JP2013212058A - 癌化情報提供方法および癌化情報提供装置 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】V11≦N/C比≦V12の細胞群から、この細胞群のうちDNA量がS期にある正常細胞が有するDNA量以上の細胞を抽出する(第1計数工程)。第1計数工程で得られる細胞数が閾値S1以上である場合(S107:YES)、フラグ1に「Cancer」をセットする。V13≦N/C比<V11の細胞群から、この細胞群のうちDNA量が2Cの細胞を抽出する(第2計数工程)。第1計数工程で得られる細胞数と第2計数工程で得られる細胞数との比を算出し、この比が閾値S2以上である場合(S111:YES)、フラグ2に「Cancer」をセットする。フラグ1、2の何れかが「Cancer」である場合(S113:YES)、要再検査の表示が行われる。
【選択図】図9
Description
るいはG1期にある正常細胞のDNA量を越えるDNA量を有する細胞の数を取得する第1取得工程と、前記第1取得工程により取得された数に基づいて、細胞の癌化に関する情報を出力する出力工程と、を含む。
ータ取得工程において前記第1データを取得する対象である解析対象細胞を決定する決定工程をさらに含む構成とされ得る。
に基づいて、前記上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞が目標個数含まれる測定試料を調製する試料調製部と、前記試料調製部で調製された測定試料に含まれる細胞のDNA量に関するデータを取得し、取得した前記DNA量に関するデータに基づいて、細胞周期がG0期あるいはG1期にある正常細胞のDNA量を越えるDNA量を有する細胞の数を取得し、得られた数に基づいて、細胞の癌化の可能性を示す情報を出力する制御部と、を備える。
構成されている。
、測定試料容器5内に供給部19a、20aから所定量の試薬が添加することが可能となる。
いる。
より実行される。また、データ処理装置3の制御は、CPU301により実行される。
16)。RNA除去処理の後、第2試薬添加部20により試薬(染色液)が添加され、反応部18により加温され、測定試料容器5内の測定対象細胞のDNA染色処理が行われる(S17)。本実施の形態では、プレ測定により、本測定で必要となる有意細胞数がある程度一定に保たれているため、細胞を染色する際の染色の程度は、測定ごとにばらつきにくくなっている。
)も、表層側の層から基底膜側の層に向かうにしたがい順次大きくなる。このため、N/C比と細胞の大きさCは、たとえば図7(c)に示すような関係となる。よって、N/C比の大きい細胞を抽出することにより、傍基底細胞と基底細胞を抽出することができる。
層細胞、表層細胞を抽出する。続いて、このように抽出された細胞群のうち、DNA量が少ない細胞を抽出することにより、癌化細胞である可能性が低い細胞を効果的に抽出する(第2計数工程)。一般に、組織の癌化が進むと、第1計数工程によって得られる細胞数が増加し、第2計数工程によって得られる細胞数が減少する。このため、両細胞数の比は、組織が正常である場合と癌化した場合とで大きく異なることとなる。判定2では、この比に基づいて組織の癌化を判定する。なお、このように互いに増減傾向が逆の2つの細胞数の比が用いられると、測定試料に含まれる測定対象細胞が比較的少なくても、信頼性の高い判定結果を得ることができる。
1(a)に示すように、「不適検体」と表示されたダイアログD1を表示部32に表示する。なお、ダイアログD1には、「NG」、「分析不能」等のメッセージが表示されても良い。そして、CPU301は、癌化情報の出力を行わずに、処理を終了する。なお、閾値S0は、検体の採取不適を判断する閾値である。閾値S0は、感度と特異度の観点から適宜設定される。本実施の形態では、閾値S0は、50〜1000の範囲で設定される。
A量(2C)とS期にある正常細胞が有するDNA量を分ける値として設定されている。具体的には、細胞周期がG0期またはG1期にある正常細胞のDNA量を示す値V30を設定し、V31と、V32(V21)は、V31とV32(V21)の範囲にV30が含まれ、V31とV32の範囲の幅がAとなるよう設定されている。
)、(e)の検体は、判定1において適正に癌であるか否かが判定されるが、図13(c)の検体は、判定1において適正に癌であるか否かが判定されない。
7でNOと判定された検体を示している。
1は、フラグ1が「Cancer」であるか否かを判定する(S121)。また、図17(b)では、図9と同様の判定2が行われた後、CPU301は、フラグ2が「Cancer」であるか否かを判定する(S122)。図17(a)、(b)のように最終的な判定が行われる場合、それぞれ、図15(a)〜(c)の判定結果と、図16(a)〜(c)の判定結果が最終的な判定となる。また、図17(a)、(b)のように判定が行われると、それぞれ、上述した判定1、2と同様の効果が奏される。
以上のDNA量を設定する領域A5の左端の値はV21に設定され、右端の値はS期にある正常細胞が有するDNA量以上の細胞全てを含むように設定されたが、かかる設定範囲の最小値と最大値は上記のように固定されるものでなく、感度と特異度が向上するよう、適宜、上記の値以外に設定されても良い。また、図10(e)に示す2CのDNA量を設定する領域A6の左端と右端の値はそれぞれV31、V32に設定されたが、かかる設定範囲の最小値と最大値は上記V31、V32に固定されるものでなく、感度と特異度が向上するよう、適宜、上記の値以外に設定されても良い。
上記実施の形態では、図9に示すように、判定1において、V11≦N/C比≦V12の細胞群が抽出され、抽出された細胞群からヒストグラム(DNAプロイディ)が作成された。そして、このヒストグラムにおいて、DNA量が正常細胞のS期以上である細胞数が閾値S1以上であるかによって癌化が判定された。本実施の形態では、判定1において、V11≦N/C比≦V12の細胞群が抽出された後、ヒストグラムを作成することなく、抽出した細胞群の数によって癌化の判定が行われる。
に基づいて癌であるか否かを判定する場合の判定結果について説明する。以下、図21(a)〜(d)に示す何れの場合も、1527個のサンプルに対して、判定が行われている。また、領域A4に含まれる細胞の個数を判定する際に用いる閾値S1は、図21(a)〜(d)に示す場合に、適宜、それぞれ異なる値に設定されている。
び中層細胞の細胞数が一定数となるように調製された測定試料が主検出部22に供給される。そのため、癌が進行していればいるほど、本測定で測定される測定試料中には、プレ測定では計数されていなかった癌化細胞が多く存在することになる。これにより、図20(a)のS133において、V11≦N/C比≦V12の細胞数と所定の個数(S1)と比較することにより、癌であるか否かを精度良く判定することが可能となる。また、図20(b)のS133において、V11≦N/C比の細胞数と所定の個数(S1)と比較することにより、癌であるか否かを精度良く判定することが可能となる。
11 … 検体ピペット部(試料調製部)
13 … 副検出部(第1検出部)
22 … 主検出部(第2検出部)
40 … フローサイトメータ(第2検出部)
43 … フローセル
301 … CPU(制御部)
Claims (22)
- 細胞の癌化に関する情報を提供する癌化情報提供方法であって、
上皮組織から採取された細胞を含む試料に含まれる、上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞の数に関する情報を取得する数情報取得工程と、
取得した細胞の数に関する情報に基づいて、前記上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞が目標個数含まれる測定試料を調製する工程と、
調製された測定試料に含まれる細胞のDNA量に関する第1データを取得するデータ取得工程と、
前記第1データに基づいて、細胞周期がG0期あるいはG1期にある正常細胞のDNA量を越えるDNA量を有する細胞の数を取得する第1取得工程と、
前記第1取得工程により取得された数に基づいて、細胞の癌化に関する情報を出力する出力工程と、を含む、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項1に記載の癌化情報提供方法において、
前記データ取得工程は、細胞核の大きさに関する第2データと、細胞の大きさに関する第3データとを更に取得し、
前記第1取得工程は、
前記第2データおよび前記第3データに基づいて、細胞の大きさに対する細胞核の大きさの比率を算出する工程と、
算出された前記比率が所定の閾値以上の所定の範囲にある第1細胞群に細胞を分類する工程と、
前記第1細胞群に分類された細胞について、細胞周期がG0期あるいはG1期にある正常細胞のDNA量を越えるDNA量を有する細胞の数を取得する工程と、を含む、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項2に記載の癌化情報提供方法において、
前記所定の範囲は、上限と下限が設定されている、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項2または3に記載の癌化情報提供方法であって、
前記第1データ、前記第2データおよび前記第3データに基づいて、細胞の大きさに対する細胞核の大きさの比率が前記所定の閾値よりも小さく、且つ、細胞周期がG0期あるいはG1期にある正常細胞のDNA量を有する細胞の数を取得する第2取得工程と、
前記第1取得工程で得られた数と前記第2取得工程で得られた数との比を算出する算出工程と、をさらに備え、
前記出力工程は、前記第1取得工程により取得された数と、前記算出工程により算出された比とに基づいて、細胞の癌化に関する情報を出力する、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項4に記載の癌化情報提供方法において、
前記第2取得工程は、前記第2データおよび前記第3データに基づいて、細胞を、細胞の大きさに対する細胞核の大きさの比率が前記所定の閾値よりも小さい第2細胞群に分類する工程と、前記第1データに基づいて、前記第2細胞群に分類された細胞のうち、細胞周期がG0期あるいはG1期にある正常細胞のDNA量を有する細胞の数を取得する工程と、を含む、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項1ないし5の何れか一項に記載の癌化情報提供方法において、
測定試料に含まれる細胞群から前記データ取得工程において前記第1データを取得する対象である解析対象細胞を決定する決定工程をさらに含む、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項6に記載の癌化情報提供方法において、
前記決定工程は、解析対象細胞と同種である細胞と、解析対象と異種である細胞とに分類する工程を含む、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項6または7に記載の癌化情報提供方法において、
前記決定工程は、解析対象細胞と同種である細胞を、凝集した細胞と、凝集していない細胞とに分類する工程を含み、分類した前記凝集していない細胞を解析対象細胞に決定する、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項6ないし8の何れか一項に記載の癌化情報提供方法において、
前記決定工程で決定された解析対象細胞の数が所定以下のとき、細胞の癌化に関する情報の出力を禁止する出力禁止工程をさらに含む、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項1に記載の癌化情報提供方法において、
上皮組織から採取された細胞を含む測定試料に光を照射し、光学情報を検出する第1光学情報取得工程をさらに含み、
前記データ取得工程は、前記第1光学情報取得工程により検出された光学情報に基づいて、前記第1データを取得する、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項10に記載の癌化情報提供方法において、
前記第1光学情報取得工程は、フローセルを流れる測定試料に光を照射する工程を含み、
前記光学情報は、散乱光強度の波形を含む散乱光情報を含み、
前記データ取得工程は、散乱光強度の波形の幅に基づいて、細胞の大きさに関する第3データをさらに取得する、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項1ないし11の何れか一項に記載の癌化情報提供方法において、
前記上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞は、表層細胞及び中層細胞である、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項1ないし12の何れか一項に記載の癌化情報提供方法において、
前記上皮組織は子宮頸部である、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項1ないし13の何れか一項に記載の癌化情報提供方法において、
前記数情報取得工程は、
上皮組織から採取された細胞を含む測定試料に光を照射し、光学情報を検出する第2光学情報取得工程をさらに含み、
前記データ取得工程は、前記第2光学情報取得工程において検出された光学情報に基づいて、細胞の大きさに関する第4データを取得する、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項14に記載の癌化情報提供方法において、
前記第2光学情報取得工程は、フローセルを流れる測定試料に光を照射する工程を含み、
前記光学情報は、散乱光強度の波形を含む散乱光情報を含み、
前記データ取得工程は、前記散乱光情報に基づいて、前記第4データを取得する、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 細胞の癌化に関する情報を提供する癌化情報提供装置であって、
上皮組織から採取された細胞を含む試料に含まれる、上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞の数に関する情報を取得する第1検出部と、
前記第1検出部において取得した細胞の数に関する情報に基づいて、前記上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞が目標個数含まれる測定試料を調製する試料調製部と、
前記試料調製部で調製された測定試料に含まれる細胞のDNA量に関するデータを取得し、
取得した前記DNA量に関するデータに基づいて、細胞周期がG0期あるいはG1期にある正常細胞のDNA量を越えるDNA量を有する細胞の数を取得し、
得られた数に基づいて、細胞の癌化の可能性を示す情報を出力する制御部と、を備える、
ことを特徴とする癌化情報提供装置。 - 請求項16に記載の癌化情報提供装置において、
前記試料調製部で調製された測定試料に光を照射し、光学情報を検出する第2検出部をさらに備え、
前記制御部は、検出された光学情報に基づいて、前記DNA量に関するデータを取得する、
ことを特徴とする癌化情報提供装置。 - 細胞の癌化に関する情報を提供する癌化情報提供方法であって、
上皮組織から採取された細胞を含む試料に含まれる、上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞の数に関する情報を取得する工程と、
取得した細胞の数に関する情報に基づいて、前記上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞が目標個数含まれる測定試料を調製する工程と、
調製された測定試料に含まれる細胞について、細胞の大きさに対する細胞核の大きさの比率に関するデータを取得するデータ取得工程と、
前記データに基づいて、前記比率が所定の閾値以上の範囲を規定する規定範囲にある細胞の数を取得する取得工程と、
前記取得工程により取得された数に基づいて、細胞の癌化に関する情報を出力する出力工程と、を含む、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項18に記載の癌化情報提供方法において、
前記データは、細胞核の大きさに対する第1データと、細胞の大きさに関する第2データに基づいて求められる、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 請求項18または19に記載の癌化情報提供方法において、
前記規定範囲は、上限と下限が設定されている、
ことを特徴とする癌化情報提供方法。 - 細胞の癌化に関する情報を提供する癌化情報提供装置であって、
上皮組織から採取された細胞を含む試料に含まれる、上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞の数に関する情報を取得する第1検出部と、
前記第1検出部において取得した細胞の数に関する情報に基づいて、前記上皮組織において少なくとも基底細胞よりも表層側に存在する正常な細胞が目標個数含まれる測定試料を調製する試料調製部と、
前記試料調製部で調製された測定試料に含まれる細胞について、細胞の大きさに対する細胞核の大きさの比率に関するデータを取得し、
前記データに基づいて、前記比率が所定の閾値以上の範囲を規定する規定範囲にある細胞の数を取得し、
得られた数に基づいて、細胞の癌化の可能性を示す情報を出力する制御部と、を備える、
ことを特徴とする癌化情報提供装置。 - 請求項21に記載の癌化情報提供装置において、
前記試料調製部で調製された測定試料に光を照射し、光学情報を検出する第2検出部をさらに備え、
前記制御部は、検出された光学情報に基づいて、前記細胞の大きさに対する細胞核の大きさの比率に関するデータを取得する、
ことを特徴とする癌化情報提供装置。
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