JP2013075916A - Tweakのアンタゴニストおよびtweakレセプターのアンタゴニスト、ならびに免疫学的障害を処置するためのこれらの使用 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、TWEAKの活性を改変する試薬、ならびに免疫学的障害の処置のための治療剤としての上記試薬の使用に関する。また、本発明は、動物における免疫学的障害の発症をブロックするかあるいは該障害の重篤度または効果を処置または減少するための方法を提供し、この方法は、治療上有効な量のTWEAKブロッキング剤および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を投与する工程を包含する。また、本発明は、治療上有効な量のTWEAKブロッキング剤および薬学的に受容可能なキャリアを含む、組成物も提供する。
【選択図】なし
Description
本発明は、新規なタンパク質TWEAKに結合する試薬を含む組成物および方法、ならびに免疫学的障害の発症をブロックするためのTWEAK結合試薬の使用に関する。TWEAK結合試薬としては、慢性対宿主性移殖片病の発症をブロックするために本明細書中で使用されるようなモノクローナル抗体、可溶性TWEAKレセプター−Ig融合タンパク質、あるいはTWEAKレセプターへのTWEAKの結合を改変する他の分子が挙げられる。本発明の他の実施形態は、TWEAKレセプターに結合して、TWEAKレセプターの活性を改変するか、またはTWEAKレセプターの細胞内シグナル伝達を改変する、試薬を含む。
免疫学的障害は、広範な種類の疾患および病理(自己免疫疾患、急性炎症障害および慢性炎症障害、器官移植拒絶、対宿主性移殖片病(GVHD)、リンパ系細胞悪性疾患、敗血症および他の形態のショック、HIVおよびSCIDSにて見られる免疫応答性の喪失、ならびに腫瘍増殖に対する免疫応答の欠損を含む)として表される。
本発明は、動物における免疫学的障害の発症をブロックするため、あるいはその障害の重篤度または効果を処置もしくは低減するための方法を提供し、この方法は、治療上有効な量のTWEAKブロッキング剤および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を投与する工程を包含する。この化合物は、TWEAKリガンドに対する抗体;TWEAKレセプターに対する抗体;TWEAKレセプターへのTWEAKリガンドの結合を改変する薬剤;細胞表面レセプターのクラスター形成を改変する薬剤;およびTWEAKレセプターの細胞内シグナルを妨害し得る薬剤であり得る。好ましい実施形態において、この抗体は、モノクローナル抗体である。より好ましい実施形態において、このモノクローナル抗体は、TWEAK表面リガンドに対する。この動物は、哺乳動物であり得、そしてヒトであり得る。このTWEAKブロッキング剤は、表面TWEAKリガンドに選択的に結合し得るリガンド結合ドメインを有する可溶性TWEAKレセプターであり得る。1つの実施形態において、この可溶性TWEAKレセプターとしては、ヒト免疫グロブリンIgGドメインが挙げられ得る。好ましい実施形態において、このヒト免疫グロブリンIgGドメインは、特異的抗原結合の能力がある領域を含む。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1) 動物における免疫学的障害の発症をブロックするかあるいは該障害の重篤度または効果を処置または減少するための方法であって、治療上有効な量のTWEAKブロッキング剤および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を投与する工程を包含する、方法。
(項目2) 動物において免疫応答を阻害するための方法であって、有効量のTWEAKブロッキング剤および薬学的に有効なキャリアを含む薬学的組成物を投与する工程を包含する、方法。
(項目3) 項目1または2に記載の方法であって、前記TWEAKブロッキング剤が、以下:
(a)TWEAKリガンドに対する抗体;
(b)TWEAKレセプターに対する抗体;
(c)TWEAKレセプターへのTWEAKリガンドの結合を改変する薬剤;
(d)細胞表面レセプターのクラスター形成を改変する薬剤;および
(e)TWEAKレセプターの細胞内シグナル伝達を妨害し得る薬剤
からなる群より選択される、方法。
(項目4) 項目1または2に記載の方法であって、前記動物が哺乳動物である、方法。
(項目5) 項目4に記載の方法であって、前記哺乳動物がヒトである、方法。
(項目6) 項目1または2に記載の方法であって、前記TWEAKブロッキング剤が、表面TWEAKリガンドに選択的に結合し得るリガンド結合ドメインを有する可溶性TWEAKレセプターを含む、方法。
(項目7) 項目6に記載の方法であって、前記可溶性TWEAKレセプターがヒト免疫グロブリンIgGドメインを含む、方法。
(項目8) 項目7に記載の方法であって、前記ヒト免疫グロブリンIgGドメインが、特異的抗原結合の能力がある領域を含む、方法。
(項目9) 項目1または2に記載の方法であって、前記TWEAKレセプターに対する抗体がモノクローナル抗体を含む、方法。
(項目10) 項目1または2に記載の方法であって、前記TWEAKブロッキング剤が、TWEAK表面リガンドに対するモノクローナル抗体を含む、方法。
(項目11) 項目10に記載の方法であって、前記抗体がTWEAKリガンドのサブユニットに対するものである、方法。
(項目12) 項目2に記載の方法であって、前記免疫応答がTh1細胞媒介性免疫応答である、方法。
(項目13) 項目2に記載の方法であって、前記免疫応答がTh2細胞媒介性免疫応答である、方法。
(項目14) 項目2に記載の方法であって、前記免疫応答がTh1細胞媒介性免疫応答およびTh2細胞媒介性免疫応答の両方を含む、方法。
(項目15) 項目2に記載の方法であって、前記TWEAKブロッキング剤がTWEAKレセプターに対するモノクローナル抗体を含む、方法。
(項目16) 薬学的組成物であって、治療上有効な量のTWEAKブロッキング剤および薬学的に受容可能なキャリアを含む、組成物。
(項目17) 項目16に記載の組成物であって、前記TWEAKブロッキング剤が、以下:
(a)TWEAKリガンドに対する抗体;
(b)TWEAKレセプターに対する抗体;
(c)TWEAKレセプターへのTWEAKリガンドの結合を改変する薬剤;
(d)細胞表面レセプターのクラスター形成を改変する薬剤;および
(e)TWEAKレセプターの細胞内シグナル伝達を妨害し得る薬剤
からなる群より選択される、組成物。
(項目18) 項目16に記載の組成物であって、前記TWEAKブロッキング剤が、表面TWEAKリガンドに選択的に結合し得るリガンド結合ドメインを有する可溶性TWEAKレセプターを含む、組成物。
(項目19) 項目18に記載の組成物であって、前記可溶性TWEAKレセプターが、特異的抗原結合の能力がある領域が挿入されたヒト免疫グロブリンIgGドメインを含む、組成物。
(項目20) 項目16に記載の組成物であって、前記TWEAKブロッキング剤がTWEAKレセプターに対するモノクローナル抗体を含む、組成物。
(項目21) 項目16に記載の組成物であって、前記TWEAKブロッキング剤がTWEAK表面リガンドに対するモノクローナル抗体を含む、組成物。
(項目22) 項目21に記載の組成物であって、前記抗体がTWEAKリガンドのサブユニットに対するものである、組成物。
(定義)
本明細書中に記載される本発明が十分に理解され得るために、以下の詳細な説明が示される。
本明細書中で使用されるような用語「体液性応答」および「細胞性応答」は、抗原に対する動物の免疫学的応答をいい、これによってその動物は、抗原に対する抗体を産生するか、またはその抗原に対する細胞傷害性応答を生じるか、あるいはその両方を産生する。Tヘルパー細胞のTh1クラスは、細胞性応答の誘導のために重要であり、そしてTヘルパー細胞のTh2クラスは、高い親和性の抗体の有効な産生とって重要である。
TWEAKは、TNFファミリーの最近発見されたメンバーのタンパク質である(Chicheporticheら、J.Biol.Chem.51:32401−32410(1997))。TNFファミリーのメンバーのタンパク質は、TNFレセプター(TNF−R)ファミリーのタンパク質のレセプターに結合する。TNFファミリーのタンパク質の、それらのレセプターとの相互作用は、免疫系内の広範な種々の機能に影響する。周知の例としては、CD40Lタンパク質(これは、抗体産生細胞へのB細胞の分化を促進するために、CD40レセプターと結合する(GrewalおよびFlavell、Immunol.Res.16:59−70(1997)))、リンホトキシン−βリガンド(LT−β)(濾胞樹状細胞の分化状態を調節することにより体液性免疫応答に影響するリンホトキシン−βレセプターに結合する(MackayおよびBrowning、Nature 395:26−27(1998)))およびOX40L(T細胞シグナルに対するB細胞応答の応答を調節するためにOX40レセプターに結合する(Flynnら、J.Exp.Med.188:297−304(1998)))が挙げられる。免疫系において決定的な役割を果たすことが公知であるTNF/TNF−Rファミリー内の他のリガンド/レセプター対としては、TNF/TNF−R55、FasL/Fas、およびCD27/CD70が挙げられる。
改変は、抗リガンドmAbについて上で概説された機構と類似の、種々の機構によって起こり得る。TNF/TNF−Rファミリーメンバーのリガンド/レセプター相互作用を改変するために、マウス系またはヒト系において使用されるレセプター−Ig融合タンパク質の例としては、とりわけ、TNF−R55−Ig、TNF−R75−Ig、TLβ−R−Ig、およびOX40−Igが挙げられる。レセプター−Ig融合タンパク質は、免疫学的疾患および他の疾患の開始または発症をブロックするために使用され得る。例えば、TNF−R75−Igは、炎症性腸疾患(IBD)を処置するために使用されている。
(マウス)DBA/2系統およびC57B1/6系統、ならびに(DBA/2×C57B1/6)F1交雑の6〜8週齢の雌のマウスをJackson Laboratory(Bar Harbor、ME USA)から購入し、従来の仕切り保護下に収容し、そして業務的指針に従って取り扱った。
(実施例1:TWEAKタンパク質に対するモノクローナル抗体の産生)
ヒトTWEAKタンパク質およびマウスTWEAKタンパク質を認識するモノクローナル抗体を、記載されるように、バキュロウイルスにおいて生成された可溶性ヒトTWEAKタンパク質を使用して、アルメニアハムスター(Armenian hamster)において生成した(Chicheporticheら、J.Biol.Chem.51:32401−32410(1997))。最初の免疫について、各ハムスターは、ipで、完全フロイントアジュバント(CFA)中で50μgのTWEAKを受けた。引き続く免疫(最初の免疫の14日後、28日後および42日後)について、各ハムスターは、ipで、不完全フロイントアジュバント(IFA)中で50μgのTWEAK(14日および28日)または33μgのTWEAK(42日)を受けた。ハイブリドーマ形成のための脾臓細胞の融合の前の最後の免疫は、ipで、アジュバントを有さない100μgのTWEAKを用いた。ハイブリドーマ生成を、標準的な手順を使用して実施した(Lerner,Yale J.Biol.Med.54:387−402(1981))。
(慢性GVHDのマウスモデルにおける巨脾腫症の発症、活性化B細胞およびIg産生をブロックするための抗TWEAK mAb AB.D3の使用)
慢性GVHDを、6〜8週齢のB6D2F1雌性マウスに、方法において記載されるDBA/2脾細胞移植片を使用して誘導した。各レシピエントを、尾静脈において500μl(1×108)の細胞を用いて注射した。実験群は、DBA/2移植片(DBA/2>F1)を受け、一方、コントロール動物のセットは、B6D2F1移植片(F1>F1)を受けた。マウスは、抗TWEAK mAb AB.D3、抗CD40L mAb MR1、コントロールmAb Ha4/8を受けたか、または処置を受けなかった。動物は、移植片注入の4時間前、ならびに2日後、4日後および6日後に、250μg mAb ipを投薬された。実験の14日目に、マウスを屠殺し、そして脾臓指数(spleen index)を、コントロールF1>F1群における各動物の体重に対する脾臓重量の比として計算し、1つの値を与えるために平均化した。全ての他の群についての平均脾臓指数を、コントロール値に対して正規化する。2つの独立実験からの結果を、表2に示す。DBA/2移植片(DBA/2>F1)を受ける動物、および未処置のままかまたはコントロールmAb Ha4/8を用いて処置された動物は、F1>F1移植片コントロールと比較した場合に、脾臓重量の劇的な増大を示した。この結果は、脾臓指数に反映され、これは、1.0〜2.6の正規化されたコントロール値からの増大を示した。抗CD40L mAb MR1を用いるマウスの処置は、脾臓指数をコントロールレベルの近く(1.1)に減少させ、そして抗TWEAK mAb AB.D3を用いる処置は、巨脾腫症を35%、1.7に減少させた(表2)。
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