JP2013023499A - 抗ｐｃｓｋ９抗体を用いた処置 - Google Patents

Abstract

【課題】低頻度で低用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体が、ヒト患者における高コレステロール血症および関連するＣＶＤの発生率を低下させるために有効となるかどうか、また、そうであれば、どのような投薬レジメンがそのようなｉｎ ｖｉｖｏの有効性に必要であるかを明確にすること。
【解決手段】本発明は、血漿中の低密度リポタンパク質粒子の著しい上昇によって特徴づけられる障害に罹りやすい、またはそれと診断されたヒト患者を、ＰＣＳＫ９拮抗抗体単独でまたはスタチンと組み合わせて処置するための用量に関する。
【選択図】図１

Description

関連出願
本出願は、そのすべてがその全体で参考として本明細書中に組み込まれている２０１１年７月１４日出願の米国仮出願第６１／５０７，８６５号、２０１２年３月２２日出願の米国仮出願第６１／６１４，３１２号、および２０１２年５月４日出願の米国仮出願第６１／６４３，０６３号の優先権を主張するものである。

本発明は、血漿中の低密度リポタンパク質（「ＬＤＬ」）粒子の著しい上昇によって特徴づけられる障害を処置するための治療レジメンに関する。対象治療レジメンは、抗前駆タンパク質転換酵素サブチリシンケキシン９型（ＰＣＳＫ９）抗体を単独でまたはスタチンと組み合わせて投与することを含む。対象治療レジメンは、血中ＬＤＬ−コレステロールレベルの低下の増強をもたらし、また、家族性高コレステロール血症、アテローム生成的異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、急性冠症候群、より一般には心血管疾患を含めた、コレステロールおよびリポタンパク質の代謝障害の予防および／または処置に使用することができる。

米国において数百万人の人々が心疾患およびその結果の心イベントのリスクを有する。心血管疾患およびその根底にあるアテローム性動脈硬化症は、その複数の危険因子に向けられた治療の利用可能性にもかかわらず、すべての人口統計群における主な死因である。アテローム性動脈硬化症は動脈の疾患であり、先進国における多くの死に関連している冠動脈性心疾患の原因である。冠動脈性心疾患のいくつかの危険因子が現在同定されており、それらは、異常脂質血症、高血圧、糖尿病、喫煙、食生活不良、不活動性およびストレスである。最も臨床的に意味がありかつ一般的である異常脂質血症は、高トリグリセリド血症の存在または非存在下において高コレステロール血症を伴うベータ−リポタンパク質（超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）およびＬＤＬ）の増加によって特徴づけられる。Ｆｒｅｄｒｉｃｋｓｏｎら、１９６７、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．、２７６：３４〜４２、９４〜１０３、１４８〜１５６、２１５〜２２５、および２７３〜２８１。心血管疾患に関して長年にわたる顕著に満たされていない要求が存在しており、スタチンを用いた処置（アテローム性動脈硬化症における現在の標準治療）にもかかわらず、６０〜７０％の血管イベント、心臓発作および脳卒中が生じている。さらに、新しい指針は、高い危険性の患者を早期の心血管疾患から保護するためには、さらに低いＬＤＬレベルを達成すべきであることを示唆している（全米コレステロール教育プログラム（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ Ｐｒｏｇｒａｍ、ＮＣＥＰ）２００４）。

ＰＣＳＫ９は血漿低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の主要な調節因子として関連づけられており、冠動脈性心疾患（ＣＨＤ）の予防および処置の有望な標的として浮かび上がっている。Ｈｏｏｐｅｒら、２０１１、Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｔａｒｇｅｔｓ、１５（２）：１５７〜６８。ヒト遺伝子研究により機能獲得型の突然変異が同定され、これらは上昇したＬＤＬ−Ｃの血清レベルならびにＣＨＤの早期性および発生率に関連しており、一方で、機能喪失型の突然変異は低いＬＤＬ−Ｃおよび低下したＣＨＤの危険性に関連していた。Ａｂｉｆａｄｅｌ、２００３、Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．、４３（２）：１５４〜６、Ｃｏｈｅｎ、２００５、Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．、３７（２）：１６１〜５、Ｃｏｈｅｎ、２００６、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．、３５４（１２）：１２６４〜７２、Ｋｏｔｏｗｓｋｉ、２００６、Ａｍ Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ．、７８（３）：４１０〜２２。ヒトでは、ＰＣＳＫ９の完全な喪失は、それ以外は健康な対象において＜２０ｍｇ／ｄＬの低い血清ＬＤＬ−Ｃをもたらす。Ｈｏｏｐｅｒ、２００７、１９３（２）：４４５〜８、Ｚｈａｏ、２００６、Ａｍ Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ．、７９（３）：５１４〜５２３。

ＰＣＳＫ９はセリンプロテアーゼのサブチリシンファミリーに属しており、Ｎ末端のプロドメイン、サブチリシン様触媒ドメインおよびＣ末端のシステイン／ヒスチジンリッチなドメイン（ＣＨＲＤ）によって形成されている。ＰＣＳＫ９は肝臓中で高度に発現され、プロドメインの自己触媒的切断の後に分泌され、これは触媒ドメインと非共有的に会合されたままである。ＰＣＳＫ９の触媒ドメインは、７．４の血清ｐＨで低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ）の表皮成長因子様反復Ａ（ＥＧＦ−Ａ）ドメインと結合し、約５．５〜６．０のエンドソームｐＨでより高い親和性で結合する。Ｂｏｔｔｏｍｌｅｙ、２００９、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．、２８４（２）：１３１３〜２３。Ｃ末端ドメインはＬＤＬＲ−ＰＣＳＫ９の複合体の内部移行に関与している一方で、触媒ドメインと結合しない。Ｎａｓｓｏｕｒｙ、２００７、Ｔｒａｆｆｉｃ、８（７）：９５０、Ｎｉ、２０１０、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．、２８５（１７）：１２８８２〜９１、Ｚｈａｎｇ、２００８、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、２００８、１０５（３５）：１３０４５〜５０。ＰＣＳＫ９のどちらの機能性も、リソソーム分解およびＬＤＬ−Ｃの降下のためにＬＤＬＲ−ＰＣＳＫ９の複合体を標的化することに必要であり、これは、機能喪失型および機能獲得型に関連している両ドメイン中の突然変異と一致している。Ｌａｍｂｅｒｔ、２００９、Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ、２０３（１）：１〜７。

ｓｉＲＮＡまたは抗センスオリゴヌクレオチドによる遺伝子サイレンシングおよび抗体によるＰＣＳＫ９−ＬＤＬＲの相互作用の破壊を含めた、ＰＣＳＫ９を阻害するための様々な治療手法が現在開発中である。Ｂｒａｕｔｂａｒら、２０１１、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ、８、２５３〜２６５。たとえば、Ｃｈａｎ、２００９およびＮｉ、２０１１は、それぞれ、マウスおよび非ヒト霊長類においてＬＤＬ−Ｃ降下活性を有する抗ＰＣＳＫ９モノクローナル抗体を報告している。それぞれの抗体の半減期は、非ヒト霊長類において３ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体で投与した場合に、それぞれ約６１時間および７７時間として報告されている。Ｃｈａｎ、２００９、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、１０６（２４）：９８２０〜５、Ｎｉ、２０１１、Ｊ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ．、５２（１）：７８〜８６。ＰＣＳＫ９拮抗抗体７Ｄ４は、カニクイザルにおいて血清コレステロールレベルを有効に低下させることが報告されている。カニクイザルにおける７Ｄ４の半減期は、１０ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の単回投与で２日未満であった。ＰＣＴ特許出願公開ＷＯ２０１０／０２９５１３。

米国仮出願第６１／５０７，８６５号 米国仮出願第６１／６１４，３１２号 米国仮出願第６１／６４３，０６３号 ＰＣＴ特許出願公開ＷＯ２０１０／０２９５１３ 米国特許第５，５４５，８０７号 米国特許第５，５４５，８０６号 米国特許第５，５６９，８２５号 米国特許第５，６２５，１２６号 米国特許第５，６３３，４２５号 米国特許第５，６６１，０１６号 米国特許第５，７５０，３７３号 米国特許出願公開第２０１０００６８１９９号 ＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５３９９０ 米国特許出願第１２／５５８３１２号 欧州特許第６１６８４６号 欧州特許第６５６０５５号 欧州特許第３６３９９７号 欧州特許出願第８９３０３９６４．４号 ＰＣＴ公開ＷＯ９９／５８５７２ 英国特許出願第９８０９９５１．８号 ＰＣＴ公開ＷＯ００／５３２１１ 米国特許第５，９８１，５６８号 米国特許第４，４８５，０４５号 米国特許第４，５４４，５４５号 米国特許第５，０１３，５５６号 米国特許第３，７７３，９１９号

Ｆｒｅｄｒｉｃｋｓｏｎら、１９６７、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．、２７６：３４〜４２、９４〜１０３、１４８〜１５６、２１５〜２２５、および２７３〜２８１ Ｈｏｏｐｅｒら、２０１１、Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｔａｒｇｅｔｓ、１５（２）：１５７〜６８ Ａｂｉｆａｄｅｌ、２００３、Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．、４３（２）：１５４〜６ Ｃｏｈｅｎ、２００５、Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．、３７（２）：１６１〜５ Ｃｏｈｅｎ、２００６、Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．、３５４（１２）：１２６４〜７２ Ｋｏｔｏｗｓｋｉ、２００６、Ａｍ Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ．、７８（３）：４１０〜２２ Ｈｏｏｐｅｒ、２００７、１９３（２）：４４５〜８ Ｚｈａｏ、２００６、Ａｍ Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ．、７９（３）：５１４〜５２３ Ｂｏｔｔｏｍｌｅｙ、２００９、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．、２８４（２）：１３１３〜２３ Ｎａｓｓｏｕｒｙ、２００７、Ｔｒａｆｆｉｃ、８（７）：９５０ Ｎｉ、２０１０、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．、２８５（１７）：１２８８２〜９１ Ｚｈａｎｇ、２００８、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、２００８、１０５（３５）：１３０４５〜５０ Ｌａｍｂｅｒｔ、２００９、Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ、２０３（１）：１〜７ Ｂｒａｕｔｂａｒら、２０１１、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ、８、２５３〜２６５ Ｃｈａｎ、２００９、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ、１０６（２４）：９８２０〜５ Ｎｉ、２０１１、Ｊ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ．、５２（１）：７８〜８６ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４） Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ編、１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ （Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編、１９８７） Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．ＭａｔｈｅｒおよびＰ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ、１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ、Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ、およびＤ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ編、１９９３〜１９９８）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．） Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．ＷｅｉｒおよびＣ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編） Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．ＭｉｌｌｅｒおよびＭ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７） Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９８７） ＰＣＲ：Ｔｈｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ、（Ｍｕｌｌｉｓら編、１９９４） Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編、１９９１） Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、１９９９） Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．ＪａｎｅｗａｙおよびＰ．Ｔｒａｖｅｒｓ、１９９７） Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ、１９９７） Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ．編、ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ、１９８８〜１９８９） Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．ＳｈｅｐｈｅｒｄおよびＣ．Ｄｅａｎ編、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、２０００） Ｕｓｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗおよびＤ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、１９９９） Ｔｈｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．ＺａｎｅｔｔｉおよびＪ．Ｄ．Ｃａｐｒａ編、Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９９５） ＨｏｌｌｉｎｇｅｒおよびＨｕｄｓｏｎ、２００５、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２３（９）：１１２６〜１１３６ Ｗａｒｄら、１９８９、Ｎａｔｕｒｅ、３４１：５４４〜５４６ Ｖａｕｇｈａｎら、１９９６、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：３０９〜３１４ Ｓｈｅｅｔｓら、１９９８、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）、９５：６１５７〜６１６２ ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１ Ｍａｒｋｓら、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１ Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ、ページ７７、１９８５ Ｂｏｅｒｎｅｒら、１９９１、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７（１）：８６〜９５ ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ、１９６（４）：９０１〜９１７、１９８７ Ｋａｂａｔら、１９９２、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、ＮＩＨ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｄ．Ｃ． Ｃｈｏｔｈｉａら、１９８９、Ｎａｔｕｒｅ、３４２：８７７〜８８３ ＭａｃＣａｌｌｕｍら、１９９６、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２６２：７３２〜７４５ Ｍａｋａｂｅら、２００８、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２８３：１１５６〜１１６６ Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．、１９９１ ＲａｖｅｔｃｈおよびＫｉｎｅｔ、１９９１、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、９：４５７〜９２ Ｃａｐｅｌら、１９９４、Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ、４：２５〜３４ ｄｅ Ｈａａｓら、１９９５、Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．、１２６：３３０〜４１ Ｇｕｙｅｒら、１９７６、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１１７：５８７ Ｋｉｍら、１９９４、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２４：２４９ Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、１９９０ Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０００ Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２９：２６１３〜２６２４ Ａｒｍｏｕｒら、２００３、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、４０、５８５〜５９３ Ａａｌｂｅｒｓｅら、２００２、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１０５、９〜１９ Ｅｐｓｔｅｉｎら、１９８５、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８２：３６８８ Ｈｗａｎｇら、１９８０、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、７７：４０３０ Ａｂｉｆａｄｅｌら、２００３、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．、３４：１５４〜１５６ Ｃｏｈｅｎら、２００５、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．、３７：１６１〜１６５ Ｚｈａｏら、２００６、Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．、７９：５１４〜５２３

当分野で入手可能な情報から、かつ本発明より前には、低頻度で低用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体が、ヒト患者における高コレステロール血症および関連するＣＶＤの発生率を低下させるために有効となるかどうか、また、そうであれば、どのような投薬レジメンがそのようなｉｎ ｖｉｖｏの有効性に必要であるかは不明確のままであった。

本発明は、ＰＣＳＫ９活性および対応するＬＤＬ−Ｃ血漿レベルに対するＰＣＳＫ９の効果を阻害することによる、血中ＬＤＬ−Ｃレベルを持続的に低下させるための治療レジメンに関する。

一部の実施形態では、本発明は、少なくとも約０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、または４００ｍｇの前駆タンパク質転換酵素サブチリシンケキシン９型（ＰＣＳＫ９）拮抗抗体の初回用量を患者に投与することと、初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量の抗体の複数の後続用量を患者に投与することとを含み、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約１、２、３、または４週間の時間間隔である、上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルによって特徴づけられる障害に罹りやすい、またはそれと診断されたヒト患者を処置する方法を提供する。本発明は、たとえばＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３を使用して実施することができる。一部の実施形態では、本発明は、配列番号１１に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域からの３個のＣＤＲおよび配列番号１２に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域からの３個のＣＤＲを含む抗体を使用して実施することができる。

一部の実施形態では、初回用量は、約０．２５ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇまたは約１．５ｍｇ／ｋｇであることができ、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに約１週間の時間間隔であることができる。

他の実施形態では、初回用量は、約２ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、または約１２ｍｇ／ｋｇであることができ、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約２週間の時間間隔であることができる。

他の実施形態では、初回用量は、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、または約１７５ｍｇであることができ、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約２週間の時間間隔であることができる。

他の実施形態では、初回用量は、約３ｍｇ／ｋｇまたは約６ｍｇ／ｋｇであることができ、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約４週間の時間間隔であることができる。他の実施形態では、初回用量は、約２００ｍｇまたは約３００ｍｇであることができ、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約４週間の時間間隔であることができる。一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体は皮下投与する。一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体は静脈内投与する。

一部の実施形態では、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに約４週間の時間間隔であることができる。一部の実施形態では、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに約８週間の時間間隔であることができる。複数の後続用量のそれぞれは、初回用量とほぼ同量またはそれ未満であることができる。

一部の実施形態では、障害は、高コレステロール血症、異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、冠動脈性心疾患、または急性冠症候群（ＡＣＳ）であることができる。ヒト患者は、初回用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体の投与前に、たとえば約６００ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時総コレステロールレベルを有し得る。ヒト患者は、初回用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体の投与前に、たとえば約１３０ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時ＬＤＬコレステロールレベルを有し得る。一部の実施形態では、ヒト患者は、初回用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体の投与前に、約１４５ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時ＬＤＬコレステロールレベルを有し得る。

一部の実施形態では、患者はスタチンで処置されている。一部の実施形態では、患者は１日用量のスタチンで処置されている。一部の実施形態では、ヒト患者は、初回用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体の投与前に有効量のスタチンを投与されていてよい。一部の実施形態では、患者は、初回用量のＰＣＳＫ９抗体を投与する前に安定用量のスタチンを受けている。安定用量は、たとえば１日用量または隔日用量であることができる。一部の実施形態では、ヒト患者は、初回用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体の投与前に、少なくとも約２、３、４、５、または６週間の間、安定１日用量のスタチンを受けている。一部の実施形態では、安定用量のスタチンを受けているヒト患者は、初回用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体の投与前に、たとえば約７０または８０ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時ＬＤＬコレステロールレベルを有する。

一部の実施形態では、この方法は、有効量のスタチンを投与することをさらに含む。

一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量は約３ｍｇ／ｋｇまたは約６ｍｇ／ｋｇであることができ、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに約４週間または約１カ月の時間間隔であることができる。一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量は約２００ｍｇまたは約３００ｍｇであることができ、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに約４週間または約１カ月の時間間隔であることができる。

スタチンは、たとえば、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、またはシンバスタチン＋エゼチミベ、ロバスタチン＋ナイアシン、アトルバスタチン＋アムロジピン、およびシンバスタチン＋ナイアシンからなる群から選択される組合せ療法であることができる。一部の実施形態では、スタチンの用量は、たとえば、４０ｍｇのアトルバスタチン、８０ｍｇのアトルバスタチン、２０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのシンバスタチン、または８０ｍｇのシンバスタチンであることができる。

一部の実施形態では、この方法は、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇまたは約６ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３の初回用量を患者に投与することと、初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量の抗体の複数の後続用量を患者に投与することとを含み、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約４週間の時間間隔であり、患者は安定１日用量のスタチンで処置されている。一部の実施形態では、スタチンの安定１日用量は、４０ｍｇのアトルバスタチン、８０ｍｇのアトルバスタチン、２０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのシンバスタチン、または８０ｍｇのシンバスタチンであることができる。

一部の実施形態では、この方法は、少なくとも約２００ｍｇまたは約３００ｍｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３の初回用量を患者に投与することと、初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量の抗体の複数の後続用量を患者に投与することとを含み、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約４週間の時間間隔であり、患者は安定１日用量のスタチンで処置されている。一部の実施形態では、この方法は、少なくとも約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、または約１７５ｍｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３の初回用量を患者に投与することと、初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量の抗体の複数の後続用量を患者に投与することとを含み、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約２週間の時間間隔であり、患者は安定１日用量のスタチンで処置されている。一部の実施形態では、スタチンの安定１日用量は、４０ｍｇのアトルバスタチン、８０ｍｇのアトルバスタチン、２０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのシンバスタチン、または８０ｍｇのシンバスタチンであることができる。

一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体は皮下または静脈内投与する。

また、本発明は、容器と、ＰＣＳＫ９拮抗抗体を含む容器内の組成物と、少なくとも約０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇまたは４００ｍｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量、および初回用量と同量またはそれ未満である少なくとも１つの後続用量を投与する指示を含有する添付文書とを含む製品も提供する。一部の実施形態では、本発明は、配列番号１１に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域からの３個のＣＤＲおよび配列番号１２に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域からの３個のＣＤＲを含む抗体を使用して実施することができる。一部の実施形態では、本発明は、ＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３を使用して実施することができる。

初回用量および後続用量の投与は、たとえば、少なくとも約１、少なくとも約２、３、４、５、６、７または８週間の時間間隔であることができる。一部の実施形態では、指示は、たとえば、静脈内注射によって初回用量を投与し、静脈内または皮下注射によって少なくとも１つの後続用量を投与するためのものであることができる。他の実施形態では、指示は、たとえば、皮下注射によって初回用量を投与し、静脈内または皮下注射によって少なくとも１つの後続用量を投与するためのものであることができる。

一部の実施形態では、複数の後続用量を投与することができる。複数の後続用量は、たとえば、互いに少なくとも２、３、４、５、６、７または８週間の時間間隔であることができる。

一部の実施形態では、添付文書には、ＰＣＳＫ９拮抗抗体をスタチンで処置されている患者に投与する指示がさらに含まれていることができる。スタチンは、たとえば、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、またはシンバスタチン＋エゼチミベ、ロバスタチン＋ナイアシン、アトルバスタチン＋アムロジピン、およびシンバスタチン＋ナイアシンからなる群から選択される組合せ療法であることができる。

一部の実施形態では、製品は、組成物を上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロールレベルによって特徴づけられる状態を処置するために使用できることを示す、容器上に存在するまたはそれに付随するラベルをさらに含むことができる。ラベルは、組成物をたとえば高コレステロール血症、アテローム生成的異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、および／または急性冠症候群（ＡＣＳ）の処置に使用できることを示すことができる。

Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の絶対的空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルをｍｇ／ｄＬで示すグラフである。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時総コレステロールレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時アポリポタンパク質Ｂレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時高密度リポタンパク質コレステロールレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時トリグリセリドリポタンパク質コレステロールレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。 図７Ａは、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の絶対的空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルをｍｇ／ｄＬで示すグラフである。図７Ｂは、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）をｍｇ／ｄＬで示すグラフである。 スタチンの存在下または非存在下での、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。Ｘ軸は、Ｌ１Ｌ３投与量をＰＣＳＫ９拮抗抗体のｍｇ／ｋｇで示す。 Ｌ１Ｌ３（Ａ〜Ｃ）およびＬＤＬ−Ｃ（Ｅ〜Ｆ）のシミュレーションした時間プロフィールを示す図である。（Ａ）および（Ｄ）：２ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体でのＬ１Ｌ３。（Ｂ）および（Ｅ）：６ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体でのＬ１Ｌ３。（Ｃ）および（Ｆ）：プラセボ。Ｘ軸は時間を日数で示す。 示したＬ１Ｌ３投与量を用いた投薬後のＬＤＬ−Ｃのシミュレーションした時間プロフィールを示す図である。 Ｌ１Ｌ３単独療法の試験設計を示す模式図である。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の絶対的空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルをｍｇ／ｄＬで示すグラフである。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの平均変化率（％）を示す表である。 Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。 薬の飲み忘れがある対象を除外した、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）を示すグラフである。

本明細書中では、血漿中のＬＤＬ粒子の著しい上昇によって特徴づけられる障害を処置するための治療レジメンを提供する。対象治療レジメンは、ＰＣＳＫ９拮抗抗体を単独でまたはスタチンと組み合わせて投与することを含む。対象治療レジメンは、血中ＬＤＬ−コレステロールレベルの持続的な低下をもたらし、家族性高コレステロール血症、アテローム生成的異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、急性冠症候群（ＡＣＳ）、より一般には心血管疾患を含めた、コレステロールおよびリポタンパク質の代謝障害の予防および／または処置に使用することができる。

一般技法
本発明の実施では、別段に指定しない限りは、当分野の技術範囲内にある分子生物学（組換え技法が含まれる）、微生物学、細胞生物学、生化学および免疫学の慣用技術を用いる。そのような技法は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ、Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４）、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ編、１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編、１９８７）、Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．ＭａｔｈｅｒおよびＰ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ、１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ、Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ、Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ、およびＤ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ編、１９９３〜１９９８）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．ＷｅｉｒおよびＣ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編）、Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．ＭｉｌｌｅｒおよびＭ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９８７）、ＰＣＲ：Ｔｈｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ、（Ｍｕｌｌｉｓら編、１９９４）、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編、１９９１）、Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、１９９９）、Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．ＪａｎｅｗａｙおよびＰ．Ｔｒａｖｅｒｓ、１９９７）、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ、１９９７）、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ．編、ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ、１９８８〜１９８９）、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．ＳｈｅｐｈｅｒｄおよびＣ．Ｄｅａｎ編、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、２０００）、Ｕｓｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗおよびＤ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、１９９９）、Ｔｈｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．ＺａｎｅｔｔｉおよびＪ．Ｄ．Ｃａｐｒａ編、Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９９５）などの文献中に完全に記載されている。

定義
「抗体」とは、免疫グロブリン分子の可変領域中に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を介して炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチドなどの標的と特異的に結合することができる免疫グロブリン分子である。本明細書中で使用する用語「抗体」には、インタクトなポリクローナルまたはモノクローナル抗体のみでなく、任意の抗原結合断片（すなわち「抗原結合部分」）またはその単鎖、抗体を含む融合タンパク質、ならびに、たとえばそれだけには限定されないが、ｓｃＦｖ、単一ドメイン抗体（たとえばサメやラクダの抗体）、マキシボディー、ミニボディー、細胞内抗体、ジアボディー、トリアボディー、テトラボディー、ｖ−ＮＡＲおよびビス−ｓｃＦｖを含めた、抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の改変された立体配置も包含される（たとえばＨｏｌｌｉｎｇｅｒおよびＨｕｄｓｏｎ、２００５、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、２３（９）：１１２６〜１１３６を参照）。抗体には、ＩｇＧ、ＩｇＡ、もしくはＩｇＭなどの任意のクラス（またはそのサブクラス）の抗体が含まれ、抗体は、任意の特定のクラスのものである必要はない。その重鎖の定常領域の抗体アミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは様々なクラスに割り当てることができる。５つの主要な免疫グロブリンクラス、すなわちＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭが存在し、これらのうちのいくつかは、サブクラス（アイソタイプ）、たとえば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２へとさらに分割され得る。様々な免疫グロブリンのクラスに対応する重鎖定常領域は、それぞれアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューと呼ばれる。様々な免疫グロブリンクラスのサブユニット構造および三次元立体配置は周知である。

本明細書中で使用する用語、抗体の「抗原結合部分」とは、所定の抗原（たとえばＰＣＳＫ９）と特異的に結合する能力を保持するインタクトな抗体の１つまたは複数の断片を指す。抗体の抗原結合機能は、インタクトな抗体の断片によって行われることができる。用語、抗体の「抗原結合部分」内に包含される結合断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）断片（Ｗａｒｄら、１９８９、Ｎａｔｕｒｅ、３４１：５４４〜５４６）、ならびに単離した相補性決定領域（ＣＤＲ）が含まれる。

用語「モノクローナル抗体」（Ｍａｂ）とは、たとえば任意の真核、原核、またはファージクローンを含めた単一のコピーまたはクローンに由来する抗体を指し、それを産生する方法ではない。好ましくは、本発明のモノクローナル抗体は均質または実質的に均質集団で存在する。

「ヒト化」抗体とは、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含有する、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはその断片（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２もしくは抗体の他の抗原結合部分配列など）である非ヒト（たとえばマウス）抗体の形態を指す。好ましくは、ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）であり、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）からの残基が、所望特異性、親和性、および能力を有するマウス、ラット、またはウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲからの残基によって置き換えられている。

本明細書中で使用する「ヒト抗体」とは、ヒトによって産生されることができる抗体のそれに対応するアミノ酸配列を有する抗体、および／または当業者に知られているもしくは本明細書中に開示されているヒト抗体を作製するための技法のうちの任意のものを使用して作製された抗体を意味する。このヒト抗体の定義には、少なくとも１つのヒト重鎖ポリペプチドまたは少なくとも１つのヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体が含まれる。１つのそのような例は、マウス軽鎖およびヒト重鎖ポリペプチドを含む抗体である。ヒト抗体は、当分野で知られている様々な技法を使用して産生させることができる。一実施形態では、ヒト抗体はファージライブラリから選択され、そのファージライブラリはヒト抗体を発現する（Ｖａｕｇｈａｎら、１９９６、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：３０９〜３１４、Ｓｈｅｅｔｓら、１９９８、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ）、９５：６１５７〜６１６２、ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２７：３８１、Ｍａｒｋｓら、１９９１、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２２２：５８１）。また、ヒト抗体は、内在性座位の代わりにヒト免疫グロブリン座位が遺伝子導入によって導入されている動物、たとえば、内在性免疫グロブリン遺伝子が部分的にまたは完全に不活性化されているマウスを免疫化することによっても産生させることができる。この手法は、米国特許第５，５４５，８０７号、第５，５４５，８０６号、第５，５６９，８２５号、第５，６２５，１２６号、第５，６３３，４２５号、および第５，６６１，０１６号に記載されている。あるいは、ヒト抗体は、標的抗原に向けられた抗体を産生するヒトＢリンパ球を不死化することによって調製し得る（そのようなＢリンパ球は、個体から回収してもよく、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで免疫化されていてもよい）。たとえば、Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ、ページ７７、１９８５、Ｂｏｅｒｎｅｒら、１９９１、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７（１）：８６〜９５、および米国特許第５，７５０，３７３号を参照されたい。

抗体の「可変領域」とは、単独または組み合わせた抗体軽鎖の可変領域または抗体重鎖の可変領域を指す。当分野で知られているように、超可変領域としても知られる３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）によって接続された４つのフレームワーク領域（ＦＲ）からそれぞれなる重鎖および軽鎖の可変領域は、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。対象可変領域の変異体が所望される場合、特にＣＤＲ領域外（すなわちフレームワーク領域中）のアミノ酸残基中の置換の場合は、適切なアミノ酸置換、好ましくは、保存的アミノ酸置換は、対象可変領域を、対象可変領域と同じカノニカル（ｃａｎｏｎｉｃａｌ）クラスのＣＤＲ１およびＣＤＲ２配列を含有する他の抗体の可変領域と比較することによって同定することができる（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ、１９６（４）：９０１〜９１７、１９８７）。対象ＣＤＲに隣接させるＦＲを選択する場合、たとえば、抗体をヒト化または最適化する場合は、同じカノニカルクラスのＣＤＲ１およびＣＤＲ２配列を含有する抗体からのＦＲが好ましい。

可変ドメインの「ＣＤＲ」とは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＫａｂａｔおよびＣｈｏｔｈｉａの両方の蓄積、ＡｂＭ、接触の定義、および／またはコンホメーション定義もしくは当分野で周知のＣＤＲを決定する任意の方法に従って同定された、可変領域内のアミノ酸残基である。抗体のＣＤＲは、Ｋａｂａｔらによって最初に定義された超可変領域として同定され得る。たとえばＫａｂａｔら、１９９２、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、ＮＩＨ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｄ．Ｃ．を参照されたい。また、ＣＤＲの位置は、Ｃｈｏｔｈｉａらによって最初に記載された構造的ループ構造としても同定され得る。たとえばＣｈｏｔｈｉａら、１９８９、Ｎａｔｕｒｅ、３４２：８７７〜８８３を参照されたい。ＣＤＲを同定するための他の手法には、ＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａの折衷であり、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェア（現在はＡｃｃｅｌｒｙｓ（登録商標））を使用して誘導する「ＡｂＭ定義」、または、ＭａｃＣａｌｌｕｍら、１９９６、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２６２：７３２〜７４５に記載の、観察された抗原接触に基づくＣＤＲの「接触定義」が含まれる。本明細書中でＣＤＲの「コンホメーション定義」と呼ばれる別の手法では、ＣＤＲの位置は、抗原結合にエンタルピー的な寄与を与える残基として同定され得る。たとえばＭａｋａｂｅら、２００８、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２８３：１１５６〜１１６６を参照されたい。さらに他のＣＤＲ境界定義は、上記手法のうちの１つに厳密に従わないが、それにもかかわらずＫａｂａｔ ＣＤＲの少なくとも一部分と重複する場合がある。しかし、これらは、特定の残基または残基群またはＣＤＲ全体さえもが抗原結合に有意な影響を与えないという予測的または実験的な発見に鑑みて、短縮または伸ばし得る。本明細書中で使用するＣＤＲとは、手法の組合せを含めた、当分野で知られている任意の手法によって定義されたＣＤＲを指し得る。本明細書中で使用する方法は、これらの手法のうちの任意のものに従って定義されたＣＤＲを利用し得る。複数のＣＤＲを含有する任意の所定の実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、拡張、ＡｂＭ、接触、および／またはコンホメーションの定義のうちの任意のものに従って定義し得る。

当分野で知られているように、抗体の「定常領域」とは、単独または組み合わせた抗体軽鎖の定常領域または抗体重鎖の定常領域を指す。

本明細書中で使用する用語「ＰＣＳＫ９」とは、ＰＣＳＫ９の任意の形態およびＰＣＳＫ９の活性の少なくとも一部を保持するその変異体を指す。ヒトＰＣＳＫ９に具体的に言及することなどによって別段に示さない限りは、ＰＣＳＫ９には、ネイティブ配列ＰＣＳＫ９のすべての哺乳動物種、たとえば、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、およびウシが含まれる。１つの例示的なヒトＰＣＳＫ９は、Ｕｎｉｐｒｏｔ受託番号Ｑ８ＮＢＰ７（配列番号１）として見つかる。

本明細書中で使用する「ＰＣＳＫ９拮抗抗体」とは、ＰＣＳＫ９に媒介されるＬＤＬＲの下方制御を含めたＰＣＳＫ９シグナル伝達によって媒介されるＰＣＳＫ９生物活性および／または下流経路（複数可）、ならびにＰＣＳＫ９に媒介されるＬＤＬ血液クリアランスの減少を阻害することができる抗ＰＣＳＫ９抗体を指す。ＰＣＳＫ９拮抗抗体には、ＬＤＬＲの相互作用および／またはＰＣＳＫ９に対する細胞応答の誘発などのＰＣＳＫ９シグナル伝達によって媒介される下流経路を含めたＰＣＳＫ９生物活性を遮断、拮抗、抑制または低下させる（有意に、を含めた任意の度合まで）抗体が包含される。本発明の目的のために、用語「ＰＣＳＫ９拮抗抗体」にはすべての以前に同定した用語、タイトル、ならびに機能的な状態および特徴が包含され、ＰＣＳＫ９自体、ＰＣＳＫ９生物活性（それだけには限定されないが、ＬＤＬＲとの相互作用、ＬＤＬＲの下方制御、および減少した血中ＬＤＬクリアランスの任意の側面を媒介するその能力が含まれる）、または生物活性の結果が、任意の有意義な度合で実質的に無効化、減少、または中和されていることを明確に理解されたい。一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体はＰＣＳＫ９と結合し、ＬＤＬＲとの相互作用を妨げる。ＰＣＳＫ９拮抗抗体の例は、たとえば、その全体で本明細書中に参考として組み込まれている米国特許出願公開第２０１０００６８１９９号中に提供されている。

本明細書中で使用する「完全拮抗剤」とは、有効な濃度でＰＣＳＫ９の測定可能な効果を本質的に完全に遮断する拮抗剤である。部分的拮抗剤とは、測定可能な効果を部分的に遮断することができるが、最高濃度でさえも完全拮抗剤ではない拮抗剤を意味する。本質的に完全とは、測定可能な効果の少なくとも約８０％、好ましくは少なくとも約９０％、より好ましくは少なくとも約９５％、最も好ましくは少なくとも約９８％または９９％が遮断されることを意味する。関連する「測定可能な効果」は本明細書中に記載されており、Ｈｕｈ７細胞中ｉｎ ｖｉｔｒｏでアッセイされたＰＣＳＫ９拮抗剤によるＬＤＬＲの下方制御、総コレステロールの血液（または血漿）レベルｉｎ ｖｉｖｏ減少、および血液（または血漿）中のＬＤＬレベルのｉｎ ｖｉｖｏでの減少が含まれる。

本明細書中で使用する用語「臨床的に有意義」とは、ヒトにおける血中ＬＤＬ−コレステロールレベルの少なくとも１５％の低下またはマウスにおける全血中コレステロールの少なくとも１５％の低下を意味する。血漿または血清中の測定が血中レベルの測定の代理として役割を果たすことができるは明らかである。

本明細書中で使用する用語「投薬レジメン」とは、患者に投与した処置、たとえばＰＣＳＫ９拮抗抗体を用いた処置の全過程を指す。

平均血中ＬＤＬコレステロールレベルが具体的なレベルの範囲内にある時間の文脈において本明細書中で使用する用語「連続的」とは、平均レベルがその具体的な範囲内にある時間が、平均レベルがその具体的なレベルの範囲内にない任意の時間によって中断されないことを意味する。

平均血中ＬＤＬコレステロールレベルが具体的なレベルの範囲内にある時間の文脈において本明細書中で使用する用語「非連続的」とは、平均レベルがその具体的な範囲内にある時間が、平均レベルがその具体的なレベルの範囲内にない何らかの量の時間（たとえば、１５分間、２０分間、３０分間、４５分間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、８時間、１０時間、１２時間、１４時間、１６時間、１８時間、２０時間、２４時間、２８時間、３２時間、３６時間、４０時間、４４時間、４８時間、６０時間、７２時間、８４時間、９０時間、または上記具体的に記述した時間のうちの任意の上限および下限を有する任意の範囲の時間）によって中断されることを意味する。

用語「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」は、本明細書中で互換性があるように使用され、任意の長さ、好ましくは比較的短いアミノ酸の鎖を指す（たとえば１０〜１００個のアミノ酸）。鎖は直鎖状または分枝状であってよく、修飾されたアミノ酸を含んでいてよく、および／または非アミノ酸によって中断されていてよい。また、この用語には、自然または介入によって修飾されたアミノ酸鎖、たとえば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または標識構成要素とのコンジュゲーションなどの任意の他の操作もしくは修飾も包含される。また、この定義内には、たとえば、アミノ酸の１つまたは複数の類似体（たとえば非天然アミノ酸などが含まれる）、および当分野で知られている他の修飾を含有するポリペプチドも含まれる。ポリペプチドは単鎖または会合した鎖として生じることができることが理解されよう。

当分野で知られているように、本明細書中で互換性があるように使用される「ポリヌクレオチド」または「核酸」とは、任意の長さのヌクレオチドの鎖を指し、ＤＮＡおよびＲＮＡが含まれる。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾されたヌクレオチドもしくは塩基、および／またはその類似体、あるいはＤＮＡまたはＲＮＡポリメラーゼによって鎖内に取り込まれることができる任意の基質であることができる。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびその類似体などの修飾されたヌクレオチドを含み得る。存在する場合は、ヌクレオチド構造への修飾は、鎖のアセンブリの前または後に与え得る。ヌクレオチドの配列は非ヌクレオチド構成要素によって中断されていてもよい。ポリヌクレオチドは、標識構成要素とのコンジュゲーションなどによって重合後にさらに修飾されてもよい。他の種類の修飾には、たとえば、「キャップ」、天然に存在するヌクレオチドのうちの１つまたは複数の類似体での置換、たとえば非荷電連結（たとえば、ホスホン酸メチル、リン酸トリエステル、ホスホアミデート、カルバメートなど）を有するものおよび荷電連結（たとえば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）を有するものなどのヌクレオチド間修飾、たとえばタンパク質（たとえば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリ−Ｌ−リシンなど）などのペンダント部分を含有するもの、インターカレーター（たとえば、アクリジン、ソラレンなど）を含有するもの、キレート剤（たとえば、金属、放射性金属、ホウ素、酸化金属など）を含有するもの、アルキル化剤を含有するもの、修飾された連結（たとえばアルファアノマー核酸など）を有するもの、ならびにポリヌクレオチド（複数可）修飾されていない形態が含まれる。さらに、糖中に通常存在するヒドロキシル基のうちの任意のものが、たとえばホスホン酸基、リン酸基によって置き換えられている、標準の保護基によって保護されている、もしくは活性化されて追加のヌクレオチドとの追加の連結を調製していてよく、または固体支持体とコンジュゲートされていてよい。５’および３’末端のＯＨは、リン酸化されている、またはアミンもしくは１〜２０個の炭素原子の有機キャップ基部分で置換されていることができる。他のヒドロキシルも、標準の保護基へと誘導体化されていてよい。また、ポリヌクレオチドは、たとえば、２’−Ｏ−メチル−、２’−Ｏ−アリル、２’−フルオロ−または２’−アジド−リボース、炭素環糖類似体、アルファ−またはベータ−アノマー糖、アラビノース、キシロースまたはリキソースなどのエピマー糖、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース、非環状類似体およびメチルリボシドなどの脱塩基ヌクレオシド類似体を含めた、当分野で一般に知られているリボースまたはデオキシリボース糖の類似体も含有することができる。１つまたは複数のリン酸ジエステル連結は、代替連結基によって置き換えられていてよい。これらの代替連結基には、それだけには限定されないが、リン酸がＰ（Ｏ）Ｓ（「チオエート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオエート」）、（Ｏ）ＮＲ_２（「アミデート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯまたはＣＨ_２（「ホルムアセタール」）によって置き換えられており、それぞれのＲまたはＲ’が、独立してＨまたは置換もしくは非置換のアルキル（１〜２０個のＣ）（エーテル（−Ｏ−）連結、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニルまたはアラルジルを任意選択で含有する）である実施形態が含まれる。ポリヌクレオチド中のすべての連結が同一である必要はない。先行する説明は、ＲＮＡおよびＤＮＡを含めた、本明細書中で言及するすべてのポリヌクレオチドに適用される。

本明細書中で使用する場合、抗体は、米国特許出願公開第２０１０００６８１９９号の実施例２に開示されている方法によって測定した平衡解離定数が２０ｎＭ以下、好ましくは約６ｎＭ未満、より好ましくは約１ｎＭ未満、最も好ましくは約０．２ｎＭ未満である場合に、ＰＣＳＫ９「と相互作用する」。

エピトープと「優先的に結合する」または「特異的に結合する」（本明細書中で互換性があるように使用される）抗体とは、当分野で十分に理解されている用語であり、そのような特異的または優先的な結合を決定する方法も当分野で周知である。分子は、特定の細胞または物質と、別の細胞または物質よりも頻繁に、より迅速に、より長く持続しておよび／またはより高い親和性で反応または会合する場合に、「特異的結合」または「優先的結合」を示すと言われる。抗体は、他の物質と結合するよりも高い親和性、結合力で、より容易に、および／またはより長く持続して結合する場合に、標的と「特異的に結合する」または「優先的に結合する」。たとえば、ＰＣＳＫ９エピトープと特異的または優先的に結合する抗体とは、他のＰＣＳＫ９エピトープまたは非ＰＣＳＫ９エピトープと結合するよりも高い親和性、結合力で、より容易に、および／またはより長く持続してこのエピトープと結合する抗体である。この定義を読むことによって、たとえば、第１の標的と特異的または優先的に結合する抗体（または部分もしくはエピトープ）は、第２の標的と特異的または優先的に結合しても結合しなくてもよいことを理解されよう。したがって、「特異的結合」または「優先的結合」は、必ずしも排他的な結合を必要としない（ただしそれが含まれることができる）。一般に、必ずしもではないが、結合への言及は優先的結合を意味する。

本明細書中で使用する「実質的に純粋」とは、少なくとも５０％純粋（すなわち汚染物質を含まない）、より好ましくは少なくとも９０％純粋、より好ましくは少なくとも９５％純粋、さらにより好ましくは少なくとも９８％純粋、最も好ましくは少なくとも９９％純粋である材料を指す。

「宿主細胞」には、ポリヌクレオチド挿入物を取り込ませるためのベクター（複数可）のレシピエントとなることができる、またはそうであった、個々の細胞または細胞培養物が含まれる。宿主細胞には単一の宿主細胞の子孫が含まれ、子孫は、天然、偶発的、または意図的な突然変異が原因で、必ずしも元の親細胞と完全に同一（形態学またはゲノムＤＮＡ相補性（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ）において）でなくてもよい。宿主細胞には、本発明のポリヌクレオチド（複数可）を用いてｉｎ ｖｉｖｏで形質移入した細胞が含まれる。

当分野で知られているように、用語「Ｆｃ領域」とは、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用する。「Ｆｃ領域」は、ネイティブ配列Ｆｃ領域または変異体Ｆｃ領域であり得る。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は変動し得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、通常、位置Ｃｙｓ２２６またはＰｒｏ２３０のアミノ酸残基からそのカルボキシル末端までのストレッチに定義される。Ｆｃ領域中の残基の付番は、Ｋａｂａｔと同様にＥＵインデックスのものである。Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ．、１９９１。免疫グロブリンのＦｃ領域は、一般に２つの定常ドメイン、ＣＨ２およびＣＨ３を含む。

当分野で使用されているように、「Ｆｃ受容体」および「ＦｃＲ」とは、抗体のＦｃ領域と結合する受容体を説明する。好ましいＦｃＲはネイティブ配列ヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）と結合するものであり、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、およびＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体が含まれ、これらの受容体の対立遺伝子変異体および選択的スプライシングされた形態が含まれる。ＦｃγＲＩＩ受容体にはＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）およびＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれ、これらは、その細胞質ドメインが主に異なる類似のアミノ酸配列を有する。ＦｃＲは、ＲａｖｅｔｃｈおよびＫｉｎｅｔ、１９９１、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、９：４５７〜９２、Ｃａｐｅｌら、１９９４、Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ、４：２５〜３４、およびｄｅ Ｈａａｓら、１９９５、Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．、１２６：３３０〜４１に総説されている。また、「ＦｃＲ」には、母体ＩｇＧを胎児に移すことを司っている新生児受容体ＦｃＲｎも含まれる（Ｇｕｙｅｒら、１９７６、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１１７：５８７、およびＫｉｍら、１９９４、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２４：２４９）。

抗体に関して本明細書中で使用する用語「競合する」とは、第１の抗体とその同族エピトープとの結合の結果が、第２の抗体の存在下で、第２の抗体の非存在下での第１の抗体の結合と比較して検出可能に減少しているように、第１の抗体またはその抗原結合部分が、第２の抗体またはその抗原結合部分の結合と十分に類似した様式でエピトープと結合することを意味する。第２の抗体とそのエピトープとの結合も第１の抗体の存在下で検出可能に減少しているという代替形式は、可能であるが、そうである必要はない。すなわち、第１の抗体は、第２の抗体が第１の抗体とそのそれぞれのエピトープとの結合を阻害することなしに、その第２の抗体とそのエピトープとの結合を阻害することができる。しかし、それぞれの抗体が、同じ、より高い、またはより低い程度かにかかわらず、他の抗体とその同族エピトープまたはリガンドとの結合を検出可能に阻害する場合は、抗体は、そのそれぞれのエピトープ（複数可）の結合について互いに「相互競合する」と言われる。競合および相互競合抗体はどちらも本発明によって包含される。当業者は、本明細書中に提供されている教示に基づいて、そのような競合または相互競合が起こる機構（たとえば、立体障害、コンホメーション変化、または共通のエピトープもしくはその一部分との結合）にかかわらず、そのような競合および／または相互競合抗体が本明細書中に開示されている方法に包含され、それに有用な場合があることを理解されよう。

別の（第２の）エピトープまたはＬＤＬＲのＥＧＦ様ドメインと相互作用するＰＣＳＫ９上の表面と「重複する」エピトープを有する抗体とは、相互作用するＰＣＳＫ９残基に関する空間の共有を意味する。重複のパーセント、たとえば、特許請求した抗体のＰＣＳＫ９エピトープとＬＤＬＲのＥＧＦ様ドメインと相互作用するＰＣＳＫ９の表面とのパーセント重複を計算するために、ＬＤＬＲと複合体形成した際に埋もれているＰＣＳＫ９の表面積を残基毎に計算する。また、埋もれている面積を、ＰＣＳＫ９：抗体の複合体中のこれらの残基についても計算する。１００％を超える可能な重複を防ぐために、ＬＤＬＲ：ＰＣＳＫ９の複合体よりもＰＣＳＫ９：抗体の複合体中でより高い埋もれた表面積を有する残基の表面積を、ＬＤＬＲ：ＰＣＳＫ９の複合体からの値に設定する（１００％）。パーセント表面重複は、ＬＤＬＲ：ＰＣＳＫ９の相互作用残基のすべてを合計することによって計算し、相互作用面積によって重み付けられる。

「機能的Ｆｃ領域」は、ネイティブ配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を保有する。例示的な「エフェクター機能」には、Ｃ１ｑ結合、補体依存性細胞傷害、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害、貪食、細胞表面受容体（たとえばＢ細胞受容体）の下方制御などが含まれる。そのようなエフェクター機能は、一般に、Ｆｃ領域が結合ドメイン（たとえば抗体可変ドメイン）と組み合わさることを必要とし、そのような抗体エフェクター機能を評価するための当分野で知られている様々なアッセイを使用して評価することができる。

「ネイティブ配列Ｆｃ領域」は、自然で見つかるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。「変異体Ｆｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾によってネイティブ配列Ｆｃ領域から異なるアミノ酸配列を含むが、それでもネイティブ配列Ｆｃ領域の少なくとも１つのエフェクター機能を保持している。好ましくは、変異体Ｆｃ領域は、ネイティブ配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して、少なくとも１つのアミノ酸置換を有する、たとえば、ネイティブ配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域中に約１〜約１０個のアミノ酸置換、好ましくは約１〜約５個のアミノ酸置換を有する。本明細書中の変異体Ｆｃ領域は、好ましくはネイティブ配列Ｆｃ領域および／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の配列同一性、最も好ましくは少なくとも約９０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％の配列同一性を保有する。

本明細書中で使用する用語「アトルバスタチン」、「セリバスタチン」、「フルバスタチン」、「ロバスタチン」、「メバスタチン」、「ピタバスタチン」、「プラバスタチン」、「ロスバスタチン」および「シンバスタチン」には、それぞれアトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、およびその任意の薬学的に許容できる塩または立体異性体が含まれる。本明細書中で使用する用語「薬学的に許容できる塩」には、患者によって生理的に耐容される塩が含まれる。そのような塩は、典型的には無機酸もしくは塩基および／または有機酸もしくは塩基から調製される。これらの酸および塩基の例は当業者に周知である。

本明細書中で使用する「処置」とは、有益または所望の臨床結果を得るための手法である。本発明の目的のために、有益または所望の臨床結果には、それだけには限定されないが、以下のうちの１つまたは複数が含まれる：ＬＤＬクリアランスの増強、ならびに代謝および／もしくは摂食障害から生じる異常なコレステロールおよび／もしくはリポタンパク質レベル、または家族性高コレステロール血症、アテローム生成的異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、ＡＣＳ、より一般には心血管疾患（ＣＶＤ）を含めたものの発生率の低下または軽快。

「発生率の低下」とは、重篤度の低下のうちの任意のものを意味する（これには、この状態に一般に使用される他の薬物および／または治療の必要性および／または量（たとえばそれへの曝露）の低下が含まれることができる）。当業者によって理解されるように、個体は、処置に対するその応答に関して変動し得、したがって、たとえば、「発生率を低下させる方法」は、そのような投与がその特定の個体においてそのような発生率の低下を引き起こし得る可能性が高いという合理的な予想に基づいて、ＰＣＳＫ９拮抗抗体を投与することを反映する。

「軽快させること」とは、ＰＣＳＫ９拮抗抗体を投与しないことと比較した、１つまたは複数の症状の軽減または改善を意味する。また、「軽快させること」には、症状の持続期間の短縮または低下も含まれる。

本明細書中で使用する薬物、化合物、または医薬組成物の「有効用量」または「有効量」とは、任意の１つまたは複数の有益または所望の結果を達成するために十分な量である。予防的な使用には、有益または所望の結果には、危険性の排除もしくは低下、重篤度の軽減、または、疾患の生化学的、組織学的および／もしくは行動性症状、その合併症および疾患の発生中に現れる中間の病理学的表現型を含めた、疾患の発生の遅延が含まれる。治療的使用には、有益または所望の結果には、高コレステロール血症または異常脂質血症の１つもしくは複数の症状、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、冠動脈性心疾患の低下、疾患の処置に必要な他の薬物の用量の減少、別の薬物の効果の増強、および／あるいは患者の疾患の進行の遅延などの臨床結果が含まれる。有効用量は１つまたは複数の投与で投与することができる。本発明の目的のために、有効用量の薬物、化合物、または医薬組成物とは、予防的または治療的処置を直接または間接的に達成するために十分な量である。臨床的な文脈で理解されるように、有効用量の薬物、化合物、または医薬組成物は、別の薬物、化合物、または医薬組成物と併せて達成され得るまたは達成され得ない。したがって、「有効用量」は、１つまたは複数の治療剤の投与の文脈において検討され得、１つまたは複数の他の薬剤と併せて望ましい結果が達成され得るまたは達成される場合は、有効量中で単一の薬剤を与えることを検討し得る。

「個体」または「対象」とは、哺乳動物、より好ましくはヒトである。また、哺乳動物には、それだけには限定されないが、家畜、スポーツ動物、ペット、霊長類、ウマ、イヌ、ネコ、マウスおよびラットも含まれる。

本明細書中で使用する「ベクター」とは、宿主細胞中に１つまたは複数の対象の遺伝子または配列を送達する、好ましくは発現させることができる構築体を意味する。ベクターの例には、それだけには限定されないが、ウイルスベクター、裸ＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、プラスミド、コスミドまたはファージベクター、陽イオン性縮合剤と会合したＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、リポソーム中にカプセル封入されたＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、および産生細胞などの特定の真核細胞が含まれる。

本明細書中で使用する「発現制御配列」とは、核酸の転写を指示する核酸配列を意味する。発現制御配列は、構成的もしくは誘導性プロモーターなどのプロモーター、またはエンハンサーであることができる。発現制御配列は、転写させる核酸配列に作動可能に連結されている。

本明細書中で使用する「薬学的に許容できる担体」または「薬学的に許容できる賦形剤」には、活性成分と組み合わせた場合に、成分が生物活性を保持することを可能にし、対象の免疫系と非反応性である、任意の材料が含まれる。例には、それだけには限定されないが、リン酸緩衝溶液、水、油／水の乳濁液などの乳濁液、および様々な種類の湿潤剤などの、標準の薬学的担体のうちの任意のものが含まれる。エアロゾルまたは非経口投与のための好ましい希釈剤は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）または通常（０．９％）生理食塩水である。そのような担体を含む組成物は、周知の慣用方法によって配合される（たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、１９９０およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０００を参照）。

本明細書中で使用する用語「ｋ_ｏｎ」とは」、抗体と抗原との会合の速度定数を指す。具体的には、速度定数（ｋ_ｏｎおよびｋ_ｏｆｆ）ならびに平衡解離定数は、Ｆａｂ抗体断片（すなわち一価）およびＰＣＳＫ９を使用して測定する。

本明細書中で使用する用語「ｋ_ｏｆｆ」とは、抗体／抗原の複合体からの抗体の解離の速度定数を指す。

本明細書中で使用する用語「Ｋ_Ｄ」とは、抗体−抗原の相互作用の平衡解離定数を指す。

本明細書における「約」の値またはパラメータの言及には、その値またはパラメータ自体に向けられている実施形態が含まれる（かつそれを説明する）。たとえば、「約Ｘ」に言及する説明には「Ｘ」の説明が含まれる。数値範囲は、範囲を定義する数値が含まれるものである。

本明細書中で言葉「含む」を用いて実施形態を説明する場合はすべて、「からなる」および／または「から本質的になる」に関して記載されている、それ以外は類似の実施形態も提供されることを理解されたい。

発明の態様または実施形態がマーカッシュ群または他の代替群に関して記載されている場合、本発明には、全体として記載された群全体だけでなく、群のそれぞれの個々のメンバーおよび主群の可能なすべての部分群、また、主群から群のメンバーのうちの１つまたは複数が存在しないものも包含される。また、本発明は、特許請求した発明中の群のメンバーのうちの任意の１つまたは複数の明確な排除も想定する。

別段に定義しない限りは、本明細書中で使用するすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の技術者によって一般的に理解されているものと同じ意味を有する。例示的な方法および材料が本明細書中に記載されているが、本明細書中に記載されているものと類似または均等の方法および材料も、本発明の実施または試験に使用することができる。本明細書中で言及したすべての出版物および他の参考文献は、その全体で参考として組み込まれている。矛盾する場合は、定義を含めて本明細書が支配する。いくつかの文書が本明細書中で引用されているが、この引用は、これらの文書のうちの任意のものが当分野の共通の一般知識の一部を形成することの承認を構成しない。本明細書および特許請求の範囲全体にわたって、言葉「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形は、記述した整数または整数群の包含を意味するが、任意の他の整数または整数群の排除を意味しないことを理解されたい。内容により必要とされない限りは、単数形の用語には複数形が含まれ、複数形の用語には単数形が含まれよう。材料、方法、および実施例は例示的のみであり、限定することを意図しない。

抗ＰＣＳＫ９抗体に関する公開された情報には、以下の公開された出願が含まれる：そのそれぞれがその全体で本明細書中に参考として組み込まれている、２０１０年３月１８日にＷＯ２０１０／０２９５１３として公開されたＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５３９９０、および２０１０年３月１８日にＵＳ２０１０／００６８１９９として公開された米国特許出願第１２／５５８３１２号。

抗ＰＣＳＫ９抗体を用いた処置
本明細書中では、血漿中のＬＤＬ粒子の著しい上昇によって特徴づけられる障害を処置するための治療レジメンを提供する。対象治療レジメンはＰＣＳＫ９拮抗抗体を投与することを含む。一部の実施形態では、対象治療レジメンは、安定用量のスタチンを受けている患者にＰＣＳＫ９拮抗抗体を投与することを含む。本明細書中に開示されている治療レジメンは、個体における高コレステロール血症、および／または異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、急性冠症候群（ＡＣＳ）、もしくは冠動脈性心疾患の少なくとも１つの症状の処置または予防に使用するための、循環ＰＣＳＫ９を拮抗する有効量のＰＣＳＫ９拮抗抗体を提供する。

有利には、本明細書中に開示されている治療レジメンは、実質的で持続的なＬＤＬ−Ｃの降下をもたらす。好ましくは、血中コレステロールおよび／または血中ＬＤＬは、投与前よりも少なくとも約１０％または１５％低い。より好ましくは、血中コレステロールおよび／または血中ＬＤＬは、抗体の投与前よりも少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０または８０％低い。

投薬レジメン
一部の実施形態では、投薬レジメンは、約２ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約２ｍｇ／ｋｇの維持用量を４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、約４ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約４ｍｇ／ｋｇの維持用量を４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、約４ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約４ｍｇ／ｋｇの維持用量を８週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、約８ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約８ｍｇ／ｋｇの維持用量を８週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、約１２ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約１２ｍｇ／ｋｇの維持用量を８週間毎に投与することを含む。

他の実施形態では、投薬レジメンは、週用量約０．２５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体を投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、週用量約０．５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体を投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、週用量約１ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体を投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、週用量約１．５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体を投与することを含む。

しかし、従事者が達成を望む薬物動態学的崩壊のパターンによっては、他の投薬レジメンが有用であり得る。この治療の進行は、慣用の技術およびアッセイによって容易に監視される。好ましい実施形態では、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも４週間の時間間隔である。投薬レジメン（使用するＰＣＳＫ９拮抗剤（複数可）が含まれる）は経時的に変動することができる。

一般に、ＰＣＳＫ９抗体の投与には、候補初回用量は、約０．３ｍｇ／ｋｇ〜約１８ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体であることができる。本発明の目的のために、典型的な投与用量は、上述の要因に応じて、約３μｇ／ｋｇから約３０μｇ／ｋｇまで、約３００μｇ／ｋｇまで、約３ｍｇ／ｋｇまで、約３０ｍｇ／ｋｇまで、約１００ｍｇ／ｋｇ以上までのうちの任意の範囲であり得る。たとえば、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約３．５ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約４．５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約５．５ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約６．５ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約７．５ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約８．５ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ、約９．５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０．５ｍｇ／ｋｇ、約１１ｍｇ／ｋｇ、約１１．５ｍｇ／ｋｇ、約１２ｍｇ／ｋｇ、約１２．５ｍｇ／ｋｇ、約１３ｍｇ／ｋｇ、約１３．５ｍｇ／ｋｇ、約１４ｍｇ／ｋｇ、約１４．５ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約１５．５ｍｇ／ｋｇ、約１６ｍｇ／ｋｇ、約１６．５ｍｇ／ｋｇ、約１７ｍｇ／ｋｇ、約１７．５ｍｇ／ｋｇ、約１８ｍｇ／ｋｇ、約１８．５ｍｇ／ｋｇ、約１９ｍｇ／ｋｇ、約１９．５ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２０．５ｍｇ／ｋｇ、約２１ｍｇ／ｋｇ、約２１．５ｍｇ／ｋｇ、約２２ｍｇ／ｋｇ、約２２．５ｍｇ／ｋｇ、約２３ｍｇ／ｋｇ、約２３．５ｍｇ／ｋｇ、約２４ｍｇ／ｋｇ、約２４．５ｍｇ／ｋｇ、および約２５ｍｇ／ｋｇの用量を使用し得る。数日間以上にわたる反復投与には、処置は、状態に応じて、症状の所望の抑制が起こるまで、または、たとえば血中ＬＤＬレベルを低下させるための十分な治療レベルが達成されるまで持続する。

例示的な投薬レジメンは、約０．２５ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１１ｍｇ／ｋｇ、約１２ｍｇ／ｋｇ、約１３ｍｇ／ｋｇ、約１４ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約１６ｍｇ／ｋｇ、約１７ｍｇ／ｋｇ、または約１８ｍｇ／ｋｇの初回用量、次いで約０．２５ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１１ｍｇ／ｋｇ、約１２ｍｇ／ｋｇ、約１３ｍｇ／ｋｇ、約１４ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約１６ｍｇ／ｋｇ、約１７ｍｇ／ｋｇ、または約１８ｍｇ／ｋｇの維持用量のＰＣＳＫ９抗体を投与することを含む。一部の実施形態では、維持用量は週に１回投与する。一部の実施形態では、維持用量は隔週で投与する。一部の実施形態では、維持用量は約３週間毎に投与する。一部の実施形態では、維持用量は約４週間毎に投与する。一部の実施形態では、維持用量は約５週間毎に投与する。一部の実施形態では、維持用量は約６週間毎に投与する。一部の実施形態では、維持用量は約７週間毎に投与する。一部の実施形態では、維持用量は約８週間毎に投与する。好ましい実施形態では、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも約４週間の時間間隔である。一部の実施形態では、維持用量を月に１回投与する。

他の実施形態では、固定用量を使用し得る。たとえば、約０．２５ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２１ｍｇ、約２２ｍｇ、約２３ｍｇ、約２４ｍｇ、約２５ｍｇ、約２６ｍｇ、約２７ｍｇ、約２８ｍｇ、約２９ｍｇ、約３０ｍｇ、約３１ｍｇ、約３２ｍｇ、約３３ｍｇ、約３４ｍｇ、約３５ｍｇ、約３６ｍｇ、約３７ｍｇ、約３８ｍｇ、約３９ｍｇ、約４０ｍｇ、約４１ｍｇ、約４２ｍｇ、約４３ｍｇ、約４４ｍｇ、約４５ｍｇ、約４６ｍｇ、約４７ｍｇ、約４８ｍｇ、約４９ｍｇ、約５０ｍｇ、約５１ｍｇ、約５２ｍｇ、約５３ｍｇ、約５４ｍｇ、約５５ｍｇ、約５６ｍｇ、約５７ｍｇ、約５８ｍｇ、約５９ｍｇ、約６０ｍｇ、約６１ｍｇ、約６２ｍｇ、約６３ｍｇ、約６４ｍｇ、約６５ｍｇ、約６６ｍｇ、約６７ｍｇ、約６８ｍｇ、約６９ｍｇ、約７０ｍｇ、約７１ｍｇ、約７２ｍｇ、約７３ｍｇ、約７４ｍｇ、約７５ｍｇ、約７６ｍｇ、約７７ｍｇ、約７８ｍｇ、約７９ｍｇ、約８０ｍｇ、約８１ｍｇ、約８２ｍｇ、約８３ｍｇ、約８４ｍｇ、約８５ｍｇ、約８６ｍｇ、約８７ｍｇ、約８８ｍｇ、約８９ｍｇ、約９０ｍｇ、約９１ｍｇ、約９２ｍｇ、約９３ｍｇ、約９４ｍｇ、約９５ｍｇ、約９６ｍｇ、約９９ｍｇ、約９８ｍｇ、約９９ｍｇ、約１００ｍｇ、約１０１ｍｇ、約１０２ｍｇ、約１０３ｍｇ、約１０４ｍｇ、約１０５ｍｇ、約１０６ｍｇ、約１０７ｍｇ、約１０８ｍｇ、約１０９ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１１１ｍｇ、約１１２ｍｇ、約１１３ｍｇ、約１１４ｍｇ、約１１５ｍｇ、約１１６ｍｇ、約１１７ｍｇ、約１１８ｍｇ、約１１９ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１２１ｍｇ、約１２２ｍｇ、約１２３ｍｇ、約１２４ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１２６ｍｇ、約１２７ｍｇ、約１２８ｍｇ、約１２９ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１３１ｍｇ、約１３２ｍｇ、約１３３ｍｇ、約１３４ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１３６ｍｇ、約１３７ｍｇ、約１３８ｍｇ、約１３９ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１４１ｍｇ、約１４２ｍｇ、約１４３ｍｇ、約１４４ｍｇ、約１４５ｍｇ、約１４６ｍｇ、約１４７ｍｇ、約１４８ｍｇ、約１４９ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１５１ｍｇ、約１５２ｍｇ、約１５３ｍｇ、約１５４ｍｇ、約１５５ｍｇ、約１５６ｍｇ、約１５７ｍｇ、約１５８ｍｇ、約１５９ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１６１ｍｇ、約１６２ｍｇ、約１６３ｍｇ、約１６４ｍｇ、約１６５ｍｇ、約１６６ｍｇ、約１６７ｍｇ、約１６８ｍｇ、約１６９ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１７１ｍｇ、約１７２ｍｇ、約１７３ｍｇ、約１７４ｍｇ、約１７５ｍｇ、約１７６ｍｇ、約１７７ｍｇ、約１７８ｍｇ、約１７９ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１８１ｍｇ、約１８２ｍｇ、約１８３ｍｇ、約１８４ｍｇ、約１８５ｍｇ、約１８６ｍｇ、約１８７ｍｇ、約１８８ｍｇ、約１８９ｍｇ、約１９０ｍｇ、約１９１ｍｇ、約１９２ｍｇ、約１９３ｍｇ、約１９４ｍｇ、約１９５ｍｇ、約１９６ｍｇ、約１９９ｍｇ、約１９８ｍｇ、約１９９ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０、約３００、約３５０、約４００、約４５０、または約５００ｍｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の用量を使用し得る。一部の実施形態では、固定用量を皮下または静脈内投与する。

ＰＣＳＫ９拮抗抗体は、本明細書中に開示されている１つまたは複数の投薬レジメンに従って、安定用量のスタチンを受けている個体に投与することができる。安定用量は、たとえばそれだけには限定されないが、１日用量または隔日用量のスタチンであることができる。様々なスタチンが当業者に知られており、たとえばそれだけには限定されないが、アトルバスタチン、シンバスタチン、ロバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、およびスタチンの組合せ療法が含まれる。スタチンの組合せ療法の非限定的な例には、アトルバスタチン＋アムロジピン（ＣＡＤＵＥＴ（商標））、シンバスタチン＋エゼチミベ（ＶＹＴＯＲＩＮ（商標））、ロバスタチン＋ナイアシン（ＡＤＶＩＣＯＲ（商標））、およびシンバスタチン＋ナイアシン（ＳＩＭＣＯＲ（商標））が含まれる。

一部の実施形態では、個体は、ＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与する前に、少なくとも１、２、３、４、５または６週間の間、安定用量のスタチンを受けている。好ましくは、安定用量のスタチンを受けている個体は、ＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与する前に、約７０ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時ＬＤＬ−Ｃを有する。一部の実施形態では、安定用量のスタチンを受けている個体は、ＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与する前に、約８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０または２００ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時ＬＤＬ−Ｃを有する。

本発明の目的のために、典型的なスタチンの用量は、上述の要因に応じて約１ｍｇ〜約８０ｍｇの範囲であり得る。たとえば、約０．３ｍｇ、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２１ｍｇ、約２２ｍｇ、約２３ｍｇ、約２４ｍｇ、約２５ｍｇ、約２６ｍｇ、約２７ｍｇ、約２８ｍｇ、約２９ｍｇ、約３０ｍｇ、約３０ｍｇ、約３１ｍｇ、約３２ｍｇ、約３３ｍｇ、約３４ｍｇ、約３５ｍｇ、約３６ｍｇ、約３７ｍｇ、約３８ｍｇ、約３９ｍｇ、約４０ｍｇ、約４１ｍｇ、約４２ｍｇ、約４３ｍｇ、約４４ｍｇ、約４５ｍｇ、約４６ｍｇ、約４７ｍｇ、約４８ｍｇ、約４９ｍｇ、約５０ｍｇ、約５１ｍｇ、約５２ｍｇ、約５３ｍｇ、約５４ｍｇ、約５５ｍｇ、約５６ｍｇ、約５７ｍｇ、約５８ｍｇ、約５９ｍｇ、約６０ｍｇ、約６１ｍｇ、約６２ｍｇ、約６３ｍｇ、約６４ｍｇ、約６５ｍｇ、約６６ｍｇ、約６７ｍｇ、約６８ｍｇ、約６９ｍｇ、約７０ｍｇ、約７１ｍｇ、約７２ｍｇ、約７３ｍｇ、約７４ｍｇ、約７５ｍｇ、約７６ｍｇ、約７７ｍｇ、約７８ｍｇ、約７９ｍｇ、または約８０ｍｇのスタチンの用量を使用し得る。

好ましい実施形態では、４０ｍｇまたは８０ｍｇのアトルバスタチンの用量を使用する。他の実施形態では、２０ｍｇまたは４０ｍｇのロスバスタチンの用量を使用する。他の実施形態では、４０ｍｇまたは８０ｍｇのシンバスタチンの用量を使用する。

一部の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約２ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約２ｍｇ／ｋｇの維持用量を約４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約３ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約３ｍｇ／ｋｇの維持用量を約４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約４ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約４ｍｇ／ｋｇの維持用量を約４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約５ｍｇ／ｋｇの維持用量を約４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約４ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約４ｍｇ／ｋｇの維持用量を８週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約６ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約６ｍｇ／ｋｇの維持用量を約４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約８ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約８ｍｇ／ｋｇの維持用量を８週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約１２ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約１２ｍｇ／ｋｇの維持用量を８週間毎に投与することを含む。

他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約２００ｍｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量を皮下で、次いで約２００ｍｇの維持用量を約４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約３００ｍｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約３００ｍｇの維持用量を約４週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約５０ｍｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約５０ｍｇの維持用量を約２週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約１００ｍｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約１００ｍｇの維持用量を約２週間毎に投与することを含む。他の実施形態では、投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約１５０ｍｇのＰＣＳＫ９抗体の初回用量、次いで約１５０ｍｇの維持用量を約２週間毎に投与することを含む。

別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約０．２５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。一部の実施形態では、投薬レジメンは、約０．２５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の月１回の維持用量を投与することをさらに含む。別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約０．５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。一部の実施形態では、投薬レジメンは、約０．５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の月１回の維持用量を投与することをさらに含む。別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約１ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。一部の実施形態では、投薬レジメンは、約１ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の月１回の維持用量を投与することをさらに含む。別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約１．５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。一部の実施形態では、投薬レジメンは、約１．５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の月１回の維持用量を投与することをさらに含む。別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約２ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。一部の実施形態では、投薬レジメンは、約２ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の月１回の維持用量を投与することをさらに含む。別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約３ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約４ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。一部の実施形態では、投薬レジメンは、約４ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の月１回の維持用量を投与することをさらに含む。別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。一部の実施形態では、投薬レジメンは、約５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の月１回の維持用量を投与することをさらに含む。別の例示的な投薬レジメンは、安定用量のスタチンを受けている対象に、約６ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量を投与することを含む。一部の実施形態では、投薬レジメンは、約６ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の月１回の維持用量を投与することをさらに含む。

しかし、従事者が達成を望む薬物動態学的崩壊のパターン次第では、他の投薬レジメンが有用であり得る。この治療の進行は、慣用の技術およびアッセイによって容易に監視される。好ましい実施形態では、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量は、互いに少なくとも４週間の時間間隔である。投薬レジメン（使用するＰＣＳＫ９拮抗剤（複数可）が含まれる）は経時的に変動することができる。

ＰＣＳＫ９拮抗抗体
以下に、本発明に従って使用する抗体を生成するための例示的な技法を説明する。抗体の生成に使用するＰＣＳＫ９抗原は、たとえば、完全長ヒトＰＣＳＫ９、完全長マウスＰＣＳＫ９、およびＰＣＳＫ９の様々なペプチド断片であり得る。抗体の生成に有用なＰＣＳＫ９の他の形態は当業者に明らかであろう。

モノクローナル抗体は、ＰＣＳＫ９ヌルマウスを組換え完全長ＰＣＳＫ９タンパク質で免疫化することによって生成した。米国特許出願第１２／５５８３１２号の実施例７に示すように、この抗体調製の様式により、ＰＣＳＫ９とＬＤＬＲとの完全な遮断、Ｈｕｈ７細胞におけるＰＣＳＫ９に媒介されるＬＤＬＲレベルの降下の完全な遮断、およびＰＣＳＫ９−／−マウスで見られるものに匹敵するレベルまでの、マウス中を含めたｉｎ ｖｉｖｏでのＬＤＬコレステロールレベルの降下を示す拮抗抗体が得られた。

理解されるように、本発明で使用するための抗体はハイブリドーマに由来し得るが、ハイブリドーマ以外の細胞系中で発現させてもよい。特定の抗体のｃＤＮＡまたはゲノムクローンをコードしている配列を、適切な哺乳動物または非哺乳動物の宿主細胞の形質転換に使用することができる。発現させるための宿主として利用可能な哺乳動物細胞系は当分野で周知であり、それだけには限定されないが、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳＯ、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎細胞（ＣＯＳ）、およびヒト肝細胞癌細胞（たとえばＨｅｐ Ｇ６）を含めた、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能な多くの不死化細胞系が含まれる。また、細菌、酵母、昆虫、および植物細胞を含めた、非哺乳動物細胞を用いることもできる。非ヒトグリコシル化から生じる免疫原性、薬物動態学、および／またはエフェクター機能のいずれかの変化を防止するために、グリコシル化を排除するための抗体ＣＨ６ドメインの部位特異的突然変異誘発が好ましい場合がある。発現のグルタミン合成酵素系は、欧州特許第６１６８４６号、第６５６０５５号、および第３６３９９７号ならびに欧州特許出願第８９３０３９６４．４号に関連して、完全にまたは部分的に記述されている。さらに、当分野で知られているものを含めたジヒドロ葉酸還元酵素（ＤＨＦＲ）発現系を使用して、抗体を産生させることができる。

一部の実施形態では、本発明は、ＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３を使用して実施する。一部の実施形態では、本発明は、抗体Ｌ１Ｌ３によって認識されるエピトープと同じである、ＰＣＳＫ９のエピトープを認識する抗体を使用して実施する。

一部の実施形態では、本発明は、配列番号１１に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域からの３個のＣＤＲおよび配列番号１２に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域からの３個のＣＤＲを含む抗体を使用して実施する。

一部の実施形態では、本発明は、配列番号２（ＳＹＹＭＨ）、配列番号１３（ＧＹＴＦＴＳＹ）、もしくは配列番号１４（ＧＹＴＦＴＳＹＹＭＨ）に示すアミノ酸配列を有するＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ１）、配列番号３（ＥＩＳＰＦＧＧＲＴＮＹＮＥＫＦＫＳ）もしくは配列番号１５（ＩＳＰＦＧＧＲ）に示すアミノ酸配列を有するＶＨ ＣＤＲ２、および／または配列番号４（ＥＲＰＬＹＡＳＤＬ）に示すアミノ酸配列を有するＶＨ ＣＤＲ３を含むＰＣＳＫ９と特異的に結合する抗体、あるいはＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３の前記配列中に１つまたは複数の保存的アミノ酸置換を有するその変異体を使用して実施し、変異体は、前記配列によって定義されるＣＤＲと本質的に同じ結合特異性を保持する。好ましくは、変異体は、約１０個までのアミノ酸置換、より好ましくは約４個までのアミノ酸置換を含む。

一部の実施形態では、本発明は、配列番号５（ＲＡＳＱＧＩＳＳＡＬＡ）に示すアミノ酸配列を有するＶＬ ＣＤＲ１、配列番号６（ＳＡＳＹＲＹＴ）に示すアミノ酸配列を有するＣＤＲ２、および／もしくは配列番号７（ＱＱＲＹＳＬＷＲＴ）に示すアミノ酸配列を有するＣＤＲ３を含む抗体、またはＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／もしくはＣＤＲ３の前記配列中に１つもしくは複数の保存的アミノ酸置換を有するその変異体を使用して実施し、変異体は、前記配列によって定義されるＣＤＲ１と本質的に同じ結合特異性を保持する。好ましくは、変異体は、約１０個までのアミノ酸置換、より好ましくは約４個までのアミノ酸置換を含む。

一部の実施形態では、本発明は、配列番号８または１０を含むまたはそれからなる重鎖配列および配列番号９を含むまたはそれからなる軽鎖配列を有する抗体を使用して実施する。

一部の実施形態では、本発明は、配列番号１１に示すアミノ酸配列を含むまたはそれからなる重鎖可変領域および配列番号１２に示すアミノ酸配列を含むまたはそれからなる軽鎖可変領域を有する抗体を使用して実施する。

一部の実施形態では、本発明は、配列番号１のＰＣＳＫ９アミノ酸配列のアミノ酸残基１５３〜１５５、１９４、１９５、１９７、２３７〜２３９、３６７、３６９、３７４〜３７９および３８１を含むヒトＰＣＳＫ９上のエピトープを認識する抗体を使用して実施する。好ましくは、ヒトＰＣＳＫ９上の抗体エピトープは、配列番号１のＰＣＳＫ９アミノ酸配列のアミノ酸残基７１、７２、１５０〜１５２、１８７〜１９２、１９８〜２０２、２１２、２１４〜２１７、２２０〜２２６、２４３、２５５〜２５８、３１７、３１８、３４７〜３５１、３７２、３７３、３８０、３８２、および３８３のうちの１つまたは複数を含まない。

一部の実施形態では、本発明は、ＰＣＳＫ９の第１のエピトープであって、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに寄託されて受託番号ＰＴＡ−８９８６が割り当てられたハイブリドーマ細胞系によって産生される５Ａ１０、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに寄託されて受託番号ＰＴＡ−８９８５が割り当てられたハイブリドーマ細胞系によって産生される４Ａ５、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに寄託されて受託番号ＰＴＡ−８９８４が割り当てられたハイブリドーマ細胞系によって産生される６Ｆ６、およびＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎに寄託されて受託番号ＰＴＡ−８９８３が割り当てられたハイブリドーマ細胞系によって産生される７Ｄ４からなる群から選択されるモノクローナル抗体によって認識される第２のエピトープと同じまたはそれと重複するエピトープを認識する抗体を使用して実施する。好ましい実施形態では、本発明は、ＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３を使用して実施する（２０１０年３月１８日にＷＯ２０１０／０２９５１３として公開されたＰＣＴ／ＩＢ２００９／０５３９９０、および２０１０年３月１８日にＵＳ２０１０／００６８１９９として公開された米国特許出願第１２／５５８３１２号を参照）。

好ましくは、変異体は、約２０個までのアミノ酸置換、より好ましくは約８個までのアミノ酸置換を含む。好ましくは、抗体は、免疫学的に不活性な定常領域をさらに含む、および／または、抗体は、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_４、ＩｇＧ_２Δａ、ＩｇＧ_４Δｂ、ＩｇＧ_４Δｃ、ＩｇＧ_４ Ｓ２２８Ｐ、ＩｇＧ_４Δｂ Ｓ２２８ＰおよびＩｇＧ_４Δｃ Ｓ２２８Ｐからなる群から選択されるアイソタイプを有する。別の好ましい実施形態では、定常領域は無グリコシル化Ｆｃである。

本発明において有用な抗体には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、抗体断片（たとえば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｃなど）、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヘテロコンジュゲート抗体、単鎖（ＳｃＦｖ）、その突然変異体、抗体部分（たとえばドメイン抗体）を含む融合タンパク質、ヒト抗体、ヒト化抗体、ならびに、抗体のグリコシル化変異体、抗体のアミノ酸配列変異体、および共有的に改変された抗体を含めた、所要の特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の改変された立体配置が包含されることができる。抗体は、マウス、ラット、ヒト、または任意の他の起源（キメラもしくはヒト化抗体が含まれる）であり得る。

一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体はモノクローナル抗体である。また、ＰＣＳＫ９拮抗抗体はヒト化されていることもできる。他の実施形態では、抗体はヒトである。

一部の実施形態では、抗体は、免疫学的に不活性である、すなわち免疫応答を誘発する潜在性が低下した定常領域などの、改変された定常領域を含む。一部の実施形態では、定常領域は、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２９：２６１３〜２６２４、ＰＣＴ公開ＷＯ９９／５８５７２、および／または英国特許出願第９８０９９５１．８号に記載のように改変されている。ＦｃはヒトＩｇＧ_２またはヒトＩｇＧ_４であることができる。Ｆｃは、Ａ３３０Ｐ３３１からＳ３３０Ｓ３３１の突然変異を含有するヒトＩｇＧ_２（ＩｇＧ_２Δａ）であることができ、アミノ酸残基は、野生型ＩｇＧ２配列を参照して付番されている。Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９９、２９：２６１３〜２６２４。一部の実施形態では、抗体は、Ｅ２３３Ｆ２３４Ｌ２３５からＰ２３３Ｖ２３４Ａ２３５（ＩｇＧ_４Δｃ）の突然変異を含むＩｇＧ_４の定常領域を含み（Ａｒｍｏｕｒら、２００３、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、４０、５８５〜５９３）、付番は野生型ＩｇＧ４を参照したものである。さらに別の実施形態では、Ｆｃは、Ｇ２３６の欠失を有するヒトＩｇＧ_４のＥ２３３Ｆ２３４Ｌ２３５からＰ２３３Ｖ２３４Ａ２３５である（ＩｇＧ_４Δｂ）。別の実施形態では、Ｆｃは、Ｓ２２８からＰ２２８のヒンジ安定化突然変異を含有する任意のヒトＩｇＧ_４ Ｆｃ（ＩｇＧ_４、ＩｇＧ_４ΔｂまたはＩｇＧ_４Δｃ）である（Ａａｌｂｅｒｓｅら、２００２、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１０５、９〜１９）。別の実施形態では、Ｆｃは無グリコシル化Ｆｃであることができる。

一部の実施形態では、定常領域は、オリゴ糖付着残基（Ａｓｎ２９７など）および／または定常領域中のグリコシル化認識配列の一部であるフランキング残基を突然変異させることによって無グリコシル化させる。一部の実施形態では、定常領域は、Ｎ連結グリコシル化について酵素的に無グリコシル化される。定常領域は、Ｎ連結グリコシル化について、酵素的にまたはグリコシル化欠損宿主細胞中での発現によって無グリコシル化させ得る。

一部の実施形態では、複数の拮抗抗体が存在し得る。少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５個の異なる、もしくはそれより多くの拮抗抗体および／またはペプチドが存在することができる。一般に、これらのＰＣＳＫ９拮抗抗体またはペプチドは、互いに有害な影響を与えない相補的活性を有し得る。また、ＰＣＳＫ９拮抗抗体は、他のＰＣＳＫ９拮抗剤またはＰＣＳＫ９受容体拮抗剤と併せて使用することもできる。たとえば、以下のＰＣＳＫ９拮抗剤、すなわち、ＰＣＳＫ９に向けられたアンチセンス分子（ＰＣＳＫ９をコードしている核酸に向けられたアンチセンス分子が含まれる）、ＰＣＳＫ９阻害化合物、およびＰＣＳＫ９構造的類似体のうちの１つまたは複数を使用し得る。また、ＰＣＳＫ９拮抗抗体は、薬剤の有効性を増強および／または補完する役割を果たす他の薬剤と併せて使用することもできる。

本明細書中に記載のすべての方法に関して、ＰＣＳＫ９拮抗抗体への言及には、１つまたは複数の追加の薬剤を含む組成物も含まれる。これらの組成物は、当分野で周知である緩衝液を含めた薬学的に許容できる賦形剤などの適切な賦形剤をさらに含み得る。本発明は、単独で、または他の慣用の処置方法と組み合わせて使用することができる。

ＰＣＳＫ９拮抗抗体は、任意の適切な経路を介して個体に投与することができる。当業者には、本明細書中に記載の実施例は、利用可能な技法を限定することを意図せず、それを例示するものであることが明らかであろう。したがって、一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体は、静脈内投与、たとえば、ボーラスとしてまたは一定期間にわたる持続注入によるもの、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、経皮、皮下、関節内、舌下、滑液内、ガス注入、くも膜下腔内、経口、吸入または外用によるものなどの、既知の方法に従って個体に投与する。投与は、全身性、たとえば静脈内投与、または局所的であることができる。ジェット噴霧器および超音波噴霧器を含めた、液体配合物のための市販の噴霧器が投与に有用である。液体配合物は直接噴霧することができ、凍結乾燥粉末は再構成後に噴霧することができる。あるいは、ＰＣＳＫ９拮抗抗体は、炭化フッ素配合物および定量吸入器を使用してエアロゾル化する、または凍結乾燥および粉砕した粉末として吸入することができる。

一実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体は、部位特異的または標的化した局所送達技法を介して投与する。部位特異的または標的化した局所送達技法の例には、ＰＣＳＫ９拮抗抗体の様々な埋め込み型デポー源もしくは輸液カテーテル、留置カテーテル、または針カテーテルなどの局所送達カテーテル、人工血管移植片、外膜ラップ、シャントおよびステントもしくは他の埋め込み型装置、部位特異的担体、直接注射、または直接塗布が含まれる。たとえば、ＰＣＴ公開ＷＯ００／５３２１１および米国特許第５，９８１，５６８号を参照されたい。

ＰＣＳＫ９拮抗抗体の様々な配合物を投与に使用し得る。一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体をニートで投与し得る。一部の実施形態では、ＰＣＳＫ９拮抗抗体および薬学的に許容できる賦形剤は様々な配合物中にあり得る。薬学的に許容できる賦形剤は当分野で知られており、薬理学的に有効な物質の投与を容易にする比較的不活性な物質である。たとえば、賦形剤は、形もしくは稠度を与える、または希釈剤として作用することができる。適切な賦形剤には、それだけには限定されないが、安定化剤、湿潤剤および乳化剤、容積モル浸透圧濃度を変動させるための塩、カプセル封入剤、緩衝液、および皮膚浸透促進剤が含まれる。非経口および非経口でない薬物送達のための賦形剤および配合物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（２０００）に記載されている。

これらの薬剤は、生理食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液などの薬学的に許容できるビヒクルと組み合わせることができる。特定の投薬レジメン、すなわち、用量、タイミングおよび反復は、特定の個体およびその個体の病歴に依存する。

許容できる担体、賦形剤、または安定化剤は、用いる用量および濃度でレシピエントに対して無毒性であり、リン酸、クエン酸、および他の有機酸などの緩衝液、塩化ナトリウムなどの塩、アスコルビン酸およびメチオニンを含めた抗酸化剤、保存料（オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチルもしくはベンジルアルコール、メチルもしくはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン、カテコール、レソルシノール、シクロヘキサノール、３−ペンタノール、およびｍ−クレゾールなど）、低分子量（約１０個未満の残基）のポリペプチド、血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなどのタンパク質、ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリシンなどのアミノ酸、単糖、二糖、およびグルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含めた他の炭水化物、ＥＤＴＡなどのキレート化剤、スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトールなどの糖、ナトリウムなどの塩形成性対イオン、金属錯体（たとえばＺｎ−タンパク質の複合体）、ならびに／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含み得る。

ＰＣＳＫ９拮抗抗体を含有するリポソームは、Ｅｐｓｔｅｉｎら、１９８５、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８２：３６８８、Ｈｗａｎｇら、１９８０、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、７７：４０３０、ならびに米国特許第４，４８５，０４５号および第４，５４４，５４５号に記載されているものなどの、当分野で知られている方法によって調製される。増強された循環時間を有するリポソームは米国特許第５，０１３，５５６号に開示されている。特に有用なリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロールおよびＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物を用いた逆相蒸発方法によって作製することができる。リポソームは、定義された孔径のフィルターを通して押し出して、所望の直径を有するリポソームが得られる。

また、活性成分は、たとえばコアセルベーション技法または界面重合、たとえばそれぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセルによって、コロイド状薬物送達系（たとえば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル）またはマクロ乳濁液中で調製したマイクロカプセル中に捕捉されていてもよい。そのような技法はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（２０００）中に開示されている。

持続放出調製物を調製し得る。持続放出調製物の適切な例には、抗体を含有する固形の疎水性ポリマーの半透性マトリックスが含まれ、マトリックスは、造形品、たとえば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。持続放出マトリックスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（たとえばポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリ乳酸（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸と７エチル−Ｌ−グルタメートとのコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸のコポリマーおよび酢酸ロイプロリドから構成される注射用ミクロスフェア）などの分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、酢酸スクロースイソブチレート、ならびにポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が含まれる。

ｉｎ ｖｉｖｏ投与に使用する配合物は無菌的でなければならない。これは、たとえば滅菌濾過膜を通した濾過によって容易に達成される。治療的ＰＣＳＫ９拮抗抗体組成物は、一般に、無菌的なアクセス口を有する容器、たとえば、皮下注射針によって貫通可能なストッパーを有する静脈内溶液バッグまたはバイアル内に入れる。

適切な乳濁液は、Ｉｎｔｒａｌｉｐｉｄ（商標）、Ｌｉｐｏｓｙｎ（商標）、Ｉｎｆｏｎｕｔｒｏｌ（商標）、Ｌｉｐｏｆｕｎｄｉｎ（商標）およびＬｉｐｉｐｈｙｓａｎ（商標）などの市販の脂肪乳濁液を使用して調製し得る。活性成分は、事前に混合した乳濁液組成物に溶かし得るか、または、油（たとえば、ダイズ油、ベニバナ油、綿実油、ゴマ油、トウモロコシ油またはアーモンド油）に溶かし、リン脂質（たとえば、卵リン脂質、ダイズリン脂質またはダイズレシチン）および水と混合した際に生じ得る乳濁液であり得る。乳濁液の等張性を調節するために、たとえばグリセロールまたはグルコースなどの他の成分を加え得ることを理解されたい。適切な乳濁液は、典型的には２０％までの油、たとえば５〜２０％を含有する。脂肪乳濁液は、０．１〜１．０μｍ、特に０．１〜０．５μｍの脂肪液滴を含み、５．５〜８．０の範囲のｐＨを有することができる。

乳濁液組成物は、ＰＣＳＫ９拮抗抗体をＩｎｔｒａｌｉｐｉｄ（商標）またはその構成要素（ダイズ油、卵リン脂質、グリセロールおよび水）と混合することによって調製したものであることができる。

吸入またはガス注入のための組成物には、薬学的に許容できる水性もしくは有機性の溶媒またはその混合物中の溶液および懸濁液、ならびに粉末が含まれる。液体または固形の組成物は、上述のような適切な薬学的に許容できる賦形剤を含有し得る。一部の実施形態では、組成物は、局所的または全身的な効果のために、経口または経鼻の呼吸器経路によって投与する。好ましくは無菌的な薬学的に許容できる溶媒中の組成物は、ガスを使用することによって噴霧し得る。噴霧された溶液は噴霧装置から直接吸い込んでもよく、または、噴霧装置は、顔面マスク、テントまたは間欠的陽圧呼吸器に取り付けられていてもよい。溶液、懸濁液または粉末組成物は、好ましくは経口または経鼻的に、配合物を適切な様式で送達する装置から投与し得る。

抗体Ｌ１Ｌ３の重鎖および軽鎖可変領域をコードしているポリヌクレオチドを、２００９年８月２５日にＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）、１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｏｕｌｅｖａｒｄ、Ｍａｎａｓｓａｓ、米国バージニア州、９０１１０に寄託した。Ｌ１Ｌ３重鎖可変領域ポリヌクレオチドにＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１０３０２を割り当て、Ｌ１Ｌ３軽鎖可変領域ポリヌクレオチドにＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１０３０３を割り当てた。寄託は、特許手続き上の微生物の寄託の国際承認に関するブダペスト条約の条項およびその規則（Ｂｕｄａｐｅｓｔ Ｔｒｅａｔｙ ｏｎ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｄｅｐｏｓｉｔ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｐｕｒｐｏｓｅ ｏｆ Ｐａｔｅｎｔ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ａｎｄ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ ｔｈｅｒｅｕｎｄｅｒ）（ブダペスト条約）の規定の下で行った。これは、寄託日から３０年間の間の、寄託物の生存可能な培養の維持を保証する。寄託物は、ＡＴＣＣによってブダペスト条約の条項の下で利用可能となり、また、関連する米国特許が発行された際または任意の米国もしくは外国の特許出願が公開された際のいずれか早い方の時点で、寄託物の培養物の子孫が永続的かつ無制限に公に利用可能となることを保証する、ならびに米国特許商標庁長官によって、米国特許法第１２２条およびそれに関連する長官の規則（米国特許法施行規則第１．１４条が含まれ、特に８８６ＯＧ６３８を参照する）に従って権利を有すると判断された者に、子孫の利用可能性を保証する、Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．とＡＴＣＣとの間の合意の対象となる。

本出願の譲受人は、寄託されている材料の培養物が、適切な条件下で培養した際に死滅または喪失または破壊された場合は、通知した際に材料を即座に別の同じものと置き換えることに同意している。寄託された材料の利用可能性は、任意の政府の権限の下でその特許法に従って与えられた権利に違反して本発明を実施することの許可として解釈されるべきでない。

以下の実施例は、本発明の方法および材料の例示を意味する。当業者に明白であり、当分野で通常遭遇する、記載した条件およびパラメータの適切な改変および適応は、本発明の精神および範囲内にある。

ヒト化ＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３を用いた処置は、血清コレステロールおよびＬＤＬコレステロールレベルを低下させるために有効である
本実施例は、動物モデルにおいて血清コレステロールおよびＬＤＬコレステロールレベルを低下させることにおける、ヒト化ＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３の有効性を例示する。

Ｌ１Ｌ３は、分泌されたＰＣＳＫ９と結合し、ＬＤＬＲのその下方制御を有効に防止して、血清中の改善されたＬＤＬクリアランスおよびＬＤＬ−Ｃの低下をもたらす、ヒト化した（＜５％のマウス残基）モノクローナル抗体である。

１０ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３を単回腹腔内（ＩＰ）投与として正常食餌を与えたＣ５７ＢＬ／６マウス（ｎ＝１０匹）に投与した場合、処置の４８時間後に血清コレステロールレベルは生理食塩水で処置した対照の７５ｍｇ／ｄＬと比較して４７ｍｇ／ｄＬまで低下しており（３７％の低下）、処置の４日後に対照動物の８３ｍｇ／ｄＬと比較して４４ｍｇ／ｄＬまで低下していた（４７％の低下）。血清コレステロールレベルは処置後７日目までに６９ｍｇ／ｄＬまで回復した。

正常食餌を与えたスプラーグ−ドーリーラットにおける用量応答実験において、Ｌ１Ｌ３を０、０．１、１、１０および８０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝６匹／群）の単回ＩＰ投与として投与した。血清コレステロールレベルが用量依存的に低下し、５０％という最大効果が投薬の４８時間後に１０および８０ｍｇ／ｋｇで見られた。コレステロールの抑圧の持続期間も用量依存的であり、１〜２１日間の範囲であった。Ｌ１Ｌ３のコレステロール降下効果の規模および持続期間はどちらも薬物曝露と相関していた。また、非空腹時血清トリグリセリドレベルも用量依存的に増加し、約３倍という最大増加は８０ｍｇ／ｋｇであり、時間経過は薬物曝露と相関していた。血清トリグリセリドレベルに対するＬ１Ｌ３の同様の効果はマウスおよび非ヒト霊長類などの他の種において観察されず（以下を参照）、血中トリグリセリドレベルの変化はＰＣＳＫ９突然変異を保有するヒトにおいて報告されなかったため（Ａｂｉｆａｄｅｌら、２００３、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．、３４：１５４〜１５６、Ｃｏｈｅｎら、２００５、Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．、３７：１６１〜１６５、Ｚｈａｏら、２００６、Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．、７９：５１４〜５２３）、Ｌ１Ｌ３処置によって引き起こされた血清トリグリセリドレベルの増加は、ラットにおける種特異的な現象であると考えられる。

正常食餌を与えたカニクイザルでは、Ｌ１Ｌ３を０．１、１、３および１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝４匹／群）の単回ＩＶ投与として投与した。０．１ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の投与は、２日目にＬＤＬ−Ｃレベルの一過性の５０％の降下を引き起こし、５日目までに急速に回復した。１ｍｇ／ｋｇの投薬は、５日目にＬＤＬ−Ｃの７１％の低下という最大効果に達し、その直後に回復し始め、１４日目までに投薬前のレベルに達した。３ｍｇ／ｋｇの投薬は、７日目までにＬＤＬ−Ｃの７２％の低下という最大効果に達し、レベルは１３日目までに回復し始め、２２日目までにベースラインまで戻った。１０ｍｇ／ｋｇの投薬は、投薬後２１日目までＬＤＬ−Ｃレベルの７０％の低下を維持し、動物は３１日目までに完全に回復した。Ｌ１Ｌ３のＬＤＬ−Ｃ降下効果の規模および持続期間はどちらも薬物曝露と相関していた。ＨＤＬ−Ｃレベルはすべての用量群においてＬ１Ｌ３処置によって影響を受けなかった。

また、３ｍｇ／ｋｇ用量群（ｎ＝４）のサルには、試験４２および５６日目（２週間間隔）に３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の２回の追加のＩＶ投与も与えた。これらの２回の追加の投与は再度ＬＤＬ−Ｃを降下させ、４週間の間ＬＤＬ−Ｃレベルを５０％未満に保った。ＬＤＬ−Ｃレベルは２週間後に正常に戻った。血清ＨＤＬ−Ｃレベルは変化しないままであった。

カニクイザルにおける０．１、１．０、３．０、１０．０および１００．０ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回ボーラスｉ．ｖ．注射によってＰＫ試験を実施し、全抗体濃度を測定した。Ｌ１Ｌ３の推定β相半減期は０．１ｍｇ／ｋｇの単回投与で０．６７日間であり、１．０、３．０、１０．０および１００．０ｍｇ／ｋｇでそれぞれ１．９１、２．３３、３．４９および５．２５日間まで増加した。したがって、カニクイザルでは、Ｌ１Ｌ３は、抗原に媒介される分解と矛盾せず、膜会合抗原を有する抗体治療剤で見られる、用量依存的かつ非線形の半減期の短縮を実証した。

要約すると、Ｌ１Ｌ３は血清ＰＣＳＫ９と結合してその機能を拮抗して、動物モデルにおける血清コレステロールおよびＬＤＬコレステロールのレベルの迅速かつ有意な低下をもたらす。

ＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３の単回漸増量静脈内投与後の薬物動態学および薬力学
本実施例は、コレステロール降下治療の候補者であった、それ以外は健康なヒト対象における、ヒト化ＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３の単回漸増量静脈内投与後の、薬物動態学および薬力学を評価するための臨床治験試験を例示する。Ｌ１Ｌ３の投与は、評価したすべての用量群においてＬＤＬ−Ｃの降下をもたらした。

試験は、Ｌ１Ｌ３の無作為化、プラセボ対照、漸増量単回投与試験を伴った。対象、知見責任医師、および現場人員（薬物調製担当の現場人員以外）は処置の割当てについて盲検下にあり、ＣＲＯに指名された人も同様であった一方、治験依頼者の臨床試験チームは非盲検下にあった。試験は、最大耐量すなわちＭＴＤを求める試みとして、１コホートあたり８人の対象の６つの計画されたコホートで実施した（合計約４８人の対象）。それぞれのコホート内で、対象をＬ１Ｌ３またはプラセボのどちらかに無作為化した（３：１の割当て比）。終夜の絶食後に６０分間にわたる静脈内注入として用量を投与した。注入速度はプロトコルに従って輸液装置によって注意深く制御した。輸液は６０分間にわたる単回注入として投与する。

投薬は以下の表１に例示したとおりであった。

投薬スケジュールは、最大耐量および無作用量を得るために、より低い、中間、またはより高い用量の投与を可能にするように調節した。試験に登録したそれぞれの対象は、コホートの割当てにかかわらず、その試験参加中に１回の試験薬物投与しか受けなかった。すべての患者は、その試験終了前に、安全性についてさらに２１日間観察した（合計２８日間）。

試験の一次ＰＫエンドポイントはＬ１Ｌ３のＡＵＣ_{（０〜ｔ［最終］）、}Ｔ_ｍａｘ、およびＣ_ｍａｘであった。二次ＰＫエンドポイントには、Ｌ１Ｌ３の最終消失半減期（Ｔ_１／２）、クリアランス（ＣＬ）、定常状態での分布容積（Ｖｓｓ）、およびＡＵＣ_{（０〜∞）}が含まれていた。血清脂質（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、トリグリセリド、非ＨＤＬ−Ｃおよびアポタンパク質Ｂ）の変化を評価した。

スクリーニングは、それぞれの対象について投薬の２８日以内に行った。対象は０日目にＬ１Ｌ３の単回投与を受け、拘束期間全体（試験の−１、０、および１日目）ならびに４、７、１４、２１、２８日目、また、ＰＫ所見によっては、２８日目の後に、ＰＫおよび安全性の評価を１日１回行った。

試験の組み入れ基準は以下のとおりであった：１８〜７０歳（両端を含む）の健康な歩行可能な男性および／または女性（女性は妊娠の可能性のない女性である）、ベースライン総コレステロール≧２００ｍｇ／ｄｌ、ベースラインＬＤＬ≧１３０ｍｇ／ｄｌ、１８．５〜３５ｋｇ／ｍ^２の体重指数（ＢＭＩ）かつ体重≦１５０ｋｇ（両端を含む）、対象（または法的に認められる代理人）に治験のすべての関連する側面の情報が通知されたことを示す、個人的に署名され日付のあるインフォームドコンセント文書の証明、ならびに予定された訪問、処置計画、臨床検査、および他の治験手順を順守する意志および能力。

試験の除外基準は以下のとおりであった：臨床的に有意な血液、腎臓、内分泌、肺、胃腸管系、心血管、肝臓、精神、神経、またはアレルギー性の疾患（薬物アレルギーが含まれるが、投薬時の未処置の無症候性の季節性アレルギーを除外する）、二次性高脂血症の証拠または病歴、対象は投薬の前に少なくとも１週間の間、他の処方薬を受けてはならない。患者が脂質降下薬を受けていた場合は、これらの薬物は血清脂質が処置前のレベルに戻ることを可能にするために十分な期間の間中断されているべきである。投薬前の５日以内の熱病の病歴、脳卒中または一過性虚血性発作の病歴、過去１年間以内の心筋梗塞の病歴、陽性の尿中薬物スクリーニング、スクリーニングの６カ月以内の女性では７杯／週または男性では１４杯／週を超える定期的なアルコール消費（１杯＝５オンス（１５０ｍＬ）のワインまたは１２オンス（３６０ｍＬ）のビールまたは１．５オンス（４５ｍＬ）の蒸留酒）の経歴、治験薬の最初の投薬の３０日間または半減期の５倍（どちらか長い方）前以内の治験薬を用いた処置、スクリーニング時のＱＴｃ＞４５０ミリ秒を実証する１２誘導ＥＣＧ、妊娠または授乳中の女性、妊娠の可能性のある女性、投薬前の５６日以内の約１パイント（５００ｍＬ）の献血、ヘパリンまたはヘパリン誘導性血小板減少症に対する感受性の病歴（静脈内カテーテルをフラッシュするためにヘパリンを使用する場合）、試験参加もしくは治験薬投与に関連する危険性を増加させ得るまたは試験結果の解釈および治験責任医師の判断に干渉し得る、他の重篤な急性または慢性の医学的または精神医学的な状態または検査所見の異常は、この試験への対照の組み入れを不適切にするであろう。

すべての対象選択基準を満たしているという条件で、対象を試験へと無作為化した。コンピュータで生成した無作為化スケジュールを使用して、対象を処置シーケンスに割り当てた。

用量の漸増には、より高い用量のＬ１Ｌ３に進むという決定は、以前の用量レベルを投与した後少なくとも７日間追跡したすべてのコホート対象からの入手可能な安全性および忍容性データを精査した後に、治験依頼者および治験責任医師によって行われた。

Ｌ１Ｌ３製剤（１００ｍｇ）は、ゴム製ストッパーおよびアルミニウム製シールを備えた静脈内（ＩＶ）投与用のガラスバイアル中で、無菌的な液体形態で１０ｍｇ／ｍＬの濃度で提供した。それぞれのバイアルは、１０ｍｇ／ｍＬの濃度およびｐＨ５．５の１０ｍＬ（抜き出し可能な体積）のＬ１Ｌ３を含有していた。Ｌ１Ｌ３およびプラセボは、現場に提供される薬学マニュアル（Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｍａｎｕａｌ）中の用量用法の指示（Ｄｏｓａｇｅ ａｎｄ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ）に従って調製した。薬物は有資格の非盲検下の現場人員によって調製され、盲検様式で患者および近い試験スタッフに分配した。Ｌ１Ｌ３は、薬学マニュアルおよび試験参照ガイド（Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｍａｎｕａｌ ａｎｄ Ｓｔｕｄｙ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｇｕｉｄｅ）中に見つかる用量投与指示（Ｄｏｓａｇｅ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓ、ＤＡＩ）に従って、速度が制御された静脈内注入によって約６０分間かけて投与した。

試験プロトコル
−１日目：０日目の活動開始の少なくとも１２時間前に対象に無作為化番号を割り当て、臨床試験ユニットに入院させ、１日目の手順が完了するまで臨床試験ユニット（ＣＲＵ）内に留まることを必要とした。対象は、０日目の予定された脂質パネルの少なくとも１０時間前の夕方に絶食を始めた。以下の手順を完了した：スクリーニング以後の病歴の変化を精査し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、スクリーニング以後の薬物、アルコール、およびタバコの使用歴を精査し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、体重を含めた身体検査を行い、尿中薬物スクリーニングを行い、仰臥位の生命徴候を取得し、約２〜４分間隔の３つ組の１２誘導ＥＣＧを取得した。

０日目：投薬前に、以下の手順を完了した：少なくとも１０時間の絶食後の空腹時脂質プロフィールを収集し（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）、ルーチンおよび追加の臨床検査（血液学、化学、凝固、アミラーゼ、尿検査）のために試料を採取し、投薬前のＰＫのために試料を採取し、ＰＣＳＫ９レベル／対象のＰＤマーカーのために試料を採取し、抗Ｌ１Ｌ３抗体のために試料を採取し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、仰臥位の生命徴候を取得し、薬学マニュアルの指示に従って試験薬物の輸液を投与した。

投薬後、以下の手順を完了した：輸液終了（ＥＯＩ）の１０分以内に開始する約２〜４分間隔の３つ組の１２誘導ＥＣＧを取得し、ＥＯＩでの仰臥位の生命徴候を取得し、ＥＯＩおよび輸液後の以下の時点（すなわちＥＯＩ＋以下の時点）：６０分間、１２０分間、および３６０分間でのＰＫ分析のために血液（ｂｌｏｏｄｅｄ）試料を採取した。

１日目：以下の手順を完了した：投薬の１４４０分後（２４時後）＋／−３０分間でのＰＫ分析のために血液試料を採取し、簡易身体検査を行い、少なくとも１０時間の絶食後の空腹時脂質プロフィールを収集し（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）、ＰＣＳＫ９レベル／対象のＰＤマーカーのために試料を採取し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、仰臥位の生命徴候を取得し、ＣＲＵから退院させた。

４日目：以下の手順を完了した：ルーチン臨床検査（血液学、化学、および尿検査）のために試料を採取し、少なくとも１０時間の絶食後の空腹時脂質プロフィールを収集し（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）、ＰＫ分析のために１つの血液試料を採取し、ＰＣＳＫ９レベル／対象のＰＤマーカーのために試料を採取し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、仰臥位の生命徴候を取得した。

７日目：以下の手順を完了した：簡易身体検査を行い、ルーチンおよび追加の臨床検査（血液学、化学、凝固、アミラーゼ、尿検査）のために試料を採取し、少なくとも１０時間の絶食後の空腹時脂質プロフィールを収集し（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）、ＰＫ分析のために１つの血液試料を採取し、ＰＣＳＫ９レベル／対象のＰＤマーカーのために試料を採取し、抗Ｌ１Ｌ３抗体のために試料を採取し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、スクリーニング以後の薬物、アルコール、およびタバコの使用歴を精査し、仰臥位の生命徴候を取得し、約２〜４分間隔の３つ組の１２誘導ＥＣＧを取得した。

１４日目：以下の手順を完了した：簡易身体検査を行い、ルーチンおよび追加の臨床検査（血液学、化学、凝固、アミラーゼ、尿検査）のために試料を採取し、少なくとも１０時間の絶食後の空腹時脂質プロフィールを収集し（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）、ＰＫ分析のために１つの血液試料を採取し、ＰＣＳＫ９レベル／対象のＰＤマーカーのために試料を採取し、抗Ｌ１Ｌ３抗体のために試料を採取し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、スクリーニング以後の薬物、アルコール、およびタバコの使用歴を精査し、仰臥位の生命徴候を取得した。

２１日目：以下の手順を完了した：簡易身体検査を行い、ルーチンおよび追加の臨床検査（血液学、化学、凝固、アミラーゼ、尿検査）のために試料を採取し、少なくとも１０時間の絶食後の空腹時脂質プロフィールを収集し（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）、ＰＫ分析のために１つの血液試料を採取し、ＰＣＳＫ９レベル／対象のＰＤマーカーのために試料を採取し、抗Ｌ１Ｌ３抗体のために試料を採取し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、スクリーニング以後の薬物、アルコール、およびタバコの使用歴を精査し、仰臥位の生命徴候を取得した。

２８日目：以下の手順を完了した：完全な身体検査を行い、対象の体重を取得し、ルーチンおよび追加の臨床検査（血液学、化学、凝固、アミラーゼ、尿検査）のために試料を採取し、少なくとも１０時間の絶食後の空腹時脂質プロフィールを収集し（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）、ＰＫ分析のために１つの血液試料を採取し、ＰＣＳＫ９レベル／対象のＰＤマーカーのために試料を採取し、抗Ｌ１Ｌ３抗体のために試料を採取し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、スクリーニング以後の薬物、アルコール、およびタバコの使用歴を精査し、仰臥位の生命徴候を取得し、約２〜４分間隔の３つ組の１２誘導ＥＣＧを取得した。

持続的なＰＫのさらなる経過観察：適応される場合は以下の手順を完了した：簡易身体検査を行い、ルーチンおよび追加の臨床検査（血液学、化学、凝固、アミラーゼ、尿検査）のために試料を採取し、少なくとも１０時間の絶食後の空腹時脂質プロフィールを収集し（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）、ＰＫ分析のために１つの血液試料を採取し、ＰＣＳＫ９レベル／対象のＰＤマーカーのために試料を採取し、抗Ｌ１Ｌ３抗体のために試料を採取し、有害事象の自発報告および対象に「具合はいかがですか？」などの非誘導的質問に答えるように質問することによって症状を評価し、スクリーニング以後の併用薬の変化を精査し、スクリーニング以後の薬物、アルコール、およびタバコの使用歴を精査し、仰臥位の生命徴候を取得し、約２〜４分間隔の３つ組の１２誘導ＥＣＧを取得した。

個々の患者の全血液サンプリング体積は約１８３〜２１０ｍＬであった。Ｌ１Ｌ３レベルを分析するための血漿試料を、０日目の投薬前、輸液の終了時、ならびに輸液終了の６０、１２０、３６０および１４４０分後（２４時間後）に採取した。さらに、１つのＰＫ試料を４、７、１４、２１、２８日目および追加のＰＫ経過観察の訪問の際（適応される場合）に得た。それぞれの時点で１つの試料を採取した。

ＰＣＳＫ９レベルおよび他の対象の実験的薬力学（ｐｈａｒｍｃａｏｄｙｎａｍｉｃ）マーカーを評価するための血液試料を、０日目の投薬前および１、４、７、１４、２１、２８日目ならびに適応される場合は追加の経過観察の訪問の際に得た。

少なくとも１０時間の絶食後に空腹時脂質プロフィールの収集を行った（総コレステロール、ＬＤＬ、ＨＤＬ、非ＨＤＬコレステロール、Ａｐｏ Ｂおよびトリグリセリド）。

試験結果
Ｌ１Ｌ３のＰＫ ＮＣＡの結果：０．３ｍｇ／ｋｇで投与したＬ１Ｌ３の半減期の中央値は２．７１日間であった。１ｍｇ／ｋｇで投与したＬ１Ｌ３の半減期の中央値は４．７７日間であった。３ｍｇ／ｋｇで投与したＬ１Ｌ３の半減期の中央値は８．１日間であった。６ｍｇ／ｋｇで投与したＬ１Ｌ３の半減期の中央値は７．７５日間であった。１２ｍｇ／ｋｇで投与したＬ１Ｌ３の半減期の中央値は１２．２４日間であった。１８ｍｇ／ｋｇで投与したＬ１Ｌ３の半減期の中央値は１１．７６日間であった。Ｌ１Ｌ３のＰＫの濃度−時間プロフィールは多相性であり、標的に媒介される薬物動態と矛盾はなかった。しかし、ヒト対象におけるＬ１Ｌ３の半減期は、カニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｕｓ ｍｏｎｋｅｙ）におけるＬ１Ｌ３の半減期よりも予想外かつ有意に長い（すなわち、カニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｕｓ ｍｏｎｋｅｙ）において１．０、３．０、１０．０および１００．０ｍｇ／ｋｇでそれぞれ１．９１、２．３３、３．４９および５．２５日間（実施例１を参照））。０．３、１、３、６、１２および１８ｍｇ／ｋｇで投与したＬ１Ｌ３の薬物クリアランスの平均速度（Ｃｌ）は、それぞれ８．７０、６．５８、４．５４、４．３３、３．２８および３．８５ｍＬ／日／ｋｇであった。この試験からのＰＫ ＮＣＡの結果は以下の表２中に要約されている。表の２〜７列目では、上の値は平均を示し、下の値は中央値である。

Ｌ１Ｌ３を用いた処置は、実質的で持続的な用量依存的な空腹時ＬＤＬ−コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）の降下をもたらした。ＬＤＬ−Ｃ対時間プロフィールは図１に示されている。ベースライン空腹時ＬＤＬ−Ｃは約１４５ｍｇ／ｄＬであった。投薬後７日目では、０．３、１、３、６、１２、または１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回で処置した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは５０〜１００ｍｇ／ｄＬであった。対照的に、プラセボを投与した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは、一般にほぼベースラインに保たれた。投薬後１４日目までに、１、３、６、１２、または１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３で処置した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは約７０ｍｇ／ｄＬ以下であった。投薬後１４日目までに、６ｍｇ／ｋｇまたは１２ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３で処置した対象は約５５ｍｇ／ｄＬのＬＤＬ−Ｃレベルを有しており、１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３で単回投与で処置した対象は約２０ｍｇ／ｄＬのＬＤＬ−Ｃレベルを有していた。１２ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与で処置した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは、投薬の少なくとも約５７日後（試験の終わり）まで約６０ｍｇ／ｄＬ以下に保たれた。１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与で処置した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは、投薬の少なくとも約５７日後まで５０ｍｇ／ｄＬ未満に保たれた。６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与で処置した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは、投薬後の約４２日間の間５０ｍｇ／ｄＬ未満に保たれ、投薬の少なくとも約５７日後まで１００ｍｇ／ｄＬ未満に保たれた。３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与で処置した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは、投薬後１４日目に約７０ｍｇ／ｄＬであり、投薬後２１日目に約６０ｍｇ／ｄＬであり、投薬の約３６日後まで１００ｍｇ／ｄＬ未満に保たれた。１ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与で処置した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは、投薬後１４日目に約６５ｍｇ／ｄＬであり、投薬の約２１日後まで１００ｍｇ／ｄＬ未満に保たれた。０．３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与で処置した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは、投薬後７日目に約８５ｍｇ／ｄＬであり、投薬の約１０日後まで１００ｍｇ／ｄＬ未満に保たれた。

空腹時血中ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）は図２に示されており（示したデータは平均＋／−ＳＥである）、以下の表３中に要約されている。表中、「Ｎ」は対象の人数を示し、「平均」は空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの平均変化率（％）を示し、「ＰＢＯ」はプラセボである。

プラセボを投薬した対象におけるＬＤＬ−Ｃレベルは、一般にベースライン以上に保たれ、図２中に「０」として示されている。上述のように、ベースライン空腹時ＬＤＬ−Ｃは約１４５ｍｇ／ｄＬであった。１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の投与は、約８３％までのベースラインからの変化率（％）をもたらした（図２）。１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与は、投与の少なくとも５７日後までの間、ＬＤＬ−Ｃレベルをベースラインの約６５％下よりも低く維持した。６ｍｇ／ｋｇまたは１２ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与は、投与の４３日後まで、ＬＤＬ−Ｃレベルをベースラインの約６０％下よりも低く維持した。３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与は、ＬＤＬ−Ｃレベルを、投与の２９日後までベースラインの約６０％下よりも低く維持し、投与の５０日後までベースラインの２０％下よりも低く維持した。

Ｌ１Ｌ３を用いた処置は、実質的で持続可能な用量依存的な空腹時総コレステロール（ＴＣ）の降下をもたらした。空腹時血中ＴＣレベルのベースラインからの変化率（％）は図３に示されている（示したデータは平均＋／−２倍ＳＥである）。ベースライン空腹時ＴＣは約２３０ｍｇ／ｄＬであり、ベースラインは図３中に「０」として示されている。投薬後約９日目までに、１２または１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与を投薬した対象におけるＴＣレベルは、ベースラインの約３０％下以下まで低下し、ＴＣ降下効果は少なくとも投薬後５７日目（試験の終わり）まで持続した。６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与を投薬した対象におけるＴＣレベルは、投薬後約９日目から投薬後約５２日目までに、ベースラインの約３０％下以下まで低下した。３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与を投薬した対象におけるＴＣレベルは、投薬後約９日目までにベースラインの約３０％下まで低下し、投薬後約２２日目までにベースラインの約４０％下まで低下した。３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与を投薬した対象におけるＴＣレベルは、投薬後約２２日目までにベースラインの約４０％下まで低下した。１ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与を投薬した対象におけるＴＣレベルは、投薬後約１５日目までにベースラインの約３６％下まで低下した。０．３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与を投薬した対象におけるＴＣレベルは、投薬後約９日目までに約２５％まで低下した。投薬後１５日目までに、数人の対象は、１２または１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与を投薬した後にベースラインの５０％下より低いＴＣレベルを有していた。投薬後３０日目までに、数人の対象は、６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の単回投与を投薬した後にベースラインの５０％下より低いＴＣレベルを有していた。プラセボを投薬した対象におけるＴＣレベルは、試験の持続期間の間ベースラインの２％下以上に保たれた。

Ｌ１Ｌ３を用いた処置は、実質的で持続的な用量依存的な空腹時アポリポタンパク質Ｂ（ａｐｏ Ｂ）の降下をもたらした。空腹時血中ａｐｏ Ｂレベルのベースラインからの変化率（％）は図４に示されている。示したデータは平均＋／−２倍ＳＥである。ベースライン空腹時ａｐｏ Ｂレベルは約１１９ｍｇ／ｄＬであり、ベースラインは図４中に「０」として示されている。プラセボを投薬した対象におけるＡｐｏ Ｂレベルは、試験の持続期間の間、ほぼベースラインに保たれた。１２または１８ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３を投薬した対象におけるＡｐｏ Ｂレベルは、１４日目までにベースラインの約５０％下まで低下し、試験の残りの期間の間はベースラインの約５０％下以下に保たれた。６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３を投薬した対象におけるＡｐｏ Ｂレベルは、１４日目までにベースラインの約４０％下まで低下し、２１日目までにベースラインの約５０％下まで低下し、試験の残りの期間の間は一般にベースラインの約３０％下より低くかった。３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３を投薬した対象におけるＡｐｏ Ｂレベルは、１４日目までにベースラインの約４０％下まで低下し、２８日目までにベースラインの約５０％下まで低下した。１ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３を投薬した対象におけるＡｐｏ Ｂレベルは、１４日目までにベースラインの約４０％下まで低下した。０．３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３を投薬した対象におけるＡｐｏ Ｂレベルは、７日目までにベースラインの約２５％下まで低下した。

図５に示されているように、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）レベルは、Ｌ１Ｌ３を用いた処置の後に有意に変化しなかった。図５に示されているデータは平均＋／−２倍ＳＥである。ベースライン空腹時ＨＤＬ−Ｃレベルは約４９ｍｇ／ｄＬであり、ベースラインは図５中に「０」として示されている。プラセボを投薬した対象におけるＨＤＬ−Ｃレベルは、試験の持続期間の間、ほぼベースラインに保たれた。空腹時トリグリセリド（ＴＧ）レベルは、試験の間、変化しないままであった。空腹時血中ＴＧレベルのベースラインからの変化率（％）は図６に示されている。示したデータは平均＋／−２倍ＳＥである。ベースライン空腹時ＴＧレベルは１７３ｍｇ／ｄＬであり、ベースラインは図６中に「０」として示されている。

試験中、重篤な有害事象は起こらず、処置中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）が原因で中断した対象は存在しなかった。ＴＥＡＥの大多数は強度が穏やかであり、重篤なものはなかった。

要約すると、Ｌ１Ｌ３の投与は、評価したすべての用量群においてＬＤＬ−Ｃの降下をもたらした。一般に、最大パーセンテージのＬＤＬ−Ｃの降下は、１５日目または２２日目に行った測定で生じた。降下効果は早くも３日目に見られた。ＬＤＬ−Ｃの降下の程度および持続期間は用量依存的であった。結果は、Ｌ１Ｌ３が長い作用持続時間を有すること、すなわち、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１．０ｍｇ／ｋｇの用量でそれぞれ７および１４日間の最大効果であり、３．０ｍｇ／ｋｇの用量のＬ１Ｌ３抗体では４週間まで、および６ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、および１８ｍｇ／ｋｇの用量では６週間より長いことを実証している。これらの持続期間の効果は、Ｌ１Ｌ３のＴ^１／_２データに基づいては予想外であった。

スタチンと組み合わせたＰＣＳＫ９拮抗抗体Ｌ１Ｌ３の単回投与の薬物動態学および薬力学
本実施例は、安定用量のアトルバスタチンを受けているヒト対象における、ＰＣＳＫ９拮抗抗体（Ｌ１Ｌ３）の単回投与の薬物動態学および薬力学を評価するための臨床治験試験を例示する。

試験中、安定用量のアトルバスタチンを受けているヒト対象に、ＰＣＳＫ９拮抗抗体０．５ｍｇ／ｋｇまたは４ｍｇ／ｋｇのどちらかでＬ１Ｌ３抗体を単回投与した。Ｌ１Ｌ３は約６０分間にわたる単回の輸液として投与した。輸液速度はプロトコルに従って輸液装置によって注意深く制御した。アトルバスタチン（４０ｍｇ、１日１回）を、以下の試験プロトコルに記載のように投与した。対象は、本試験に参加中、有資格の現場人員によって同じ用量を投与された、１〜７日目のクリニックに拘束されている間以外は、アトルバスタチンを自己投与した。

１０ｍｇ／ｍＬのＬ１Ｌ３注射液は、静脈内（ＩＶ）投与用の無菌的溶液として提供された。それぞれのバイアルは１０ｍＬの水性緩衝溶液中の１００ｍｇのＬ１Ｌ３を含有しており、コーティングされたストッパーおよびアルミニウム製シールで密封されていた。アトルバスタチン（４０ｍｇ）は、片側に「ＰＤ１５７」、反対側に「４０」と符号が付けられている白色錠剤である。

スクリーニングは、それぞれの対象について投薬の２８日以内に行った。対象は、スクリーニングの少なくとも４５日前までの間、安定用量のアトルバスタチンを受けていた。対象は４日目にＬ１Ｌ３の単回投与を受け、拘束期間の間に複数のＰＫおよび安全性の評価を行った（試験の−１、１〜７日目）。対象は続く訪問のために臨床試験ユニットに戻った。

対象の主要な組み入れ基準は以下のとおりであった：１日目の前に４５日間の間、安定用量のアトルバスタチンを受けている（４０ｍｇ、１日１回）、１８．５〜４０ｋｇ／ｍ２の体重指数（ＢＭＩ）（両端を含む）、および１５０ｋｇ以下の体重。対象の主要な除外基準は以下のとおりであった：過去１年間の間の心血管イベント（たとえば心筋梗塞（ＭＩ））の病歴、制御不良の１型または２型の真性糖尿病（定義：制御されていない糖尿病はＨＢＩＡｃ＞９％として定義される）、および制御不良の高血圧（制御されていない高血圧は、処置した場合でさえも１４０ｍｍＨｇより高い収縮期血圧または９０ｍｍＨｇより高い拡張期血圧と定義される）。高血圧を有しており、安定用量の血圧降下圧薬で制御している対象を含めることができる。試験には両方の性別が含まれ、最低年齢制限は１８歳であり、最高年齢制限は８０歳であった。

アトルバスタチンおよびアトルバスタチンの存在下におけるＬ１Ｌ３抗体薬物動態学的パラメータの推定値を、０．５または４ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３抗体の単回投与後に評価した。絶対的および空腹時ＬＤＬコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）のベースラインからの変化率（％）を、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後に測定した。試験中、毒性または非耐用量の基準を満たす対象の発生率を測定した。処置中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）の発生率を重篤度に応じて分類し、試験薬物に対する偶発の関係性も測定した。上記結果のそれぞれの測定値のタイムフレームは２カ月であった。

試験プロトコル
−１日目：対象を臨床試験ユニット（ＣＲＵ）に入院させ、以下を完了した：組み入れ基準および除外基準を精査および更新し、病歴を精査および更新し、計画された最初の投与の前２８日以内に服用したすべての処方薬または非処方薬および補助食品の経歴を精査および更新し、手短な身体検査を行い、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、１０時間の絶食後に安全性臨床検査（血清化学、血液学、尿検査、凝固、リパーゼ、アミラーゼ、ＣＲＰ）のために血液および尿の検体を採取し、尿中の薬物およびアルコールのスクリーニング検査を行い、尿妊娠検査を行い（妊娠の可能性のある女性）、免疫原性分析（抗Ｌ１Ｌ３抗体）のために血液試料を採取し、薬力学的分析（ＰＣＳＫ９および脂質粒子）のために血液試料を採取し、薬理ゲノム学のために血液試料を採取し（任意選択、対象の同意が必要）、３つ組の仰臥位ＥＣＧを行い、アルコール、カフェインおよびタバコの使用を評価し、ベースラインの症状／有害事象を評価し、対象を無作為化した。

１日目：投薬前に、以下を完了した：３つ組の仰臥位ＥＣＧを行い（適応される場合はＩＶカテーテルを挿入する前）、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ＰＫ（アトルバスタチン）のために血液試料を採取し（１日目、０時間）、対象は治験依頼者から提供されたアトルバスタチンの用量（４０ｍｇ）を服用し、投薬後、１日目では以下の時点：０．２５、０．５、１、２、３、４、６、８および１２時間でＰＫ（アトルバスタチン）のために血液試料を採取した。以下を完了した：ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。対象は、２日目の脂質パネルの血液試料の少なくとも１０時間前に、絶食させた。

２日目：投薬前に、以下を完了した：仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ＰＫ（アトルバスタチン）のために血液試料を採取し（２日目、０時間）、１０時間の絶食後に脂質パネルを収集し、対象は治験依頼者から提供されたアトルバスタチンの用量（４０ｍｇ）を服用した。以下を完了した：ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。

３日目：投薬前に、以下を完了した：ＰＫ（アトルバスタチン）のために血液試料を採取し（３日目、０時間）、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、対象は治験依頼者から提供されたアトルバスタチンの用量（４０ｍｇ）を服用した。以下を完了した：ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。対象は、４日目の脂質パネルの血液試料の少なくとも１０時間前の間、絶食させた。

４日目：アトルバスタチンおよびＬ１Ｌ３を投薬する前に、以下を完了した：仰臥位ＥＣＧを３回行い、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、アトルバスタチンのＰＫのために血液試料を採取し（４日目、０時間）、Ｌ１Ｌ３のＰＫのために血液試料を採取し（４日目、０時間）、１０時間の絶食後に安全性臨床検査（血清化学、血液学、尿検査、リパーゼ、アミラーゼ、ＣＲＰ）のために血液および尿の検体を採取し、体重を測り、１０時間の絶食後に脂質パネルを収集し、薬力学的分析（ＰＣＳＫ９および脂質粒子）のために血液試料を採取し、免疫原性（抗Ｌ１Ｌ３抗体）のために血液試料を採取した。用量の投与：対象は治験依頼者から提供されたアトルバスタチン（４０ｍｇ）を服用した。Ｌ１Ｌ３は、速度が制御された静脈内注入によって約６０分間かけて投与した。用量の投与後、以下を完了した：４日目ではアトルバスタチンの用量の．２５、０．５、１、２、３、４、６、８、および１２時間後にＰＫ（アトルバスタチン）のために血液試料を採取し、４日目では輸液開始から１、４、８、および１２時間目にＰＫ（Ｌ１Ｌ３）のために血液試料を採取し、投薬の１時間後に仰臥位ＥＣＧを３回行い、Ｌ１Ｌ３の輸液開始から１および４時間目に仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。対象は、５および６日目の脂質パネルの血液試料の少なくとも１０時間前の間、絶食させた。

５および６日目：投薬前に、以下を完了した：仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ＰＫ（アトルバスタチン）のために血液試料を採取し（５日目、０時間）、ＰＫ（Ｌ１Ｌ３）のために血液試料を採取し（５日目）、１０時間の絶食後に脂質パネルを収集した。５日目のみ：薬力学的分析（ＰＣＳＫ９および脂質粒子）のために血液試料を採取した。対象は治験依頼者から提供されたアトルバスタチンの用量（４０ｍｇ）を服用した。以下を完了した：ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。対象は、７日目の脂質パネルの血液試料の少なくとも１０時間前の間、絶食させた。

７日目：投薬前に、以下を完了した：３つ組の仰臥位ＥＣＧを行い、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ＰＫ（アトルバスタチン）のために血液試料を採取し（７日目）、ＰＫ（Ｌ１Ｌ３）のために血液試料を採取し（７日目）、１０時間の絶食後に脂質パネルを収集し、薬力学的分析（ＰＣＳＫ９および脂質粒子）のために血液試料を採取し、１０時間の絶食後に安全性臨床検査（血清化学、血液学、尿検査、凝固、リパーゼ、アミラーゼ、ＣＲＰ）のために血液および尿の検体を採取した。対象は治験依頼者から提供された最後のアトルバスタチンの用量（４０ｍｇ）を服用した。ユニットから退院する前に、以下を完了した：手短な身体検査を行い、ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。対象に、１５日目にクリニックに戻ることおよび脂質パネルの血液試料の少なくとも１０時間前に絶食することを念押しした。対象は、試験の残りの期間全体にわたって、その処方されたアトルバスタチン薬物を服用し続けた。

１５日目（±１日）：以下を完了した：手短な身体検査を行い、アトルバスタチンのコンプライアンスを確認し、標準の仰臥位ＥＣＧを行い、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ＰＫ（Ｌ１Ｌ３）のために血液試料を採取し（１５日目）、１０時間の絶食後に脂質パネルを収集し、免疫原性（抗Ｌ１Ｌ３抗体）のために血液試料を採取し、薬力学的分析（ＰＣＳＫ９および脂質粒子）のために血液試料を採取し、１０時間の絶食後に安全性臨床検査（血清化学、血液学、尿検査、ＣＲＰ）のために血液および尿の検体を採取し、ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。対象に、２２日目にクリニックに戻ることおよび脂質パネルの血液試料の少なくとも１０時間前に絶食することを念押しした。

２２日目（±１日）：以下を完了した：手短な身体検査を行い、アトルバスタチンのコンプライアンスを確認し、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ＰＫ（Ｌ１Ｌ３）のために血液試料を採取し（２２日目）、１０時間の絶食後に脂質パネルを収集し、１０時間の絶食後に安全性臨床検査（血清化学、血液学、尿検査、ＣＲＰ）のために血液および尿の検体を採取し、ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。対象に、２９日目にクリニックに戻ることおよび脂質パネルの血液試料の少なくとも１０時間前に絶食することを念押しした。

２９日目（±１日）：以下を完了した：完全な身体検査を行い、アトルバスタチンのコンプライアンスを確認し、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ＰＫ（Ｌ１Ｌ３）のために血液試料を採取し（２９日目）、薬力学的分析（ＰＣＳＫ９および脂質粒子）のために血液試料を採取し、免疫原性（抗Ｌ１Ｌ３抗体）のために血液試料を採取し、１０時間の絶食後に脂質パネルを収集し、３つ組の仰臥位ＥＣＧを行い、１０時間の絶食後に安全性臨床検査（血清化学、血液学、尿検査、凝固、リパーゼ、アミラーゼ）のために血液および尿の検体を採取し、尿中の薬物およびアルコールのスクリーニング検査を行い、血清妊娠検査を行い（妊娠の可能性のある女性）、ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。対象に、３６日目にクリニックに戻ることおよび脂質パネルの血液試料の少なくとも１０時間前に絶食することを念押しした。

３６、４３、５０、５７、および６４日目（終了時訪問）：以下を完了した：手短な身体検査を行い、アトルバスタチンのコンプライアンスを確認し、標準の仰臥位ＥＣＧを行い、仰臥位および起立時の生命徴候を測定し（血圧、脈拍数、体温）、ＰＫ（Ｌ１Ｌ３）のために血液試料を採取し、免疫原性（抗Ｌ１Ｌ３抗体）のために血液試料を採取し、１０時間の絶食後に脂質パネルを収集し、１０時間の絶食後に安全性臨床検査（血清化学、血液学、尿検査、リパーゼ、アミラーゼ、ＣＲＰ）のために血液および尿の検体を採取し、ベースラインの症状／有害事象を評価し、併用薬を精査した。６４日目のみ：尿妊娠検査を行い（妊娠の可能性のある女性）、凝固パネルを行い、体重を測り、薬力学的分析（ＰＣＳＫ９および脂質粒子）のために血液試料を採取した。

７８日目および９２日目：一部の例では、５７日目からの薬物動態学的結果を待って７８および９２日目の２回の訪問を追加した。この場合、７８日目には５７日目からの手順に従い、９２日目には６４日目の手順に従った。９２日目が終了時訪問となった。

結果
試験中に中断した対象は存在しなかった。１人で重篤な有害事象（ＳＡＥ）、すなわち偏頭痛の悪化が存在し、これは薬物関連ではなかった。ＴＥＡＥは一般に非特異的であり、重篤な強度なものは存在しなかった。さらに、ＴＥＡＥは一過性であり、３×ＵＬＮを超えるアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）および／またはアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）であり、臨床的徴候／症状はなく、すべて１週間以内に解消された。

表４は、本試験のＬ１Ｌ３のＰＫのパラメータを要約している。

表５は、安定用量のアトルバスタチンを受けているヒト対象における、Ｌ１Ｌ３の単回投与の薬物動態学および薬力学を評価するためのこの臨床治験試験からの結果を要約する。Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの平均変化率（％）が提供されている（表４）。

アトルバスタチン（用量＝４０ｍｇ）の存在下におけるＬ１Ｌ３を用いた処置は、実質的で持続的な用量依存的な空腹時ＬＤＬ−Ｃの降下をもたらした。ベースライン空腹時ＬＤＬ Ｃは約７２．５ｍｇ／ｄＬであった。図７Ａは、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の絶対的空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルを示す。図７Ｂは、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）を示す。ベースラインは図７Ｂ中に「０」として示されている。０．５ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の用量では、最大のＬＤＬ−Ｃの降下効果はＬ１Ｌ３投与後の３日目に観察された。４ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の用量では、最大のＬＤＬ−Ｃの降下効果はＬ１Ｌ３投与後の３２日目まで観察された。ＬＤＬ−Ｃの降下の用量依存的な応答は図８に示されている。図８に示されているように、Ｌ１Ｌ３は、投与したすべての用量で、安定用量のスタチンを受けている患者におけるＬＤＬ−Ｃを降下した。さらに、安定用量のスタチンを受けている患者におけるＬＤＬ−Ｃの降下効果は、Ｌ１Ｌ３単独を投薬した患者における効果よりも高かった（図８）。

ＰＫ−ＰＤモデリングおよびシミュレーションした時間プロフィール
上述の試験中で提供されたデータに基づいて、シミュレーションした血清Ｌ１Ｌ３−時間プロフィールおよびＬＤＬ−Ｃ−時間プロフィールを生成した。図９Ａ〜Ｆは、示した用量のＬ１Ｌ３またはプラセボを投与した後の、Ｌ１Ｌ３（上部パネル）およびＬＤＬ−Ｃ（下部パネル）のシミュレーションした時間プロフィールのグラフを示す。シミュレーションしたプロフィールは、プラセボ（右）と比較した、２ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３（左）または６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３（中央）の投薬について生成した。Ｌ１Ｌ３またはプラセボは、０日目および２９日目に投与した、すなわち４週間の間隔の２回の投薬であった。図１０は、それぞれ０日目、２９日目および５６日目に投与した０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇおよび６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３投与量を投与した後の、シミュレーションしたＬＤＬ−Ｃ−時間プロフィールを示す（図１０）。シミュレーションしたＬ１Ｌ３−時間プロフィールおよびＬＤＬ−Ｃ−時間プロフィールは、４週間毎に１回投与した低用量のＬ１Ｌ３が持続的なＬＤＬ−Ｃの降下を生じることを実証している。

Ｌ１Ｌ３の多回投与後の薬物動態学および薬力学
本実施例は、ヒト対象に、ＰＣＳＫ９拮抗抗体（Ｌ１Ｌ３）を多回静脈内投与した後に薬物動態学および薬力学を評価するための臨床治験試験を例示する。

本試験は、２８日間のスクリーニング期間、４週間の処置期間および８週間の経過観察期間を有する、無作為化、多施設、二重盲検、プラセボ対照の並行群間比較試験の設計の治験であった（図１１）。試験中、日本人の対象にＬ１Ｌ３抗体を０．２５ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、または１．５ｍｇ／ｋｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体で投与した。それぞれの対象について、試験はスクリーニング、処置、および経過観察の３つの期間からなっていた。処置期間は約２８日間まで持続し、Ｌ１Ｌ３またはプラセボのどちらかの単回Ｉ．Ｖ．投与を４回、１、８、１５、および２２日目に投与した。経過観察期間は、約２９日目から最後の訪問（７８日目）までの約８週間続いた。対象は、安全性の評価ならびにルーチン臨床検査、脂質プロフィール、ＰＫ、ＰＤ、および免疫原性試料のための血液の採取のためにクリニックで定期的に診察した。

Ｌ１Ｌ３を用いた週に１回の処置は、試験したすべての用量で、持続した実質的で持続的な用量依存的な空腹時ＬＤＬ−Ｃの降下をもたらした。ベースライン空腹時ＬＤＬ−Ｃは約１５５ｍｇ／ｄＬであった。図１２は、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の絶対的空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルを示す。図１３は、Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの変化率（％）を示す。ベースラインは図１３中に「０」として示されている。

図１４中の表は、安定用量のアトルバスタチンを受けているヒト対象における、Ｌ１Ｌ３の多回投与後の薬物動態学および薬力学を評価するためのこの臨床治験試験からの結果を要約する。Ｌ１Ｌ３抗体を投与した後の空腹時ＬＤＬ−Ｃレベルのベースラインからの平均変化率（％）が提供されている（「平均」）（図１４）。

スタチンと組み合わせたＬ１Ｌ３の多回投与後の薬物動態学および薬力学
本実施例は、アトルバスタチン、シンバスタチンまたはロスバスタチンを受けているヒト対象における、ＰＣＳＫ９拮抗抗体（Ｌ１Ｌ３）の多回静脈内投与後の薬物動態学および薬力学を評価するための臨床治験試験を例示する。

本試験は、３週間のスクリーニング期間、１２週間の処置期間および８週間の経過観察期間を有する、無作為化、多施設、二重盲検、プラセボ対照、並行群間比較試験の設計の治験であった。

試験に登録された対象は、以下の基準のすべてを満たしていた：１８歳以上の男性および女性の対象、１８．５〜４０ｋｇ／ｍ^２の体重指数、５０ｋｇ（１１０ｌｂｓ）より高く１５０ｋｇ（３３０ｌｂｓ）より低い全体重、４０もしくは８０ｍｇのアトルバスタチン、２０もしくは４０ｍｇのロスバスタチンまたは４０もしくは８０ｍｇのシンバスタチンと定義される安定１日用量のスタチンを１日目の前の最低４５日間の間受けている、２回の対象訪問（スクリーニングおよび−７日目）に脂質が１００ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時ＬＤＬ−Ｃの基準を満たしている。

対象は、安全性の評価ならびに安全性臨床検査（ｓａｆｅｔｙ ｌａｂｓ）、脂質プロフィール、ＰＫ、ＰＤ、および免疫原性試料のための血液の採取のためにクリニックで定期的に診察した。それぞれの訪問の前に１０時間の絶食要件を念押しするため、スクリーニング中および３日目に有害事象を評価するために電話での接触を行い、対象の原資料に接触を記録した。対象は、１ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３、３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３、６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３、またはプラセボの１回の輸液を、１、２９および５７日目に受け、処置および経過観察の期間の全体にわたって複数の有効性、安全性およびＰＫの評価を行った。輸液速度はプロトコルに従って輸液装置によって注意深く制御した。輸液は約６０分間にわたる単回の輸液として投与した。

結果
３ｍｇ／ｋｇの投薬レジメンおよび６ｍｇ／ｋｇの投薬レジメンはどちらも統計的有意性を達成し、ベースラインから３０％のＬＤＬ−Ｃの変化という標的値を超えた。トリグリセリドに対するＬ１Ｌ３の効果は観察されなかった。９％までのＨＤＬのわずかな上昇が見られた。処置群および登録を表６に示す。

事前に指定された一次有効性エンドポイントは、ＡＮＣＯＶＡモデルを使用して分析した、８５日目でのＬＤＬ−Ｃのベースラインからの変化率（％）であった。最終ＡＮＣＯＶＡモデルは、ベースラインのＬＤＬ−Ｃおよび処置の期間を含有していた。一次エンドポイント分析において０．０５のレベルの全体的なＩ型誤差率を保つために、０．００１のアルファ消費を有する境界であるＨａｙｂｉｔｔｌｅ−Ｐｅｔｏを採用した。

明確な用量応答を有する強力な処置効果が観察され、３および６ｍｇ／ｋｇの処置群について投与の欠損よるＬＤＬ−Ｃの変動があった（図１５および１６）。続いて、時間毎の処置および経験的な用量応答プロフィールをどちらも推定するために、混合モデル反復測定を使用してＬＤＬ−Ｃデータを分析した。

スタチンに加えた場合のさらに３０％のＬＤＬ−Ｃという事前に決定された標的値が、成功の概念証明基準であった。スタチン治療に加えた場合の３０％以上のＬＤＬ−Ｃの降下というこの標的レベルは、４週間毎に与えた３および６ｍｇ／ｋｇの用量で明らかに達成されていた（図１５および１６）。図１５中のグラフは、試験日および処置ごとのベースラインからの変化率（％）を示し、図１６中のグラフは、薬の飲み忘れがある対象を除外した、試験日および処置ごとのベースラインからの変化率（％）を示す。安定１日用量のスタチンを受けている患者における３ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の投薬レジメンは、２９日目までに、ベースラインの約５０％下までのＬＤＬ−Ｃの降下を達成した（図１５）。安定１日用量のスタチンを受けている患者における６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３の投薬レジメンは、２９日目までに、ベースラインの約６５％下までのＬＤＬ−Ｃの降下を達成した（図１５）。３ｍｇ／ｋｇおよび６ｍｇ／ｋｇの投薬レジメンのどちらにおいても、３０％を超えるＬＤＬ−Ｃの降下が２８日間持続した（図１６）。８５日目でのプラセボ調節した処置効果の統計的な要約が表７に提供されている。表７中、脂質プロフィールのベースラインは、−７および１日目に観察された値の平均として定義されている。

Ｌ１Ｌ３のＣｍａｘおよびトラフ濃度の要約を表８に示す。

安定１日用量のスタチンを受けている患者における、３および６ｍｇ／ｋｇのＬ１Ｌ３を用いた月に１回の処置は、３０％を超えるベースラインからの血中ＬＤＬ−Ｃレベルの降下をもたらした。ＨＤＬレベルのわずかな上昇（９％まで）およびトリグリセリドに対するＬ１Ｌ３の小さな効果が観察された。Ｌ１Ｌ３は一般に安全かつ十分に耐容されていた。ＬＦＴ、ＣＫ、ＥＣＧ、およびＢＰの変化は、一過性であり、緩和な性質であり、ほとんどの場合、処置に関連していないとみなされた。陽性ＡＤＡを有する対象はいなかった。

スタチンと組み合わせたＬ１Ｌ３の多回投与後の薬物動態学および薬力学
本実施例は、スタチンを受けているヒト対象における、ＰＣＳＫ９拮抗抗体（Ｌ１Ｌ３）の多回皮下投与後のＬＤＬ−Ｃレベルを評価するための臨床治験試験を例示する。

本試験は、スタチンを受けている高コレステロール血症対象における６カ月の月に１回および２回の皮下投薬後の、Ｌ１Ｌ３の有効性、安全性および許容性を評価するための、無作為化、多施設、二重盲検、プラセボ対照、並行群間比較、用量設定試験の設計の治験である。２つの投薬スケジュール（Ｑ２８ｄまたはＱ１４ｄ）の合計７つの用量群が、５０人の対象／用量群で計画された。プロトコルの設計は表９に示されている。

資格群：１８歳以上。
組み入れ基準：対象は、安定用量（少なくとも６週間）の任意のスタチンを受けており、この治験の持続期間の間に同じ用量のスタチンを続けるべきである。脂質は、スクリーニングおよび１日目の無作為化の少なくとも７日前に行う２回のスクリーニング訪問時に、スタチンを用いたバックグラウンド処置における以下の基準を満たしているべきである：空腹時ＬＤＬ−Ｃは８０ｍｇ／ｄＬ（２．３１ｍｍｏｌ／Ｌ）以上であり、空腹時ＴＧは４００ｍｇ／ｄＬ（４．５２ｍｍｏｌ／Ｌ）以下であり、最初のスクリーニング訪問時に対象の空腹時ＬＤＬ−Ｃは８０ｍｇ／ｄＬ（２．３１ｍｍｏｌ／Ｌ）以上でなければならず、無作為化の７日以内の２回目の訪問時での値は、この治験の資格基準を満たすためにこの初期値の２０％未満であってはならない。

一次結果測定は、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるＬＤＬ−Ｃのベースラインからの絶対的変化である。二次結果測定には以下のものが含まれる：ＬＤＬ−Ｃは、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価され、血漿定常状態Ｌ１Ｌ３薬物動態学的パラメータ、指定された限界（＜１００ｍｇ／ｄＬ、＜７０ｍｇ／ｄＬ、＜４０ｍｇ／ｄＬ、＜２５ｍｇ／ｄＬ）より低いＬＤＬ−Ｃを有する対象の割合、総コレステロールは、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価され、ＡｐｏＢは、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価され、ＡｐｏＡ１は、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価され、リポタンパク質（ａ）は、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価され、ＨＤＬ−コレステロールは、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価され、超低密度リポタンパク質−コレステロールは、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価され、トリグリセリドは、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価され、非ＨＤＬ−コレステロールは、無作為化後の１２週間目の終わりにおけるベースラインからの変化および％変化として評価される。

開示した教示は様々な応用、方法、および組成物を参照して記載したが、本明細書中の教示および以下の特許請求した発明から逸脱せずに様々な変化および改変を行うことができることを理解されたい。前述の実施例は、開示した教示をより良好に例示するために提供し、本明細書中に提示した教示の範囲を限定することを意図しない。本教示はこれらの例示的な実施形態に関して記載されているが、当業者には、これらの例示的な実施形態の数々の変形および改変が必要以上の実験を行わずに可能であることを容易に理解されよう。すべてのそのような変形および改変が本教示の範囲内にある。

特許、特許出願、論文、教科書などを含めた、本明細書中で引用したすべての参考文献、およびそれ中で引用された参考文献は、既に引用されていない程度まで、その全体で本明細書中に参考として組み込まれている。それだけには限定されないが定義された用語、用語の使用法、記載された技法などを含めた、組み込まれた文献および類似の材料のうちの１つまたは複数が本出願とは異なるまたは矛盾する場合は、本出願が支配する。

前述の説明および実施例は、本発明の特定の具体的な実施形態を詳述しており、本発明者らによって企図される最良の形態を記載している。しかし、前述のものが文字上でどれだけ詳細であるように見えた場合でも、本発明は多くの方法で実施し得、本発明は添付の特許請求の範囲およびその任意の均等物に従って解釈されるべきであることを、理解されたい。

Claims (36)

1. 上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルによって特徴づけられる障害の処置において使用するための前駆タンパク質転換酵素サブチリシンケキシン９型（ＰＣＳＫ９）拮抗抗体であって、ＰＣＳＫ９拮抗抗体が、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇの初回用量として投与され、初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量の複数の後続用量で投与され、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量が、互いに少なくとも約４週間の時間間隔である抗体。
2. 上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルによって特徴づけられる障害の処置において使用するための前駆タンパク質転換酵素サブチリシンケキシン９型（ＰＣＳＫ９）拮抗抗体であって、ＰＣＳＫ９拮抗抗体が、少なくとも約２００ｍｇまたは約３００ｍｇの初回用量として投与され、初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量の複数の後続用量で投与され、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量が、互いに少なくとも約４週間の時間間隔である抗体。
3. 上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルによって特徴づけられる障害の処置において使用するための前駆タンパク質転換酵素サブチリシンケキシン９型（ＰＣＳＫ９）拮抗抗体であって、ＰＣＳＫ９拮抗抗体が、少なくとも約５０ｍｇ、約１００ｍｇまたは約１５０ｍｇの初回用量として投与され、初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量の複数の後続用量で投与され、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量が、互いに少なくとも約２週間の時間間隔である抗体。
4. スタチンがＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量の前に投与されている、請求項１から３のいずれか一項に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
5. １日用量のスタチンを投与する、請求項４に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
6. 安定用量のスタチンが、ＰＣＳＫ９抗体の初回用量の前に、少なくとも約２、３、４、５または６週間の間、投与されている、請求項４または５に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
7. スタチンが、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、またはその任意の薬学的に許容できる塩もしくは立体異性体である、請求項４から６のいずれか一項に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
8. スタチンの１日用量が、４０ｍｇのアトルバスタチン、８０ｍｇのアトルバスタチン、２０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのシンバスタチン、および８０ｍｇのシンバスタチンからなる群から選択される、請求項５に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
9. 障害が、高コレステロール血症、異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、または急性冠症候群（ＡＣＳ）である、請求項１から８のいずれか一項に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
10. 抗体が、配列番号１１に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域からの３個のＣＤＲおよび配列番号１２に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域からの３個のＣＤＲを含む、請求項１から９のいずれか一項に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
11. 抗体がＬ１Ｌ３である、請求項１０に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
12. 抗体を皮下または静脈内投与する、請求項１から１１のいずれか一項に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
13. 抗体を約１カ月に１回投与する、請求項１から１２のいずれか一項に記載のＰＣＳＫ９拮抗抗体。
14. 少なくとも約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、または約６ｍｇ／ｋｇの前駆タンパク質転換酵素サブチリシンケキシン９型（ＰＣＳＫ９）拮抗抗体の初回用量を患者に投与することと、
    抗体の複数の後続用量を初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量で患者に投与することとを含み、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量が、互いに少なくとも約４週間の時間間隔である、上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルによって特徴づけられる障害に罹りやすい、またはそれと診断された患者を処置する方法。
15. 少なくとも約２００ｍｇまたは約３００ｍｇの前駆タンパク質転換酵素サブチリシンケキシン９型（ＰＣＳＫ９）拮抗抗体の初回用量を患者に投与することと、
    抗体の複数の後続用量を初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量で患者に投与することとを含み、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量が、互いに少なくとも約４週間の時間間隔である、上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルによって特徴づけられる障害に罹りやすい、またはそれと診断された患者を処置する方法。
16. 少なくとも約５０ｍｇ、約１００ｍｇまたは約１５０ｍｇの前駆タンパク質転換酵素サブチリシンケキシン９型（ＰＣＳＫ９）拮抗抗体の初回用量を患者に投与することと、
    抗体の複数の後続用量を初回用量とほぼ同じまたはそれ未満の量で患者に投与することとを含み、初回用量ならびに第１の後続用量および追加の後続用量が、互いに少なくとも約２週間の時間間隔である、上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）レベルによって特徴づけられる障害に罹りやすい、またはそれと診断された患者を処置する方法。
17. 患者がスタチンで処置されている、請求項１４から１６のいずれか一項に記載の方法。
18. 患者が１日用量のスタチンで処置されている、請求項１７に記載の方法。
19. 患者が、ＰＣＳＫ９抗体の初回用量の前に、少なくとも約２、３、４、５または６週間の間、安定用量のスタチンを受けている、請求項１７または１８に記載の方法。
20. スタチンが、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、またはその任意の薬学的に許容できる塩もしくは立体異性体である、請求項１７から１９のいずれか一項に記載の方法。
21. スタチンの１日用量が、４０ｍｇのアトルバスタチン、８０ｍｇのアトルバスタチン、２０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのロスバスタチン、４０ｍｇのシンバスタチン、および８０ｍｇのシンバスタチンからなる群から選択される、請求項１８に記載の方法。
22. 障害が、高コレステロール血症、異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、または急性冠症候群（ＡＣＳ）である、請求項１４から２１のいずれか一項に記載の方法。
23. 患者が、初回用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体の投与前に約７０ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時総コレステロールレベルを有する、請求項１４から２２のいずれか一項に記載の方法。
24. 患者が、初回用量のＰＣＳＫ９拮抗抗体の投与前に約１３０ｍｇ／ｄＬ以上の空腹時ＬＤＬコレステロールレベルを有する、請求項１４から２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 抗体が、配列番号１１に示すアミノ酸配列を有する重鎖可変領域からの３個のＣＤＲおよび配列番号１２に示すアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域からの３個のＣＤＲを含む、請求項１４から２４のいずれか一項に記載の方法。
26. 抗体がＬ１Ｌ３である、請求項２５に記載の方法。
27. 抗体を皮下または静脈内投与する、請求項１４から２６のいずれか一項に記載の方法。
28. 抗体を約１カ月に１回投与する、請求項１４から２７のいずれか一項に記載の方法。
29. 容器と、ＰＣＳＫ９拮抗抗体を含む容器内の組成物と、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ、または約３００ｍｇのＰＣＳＫ９拮抗抗体の初回用量、および初回用量と同量またはそれ未満である少なくとも１つの後続用量を投与する指示を含有する添付文書とを含み、初回用量および後続用量の投与が少なくとも約４週間の時間間隔である製品。
30. 添付文書が、ＰＣＳＫ９拮抗抗体をスタチンで処置されている個体に投与するための指示を含む、請求項２９に記載の製品。
31. スタチンが、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン、またはその任意の薬学的に許容できる塩もしくは立体異性体である、請求項３０に記載の製品。
32. 指示が、静脈内または皮下注射によって初回用量を投与し、静脈内または皮下注射によって少なくとも１つの後続用量を投与するためのものである、請求項２９から３１のいずれか一項に記載の製品。
33. 複数の後続用量を投与する、請求項２９から３２のいずれか一項に記載の製品。
34. 組成物が上昇した血中低密度リポタンパク質コレステロールレベルによって特徴づけられる状態を処置するために使用できることを示す、容器上に存在するまたはそれに付随するラベルをさらに含む、請求項２９から３３のいずれか一項に記載の製品。
35. ラベルが、組成物を高コレステロール血症、アテローム生成的異常脂質血症、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、または急性冠症候群（ＡＣＳ）の処置に使用できることを示す、請求項２９から３４のいずれか一項に記載の製品。
36. 抗体がＬ１Ｌ３である、請求項２９から３５のいずれか一項に記載の製品。

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