JP2012529279A - 新規の強力な抗apobアンチセンス化合物 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、細胞内のAPO-B100 mRNA を標的とするオリゴマー化合物(オリゴマー)に関するもので、これはAPO-B100の発現低下をもたらす。APO-B100 発現の低下は、アポリポタンパク質B 活性に関連する疾患などの内科的疾患の範囲、例えば、非限定的な例として、HDL/LDL コレステロールアンバランスの様々な型;脂質異常症、例えば、家族性合併脂質異常症(FCHL)、後天的脂質異常症、高コレステロール血症、スタチン耐性高コレステロール血症;冠動脈疾患(CAD)、冠状動脈性疾患(CHD)、アテローム性動脈硬化症に有益である。
以下の関連出願WO2007/031081およびWO2008/113830は、それらの全てを出典明示により本明細書に組み込まれる。
出典明示により本明細書に組み込まれるWO2007/031081およびWO2008/113830を参照されたい。
本発明は、10−50の、例えば合計が10−30の連続するヌクレオチド配列を含む10−30のヌクレオチド長のオリゴマーを提供するものであって、ここで該連続するヌクレオチド配列は、哺乳類APO-B100遺伝子またはmRNA、例えばヒト(genbank accession No: NM_000384またはgenbank accession No: NG_011793)またはその天然変異体の逆相補体に対応する領域に少なくとも80%(例えば、85%、90%、95%、98%、または99%)相同である。即ち、例えば該オリゴマーは、APOB-100 mRNAまたはAPOB-100遺伝子配列の一部の配列を有する一本鎖核酸分子とハイブリダイズする。
オリゴマー
本発明は、ヒトAPO-B100 mRNAまたは遺伝子のAPO-B100核酸などの哺乳類APO-B100をコードする核酸分子ならびに哺乳類APO-B100をコードするかかる核酸分子の天然変異体の機能を調節する際に使用するための、オリゴマー化合物(本明細書においてはオリゴマーという)を用いる。本発明の内容における「オリゴマー」とは、2以上のヌクレオチドが共有結合により形成される分子(即ち、オリゴヌクレオチド)をいう。本明細書では、単一のヌクレオチド(ユニット)もまた、モノマーまたはユニットということもできる。該オリゴマーは、10−50、例えば10−30のヌクレオチド長の連続するヌクレオチド配列からなるか、またはそれを含む。
好適には本発明の該オリゴマーは、APO-B100遺伝子の発現を下方調節できる。これに関して、本発明の該オリゴマーは、一般的にはヒト細胞などの哺乳類において、例えば、肝臓細胞においてAPO-B100の阻害に作用し得る。ある実施態様において、本発明のオリゴマーは、該標的核酸に結合し、正常な発現レベルと比較して少なくとも10%または20%の、好ましくは正常な発現レベルと比較して少なくとも30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%または95%阻害の発現阻害をもたらす。ある実施態様において、かかる改変は、0.04〜25nM、例えば0.8〜20nMの濃度の本発明の化合物を用いた場合に見られる。同一または異なる実施態様において、発現の阻害は、100%未満、例えば、98%未満の阻害、95%未満の阻害、90%未満の阻害、80%未満の阻害、例えば、70%未満の阻害である。発現レベルの改変を、タンパク質レベルを測定することによって、例えば、SDS-PAGEに続いて該標的タンパク質に対して生じた好適な抗体を用いるウェスタンブロッティング方法によって決定してもよい。あるいは、発現レベルの改変を、mRNAレベルを測定すること、例えば、ノーザン・ブロットまたは定量的RT-PCRにより測定することにより決定してもよい。mRNA レベルを介して測定する場合、適切な用量、例えば、0.04−25nM、例えば0.8−20nM濃度を用いる場合の下方調節のレベルは、ある実施態様において、通常、本発明の化合物の非存在下における正常レベルの10-20%のレベルである。
該オリゴマーは、ヒトAPO-B100 mRNA中に存在するヌクレオチド配列の逆相補体に対応する連続するヌクレオチド配列を含むか、またはそれらから構成される。即ち、該オリゴマーは、配列番号1-25 (表1) からなる群から選択される配列を含むか、またはそれらからなり得る、ここで該オリゴマー(またはその連続するヌクレオチド部分)はこの選択された配列に対して1、2、または3つのミスマッチを有してもよい。
該オリゴマーは、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29または30の連続するヌクレオチド長の全ての連続するヌクレオチド配列を含むか、またはそれらからなり得る。
本明細書にて使用した用語「ヌクレオチド」は、糖部分、塩基部分および共有結合したリン酸基を含むグリコシドを指し、両方の天然ヌクレオチド、例えば、DNAまたはRNA、好ましくはDNA、改変された糖および/または塩基部分を含む非天然ヌクレオチドも範囲に含み、これは本明細書中で「ヌクレオチドアナログ」ともいう。
スキーム1:
用語「LNA」は、「ロックされた核酸」として知られる二環式ヌクレオチドアナログを示す。それは、LNA モノマーを示してもよいし、または「LNA オリゴヌクレオチド」の文脈で使用される場合には、LNAは1以上のかかる二環式ヌクレオチドアナログを含有するオリゴヌクレオチドをいう。LNAヌクレオチドは、リボース糖環のC2'からC4'の間のビラジカル「架橋」の存在、例えば下記のビラジカルR4*-R2*として示されるような存在を特徴とする。
式1
[式中、全ての不斉中心に対して、不斉基はRまたはS配向いずれかにある;
ここで、
X は -O-、-S-、-N(RN*)-、-C(R6R6*)- から選択され、例えばいくつかの実施形態では、-O-である;
B は、水素、所望により置換されていてもよいC1-4アルコキシ、所望により置換されていてもよいC1-4アルキル、所望により置換されていてもよいC1-4アシルオキシ、天然のアナログおよび核酸塩基アナログなどの核酸塩基、DNA 挿入剤、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート化基、レポーター基、およびリガンドから選択される;
Pは、近接モノマーとのヌクレオチド間の連結または5'末端基を表し、かかるヌクレオチド間連結または5'末端基は置換基R5または同等に適用できる置換基 R5*を所望により含む;
P*は、近接モノマーまたは3'末端基とのヌクレオチド間連結を表す;
R4* および R2* は、共に、-C(RaRb)-、-C(Ra)=C(Rb)、-C(Ra)=N、-O-、-Si(Ra)2-、-S-、-SO2-、-N(Ra)-、および>C=Zから選択される1-4の基/原子からなるビラジカルを表し、
ここで Z は、-O-、-S-、および -N(Ra)- から選択され、Ra および Rb は、水素、所望により置換されていてもよいC1-12-アルキル、所望により置換されていてもよいC2-12-アルケニル、所望により置換されていてもよいC2-12-アルキニル、ヒドロキシ、所望により置換されていてもよいC1-12-アルコキシ、C2-12-アルコキシアルキル、C2-12-アルケニルオキシ、カルボキシ、C1-12-アルコキシカルボニル、C1-12-アルキルカルボニル、ホルミル、アリール、アリールオキシ-カルボニル、アリールオキシ、アリールカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ-カルボニル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールカルボニル、アミノ、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)アミノ、カルバモイル、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)-アミノ-カルボニル、アミノ-C1-6-アルキル-アミノカルボニル、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)アミノ-C1-6-アルキル-アミノカルボニル、C1-6-アルキル-カルボニルアミノ、カルバミド、C1-6-アルカノイルオキシ、スルホノ、C1-6-アルキルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、C1-6-アルキルチオ、ハロゲン、DNA 挿入剤、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート化基、レポーター基、およびリガンドから各々独立して選択される、ここで該アリールおよびヘテロアリールは所望により置換されてもよく、2つの双子(geminal)置換基 Ra および Rbは共に、所望により置換されたメチレン (=CH2)を表し得る、ここで全ての不斉中心について、不斉基は、RまたはS 配向のいずれかにある;および
各置換基 R1*、R2、R3、R5、R5*、R6 および R6*は、水素、所望により置換されていてもよいC1-12-アルキル、所望により置換されていてもよいC2-12-アルケニル、所望により置換されていてもよいC2-12-アルキニル、ヒドロキシ、C1-12-アルコキシ、C2-12-アルコキシアルキル、C2-12-アルケニルオキシ、カルボキシ、C1-12-アルコキシカルボニル、C1-12-アルキルカルボニル、ホルミル、アリール、アリールオキシ-カルボニル、アリールオキシ、アリールカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ-カルボニル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールカルボニル、アミノ、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)アミノ、カルバモイル、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)-アミノ-カルボニル、アミノ-C1-6-アルキル-アミノカルボニル、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)アミノ-C1-6-アルキル-アミノカルボニル、C1-6-アルキル-カルボニルアミノ、カルバミド、C1-6-アルカノイルオキシ、スルホノ、C1-6-アルキルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、C1-6-アルキルチオ、ハロゲン、DNA 挿入剤、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート化基、レポーター基、および リガンドから独立して選択される、ここでアリールおよびヘテロアリールは、所望により置換されてもよく、およびここで2つの双子置換基は共に、オキソ、チオキソ、イミノ、または所望により置換されたメチレンを表し得る;ここでRNは、水素およびC1-4アルキルから選択され、ここで2つの近接置換基[双子(ジェミナル)ではない]は、二重結合をもたらす追加の結合を表し得る;およびRN*は、存在しかつビラジカルに関与しない場合に、水素およびC1-4アルキルから選択される;ならびに塩基性塩およびその酸付加塩。全ての不斉中心について、不斉基は、RまたはS 配向のいずれかで存在し得る。
式中、Yは、-O-、-CH2O-、-S-、-NH-、N(Re) および/または -CH2-からなる群から選択される;Z および Z* は、ヌクレオチド間結合、RH、末端基または保護基から独立して選択される;B は、天然または非天然のヌクレオチド塩基部分(核酸塩基)を構成し、RH は、水素 および C1-4アルキルから選択される;Ra、Rb Rc、Rd および Re は、所望により、水素、所望により置換されていてもよいC1-12-アルキル、所望により置換されていてもよいC2-12-アルケニル、所望により置換されていてもよいC2-12-アルキニル、ヒドロキシ、C1-12-アルコキシ、C2-12-アルコキシアルキル、C2-12-アルケニルオキシ、カルボキシ、C1-12-アルコキシカルボニル、C1-12-アルキルカルボニル、ホルミル、アリール、アリールオキシ-カルボニル、アリールオキシ、アリールカルボニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ-カルボニル、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールカルボニル、アミノ、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)アミノ、カルバモイル、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)-アミノ-カルボニル、アミノ-C1-6-アルキル-アミノカルボニル、モノ-およびジ(C1-6-アルキル)アミノ-C1-6-アルキル-アミノカルボニル、C1-6-アルキル-カルボニルアミノ、カルバミド、C1-6-アルカノイルオキシ、スルホノ、C1-6-アルキルスルホニルオキシ、ニトロ、アジド、スルファニル、C1-6-アルキルチオ、ハロゲン、DNA 挿入剤、光化学的に活性な基、熱化学的に活性な基、キレート化基、レポーター基、および リガンドからなる群から独立して選択される、ここでアリールおよびヘテロアリールは置換されていてもよく、2つの双子置換基 Ra および Rb が共に、所望により置換されていてもよいメチレン(=CH2)を表し得る;および RH は、水素およびC1-4アルキルから選択される。ある実施態様において、Ra、Rb Rc、Rd および Re は、所望により、水素およびC1-6アルキル、例えばメチルからなる群から独立して選択される。全ての不斉中心について、不斉基は、RまたはS 配向のいずれかで存在し得る(例えば、2つの例示的な立体化学異性体は、β-D および α-L 異性体を含む)、これらを下記に示す:
オリゴマー化合物は、標的mRNAの非RNaseに媒介される分解を介して、例えば翻訳の立体障害または他の方法により機能し得るが、本発明の好ましいオリゴマーは、エンドリボヌクレアーゼ(RNase)、例えばRNase Hを動員することができると認識される。
好ましくは、本発明のオリゴマーはギャップマーである。ギャップマーオリゴマーは、RNAseHなどのRNAseを動員できるヌクレオチドの連続するストレッチを含むオリゴマーであり、例えば、RNAseを動員することができるヌクレオチドの連続的伸長に対して5'および3'にある1〜6つのヌクレオチドアナログなどの、親和性増強ヌクレオチドアナログの領域により5'および3'の双方に挟まれる(これらの領域を、それぞれA領域およびC領域と呼ぶ)、本明細書ではB領域と呼ばれる少なくとも6もしくは7つのDNAヌクレオチドの領域である。
用語「連結基」または「ヌクレオチド間結合」は、2つのヌクレオチド、2つのヌクレオチドアナログ、およびヌクレオチドおよびヌクレオチドアナログ等を一緒に共有結合させることができる基を意味すると意図される。特定かつ好ましい例には、リン酸基およびホスホロチオエート基が含まれる。
本発明のオリゴマーは、例えば、配列番号:26-50からなる群から選択され得る。特に好ましい実施態様において、該本発明のオリゴマーは、配列番号 28、29、44および45からなる群から選択される。
本明細書において、用語「コンジュゲート」は、本明細書に記載したとおり該オリゴマーの、1以上の非ヌクレオチドまたは非ポリヌクレオチド部分への共有結合(「コンジュゲーション」)によって形成した異種性分子を示すと意図される。非ヌクレオチドまたは非ポリヌクレオチド部分の例には、巨大分子剤、例えばタンパク質、脂肪酸鎖、糖残基、糖タンパク質、ポリマーまたはその組合せを包含する。一般的には、タンパク質は、標的タンパク質に対する抗体であってよい。通常のポリマーは、ポリエチレングリコールであってよい。
本明細書で使用される用語「活性化オリゴマー」とは、1以上のコンジュゲートされた部分へのオリゴマーの共有結合を許容する少なくとも一つの官能基部分、即ち、それ自体核酸やモノマーでもない部分に共有結合(即ち、官能化)されて、本明細書に記載のコンジュゲートを形成する、本発明のオリゴマーを指す。通常、官能基部分は、コンジュゲートされた部分に結合することができる親水性基および末端基(例えば、アミノ、スルフィドリルまたはヒドロキシル基)であるスペーサーであり、例えばアデニン塩基の3'-ヒドロキシル基または環外のNH2基を介して、オリゴマーに共有結合することができる化学基を含むであろう。ある実施態様において、この末端基は保護されない、例えばNH2基である。別の実施態様において、該末端基は、例えば任意の好適な保護基により、例えば、Theodora W Greene および Peter G M Wuts、3rd edition (John Wiley & Sons, 1999)により“Protective Groups in Organic Synthesis"に記載したものにより保護される。好適なヒドロキシル保護基の例には、エステル、例えば酢酸エステル、アラルキル基、例えばベンジル、ジフェニルメチル、またはトリフェニルメチル、およびテトラヒドロピラニルが挙げられる。好適なアミノ保護基の例には、ベンジル、α-メチルベンジル、ジフェニルメチル、トリフェニルメチル、ベンジルオキシカルボニル、tert-ブトキシカルボニル、およびアシル基、例えばトリクロロアセチルまたはトリフルオロアセチルが挙げられる。ある実施態様において、この官能基部分は、自己切断的である。別の実施態様において、該官能基部分は、生分解性である。例えば、米国特許番号第7,087,229号を参照されたい、これは本明細書に組み込まれる。
本発明のオリゴマーを、医薬製剤および組成物に使用できる。好適には、かかる組成物は、医薬上許容し得る希釈剤、担体、塩またはアジュバンドを含む。PCT/DK2006/000512は、好適および好ましい医薬上許容し得る希釈剤、担体およびアジュバンドを提供している(これらを本明細書に組み込む)。好適な用量、製剤、投与経路、組成物、投薬形態、他の治療剤との組合せ、プロドラッグ製剤はPCT/DK2006/000512で提供される-これらもまた本明細書に組み込む。
本発明のオリゴマーを、研究試薬として、例えば、診断、治療および予防のための研究試薬として利用できる。
本発明のオリゴマーおよび他の組成物を、APO-B100の過剰発現またはAPO-B100の突然変異型の発現と関連のある症状の処置に使用できる。
本発明の以下の実施形態を、本明細書に記載の他の実施形態と組み合わせて使用してもよい。
10. 配列番号:28、29、44または45のいずれか1つからなるか、またはそれを含む、実施態様1-9いずれか記載のオリゴマー。
実施例1:モノマー合成
LNAモノマーの構成要素(building blocks)およびその誘導体を、標準方法、例えば公開された方法およびW02007/031081に引用された文献を用いて製造した。
オリゴヌクレオチドを、WO2007/031081における実施例2に記載の方法を用いて合成した。これらは本明細書に組み込まれる。
apoB-100発現のアンチセンス改変を、当業者には既知の様々な方法にてアッセイできる。例えば、apoB-100mRNAレベルを、例えば、ノーザン・ブロット分析、競合的ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、またはリアルタイムPCRにより定量できる。リアルタイム定量的PCRが、現在のところ好ましい。RNA分析を、全細胞のRNAまたはmRNAに対して行うことができる。RNA単離およびRNA分析の方法、例えばノーザン・ブロット分析は、当分野では常法であり、例えばCurrent Protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons において教示されている。
標的核酸発現に対するアンチセンス化合物の効果を、該標的核酸が測定可能なレベルで存在することを条件として様々な細胞型のいずれかにて試験できる。標的は、内生的に発現させることができるか、または該核酸をコードしている核酸の一過的または安定なトランスフェクションにより発現させることができる。
細胞培養およびトランスフェクション:Huh-7 および Hepa 1-6 細胞を、10% FBS、Glutamax I および ゲンタマイシンを添加した培養培地中で37℃(5% CO2)にて6ウェルプレート上に播種した。該細胞が60-70%のコンフルエンスとなった場合に、それらを、Lipofectamine 2000 (Huh-7 および Hepa 1-6の各々について5 μg/mL および 10 μg/ml)を用いて、オリゴヌクレオチド(0.04-25 nM)の異なる濃度を用いて二連にてトランスフェクトした。トランスフェクションを、基本的にはDean et al.(1994, JBC 269:16416-16424)により記載したとおりに行った。要するに、細胞を、OptiMEM中のリポフェクタミンに続いて、全容量のトランスフェクションミックス/ウェル(1.5 mL)にオリゴヌクレオチドを添加して7分間プレインキュベートした。4時間後に、このトランスフェクションミックスを回収した;細胞を洗浄し、適切な増殖培地中でおおよそ20時間(mRNA分析およびタンパク質分析) 37℃にて増殖させた。次いで、細胞をタンパク質およびRNA分析のために収集した。
全RNAの単離
全RNAを、RNeasy mini kit (Qiagen)を用いて単離した。細胞を、PBSで洗浄し、1% メルカプタエタノールを添加した細胞溶融緩衝液(RTL, Qiagen)をウェルに直接添加した。数分後、サンプルを製造者の指示書に従って処理した。
第一鎖の合成を、OmniScript 逆転写酵素キットまたはM-MLV 逆転写酵素のいずれかを用いて(基本的には製造社(Ambion)による記述どおり)、製造者(Qiagen)の指示書に従って行った。OmniScript 逆転写酵素を用いた場合に、0.5 μgの全RNAの各サンプルを、12μlに調整し、ポリ (dT)12-18 (0.5 μg/μl) (Life Technologies) (0.2 μl)、2 μl dNTP mix (各々5 mM)、10x RT 緩衝液(2 μl)、RNAguardTM RNase 阻害剤(33ユニット/mL, Amersham)(0.5 μl)およびOmniScript 逆転写酵素(1 μl)と共に混合した後、続いて60分間37℃でインキュベーションを行い、5分間93℃で加熱する不活性化を行った。
apoB mRNA 発現を、化合物の配列番号26-50による処置後に、Huh-7 細胞内のリアルタイム定量PCRにより決定した。データを、GAPDHに対して規準化し、モックコントロールに対して規準化した(図1AおよびB)。
血漿中の総コレステロールレベルをABX Pentraからの比色分析アッセイコレステロールCPを用いて測定した。該コレステロールを、酵素分解および酸化後に測定した。水(21.5 μL)を、血清(3 μL)に添加した。試薬(250 μL)を15分以内に添加し、該コレステロール含量を540 nMの波長で測定した。各動物に対する測定値を、二連で行った。感受性および 直線性をコントロール化合物(ABX Pentra N control)の連続希釈を用いて試験した。該コレステロールレベルを、バックグラウンドを控除して決定し、生理食塩水処理マウスの血清中のコレステロールレベルに対し相対的に表す。
LNAオリゴヌクレオチドは、標準食(standard chow diet)にてC57BL/6Jメスマウスに投与した下記の本試験に含めた。
この試験では、マウスに、2つの異なる用量レベル(配列番号28、29、44 および 45の10 mg/kg)にて、週に一回、4週間(合計5回の投与)、LNAオリゴヌクレオチドを皮下投与した。血清を、週に1回および屠殺時(最終投与後48時間)にサンプル採取して、総コレステロールに対する化合物の効果を試験した。
この試験では、マウスに、週に1回、4週間(合計5回投与)、LNAオリゴヌクレオチドを皮下投与した。配列番号45を、4つの異なる用量レベル(0.02、0.4、2 および 10 mg/kg/週)で投与し、一方で配列番号29および51を10 mg/kg/週にて投薬した。血清を週に一回および屠殺時(最終投与48時間後)にサンプル採取し、総コレステロールに対するこの化合物の効果を試験した。
マウスを、0日目に配列番号29の異なる用量レベル(1、2.5、5 および 10 mg/kg)にて静脈内の投与を1回行い、血清コレステロールを、0、1、3、8、16、24および32日目に測定した。オリゴヌクレオチドの投与後1日目に既に、5および10 mg/kgにて総コレステロールに対して顕著な効果を得た。コレステロールに対する最大効果を3日目に測定した;1、2.5、5および10 mg/kg各々についての総血清コレステロールにおいて16%、36%、42%および70%の低下であった。24日後の総コレステロールレベルは、5および10 mg/kg用量レベルの群において、依然として13%および19%まで有意に低下した(図4A)。
マウスに、70日間、一週間に1回または一週間に2回、用量レベル1、2.5または5 mg/kgにて配列番号29を皮下投与した。処置期間の後、マウスを屠殺前の7または21日目に回復させた。血清を、最初の5週間の間は一週間に1回サンプル採取し、その後35日目から63日目は二週間に1回サンプルを採取して、再び63日目から91日目は一週間に1回サンプルを採取した。週に1回投薬した群では、14日目に(2回の投薬後)、総血清コレステロールは、2.5および5 mg/kgの用量レベルについて、おおよそ30-40%低下の持続レベルに到達し、一方で1 mg/kg 用量レベルは、処置期間中で総コレステロールにおいてわずか10%の低下の平均持続効果を示した(図5A)。投薬頻度を二週間に1回まで低下すると、総コレステロールにおける徐放性低下が、35日以降に2.5 および 5 mg/kg 用量レベルについて30% および 20% 得られた。1mg/kgの用量レベルは、総コレステロールにおけるいずれの低下も示さなかった(図5B)。
Claims (12)
- 合計10-30のヌクレオチドの連続するヌクレオチド配列を含む10−30のヌクレオチド長の一本鎖オリゴマーであって、該連続するヌクレオチド配列が、哺乳類APO-B100遺伝子またはmRNA、例えばヒトAPO-B100 mRNAまたはその天然変異体の逆の相補体に対応する領域と少なくとも80% 相同であり、該連続するヌクレオチド配列が、配列番号4、3、19または20あるいは配列番号1-25のいずれかに対応する領域と少なくとも80%相同である、一本鎖オリゴマー。
- 該連続するヌクレオチド配列が、ヒトAPO-B100 mRNAの対応する領域の逆の相補体とのミスマッチを含まない、または1または2のミスマッチを含む、請求項1記載のオリゴマー。
- 該オリゴマーのヌクレオチド配列が該連続するヌクレオチド配列からなる、請求項1-2のいずれか一項に記載のオリゴマー。
- 該連続するヌクレオチド配列が10-18のヌクレオチド長である、請求項1-3のいずれか一項に記載のオリゴマー。
- 該連続するヌクレオチド配列がヌクレオチドアナログを含む、請求項1-4のいずれか一項に記載のオリゴマー。
- 該ヌクレオチドアナログが、糖改変型ヌクレオチドであり、例えばロックされた核酸(LNA)ユニット、2'-O-アルキル-RNAユニット、2'-OMe-RNAユニット、2'-アミノ-DNAユニット、および2'-フルオロ-DNAユニットからなる群から選択される糖改変型ヌクレオチドである、請求項5に記載のオリゴマー。
- 該ヌクレオチドアナログがLNAである、請求項5に記載のオリゴマー。
- ギャップマーである、請求項5-7のいずれか一項に記載のオリゴマー。
- 配列番号:26-50のいずれか1つからなるか、またはそれを含む、請求項1-8のいずれか一項に記載のオリゴマー。
- 配列番号:28、29、44または45のいずれか1つからなるか、またはそれを含む、請求項1-9のいずれか一項に記載のオリゴマー。
- APO-B100遺伝子またはmRNAを発現している細胞内でAPO-B100の遺伝子またはmRNAの発現を阻害する、請求項1-10のいずれか一項に記載のオリゴマー。
- 請求項1-11のいずれか一項に記載のオリゴマーおよび該オリゴマーに共有結合した少なくとも一つの非ヌクレオチドまたは非ポリヌクレオチド部分を含む、コンジュゲート。
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