JP2012500011A - 熱処理なしのキャノーラタンパク質単離物「C200Ca」の製造 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2008年8月18日出願の米国特許仮出願第61/136,193号から米国特許法第119条(e)に基づいて優先権を主張する。
発明の分野
本発明は、キャノーラタンパク質単離物の製造に関する。
少なくとも100wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有するキャノーラ油糧種子タンパク質単離物は、本譲受人に譲渡され、その開示が参照により本明細書に組み込まれた、同時係属の2002年5月3日出願の米国特許出願第10/137,391号(米国特許出願公開第2003−0125526A1号およびWO02/089597)および2004年6月9日出願の米国特許出願第10/476,230号(米国特許出願公開第2004−0254353A1号)に記載の方法によって油糧種子粗粉から形成することができる。この手順は、塩水溶液を用いてキャノーラ油糧種子粗粉を抽出するステップと、得られたタンパク質水溶液を残留油糧種子粗粉から分離するステップと、選択的膜技術を用いてイオン強度を実質的に一定に維持しながら、水溶液のタンパク質濃度を少なくとも約200g/Lに増加させるステップと、得られた濃縮タンパク質溶液を冷水中に希釈し、タンパク質のミセルの形成をもたらすステップと、タンパク質のミセルを沈降させて非晶質、粘着性で、ゼラチン状のグルテン様タンパク質ミセル塊(protein micellar mass)(PMM)を形成するステップと、タンパク質ミセル塊を、少なくとも約100wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有する上澄み液から回収するステップとを含む多数のステップのプロセスを含む。本明細書で用いる場合、タンパク質含量は、乾燥重量基準で測定される。回収したPMMは乾燥することができる。
キャノーラタンパク質ミセル塊の沈殿による上澄み液にカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、約5mS〜約30mS、好ましくは約8〜約10mSの導電率を得て、フィチン酸カルシウム沈殿物を形成させるステップと、
沈殿したフィチン酸カルシウムを得られた溶液から除去して透明な溶液を得るステップと、
場合により、透明な溶液のpHを、塩酸の添加などにより、約2.0〜約4.0、好ましくは約2.9〜約3.2に調整するステップと、
場合によりpH調整した透明な溶液を、少なくとも約50g/L、好ましくは約50〜約500g/L、より好ましくは約100〜約250g/Lのタンパク質含量まで濃縮して透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を得るステップと、
場合により、透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を、数倍容(volumes)のpH3の水などにより透析濾過するステップと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色除去ステップを行うステップと、
濃縮タンパク質溶液を乾燥させるステップと
を含む方法を提供する。
キャノーラタンパク質単離物を提供するプロセスの最初のステップは、キャノーラ油糧種子粗粉からタンパク質性物質(proteinaceous material)を可溶化させることを含む。キャノーラ油糧種子粗粉から回収したタンパク質性物質(proteinaceous material)は、キャノーラ種子中に天然に存在するタンパク質であってよく、またはそのタンパク質性物質(proteinaceous material)は、遺伝子操作によって改変されているが、天然のタンパク質の特徴的な疎水性および極性の特性を有しているタンパク質であってよい。キャノーラ粗粉は、例えば高温ヘキサン抽出法または冷オイル押出法によって得られる、異なるレベルの非変性タンパク質を有するキャノーラ油糧種子から、キャノーラ油を除去することによって得られる任意のキャノーラ粗粉であってよい。キャノーラ油糧種子からのキャノーラ油の除去は、通常、本明細書に記載のタンパク質単離物の回収手順とは別の操作として行われる。
この例では、カルシウム塩を上澄み液に添加し、沈殿物を除去し、次いで、溶液を酸性化し、さらに処理する、本発明の一実施形態による新規なキャノーラタンパク質単離物の製造方法を説明する。
この例では、さらなる処理なしで乾燥させた場合に、カルシウム塩の上澄み液への添加により形成した沈殿物を酸性化およびさらなる処理の前に除去しない、本発明の一実施形態による単離物を生成するはずの濃縮キャノーラタンパク質溶液の製造を説明する。
この例では、さらなる処理なしで乾燥させた場合に、カルシウム塩を部分濃縮上澄み液に添加し、沈殿物を除去し、サンプルを酸性化する本発明の一実施形態に従って、単離物を生成するはずの濃縮キャノーラタンパク質溶液の製造を説明する。
Claims (9)
- 乾燥重量基準で少なくとも約90wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を調製する方法であって、
キャノーラタンパク質ミセル塊(canola protein micellar mass)の沈殿による上澄み液に、カルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、約5mS〜約30mS、好ましくは約8〜約10mSの導電率を得て、フィチン酸カルシウム沈殿物を形成させるステップと、
沈殿したフィチン酸カルシウムを得られた溶液から除去して、透明な溶液を得るステップと、
場合により、前記透明な溶液のpHを、塩酸の添加などにより、約2.0〜約4.0、好ましくは約2.9〜約3.2に調整するステップと、
場合によりpH調整した前記透明な溶液を、少なくとも約50g/L、好ましくは約50〜約500g/L、より好ましくは約100〜約250g/Lのタンパク質含量まで濃縮して、透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を生成するステップと、
場合により、前記透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を、数倍容(volumes)のpH3の水などにより透析濾過するステップと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色除去ステップを行うステップと、
前記濃縮タンパク質溶液を乾燥させるステップと
を含む方法。 - 乾燥重量基準で少なくとも約90wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を調製する方法であって、
キャノーラタンパク質ミセル塊(canola protein micellar mass)の沈殿による上澄み液を、約50g/L以下の濃度まで部分的に濃縮するステップと、
前記部分濃縮上澄み液にカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、約2mS〜約30mS、好ましくは約4mS〜約10mSの導電率を得て、前記部分濃縮上澄み液からフィチン酸カルシウムを沈殿させるステップと、
沈殿したフィチン酸カルシウムを得られた溶液から除去して、透明な溶液を得るステップと、
場合により、前記透明な溶液のpHを、塩酸の添加などにより、約2.0〜約4.0、好ましくは約2.9〜約3.2に調整するステップと、
場合によりpH調整した前記透明な溶液を、少なくとも約50g/L、好ましくは約50〜約500g/L、より好ましくは約100〜約250g/Lのタンパク質含量まで濃縮して、透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を生成するステップと、
場合により、前記透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を、数倍容(volumes)のpH3の水などにより透析濾過するステップと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色除去ステップを行うステップと、
前記濃縮タンパク質溶液を乾燥させるステップと
を含む方法。 - 乾燥重量基準で少なくとも約90wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を調製する方法であって、
キャノーラタンパク質ミセル塊(canola protein micellar mass)の沈殿による上澄み液を、少なくとも約50g/L、好ましくは約50〜約500g/L、より好ましくは約100〜約250g/Lのタンパク質含量まで濃縮して、濃縮上澄み液を生成するステップと、
前記濃縮上澄み液にカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、約2〜約30mS、好ましくは約4〜約10mSの導電率を得て、フィチン酸カルシウムの沈殿を引き起こすステップと、
得られた溶液からフィチン酸カルシウムを除去して、透明な溶液を得るステップと、
場合により、前記透明な溶液のpHを、塩酸の添加などにより、約2.0〜約4.0、好ましくは約2.9〜約3.2に調整するステップと、
前記透明な、場合によりpH調整した溶液(clear optionally pH−adjusted solution)を、数倍容(volumes)のpH3の水などにより、場合により透析濾過するステップと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色除去ステップを行うステップと、
前記透明な、場合によりpH調整したタンパク質溶液を乾燥させるステップと
を含む方法。 - 乾燥重量基準で少なくとも約90wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を調製する方法であって、
初期量のカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを、キャノーラタンパク質ミセル塊(canola protein micellar mass)の沈殿による上澄み液に添加して、約1〜約3.5、好ましくは約1〜約2mSであり、フィチン酸カルシウムの沈殿を引き起こすには不十分な導電率を得るステップと、
得られた溶液のpHを、塩酸の添加などにより、約2.0〜約4.0、好ましくは約2.9〜約3.2に調整して、酸性化溶液を形成させるステップと、
前記酸性化溶液を約50g/L以下のタンパク質濃度まで部分的に濃縮するステップと、
さらなる量のカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、約4mS〜約30mS、好ましくは約4〜約10mSの導電率を得て、沈殿物を形成させるステップと、
得られた溶液から前記沈殿物を除去して、透明なpH調整した溶液を得るステップと、
前記透明なpH調整した溶液を、少なくとも約50g/L、好ましくは約50〜約500g/L、より好ましくは約100〜約250g/Lのタンパク質含量まで濃縮して、透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を生成するステップと、
場合により、前記透明なキャノーラタンパク質溶液を、数倍容(volumes)のpH3の水などにより透析濾過するステップと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色除去ステップを行うステップと、
前記濃縮タンパク質溶液を乾燥させるステップと
を含む方法。 - 乾燥重量基準で少なくとも約90wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を調製する方法であって、
キャノーラタンパク質ミセル塊(canola protein micellar mass)の沈殿による上澄み液にカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、約5mS〜約30mS、好ましくは約8〜約10mSの導電率を得て、上澄み液からフィチン酸カルシウムの沈殿を引き起こすステップと、
前記フィチン酸カルシウム沈殿物を除去することなく、得られた溶液のpHを、塩酸の添加などにより、約2.0〜約4.0、好ましくは約2.9〜約3.2に調整して、前記沈殿物を溶解させ、透明なpH調整した溶液を形成するステップと、
前記透明なpHを調整した溶液を、少なくとも約50g/L、好ましくは約50〜約500g/L、より好ましくは約100〜約250g/Lのタンパク質含量まで濃縮して透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を得るステップと、
場合により、前記透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を、数倍容(volumes)のpH3の水などにより透析濾過するステップと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色除去ステップを行うステップと、
前記濃縮タンパク質溶液を乾燥させるステップと
を含む方法。 - 乾燥重量基準で少なくとも約90wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を調製する方法であって、
キャノーラタンパク質ミセル塊(canola protein micellar mass)の沈殿による上澄み液を、約50g/L以下の濃度まで部分的に濃縮するステップと、
前記部分濃縮上澄み液にカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、約2mS〜約30mS、好ましくは約4mS〜約10mSの導電率を得て、前記部分濃縮上澄み液からフィチン酸カルシウムを沈殿させるステップと、
前記フィチン酸カルシウム沈殿物を除去することなく、得られた溶液のpHを、塩酸の添加などにより、約2.0〜約4.0、好ましくは約2.9〜約3.2に調整して、前記沈殿物を溶解させ、透明なpH調整した溶液を形成させるステップと、
pH調整した前記透明な溶液を、少なくとも約50g/L、好ましくは約50〜約500g/L、より好ましくは約100〜約250g/Lのタンパク質含量まで濃縮して、透明な濃縮キャノーラタンパク質溶液を生成するステップと、
場合により、前記透明なキャノーラタンパク質溶液を、数倍容(volumes)のpH3の水などにより透析濾過するステップと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色除去ステップを行うステップと、
前記濃縮タンパク質溶液を乾燥させるステップと
を含む方法。 - 乾燥重量基準で少なくとも約90wt%(N×6.25)のタンパク質含量を有するキャノーラタンパク質単離物を調製する方法であって、
キャノーラタンパク質ミセル塊(canola protein micellar mass)の沈殿による上澄み液を、少なくとも約50g/L、好ましくは約50〜約500g/L、より好ましくは約100〜約250g/Lのタンパク質含量まで濃縮して、濃縮上澄み液を生成するステップと、
前記濃縮上澄み液にカルシウム塩、好ましくは塩化カルシウムを添加して、約2〜約30mS、好ましくは約4〜約10mSの導電率を得て、フィチン酸カルシウムの沈殿を引き起こすステップと、
前記フィチン酸カルシウム沈殿物を除去することなく、得られた溶液のpHを、塩酸の添加などにより、約2.0〜約4.0、好ましくは約2.9〜約3.2に調整して、前記沈殿物を溶解させ、透明なpH調整した溶液を形成させるステップと、
場合により、前記透明なpH調整した溶液を、数倍容(volumes)のpH3の水などにより透析濾過するステップと、
場合により、粒状活性炭処理などの着色除去ステップを行うステップと、
前記透明なpH調整したタンパク質溶液を乾燥させるステップと
を含む方法。 - 請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法により製造されるキャノーラタンパク質単離物。
- 請求項8に記載のキャノーラタンパク質単離物が溶解している酸性溶液。
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