JP2012225932A - 対象の微生物汚染を評価するための分析機器および方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】較正曲線上の一方の点は、x切片値(すなわち、サンプルを培養の開始時に実質的に即時にt閾値に達するようにさせるのに有効な、サンプル中の試験の開始時(t0)における最小生存好気性菌数の対数の推定値または実験値)である。もう一方の点は、t0でのより小さい既知生存好気性菌数を有するサンプルから実験的に確認される。
【選択図】図1
Description
y=mx+b (式1)
ここで、
x=t0における、サンプルの単位重量、容積またはサンプルを得るためにスワブされた面積あたりの生存好気性菌数の対数、
y=t閾値、
x切片=(−b/m)=サンプルを培養の開始時に実質的に即時にt閾値に達するようにさせるのに有効な、サンプル中のt0における最小生存好気性菌数の対数の推定値または実験値、
m(傾き)=(y2−y1)/(x2−x1)であり、
x1およびy1は、既知xを有する対象から採取されたサンプルのt閾値を確立することによって実験的に確認されるものであり、
x2およびy2は、x切片でのxおよびyの値(−b/m,0)である。
y=mx+b (式1)
ここで、
x=t0における、サンプルの単位重量、容積、またはサンプルを得るためにスワブされた面積あたりの生存好気性菌数の対数、
y=t閾値、
x切片=(−b/m)=サンプルを培養の開始時に実質的に即時にt閾値に達するようにさせるのに有効な、サンプル中のt0における最小生存好気性菌数の対数の推定値または実験値、
m(傾き)=(y2−y1)/(x2−x1)であり、
x1およびy1は、既知xを有する対象から採取されたサンプルのt閾値を確立することによって実験的に確認されるものであり、
x2およびy2は、x切片でのxおよびyの値(−b/m,0)である。
本発明は、対象(図示せず)から採取された培養サンプル50中の酸素濃度の変化をモニタリングすることと、容易に較正可能な一次方程式を使用して観察された変化を、培養前のサンプル50中の生存好気性菌数と関連付けることとによって、対象(図示せず)の微生物汚染を評価するための機器および方法を対象とする。
プローブ30を含有するバイアル20は、(A)酢酸エチルなどの有機溶媒(図示せず)中にフォトルミネッセンス酸素感受性色素と、酸素透過性ポリマーとを含有するコーティングカクテル(図示せず)を調製することと、(B)シリンジ(図示せず)を使用することなどによって、保持チャンバー29の底22にカクテルを置くことと、(C)カクテル(図示せず)を乾燥させ、それによって、固体状態コーティングが、バイアル20の底22で保持チャンバー29内に形成され、それによって、バイアル20内にプローブ30を形成することによって従来的に製造できる。
対象の微生物汚染は、(a)対象から採取したサンプル50を得ることおよびプローブ30を備えた容器20の保持チャンバー29中に置くことと、(b)場合により、サンプル50を規定の期間、消化することと、(c)置かれたサンプル50内に含有される微生物の増殖を支持するために必要かつ適当な場合には、場合により、増殖培地40を保持チャンバー29中に置くことと、(d)時間t0で出発して、サンプル50を培養することと、(e)プローブ30で検出されるO2濃度が閾値より下に低下するまで、培養サンプル50のO2濃度を定期的に確認することと、(f)t0から、O2濃度が閾値よりも下に低下した時点までに測定される期間t閾値を確立することと、(g)次に示す一次方程式を使用して、t閾値を、培養前のサンプル中の生存好気性菌数と関連付けることとによって評価できる。
y=mx+b (式1)
ここで、
x=t0における、サンプルの単位重量、容積または、サンプルを得るためにスワブされた面積あたりの生存好気性菌数の対数、
y=t閾値、
x切片=(−b/m)=サンプルを培養の開始時に実質的に即時にt閾値に達するようにさせるのに有効な、サンプル中のt0における最小生存好気性菌数の対数の推定値または実験値、
m(傾き)=(y2−y1)/(x2−x1)
ここで、
x1およびy1は、既知xを有する対象から採取されたサンプルのt閾値を確立することによって実験的に確認されるものであり、
x2およびy2は、x切片でのxおよびyの値(−b/m,0)である。
密閉されたサンプル50が規定量または%の酸素を消費するのに必要な時間からサンプル50中の好気性菌の総生存数(TVC)を調べるために、図1に表されるものなどのt閾値対TVCの先に確立された較正曲線を使用することが必要である。
y=mx+b (式1)
ここで、
x=t0における、サンプルの単位重量、容積、またはサンプルを得るためにスワブされた面積あたりの生存好気性菌数の対数、
y=t閾値、
x切片=(−b/m)=サンプルを培養の開始時に実質的に即時にt閾値に達するようにさせるのに有効な、サンプル中のt0における最小生存好気性菌数の対数の推定値または実験値、
m(傾き)=(y2−y1)/(x2−x1)
ここで、
x1およびy1は、既知xを有する対象から採取されたサンプルのt閾値を確立することによって実験的に確認されるものであり、
x2およびy2は、x切片でのxおよびyの値(−b/m,0)である。
実施例1(予測)
剥離されたサンプル
プローブ30において酸素感受性色素の蛍光を測定することによってプローブ30と流体連結しているサンプル50中のO2濃度を決定できる検査装置10に、特定の種類のサンプル50の1種のサンプル50からy(t閾値)を実験的に得ると、方程式1をx(t0における、サンプルの単位重量、容積またはサンプルを得るためにスワブされた面積あたりの生存好気性菌数の対数)について解くことができる、種々の特定の種類のサンプルのm(傾き)およびb(y切片)の値を提供する。
スワブされたサンプル
プローブ30において酸素感受性色素の蛍光を測定することによってプローブ30と流体連結しているサンプル50中のO2濃度を決定できる検査装置10に、特定の種類のサンプル50の1種のサンプル50からy(t閾値)を実験的に得ると、方程式1をx(t0における、サンプルの単位重量、容積またはサンプルを得るためにスワブされた面積あたりの生存好気性菌数の対数)について解くことができる、種々の特定の種類のサンプルのm(傾き)およびb(y切片)の値を提供する。
10 検査装置
15 検査装置のディスプレイ構成要素
16 マイクロプロセッサ
20 容器、バイアルまたはキュベット
21 容器、バイアルまたはキュベットの開放上端
22 容器、バイアルまたはキュベットの密閉下端
29 容器、バイアルまたはキュベットの保持チャンバー
30 プローブ
40 増殖培地
50 サンプル
51 サンプルを含有するスワブ
Claims (28)
- 対象の微生物汚染を評価する方法であって、
(a)時間t0で出発して、対象から採取したサンプルを培養する段階と、
(b)培養サンプルのO2濃度を、検出されるO2濃度が閾値より下に低下するまで定期的に確認する段階と、
(c)t0からO2濃度が閾値より下に低下した時点までに測定される期間t閾値を確立する段階と、
(d)下記の一次方程式[式1]を使用して、t閾値を、培養前のサンプル中の生存好気性菌数と関連付ける段階と、
を有する方法。
y=mx+b・・・ [式1]
ここで、
x=t0における、サンプルの単位重量、容積またはサンプルを得るためにスワブされた面積あたりの生存好気性菌数の対数、
y=t閾値、
x切片=(−b/m)=サンプルを培養の開始時に実質的に即時にt閾値に達するようにさせるのに有効な、サンプル中のt0における最小生存好気性菌数の対数の推定値または実験値、
m(傾き)=(y2−y1)/(x2−x1)であり、
x1およびy1は、既知xを有する対象から採取されたサンプルのt閾値を確立することによって実験的に確認されるものであり、
x2およびy2は、x切片でのxおよびyの値(−b/m,0)である。 - 対数が自然対数である、請求項1に記載の方法。
- サンプルが、対象から剥離された試料であり、x=t0におけるサンプルの単位重量または容積あたりの生存好気性菌数の対数である、請求項1に記載の方法。
- サンプルが、対象の表面から採取されたスワブサンプリングであり、x=t0におけるサンプルを得るためにスワブされた対象の単位面積たりの生存好気性菌数の対数である、請求項1に記載の方法。
- 表面の衛生化を検証する目的で、スワブサンプリングを、表面を衛生的にした後に採取する、請求項4に記載の方法。
- 対象が食料品であり、t0が、サンプルを時間tstomachの規定の期間消化した後に生じる、請求項3に記載の方法。
- tstomachが、細菌の誘導期増殖内に完了する、請求項6に記載の方法。
- 培養サンプルのO2濃度を、少なくとも毎時1回確認する、請求項1に記載の方法。
- O2濃度閾値が、t0におけるO2濃度の25%から75%の間の低下である、請求項1に記載の方法。
- t閾値を、培養前のサンプル中の生存好気性菌数と関連付けることが、一次方程式をxについて解くことによって達成される、請求項1に記載の方法。
- t閾値を、培養前のサンプル中の生存好気性菌数と関連付けることが、ルックアップテーブルの使用によって達成される、請求項1に記載の方法。
- x切片が実験値である、請求項1に記載の方法。
- x切片が、6から10の間の推定値である、請求項1に記載の方法。
- サンプルを、酸素感受性フォトルミネッセンス色素の存在下で密閉チャンバー中で培養し、培養サンプルのO2濃度を酸素感受性色素の蛍光を測定することによって確認する、請求項1に記載の方法。
- 酸素感受性色素の発光寿命が、培養サンプルのO2濃度の変化に応じて変化する、請求項14に記載の方法。
- 酸素感受性フォトルミネッセンス色素が、サンプルと物理的に接触する酸素透過性疎水性ポリマーマトリックス内に埋め込まれている、請求項14に記載の方法。
- 酸素感受性フォトルミネッセンス色素を、サンプル中に溶解する、請求項14に記載の方法。
- O2センサと、センサと電気的に連通しているマイクロプロセッサとを含む分析機器であって、
(i)対象から採取された培養サンプルのO2濃度を定期的に確認し、
(ii)サンプルの培養が開始された時間t0から、サンプルの確認されたO2濃度が最初に閾値より下に落ちた時点までの期間t閾値を決定し、
(iii)下記の一次方程式[式1]を使用して、t閾値を、培養前のサンプル中の生存好気性菌数と関連付け、
(iv)xの関連付けられた値を周辺装置に送信する、
のに有効である機器。
y=mx+b・・・ [式1]
ここで、
x=t0におけるサンプルの単位重量、容積またはサンプルを得るためにスワブされた面積あたり生存好気性菌数の対数、
y=t閾値、
x切片=(−b/m)=サンプルを培養の開始時に実質的に即時にt閾値に達するようにさせるのに有効な、サンプル中のt0における最小生存好気性菌数の対数の推定値または実験値、
m(傾き)=(y2−y1)/(x2−x1)であり、
x1およびy1は、既知xを有する対象から採取されたサンプルのt閾値を確立することによって実験的に確認されるものであり、
x2およびy2は、x切片でのxおよびyの値(−b/m,0)である。 - 対数が自然対数である、請求項18に記載の機器。
- 培養サンプルのO2濃度を、少なくとも2時間に1回確認するようプログラムされている、請求項18に記載の機器。
- t0のO2濃度からの25%から75%の間の低下のO2濃度閾値を用いてプログラムされている、請求項18に記載の機器。
- 一次方程式をxについて解くことによって、t閾値を、培養前のサンプル中の生存好気性菌数と関連付ける、請求項18に記載の機器。
- ルックアップテーブルを使用することによって、t閾値を、培養前のサンプル中の生存好気性菌数と関連付ける、請求項18に記載の機器。
- 少なくともユーザーインターフェースをさらに含み、x切片が、人によって入力される実験値である、請求項18に記載の機器。
- 少なくともユーザーインターフェースをさらに含み、x切片が、人によって入力される6から10の間の推定値である、請求項18に記載の機器。
- センサが、発光寿命を有する酸素感受性フォトルミネッセンス色素と、酸素感受性色素の蛍光を測定することによって色素と流体連結している環境中のO2濃度を決定するのに有効な読み取り装置とを含む、請求項18に記載の機器。
- 酸素感受性色素の発光寿命が、培養サンプルのO2濃度の変化に応じて変化する、請求項26に記載の機器。
- 酸素感受性フォトルミネッセンス色素が、対象から採取したサンプルと物理的に接触させて配置することができる酸素透過性疎水性ポリマーマトリックス内に埋め込まれている、請求項27に記載の機器。
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