JP2012139150A - アスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 原料デンプンに、混合培養したリゾープス属菌とアスペルギルス属菌を加えて、α−アミラーゼとグルコアミラーゼを生成し、しかも、加えるリゾープス属菌とアスペルギルス属菌の割合と培養時間を制御して、α−アミラーゼとグルコアミラーゼの生産量を調整する。また、リゾープス属菌に対するアスペルギルス属菌の割合を等しく又は多くして、グルコアミラーゼの活性を高めることができる。
【選択図】図2
Description
また、特許文献1には、酒類の製造にあって、アスペルギルス属菌を用いて、グルコアミラーゼ活性を高めること、麹菌の液体培養によって発酵原料によるカタボライトリプレッション(異化産物抑制)を制御し、麹菌の液体培養によって発現する糖質分解酵素の生産性を調整することが記載されている。
引用文献1記載の技術でも同様、80℃前後の高温に加熱した原料に、耐熱性酵素剤が使用されており、加熱と耐熱性酵素剤にコストがかかるという問題が残っている。
引用文献2には、糸状菌として、アスペルギルス属菌及びリゾープス属菌を使用し、厨芥物を分解する酵素を製造することの記載はあるが、目的が厨芥物の分解であり、更には、引用文献2記載の技術は、アスペルギルス属菌及びリゾープス属菌を混ぜて混合培養するものではない。
また、アスペルギルス属菌としては、1)ニホンコウジカビ(A.oryzae)、ショウユコウジカビ(A.sojae)等で代表される黄麹菌、2)カワチコウジカビ(A.kawachii)で代表される白麹菌、3)アワモリコウジカビ(A.awamori)、アスペルギルス・ニガー(A.niger)で代表される黒麹菌等がある。また、リゾープス属菌としては、例えば、リゾープス・ニベウス(R.niveus)、リゾープス・コーニイ(R.cohnii)等がある。
図1、図2には、リゾープス属菌の一例であるリゾープス・コーニイ(R.cohnii P5)、アスペルギルス属菌の一例であるアスペルギルス・オリーゼ(A.oryzae IFO5238)、及びこれらを1対44で同時接種して混合培養した場合のα−アミラーゼと、グルコアミラーゼの活性の推移を示すものである。
図3には、各種の糸状菌の生デンプン分解活性との関係について調べた結果を示す。この実施例においては、1)2%米粉懸濁液(pH4.5)に、各種菌を含む酵素液を添加し、40℃で60分保持した。そして、各処理液を遠心分離により得た上澄み溶液中の糖量をフェノール硫酸法で測定した。なお、生デンプン分解活性(Raw Starch digestivity)は、(上澄み溶液中の糖量/初発糖量)×100(%)で表される。
図4(A)はサンプル中の総糖量を示し、(B)は糖中のグルコース量とそれ以外の低分子糖量との比を示す。これによると、アスペルギルス・オリーゼは生デンプンの分解能が高いが、グルコースが少ないので、グルコアミラーゼ活性が低い、即ち、α−アミラーゼ活性が高くて、生デンプンからグルコース以外の低分子糖を高生産することが判る。
図7(A)〜(E)はリゾープス・コーニイとアスペルギルス・オリーゼの混合比を変えて培養した場合、図7(F)は純粋培養した場合の、α−アミラーゼ活性の推移を調べたものである。混合培養にすることによって、アスペルギルス・オリーゼの純粋培養の場合よりも、α−アミラーゼの活性が下がっている。これによって、リゾープス・コーニイを適当量入れることによって、α−アミラーゼの活性を抑えることができる。
このグラフからも明らかなように、リゾープス・コーニイの純粋培養に比較して、リゾープス・コーニイとアスペルギルス・オリーゼの混合培養の方が48時間経過後の又は72時間経過後のグルコアミラーゼ活性が高いことが判る。
従って、生デンプンを用いてグルコアミラーゼを造る場合、リゾープス属菌とアスペルギルス属菌の混合培養をすれば、短時間でグルコアミラーゼを造ることができる。
また、前記実施の形態においては、原料デンプンとして生デンプンを用いたが、当然のことながら、加工デンプンであっても本発明は適用される。
Claims (5)
- 原料デンプンを含む培地に、混合培養したリゾープス属菌とアスペルギルス属菌を加えて、α−アミラーゼとグルコアミラーゼを生成し、しかも、加える前記リゾープス属菌と前記アスペルギルス属菌の割合と培養時間を制御して、前記α−アミラーゼと前記グルコアミラーゼの生産量を調整することを特徴とするアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法。
- 請求項1記載のアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法において、前記リゾープス属菌に対する前記アスペルギルス属菌の割合を等しく又は多くして、前記グルコアミラーゼの活性を高めることを特徴とするアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法。
- 請求項2記載のアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法において、前記リゾープス属菌に対する前記アスペルギルス属菌の割合が1対1〜1対251の範囲にあることを特徴とするアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法。
- 請求項1〜3のいずれか1記載のアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法において、前記アスペルギルス属菌はアスペルギルス・オリーゼであり、前記リゾープス属菌はリゾープス・コーニイであることを特徴とするアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法。
- 請求項1〜4のいずれか1記載のアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法において、前記培地は生デンプンを使用した液体培地であることを特徴とするアスペルギルス属菌及びリゾープス属菌の混合培養系を用いたアミラーゼの生産方法。
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