JP2011525914A - クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(cat)不完全ソマトスタチン融合タンパク質およびその使用 - Google Patents
クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(cat)不完全ソマトスタチン融合タンパク質およびその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2011525914A JP2011525914A JP2011516244A JP2011516244A JP2011525914A JP 2011525914 A JP2011525914 A JP 2011525914A JP 2011516244 A JP2011516244 A JP 2011516244A JP 2011516244 A JP2011516244 A JP 2011516244A JP 2011525914 A JP2011525914 A JP 2011525914A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- somatostatin
- seq
- chimeric polypeptide
- cat
- chimeric
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 title claims abstract description 85
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 title claims abstract description 85
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 title claims abstract description 76
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 title claims abstract description 66
- 108010035563 Chloramphenicol O-acetyltransferase Proteins 0.000 title claims description 55
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 title description 27
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 title description 27
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 60
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 58
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 58
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims abstract description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 claims abstract description 19
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 51
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 43
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 27
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 27
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 21
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 21
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 21
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical group NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 20
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 18
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 16
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 16
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 15
- 239000004471 Glycine Chemical group 0.000 claims description 9
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 9
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims description 9
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 6
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 claims description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 5
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 claims description 5
- 244000144972 livestock Species 0.000 claims description 5
- 229920006158 high molecular weight polymer Polymers 0.000 claims description 4
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 4
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 4
- PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N Sorbitan trioleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PRXRUNOAOLTIEF-ADSICKODSA-N 0.000 claims description 3
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 claims description 3
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 claims description 3
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 claims description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims description 2
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 claims description 2
- 239000000568 immunological adjuvant Substances 0.000 claims description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims 1
- 235000020997 lean meat Nutrition 0.000 claims 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 72
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 abstract description 7
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 abstract description 7
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 abstract description 7
- 230000009851 immunogenic response Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 22
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 17
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 13
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 244000309466 calf Species 0.000 description 12
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 description 11
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 11
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 10
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 10
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 9
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 9
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 8
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 7
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 7
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 7
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 6
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 6
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 5
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 5
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 4
- MGSKVZWGBWPBTF-UHFFFAOYSA-N aebsf Chemical compound NCCC1=CC=C(S(F)(=O)=O)C=C1 MGSKVZWGBWPBTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 108091006116 chimeric peptides Proteins 0.000 description 3
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000003673 groundwater Substances 0.000 description 3
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 3
- -1 histidine amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 208000018756 Variant Creutzfeldt-Jakob disease Diseases 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 2
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 2
- 208000005881 bovine spongiform encephalopathy Diseases 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 238000011013 endotoxin removal Methods 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 238000001794 hormone therapy Methods 0.000 description 2
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 239000002684 recombinant hormone Substances 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 2
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 2-Propenoic acid Natural products OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ATVJXMYDOSMEPO-UHFFFAOYSA-N 3-prop-2-enoxyprop-1-ene Chemical compound C=CCOCC=C ATVJXMYDOSMEPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 230000005730 ADP ribosylation Effects 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000589155 Agrobacterium tumefaciens Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 238000011537 Coomassie blue staining Methods 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 1
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 102400000321 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 102000004218 Insulin-Like Growth Factor I Human genes 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 239000012722 SDS sample buffer Substances 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 108010086019 Secretin Proteins 0.000 description 1
- 102100037505 Secretin Human genes 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108050001286 Somatostatin Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000011096 Somatostatin receptor Human genes 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 1
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 1
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 1
- 241001464837 Viridiplantae Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 1
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003263 anabolic agent Substances 0.000 description 1
- 210000004198 anterior pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021052 average daily weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 230000000711 cancerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229940075508 carbomer homopolymer type b Drugs 0.000 description 1
- 231100000315 carcinogenic Toxicity 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 235000021051 daily weight gain Nutrition 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011124 ex vivo culture Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 238000009578 growth hormone therapy Methods 0.000 description 1
- PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N guanidinium chloride Chemical compound [Cl-].NC(N)=[NH2+] PJJJBBJSCAKJQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 230000026045 iodination Effects 0.000 description 1
- 238000006192 iodination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 238000005567 liquid scintillation counting Methods 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002445 nipple Anatomy 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005030 other vaccine in atc Drugs 0.000 description 1
- 230000032696 parturition Effects 0.000 description 1
- WXZMFSXDPGVJKK-UHFFFAOYSA-N pentaerythritol Chemical compound OCC(CO)(CO)CO WXZMFSXDPGVJKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004584 polyacrylic acid Substances 0.000 description 1
- 150000007519 polyprotic acids Polymers 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000030788 protein refolding Effects 0.000 description 1
- 230000006432 protein unfolding Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 235000020989 red meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- ZSLZBFCDCINBPY-YHBLMJDYSA-N s-[2-[3-[[(2r)-4-[[[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-4-hydroxy-3-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-hydroxyphosphoryl]oxy-2-hydroxy-3,3-dimethylbutanoyl]amino]propanoylamino]ethyl] ethanethioate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCS[14C](=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 ZSLZBFCDCINBPY-YHBLMJDYSA-N 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 229960002101 secretin Drugs 0.000 description 1
- OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N secretin human Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 OWMZNFCDEHGFEP-NFBCVYDUSA-N 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013605 shuttle vector Substances 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000002352 surface water Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000013077 target material Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000034512 ubiquitination Effects 0.000 description 1
- 238000010798 ubiquitination Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/655—Somatostatins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/60—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for weanlings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/31—Somatostatins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
- C12N9/1029—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
- C12N9/1033—Chloramphenicol O-acetyltransferase (2.3.1.28)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y203/00—Acyltransferases (2.3)
- C12Y203/01—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
- C12Y203/01028—Chloramphenicol O-acetyltransferase (2.3.1.28)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Abstract
Description
[0038]本明細書で頻繁に用いられる特定の用語の理解を容易にするため、以下の定義を提供し、そしてこうした定義は本開示の範囲を限定することを意味しない。
[0048]いくつかの研究によって、ソマトスタチンで免疫された動物は、10〜20%の平均一日増体重、9%の食欲減少、および食物利用効率の11%の増加を有することが示された。ソマトスタチンで免疫された動物、およびまたその子孫は、正しい比率(proportions)を有し、そして筋肉、骨および脂肪の間の動物の重量分布は、対照動物におけるのと同じである(Reichlin、1987を参照されたい)。したがって、ソマトスタチン免疫は、ターゲット動物の生産性を増進する有用でそして安全な方法を提供する。これは、その使用に関して、治療された動物由来のミルクまたは肉におけるホルモンに関する懸念、あるいは動物自身の安全性または生態系、特に地下水供給におけるホルモンの蓄積に関する懸念が生じている、組換え成長ホルモンの使用と比較した際、特に当てはまる。
[0053]本発明の1つの側面は、最適化されたソマトスタチン免疫原性活性を有するキメラタンパク質をコードする、単離核酸分子を提供する。特に、本発明の態様には、ソマトスタチンに関する免疫原性活性を有するCAT融合タンパク質をコードする新規核酸構築物が含まれる。これらのポリペプチドは、免疫法において、最適な機能的活性があると同定されてきている。
[0064]本発明はまた、本発明のポリヌクレオチド分子を含むベクター、ならびにこうしたベクターで形質転換された宿主細胞にも関する。一般的に、関心対象の増殖宿主のための選択可能マーカーおよび複製起点を含むベクターに、本発明のポリヌクレオチド分子のいずれを連結してもよい。宿主細胞がこれらのベクターを含み、そしてそれによって本発明のポリペプチドを発現するように、宿主細胞を遺伝的に操作する。一般的に、本明細書のベクターには、微生物またはウイルス宿主細胞のためのものなどの、適切な転写または翻訳制御配列に機能可能であるように連結された、本発明のポリヌクレオチド分子が含まれる。制御配列の例には、転写プロモーター、オペレーター、またはエンハンサー、mRNAリボソーム結合部位、ならびに転写および翻訳を制御する適切な配列が含まれる。ヌクレオチド配列は、本明細書の制御配列が、本発明のポリヌクレオチドをコードするキメラポリペプチドに機能的に関連している場合、機能可能であるように連結されている。
[0068]ターゲット制御配列の利用を通じて、本発明のキメラポリペプチドを発現させるための、本発明の多様なプラスミドが構築されてきている。例示的なプラスミドには、T7lacプロモーターが含まれてもよい(図1を参照されたい)。
[0072]本発明の側面には、動物ワクチン接種において使用するための、そして特に、いくつかの場合、米国で育った乳牛である、農場動物のワクチン接種のための、内毒素不含でコドンが最適化されたCAT不完全ソマトスタチンの使用が含まれる。内毒素不含材料は、米国で育ちそして飼育された畜牛に関して特に重要である(例えば、Drackley, JK 2004. Physiological adaptations in transition dairy cows. pp 74−87, Proc. Minnesota Dairy Herd Health Conf.中, ミネソタ州セントポール, ミネソタ大学, セントポール)。
[0083]本発明の態様は、体液性免疫の誘導増進のための新規アジュバントを提供する。これらのアジュバントは、体液性応答の誘導のための慣用的な材料に勝る有意な改善を提供する。本明細書のアジュバントは、多くのワクチンとともに使用可能であるが、実施例には、乳牛、ブタまたは雄の子ウシにおけるワクチン接種のための本発明のポリペプチドを伴う使用を示す。
[0086]本明細書で使用するための例示的な水中油エマルジョンには、ミネラルオイル、Tween80、Span85およびターゲットポリマー(ベンゼン不含ポリアクリル酸)の組み合わせが含まれる。いくつかの場合、ターゲットポリマーは、CarbomerホモポリマーB型からなる群より選択される。典型的な油−水エマルジョンは、約8〜10%ミネラルオイル(v/v)、0.003〜0.004% Tween80(v/v)、0.007〜0.008 Span85(v/v)および0.04〜0.06%ポリマー(w/v)を含む。
[0089]本発明の組成物および方法にしたがって、本明細書記載の免疫原性組成物(内毒素不含でコドンが最適化されたCAT不完全ソマトスタチン構築物)を、上述のような新規アジュバントと組み合わせて、本発明のワクチンを提供する。1つの態様において、2.98mg/2ml(このうち5〜25%がアジュバント(v/v)であり、より典型的には10%〜20%がアジュバントであり、そして最も典型的には約20%がアジュバントである)の総用量で、内毒素不含でコドンが最適化されたCAT不完全ソマトスタチン構築物を投与する。他の慣用的なアジュバントが本発明の範囲内であると想定され、そしてこれを、本発明のコドンが最適化されたCAT不完全ソマトスタチン構築物とともに用いてもよいが、本明細書の新規アジュバントをこの能力で用いると、最適な結果になることが示されてきていることに留意されたい。
実施例1: CAT不完全ソマトスタチン融合タンパク質の構築
[0095]本実施例は、本発明の態様にしたがった、CAT不完全ソマトスタチン融合タンパク質の産生を例示する。プラスミドpET30b−Cat−Somに対して部位特異的突然変異誘発を行って、His192およびHis193をグリシン残基で置換した(修飾後: Gly192およびGly193)。His193(およびHis192)残基を不活性化すると、CAT酵素が陽子を受容する能力が排除され、それによってCATの完全な不活性化が提供される。
[0098]実施例1に記載するような、コドンが最適化されたCAT不完全ソマトスタチン構築物を用いて、BL21(DE3)細胞において融合タンパク質を発現させた。形質転換細胞をLB中で増殖させて、そして0.4mM IPTGでおよそ3時間誘導した。OD0.7の密度の培養から1ミリリットルの細胞をペレットにし、そして100μl SDS試料緩衝液中で、70℃で10分間加熱した。SDS PAGEのため、レーンあたり40μlの細胞抽出物試料を装填した。
[00100]本発明にしたがった例示的なワクチン:
[00102]乳牛のランダムなプール(ホルスタイン交雑種−米国で育ちそして飼育されたもの)を同定し、各々は分娩31〜65日後であった(3〜5回目の授乳)。獣医によって、各乳牛を検査し、そして最適な健康状態であると決定した。
[00107]本実施例中のデータによって、乳牛において、本発明のアジュバントと組み合わせて内毒素不含構築物を用いると、有効性の大幅な改善が示される。これらの結果は、rBSTを2回注射された(rejected)乳牛に比較すると、動物の健康および生産性に向けて劇的に改善される。
[00109]雌ブタのランダムなプールを同定し、各々は、分娩の少なくとも35〜36日前である。獣医によって、各雌ブタを検査し、そして最適な健康状態であると決定する。妊娠した雌ブタを、本発明のワクチンを用いて2回免疫し(実施例3を参照されたい)、1回は、分娩35〜36日前であり、そしてもう1回は分娩8日前である。妊娠した雌ブタの対照群を比較目的のため維持する(ワクチン接種なしまたは無菌生理食塩水でのワクチン接種)。
[00113]1〜3ヶ月齢の雄の子ウシのランダムなプールを同定し、そして本発明の組成物を注射する。およそ10ヶ月の期間に渡る体重増加を監視し、そして本発明のワクチン注射以外は、すべての意味で注射群と同じに処置した対照群と比較する。治療経過中、獣医によって、雄の子ウシ各々を検査し、そして最適な健康状態であると決定する。
[00117]本発明は、いくつかの態様に言及して特に示され、そして記載されてきているが、当業者は、本発明の精神および範囲から逸脱することなく、本明細書に開示する多様な態様に対して、形式および詳細の変化を行ってもよく、そして本明細書に開示する多様な態様は、請求項の範囲に対する限定として作用するとは意図されないことを理解するであろう。
Claims (14)
- ソマトスタチンの免疫原性を有するキメラポリペプチドであって:実質的に不活性でありそして一部切除された(truncated)クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼポリペプチドに連結されたソマトスタチン−14のアミノ酸配列を含み、該ソマトスタチン−14が、ターゲット宿主細胞におけるキメラポリペプチドの最適な発現のために最適化されたスペーサーによって該不活性クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼに連結され、そして該不活性クロラムフェニコールが、アラニン、グリシンまたは他の類似のアミノ酸で置換された少なくとも1つのヒスチジン残基193を有する、前記キメラポリペプチド。
- スペーサーが配列番号10または配列番号11のアミノ酸配列を有する、請求項1のキメラポリペプチド。
- 実質的に不活性でありそして一部切除されたクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼポリペプチドが、配列番号3、配列番号7または配列番号8のアミノ酸配列を有する、請求項1のキメラポリペプチド。
- 配列番号12のアミノ酸配列と少なくとも99%の配列同一性を持つアミノ酸配列を有する、請求項1のキメラポリペプチド。
- 配列番号12のアミノ酸配列を有する、請求項1のキメラポリペプチド。
- 免疫応答を誘発するのに有効な量の薬学的に適切なアジュバントとともに、請求項1のキメラポリペプチドを含む、免疫原性組成物。
- エマルジョンプレミックスと混合された水中油エマルジョンを含む、免疫学的アジュバントであって、水中油エマルジョンが、ミネラルオイル、Tween80、Span85および1以上のポリマーを含む、前記免疫学的アジュバント。
- エマルジョンプレミックスが、高分子量ポリマー、界面活性剤、および油水性(oil−aqueous)基剤中の乳化剤を含む、請求項7のアジュバント。
- 抗原が、天然、組換えまたは合成ポリペプチド、多糖および糖タンパク質である、あらかじめ選択された抗原をさらに含む、請求項7のアジュバント。
- 請求項8のアジュバントとともに、請求項1のキメラポリペプチドを含む、免疫原性組成物。
- 乳牛におけるミルク産生を増加させるための方法であって:
乳牛に請求項6の組成物の1以上の用量をワクチン接種し;そして
ワクチン接種の非存在下での同じ乳牛のミルク産生に比較した際、乳牛のミルク産生が、少なくとも10日間、増加することを可能にする
工程を含む、前記方法。 - 乳牛に請求項6の組成物の単一用量のみをワクチン接種する、請求項11の方法。
- 乳牛におけるミルク産生を増加させるための方法であって:
乳牛に請求項10の組成物の1以上の用量をワクチン接種し;そして
ワクチン接種の非存在下での同じ乳牛のミルク産生に比較した際、乳牛のミルク産生が、少なくとも10日間、増加することを可能にする
工程を含む、前記方法。 - 農場家畜における赤身肉産生を増加させるための方法であって;
農場家畜にワクチン接種する
工程を含む、前記方法。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
PCT/US2008/068195 WO2009157926A1 (en) | 2008-06-25 | 2008-06-25 | Chloramphenicol acetyl transferase (cat)-defective somatostatin fusion protein and uses thereof |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011525914A true JP2011525914A (ja) | 2011-09-29 |
JP2011525914A5 JP2011525914A5 (ja) | 2012-07-12 |
JP5506792B2 JP5506792B2 (ja) | 2014-05-28 |
Family
ID=41444809
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011516244A Expired - Fee Related JP5506792B2 (ja) | 2008-06-25 | 2008-06-25 | クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(cat)不完全ソマトスタチン融合タンパク質およびその使用 |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US7722881B2 (ja) |
EP (1) | EP2303314B1 (ja) |
JP (1) | JP5506792B2 (ja) |
KR (1) | KR101555731B1 (ja) |
CN (1) | CN102105163B (ja) |
AU (1) | AU2008358353B2 (ja) |
BR (1) | BRPI0822826A2 (ja) |
CA (1) | CA2728734A1 (ja) |
DK (1) | DK2303314T3 (ja) |
ES (1) | ES2445403T3 (ja) |
IL (1) | IL209792A (ja) |
MX (1) | MX2010014082A (ja) |
NZ (1) | NZ590011A (ja) |
RU (1) | RU2501565C2 (ja) |
WO (1) | WO2009157926A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201009125B (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2728734A1 (en) | 2008-06-25 | 2009-12-30 | Braasch Biotech Llc | Chloramphenicol acetyl transferase (cat)-defective somatostatin fusion protein and uses thereof |
EP2291194B1 (en) | 2008-06-25 | 2017-02-22 | Braasch Biotech LLC | Compositions and methods for enhanced somatostatin immunogenicity |
US20150173333A1 (en) * | 2012-06-26 | 2015-06-25 | Biovalence Sdn. Bhd. | Rapid specific pathogen free animal |
WO2014072411A1 (en) | 2012-11-08 | 2014-05-15 | Phi Pharma Sa | C4s proteoglycan specific transporter molecules |
RU2526571C1 (ru) * | 2013-04-08 | 2014-08-27 | Сергей Михайлович Юдин | Инъекционный препарат для повышения спермопродукции человека и способ его применения |
WO2016029013A2 (en) | 2014-08-21 | 2016-02-25 | Braasch Biotech Llc | Methods for improving immunological response in vaccinated animals |
WO2021024020A1 (en) | 2019-08-06 | 2021-02-11 | Astellas Pharma Inc. | Combination therapy involving antibodies against claudin 18.2 and immune checkpoint inhibitors for treatment of cancer |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6316004B1 (en) * | 1993-06-22 | 2001-11-13 | T. Tikhonenko | Chimeric somatostatin containing protein and encoding DNA, plasmids of expression, method for preparing chimeric protein, strain-producers, immunogenic composition, method for increasing the productivity of farm animals |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4342832A (en) * | 1979-07-05 | 1982-08-03 | Genentech, Inc. | Method of constructing a replicable cloning vehicle having quasi-synthetic genes |
US4446235A (en) * | 1982-03-22 | 1984-05-01 | Genentech, Inc. | Method for cloning human growth hormone varient genes |
AU625394B2 (en) | 1987-11-04 | 1992-07-09 | Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik Gmbh | Alveolar surfactant proteins |
RU2034457C1 (ru) * | 1993-06-22 | 1995-05-10 | Товарищество с ограниченной ответственностью "Ветек" | Способ повышения продуктивности сельскохозяйственных животных и препарат для его осуществления |
US6025368A (en) * | 1997-02-25 | 2000-02-15 | Celtrix Pharmaceuticals, Inc. | Method for treating the symptoms of chronic stress-related disorders using IGF |
US20070048860A1 (en) * | 1997-10-10 | 2007-03-01 | The Government Of The Usa, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Carcinoembryonic antigen (CEA) peptides |
PL213561B1 (pl) * | 2004-01-09 | 2013-03-29 | Inst Biotechnologii I Antybiotykow | Sposób otrzymywania plazmidu, plazmid oraz zastosowania |
US7998930B2 (en) * | 2004-11-04 | 2011-08-16 | Hanall Biopharma Co., Ltd. | Modified growth hormones |
WO2007002597A2 (en) * | 2005-06-27 | 2007-01-04 | Biovail Laboratories International S.R.L. | Modified-release formulations of a bupropion salt |
CA2728734A1 (en) * | 2008-06-25 | 2009-12-30 | Braasch Biotech Llc | Chloramphenicol acetyl transferase (cat)-defective somatostatin fusion protein and uses thereof |
EP2291194B1 (en) | 2008-06-25 | 2017-02-22 | Braasch Biotech LLC | Compositions and methods for enhanced somatostatin immunogenicity |
-
2008
- 2008-06-25 CA CA2728734A patent/CA2728734A1/en not_active Abandoned
- 2008-06-25 NZ NZ590011A patent/NZ590011A/xx not_active IP Right Cessation
- 2008-06-25 BR BRPI0822826-4A patent/BRPI0822826A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2008-06-25 CN CN200880130533.4A patent/CN102105163B/zh active Active
- 2008-06-25 JP JP2011516244A patent/JP5506792B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-06-25 DK DK08771936.5T patent/DK2303314T3/da active
- 2008-06-25 WO PCT/US2008/068195 patent/WO2009157926A1/en active Application Filing
- 2008-06-25 RU RU2011100104/15A patent/RU2501565C2/ru active
- 2008-06-25 EP EP08771936.5A patent/EP2303314B1/en not_active Not-in-force
- 2008-06-25 MX MX2010014082A patent/MX2010014082A/es active IP Right Grant
- 2008-06-25 ES ES08771936.5T patent/ES2445403T3/es active Active
- 2008-06-25 KR KR1020107029180A patent/KR101555731B1/ko active IP Right Grant
- 2008-06-25 AU AU2008358353A patent/AU2008358353B2/en not_active Ceased
- 2008-08-26 US US12/198,579 patent/US7722881B2/en active Active
-
2010
- 2010-02-10 US US12/703,631 patent/US7943143B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2010-12-06 IL IL209792A patent/IL209792A/en active IP Right Grant
- 2010-12-20 ZA ZA2010/09125A patent/ZA201009125B/en unknown
-
2011
- 2011-03-23 US US13/069,592 patent/US8367073B2/en active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6316004B1 (en) * | 1993-06-22 | 2001-11-13 | T. Tikhonenko | Chimeric somatostatin containing protein and encoding DNA, plasmids of expression, method for preparing chimeric protein, strain-producers, immunogenic composition, method for increasing the productivity of farm animals |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
JPN6013017122; J.Pharm.Sci.,Vol.88,No.12(1999)p.1332-1339 * |
JPN6013017124; Biochem.J.,Vol.290(1993)p.15-19 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2728734A1 (en) | 2009-12-30 |
CN102105163B (zh) | 2014-12-10 |
MX2010014082A (es) | 2011-04-07 |
US20100136037A1 (en) | 2010-06-03 |
JP5506792B2 (ja) | 2014-05-28 |
AU2008358353B2 (en) | 2013-11-07 |
WO2009157926A1 (en) | 2009-12-30 |
RU2501565C2 (ru) | 2013-12-20 |
AU2008358353A1 (en) | 2009-12-30 |
US7943143B2 (en) | 2011-05-17 |
US8367073B2 (en) | 2013-02-05 |
RU2011100104A (ru) | 2012-07-20 |
KR20110039517A (ko) | 2011-04-19 |
US20120076806A1 (en) | 2012-03-29 |
IL209792A (en) | 2012-12-31 |
EP2303314B1 (en) | 2013-12-11 |
NZ590011A (en) | 2012-09-28 |
KR101555731B1 (ko) | 2015-09-25 |
CN102105163A (zh) | 2011-06-22 |
ZA201009125B (en) | 2012-06-27 |
US7722881B2 (en) | 2010-05-25 |
US20090324629A1 (en) | 2009-12-31 |
DK2303314T3 (da) | 2014-01-13 |
BRPI0822826A2 (pt) | 2015-07-07 |
ES2445403T3 (es) | 2014-03-03 |
IL209792A0 (en) | 2011-02-28 |
EP2303314A1 (en) | 2011-04-06 |
EP2303314A4 (en) | 2012-07-18 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5506792B2 (ja) | クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(cat)不完全ソマトスタチン融合タンパク質およびその使用 | |
JP5627581B2 (ja) | ソマトスタチン免疫原性増進のための組成物および方法 | |
RU2646137C2 (ru) | КОМПОЗИЦИЯ ПО ПРЕДУПРЕЖДЕНИЮ ИНФЕКЦИИ Mycoplasma spp. | |
CN111944023B (zh) | 一种抗o型口蹄疫的疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
WO2013144579A1 (en) | Use of flagellin as a vaccine | |
US11400151B2 (en) | Methods for improving immunological response in vaccinated animals | |
US10682398B2 (en) | Yeast vaccine vector including immunostimulatory and antigenic polypeptides and methods of using the same | |
JP2021127334A (ja) | 乳房炎の処置及び/又は予防のための組成物 | |
JP5561892B2 (ja) | アルスロバクターからのhsp60 | |
RU2614115C1 (ru) | Рекомбинантный соматостатинсодержащий белок, способ его получения, инъекционный препарат для повышения мясной и молочной продуктивности сельскохозяйственных животных, а также способ использования препарата | |
FANG et al. | Immunization of male mice with a new recombinant GnRH fusion protein reduces the testicular function | |
US11000579B2 (en) | Recombinant Eimeria maxima protein delivered as nanoparticles | |
Han YanGuo et al. | Evaluation of the fusion type CpG adjuvant for the enhancement of somatostatin DNA vaccine in ram lambs. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120516 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130411 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20130710 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20130718 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131009 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20131030 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140127 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140217 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140318 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5506792 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |