JP2011505160A - 医薬用途のためのプロテアーゼ変異体 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、コンピューター読み取り可能な形式の配列表を含む。そのコンピューターが読み取り可能な形式は、本明細書中に援用される。
本発明は、配列番号1の第1〜188アミノ酸に対して少なくとも90%の同一性を有するプロテアーゼであって、そして配列番号1の第1〜188アミノ酸と比較して、以下の置換:A1T;I3V;G12;R14I;T22A;N23D;G34A;R38;T41A;T44K;N47;G48D;E53K;Q54L, D;T68A, R, S;S69T;L73P;V88A;S99P;P124L;E125;M131V;T151I;R165;及びT166Aから選択された少なくとも1つの置換を含んで成る前記プロテアーゼに関する。配列番号1のプロテアーゼは、ノカルジオプシス属(Nocardiopsis sp.)由来の野性型プロテアーゼである。
酵素
「プロテアーゼ」という用語は、プロテアーゼ活性を有するポリペプチドと本明細書中に規定される。プロテアーゼは、ペプチド結合を加水分解する酵素である。それは、EC 3.4酵素グループ(それらの13個のサブクラスのそれぞれを含み、これらの酵素は以降「EC 3.4.‐.‐グループに属する」と言及される)に属するあらゆる酵素を含む。EC 番号は、それぞれEur. J. Biochem. 1994, 223, 1-5; Eur. J. Biochem. 1995, 232, 1-6; Eur. J. Biochem. 1996, 237, 1-5; Eur. J. Biochem. 1997, 250, 1-6;及びEur. J. Biochem. 1999, 264, 610-650において公開された付録1〜5を含めた、NC-IUBMB, Academic Press、San Diego, Californiaからの酵素命名法1992を参照する。前記命名法は、定期的に補足及び更新される;例えばhttp://www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzymeのワールドワイドウェブを参照のこと。
配列番号1の第1〜188アミノ酸に対して少なくとも90%の同一性を有するプロテアーゼであって、そして配列番号1の第1〜188アミノ酸と比較して、以下の置換:A1T;I3V;G12;R14I;T22A;N23D;G34A;R38;T41A;T44K;N47;G48D;E53K;Q54L, D;T68A, R, S;S69T;L73P;V88A;S99P;P124L;E125;M131V;T151I;R165;及びT166Aから選択された少なくとも1つの置換を含んで成る前記プロテアーゼである。
(b)非常に低い(好ましくは低い、中程度、中程度に高い、高い、又は最も好ましくは非常に高い)ストリンジェンシー条件下、(i)配列番号1((本明細書中に援用される)WO 2005/035747の配列番号1のヌクレオチド900〜1463)のコード配列又は(ii)(i)の完全長の相補鎖にハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされるプロテアーゼ;及び
(c)好ましくは保存的な性質の、配列番号1の成熟ポリペプチドのアミノ酸の1つ以上(例えば数個)の置換、欠失、及び/又は挿入を加えて含んで成る変異体、から成る群から選択される前記プロテアーゼである。
さらなる詳細に関しては、実施例4を参照のこと。
本発明のプロテアーゼ変異体などの酵素及び酵素変異体を得るために、遺伝子のクローニング及び(ランダム及び/又は部位特異的な)突然変異の導入のための標準的な手続きが使用できる。着目の遺伝子(例えば本明細書中の配列番号1をコードする遺伝子であるWO 2005/035747の配列番号1)は、制限部位を含むように設計されたプライマーを使用して増幅されることもできる。好適な技術のさらなる説明に関しては、Sambrook et al. (1989), Molecular cloning: A laboratory manual, Cold Spring Harbor lab., Cold Spring Harbor, NY; Ausubel, F. M. et al. (eds.) "Current protocols in Molecular Biology". John Wiley and Sons, 1995; Harwood, C. R., and Cutting, S. M. (eds.) "Molecular Biological Methods for Bacillus". John Wiley and Sons, 1990、及びWO 96/34946に言及されている。クローニング目的の関連する制限エンドヌクレアーゼを使用した着目の遺伝子と先のプラスミドの消化の後に、リガーゼを必要とする連結手順において、着目の遺伝子と上記プラスミドを繋ぐことができる。リガーゼ反応後に、連結混合物を、Ausubel, F. M. et al.に記載のようにE.コリ(E. coli)細胞を形質転換するのに使用し得る。形質転換したE.コリ細胞を液体培地中又は固形寒天プレート上で増殖させることができ、プラスミドをその形質転換細胞から取り出すことができ、そしてB.ズブチリス(B.subtilis)細胞を形質転換するのに使用できる。好適なコンピテント・バチルス細胞、例えばMB1510、168誘導体など(例えば受入番号1A1 168 trpC2でBGSCから入手可能である)を、WO 03/095658に記載の通り形質転換することもできる。
i)シグナル・ペプチド・コード領域(例えば、バチルスNCIB 11837マルトース生成型アミラーゼ、バチルス・ステアロサーモフィルス(Bacillus stearothermophilus)α‐アミラーゼ、バチルス・リケニホルミス(Bacillus licheniformis)ズブチリシン、バチルス・リケニホルミスα‐アミラーゼ、バチルス・ステアロサーモフィルス中性プロテアーゼ(nprT、nprS、nprM)、及びバチルス・ズブチリス(Bacillus subtilis)prsA遺伝子から得られるもの)とそれに続く、配列番号1のノカルジオプシス属のプロテアーゼのプロドメイン(WO 2005/035747の配列番号1の第405〜899残基)及び成熟プロテアーゼ変異体遺伝子、
を含むこともできる。この配列は、以下の:
iii)マーカー遺伝子(例えばクロラムフェニコール耐性遺伝子);及び
iv)隣接セグメントとバチルス・ゲノムの間の相同組み換えによってゲノム組み込みを可能にするための、ポリヌクレオチドの上流と下流それぞれの5’及び3’隣接セグメントとしてのバチルス・ズブチリスからのゲノムDNA、
によって先行されていてもよく、且つ、それらに作動できるように連結されてもよい。
本明細書では、用語「医薬品」は、疾患の症状を処置、予防及び/又は緩和する、好ましくは疾患の症状を処置及び/又は緩和する化合物、又は化合物の混合物を意味する。医薬品は、医師により処方されてもよく、又はそれは店頭販売の製品であってもよい。
本発明の酵素(群)の分離、精製、及び濃度は、従来の手段によって実施され得る。例えばそれらは、これだけに限定されるものではないが、遠心分離、濾過、抽出、スプレードライ、留去、又は沈殿を含めた従来の手順によって発酵ブロスから回収され、そしてこれだけに限定されるものではないが、クロマトグラフィー(例えばイオン交換、親和性、疎水性、クロマトフォーカシング及びサイズ排除)、電気泳動方法(例えば分取用等電点電気泳動)、示差溶解度(例えば硫酸アンモニウム沈殿)、SDS-PAGE又は抽出を含めた当該技術分野で知られている様々な手順によってさらに精製され得る(例えばProtein Purification, J.-C. Janson and Lars Ryden, editors, VCH Publishers, New York, 1989を参照のこと)。
さらなる特定の実施形態では、経口組成物は、(i)酵素(群)の結晶を含む液体組成物;(ii)(高度に)精製された酵素(群)の沈殿物の液体懸濁液;(iii)固形又は可溶化された形で酵素(群)を含むゲル;(iv)固定された酵素(群)又は粒子及び同様のものに吸着された酵素(群)の液体懸濁液;あるいは(v)酵素(群)含有の散剤、ペレット、顆粒剤、又は微小球体の形、所望であれば酸性安定性コーティングで任意にコーティングされる錠剤、カプセル、又は同様のものの形での固体組成物である。
本発明による使用のためのプロテアーゼは、任意に、リパーゼ及び/又はアミラーゼ(本発明の酵素(群))と組み合わせて、動物の種々疾患又は障害の治療的及び/又は予防的処置において有効である。用語「動物」は、すべての動物、そして特にヒトを含んでいる。動物の例は、非反芻動物及び反芻動物、例えばヒツジ、ヤギ、ウシ、例えば肉牛及び乳牛などである。特定の実施形態では、動物は非反芻類動物である。非反芻動物としては、単一の胃しか持たない動物、例えばウマ、(これだけに限定されるものではないが、子ブタ、成長したブタ、及び雌ブタを含めた)ブタ;家禽類、例えばシチメンチョウ、アヒル及び(これだけに限定されるものではないが、ブロイラー鶏、産卵鶏を含めた)ニワトリなど;仔牛;ペット、例えばネコ及びイヌなど;そして(これだけに限定されるものではないが、サケ、マス、ティラピア、ナマズ、及びコイを含めた)魚;及び(これだけに限定されるものではないが、小エビ及び車エビを含めた)甲殻類が挙げられる。特定の実施形態では、動物は哺乳動物、より特にヒトである。
実施例1:酵素アッセイ
ブタのパンクレアチンのリパーゼ、プロテアーゼ、及びアミラーゼ活性についてのアッセイは、FIP(Federation Internationale Pharmaceutique)並びに欧州薬局方及び米国薬局方によって公開されている。1FIP単位=1Ph.Eur.単位(欧州薬局方)。アッセイは、例えば:医薬酵素の標準化については、Federation Internationale Pharmaceutique, Scientific Section: International Commissionに記載されている。a) “Pharmaceutical Enzymes,” Editors: R. Ruyssen and A. Lauwers, E. Story Scientia, Ghent, Belgium (1978), b) European Pharmacopoeia。また、Deemester et al in Lauwers A, Scharpe S (eds.): Pharmaceutical Enzymes, New York, Marcel Dekker, 1997, p. 343-385も参照のこと。適切な酵素標準は、International Commission on Pharmaceutical Enzymes, Centre for Standards, Harelbekestraat 72, B-9000 Ghentから調達できる。
プロテアーゼFIPアッセイ、並びにプロテアーゼ、リパーゼ及びアミラーゼについての他の好適なアッセイを以下に記載する。
プロテアーゼ活性を、FIPアッセイ(Federation Internationale Pharmaceutique)、1FIP単位=1Ph.Eur.単位(欧州薬局方)を使用して測定し得る。このアッセイは、他のFIPアッセイと共に以下に記載されている:Federation Internationale Pharmaceutique, Scientific Section: 医薬酵素の標準化のためのInternational Commission。a) “Pharmaceutical Enzymes,” Editors: R. Ruyssen and A. Lauwers, E. Story Scientia, Ghent, Belgium (1978), b) European Pharmacopoeia。また、Deemester et al in Lauwers A, Scharpe S (eds.): Pharmaceutical Enzymes, New York, Marcel Dekker, 1997, p. 343-385も参照のこと。このアッセイを、パンクレアチンにおけるプロテアーゼ活性を測定するのに使用した。微生物プロテアーゼのFIP活性を測定するために、エンテロキナーゼを添加することによって活性化段階を削除した。
カゼイン溶液:
1.25gのカゼイン(乾物)、例えばCalbiochem番号218680を、実質的に透明な溶液が得られるまで水に懸濁する。pHを8.0に調整し、そしてその溶液を水で希釈し、100mlの終量にする。これ以降、水とは脱イオン水を意味する。
2.5gの塩化ナトリウム、2.85gの四ホウ酸二ナトリウム及び10.5gのホウ酸を、900mlの水に溶解し、pHをpH7.5+/−0.1に調整し、そして水で1000mlに希釈する。
125mmの直径の折り畳まれたフィルター、例えばSchleicher & Schuell番号1573 1/2。濾紙の試験:フイルターを通して5mlの5.0% トリクロロ酢酸を濾過する。濾液の275nmでの吸光度は、ブランクとして濾過していないトリクロロ酢酸溶液を使用して、0.04未満であるべきである。
International Commission on Pharmaceutical Enzymes, Centre for Standards, Harelbekestraat 72, B-9000 Ghent, Belgiumからの市販されているプロテアーゼ(膵臓)。標準はFIP/Ph.Eur.単位/gでラベルに表示されている活性(A)を有する。約130プロテアーゼ‐FIP/Ph.Eur.単位に相当する数量の正確に計量する。へらの先の海砂を加え、数滴の氷冷した0.02Mの塩化カルシウム(pH6.0〜6.2)により湿らせ、そして平らな先端のガラス棒で全体を粉砕する。約90mlの同じ氷冷した塩化カルシウム溶液により希釈し、そしてその懸濁液を氷浴中、15〜30分間撹拌する。pHを6.1に調整し、そしてその体積を、同じ塩化カルシウム溶液により100mlに調整する。5.0mlのこの懸濁液を、ホウ酸バッファーpH7.5により100mlに希釈する。活性試験のために、1.0、2.0及び3.0mlのこの溶液を基準として使用する(以下では、S1、S2及びS3と表す、標準(Standard)にちなんでS)。
約260FIP/Ph.Eur.単位に等しいサンプル量を使用して、プロテアーゼ参照標準について先に記載したように、サンプルの懸濁液を調製する。pHを6.1に調整し、そして水を100mlまで加える。5.0mlのこの溶液を、5mlの塩化カルシウム溶液と混合する。5mlのこの希釈を、ホウ酸バッファーにより100mlにさらに希釈する。アッセイのために2.0mlのこの溶液を使用する(以下では、サンプルをUnと表す、未知の活性(unknown activity)、番号(number)nのサンプル)
このアッセイを、3種類の参照懸濁液(S1、S2、S3)及びサンプル懸濁液(Un)に対して、すべて三重反復試験で実施する。1サンプルあたり1つのブランクで十分である(それぞれS1b、S2b、S3b、及びUnbと示す)。ブラインド(B)を、分光光度計のための補正液体としてサンプル/標準を含まないで調製する。ホウ酸バッファーを、以下の通り試験管に加える:ブラインド(B)3.0ml;サンプル(Un)1.0ml;標準(S1、S2及びS3)それぞれ2.0、1.0及び0ml。プロテアーゼ参照標準を、S1、S2、及びS3に、以下の通りに加える:それぞれ1.0、2.0、及び3.0ml。試験懸濁液を、以下の通りに試料管に加える(Un):2.0ml。5mlのトリクロロ酢酸を、すべてのブラインドに加え(S1b、S2b、S3b、Unb及びB)、続いてすぐに混合する。すべての試験管を、ガラス・ストッパーで止め、基質溶液と一緒に一定温度(35+/−0.5℃)の水浴中に置く。
基質:2.0mlの0.01% Triton X-100中に懸濁さした1錠のプロタザイムAK錠剤(Megazyme T-PRAK 1000)。均質な懸濁液を、撹拌することによって調製した。
温度:37℃
アッセイ・バッファー:100mMのHEPES/NaOH、0.01%のTriton X-100、pH7.0。
基質:Suc-AAPF-pNA(Sigma(登録商標) S-7388)。
アッセイ・バッファー:100mMのコハク酸、100mMのHEPES、100mMのCHES、100mMのCABS、1mMのCaCl2、150mMのKCl、0.01%のTriton(登録商標)X-100、HCl又はNaOHでpH9.0に調整した。
アッセイ温度:25℃。
基質:パラ‐ニトロフェニル(pNP)バレラート。
アッセイpH:7.7。
アッセイ温度:40℃。
反応時間:25分。
基質:Phadebas錠剤(Pharmacia Diagnostics;架橋された不溶性の青色に着色されたデンプン・ポリマー、それはウシ血清アルブミン及び緩衝物質と混合され、そして錠剤に製造される)。
アッセイ温度:37℃。
アッセイpH:4.3。
反応時間:20分。
配列番号6、7、8、9、10、及び11のプロテアーゼ変異体を、標準的な手順で調製した、要するに:遺伝子内にランダム及び/又は部位特異的突然変異を導入し、、バチルス・ズブチリス宿主細胞を突然変異遺伝子で形質転換し、(例えばWO 2004/111220の実施例1に記載のとおり)形質転換宿主細胞を発酵させ、そしてその発酵ブロスからプロテアーゼを精製する。参照プロテアーゼ(配列番号1)を、同じような様式でバチルス・ズブチリスにおいて遺伝子組み換えにより作り出した。
表1は、選択された本発明の変異体の一覧である。これらのプロテアーゼを、以下の実施例に記載の通り試験した。
プロテアーゼ変異体VAR294(配列番号6)を、pH5.6及びpH8.0におけるプロテアーゼ活性について試験し、そして以下に記載の通り、参照プロテアーゼ(配列番号1)の対応する活性と比較した。
Molecular Probes製のEnzChek(登録商標)Protease Assay Kit(Invitrogen、カタログ番号E6639)を使用した。基質として、それは、pH非感受性の赤色蛍光BODIPY(登録商標)TR-X色素で濃密に標識されているカゼイン誘導体を使用し、複合体の蛍光のほぼすべてのクエンチングをもたらした。プロテアーゼに触媒された加水分解は、高度に蛍光BODIPY TR-X色素標識されたペプチドを放出する。付随する蛍光の増大は、プロテアーゼ活性に比例している。
赤色蛍光(200μg)のためのEnzChek Protease Assay Kitの1本のチューブを、200μlの0.1M NaHCO3(pH8)中に可溶化して、1mg/mLの原液を得る。
10μlの0.5μM プロテアーゼ溶液(参照プロテアーゼ、プロテアーゼ変異体、すべて二重反復試験)を、384ウェル・プレート内で40μlのそれぞれのバッファーと混合する。室温にて60分間のインキュベーション;750rpm/分にて激しく振盪。蛍光を、t=0及びt=60分にて蛍光マイクロ・プレート・リーダーにより読み取る。BODIPY TR-X標識ペプチドは、589/617nmの励起/発光最大値を有する。標準フルオレセイン・フィルター(励起=590nm、発光=635nm)を、BODIPY TR-X色素標識ペプチドを検出するのに使用した。
t=60分の時点のpH5.6における読み取りは、t=0と比較して4倍高くなければならない。pH5.6における読み取りとpH8における読み取りの間の比を計算する。得られた数は、参照酵素のそれぞれの数より1.4倍大きくなければならない。変異体についての比を、各96ウェル・プレート上の8種類の参照ウェルの平均比と比較する。計算のために、両pH値においてt=0をt=60から引き算する。
以下の表2に挙げた変異体は、1.00のpH5.6/pH8比を有する参照プロテアーゼと比較して、pH5.6/pH8.0にて異なった活性比を有する。
精製プロテアーゼ変異体VAR294、VAR295、VAR375、VAR213、及びVAR307(配列番号6、7、8、9、及び10)を、誘発された膵臓外分泌機能不全症(PEI)を患っている3〜4匹の雌Gottingenミニブタ(Ellegaard)の群におけるプロテアーゼ・スクリーニング試験において研究した。Tabeling et al. (Tabeling et al. (1999): “Studies on nutrient digestibilities (pre-caecal and total) in pancreatic duct-ligated pigs and the effects of enzyme substitution”, J. Anim. Physiol. A. Anim. Nutr. 82: 251-263)及びGregory et al. (Gregory et al. (1999): “Growth and digestion in pancreatic duct ligated pigs, Effect of enzyme supplementation” in “Biology of the Pancreas in Growing Animals” (SG Pierzynowski & R. Zabielski eds), Elsevier Science BV, Amsterdam, pp 381-393)に別段の記載があるとおり、すべてイソフルオラン麻酔下、且つ、約25kgの体重にて、ミニブタにおいて膵管の結紮により膵臓外分泌機能不全症(PEI)を誘発し、そしてまた、それらに回腸‐盲腸リエントリー・カニューレも取り付けた。研究を開始する前、少なくとも4週間の期間を、手術からの回復に割り当てた。研究開始前に、それぞれのブタのPEI状態を、便キモトリプシン試験(Immundiagnostik AG、Wiesenstrasse 4, D-64625 Bensheim, Germanyからカタログ番号K6990で市販されている)により確認した。
研究の間、ブタを、12:12時間の明暗サイクルの改良した代謝ケージ内で飼育し、水を自由摂取させ、そして1日に2回の食餌を与えた。
試験食は、21.3%のタンパク質、51.9%のデンプン、2.6%の脂肪を含み、そして以下の組成(g/100g乾物)を有した:魚粉3.5、家禽肉粉10.2、小麦粉29.5、玄米14、ジャガイモ・デンプン11、トウモロコシ・デンプン14、カゼイン5.9、セルロース粉末4.3、ビタミン、ミネラル及び微量元素7.6(ブタ/仔ブタに対する栄養所要量による、例えばWO 01/58276の表Aを参照のこと)。
プロテアーゼ有効性を評価するために、1リットルの水、0.625gのCr2O3(酸化クロム・マーカー)と混合した単回の250g試験食であって、与える直前に異なる量の配列番号1の参照プロテアーゼ(0mg、20mg、50mg及び120mgの酵素タンパク質、0、500、1250、及び3000FIP Uのプロテアーゼ/食餌と同等)を混合したものをブタに与えた。試験自体に関しては、参照プロテアーゼのそれとインビボにおける有効性を比較するために、本発明のプロテアーゼ変異体をmg酵素タンパク質に応じて投与した(20mg、50mg及び120mg/食餌)。
凍結回腸キームス・サンプルを凍結乾燥し、粉砕し、そして乾物量(DM)及び粗タンパク質について分析した。
見掛けの前盲腸タンパク質消化率の計算を、以下の式に従ってマーカ法によって行った:
さらに、それぞれ、50%及び60%のタンパク質消化率(%CNA)を達成するのに必要とされるプロテアーゼの量(mg)を、個々の回帰曲線から推定した(excel)。参照プロテアーゼの50%及び60%のタンパク質消化率(%CNA)とより効率的に比較するために、いわゆる改善度「IF」を計算した。各プロテアーゼ変異体についてのIF50及びIF60値を、50%及び60%のタンパク質消化率(%CNA)を達成するのに必要とされる参照プロテアーゼの量(mg)を、それぞれ50%及び60%のタンパク質消化率(%CNA)を達成するのに必要とされるプロテアーゼ変異体の量(mg)で割り算することによって決定した。
回腸タンパク質消化率の結果を、以下の表3に示す。プロテアーゼ投与量を、食餌(mg/食餌)あたりの酵素タンパク質のミリグラムで示す。
表4で触れたすべての変異体もまた、試験した。それらはすべて、0.8以上のIFを有していた。
ペレット
プロテアーゼ変異体VAR295(配列番号7)の液体濃縮物を、実施例2に記載の通り調製する。その液体濃縮物を、病原体を濾過し、そしてスプレー・ドライし、そして乾燥粉末のプロテアーゼ・タンパク質量を計測する。(規制上の要件に従って)50%超のプロテアーゼ・タンパク質量であることが好ましい。500gの乾燥プロテアーゼ粉末を、200gの微結晶性セルロース及び300gのポリエチレングリコール4000(Macrogol(商標)4000)と市販のミキサーで予混合した。十分な量の一般的に使用される湿潤剤を加え、そして得られた湿った塊状物を室温にて十分に混合する。次に、均質化された塊状物を、(特定の穴径を有する、例えば約0.8mmの穴径を有する穴あけダイを備えた)市販の押出機で押出成形して、円柱状のペレットを形成する。作り出された押出物を、必要な量の一般的に使用される湿潤剤を添加することによって、市販のスフェロナイザー(spheronizer)を用いて、球状ペレットに丸める。ペレットを、市販の真空乾燥機内で約40℃の生成物温度にて乾燥させる。次に、乾燥したペレットを、適切なサイズのふるい、例えば0.7及び1.4mmのふるいを備えた機械的なふるい分け機を使用することによって分離し、所望のふるい分け画分を得る。例えば≧0.7mm且つ≦1.4mmの回収したふるい分け画分を、回収し、そして所望の標準化された作用物質含量を含んで成る量で適切なサイズのカプセル内に充填する。
次に、得られたペレットを、Pharm. Eur. 2.9.1.(「錠剤とカプセルの崩壊」という項)(試験溶液:水‐500mL、37℃)に従って、崩壊について試験する。
ヒト結腸腺癌細胞株を用いた細胞アッセイを、プロテアーゼの毒性のインビトロスクリーニングのために使用した。このアッセイは、細胞の代謝能力を計測し、従って生存率を計測する。
HT-29及びCaco2細胞を用いたインビトロ毒性アッセイ
プロテアーゼVAR203(配列番号11)及び表4で触れた他の変異体の性能を、1時間のpH3(胃)ステップ、並びに2時間のpH6(腸)ステップを含んで成るインビトロ消化モデルにおいて測定し、そして参照プロテアーゼ(配列番号1)の性能と比較した。プロテアーゼを、実施例2に記載の通り精製し、そして、mg/ml単位の酵素タンパク質含量をA280によって測定した。
セリン希釈列(0.5mg/mlのストックを2倍に希釈する)を、遊離アミノ基の定量のための標準として含めた。340nmにて吸光度を計測した。
IF=I(50)(参照)/I(50)(変異体)
胃にカテーテルを挿入したラット・モデルを使用した毒性学的評価
試験系
経験的に、ラットへのプロテアーゼの強制飼養によって経口投与後の予期しない肺への曝露の続発リスクを伴った被験物質の反芻の高いリスクが明らかであった。そのため、専門的な実験的方法を、胃腸に対する野性型(配列番号1)からのプロテアーゼ変異体のインビボ毒性を判断するために使用した。Charles River Laboratories Germany GmbHによって供給された胃にカテーテルを挿入されたラットを、これらの実験に使用した。被験物質を、胃‐カテーテルを通して14日間毎日胃内に直接投与し、気管内への誤投与のリスクを排除し、且つ、胃からの被験物質の反芻のリスクを減少させた。適用容量はすべてのプロテアーゼに関して10ml/kgであり、食餌は投与の約4時間前に回収し、そして投与の4時間後に再び提供された。動物は単独で飼育し、そしてカテーテルの閉塞を予防するために;それを、各投与の後と週に1度の午後に水道水によってすすいだ。
投与の前後に、行動の変化、処置に対する反応又は病気のあらゆる兆候について、ラットを個別に観察した。すべての動物の体温を、研究中に3回、投与前と投与の1時間後において肛門プローブを用いて計測した。体重と食餌消費量を1週間間隔で計測し、そして水の消費量を毎日、水容器の目視検査によって計測した。
本研究で観察された死亡率は、呼吸管への被験物質の反芻に主に関連し、そして適用部位(胃)からの被験物質の漏出を含めた技術的争点にも関連している。死亡率は、700mg/kgの用量レベルにおいて野性型プロテアーゼ投与群が最も顕著である。
結論として、死亡率と組織病理学データは共に、野性型が変異体より有毒であることを示す。
Claims (19)
- 配列番号1の第1〜188アミノ酸に対して少なくとも90%の同一性を有し、且つ、配列番号1の第1〜188アミノ酸と比較して、以下の置換:A1T;I3V;G12;R14I;T22A;N23D;G34A;R38;T41A;T44K;N47;G48D;E53K;Q54L, D;T68A, R, S;S69T;L73P;V88A;S99P;P124L;E125;M131V;T151I;R165;及びT166Aから選択された少なくとも1つの置換を含んで成るプロテアーゼ。
- 以下の置換:G12D, N, H;R38T;N47H, T, S;E125D及びR165S, H, G, Tのうちの少なくとも1つを含んで成る、請求項1に記載のプロテアーゼ。
- 以下の置換又は置換の組み合わせ:G12D;及び(N47H+G48D)のうちの少なくとも1つを含んで成る、請求項2に記載のプロテアーゼ。
- 以下の置換又は置換の組み合わせ:R38T、(T44K+S99P)、S69T、(S69T+E125D)、E125D、及びR165Sのうちの少なくとも1つを含んで成る、請求項1に記載のプロテアーゼ。
- 医薬品としての使用のための、請求項1に記載のプロテアーゼ。
- 医薬品として使用するための、リパーゼ又はアミラーゼと組み合わせた、請求項1に記載のプロテアーゼ。
- (i)前記リパーゼが、配列番号2の第1〜269アミノ酸を持つリパーゼに対して少なくとも70%の同一性を有し;及び/又は
(ii)前記アミラーゼが、以下の:
a)配列番号3の第1〜481アミノ酸を持つアミラーゼ、
b)配列番号4の第1〜483アミノ酸を持つアミラーゼ、及び
c)配列番号5の第1〜513アミノ酸を持つアミラーゼ、
から成る群から選択されるアミラーゼに対して少なくとも70%の同一性を有する、請求項6に記載のリパーゼ又はアミラーゼと組み合わせたプロテアーゼ。 - 消化障害、膵臓外分泌機能不全症、膵炎、嚢胞性繊維症、I型糖尿病、及び/又はII型糖尿病の処置における使用のための、請求項1に記載のプロテアーゼ。
- リパーゼ又はアミラーゼと組み合わせた、請求項8に記載のプロテアーゼ。
- (i)前記リパーゼが、配列番号2の第1〜269アミノ酸を持つリパーゼに対して少なくとも70%の同一性を有し;及び/又は
(ii)前記アミラーゼが、以下の:
a)配列番号3の第1〜481アミノ酸を持つアミラーゼ、
b)配列番号4の第1〜483アミノ酸を持つアミラーゼ、及び
c)配列番号5の第1〜513アミノ酸を持つアミラーゼ、
から成る群から選択されるアミラーゼに対して少なくとも70%の同一性を有する、請求項9に記載のリパーゼ又はアミラーゼと組み合わせたプロテアーゼ。 - 少なくとも1つの医薬的に許容し得る助剤と一緒に、請求項1に記載のプロテアーゼを含んで成る医薬組成物。
- リパーゼ又はアミラーゼをさらに含んで成る、請求項11に記載の組成物。
- (i)前記リパーゼが、配列番号2の第1〜269アミノ酸を持つリパーゼに対して少なくとも70%の同一性を有し;及び/又は
(ii)前記アミラーゼが、以下の:
a)配列番号3の第1〜481アミノ酸を持つアミラーゼ、
b)配列番号4の第1〜483アミノ酸を持つアミラーゼ、及び
c)配列番号5の第1〜513アミノ酸を持つアミラーゼ、
から成る群から選択されるアミラーゼに対して少なくとも70%の同一性を有する、請求項12に記載の組成物。 - 治療的有効量の請求項1又は2に記載のプロテアーゼを投与することによる、消化障害、膵臓外分泌機能不全症、膵炎、嚢胞性繊維症、I型糖尿病、及び/又はII型糖尿病の処置方法。
- 治療的有効量のリパーゼ又はアミラーゼを投与することをさらに含んで成る、請求項14に記載の方法。
- (i)前記リパーゼが、配列番号2の第1〜269アミノ酸を持つリパーゼに対して少なくとも70%の同一性を有し;及び/又は
(ii)前記アミラーゼが、以下の:
a)配列番号3の第1〜481アミノ酸を持つアミラーゼ、
b)配列番号4の第1〜483アミノ酸を持つアミラーゼ、及び
c)配列番号5の第1〜513アミノ酸を持つアミラーゼ、
から成る群から選択されるアミラーゼに対して少なくとも70%の同一性を有する、請求項15に記載の方法。 - 消化障害、膵臓外分泌機能不全症、膵炎、嚢胞性繊維症、I型糖尿病、及び/又はII型糖尿病の処置のための医薬品の製造のための、請求項1に記載のプロテアーゼの使用。
- リパーゼ又はアミラーゼの使用をさらに含んで成る、請求項17に記載の使用。
- (i)前記リパーゼが、配列番号2の第1〜269アミノ酸を持つリパーゼに対して少なくとも70%の同一性を有し;及び/又は
(ii)前記アミラーゼが、以下の:
a)配列番号3の第1〜481アミノ酸を持つアミラーゼ、
b)配列番号4の第1〜483アミノ酸を持つアミラーゼ、及び
c)配列番号5の第1〜513アミノ酸を持つアミラーゼ、
から成る群から選択されるアミラーゼに対して少なくとも70%の同一性を有する、請求項18に記載の使用。
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Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004111220A1 (en) * | 2003-06-19 | 2004-12-23 | Novozymes A/S | Proteases |
WO2005115445A1 (en) * | 2004-05-24 | 2005-12-08 | Novozymes A/S | Enzymes for pharmaceutical use |
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CA2222682A1 (en) * | 1995-05-31 | 1996-12-05 | Medzyme N.V. | Composition to improve digestibility and utilisation of nutrients |
NL1001620C2 (en) | 1995-06-22 | 1996-12-24 | Instituut Voor Agrobiologisch | Improvement in activity of plant growth regulators |
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Patent Citations (3)
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WO2004111220A1 (en) * | 2003-06-19 | 2004-12-23 | Novozymes A/S | Proteases |
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WO2005115445A1 (en) * | 2004-05-24 | 2005-12-08 | Novozymes A/S | Enzymes for pharmaceutical use |
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Publication number | Publication date |
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