JP2011053222A - カルグラヌリンcを用いた炎症性疾患の診断方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】カルグラヌリンCマーカーの量及び/又は濃度の測定による。より具体的に、(a)患者から得た生物学的サンプル中のカルグラヌリンCのポリペプチドの量及び/又は濃度を測定し;(b)患者の対照サンプル中で測定されたカルグラヌリンCポリペプチドの量及び/又は濃度を、生物学的サンプル中のカルグラヌリンCポリペプチドの量及び/又は濃度を比較することを含むことによる。
【選択図】図1
Description
本発明は、カルグラヌリンCマーカーに基づいた炎症性疾患の診断方法、特に炎症性疾患の特異的段階の診断方法、及び/又は再発の危険性の決定方法、及び/又は疾患と類似の症状との区別方法に関する。
多くの疾患は、炎症の症状によって特徴付けられる(炎症性疾患)。指標は、炎症の局所部位における炎症性細胞、例えば好中球及びマクロファージである。炎症部位は、全身でありうる。つまり炎症性細胞により分泌されるタンパク質が、血清において検出できるようになる。
本発明は、炎症性疾患の段階を診断するための、及び/又は、再発の危険性を決定するための、及び/又は似たような症状を有する疾患を区別するための方法であって、カルグラヌリンCのマーカーに基づく方法を提供する。さらに、本発明は、治療の本質的な部位として進歩性のある方法を含む、疾患の治療方法を提供する。
第一に、診断される哺乳動物の体液又は組織の生物学的サンプルが取得される。生物学的サンプルは、細胞系列、生検、血液、タン、便、尿、滑液、創傷液、脳髄液、パラフィン内に包埋された組織、例えば目、腸、腎臓、脳、皮膚、心臓、前立腺、肺、乳房、筋肉、又は結合組織からのの組織、及びそれら全ての可能性のある組み合わせを含みうる。
本発明は、以下の例によって、添付の図に関してさらに記述される。全ての実施例は、例の方法によって提供されており、本発明の特許請求の範囲を制限するつもりを有さない。全ての引用された文献はその全てを本明細書中に援用する。
カルグラヌリンCの調製
カルグラヌリンCを以前詳細に記述された(Vogl et al., 1999, J Biol Chem 274: 25291-25296; van den Bos, 1998, Prot Expr Purif 13: 313-318)とおりに、ヒト顆粒球から単離した。
ヒト・カルグラヌリンCに対するアフィニティーで精製されたポリクローナルウサギ抗血清を以前報告された(Vogl et al., 1999, J Biol Chem 274: 25291-25296; van den Bos, 1998, Prot Expr Purif 13: 313-8)とおりに調製した。ウサギ抗‐ヒト・カルグラヌリンC抗体の単一特異性精製度を、精製されたヒト及び組換えカルグラヌリンCに対する免疫反応性によって、及び顆粒球のライセートのウェスタンブロット分析によって分析した。
患者の血清におけるカルグラヌリンCの濃度を、ダブル・サンドウィッチ酵素結合免疫吸着検定法(ELISA)システムにより測定した。平底96穴マイクロ・タイター・プレート(Maxisorp;Nunc, Rosklide,Denmark)を、0.1M炭酸ナトリウム緩衝液、pH9.6内の10ng/ウェルの抗-カルグラヌリンC50μl/ウェルでコートし;16時間4℃でインキュベーションし、;0.1%Tween 20を含み、pH7.4のリン酸緩衝液(洗浄液)で3回洗い;そして、0.25%ウシ血清アルブミンを含む洗浄液(ブロック緩衝液)で1時間37℃でインキュベーションした。プレートを、洗浄緩衝液で1回洗い、そしてブロック緩衝液で様々に希釈した50μlのサンプルを、室温で1時間添加した。ELISAを0.016〜125ng/mlの濃度範囲の精製されたカルグラヌリンCで較正された。アッセイは、0.5と10ng/mlの間の直線範囲を及び<0.5ng/mlの感受性を有した。3回の洗浄後、20ng/ウェルのビオチン標識されたウサギ抗ヒト・カルグラヌリンCを添加し、そして30分で37℃インキュベーションした。プレートを3回洗い、そしてストレプトアビジン結合西洋わさびペルオキシダーゼ(1:5000希釈;Pierce, Rockford, Illinois, USA)で37℃30分インキュベーションした。3回洗浄後、プレートをABTS(2,2’アジノビス(3-エチルベンズチアゾリン・スルホン酸);Roche Diagnostics, Mannheim, Germany)及びH2O2(25ml 0.05Mクエン酸緩衝液、pH4.0中10mgABTS及び10μl H2O2(30%))で20分間室温でインキュベーションした。405nMの吸収を、ELISA-リーダー(MRX マイクロプレート リーダーDynatech Laboratories, St Peter Port, Guernsey, UK)で計測した。
抗生物質治療の始め及び終わりにおける急性悪化の21コース上の静脈投与抗生物質治療をうけた17人のCF入院患者(9人の少年、8人の少女;調査に入った時の平均年齢は、21.1歳であり、10〜35歳の範囲であった)のカルグラヌリンC血清濃度が測定された。実際の治療の入院平均期間は、2週間であった。入院の主要な理由は、健康状態の全体的悪化、粘稠性タン、及び増殖性の咳の増加であった。
異なる分類間のカルグラヌリンC発現の差を決定するためスチューデントのT検定が行われた。データーは、平均値±SDとして表される。0.05より大きいP値は、有意差なしとした。
通常のカルグラヌリンCの平均値は、健常成人のコントロールでは64±36ng/mlであり、健常小児では50±32ng/mlであった。健常者のコントロールにおける全体の平均値は、57ng/mlであった。年齢又は性別の違いによる有意差は無かった。
抗生物質治療の開始前における急性悪化の21のケースのうち13のケース(61%)では、CRPが上昇するということを我々は見つけた。抗生物質治療前の急性悪化を患う患者のCRP濃度(1.87±2.94mg/dl;0〜10.6の範囲)と抗生物質治療後のCRP濃度(0.15±0.39mg/dl;0〜1.6の範囲)との間の平均値に有意差があった。それにもかかわらず、急性の悪化と、急性感染を患わない外来患者(0.52±0.40mg/dl;0-1.5の範囲)との間の平均値の差は、有意ではなかった。ESRは、21のケースのうち14のケース(66%)において通常の範囲を超えていた。我々は、急性悪化を有する患者のESR平均値(25±18mm/h;4-51の範囲)と外来患者のESR平均値(12±9mm/h;1〜28の範囲)との間の有意差を見つけた。抗生物質治療の前及び後の急性悪化を患う患者のESR(17±15mm/h;6-36の範囲)は、有意差が無かった。12のケース(56%)では、白血球数は、10,000/μlを超えた。白血球数は、急性悪化において、抗生物質治療の前(11,260±3,948/μl;2900-22,100の範囲)と後(7,920±2,311/μl;2,500-12,500)で有意に高かったが、治療前の急性悪化を有する患者と外来患者(9,583±3,438/μl;4,300〜16,500の範囲)との間でそういった差は見つからなかった。データは、図2に要約される。
患者と健常者コントロール
我々は、川崎病の診断基準を満たし、静脈内γグロブリン(2g/kg体重)で処理された6の女性患者及び15の男性患者のカルグラヌリンCを上記ELISA法を用いて、並びにCRPのレベルを分析した。川崎病患者の血清におけるカルグラヌリンCの濃度は、例1に記載されるダブル・サンドウィッチ酵素結合免疫吸着検定法(ELISA)システムによって測定された。また、タンパク質及び抗体調製は、上記のとおりに行われた。血清サンプルは、治療の開始時、γグロブリンの処置後直に、治療開始後2週間で、及び寛解時において採取された。熱の平均期間は、7.5日(5〜13日の範囲)であった。白血球数の平均最大値は、14,900/μl(5,300〜24,400の範囲)であり、平均63%の好中球を有する。8の患者は、冠動脈病変(CAL)を有し、及び、冠動脈動脈瘤と診断された。CALを患う全ての患者は男性であった。CALを患う患者と患わない患者との間の年齢における有意差は無かった(平均年齢2.4対2.6歳)。CALを患う患者は、熱、及び高レベルのカルグラヌリンC、CRP、白血球数及び好中球数の長い期間を有した。
治療前の初期カルグラヌリンCレベルの平均値は、450±348ng/ml(31〜1,330ng/mlの範囲)であった。カルグラヌリンCレベルの平均値は、γグロブリン治療のち有意に減少した(236±244ng/ml;9〜1071の範囲;P<0.05)。2週間後のカルグラヌリンCのレベルは、84±88ng/ml(15〜402の範囲)であった。完全に寛解したときに検出されるカルグラヌリンCのレベルは、83±84ng/ml(6〜371の範囲)であった。初期CRPレベルの平均値は、8.9±3.5mg/dl(2.5〜16.0mg/dlの範囲)であった。CRPレベルの平均値は、γグロブリンの治療の後、初期レベルに対し有意差を示すことなく6.3±6.9mg/dl(0.8〜28.7mg/dl)に減少した。CRPレベルの平均値は、2週間後において1.5±2.1mg/dl(0〜8.9mg/dl)であり、寛解時には0.15mg/dl(0〜0.6mg/dlの範囲)であった。図3は、川崎病の過程における検出されたカルグラヌリンC及びCRPレベルを示す。
上記で詳細に記されたカルグラヌリンCのELISAを用いて、我々は、SOJRAを患う患者、若年性リュウマチ関節炎(JRA)の活動性オリゴ関節炎(Oligoarthritis)の形態を患う患者、細菌性感染(CRP-値>50mg/l;平均CRP値:95mg/l)を患う患者、及びコントロールのヒト(n=20)において、カルグラヌリンCタンパク質の血清濃度を分析した。付け加えて、JRA患者の滑液におけるカルグラヌリンC濃度は、局所的炎症マーカーとしてカルグラヌリンCの適用性を証明するために計測された。
上記の例は、本発明に従った予防及び/又は治療のためのカルグラヌリンCの使用を、特に示す。
メトトレキセート(MTX)での治療の終わりの時点での治療上の寛解において、患者の血清におけるカルグラヌリンC濃度が測定された。CRP及びESRも測定された。我々は、2つの群:群1:1年以内に疾患の再発。群2:1年以内の再発なし、つまり長い期間の寛解:の値を比較した。驚くべきことに、カルグラヌリンC血清濃度のみが、2つの群の間で有意に異なっており、それゆえ、予後の及び適切な治療に適している。ESRは、全く適していないことが分かった。CRPは、2つの例外を有して、調査した全ての患者(n=8)において陰性であり;それゆえ、感受性はとても不適切である。
患者及び健常者コントロール
我々は慢性炎症関節炎を患う42の患者を調査した。カルグラヌリンC濃度は、上記の通りサンドウィッチELISAを用いて、血清及び滑液において分析された。血清レベルは、乾癬性関節炎(平均疾患期間14.6±8.6ヶ月)を患い、抗炎症薬MTX(平均投与量12.9±4.8mg)で治療された14の患者(9人の男性、5人の女性;平均年齢40歳;21〜64歳の範囲)から測定された。非ステロイド性抗炎症薬剤(NSAIDs)を除いて、別の薬物は処方されない。血清は、治療前及び治療後に取られた(平均追跡調査間隔6.4±1.3ヶ月)。付け加えて、血清及び滑液サンプルのペアは、関節鏡検査を受けた28人の患者(乾癬性関節炎をわずらう8人の患者、リューマチ性関節炎を患う9人の患者、血清陰性の関節炎を患い11人の患者)から入手された。全ての患者は、同じ医師によって試験された。患者の治療状態は、朝早くの硬直、痛みの点数、リッチー関節指数(Ritchie articular index)(RI)(Ritchie et al., 1968, QJ Med 37: 393-406)及び疼痛関節数(SJC)によって記述された。リューマチ性関節炎を患う患者は、血清陰性関節炎を患う患者より、有意に多くSJC及びRIに従った冒された関節を有する。血清陰性関節炎を患う患者は、これらの群の中である。診療状態に加えて、CRP、ESR、抗核抗体(ANA)、及びリューマチ性因子が、記述された。
マン-ホイットニーのU検定(通常分布でない独立値に対し)及びウィルコクソン検定(対応値に対し)が、異なる分類間における有意差を決定するために行われた。ウィンドウズ(登録商標)用バージョン9.0のSPSSは、カルグラヌリンCと別のパラメーターとの相関を決定するために使われた。データーは、平均値±SEMとして表される。0.05より大きいP値は、有意差が無いとした。
カルグラヌリンC血清レベルは、健常者のコントロール(60±20ng/ml)と比較して、リューマチ性関節炎において最も高く(平均値340±90ng/ml)、乾癬性関節炎において目立って上昇し(平均値260±60ng/ml)、そして血清陰性関節炎において少ないが、それでも有意に上昇した(190±20ng/ml)。血清及び滑液のサンプルのペアにおいて、我々は、全ての患者において、血清におけるよりも5〜10倍高いカルグラヌリンCレベルを滑液において見つけた。滑液のカルグラヌリンCレベルは、リューマチ性関節炎及び乾癬性関節炎(1,870±1,160ng/ml及び1,720±425ng/ml、それぞれ)におけるより、血清陰性関節炎(4,920±1,680ng/ml)において高い。カルグラヌリンCの血清濃度は、疾患の活動度を決定するために使われる別のパラメーターに相関し、特にESR(r=0.47;P<0.01)及びRI(r=0.36;P<0.01)に最も有意に相関した。データは図6に要約される。
炎症部位におけるカルグラヌリンCの局所的な発現を確かめるため、我々は、免疫組織化学的研究を行った。滑膜生検は、MTX-治療の前及び後における乾癬性関節炎を患う4人の患者において、行われた。付け加えて、生検は、MTXを受けていない乾癬性関節炎を患う5人の患者から取られ、リューマチ性関節炎を患う2人の患者、及び血清陰性関節炎を患う2人の患者から取られた。滑膜炎症を患っていない2人の患者の生検は、ネガティブコントロールとして役に立った。凍結固定された及びパラフィン包埋された切片は、当該技術分野によく知られている通りに準備された。ウサギ抗-ヒト・カルグラヌリンC抗体は、カルグラヌリンCの発現を検出するために使われた。マウス-抗-ヒト・CD15、顆粒球関連抗原は、浸潤している顆粒球を検出するために使われた。マウス-抗ヒト・CD163抗体(RM3/1のクローン、マクロファージ特異的スカベンジャー受容体を検出する)は、浸潤しているマクロファージを検出するために使われうる。種に適合する不適切な特異性のコントロール抗体は、ネガティブコントロールとして使われた。最終的に、切片は、メイヤーのヘマトキシリンで対比染色された。2次抗体及び色反応の基質は、以前に記述されたとおりに使われた。2重標識実験のために、抗カルグラヌリンC抗体に続き、抗CD15抗体が使われた。我々は、アフィニティーで精製された、テキサスレッド又はFITCが結合したヤギ-抗-マウス又はヤギ-抗ウサギ-2次抗体(Dianova, Hamburg, Germany)を用いた。蛍光は、ウィンドウズ(登録商標)用Axiovision3.0(Zeiss, Goettingen,Germany)を供給されるZeiss Axioskopが結合するAxiocam Camera を用いて分析された。特異抗体を取り除いた後の、又は特異抗体を不適切な特異性を持つアイソタイプ適合性コントロール抗体に置換えた後のコントロール実験において、相互反応性又は溢流は検出されなかった。
我々は、乾癬性関節炎を患う14人の患者の血清における、及び4人の患者滑膜におけるカルグラヌリンCの発現に関してMTX治療の効果を分析した。MTX治療の前、過度のカルグラヌリンCの発現は、乾癬性関節炎患者の滑膜組織において、上記で示したようにサブライニング層及び血管周囲において見つかった。カルグラヌリンC発現は、効果的なMTX治療後の同じ患者の滑膜生検においてほとんど検出できない。評価は表2に示される。
患者及び健常者のコントロール
クローン病患者(n=40)、潰瘍性大腸炎患者(n=34)及び健常者のコントロール(n=30)が調査された。カルグラヌリンCタンパク質の血清レベルは、ELISAを用いて上記のとおりに計測された。平行してCRP及びESRも測定された。クローン病の疾患活動性は、クローン病活動性指標を用いて記され、潰瘍性大腸炎では、大腸炎活動性指標 (CAI;Rachemilewitz, 1989, Br Med J 298: 82-86)及びTruelove及びWittsの判断基準(1955, Br Med J2: 1041-1048)を用いることで記された。患者のデータは、表4に要約される。
マンホイットニーのU検定は、異なる分類間のカルグラヌリンC及びCRPの発現の有意差を決定するために行われた。血清マーカーと疾患活性との間の相関は、ウィンドウズ(登録商標)用のSPSSバージョン9.0のソフトウェアを用いることによって、パーソン検定で分析された。データは、平均値±95%の信頼区間として表された。0.05より大きいP値は、有意差が無いとした。
クローン病患者(CDAI>150、n=30)は、健常者のコントロール(470±125ng/ml vs. 75±15ng/ml;P>0.001)と比較して有意に上昇したレベルを有した。非活動性の疾患と比較して、活動性クローン病を患う患者におけるカルグラヌリンC血清レベルとの間の有意差があった(470±125ng/ml vs. 215±95ng/ml;P>0.01)。非活動性の疾患を患う患者でさえ、健常者のコントロールと有意に異なる血清レベルを示した。(215±95ng/ml vs. 75±15ng/ml;P>0.05)。それゆえ、疾患活動性は、正確にモニターされうる。それ以上に、カルグラヌリンCのレベルは、CDAIと強く相関しており、疾患の段階を診断するための優れた適切性を支持する。
活動性クローン病又は活動性潰瘍性大腸炎を患う患者及び腸炎症を有しないコントロールからの腸生検のパラフィン包埋及び凍結した切片は、ウサギ抗−カルグラヌリンC抗体によりカルグラヌリンCの発現を検出するために使われた。疾患活動性は、ヘマトキシリン及びエオシン染色された切片において決定された。モノクローナルマウス抗ヒト顆粒球関連抗原CD15抗体(Dako, Hamburg, Germany)、感受性の高い好中球マーカーは、浸潤している好中球を検出するために使われた。連続切片の染色は、浸潤におけるカルグラヌリンC及びCD15の共発現を検出するために行われた。コントロールとして、不適切な特異性のモノクローナルマウスIgM(Dianova, Hamburg, Germany)及びポリクローナルウサギIgG(Amersham Biosciences, Freiburg, Germany)が用いられた。2次抗体及び呈色反応の基質は、以前記述されたとおり(Rammes et al., 1997, J Biol Chem 272: 9496-9502; Frosch et al., 2000, Arthritis Rheum 43: 628-637)に行った。免疫蛍光顕微鏡は、上記例5のとおり行われた。
血清中のカルグラヌリンCの濃度は、少数関節性および多発関節性若年性リューマチ性関節炎を患う13人の患者であって、寛解を導くためにMTXで治療を受けた患者において測定された。そして、データ−は、再発危険性との相関を遡及的に調査された。カルグラヌリンC濃度は、JRA判断基準に従って寛解が記述されたときにおいて測定された。カルグラヌリンC濃度の測定は、上記のとおりELISAを用いて行われた。
潰瘍性大腸炎並びにクローン病において観察される最も目立った組織学的特徴の一つは、炎症の早い時間点において、好中球が炎症性粘膜への浸潤することである(Nikolaus et al., 1998, Gut 42: 470-476; Kucharzik et al., 2001, Am J Pathol 159: 2001-2009)。最近、カルグラヌリンCは、活性化ヒト好中球から分泌されるということが示されてきた(Boussac&Garin, 2000, Electrophoresis 21: 655-672)。
Claims (42)
- 炎症性疾患の診断方法であって、以下のステップ:
a)診断される哺乳動物の体液又は組織の生物学的サンプルを取得し;
b)上記生物学的サンプル中に存在するカルグラヌリンCのポリペプチド及び/又は上記ポリペプチドをコードする核酸の量及び/又は濃度を測定し;そして
c)上記生物学的サンプル中のカルグラヌリンCポリペプチドの測定量及び/又は濃度を、コントロールのサンプル中の測定されたカルグラヌリンCポリペプチドの量及び/又は濃度と比較し、及び/又は
上記生物学的サンプル中のカルグラヌリンCポリペプチドをコードする核酸の測定量及び/又は濃度を、対照のサンプル中の計測されたカルグラヌリンCポリペプチドをコードする核酸の量及び濃度と比較することを含み、
ここで、カルグラヌリンCポリペプチド及び/又は上記ポリペプチドをコードする核酸の量の上記差が、診断される疾患の段階を指標する、前記方法。 - 核酸プローブが、前記ポリペプチドをコードするカルグラヌリンCの核酸の量及び/又は濃度を測定するために使われる、請求項1に記載の方法。
- 前記核酸プローブが、配列番号1に示す核酸配列に由来する、請求項2に記載の方法。
- 前記核酸プローブが、配列番号1に示す核酸配列、及び/又はその断片にハイブリダイズする核酸を含む、請求項2に記載の方法。
- PCRに基づく技術が使用される、請求項2に記載の方法。
- 特異抗体を、カルグラヌリンCポリペプチドの量及び/又は濃度を測定するために使用する、請求項1に記載の方法。
- 前記特異抗体が、配列番号2示すアミノ酸配列に由来するエピトープを認識する、請求項6に記載の方法。
- 前記抗体が、ポリクローナル抗血清、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、抗体断片、一本鎖抗体、及び二重特異性抗体を含む群から選ばれる、請求項6に記載の方法。
- 前記抗体を、免疫アッセイ、例えばELISA又は免疫組織化学的技術を行うために使用する、請求項6に記載の方法。
- カルグラヌリンCポリペプチド及び/又は上記ポリペプチドをコードする核酸の量及び/又は濃度を測定することが、カルグラヌリンCのポリペプチド及び/又は上記ポリペプチドをコードする核酸の量及び/又は濃度を局所的マーカーとして測定することを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、脈管炎、特に川崎病である、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、嚢胞性線維症である、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症性腸疾患様の、例えば潰瘍性大腸炎又はクローン病である、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性気管支炎である、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、炎症性関節炎様の、例えば乾癬性関節炎、リューマチ性関節炎、又は血清陰性関節炎である、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、全身発症若年性リューマチ性関節炎(SOJRA、スティル病)である、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症の背景上の急性炎症である、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症性疾患の背景上の後天性感染である、請求項1に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、既往の疾患の悪化である、請求項1に記載の方法。
- 炎症性疾患の特定の段階を診断するため、及び/又は、再発の危険性を決定するため、及び/又は疾患と似たような症状との間を区別するための、請求項1に記載の方法の使用。
- 前記診断が、炎症性疾患の予防及び/又はモニターの基礎として役に立つ、請求項1に記載の方法の使用。
- 治療を必要とする哺乳動物における炎症性疾患の治療方法であって、以下のステップ:
a)請求項1に記載のステップa)〜c)を行い;そして
b)上記治療を必要とする哺乳動物を、治療される疾患の段階に基づき医学的に処置すること
を含む、前記方法。 - 前記炎症性疾患が、局所的炎症性疾患である、請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、脈管炎、特に川崎病である、請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、嚢胞性線維症である、請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症性腸疾患様の、例えば潰瘍性大腸炎又はクローン病である、請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性気管支炎である、請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、炎症性関節炎様の、例えば乾癬性関節炎、リューマチ性関節炎、又は血清陰性関節炎である請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、全身発症若年性リューマチ性関節炎(SOJRA)である、請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症の背景上の急性炎症である、請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症性疾患の背景上の後天性感染である、請求項22に記載の方法。
- 前記炎症性疾患は、既往症の悪化である、請求項22に記載の方法。
- 予防の必要のある哺乳動物における炎症疾患の予防方法であって、以下のステップ:
a)請求項1に記載のa)からc)のステップを行うこと;及び
b)治療を必要とする哺乳動物を、予防される疾患の段階に基づき医学的に処置する
を含む前記方法。 - 前記炎症性疾患が、局所的炎症性疾患である、請求項33に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、脈管炎、特に川崎病である、請求項33に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、嚢胞性線維症である、請求項33に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症性腸疾患様の、例えば潰瘍性大腸炎又はクローン病である、請求項33に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性気管支炎である、請求項33に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、炎症性関節炎の様の、例えば乾癬性関節炎、リューマチ性関節炎、又は血清陰性関節炎である請求項33に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、全身発症若年性リューマチ性関節炎(SOJRA)である、請求項33に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症の背景上の急性炎症である、請求項33に記載の方法。
- 前記炎症性疾患が、慢性炎症性疾患の背景上の後天性感染である、請求項33に記載の方法。
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