JP2010531335A

JP2010531335A - 脂肪酸合成酵素（ｆａｓｎ）阻害剤としての新規ポリヒドロキシル化化合物

Info

Publication number: JP2010531335A
Application number: JP2010513910A
Authority: JP
Inventors: ボシュ，ラモンコロメル; ミケル，テレサプイグ; ビダル，ホアンブルネット; ロドリゲス，マリアルスロペス; サラマ，ベインダベンハム，; グティエレス，シルビアオルテガ; ガルシア，カルロストゥラド
Original assignee: フンダシオプリバーダインスティテュートディンベスティガシオビオメディカデジロナドクター．ホセプトルエタ; ユニベルシダードコンプルテンセデマドリッド
Priority date: 2007-06-25
Filing date: 2008-06-25
Publication date: 2010-09-24
Also published as: EP2170802A1; WO2009000864A1; EP2019091A1; US20100190856A1

Abstract

本発明は、新規ポリヒドロキシル化化合物、特に脂肪酸合成酵素(ＦＡＳＮ)阻害剤としてのその活性、及びこれらの酵素の阻害剤が示す病的状態の処置への使用に関する。また本発明は、それらを含有する薬学的組成物、及びこのような化合物を調製する方法に関する。

Description

本発明は、ポリヒドロキシル化化合物、特に脂肪酸合成酵素(ＦＡＳＮ)阻害剤としてのその活性、及びこれらの酵素の阻害剤が示す病的状態の処置への使用に関する。また本発明は、それらを含有する薬学的組成物、及びこのような化合物を調製する方法に関する。

脂肪酸合成酵素(Ｅ.Ｃ.２.３.１.８５、ＦＡＳＮ)は、アセチル-ＣｏＡ、マロニル-ＣｏＡ及びＮＡＤＰＨ前駆体からの長鎖脂肪酸のデノボ合成を触媒するのに必要とされる重要な脂質合成酵素である(Wakil, S.J.ら, Biochemistry 1989, 28, 4523-30)。正常細胞は、新規の構造的脂質の合成のために循環している食餌性脂肪酸を優先的に使用する。よってＦＡＳＮ発現は、一般的に、肝臓及び脂肪組織以外の正常なヒト組織においては検出不能な程低い。これに対して、高レベルのＦＡＳＮ発現が、乳房、前立腺、結腸、卵巣、子宮内膜、中皮、肺、甲状腺、胃及び脳を含む、数種の癌で観察されている(Kuhajda, F.Pら, Cancer Res. 2006, 66, 5977-80により概説)。ヒト癌におけるＦＡＳＮの広汎な発現とその予後不良との関係が、脂肪酸合成が腫瘍増殖に有利であり、抗腫瘍剤開発の有望な標的となりうることを示唆する。

腫瘍細胞におけるＦＡＳＮ機能の喪失を研究するためにＦＡＳＮの薬理学的阻害が使用されている。ＦＡＳＮの新規阻害剤の同定には、かなりの関心が寄せられている。最初に同定されたのは、セルレニン、つまり真菌Cephalosporium ceruleansの天然の抗生物質である(Omuraら, Bacteriol. Rev. 1976, 40, 681-97)。セルレニンによるＦＡＳＮ阻害はアポトーシス癌細胞死を生じることが報告されている(Menendez, J.Aら, Proc. Nat. Acad. Sci. 2004, 101, 10715-20)。しかしながら、セルレニンは不安定であるので、インビボ抗腫瘍剤としては不適切なものである。最近、より高い安定性を有するセルレニンに関連した合成誘導体である化合物Ｃ７５((２Ｒ,３Ｓ)-４-メチレン-２-オクチル-５-オキソテトラヒドロフラン-３-カルボン酸)の抗腫瘍効果が試験されている(Kuhajda, F.Pら, Proc. Nat. Acad. Sci. 2000, 97, 3450-4)。Ｃ７５を使用するＦＡＳＮ阻害は、インビトロにおいて種々の腫瘍細胞株に対して細胞毒性であり、癌細胞の異種移植片及びインビボでのトランスジェニックマウスに対して増殖阻害効果もまた示す。しかしながら、インビボ抗腫瘍剤としてのＣ７５の使用は、カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ-１(ＣＰＴ-１)β-酸化の刺激に関連していると思われる用量依存性拒食症により制限される(Nicot, Cら, Biochem. Biophys. Res. Comm. 2004, 325, 2745-7)。高レベルのマロニル-ＣｏＡ及びＣＰＴ-１阻害は、ＦＡＳＮ阻害が腫瘍細胞死を生じせしめる機序を示すかも知れないことが推論されている。インビボ抗腫瘍活性を有する他の新規ＦＡＳＮ阻害剤は、肥満症の処置に使用されるＦＤＡ-承認薬のβ-ラクトンオルリスタット(Kridelら, Cancer Res. 2004, 64, 2070-5)である。しかしながら、オルリスタットは、極めて低い経口生物学的利用能を有するため、腫瘍を処置するための新規な製剤が必要とされている。

緑茶の主要なポリフェノールカテキンである(-)-エピガロカテキン-３-ガラート(ＥＧＣＧ)と、他の自然に生じるフラボノイド類(ルテオリン、ケルセチン及びケンフェロール)はＦＡＳＮを阻害し、インビトロにおいていくつかの腫瘍細胞株のアポトーシスを誘導し、動物モデルにおける腫瘍サイズを低減させることが最近報告されている(Brusselmans, Kら, J. Biol. Chem. 2005, 280, 5636-45)。我々は、ＥＧＣＧが、Ｃ７５により示される全ての細胞性、機能性及び分子的抗腫瘍効果を達成するが、ＣＰＴ-１活性を調節しないことを最近報告した。よって、ＥＧＣＧは、Ｃ７５投与に関連しているインビボでの減量経路を、おそらくは回避する。しかしながら、インビボにおけるＥＧＣＧの効果は、ＦＡＳＮを過剰発現している癌細胞では、その高ＩＣ_５０値のために限定されており(ＥＧＣＧの阻害能はＣ７５及びセルレニより４倍低い)、インビボ投与に対しては、明らかに高用量が必要である。さらに、ＥＧＣＧはNakagawa Kにより証明されているように、生物学的利用能が乏しいことが示されている(Nakagawa, Kら, Anal. Biochem. 1997, 248, 41-9)。この研究では、５６ｍｇのＥＧＣＧを経口投与した後、０．０１２％のＥＧＣＧのみがラットに吸収されたことが示されている。この低吸収性は、中性又はアルカリ性溶液中においてＥＧＣＧの安定性が乏しさが原因である。腸及び体液のｐＨ値は、中性か又はわずかにアルカリ性であるため、緑茶カテキンはヒト体内で不安定であり、よって生物学的利用能の低下に至る。

また、脂肪酸代謝の調節を利用して食物の取込を阻害することも知られている。元々、ＦＡＳＮ阻害剤として設計されたＣ７５は、痩せたマウス、食餌性肥満(ＤＩＣ)のマウス、レプチン欠損(ｏｂ／ｏｂ)マウス、及び正常な痩せたマウスに、かなりの可逆的な減量を生じさせ、マウスモデルでは２４時間以内に体重の１２％までが失われる結果となった(Kuhajda, Fら, Trends Pharmacol. Sci. 2005, 26, 541-4)。欧州特許第０８６９７８４-Ｂ１号は、有意な毒性なしに減量及び／又は脂肪細胞質量の低減を達成するための、ここに記載したものとは構造的に関連していないＦＡＳＮ阻害剤の使用に関する。

ＦＡＳＮ阻害剤は、減量を誘発し、以前から存在している癌細胞の成長を阻害するための薬剤として開示されている。例えば、欧州特許出願公開第０８６９７８４号には、ＦＡＳＮ阻害剤のあるクラス(γ-置換-α-メチレン-β-カルボキシ-γ-ブチロラクトン化合物)を投与することにより、減量を誘発させる方法が開示されている。また、欧州特許第０８６９７８４号には、これらの化合物が前から存在している癌細胞の増殖を阻害するのに有用であることが開示されている。
欧州特許出願公開第６５１６３６号には、癌細胞に対しては選択的に細胞毒性があるが、他の種類の非形質転換(正常)細胞に対してはそうではない用量でＦＡＳＮ阻害剤を投与することにより、前から存在している癌を処置する方法が開示されている。
J. Chem. Soc. Perkin Transl. 1, 1996: 7: 649-656には、ポリエステルデンドリマーの合成法が開示されており、そこでは、化合物２,６-ビス[(３,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレンに言及されている。何の生物学的活性も挙げられていない。

要約すると、ＦＡＳＮ阻害剤が、減量を誘導し、前から存在している癌細胞の増殖を阻害するための薬剤として有用であることを示す強力な証拠が存在する。よって、新規のＦＡＳＮ阻害剤の発見は、これらの疾患又は病気の治療において興味をもたれている。

本発明者は、ＣＰＴ-１活性を同時に刺激することなくＦＡＳＮの有意な阻害を示す一連の新規ポリヒドロキシル化化合物を提供した。実施例に示すように、癌細胞の増殖及びシグナル伝達経路におけるそれらの効果を試験した。細胞増殖、脂肪酸の代謝経路(ＦＡＳＮ及びＣＰＴ-１活性)、アポトーシス誘導性(ポリ(ＡＤＰ-リボース)ポリメラーゼ(ＰＡＲＰ)の切断により評価)及び細胞シグナル伝達(ＨＥＲ２、ＥＲＫ１／２及びＡＫＴカスケード)を評価した。結果は、本発明の化合物はＦＡＳＮ阻害剤であり、これら化合物が、減量を誘発し、ヒトを含む哺乳動物において前から存在している癌細胞の増殖を阻害するための処置として有用であることを示すものである。

よって、本発明の第１の態様によれば、式(Ｉ)

[上式中：
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７及びＲ_８は独立して、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミド、ＣＦ_３、及びヒドロキシルからなる群から選択され；
Ｙ及びＺはそれぞれ独立して、Ｃ及びＮから選択され；
Ｘは、各環が５−６員、好ましくは６員で、芳香族又は部分的に不飽和の、分離又は縮合した環である２−３の環を含む既知の環系の一つから誘導されるビラジカルであり；各環は、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される一又は複数の基で置換されていてもよく；環員の各一が、Ｃ、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択され；
但し、Ｘは、クロマン、アントラセン、式：

のビラジカル、又は化合物２,６-ビス[(３,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレンではない]
のポリヒドロキシル化化合物、その立体異性体、その薬学的に許容可能な塩、又はその薬学的に許容可能な溶媒和物が提供される。

本発明の第２の態様は、適切な量の薬学的に許容可能な希釈剤又は担体と組合せて、Ｘがクロマン又は

ではない有効量の式(Ｉ)の化合物、その立体異性体、その薬学的に許容可能な塩、又はその薬学的に許容可能な溶媒和物を含有する薬学的組成物に関する。

また本発明は、ヒトを含む哺乳動物において、ＦＡＳＮにより媒介される非常に広範囲の疾患、及び関連する臨床的兆候の処置及び／又は予防用の医薬を製造するための上述した薬学的組成物であって、このような疾患が癌及び肥満症から選択される薬学的組成物に関する。
従って、本発明の第３の態様は、ヒトを含む哺乳動物において、ＦＡＳＮにより媒介される疾患、及び関連する臨床的兆候の処置及び／又は予防用の医薬を製造するための、Ｘがクロマン又は

ではない上述した式(Ｉ)の化合物、その立体異性体、その薬学的に許容可能な塩、又はその薬学的に許容可能な溶媒和物の使用に関する。好ましくは、このようなＦＡＳＮにより媒介される疾患は、癌又は肥満症である。
この第３の態様は、適切な量の薬学的に許容可能な希釈剤又は担体と組合せて、Ｘがクロマン又は

ではない治療的有効量の式(Ｉ)の化合物を患者に投与することを含む、上述の疾患のいずれかに罹患した、又は罹患しやすい、ヒトを含む哺乳動物を処置及び／又は予防する方法として構成される。

本発明の第４の態様は、Ｘがクロマン、アントラセン、又は

ではない上述した式(Ｉ)の化合物を調製する方法であって、
ａ）式(ＩＩ)

[上式中、Ｘは上述したものである]
のジヒドロキシ誘導体を、式(ＩＩＩ)及び(ＩＶ)

[上式中、Ｙ、Ｚ及びＲ_１-Ｒ_８は上述したものであり；Ｇｐ_１及びＧｐ_２はそれぞれ独立して、ヒドロキシル保護基である]
のカルボン酸と反応させ、式(Ｖ)の保護された中間生成物を得；
ｂ）中間生成物(Ｖ)

[上式中、Ｇｐ_１、Ｇｐ_２及びＲ_１-Ｒ_８は上述したものである]
を脱保護して、式(Ｉ)の最終化合物を得る
工程を含む方法に関する。

場合によっては、化合物が得られたら直ぐに、それを、当該分野で知られている一般的な方法により、その薬学的に許容可能な塩に変換させることができる。
場合によっては、化合物又はその薬学的に許容可能な塩が得られたら直ぐに、それを、当該分野で知られている方法を使用してそのプロドラッグに変換させることができる。例えば、本発明の化合物は、一又は複数のヒドロキシ基をエステルに転換させることによって、プロドラッグに変換させることができる。

Ｘがクロマン、アントラセン、又は

である式(Ｉ)の化合物は、同様な方法で調製することができる。

本方法の工程(ａ)及び(ｂ)の双方をスキーム１に示す。

本発明は、さらに上述した薬学的組成物、再構成剤、及び癌の処置又は予防のための組合せた各作用物質（アクター）を使用するための使用説明書を収容する別個の容器を含むキットを提供する。また再構成法も提供する。

本発明者は、驚くべきことに、顕著なＦＡＳＮ阻害活性を示す化合物のあるクラスを同定した。

定義
本発明の詳細な実施態様の検討の前に、本発明の主要な態様に関連する特定の用語の定義を提供する。
波線は、部分の結合点を示す。
ここで使用される「薬学的に許容可能な塩」なる用語は、有機及び無機酸から誘導される塩を意味する。一般式(Ｉ)の化合物は、常法により、その薬学的に許容可能な塩、又はその薬学的に許容可能な溶媒和物に転換されうる。例えば、このような塩は、所望する薬学的に許容可能な金属水酸化物又は他の金属塩基の水溶液で、一又は複数の化合物を処理し、好ましくは窒素雰囲気における減圧下で、得られた溶液を蒸発乾固させることにより調製されうる。また、式(Ｉ)の化合物の溶液を、所望する金属のアルコキシドと混合し、逐次、溶液を蒸発乾固させてもよい。薬学的に許容可能な水酸化物、塩基及びアルコキシドには、(限定されるものではないが)カリウム、ナトリウム、アンモニウム、カルシウム、及びマグネシウムを含む、この目的にとって価値のあるカチオンのものが含まれる。他の代表的な薬学的に許容可能な塩には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、プロピオン酸塩、硝酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、及び類似した既知の許容可能な塩が含まれる。しかしながら、製薬的に許容可能ではない塩も、薬学的に許容可能な塩の調製に有用である場合があるため、本発明の範囲に含まれることが理解される。

ここで使用される「(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル」なる用語は、１〜４の炭化水素原子を有する飽和した分枝状又は直鎖状の炭化水素鎖を意味する。好ましくは、「(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル」は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ-ブチル及びｔ-ブチルから選択される未置換基である。
ここで使用される「(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ」なる用語は、酸素に結合した１〜４の炭化水素原子を有する飽和した分枝状又は直鎖状の炭化水素鎖(すなわち、上述した(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル基)、よって(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル-Ｏを意味する。好ましくは、「(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ」は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓ-ブトキシ、及びｔ-ブトキシから選択される未置換基である。

「ハロゲン」なる用語は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を含むことを意味する。
「溶媒和物」なる用語は、一又は複数の溶媒分子と、この発明の化合物と物理的に結合したものを意味する。この物理的結合には、水素結合が含まれる。ある例において、溶媒和物は、結晶性固体の結晶格子に、一又は複数の溶媒分子が組み込まれた場合に単離可能である。「溶媒和物」は溶液相及び単離可能な溶媒和物の双方を含む。代表的な溶媒和物には、水和物、エタノラート類、メタノラート類等が含まれる。

「保護基」なる用語は、一又は複数の化学合成工程に参加し又は干渉する活性部分又は基を保護又は防止する化学部分又は基を意味し、それを除去することで、該部分は、その元々の活性状態に復元する。ここで使用される保護基なる用語は、合成手順中、所望しない反応から保護することを意図した基を意味する。このような保護基は当業者によく知られている。保護基の具体例は、Greenら,「Protective Groups in Organic Chemistry」(Wiley, 第2版. 1991), McOmieら,「Protective Groups in Organic Chemistry」(Plenam Press, New York, 1973)、及びHarrisonら,「Compendium of Synthetic Organic Methods」, Vols. 1-8(John Wiley and Sons, 1971-1996)に見出すことができる。保護基は、酸、塩基、フッ素イオン、水素化、金属、例えば亜鉛を用いて、同様に当該分野でよく知られている数々の他の方法により除去することができる。当業者であれば、過度の実験をすることなく、本発明の方法論的態様に従い、合成反応を促進させるための適切な保護基を容易に選択できるであろう。代表的なアミノ保護基には、限定されるものではないが、ホルミル、アセチル、トリフルオロアセチル、ベンジル、ベンジルオキシカルボニル(「ＣＢｚ」)、tert-ブトキシカルボニル(「ＢＯＣ」)、トリメチルシリル(「ＴＭＳ」)、terc-ブチルジメチルシリル(「ＴＢＳ」)、２-トリメチルシリル-エタンスルホニル(「ＳＥＳ」)、トリチル及び置換されたトリチル基、アリルオキシカルボニル、９-フルオレニルメチルオキシカルボニル(「ＦＭＯＣ」)、ニトロ-ベラトリルオキシカルボニル(「ＮＶＯＣ」)等が含まれる。代表的なヒドロキシ保護基には、限定されるものではないが、ヒドロキシ基がアシル化又はアルキル化されるもの、例えばベンジル(Ｂｎ)、及びトリチルエーテル、並びにアルキルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、トリアルキルシリルエーテル、及びアリルエーテルが含まれる。Ｂｎ基又はトリアルキルシリルエーテルが、ヒドロキシルの保護に対して好ましい基である。

ここで使用される場合、「癌の発症」なる用語は、癌細胞の最初の出現を意味すると理解される。「癌細胞」とは、自己増殖特性を有し、隣接する組織に侵入する細胞を意味する。
ここで使用される場合、「それを必要とする被験者」なる用語は、前癌期であると診断され、癌を発症しており、又は遺伝的又はそうではないが疾患を発症する素因を有しているおそれのある被験者を含むと理解される。あるいは、肥満症の患者であると診断されており、又は遺伝的又はそうではないが疾患を発症する素因を有しているおそれがあり、減量が示され又は示される可能性のある被験者を含む。
ここで使用される場合、「阻害」なる用語は、例えば前癌期細胞においてアポトーシス(すなわち、プログラムされた細胞死)を刺激し、誘導し又は誘引させることにより、癌の発症を予防し、抑制し、妨害し、ブロックし又は遅延化させることを意味すると理解される。

ここで使用される「ＦＡＳＮの活性を阻害」なる表現は、ＦＡＳＮ活性を１０％〜１００％低減させることを意味する。より好ましくは、「ＦＡＳＮの活性を阻害」なる表現は、ＦＡＳＮ活性を２５％〜１００％低減、最も好ましくはＦＡＳＮ活性を５０％〜１００％低減させることを意味する。本発明は、ＦＡＳＮ活性に必要とされる前述の７つの酵素工程のいずれかを介して、及び任意の固有の工程又はプロセスを介して、ＦＡＳＮを阻害することを考慮している。ＦＡＳＮ活性の低減又は変化は、当業者に知られている任意の方法により測定することができる。

「ＦＡＳＮ阻害剤」には、競合的及び非競合的ＦＡＳＮ阻害剤が含まれる。競合的ＦＡＳＮ阻害剤は、相互に基質結合を含まない形でＦＡＳＮ酵素に結合する分子である。典型的には、ＦＡＳＮの競合的阻害剤は活性部位に結合するであろう。非競合的ＦＡＳＮ阻害剤は、脂肪酸の合成を阻害するものであるが、その酵素への結合は、基質結合に対して相互に排他的ではない。この発明で考慮されるＦＡＳＮ阻害剤は、少なくとも同程度の濃度で、他の細胞性活性に何ら有意な影響を及ぼすことなく、動物細胞のＦＡＳＮ活性を低減させる化合物である。

本発明の化合物は少なくとも一のキラル中心を有し、よって「立体異性体」、例えばジアステレオマーを形成し得ることは当業者には明らかである。ラセミ形態、並びに全ての光学異性体は本発明の一部であり、よって請求の範囲に含まれる。

本発明の一実施態様によれば、本発明は、Ｘが、各環が５−６員で、芳香族又は部分的に不飽和の、分離又は縮合した環である２−３の環を含む既知の環系の一つのビラジカル誘導体であり；それぞれが、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される一又は複数の基で置換されていてもよく；環員の各一が、Ｃ及びＮから独立して選択され；
但し、Ｘが、アントラセン又は

ではない式(Ｉ)のポリヒドロキシル化化合物が提供される。

本発明の好ましい実施態様によれば、式(Ｉ)の化合物は、Ｘが、ナフタレン、テトラヒドロナフタレン及びビフェニルからなる群から選択され、場合によっては、それぞれが(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される一又は複数の基で置換されていてもよいものである。

好ましい実施態様では、Ｘがビフェニルである場合、このようなビフェニル部分は、

[上式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は独立して、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される]
から選択される。好ましくは、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は独立して、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル及び(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキルエステルから選択される。

他の好ましい実施態様では、Ｘがテトラヒドロナフタレンである場合、このようなテトラヒドロナフタレン部分は、

[上式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３及びＲ_４は独立して、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される]
から選択される。好ましくは、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３及びＲ_４は独立して、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル及び(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキルエステルから選択される。

他の好ましい実施態様によれば、本発明は、Ｘが、

[上式中、各環系は、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドから選択される一又は複数の基で置換されていてもよい]
からなる群から選択される化合物に関する。好ましくは置換基は、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステルから選択される。

本発明の他の特定の実施態様によれば、上述した好ましい化合物は、式(Ｉ)の次のフラグメント

が、次のもの

から選択されるものである。
本発明の特定の実施態様によれば、好ましい化合物は、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７及びＲ_８の少なくとも２つがヒドロキシルに等しいものである。

次の化合物が特に好ましい：
２,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｅ)；
１,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｆ)；
１,３-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｇ)；
１,３-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｈ)；
１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｉ)；
１,４-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｊ)；
１,４-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｋ)；
２,６-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｌ)；
１,５-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｍ)；
２,５-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｏ)；
６-(ベンゾイルオキシ)-１,１'-ビフェニル-３-イル-３,４,５-トリヒドロキシベンゾアート(ｐ)；
４,４'-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｑ)；
４,４'-ビス[(２,６-ジヒドロキシイソニコチノイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｒ)；
４,４'-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｓ)；
４,４'-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｔ)；
４'-[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル-４-イル-４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾアート(ｕ)；
４'-[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル-４-イル-３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシベンゾアート(ｖ)；
１,３-ビス[(４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｗ)；
１,３-ビス[(３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｘ)；
１,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ｙ)；
１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ｚ)；
１,４-ビス[(３,５-ジヒドロキシ-４-メチルベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ａａ)；
４-[(３,５-ジヒドロキシ-４-メチルベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン-１-イル-３,４,５-トリヒドロキシベンゾアート(ｂｂ)；
メチル-１-[(４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｃｃ)；
メチル-１-[(３-ヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｄｄ)；及び
メチル-１-[(４-ヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｅｅ)。

最終生成物は、ＩＲ、ＮＭＲ、及びＭＳ技術により、構造的に特徴付けされる。取り扱いをより容易にするために、最終生成物が結晶性ではない場合、無機又は有機の酸又は塩基から誘導される薬学的に許容可能な塩に転換される。
本発明の化合物は、ＦＡＳＮに対して有意な阻害活性を示す。
実施例に示すように、化合物ｆ及びｉは、ＣＰＴ-１活性を同時に阻害することなく、ＦＡＳＮ活性を有意に阻害した(細胞暴露の６時間後、ＦＡＳＮ活性の５０％が低減)。

本発明の化合物は、種々の腫瘍細胞株に対して際だった細胞毒性を示し、アポトーシス(ＰＡＲＰの切断)を誘導し、非悪性細胞に影響を与えることなく、腫瘍性タンパク質ＨＥＲ２、Ａｋｔ及びＥＲＫ１／２の活性形態を顕著に低減させる。特に際だっているのが、乳癌細胞の増殖に対するその活性である。

ＳＫ-Ｂｒ３細胞におけるＥＧＣＧの相対的ＩＣ_５０比は、化合物ｆに対しては７．５(１５０μＭ／２０μＭ)であり、化合物ｉに対しては５．４(１５０μＭ／２８μＭ)である。化合物ｆ及び化合物ｉはアポトーシス(ＰＡＲＰの切断)を誘導し、処置後２時間以内に、腫瘍性タンパク質ＨＥＲ２、Ａｋｔ及びＥＲＫ１／２の活性形態を顕著に低減させた。同様の阻害剤濃度では、非悪性細胞は影響を受けなかった。総括すると、結果には、化合物ｆ及びｉが強力で、ＦＡＳＮの特異的な阻害剤であり、乳癌細胞の増殖を阻害することが示されている。

ドラッグデザインの分野において、薬理学的に活性な化合物の任意の構造的修飾は、構造的特徴と活性度との間に実証された相関関係が存在しないならば、当初の構造の薬理学的活性プロファイルを乱すと、先験的に予期される。
本発明の化合物は、式の置換基の新規組合せ、特に、それらの構造体に存在する中心部分(Ｘ)の特異的選択によって、従来技術に記載されている化合物とは構造的に異なる。これらの構造的変化は、従来技術においては開示も示唆もされていない。これらの構造的変化により、種々の癌細胞株の増殖を阻害する際だった活性を有するＦＡＳＮ阻害剤として有用である化合物が得られる。

ここに定義される式(Ｉ)の化合物のプロドラッグである任意の化合物は、本発明の範囲及び趣意に入る。「プロドラッグ」なる用語は広義の意味で使用され、代謝(例えば加水分解)により、インビボにおいて、そのＮ-オキシド類を含む本発明の化合物に転換されるそれらの誘導体を含む。プロドラッグは、いくつかの状況では、親薬剤よりも投与が容易であるため、多くの場合で有用である。例えば、それらは経口投与により体内に吸収されて利用され得るが、親薬剤はそうではない場合がある。またプロドラッグは薬学的組成物において、親薬剤よりも改善された溶解度を有する場合もある。さらにプロドラッグは、改善された化学的安定性、改善された患者許容性及びコンプライアンス、改善された生物学的利用能、長時間にわたる作用の持続時間、改善された器官選択性、改善された処方性(例えば、増加した水溶解性)、及び／又は低減した副作用(例えば、毒性)を有し得る。

本発明で考慮されるプロドラッグの種類のさらなる情報については、以下の参考文献を挙げることができる：Fleicherら, Advanced Drug Delivery Review 19(1996) 115-130；Design of prodrugs, H. Bundgaard編, Elsevier, 1985；H. Bungaard, Drugs of the Future 16(1991) 443；Saulnierら. Bioorg. Med. Chem. Lett. 4(1994) 1985；Safadiら Pharmaceutical Res. 10(1993) 1350。式(Ｉ)の化合物の種々の適切なプロドラッグには好ましくはヒドロキシ基のエステルの形態がある。

薬学的生成物
他の実施態様では、本発明は、一又は複数の式(Ｉ)の化合物、それらの立体異性体、プロドラッグ、薬学的に許容可能な塩、又は薬学的に許容可能な溶媒和物、及び場合によっては一又は複数の薬学的に許容可能な担体、賦形剤又は希釈剤を含有する薬学的組成物を提供する。ここで使用される場合、「担体」なる用語は、担体、賦形剤及び希釈剤を含む。
このような担体の具体例は、当業者によく知られており、許容可能な製薬的手順に従い調製される。薬学的に許容可能な担体は、製剤中の他の成分と融和性があり、生物学的に許容可能な担体である。

本発明の化合物又は組成物の投与は、任意の適切な方法、例えば経口的、経皮的、非経口的、筋肉内、静脈内、皮下的、又は他の投与方式によりなされうる。好ましくは、薬学的生成物は、経口的に投与することができる。好ましくは、本発明の化合物の薬学的組成物は、静脈内投与に適した組成物と共にされた液体(溶液、懸濁液又はエマルション)を含み、それらは、純粋な化合物を、又は任意の担体又は他の薬理学的に活性な化合物と組合せて含有してもよい。

我々は、２４時間まで、さらに好ましくは２−１２時間、最も好ましくは２−６時間の注入時間が使用されることを好む。注入時間が短いと、病院に一晩滞在することなく処置を実施することができ、特に好ましい。しかしながら、必要であるならば、１２〜２４時間又はそれ以上の注入としてもよい。注入は、１〜４週間といわれる適切な間隔で実施されてよい。投与は、好ましい投与方法では、周期的に実施することができ、本発明の化合物の静脈内注入が、各サイクルの最初の週に患者になされ、患者はサイクルの残りについて回復が許される。各サイクルの好ましい持続時間は１、３又は４週間のいずれかであり；必要な場合は、複数回のサイクルを付与することができる。変形例として、他のプロトコルを考案することもできる。処置される個々の患者の耐性に応じて、必要な場合は、投与の遅延化、及び／又は投与量の低減、及びスケジュールの調節が行われる。投与量についての指針は上述した通りであるが、化合物の正確な投与量は、特定の製剤、適用方法、及び処置される特定の位置、宿主又は腫瘍によって変えられるであろう。他の要因、例えば年齢、体重、性別、食餌、投与時間、排出率、宿主の状態、複合薬、反応感度、及び疾患の重篤度を考慮すべきである。投与は、最大耐性用量の範囲内で、連続的又は定期的に実施することができる。

本発明の化合物を含有する薬学的組成物は、徐放性製剤において、リポソーム又はナノスフェアカプセル化により、又は他の標準的な送達手段により送達されうる。
化合物の正確な投与量は、特定の製剤、適用方式、及び処置される特定の位置、宿主及び腫瘍によって変えられるであろう。
この発明の化合物及び組成物は、他の薬剤と共に使用され得、併用療法が提供される。他の薬剤が、同じ組成物の一部を形成してもよく、又は同時にもしくは異なる時間に投与される別々の組成物として提供されうる。

代表的な固体状担体には、香味料、滑剤、可溶化剤、懸濁剤、フィラー、流動促進剤、圧縮補助剤、バインダー、錠剤崩壊剤、又はカプセル化物質として作用可能な、一又は複数の物質が含まれる。この発明の活性化合物を含有する経口用製剤は、錠剤、カプセル、口腔用形態、トローチ、薬用キャンディー、及び経口用の液体、懸濁液又は溶液を含む、任意の従来から使用されてる経口形態を含んでよい。パウダーにおいて、担体は、微細に分割された活性成分と混合された、微細に分割された固形物である。錠剤において、活性成分は、適切な割合で、必要な圧縮特性を有する担体と混合され、所望される形状及びサイズに圧密される。
カプセルは、不活性なフィラー及び／又は希釈剤、例えば薬学的に許容可能なデンプン、糖類、人工的な甘味料、パウダー状セルロース、例えば結晶性及びマイクロクリスタリンセルロース、小麦粉、ゼラチン、ガム類等と、活性化合物との混合物を含みうる。

有用な錠剤製剤は、従来からの圧縮、湿式造粒法又は乾式造粒法により作製され得、薬学的に許容可能な希釈剤、結合剤、滑剤、錠剤崩壊剤、表面改質剤(界面活性剤を含む)、懸濁剤又は安定剤で、限定されるものではないが、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、マイクロクリスタリンセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、アルギン酸、アカシアガム、キサンタンガム、クエン酸ナトリウム、ケイ酸錯体、炭酸カルシウム、グリシン、デキストリン、スクロース、ソルビトール、リン酸二カルシウム、硫酸カルシウム、ラクトース、カオリン、マンニトール、塩化ナトリウム、タルク、デンプン、糖類、低融点ワックス、及びイオン交換樹脂を含むものを利用してもよい。好ましい表面改質剤には、非イオン性及びアニオン性の表面改質剤が含まれる。表面改質剤の代表例には、限定されるものではないが、ポロキサマー１８８、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、セトステアリルアルコール、セトマクロゴール乳化ワックス、ソルビタンエステル、コロイダル(colloidol)二酸化ケイ素、ホスファート、ドデシル硫酸ナトリウム、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、及びトリエタノールアミンが含まれる。ここで、経口用製剤は、活性化合物の吸収性を変化させるために、標準的な遅延化又は持続放出性製剤に利用されうる。また経口用製剤は、必要な場合に、適切な可溶化剤又は乳化剤を含有する、水又は果汁に活性成分を投与することからなるものであってもよい。

液状担体は、溶液、懸濁液、エマルション、シロップ、及びエリキシル剤の調製に使用することができる。活性成分は、薬学的に許容可能な油又は脂肪に溶解又は懸濁させることができる。液状担体は、他の適切な薬学的添加剤、例えば可溶化剤、乳化剤、バッファー、保存料、甘味料、香味料、懸濁剤、増粘剤、着色料、粘度調節剤、安定剤、又は浸透圧調節剤を含有することができる。経口及び非経口投与用の液状担体の適切な例には、水(特に上述した添加剤、例えばセルロース誘導体、好ましくはカルボキシメチルセルロースナトリウム溶液を含有)、アルコール類(一価アルコール及び多価アルコール、例えばグリコール類を含む)及びそれらの誘導体、及び油(例えば、分画されたココナツ油及びラッカセイ油)が含まれる。

非経口投与用に、担体は、油性エステル、例えばオレイン酸エチル及びミリスチン酸イソプロピルとすることができる。非経口投与用には、滅菌された液状担体が、滅菌された液状形態の組成物に使用される。加圧組成物用の液状担体は、ハロゲン化炭化水素、又は他の薬学的に許容可能な噴霧剤であってもよい。

またこの発明の組成物は、非経口的又は腹腔内に投与されてもよい。遊離の塩基又は薬学的に許容可能な塩としてのこれらの活性化合物の溶液又は懸濁液は、水中で、界面活性剤、例えばヒドロキシ-プロピルセルロースと適切に混合することにより調製することができる。また分散液は、グリセロール、液状ポリエチレングリコール、及びそれらと油との混合物において調製することができる。通常の保管及び使用条件下で、これらの調製物は、微生物の成長を阻害する保存料を含む。

注射使用に適した薬学的形態には、滅菌された水溶液又は分散液、及び滅菌された注射用溶液又は分散液を即席で調製するための滅菌パウダーが含まれる。それは、製造及び保管条件下では安定していなければならず、微生物、例えば細菌及び真菌の汚染作用を防止しなければならない。担体は、例えば水、エタノール、ポリオール(例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液状ポリエチレングリコール)、それらの適切な混合物、及び植物性油を含む、溶媒又は分散液であってよい。

通常、本発明の化合物は、再構築に適した凍結乾燥形態に、適切に調製することができる。再構築は、乳化可溶化剤、アルカノール及び水の混合物を用いて、好ましくは達成される。凍結乾燥された組成物は、好ましくは主として、増量剤、例えば少なくとも９０％又は少なくとも９５％の増量剤を含む。

製剤は、単一投与又は複数回投与用の容器、例えば密封されたアンプル又はバイアルで提供されてよく、又は使用直前に、滅菌された液状担体、例えば注射用には水の添加のみが必要なフリーズドライ(凍結乾燥)状態で保存されうる。よって、本発明は、凍結乾燥された組成物と再構築剤を収容する決別の容器を具備するキットを、さらに提供する。また、再構築法も提供される。
ここに記載したような薬学的生成物は、他の製薬的に活性な物質を含んでいてもよい。それは、一又は複数の製薬的に耐性のある担体と活性化合物とを混合し、混合物を適切な薬学的形態に転換させることによって調製可能である。

臨床症状における使用
ＦＡＳＮを際だって阻害することを考慮すると、式(Ｉ)の化合物は、ＦＡＳＮの阻害が効能がある病的状態の処置及び／又は予防、例えば哺乳動物、特にヒトにおける癌又は肥満症の処置及び／又は予防に有用である。

本発明の化合物を使用して処置可能な癌には、限定されるものではないが、血液細胞癌、例えば自己免疫性リンパ増殖症候群(ＡＬＰＳ)、慢性リンパ芽球性白血病、ヘアリーセル白血病、慢性リンパ性白血病、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、エプスタイン-バーウイルス-陽性Ｔ細胞リンパ腫、組織球性リンパ腫、ホジキン病、びまん性侵攻性リンパ腫、急性リンパ性白血病、Ｔガンマリンパ球増殖性疾患、皮膚Ｂ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫(すなわち、菌状息肉腫)、セザリー症候群、急性骨髄性白血病、慢性又は急性のリンパ芽球性白血病、及びヘアリーセル白血病が含まれる。本発明の方法で処置可能なさらなる癌には、固形腫瘍、特に肉腫、骨肉腫、及び癌腫、例えば腺癌(中でも乳癌)、及び扁平上皮癌、エプスタイン-バーウイルス-陽性上咽頭癌、グリオーマ、結腸、胃、前立腺、腎臓の細胞、子宮頸部及び卵巣の癌、肺癌(小細胞肺癌(ＳＣＬＣ)及び非小細胞肺癌(ＮＳＣＬＣ))が含まれる。好ましい癌は、胸部、前立腺、結腸、卵巣、子宮内膜、中皮、肺、甲状腺、胃及び脳にあるものである。

また、多発性骨髄腫を含む、浸潤性転移能を有する悪性腫瘍も、本発明の方法で処置することができる。上述した癌を処置することにより、癌に関連した兆候、癌関連性の悪液質、疲労、無力症、悪液質の腫瘍随伴症候群、及び高カルシウム血症が軽減又は改善されるであろうと考慮される。

さらなる実施態様では、患者が固形腫瘍又は転移する腫瘍について処置されたケースでは、免疫細胞アクチベータと本発明の化合物との同時投与は、腫瘍量の外科的低減の後になされることが考慮される。さらに、患者が免疫学的に抑圧又は疲弊しないように、疾患進行の初期段階で、患者を治療可能であることが考慮される。

治療的有効量とは、兆候を改善するのに十分な化合物の量を意味する。癌の兆候には、痛み、消耗、及び／又は食欲の喪失、腫瘍量、吐き気、疲労、下痢、嘔吐、及び便秘が含まれる。ＦＡＳＮ阻害剤が他の治療剤と同時投与される場合、投与量は、治療剤の間で生じる任意の相互作用に応じて変えられる。
ここで所望の化合物は、脂肪酸の生合成経路の少なくとも一の酵素を発現する腫瘍細胞を処置する医薬の調製に使用することができる。特に、脂肪酸合成酵素(ＦＡＳＮ)を発現する腫瘍細胞、及び／又は脂肪組織量の低減に敏感な状態を処置、又は減量誘発を処置する医薬の調製に使用される。

本明細書及び請求の範囲にわたって、「含む」なる用語、及びその変形例、例えば「含有する」は、他の技術的特徴、添加剤、成分、又は工程を排除することを意図していない。
本発明のさらなる目的、利点及び特徴は、本記載の実験時に、当業者には明らかになるであろうし、又は本発明の実施により学ぶこともできるであろう。以下の実施例及び図は、例証のために提供されるものであって、本発明を限定することを意図しているわけではない。

図１は、ＥＧＣＧ及び新規の化合物ｅ、ｆ、ｉ、ｈ、ｋ、ｍ及びｑが、ＳＫ-Ｂｒ３乳癌細胞において、ＦＡＳＮ活性を阻害することを示す。試験化合物を用い、細胞を、６、１２及び２４時間処理し、粒子の存在しない上清において、ＦＡＳＮ活性(％ｎｍｏｌ酸化ＮＡＤＰＨ／分．ｍｇコントロール細胞タンパク質)を分光光度的にアッセイした。図２は、Ｃ７５がＣＰＴ-１活性を刺激し、これに対して化合物ｅ、ｆ、ｉ、ｏ及びｑがそうではないことを示す。P. pastorisを、ラットＣＰＴ-１をコードするプラスミドを用いて形質転換した。これらの細胞から単離されたミトコンドリアを、ＤＭＳＯ(コントロール)、Ｃ７５、ＥＧＣＧ及び化合物ｅ、ｆ、ｉ、ｏ又はｑの存在下、ＣＰＴ-１活性(％ｍＵ／ｍｇ／分コントロール)についてアッセイした。

(特定の実施態様の詳細な説明)
実施例１．一般構造(Ｉ)の化合物の合成。一般的手順(スキーム１を参照)。
式(ＩＶ)のカルボン酸(２．２当量)を、アルゴン雰囲気下、３０分、無水テトラヒドロフランにおいてはＤＣＣ(２．２当量)及びＤＭＡＰ(０．２当量)を用い、又は無水トルエンにおいては塩化チオニル(３．３当量)を用いて処理した。ついで、ＴＨＦ又はピリジンに、式(ＩＩ)のジヒドロキシ誘導体(１当量)の溶液を滴下し、反応混合物を４０-５０℃で一晩攪拌した。混合物を濾過し、減圧下、溶媒を蒸発乾固させた。粗物質をジクロロメタンに再懸濁させ、重炭酸ナトリウムの５％水溶液で洗浄した。有機相を乾燥させ、溶媒を蒸発させた後に、適切な溶離液を使用し、シリカゲルにおけるカラムクロマトグラフィーにより残留物を精製し、一般式(Ｖ)の保護された中間生成物を得た。

また、式(ＩＩＩ)のカルボン酸(１．１当量)を、同様の試薬と条件を使用し、式(ＩＩ)のジヒドロキシ誘導体(１当量)で処理し、ついで、得られたモノエステル(１当量)を、同様の試薬と条件を使用し、式(ＩＶ)のカルボン酸(１．１当量)とカップリングさせ、一般式(Ｖ)の保護された中間生成物を得た。

ジクロロメタン／エタノールの混合物に式(Ｖ)のベンジル化中間生成物が入った溶液に、２０％の酸化パラジウム-炭素を添加し、混合物を室温で水素化した。ついで、触媒を濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させ、固体として式(Ｉ)の所望する最終化合物を得、適切な溶媒からの再結晶により精製した。

また、テトラヒドロフランに式(Ｖ)のシリル化中間生成物が入った溶液を、室温にて、フッ化水素酸-ピリジン複合体で処理した。ついで、水を添加し、溶液を酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和したＣｕＳＯ_４水で洗浄した。式(Ｉ)の最終化合物を適切な溶媒から再結晶化し、又は適切な溶離液を使用し、シリカゲルにおけるカラムクロマトグラフィーにより精製した。

実施例２．１,２-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ベンゼン(ａ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸とピロカテコールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：３７％(ａ)、４４％(ｂ)；ｍｐ：２１０℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４２７、１６８９、１６２４ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．０８(ｓ,４Ｈ)、７．２９-７．３７(ｍ，４Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＤＭＳＯ)：δ１０９．１(４Ｃ)、１１８．１(２Ｃ)、１２３．２(２Ｃ)、１２６．０(２Ｃ)、１４２．０(４Ｃ)、１４５．０(４Ｃ)、１６３．５(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４１２．９。

実施例３．１,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ベンゼン(ｂ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸とレゾルシノールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：６８％(ａ)、３８％(ｂ)；ｍｐ：１９４-１９５℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３７０、１７１８、１６１８、１２００ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．０６-７．１４(ｍ,３Ｈ)、７．２０(ｓ,４Ｈ)、７．４８(ｔ,Ｊ＝８．４,１Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１１０．７(４Ｃ)、１１７．１(２Ｃ)、１２０．３(２Ｃ)、１３０．８(２Ｃ)、１４０．８(２Ｃ)、１４６．８(４Ｃ)、１５３．３(２Ｃ)、１６６．７(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４１２．８。

実施例４．２-メチル-１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ベンゼン(ｃ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸と２-メチルベンゼン-１,４-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：５２％(ａ)、６７％(ｂ)；ｍｐ：２５６℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３８５、１６９２、１６０４、１２０９ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ２．３１(ｓ,３Ｈ)、６．９５(ｄｄ,Ｊ＝８．６,２．９,１Ｈ)、７．０１-７．０５(ｍ,２Ｈ)、７．１０(ｓ,２Ｈ)、７．１３(ｓ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１６．４、１１０．７(４Ｃ)、１２０．４、１２０．６、１２１．３、１２４．１、１２５．２、１３３．１、１４０．６、１４０．７、１４６．７(２Ｃ)、１４６．８(２Ｃ)、１４８．０、１５０．１、１６６．７、１６７．０。ＭＳ：Ｍ＋Ｈ＝４２９．０。

実施例５．２-メトキシ-１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ベンゼン(ｄ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸と２-メトキシベンゼン-１,４-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４５％(ａ)、７７％(ｂ)；ｍｐ：２１４-２１６℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３６９、１７１２、１６１６、１１７５ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ３．７０(ｓ,３Ｈ)、６．７０(ｄｄ,Ｊ＝８．６,２．５,１Ｈ)、６．８７(ｄ,Ｊ＝２．５,１Ｈ)、７．０５(ｄ,Ｊ＝８．６,１Ｈ)、７．０９(ｓ,２Ｈ)、７．１１(ｓ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ５６．７、１０８．２、１１０．７(２Ｃ)、１１０．８(２Ｃ)、１１４．７、１２０．４、１２０．５、１２４．２、１３９．１(２Ｃ)、１４０．７、１４６．７(２Ｃ)、１４６．８(２Ｃ)、１５１．０、１５３．５、１６６．７、１６７．０。ＭＳ：Ｍ＋Ｈ＝４４４．９。

実施例６．２,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｅ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸とナフタレン-２,３-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：５４％(ａ)、４０％(ｂ)；ｍｐ：１８２-１８３℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３０８、１７４３、１６１８、１１９４ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．１２(ｓ,４Ｈ)、７．５１-７．５６(ｍ,２Ｈ)、７．７９(ｓ,２Ｈ)、７．８９-７．９２(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１０９．３(４Ｃ)、１１８．４(２Ｃ)、１２０．６(２Ｃ)、１２５．９(２Ｃ)、１２６．９(２Ｃ)、１３１．７(２Ｃ)、１３９．２(２Ｃ)、１４１．９(２Ｃ)、１４５．１(４Ｃ)、１６５．０(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ＋Ｎａ＝４８７．０。

実施例７．１,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｆ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸とナフタレン-１,３-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４７％(ａ)、５０％(ｂ)；ｍｐ：１６３-１６４℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３８５、１７０９、１６０８、１１９８ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．１８-７．２７(ｍ,３Ｈ)、７．３４(ｓ,２Ｈ)、７．４５-７．６５(ｍ,３Ｈ)、７．８８-７．９６(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１０９．７(２Ｃ)、１０９．８(２Ｃ)、１１４．７、１１６．８、１１９．１、１１９．４、１２１．４、１２５．６、１２６．３、１２７．４、１２８．０、１３４．８、１３９．７、１３９．９、１４５．８(２Ｃ)、１４５．９(２Ｃ)、１４８．１、１４８．６、１６５．７、１６５．９。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４６２．７。

実施例８．１,３-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｇ)

表題化合物を、出発物質として、３,５-ジヒドロキシ安息香酸とナフタレン-１,３-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：６０％(ａ)、５２％(ｂ)；ｍｐ：１６７-１６９℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３８６、１７１０、１６０３、１１６６ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ６．５８(ｔ,Ｊ＝１．５,１Ｈ)、６．６２(ｔ,Ｊ＝１．５,１Ｈ)、７．１５(ｄ,Ｊ＝１．５,２Ｈ)、７．２３(ｄ,Ｊ＝１．５,２Ｈ)、７．３４(ｄ,Ｊ＝１．５,１Ｈ)、７．５４-７．６０(ｍ,２Ｈ)、７．７１(ｄ,Ｊ＝１．３,１Ｈ)、７．９０-７．９９(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１０９．０(２Ｃ)、１０９．３(４Ｃ)、１１５．４、１１７．９、１２２．２、１２６．４、１２７．４、１２８．４、１２９．９、１３１．７、１３２．１、１３５．７、１４８．８、１４９．３、１６０．０(２Ｃ)、１６０．１(２Ｃ)、１６６．３、１６６．５。ＭＳ：Ｍ＋Ｎａ＝４５４．８。

実施例９．１,３-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｈ)

表題化合物を、出発物質として、３,４-ジヒドロキシ安息香酸とナフタレン-１,３-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：５１％(ａ)、２６％(ｂ)；ｍｐ：７９-８１℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４２３、１７１２、１６０３、１１２６ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ６．９０(ｄ,Ｊ＝８．２,１Ｈ)、６．９５(ｄ,Ｊ＝８．２,１Ｈ)、７．２９(ｄ,Ｊ＝２．１,１Ｈ)、７．５０-７．７５(ｍ,７Ｈ)、７．８９-７．９７(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１１５．８、１１６．２、１１６．４、１１７．９、１１８．０(２Ｃ)、１２１．３、１２１．６、１２２．４、１２４．６、１２４．７、１２６．６、１２７．４、１２８．４、１２９．０、１３５．８、１４６．５、１４６．７、１４９．１、１４９．６、１５２．７、１５２．９、１６６．６、１６６．７。ＭＳ：Ｍ＋Ｎａ＝４５４．９。

実施例１０．１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｉ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸とナフタレン-１,４-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：６４％(ａ)、８８％(ｂ)；ｍｐ：２５２℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４０６、１７１８、１６１２、１１９６ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．３６(ｓ,４Ｈ)、７．３９(ｓ,２Ｈ)、７．５７-７．６０(ｍ,２Ｈ)、７．９２-７．９５(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１１０．８(４Ｃ)、１１９．２(２Ｃ)、１２０．２(２Ｃ)、１２２．８(２Ｃ)、１２８．２(２Ｃ)、１２９．４(２Ｃ)、１４０．９(２Ｃ)、１４６．２(２Ｃ)、１４６．９(４Ｃ)、１６７．１(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ＋Ｎａ＝４８６．９。

実施例１１．１,４-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｊ)

表題化合物を、出発物質として、３,５-ジヒドロキシ安息香酸とナフタレン-１,４-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：５７％(ａ)、６０％(ｂ)；ｍｐ：２０１-２０３℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４０６、１７０１、１６０８、１１５５ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ６．６３(ｔ,Ｊ＝２．２,１Ｈ)、７．２４(ｄ,Ｊ＝４．６,２Ｈ)、７．４２(ｓ,２Ｈ)、７．５９-７．６２(ｍ,２Ｈ)、７．９３-７．９６(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１０９．２(２Ｃ)、１０９．３(４Ｃ)、１１９．１(２Ｃ)、１２２．６(２Ｃ)、１２８．２(２Ｃ)、１２９．１(２Ｃ)、１３１．９(２Ｃ)、１４６．０(２Ｃ)、１６０．２(４Ｃ)、１６６．９(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ＋Ｎａ＝４５４．８。

実施例１２．１,４-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｋ)

表題化合物を、出発物質として、３,４-ジヒドロキシ安息香酸とナフタレン-１,４-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：２７％(ａ)、７６％(ｂ)；ｍｐ：２６１℃(メタノール／ジクロロメタン)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４９７、１７００、１６１０、１１２２ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ６．９３-７．０１(ｍ,２Ｈ)、７．４０(ｓ,２Ｈ)、７．５７-７．６３(ｍ,２Ｈ)、７．７０-７．７７(ｍ,４Ｈ)、７．９１-７．９５(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１１６．３(２Ｃ)、１１８．０(２Ｃ)、１１９．３(２Ｃ)、１２１．５(２Ｃ)、１２２．８(２Ｃ)、１２４．７(２Ｃ)、１２８．２(２Ｃ)、１２９．４(２Ｃ)、１４６．２(２Ｃ)、１４６．７(２Ｃ)、１５２．９(２Ｃ)、１６６．９(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ＋Ｎａ＝４５４．８。

実施例１３．２,６-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｌ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸とナフタレン-２,６-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４０％(ａ)、５４％(ｂ)；ｍｐ：２７２℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４１５、１７１２、１６０８。１２０５ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．２１(ｓ,４Ｈ)、７．３２(ｄｄ,Ｊ＝８．８,２．２,２Ｈ)、７．６６(ｄ,Ｊ＝２．２,２Ｈ)、７．９０(ｄ,Ｊ＝８．８,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１０９．６(４Ｃ)、１１８．８(２Ｃ)、１１９．５(２Ｃ)、１２２．４(２Ｃ)、１２９．０(２Ｃ)、１３２．２(２Ｃ)、１３９．７(２Ｃ)、１４５．７(４Ｃ)、１４９．３(２Ｃ)、１６６．１(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４６２．７。

実施例１４．１,５-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｍ)

表題化合物を、出発物質として、３,４-ジヒドロキシ安息香酸とナフタレン-１,５-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４２％(ａ)、３０％(ｂ)；ｍｐ：２６５℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４０６、１７１８、１６１８、１２０９ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．２９(ｓ,４Ｈ)、７．３３(ｄ,Ｊ＝７．０,２Ｈ)、７．４７(ｔ,Ｊ＝７．６,２Ｈ)、７．６０(ｄ,Ｊ＝８．０,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ _６ )：δ１０９．２(４Ｃ)、１１７．５(２Ｃ)、１１９．１(２Ｃ)、１１９．３(２Ｃ)、１２７．８(２Ｃ)、１２８．４(２Ｃ)、１３９．６(２Ｃ)、１４５．８(４Ｃ)、１４６．７(２Ｃ)、１６４．５(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４６２．７。

実施例１５．２,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１,４,４-テトラメチル-１,２,３,４-テトラヒドロナフタレン(ｎ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸と１,１,４,４-テトラメチル-１,２,３,４-テトラヒドロナフタレン-２,３-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：２０％(ａ)、９５％(ｂ)。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１．４０(ｓ,６Ｈ)、１．５２(ｓ,６Ｈ)、５．６１(ｓ,２Ｈ)、６．９９(ｓ,４Ｈ)、７．２４-７．２７(ｍ,２Ｈ)、７．４３-７．４６(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ２７．５(２Ｃ)、３０．９(２Ｃ)、４０．３(２Ｃ)、７８．０(２Ｃ)、１１０．４(４Ｃ)、１２１．５(２Ｃ)、１２７．７(２Ｃ)、１２７．９(２Ｃ)、１４０．０(２Ｃ)、１４３．６(２Ｃ)、１４６．６(４Ｃ)、１６８．１(２Ｃ)。

実施例１６．２,５-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｏ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸と１,１'-ビフェニル-２,５-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：５７％(ａ)、７５％(ｂ)；ｍｐ：１１４-１１６℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３６２、１７０１、１６１６、１１６５ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．０６(ｓ,２Ｈ)、７．２４(ｓ,２Ｈ)、７．２６-７．３８(ｍ,６Ｈ)、７．４５-７．４９(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１１０．６(２Ｃ)、１１０．７(２Ｃ)、１２０．４、１２０．５、１２２．８(２Ｃ)、１２４．９、１２５．４、１２８．９、１２９．５(２Ｃ)、１３０．０(２Ｃ)、１３７．６、１３８．２、１４０．７、１４６．６(２Ｃ)、１４６．８(２Ｃ)、１４７．０、１５０．４、１６６．９、１６７．０。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４８８．６。

実施例１７．６-(ベンゾイルオキシ)-１,１'-ビフェニル-３-イル-３,４,５-トリヒドロキシベンゾアート(ｐ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸、安息香酸及び１,１'-ビフェニル-２,５-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：２０％(ａ)、５４％(ｂ)；ｍｐ：８２-８４℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３８１、１７１３、１６１１、１１６４ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．０７(ｓ,２Ｈ)、７．２９-７．３９(ｍ,６Ｈ)、７．４７-７．５０(ｍ,２Ｈ)、７．５５-７．６０(ｍ,２Ｈ)、７．６８-７．７４(ｍ,１Ｈ)、８．２０-８．２４(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１１０．６(２Ｃ)、１２０．２、１２２．８、１２４．８、１２５．４、１２８．９、１２９．４(２Ｃ)、１２９．８(２Ｃ)、１２９．９(２Ｃ)、１３０．６、１３１．１、(２Ｃ)、１３５．０、１３７．６、１３８．０、１４０．５、１４６．６(２Ｃ)、１４７．１、１５０．０、１６６．６、１６６．９。ＭＳ：Ｍ＋Ｎａ＝４６４．９。

実施例１８．４,４'-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｑ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸と１,１'-ビフェニル-４,４'-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４４％(ａ)、７０％(ｂ)；ｍｐ：２６８℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３９６、１７０１、１６０８、１１９２ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ７．２４(ｓ,４Ｈ)、７．２４-７．２８(ｍ,４Ｈ)、７．６７-７．７１(ｍ,４Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１１０．８(４Ｃ)、１２０．８(２Ｃ)、１２３．５(４Ｃ)、１２９．２(４Ｃ)、１３９．４(２Ｃ)、１４０．６(２Ｃ)、１４６．９(４Ｃ)、１５２．４(２Ｃ)、１６７．２(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４８８．８。

実施例１９．４,４'-ビス[(２,６-ジヒドロキシイソニコチノイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｒ)

表題化合物を、出発物質として、２,６-ジヒドロキシイソニコチン酸と１,１'-ビフェニル-４,４'-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：２６％(ａ)、６６％(ｂ)；ｍｐ：２８５℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４５２、１７４２、１６４５、１２３４ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ６．５５(ｓ,４Ｈ)、７．４７(ｄ,Ｊ＝８．６,４Ｈ)、７．８７(ｄ,Ｊ＝８．６,４Ｈ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４５８．７。

実施例２０．４,４'-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｓ)

表題化合物を、出発物質として、３,５-ジヒドロキシ安息香酸と１,１'-ビフェニル-４,４'-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：７７％(ａ)、６５％(ｂ)；ｍｐ：２７２℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３２８、１７３３、１７０２、１６０４、１１６１ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ６．５７(ｔ,Ｊ＝２．３,２Ｈ)、７．１１(ｄ,Ｊ＝２．３,４Ｈ)、７．２９-７．３２(ｍ,４Ｈ)、７．７１-７．７４(ｍ,４Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１０９．１(２Ｃ)、１０９．４(４Ｃ)、１２３．３(４Ｃ)、１２９．１(４Ｃ)、１３２．４(２Ｃ)、１３９．５(２Ｃ)、１５２．１(２Ｃ)、１６０．１(４Ｃ)、１６７．２(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４５６．９。

実施例２１．４,４'-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｔ)

表題化合物を、出発物質として、３,４-ジヒドロキシ安息香酸と１,１'-ビフェニル-４,４'-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：１４％(ａ)、６０％(ｂ)；ｍｐ：２８６℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３２９５、１６９３、１６１０、１２１７、１２００ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ _６ )：δ６．９０(ｄ,Ｊ＝８．７,２Ｈ)、７．３３(ｄ,Ｊ＝８．５,４Ｈ)、７．５１-７．５３(ｍ,４Ｈ)、７．７５(ｄ,Ｊ＝８．６,４Ｈ)、９．５１(ｓ,２Ｈ)、９．９９(ｓ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ _６ )：δ１１５．９(２Ｃ)、１１７．１(２Ｃ)、１１９．８(２Ｃ)、１２２．９(４Ｃ)、１２３．０(２Ｃ)、１２８．１(４Ｃ)、１３７．３(２Ｃ)、１４５．８(２Ｃ)、１５０．８(２Ｃ)、１５１．７(２Ｃ)、１６４．８(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４５６．９。

実施例２２．４'-[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル-４-イル-４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾアート(ｕ)

表題化合物を、出発物質として、３,４-ジヒドロキシ安息香酸、４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシ安息香酸及び１,１'-ビフェニル-４,４'-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：６５％(ａ)、８８％(ｂ)；ｍｐ：２５２-２５４℃。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３８６、１７３４、１６９７、１５９９、１２１８、１１９８ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＣＯＣＤ _３ )：δ６．９９-７．０３(ｍ,１Ｈ)、７．３４-７．４６(ｍ,６Ｈ)、７．６３-７．６８(ｍ,２Ｈ)、７．７５-７．８１(ｍ,４Ｈ)、８．４９(ｂｒｓ,１Ｈ)、８．８７(ｂｒｓ,１Ｈ)、９．２９(ｂｒｓ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＣＯＣＤ _３ )：δ１０５．４(Ｃ)、１０９．２(２Ｃ)、１１６．０、１１７．６、１２１．９、１２３．１(２Ｃ)、１２３．３(２Ｃ)、１２４．２、１２８．７(２Ｃ)、１２８．８(２Ｃ)、１３０．４、１３８．４、１３８．９、１４５．８、１５１．６(２Ｃ)、１５１．９、１５６．５(２Ｃ)、１６４．９、１６５．２。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝５３５．０。

実施例２３．４'-[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル-４-イル-３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシベンゾアート(ｖ)

表題化合物を、出発物質として、３,４-ジヒドロキシ安息香酸、３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシ安息香酸及び１,１'-ビフェニル-４,４'-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：５６％(ａ)、７７％(ｂ)；ｍｐ：２４０℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３４８、１７３１、１７００、１６０８、１１９６ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ _６ )：δ３．８５(ｓ,３Ｈ)、６．９０(ｄ,Ｊ＝８．８,１Ｈ)、７．２２(ｄ,Ｊ＝１．７,１Ｈ)、７．３０(ｄ,Ｊ＝１．６,１Ｈ)、７．３２-７．３６(ｍ,４Ｈ)、７．５１-７．５３(ｍ,２Ｈ)、７．７６(ｄ,Ｊ＝８．６,４Ｈ)、８．３８(ｓ,１Ｈ)、９．５４(ｓ,２Ｈ)、１０．０(ｓ,１Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＤＭＳＯ-ｄ _６ )：δ５６．２、１０５．３、１１１．２、１１５．５、１１６．７、１１８．２、１１９．４、１２２．５(４Ｃ)、１２２．７、１２７．７(４Ｃ)、１３６．８、１３６．９、１４０．２、１４５．２、１４５．４、１４８．０、１５０．３(２Ｃ)、１５１．２、１６４．４、１６４．５。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４８７．０。

実施例２４．１,３-ビス[(４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｗ)

表題化合物を、出発物質として、４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシ安息香酸とナフタレン-１,３-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４２％(ａ)、５１％(ｂ)；ｍｐ：２７１℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４１０、１７２１、１５９２、１２１２ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＣＯＣＤ _３ )：δ７．３８(ｓ,２Ｈ)、７．４７(ｓ,２Ｈ)、７．５２(ｄ,Ｊ＝２．２,１Ｈ)、７．５８-７．６９(ｍ,２Ｈ)、７．８２(ｄ,Ｊ＝２．１,１Ｈ)、７．９９-８．０６(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＣＯＣＤ _３ )：δ１０５．３、１０５．５、１０８．７(４Ｃ)、１１５．１、１１７．３、１２１．７、１２５．５、１２６．９、１２７．９、１２８．３、１２９．３、１２９．６、１３４．７、１４７．９、１４８．５、１５６．３(２Ｃ)、１５６．５(２Ｃ)、１６４．４、１６４．６。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝５８６．８。

実施例２５．１,３-ビス[(３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｘ)

表題化合物を、出発物質として、３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシ安息香酸とナフタレン-１,３-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４９％(ａ)、９３％(ｂ)；ｍｐ：２６０℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４００、１７１９、１６０５、１２００ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＣＯＣＤ _３ )：δ３．９４(ｓ,３Ｈ)、３．９６(ｓ,３Ｈ)、７．４１(ｄ,Ｊ＝１．９,２Ｈ)、７．４４-７．４８(ｍ,２Ｈ)、７．５４(ｄ,Ｊ＝１．９,２Ｈ)、７．５７-７．６７(ｍ,１Ｈ)、７．７８(ｄ,Ｊ＝２．０,１Ｈ)、７．９６-８．０６(ｍ,２Ｈ)、８．２０(ｓ,１Ｈ)、８．２６(ｓ,１Ｈ)、８．４６(ｓ,１Ｈ)、８．５１(ｓ,１Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＣＯＣＤ _３ )：δ５６．７(２Ｃ)、１０６．４、１０６．５、１１２．３、１１２．４、１１５．８、１１７．６、１２０．２、１２０．６、１２２．３、１２６．２、１２７．１、１２８．２、１２８．７、１３５．３、１４０．６、１４０．８、１４６．１、１４６．２、１４８．７、１４８．９、１４９．４、１６５．２。１６５．３。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４９０．９。

実施例２６．１,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ｙ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸とナフタレン-１,３-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４７％(ａ)、９２％(ｂ)；ｍｐ：２１３℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３５６、１７０５、１６１５、１２００ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１．８０(ｍ,４Ｈ)、２．５９(ｍ,２Ｈ)、２．８３(ｍ,２Ｈ)、６．７８(ｄ,１Ｈ,Ｊ＝２．３)、６．８４(ｄ,１Ｈ,Ｊ＝２．３)、７．１８(ｓ,２Ｈ)、７．２１(ｓ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ２３．６、２３．８、２４．３、３０．６、１１０．７(４Ｃ)、１１４．４、１２０．４、１２０．６、１２０．８、１２８．４、１４０．６、１４０．７、１４１．１、１４６．７(２Ｃ)、１４６．８(２Ｃ)、１５０．３、１５１．０、１６６．６、１６７．０。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４６６．９。

実施例２７．１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ｚ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸とナフタレン-１,４-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：６４％(ａ)、８８％(ｂ)；ｍｐ：２０６℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３４４、１７０１、１６１２、１１８４ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１．７６(ｍ,４Ｈ)、２．６２(ｍ,４Ｈ)、６．９８(ｓ,２Ｈ)、７．２２(ｓ,４Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ２３．１(２Ｃ)、２４．８(２Ｃ)、１１０．６(４Ｃ)、１２０．５(２Ｃ)、１２０．９(２Ｃ)、１３２．６(２Ｃ)、１４０．６(２Ｃ)、１４６．８(４Ｃ)、１４８．４(２Ｃ)、１６６．８(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４６６．９。

実施例２８．１,４-ビス[(３,５-ジヒドロキシ-４-メチルベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ａａ)

表題化合物を、出発物質として、３,５-ジヒドロキシ-４-メチル安息香酸とナフタレン-１,４-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：３１％(ａ)、１８％(ｂ)；ｍｐ：２０４℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３９２、１７０７、１５９４、１１９７ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１．７８(ｍ,４Ｈ)、２．１４(ｓ,６Ｈ)、２．６４(ｍ,４Ｈ)、７．０２(ｓ,２Ｈ)、７．１５(ｓ,４Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ８．０(２Ｃ)、２２．０(２Ｃ)、２３．８(２Ｃ)、１０７．７(４Ｃ)、１１８．３(２Ｃ)、１１９．８(２Ｃ)、１２７．１(２Ｃ)、１３１．５(２Ｃ)、１４７．３(２Ｃ)、１５６．８(４Ｃ)、１６５．７(２Ｃ)。ＭＳ：Ｍ＋Ｎａ＝４８７．２。

実施例２９．４-[(３,５-ジヒドロキシ-４-メチルベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン-１-イル-３,４,５-トリヒドロキシベンゾアート(ｂｂ)

表題化合物を、出発物質として、３,５-ジヒドロキシ-４-メチル安息香酸、没食子酸及びナフタレン-１,４-ジオールから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：５０％(ａ)、１０％(ｂ)。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ１．７８(ｍ,４Ｈ)、２．１４(ｓ,３Ｈ)、２．６４(ｍ,４Ｈ)、７．０１(ｓ,２Ｈ)、７．１５(ｓ,２Ｈ)、７．２３(ｓ,２Ｈ)。

実施例３０．メチル-１-[(４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｃｃ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸、４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシ安息香酸、及びメチル-１,４-ジヒドロキシ-２-ナフトアートから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４０％(ａ)、７９％(ｂ)；ｍｐ：２３６℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４００、１７１３、１６０４、１１８０ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ３．８０(ｓ,３Ｈ)、７．３４(ｓ,２Ｈ)、７．３６(ｓ,２Ｈ)、７．６６-７．７６(ｍ,２Ｈ)、７．８９(ｓ,１Ｈ)、７．９７-８．００(ｍ,１Ｈ)、８．０８-８．１１(ｍ,１Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ５２．０、１０５．３、１０８．３(２Ｃ)、１０９．８(２Ｃ)、１１８．６、１１８．８、１１９．４、１２１．８、１２３．２、１２８．３、１２８．８、１２９．１、１２９．６、１３０．５、１４０．０、１４５．１、１４５．９、１４６．１、１５６．２(２Ｃ)、１６５．０、１６５．３、１６５．７。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝５８２．８。

実施例３１．メチル-１-[(３-ヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｄｄ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸、３-ヒドロキシ安息香酸、及びメチル-１,４-ジヒドロキシ-２-ナフトアートから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４５％(ａ)、６６％(ｂ)；ｍｐ：２５４℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３４０１、１７１４、１６０５、１１７９ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ３．８０(ｓ,３Ｈ)、７．１８(ｄｄｄ,Ｊ＝８．２,２．５,０．９,１Ｈ)、７．３７(ｓ,２Ｈ)、７．４６(ｔ,Ｊ＝８．０,１Ｈ)、７．６６-７．７７(ｍ,３Ｈ)、７．８０(ｄｔ,Ｊ＝６．６,１．２,１Ｈ)、７．９０(ｓ,１Ｈ)、７．９８-８．００(ｍ,１Ｈ)、８．０９-８．１２(ｍ,１Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ５２．０、１０９．８(２Ｃ)、１１６．７、１１８．６、１１８．９、１１９．４、１２１．３、１２１．５、１２１．８、１２３．３、１２８．２、１２８．９、１２９．６、１３０．０、１３０．５、１３０．６、１４０．０、１４５．１、１４５．９、１４６．２、１５８．２、１６５．１(２Ｃ)、１６５．７。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４８８．８。

実施例３２．メチル-１-[(４-ヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｅｅ)

表題化合物を、出発物質として、没食子酸、４-ヒドロキシ安息香酸、及びメチル-１,４-ジヒドロキシ-２-ナフトアートから出発し、実施例１に記載の一般的手順に従い調製した。
収率：４５％(ａ)、８２％(ｂ)；ｍｐ：２６２℃(ｄ)。ＩＲ(ＫＢｒ)：３３７２、１７１２、１６０９、１１５５ｃｍ^-１。^１ＨＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ３．７８(ｓ,３Ｈ)、６．９８-７．０１(ｍ,２Ｈ)、７．３７(ｓ,２Ｈ)、７．６６-７．７３(ｍ,２Ｈ)、７．８８(ｓ,１Ｈ)、７．９７-７．９９(ｍ,１Ｈ)、８．０８-８．１１(ｍ,１Ｈ)、８．１７-８．２０(ｍ,２Ｈ)。^１３ＣＮＭＲ(ＣＤ _３ＯＤ)：δ５１．９、１０９．８(２Ｃ)、１１５．６(２Ｃ)、１１８．６、１１８．９、１１９．５、１２０．１、１２１．８、１２３．４、１２８．１、１２９．１、１２９．６、１３０．５、１３２．９(２Ｃ)、１４０．０、１４４．９、１４５．９、１４６．４、１６３．５、１６５．２、１６５．６、１６５．７。ＭＳ：Ｍ−Ｈ＝４８８．８。

実施例３３．細胞毒性アッセイ
ＭＣＦ-７及びＭＤＡ-ＭＢ-２３１乳癌細胞を、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション(ＡＴＣＣ)から得、１０％のウシ胎児血清(FBS、Bio-Whittaker)、１％のＬ-グルタミン、１％のピルビン酸ナトリウム、５０Ｕ／ｍＬのペニシリン、及び５０μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを含有するダルベッコの変性イーグル培地(DMEM、Gibco)中において常套的に増殖させた。ＳＫ-Ｂｒ３乳癌細胞をEucellbank(Universidad de Barcelona、Spain)から得、１０％のＦＢＳ、１％のＬ-グルタミン、１％のピルビン酸ナトリウム、５０Ｕ／ｍＬのペニシリン、及び５０μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを含有するマッコイの５Ａ培地に継代した。非悪性線維芽細胞Ｎ-１をEucellbank(Universidad de Barcelona、Spain)から得、１０％のＦＢＳ、１％のＬ-グルタミン、１％のピルビン酸ナトリウム、５０Ｕ／ｍＬのペニシリン、及び５０μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを含有するＤＭＥＭ培地に継代した。細胞はマイコプラズマがないままであり、確立されたプロトコルに従い、接着培養体を増殖させた。細胞を、３７℃、９５％の空気及び５％のＣＯ_２の湿潤雰囲気下に保持した。

薬物感受性を、標準的な比色分析ＭＴＴ(３-４,５-ジメチルチアゾール-２-イル-２,５-ジフェニルテトラゾリウムブロミド)アッセイを使用して測定した。簡潔に述べると、細胞を、７×１０^３細胞／１００μＬ／ウェルの密度で、９６-ウェルマイクロタイタープレートに蒔き、付着期間、一晩放置した。ついで、培地を取り除き、種々の濃度の試験化合物が付加された新鮮な培地を、４８時間、培養体に添加した。処理に続き、薬剤を含有しない培地(１００μＬ／ウェル)、及び１０ｍＬのＭＴＴ溶液(５ｍｇ／ｍＬ；Sigma、St. Louis, MO)を細胞を与え、３７℃で３時間、インキュベートを延長した。上清を注意深く除去した後、生存細胞により、代謝的に形成されたＭＴＴ-ホルマザン結晶を、ジメチルスルホキシド(１００μＬ／ウェル)に溶解させ、マルチ-ウェルプレートリーダー(Model Anthos Labtec 2010 1.7 reader)において、吸光度を５７０ｎｍで測定した。

これらの細胞毒性アッセイから得られた結果を、以下の表１にまとめる。

ＩＣ_５０値は、５０％の細胞増殖が阻害される濃度である；Ｎ.Ｔ.：毒性がないことが同定；Ｎ.Ｄ.：測定せず。

表１は、新規ポリヒドロキシ誘導体(Ｉ)化合物と、比較する目的でＥＧＣＧも含まれるものの増殖阻害をまとめている。際だって、新規ポリフェノール化合物の殆どが、ＳＫ-Ｂｒ３細胞において２−３０倍のＩＣ_５０(ＥＧＣＧ)／ＩＣ_５０(化合物)比で、細胞毒性に関してＥＧＣＧよりかなり優れていた。
腫瘍細胞でのその細胞毒性ＩＣ_５０値の３倍の用量までは、非悪性細胞において、化合物ｃ、ｄ、ｆ、ｈ、ｉ、ｋ、ｌ、ｍ、ｑ、ｓ、ｗ、ｙ、ｚ、ｃｃ、ｄｄ及びｅｅを用いての処置後に、細胞死における有意な効果も形態変化も観察されなかった。同じ条件下で、ＥＧＣＧは、非悪性線維芽細胞におけいて大量の細胞死を引き起こした。

実施例３４．脂肪酸合成酵素の活性度アッセイ
化合物ａ、ｂ、ｅ、ｆ、ｈ、ｉ、ｋ、ｍ及びｑのＦＡＳＮ活性を、我々が先に記載したように、３７℃で、ＮＡＤＰＨの酸化によるＡ_{３４０ｎｍ}の低減度を分光光度的に記録する(Lambda Bio 20、Perkin Elmer、EUA；UV Kinlab 2.80.02ソフトウェアを使用)ことにより、粒子の存在しない上清においてアッセイした。試験化合物に暴露して６、１２、２４時間後、トリプシン-ＥＤＴＡ溶液で処理することにより細胞を収集し、遠心分離によりペレット状にし、２回洗浄し、冷ＰＢＳに再懸濁させた。４℃で３０分、細胞を超音波処理し(PSelecta ultrasons)、４℃で１５分遠心分離させ、粒子の存在しない上清を維持した。サンプルを取り出し、ＢｉｏＲａｄアッセイ(Bio-Rad Laboratories)により、タンパク質含有量を測定した。温度平衡にするために、０．２Ｍのリン酸化合物バッファー、ｐＨ７．０において、３７℃で１５分、１２０ｍｇのタンパク質をプレインキュベートした。ついでサンプルを、反応混合物：２００ｍＭのリン酸カリウムバッファー、ｐＨ７．０、１ｍＭのＥＤＴＡ(Sigma)、１ｍＭのジチオスレイトール(Sigma)、３０μＭのアセチル-ＣｏＡ(Sigma)、０．２４ｍＭのＮＡＤＰＨ(Sigma)に添加し、０．３ｍＬの反応容量を３４０ｎｍで３分モニターし、ＮＡＤＰＨ酸化のバックグラウンドを測定した。５０μＭのマロニル-ＣｏＡ(Sigma)を添加した後、さらに１０分、反応体をアッセイし、ＮＡＤＰＨのＦＡＳＮ-依存性酸化を測定した。アセチル-ＣｏＡの存在下、ＮＡＤＰＨ酸化のバックグラウンド率に対して、比率を補正した。ＦＡＳＮ活性を、ｎｍｏｌ酸化ＮＡＤＰＨ^-１ｍｇタンパク質^-１で表した。

ＥＧＣＧ、及び化合物ｅ、ｆ、ｉ、ｍ及びｑに癌細胞を暴露して後、ＦＡＳＮ活性は、２４時間まで時間依存方式で低減した(図１)。さらに２４時間、化合物ｅ、ｆ、ｉ、ｍ及びｑにＳＫ-Ｂｒ３細胞を暴露すると、ＦＡＳＮ活性が、それぞれコントロール細胞の６９％、１０±４％、３１±１６％、７６％及び２０％まで低減した(図１)。ＦＡＳＮ活性の低減は、ＦＡＳＮタンパク質レベルにおける変化によって引き起こされるものではなく、ウエスタンブロット分析により、処理された及びコントロールとなるＳＫ-Ｂｒ３溶解物が、ウサギモノクローナル抗-ＦＡＳＮ抗体により認識される、同じ単一バンド(〜２５０ＫＤａ)を示すことが明らかとなった。さらに１２時間、化合物ｈ、ｋ及びｍにＳＫ-Ｂｒ３細胞を暴露すると、ＦＡＳＮ活性が、それぞれ７７％、４４％、及び７７％まで低減した。

これらをもとに、化合物ｆ、ｉ及びｑは、ＳＫ-Ｂｒ３乳癌細胞に際だった細胞毒性効果を有し(ＥＧＣＧのＩＣ_５０、１４９．８±１９．８μＭと比較して、それぞれＩＣ_５０＝２１．３±６．７μＭ、２８．７±０．３μＭ、及び４±１μＭ)、さらにＦＡＳＮ活性に最も大きな阻害を示す(細胞暴露の２４時間後、ＦＡＳＮ活性は５０％低減、図１)。またさらに、正常な線維芽細胞は、ＩＣ_５０に対して同様の濃度では、化合物ｆ、ｉ及びｑによる影響は受けなかった。
要約すると、化合物ｆ、ｉ及びｑの癌細胞の成長阻害とＦＡＳＮ発現との間に、目立った相関関係は観察されなかった。

実施例３５．カルニチンパルミトイルトランスフェラーゼ１(ＣＰＴ-１)アッセイ
発現プラスミドｐＲＣＰＴ-Ｉβ／ｐＨＷ０１０(Gebre Woldegiorgis,Beaverton, Oregon. Published in Woldegiorgis Gらにより公開. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2004, 325, 660-4から提供)を、AvrIIを用いて消化させることにより、ＧＡＰ遺伝子プロモータにおいて直鎖状にし、エレクトロポレーションにより、P. pastoris ＧＳ１１５のＧＡＰｐ遺伝子座に組み込んだ。ヒスチジン原栄養形質転換体をＹＮＤプレートにおいて選択し、ＹＮＤ培地において成長させた。予め記載したガラスビーズを用いて、酵母細胞を崩壊させることにより、ミトコンドリアを単離した。

ＣＰＴ活性を、予め記載したようなＬ-[^３Ｈ]カルニチンを使用する、前方交換法(forward exchange method)によりアッセイした(Nicot,Cら, Biochem. Biophys. Res. Comm. 2004, 325, 2745-7)。全容量０．５ｍＬにおいて、標準的な酵素アッセイ混合物は、０．２ｍＭのＬ-[^３Ｈ]カルニチン(〜５０００ｄｐｍ／ｎｍｏｌ)、８０μＭのパルミトイル-ＣｏＡ、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ(ｐＨ７．０)、１％の脂肪酸を含有しないアルブミン、及び４０-７５ｍＭのＫＣｌを含有し、示したように、マロニル-ＣｏＡは含有するか含有しない。単離された無傷の酵母ミトコンドリアを添加することにより、反応を開始させた。反応は４分までは直線状であり、全てのインキュベートを３０℃で３分実施した。６％の過塩素酸を添加することにより、反応を停止させ、ついで、２０００ｒｐｍで７分遠心分離した。得られたペレットを水に懸濁させ、生成物[^３Ｈ]パルミトイルカルニチンを、低ｐＨで、ブタノールを用いて抽出した。２０００ｒｐｍで２分遠心分離をした後に、ブタノール相のアリコートを、放射能を計測するために、バイアルに移した。

これらのアッセイから得られた結果を、以下の表２に付与する。正の活性の参照として、化合物Ｃ７５を使用し、負の活性の参照として、ＥＧＣＧを使用した(Breast Cancer Res Treat 2008, 109:471-479)。

図２に示すように、ＣＰＴ-１は、コントロール化合物Ｃ７５によりかなり活性化され(１２９±６％まで)、興味あることに、化合物ｆ、ｉ、ｑ、ｅ及びｏはＣＰＴ-１活性、脂肪酸酸化を調節する一因である酵素を刺激しなかった。ＣＰＴ-１活性を刺激することなく、最も重要なこととして、インビボにおける減量を誘発させることなく(データを図示せず)、それらの抗腫瘍効果が生じる。

実施例３６．ＦＡＳＮ、ｐ１８５^{ＨＥＲ２／ｎｅｕ}、ホスホ-ｐ１８５^{ＨＥＲ２／ｎｅｕ}、抗-ＥＲＫ１／２、抗-ホスホ-ＥＲＫ１／２、抗-ＡＫｔ、抗-ホスホ-ＡＫＴ^{Ｓｅｒ４７３}及びＰＡＲＰの免疫ブロット分析
所望の濃度及び時間間隔で、研究される化合物を用いてＳＫ-Ｂｒ３細胞を処理した後、トリプシン-ＥＤＴＡ溶液で処理することにより細胞を収集し、ＰＢＳで２回洗浄し、−８０℃で保存した。溶解バッファー(１ｍＭのＥＤＴＡ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１００μｇ／ｍＬのＰＭＳＦ、及び５０ｍＭのトリス-ＨＣｌ、ｐＨ７．５)に、細胞を溶解させ、４℃で保持し、それらを３０分間、渦において、２分毎に常套的に混合した。ＢｉｏＲａｄアッセイ(Bio-Rad Laboratories)により、タンパク質含有量を測定するため、サンプルを取り出した。同量のタンパク質を、ドデシル硫酸ナトリウム(ＳＤＳ)サンプルバッファー(Laemmli)におおて、９５℃で５分加熱し、３-８％のＳＤＳ-ポリアクリルアミドゲル(ＦＡＳＮ、ｐ１８５^{ＨＥＲ２／ｎｅｕ}、ホスホ-ｐ１８５^{ＨＥＲ２／ｎｅｕ})、又は４-１２％のＳＤＳ-ポリアクリルアミドゲル(ＡＫＴ、ホスホ-ＡＫＴ、ＥＲＫ１／２、ホスホ-ＥＲＫ１／２及びＰＡＲＰ)において分離させ、ニトロセルロース膜に移した。ブロック用バッファー(ＴＢＳ-Ｔ[１０ｍＭのトリス-ＨＣＩ、ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、及び０．０５％のトゥイーン-２０]に２．５％のパウダー状のスキムミルクが入ったもの)において、室温で１時間、膜をインキュベートし、非特異的な抗体結合を防止させた。使用した主要な抗体はモノクローナル抗体であった。抗体希釈液をブロック用溶液において調製し、ブロットをモノクローナル抗体と共に、４℃で一晩インキュベートした。ＴＢＳ-Ｔにおいて３ｘ５分洗浄した後、抗-マウスＩｇＧペルオキシダーゼコンジュゲートと共に、ブロットを１時間インキュベートし、市販のキット(West Pico chemiluminescent substrate)を使用して明らかにした。タンパク質の荷重及び移動をコントロールするために、β-アクチンに対する抗体を用いて、ブロットを再度調べた。

ポリ-ＡＤＰ-リボースポリメラーゼ(ＰＡＲＰ)に対するウエスタンブロット分析を、化合物ｆ(３０μＭ)及び化合物ｉ(３０μＭ)に対して、１２、２４及び４８時間暴露させたＳＫ-Ｂｒ３細胞において実施した。アポトーシス及びカスパーゼ活性化の誘発が、ＰＡＲＰの切断を示すウエスタンブロット分析により確認された。化合物ｆ及びｉを用いた処理により、８９ＫＤａのＰＡＲＰ切断の生成物が、時間依存性方式でかなり増加する結果となった。

我々は、ＦＡＳＮ阻害剤(Ｃ７５及びＥＧＣＧ)が、アポトーシスを誘発し、ＳＫ-Ｂｒ３乳癌細胞(ＨＥＲ２の過剰発現モデル)において、癌遺伝子ＨＥＲ２、及びそれらの下流シグナル伝達経路ＥＲＫ１／２及びＰＩ３／ＡＫＴの活性化をブロックすることを、予め報告している。我々は、ＨＥＲ２、ＡＫＴ及びＥＲＫ１／２活性化における、化合物ｆ(３０μＭ)及び化合物ｉ(３０μＭ)の時間依存性効果を試験した。我々は、化合物ｆ及びｉを用いた処理の６時間後、ｐ-ＨＥＲ２タンパク質のレベルが、全体的に低下していることを観察した。事実、化合物ｆ及びｉへの暴露後２時間以内に、ｐ-ＨＥＲ２タンパク質の発現レベルはかなり低下していた。この期間中、ウエスタンブロット分析により、又はＨＥＲ２-特異性ＥＬＩＳＡにより評価した場合、全ＨＥＲ２のレベルに有意な変化はなかった。

また、ｐ-ＥＲＫ１／２タンパク質の活性も、誘導体ｆ及びｉでの処理の６時間後に、かなり低減していることが示された。さらに、ｐ-ＡＫＴタンパク質の発現レベルは、化合物ｆ及びｉでの処理の６時間後に低下していることも示された。いずれにおいても、ｐ-ＡＫＴの際だった低減は、化合物ｆを用いた処理の２４時間後、及び化合物ｉを用いた処理の１２時間後に観察された。この期間中、それぞれのタンパク質の全レベルにおいて、有意な変化はなかった。

Claims

次の式(Ｉ)

[上式中、
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７及びＲ_８は独立して、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミド、ＣＦ_３、及びヒドロキシルからなる群から選択され；
Ｙ及びＺはそれぞれ独立して、Ｃ及びＮから選択され；
Ｘは、各環が５−６員であり、芳香族、又は部分的に不飽和の、分離又は縮合した２−３の環を含む既知の環系の一つから誘導されるビラジカルであり；各環は、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される一又は複数の基で置換されていてもよく；環員の各一が、Ｃ、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択され；
但し、Ｘは、クロマン、アントラセン、式：

のビラジカル、又は化合物２,６-ビス[(３,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレンではない]
の化合物、その立体異性体、その薬学的に許容可能な塩、又はその薬学的に許容可能な溶媒和物。
Ｘが、ナフタレン、テトラヒドロナフタレン及びビフェニルからなる群から選択され、場合によっては、それぞれが(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ニトロ、ハロゲン、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される一又は複数の基で置換されていてもよい、請求項１に記載の化合物。
Ｘがナフタレン及びビフェニルからなる群から選択され、場合によっては、それぞれが(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ニトロ、ハロゲン、及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステルからなる群から選択される一又は複数の基で置換されていてもよい、請求項１又は２に記載の化合物。
Ｘが、

[上式中、各環系は、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステルから選択される一又は複数の基で置換されていてもよい]
からなる群から選択される、請求項１から３のいずれか１項に記載の化合物。
Ｘが、

[上式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は独立して、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される]
から選択されるビフェニルである、請求項１から３のいずれか１項に記載の化合物。
Ｘが、

[上式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３及びＲ_４は独立して、Ｈ、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルキル、(Ｃ_１-Ｃ_４)-アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、ＮＨ_２、(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルエステル、ＣＯＮＨ_２及び(Ｃ_１-Ｃ_４)アルキルアミドからなる群から選択される]
から選択されるテトラヒドロナフタレンである、請求項１又は２に記載の化合物。
Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ_６、Ｒ_７及びＲ_８の少なくとも２つがヒドロキシルである、請求項１から６のいずれか１項に記載の化合物。
次の化合物：
２,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｅ)；
１,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｆ)；
１,３-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｇ)；
１,３-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｈ)；
１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｉ)；
１,４-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｊ)；
１,４-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｋ)；
２,６-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｌ)；
１,５-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｍ)；
２,５-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｏ)；
６-(ベンゾイルオキシ)-１,１'-ビフェニル-３-イル-３,４,５-トリヒドロキシベンゾアート(ｐ)；
４,４'-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｑ)；
４,４'-ビス[(２,６-ジヒドロキシイソニコチノイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｒ)；
４,４'-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｓ)；
４,４'-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｔ)；
４'-[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル-４-イル-４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾアート(ｕ)；
４'-[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル-４-イル-３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシベンゾアート(ｖ)；
１,３-ビス[(４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｗ)；
１,３-ビス[(３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｘ)；
１,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ｙ)；
１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ｚ)；
１,４-ビス[(３,５-ジヒドロキシ-４-メチルベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン(ａａ)；
４-[(３,５-ジヒドロキシ-４-メチルベンゾイル)オキシ]-５,６,７,８-テトラヒドロナフタレン-１-イル-３,４,５-トリヒドロキシベンゾアート(ｂｂ)；
メチル-１-[(４-ブロモ-３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｃｃ)；
メチル-１-[(３-ヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｄｄ)；
メチル-１-[(４-ヒドロキシベンゾイル)オキシ]-４-[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-２-ナフトアート(ｅｅ)
から選択される、請求項１から７のいずれか１項に記載の化合物。
次の化合物：
１,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｆ)；
１,３-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｈ)；
１,４-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｉ)；
２,５-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｏ)；
４,４'-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｑ)；
２,３-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｅ)；
１,４-ビス[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｋ)；
２,６-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｌ)；
１,５-ビス[(３,４,５-トリヒドロキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｍ)；
４,４'-ビス[(３,５-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル(ｓ)；
４'-[(３,４-ジヒドロキシベンゾイル)オキシ]-１,１'-ビフェニル-４-イル-３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシベンゾアート(ｖ)；及び
１,３-ビス[(３,４-ジヒドロキシ-５-メトキシベンゾイル)オキシ]ナフタレン(ｘ)；
から選択される、請求項８に記載の化合物
適切な量の薬学的に許容可能な希釈剤又は担体と組合せて、Ｘがクロマン又は

のものではない、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物を有効量含有する薬学的組成物。
ヒトにおいて、ＦＡＳＮにより媒介される疾患、及び関連する臨床的兆候の処置及び／又は予防用の医薬を製造するための、Ｘがクロマン又は

のものではない、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物の使用であって、該疾患が癌及び肥満症から選択される使用。
癌が、自己免疫性リンパ増殖症候群(ＡＬＰＳ)、慢性リンパ芽球性白血病、ヘアリーセル白血病、慢性リンパ性白血病、末梢性Ｔ細胞リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、バーキットリンパ腫、エプスタイン-バーウイルス-陽性Ｔ細胞リンパ腫、組織球性リンパ腫、ホジキン病、びまん性侵攻性リンパ腫、急性リンパ性白血病、Ｔガンマリンパ球増殖性疾患、皮膚Ｂ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、セザリー症候群、急性骨髄性白血病、慢性又は急性のリンパ芽球性白血病、ヘアリーセル白血病、肉腫、骨肉腫、乳癌、扁平上皮癌、エプスタイン-バーウイルス-陽性上咽頭癌、グリオーマ、結腸、胃、前立腺、腎臓の細胞、子宮頸部及び卵巣の癌、肺癌、小細胞肺癌、及び非小細胞肺癌からなる群から選択される、請求項１１に記載の使用。
癌が、胸部、前立腺、結腸、卵巣、子宮内膜、中皮、肺、甲状腺、胃及び脳の癌からなる群から選択される、請求項１２に記載の使用。
癌に関連した兆候が、癌関連性の悪液質、疲労、無力症、悪液質の腫瘍随伴症候群、及び高カルシウム血症から選択される、請求項１１に記載の使用。
Ｘがクロマン、アントラセン、又は式

のビラジカルではない、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物の調製方法であって、
ａ）次の式(ＩＩ)

[上式中、Ｘは請求項１に記載の通りである]
のジヒドロキシ誘導体を、式(ＩＩＩ)のカルボン酸及び式(ＩＶ)のカルボン酸

[上式中、Ｙ、Ｚ及びＲ_１-Ｒ_８は請求項１に記載の通りであり；Ｇｐ_１及びＧｐ_２はそれぞれ独立して、ヒドロキシル保護基である]
と反応させて、式(Ｖ)

[上式中、Ｇｐ_１、Ｇｐ_２及びＲ_１-Ｒ_８は請求項１に記載の通りである]
の化合物を得、
ｂ）式(Ｖ)の化合物を脱保護して、保護基を除去し；
ｃ）場合によっては、式(Ｉ)の化合物を、その薬学的に許容可能な塩に転換し；及び／又は式(Ｉ)の化合物の異性体の混合物を分離して、他の異性体が実質的に含まれない該異性体の一を分離し；及び／又はそれをそのプロドラッグに変換する、
工程を含んでなる方法。
請求項１０に記載の薬学的組成物、再構成剤、及び癌の処置又は予防のために組合せた各作用物質の使用のための使用説明書を収容する別個の容器を含んでなるキット。