JP2010528023A

JP2010528023A - Ｓｇｌｔ２阻害剤の結晶構造およびその製造方法

Info

Publication number: JP2010528023A
Application number: JP2010509447A
Authority: JP
Inventors: プラシャント・ピー・デシュパンデ; リフェン・ロリ・シェン; ジャック・ゼット・グーグータス
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2007-05-18
Filing date: 2008-05-15
Publication date: 2010-08-19
Also published as: EP2147008A2; WO2008144346A3; US20080287529A1; WO2008144346A2; CN101754972A

Abstract

本発明は、Ｈ−１型、Ｈ−２型またはＳ−ＰＧ型である、式（Ｉ）：

の化合物の物理的な結晶構造、化合物Ｉの構造を含む医薬組成物および化合物Ｉを用いた疾患の治療方法に関する。

Description

本発明は、ＳＧＬＴ２阻害剤の結晶構造、その医薬組成物、このような結晶構造の製造方法、およびそれと共に、障害の治療方法に関する。

世界中で約１億人がＩＩ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）を患っており、それは肝臓での過剰なグルコース産生および末梢インスリン耐性による高血糖の特徴を有しており、その根本的な原因はまだ分かっていない。糖尿病患者における血漿グルコース濃度の一貫した制御によって、進行した疾患に見られる糖尿病合併症の進行およびβ細胞の機能の衰え(beta cell failure)が停止しうる。

血漿グルコースは通常、腎臓における糸球体で濾過され、近位尿細管で活発に再吸収される。腎臓におけるグルコースの再取り込みの９０％は、腎皮質の近位尿細管の初期Ｓ１分節(early S1 segment)の上皮細胞で起こる。ＳＧＬＴ２（腎近位尿細管の初期Ｓ１分節で主に発現される１４膜貫通セグメントを含む６７２アミノ酸のタンパク質）は、この再取り込みに関与する主要な輸送体であると思われる。ＳＧＬＴ２の基質特異性、ナトリウム依存性、および局在性は、ヒト腎皮質の近位尿細管において先に特徴を述べた高機能性(high capacity)、低親和性、ナトリウム依存性のグルコース輸送体の特性と一致している。また、ラット腎皮質からｍＲＮＡにおいてコードされる実質的にすべてのＮａ依存性グルコース輸送活性が、ラットＳＧＬＴ２に特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチドによって阻害されるので、ハイブリッド欠乏(hybrid depletion)の研究によって、ＳＧＬＴ２は、近位尿細管のＳ１分節において支配的なＮａ⁺／グルコース共輸送体として関係付けられる。ヒトにおいて、ＳＧＬＴ２における変異は腎性糖尿の家族構造(familial structure)と関連しており、それによって腎臓のグルコース再吸収におけるＳＧＬＴ２の主要な役割のさらなる証拠が提供される。このような患者において、腎臓形態および腎機能は他の点では正常である。ＳＧＬＴ２の阻害は、糖尿病患者におけるグルコースの排出を増大させることによって、血漿グルコース濃度を減少させると予測される。

糖尿病患者におけるＳＧＬＴ２の選択的阻害は、尿中のグルコースの排出を増大させることによって血漿グルコースを正常化し、それによって胃腸の著しい副作用を生じずにインスリン感受性を改善し、糖尿病合併症の進行を遅らせることができる。

（発明の概要）
本発明は、式Ｉ：

の化合物の結晶構造；
化合物Ｉの結晶構造を含む医薬組成物、例えば（Ｓ）−プロピレングリコール（（Ｓ）−ＰＧ）構造Ｉａ：

；
Ｌ−フェニルアラニン（Ｌ−Ｐｈｅ）構造（Ｈ−１型）

；および
Ｌ−Ｐｈｅ構造（Ｈ−２型）

；
このような結晶構造の製造方法；並びに
化合物Ｉの結晶構造を用いた糖尿病および関連疾患の治療方法に関する。

非結晶性固形物の形態の式Ｉの化合物は、２００５年９月２３日に出願された米国特許出願第１１／２３３，６１７号（ウォッシュバーンら）に開示されており、その開示は、その全体が本明細書に引用される。式Ｉの化合物を含む化合物の種類は、グーグータス(Gougoutas)への米国特許第６，７７４，１１２号に開示されており、その開示は、その全体が本明細書に引用される。

また、本発明に従って、構造Ｉａ：

の結晶性化合物（Ｓ）−ＰＧの製造方法であって、構造：

の化合物Ｉ（２００５年９月２３日に出願された米国特許出願第１１／２３３，６１７号，実施例１に記載されているように製造した）を水混和性有機溶媒（例えばメチルｔ−ブチルエーテル）に溶解し、生じた溶液を（Ｓ）−プロピレングリコールの有機溶媒（例えばメチルｔ−ブチルエーテル）溶液で処理し、化合物Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）の種晶を反応混合物に適宜加え、化合物Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）の結晶を形成する段階を含むことを特徴とする方法が提供される。

本発明のさらに別の態様において、要約した反応における化合物Ｉａ：

の新規の製造方法であって、構造：

の化合物Ｂを、還元剤（例えば水素化トリエチルシリル）および活性化基（例えばＢＦ₃・Ｅｔ₂Ｏ）、および有機溶媒（例えばＣＨ₃ＣＮ）、および水で処理することによって、化合物Ｂを還元してメトキシ基を除去し、構造Ｉ：

の化合物を分離し、メチルｔ−ブチルエーテルのような溶媒の存在下で、化合物Ｉを（Ｓ）−プロピレングリコールで処理し、化合物Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）の種晶を適宜加えて、化合物Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）の結晶スラリーを形成し、化合物Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）を分離する段階を含むことを特徴とする方法が提供される。

本発明の上記の方法は、中間体の生成を最小化する要約されるかまたはワンポットの操作であり、最終の結晶性化合物Ｉａの収率および優先度(priority)の改善をもたらす。

化合物Ｉの（Ｓ）−プロピレングリコール溶媒和物とも呼ばれる結晶性化合物Ｉａは新規の結晶構造であり、本発明の一部である。

本発明のさらに別の態様において、式ＩｃＨ−２型：

の構造のＬ−フェニルアラニンを形成する方法であって、化合物Ａ：

を水混和性有機溶媒（例えばイソプロピルアルコール）に溶解し、生じた溶液を冷却し、水を溶液に加え、酸を溶液に加えて溶液を中和し、Ｌ−フェニルアラニン、イソプロピルアルコールおよび水を溶液に加え、イソプロピルアルコールおよび水のような溶媒を有するスラリー中で構造ＩｃＨ−２型の種晶を適宜加え、並びにスラリーを冷却して、構造ＩｃＨ−２型の結晶を形成する段階を含むことを特徴とする方法が提供される。

上記の構造ＩｃＨ−２型の製造方法において、構造ＩｂＨ−１型の結晶も同様に形成されうる。

式Ｉの化合物の製造は、米国特許第６，４１４，１２６号に一般的に記載されており、２００５年９月２３日に出願された米国特許出願第１１／２３３，６１７号に具体的に記載されている。

本発明は、下記の添付図面を参照することによって説明される。

図１は、Ｈ−２結晶構造Ｉｃの計算された（２５℃でシミュレーションされた）および観測された（室温で実験された）粉末Ｘ線回折パターンを示す。

図２は、（Ｓ）−ＰＧ結晶構造Ｉａのハイブリッド（室温）および観測された（室温で実験された）粉末Ｘ線回折パターンを示す。

図３は、Ｈ−２結晶構造Ｉｃの示唆走査熱量測定サーモグラムを示す。

図４は、（Ｓ）−ＰＧ結晶構造Ｉａの示唆走査熱量測定サーモグラムを示す。

図５は、Ｈ−２結晶構造Ｉｃの熱重量分析曲線を示す。

図６は、（Ｓ）−ＰＧ結晶構造Ｉａの熱重量分析曲線を示す。

図７は、Ｈ−２結晶構造Ｉｃの吸湿等温線分析を示す。

図８は、（Ｓ）−ＰＧ結晶構造Ｉａについての¹³ＣＮＭＲＣＰＭＡＳスペクトルを示す。

（発明の詳細な説明）
本発明は、新規物質として、医薬的に許容される形態の化合物Ｉの結晶構造の少なくとも一部を提供する。化合物Ｉの３つの結晶構造であるＨ−１（Ｉｂ）、Ｈ−２（Ｉｃ）および（Ｓ）−ＰＧ（Ｉａ）は、単離および／または同定されている。

本明細書で用いられる用語「医薬的に許容される」とは、正常な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、または合理的な損益比(benefit/risk ratio)に見合った他の問題の合併症を伴わずに、ヒトおよび動物の組織と接触させるのに適した化合物、物質、組成物、および／または製剤をいう。特定の好ましい態様において、化合物Ｉ、Ｉａ、Ｉｂおよび／またはＩｃは実質的に純粋な形態であってもよい。本明細書で用いられる用語「実質的に純粋な」とは、約９０％超、例えば、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、および約１００％の純度を有する化合物を意味する。

異なる結晶構造で存在する化合物の能力は、多形として知られている。本明細書で用いられるように、「多形」とは、同じ化学組成を有するが、結晶を形成する分子、原子、および／またはイオンの異なる空間的配置を有する結晶構造をいう。多形は同一の化学組成を有するが、これらは充填および幾何学的配置が異なっており、異なる物性、例えば融点、形状、色、密度、硬度、変形能、安定性、溶解などを示しうる。その温度−安定性の関係に応じて、２つの多形は単変性(monotropic)または互変性(enantiotropic)でありうる。単変系については、温度が変化している時、２つの固相間の相対的安定性は変化しないままである。それに対し、互変系では、２つの相の安定性が逆転する転移温度が存在する。(Theory and Origin of Polymorphism in 「Polymorphism in Pharmaceutical Solids」 (1999) ISBN: )-8247-0237)。

結晶構造のサンプルは、実質的に純粋な相均一性をもって提供されてもよく、単結晶構造の優位な量の存在、および適宜１またはそれ以上の他の結晶構造のごく少量の存在を示している。サンプル中１つより多い結晶構造の存在は、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）または固体核磁気共鳴スペクトル（ＳＳＮＭＲ）のような技術によって決定されうる。例えば、実験的に測定されたＰＸＲＤパターン（観測）とシミュレートされたＰＸＲＤパターン（計算）との比較で余分のピークの存在は、サンプル中１より多い結晶構造を示しうる。シミュレートされたＰＸＲＤは、単一結晶Ｘ線データから計算されうる（Smith, D.K., 「A FORTRAN Program for Calculating X-Ray Powder Diffraction Patterns」, Lawrence Radiation Laboratory, Livermore, California, UCRL-7196, April 1963を参照; Yin, S. et al., American Pharmaceutical Review, 6(2):80 (2003)も参照）。好ましくは、結晶構造は、シミュレートされたＰＸＲＤパターンにはない余分のピークに起因する実験的に測定されたＰＸＲＤパターンにおいて、全ピーク面積の１０％未満、好ましくは５％未満、より好ましくは２％未満を示すような実質的に純粋な相均一性を有する。最も好ましいのは、シミュレートされたＰＸＲＤパターンにはない余分のピークに起因する実験的に測定されたＰＸＲＤパターンにおいて、全ピーク面積の１％未満を示すような実質的に純粋な相均一性を有する結晶構造である。

本明細書に記載される様々な構造は、当業者に公知の様々な分析技術を用いて、互いに識別可能でありうる。このような技術には、これらに限らないが、固体核磁気共鳴（ＳＳＮＭＲ）分光法、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、および／または熱重量分析（ＴＧＡ）が含まれる。

結晶構造の製造
結晶構造の製造方法は当該技術分野で公知である。結晶構造は様々な方法、例えば、適当な溶媒からの結晶化または再結晶化、昇華、融解からの成長、固体以外から固体への状態変換、超臨界流体からの結晶化、および噴射スプレーによって製造されうる。溶媒混合物からの結晶構造の結晶化または再結晶化のための技術には、例えば、溶媒の蒸発、溶媒混合物の温度の低下、分子および／または塩の過飽和溶媒混合物への種晶の付加、溶媒混合物の凍結乾燥、および溶媒混合物への貧溶媒(counter solvents)の付加が含まれる。ハイスループット結晶化技術は、結晶構造、例えば多形を製造するのに用いられうる。

多形を含む薬物の結晶、製造方法、および薬物の結晶のキャラクタリゼーションは、Byrn, S.R. et al., Solid-State Chemistry of Drugs, 2^nd Edition, SSCI, West Lafayette, Indiana (1999)において議論される。

種晶はいずれの結晶化混合物にも加えられ、結晶化を促進しうる。当業者にとって明らかであるように、種晶の添加は、特定の結晶構造の成長を制御する手段として、または結晶性生成物の粒子サイズ分布を制御する手段として用いられる。したがって、必要な種晶の量の計算は、利用できる種晶のサイズおよび平均的な生成物粒子の目的のサイズに依存し、これは例えば、Mullin, J.W. et al.,「Programmed Cooling of Batch crystallizers」, Chemical Engineering Science, 26:369-377 (1971)に記載されている。一般に、小さなサイズの種晶は、バッチにおける結晶の成長を効果的に調節するのに必要である。小さなサイズの種晶は、大きな結晶のふるい分け、粉砕、または微粉化、あるいは溶液の微結晶化によって生成しうる。結晶の粉砕または微粉化は、目的の結晶構造からの結晶化度においていずれの変化（すなわち、アモルファスまたは別の多形への変化）ももたらさないことに注意を払うべきである。

本明細書で用いられるように、用語「室温」または「ＲＴ」は、２０〜２５℃（６８〜７７°Ｆ）の周囲温度を示す。

本発明の構造Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）ＳＣ−３の結晶性化合物を、反応式Ｉに示される下記の要約した反応に従って製造する：
反応式Ｉ

反応式Ｉに関して、無定形固体または結晶性固体の形態の化合物Ｉを水混和性有機溶媒（例えばメチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ））に溶解して、溶液を形成し、生じた溶液を、（Ｓ）−プロピレングリコール（（Ｓ）−ＰＧ）の有機極性溶媒、例えば酢酸アルキル（例えば酢酸エチル、酢酸メチルおよび酢酸イソプロピル）、およびメチルｔ−ブチルエーテル、好ましくは、メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）の溶液で処理する。化合物（（Ｓ）−ＰＧ）Ｉａの種晶を反応混合物に適宜加える。化合物（（Ｓ）−ＰＧ）Ｉａの結晶スラリーが形成され、それを結晶スラリーから分離する。通常の方法、例えば、化合物Ｉａのスラリーをシクロヘキサンのような有機溶媒で処理し、結晶性化合物Ｉａを回収する方法を用いて、結晶性化合物Ｉａをスラリーから分離してもよい。

種晶を加える段階(seeding step)の有無にかかわらず、結晶性化合物Ｉａの種晶を、反応式Ｉについて記載したように製造してもよい。

反応式Ｉの上記の要約した反応を実行する際、（Ｓ）−プロピレングリコール（（Ｓ）−ＰＧ）を、約０.８：１〜約１.２：１、好ましくは約０.９：１〜約１：１の範囲の化合物Ｉに対するモル比で用いる。

本発明の別の態様において、上記のように、化合物Ｉを要約した反応で製造してもよく、その中で、好ましくは、活性化基、例えばルイス酸（例えばＢＦ₃・Ｅｔ₂ＯまたはＢＦ₃・２ＣＨ₃ＣＯＯＨ）、および反応溶媒（例えばＣＨ₃ＣＮ／トルエンのＣＨ₃ＣＮ混合物、またはＣＨ₃ＣＮ／ジクロロメタンの混合物）の存在下、周囲温度（例えば、１５℃）で、化合物Ｂをシリルヒドリド（例えばアルキルシリルヒドリド類、好ましくはトリアルキルシリルヒドリド、例えばトリエチルシリルヒドリド）のような還元剤と反応させる。

本発明の構造Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）の結晶性化合物はまた、以下に示す反応式ＩＩに従って製造されうる：
反応式ＩＩ

その中で、好ましくは窒素のような不活性雰囲気下、約５０〜約８５℃、好ましくは約６０〜約８０℃の範囲内の高温で、化合物Ａを、アルコール溶媒（例えばメタノールまたはエタノール、好ましくはメタノール）、水および塩基（例えばアルカリ金属水酸化物、例えばＮａＯＨ、ＫＯＨまたはＬｉＯＨ、好ましくはＮａＯＨ）水溶液で処理して、化合物Ｉを形成する。

塩基水溶液を、約０.２５：１〜約１：１、好ましくは約３：１〜約５：１の範囲の化合物Ａのモル比で用いる。

化合物Ｉａを形成するために、反応式Ｉに示されるように、化合物Ｉを含有する反応混合物を、有機極性溶媒、例えばメチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、または反応式Ｉについて上記で示した酢酸アルキル、好ましくはＭＴＢＥで処理して、化合物Ｉを分離し、それを（Ｓ）−プロピレングリコールで処理して、結晶性生成物Ｉａ（Ｓ）−ＰＧを含有する濃厚スラリーを形成する。通常の方法、例えば、化合物Ｉａのスラリーをシクロヘキサン：ＭＴＢＥ、イソオクタン：ＭＴＢＥ、ヘプタン：ＭＴＢＥ、シクロヘキサン、反応式Ｉについて示した酢酸アルキル、好ましくはシクロヘキサン：ＭＴＢＥのような有機溶媒で処理し、結晶性化合物Ｉａを回収する方法を用いて、結晶性化合物Ｉａをスラリーから分離する。

反応式ＩＩＩに関して、Ｌ−フェニルアラニン構造Ｈ−２を以下のように製造する：
反応式ＩＩＩ

化合物Ａを、アルコール溶媒、例えばイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）水、エタノールまたはメタノール、好ましくはイソプロピルアルコール水に溶解し、強塩基（例えばＮａＯＨまたはＫＯＨ）で処理し、約１０〜約６０分間、好ましくは約２５〜約３０分間、約４０〜約６０℃、好ましくは約４５〜約５５℃の範囲の温度で加熱する。混合物を約１５℃〜約３０℃、好ましくは約２０℃〜約２５℃の範囲の温度に冷却する。冷却混合物を、強鉱酸（例えばＨＣｌ）を用いて約５.５〜約７.５、好ましくは約６〜約６.５の範囲のｐＨに中和する。Ｌ−フェニルアラニン（Ｌ−Ｐｈｅ）を該中和した混合物に加え、必要であれば、追加の水およびＩＰＡを加えて、約１４〜約２４容積％(vol％) ＩＰＡの範囲に溶媒組成を調整する。生じた混合物を約室温〜約８０℃、好ましくは約６０〜約７５℃の範囲の温度で加熱して、透明な溶液を得て、それを約４０〜約５５℃、好ましくは約４７〜約５２℃の範囲の温度に冷却する。好ましい態様において、化合物ＩｃＨ−２の種晶の（種晶を加える段階の有無にかかわらず、反応式ＩＩにおいて本明細書に記載したように製造する）のアルコール水（例えばＩＰＡ／Ｈ₂Ｏ）溶液のスラリーを加える。生じたスラリーを、約１〜約４時間、好ましくは約２〜約３時間、約３０〜約４５℃、好ましくは約３５〜約４５℃の範囲の温度に冷却して、結晶性化合物ＩａＨ−２を形成する。Ｌ−フェニルアラニン結晶形ＩｃＨ−２の種晶のアルコール水溶液（約０.３％〜約１％、好ましくは約０.５％の種晶を含有する）を上記のスラリーに加える。スラリーを冷却し、Ｌ−フェニルアラニン結晶ＩｃＨ−２型を回収する。

（実施例）
以下の実施例は、本発明をさらに詳細に記載するために与えられる。本発明を遂行するために現在考えられる最良の態様を示すこれらの実施例は例証するためのものであり、本発明を限定する主旨ではない。

実施例１

Ａ．５−ブロモ−２−クロロ−４’−エチルベンゾフェノン
市販品の５−ブロモ−２−クロロ安息香酸（４１０ｇ、１.７４ｍｏｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂懸濁溶液（７００ｍＬ）を入れた磁気撹拌した２Ｌ丸底フラスコに、シュウ酸クロリド（２３５ｇ、１.８５ｍｏｌ）を加え、続いてＤＭＦ（１.５ｍＬ）を加えた。生じたＨＣｌをトラップするために、フラスコをチューブ(tubing)で固定して、撹拌したＫＯＨ水溶液の表面上をガスが放出(discharge)するようにした。２時間後、ガスの活発な発生が止んだとき、均一な反応液を終夜撹拌し、次いでロータリーエバポレーターを用いて揮発物を減圧留去した。その後の排気の間、生じた油を凝固させた。

クルード５−ブロモ−２−クロロ塩化ベンゾイルをエチルベンゼン（５３０ｍＬ）に溶解した後、黄色溶液を−３℃に冷却し、次いでＡｌＣｌ₃（２５７ｇ、１.９３ｍｏｌ）を〜３０ｇずつ６０分かけて加えて、温度が１０℃を超えないようにした。６０％のＡｌＣｌ₃を加えた後で発生し始めた大量のＨＣｌガスを、撹拌した濃ＮａＯＨ溶液に通すことによってトラップした。反応液がさらに濃縮されていたら、ＡｌＣｌ₃の添加が完了後、マグネチックスターラの撹拌を維持し得なかっただろう。バスを〜１５℃に加温しながら１時間撹拌した後、バスを取り除いた。２０℃で４時間後、その濃いシロップを氷（１.５ｋｇ）の上に注いだ。続いて、いったん撹拌懸濁液が冷却したら、Ｈ₂Ｏ（１Ｌ）を加え、次いでＥｔＯＡｃで抽出した（４×）。有機抽出物を合わせて、ＨＣｌ（１Ｎ）で洗浄し（２×）、ＫＯＨ（１Ｍ）で洗浄し（３×）、食塩水で洗浄し（２×）、次いでＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。最初にロータリーエバポレーターを用いて、次いで１トル、〜６０℃で加熱することによって揮発物を除去した。生じた暗色油の¹ＨＮＭＲ分析によって、残渣がオルト／パラ異性体の１：１４混合物であることが明らかとなった。ヘキサンに溶解し、続いてシリカゲルパッドを通して濾過することによって、大部分の色を除去した。溶離液の濃縮によって、５６０ｇ（９９％）の５−ブロモ−２−クロロ−４’−エチルベンゾフェノン／５−ブロモ−２−クロロ−２’−エチルベンゾフェノンの１４：１混合物を得た。

ＨＰＬＣ保持時間：４.７分、ＹＭＣＳ５Ｃ−１８４.６×５０ｍｍカラム、２.５ｍＬ／分、２２０ｎＭで検出；０〜１００％Ｂの４分グラジエント１００％Ｂで２分保持。溶媒Ａ：１０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。溶媒Ｂ：９０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。

５−ブロモ−２−クロロ−４’−エチルベンゾフェノン
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.73 (d, 2H, J_AB = 8.2 Hz), 7.54 (dd, 1H, J = 2.2 Hz, J = 8.8 Hz), 7.32 (d, 1H, J = 8.8 Hz), 7.295 (d, 2H, J_AB = 8.2 Hz), 2.72 (q, 2H, J=7.7 Hz), 1.27 (t, 3H, J=7.7 Hz).

¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 193.13. 151.33, 140.49, 133.8, 133.52, 131.6, 131.44, 130.34, 130.16, 128.28, 120.44, 29.04, 15.02.

５−ブロモ−２−クロロ−２’−エチルベンゾフェノン（特有のシグナル）
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 2.64 (q, 2H, J=7.7 Hz), 1.23 (t, 3H, J=7.7 Hz).

¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 28.9, 15.5.

Ｂ．５−ブロモ−２−クロロ−４’−エチルジフェニルメタン
Ｅｔ₃ＳｉＨ（４００ｇ、３.４５ｍｏｌ）および〜７％の異性体のケトンを含有する５−ブロモ−２−クロロ−４’−エチルベンゾフェノン（５３４ｇ、１.６５ｍｏｌ）のＴＦＡ撹拌溶液（３００ｍＬ）に、３０℃で、ＣＦ₃ＳＯ₃Ｈ（１.５ｇ、０.０１ｍｏｌ）を加えた。数分以内に温度が上昇し、溶液は激しく還流した。注：この穏やかな発熱は、外部の氷浴による冷却を必要とする。１時間後、ＨＰＬＣによって、反応が９０％完了したことが明らかとなった。追加のＥｔ₃ＳｉＨ（２０ｇ）を加え、終夜７０℃で加熱した後、ＨＰＬＣ分析で、反応は＞９５％完了していた。冷却して、揮発物をバルブ・ツー・バルブ蒸留(bulb to bulb distillation)によって減圧留去した。生じた薄灰色油（〜１Ｌ）をＨ₂Ｏ（１Ｌ）の中に注いだ。混合物をヘキサンで抽出し（３×）；有機層を合わせて、Ｈ₂Ｏで洗浄し（３×）、Ｎａ₂ＣＯ₃水で洗浄し（２×）、食塩水で洗浄し（２×）、次いでＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。ロータリーエバポレーターを用いて濃縮した後、透明で明るい琥珀油（〜１Ｌ）が残存した。この物質をさらに濃縮し；（Ｅｔ₃Ｓｉ）₂Ｏ（４５０ｍＬ）を０.６トルでの蒸留によって除去した。いったん蒸留ヘッドでの温度が７５℃に達したら、ポットを冷却した。ポットの¹ＨＮＭＲ分析によって、ジアリールメタン対（Ｅｔ₃Ｓｉ）₂Ｏの〜８：１混合物が含まれていることが明らかとなった。勢いよく撹拌した１０℃ ８５％ＥｔＯＨ／Ｈ₂Ｏ（１.２Ｌ）の中に生成物を注ぐことによって、この混合物の結晶化を達成し、数時間撹拌した後、濾過によって結晶を集め、冷１：１ＥｔＯＨ／Ｈ₂Ｏで洗浄し、減圧乾燥した。５−ブロモ−２−クロロ−４’−エチルジフェニル−メタン（５００ｇ）を、〜１％（Ｅｔ₃Ｓｉ）₂Ｏを含有する低融点固形物(low melting solid)として得て、それをさらに精製することなく用いた。

ＨＰＬＣ保持時間：５.３分、ＹＭＣＳ５Ｃ−１８４.６×５０ｍｍカラム、２.５ｍＬ／分、２２０ｎＭで検出；０〜１００％Ｂの４分グラジエント１００％Ｂで２分保持。溶媒Ａ：１０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。溶媒Ｂ：９０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。

¹H NMR (125 MHz, CDCl₃) δ 7.27-7.23 (m, 3H), 7.14 (d, 2H, J_AB = 7.7 Hz), 7.09 (d, 2H, J_AB = 7.7 Hz), 2.63 (q, 2H, J=7.7 Hz), 1.23 (t, 3H, J=7.7 Hz).

¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 142.46. 141.08, 135.68, 133.64, 133.13, 130.85, 130.55, 128.83, 128.1, 120.0, 38.62, 28.43, 15.51.

Ｃ．２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコラクトン
グルコノラクトン（２３９ｇ、１.３４ｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（１１８０ｍＬ、１０.７３ｍｏｌ）のＴＨＦ撹拌溶液（−５℃、２.４Ｌ）に、アルゴン下、温度が５℃を超えない速度で、滴下漏斗によってトリメチルシリルクロリド（１０２２ｍＬ、８.０５ｍｏｌ）を加えた。１時間後、撹拌した反応液を５時間３５℃に加熱し、その後、反応液を終夜撹拌しながら２０℃に冷却した。トルエン（３.６Ｌ）で希釈した後、混合物を０〜５℃に冷却し、次いで温度が１０℃を超えない速度でＨ₂Ｏ（７Ｌ）を注意して加えた。最初のＨ₂Ｏを加えると激しい発熱が起こることに留意せよ。混合した後、相を分離させ、次いで分けた。有機相をＮａＨ₂ＰＯ₄水（２Ｌ）、Ｈ₂Ｏ（１Ｌ）、および食塩水（１Ｌ）で洗浄した。有機層を次いでロータリーエバポレーターを用いて減圧濃縮し；生じた明黄色油をトルエン（２５０ｍＬ）に２回溶解し、再び濃縮して、６１６ｇを得た。

Ｄ．

パートＢ５−ブロモ−２−クロロ−４’−エチルジフェニルメタン（８８ｇ、０.２８ｍｏｌ）の１：２乾燥ＴＨＦ／トルエン撹拌溶液（４５０ｍＬ、−７８℃）に、アルゴン下、温度が−５５℃未満に維持される速度で、２.５Ｍｎ−ＢｕＬｉ（１３６ｍＬ、０.３４ｍｏｌ）のヘキサン溶液をゆっくりと加えた。添加後１０分間撹拌した後、この溶液を、反応が−５５℃未満に維持される速度で、パートＣ２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコラクトン（１５３ｇ、０.３３ｍｏｌ）のトルエン撹拌溶液（３５０ｍＬ、−７８℃）にカニューレで移した。溶液を−７８℃で３０分間撹拌し、次いでメタンスルホン酸（２８ｍＬ、０.４５ｍｏｌ）を含有するＭｅＯＨ（４００ｍＬ）の添加によってクエンチした。反応液を２０℃で１８時間終夜撹拌した。反応液を２０℃で１８時間終夜撹拌した。ＨＰＬＣ分析によって新たなピークが明らかとなり、それは予期したＯ−メチルグルコシドの質量に対応する（ＬＣ／ＭＳによる）。反応がいったん完了したら、ＮａＨＣＯ₃（４２ｇ、０.５ｍｏｌ）のＨ₂Ｏ溶液（２００ｍＬ）の添加によってクエンチした。ｐＨが弱塩基性でない場合、さらにＮａＨＣＯ₃を加え、次いでＨ₂Ｏで２倍に希釈し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。ＥｔＯＡｃ画分を合わせて、食塩水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。ロータリーエバポレーターを用いて濃縮した後、油（１４０ｇ、ＨＰＬＣ分析により純度９０％）をさらに精製することなく、純粋でないジアステレオマー混合物として用いた(carried forward)。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.37 (m, 1H), 7.23 (m, 2H), 7.02 (m, 4H), 5.14 (m, 1H), 5.06 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 4.03 (d, 1H, J_AB = 15.4 Hz), 3.97 (d, 1H, J_AB = 15.4 Hz), 3.80 - 3.70 (m, 4H), 3.60 (m, 1H), 3.48 (m, 1H), 3.31 (m, 1H), 2.84 (s, 3H), 2.53 (q, 2H, J =7.5 Hz ), 1.14 (t, 3H, J =7.5 Hz).

¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 144.4, 140.7, 138.94, 136.9, 132.51, 131.6, 130.96, 130.6, 130.2, 129.16, 103.36, 77.0, 74.86, 72.48, 64.27, 51.57, 41.33, 30.75, 17.9.

ＨＰＬＣ保持時間：４.２８分、純度９０％、ＹＭＣＳ５Ｃ−１８４.６×５０ｍｍカラム、２.５ｍＬ／分、２２０ｎＭで検出；０〜１００％Ｂの４分グラジエント１００％Ｂで２分保持。溶媒Ａ：１０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。溶媒Ｂ：９０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。

LC/MS: [M-OMe]⁺ 391, 393; [M+Na]⁺ 445, 447.

Ｅ．

ジイソプロピルエチルアミン（４６５ｇ、３.６ｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０.５ｇ、４.１ｍｍｏｌ）を含有するパートＤＯ−メチルグルコシド（２０６ｇ、０.４９ｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１Ｌ）を０℃に冷却した。温度が５℃を超えない速度で、無水酢酸（３２６ｇ、３.１９ｍｏｌ）をゆっくりと加えた。溶液を徐々に２０℃に加温した後、それを１０時間撹拌し、その後、ｔｌｃ分析によって、テトラアセテートへの十分な変換が明らかとなった。ＥｔＯＡｃ（１.５Ｌ）および１０％Ｈ₃ＰＯ₄水（１.５Ｌ）の添加によって反応をクエンチした。層を分離した後、水相をＥｔＯＡｃで抽出した（２×）。有機相を合わせて、食塩水で洗浄し（１×）、次いでＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧濃縮した。生じた油をトルエン（３００ｍＬ）に２回溶解し、再び濃縮して、濃い油（３００ｇ、ＨＰＬＣ純度９５％）を得て、生じた純粋でないジアステレオマー混合物をさらに精製することなく用いた。

¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.38 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.28 (dd, 1H, J = 8.3 Hz, J = 2.2 Hz), 7.24 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 7.11 (d, 2H, J_AB = 8.3 Hz), 7.04 (d, 2H, J_AB = 8.3 Hz), 5.56 (t, 1H, J = 9.7 Hz), 5.21 (t, 1H, J = 10.1 Hz), 4.93 (t, 1H, J = 10.1 Hz), 4.20 (dd, 1H, J = 12 Hz, J = 2 Hz), 4.12 (d, 1H, J_AB = 15.4 Hz), 4.02 (m, 1H), 4.018 (d, 1H, J_AB = 15.4 Hz), 3.10 (s, 3H), 2.606 (q, 2H, J = 7.7 Hz), 2.097 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.94 (s, 3H), 1.72sd (s, 3H), 1.21 (t, 3H, J=7.7 Hz).

¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ 170.7, 170.05, 169.47, 168.9, 142.2, 138.74, 136.4, 135.1, 134.7, 129.8, 129.4, 128.6, 128.0, 126.0, 100.02, 73.83, 71.33, 68.87, 68.77, 62.11, 49.43, 38.75, 28.4, 22.64, 20.68, 20.58, 20.16, 15.5.

ＨＰＬＣ保持時間：４.８１分、純度９０％、ＹＭＣＳ５Ｃ−１８４.６×５０ｍｍカラム、２.５ｍＬ／分、２２０ｎＭで検出；０〜１００％Ｂの４分グラジエント１００％Ｂで２分保持。溶媒Ａ：１０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。溶媒Ｂ：９０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。

Ｆ．

１当量のＨ₂Ｏ（９ｇ、０.５ｍｏｌ）およびＥｔ₃ＳｉＨ（１８８ｇ、１.６２ｍｏｌ）を含有する上記のクルードの油（３０１ｇ、０.５１ｍｏｌ）のＣＨ₂Ｃｌ₂撹拌溶液（５００ｍＬ）を−２０℃に冷却し、次いでＢＦ₃Ｅｔ₂Ｏ（１４５ｇ、１.０２ｍｏｌ）を加えた。添加の間、温度を＜０℃に維持した。反応液を続いて１０℃で２時間および１５〜２０℃で１８時間撹拌し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂（５００ｍＬ）およびＨ₂Ｏ（５００ｍＬ）の添加によってクエンチした。層を分離した後、水相をＣＨ₂Ｃｌ₂で１回抽出した。有機層を合わせて、ＮａＨＣＯ₃水および食塩水で洗浄し（１×）、次いでＮａ₂ＳＯ₄で乾燥した。濾過によってＮａ₂ＳＯ₄を除去した後、Ａｃ₂Ｏ（６.４ｇ、６５ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（９.５ｇ、７４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１００ｍｇ、０.８ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を２０℃で１８時間撹拌して、還元およびワークアップ中に加水分解されるいずれのグルコシドヒドロキシル類も再アセチル化されるようにした。減圧濃縮後に油を得て、ＥｔＯＨを加えて結晶化させた。濾過した後、ＨＰＬＣによるこの物質の純度は９８％であり；ＥｔＯＨからの再結晶によって、白色の固形物として、テトラアセチル化β−Ｃ−グルコシド（１８０ｇ、純度９９.８％）を得た。手順Ｄ〜Ｆについての全変換率は６１％であった。

ＨＰＬＣ保持時間：４.７４分、純度１００％、ＹＭＣＳ５Ｃ−１８４.６×５０ｍｍカラム、２.５ｍＬ／分、２２０ｎＭで検出；０〜１００％Ｂの４分グラジエント１００％Ｂで２分保持。溶媒Ａ：１０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。溶媒Ｂ：９０％ＭｅＯＨ／Ｈ₂Ｏ＋０.２％Ｈ₃ＰＯ₄。

¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.35 (d, 1H, J = 8.2 Hz), 7.19 (dd, 1H, J = 8.2 Hz, J = 2.2 Hz), 7.11 (d, 2H, J_AB = 8.5 Hz), 7.086 (d, 1H, J = 2.2 Hz), 7.06 (d, 2H, J_AB = 8.5 Hz), 5.28 (t, 1H, J = 9.7 Hz), 5.20 (t, 1H, J = 9.7 Hz), 5.04 (t, 1H, J = 9.7 Hz), 4.31 (d, 1H, J = 9.9 Hz), 4.26 (dd, 1H, J = 12 Hz, J = 5 Hz), 4.135 (dd, 1H, J = 12 Hz, J = 5 Hz), 4.095 (d, 1H, J_AB = 7.7 Hz), 3.995 (d, 1H, J_AB = 7.7 Hz), 3.79 (m, 1H), 2.605 (q, 2H, J = 7.7 Hz), 2.069 (s, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.67 (s, 3H), 1.21 (t, 3H, J=7.7 Hz) .

¹³C NMR (125 MHz, CDCl₃) δ 170.64, 170.3, 169.4, 168.7, 142.2, 138.78, 136.4, 135.1, 134.6, 129.9, 129.8, 128.7, 128.0, 125.9, 79.45, 76.1, 74.1, 72.5, 68.45, 62.2, 38.6, 28.4, 20.7, 20.6, 20.59, 20.2, 15.55.

LC/MS: [M+NH₄ ⁺] m/z 578.3にて

実施例２
Ｈ−２結晶構造

４ｇ（７１.５ｍｍｏｌ）の化合物Ａを、メカニカルスターラーを備えた２５０ｍＬ三つ口フラスコの中に入れた。６ｍＬの６.３ＮＮａＯＨと混合した１２ｍＬのイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）をフラスコの中に加え、溶液を５０℃に加熱した。反応後、溶液は透明になった（〜１時間）。溶液を２０℃に冷却し、Ｈ₂Ｏ（２８ｍＬ）を入れ、溶液を少なくとも２０〜３０分間撹拌した。反応混合物をＨＣｌで中和し：１.１ｍＬの濃ＨＣｌ（３７％）を反応混合物に加え（ｐＨ７.４）；別の５０μＬのＨＣｌを加えた（ｐＨ６.３）。

１.１８ｇのＬ−フェニルアラニン（Ｌ−Ｐｈｅ）をフラスコに入れた。１４ｍＬのＨ₂Ｏを用いて、（１）フラスコ壁のＬ−Ｐｈｅを反応溶液の中に注ぎ、（２）溶媒組成を約２０容積％のＩＰＡに調整した。スラリーを７０℃に加熱し、透明な溶液を得た。溶液を約５０℃に冷却し、Ｈ−２型（Ｉｃ）の種晶をスラリーとして導入し（０.５％種晶、２０ｍｇ／２００ｍＬ１５％ＩＰＡ／Ｈ₂Ｏ溶液）；溶液はすぐに濁った。スラリーを２時間かけて４０℃に冷却し、温度を６時間維持し；次いでスラリーを２時間かけて２０℃に冷却し、温度を約８時間維持した。スラリーをサンプリングし：少量のスラリーを遠心分離して、固形物を単離した。ブフナー漏斗および濾紙（ワットマン４）を用いてスラリーを濾過した。ケーキをＨ₂Ｏ（４×４ｍＬ）で洗浄し；次いでケーキをＥｔＯＡｃ（３×４ｍＬ）で洗浄した。ケーキを〜３０℃で終夜、ハウス・バキューム(house vacuum)下で乾燥した。Ｈ−２結晶の形態で化合物Ｉｃ（収率８１％）を得た。

ＩＰＡ／Ｈ₂Ｏ比は、結晶構造の調節に重要であることに留意せよ。ＩＰＡが３０％超である場合、混合物は時間とともに油になり(oil out)やすい。ＩＰＡが１２％未満である場合、混合物は８０℃であってもスラリーのままであり、結晶化の方法を調節するのが困難となる。この重要なパラメータを調節するためには、（１）密閉容器中で操作し、（２）ＩＰＡおよびＨ₂Ｏの添加を、例えばＮａＯＨおよびＨＣｌからモニターすることが重要である。

種晶を使用しない実施例２の反応式に示される手順を用いて、化合物Ｉｃの種晶を製造する。

実施例３
Ｈ−１結晶構造
Ｈ−２についての上記の実施例２の方法を用いて、より少量のＨ−１の結晶を形成する。Ｈ−１型は、同じ１：１Ｌ−フェニルアラニン構造の異なる型である。当業者に知られている手順、例えば本明細書に記載した手順を用いて、Ｈ−１型を単離および評価してもよい。

実施例４
（Ｓ）−ＰＧ結晶構造

化合物Ｉ（１.５ｇｍ、３.８ｍｍｏｌ）をＭＴＢＥ（８ｍＬ）に溶解し；溶液はわずかに濁った。これに（Ｓ）−１，２−プロパンジオール［（Ｓ）−ＰＧ］（３９７ｍｇ、２ｍＬＭＴＢＥ溶液）を加えた。反応液を５分間撹拌し；固形物は観察されなかった。当業者に一般に知られているように、この段階で適宜、種晶（５ｍｇ）を加えるのが好ましいが、必ずしも必要というわけではない。すぐに濁りが現れ、結晶化が観察された。反応液を室温で２４時間撹拌し、次いで濾過し、得られた固形物を室温でのデシケーターにおいてさらに乾燥した。総量１.１０ｇｍの複合体を単離した。母液を冷却し、乾燥後にさらに０.５ｇｍの複合体が生成された。総量１.５５ｇｍ（８３％）の生成物を単離した。

化合物ＩをＭＴＢＥに溶解し、生じた溶液を（Ｓ）−プロピレングリコールで処理し、上記のように行って（種晶を加えずに）、結晶性化合物Ｉａを形成することによって、用いた種晶を製造してもよい。

結晶の評価
下記およびここで特許請求された結晶構造と同等の結晶構造は、試験条件、純度、装置および当業者に知られている他の共通の変数(variable)に依存して、妥当な範囲内の誤差で、同一ではないが、類似の分析特性を示しうる。

したがって、本発明の範囲および精神からはずれることなく、本発明において様々な修正および変化がなされうることは、当業者にとって明らかである。本発明の他の態様は、本明細書に開示された発明の明細書および慣行を考察すれば、当業者にとって明らかである。出願人は、本明細書および実施例が、その範囲に限らないが、例として考慮されることを意図している。

粉末Ｘ線回折
粉末Ｘ線回折パターンが、用いられる測定条件に依存する測定誤差とともに得られうることは、当業者に認識されている。特に、粉末Ｘ線回折パターンにおける強度が、用いられる測定条件に依存して変動しうることは、一般に知られている。相対的な強度もまた、実験条件に依存して変化しうることがさらに理解されるべきであり、したがって、強度の正確な順番は考慮されるべきではない。また、通常の粉末Ｘ線回折パターンについての回折角の測定誤差は、典型的には約５％またはそれ以下であり、このような測定誤差の程度は、前述の回折角に付属するものとして考慮されるべきである。その結果、本発明の結晶構造は、本明細書で開示される添付図面に図示される粉末Ｘ線回折パターンと完全に同一なＸ線回折パターンを提供する結晶構造に限らないことは理解されるべきである。添付図面に開示されるものと実質的に同一な粉末Ｘ線回折パターンを提供するいずれの結晶構造も、本発明の範囲内に入る。粉末Ｘ線回折パターンの実質的同一性を確かめる能力は、当業者の範囲内にある。

Ｈ−２構造
約２００ｍｇの化合物Ｉｃ（実施例２に記載したように製造した）をフィリップス粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）サンプルホルダーの中に詰める。サンプルをフィリップスＭＰＤユニット（４５ＫＶ、４０ｍＡ、ＣｕＫα₁）に移した。データを室温で２〜３２の２θの範囲で収集した（連続走査モード、走査速度０．０３度／秒、オートダイバージェンス(auto divergence)および散乱防止スリット(anti scatter slit)、受光スリット(receiving slit)：０．２ｍｍ、サンプルスピナー(sample spinner)：ＯＮ）。

（Ｓ）−ＰＧ構造
ブルカーＣ２ＧＡＤＤＳを用いて、粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ）データを得た。照射はＣｕＫα（４０ＫＶ、５０ｍＡ）であった。サンプル−検出器距離は１５ｃｍであった。（Ｓ）−ＰＧ化合物Ｉａ（実施例３に記載したように製造した）の粉末サンプルを直径１ｍｍ以下の密封したガラスキャピラリーの中に入れ；データ収集の間、キャピラリーを回転させた。少なくとも２０００秒のサンプル露出時間(sample exposure time)で、３≦２θ≦３５°についてデータを収集した。３〜３５度の２θの範囲で、０．０２度の２θのステップサイズで、生じた２次元回折円弧(two-dimensional diffraction arc)を合わせて(integrated)、通常の１次元ＰＸＲＤパターンを作成した。

ＩｃＨ−２およびＩａ（Ｓ）−ＰＧ構造についての粉末Ｘ線回折パターンを、それぞれ図１〜２で説明する。構造Ｈ−２および（Ｓ）−ＰＧの各々についての選択された回折ピーク位置（２θ±０．２度）を、以下の表１に示す。室温での特徴的な回折ピーク位置（２θ±０．１度）は、米国標準技術局の方法、当業者に知られている他の適当な標準でキャリブレーションした２θを用い、回転キャピラリー(spinning capillary)を有する回折計（ＣｕＫα）で収集した質の高いパターンに基づいている。しかしながら、相対強度は、結晶の大きさおよび形態に依存して変化しうる。
表１
選択されたＰＸＲＤピーク（２θ±０.１°）

ハイブリッドＰＸＲＤパターン（等構造類似体(Isostructural Analog)より）：（Ｓ）−ＰＧ
文献（Yin. S. et al., American Pharmaceutical Review, 6(2):80 (2003)）に記載されたように、「ハイブリッド」のシミュレーションされた粉末Ｘ線パターンを生成した。ＣｅｌｌＲｅｆｉｎｅ．ｘｌｓプログラムを用いて格子の精密化(cell refinement)を行うことによって、室温の格子パラメータを得た。プログラムへの入力には、室温で実験した粉末パターンから得た約１０個の反射の２θ位置が含まれており；対応のミラー指数のｈｋｌを、等構造類似体について集めた単結晶データに基づいて帰属させた(assign)。
（１）実験の類似結晶構造における類似分子を、興味のある分子と置き換える工程（この段階によって、類似化合物の単位格子において興味のある分子の配向および位置が固定される）；
（２）上記のように、興味のある分子の実験のＰＸＲＤから得られた室温の格子の中に、興味のある分子を挿入する工程（この段階において、格子の原点(cell origin)についての分子の大きさおよび形状、並びに分子の位置を保持する方法で分子を挿入するが、格子とともに分子間距離を広げる／縮める）；
による２段階の工程で、興味のある分子についての結晶構造を生成した。上記で生成した結晶構造に基づいて、新たな（ハイブリッド）ＰＸＲＤを計算した（ソフトウェアプログラムのＡｌｅｘまたはＬａｔｔｉｃｅＶｉｅｗによる）。

（Ｓ）−ＰＧ複合体Ｉａの類似体およびハイブリッド（室温で精密化(refined)）からの単結晶についての格子パラメータ（２５°で入力）を以下の表２に示す。実質的に類似する入力を示す結晶構造および精密化された格子パラメータは、本発明の範囲に含まれると考えられる（すなわち、以下で説明される（Ｓ）−ＰＧＩａデータと同等である）。
表２
（Ｓ）−ＰＧＩａ

Ｖは、単位格子の体積である。

固体核磁気共鳴
構造（Ｓ）−ＰＧＩａを、固体ＮＭＲ法によって評価した。

すべての固体Ｃ−１３ＮＭＲ測定を、ブルカーＤＳＸ−４００、４００ＭＨｚＮＭＲ分光計で行った。およそ１２ｋＨｚで測定中に試料を高速回転させて(magic-angle spinning)（ＭＡＳ）、高出力プロトンデカップリングおよびＴＰＰＭパルスシークエンスおよび傾斜振幅交差分極(ramp amplitude cross-polarization)（ＲＡＭＰ−ＣＰ）を用いて、高分解能スペクトルが得られた(Bennett, A.E. et al., J. Chem. Phys., 103:6951 (1995), (Metz, G. et al., J. Magn. Reson. A, 110:219-227 (1994))。サンプルのおよそ７０ｍｇを、キャニスターデザインジルコニアローター(canister-design zirconia rotor)に詰め込み、各実験に用いた。化学シフト（δ）は、３８．５６ｐｐｍにセットされた高周波共鳴で、外部基準のアダマンタンを基準とした(Earl, W.L. et al., J. Magn. Reson., 48:35-54 (1982))。

構造（Ｓ）−ＰＧＩａについて生じた¹³ＣＮＭＲＣＰＭＡＳスペクトルを図８に示す。

（Ｓ）−ＰＧＩａ構造の固体炭素スペクトルについての主要な共鳴ピークを以下の表３に記載する。実質的に類似する¹³ＣＮＭＲピーク位置を示す結晶構造（「実質的に類似する」とは、１０〜１５％の無次元値を意味する）は、本発明の範囲内に入ると思われる（すなわち、以下に説明される（Ｓ）−ＰＧＩａ構造と等価である）。
表３
（Ｓ）−ＰＧＩａ
２７３°Ｋで測定されたＴＭＳ（テトラメチルシラン）に対するＳＳＮＭＲピーク位置／δ（ｐｐｍ）

これらのデータは、４００ＭＨｚ分光光度計で厳密に有効である。

熱重量分析
熱重量分析（ＴＧＡ）実験を、ティー・エイ・インスツルメント（登録商標）モデルＱ５００において行った。サンプル（約１０〜３０ｍｇ）を、あらかじめ風袋を量った白金皿に置いた。サンプルの重量を正確に測定し、装置によって１０００分の１ミリグラムまで記録した。窒素ガスを用いて１００ｍＬ／分で炉(furnace)をパージした。１０℃／分の加熱速度で、室温と３００℃の間でデータを収集した。

構造Ｈ−２Ｉｃおよび（Ｓ）−ＰＧＩａについてのＴＧＡ曲線を、それぞれ図５および６に示す。重量減少は、分析された構造１モルあたり、１モルの水に対応する。等価な結晶構造は、試験条件、純度および当業者に知られている他の変量に応じて、図５および６で説明される妥当な範囲の類似する重量減少を示しうる。

示唆走査熱量測定
構造Ｈ−２Ｉｃおよび（Ｓ）−ＰＧＩａの固体の熱挙動を、示唆走査熱量測定（ＤＳＣ）によって調べた。構造Ｈ−２Ｉｃおよび（Ｓ）−ＰＧＩａについてのＤＳＣ曲線を、それぞれ図３および４に示す。

示差走査熱量測定（ＤＳＣ）実験を、ティー・エイ・インスツルメント（登録商標）モデルＱ１０００において行った。サンプル（約２〜６ｍｇ）をアルミニウム皿において秤量し、１００分の１ミリグラムまで正確に記録し、ＤＳＣに移した。窒素ガスを用いて５０ｍｌ／分で装置をパージした。１０℃／分の加熱速度で、室温と３００℃の間でデータを収集した。下向きの吸熱ピークでプロットを作成した。

しかしながら、ＤＳＣ測定においては、加熱速度、結晶の形状および純度、並びに他の測定パラメータに依存して、実際に測定された開始およびピーク温度における特定の変動率が存在することを当業者は留意している。

吸湿等温線
吸湿等温線を、約１０ｍｇのサンプルを用いて、ＶＴＩＳＧＡ−１００シンメトリックベイパーアナライザ(Symmetric Vapor Analyzer)において収集した。０.０００５重量％／分の減少率(loss rate)（１０分間で得られた）まで、サンプルを６０℃で乾燥した。２５℃および３もしくは４、５、１５、２５、３５、４５、５０、６５、７５、８５、および９５％ＲＨでサンプルを試験した。３５分間、０.０００３重量％／分の割合に達したとき、または最大６００分で、各ＲＨでの平衡に達した。

Ｈ−２Ｉｃ構造についての吸湿等温線を図７に示す。

単結晶Ｘ線解析
Ｈ−１、Ｈ−２および（Ｓ）−ＰＧ構造についての単結晶解析を得て、Ｘ線回折によって調査した。

ブルカー−ノニウス（BRUKER AXS, Inc., 5465 East Cheryl Parkway Madison, WI 53711 USA）ＣＡＤ４連続回折計においてデータを収集した。２５高角反射の実験用回折計の調節の最小二乗解析を通して、単位格子パラメータを得た。θ−２θ可変走査法による恒温でのＣｕＫα照射（λ＝１．５４１８Å）を用いて強度を測定し、ローレンツ偏光因子についてのみ補正した。バックグラウンド計数を、走査時間の半分について走査の先端で収集した。あるいは、ＣｕＫα照射（λ＝１．５４１８Å）を用いたブルカー−ノニウスカッパＣＣＤ２０００システム(Bruker-Nonius Kappa CCD 2000 system)において単結晶データを収集した。測定した強度データの索引付けおよび加工を、ＨＫＬ２０００ソフトウェアパッケージ（Otwinowski, Z. & Minor, W. in Macromolecular Crystallography, Academic, NY, publ., Carter, W.C. Jr., & Sweet, R.M., eds. Vol. 276, pp.307-326 (1997)）を用いて、集積プログラムスイート(Collect program suite)（Collect Data collection and processing user interface: Collect: Data collection software, R. Hooft, Nonius B.V., 1998）において行った。

必要であれば、データ収集の間、オックスフォードクライオシステム（Oxford Cryosystems Cryostream cooler: Cosier, J. et al., J. Appl. Cryst., 19:105 (1986)）の冷却流の中で結晶を冷却した。

構造を直接的な方法によって解析し、マイナー部分の改良を施したＳＤＰ（SDP, Structure Determination Package, エンラフ−ノニアス(Enraf-Nonius), ボヘミアＮＹ１１７１６、ＳＤＰソフトウェアにおける散乱因子、例えばｆ’およびｆ’’は、International Tables for Crystallography, Kynoch Press, Birmingham, England, publ., Vol. IV, Tables 2.2A and 2.3.1 (1974)から採用）ソフトウェアパッケージまたは結晶学パッケージ，ＭＡＸＵＳ（ｍａＸｕｓソリューションおよび精密化ソフトウェアスイート(refinement software suite)： S. Mackay, C.J. Gilmore, C. Edwards, M. Tremayne, N. Stewart, K. Shankland. ｍａＸｕｓ：回折データからの結晶構造の解析および精密化のためのコンピュータプログラム）を用いて、実測した反射に基づいて精密化した。

導かれた原子パラメータ（座標および温度因子）を、完全行列最小二乗法を通して精密化した。精密化において最小化した関数は、Σ_w（｜Ｆ_o｜−｜Ｆ_c｜）²であった。ＲをΣ｜｜Ｆ_o｜−｜Ｆ_c｜｜／Σ｜Ｆ_o｜として定義し、一方、Ｒ_w＝［Σ_w（｜Ｆ_o｜−｜Ｆ_c｜）²／Σ_w｜Ｆ_o｜²］^1/2であり、ここでｗは実測強度における誤差に基づく適当な重み関数である。距離マップを、精密化の全段階で調査した。水素を、等方性温度因子を用いて理想的な位置に導入したが、水素パラメータは変えなかった。

Ｈ−２Ｉｃ、Ｈ−１Ｉｂおよび（Ｓ）−ＰＧＩａ構造についての単位格子パラメータを以下の表４に列挙する。本明細書中で用いられるように、単位格子パラメータ「格子あたりの分子」とは、単位格子中の化合物の分子数をいう。
表４
結晶学的単位格子データ

Ｔ＝結晶学的データについての温度（℃）
Ｚ’＝非対称単位(asymmetric unit)あたりの薬物分子の数
Ｖ_m＝Ｖ（単位格子）／（格子あたりのＺ薬物分子）
Ｒ＝残差因子(residual index)（Ｉ＞３σ（Ｉ））
Ｄ_calc＝計算された結晶の密度
ＳＧ＝空間群
括弧（）の中で示される数値は、最下位桁における推定標準偏差を示す。

以下の表５は、２５℃でのＨ−２Ｉｃ構造についての位置パラメータおよびその推定標準偏差を示す。
表５
Ｔ＝２５℃でのＨ−２Ｉｃの部分原子座標(fractional atomic coordinate)

以下の表６は、２５℃でのＨ−１Ｉｂ構造についての位置パラメータおよびその中の推定標準偏差を示す。
表６
Ｔ＝２２℃でのＨ−１型Ｉｂについての部分原子座標の表

有用性および組合せ
Ａ．有用性
本発明の化合物（Ｓ）−ＰＧＩａ、Ｈ−１ＩｂおよびＨ−２Ｉｃは、哺乳類の腸および腎臓に見られるナトリウム依存性グルコース輸送体の阻害剤として活性を有する。好ましくは、本発明の化合物は腎臓のＳＧＬＴ２活性の選択的阻害剤であり、それゆえ、ＳＧＬＴ２活性に関連する疾患または障害の治療に用いられうる。

したがって、本発明の化合物は、様々な症状および障害の治療のため、例えば、これらに限らないが、糖尿病（例えばＩ型およびＩＩ型、耐糖能障害、インスリン耐性、および糖尿病合併症、例えば腎障害、網膜症、神経障害および白内障）、高血糖、高インスリン血症、高コレステロール血症、遊離脂肪酸もしくはグリセロールの血中濃度の上昇、高脂血症、脂質代謝異常、高トリグリセリド血症、肥満症、創傷治癒、組織虚血、アテローム性動脈硬化症並びに高血圧症の進行または発症を治療するかまたは遅延させるために、哺乳類、好ましくはヒトに投与されうる。本発明の化合物はまた、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）の血中濃度を増大させるのにも利用されうる。

また、Johannsson, J. Clin. Endocrinol. Metab., 82:727-734 (1997)に詳述される「シンドロームＸ」またはメタボリックシンドロームと集合的に呼ばれる症状、疾患、および疾病は、本発明の化合物を用いて治療されうる。

結晶性化合物Ｈ−１Ｉｂ、Ｈ−２Ｉｃおよび（Ｓ）−ＰＧＩａは、２００５年９月２３日に出願された米国特許出願第１１／２３３，６１７号（その開示は全体として本明細書に引用される）に開示される製剤および用量で投与されうる。

Ｂ．組合せ
本発明は、単独または医薬担体もしくは希釈剤と併用して、式Ｉの化合物の治療上の有効量を活性成分として含む医薬組成物をその範囲内に含む。適宜、本発明の化合物は、個々の治療剤として利用されるか、または一つ以上の他の治療剤と併用して利用されうる。

本発明の化合物と併用するのに適した他の「治療剤」には、これらに限らないが、上述の障害の治療に有用な公知の治療剤、例えば抗糖尿病薬；高血糖治療薬；脂質低下薬(hypolipidemic/lipid lowering agent)；抗肥満薬；降圧薬および食欲抑制薬が含まれる。

本発明の化合物と併用するのに適した抗糖尿病薬の例には、ビグアナイド（例えば、メトホルミンまたはフェンホルミン）、グルコシダーゼ阻害剤（例えば、アカルボースまたはミグリトール）、インスリン（例えばインスリン分泌促進物質またはインスリン増感剤）、メグリチナイド（例えば、レパグリニド）、スルホニル尿素（例えば、グリメピリド、グリブリド、グリクラジド、クロロプロパミドおよびグリピジド）、ビグアナイド／グリブリド併用（例えば、グルコバンス（登録商標））、チアゾリジンジオン（例えば、トログリタゾン、ロシグリタゾンおよびピオグリタゾン）、ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ α／γ デュアルアゴニスト、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、脂肪酸結合タンパク質（ａＰ２）の阻害剤、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）またはＧＬＰ−１受容体の他のアゴニスト、並びにジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ４）阻害剤が含まれる。

少なくとも一つ以上の他の抗糖尿病薬と併用した式Ｉの化合物の使用によって、これらの薬剤をそれぞれ単独で使用して得られるよりも大きな血糖降下の成果、およびこれらの薬剤によって生じる血糖降下作用を加法的に組み合わせるよりも大きな血糖降下の成果が得られると考えられる。

他の適当なチアゾリジンジオンには、三菱のＭＣＣ−５５５（米国特許第５，５９４，０１６号に開示されている）、グラクソウェルカムＧＬ−２６２５７０、エングリタゾン（ＣＰ−６８７２２、ファイザー）またはダルグリタゾン（ＣＰ−８６３２５、ファイザー、イサグリタゾン）（ＭＩＴ／Ｊ＆Ｊ）、ＪＴＴ−５０１（ＪＰＮＴ／Ｐ＆Ｕ）、Ｌ−８９５６４５（メルク）、Ｒ−１１９７０２（三共／ＷＬ）、ＮＮ−２３４４（ドクター・レディー(Dr.Reddy)／ＮＮ）、またはＹＭ−４４０（山之内）が含まれる。

ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニストおよびＰＰＡＲ α／γ デュアルアゴニストの例には、マルグリタザー(muraglitazar)、ペリグリタザル(peliglitazar)、ＡＲ−ＨＯ３９２４２（アストラ／ゼネカ）、ＧＷ−４０９５４４（グラクソウェルカム）、ＧＷ−５０１５１６（グラクソウェルカム）、ＫＲＰ２９７（キョーリンメルク）、並びにムラカミら「A Novel Insulin Sensitizer Acts As a Coligand for Peroxisome Proliferation-Activated Receptor Alpha (PPAR alpha) and PPAR gamma. Effect on PPAR alpha Activation on Abnormal Lipid Metabolism in Liver of Zucker Fatty Rats」, Diabetes 47，1841-1847（1998）、ＷＯ０１／２１６０２および米国特許第６，６５３，３１４号（その開示は本明細書に引用される）に開示されているものが含まれ、その中で示される用量が用いられ、好ましいものとして示されるその化合物は、本明細書で使用するのに好ましい。

適当なａＰ２阻害剤には、１９９９年９月７日に出願された米国特許出願第０９／３９１，０５３号、および２０００年３月６日に出願された米国特許出願第０９／５１９，０７９号に開示されたものが含まれ、その中で示される用量が用いられる。

適当なＤＰＰ４阻害剤には、ＷＯ９９／３８５０１、ＷＯ９９／４６２７２、ＷＯ９９／６７２７９（プロバイオドラッグ(PROBIODRUG)）、ＷＯ９９／６７２７８（プロバイオドラッグ）、ＷＯ９９／６１４３１（プロバイオドラッグ）に開示されるもの、Hughes et al., Biochemistry, 38(36):11597-11603 (1999)によって開示されるＮＶＰ−ＤＰＰ７２８Ａ（１−［［［２−［（５−シアノピリジン−２−イル）アミノ］エチル］アミノ］アセチル］−２−シアノ−（Ｓ）−ピロリジン）（ノバルティス）、ＴＳＬ−２２５（トリプトフィル−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸（Yamada et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., 8:1537-1540 (1998)によって開示される）、Ashworth et al., Bioorg. & Med. Chem. Lett., 6(22):1163-1166 and 2745-2748 (1996)に開示される２−シアノピロリダイド(2-cyanopyrrolidide)類および４−シアノピロリダイド類、米国特許出願第１０／８９９，６４１号、ＷＯ０１／６８６０３および米国特許第６，３９５，７６７号に記載される化合物が含まれ、上記の引用文献に示される用量が用いられる。

他の適当なメグリチナイド類には、ナテグリニド（ノバルティス）またはＫＡＤ１２２９（ＰＦ／キッセイ）が含まれる。

本発明の化合物と併用するのに適当な高血糖治療薬の例には、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、例えばＧＬＰ−１（１−３６）アミド、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド、ＧＬＰ−１（７−３７）（米国特許第５，６１４，４９２号に開示される）、並びにエクセナチド（アミリン／リリー）、ＬＹ−３１５９０２（リリー）、ＭＫ−０４３１（メルク）、リラグルチド（ノボノルディスク）、ＺＰ−１０（ジーランドファーマシューティカルズＡ／Ｓ）、ＣＪＣ−１１３１（コンジュケム社）、並びにＷＯ０３／０３３６７１に開示される化合物が含まれる。

本発明の化合物と併用するのに適した脂質低下薬の例には、一つ以上のＭＴＰ阻害剤、ＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤、スクアレン合成酵素阻害剤、フィブリン酸誘導体、ＡＣＡＴ阻害剤、リポキシゲナーゼ阻害剤、コレステロール吸収阻害剤、回腸Ｎａ⁺／胆汁酸共輸送体阻害剤、ＬＤＬ受容体活性の上方調節剤(up-regulator)、胆汁酸捕捉剤、コレステロールエステル輸送タンパク質（例えば、ＣＰ−５２９４１４（ファイザー）およびＪＴＴ−７０５（アクロスファーマ(Akros Pharma)）のようなＣＥＴＰ阻害剤）、ＰＰＡＲアゴニスト（上記のもの）および／またはニコチン酸およびその誘導体が含まれる。

上記のように用いられうるＭＴＰ阻害剤には、米国特許第５，５９５，８７２号、米国特許第５，７３９，１３５号、米国特許第５，７１２，２７９号、米国特許第５，７６０，２４６号、米国特許第５，８２７，８７５号、米国特許第５，８８５，９８３号および米国特許第５，９６２，４４０号に記載されているものが含まれる。

一つ以上の式Ｉの化合物と併用して用いられうるＨＭＧＣｏＡ還元酵素阻害剤には、米国特許第3,983,140号に開示されているメバスタチンおよび関連化合物、米国特許第4,231,938号に開示されているロバスタチン（メビノリン）および関連化合物、プラバスタチンおよび関連化合物、例えば米国特許第4,346,227号に開示されているもの、米国特許第4,448,784号および同第4,450,171号に開示されているシンバスタチンおよび関連化合物などがあるが、これらに限定されるわけではない。ここで使用することができる他のHMG CoAレダクターゼ阻害剤には、米国特許第5,354,772号に開示されているフルバスタチン、米国特許第5,006,530号および同第5,177,080号に開示されているセリバスタチン、米国特許第4,681,893号、同第5,273,995号、同第5,385,929号および同第5,686,104号に開示されているアトルバスタチン、米国特許第5,011,930号に開示されているアタバスタチン(atavastatin)（日産/三共のニスバスタチン（NK-104））、米国特許第5,260,440号に開示されているビサスタチン（visastatin）（塩野義-アストラゼネカ（ZD-4522））、および米国特許第5,753,675号に開示されている関連スタチン化合物、米国特許第4,613,610号に開示されているメバロノラクトン誘導体のピラゾール類似体、PCT出願WO 86/03488に開示されているメバロノラクトン誘導体のインデン類似体、米国特許第4,647,576号に開示されている6-[2-(置換-ピロール-1-イル)-アルキル)ピラン-2-オン類およびその誘導体、SearleのSC-45355（3-置換ペンタン二酸誘導体）ジクロロ酢酸塩、PCT出願WO 86/07054に開示されているメバロノラクトンのイミダゾール類似体、フランス特許第2,596,393号に開示されている3-カルボキシ-2-ヒドロキシ-プロパン-ホスホン酸誘導体、欧州特許出願第0221025号に開示されている2,3-二置換ピロール、フランおよびチオフェン誘導体、米国特許第4,686,237号に開示されているメバロノラクトンのナフチル類似体、オクタヒドロナフタレン類、例えば米国特許第4,499,289号に開示されているもの、欧州特許出願第0142146号A2に開示されているメビノリン（ロバスタチン）のケト類似体、ならびに米国特許第5,506,219号および同第5,691,322号に開示されているキノリンおよびピリジン誘導体などがあるが、これらに限定されるわけではない。

好ましい脂質低下薬は、プラバスタチン、ロバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン、フルバスタチン、セリバスタチン、アタバスタチンおよびＺＤ−４５２２である。

また、ＨＭＧＣｏＡ還元酵素を阻害するのに有用なホスフィン酸化合物、例えばＧＢ２２０５８３７に記載されているものは、本発明の化合物と併用するのに適当である。

ここでの使用に適したスクアレンシンテターゼ阻害剤には、米国特許第5,712,396号に開示されているα-ホスホノ-スルホン酸類、Billerら, J. Med. Chem., 31(10):1869-1871 (1988)に開示されているもの、例えばイソプレノイド(ホスフィニル-メチル)ホスホン酸類、ならびに例えば米国特許第4,871,721号および同第4,924,024号ならびにBiller, S.A. et al., Current Pharmaceutical Design, 2:1-40 (1996)などに開示されている他の既知のスクアレンシンテターゼ阻害剤があるが、これらに限定されるわけではない。

さらにまた、ここでの使用に適した他のスクアレンシンテターゼ阻害剤として、Ortiz de Montellano, P. et al., J. Med. Chem., 20:243-249 (1977)に開示されているテルペノイドピロリン酸類、Corey et al., J. Am. Chem. Soc., 98:1291-1293 (1976)に開示されているファルネシル二リン酸類似体Aおよびプレスクアレンピロリン酸（PSQ-PP）類似体、McClard, R.W. et al., J. Am. Chem. Soc., 109:5544 (1987)に報告されているホスフィニルホスホン酸類、ならびにCapson,T.L.博士論文 1987年6月（ユタ大学医化学部）のアブストラクト、目次、16頁、17頁、40〜43頁、48〜51頁、要約に報告されているシクロプロパン類も挙げられる。

式Ｉの化合物と併用して用いられうるフィブリン酸誘導体には、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、クロフィブラート、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラートなど、プロブコール、および米国特許第3,674,836号に開示されている関連化合物（プロブコールおよびゲムフィブロジルは好ましい）、胆汁酸吸着剤、例えばコレスチラミン、コレスチポールおよびDEAE-セファデックス（セコレックス(Secholex)（登録商標）、ポリセキシド(Policexide)（登録商標））、ならびにリポスタビル（Rhone-Poulenc）、エーザイE-5050（N-置換エタノールアミン誘導体）、イマニキシル（HOE-402）、テトラヒドロリプスタチン（THL）、イスチグマスタニルホスホリルコリン（istigmastanylphosphorylcholine）（SPC, Roche）、アミノシクロデキストリン（田辺製薬）、味の素AJ-814（アズレン誘導体）、メリナミド（住友）、Sandoz 58-035、American Cyanamid CL-277,082およびCL-283,546（二置換尿素誘導体）、ニコチン酸、アシピモックス、アシフラン、ネオマイシン、p-アミノサリチル酸、アスピリン、ポリ(ジアリルメチルアミン)誘導体、例えば米国特許第4,759,923号に開示されているもの、4級アミンポリ(ジアリルジメチルアンモニウムクロリド)、およびイオネン類、例えば米国特許第4,027,009号に開示されているもの、ならびに他の公知の血清コレステロール降下剤が含まれる。

式Ｉの化合物と併用して用いられうるＡＣＡＴ阻害剤には、Drugs of the Future, 24:9-15 (1999)（アバシミベ（Avasimibe））；Nicolosi et al.,「The ACAT inhibitor, Cl-1011 is effective in the prevention and regression of aortic fatty streak area in hamsters（ACAT阻害剤Cl-1011はハムスターにおける大動脈線状脂肪沈着領域の予防および退縮に有効である）」, Atherosclerosis (Shannon, Irel.), 137(1):77-85 (1998)；Ghiselli, G.,「The pharmacological profile of FCE 27677: a novel ACAT inhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selective suppression of the hepatic secretion of ApoB100-containing lipoporotein（FCE27677の薬理学的プロファイル：ApoB100含有リポタンパク質の肝分泌の選択的抑制によって媒介される強力な血中脂質降下活性を持つ新規ACAT阻害剤）」, Cardiovasc. Drug Rev., 16(1):16-30 (1998)；Smith, C. et al.,「RP 73163: a bioavailable alkylsulfinyl-diphenylimidazole ACAT inhibitor（RP73163：バイオアベイラブルなアルキルスルフィニル-ジフェニルイミダゾールACAT阻害剤）」, Bioorg. Med. Chem. Lett. 6(1):47-50 (1996)；Krause, B.R. et al., Chapter 6:「ACAT Inhibitor: Physiologic Mechanisms for Hypolipidemic and Anti-Atherosclerotic Activities in Experimental Animals（ACAT阻害剤：実験動物における血中脂質降下活性および抗アテローム性動脈硬化活性の生理学的機序）」, Inflammation: Mediators and Pathways, CRC Press, Inc., publ., Ruffolo, Jr., R.R. et al., eds., pp. 173-198 (1995)；Sliskovic et al.,「ACAT inhibitors: potential anti-atherosclerotic agents（ACAT阻害剤：抗アテローム性動脈硬化症薬(anti-atherosclerotic agent)の候補）」, Curr. Med. Chem., 1(3):204-225 (1994)；Stout et al.,「Inhibitor of acyl-CoA:cholesterol O-acyl transferase (ACAT) as hypocholesterolemic agents. 6. The first water-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity. Inhibitors of acyl-CoA:cholesterol acyltransferase (ACAT). 7. Development of a series of substituted N-phenyl-N'-[(1-phenylcyclopentyl)-methy]ureas with enhanced hypocholesterolemic activity（血中コレステロール降下剤としてのアシル-CoA:コレステロールO-アシルトランスフェラーゼ（ACAT）の阻害剤.6. 脂質調節活性を持つ初の水溶性ACAT阻害剤. アシル-CoA:コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ACAT）の阻害剤.7. 強化された血中コレステロール降下活性を持つ一連の置換N-フェニル-N'-[(1-フェニルシクロペンチル)-メチル]尿素類の開発）」, Chemtracts: Org. Chem., 8(6):359-362 (1995)に開示されているもの、またはTS-962（大正製薬）が含まれる。

脂質低下薬は、ＬＤ２受容体活性の上方調節剤、例えば、ＭＤ−７００（大正製薬株式会社）およびＬＹ２９５４２７（イーライリリー）であってもよい。

本発明の化合物と併用するのに適したコレステロール吸収阻害剤の例には、ＳＣＨ４８４６１（シェリング・プラウ）、並びにAtherosclerosis, 115:45-63 (1995)およびJ. Med. Chem., 41:973 (1998)に開示されているものが含まれる。

本発明の化合物と併用するのに適した回腸Ｎａ⁺／胆汁酸共輸送体阻害剤の例には、Drugs of the Future, 24:425-430 (1999)に開示されている化合物が含まれる。

式Ｉの化合物と併用して用いられうるリポキシゲナーゼ阻害剤には、15-リポキシゲナーゼ（15-LO）阻害剤、例えばWO 97/12615に開示されているベンズイミダゾール誘導体、WO 97/12613に開示されている15-LO阻害剤、WO 96/38144に開示されているイソチアゾロン類、ならびにSendobry et al.,「Attenuation of diet-induced atherosclerosis in rabbits with a highly selective 15-lipoxygenase inhibitor lacking significant antioxidant properties（有意な抗酸化剤性を持たない高度に選択的な15-リポキシゲナーゼ阻害剤によるウサギにおける食餌誘発性アテローム動脈硬化の減少）」, Brit. J. Pharmacology, 120:1199-1206 (1997), およびCornicelli et al.,「15-Lipoxygenase and its Inhibition: A Novel Therapeutic Target for Vascular Disease（15-リポキシゲナーゼおよびその阻害：血管病の新しい治療標的）」, Current Pharmaceutical Design, 5:11-20 (1999)に開示されている15-LO阻害剤が含まれる。

本発明の化合物と併用するための適当な抗高血圧剤の例には、ベータアドレナリン作動性ブロッカー、カルシウムチャネルブロッカー（Ｌ−タイプおよびＴ−タイプ；例えば、ジルチアゼム、ベラパミル、ニフェジピン、アムロジピンおよびミベフラジル）、利尿剤（例えば、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、フルメチアジド、ヒドロフルメチアジド、ベンドロフルメチアジド、メチルクロロチアジド、トリクロロメチアジド、ポリチアジド、ベンズチアジド、エタクリン酸トリクリナフェン、クロルタリドン、フロセミド、ムソリミン、ブメタニド、トリアムトレン、アミロリド、スピロノラクトン）、レニン阻害剤、ＡＣＥ阻害剤（例えば、カプトプリル、ゾフェノプリル、フォシノプリル、エナラプリル、セラノプリル、シラゾプリル、デラプリル、ペントプリル、キナプリル、ラミプリル、リシノプリル）、ＡＴ−１受容体拮抗薬（例えば、ロサルタン、イルベサルタン、バルサルタン）、ＥＴ受容体拮抗薬（例えば、シタクスセンタン、アトルセンタンおよび米国特許第５，６１２，３５９号、および第６，０４３，２６５号で開示された化合物）、デュアルＥＴ／ＡＩＩ拮抗薬（例えば、ＷＯ００／０１３８９で開示された化合物）、中性エンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）阻害剤、バゾペプシダーゼ阻害剤（デュアルＮＥＰ−ＡＣＥ阻害剤）（例えば、オマパトリラートおよびゲモパトリラート）およびナイトレート化合物等が含まれる。

本発明の化合物と併用するのに適した抗肥満薬の例には、β３アドレナリン作動薬、リパーゼ阻害剤、セロトニン（およびドパミン）再取り込み阻害剤、甲状腺受容体β薬、５ＨＴ２Ｃアゴニスト、（例えばアリーナＡＰＤ−３５６）；ＭＣＨＲ１アンタゴニスト、例えばシナプス性ＳＮＡＰ−７９４１および武田Ｔ−２２６９２６、メラノコルチン受容体（ＭＣ４Ｒ）アゴニスト、メラニン凝集ホルモン受容体（ＭＣＨＲ）アンタゴニスト（例えばシナプス性ＳＮＡＰ−７９４１および武田Ｔ−２２６９２６）、ガラニン受容体修飾因子、オレキシンアンタゴニスト、ＣＣＫアゴニスト、ＮＰＹ１もしくはＮＰＹ５アンタゴニスト、ＮＰＹ２およびＮＰＹ４修飾因子、コルチコトロピン放出因子アゴニスト、ヒスタミン受容体−３（Ｈ３）修飾因子、１１−β−ＨＳＤ−１阻害剤、アジノペクチン受容体修飾因子(adinopectin receptor modulator)、モノアミン再取り込み阻害剤もしくは放出剤(releasing agent)、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ、例えばリジェネロンによるアキソキン（登録商標））、ＢＤＮＦ（脳由来神経栄養因子）、レプチンおよびレプチン受容体修飾因子、カンナビノイド−１受容体アンタゴニスト（例えばＳＲ−１４１７１６（サノフィ）またはＳＬＶ−３１９（ソルベイ））、および／または食欲抑制剤が含まれる。

本発明の化合物と併用して適宜用いられうるβ３アドレナリン作動薬には、ＡＪ９６７７（武田／大日本）、Ｌ７５０３５５（メルク）、もしくはＣＰ３３１６４８（ファイザー）または米国特許第５，５４１，２０４号、第５，７７０，６１５号、第５，４９１，１３４号、第５，７７６，９８３号および第５，４８８，０６４号に記載された他の公知のβ３アゴニストが含まれる。

本発明の化合物と併用して適宜用いられうるリパーゼ阻害剤の例には、オーリスタットまたはＡＴＬ−９６２（アリザイム）が含まれる。

本発明の化合物と併用して適宜用いられうるセロトニン（およびドパミン）再取り込み阻害剤（またはセロトニン受容体アゴニスト）は、ＢＶＴ−９３３（ビオヴィトルム(Biovitrum)）、シブトラミン、トピラメート（ジョンソン＆ジョンソン）またはアキソキン（リジェネロン）でありうる。

本発明の化合物と併用して適宜用いられうる甲状腺受容体β化合物の例には、甲状腺受容体リガンド、例えばＷＯ９７／２１９９３（Ｕ．ＣａｌＳＦ）、ＷＯ９９／００３５３（カロ・バイオ(KaroBio)）およびＷＯ００／０３９０７７（カロ・バイオ）に開示されているものが含まれる。

本発明の化合物と併用して適宜用いられうるモノアミン再取り込み阻害剤には、フェンフルラミン、デクスフェンフルラミン、フルボキサミン、フルオキセチン、パロキセチン、セルトラリン、クロルフェンテルミン、クロフォレックス、クロルテルミン、ピシロレックス、シブトラミン、デキサンフェタミン、フェンテルミン、フェニルプロパノールアミン、またはマジンドールが含まれる。

本発明の化合物と併用して適宜用いられうる食欲抑制剤には、トピラメート（ジョンソン＆ジョンソン）、デキサアンフェタミン、フェンテルミン、フェニルプロパノールアミンまたはマジンドールが含まれる。

上述の特許および特許出願は、本明細書に引用される。

本発明の化合物と併用して用いられる場合に、上記の他の治療剤は、例えば、米医薬品便覧に示される量で、上記の特許に示される量で、または当業者によって決定された他の量で用いられうる。

Claims

の結晶構造。
Ｈ−１、Ｈ−２および（Ｓ）−ＰＧからなる群から選択される構造を含む、請求項１の結晶構造。
Ｈ−２および（Ｓ）−ＰＧからなる群から選択される構造を含む、請求項１の結晶構造。
前記構造が実質的に純粋な形態である、請求項３の結晶構造。
（Ｓ）−プロピレングリコール（（Ｓ）−ＰＧ）Ｉａ：

の結晶構造。
Ｌ−フェニルアラニン（Ｌ−Ｐｈｅ）（Ｈ−１型）Ｉｂ：

の結晶構造。
Ｌ−フェニルアラニン（Ｌ−Ｐｈｅ）（Ｈ−２型）Ｉｃ：

の結晶構造。
ａ）結晶構造の測定が約２５℃の温度において、下表：

に実質的に等しい単位格子パラメータ；および
実質的に表５に記載された部分原子座標；
ｂ）室温で、４.２±０.１、８.３±０.１、９.２±０.１、１０.７±０.１、１５.５±０.１、１８.４±０.１、１９.２±０.１および２１.６±０.１からなる群から選択されるかまたは図１に示される２θ値（ＣｕＫα λ＝１.５４１８Å）を含む粉末Ｘ線回折パターン；
ｃ）約室温〜１１０℃の範囲で吸熱性を有するかまたは図３に示される示唆走査熱量測定サーモグラム；
ｄ）約１１０℃までに約３.１％の重量減少を有するかまたは図５に示される熱重量分析曲線；あるいは
ｅ）２５℃で相対湿度２５〜７５％の範囲における水の取り込みが＜０.３％であるかまたは図７に示される吸湿等温線；
のいずれか一つ以上の特徴を有する、請求項１のＨ−２結晶構造。
結晶構造の測定が約２２℃の温度において、下表：

に実質的に等しい単位格子パラメータ；および
実質的に表６に記載された部分原子座標の特徴を有する、請求項１のＨ−１結晶構造。
ａ）結晶構造の測定が約室温において、下表：

に実質的に等しい入力単位格子パラメータ；
ｂ）結晶構造の測定が約室温において、下表：

に実質的に等しいハイブリッド（精密化）単位格子パラメータ；
ｃ）室温で、３.７±０.１、８.１±０.１、８.７±０.１、１５.０±０.１、１５.８±０.１、１７.０±０.１、１８.９±０.１、２０.２±０.１および２１.８±０.１からなる群から選択されるかまたは図２に示される２θ値（ＣｕＫα λ＝１.５４１８Å）を含む粉末Ｘ線回折パターン；
ｄ）約室温〜７０℃の範囲で吸熱性を有するかまたは図４に示される示唆走査熱量測定サーモグラム；
ｅ）約７０℃までに約３.７％の重量減少を有し、かつ約２２０℃までに約１９.３％の重量減少を有するかまたは図６に示される熱重量分析曲線；あるいは
ｆ）零点でのＴＭＳに対して４００ＭＨｚ分光計で測定して、１４.１、１８.１、２７.０、３９.６、６１.１、６９.９、７６.７、７８.５、７８.９、１２４.０、１３１.５、１３６.３および１４１.０で実質的に類似するピーク位置を有する固体¹³ＣＮＭＲスペクトル；
のいずれか一つ以上の特徴を有する、請求項１の（Ｓ−ＰＧ）結晶構造。
請求項５の式Ｉａ：

の化合物の製造方法であって、式Ｉ：

の化合物を有機溶媒中で（Ｓ）−プロピレングリコールと反応させて、式Ｉａの化合物を得ることを特徴とする方法。
化合物Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）の種晶を、化合物Ｉおよび（Ｓ）−プロピレングリコールを含む反応混合物に加える段階を含むことを特徴とする、請求項１１の方法。
該有機溶媒が酢酸アルキルまたはメチルｔ−ブチルエーテルである、請求項１１の方法。
請求項５の結晶性化合物Ｉａの製造方法であって、構造：

の化合物を活性化基の存在下で還元剤と反応させて、構造：

の化合物Ｉを形成し、化合物Ｉを有機溶媒の存在下で（Ｓ）−プロピレングリコールと反応させ、化合物Ｉａ（（Ｓ）−ＰＧ）の種晶を該反応混合物に適宜加えて、結晶性化合物Ｉａ：

を形成することを特徴とする方法。
該還元剤がアルキルスルフィルハライドであり、該活性化基がルイス酸である、請求項１４の方法。
該還元剤がトリエチルシランであり、該活性化基がＢＦ₃ＯＥｔ₂またはＢＦ₃・２ＣＨ₃ＣＯＯＨであり、並びに該有機溶媒がメチルｔ−ブチルエーテルである、請求項１５の方法。
式ＩｃＨ−２型：

の構造のＬ−フェニルアラニンの製造方法であって、
ａ）構造：

の化合物Ａを得て；
ｂ）アルコール溶媒に化合物Ａを溶解し；
ｃ）生じた溶液を強塩基で処理し；
ｄ）生じた混合物を約４５〜約５５℃の範囲の温度で加熱し；
ｅ）生じた混合物を約１５〜約３０℃の範囲の温度に冷却し；
ｆ）強鉱酸を該冷却混合物に加えて、該混合物を中和し；
ｇ）Ｌ−フェニルアラニンの有機溶媒および水の溶液を該混合物に加え；
ｈ）該混合物を加熱して、溶液を得て；
ｉ）化合物ＩｃＨ−２型の種晶を、水および溶媒を有するスラリー中で、該溶液に適宜加え；並びに
ｊ）生じた溶液を冷却して、化合物ＩｃＨ−２型の結晶を形成することを特徴とする方法。
用いた有機溶媒がイソプロピルアルコールである、請求項１７の方法。
構造：

の化合物ＩｂＨ−１型の結晶を回収する段階を含むことを特徴とする、請求項１７の方法。
有効量の請求項１の結晶構造および医薬的に許容される担体もしくは希釈剤を含む医薬組成物。
前記結晶構造がＨ−２およびＳ−ＰＧからなる群から選択される、請求項２０の医薬組成物。
前記結晶構造が実質的に純粋な形態である、請求項２０の医薬組成物。
抗糖尿病薬、抗肥満薬、抗高血圧薬、抗アテローム性動脈硬化症薬および高脂血症治療薬からなる群から選択される一つ以上の治療剤とともに、有効量の請求項１の結晶構造を含む医薬組成物。
前記結晶構造がＨ−２およびＳ−ＰＧから選択される、請求項２３の医薬組成物。
前記結晶構造が実質的に純粋な形態である、請求項２４の医薬組成物。
治療上有効量の請求項５の結晶構造を哺乳類に投与することを特徴とする、糖尿病、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎障害、創傷治癒の遅延、インスリン耐性、高血糖、高インスリン血症、血中脂肪酸もしくはグリセロール値の上昇、脂質異常症、高脂血症、肥満症、高トリグリセリド血症、シンドロームＸ、糖尿病性合併症、アテローム性動脈硬化症または高血圧症の治療方法、あるいは哺乳類における高密度リポタンパク質濃度を上昇させる方法。
治療上有効量の請求項７の結晶構造を哺乳類に投与することを特徴とする、糖尿病、糖尿病性網膜症、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎障害、創傷治癒の遅延、インスリン耐性、高血糖、脂質異常症、高インスリン血症、血中脂肪酸もしくはグリセロール値の上昇、高脂血症、肥満症、高トリグリセリド血症、シンドロームＸ、糖尿病性合併症、アテローム性動脈硬化症または高血圧症の治療方法、あるいは哺乳類における高密度リポタンパク質濃度を上昇させる方法。
該哺乳類がヒトである、請求項２７の方法。