JP2010521148A - 物質及び器具 - Google Patents
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Abstract
【選択図】図3
Description
・脱酸素剤
脱酸素剤の例には、以下のもの、亜硫酸塩、カタラーゼ、カルノシン、N−アセチルカルノシン、ホモカルノシン、カルボヒドラジド、酸素消去酵素、及びピロガロールに含まれるが、これらに限定されるものではない。
発熱作用を生じる化合物の例には、水酸化ナトリウムと塩酸、グリシン(グリセロール)と低級ポリグリコールが含まれるが、これらに限定されるものではない、望ましくは、前記反応は、エンドユーザーによって、例えば環境条件の変化によって抑制しかつ/又は活性化することができる。
吸熱反応を生じる化合物の例には、次のもの、水酸化ナトリウムと水、クエン酸と水酸化ナトリウムが含まれるが、これらに限定されるものではない。望ましくは、前記反応は、エンドユーザーによって、例えばマトリックスを囲繞する環境条件を変更することによって抑制し、かつ/又は活性化することができる。
例えば、重炭酸ソーダ/スカベンジャー、例えばソーダ石灰。
乾燥剤の例には、次のもの、シリカゲル、コバルト、塩化物が含まれるが、これらに限定されるものではない。
例えば、フェノールレッド。
染料の例には、次のもの、Remazol Brilliant Blue R(RBBR)、ポリR−478、グアヤコール及びタンニン酸のような菌類色素指示薬が含まれるが、これらに限定されるものではない。染料は、免疫蛍光法又は蛍光の用途で使用するために前記物質に添加することができる。例えば、染料を用いて蛍光試料の光への露出を最小にし、それにより蛍光のフェーディング効果を低減させ、かつ蛍光試料の保存期間を延長させることができる。
例えば、細菌汚染のための早期警告システム。
抗菌剤の例には、次のもの、殺菌剤、抗生物質、殺真菌剤、微生物成長の化学的阻害剤及びこれらの類似物が含まれるが、これらに限定されるものではない。
前記マトリックスを、低融点精製アガロースを水に最終濃度が1%アガロースとなるように溶解させて調整した。前記アガロース溶液をマルチウエルプレートのウエルを囲繞する空間にピペットで分注して、固化し得るようにした。
前記マトリックスを、低融点精製アガロースを重曹の0.044M水溶液(1リットル当たり重曹3700mg)に溶解させることによって調整した。このアガロース溶液を、マルチウエルプレートのウエルを囲繞する空間にピペットで分注し、固化し得るようにした。
pHを、フェノールレッドの色の変化の視覚評価により評価した。フェノールレッドは、Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM)培養培地内のpH指示薬として使用する。DMEMを適当に較正したインキュベーター(5%CO2及び37℃)内に配置したとき、前記培地は7.4に近いpHを有し、これらの条件下でフェノールレッドの色は赤である。前記培地のpHは、インキュベーター雰囲気の5%CO2とDMEM中の重曹(3700mg/L)との相互作用により維持される。前記培地は、インキュベーターの制御された雰囲気から移動させると、アルカリ性を強くする傾向があり、藤色/紫色を呈するようになる。組織培養インキュベーターの外側におけるCO2における変化を緩衝するゲルの有効性を評価するのに用いるのは、この色変化である。
標準の96ウエルプレート及びマトリックス処理した96ウエルプレート(本発明による器具)のウエルを、生理食塩水200μlを予め充填した後、標準的な組織培養インキュベーター(95%空気かつ5%CO2、37℃に設定)内で12時間保持した。実験プロトコルの開始前に、液体ウエル内容物の温度測定を記録した。次に、プレートを前記インキュベーターから、室温を19℃に維持した標準的な実験条件に移した。表示された時間に、96ウエルプレートの中央上側、中央中程及び中央下側に対応するウエルの測定を記録した。図示するデータは、開始温度を100%で表し、かつ0%が室温に対応する(即ち、実験の熱条件の動的範囲の極値)とした場合の百分率で表されている(図9)。
標準96ウエルプレート及びマトリックス処理した96ウエルプレートのウエルを、生理食塩水200μlを予め充填しかつ37℃の温度に予め加温した後、室温で30分間保持した。次に、液体ウエル内容物の温度測定を記録した。次に、プレートをインキュベーター(95%空気、5%CO2、37℃に設定)内に移した。30分経過時に、96ウエルプレートの中央上側、中央中程及び中央下側に対応するウエルの測定を記録した。これらのデータを温度上昇(℃/分)として表す(図10)。
標準96ウエルプレート及びマトリックス処理した96ウエルプレートのウエルを、不死化細胞株THP1の細胞を等密度(ウエル当たり細胞数3000個)で播種した後、標準的な組織培養インキュベーター(95%空気、5%CO2、37℃に設定)内で48時間保持した。マトリックスプレート及び標準プレート双方を前記インキュベーターの中央に並べて配置した。
標準96ウエルプレート及びゲルを含みかつ絶縁した96ウエルプレートのウエルを、生理食塩水200μlを予め充填した後、標準的な組織培養インキュベーター(95%空気かつ5%CO2、37℃に設定)内で12時間保持した。実験プロトコルの開始前に、液体ウエル内容物の温度測定を記録した。次に、プレートを前記インキュベーターから、室温を19℃に維持した標準的な実験条件に移した。表示された時間に、96ウエルプレートの中央上側、中央中程及び中央下側に対応するウエルの測定を記録した。図示するデータは、開始温度を100%で表し、かつ0%が室温に対応する(即ち、実験の熱条件の動的範囲の極値)とした場合の百分率で表されている。
この実験は、本発明によるゲルプレートのウエル内の試料の水分保持特性をゲルなしプレートのウエル内の試料と比較して測定するように設計した。96ウエルプレートのウエルに無血清培養培地200μlを充填し、標準的な組織培養インキュベーター内で84日間保持した。この実験では図17に示すウエル15を試料ウエルとして用いた。図18を参照すると、前記ゲルプレートの試料ウエルは、水分保持特性がゲルなしプレートと比較して13倍以上大きいことが分かる(データはn=4回の実験のインキュベーション時間後に残存する容積百分率を表している)。
この実験は、本発明によるゲルプレートのウエル中の試料の水分保持特性を、ゲルなしプレートのウエル中の試料と比較して測定するように設計した。96ウエルプレートのウエルに無血清培養培地100μlを充填し、かつ50℃に設定した標準的な乾燥オーブン内に48時間に亘って保持した。この実験では、図19に示すウエル18〜25を試料ウエルとして用いた。図20から分かるように、前記ゲルプレートは、ウエル内の水分が、ゲルなしプレートのウエルでは24〜91%であったのと比較して、94〜98%を保持した。前記ゲルプレートのウエル内に保持される水分は、試験した全てのウエル18〜25について全く一定であったのに対し、ゲルなしプレートでは、最も外側のウエル18,25における流体の喪失が非常に大きく、標準的なマルチウエルプレートのエッジ効果を示している。
Claims (49)
- 試料を入れるために、少なくとも1つの試料ウエルとオンボード(on-board)緩衝物質とを備え、前記緩衝物質が少なくとも部分的に前記試料ウエルを囲繞することを特徴とする器具。
- 前記試料が、生物学的、化学的、物理的、物理化学的及びナノ技術的試料を含む群から選択される1種又は2種以上である請求項1に記載の器具。
- 前記物質がマトリックスの形態をなす請求項1又は2に記載の器具。
- 前記物質が室温で固体又は半固体である請求項1乃至3のいずれかに記載の器具。
- 前記物質がゲル状材料からなる請求項1乃至4のいずれかに記載の器具。
- 前記物質が天然ゲル状材料からなる請求項5に記載の器具。
- 前記物質が合成ゲル状材料からなる請求項5に記載の器具。
- 前記物質が半合成ゲル状材料からなる請求項5に記載の器具。
- 前記ゲル状材料がポリマーである請求項5乃至8のいずれかに記載の器具。
- 前記ゲル状材料が、寒天、アガロース、アクリルアミド及びゼラチンからなる群から選択される1種又は2種以上からなる請求項5に記載の器具。
- 前記ゲル状材料が水性である請求項5乃至10のいずれかに記載の器具。
- 前記物質が、脱酸素剤、発熱化合物、吸熱化合物、乾燥剤、pH指示薬、染料及び抗菌剤からなる群から選択した1種又は2種以上の添加物を更に有する請求項1乃至11のいずれかに記載の器具。
- 前記オンボード緩衝系が熱緩衝物である請求項1乃至12のいずれかに記載の器具。
- リッドを更に備える請求項1乃至13のいずれかに記載の器具。
- 前記リッドが、試料保持手段へのアクセスを可能にするべく可動である請求項14に記載の器具。
- 絶縁手段を更に備える請求項1乃至15のいずれかに記載の器具。
- 前記絶縁手段が絶縁材料の膜層である請求項16に記載の器具。
- 前記絶縁手段がポリスチレンからなる請求項16又は17に記載の器具。
- 前記絶縁手段がリッドである請求項16乃至18のいずれかに記載の器具。
- 前記器具がマルチウエルプレートである請求項1乃至19のいずれかに記載の器具。
- 試料を培養しかつ/又は検定する際に使用するための物質であって、雰囲気緩衝及び熱緩衝を提供することを特徴とする物質。
- 前記試料が、生物学的、化学的、物理的、物理化学的及びナノ技術的試料を含む群から選択される1種又は2種以上である請求項22に記載の物質。
- 前記物質がマトリックスの形態をなす請求項22又は23に記載の物質。
- 前記物質が室温で固体又は半固体である請求項22乃至24のいずれかに記載の物質。
- 前記物質がゲル状材料からなる請求項22乃至25のいずれかに記載の物質。
- 前記物質が天然ゲル状材料からなる請求項26に記載の物質。
- 前記物質が合成ゲル状材料からなる請求項26に記載の物質。
- 前記物質が半合成ゲル状材料からなる請求項26に記載の物質。
- 前記ゲル状材料がポリマーである請求項26乃至29のいずれかに記載の物質。
- 前記ゲル状材料が、寒天、アガロース、アクリルアミド及びゼラチンからなる群から選択される1種又は2種以上からなる請求項26に記載の物質。
- 脱酸素剤、発熱化合物、吸熱化合物、乾燥剤、pH指示薬、染料及び抗菌剤からなる群から選択した1種又は2種以上の添加物を更に有する請求項22乃至31のいずれかに記載の物質。
- 請求項22乃至32のいずれかに記載の物質を備えるマルチウエルプレート。
- シングルウエル又はマルチウエルサンプルプレートのためのリッドであって、前記リッドを通して試料のウエル内への導入を容易にしかつ前記ウエルをシールするように形成されていることを特徴とするリッド。
- 試料導入の配置とシールする配置との間で互いに相対的に動く可動部分を備える請求項34に記載のリッド。
- 前記各可動部分が少なくとも1つのオリフィスを有する請求項34又は35に記載のリッド。
- 前記リッドの両方の前記可動部分の前記オリフィスを整合させることによってコンジットが形成される請求項36に記載のリッド。
- 前記コンジットが、前記リッドの一方の前記可動部分の前記オリフィスを前記リッドの他方の前記可動部分のオリフィスに関して整合させないことによって閉じる請求項36又は37に記載のリッド。
- 付勢手段を更に備える請求項34乃至38のいずれかに記載のリッド。
- 前記付勢手段が前記リッドを閉鎖配置に付勢する請求項39に記載のリッド。
- 前記付勢手段がばねである請求項39又は40に記載のリッド。
- 前記リッドの前記可動部分が結合手段によって互いに結合されている請求項34乃至41のいずれかに記載のリッド。
- 前記結合手段が、レール、スライダー、上側リッドからの突起、下側リッドからの突起からなる群から選択される請求項42に記載のリッド。
- 前記リッドの前記可動部分の相対的な動きの量を制限するストッパーを更に備える請求項34乃至43のいずれかに記載のリッド。
- ロック機構を更に備える請求項34乃至44のいずれかに記載のリッド。
- 前記リッドがプラスチック材料で形成されている請求項34乃至45のいずれかに記載のリッド。
- 前記リッドの一方の前記可動部分が単体として形成されている請求項34乃至46のいずれかに記載のリッド。
- スペーサー要素を更に備える請求項34乃至47のいずれかに記載のリッド。
- シングルウエル又はマルチウエルサンプルプレートと請求項34乃至48のいずれかに記載のリッドとを備える器具。
- 請求項34乃至48のいずれかに記載のリッドを更に備える請求項1乃至21のいずれかに記載の器具。
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