JP2010509610A - 多細胞生物の蛍光測定装置及びその蛍光測定方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、液体のサンプル中の大型多細胞生物の蛍光測定装置及びその蛍光測定方法を含んでいる。蛍光測定装置は、2つのポンプ機構を含んでいる。第1のポンプ機構は、図4に示し、空気圧及び重力を使用しており、第2のポンプ機構は、図8に示し、重力だけを使用している。蛍光測定装置が図6Aに示してあり、サンプルを導入するための機構が図6Bに示してある。測定値を解析する方法は、任意選択の仕分け機構を含み、図5に示されている。図7A乃至図7Cに、本発明に適切な貯蔵容器の例を示している。
図4は、本発明のポンプシステムの第1の好ましい実施形態を示す概略図である。具体的な装置は以下に述べる。図4に示されているアフリカツメガエルのポンプサブシステムは、(左側から右側に)バリアック(Variac)(variable voltage transformer:可変電圧変圧器)410と、水槽空気ポンプ412と、サンプル容器402のための環状スタンド支持器と、サンプル容器402と、フローセル104及び廃棄物容器422を含んでいる。サンプル容器402は、オタマジャクシを容器の底隅部に集めるために、約30°傾けられている。空気ポンプ412は、短いステンレス鋼の空気パイプ404中に空気配管414を介して空気を送り込むものである。サンプル102は、容器402中の最下位点から長いステンレス鋼のサンプルパイプ406/Tygon(商標)サンプル配管416の組み合わせを通してフローセル104に送られる。フローセル104からサンプルは、サンプル配管420を介して廃棄物容器422中に流入する。
図5は、本発明によって実施されるプロセスに関する変化を明らかにするブロック図である。空気ポンプ412及びサンプル容器402は、図4に示されている。測定装置508の一例が図6A及び図6Bに示されている。
1.例えば、手動によって導入じょうご802を通して第1のシリンダ806中に、サンプル804を導入する。
102 サンプル
104 フローセル
106 デジタルカメラ
108 光学系
110 焦点面
112 レーザ
114 フィルタ
116 ドレインチューブ
118 窓
120 廃液
202 流入チューブ
206 廃液流出配管
208 ポンプからの配管
210 流入穴
214 流出穴
216 ガスケット
218 ねじ式キャップ
300 LEDサイトメータ
302 LED
402 サンプル容器
404 空気パイプ
406 サンプルパイプ
408 湾曲端部
410 バリアック(可変変圧器)
412 空気ポンプ
414 サンプル容器への配管
416 フローセルへの配管
418 観察領域
420 廃棄物容器への配管
422 廃棄物容器
502 バルブ
504、506 瓶
508 測定装置
602 送り込まれる空気
604 サンプル導入バルブ
606 サンプル導入じょうご
702、704、706 容器構成
708 湾曲パイプ
800 重力による実施形態
802 サンプル導入じょうご
804 サンプル
806 第1のシリンダ
808 第1のシリンダレベルを維持するための流出
810 第1のシリンダ水の補充バルブ
812 第1のシリンダから第2のシリンダへのドレイン
814 フローセルから第1のシリンダへのバルブ
816 第1のシリンダから第2のシリンダへのサンプル経路
818 フローセルから第1のシリンダへのサンプル経路
820 第2のシリンダからフローセルへのドレイン
822 ドレインチューブ
824 ドレインバルブ
826 第2のシリンダ
828 第2のシリンダ水の補充バルブ
830 第2のシリンダレベルを維持するための流出
832 第2のシリンダレベルを維持するためのバルブ
834 第2のシリンダのサンプル入力バルブ
836、838 第2のシリンダの補充レベル
840 第2のシリンダのサンプル容積
842 第2のシリンダの間仕切り
846 第1のシリンダの間仕切り
Claims (19)
- ポンプを介して多細胞生物を通過させることなく、フローセル(104)を介して前記多細胞生物を含む液体サンプル(102,804)をサンプル容器(402,826)から廃棄物容器(806,422)に送るための蛍光測定装置であって、
前記サンプル(102,804)を含むサンプル容器(402,826)と、
該サンプル容器(402,826)と前記廃棄物容器(806,422)の間に圧力差を選択的に加える供給手段と、
前記サンプル容器を前記フローセル(104)に結合するための第1の流出口(406,416,820)と、
廃棄物容器(806,422)と、
前記フローセルを前記廃棄物容器に結合するための第2の流出口(420,818,814)とを備え、
前記供給手段により圧力差が加えられたとき、前記サンプルの部分が、前記サンプル容器から前記第1の流出口と前記フローセルと前記第2の流出口を通って前記廃棄物容器に流れ、
前記サンプルの部分が、前記ポンプを介して通過しないことを特徴とする蛍光測定装置。 - 前記多細胞生物は、長さが0.1mmから3cmであることを特徴とする請求項1に記載の蛍光測定装置。
- 前記多細胞生物は、アフリカツメガエルのオタマジャクシであることを特徴とする請求項2に記載の蛍光測定装置。
- 前記圧力差を選択的に加える供給手段は、前記サンプル容器に結合された、前記サンプル容器中の圧力を上昇させるための空気ポンプ(412)であることを特徴とする請求項1に記載の蛍光測定装置。
- 前記圧力差を選択的に加える供給手段は、重力を使用することを特徴とする請求項1に記載の蛍光測定装置。
- 前記圧力差を選択的に加える供給手段は、前記サンプル容器中の液体レベルを第1のレベル(836)まで上昇させるための手段(828,832,814)を備え、
前記第1のレベルは、前記廃棄物容器中の液体レベルより高いことを特徴とする請求項5に記載の蛍光測定装置。 - 前記廃棄物容器から前記サンプル容器に前記サンプルの部分を送り戻すための手段をさらに備え、
前記サンプル容器中の液体レベルを前記廃棄物容器中の液体レベルより低く第2のレベル(838)まで低下させる手段(832)と、前記サンプルの部分が前記廃棄物容器から前記サンプル容器に流れることを可能にするためのバルブ(834)とを備えていることを特徴とする請求項6に記載の蛍光測定装置。 - 前記サンプル容器中に、前記第2のレベルの下に(840)前記多細胞生物を収容するように構成された間仕切り(842)をさらに備えていることを特徴とする請求項7に記載の蛍光測定装置。
- 前記サンプル容器は、前記多細胞生物がその中に沈むことができる、前記サンプル容器の横断面より狭い下側領域を有するように構成されていることを特徴とする請求項1に記載の蛍光測定装置。
- 前記第1の流出口は、前記多細胞生物を吸い出すための前記下側領域中に延在したパイプ(406,708)を備えていることを特徴とする請求項9に記載の蛍光測定装置。
- 前記パイプは、前記下側領域中に延在するように湾曲した端部(408,708)を備えていることを特徴とする請求項10に記載の蛍光測定装置。
- 前記圧力差は、約140ml/分のサンプル流量を達成するのに十分であることを特徴とする請求項1に記載の蛍光測定装置。
- 前記サンプル内の光度を測定するための検出要素(100,300,508)を備え、前記多細胞生物が流出した後に、測定された光度に従って前記多細胞生物を仕分けするための機構(508,502)をさらに備えていることを特徴とする請求項1に記載の蛍光測定装置。
- 多細胞生物の蛍光測定方法であって、
サンプル容器(402、826)内に前記多細胞生物を含む液体サンプル(102,804)を配置するステップと、
廃棄物容器(806,422)を提供するステップと、
前記サンプル容器と前記廃棄物容器の間の流れの結合中に蛍光測定装置(104)を配置するステップと、
前記サンプルの部分が前記サンプル容器から前記蛍光測定装置を介して通過して前記廃棄物容器中に流れるように、前記サンプル容器と前記廃棄物容器の間に圧力差を選択的に加えるステップとを有し、
ポンプを介して前記サンプルの部分を通過させるステップを含まないことを特徴とする蛍光測定方法。 - 前記圧力差を加えるステップは、前記サンプル容器中に空気を送り込む(412)ステップを有することを特徴とする請求項14に記載の蛍光測定方法。
- 前記圧力差を加えるステップは、前記廃棄物容器中の液体レベルより高く前記サンプル容器中の液体レベル(836)を上昇させる(828,832,814)ステップを有することを特徴とする請求項14に記載の蛍光測定方法。
- 前記廃棄物容器内の液体レベルより下に(838)前記サンプル容器内の液体レベルを低下させることによって(832)、前記サンプル容器に前記サンプルを移動させて戻すステップをさらに有することを特徴とする請求項16に記載の蛍光測定方法。
- 前記多細胞生物は、アフリカツメガエルのオタマジャクシであることを特徴とする請求項14に記載の蛍光測定方法。
- 前記蛍光測定装置中の前記サンプル内の光を検出する(100,300,508)ステップと、検出された光に従って前記多細胞生物を仕分けする(508,502)ステップとをさらに有することを特徴とする請求項14に記載の蛍光測定方法。
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