JP2010189300A - Beauty method for restoring skin damage - Google Patents

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隆史 岡
Takuya Saiwaki
卓也 才脇
Toyoko Imae
東洋子 今栄
Zuu Yen
ズー イェン
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a novel beauty method for restoring skin damage. <P>SOLUTION: The beauty method comprises applying an external preparation for skin containing a compound having a sterol structure so as to facilitate restoration of skin damage. <P>COPYRIGHT: (C)2010,JPO&amp;INPIT

Description

本発明は、ステロール化合物を用いて肌荒れを修復する新規の美容方法に関する。   The present invention relates to a novel cosmetic method for repairing rough skin using a sterol compound.

皮膚の最外層に位置する角層は細菌や有害物質などの異物の接触や浸透から生体を保護すると共に、体内からの水分蒸散を防ぐことによって皮膚を健全な状態に保持するバリア機能を有する。バリア機能が低下すると、皮膚表面からの経表皮水分蒸発量(trans epidermal water loss:TEWL)が増加し、相対的に角層水分量が低下する。角層水分量の低下により皮溝、皮丘から成る皮紋(きめ)が不規則化すると、皮膚はかさかさした肌荒れ状態を呈する(曽根俊郎ら、香粧会誌 Vol.15 No.2. pp. 60-65(1991))。   The stratum corneum located in the outermost layer of the skin protects the living body from the contact and penetration of foreign substances such as bacteria and harmful substances, and has a barrier function to keep the skin in a healthy state by preventing moisture evaporation from the body. When the barrier function is lowered, transepidermal water loss (TEWL) from the skin surface is increased, and the stratum corneum moisture is relatively lowered. When the skin crests (skins) consisting of skin grooves and skin hills become irregular due to a decrease in water content of the stratum corneum, the skin becomes rough and rough (Toshiro Sone et al., Cosmetic Society Journal Vol.15 No.2. Pp. 60-65 (1991)).

このバリア機能において重要な役割を果たす角層の細胞間脂質は、主にセラミド、遊離脂肪酸及びコレステロールを主成分とし、ラメラ構造を形成していることが知られている(Bouwstra JA, et al., Acta Derm Venereol Suppl (Stockh). 2000;208:pp. 23-30.; Bouwstra JA, et al., Int J Cosmet Sci. 2008 Oct;30(5): p. 388)。   It is known that intercellular lipids in the stratum corneum that play an important role in this barrier function are mainly composed of ceramide, free fatty acid and cholesterol, and form a lamellar structure (Bouwstra JA, et al. Acta Derm Venereol Suppl (Stockh). 2000; 208: pp. 23-30 .; Bouwstra JA, et al., Int J Cosmet Sci. 2008 Oct; 30 (5): p. 388).

スキンケア洗浄料等に含まれる成分として界面活性剤がある。界面活性剤は、角層に浸透し、角質細胞のケラチンに吸収され、そして細胞間脂質と混和する(Friberg, S. E. et al., Colloids Surf. 1988, 30, pp.1-12; Rhein, L. D. Ibid. 1997, 48, pp.253-274)。更に、界面活性剤は、脂肪酸、脂肪酸グリセリド、コレステリルエステル等の皮膚脂質を除去することで、たとえ除去される脂質が少量であったとしても皮膚に損傷を与えることが知られている(Fulmer, A. W. et al., J. Invest. Dermatol. 1986, 86, pp. 598-602; Denda, M. et al., Arch. Dermatol. Res. 1994, 286, pp.41-46; Ronald, R. W. et al., J. Invest. Dermatol. 1999, 113, pp. 960-966; Lopez, O. et al. Bioch. et Biophy Acta 2000, 1508, pp. 196-209及びEbba, B. et al., Inter J. Phama. 2000, 195, pp.189-195)。   There is a surfactant as a component contained in a skin care cleaning agent or the like. Surfactants penetrate the stratum corneum, are absorbed by keratinous keratin, and mix with intercellular lipids (Friberg, SE et al., Colloids Surf. 1988, 30, pp.1-12; Rhein, LD Ibid. 1997, 48, pp.253-274). Furthermore, surfactants are known to damage skin by removing skin lipids such as fatty acids, fatty acid glycerides, cholesteryl esters, even if only a small amount of lipid is removed (Fulmer, AW et al., J. Invest. Dermatol. 1986, 86, pp. 598-602; Denda, M. et al., Arch. Dermatol. Res. 1994, 286, pp. 41-46; Ronald, RW et al , J. Invest. Dermatol. 1999, 113, pp. 960-966; Lopez, O. et al. Bioch. Et Biophy Acta 2000, 1508, pp. 196-209 and Ebba, B. et al., Inter J Phama. 2000, 195, pp.189-195).

化粧品業界において、上記のようなヒトの角層の損傷に対して回復させるための検討が行われてきた。その一例として、添加物として油脂を使用することで、少なくとも部分的に脂質膜を回復させることができることが知られている(Lawson, E. E.; Anigbogu, A. N. C.; Williams, A. C.; Barry, B. W.; Edwards, H. G. M. Spectrochimica Acta Part A 1998, 54, pp. 543-558)。   In the cosmetic industry, studies have been made to recover from the above-mentioned damage to the human stratum corneum. As an example, it is known that lipid membranes can be restored at least partially by using fats and oils as additives (Lawson, EE; Anigbogu, ANC; Williams, AC; Barry, BW; Edwards, HGM Spectrochimica Acta Part A 1998, 54, pp. 543-558).

皮膚表面をアセトン/エーテルで処理すると、角層からセラミドを含む細胞間脂質が溶出する。セラミドの溶出により、角層中の水分含量は著しく低下するものの、セラミドを当該皮膚表面に塗布して補うことで、かかる水分含量は正常レベルに回復することが知られている(Imokawa, G.; Akasaki, S.; Minematsu, Y.; Kawai, M. Arch. Dermatol. Res. 1989, 281, pp. 45-51.)。角層を構成するセラミドが失われた場合、セラミドを補填するのは合理的である。   When the skin surface is treated with acetone / ether, intercellular lipids containing ceramide are eluted from the stratum corneum. Although elution of ceramide significantly reduces the water content in the stratum corneum, it is known that such water content can be restored to a normal level by applying ceramide to the skin surface and supplementing it (Imokawa, G. Akasaki, S .; Minematsu, Y .; Kawai, M. Arch. Dermatol. Res. 1989, 281, pp. 45-51.). If the ceramide composing the stratum corneum is lost, it is reasonable to make up for the ceramide.

曽根俊郎ら、香粧会誌 Vol.15 No.2. pp. 60-65(1991)Toshiro Sone et al., Cosmetic Society Vol.15 No.2. Pp. 60-65 (1991) Bouwstra JA, et al., Acta Derm Venereol Suppl (Stockh). 2000;208:pp. 23-30.Bouwstra JA, et al., Acta Derm Venereol Suppl (Stockh). 2000; 208: pp. 23-30. Bouwstra JA, et al., Int J Cosmet Sci. 2008 Oct;30(5): p. 388)。Bouwstra JA, et al., Int J Cosmet Sci. 2008 Oct; 30 (5): p. 388). Friberg, S. E. et al., Colloids Surf. 1988, 30, pp.1-12Friberg, S. E. et al., Colloids Surf. 1988, 30, pp.1-12 Rhein, L. D. Ibid. 1997, 48, pp.253-274Rhein, L. D. Ibid. 1997, 48, pp.253-274 Fulmer, A. W. et al., J. Invest. Dermatol. 1986, 86, pp. 598-602Fulmer, A. W. et al., J. Invest. Dermatol. 1986, 86, pp. 598-602 Denda, M. et al., Arch. Dermatol. Res. 1994, 286, pp.41-46Denda, M. et al., Arch. Dermatol. Res. 1994, 286, pp.41-46 Ronald, R. W. et al., J. Invest. Dermatol. 1999, 113, pp. 960-966Ronald, R. W. et al., J. Invest. Dermatol. 1999, 113, pp. 960-966 Lopez, O. et al. Bioch. et Biophy Acta 2000, 1508, pp. 196-209Lopez, O. et al. Bioch. Et Biophy Acta 2000, 1508, pp. 196-209 Ebba, B. et al., Inter J. Phama. 2000, 195, pp.189-195Ebba, B. et al., Inter J. Phama. 2000, 195, pp.189-195 Lawson, E. E.; Anigbogu, A. N. C.; Williams, A. C.; Barry, B. W.; Edwards, H. G. M. Spectrochimica Acta Part A 1998, 54, pp. 543-558Lawson, E. E .; Anigbogu, A. N. C .; Williams, A. C .; Barry, B. W .; Edwards, H. G. M. Spectrochimica Acta Part A 1998, 54, pp. 543-558 Imokawa, G.; Akasaki, S.; Minematsu, Y.; Kawai, M. Arch. Dermatol. Res. 1989, 281, pp. 45-51.Imokawa, G .; Akasaki, S .; Minematsu, Y .; Kawai, M. Arch. Dermatol. Res. 1989, 281, pp. 45-51.

本発明は、従来知られていたセラミドをベースとした保湿機能の回復方法とは異なる、新規なメカニズムによる肌荒れの修復のための美容方法を提供することを目的とする。   An object of the present invention is to provide a cosmetic method for repairing rough skin by a novel mechanism, which is different from a conventionally known method for restoring a moisturizing function based on ceramide.

かかる皮膚へのアセトン/エーテルの適用は、セラミドだけでなく、それ以外の細胞間脂質の流出を生じさせ、皮膚疾患に近い状態をもたらすことが報告されている。このように、細胞間脂質構造が大きく乱れた状態は、化粧品等に含める成分の適否を検討する上で日常発生する肌荒れとは異なると考えられる。   It has been reported that the application of acetone / ether to the skin causes efflux of not only ceramide but also other intercellular lipids, resulting in a state close to skin diseases. Thus, it is considered that the state in which the intercellular lipid structure is greatly disturbed is different from the rough skin that occurs on a daily basis in examining the suitability of ingredients to be included in cosmetics and the like.

一方、本発明者が適切な濃度のドデシル硫酸ナトリウム(SDS)等の界面活性剤を皮膚に適用したところ、上記のアセトン/エーテル処理とは異なり、短時間内(1日以内)ではセラミドはほとんど流出しないことが分かった。また、界面活性剤の適用により損傷が生じた角層に種々の油分を適用したところ、コレステロールやフィトステロール等のステロール構造を有する油分が特にその損傷に対する修復に有効であることも見出された。これらの知見に基づき、本発明者は、セラミドではなくステロール構造を有する化合物が肌荒れの修復に重要な因子であると結論付け、本発明を完成させるに至った。   On the other hand, when the present inventor applied a suitable concentration of a surfactant such as sodium dodecyl sulfate (SDS) to the skin, unlike the above-mentioned acetone / ether treatment, ceramide is hardly contained within a short time (within 1 day). It turns out that it does not leak. In addition, when various oils were applied to the stratum corneum damaged by the application of a surfactant, it was also found that oils having a sterol structure such as cholesterol and phytosterol are particularly effective for repairing the damage. Based on these findings, the present inventor concluded that a compound having a sterol structure, not ceramide, is an important factor for repairing rough skin, and completed the present invention.

即ち、本発明は以下の発明を包含する。   That is, the present invention includes the following inventions.

[1]ステロール構造を有する化合物を含む皮膚外用剤を皮膚上に適用することにより肌荒れの修復を促進させることを特徴とする美容方法。
[2]前記皮膚外用剤の適用の前又は後、あるいはそれと同時に、炭素数12〜18の脂肪酸から選ばれる1種又は2種以上の脂肪酸を含む皮膚外用剤が皮膚に適用される、[1]に記載の美容方法。
[3]前記脂肪酸がパルミチン酸である[2]に記載の美容方法。
[4]前記皮膚外用剤が更に、炭素数12〜18の脂肪酸から選ばれる1種又は2種以上の脂肪酸を含む[1]に記載の美容方法。
[5]前記脂肪酸がパルミチン酸である[4]に記載の美容方法。
[1] A cosmetic method characterized by accelerating repair of rough skin by applying a skin external preparation containing a compound having a sterol structure on the skin.
[2] A skin external preparation containing one or more fatty acids selected from fatty acids having 12 to 18 carbon atoms is applied to the skin before, after, or simultaneously with the application of the external preparation for skin. ] Beauty method as described in.
[3] The cosmetic method according to [2], wherein the fatty acid is palmitic acid.
[4] The cosmetic method according to [1], wherein the external preparation for skin further contains one or more fatty acids selected from fatty acids having 12 to 18 carbon atoms.
[5] The cosmetic method according to [4], wherein the fatty acid is palmitic acid.

主要な細胞間脂質成分であるコレステロールは、生体膜の流動性を調節している。本発明によれば、コレステロール等のステロール構造を有する化合物を皮膚に適用することで、肌荒れ状態、すなわち、コレステロール、パルミチン酸が溶出して乱れた細胞間脂質構造を即時的に正常な状態に再構築することができる。これは皮膚のバリア機能の回復を意味し、セラミドを用いた保湿機能の回復とは異なるメカニズムと言える。   Cholesterol, which is a major intercellular lipid component, regulates the fluidity of biological membranes. According to the present invention, by applying a compound having a sterol structure such as cholesterol to the skin, the rough skin state, that is, the intercellular lipid structure that has been disturbed by elution of cholesterol and palmitic acid, is immediately restored to a normal state. Can be built. This means the recovery of the skin barrier function, which is a different mechanism from the recovery of the moisturizing function using ceramide.

ステロール化合物による角層中の細胞間脂質構造の修復は、本願出願人により構築された、角層をトータルで育て・維持するという「コルネオ(角層)育成理論」と軌を一にするものでもある。   The repair of the intercellular lipid structure in the stratum corneum by the sterol compound is also in line with the “corneo (the stratum corneum) growth theory” constructed by the applicant of the present application, in which the stratum corneum is brought up and maintained in total.

このようなステロール化合物を用いた新規の肌荒れ修復メカニズムは、従来の保湿剤が発揮する肌荒れ改善効果のメカニズムとは異なる、細胞間脂質をターゲットとした新規な角層ケア成分の開発、延いては新規な肌荒れ改善剤の開発にも資するものである。   The new rough skin repair mechanism using such sterol compounds is different from the conventional rough skin amelioration mechanism that moisturizers exhibit, and the development of a new stratum corneum care component targeting intercellular lipids. It also contributes to the development of new rough skin improvement agents.

図1Aは、下から、未処理角層脂質擬似基板、SDS溶液曝露後の前記基板、SDS溶液に代え、エタノール溶液に曝露した後の角層脂質擬似基板、並びにSDS溶液曝露後にコレステロール及びパルミチン酸の混合物を含有するエタノール溶液を適用した後の前記基板(7秒〜24時間)の赤外(IR)吸収スペクトルを示す。FIG. 1A shows, from below, an untreated stratum corneum pseudo-substrate, the substrate after exposure to SDS solution, a stratum corneum pseudo-substrate after exposure to an ethanol solution instead of an SDS solution, and cholesterol and palmitic acid after exposure to an SDS solution. The infrared (IR) absorption spectrum of the said board | substrate (7 second-24 hours) after applying the ethanol solution containing the mixture of these is shown. 図1Bは、下から、SDS溶液曝露後の角層脂質擬似基板及びパルミチン酸含有エタノール溶液を適用した後の当該基板(5秒〜24時間)のIR吸収スペクトルを示す。FIG. 1B shows an IR absorption spectrum of the substrate (5 seconds to 24 hours) after applying the stratum corneum pseudo-substrate after exposure to the SDS solution and the palmitic acid-containing ethanol solution from the bottom. 図1Cは、下から、SDS溶液曝露後の角層脂質擬似基板及びコレステロール酸含有エタノール溶液を適用した後の当該基板(6秒〜24時間)のIR吸収スペクトルを示す。FIG. 1C shows an IR absorption spectrum of the substrate (6 seconds to 24 hours) after application of the stratum corneum lipid simulated substrate after exposure to the SDS solution and the ethanol solution containing cholesterol acid, from the bottom. 図2は、電子スピン共鳴(ESR)測定による、SDS処理後の角層脂質擬似基板に対するパルミチン酸、コレステロール、フィトステロールの修復効果を示す図である。FIG. 2 is a diagram showing the repairing effect of palmitic acid, cholesterol, and phytosterol on the stratum corneum lipid pseudo-substrate after SDS treatment by electron spin resonance (ESR) measurement. 図3は、ESR測定による、SDS処理後の角層脂質擬似基板に対する化粧品汎用成分の修復効果を示す図である。FIG. 3 is a diagram showing the effect of repairing a cosmetic general-purpose ingredient on the stratum corneum lipid pseudo-substrate after SDS processing, by ESR measurement. 図4は、ESR測定による、SDS処理後の角層脂質擬似基板に対するステロール油分の修復効果を示す図である。FIG. 4 is a diagram showing the effect of repairing the sterol oil content on the stratum corneum lipid pseudo-substrate after the SDS treatment by ESR measurement. 図5は、示差走査熱量(DSC)測定による、SDS処理後の角層脂質擬似基板に対するパルミチン酸、コレステロール、フィトステロールの修復効果を示す図である。FIG. 5 is a diagram showing the repairing effect of palmitic acid, cholesterol, and phytosterol on the stratum corneum lipid pseudo-substrate after SDS treatment by differential scanning calorimetry (DSC) measurement. 図6は、SDS処理後のヒト角層に対するフィトステロールの修復効果をコルネオメーター測定値の比で表した図である。FIG. 6 is a diagram showing the repair effect of phytosterol on the human stratum corneum after SDS treatment, expressed as a ratio of Corneometer measurement values. 図7は、SDS処理後のヒト角層に対するフィトステロールの修復効果をTEWL比で表した図である。FIG. 7 is a diagram showing the repair effect of phytosterol on the human stratum corneum after SDS treatment in terms of TEWL ratio.

本発明は、ステロール構造を有する化合物を含む溶液を皮膚上に適用することにより肌荒れの修復を促進させることを特徴とする美容方法を提供する。   The present invention provides a cosmetic method characterized by promoting the repair of rough skin by applying a solution containing a compound having a sterol structure on the skin.

本明細書で使用する用語「ステロール構造を有する化合物」は、本明細書において「ステロール化合物」と同義に使用される。肌荒れを修復させる観点からは、ステロール構造を有する化合物が好ましい。   The term “compound having a sterol structure” as used herein is used synonymously with “sterol compound” in the present specification. From the viewpoint of repairing rough skin, a compound having a sterol structure is preferable.

ステロール化合物のうち、コレステロール、フィトステロール等室温で固体の結晶性物質に関しては、適当な溶媒に溶解した後皮膚に適用される。後述する皮膚角層細胞間脂質擬似基板を用いた実験によれば、SDSの添加により細胞間脂質構造が乱れた当該基板に対しステロール化合物を適用した場合、当該基板内のセラミドのコンフォーメーションが短時間(8秒)で修復されることが明らかとなっている。一方、パルミチン酸は、ステロール化合物のように短時間でセラミドのコンフォーメーションを修復することはできないものの、徐々に当該基板内に浸透していき、当該基板を未処理の状態に修復することができる。従って、ステロールの化合物の適用時に、例えば当該適用前又は後、あるいはそれと同時に炭素数12〜18の脂肪酸、好ましくはパルミチン酸を含む溶液を皮膚に適用することで、ステロール化合物を単独で適用した場合と比較してより未処理の状態に修復させることができる。   Among the sterol compounds, crystalline substances that are solid at room temperature such as cholesterol and phytosterol are applied to the skin after being dissolved in an appropriate solvent. According to an experiment using a skin stratum corneum intercellular lipid pseudo-substrate described later, when a sterol compound is applied to the substrate in which the intercellular lipid structure is disturbed by the addition of SDS, the conformation of the ceramide in the substrate is short. It is clear that it will be repaired in time (8 seconds). On the other hand, palmitic acid cannot repair the ceramide conformation in a short time like a sterol compound, but gradually permeates into the substrate and can restore the substrate to an untreated state. . Therefore, when the sterol compound is applied alone, for example, before, after, or simultaneously with the application of the sterol compound, a solution containing a fatty acid having 12 to 18 carbon atoms, preferably palmitic acid, is applied to the skin. It can be restored to an unprocessed state as compared with.

上述したステロール化合物及び炭素数12〜18の脂肪酸は、パルミチン酸、ステアリン酸等のように室温で粉末状の場合、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類、流動パラフィン、スクワラン、イソドデカン等の炭化水素油、マカデミアナッツ油、ヒマワリ油、オリーブ油等の油脂、ホホバ油、オレイン酸等の炭素数12〜18以外の脂肪酸等、あるいはこれらの混合物に溶解した後皮膚外用剤に含められる。これらの溶媒は、列記した具体的なものに限定されず、前記ステロール化合物及び炭素数12〜18の脂肪酸を溶解可能なものであればどのようなものでもよい。一方、ステロール化合物及び炭素数12〜18の脂肪酸が室温で液状である場合、これらはそのまま皮膚外用剤に含めることができる。このように、別の観点において、本発明は、肌荒れを修復する有効成分としてステロール化合物及び/又は炭素数12〜18の脂肪酸を含有する皮膚外用剤を提供する。   When the above-mentioned sterol compound and fatty acid having 12 to 18 carbon atoms are powdered at room temperature such as palmitic acid and stearic acid, alcohols such as ethanol and isopropanol, hydrocarbon oils such as liquid paraffin, squalane and isododecane, Oils such as macadamia nut oil, sunflower oil and olive oil, jojoba oil, fatty acids other than carbon number 12-18 such as oleic acid, etc., or a mixture thereof are included in the external preparation for skin. These solvents are not limited to the specific ones listed, and any solvents can be used as long as they can dissolve the sterol compound and the fatty acid having 12 to 18 carbon atoms. On the other hand, when the sterol compound and the fatty acid having 12 to 18 carbon atoms are liquid at room temperature, they can be directly included in the external preparation for skin. Thus, in another aspect, the present invention provides a skin external preparation containing a sterol compound and / or a fatty acid having 12 to 18 carbon atoms as an active ingredient for repairing rough skin.

前記皮膚外用剤中、ステロール化合物は0.01〜100重量%、そして炭素数12〜18の脂肪酸は0.01〜100重量%の量で含まれてもよい。   In the skin external preparation, the sterol compound may be contained in an amount of 0.01 to 100% by weight, and the fatty acid having 12 to 18 carbon atoms may be contained in an amount of 0.01 to 100% by weight.

前記皮膚外用剤の剤型は溶液に限定されるものでなく、クリーム、軟膏、ゲル、エアゾール等の任意の剤型をとることができる。これらの成分は、他の任意な成分とともに、化粧水、乳液等の任意のスキンケア製品に含めることができる。   The dosage form of the external preparation for skin is not limited to a solution, and may be any dosage form such as cream, ointment, gel, aerosol and the like. These ingredients, along with other optional ingredients, can be included in any skin care product such as lotions, emulsions, and the like.

「肌荒れ」を評価する指標として、TEWL値(経皮水分蒸散量)の上昇が一般的に知られている。この方法によれば、被検物適用前よりTEWL(経皮水分蒸散量)が上昇した状態が肌荒れとみなされ、TEWL上昇の程度が大きいほど皮膚のバリア能が低下している状態とみなされる。本発明では、in vitroで肌荒れを評価するために、本願発明者が開発した皮膚角層細胞間脂質を模した基板(以下、本明細書では「皮膚角層細胞間脂質擬似基板」と称する)(特願2008−335319)を用いて、その構造の乱れ等を肌荒れとして評価する。当該基板は、複雑な構造を有する角層を単純化した、3種の脂質(セラミド、パルミチン酸及びコレステロール)から構成されるモデル膜である。本発明では、未処理基板のIR吸収スペクトルと比較した差異(スペクトル強度、配合脂質由来の吸収帯の波数シフトなど)を損傷の程度とみなす。   As an index for evaluating “skin roughness”, an increase in TEWL value (transdermal moisture transpiration) is generally known. According to this method, a state in which TEWL (transdermal moisture transpiration) has increased since before application of the test object is regarded as rough skin, and the degree of increase in TEWL is regarded as a state in which the barrier ability of the skin has decreased. . In the present invention, in order to evaluate rough skin in vitro, a substrate simulating the skin stratum corneum intercellular lipid developed by the present inventor (hereinafter referred to as “skin stratum corneum lipid simulated substrate” in the present specification). (Japanese Patent Application No. 2008-335319) is used to evaluate the disorder of the structure as rough skin. The substrate is a model membrane composed of three types of lipids (ceramide, palmitic acid and cholesterol) in which the stratum corneum having a complicated structure is simplified. In the present invention, the difference (spectral intensity, wave number shift of absorption band derived from compounded lipid, etc.) compared with the IR absorption spectrum of the untreated substrate is regarded as the degree of damage.

前記3種の脂質から成る脂質膜を形成させる基礎の基板には、カバーガラス、マイカ、シリコンウエハー等の平面板を用いることができる。これらの脂質混合物は、質量比で、20〜70%:10〜60%:20〜40%(セラミド:パルミチン酸:コレステロール)で溶媒中に溶解される。皮膚中に存在する角層細胞間脂質の組成比を模するという観点からは、混合脂質の比率は2:1:1(セラミド:パルミチン酸:コレステロール)の質量比であることが好ましい。前記溶媒として、メタノール、クロロホルム、ヘキサン、アセトン、酢酸エチル等、あるいはその混合物を使用することができる。前記溶媒は、これらの具体的な溶媒に限定されず、上記脂質を溶解可能なものであればどのようなものでもよい。   A flat plate such as a cover glass, mica, or silicon wafer can be used as a base substrate on which a lipid film composed of the three types of lipids is formed. These lipid mixtures are dissolved in a solvent at a mass ratio of 20-70%: 10-60%: 20-40% (ceramide: palmitic acid: cholesterol). From the viewpoint of imitating the composition ratio of stratum corneum intercellular lipid present in the skin, the ratio of the mixed lipid is preferably a mass ratio of 2: 1: 1 (ceramide: palmitic acid: cholesterol). As the solvent, methanol, chloroform, hexane, acetone, ethyl acetate, or the like, or a mixture thereof can be used. The solvent is not limited to these specific solvents, and any solvent may be used as long as it can dissolve the lipid.

上記脂質混合物を溶媒に溶解した後、当該溶液を平面板、例えばカバーグラス上に展開させ、乾燥させる。続いて、平面板を高温(例えば120℃)のオーブン中で溶融させ、窒素気流下で所定の時間静置する。室温に冷却後、平面板に水を加えて加湿(例えば、水に長時間浸漬又は加水)浸漬することで、本発明の脂質擬似基板を調製することができる。固体脂質混合物を溶融した後加湿する方法も可能である。   After dissolving the lipid mixture in a solvent, the solution is spread on a flat plate, for example, a cover glass, and dried. Subsequently, the flat plate is melted in an oven at a high temperature (for example, 120 ° C.) and left to stand for a predetermined time in a nitrogen stream. After cooling to room temperature, the lipid pseudo-substrate of the present invention can be prepared by adding water to a flat plate and immersing it in humidification (for example, dipping in water for a long time or adding water). A method in which the solid lipid mixture is melted and then humidified is also possible.

「肌荒れの修復」は、界面活性剤の適用により引き起こされた前記基板における細胞間脂質構造(ラメラ構造)の乱れ及びその流動性・秩序性が、界面活性剤適用前の状態に回復することを意味する。ステロール化合物単独及び/又はステロール化合物とパルミチン酸の混合物を前記基板に適用すると、8秒後にはIRスペクトルが未処理の基板と同様のプロファイルを示した(図1A及び1C)。一方、パルミチン酸を単独で適用した場合、IRスペクトルが元のプロファイルに回復するのに11分かかった(図1B)。このような結果から、実際の皮膚に適用した場合でも、ステロール化合物は即時的な肌荒れの修復に寄与するものと考えられる。   “Repair of rough skin” means that the disruption of intercellular lipid structure (lamellar structure) in the substrate caused by the application of the surfactant and its fluidity and order are restored to the state before the application of the surfactant. means. When a sterol compound alone and / or a mixture of sterol compound and palmitic acid was applied to the substrate, the IR spectrum showed the same profile as that of the untreated substrate after 8 seconds (FIGS. 1A and 1C). On the other hand, when palmitic acid was applied alone, it took 11 minutes for the IR spectrum to recover to the original profile (FIG. 1B). From these results, even when applied to actual skin, sterol compounds are considered to contribute to immediate repair of rough skin.

しかしながら、前記皮膚外用剤におけるステロール構造を有する化合物及び炭素数12〜18の脂肪酸の用量・用法も特に限定されるものではなく、剤型や処置すべき肌荒れの状態により適宜決定される。典型的には、1日当たり数回、例えば1回〜3回、適量、例えば1平方cm2当たり3質量%溶液2〜3μLを肌に直接すり込むか、又その適量をガーゼなどに染み込ませてから肌に貼付することができる。 However, the dose and usage of the compound having a sterol structure and the fatty acid having 12 to 18 carbon atoms in the external preparation for skin are not particularly limited, and are appropriately determined depending on the dosage form and the rough skin condition to be treated. Typically, several times a day, for example, 1 to 3 times, an appropriate amount, for example, 2 to 3 μL of a 3% by mass solution per square cm 2 is rubbed directly into the skin, or the appropriate amount is soaked in gauze or the like. Can be applied to the skin.

皮膚角層細胞間脂質擬似基板の調製
セラミドIII(95.9%、0.3g)(Evonik Degussa社、ドイツ、エッセン)、パルミチン酸(0.15g)(ナカライテスク社、日本、京都)及びコレステロール(0.15g)(ナカライテスク社、日本、京都)をクロロホルム(50cm3)及びメタノール(10cm3)の混合溶媒に溶解した。続いて、この脂質混合溶液(0.2cm3)を18×18mmのカバーグラス上に広げ、そして乾燥させた。生成した脂質混合膜は、オーブン内において120℃で融解した後、同じ温度で1時間窒素雰囲気下に放置した。このサンプルを、室温に冷却した後24時間水に浸透させた。最後に、飽和塩化ナトリウムを含むデシケーター(相対湿度75%)内で、使用するまで保存した。
Preparation of skin stratum corneum lipid mimic substrate Ceramide III (95.9%, 0.3 g) (Evonik Degussa, Essen, Germany), palmitic acid (0.15 g) (Nacalai Tesque, Kyoto, Japan) and cholesterol (0.15 g) (Nacalai Tesque, Kyoto, Japan) was dissolved in a mixed solvent of chloroform (50 cm 3 ) and methanol (10 cm 3 ). Subsequently, the lipid mixed solution (0.2 cm 3 ) was spread on an 18 × 18 mm cover glass and dried. The produced lipid mixed film was melted at 120 ° C. in an oven and then left in a nitrogen atmosphere at the same temperature for 1 hour. The sample was allowed to penetrate water for 24 hours after cooling to room temperature. Finally, it was stored in a desiccator containing saturated sodium chloride (75% relative humidity) until use.

SDSによる皮膚角層細胞間脂質擬似基板の損傷
調製した複数の基板を各々SDS水溶液(5.0mg/cm3)に曝露し、そしてそれぞれ異なる時間維持することで、実験的にヒトの肌荒れ状態を当該基板内に作り出した。SDSの曝露により損傷した基板は、少量の水で洗浄し、乾燥させた後使用した。
Damage to skin stratum corneum intercellular lipid mimetic substrate by SDS Each of the prepared substrates was exposed to an aqueous SDS solution (5.0 mg / cm 3 ) and maintained for a different period of time. Produced in the substrate. The substrate damaged by the SDS exposure was washed with a small amount of water and dried before use.

SDS水溶液に曝露した後の基板内の化学構造及び組成の変化は、IR吸収スペクトルを用いて分光学的に解析した。IR吸収スペクトルは、Bio-Rad社製Digilab FTS-60Aスペクトロメーター上で、KBrペレットを用いた透過モードで測定することにより得た。スペクトルは全て、4000〜400cm-1の間で、平均64回スキャンしたものである。 Changes in chemical structure and composition in the substrate after exposure to an aqueous SDS solution were analyzed spectroscopically using IR absorption spectra. The IR absorption spectrum was obtained by measuring in a transmission mode using a KBr pellet on a Digilab FTS-60A spectrometer manufactured by Bio-Rad. All spectra were scanned 64 times on average between 4000 and 400 cm −1 .

また、損傷後の基板をX線回折(XRD)にかけることで、基板内の脂質の充填状態を確認した。X線回折(XRD)測定は、X線回折装置(理学社製RAD-RC、日本及びBruker社製D8 Discover、ドイツ)上で、グラファイトモノクロメーターで単色化した高密度CuKα放射線(λ=0.154nm)を用い、50mA、60kV、及び40mA、40kVの条件で実施した。   Moreover, the packed state of lipids in the substrate was confirmed by subjecting the damaged substrate to X-ray diffraction (XRD). X-ray diffraction (XRD) measurement was performed on a X-ray diffractometer (RAD-RC, manufactured by Rigaku Corporation, D8 Discover, manufactured by Bruker, Germany), and high-density CuKα radiation (λ = 0. 154 nm) under the conditions of 50 mA, 60 kV, and 40 mA, 40 kV.

IR及びXRDの結果から、SDSを前記基板に適用した場合、コレステロール及びパルミチン酸が前記基板から溶出することが明らかになった。具体的には、コレステロールは適用から約1分後に溶出し、パルミチン酸は適用から5〜6分で溶出した。一方、セラミド(特にセラミドIII)は、適用から4分後に、そのアミド基の構造が、α−ヘリックスからβ構造へと変化したことが示唆されたものの、適用から24時間経過した後も前記基板にほとんど残留していた。これらの現象は、ヒトの皮膚でも確認された。   From the results of IR and XRD, it was found that when SDS was applied to the substrate, cholesterol and palmitic acid were eluted from the substrate. Specifically, cholesterol was eluted about 1 minute after application, and palmitic acid was eluted 5-6 minutes after application. On the other hand, although ceramide (especially ceramide III) was suggested that the structure of the amide group changed from α-helix to β structure 4 minutes after application, the substrate was not removed after 24 hours from application. Almost remained. These phenomena were also confirmed in human skin.

コレステロール及び/又はパルミチン酸の添加による脂質構造の回復
エタノールに1)コレステロールとパルミチン酸とを等量含む混合物、2)パルミチン酸単独、及び3)コレステロール単独をそれぞれ5.0mg/cm3となるよう溶解させ、損傷した前記基板を当該溶液に異なる期間曝露し、維持した。洗浄して乾燥させた後、IR吸収スペクトル測定を行った。
Restoration of lipid structure by addition of cholesterol and / or palmitic acid 1) Mixture containing equal amounts of cholesterol and palmitic acid in ethanol, 2) Palmitic acid alone, and 3) Cholesterol alone to 5.0 mg / cm 3 each The dissolved and damaged substrate was exposed to the solution for different periods of time and maintained. After washing and drying, IR absorption spectrum measurement was performed.

IRスペクトルによるSDS曝露により損傷した基板の修復評価
脂質曝露後の前記基板と曝露前のIR吸収スペクトルを比較した。結果を図1A〜Cに示す。図1Aに示すとおり、1)コレステロールとパルミチン酸の混合溶液に対して曝露された前記基板は、8秒間の曝露によりアミドI(セラミドIII)の1614cm-1の吸収帯が1640cm-1に回復した。これは、セラミドIIIの構造がβ構造からαヘリックスへと回復したことを示唆している。損傷した基板を3)コレステロール単独の溶液に曝露した場合にも、セラミドIIIは同様にβ構造からαヘリックスへと回復した(図1C)。しかしながら、2)パルミチン酸単独の溶液に曝露した場合、アミドI(セラミドIII)の構造は回復しなかった(図1B)。これにより、コレステロールを添加することで、残留していたセラミドIIIの構造にも影響を及ぼすことが分かる。
Evaluation of repair of substrate damaged by SDS exposure by IR spectrum The substrate after lipid exposure was compared with the IR absorption spectrum before exposure. The results are shown in FIGS. As shown in FIG. 1A, 1) the substrate that has been exposed to a mixed solution of cholesterol and palmitic acid, the absorption band of 1614cm -1 in the amide I (ceramide III) is recovered to 1640 cm -1 by exposure 8 seconds . This suggests that the structure of ceramide III has recovered from the β structure to the α helix. When the damaged substrate was exposed to a solution of 3) cholesterol alone, ceramide III similarly recovered from the β structure to the α helix (FIG. 1C). However, 2) When exposed to a solution of palmitic acid alone, the structure of amide I (ceramide III) did not recover (FIG. 1B). Thus, it can be seen that the addition of cholesterol affects the structure of the remaining ceramide III.

C=O伸縮モード(パルミチン酸由来)の1708cm-1の吸収帯は、1)パルミチン酸とコレステロールのエタノール溶液に曝露してから3分後に徐々に強度が増大した(図1A)。他方、1378cm-1の吸収帯(コレステロールのCOHの面内変角モード由来)の強度は、1)の溶液を用いた場合、8秒の曝露後に増大した。しかしながら、1708cm-1の吸収帯が、2)パルミチン酸単独のエタノール溶液に対する曝露から11分後に強度が増大したのに対し(図1B)、1378cm-1の吸収帯は、3)コレステロール単独のエタノール溶液に対する曝露から8秒後に強度が増大した(図1C)。これらの結果は、コレステロールの浸透速度がパルミチン酸よりも速いことを示唆している。 The absorption band at 1708 cm −1 in C═O stretching mode (derived from palmitic acid) increased in intensity gradually after 1) exposure to an ethanol solution of palmitic acid and cholesterol (FIG. 1A). On the other hand, the intensity of the 1378 cm -1 absorption band (derived from the COH in-plane variable angle mode of cholesterol) increased after 8 seconds of exposure when the solution of 1) was used. However, the 1708 cm -1 absorption band increased in intensity 11 minutes after exposure to 2) palmitic acid alone in ethanol (FIG. 1B), whereas the 1378 cm -1 absorption band 3) ethanol alone in cholesterol. The intensity increased 8 seconds after exposure to the solution (FIG. 1C). These results suggest that the penetration rate of cholesterol is faster than that of palmitic acid.

ESR測定によるSDS処理角層に対する修復効果の検討
角層のラメラ構造の流動性・秩序性を検討するために、前記脂質曝露前の基板と曝露後の基板のESR測定を行った。SDS処理角層を被検試料のエタノール溶液に10秒間浸漬した後、角層に吸着した被検試料を除去するためエタノールに10秒間浸漬した。対照として、未処理角層、SDS処理角層をそれぞれエタノールに10秒間浸漬したサンプルも調製した。それぞれの処理角層に対して、5−DSA水溶液を適用して37℃で1時間インキュベートした後、角層を十分に水洗してカバーグラス上に広げ、相対湿度93%のデシケーター中で終夜静置しESR測定に供した。測定条件は以下の通りである。装置:JES-RE1X X-band (9 GHz) EPR spectrometer(JEOL)、microwave power:10mW、time constant:1 second、sweep time:8 minutes、modulation:0.2 mT、sweep width:15 mT。角層構造性はオーダーパラメーター(S値)を算出して評価した。
Examination of repair effect on SDS-treated stratum corneum by ESR measurement In order to examine the fluidity and order of the lamellar structure of the stratum corneum, ESR measurement was performed on the substrate before and after the lipid exposure. The SDS-treated stratum corneum was immersed in an ethanol solution of a test sample for 10 seconds, and then immersed in ethanol for 10 seconds to remove the test sample adsorbed on the stratum corneum. As a control, samples in which the untreated stratum corneum and the SDS-treated stratum corneum were each immersed in ethanol for 10 seconds were also prepared. For each treated stratum corneum, 5-DSA aqueous solution was applied and incubated at 37 ° C. for 1 hour, and then the stratum corneum was washed thoroughly with water and spread on a cover glass, and allowed to stand overnight in a desiccator with a relative humidity of 93%. And then subjected to ESR measurement. The measurement conditions are as follows. Equipment: JES-RE1X X-band (9 GHz) EPR spectrometer (JEOL), microwave power: 10 mW, time constant: 1 second, sweep time: 8 minutes, modulation: 0.2 mT, sweep width: 15 mT. The stratum corneum structure was evaluated by calculating an order parameter (S value).

1.角層細胞間脂質関連物質の添加
角層細胞間脂質関連物質であるパルミチン酸、コレステロール、フィトステロールを0.25質量%の量で含むエタノール溶液で10秒間浸漬処理した角層の測定結果を図2に示す。グラフの縦軸はS値を示しており、数値が大きい程角層構造性が高いことを示している。未処理角層に対しSDS処理した角層は角層構造性が低下しており、更に10秒間エタノール処理をしてもS値に変化はみられなかった。これらに対し、パルミチン酸適用角層に関しては中程度の修復効果、ステロール化合物であるコレステロール、フィトステロール適用角層は優れた修復効果がみられた。
1. 2. Addition of stratum corneum intercellular lipid-related substance Fig. 2 shows the measurement results of the stratum corneum immersed in an ethanol solution containing 0.25 mass% of palmitic acid, cholesterol and phytosterol, which are stratum corneum intercellular lipid-related substances, for 10 seconds. Shown in The vertical axis of the graph indicates the S value, and the larger the value, the higher the stratum corneum structure. The stratum corneum structure of the stratum corneum treated with SDS with respect to the untreated stratum corneum was deteriorated, and the S value was not changed even after ethanol treatment for 10 seconds. On the other hand, moderate repairing effect was observed for palmitic acid applied stratum corneum, and excellent repairing effect was observed for cholesterol as a sterol compound and phytosterol applied stratum corneum.

2.化粧品汎用油分の添加
化粧品汎用油分として用いられる流動パラフィン、ジイソステアリン酸グリセリル、N−ラウロイル−L−グルタミン酸ジ(フィトステリル・2−オクチルドデシル)、オリーブ油、イソステアリン酸、メチルポリシロキサンの3質量%のエタノール溶液で10秒間浸漬処理した角層の測定結果を図3に示す。グラフの縦軸はS値を示しており、数値が大きい程角層構造性が高いことを示している。未処理角層に対しSDS処理した角層は角層構造性が低下しており、更に10秒間エタノール処理をしてもS値に変化はみられなかった。これらに対し、流動パラフィン、ジイソステアリン酸グリセリル、オリーブ油適用角層に関しては中程度の修復効果、イソステアリン酸、メチルポリシロキサン適用角層に関しては修復効果があまりみられなかったが、ステロール化合物であるN−ラウロイル−L−グルタミン酸ジ(フィトステリル・2−オクチルドデシル)処理角層は優れた修復効果がみられた。
2. Addition of general cosmetic oils Liquid paraffin used as cosmetic general oils, glyceryl diisostearate, N-lauroyl-L-glutamate di (phytosteryl 2-octyldodecyl), olive oil, isostearic acid, methylpolysiloxane 3% by mass ethanol solution FIG. 3 shows the measurement results of the stratum corneum soaked for 10 seconds. The vertical axis of the graph indicates the S value, and the larger the value, the higher the stratum corneum structure. The stratum corneum structure of the stratum corneum treated with SDS with respect to the untreated stratum corneum was deteriorated, and the S value was not changed even after ethanol treatment for 10 seconds. In contrast, liquid paraffin, glyceryl diisostearate, olive oil applied stratum corneum, moderate restoration effect, isostearic acid, methylpolysiloxane applied stratum corneum did not so much, N-sterol compound N- The lauroyl-L-glutamate di (phytosteryl 2-octyldodecyl) treated stratum corneum showed an excellent repair effect.

3.ステロール油分の添加
ステロール構造を有する油分であるポリオキシエチレンフィトステロール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンフィトステロール、N−ラウロイル−L−グルタミン酸ジ(フィトステリル・2−オクチルドデシル)、マカデミアナッツ油脂肪酸フィトステリルの3質量%のエタノール溶液で10秒間浸漬処理した角層の測定結果を図4に示す。グラフの縦軸はS値を示しており、数値が大きい程角層構造性が高いことを示している。未処理角層に対しSDS処理した角層は角層構造性が低下しており、更に10秒間エタノール処理をしてもS値に変化はみられなかった。これらに対し、検討したステロール油分処理角層すべてに関して優れた修復効果がみられた。
3. Addition of sterol oil 3% by mass of polyoxyethylene phytosterol, polyoxyethylene polyoxypropylene phytosterol, N-lauroyl-L-glutamate di (phytosteryl-2-octyldodecyl), macadamia nut oil fatty acid phytosteryl which is an oil having a sterol structure The measurement results of the stratum corneum immersed in an ethanol solution for 10 seconds are shown in FIG. The vertical axis of the graph indicates the S value, and the larger the value, the higher the stratum corneum structure. The stratum corneum structure of the stratum corneum treated with SDS with respect to the untreated stratum corneum was deteriorated, and the S value was not changed even after ethanol treatment for 10 seconds. On the other hand, an excellent restoration effect was observed for all the sterol oil-treated horny layers examined.

DSC測定による角層修復効果の検討
角層細胞間脂質の添加による、SDS処理後の前記基板の脂質構造の回復をDSC測定により検討した。添加する角層細胞間脂質として、1)パルミチン酸、2)コレステロールに加え、3)フィトステロールを使用した。各脂質をそれぞれ0.25重量%の濃度となるようエタノールに溶解させた。SDS処理角層を当該エタノール溶液に各々10秒間適用した後、角層に吸着した被検試料を除去するためエタノールに10秒間浸漬した。対照として、未処理角層、SDS処理角層をそれぞれエタノールに10秒間浸漬したサンプルも調製した(n=1)。測定条件は以下の通りである。装置:DSC120(SII社)、測定セル:銀製15μL容、測定条件:5℃から130℃まで2K/minで昇温。結果を図5に示す。
Examination of the stratum corneum repair effect by DSC measurement The recovery of the lipid structure of the substrate after SDS treatment by the addition of stratum corneum intercellular lipid was examined by DSC measurement. As the stratum corneum intercellular lipid to be added, 1) palmitic acid, 2) cholesterol, and 3) phytosterol were used. Each lipid was dissolved in ethanol to a concentration of 0.25% by weight. The SDS-treated stratum corneum was applied to the ethanol solution for 10 seconds each, and then immersed in ethanol for 10 seconds to remove the test sample adsorbed on the stratum corneum. As a control, a sample in which the untreated stratum corneum and the SDS-treated stratum corneum were each immersed in ethanol for 10 seconds was also prepared (n = 1). The measurement conditions are as follows. Apparatus: DSC120 (SII), measurement cell: 15 μL silver, measurement conditions: temperature raised from 5 ° C. to 130 ° C. at 2 K / min. The results are shown in FIG.

図5の結果から明らかなように、未処理角層は、64℃付近に脂質由来のピーク温度を有する。当該ピーク温度は、SDS処理角層では62℃未満に低下し、更にエタノールを10秒間適用しでも62℃未満のままであった。しかしながら、SDS処理角層をコレステロールのエタノール溶液に10秒という短時間曝露しただけで、ピーク温度は未処理角層が示す温度に回復した。また、フィトステロールも顕著に脂質由来のピーク温度が回復した。パルミチン酸のエタノール溶液の添加によっては中程度の回復効果を示した。   As is apparent from the results of FIG. 5, the untreated stratum corneum has a lipid-derived peak temperature around 64 ° C. The peak temperature decreased below 62 ° C. in the SDS-treated stratum corneum, and remained below 62 ° C. even when ethanol was applied for 10 seconds. However, the peak temperature recovered to the temperature indicated by the untreated stratum corneum by simply exposing the SDS-treated stratum corneum to an ethanol solution of cholesterol for 10 seconds. Moreover, the peak temperature derived from lipid also recovered significantly for phytosterol. A moderate recovery effect was obtained by adding an ethanol solution of palmitic acid.

上記のESR及びDSCの結果から、ステロール構造を有する化合物は角層のラメラ構造の乱れ及び流動性・秩序性を即時に本来の状態に回復させることに寄与するものと考えられる。優れた角層修復効果を示したフィトステロールに関して、ヒト角層を用いたin vivo試験において修復効果を検討した。   From the results of the above ESR and DSC, it is considered that the compound having a sterol structure contributes to the immediate restoration of the disorder of the lamellar structure of the stratum corneum and the fluidity and order. With regard to phytosterols that showed excellent stratum corneum repair effect, the repair effect was examined in an in vivo test using human stratum corneum.

in vivoヒト角層におけるSDS処理に対するフィトステロールの修復効果の検討
前腕内側部を石鹸洗浄し、タオルで乾燥させた。30分経過した後に、フィトステロールを適用する部位に印を付け、コルネオメーターCM825PC(COLOGNE社製、ドイツ)、テバメーターTM210(Courage+Khazaka社製、ドイツ、ケルン)を用いて皮表水分量及びTEWL値を測定した。その後、3重量%のSDS水溶液300μlを各適用部位に30分間パッチ適用した。
Examination of the repair effect of phytosterol on SDS treatment in the human stratum corneum in vivo The forearm inner side was washed with soap and dried with a towel. After 30 minutes, mark the site to which phytosterol is applied, and use the Corneometer CM825PC (COLOGNE, Germany), Tevameter TM210 (Courage + Khazaka, Cologne, Germany) to determine the moisture content of the skin and the TEWL value. Was measured. Thereafter, 300 μl of 3 wt% SDS aqueous solution was patched to each application site for 30 minutes.

次に、SDSをパッチ適用部位から除去するために、適用部位を石鹸洗浄し、30分間静置した。その後、前記コルネオメーター及びテバメーターを用いて皮表水分量及びTEWL値を測定した。   Next, in order to remove SDS from the patch application site, the application site was washed with soap and allowed to stand for 30 minutes. Thereafter, the skin surface moisture content and TEWL value were measured using the Corneometer and Tevameter.

前記適用部位に0.25重量%フィトステロール(日清製油(株)、日本、東京)含有エタノール溶液を塗布し、30分間静置した。その後、前記コルネオメーター及びテバメーターを用いて皮表水分量及びTEWL値を測定した。結果を図6及び7に示す。   An ethanol solution containing 0.25 wt% phytosterol (Nisshin Oil Co., Ltd., Tokyo, Japan) was applied to the application site, and allowed to stand for 30 minutes. Thereafter, the skin surface moisture content and TEWL value were measured using the Corneometer and Tevameter. The results are shown in FIGS.

未処理皮膚に対する皮表水分量比(コルネオメーター測定値比)及びTEWL比は、SDS適用後に皮表水分量比は低下し(図6)、TEWL比は上昇した(図7)。これは、SDSの適用により肌荒れの状態が引き起こされたことを意味する。これに対し、フィトステロール添加後の皮膚は、皮表水分量比が上昇し(図6)、TEWL比が低下した(図7)。すなわち、コレステロールだけでなく、植物由来のステロール化合物であるフィトステロールも肌荒れの回復に寄与することが実際の皮膚で証明された。   The skin surface moisture ratio (corneometer measured value ratio) and TEWL ratio with respect to untreated skin decreased after application of SDS (FIG. 6) and TEWL ratio increased (FIG. 7). This means that rough skin was caused by the application of SDS. In contrast, in the skin after addition of phytosterol, the skin surface moisture content ratio increased (FIG. 6) and the TEWL ratio decreased (FIG. 7). That is, not only cholesterol but also phytosterol, which is a plant-derived sterol compound, has been proven in actual skin to contribute to the recovery of rough skin.

本発明の美容方法によれば、セラミドを用いることなく、ステロール構造を有する化合物を肌に適用することで肌荒れ状態を回復させることができる。このようなステロール化合物を用いた新規の肌荒れ修復メカニズムを利用することで、細胞間脂質をターゲットとした新規な角層ケア成分、延いては新規な肌荒れ改善剤の開発が可能となる。   According to the cosmetic method of the present invention, a rough skin state can be recovered by applying a compound having a sterol structure to the skin without using ceramide. By utilizing a novel rough skin repairing mechanism using such a sterol compound, it becomes possible to develop a novel stratum corneum care component targeting intercellular lipids and, in turn, a novel rough skin improving agent.

Claims (5)

ステロール構造を有する化合物を含む皮膚外用剤を皮膚上に適用することにより肌荒れの修復を促進させることを特徴とする美容方法。   A cosmetic method characterized by accelerating repair of rough skin by applying a skin external preparation containing a compound having a sterol structure on the skin. 前記皮膚外用剤の適用の前又は後、あるいはそれと同時に、炭素数12〜18の脂肪酸から選ばれる1種又は2種以上の脂肪酸を含む皮膚外用剤が皮膚に適用される、請求項1に記載の美容方法。   The skin external preparation containing one or more fatty acids selected from fatty acids having 12 to 18 carbon atoms is applied to the skin before, after, or simultaneously with the application of the external preparation for skin. Beauty methods. 前記脂肪酸がパルミチン酸であることを特徴とする請求項2に記載の美容方法。   The cosmetic method according to claim 2, wherein the fatty acid is palmitic acid. 前記皮膚外用剤が更に、炭素数12〜18の脂肪酸から選ばれる1種又は2種以上の脂肪酸を含むことを特徴とする請求項1に記載の美容方法。   The cosmetic method according to claim 1, wherein the external preparation for skin further contains one or more fatty acids selected from fatty acids having 12 to 18 carbon atoms. 前記脂肪酸がパルミチン酸であることを特徴とする請求項4に記載の美容方法。   The cosmetic method according to claim 4, wherein the fatty acid is palmitic acid.
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