JP2009545541A - カチオン界面活性剤の抗ウイルスのための使用 - Google Patents

Abstract

ラウリン酸およびアルギニンのような脂肪酸およびエステル化二塩基性アミノ酸の縮合物から誘導されるカチオン界面活性剤、特にアルギニン一塩酸塩・ラウリルアミド・エチルエステル（ＬＡＥ）を、微生物増殖を防ぐために使用できる。この種のカチオン界面活性剤は、ウイルス感染に対しても有効である。ヘルペスウイルス１型、ワクシニアウイルス、及びウシパラインフルエンザ３型ウイルスの培養物にＬＡＥを添加することによって、これら培養物でのウイルス有機体はほとんど完全に削減される。そのような効果は５及び６０分後に観察される。

Description

本願は、カチオン界面活性剤の新規な使用に関する。

カチオン界面活性剤は、様々な異なる用途の分野でよく知られている。

ラウリン酸およびアルギニンから誘導されるカチオン界面活性剤、特にアルギニン一塩酸塩・ラウリルアミド・エチルエステル（以下ＬＡＥと略称する）は、微生物増殖を防ぐために使用できる。ＬＡＥの化学構造は、下記式（１）で記載される：

この製品の製造は、特許文献１に記載されている。

式（１）の上記カチオン界面活性剤の代謝はラットで研究されており、これらの研究は、急速な吸収、および最終的に二酸化炭素および尿素として排泄される天然由来のアミノ酸および脂肪酸（ラウリン酸）への代謝を示している。毒物学的研究は、ＬＡＥが動物およびヒトに対して完全に無害であることを示している。

それゆえＬＡＥおよび関連化合物は、全ての腐敗し易い食品の保存に使用するために、特に適している。ＬＡＥおよび関連化合物は、同様に、化粧品での使用に適している。

この化合物は、異なる微生物、例えば細菌、真菌および酵母の増殖に対する抑制作用に優れている。ＬＡＥの最小抑制濃度を下記表１に示す。

スペイン特許出願公開第５１２６４３号（ＥＳ−Ａ−５１２６４３）

本発明の使用は、下記式（２）の脂肪酸およびエステル化二塩基性アミノ酸の縮合物から誘導されるカチオン界面活性剤に関するものである。

式中、
Ｘ^-は、Ｂｒ^-、Ｃｌ^-若しくはＨＳＯ₄ ^-、有機酸若しくは無機酸から誘導される対イオン、又はフェノール系化合物に基づくアニオンであり、
Ｒ₁は、アミド結合を介してα−アミノ基と結合している８〜１４個の炭素原子の飽和脂肪酸またはヒドロキシ酸からの直鎖状アルキル鎖であり、
Ｒ₂は、１〜１８個の炭素原子の直鎖状または分岐鎖状アルキル鎖、又は芳香族基であり、
Ｒ³は、以下のいずれかの基であり、

ｎは、０〜４であり得る。

対イオンＸ^-の供給源となり得る有機酸は、乳酸、酢酸、フマル酸、マレイン酸、グルコン酸、プロピオン酸、ソルビン酸、安息香酸、炭酸、グルタミン酸若しくは他のアミノ酸、ラウリン酸、並びにオレイン酸およびリノール酸のような脂肪酸であってもよく、一方、無機酸は、リン酸、硝酸およびチオシアン酸であってもよい。

アニオンＸ^-の基礎となり得るフェノール系化合物は、例えば、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）および関連するブチル化ヒドロキシトルエン、第３級ブチルヒドロキノン、並びにメチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベンおよびブチルパラベンのようなパラベン類である。

上記化合物群の中で最も好ましい化合物はＬＡＥである。

食品用銘柄の好ましい下記溶媒の１つに、該化合物を、使用前に直接溶解させることが好ましい：水、エタノール、プロピレングリコール、イソプロピルアルコール、他のグリコール類、グリコール類の混合物、並びにグリコール類および水の混合物。処置を特定のｐＨ値で行わなければならない場合、対応する緩衝液の使用が推奨され得る。他方、該化合物を、固体として容易に使用できる。固体品によって保護される表面は、例えば、食品または化粧品の表面である。

上記式（２）のカチオン界面活性剤について、抗菌活性、並びに真菌および酵母のような他の微生物に対する生物活性はよく実証されている。しかしウイルスに対するカチオン性防腐剤の活性は、記述されていない。

ウイルス感染の処置のために安全で有効な製品は、緊急且つ継続的に求められている。ウイルス感染の世界中での大発生は、有効な処置の複雑性を示す。近年のトリ流感（avian flu）の大発生は、疾患拡大を制限する最適なツールの緊急な調査につながっている。

今日、トリ流感として知られているトリインフルエンザ（avian influenza）は、オルトミクソウイルス科に属する本質的に血球凝集素サブタイプＨ５又はＨ７のインフルエンザＡ型ウイルスによって引き起こされるトリの疾患である。同じ群のウイルス内で、インフルエンザまたは流感と呼ばれる呼吸器疾患の原因となるウイルスが発見されている。

パラミクソウイルス科のパラミクソウイルス亜科に含まれるパラインフルエンザウイルスは、ヒト及び動物に影響を及ぼすウイルスを含む。ビリオンは、直径１５０ｎｍ、多形性であり、宿主の細胞膜から誘導される脂質エンベロープ、および長さ１０〜１４ｎｍの突起を有する。そのゲノムは、線状の７〜８セグメント、負のセンス、一本鎖ＲＮＡを含有し、その結果、１０，０００〜１４，６００ヌクレオチドのゲノムサイズである。

さらにパラミクソウイルス科及びオルソミクソウイルス科は、エンベロープ糖タンパク質の生物学的特性に関して特別な関係を共有する。下記表２に示されるように、パラミクソウイルス科及びオルソミクソウイルス科は、それらのタンパク質、脂質および炭水化物含有量に大きな違いを示さない。

パラインフルエンザの用語は由来的に選ばれた。なぜなら、いくつかの疾患症状はインフルエンザのものと非常に似ており、両方のウイルスタイプは、血球凝集およびノイラミニダーゼ活性を示すからである。

インフルエンザウイルスおよびパラインフルエンザウイルスは、熱のような外部影響に対して同じ感受性を示す。

パラインフルエンザウイルスは、インフルエンザウイルスに対する試験化合物の生物学的活性を測定するための良好な実験モデルであることは、該分野で信じられている。

上記式（２）のカチオン界面活性剤が、驚くほど著しく強い抗ウイルス活性を示すということが、本発明者らによってなされた調査の予期されなかった結果である。今まで、この群の化合物は、その抗菌作用について知られていたが、抗ウイルス作用は予期できなかった。

その抗ウイルス活性は、ワクシニア（Vaccinia）、単純ヘルペス（Herpes simplex）およびウシパラインフルエンザ（bovine parainfluenzae）ウイルス型のウイルスに対して観察することができた。特に強いのは、ヘルペスおよびウシパラインフルエンザウイルス型のウイルスに対する作用であった。このタイプでは、最大の効果を達成するために、５分という短い接触時間で充分であった。これは、このような短時間でウイルスに対する効果を達成できるという本発明の特に驚くべき側面とみなすことができる。

カチオン界面活性剤の抗ウイルス作用に対して最も感受性があると判明したウイルス型、例えばワクシニア、単純ヘルペスおよびウシパラインフルエンザウイルス型、並びにＡＩＤＳの原因物質であるアデノウイルスのようなウイルスの間には類似性がある。本発明者らによって研究されたカチオン界面活性剤は、ヒト免疫不全ウイルスＩ型に対しても有効であることが見出された。

本発明は、ウイルス汚染で冒されたあらゆる種類の製品の処置に、式（２）のカチオン界面活性剤を使用することに関する。そのような製品は、例えば、温かい皿または温かい液体であり得る。処置される製品は、ウイルスに感染した動物を扱う際に使用されるあらゆる種類の器具であり得る。より一層広い意味で、処置される製品は、動物が飼われる設備でも良く、又は地面若しくは貯水池のような自然環境の一部であっても良い。

本発明は、さらにウイルス疾患の予防または治療処置のために、動物またはヒトへの式（２）のカチオン界面活性剤の直接投与に関する。

式（２）のカチオン界面活性剤は、溶液として適用できる。これは、地面、車および人々を処置するために、容易で適した方法である。他の用途のために、カチオン活性剤を個体として適用することもより一層適していることがあり、これも同様に有効である。

あらゆる種類のウイルス感染を回避するための製品の処置では、処置される製品の約２〜２０，０００ｐｐｍの濃度、好ましくは１００〜１０，０００ｐｐｍ、より好ましくは２００〜２，０００ｐｐｍの濃度で、式（２）のカチオン界面活性剤（好ましい実施態様によれば特にＬＡＥ）が存在してもよい。これは、抗微生物作用を達成するために記載されているのと同様の濃度である。上記範囲濃度のカチオン界面活性剤で処理される製品は、例えば食品または化粧品である。

食品表面、化粧品表面、地面、あらゆる種類の乗物の表面、及びウイルスに感染した動物を扱う際に使用されるあらゆる器具の表面のようなウイルスに感染した表面の処置は、その表面で、要求される抗ウイルス作用を達成するために充分なレベルの濃度で式（２）のカチオン界面活性剤（好ましい実施態様によれば特にＬＡＥ）の存在が必要である。そのようなレベルの濃度は、２〜２０，０００ｐｐｍ、より好ましくは１００〜１０，０００ｐｐｍ、より一層好ましくは２００〜２，０００ｐｐｍの範囲で、特許請求の範囲のカチオン界面活性剤（好ましい実施態様によればＬＡＥ）を含有することが期待される。これら濃度は、処置される表面に適用されるカチオン界面活性剤を含有する溶液の濃度に関して与えられる。式（２）のカチオン界面活性剤の固体剤で表面が処置される場合、その適用量を、式（２）のカチオン界面活性剤量が０．０１〜１００ｍｇ／ｄｍ²の範囲、好ましくは０．５〜５０ｍｇ／ｄｍ²の量、より好ましくは１〜１０ｍｇ／ｄｍ²の量であるようにする。

飲用液のような液状品、又は池若しくは沼のような天然水源の処置は、飲用液または水中で、要求される抗ウイルス作用を達成するために充分なレベルの濃度で式（２）のカチオン界面活性剤（好ましい実施態様によれば特にＬＡＥ）の存在が必要である。そのようなレベルの濃度は、０．２〜２０，０００ｐｐｍ、より好ましくは２〜１５，０００ｐｐｍ、より一層好ましくは１００〜１０，０００ｐｐｍ、最も好ましくは２００〜２，０００ｐｐｍの範囲で、式（２）のカチオン界面活性剤（好ましい実施態様によればＬＡＥ）を含有することが期待される。これら濃度は、処置される液または水中のカチオン界面活性剤濃度に関して与えられる。

動物またはヒトの処置は、本発明で使用される化合物の吸収に適した様式でのカチオン界面活性剤の投与という意味を含む。該化合物は、経口的に、非経口的に（腹腔内注射、皮下注射および筋肉注射を含む）、または外用的に（点滴注入または経鼻（transnasal）による直腸又は経皮のような局所的に）投与することができる。投与剤は、通常の薬剤、例えばカプセル、マイクロカプセル、タブレット、腸溶性剤、顆粒、粉末、丸剤、軟膏、坐剤、懸濁液、シロップ、エマルション、液体、スプレー、吸入剤、点眼剤、及び点鼻剤の形態をとり得る。

上述の薬剤は、薬学的調剤に通常使用される様々な有機または無機キャリヤ、例えば賦形剤（例えばスクロース、デンプン、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、グルコース、セルロース、タルク、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム）、バインダー（例えばセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ポリプロピルピロリドン、ゼラチン、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、スクロース、デンプン）、崩壊剤（例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルデンプン、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、クエン酸カルシウム）、滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム、アエロシル（aerosyl）、タルク、ラウリル硫酸ナトリウム）、矯正剤（例えばクエン酸、メントール、グリシン、オレンジパウダー）、防腐剤（安息香酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メチルパラベン、プロピルパラベン）、安定剤（例えばクエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸）、沈殿防止剤（メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸アルミニウム）、分散剤（例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース）、希釈剤（例えば水）、ベースワックス（例えばカカオ脂、白色ワセリン、ポリエチレングリコール）、及び他の適当な物を使用する通常の方法によって製造できる。

本発明の使用によるカチオン界面活性剤の用量は、要求される予防または治療効果を達成するために必要な用量によって定められる。通常の用量は、経口または非経口投与に対して、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇである。ヒトへの通常の用量は、個人あたり０．１〜１０００ｍｇ、より好ましくは個人あたり０．５〜５００ｍｇの１回用量であり得る。この用量は、症状の激しさに応じて、１日あたり１〜４回投与できる。動物への通常の用量は１用量あたり０．１〜１００ｍｇ、好ましくは１用量あたり０．５〜５０ｍｇであり得る。

本発明の使用の効果は、下記実施例を通じて説明される。

下記実験では減少係数が計算されている。この減少係数は次式で計算される：

この式中、
Ｒ’は減少係数を表し、
ｖ’は試験化合物のサンプルの体積を表し、
ａ’は添加サンプル中のウイルス濃度であり（¹⁰ｌｏｇ値）、
ｖ”は最終サンプルの体積であり、
ａ”は処置後のウイルス濃度である（¹⁰ｌｏｇ値）。

下記実験ではクリアランス係数が計算されている。クリアランス係数は、次式で計算される：

この式中、
ＣＬは除去係数（クリアランス係数）であり、
ｑ’はウイルスの初期濃度であり（¹⁰ｌｏｇ値）、
ｑ”はウイルスの最終濃度である（¹⁰ｌｏｇ値）。

実施例１
ＬＡＥの活性を、ウシパラインフルエンザ３型ウイルスに対して調査した。

細胞培養培地
イーグル最小必須培地（ＥＭＥＭ）をEarleから得て（ICN Flow, Rf. 11-100-24）、
１０％のウシ血清（Biowhittaker, Ref. D14-810F）、
２ｎＭのグルタミン（Biowhittaker, Ref. 17-605E）、
非必須アミノ酸（Biowhittaker, Ref. 13-114E）、
１００ユニットのペニシリン、
１００μｇのストレプトマイシン／ｍＬ、及び
１ｍＭのピルビン酸ナトリウム
を補充した。

ＬＡＥ（CAS 60372-77-2）lot no. 10234、ＬＡＥ含有量８８．７％。

調査したウシパラインフルエンザ３型の系統はＳＦ−４であった（ATCC VR-281）。

実験条件：
ＬＡＥは２００ｐｐｍの濃度で調査した。
全ての実験は室温で行った。

８ｍＬの脱イオン水を１ｍＬのウイルス懸濁液と混合した。１ｍＬのＬＡＥ溶液（２０００ｐｐｍのＬＡＥを含有）を添加し、最終ＬＡＥ濃度を２００ｐｐｍとした。

５及び６０分後に、測定のためにサンプルを採取した。実験設計は、５及び６０分の接触時間後のＬＡＥ有効性の結論を考慮した。
結果を下記表３に示す。

６０分間のＬＡＥの処置後には、残留ウイルス有機体は検出されなかった。同様の結果が５分後にも達成された。

実験でのウイルス粒子数は、定量分析ＴＣＩＤ５０（培養組織の感染用量）によって測定した。

実施例２
ヘルペスウイルス１型に対するＬＡＥの活性
調査したウイルスは、ヘルペスウイルス科のアルファヘルペスウイルス亜科のシンプレックスウイルス型であった。
測定条件は、実施例１のものから同様に選択した。
ＬＡＥは、２００ｐｐｍの濃度で調査した。
結果を下記表４に示す。

６０分間のＬＡＥの処置後には、残留ウイルス有機体は検出されなかった。同様の結果が５分後にも達成された。

実施例３
ワクシニアウイルスに対するＬＡＥの活性
調査したウイルスは、ポックスウイルス科のオルソポックスウイルス型であった。
ポックスウイルス科は、ウイルスＤＮＡ（１７０〜２５０ｋｂｐの二重鎖）を含有する核を持つ複合構造のコンプレックスウイルスを包含する。
ＬＡＥは、２００ｐｐｍの濃度で調査した。
結果を下記表５に示す。

６０分間のＬＡＥの処置後には、生存ワクシニアウイルス有機体数の充分な削減が検出された。生存微生物数のかなりの減少が、５分間の処置後にも観察された。

Claims (12)

1. 下記式（２）の脂肪酸およびエステル化二塩基性アミノ酸の縮合物から誘導されるカチオン界面活性剤の、ウイルス感染を処置するための使用。
   

   

   
   〔式中、
   Ｘ^-は、Ｂｒ^-、Ｃｌ^-若しくはＨＳＯ₄ ^-、有機酸若しくは無機酸から誘導される対イオン、又はフェノール系化合物に基づくアニオンであり、
   Ｒ₁は、アミド結合を介してα−アミノ基と結合している８〜１４個の炭素原子の飽和脂肪酸またはヒドロキシ酸からの直鎖状アルキル鎖であり、
   Ｒ₂は、１〜１８個の炭素原子の直鎖状または分岐鎖状アルキル鎖、又は芳香族基であり、
   Ｒ³は、以下のいずれかの基であり、
   

   

   ｎは、０〜４であり得る。〕
2. 動物又はヒトのウイルス感染を処置するための薬剤を製造するための、請求項１に記載の使用。
3. カチオン界面活性剤が、経口的に、非経口的に（腹腔内注射、皮下注射および筋肉注射を含む）、または外用的に（点滴注入または経鼻による直腸または経皮のような局所的に）投与される請求項２に記載の使用。
4. 式（２）の界面活性剤が、アルギニン一塩酸塩・ラウリルアミド・エチルエステル（ＬＡＥ）である請求項３に記載の使用。
5. インフルエンザウイルスによって引き起こされた疾患を処置するための請求項２〜４のいずれかに記載の使用。
6. インフルエンザウイルスが、トリインフルエンザ由来のウイルスである請求項５に記載の使用。
7. 動物またはヒトに対して予防適用するための請求項２〜６のいずれかに記載の使用。
8. 食品表面、化粧品表面、地面、あらゆる種類の乗物の表面、ウイルスに感染した動物を扱う際に使用されるあらゆる器具の表面のような、ウイルスに感染した表面を処置するための請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
9. 飲用液のような液状品または天然の水源を処置するための請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
10. 食品を処置するための請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
11. 化粧品を処置するための請求項１〜４のいずれかに記載の使用。
12. ウイルスが、ワクシニア、単純ヘルペスおよびウシパラインフルエンザウイルス型のウイルスである請求項１〜１１のいずれかに記載の使用。