JP2009542626A - メチルトランスフェラーゼ(hmtase)の部位特異的阻害剤及びその製剤方法 - Google Patents
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Abstract
【選択図】なし
Description
本発明は、ヒストンメチルトランスフェラーゼの部位特異的阻害剤としての化合物及びその製剤方法に関する。
セファデックスLH20カラムは、水:メタノール(8:2)系により予め平衡化された。粗生成物(3グラム)がカラムに加えられた。カラムはメタノールの量を増やすことにより溶出された。異なる留分が収集され、TLC上にスポットされた。同様の留分は結合された。5つの異なる留分が収集され、留分A,B,C,D,Eと名付けられた。留分Aは、ヒストンメチルトランスフェラーゼCARM1に対する阻害活性を有する分子として特徴づけられた。
(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)分子の阻害活性が、標準HATアッセイ及びHMTaseアッセイに従い、基質としてのHeLaコアヒストンを用いて、ヒストンアセチルトランスフェラーゼp300及びPCAF、リジンメチルトランスフェラーゼG9a、アルギニンメチルトランスフェラーゼCARM1について検査された。(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)は、フィルタ結合(図1a)及びX線蛍光撮影(図1b)の双方により、20μMのIC50でアルギニンメチルトランスフェラーゼCARM1に対して効能を有することが確認された。
誘電体LTK51及びLTK54の阻害活性が、標準HMTaseアッセイに従って、基質としてのHeLaコアヒストンを用いて、リジンメチルトランスファーゼG9a及びアルギニンメチルトランスファーゼCARM1についてアッセイされた。R1‐OH及びR2‐OAcグループを含む誘導体は活性でないことがわかり、R1‐OCH及びR2‐OHグループは阻害活性に極めて重要であることが示された。
阻害パターンの動態解析
阻害剤は、ヒストンH3を対象とするヒストンのCARM1媒介メチル化に効能を有するため、ヒストンH3は動態解析の基質として用いられた。初めに、阻害剤は、基質として組み換え型ヒストンを用いて確認された。CARM1メチル化反応は、ヒストンH3及びメチルグループドナーの濃度の増加を用いて実行され、トリチウム化したSAMがエンザイムの濃度を一定に保った。2つの異なる阻害剤濃度がアッセイされた。動態解析は、(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)媒介CARM1メチル化阻害が非競合的であることを明らかにした。
阻害パターンが非競合的であることは、阻害モードがエンザイム‐基質複合体を介することを示し、阻害剤の結合は、基質(ヒストンH3)又はエンザイム(CARM1)のいずれかが細胞に取り込まれて阻害剤(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)に対して滴定される、等温線熱量滴定によって特徴づけられている。データは、分子のエンザイムへの結合はなく、分子は2つの連続する結合部位において基質に結合することを明確に示している(図2)。
インビトロCARM1メチル化反応は、阻害剤の存在下又は不存在下で実行され、ヒストンH13,R17及びR26の特定CARM1メチル化部位に対する抗体によって調査された。H3R17の部位特異的阻害が観察され、(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)が新たな部位特異的阻害剤であることを示した(図3a)。
インビボ特性解析は、HeLa細胞を50μM濃度の分子で24時間処理することによって実行され、酸抽出ヒストンは、ヒストンH3,R17及びR26のCARM1メチル化部位に対する抗体を用いて調査された。H3R17の部位特異的阻害が観察され、(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)は、インビボ環境においても新たな部位特異的阻害剤であることを示した(図3b)。
インビボ特性解析は、HeLa細胞を、50μM濃度の分子で24時間処理することによって実行され、細胞は、ヒストンH3,R17及びR26のCARM1メチル化部位に対する抗体を用いて調査され、抗ウサギ488蛍光標識抗体により視覚化された。H3R17の部位特異的阻害が観察され、(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)は、インビボ環境においても新たな部位特異的阻害剤であることを示した(図3c及び3d)。
ウエスタン分析によるU2OS細胞におけるp53及びp21タンパク質レベルの調整
CARM1媒介ヒストンメチル化は、p53反応遺伝子の転写活性を共同して増進することが知られているため、阻害剤の生理的効果はp53系の選択により特徴づけられる。(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)の抗酸化特性により、発光酵素レポーターアッセイは機能しなかった。p53陽性細胞系であるU2OSがアッセイに使用され、50μM濃度の分子による24時間の処理において、p53レベルは変化した。したがって、p53反応遺伝子はアッセイされなければならないので、P21が選択された(アポトーシスはないので、アポトーシス遺伝子は選択されなかった)。UV照射細胞は(2,3,7,8‐テトラヒドロキシ[1] ベンゾピラノ (5,4,3(de)[1]ベンゾピラン5,10‐ジオン)により24時間処理され、溶解物がp21に対する抗体を用いて調べられた。処理されるp21レベルに増加がある(図4)。これはこの分子が腫瘍抑制遺伝子p53媒介転写活性に関与する可能性を明らかに示している。
Claims (19)
- ヒストンメチルトランスフェラーゼの部位特異的阻害剤としての下記の構造式Iの化合物であって、R1及びR1が‐OCH又は‐OH、R2及びR2が‐OH又は‐OAcである化合物。
- 前記化合物はザクロから単離される、請求項1に記載の化合物。
- 前記ヒストンメチルトランスフェラーゼはアルギニンメチルトランスフェラーゼ、好ましくはCARM1である、請求項1に記載の化合物。
- R1及びR1が‐OCH、R2及びR2が‐OHである下記の構造式Iaの化合物を単離する方法であって、
(a)乾燥及び粉砕の手法でザクロの皮を得る工程と、
(b)粉砕された前記皮を攪拌した後、沈殿物をろ過して半固体状の抽出物としてのろ液を収集する工程と、
(c)カラムに前記半固体状の抽出物を入れて、粗生成物を適切な溶媒系により溶出する工程と、
(d)粗生成物を精製して、前記構造式Iaの化合物を含む留分を得る工程と、
を有する方法。
- 前記溶媒系はメタノール:水系である、請求項4に記載の方法。
- R1及びR1が‐OCH、R2及びR2が‐OAcである下記の構造式Ibの化合物を製剤する方法であって、
(a)前記構造式Iaの化合物、無水酢酸及び硫酸を含む反応混合物を攪拌する工程と、
(b)前記反応混合物の温度を上昇させて反応質量が得られるまで攪拌を続ける工程と、
(c)前記反応質量をろ過し、沈殿物を洗浄して残留物を得る工程と、
(d)前記残留物を乾燥及び加水分解して前記構造式Ibの化合物を含む沈殿物を得る工程と、
を有する方法。
- 前記温度はおよそ摂氏100度から徐々に上昇させられる、請求項6記載の方法。
- 前記沈殿物は洗浄されて未反応無水酢酸が除去される、請求項6記載の方法。
- 前記沈殿物は有機溶媒、好ましくはアセトンにより洗浄される、請求項6記載の方法。
- 前記残留物はピリジン水により加水分解される、請求項6記載の方法。
- R1及びR1が‐OH、R2及びR2が‐OHである下記の構造式Icの化合物を製剤する方法であって、
(a)前記構造式Iaの化合物及び水酸化カリウムのメタノール溶液の反応混合物を還流させる工程と、
(b)前記還流反応混合物を冷却して反応質量を得て、有機生成物を得るために酸性化させる工程と、
(c)ジクロロメタンにより前記有機生成物を抽出して前記構造式Icの化合物を得る工程と、
を有する方法。
- 癌及び/又は疾患の状態を管理する薬剤の製造のための、構造式Iの化合物のそれを必要とする対象における使用。
- 前記化合物はヒストンメチルトランスフェラーゼの阻害剤である、請求項12に記載の使用。
- 前記ヒストンメチルトランスフェラーゼはアルギニンメチルトランスフェラーゼ、好ましくはCARM1である、請求項13に記載の使用。
- 前記化合物の阻害作用の性質は非競合的である、請求項12に記載の使用。
- 前記化合物は生来、抗増殖性かつ抗血管新生のものである、請求項12に記載の使用。
- 前記化合物は、p53応答性遺伝子の転写活性を調整する、請求項12に記載の使用。
- 前記対象は人間を含む動物である、請求項12に記載の使用。
- 添付の実施例及び図面を参照して実質的にここに記載される、構造式Iの化合物、構造式Iaの化合物を単離する方法、構造式Ib及びIcの化合物を製剤する方法。
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Citations (2)
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS63130589A (ja) * | 1986-11-04 | 1988-06-02 | ツィマ ソシエテ アノニム | 二環式化合物 |
US5066671A (en) * | 1990-07-16 | 1991-11-19 | American Home Products Corporation | Ellagic acid derivatives as phospholipase A2 inhibitors |
Non-Patent Citations (5)
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JPN6011064660; Journal of Agricultural and Food Chemistry Vol.53, 2005, p.7715-7720 * |
JPN6011064661; Separation and Purification Technology Vol.41, 2004, p.49-55 * |
JPN6011064662; Bioscience, Biotechnology and Biochemistry Vol.56, No.5, 1992, p.766-768 * |
JPN6011064662; Bioscience, Biotechnology and Biochemistry Vol.56,No.5, 1992, p.766-768 * |
JPN6012029181; Cancer Letters Vol.136,No.2, 1999, p.215-221 * |
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