JP2008517625A

JP2008517625A - 分泌されたタンパク質をコードする遺伝子の破壊、それに関連する組成物および方法

Info

Publication number: JP2008517625A
Application number: JP2007538976A
Authority: JP
Inventors: アリソンアンバイヤーズ−ホーナー，; キャサリンコームズ，; フレデリックデソバージュ，; チーヨンディン，; ドロシーフレンチ，; リノゴンザレス，; エリンマリーマッシー，; ローリージャネットミンゼ，; チャールズエー．モンゴメリー，; アシャプレター，; カロライナレンジェル，; チェン−チェンシャイ，; メアリージーンスパークス，; ジョイスタラ，; ピーターボーゲル，; トレイシーエレンウィリス−セボークス，; ウェイランイェ，
Original assignee: Genentech Inc
Current assignee: Genentech Inc
Priority date: 2004-10-29
Filing date: 2005-10-18
Publication date: 2008-05-29
Also published as: WO2006049854A2; US20090196876A1; CA2584297A1; ZA200806860B; EP1817335A2; ZA200806861B; US7947866B2; ZA200806864B; US20120210450A1; ZA200806863B; ZA200806862B; WO2006049854A3; ZA200704338B; AU2005301152A1; ZA200806866B

Abstract

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６またはＰＲＯ２３３７０の遺伝子において破壊を含むトランスジェニックマウスを提供する。

Description

（発明の分野）
本発明は、トランスジェニックおよびノックアウト動物を含めた組成物、ならびに病気または障害の診断および治療のためのそのような組成物の使用方法に関する。

（発明の背景）
細胞外タンパク質は、とりわけ、多細胞生物の形成、分化および維持において重要な役割を演じる。多くの個々の細胞の運命、例えば、増殖、移動、分化、または他の細胞との相互作用は、典型的には、他の細胞および／または直接的な環境から受けた情報によって支配される。この情報は、しばしば、分泌されたポリペプチド（例えば、分裂因子、生存因子、細胞傷害性因子、分化因子、神経ペプチド、およびホルモン）によって伝達され、該分泌されたポリペプチドは、今度は、多様な細胞受容体または膜−結合タンパク質によって受け取られ、解釈される。これらの分泌されたポリペプチドまたはシグナリング分子は、通常、細胞分泌経路を通って、細胞外環境においてそれらの作用部位に到達する。

分泌されたタンパク質は、医薬、診断剤、バイオセンサーおよびバイオリアクターを含めた種々の産業的適用を有する。血栓溶解剤、インターフェロン、インターロイキン、エリスロポエチン、コロニー刺激因子、および種々の他のサイトカインなどの現在入手可能な多くのタンパク質薬物は分泌タンパク質である。膜タンパク質であるそれらの受容体もまた、治療剤または診断剤としての潜在的能力を有する。新しい天然分泌タンパク質を同定するために産業界および大学双方によって努力が成されている。多くの努力は、哺乳動物組換えＤＮＡライブラリーをスクリーニングして、新規な分泌タンパク質についてのコーディング配列を同定することに焦点を合わしている。スクリーニング方法および技術の例は、文献に記載されている［例えば、非特許文献１；特許文献１参照］。

膜−結合タンパク質および受容体は、とりわけ、多細胞生物の形成、分化および維持において重要な役割を果たし得る。多くの個々の細胞の運命、例えば、増殖、移動、分化、または他の細胞との相互作用は、典型的には、他の細胞および／または直接的環境から受け取る情報によって支配されている。この情報は、しばしば、分泌されたポリペプチド（例えば、分裂因子、生存因子、細胞傷害性因子、分化因子、神経ペプチド、およびホルモン）によって伝達され、該分泌されたポリペプチドは、今度は、多様な細胞受容体または膜−結合タンパク質によって受け取られ、解釈される。そのような膜−結合タンパク質および細胞受容体は、限定されるものではないが、サイトカイン受容体、受容体キナーゼ、受容体ホスファターゼ、細胞−細胞相互作用に関与する受容体、ならびにセレクチンおよびインテグリンのような細胞接着分子を含む。例えば、細胞の成長および分化を調節するシグナルの変換は、部分的には、種々の細胞タンパク質のリン酸化によって調節される。タンパク質チロシンキナーゼ、そのプロセスを触媒する酵素もまた、成長因子受容体として作用することもできる。その例は、線維芽細胞成長因子受容体および神経成長因子受容体を含む。

膜−結合タンパク質および受容体分子は、医薬および診断剤としてを含めた、種々の産業的適用を有する。受容体免疫−接着は、例えば、受容体−リガンド相互作用をブロックするための治療剤として使用することができる。膜−結合タンパク質は、潜在的ペプチド、または関連受容体／リガンド相互作用の小分子阻害剤のスクリーニングで使用することもできる。

新しい天然受容体または膜−結合タンパク質を同定するために、産業界および大学双方によって努力が成されている。多くの努力は、新規な受容体または膜−結合タンパク質についてのコーディング配列を同定するための哺乳動物組換えＤＮＡライブラリーのスクリーニングに焦点を当てている。

生物学的および病気のプロセスにおける分泌された膜−結合タンパク質の重要性を仮定すれば、イン・ビボ研究および特徴付けは、病気または機能不全の予防、軽減または修正で有用な治療剤および／または治療の価値ある同定および発見を提供することができる。この点に関して、遺伝子工学により作成されたマウスは、免疫学、癌、神経−生物学、心血管生物学、肥満および他の多くのものを含めた、ヒト病気に関連する生物学的プロセスの機能的解明のための非常に価値あるツールであることが判明している。遺伝子ノックアウトは、イン・ビボにて高度に特異的なアンタゴニストの活性を予言することによって、薬物作用の生物学的メカニズムをモデル化することとして考えることができる。ノックアウトマウスは、薬物の活性をモデル化することが示されており；特異的医薬標的タンパク質が欠乏したマウスの表現型は、対応するアンタゴニスト薬物によって引き起こされたヒト臨床表現型に似せることができる。遺伝子ノックアウトは、標的の作業メカニズム、標的の支配的な生理学的役割、および哺乳動物における標的の阻害に由来し得るメカニズム−ベースの副作用の発見を可能とする。このタイプの例は、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）［非特許文献２］およびシクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ１）遺伝子［非特許文献３］が欠乏したマウスを含む。対照的に、該マウスにおいて遺伝子をノックアウトすることは、対応する標的へのアゴニスト薬物の投与後にヒトで観察されるものとは反対の表現型効果を有し得る。その例は、突然変異の結果赤血球細胞の生産が欠乏するエリスロポエチンノックアウト［非特許文献４］、および突然変異体マウスが過剰活性および過剰応答性を示すＧＡＢＡ（Ａ）−Ｒ−β３ノックアウト［非特許文献５］を含む。これらの表現型は、共に、ヒトにおけるエリスロポエチンおよびベンゾジアゼピン投与の効果と反対である。マウス遺伝学を用いて有効化された標的の顕著な例はＡＣＣ２遺伝子である。ヒトＡＣＣ２遺伝子は数年前に同定されているが、薬物開発のための標的としてのＡＣＣ２における興味は、ノックアウトマウスを用いるＡＣＣ２機能の分析後、最近刺激されたに過ぎない。ＡＣＣ２突然変異体マウスはそれらの野生型同腹子よりも多く食べるが、それらの脂肪細胞においてより多くの脂肪を燃焼し、より少ない脂肪を貯蔵し、この酵素を、肥満の治療における化学的拮抗作用に対する潜在的標的とする［非特許文献６］。
米国特許第５，５３６，６３７号明細書Ｋｌｅｉｎら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１９９６年，第９３巻，ｐ．７１０８−７１１３Ｅｓｔｈｅｒ，Ｃ，Ｒ，ら，Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１９９６年，第７４巻，ｐ．９５３−９６５Ｌａｎｇｅｎｂａｃｈ，Ｒ．ら，Ｃｅｌｌ，１９９５年，第８３巻，ｐ．４８３−４９２Ｗｕ，Ｃ．Ｓ．ら，Ｃｅｌｌ，１９９６年，第８３巻，ｐ．５９−６７ＤｅＬｏｒｅｙ，Ｔ．Ｍ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１９９８年，第１８巻，ｐ．８５０５−８５１４Ａｂｕ−Ｅｌｈｅｉｇａ，Ｌ．ら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００１年，第２９１巻，ｐ．２６１３−２６１６

本出願においては、突然変異した遺伝子の破壊の結果、ＣＮＳ／神経学的乱れ、または不安などの障害；眼の異常および関連する病気；心血管、内皮、またはアテローム性動脈硬化症を含めた血管新生疾患；上昇した血清トリグリセリドおよびコレステロールレベルに関連する糖尿病および異脂肪血症を含めた異常な代謝障害；免疫学おおよび炎症障害；腫瘍学的障害；関節炎、骨粗鬆症および大理石骨病などの骨代謝異常または障害；または胚性致死などの発生病を含めた種々の病気状態または機能不全に関連する表現型観察をもたらした。

（発明の要旨）
Ａ．実施形態
本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸分子を提供する。

１つの態様において、単離された核酸分子は、（ａ）本明細書中に開示された全長アミノ酸配列、本明細書中に開示されたシグナルペプチドを欠くアミノ酸配列、本明細書中に開示された、シグナルペプチドを含むまたは含まない膜貫通タンパク質の細胞外ドメイン、または本明細書中に開示された全長アミノ酸配列のいずれかの他の具体的に定義された断片を有するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡ分子、または（ｂ）（ａ）のＤＮＡ分子の相補体に対して、少なくとも約８０％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８１％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８２％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８３％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８４％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８５％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８６％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８７％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８８％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８９％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９０％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９１％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９２％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９３％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９４％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９５％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９６％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９７％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９８％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９９％核酸配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む。

他の態様において、単離された核酸分子は、（ａ）本明細書中に開示された全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドｃＤＮＡのコーディング配列、本明細書中に開示されたシグナルペプチドを欠くＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのコーディング配列、本明細書中に開示された、シグナルペプチドを含むまたは含まない膜貫通ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの細胞外ドメインのコーディング配列、あるいは本明細書中に開示された全長アミノ酸配列のいずれかの他の具体的に定義された断片のコーディング配列を含むＤＮＡ分子、または（ｂ）（ａ）のＤＮＡ分子の相補体に対して、少なくとも約８０％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８１％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８２％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８３％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８４％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８５％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８６％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８７％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８８％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８９％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９０％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９１％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９２％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９３％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９４％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９５％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９６％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９７％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９８％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９９％核酸配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む。

さらなる態様において、本発明は、（ａ）本明細書中に開示された、ＡＴＣＣに寄託されたヒトタンパク質ｃＤＮＡのいずれかによってコードされる同一成熟ポリペプチドをコードするＤＮＡ分子、または（ｂ）（ａ）のＤＮＡ分子の相補体に対して、少なくとも約８０％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８１％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８２％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８３％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８４％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８５％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８６％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８７％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８８％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約８９％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９０％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９１％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９２％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９３％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９４％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９５％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９６％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９７％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９８％核酸配列同一性、あるいは少なくとも約９９％核酸配列同一性を有するヌクレオチドを含む単離された核酸分子に関する。

本発明の別の態様は、膜貫通ドメイン−欠失した、または膜貫通ドメイン−不活化された、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸分子を提供し、あるいはそのようなコーディングヌクレオチド配列に対して相補的であり、そのようなポリペプチドの膜貫通ドメインは本明細書中に開示される。従って、本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの可溶性細胞外ドメインが考えられる。

また、本発明は、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体のための結合部位を含むポリペプチドを所望によりコードできる、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの断片をコードするための、例えば、ハイブリダイゼーションプローブとしてのあるいはアンチセンスオリゴヌクレオチドプローブとしての用途を見出すことができる、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドコーディング配列の断片、またはその相補体も提供する。そのような核酸断片は、通常、長さが少なくとも約１０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１５ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約２０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約３０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約４０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約５０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約６０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約７０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約８０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約９０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１１０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１２０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１３０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１４０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１５０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１６０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１７０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１８０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１９０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約２００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約２５０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約３００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約３５０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約４００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約４５０ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約５００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約６００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約７００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約８００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約９００ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約１０００ヌクレオチドであり、この文脈において、用語「約」は、その参照された長さのプラスまたはマイナス１０％の参照されたヌクレオチド配列長さを意味する。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の新規な断片は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を、多数のよく知られた配列整列プログラムのいずれかを用いて他の公知のヌクレオチド配列と整列させ、いずれのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列断片が新規であるかを決定することによってルーチン的に決定することができることに注意されたし。そのようなＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の全てが本明細書中で考えられる。また、これらのヌクレオチド分子断片によってコードされるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド断片、好ましくは、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体のための結合部位を含むＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド断片も考えられる。

本発明は、同定された前記の単離された核酸配列のいずれかによってコードされた、単離されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを提供する。

ある態様において、本発明は、本明細書中に開示された全長アミノ酸配列を有するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対して、少なくとも約８０％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８１％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８２％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８３％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８４％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８５％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８６％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８７％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８８％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８９％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９０％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９１％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９２％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９３％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９４％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９５％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９６％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９７％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９８％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９９％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列、本明細書中に開示されたシグナルペプチドを欠くアミノ酸配列、本明細書中に開示されたシグナルペプチドを含むまたは含まない、膜貫通タンパク質の細胞外ドメイン、または本明細書中に開示された全長アミノ酸配列のいずれかの他の具体的に定義された断片を含む、単離されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに関する。

さらなる態様において、本発明は、本明細書中に開示された、ＡＴＣＣに寄託されたヒトタンパク質ｃＤＮＡのいずれかによってコードされたアミノ酸配列に対して、少なくとも約８０％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８１％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８２％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８３％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８４％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８５％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８６％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８７％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８８％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８９％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９０％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９１％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９２％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９３％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９４％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９５％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９６％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９７％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９８％アミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約９９％アミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む単離されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに関する。

１つの態様において、本発明は、長さが少なくとも約１０アミノ酸である、あるいは長さが少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００アミノ酸、またはそれ以上であるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリペプチドに関する。所望により、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリペプチドは、天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列と比較して、１以下の保存的アミノ酸置換を有するであろうし、または有し、あるいは天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列と比較して、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０以下の保存的アミノ酸置換を有するであろうし、または有する。

特定の態様において、本発明は、Ｎ−末端シグナル配列および／または開始メチオニンを含まない単離されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを提供し、それは、前記されたそのようなアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列によってコードされる。それを生産するための方法も本明細書中で記載され、該方法は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現に適した条件下で適当なコーディング核酸分子を含むベクターを含む宿主細胞を培養し、該細胞培養からＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを回収することを含む。

本発明の別の態様は、膜貫通ドメイン−欠失または膜貫通ドメイン−不活化された単離されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを提供する。それを生産する方法も本明細書中に記載され、該方法は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現に適した条件下で適当なコーディング核酸分子を含むベクターを含む宿主細胞を培養し、該細胞培養からＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを回収することを含む。

本発明は、本明細書中で定義された天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストおよびアンタゴニストを提供する。特に、該アゴニストまたはアンタゴニストは抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体または小分子である。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを、候補化合物と接触させ、該ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドによって媒介される生物学的活性をモニターすることを含む、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対するアゴニストまたはアンタゴニストを同定する方法を提供する。好ましくは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドである。

本発明は、担体と組合せた、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、または本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストもしくはアンタゴニスト、または抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体を含む組成物を提供する。所望により、該担体は医薬上許容される担体である。

本発明は、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体に対して応答性である疾患の治療で有用な医薬の調製のためのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、または前記したそのアゴニストまたはアンタゴニスト、または抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体の使用を提供する。

本発明は、本明細書中に記載されたポリペプチドのいずれかをコードするＤＮＡを含むベクターを提供する。いずれかのそのようなベクターを含む宿主細胞も提供される。その例として、宿主細胞はＣＨＯ細胞、Ｅ．ｃｏｌｉ、または酵母であり得る。本明細書中に記載されたポリペプチドのいずれかを生産する方法がさらに提供され、該方法は、所望のポリペプチドの発現に適した条件下で宿主細胞を培養し、該細胞培養から所望のポリペプチドを回収することを含む。

本発明は、異種ポリペプチドまたはアミノ酸配列に融合された本明細書中に記載されたポリペプチドのいずれかを含むキメラ分子を提供する。そのようなキメラ分子の例は、エピトープタグ配列、または免疫グロブリンのＦｃ領域に融合した本明細書中に記載されたポリペプチドのいずれかを含む。

本発明は、前記したまたは後に記載するポリペプチドのいずれかに、好ましくは特異的に結合する抗体を提供する。所望により、該抗体は、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、抗体断片または単一鎖抗体である。

本発明は、ゲノムおよびｃＤＮＡヌクレオチド配列を単離し、会合した遺伝子の発現を測定または検出するのに、あるいはアンチセンスプローブとして有用であり得るオリゴヌクレオチドプローブを提供し、プローブは前記した、または後に記載するヌクレオチド配列のいずれかに由来し得る。好ましいプローブの長さは先に記載している。

また、本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を同定する方法も提供し、該方法は：
（ａ）そのゲノムがＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を包含する非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定すること；次いで、
（ｃ）測定された生理学的特徴を、性別の一致した野生型動物のそれと比較することを含み、野生型動物の生理学的特徴とは異なる非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を、非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に由来する表現型として同定する。１つの態様において、非ヒトトランスジェニック動物は哺乳動物である。別の態様において、哺乳動物はげっ歯類である。なお別の態様において、哺乳動物はラットまたはマウスである。１つの態様において、非ヒトトランスジェニック動物は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊についてヘテロ接合性である。別の態様において、性別の一致した野生型同腹子と比較して非ヒトトランスジェニック動物によって呈される表現型は以下：神経学的障害；心血管、内皮、または血管新生疾患；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常のうちの少なくとも１つである。

なお別の態様において、神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である。なお別の態様において、神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である。なお別の態様において、神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである。なお別の態様において、神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である。なお別の態様において、神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である。なお別の態様において、神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。そのような神経学的障害は「不安障害」と定義されるカテゴリーを含み、限定されるものではないが：軽度ないし中程度の不安、身体疾患による不安障害、特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖を伴うパニック障害、広場恐怖を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、強迫性障害、広場恐怖症、単極性障害、双極性障害ＩまたはＩＩ型、特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、大鬱病性障害、気分障害、物質誘発性気分障害、認知機能の亢進、限定されるものではないがアルツハイマー病、卒中発作、または脳外傷に伴う認知機能の喪失、てんかん、学習障害／疾患、脳性麻痺に限定されるものではないがそれらを含めた疾患または損傷に由来する発作を含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下の型：妄想症、反社会型、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、統合失調質、および統合失調症性を含めた人格障害に当てはめることができる。

別の態様において、眼の異常は網膜異常である。さらに別の態様において、眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する。なお別の態様において、網膜異常は色素性網膜炎に合致し、網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる。

さらに別の態様において、網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する。

なお別の態様において、眼の異常は白内障である。さらになお別の態様において、該白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患である。

さらに別の態様において、発生異常は胚死または生存率低下を含む。

さらになお別の態様において、心血管、内皮または血管新生疾患は糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である。

さらに別の態様において、該免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患と合致する。

さらに別の態様では、骨代謝異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、骨減少症または大理石骨病である。

別の態様では、非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子で比較して以下の生理学的特徴の内の少なくとも１つを示す。開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；増大した平均血清グルコース濃度；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度が増大したこと；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪の平均パーセント増大；平均体脂肪増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体脂肪（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常性；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死。

本発明は、そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物から誘導される単離細胞も提供する。１つの態様では、単離細胞は、マウス細胞である。さらに別の態様では、マウス細胞は、胚性幹細胞である。さらに別の態様では、単離細胞は、性別一致野生型同腹子と比較した場合、以下の表現型の内の少なくとも１つを示す非ヒトトランスジェニック動物から誘導される：神経学的障害；心血管、内皮または血管形成障害；眼の異常性；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常。本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型を調節する剤を同定する方法も提供し、そして該方法は、
（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること、
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定すること、
（ｃ）野生型動物の生理学的特徴と異なる非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴が、非ヒトトランスジェニック動物での遺伝子破壊から生じる表現型として同定される、（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別の一致した野生型動物のものと比較すること、
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に、試験剤を投与すること、および
（ｅ）試験剤が、非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に関連した同定された表現型を調節するかどうかを決定すること
を包含する。

１つの態様では、遺伝子破壊に関連した表現型は、神経学的障害；心血管、内皮または血管形成障害；眼の異常性；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を包含する。

さらに別の実施態様では、神経学的障害は、開放野外活動試験の間に、不安様応答が増大したことである。さらに別の態様では、神経学的障害は、開放野外活動試験の間に、不安様応答が減少したことである。さらに別の態様では、神経学的障害は、ホームーケージ活動試験の間の異常な概日リズムである。さらに別の態様では、神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間の運動協調増大である。さらに別の態様では、神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間の運動協調損傷である。さらに別の態様では、神経学的障害は、鬱病、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。このような神経障害としては、それに限定されないが、軽度から中等度の不安、身体疾患による不安障害、特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖を伴うパニック障害、広場恐怖を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘発性不安障害、急性アルコール離脱症候群、強迫性障害、広場恐怖症、単極性障害、双極性障害ＩまたはＩＩ型、特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、大鬱病性障害、気分障害、物質誘発性気分障害、認知機能の亢進，；それに限定されないがアルツハイマー病、卒中発作、または脳外傷に関連した認知機能の喪失；てんかん、学習障害／疾患、脳性麻痺に限定されないが、それらを含めた疾患または損傷から生じる発作を含めた「不安障害」として定義されたカテゴリーを含む。さらに、不安障害は、それに限定されないが以下の型を含む人格障害に当てはまる：妄想性、反社会型、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、統合失調質、および統合失調症性。

さらに別の態様では、眼の異常は、網膜異常である。さらに別の態様では、眼の異常は、視覚障害または失明と合致している。さらに別の態様では、網膜異常は、色素性網膜炎と合致しているか、または網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる。

さらに別の態様では、網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶反応、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜およびその他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離症、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニアーロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端骨異形成症、フリンーエアード症候群、フリーデリッヒ失調症、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエールーマリー・ダンスドローム（Ｐｉｅｒｒｅ−Ｍａｒｉｅｄｕｎｓｄｒｏｍｅ，）、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラム症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無βリポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿、またはマンノシドーシスを含めた種々の網膜症に合致している。

さらに別の態様では、眼の異常は、白内障である。さらに別の態様では、白内障は、ヒトダウン症候群、ハレルマンーストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下症、またはコンラディ症候群などの全身性疾患である。

さらに別の態様では、発生異常は、胚死または生存率低下を包含する。

さらに別の態様では、心血管、内皮、または血管新生疾患は、糖尿病などの動脈疾患；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポジ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕；虚血再潅流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である。

さらに別の態様では、免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本病、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギヤン・バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシーなどの中枢または末梢神経系の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水疱性皮膚疾患、多形紅斑および接触性皮膚炎を含めた自己免疫性または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的疾患；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患に合致している。

別の態様では、非ヒトトランスジェニック動物は、性別一致した野生型同腹子と比較して、以下の生理学的特徴の内の少なくとも１つを示す：開放野外試験の間の不安様応答増大；開放野外試験の間の不安様応答減少；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調の損傷；尾部靭帯試験の間の欝様応答増大；尾部靭帯試験の間の鬱様応答減少；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；心拍減少；インシュリン感受性が増大したこと；増大した平均血清グルコース濃度；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率減少；好塩基性細胞の減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数の増大；大球性貧血；赤血球細胞数の減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪の平均パーセント増大；平均体脂肪増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体脂肪（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常性；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死。

本発明は、遺伝子破壊に関連した表現型を調節する剤も提供する。１つの態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、該アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。さらに別の態様では、該アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。

本発明は、（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供し；（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物によって呈される生理学的特徴を測定し；（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性が一致した野生型動物のそれと比較し、ここに、野生型動物によって呈された生理学的特徴と異なる非ヒトトランスジェニック動物によって呈される生理学的特徴が遺伝子破壊に関連する生理学的特徴として同定され；（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与し；次いで、（ｅ）遺伝子破壊に関連する生理学的特徴が変調されたか否かを判断することを特徴とする、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴を変調する剤を同定する方法を提供する。

１つの態様では、非ヒトトランスジェニック動物が、性が一致した野生型同腹子と比較して、以下の生理学的特徴：開放場テストの間における増大した不安様応答；開放場活動テストにおける減少した不安様応答；開放場テストの間における過剰活動；開放場テストの間における活動低下；開放−場テストの間における増大した探究活動；開放−場テストの間における減少した探究活動；減少した歩行カウントを含めたホーム−ケージ活動テストの間における異常な概日リズム；増大した歩行カウントを含めたホーム−ケージ活動テストの間における異常な概日リズム；新しい環境に対する増大した馴化応答；ストレス誘導高体温に対する増大した抵抗性；逆転スクリーニングテストの間における損なわれた運動協調；尾懸濁液テストの間における増大した鬱病−様応答；尾懸濁液テストの間における減少した鬱病−様応答；プレパルス阻害テストの間における減少した驚愕応答；プレパルス阻害テストの間における増強された感覚運動ゲーティング／注意；ホットプレートテストにおける応答に対する低下した潜伏期間；眼窩の異常；網膜色素喪失；白内障；減少した心拍；増大したインスリン感受性；増大した平均絶食血清グルコースレベル；減少した平均血清グルコースレベル；増大した平均血清コレステロールレベル；増大した平均血清トリグリセリドレベル；減少した平均血清トリグリセリドレベル；増強されたグルコース耐性；損なわれたグルコース耐性；減少した平均血清インスリンレベル；増大した尿酸レベル；減少した尿酸レベル；減少した血清ホスフェートレベル；増大した血清ホスフェートレベル；増大したビリルリンレベル；増大した亜硝酸炎尿症；減少した平均血清アルブミン；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の減少した平均パーセンテージ；ＣＤ４細胞の増大した平均パーセンテージ；ＣＤ４細胞の減少した平均パーセンテージ；ＣＤ８＋細胞の減少した平均パーセンテージ；減少した好塩基球；減少したリンパ球；増大した平均絶対単球カウント；巨大細胞貧血；減少した赤血球細胞カウント、減少したヘモグロビンおよび減少したヘマトクリット；増大した平均血小板カウント；オボアルブミン攻撃に対する減少した平均血清ＩｇＧ１応答；オボアルブミン攻撃に対する増大した平均血清ＩｇＧ１応答；オボアルブミン攻撃に対する減少した平均血清ＩｇＧ２ａ応答；オボアルブミン攻撃に対する増大した平均血清ＩｇＧ２ａ応答；ＬＰＳ攻撃に対する増大した平均血清ＭＣＰ−１応答；ＬＰＳ攻撃に対する増大した平均血清ＴＮＮ−アルファ応答；ＬＰＳ攻撃に対する増大した平均血清ＩＬ−６応答；増大した皮膚線維芽細胞増殖；脾臓および骨髄双方における増大したヘモシデリン色素；合計体脂肪および合計脂肪質量の増大した平均パーセント；増大した平均体重；増大した合計組織質量（ＴＴＭ）；増大した無脂肪体質量（ＬＢＭ）；増大した大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）；増大した脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）；増大したＢＭＣ／ＬＢＭ比率；増大した骨ミネラル密度（ＢＭＤ）；増大した骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）；増大した平均大腿中間幹皮質厚みおよび断面積；増大した平均脊椎小柱骨用量数および結合密度；合計体脂肪および合計脂肪質量の減少した平均パーセント；減少した平均体重；減少した平均身長；減少した合計組織質量（ＴＴＭ）；減少した無脂肪体質量（ＬＢＭ）；減少した大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）；減少した脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）；減少したＢＭＣ／ＬＢＭ比率；減少した骨ミネラル密度（ＢＭＤ）；減少した骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）；減少した用量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）；減少した平均大腿中間幹皮質厚みおよび断面積；減少した平均脊椎小柱骨用量数および結合密度；骨ジストロフィーおよび転移性カルシウム沈着；減少した腹部内脂肪；成長の遅延；発生の異常；多病巣急性および肉芽腫症炎症；男性受精不能；女性受精不能；精巣変性；男性性機能低下；欠陥があるまたは阻止された精子形成；減少した精巣重量；炎症および変性筋肉障害；膵臓細葉細胞の変化；拡大された腎臓；腎臓障害；筋肉障害；全ての器官サイズの一般的低下が伴う阻止された成長；低下した生存率を伴う成長の遅延；および胚致死性のうちの少なくとも１つを呈する。。

本発明は、遺伝子破壊に関連する生理学的特徴を調節する剤も提供する。１つの態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、アゴニストは、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。さらに別の態様では、アンタゴニストは、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。

本発明は、（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供し；
（ｂ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物によって呈された挙動を観察し；
（ｃ）（ｂ）の観察された挙動を性が一致する野生型動物のそれと比較し、ここに、野生型動物によって呈される観察された挙動とは異なる非ヒトトランスジェニック動物によって呈された観察された挙動が遺伝子破壊に関する挙動と同定され；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与し；次いで、
（ｅ）該剤が遺伝子破壊に関連する挙動を変調するか否かを判断することを特徴とする、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する挙動を変調する剤を同定する方法を提供する。

１つの態様では、観察された作用は、開放野外活動試験の間の不安様応答増大である。さらに別の態様では、観察された作用は、開放野外活動試験の間の不安様応答減少である。さらに別の態様では、観察された作用は、ホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズムである。さらに別の態様では、観察された作用は、逆反転スクリーン試験の間の運動協調増強である。さらに別の態様では、観察された作用は、逆反転スクリーン試験の間の運動協調損傷である。さらに別の態様では、観察された作用としては、欝うつ病、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。このような障害としては、それに限定されないが、軽度から中等度の不安、身体疾患による不安障害、特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖を伴うパニック障害、広場恐怖を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘発性不安障害、急性アルコール離脱症候群、強迫性障害、広場恐怖症、単極性障害、双極性障害ＩまたはＩＩ型、他の点では特定されない双極性障害、気分循環性障害、欝病性障害、大欝病性障害、気分障害、物質誘発性気分障害、認知機能の亢進、それに限定されないが、アルツハイマー病、卒中発作または脳外傷と関連した認知機能の喪失；それに限定されないが、てんかん、学習障害／疾患、脳性麻痺を含めた疾患または損傷から生じる発作を含めた「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。さらに、不安障害は、以下の型に限定されないがそれを含めた人格障害に当てはまる：妄想性、反社会型、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、統合失調質、および統合失調症性。

本発明は、遺伝子破壊に関連する作用を調節する剤も提供する。１つの態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。別の態様では、そのアゴニストは、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。さらに別の態様では、アンタゴニストは、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。

本発明は、（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供し；
（ｂ）非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与し；次いで、
（ｃ）試験剤が神経学的障害；心血管、内皮または血管新生疾患；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常非ヒトトランスジェニック動物において軽減し、または変調するか否かを判断することを特徴とする、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子における破壊に関連する神経学的障害；心血管、内皮または血管新生疾患；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を軽減または変調する剤を同定する方法を提供する。。

さらに別の態様では、神経学的上の障害は、開放野外活動試験の間の不安様応答増大である。さらに別の態様では、神経学的上の障害は、開放野外活動試験の間の不安様応答減少である。さらに別の態様では、神経学的上の障害は、ホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズムである。さらに別の態様では、神経学的上の障害は、逆反転スクリーン試験の間の運動協調増強である。さらに別の態様では、神経学的上の障害は、逆反転スクリーン試験の間の運動協調損傷である。さらに別の態様では、神経学的障害としては、鬱うつ病、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。このような神経学的障害は、それに限定されないが、軽度から中等度の不安、身体疾患による不安障害、特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖を伴うパニック障害、広場恐怖を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘発性不安障害、急性アルコール離脱症候群、強迫性障害、広場恐怖症、単極性障害、双極性障害ＩまたはＩＩ型、特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、大鬱病性障害、気分障害、物質誘発性気分障害、認知機能の亢進，；それに限定されないが、アルツハイマー病、卒中発作、または脳外傷に関連した認知機能の喪失；それに限定されないが、てんかん、学習障害／疾患、脳性麻痺を含めた疾患または損傷から生じる発作を含めた「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。さらに、不安障害は、それに限定されないが以下の型を含めた人格障害に当たりうる：妄想性、反社会型、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、統合失調質、および統合失調症性。

別の態様では、眼の異常が網膜異常である。さらに別の態様では、眼の異常が視覚の問題または盲目に合致する。さらに別の態様では、網膜の異常が色素性網膜炎と合致するか、または網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる。

さらに別の態様では、網膜異常は、網膜異形成；未熟児網膜症を含めた種々の網膜症、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶反応、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜およびその他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離症、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端骨異形成症、フリン−エアード症候群、フリーデリッヒ失調症、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム（Ｐｉｅｒｒｅ−Ｍａｒｉｅｄｕｎｓｄｒｏｍｅ）、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症，ウルフラム症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無βリポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿またはマンノシドーシスと合致している。

さらに別の態様では、発生の異常が胚致死性または低下した生存率を含む。

さらに別の態様では、心血管、内皮、または血管新生疾患は、糖尿病などの動脈疾患；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポジ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕；虚血再潅流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患または骨粗鬆症である。

さらになお別の態様では、免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギヤン・バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシーなどの中枢または末梢神経系の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎，および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水疱性皮膚疾患、多形紅斑および接触性皮膚炎を含めた自己免疫性または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的疾患；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患と合致している。

別の態様では、非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して、以下の生理学的特徴の少なくとも１つを示す：開放野外試験の間の不安様応答増大；開放野外試験の間の不安様応答減少；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスで誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調の損傷；尾部靭帯試験の間の鬱様応答の増大；尾部靭帯試験の間の鬱様応答減少；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力増強；ホットプレート試験における潜伏応答減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；心拍減少；インシュリン感受性増大；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清グルコース濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数の増大；大球性貧血；赤血球細胞数の減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪の平均パーセント増大；平均体脂肪増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体脂肪（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪酸質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ）の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常性；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズにおける全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死。

本発明は、遺伝子破壊に関連する神経学的障害；心血管、内皮または血管形成障害；眼の異常性；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を緩和または調節する剤も提供する。１つの態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型のアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、そのアゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。さらに別の態様では、そのアンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。

本発明は、神経学的障害；心血管、内皮または血管形成障害；眼の異常性；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常の処置のための治療剤も提供する。

本発明は、（ａ）試験剤を、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する宿主細胞と接触させ；次いで、（ｂ）該試験剤が、宿主細胞によるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を変調するか否かを判断することを特徴とする、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を変調する剤を同定する方法を提供する。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を調節する剤も提供する。１つの態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型のアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、該アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。さらに別の態様では、該アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。

本発明は、（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供し；
（ｂ）（ａ）非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定し；
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を、性が一致した野生型動物のそれと比較し、ここに、野生型動物の生理学的特徴とは異なる非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴は、非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に由来する疾患と同定され；
（ｄ）（ａ）の非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与し；次いで、
（ｅ）非ヒトトランスジェニック動物における、遺伝子破壊に関連した同定された疾患に対する試験剤の効果を評価することを特徴とする、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する疾患に影響できる治療剤を評価する方法を提供する。

１つの態様では、疾患が神経学的障害；心血管、内皮または血管新生疾患；眼の異常；神経学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生の異常である。

本発明は、遺伝子破壊に関連した症状に影響を及ぼす能力がある治療剤も提供する。１つの態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型のアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、該アゴニストは抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。さらに別の態様では、該アゴニストは抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。

本発明は、遺伝子破壊に関連した症状に影響を及ぼす能力のある治療剤を包含する医薬組成物も提供する。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した神経学的障害；心血管、内皮または血管形成障害；眼の異常性；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；または胚性致死を治療または防止または緩和する方法も提供し、そして該方法は、すでにその障害を示している可能性があるか、またはその障害を有する傾向がありうるか、またはその障害が防止されるべき状態にありうるそのような処置の必要な対象に、治療上有効量の治療剤、またはそれのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより上記障害または疾患を有効に治療または防止または緩和することを包含する。

さらに別の態様では、神経学的障害は、開放野外活動試験の間の不安様応答増大である。さらに別の態様では、神経学的障害は、開放野外活動試験の間の不安様応答減少である。さらに別の態様では、神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズムである。さらに別の態様では、神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間の運動協調増強である。さらに別の態様では、神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間の運動協調損傷である。さらに別の態様では、神経学的障害は、欝病、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。このような神経障害は、それに限定されないが軽度から中等度の不安、身体疾患による不安障害、特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖を伴うパニック障害、広場恐怖を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘発性不安障害、急性アルコール離脱症候群、強迫性障害、広場恐怖症、単極性障害、双極性障害ＩまたはＩＩ型、特定されない双極性障害、気分循環性障害、欝病性障害、大欝病性障害、気分障害、物質誘発性気分障害、認知機能の亢進、それに限定されないがアルツハイマー病、卒中発作、または脳外傷に関連した認知機能の喪失；それに限定されないがてんかん、学習障害／疾患、脳性麻痺を含めた疾患または損傷から生じる発作を含めた「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。さらに、不安障害は、それに限定されないが以下の型を含めた人格障害に当たりうる：妄想性、反社会型、回避性、境界性、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、統合失調質、および統合失調症性。

別の態様では、眼の異常は、網膜異常である。さらに別の態様では、眼の異常は、視覚障害または失明に合致している。さらに別の態様では、網膜異常は、色素性網膜炎に合致しているか、または網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる。

さらに別の態様では、網膜異常は、網膜異形成；未熟児網膜症を含めた種々の網膜症、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶反応、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜およびその他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離症、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端骨異形成症、フリン−エアード症候群、フリーデリッヒ失調症、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエールーマリー・ダンスドローム（Ｐｉｅｒｒｅ−Ｍａｒｉｅｄｕｎｓｄｒｏｍｅ）、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、フルフラム症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無βリポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿、またはマンノシドーシスに合致している。

さらに別の態様では、眼の異常は、白内障である。さらに別の態様では、白内障は、ヒトダウン症候群、ハレルマンーストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下症またはコンラディ症候群などの全身性疾患である。

さらに別の態様では、心血管、内皮、または血管新生疾患は、糖尿病などの動脈疾患；乳頭浮腫；視神経萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧；炎症性血管炎；レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポジ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷のような外傷、インプラント固着、瘢痕；虚血再潅流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である。

さらに別の態様では、免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギヤン・バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシーなどの中枢または末梢神経系の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水疱性皮膚疾患、多形紅斑および接触性皮膚炎を含めた自己免疫性または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的疾患；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患と合致している。

別の態様では、治療剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型のアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、該アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。さらに別の態様では、該アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子における破壊に関連した神経学的障害；心血管、内皮または血管形成障害；眼の異常性；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を緩和または調節する剤を同定する方法も提供し、そして該方法は、
（ａ）上記培養物の各細胞が、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含むものである、非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物を提供すること；
（ｂ）上記細胞培養物に、試験剤を投与すること、そして
（ｃ）試験剤が、上記培養物における神経学的障害；心血管、内皮または血管形成障害；眼の異常性；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を緩和または調節するかどうかを決定すること
を包含する。

さらに別の態様では、神経学的障害は、開放野外活動試験の間の不安様応答増大である。さらに別の態様では、神経学的障害は、開放野外活動試験の間の不安様応答減少である。さらに別の態様では、神経学的障害は、ホームーケージ活動試験の間の異常な概日リズムである。さらに別の態様では、神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間の運動協調増強である。さらに別の態様では、神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間の運動協調損傷である。さらに別の態様では、神経学的障害は、欝病、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含む。このような神経学的障害は、それに限定されないが軽度から中等度の不安、身体疾患による不安障害、特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖を伴うパニック障害、広場恐怖を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘発性不安障害、急性アルコール離脱症候群、強迫性障害、広場恐怖症、単極性障害、双極性障害ＩまたはＩＩ型、特定されない双極性障害、気分循環性障害、欝病性障害、大欝病性障害、気分障害、物質誘発性気分障害、認知機能の亢進；それに限定されないがアルツハイマー病、卒中発作、または脳外傷に関連した認知機能の喪失；それに限定されないがてんかん、学習障害／疾患、脳性麻痺を含めた疾患または損傷から生じる発作を含めた「不安障害」として定義されるカテゴリーを含む。さらに、不安障害は、それに限定されないが以下の型を含めた人格障害に当たりうる：妄想性、反社会型、回避性、境界性、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、統合失調質、および統合失調症性。

さらに別の態様では、網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜症、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜およびその他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離症、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端骨異形成症、フリンーエアード症候群、フリードリッヒ失調症、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム（Ｐｉｅｒｒｅ−Ｍａｒｉｅｄｕｎｓｄｒｏｍｅ）、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無βリポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿、またはマンノシドーシスに合致している。

さらに別の態様では、眼の異常は、白内障である。さらに別の態様では、白内障は、ヒトダウン症候群、ハレルマンーストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患である。

さらに別の態様では、免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節症；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギヤン・バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシーなどの中枢または末梢神経系の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水疱性皮膚疾患、多形紅斑および接触性皮膚炎を含めた自己免疫性または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的疾患；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患に合致している。

本発明は、上記培養物における遺伝子中の破壊に関連する神経学的障害；心血管、内皮、または血管新生障害；眼の異常性；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生上の異常を緩和または調節する剤も提供する。１つの態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型のアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、その剤は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである。さらに別の態様では、アゴニスト剤は、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。さらに別の態様では、アンタゴニスト剤は、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型を調節する方法も提供し、そして該方法は、すでにその表現型を示している可能性があるか、またはその表現型を有する傾向がありうるか、またはその表現型が防止されるべき状態にありうるような対象に、上記表現型を調節すると同定された有効量の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それによりその表現型を有効に調節することを包含する。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した生理学的特徴を調節する方法も提供し、そして該方法は、すでにその生理学的特徴を示している可能性があるか、またはその生理学的特徴を有する傾向がありうるか、またはその生理学的特徴が防止されるべき状態にありうるような対象に、上記生理学的特徴を調節すると同定された有効量の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それによりその生理学的特徴を有効に調節することを包含する。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した作用を調節する方法も提供し、そして該方法は、すでにその作用を示している可能性があるか、またはその作用を有する傾向がありうるか、またはその作用が防止されるべき状態にありうるような対象に、上記作用を調節すると同定された有効量の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それによりその作用を有効に調節することを包含する。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を調節する方法も提供し、そして該方法は、上記ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する宿主細胞に、上記発現を調節すると同定された有効量の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより上記ポリペプチドの発現を有効に調節することを包含する。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した症状を調節する方法も提供し、そして該方法は、すでにその症状を示している可能性があるか、またはその症状を有する傾向がありうるか、またはその症状が防止されるべき状態にありうるような対象に、上記症状を調節すると同定された治療上有効な量の治療剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それによりその症状を有効に調節することを包含する。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した神経学的障害；心血管、内皮、または血管新生障害；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝性異常または障害；または発生異常を治療または防止または緩和する方法も提供し、そして該方法は、上記培養物の各細胞がＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を包含するものである非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物に、上記障害を治療または防止または緩和すると同定された有効量の剤、またはそれのアゴニストまたはアンタゴニストを投与して、それにより上記障害を有効に治療または防止または緩和することを包含する。
Ｂ．さらなる実施形態
なおさらなる実施形態において、本発明は、本出願の潜在的特許請求の範囲の以下の組に指向される。

（項目１）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を同定する方法であって、該方法は：
（ａ）そのゲノムがＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を包含する非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定すること；そして、
（ｃ）該測定された生理学的特徴を、性別の一致した野生型動物の生理学的特徴と比較することを含み、該野生型動物の該生理学的特徴とは異なる該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を、該非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に由来する表現型として同定する方法。

（項目２）上記非ヒトトランスジェニック動物は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊についてヘテロ接合性である、項目１に記載の方法。

（項目３）性別の一致した野生型同腹子と比較して上記非ヒトトランスジェニック動物によって呈される上記表現型は以下：神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常のうちの少なくとも１つである項目１に記載の方法。

（項目４）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である項目３に記載の方法。

（項目５）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である項目３に記載の方法。

（項目６）上記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである項目３に記載の方法。

（項目７）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である項目３に記載の方法。

（項目８）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である項目３に記載の方法。

（項目９）上記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である項目３に記載の方法。

（項目１０）上記眼の異常は網膜異常である項目３に記載の方法。

（項目１１）上記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する項目３に記載の方法。

（項目１２）上記網膜異常は色素性網膜炎に合致する項目１０に記載の方法。

（項目１３）上記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる項目１０に記載の方法
（項目１４）上記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する項目１０に記載の方法。

（項目１５）上記眼の異常は白内障である項目３に記載の方法。

（項目１６）上記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患と合致する項目１５に記載の方法。

（項目１７）上記発生異常は胚死または生存率低下を含む項目３に記載の方法。

（項目１８）上記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である項目３に記載の方法。

（項目１９）上記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である項目３に記載の方法。

（項目２０）上記骨代謝異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、または大理石骨病である項目３に記載の方法。

（項目２１）上記非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して以下の生理学的特徴：開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセント増大；平均体重増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体質量（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ））の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死の内の少なくとも１つを示す項目１に記載の方法。

（項目２２）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物から誘導される単離細胞。

（項目２３）上記単離細胞は、マウス細胞である項目２２に記載の単離された細胞。

（項目２４）上記マウス細胞は、胚性幹細胞である項目２３に記載の単離された細胞。

（項目２５）上記非ヒトトランスジェニック動物が、性別一致野生型同腹子と比較した場合、以下の表現型：神経学的障害；心血管障害、内皮障害または血管形成障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常の内の少なくとも１つを示す項目２２に記載の単離された細胞。

（項目２６）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型を調節する剤を同定する方法であって、該方法は、
（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること、
（ｂ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定すること、
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別の一致した野生型動物の生理学的特徴と比較することであって、ここで、該野生型動物の生理学的特徴と異なる該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴が、該非ヒトトランスジェニック動物での遺伝子破壊から生じる表現型として同定されること、
（ｄ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物に、試験剤を投与すること、および
（ｅ）該試験剤が、該非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に関連した同定された表現型を調節するかどうかを決定すること
を包含する方法。

（項目２７）上記遺伝子破壊に関連した上記表現型は、神経学的障害；心血管障害、内皮障害または血管形成障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を包含する項目２６に記載の方法。

（項目２８）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である項目２７に記載の方法。

（項目２９）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である、項目２７に記載の方法。

（項目３０）上記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである項目２７に記載の方法。

（項目３１）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である項目２７に記載の方法。

（項目３２）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である項目２７に記載の方法。

（項目３３）上記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である項目２７に記載の方法。

（項目３４）上記眼の異常は網膜異常である項目２７に記載の方法。

（項目３５）上記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する項目２７に記載の方法。

（項目３６）上記網膜異常は色素性網膜炎に合致する項目３４に記載の方法。

（項目３７）上記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる項目３４に記載の方法。

（項目３８）上記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する項目３４に記載の方法。

（項目３９）上記眼の異常は白内障である項目２７に記載の方法。

（項目４０）上記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患と合致する項目３９に記載の方法。

（項目４１）上記発生異常は胚死または生存率低下を含む項目２７に記載の方法。

（項目４２）上記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である項目２７に記載の方法。

（項目４３）上記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である項目２７に記載の方法。

（項目４４）上記骨代謝異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、または大理石骨病である項目２７に記載の方法。

（項目４５）上記非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して以下の生理学的特徴：開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセント増大；平均体重増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体質量（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ））の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死の内の少なくとも１つを示す項目２６に記載の方法。

（項目４６）項目２６の方法によって同定される剤。

（項目４７）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである項目４６に記載の剤。

（項目４８）上記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目４７に記載の剤。

（項目４９）上記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目４７に記載の剤。

（項目５０）（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物によって呈される生理学的特徴を測定すること；
（ｃ）（ｂ）の該測定された生理学的特徴を性が一致した野生型動物の生理学的特徴と比較することであって、ここで、該野生型動物によって呈された該生理学的特徴と異なる該非ヒトトランスジェニック動物によって呈される生理学的特徴が遺伝子破壊に関連する生理学的特徴として同定されること；
（ｄ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与すること；そして、
（ｅ）遺伝子破壊に関連する該生理学的特徴が変調されたか否かを判断することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴を変調する剤を同定する方法。

（項目５１）上記非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して以下の生理学的特徴：開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセント増大；平均体重増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体質量（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ））の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死の内の少なくとも１つを示す項目５０に記載の方法。

（項目５２）項目５０に記載の方法によって同定された剤。

（項目５３）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである項目５２に記載の剤。

（項目５４）上記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目５３に記載の剤。

（項目５５）上記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目５３に記載の剤。

（項目５６）（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物によって呈された挙動を観察すること；
（ｃ）（ｂ）の該観察された挙動を性が一致する野生型動物の観察された挙動と比較することであって、ここで、該野生型動物によって呈される該観察された挙動とは異なる該非ヒトトランスジェニック動物によって呈された観察された挙動が遺伝子破壊に関する挙動と同定されること；
（ｄ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与すること；そして、
（ｅ）該剤が遺伝子破壊に関連する挙動を変調するか否かを判断することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する挙動を変調する剤を同定する方法。

（項目５７）上記挙動は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である項目５６に記載の方法。

（項目５８）上記挙動は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である項目５６に記載の方法。

（項目５９）上記挙動は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである項目５６に記載の方法。

（項目６０）上記挙動は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である項目５６に記載の方法。

（項目６１）上記挙動は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である項目５６に記載の方法。

（項目６２）上記挙動は、鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である項目５６に記載の方法。

（項目６３）項目５６に記載の方法によって同定された剤。

（項目６４）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである項目６３に記載の剤。

（項目６５）上記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目６４に記載の剤。

（項目６６）上記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目６４に記載の剤。

（項目６７）（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）該非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与すること；そして、
（ｃ）該試験剤が神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を、該非ヒトトランスジェニック動物において軽減し、または変調するか否かを判断することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子における破壊に関連する神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を軽減または変調する剤を同定する方法。

（項目６８）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である項目６７に記載の方法。

（項目６９）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である項目６７に記載の方法。

（項目７０）上記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである項目６７に記載の方法。

（項目７１）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である項目６７に記載の方法。

（項目７２）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である項目６７に記載の方法。

（項目７３）上記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である項目７３に記載の方法。

（項目７４）上記眼の異常は網膜異常である項目６７に記載の方法。

（項目７５）上記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する項目６７に記載の方法。

（項目７６）上記網膜異常は色素性網膜炎に合致する項目７４に記載の方法。

（項目７７）上記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる項目７４に記載の方法。

（項目７８）上記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する項目７４に記載の方法。

（項目７９）上記眼の異常は白内障である項目６７に記載の方法。

（項目８０）上記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患である項目７９に記載の方法。

（項目８１）上記発生異常は胚死または生存率低下を含む項目６７に記載の方法。

（項目８２）上記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である項目６７に記載の方法。

（項目８３）上記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である項目６７に記載の方法。

（項目８４）上記骨代謝異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、または大理石骨病である項目６７に記載の方法。

（項目８５）上記非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して以下の生理学的特徴：開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセント増大；平均体重増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体質量（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ））の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死の内の少なくとも１つを示す項目６７に記載の方法。

（項目８６）項目６７に記載の方法によって同定された剤。

（項目８７）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである項目８６に記載の剤。

（項目８８）上記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目８７に記載の剤。

（項目８９）上記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目８７に記載の剤。

（項目９０）項目６７に記載の方法によって同定される治療剤。

（項目９１）（ａ）試験剤を、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する宿主細胞と接触させること；そして、
（ｂ）該試験剤が、該宿主細胞によるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を変調するか否かを判断することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を変調する剤を同定する方法。

（項目９２）項目９１の記載の方法によって同定される剤。

（項目９３）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである項目９２に記載の剤。

（項目９４）上記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目９３に記載の剤。

（項目９５）上記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目９３に記載の剤。

（項目９６）（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）（ａ）該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定すること；
（ｃ）（ｂ）の該測定された生理学的特徴を、性が一致した野生型動物の生理学的特徴と比較することであって、ここで、該野生型動物の該生理学的特徴とは異なる該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴は、該非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に由来する状態と同定されること；
（ｄ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与すること；そして、
（ｅ）非ヒトトランスジェニック動物における、遺伝子破壊に関連した同定された該状態に対する該試験剤の効果を評価することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する疾患に影響できる治療剤を評価する方法。

（項目９７）上記疾患が神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常である項目９６に記載の方法。

（項目９８）項目９６に記載の方法によって同定された治療剤。

（項目９９）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである項目９８に記載の治療剤。

（項目１００）上記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目９９に記載の治療剤。

（項目１０１）上記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目９９に記載の治療剤。

（項目１０２）項目９８に記載の治療剤を含む医薬組成物。

（項目１０３）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害または胚性致死を治療または防止または緩和する方法であって、該方法は、すでにその障害を有し得るか、またはその障害を有する傾向があり得るか、またはその障害が防止されるべき状態にありうるそのような処置の必要な対象に、治療上有効量の項目９４に記載のの治療剤、またはそれのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該障害または疾患を有効に治療または防止または緩和することを包含する、方法。

（項目１０４）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である項目１０３に記載の方法。

（項目１０５）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である項目１０３に記載の方法
（項目１０６）上記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである項目１０３に記載の方法。

（項目１０７）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である項目１０３に記載の方法。

（項目１０８）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である項目１０３に記載の方法。

（項目１０９）上記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である項目１０３に記載の方法。

（項目１１０）上記眼の異常は網膜異常である項目１０３に記載の方法。

（項目１１１）上記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する項目１０３に記載の方法。

（項目１１２）上記網膜異常は色素性網膜炎に合致する項目１１０に記載の方法。

（項目１１３）上記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる項目１１０に記載の方法。

（項目１１４）上記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する項目１１０に記載の方法。

（項目１１５）上記眼の異常は白内障である項目１０３に記載の方法。

（項目１１６）上記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患である項目１１５に記載の方法。

（項目１１７）上記発生異常は胚死または生存率低下を含む項目１０３に記載の方法。

（項目１１８）上記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である項目１０３に記載の方法。

（項目１１９）上記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である項目１０３に記載の方法。

（項目１２０）上記骨代謝異常または障害が関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である項目１０３に記載の方法。

（項目１２１）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子における破壊に関連した神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害または発生異常を緩和または調節する剤を同定する方法であって、該方法は、
（ａ）非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物を提供することであって、該培養物の各細胞が、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含むこと、；
（ｂ）該細胞培養物に、試験剤を投与すること、そして
（ｃ）該試験剤が、該培養物における神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害または発生異常を緩和または調節するかどうかを決定することを包含する方法。

（項目１２２）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である項目１２１に記載の方法。

（項目１２３）上記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である項目１２１に記載の方法。

（項目１２４）上記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである項目１２１に記載の方法。

（項目１２５）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である項目１２１に記載の方法。

（項目１２６）上記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である項目１２１に記載の方法。

（項目１２７）上記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である項目１２１に記載の方法。

（項目１２８）上記眼の異常は網膜異常である項目１２１に記載の方法。

（項目１２９）上記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する項目１２１に記載の方法。

（項目１３０）上記網膜異常は色素性網膜炎に合致する項目１２８に記載の方法。

（項目１３１）上記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる項目１２８に記載の方法。

（項目１３２）上記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致するに合致している項目１２８に記載の方法。

（項目１３３）上記眼の異常は白内障である項目１２１に記載の方法。

（項目１３４）上記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患である項目１３３に記載の方法。

（項目１３５）上記発生異常は胚死または生存率低下を含む項目１２１に記載の方法。

（項目１３６）上記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である項目１２１に記載の方法。

（項目１３７）上記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である項目１２１に記載の方法。

（項目１３８）上記骨代謝の異常または障害が関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である項目１２１に記載の方法。

（項目１３９）項目１２１に記載の方法によって同定された剤。

（項目１４０）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである項目１３９に記載の剤。

（項目１４１）上記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目１４０に記載の剤。

（項目１４２）上記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である項目１４０に記載の剤。

（項目１４３）項目１２１に記載の方法によって同定された治療剤。

（項目１４４）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型を調節する方法であって、該方法は、すでに該表現型を示し得るか、または該表現型を有する傾向があり得るか、または該表現型が防止されるべき状態にあり得るような対象に、有効量の項目４６に記載の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該表現型を有効に調節することを包含する、方法。

（項目１４５）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した生理学的特徴を調節する方法であって、該方法は、すでに該生理学的特徴を示し得るか、または該生理学的特徴を有する傾向がありうるか、または該生理学的特徴が防止されるべき状態にありうるような対象に、有効量の項目５２の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該生理学的特徴を有効に調節することを包含する、方法。

（項目１４６）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した作用を調節する方法であって、該方法は、すでに該作用を示し得るか、または該作用を有する傾向がありうるか、または該作用が防止されるべき状態にありうるような対象に、有効量の項目６３の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該作用を有効に調節することを包含する、方法。

（項目１４７）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を調節する方法であって、該方法は、該ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する宿主細胞に、項目９２の有効量の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該ポリペプチドの発現を有効に調節することを包含する、方法。

（項目１４８）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した症状を調節する方法であって、該方法は、すでに該症状を有し得るか、または該症状を有する傾向がありうるか、または該症状が防止されるべき状態にありうるような対象に、治療上有効な量の項目９８の治療剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該症状を有効に調節することを包含する方法。

（項目１４９）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝性異常または障害；または発生異常を治療または防止または緩和する方法であって、該方法は、非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物であって、該培養物の各細胞がＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を包含する、細胞培養物に、有効量の項目１３９の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与して、それにより該障害を有効に治療または防止または緩和することを包含する方法。

（好ましい実施形態の詳細な説明）
Ｉ．定義
用語「ＰＲＯポリペプチド」および「ＰＲＯ」は、本明細書中で用いられ、数字表示に直ちに続く場合、種々のポリペプチドをいい、ここに、完全な表示（すなわち、ＰＲＯ／数）とは、本明細書中に記載された特異的ポリペプチド配列をいう。用語「ＰＲＯ／数ポリペプチド」および「ＰＲＯ／数」（用語「数」は本明細書中で用いられるように現実の数表示として供される）は、（さらに本明細書中で定義される）天然配列ポリペプチドおよびポリペプチド改変体を含む。本明細書中に記載される該ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、ヒト組織タイプから、または熱の源からなど、種々の源から単離することができる。用語「ＰＲＯポリペプチド」とは、本明細書中で開示される各個々のＰＲＯ／数ポリペプチドをいう。「ＰＲＯポリペプチド」をいう本明細書中における全ての開示は、個々ならびに連結ポリペプチドの各々をいう。例えば、抗体、またはアゴニストの調製、精製、誘導体化、形成、関連する病気（または疾患）の治療の投与、それを含む組成物の記載は、個々に本発明の各ポリペプチドに関する。用語「ＰＲＯポリペプチド」は、本明細書中に開示されたＰＲＯ／数ポリペプチドの改変体も含む。

「天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド」は、天然に由来する対応するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと同一のアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。そのような天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは天然から単離することができるか、あるいは組換えまたは合成手段によって生産することができる。用語「天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド」は、具体的には、特異的ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの天然に生じる切形されたまたは分泌された形態（例えば、細胞外ドメイン配列）、天然に生じる改変体形態（例えば、あるいはスプライシングされた形態）、および該ポリペプチドの天然に生じる対立遺伝子改変体を含む。本発明は、添付の図面に示される全長アミノ酸配列を含む成熟または全長天然配列ポリペプチドである、本明細書中に開示された天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを提供する。開始および停止コドンは太文字フォントで示され、図面においては下線が施される。しかしながら、添付の図面に開示されるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、図面中のアミノ酸位置１としてここでは命名されるメチオニン残基で開始することが示されるが、図面中のアミノ酸位置１から上流または下流いずれかに位置する他のメチオニン残基を、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのための出発アミノ酸残基として使用することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド「細胞外ドメイン」または「ＥＣＤ」とは、実質的に膜貫通および細胞質ドメインを含まないＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの形態をいう。通常、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドＥＣＤは、１％未満のそのような膜貫通および／または細胞質ドメインを有し、好ましくは、０．５％未満のそのようなドメインを有するであろう。本発明のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドについて同定されたいずれの膜貫通ドメインも、疎水性ドメインのその型を同定するための当該分野でルーチン的に使用される基準に従って同定されることは理解されるであろう。膜貫通ドメインの正確な境界は変化し得るが、最もありそうには、本明細書中で最初に同定されたドメインのいずれかの末端において約５以下のアミノ酸だけ変化し得る。従って、所望により、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの細胞外ドメインは、実施例または明細書中で同定された膜貫通ドメイン／細胞外ドメイン境界のいずれかの側に約５以下のアミノ酸を含有することができ、関連するシグナルペプチドを含むまたは含まないそのようなポリペプチド、およびそれらをコードする核酸が本発明によって考えられる。

本明細書中に開示された種々のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの「シグナルペプチド」の近似的な位置は本明細書中および／または添付の図面中に示される。しかしながら、シグナルペプチドのＣ−末端境界は変化し得るが、本明細書中で最初に同定されたシグナルペプチドＣ−末端境界のいずれかの側に最もありそうには約５以下のアミノ酸だけ変化でき、シグナルペプチドのＣ−末端境界は、アミノ酸配列エレメントのその型を同定するための同外分野でルーチン的に使用される基準に従って同定することができることに注意されたし（例えば、Ｎｉｅｌｓｅｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｔ．Ｅｎｇ．１０：１−６頁（１９９７年）およびｖｏｎＨｅｉｎｊｅｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．１４：４６８３−４６９０頁（１９８６年））。さらに、ある場合には、分泌されたポリペプチドからのシグナル配列の切断は完全には均一でなく、その結果、１を超える分泌された種をもたらすことも認識される。シグナルペプチドが本明細書中で同定されたシグナルペプチドのＣ−末端境界のいずれかの側の約５以下のアミノ酸内で切断されるこれらの成熟ポリペプチド、およびそれらをコードするポリペプチドが本発明によって考えられる。

「ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド改変体」は、本明細書中に開示された全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列に対して少なくとも約８０％アミノ酸配列同一性を有するとここでは定義される、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、好ましくは活性ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、本明細書中に開示されたシグナルペプチドを欠くＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列、本明細書中に開示された、シグナルペプチドを含むまたは含まないＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの細胞外ドメイン、または（全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドについての完全なコーディング配列の部分のみを表す核酸によってコードされるものなどの）本明細書中に開示された全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列のいずれかの他の断片を意味する。そのようなＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド改変体は、例えば、１以上のアミノ酸残基が、全長天然アミノ酸配列のＮ−またはＣ−末端において付加され、または欠失されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを含む。通常、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド改変体は、本明細書中に開示された全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列、本明細書中に開示されたシグナルペプチドを欠くＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列、本明細書中に開示された、シグナルペプチドを含むまたは含まない、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの細胞外ドメイン、または本明細書中に開示された全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４

４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列のいずれかの他の特別に定義された断片に対して、少なくとも約８０％アミノ酸配列同一性を有し、あるいは少なくとも約８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％アミノ酸配列同一性を有するであろう。通常、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリペプチドは長さが少なくとも約１０アミノ酸であり、あるいは長さが少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００アミノ酸、またはそれ以上である。通常、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリペプチドは、天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列と比較して、１以下の保存的アミノ酸置換を有し、あるいは、天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列と比較して、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０以下の保存的アミノ酸置換を有するであろう。

本明細書中で同定されるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列に対する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」は、配列を整列させ、ギャップを導入して、必要であれば、最大のパーセント配列同一性を達成し、配列同一性の一部としていずれの保存的置換も考慮せずに、特別なＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸配列のパーセンテージと定義される。パーセントアミノ酸配列同一性を決定する目的での整列は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウエアなどの公に入手可能なコンピューターソフトウエアを用いる、当該分野における技量内にある種々の方法で達成することができる。当業者であれば、比較すべき配列の全長にわたって最大整列を達成するのに必要ないずれかのアルゴリズムを含めた、整列を測定するための適当なパラメーターを決定することができる。しかしながら、ここでの目的では、％アミノ酸配列同一性値は配列比較コンピュータープログラムＡＬＩＧＮ−２を用いて生じ、ＡＬＩＧＮ−２プログラムについての完全なソースコードは以下の表１に供される。ＡＬＩＧＮ２配列比較コンピュータープログラムはＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．によって著作され、以下の表１に示されるソースコードはＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＤ．Ｃ．，２０５５９の合衆国著作権局のユーザードキュメンテーションに申請されており、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下で登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣａｌｉｆｏｒｎｉａのＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．を通じて公に入手可能であるか、あるいは以下の表１に供されるソースコードからコンパイルすることができる。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸ（登録商標）操作システム、好ましくはデジタルＵＮＩＸ（登録商標）Ｖ４．０Ｄで用いるためにコンパイルすべきである。全ての配列比較パートナーはＡＬＩＧＮ−２プログラムによって設定され、変化しない。

ＡＬＩＧＮ−２がアミノ酸配列比較のために使用される状況では、（所与のアミノ酸配列Ｂについて、関して、またはそれに対してある％アミノ酸配列同一性を有する又は含む所与のアミノ酸配列Ａとして別法では表現できる）所与のアミノ酸配列Ｂについて、関して、またはそれに対して所与のアミノ酸配列Ａの％アミノ酸配列同一性は以下のように計算される：
分率Ｘ／Ｙの１００倍
ここで、ＸはＡおよびＢのそのプログラムの整列において配列整列プログラムＡＬＩＧＮ−２による同一マッチとスコア取りされるアミノ酸残基の数であり、ＹはＢにおけるアミノ酸残基の合計数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合には、Ｂに対するＡの％アミノ酸配列同一性は、Ａに対するＢの％アミノ酸配列同一性とは等しくないであろうと認識される。この方法を用いる％アミノ酸配列同一性の計算の例として、表２および３は、「ＰＲＯ」と命名されるアミノ酸配列に対する「比較タンパク質」と命名されるアミノ酸配列の％アミノ酸配列同一性をどのようにして計算するかを示し、「ＰＲＯ」は、対象の仮ＰＲＯポリペプチドのアミノ酸配列を表し、「比較タンパク質」は、対象の「ＰＲＯ」ポリペプチドがそれに対して比較されるポリペプチドのアミノ酸配列を表し、そして「Ｘ」、「Ｙ」、および「Ｚ」は、各々、異なる仮アミノ酸残基を表す。特に断りのない限り、本明細書中で用いる全ての％アミノ酸配列同一性は、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータープログラムを用いて直前のパラグラフに記載したように得られる。

「ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリペプチド」または「ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体核酸配列」は、ここに定義され、かつ本明細書中に開示された全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列をコードするヌクレオチド配列に対して少なくとも約８０％核酸配列同一性を有する、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、好ましくは活性ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、本明細書中に開示されたシグナルペプチドを欠く全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列、本明細書中に開示された、シグナルペプチドを含むまたは含まないＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの細胞外ドメイン、または（全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドにつての完全なコーディング配列の一部のみを表す核酸によってコードされたものなどの）本明細書中に開示された全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列のいずれかの他の断片をコードする核酸分子を意味する。通常、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリヌクレオチドは、本明細書中に開示された全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列、本明細書中に開示されたシグナルペプチドを欠く全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列、本明細書中に開示された、シグナル配列を含むまたは含まない、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの細胞外ドメイン、または本明細書中に開示された全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド配列のいずれかの他の断片をコードする核酸配列に対して少なくとも約８０％核酸配列同一性を有し、あるいはそれに対して少なくとも約８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、もしくは９９％核酸配列同一性を有するであろう。改変体は、天然ヌクレオチド配列を含まない。

通常、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリヌクレオチドは長さが少なくとも約５ヌクレオチドであり、あるいは長さが少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００、８１０、８２０、８３０、８４０、８５０、８６０、８７０、８８０、８９０、９００、９１０、９２０、９３０、９４０、９５０、９６０、９７０、９８０、９９０、もしくは１０００ヌクレオチドであり、この文脈で、用語「約」は、参照ヌクレオチド配列の長さ±その参照配列の１０％を意味する。

本明細書中で同定されるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードする核酸配列に対する「パーセント（％）核酸配列同一性」は、配列を整列させ、ギャップを導入して、必要であれば、最大のパーセント配列同一性を達成した後に、対象のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０核酸配列中のヌクレオチドに対して同一である候補配列中のヌクレオチドのパーセンテージと定義される。パーセント核酸配列同一性を決定する目的での整列は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウエアなどの公に入手可能なコンピュータープログラムを用いる、当該分野における技量内である種々の方法で達成することができる。しかしながら、ここでの目的では、％核酸配列同一性値は、配列比較コンピュータープログラムＡＬＩＧＮ−２を用いて生じ、ＡＬＩＧＮ−２プログラムについての完全なソースコードは以下の表１に供される。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータープログラムはＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．によって著作され、以下の表１に示されたソースコードは、ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＤ．Ｃ．，２０５５９の合衆国著作権局におけるユーザードキュメンテーションに申請されており、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７の下で登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａを通じて公に入手可能であるか、あるいは以下の表１に供されたソースコードからコンパイルしてもよい。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸ（登録商標）操作システム、好ましくはデジタルＶ４．０Ｄで用いるためにコンパイルすべきである。全ての配列比較パラメーターはＡＬＩＧＮ−２プログラムによって設定されており、変化しない。

ＡＬＩＧＮ−２を核酸配列比較で使用する状況では、（所与の拡散配列Ｄについて、関して、またはそれに対するある％核酸配列同一性を有し又はそれを含む所与の核酸配列Ｃとして別法で表現できる）所与核酸配列Ｄについて、それに関して、またはそれに対する所与の拡散配列の％核酸配列同一性は以下のように計算される：
分率Ｗ／Ｚの１００倍
ここで、ＷはＣおよびＤのそのプログラムの整列における配列整列プログラムＡＬＩＧＮ−２によって同一マッチとしてスコア取りされたヌクレオチドの数であり、そしてＺはＤにおけるヌクレオチドの合計数である。核酸配列Ｃの長さが核酸配列Ｄの長さと等しくない場合には、Ｄに対するＣの％核酸配列同一性は、Ｃに対するＤの％核酸配列同一性と等しくない。％核酸配列同一性の計算の例として、表４および５は、「ＰＲＯ−ＤＮＡ」と命名される核酸配列に対する「比較ＤＮＡ」と命名される核酸配列の％核酸配列同一性をどのようにして計算するかを示し、「ＰＲＯ−ＤＮＡ」は対象の仮ＲＰＯ−コーディング核酸配列を表し、「比較ＤＮＡ」は、対象の「ＰＲＯ−ＤＮＡ」核酸分子がそれに対して比較される核酸分子のヌクレオチド配列を表し、そして「Ｎ」、「Ｌ」および「Ｖ」は、各々、異なる仮分子を表す。特記しない限り、本明細書中で用いる全ての％核酸配列同一性値は、ＡＬＩＧＮ−２コンピュータープログラムを用い、直前のパラグラフに記載されたようにして得られる。

また、本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする核酸分子であって、好ましくはストリンジェントなハイブリダイゼーションおよび洗浄条件下で、本明細書中に開示された全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列にハイブリダイズすることができるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリヌクレオチドも提供する。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリペプチドは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ポリヌクレオチドによってコードされるものであってよい。

用語「全長コーディング領域」とは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする核酸を参照して用いる場合、（しばしば、包括的に、添付の図面中において開始および停止コドンの間に示される）本発明の全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチドの配列をいう。用語「全長コーディング領域」とは、ＡＴＣＣ寄託された核酸を参照して用いる場合、（しばしば、包括的に、添付の図面中では開始および停止コドンの間に示される）ＡＴＣＣに寄託されたベクターに挿入されたｃＤＮＡのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする部分をいう。

「単離された」は、本明細書中に開示された種々のポリペプチドを記載するのに用いる場合、その天然環境の成分から同定され、分離されおよび／または回収されたポリペプチドを意味する。その天然環境の汚染成分は、ポリペプチドについての診断的または治療的使用に典型的には干渉するであろう物質であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性溶質を含みえる。本発明は、該ポリペプチドが、（１）スピニングカップセクネーターの使用によってＮ−末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度まで、または（２）クーマシーブルー、または好ましくは銀染色を用いて非還元または還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均質になるまで精製されることを提供する。単離されたポリペプチドは組換え細胞内にイン・サイチュにてポリペプチドを含む。というのは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド天然環境の少なくとも１つの成分は存在しないだろうからである。しかしながら、通常、単離されたポリペプチドは少なくとも１つの精製工程によって調製されるであろう。

「単離された」ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする核酸、または他のポリペプチドをコードする核酸は、それとともにポリペプチドをコードする核酸の天然源において通常は会合する少なくとも１つの汚染核酸分子から同定され、分離された核酸分子である。単離されたポリペプチドをコードする核酸分子は、それが天然で見出される形態または状況ではない。従って、単離されたポリペプチドをコードする核酸分子は、それが天然細胞に存在するように、特異的ポリペプチド−コーディング核酸分子から区別される。しかしながら、単離されたポリペプチド−コーディング核酸分子は、通常はポリペプチドを発現する細胞に含まれるポリペプチド−コーディング核酸分子を含み、例えば、核酸分子は天然細胞のそれとは異なる染色体位置にある。

用語「制御配列」とは、特定の宿主生物での操作可能に連結されたコーディング配列の発現に必要なＤＮＡ配列をいう。原核生物に適した制御配列は、例えば、プロモーター、所望によるオペレーター配列、およびリボソーム結合部位を含む。真核生物細胞は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、およびエンハンサーを利用することが知られている。

核酸は、別の核酸配列との機能的関係に置かれている場合に「操作可能に連結されている」。例えば、プレ配列または分泌リーダーについてのＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に参加するプレタンパク質として発現されるとき、ポリペプチドについてのＤＮＡに操作可能に連結されており；プロモーターまたはエンハンサーは、配列の転写に影響するとき、コーディング配列に操作可能に連結されており；あるいはリボソーム結合部位は、転写を促進するように位置するとき、コーディング配列に操作可能に連結されている。一般には、「操作可能に連結された」は、連結されるべきＤＮＡ配列が連続しており、分泌リーダーの場合には、連続的であり且つリーディング相にあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは連続している必要はない。連結は、便宜な制限部位における連結によって達成される。そのような部位が存在するとき、合成オリゴヌクレオチドアダプターまたはリンカーは常套の実践に従って用いられる。

ハイブリダイゼーション反応の「ストリンジェンシー」は当業者によって容易に決定でき、一般には、プローブの長さ、洗浄温度、および塩濃度に依存して経験的に計算される。一般には、より長いプローブは適切なアニーリングのためにより高い温度を必要とし、他方、より短いプローブはより低い温度を必要とする。ハイブリダイゼーションは、一般には、相補的なストランドがそれらの融解温度未満の環境に存在する場合、再アニールする変性ＤＮＡの能力に依存する。プローブおよびハイブリダイズ可能な配列の間の所望の相同性がより高ければ、用いることができる相対的温度はより高い。その結果、より高い相対的温度は、反応条件をよりストリンジェントにする傾向があり、他方、より低い温度はそうする傾向は低いことになる。ハイブリダイゼーション反応のストリンジェンシーのさらなる詳細および説明については、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｒａｒＢｉｏｌｉｇｙ，ＷｉｌｅｙＩｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ（１９９５）参照。

「ストリンジェントな条件」または「高ストリンジェンシー条件」は、本明細書中で定義されるように：（１）洗浄のための低イオン強度および高温、例えば、５０℃において０．０１５Ｍ塩化ナトリウム／０．００１５クエン酸ナトリウム／０．１％ドデシル硫酸ナトリウムを使用する；（２）ホルムアミドのような変性剤、例えば、４２℃において、０．１％ウシ血清アルブミン／０．１％Ｆｉｃｏｌｌ／０．１％ポリビニルピロニドン／７５０ｍＭ塩化ナトリウム、７５ｍＭクエン酸ナトリウムを含むｐＨの５０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液をハイブリダイゼーションの間に使用する；または（３）５５℃における０．２×ＳＳＣ（塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム）中の４２℃での洗浄、続いての、５５℃におけるＥＤＴＡを含有する０．１×ＳＳＣよりなる高−ストリンジェンシー洗浄と共に、５０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（０．７５ＭＮａＣｌ、０．０７５Ｍクエン酸ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ６．８）、０．１％ピロリン酸ナトリウム、５×デンハルト溶液、音波処理したサケ精子ＤＮＡ（５０μｇ／ｍｌ）、０．１％ＳＤＳ、および１０％レキストラン硫酸を４２℃で使用するものによって同定することができる。

「中程度にストリンジェントな条件」は、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｒａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，ＮｅｗＹｏｒｋ：ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｅｒＰｒｅｓｓ，１９８９によって記載されているように同定することができ、前記したものよりもストリンジェントでない洗浄溶液およびハイブリダイゼーション条件（例えば、温度、イオン強度および％ＳＤＳ）の使用を含む。中程度にストリンジェントな条件の例は、２０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ（１５０ｍＭＮａＣ１、１５ｍＭクエン酸三ナトリウム）、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７．６）、５×デンハルト溶液、１０％デキストラン硫酸、および２０ｍｇ／ｍｌ変性剪断サケ精子ＤＮＡを含む溶液中での３７℃での一晩のインキュベーション、続いての、約３７ないし５０℃で１×ＳＳＣにてフィルターを洗浄することである。当業者であれば、プローブの長さなどの因子に適合するのに必要な温度、イオン強度などをどのようにして調整するかを認識するであろう。

用語「エピトープタグ化（ｅｐｉｔｏｐｅｔａｇｇｅｄ）」は、本明細書中で用いる場合、「タグポリペプチド」に融合したＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを含むキメラポリペプチドを言う。タグポリペプチドは、それに対して抗体が作成できるエプトープを供するのに十分な残基を有するが、融合するポリペプチドの活性に干渉しないように十分に短い。タグポリペプチドは、好ましくは、抗体が他のエピトープと実質的に交差反応しないようにかなりユニークでもある。適当なタブポリペプチドは、一般には、少なくとも６つのアミノ酸残基、通常、約８および５０の間のアミノ酸残基（好ましくは、約１０および２０の間のアミノ酸残基）を有する。

ここでの目的で「活性な」または「活性」とは、天然または天然に生じるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの生物学的および／または免疫学的活性を保有するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの形態をいい、「生物学的」活性とは、天然または天然に生じるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドによって保有される抗原性エピトープに対する抗体の生産を誘導する能力以外の、天然または天然に生じるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドによって引き起こされる生物学的機能（阻害性または刺激性いずれか）をいい、「免疫学的」活性とは、天然または天然に生じるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドによって保有される抗原性エピトープに対する抗体の生産を誘導する能力をいう。

用語「アンタゴニスト」は［他に適しているものがなければ］最も広い意味で用いられ、本明細書中に開示された天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの生物学的活性を部分的にまたは十分にブロックし、阻害し、または中和するいずれの分子も含む。同様に、用語「アゴニスト」は［他に適しているものがなければ］最も広い意味で用いられ、本明細書中に開示された天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの生物学的活性を模倣するいずれの分子も含む。適当なアゴニストまたはアンタゴニスト分子は、具体的には、アゴニストまたはアンタゴニスト抗体、または抗体断片、天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、ペプチド、アンチセンスオリゴヌクレオチド、小有機分子などの断片、またはアミノ酸配列改変体を含む。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストを同定するための方法は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを候補アゴニストまたはアンタゴニスト分子と接触させ、ついで、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと通常は会合する１以上の生物学的活性の検出可能な変化を測定することを含むことができる。

「治療する」または「治療」または「軽減」とは、治療的処置および予防的または防止的尺度を共にいい、目的は標的化病理学的疾患または障害を妨げ、または遅延させる（少なくする）ことである。治療を必要とする対象は障害を既に有するものであってよく、あるいは障害を有する傾向があるものであってよく、あるいは障害が予防されるべきものであってよい。

「慢性的」投与とは、長期間にわたって初期治療効果（活性）を維持するような、急な様式とは反対に連続様式での剤の投与をいう。「間欠的」投与は、中断なくして連続的に行われないが、むしろ事実上周期的である処置である。

治療の目的での「哺乳動物」とは、ヒト、ラットまたはマウスなどのげっ歯類、家畜および農場動物、および動物園、スポーツ、または愛玩動物、例えばイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウサギなどを含めた哺乳動物として分類されるいずれの動物もいう。好ましくは、哺乳動物はヒトである。

１以上のさらなる治療剤「と組合せての」投与は、同時（同時期）およびいずれかの順番での順次の投与を含む。

本明細書中で用いる「担体」は、使用される用量および濃度においてそれに暴露される細胞または哺乳動物に対して非毒性である医薬上許容される担体、賦形剤または安定化剤を含む。しばしば、生理学上許容される担体は水性ｐＨ緩衝化溶液である。生理学上許容される担体の例はリン酸塩、クエン酸塩、および他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸を含めた抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロニドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリシンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含めた単糖類、二糖類および他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；マンニトールまたはソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの塩−形成対イオン；および／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、およびＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）などの非イオン性界面活性剤を含む。

「固相」とは、本発明の抗体が接着することができる非−水性マトリックスを意味する。ここに含まれる固相の例はガラス（例えば、制御孔ガラス）、多糖（例えば、アガロース）、ポリアクリルアミド、ポリスチレン、ポリビニルアルコールおよびシリコーンから部分的にまたは全部が形成されたものを含む。文脈に応じて、固相はアッセイプレートのウエルを含むことができ；他の場合には、精製カラム（例えば、アフィニティクロマトグラフィーカラム）である。この用語は、米国特許第４，２７５，１４９号に記載されるものなどの、別々の粒子の不連続な固相も含む。

「リポソーム」は、哺乳動物への（ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたはそれに対する抗体などの）薬物の送達で有用である、種々のタイプの脂質、リン脂質および／または界面活性剤から構成される小さなベシクルである。脂質の成分は、生物学的膜の脂質配置と同様に、二層形成において普通に配置される。

「小分子」は、本明細書中においては、約５００ダルトン未満の分子量を有すると定義される。

本明細書中に開示される、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチド、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストの「有効量」は、具体的に述べられた目的を行うのに十分な量である。「有効量」は、述べられた目的に関連して、経験的に、かつルーチン的手法で決定することができる。

用語「治療上有効量」とは、対象または哺乳動物において病気または傷害を「治療する」のに効果的な、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチド、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子、または他の薬物の量を言う。癌の場合には、薬物の治療上有効量は、癌細胞の数を低下させることができ；腫瘍のサイズを低下させることができ；末梢器官への癌細胞の浸潤を阻害することができ（すなわち、ある程度遅らせ、好ましくは、停止させることができ）；腫瘍の転移を阻害することができ（すなわち、ある程度遅らせ、好ましくは、停止させることができ）；腫瘍の成長をある程度阻害することができ、および／または癌に関連する１以上の徴候をある程度軽減することができる。「治療する」の本明細書中における定義を参照されたし。薬物が成長を妨げることができ、および／または存在する癌細胞を殺傷できることができる程度に、薬物は静細胞性および／または細胞傷害性であり得る。

語句「心血管、内皮および血管新生障害」、「心血管、内皮および血管新生機能不全」、「心血管、内皮または血管新生障害」および「心血管、内皮または血管新生機能不全」は、相互交換で使用され、そして糖尿病などの血管に影響を及ぼす全身性障害、並びに、動脈、毛細管、静脈および／またはリンパ腺のものなどのそれら自身の血管の疾病に部分的に該当する。これは、血管新生および／または心血管形成を刺激する指標、および血管新生および／または心血管形成を阻害するものを含む。このような障害は、例えば、アテローム性動脈硬化症、高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象、動脈瘤、および動脈再狭窄などの動脈疾患；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；および末梢血管疾患のような他の血管障害、血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポジ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌、腫瘍血管新生、創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再潅流障害、関節リウマチ、脳血管疾患、急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症が挙げられる。これは、狭心症、急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、およびＣＨＦのような心不全も含む。

「肥大」は、本明細書中で使用される場合、腫瘍形成に関与しない自然の成長から独立した臓器または構造の質量における増大として定義される。臓器または組織の肥大は、個々の細胞の質量における増大（真性肥大）か、または組織を作成する細胞の数における増大（肥大）のいずれかによるか、または両方による。心臓などの所定の臓器は、誕生の直後に分裂する能力を損なう。したがって、「心肥大」は、心臓の質量における増大として定義され、そしてそれは、成人では、随伴の細胞分裂なしに、心筋細胞サイズおよび収縮タンパク質含量での増大によって特徴付けられる。肥大（例えば、心筋の収縮でのような、前負荷の増大、後負荷の増大、心細胞の損失、または収縮の一次降下）を誘発する原因であるストレスの特徴は、応答の特性を決定する上での重要な役割を果たすように見える。心肥大の初期段階は、筋原線維およびミトコンドリアのサイズにおける増大によって、並びに、ミトコンドリアおよび核の拡大によって形態学で通常に特徴付けられる。この段階で、筋肉細胞は、正常より大きい一方で、細胞組織化がおおむね保存される。心肥大のさらに進んだ段階で、ミトコンドリアのような特定のオルガネラのサイズまたは数における優先的増大があり、そして新たな収縮性要素は、不規則な手段で、細胞の局在化領域に加えられる。長年の肥大の影響を受けている細胞は、非常に小葉の膜を有する際立って拡大した核を含めた、細胞の組織化でいっそう明らかな破壊を示し、そして、それは隣接の筋原線維を交換し、そして正常なＺ−バンド登録の崩壊を引起す。語句「心肥大」は、この症状の進行の全ての段階を含むために使用され、基本的な心臓障害にかかわらず、心筋の種々の程度の構造上の損傷によって特徴付けられる。したがって、その用語は、血圧上昇、大動脈狭窄、または心筋梗塞などの心肥大の発生できっかけとなる生理学的症状も含む。

「心不全」は、心臓が、代謝組織の必須要件として必要とされる心拍で血液を押し出さない心臓機能の異常性に該当する。心不全は、虚血性、先天性、リューマチ性、または特発性形態を含めた多数の要因によって引き起こされうる。

「先天性心不全」（ＣＨＦ）は、心臓が、酸素添加した血液を末梢組織に送達する適切な心臓放出量（時間に渡って心臓によって送り出される血液の体積）を供給することが徐々にできなくなる進行性病理学的状態である。ＣＨＦが進行した場合、構造および血液力学上の損傷が起こる。これらの損傷が、多様な徴候を示す一方で、１つの特徴的徴候は、心室肥大である。ＣＨＦは、多数の様々な心臓障害の共通の最終結果である。

「心筋梗塞」は、一般に、しばしば冠状血栓を追加して伴って、冠状動脈のアテローム硬化症から生じる。それは、２つの主要な型に分けることができる：心筋壊死が、心室壁の全厚み巻き込む経壁梗塞、および壊死が、心室壁を通って心外膜までの全ての経路に拡大することなく、心内膜下、壁内心筋層、または両方を包み込む心内膜下（非経壁）梗塞。心筋梗塞は、心臓の損傷を受けた領域と健全な領域とに、血液力学的効果における変化と、構造における変動との両方を引き起こすことが知られている。したがって、例えば、心筋梗塞は、最大心臓排出量、そして心臓の脈拍量を減らす。さらに、心筋梗塞に関連しているのは、ある間隔で起こるＤＮＡ合成の刺激、および影響を受けなかった心臓の領域におけるコラーゲンの形成における増大である。

例えば、総末梢抵抗が増大したことによる長期化した高血圧で、心臓にかかるストレスまたは圧縮が増大した結果として、心肥大は、長年「高血圧」に関連してきた。慢性圧力過剰負荷の結果として肥大する心室の特徴は、拡張期作用が損傷を受けていることである。Ｆｏｕａｄら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．４巻：１５００−１５０６頁（１９８４年）；Ｓｍｉｔｈら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｏｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌ．５巻：８６９−８７４頁（１９８５年）。長期化した左心室弛緩は、正常またはより正常な機能にもかかわらず、初期の本態性高血圧で検出された。Ｈａｒｔｆｏｒｄら、Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ，６巻：３２９−３３８頁（１９８４年）。しかし、血圧レベルと心肥大との間に密接な類似はない。降圧剤療法に応答した左心室機能における改善は、ヒトで報告されているが、利尿剤（ヒドロクロロチアジン）、β−遮断薬（プロパノロル）、またはカルシウムチャネル遮断薬（ジルチアゼム）を用いて多様に処置された患者は、拡張期機能における改善なしに、左心室肥大の反転を示した。Ｉｎｏｕｙｅら、Ａｍ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ．、５３巻：１５８３−７頁（１９８４年）。

心肥大に関連した別の複雑な心臓疾患は、「肥大性心筋症」である。この症状は、非常に多様な形態学、機能および医療上の特性（Ｍａｒｏｎら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３１６巻：７８０−７８９頁（１９８７年）；Ｓｐｉｒｉｔｏら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２０巻：７４９−７５５頁（１９８９年）；ＬｏｕｉｅおよびＥｄｗａｒｄｓ、Ｐｒｏｇ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｄｉｓ．、３６巻：２７５−３０８頁（１９９４年）；Ｗｉｇｌｅら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、９２巻：１６８０−１６９２頁（１９９５年））、それが全ての年齢の患者を悩ますという事実によって強調される不均質性によって特徴付けられる。Ｓｐｉｒｉｔｏら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３３６巻：７７５−７８５頁（１９９７年）。肥大性心筋症の病因因子も多様であり、そしてほとんど分かっていない。一般に、肉腫タンパク質をコードする遺伝子における突然変異は、肥大性心筋症に関連している。最近のデータは、β−ミオシン重鎖突然変異が、家族性肥大性心筋症の症例の内のおよそ３０から４０パーセントまでを占める可能性があることを示唆している。Ｗａｔｋｉｎｓら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．、３２６巻：１１０８−１１１４頁（１９９２年）；Ｓｃｈｗａｒｔｚら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、９１巻：５３２−５４０頁（１９９５年）；ＭａｒｉａｎおよびＲｏｂｅｒｔｓ、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ、９２巻：１３３６−１３４７頁（１９９５年）；Ｔｈｉｅｒｆｅｌｄｅｒら、Ｃｅｌｌ；７７巻：７０１−７１２頁（１９９４年）；Ｗａｔｋｉｎｓら、Ｎａｔ．Ｇｅｎ．、１１巻：４３４−４３７頁（１９９５年）。β−ミオシン重鎖以外に、遺伝学的突然変異の他の位置としては、心臓トロポニンＴ、アルファ・トポミオシン、心臓ミオシン結合タンパク質Ｃ、必須ミオシン軽鎖、および制限ミオシン軽鎖が挙げられる。ＭａｌｉｋおよびＷａｔｋｉｎｓ、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃａｒｄｉｏｌ．．１２巻：２９５−３０２頁（１９９７年）を参照。

弁上の「大動脈狭窄」は、上行大動脈の狭窄によって特徴付けられる遺伝した血管障害であるが、しかし肺動脈を含めた他の動脈も影響を受けうる。未処置の大動脈狭窄は、心臓内圧が増大され、そして心肥大、そして最終的に、心不全および死亡を生じうる。この障害の病因は十分には理解されていないが、しかし医療上の平滑筋の肥大、そしておそらく過形成は、この障害の突出した特性である。エラスチン遺伝子の分子変異株は、大動脈狭窄の発生および病因誘発に関与していることが報告されている。１９９７年７月２２日に公告された米国特許番号第５、６５０、２８２号。

「弁の逆流」は、心臓疾患の結果として起こり、そして心臓弁の障害を生じる。リューマチ熱のような種々の疾患は、弁の開口部の収縮または引伸ばしを引き起こす一方で、他の疾患は、心内膜炎、房室口の心内膜または内層膜の炎症、および心臓の手術の結果を生じる。弁狭窄の狭まり、または弁の欠陥のある閉鎖などの欠陥は、心臓腔中の血液の蓄積、または弁を通過する血液の逆流を生じる。修正されなければ、長期化した弁狭窄または機能不全は、心肥大および心筋に関連した損傷を生じる可能性があり、そしてそれは、最終的に弁交換を必要とする可能性がある。

用語「免疫関連疾患」は、哺乳類の免疫系の成分が、哺乳類における病的状態を引き起こすか、介在するか、またはそうでなければ寄与する疾患を意味する。さらに含まれるのは、免疫応答の刺激または介入が、疾患の進行に改善効果を示す疾患である。この用語に含まれるのは、免疫介在炎症性疾患、非免疫介在炎症性疾患、感染性疾患、免疫不全疾患、新生物形成などである。

用語「Ｔ細胞介在疾患」は、Ｔ細胞が、哺乳類における病的状態を直接または間接的に介在するか、またはそうでなければ寄与する疾患を意味する。Ｔ細胞介在疾患は、細胞介在効果、リンホカイン介在効果などと、そして例えばＴ細胞によって分泌されるリンホカインによりＢ細胞が刺激される場合、Ｂ細胞と関連した効果とさえ関連する可能性がある。

免疫性および炎症性疾患の例としては、そのいくつかは、免疫性またはＴ細胞性であり、そして全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、若年性慢性関節炎、脊椎関節症、全身性硬化症（強皮症）、特発性炎症性筋疾患（皮膚筋炎、多発性筋炎）、シェーグレン症候群、全身血管炎、サルコイドーシス、自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿症）、自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）、甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状腺炎、若年性リンパ球性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）、糖尿病、免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発ニューロパシーまたはギヤン・バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシーのような中枢または末梢神経系の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫性慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性大腸炎：クローン病）、グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水疱性皮膚疾患、多形紅斑および接触性皮膚炎を含めた自己免疫性または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性肺線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的疾患；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患；ＡＩＤＳ（ＨＩＶ感染）、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型およびＥ型肝炎、ヘルペス、などのウイルス性疾患を含めた感染性疾患；細菌感染、真菌感染、原虫感染および寄生虫感染が挙げられる。

ここで「自己免疫性疾患」は、個人自身の組織または臓器またはそれの共同分離または徴候またはそれから生じる症状から生じ、そしてそれに対して指向される疾病または障害である。これらの自己免疫および炎症性障害の多くの内、それに限定されないが、過剰ガンマグロブリン血症、高レベルの自己抗体、組織における抗原−抗体複合体沈着物、コルチコステロイドまたは免疫抑制療法からの恩恵、および影響を受けた組織におけるリンパ球細胞凝集物を含めた多数の臨床用および実験室用マーカーが存在しうる。Ｂ細胞介在自己免疫疾患に関するいずれか１つの推測に限定されることなく、Ｂ細胞は、自己抗体産生、免疫複合体形成、歯の発生およびＴ細胞活性化、サイトカイン合成、直接ケモカイン放出を含めた複数の機構経路を通したヒト自己免疫疾患における病因影響を示すと考えられ、そして転位性新生リンパ球形成のための病巣を供する。これらの経路の各々は、自己免疫疾患の病因に様々な程度まで関与しうる。

「自己免疫性疾患」は、臓器特異的疾患（すなわち、免疫応答は、エンドクリン系、造血系、皮膚、心肺系、胃腸および肝臓系、腎臓系、甲状腺、耳、神経筋肉系、中枢神経系などの臓器系に対して特異的に指示される）または複数の臓器系に影響を及ぼす全身性疾患（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ、多発性筋炎、など）でありうる。好ましいこのような疾患としては、自己免疫リウマチ疾患（例えば関節リウマチ、シェーグレン症候群、強皮症；ＳＬＥおよびループス腎炎などのループス；多発性筋炎／皮膚筋炎、クリオグロブリン血症、抗リン脂質抗体症候群、および乾癬性関節炎）、自己免疫性胃腸および肝障害（例えば、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎およびクローン病）、自己免疫性胃炎および悪性貧血、自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、およびセリアック病など）、血管炎（例えば、チャーグーストラウス血管炎、ヴェゲナー肉芽腫症、および多発動脈炎を含めたＡＮＣＡ関連血管炎など）、自己免疫性神経障害（例えば、多発性硬化症、眼球クローヌスミオクローヌス症候群、重症筋無力症、視神経脊髄炎、パーキンソン病、アルツハイマー病、および自己免疫性多発ニューロパシーなど）、腎障害（例えば、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、およびベルガー病など）、自己免疫性皮膚疾患（例えば、乾癬、皮膚の掻痒、蕁麻疹、尋常性天疱瘡、水疱性類天疱瘡、および皮膚エリテマトーデスなど）、血液疾患（例えば、血小板減少性紫斑病、血栓性血小板減少性紫斑病、輸血後紫斑、および自己免疫性溶血性貧血など）、アテローム性動脈硬化症、ブドウ膜炎、自己免疫性聴覚疾患（例えば、内耳疾患および難聴など）、ベーチェット病、レイノー症候群、臓器移植、および自己免疫性内分泌障害（例えば、インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）、アジソン病、および自己免疫性甲状腺疾患（例えば、グレーブス病および甲状腺炎）などの糖尿病性関連の自己免疫性疾患など）が挙げられる。さらに好ましいこのような疾患としては、例えば、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎、ＡＮＣＡ関連血管炎、ループス、多発性硬化症、シェーグレン症候群、グレーブス病、ＩＤＤＭ、悪性貧血、甲状腺炎、および糸球体腎炎が挙げられる。

いくつかの例では、上に列挙されるものを包含する、ここに定義される場合他の自己免疫性疾患の特定の例としては、それに限定されないが、関節炎（リウマチ様滑膜炎、痛風または痛風性関節炎などの若年性関節リウマチおよび段階を含めた急性および慢性の関節リウマチ、急性免疫性関節炎、慢性炎症性関節炎、変性性関節炎、ＩＩ型コラーゲン誘発性関節炎、感染性関節炎、ライム関節炎、増殖性関節炎、乾癬性関節炎、スチル病、脊椎関節炎、骨関節炎、慢性進行性関節炎、変形性関節炎、慢性原発性多発性関節炎、反応性関節炎、閉経期関節炎、エストロゲン欠乏関節炎、および強直性脊椎炎／リウマチ性脊椎炎）、自己免疫性リンパ増殖性疾患、炎症性過剰増殖性皮膚疾患；プラーク乾癬、滴状乾癬、膿疱性乾癬、および爪乾癬などの乾癬；枯草熱およびヨブ症候群などのアトピー性疾患を含めたアトピー；接触性皮膚炎、慢性接触性皮膚炎、剥脱性皮膚炎、アレルギー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、蕁麻疹、疱疹状皮膚炎、貨幣状皮膚炎、脂漏性皮膚炎、非特異性皮膚炎、原発性刺激性接触皮膚炎、およびアトピー性皮膚炎を含めた皮膚炎；Ｘ連鎖高ＩｇＭ症候群、アレルギー眼内炎症性疾患；慢性自己免疫性蕁麻疹を含めた慢性アレルギー性蕁麻疹および慢性特発性蕁麻疹などの蕁麻疹；筋炎、多発性筋炎／皮膚筋炎、若年性皮膚筋炎、中毒性表皮壊死融解症、強皮症（全身性強皮症を含む）、全身性硬化症などの硬化症、スピノ視神経多発性硬化症（ＭＳ）、一次進行型ＭＳ（ＰＰＭＳ）、および再発寛解型ＭＳ（ＲＲＭＳ）などの多発性硬化症（ＭＳ）、進行性全身性硬化症、アテローム性動脈硬化症、動脈硬化症、播種性硬化症、失調性硬化症、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）（例えば、クローン病、自己免疫性胃腸疾患、胃腸の炎症；潰瘍性大腸炎、潰瘍性大腸（結腸）炎、顕微鏡的大腸炎、コラーゲン性大腸炎、ポリープ性大腸炎、壊死性腸炎、および貫壁性大腸炎などの大腸炎；および自己免疫性炎症性腸疾患）、腸炎、壊疽性膿皮症、結節性紅斑、原発性硬化性胆管炎、成人または急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を含めた呼吸窮迫症候群、髄膜炎、ブドウ膜の全部または一部の炎症、虹彩炎、脈絡膜炎、自己免疫性血管疾患、移植片対宿主病、遺伝性血管浮腫などの血管浮腫、髄膜炎でのような頭側神経障害、妊娠ヘルペス、妊娠性類天疱瘡、陰嚢そう痒症、自己免疫性早期卵巣機能不全、自己免疫症状による突発難聴、アナフィラキシーおよびアレルギー性およびアトピー性鼻炎などのＩｇＥ介在性疾患；ラスミュンゼン脳炎および辺縁系および／または脳幹脳炎などの脳炎；前部ブドウ膜炎、急性前部ブドウ膜炎、肉芽腫性ブドウ膜炎、非肉芽腫性ブドウ膜炎、水晶体抗原性ブドウ膜炎、後部ブドウ膜炎、または自己免疫性ブドウ膜炎などのブドウ膜炎；原発性ＧＮ、免疫性ＧＮ、膜性ＧＮ（膜性腎症）、特発性膜性ＧＮまたは特発性膜性腎症などの慢性または急性糸球体腎炎などのネフローゼ症候群を伴うか、または伴わない糸球体腎炎（ＧＮ）；Ｉ型およびＩＩ型を含めた膜性または膜増殖性ＧＮ（ＭＰＧＮ）、および急速進行性ＧＮ（ＲＰＧＮ）、増殖性腎炎、自己免疫性多腺性内分泌不全症、形質細胞限局性亀頭炎を含めた亀頭炎、亀頭包皮炎、遠心性環状紅斑、色素異常性固定紅斑、多形性紅斑、環状肉芽腫、光沢苔癬、硬化性萎縮性苔癬、慢性単純性苔癬、棘状苔癬、扁平苔癬、層状魚鱗癬、表皮溶解性角化症、前癌性角化症、壊疽性膿皮症、アレルギー状態および応答、食物アレルギー、薬物アレルギー、昆虫アレルギー、肥満細胞症などの稀なアレルギー疾患、アレルギー反応；アレルギー性またはアトピー性湿疹、皮脂欠乏性湿疹、異汗性湿疹、および水疱性掌蹠湿疹を含めた湿疹；気管支喘息、気管支喘息、および自己免疫性喘息などの喘息；Ｔ細胞の浸潤および慢性炎症性反応に関与する症状；妊娠中の胎児Ａ−Ｂ−Ｏ血液型群などの異種抗原に対する免疫反応、慢性炎症性肺疾患、自己免疫性心筋炎、白血球接着不全症；ループス腎炎、ループス脳炎、小児ループス、非腎臓ループス、腎外ループス、円板状エリテマトーデスおよび円板状紅斑性狼瘡、脱毛狼瘡、皮膚型ＳＬＥまたは亜急性皮膚型ＳＬＥなどのＳＬＥ、新生児狼瘡症候群（ＮＬＥ）、および播種状紅斑性狼瘡を含めたループス；小児ＩＤＤＭを含めた若年性（Ｉ型）糖尿病、成人発症糖尿病（ＩＩ型糖尿病）、自己免疫性糖尿病、特発性尿崩症、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症、糖尿病性大腸炎、糖尿病性大血管障害、サイトカインおよびＴ−リンパ球によって介在される急性および遅延型過敏症に関連した免疫応答、結核、サルコイドーシス、リンパ腫様肉芽腫症、ヴェゲナー肉芽腫症、無顆粒球症を含めた肉芽腫症；血管炎、大血管血管炎（リウマチ性多発筋痛および巨細胞（高安）動脈炎を含めた）、中血管炎（川崎病および結節性多発動脈炎／結節性動脈周囲炎を含めた）、顕微鏡的多発動脈炎、免疫性血管炎、ＣＮＳ血管炎、皮膚血管炎、過敏性血管炎、全身性壊死性血管炎などの壊死性血管炎、および、チャーグーストラウス血管炎または症候群（ＣＳＳ）およびＡＮＣＡ関連の小血管血管炎などのＡＮＣＡ関連血管炎を含めた脈管炎；側頭動脈炎、再生不良性貧血、自己免疫性再生不良性貧血、クームズ陽性貧血、ダイアモンドブラックファン貧血、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）、悪性貧血（悪性貧血）、アジソン病、赤芽球貧血または赤芽球癆（ＰＲＣＡ）、第ＶＩＩＩ因子欠乏症、血友病Ａ、自己免疫性好中球減少症（ｓ）を含めた溶血性貧血または免疫溶血性貧血；汎血球減少症などの血球減少症、白血球減少症、白血球の血管外遊出に関与する疾患、ＣＮＳ炎症性障害、アルツハイマー病、パーキンソン病；敗血症、外傷または出血に二次的なものなどの多臓器損傷症候群；抗原抗体複合体介在性疾患、抗糸球体基底膜疾患、抗リン脂質抗体症候群、運動神経炎、アレルギー性神経炎、ベーチェット病／症候群、キャスルマン症候群、グッドパスチャー症候群、レイノー症候群、シェーグレン症候群、スティーブンス・ジョンソン症候群、水疱性類天疱瘡および皮膚類天疱瘡などの類天疱瘡、天疱瘡（尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、粘膜類天疱瘡、および紅斑性天疱瘡を含めて）、自己免疫性多腺性内分泌障害、ライター病または症候群、自己免疫症状による熱損傷、子癇前症；免疫複合体性腎炎などの免疫複合体病、抗体惹起性腎炎、神経炎症疾患、多発ニューロパシー、ＩｇＭポリニューロパシーまたはＩｇＭ介在性ニューロパシーなどの慢性ニューロパシー、血小板減少症（例えば、心筋梗塞患者によって発生されるような）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、輸血後紫斑（ＰＴＰ）、ヘパリン起因性血小板減少症、および、例えば慢性または急性ＩＴＰを含めた特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）を含めた自己免疫性または免疫性血小板減少症、特発性角膜−強膜炎、上強膜炎、自己免疫性精巣炎および卵巣炎を含めた精巣および卵巣の自己免疫性疾患などの強膜炎、原性甲状腺機能低下症、副甲状腺機能低下症、自己免疫性甲状腺炎、橋本甲状腺炎、慢性甲状腺炎（橋本病）、または亜急性甲状腺炎などの甲状腺炎、自己免疫性甲状腺疾患、特発性甲状腺機能低下症、グレーブス病、自己免疫多腺症候群、例えばＩ型（または多腺内分泌障害症候群）の多腺症候群を含めた自己免疫性内分泌疾患；ランバート−イートン筋無力症候群またはイートン・ランバート症候群などの神経学的腫瘍随伴症候群を含めた腫瘍随伴症候群；スティフマンまたはスティフパーソン症候群；アレルギー性脳脊髄炎またはアレルギー性脳脊髄炎および実験的アレルギー性脳脊髄炎（ＥＡＥ）などの脳脊髄炎、胸腺腫関連の重症筋無力症などの重症筋無力症、小脳変性症、神経ミオトニー、眼球クローヌスまたは眼球クローヌスミオクローヌス症候群（ＯＭＳ）、および感覚ニューロパシー、多巣性運動ニューロパシー、シーハン症候群、自己免疫性肝炎、慢性肝炎、ルポイド肝炎、巨細胞性肝炎、慢性活動性肝炎または自己免疫性慢性活動性肝炎、リンパ球性間質性肺臓炎（ＬＩＰ）、閉塞性細気管支炎（非移植）対ＮＳＩＰなどの肺炎；ギヤン・バレー症候群、ベルガー病（ＩｇＡ腎症）、特発性ＩｇＡ腎症、リニアＩｇＡ皮膚症、急性熱性好中球性皮膚症、角層下膿疱性皮膚症、一過性棘融解性皮膚症、原発性胆汁性肝硬変などの肝硬変、および肺硬変；自己免疫性長疾患症候群、セリアックまたはコエリアック病、セリアックスプルー（グルテン腸症）、難治性スプルー、特発性スプルー；混合性クリオグロブリン血症などのクリオグロブリン血症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ；ルー・ゲーリク病）、冠動脈疾患；自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、自己免疫性難聴などの自己免疫性耳疾患；難治性または再発または再発性多発性軟骨炎などの多発性軟骨炎；肺胞タンパク症、コーガン症候群／非梅毒性角膜実質炎、ベル麻痺、スイート病／症候群、自己免疫性酒さ、帯状疱疹関連の疼痛、アミロイドーシス、非癌性リンパ球増加症；モノクローナルＢ細胞リンパ球増加症（例えば、良性単クローン性免疫グロブリン血症および意義不明の単クローン性免疫グロブリン血症、ＭＧＵＳ）を含めた原発性リンパ球増加症；末梢ニューロパシー、腫瘍随伴症候群；てんかん、片頭痛、不整脈、筋疾患、難聴、失明、周期性麻痺、およびＣＮＳのチャネル病などのチャネル病；自閉症、炎症性ミオパシー、巣状または分節状または巣状分節状糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）、内分泌性眼症、ぶどう膜網膜炎、脈絡網膜炎、自己免疫性肝臓疾患、線維筋痛、多発性内分泌腺不全症、シュミット症候群、副腎炎、胃萎縮、初老期認知症；自己免疫性脱髄疾患および慢性炎症性脱髄性多発ニューロパシーなどの脱髄疾患、ドレスラー症候群、円形脱毛症、全頭脱毛症、クレスト症候群（石灰沈着症、レイノー現象、食道運動障害、手指硬化症、および毛細血管拡張症）、例えば、抗精子抗体による男性および女性自己免疫性不妊症、混合性結合組織病、シャーガス病、リウマチ熱、反復流産、農夫肺、多形紅斑、心臓切開術後症候群、クッシング症候群、鳥飼病、アレルギー性肉芽腫性血管炎、良性リンパ球性血管炎、アルポート症候群；アレルギー性胞隔炎および線維化性胞隔炎のような胞隔炎、間質性肺疾患、輸血反応、ハンセン病、マラリア、リーシュマニア症、トリパノソーマ症、住血吸虫症、回虫症、アスペルギルス症、サムター症候群、カプラン症候群、デング熱、心内膜炎、心内膜心筋線維症、びまん性間質性肺線維症、間質性肺線維症、線維化性縦隔炎、肺線維症、特発性肺線維症、嚢胞性線維症、眼内炎、持久性隆起性紅斑、胎児赤芽球症、好酸球性筋膜炎、Ｓｈｕｌｍａｎ症候群、フェルティ症候群、フィラリアなどの寄生虫症；慢性毛様体炎、ヘテロクロニック毛様体炎、虹彩毛様体炎（急性または慢性）、またはＦｕｃｈｓ毛様体炎などの毛様体炎；ヘノッホ・シェンライン紫斑病、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）感染、ＳＣＩＤ、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、エコーウイルス感染、敗血症（全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ））、内毒素血症、膵炎、甲状腺中毒、パルボウイルス感染、風疹ウイルス感染、ワクチン接種後症候群、先天性風疹感染、エプスタイン・バーウイルス感染、ムンプス、エヴァンズ症候群、自己免疫性腺機能不全、シデナム舞踏病、溶連菌感染後腎炎、血栓血管炎オビテランス（ｕｂｉｔｅｒａｎｓ）、甲状腺中毒症、脊髄癆、脈絡膜炎、巨細胞性多発性筋痛、慢性過敏性肺炎；春季カタル、乾性角結膜炎、および流行性角結膜炎のような結膜炎、特発性腎炎症候群、微少変化型腎症、良性家族性および虚血再潅流障害、移植臓器再灌流、網膜自己免疫性、関節の炎症、気管支炎、慢性閉塞性気道／肺疾患、珪肺症、アフタ、アフタ性口内炎、動脈硬化性脳症および動脈硬化性網膜症などの動脈硬化性疾患（脳血行不全）、無精子症、自己免疫性溶血、ベック病、クリオグロブリン血症、デュプイトラン拘縮、水晶体過敏性眼内炎、アレルギー性小腸炎、癩性結節性紅斑、特発性顔面麻痺、慢性疲労症候群、リウマチ熱、ハンマンリッチ症候群、感覚神経性難聴、発作性ヘモグロビン尿、性腺機能低下、限局性回腸炎、白血球減少症、感染性単核球症、横断性脊髄炎、原発性特発性粘液水腫、ネフローゼ、交感神経性眼炎、肉芽腫性

精巣炎、膵炎、急性多発神経根炎、壊疽性膿皮症、ド・ケルヴァン甲状腺炎、後天性脾臓萎縮、非悪性胸腺腫、リンパ濾胞性胸腺炎、尋常性白斑、中毒性ショック症候群、食中毒、Ｔ細胞の浸潤に関与する症状、白血球接着不全症、サイトカインおよびＴ−リンパ球に介在される急性および遅延型過敏症に関連した免疫反応、白血球の血管外遊出に関与する疾患、多臓器損傷症候群、抗原抗体複合体介在性疾患、抗糸球体基底膜疾患、自己免疫性多腺性内分泌障害、卵巣炎、原発性粘液水腫、自己免疫性萎縮性胃炎、交感性眼炎、リウマチ性疾患、混合性結合組織病、ネフローゼ症候群、膵島炎、多腺性内分泌不全症、多腺性症候群Ｉ型を含めた自己免疫性多腺性症候群、成人発症特発性副甲状腺機能低下症（ＡＯＩＨ）、拡張型心筋症などの心筋症、後天性表皮水疱症（ＥＢＡ）、ヘモクロマトーシス、心筋炎、ネフローゼ症候群、原発性硬化性胆管炎、化膿性または非化膿性副鼻腔炎、急性または慢性副鼻腔炎、篩骨、前頭、上顎、またはちょう形副鼻腔炎、アレルギー性副鼻腔炎、好酸球増加症などの好酸球関連障害、肺浸潤好酸球増加症、好酸球増加症−筋痛症候群、ロフラー症候群、慢性好酸球性肺炎、熱帯性肺好酸球増多症、気管支肺アスペルギルス症、アスペルギローム、または肉芽腫含有好酸球、アナフィラキシー、脊椎関節症、血清反応陰性脊椎関節炎、自己免疫性多腺性症、硬化性胆管炎、強膜、上強膜、慢性粘膜皮膚カンジダ症、ブルトン症候群、小児一過性低グロブリン血症、ウィスコット・オルドリック症候群、毛細血管拡張運動失調症候群、血管拡張、膠原病に関連した自己免疫障害、慢性関節リウマチなどのリウマチ、リンパ節炎、血圧反応低下、血管機能不全、組織損傷、心血管虚血、痛覚過敏、腎虚血、脳虚血、および脈管化を随伴する疾患、アレルギー性過敏症、糸球体腎炎、再潅流障害、虚血再灌流障害、心筋またはその他の組織の再潅流障害、リンパ腫性気管支炎、炎症性皮膚疾患、急性炎症性成分を伴う皮膚疾患、多臓器不全、水疱性疾患、腎皮質壊死、急性化膿性髄膜炎または他の中枢神経系の炎症性障害、眼内および眼窩の炎症性障害、顆粒球輸血関連の症候群、サイトカイン誘発性毒性、ナルコレプシー、急性重症炎症、慢性難治性炎症、腎盂炎、動脈内膜過形成、消化性潰瘍、弁膜炎、および子宮内膜症が挙げられる。

語句「不安関連障害」は、不安、気分、および物質乱用の障害に該当し、それに限定されないが、：欝病、全般性不安障害、注意欠陥障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害が挙げられる。このような障害としては、軽度から中等度の不安、身体疾患による不安障害、特定されない不安障害、全般性不安障害、パニック発作、広場恐怖を伴うパニック障害、広場恐怖を伴わないパニック障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、社会不安、自閉症、特定の恐怖症、物質誘発性不安障害、急性アルコール離脱症候群、強迫性障害、広場恐怖症、単極性障害、双極性障害ＩまたはＩＩ型、特定されない双極性障害、気分循環性障害、欝病性障害、大欝病性障害、気分障害、物質誘発性気分障害、認知機能の亢進；それに限定されないがアルツハイマー病、卒中発作、または脳外傷に関連した認知機能の喪失；それに限定されないが、てんかん、学習障害／疾患、脳性麻痺を含めた疾患または損傷から生じる発作が挙げられる。さらに、不安障害は、以下の型を含めた人格障害に当たりうる：妄想性、反社会型、回避性、境界性、依存性、演技性、自己愛性、強迫性、統合失調質、および統合失調症性。

用語「脂質代謝障害」は、コレステロールおよびトリグリセリドの異常な医療化学的レベルに該当し、これらの脂質のレベルの上昇は、アテローム性動脈硬化症についての指標である。さらに、異常な血清脂質濃度は、高血圧、卒中発作、冠動脈疾患、糖尿病および／または肥満を含めた種々の心臓血管疾患の指標でありうる。

語句「眼の異常」は、アテローム性動脈硬化症または種々の眼科学的異常に関連しうる場合、眼のこのような潜在的障害に該当する。このような障害は、それに限定されないが、以下のものを含む：網膜異形成、種々の網膜症、再狭窄、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離症、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニアーロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端骨異形成症、フリン−エアード症候群、フリーデリッヒ失調症、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエールーマリー・ダンスドローム（Ｐｉｅｒｒｅ−Ｍａｒｉｅｄｕｎｓｄｒｏｍｅ）、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラム症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無βリポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿、またはマンノシドーシス。白内障も、眼の異常とみなされ、そしてのような全身性疾患と関連している：ヒトダウン症候群、ハレルマンーストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、甲状腺機能低下症、またはコンラディ症候群。他の眼の発生異常は、無虹彩症、前眼部および発育不全症候群を含む。白内障は、眼内感染または炎症（ブドウ膜炎）の結果としても起こりうる。

抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチドまたはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子の「成長阻害量」は、細胞、特に腫瘍、例えば、癌細胞をイン・ビトロまたはイン・ビボいずれかで阻害することができる量である。新形成細胞の成長を阻害する目的での抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチドまたはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子の「成長阻害量」は、経験的に、かつルーチン的手法で決定することができる。

抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチドまたはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子の「細胞傷害性量」は、細胞、特に腫瘍、例えば、癌細胞の破壊をイン・ビトロまたはイン・ビボいずれかで引き起こすことができる量である。新形成細胞成長を阻害する目的での抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチドまたはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子の「細胞傷害性量」は、経験的に、かつルーチン的手法で決定することができる。

用語「抗体」は、最も広い意味で用いられ、具体的には、それらが所望の生物学的または免疫学的活性を呈する限りは、具体的には、例えば、単一の抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体モノクローナル抗体（アゴニスト、アンタゴニスト、および中和抗体を含む）、ポリエピトープ特異性を持つ抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体組成物、ポリクローナル抗体、単一鎖抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体、および抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体の断片（後記参照）をカバーする。用語「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書中においては抗体と相互交換可能に用いられる。

「単離された抗体」は、その天然環境の成分から同定され、および分離され、および／または回収されたものである。その天然環境の汚染成分は、抗体についての診断的または治療的使用に干渉する物質であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性溶質を含むことができる。本発明は、抗体を（１）Ｌｏｗｒｙ方法によって判断して抗体の９５重量％を超えるまで、最も好ましくは、９９重量％を超えるまで、（２）スピニングカップセケネーターの使用によってＮ−末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５残基を得るのに十分な程度まで、または（３）クーマシーブルー、好ましくは、銀染色を用いて、還元または非還元条件下で、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均質となるまで精製することを提供する。単離された抗体は組換え細胞内にイン・サイチュの抗体を含む。というのは、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分は存在しないであろうからである。しかしながら、通常、単離された抗体は少なくとも１つの精製工程によって調製し得る。

基本的な４−鎖抗体ユニットは、２つの同一の軽（Ｌ）鎖および２つの重（Ｈ）鎖から構成されるヘテロテトラマー糖タンパク質である（ＩｇＭ抗体は、Ｊ鎖と呼ばれるさらなるポリペプチドと共に基本的なヘテロテトラマーユニットの５よりなり、従って、１０の抗原結合部位を含有し、他方、分泌されたＩｇＡ抗体は、重合して、Ｊ鎖と共に基本的な４−鎖ユニットの２ないし５を含む多価組立体を形成することができる）。ＩｇＧの場合には、４−鎖ユニットは、一般には約１５０，０００ダルトンである。各Ｌ鎖は１つのジスルフィド共有結合によってＨ鎖に連結され、他方２つのＨ鎖は、Ｈ鎖のイソタイプに応じて、１以上のジスルフィド結合によって相互に連結される。各ＨおよびＬ鎖は規則的に間隔が設けられた鎖内ジスルフィドブリッジも有する。各Ｈ鎖は、Ｎ−末端において、可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）、続いてαおよびγ鎖の各々については３つの定常ドメイン（Ｃ_Ｈ）、ならびにμおよびεイソタイプについては４つのＣ_Ｈドメインを有する。各Ｌ鎖は、Ｎ−末端において、可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）、続いてその他端における定常ドメイン（Ｃ_Ｌ）を有する。Ｖ_ＬはＶ_Ｈと整列し、Ｃ_Ｌは重鎖の最初の定常ドメイン（Ｃ_Ｈ１）と整列する。特定のアミノ酸残基は、軽鎖および重鎖可変ドメインの間で界面を形成すると考えられる。Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌが一緒になった対合は、単一の抗原−結合部位を形成する。抗体の異なるクラスの構造および特性については、例えば、ＢａｓｉｃａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，ＤａｎｉｅｌＰ．Ｓｔｉｔｅｓ，ＡｂｂａＩ．ＴｅｒｒａｎｄＴｒｉｓｔｒａｍＧ．Ｐａｒｓｌｏｗ（ｅｄｓ．），Ａｐｐｌｅｔｏｎ＆Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４年、７１頁および６章参照。

いずれの脊椎動物種からのＬ鎖も、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパおよびラムダと呼ばれる２つの明瞭に区別されるタイプの１つに帰属させることができる。それらの重鎖（Ｃ_Ｈ）の定常ドメインのアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは異なるクラスまたはイソタイプに帰属させることができる。各々、α、δ、ε、γおよびμと命名される重鎖を有する免疫グロブリンの５つのクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭがある。γおよびαクラスは、Ｃ_Ｈ配列および機能の比較的重要でない差に基づいて、さらにサブクラスに分けられ、例えば、ヒトは以下のサブクラス；ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２を発現する。

用語「可変」とは、可変ドメインのある種のセグメントが抗体の中でかなり異なる事実をいう。Ｖドメインは抗原の結合を媒介し、その特定の抗原に対する特定の抗体の特異性を規定する。しかしながら、可変性は、可変ドメインの１１０−アミノ酸スパンにわたって均等に分布しない。代わりに、Ｖ領域は、各々９ないし１２アミノ酸長である「超可変領域」と呼ばれる極端な可変性のより短い領域によって分離された１５ないし３０アミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる比較的不変のストレッチよりなる。天然の重鎖および軽鎖の可変ドメインは、各々、３つの超可変領域によって連結されたβ−シート立体配座を大いに導入する４つのＦＲを含み、これは、β−シート構造を連結するループを形成し、ある場合には、β−シート構造の一部を形成するループを形成する。各鎖における超可変領域はＦＲによって近接して一緒に保持され、他の鎖からの超可変領域と共に抗体の抗原−結合部位の形成に寄与する。（Ｋａｂａｔｅｔａｌ．，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈＥｄ．ＰｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＳｅｒｖｉｃｅ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１年）参照）。定常ドメインは抗原に対する抗体の結合には直接的に関与しないが、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）における抗体の参加などの種々のエフェクター機能を呈する。

用語「超可変領域」とは、本明細書中で用いる場合、抗原−結合を担う抗体のアミノ酸残基をいう。超可変領域は、一般に、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」からのアミノ酸残基（例えば、Ｖ_Ｌにおける約残基２４ないし３４（Ｌ１）、５０ないし５６（Ｌ２）および８９ないし９７（Ｌ３）の周り、およびＶ_Ｈにおける約１ないし３５（Ｈ１）、５０ないし６５（Ｈ２）および９５ないし１０２（Ｈ３）の周り；Ｋｂａｔら、ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈＥｄ．ｐｕｂｌｉｃＨｅａｌｔｈＳｅｒｖｉｃｅ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１年））、および／または「超可変ループ」からの残基（例えば、Ｖ_Ｌにおける残基２６ないし３２（Ｌ１）、５０ないし５２（Ｌ２）および９１ないし９６（Ｌ３）、およびＶ_Ｈにおける２６ないし３２（Ｈ１）、５３ないし５５（Ｈ２）および９６ないし１０１（Ｈ３）；ＣｈｏｔｈｉａａｎｄＬｅｓｋＪ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７頁（１９８７年））を含む。

本明細書中で用いるように、用語「モノクローナル抗体」とは、実質的に均質な抗体の集団から得られる抗体を言い、すなわち、該集団を含む個々の抗体は、微量で存在できる、可能な天然に生じる突然変異を除いて同一である。モノクローナル抗体は高度に特異的であり、単一の抗原性部位に対して向けられる。さらに、異なる決定基（エピトープ）に対して向けられた異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一決定基に対して向けられる。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、それが他の抗体によって汚染されずに合成できる点で有利である。修飾語「モノクローナル」は、いずれかの特定の方法による抗体の生産を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、本発明で有用なモノクローナル抗体は、最初、Ｋｏｈｌｅｒｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５頁（１９７５年）によって記載されたハイブリドーマ方法によって調製することができるか、あるいは細菌、真核生物動物もしくは植物細胞において組換えＤＮＡ分子を用いて作成することができる（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号参照）。「モノクローナル抗体」は、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８頁（１９９１年）およびＭａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７頁（１９９１年）に記載された技術を用いてファージ抗体ライブラリーから単離することもできる。

モノクローナル抗体は、ここでは、重鎖および／または軽鎖の一部が、特定の種に由来し、または特定の抗体クラスまたはサブクラスに属する、抗体中の対応する配列と同一であり、または相同であり、他方、鎖の残りは、別の種に由来するか、または別の抗体クラスまたはサブクラスに属する、抗体中の対応する配列に同一であるか、または相同である「キメラ」抗体、ならびに所望の生物学的活性を呈する限りはそのような抗体の断片を含む（米国特許第４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５頁（１９８４年）参照）。対象のキメラ抗体は、ここでは非ヒト霊長類（例えば、旧世界のサル、類人猿など）に由来する可変ドメイン抗原−結合配列、およびヒト定常領域配列を含む「霊長類化」抗体を含む。

「無傷」抗体は、抗原−結合部位、ならびにＣ_Ｌおよび少なくとも重鎖定常ドメイン、Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３を含むものである。定常ドメインは、天然配列の定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸改変体であってよい。好ましくは、無傷抗体は１以上のエフェクター機能を有する。

「抗体断片」は、無傷抗体の一部、好ましくは、無傷抗体の抗原結合または可変領域を含む。抗体断片の例として、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、およびＦｖ断片；ダイヤボディー；線状抗体（米国特許第５，６４１，８７０号、実施例２；Ｚａｐａｔａｅｔａｌ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇ．８（１０）：１０５７−１０６２頁｛１９９５年｝）；単一鎖抗体分子；および抗体断片から形成された多特異的抗体が挙げられる。

抗体のパパイン消化は「Ｆａｂ」断片、および残存「Ｆｃ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原−結合断片を生じ、命名は容易に結晶化する能力を反映する。Ｆａｂ断片は、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（Ｖ_Ｈ）、および１つの重鎖の最初の定常ドメイン（Ｃ_Ｈ１）と共に全Ｌ鎖より成る。各Ｆａｂ断片は抗原結合に関して一価であり、すなわち、それは単一の抗原−結合部位を有する。抗体のペプシン処理は、二価抗原−結合活性を有する２つのジスルフィド連結Ｆａｂ断片とおおまかに対応し、かつ依然として抗原を架橋することができる単一の大きなＦ（ａｂ’）_２断片を生じる。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域からの１以上のシステインを含めたＣ_Ｈ１ドメインのカルボキシ末端にさらに少数の残基を有することによってＦａｂ断片から異なる。Ｆａｂ’−ＳＨはここではＦａｂ’についての命名であり、定常ドメインのシステイン残基は遊離チオール基を担う。Ｆ（ａｂ’）_２抗体断片は、元来、それらの間にヒンジシステインを有する対のＦａｂ’断片として生産された。抗体断片の他の化学的カップリングも知られている。

Ｆｃ断片は、ジスルフィドによって一緒に保持された双方のＨ鎖のカルボキシ−末端部分を含む。抗体のエフェクター機能はＦｃ領域における配列によって決定され、その領域は、細胞のあるタイプに見出されるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される部分でもある。

「Ｆｖ」は、完全な抗原−認識および−結合部位を含有する最小抗体断片である。この断片は、密な、非共有結合性会合で、１つの重鎖および１つの軽鎖可変領域ドメインのダイマーよりなる。これらの２つのドメインの折畳から、抗原結合についてアミノ酸残基を寄与させ、かつ抗体に抗原結合特異性を付与する６つの超可変ループ（各々、ＨおよびＬ鎖からの３つのループ）を出す。しかしながら、全結合部位よりも低い親和性においてではあるが、単一の可変ドメイン（抗原に対して特異的なＣＤＲを３つだけ含むＦｖの半分）でさえ、抗原を認識し、それを結合する能力を有する。

「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも省略される「単一鎖Ｆｖ」は、単一のポリペプチド鎖に連結したＶ_ＨおよびＶ_Ｌ抗体ドメインを含む抗体断片である。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドは、さらに、ｓＦｖが抗原結合のために所望の構造を形成できるようにするＶ_ＨおよびＶ_Ｌドメインの間にポリペプチドリンカーを含む。ｓＦｖのレビューについては、ＴｈｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙｏｆＭｏｎｏｃｈｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，ＲｏｓｅｎｂｕｒｇａｎｄＭｏｏｒｅｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ＮｅｗＹｏｒｋ，２６９−３１５頁（１９９４年）；Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ１９９５，（下記）におけるＰｌｕｃｋｔｈｕｎ参照。

用語「ダイヤボディー」とは、Ｖドメインの鎖内ではなく鎖間対合が達成され、その結果、二価断片、すなわち、２つの抗原−結合部位を有する断片がもたらされるように、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌドメインの間に短いリンカー（約５ないし１０残基）でｓＦｖ断片（これまでの段落参照）を構築することによって調製される小さな抗体断片をいう。二価ダイヤボディーは２つの「クロスオーバー」ｓＦｖ断片のヘテロダイマーであり、２つの抗体のＶ_ＨおよびＶ_Ｌドメインが異なるペプチド鎖に存在する。ダイヤボディーは、例えば、ＥＰ４０４，０９７；ＷＯ９３／１１１６１；およびＨｏｌｌｉｎｇｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｎ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８頁（１９９３年）により十分に記載されている。

非ヒト（例えば、げっ歯類）抗体の「ヒト化」形態は、非抗体に由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。ほとんどの場合、ヒト化抗体はヒト免疫グロブリン（受容者抗体）であり、受容者の超可変領域からの残基が、所望の抗体特異性、親和性、および能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種の超可変領域からの残基によって置き換えられる（ドナー抗体）。いくつかの場合には、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は対応する非ヒト残基によって置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、受容者抗体において、またはドナー抗体において見出されない残基を含んでも良い。これらの修飾は、抗体の性能をさらに精巧なものとするために成される。一般に、ヒト化抗体は少なくとも１つの、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、超可変ループの全てまたは実質的に全ては非ヒト免疫グロブリンのそれらに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全てはヒト免疫グロブリン配列のそれらである。ヒト化抗体は、所望により、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分、典型的にはヒト免疫グロブリンのそれも含むであろう。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２−５２５頁（１９８６年）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３−３２９頁（１９８８年）；およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６頁（１９９２年）参照。

「種−依存性抗体」、例えば、哺乳動物抗ヒトＩｇＧ抗体は、それが、第二の哺乳動物種からの抗原の相同体について有するよりも第一の哺乳動物種からの抗原に対するより強い結合親和性を有する抗体である。通常、種−依存性抗体はヒト抗原に対して「特異的に結合する」（すなわち、約１×１０^−７Ｍ以下、好ましくは、約１×１０^−８Ｍ以下、最も好ましくは、約１×１０^−９Ｍ以下の結合親和性（Ｋｄ）値を有する）が、ヒト抗原に対するその結合親和性よりも少なくとも約５０倍、または少なくとも約５００倍、または少なくとも約１０００倍弱い、第二の非ヒト哺乳動物種からの抗原の相同体に対する結合親和性を有する。種−依存性抗体は、前記定義の種々のタイプの抗体のいずれでもあり得るが、好ましくは、ヒト化またはヒト抗体である。

「ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチド」は、本明細書中で記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに好ましくは特異的に結合するオリゴペプチドである。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチドは公知のオリゴペプチド合成方法を用いて化学的に合成することができるか、あるいは組換え技術を用いて調製し、精製することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチドは、通常、長さが少なくとも約５アミノ酸であり、あるいは長さが少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、もしくは１００アミノ酸、またはそれ以上であり、そのようなオリゴペプチドは本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに好ましくは特異的に結合することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合オリゴペプチドは、よく知られた技術を用いて過度な実験無くして同定することができる。この点に関して、ポリペプチド標的に特異的に結合することができるオリゴペプチドについてのオリゴペプチドライブラリーをスクリーニングするための技術が当該分野で良く知られていることを注記する（例えば、米国特許第５，５５６，７６２号、第５，７５０，３７３号、第４，７０８，８７１号、第４，８３３，０９２号、第５，２２３，４０９号、第５，４０３，４８４号、第５，５７１，６８９号、第５，６６３，１４３号；ＰＣＴ公開番号ＷＯ８４／０３５０６およびＷＯ８４／０３５６４；Ｇｅｙｓｅｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，８１：３９９８−４００２頁（１９８４年）；Ｇｅｙｓｅｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，８２：１７８−１８２頁（１９８５年）；Ｇｅｙｓｅｎｅｔａｌ．，ｉｎＳｙｎｔｈｅｔｉｃＰｅｐｔｉｄｅｓａｓＡｎｔｉｇｅｎｓ，１３０−１４９頁（１９８６年）；Ｇｅｙｓｅｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，１０２：２５９−２７４頁（１９８７年）；Ｓｃｈｏｏｆｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４０：６１１−６１６頁（１９８８年），Ｃｗｉｒｌａ，Ｓ．Ｅ．ｅｔａｌ．，（１９９０年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，８７：６３７８；Ｌｏｗｍａｎ，Ｈ．Ｂ．ｅｔａｌ．，（１９９１年）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３０：１０８３２；Ｃｌａｃｋｓｏｎ，Ｔ．ｅｔａｌ．，１９９１Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４；Ｍａｒｋｓ，Ｊ．Ｄ．ｅｔａｌ．，（１９９１年），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１；Ｋａｎｇ，Ａ．Ｓ．ｅｔａｌ．，（１９９１年）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，８８：８３６３，およびＳｍｉｔｈ，Ｇ．Ｐ．（１９９１年）ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２：６６８参照）。

「ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子」は、本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに好ましくは特異的に結合する本明細書中に定義されたオリゴペプチドまたは抗体以外の有機分子である。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子は、公知の方法（例えばＰＣＴ公開番号ＷＯ００／００８２３およびＷＯ００／３９５８５参照）を用いて同定し、化学的に合成することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合有機分子は、通常、サイズが約２０００ダルトン未満であり、あるいはサイズが約１５００、７５０、５００、２５０または２００ダルトン未満であり、本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに好ましくは特異的に結合することができるそのような有機分子は、よく知られた技術を用いて過度な実験なくして同定することができる。この点に関して、ポリペプチド標的に結合することができる分子についての有機分子ライブラリーをスクリーニングするための技術は当該分野でよく知られていることを注記する（例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ００／００８２３およびＷＯ００／３９５８５参照）。

対象の抗原、例えば、腫瘍−関連ポリペプチド抗原標的に「結合する」抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、該抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子が、抗原を発現する細胞または組織を標的化するにおいて診断剤および／または治療剤として好ましくは有用であり、他のタンパク質と有意に交差反応しないように、十分な親和性でもって抗原に結合するものである。該抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子の「非標的」タンパク質への結合の程度は、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）分析または放射性免疫沈澱（ＲＩＡ）によって測定して、その特定の標的タンパク質への該抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子への結合の約１０％未満であろう。標的分子への抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子の結合に関しては、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド標的上のエピトープへの用語「特異的結合」または「それに特異的に結合する」または「それに特異的である」は、非特異的相互作用とは測定可能に異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、対照分子の結合と比較して分子の結合を決定することによって測定することができ、一般に、対照分子は結合活性を有しない同様な構造の分子である。例えば、特異的結合は、標的、例えば、過剰の非標識標的と同様である対照分子との競合によって決定することができる。この場合、プローブへの標識された標的の結合が過剰の未標識標的によって競合的に阻害されるとき、特異的結合が示される。本明細書中で用いる特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド標的上のエピトープへの用語「特異的結合」または「それに特異的に結合する」または「それに特異的である」は、例えば、少なくとも約１０^−４Ｍ、あるいは少なくとも約１０^−５Ｍ、あるいは少なくとも約１０^−６Ｍ、あるいは少なくとも１０^−７Ｍ、あるいは少なくとも約１０^−８Ｍ、あるいは少なくとも約１０^−９Ｍ、あるいは少なくとも約１０^−１０Ｍ、あるいは少なくとも約１０^−１１Ｍ、あるいは少なくとも約１０^−１２Ｍ、あるいはそれ以上の標的に対するＫｄを有する分子によって呈され得る。用語「特異的結合」とは、いずれかの他のポリペプチドまたはポリペプチドエピトープへの実質的結合なくして特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド上のエピトープに分子が結合する結合をいう。

「ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０」を発現する腫瘍細胞の成長を阻害する抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子、または「成長阻害性」抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、適当なＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する、または過剰発現する癌細胞の測定可能な成長阻害をもたらすものである。該ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、癌細胞の表面に発現される膜貫通ポリペプチドであってよく、あるいは癌細胞によって生産され、分泌されるポリペプチドであってよい。好ましい成長阻害性抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体、オリゴペプチドまたは有機分子は、適当な対照と比較して、２０％を超えて、好ましくは約２０％ないし約５０％、なおより好ましくは５０％を超えて（例えば、約５０％ないし約１００％）、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−発現腫瘍細胞の成長を阻害し、該対照は、典型的には、試験すべき抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子で処理されていない腫瘍細胞である。成長阻害は、細胞培養中で約０．１ないし３０μｇ／ｍｌまたは約０．５ｎＭないし２００ｎＭ抗体濃度で測定することができ、該成長阻害は抗体への腫瘍細胞の暴露から１ないし１０日後に測定される。イン・ビボでの腫瘍細胞の成長阻害は種々の方法で測定することができる。該抗体は、約１μｇ／ｋｇないし約１００ｍｇ／ｋｇ体重における抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体の投与の結果、抗体の最初の投与から約５日ないし３ヶ月以内に、好ましくは、約５ないし３０日以内に腫瘍のサイズまたは種様細胞の増殖の低下がもたらされるとき、イン・ビボで成長阻害性である。

「アポトーシスを誘導する」抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、アネキシンＶの結合、ＤＮＡの断片化、細胞の収縮、小胞体の膨張、細胞の断片化、および／または（アポトーシス体と呼ばれる）膜ベシクルの形成によって判断してプログラムされた細胞の死滅を誘導するものである。該細胞は、通常、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを過剰発現するものである。好ましくは、該細胞は腫瘍細胞、例えば、前立腺、乳房、卵巣、胃、子宮内膜、肺、腎臓、結腸、膀胱細胞である。種々の方法が、アポトーシスに関連する細胞事象を評価するために利用できる。例えば、ホスファチジルセリン（ＰＳ）トランスロケーションはアネキシン結合によって測定することができ；ＤＮＡ断片化はＤＮＡラダリングを通じて評価することができ；およびＤＮＡ断片を伴う核／クロマチン凝縮は、ハイポジプロイド細胞のいずれかの増加によって評価することができる。好ましくは、アポトーシスを誘導する、抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、アネキシン結合アッセイにおいて、未処理細胞に対してアネキシン結合の約２ないし５０倍、好ましくは約５ないし５０倍、最も好ましくは約１０ないし５０倍誘導をもたらすものである。

抗体「エフェクター機能」とは、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列改変体Ｆｃ領域）に帰属させることができる生物学的活性をいい、抗体のイソタイプと共に変化する。抗体エフェクター機能の例として：Ｃ１ｑ結合および補体依存性細胞傷害性；Ｆｃ受容体結合；抗体−依存性細胞−媒介細胞傷害性（ＡＤＣＣ）；ファゴサイトーシス；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）のダウンレギュレーション；およびＢ細胞活性化が挙げられる。

「抗体−依存性細胞−媒介細胞傷害性」または「ＡＤＣＣ」とは、ある種の細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、およびマクロファージ）上に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲｓ）に結合した分泌Ｉｇが、これらの細胞傷害性エフェクター細胞が抗原−担持標的細胞に特異的に結合し、引き続いて、サイトトキシンで標的細胞を殺傷するのを可能とする細胞傷害性の形態をいう。抗体は細胞傷害性細胞を「腕で捕まえ」、そのような殺傷に絶対的に必要である。ＡＤＣＣを媒介するための主な細胞、ＮＫ細胞はＦｃγＲＩＩＩのみを発現し、他方、単球はＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血系細胞でのＦｃＲ発現は、ＲａｖｅｔｃｈａｎｄＫｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−９２頁（１９９１年）の４６４ページの表３にまとめられている。対象の分子のＡＤＣＣ活性を評価するためには、米国特許第５，５００，３６号または第５，８２１，３３７号に記載されているようにイン・ビトロＡＤＣＣアッセイを行うことができる。そのようなアッセイのための有用なエフェクター細胞は、末梢血液単核細胞（ＰＢＭＣ）およびナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む。別法として、あるいは加えて、注目する分子のＡＤＣＣ活性は、例えば、Ｃｌｙｎｅｓｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９５：６５２−６５６頁（１９９８年）に開示されているような動物モデルにおいてイン・ビボで評価することができる。

「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は抗体のＦｃ領域に結合する受容体を記載する。好ましいＦｃＲは天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマー受容体）に結合し、対立遺伝子改変体および、あるいは、これらの受容体のスプライスされた形態を含めた、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩおよびＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含むものである。ＦｃγＲＩＩ受容体はＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）およびＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）を含み、それらが、その細胞質ドメインにおいて主として異なる同様なアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインにおいて免疫受容体チロシン−ベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含有する。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインにおいて免疫受容体チロシン−ベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含有する（Ｍ．ｉｎＤａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３−２３４頁（１９９７年）のレビュー参照）。ＦｃＲはＲａｖｅｔｃｈおよびＫｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−４９２頁（１９９１）；Ｃａｐｅｌｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ４：２５−３４（１９９４）；およびｄｅＨａａｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０−４１頁（１９９５年）でレビューされている。将来同定されるべきものを含めた他のＦｃＲは、本明細書中における用語「ＦｃＲ」に含まれる。該用語は、胎児への母性ＩｇＧの移動を担う新生児受容体ＦｃＲｎも含む（Ｇｕｙｅｒｅｔａｌ．，Ｊ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７頁（１９７６年）およびＫｉｍｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９頁（１９９４年））。

「ヒトエフェクター細胞」は、１以上のＦｃＲを発現し、エフェクター機能を行う白血球である。好ましくは、該細胞は少なくともＦｃγＲＩＩＩを発現し、ＡＤＣＣエフェクター機能を発揮する。ＡＤＣＣを媒介するヒト白血球の例として、末梢血液単核細胞（ＰＢＭＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、単球、細胞傷害性Ｔ細胞および好中球が挙げられ、ＰＢＭＣおよびＮＫ細胞が好ましい。エフェクター細胞は天然源から、例えば、血液から単離することができる。

「補体依存性細胞傷害性」または「ＣＤＣ」とは、補体の存在下における標的細胞の溶解をいう。古典的補体経路の活性化は、それらの同族体抗原に結合した（適当なサブクラスの）抗体への補体系の最初の成分（Ｃ１ｑ）の結合によって開始される。補体活性化を評価するためには、例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ２０：１６３頁（１９９６年）に記載されたＣＤＣアッセイを行うことができる。

用語「癌」および「癌性」とは、制御されない細胞成長によって典型的には特徴付けられる、哺乳動物における生理学的状態をいい、またはそれを記載する。癌の例として、限定されるものではないが、癌腫、リンパ腫、芽細胞種、肉腫、および白血病が挙げられる。そのような癌のより具体的な例として、扁平細胞癌、肺癌（小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、および肺の扁平癌腫を含む）、腹膜の癌、肝細胞癌、胃癌（胃腸癌を含む）、膵臓癌、神経膠芽細胞腫、頚癌、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、肝腫、乳癌、結腸癌、結直腸癌、子宮内膜または子宮癌腫、唾液腺癌腫、腎臓癌、肝臓癌、前立腺癌、甲状腺癌、肝臓癌腫および種々のタイプの頭部および首癌、ならびにＢ−細胞リンパ腫（低グレード／小胞非−ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リンパ系（ＳＬ）ＮＨＬ；中程度グレード／小胞ＮＨＬ；中程度グレード散漫ＮＨＬ；高グレード免疫芽球ＮＨＬ；高グレードリンパ芽球ＮＨＬ；高グレード小非切断細胞ＮＨＬ；巨大病ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ−関連リンパ腫；およびワルデンシュトレームマクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ系白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球白血病（ＡＬＬ）；毛様細胞白血病；慢性骨髄芽球白血病；および移植後リンパ系増殖障害（ＰＴＬＤ）が挙げられる。好ましくは、癌はＩＧＦ受容体を発現する腫瘍、より好ましくは乳癌、肺癌、結直腸癌、または前立腺癌、最も好ましくは乳癌または前立腺癌を含む。

「化学療法剤」は、癌の治療で有用な化学化合物である。化学療法剤の例として、チオテパおよびＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロホスファミドなどのアルキル化剤；ブスルファン、イムプロスルファンおよびピポスルファンなどのアルキルスルフォネート；ベンゾドパ、カルボクオン、メツレドパ、およびウレドパなどのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスファミドおよびトリメチロールメラミンを含めたエチレンイミンおよびメチルメラミン；アセトゲニン（特に、ブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（アドゼレシン、カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレウテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、クロロフォスファミド、エストラムスチン、イフォスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキサイド塩酸、ミルファラン、ノベムブチン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロフォスファミド、ウラシルマスタードのようなナイトロジェンマスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、およびラニンヌスチンなどのニトロソ尿素；エネジイン抗生物質（例えば、カリケアミシン、特にカリケアミシンガンマーＩＩおよびカリケアミシンオメガＩＩ（例えば、Ａｇｎｅｗ，ＣｈｅｍＩｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１８３−１８６頁（１９９４年）参照）；ダイネミシンＡを含めたダイネミシン；クロドロネートなどのビスフォスフォネート；エスペラミシン；並びにネオカルジノスタチンクロモフォアおよび関連クロモプロテインエニジイン抗生物質クロモフォア）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アウトラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモニシニス、ダクチノマイシン、ダウノルリシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）ドキソルビシン（モルフォルノ−ドキソルビシン、シアノモルフォリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、チューベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシンなどの抗生物質；メトトレキセートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの抗代謝産物；デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセートなどの葉酸類似体、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジンのようなピリミジンアナログ；カルステロン、ドロモスタノロンプロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ニトタン、トリドスタンなどの抗アドレナル；フロリン酸などの尿酸補充物；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エミルラシル；アムスサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキセート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジクオン；エルフォニチン；エリプチニウム酢酸；エポチロン；エトグルシド；ガリウム硝酸；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシンおよびアンサミトシンなどのメイタンシノイド；マイトグアゾン；マイトキサントロン；モピダンモル；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメト；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳＮａｔｕｒａｌＰｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン；特に、Ｔ−２トキシン、ベラクリンＡ、ロリジンＡおよびアンギジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；マイトブロニトール；マイトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂＯｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（商標）クロメフォル−フリー、パクリタキセルのアルブミン−作成ナノ粒子処方（ＡｍｅｒｉｃａｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＰａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、およびＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）ドキセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−ＰｏｕｌｅｍｃＲｏｒｅｒ，Ａｎｔｏｎｙ，Ｆｒａｎｃｅ）；クロランブシル；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）ゲンシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキセート；シスプラチンおよびカルボプラチンのような白金アナログ；ビンブラスチン；白金；ヘトポシド（ＶＰ−１６）；イフォスファミド；マイトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；キセロラ；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；カペシタビン；および前記のいずれかの医薬上許容される塩、酸または誘導体が挙げられる。

また、この定義には、例えば、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）タモキシフェン）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストンおよびＦＡＲＥＳＴＯＮトレミフェンを含めた抗エストロゲンおよび選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）などの腫瘍に対するホルモンの作用を調節し、または阻害するように働く抗ホルモン剤；例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）メゲストロール酢酸、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）エキセネスタン、フォルメスタニー、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）ボロゾール、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）レトロゾール、およびＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）アナストロゾールのような副腎におけるエストロゲン生産を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤；およびフルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレシンのような抗アンドロゲン；ならびにトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、例えば、ＰＫＣ−アルファ、ＲａｌｆおよびＨ−Ｒａｓなどの異常な細胞増殖に関連するシグナリング経路において遺伝子の発現を阻害するもの；ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標）リボザイム）のようなリボザイム、およびＨＥＲ２発現阻害剤；遺伝子療法ワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）ワクチン、およびＶＡＸＩＤ（登録商標）ワクチンなどのワクチン；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）ｒＩＬ−２；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）トポイソベラーゼ１阻害剤；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；および前記のいずれかの医薬上許容される塩、酸または誘導体を含む。
用語「細胞増殖性障害」および「増殖性障害」とは、異ある程度の異常な細胞増殖に関連する障害をいう。本発明の１つの態様において、細胞増殖性障害は癌である。

「腫瘍」は、本明細書中で用いるように、悪性または良性を問わず、全ての新形成細胞成長および増殖、および全てのプレ−癌性および癌性細胞および組織をいう。

「細胞の死滅を誘導する」抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、生きた細胞を生きていなくするものである。該細胞はＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現するもの、好ましくは、同一組織タイプの正常な細胞と比較してＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを過剰発現する細胞である。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、癌細胞の表面に発現される膜貫通ポリペプチドであってよく、あるいは癌細胞によって生産され、分泌されるポリペプチドであってよい。好ましくは、該細胞は癌細胞、例えば、乳房、卵巣、胃、子宮内膜、唾液腺、肺、腎臓、結腸、甲状腺、膵臓または膀胱細胞である。イン・ビトロでの細胞死滅は、補体および免疫エフェクター細胞の不在下で測定して、抗体−依存性細胞−媒介細胞傷害性（ＡＤＣＣ）または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）によって誘導された細胞死滅を区別することができる。かくして、細胞死滅についてのアッセイは、熱不活化血清（すなわち、補体の不在下）を用い、免疫エフェクター細胞の不在下で行うことができる。抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子が細胞死滅を誘導できるが否かを決定するためには、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）、トリパンブルー（Ｍｏｏｒｅｅｔａｌ．，Ｃｙｔｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１７；１−１１頁（１９９５年）参照）または７ＡＡＤの摂取によって評価される膜一体性の喪失は、未処理細胞に対して評価することができる。好ましい細胞死滅−誘導抗体、オリゴペプチドまたは他の有機分子は、ＢＴ４７４細胞におけるＰＩ摂取アッセイにおいてＰＩ摂取を誘導するものである。

本明細書中で用いるように、用語「免疫接着」は、異種タンパク質の結合特異性（「接着」）を免疫グロブリン定常ドメインのエフェクター機能と組合せる抗体様分子をいう。構造的には、免疫接着は、抗体の抗原認識および結合部位以外である（すなわち、「異種」である）所望の結合特異性とアミノ酸配列の融合、および免疫グロブリン定常ドメイン配列を含む。免疫接着分子の接着部分は、典型的には、少なくとも、受容体またはリガンドの結合部位を含む連続アミノ酸配列である。免疫接着における免疫グロブリン定常ドメイン配列は、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−２、ＩｇＧ−３またはＩｇＧ−４サブタイプ、（ＩｇＡ−１およびＩｇＡ−２を含めた）ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＤまたはＩｇＭなどのいずれかの免疫グロブリンから得ることができる。

用語「標識」は、本明細書中で用いる場合、抗体に直接的にまたは間接的にコンジュゲートして、「標識された」抗体を生じる検出可能な化合物または組成物をいう。標識はそれ自体によって（例えば、放射性同位体標識または蛍光標識）検出できるか、あるいは酵素標識の場合には、検出可能な基質化合物または組成物の化学的変化を触媒することができる。

「複製−防止剤」は、細胞の複製、機能および／または成長が、アポトーシス、アンジオスタシス、サイトーシス、殺腫瘍剤、マイトーシス阻害、細胞周期進行のブロック、細胞成長の阻止、腫瘍への結合、細胞メディエーターとしての作用などのメカニズムを問わず、阻害され、または妨げられあるいは細胞が破壊される剤である。そのような剤として、化学療法剤、細胞傷害性剤、サイトカイン、成長−阻害剤、または抗ホルモン剤、例えば、タモキシフェンなどの抗エストロゲン化合物、オナプリストン（ＥＰ６１６８１２参照）などの抗プロゲステロン；またはフルタミドなどの抗アンドロゲンならびにアロミダーゼ阻害剤、あるいはアンドロゲンなどのホルモン剤が挙げられる。

用語「細胞傷害性剤」は、本明細書中で用いるように、細胞の機能を阻害し、または妨げ、および／または細胞の破壊を引き起こす物質をいう。該用語は放射性同位体（例えば、Ａｔ^２１１、Ｉ^１３１、Ｉ^１２５、Ｙ^９０、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８、Ｓｍ^１５３、Ｂｉ^２１２、Ｐ^３２およびＬｕの放射性同位体）、化学療法剤、例えば、メトトレキセート、アドリアミシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシンンまたは他のインターカレーティング剤、ヌクレオ溶解酵素などの酵素およびその断片、抗生物質、および小分子トキシンまたはその断片および／または改変体を含めた細菌、真菌、植物または動物起源の酵素的に活性なトキシンなどのトキシン、および種々の後に開示する抗腫瘍または抗癌剤を含む。他の細胞傷害性剤は後に記載する。殺腫瘍剤は、腫瘍細胞の破壊を引き起こす。

アンタゴニストと組合せて用いるための特別な腫瘍タイプについての本明細書中における好ましい細胞傷害性剤は、本明細書中において、以下の通りである：
１．前立腺癌：アンドロゲン、ドセタキセル、パクリタキセル、エストラムスチン、ドキソルビシン、マイトキサントロン、ＥｒｂＢ２の細胞外ドメインにおける領域（例えば、包括的に、ＥｒｂＢ２の約残基２２ないし約残基５８４の領域におけるいずれかの１以上の残基）に結合する２Ｃ４などのＥｒｂＢ２ドメインに対する抗体（ＷＯ０１／００２４５；ハイブリドーマＡＴＣＣＨＢ−１２６９７）、ＡＶＡＳＴＩＮ（商標）抗血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、ＴＡＲＣＥＶＡ（商標）ＯＳＩ−７７４（エルロチミブ）（ＧｅｎｅｎｅｔｅｃｈおよびＯＳＩＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、または他の表皮成長因子受容体チロシンキナーゼ阻害剤（ＥＧＦＲＴＫＩ）
２．胃癌：５−フルオロウラシル（５ＦＵ）、ＸＥＬＯＤＡ（商標）カペシタビン、メトトレキセート、エトポシド、シスプラチン／カルボプラチン、パクリタキセル、ドセタキセル、ゲムシタビン、ドキソルビシン、およびＣＰＴ−１１（カンプトテシン−１１；イリノテカン、ＵＳＡ商品名：ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）
３．膵臓癌：ゲムシタビン、５ＦＵ、ＸＥＬＯＤＡ（商標）カペシタビン、ＣＰＴ−１１、ドセタキセル、パクリタキセル、シスプラチン、カルボプラチン、ＴＡＲＣＥＶＡ（商標）エルロチニブおよび他のＥＧＦＲＴＫＩ
４．結直腸癌：５ＦＵ、ＸＥＬＯＤＡ（商標）カペシタビン、ＣＰＴ−１１、オキサリプラチン、ＡＶＡＳＴＩＮ（商標）抗ＶＥＧＦ、ＴＡＲＣＥＶＡ（商標）エルロチニブおよび他のＥＧＦＲＴＫＩ、およびＥＧＦＲに結合し、受容体活性化および腫瘍へのシグナリングを開始するＥＧＦの能力をブロックする（以前ＩＭＣ−Ｃ２２５として知られた）ＥＲＢＩＴＵＸ（商標）ヒト：マウス−キメラ化モノクローナル抗体
５．腎臓癌：ＩＬ−２、インターフェロンアルファ、ＡＶＡＳＴＩＮ（商標）抗ＶＥＧＦ、ＭＥＧＡＣＥ（商標）（酢酸メデストローム）プロゲスチン、ビンブラスチン、ＴＡＲＣＥＶＡ（商標）エルロチニブ、および他のＥＧＦＲＴＫＩ
「成長阻害剤」は、本明細書中で用いる場合、細胞、特にＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−発現癌細胞をイン・ビトロまたはイン・ビボいずれかで阻害する化合物または組成物をいう。かくして、成長阻害剤は、Ｓ期においてＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−発現細胞のパーセンテージを有意に低下させるものであってよい。成長阻害剤の例として、Ｇ１阻止およびＭ−期阻止を誘導する剤などの（Ｓ期以外の箇所において）細胞周期の進行をブロックする剤が挙げられる。古典的なＭ−期ブロッカーとして、ビンカス（ビンクリスチンおよびビンブラスチン）、タキセン、ならびにドキソルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシドおよびブレオマイシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤が挙げられる。Ｇ１を阻止する剤、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタニン、シスプラチン、メトトレキセート、５−フルオロウラシル、およびａｒａ−ＣもまたＳ−期阻止に入る。さらなる情報は、Ｍｕｒａｋａｍｉｅｔａｌ．，（ＷＢＳａｕｎｄｅｒｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，１９９５）による「Ｃｅｌｌｃｙｃｌｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ，ａｎｄａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｄｒｕｇｓ」と題されたＴｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒＢａｓｉｓｏｆＣａｎｃｅｒ，ＭｅｎｄｅｌｓｏｈｎａｎｄＩｓｒａｅｌ，ｅｄｓ，１章、特に１３頁に見出すことができる。タキセン（パクリタキセルおよびドセタキセル）は、共にイチイ樹木に由来する抗癌薬物である。セイヨウイチイに由来するドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ−ＰｏｕｌｅｎｃＲｏｒｅｒ）は、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）の半合成類似体である。パクリタキセルおよびドセタキセルはチューブリンダイマーからの微小管の組立を促進し、脱重合を妨げることによって微小管を安定化し、その結果、細胞における有糸分裂を阻害する。

「ドキソルビシン」はアントラサイクリン抗生物質である。ドキソルビシンの完全な化学名称は（８Ｓ−シス）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リキソ−ヘキサピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−８−（ヒドロキシアセチル）−１−メトキシ−５，１２−ナフタセンジオンである。

用語「サイトカイン」は、細胞間メディエーターとして別の細胞に対して作用する１つの細胞集団によって放出されるタンパク質に対する上位概念用語である。そのようなサイトカインの例として、リンホカイン、モノカイン、および常套のポリペプチドホルモンがある。サイトカインの中には、ヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、およびウシ成長ホルモン；副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；レラキシン；プロレラキシン；卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、チロイド刺激ホルモン（ＴＨＳ）、および黄体ホルモン（ＬＨ）などの糖タンパク質ホルモン；肝臓成長因子；線維芽細胞成長因子；プロラクチン；胎盤ラクトゲン；腫瘍壊死因子−αおよびβ；ムレリアン−阻害物質；マウスゴナドトロピン−関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦ−βなどの神経成長因子；血小板−成長因子；ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子−Ｉおよび−ＩＩ；エリスロポエチン（ＥＰＯ）；骨誘導因子；インターフェロン−α、−β、および−γなどのインターフェロン；マクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）などのコロニー刺激因子（ＣＳＦ）；顆粒球−マクロファージ−ＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）；および顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）；ＩＬ−１、ＩＬ−１ａ、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２などのインターロイキン（ＩＬ）；ＴＮＦ−αまたはＴＮＦ−βなどの腫瘍壊死因子；およびＬＩＦおよびキットリガンド（ＫＬ）を含めた他のポリペプチド因子が挙げられる。本明細書中で用いるように、用語サイトカインは天然源からの、または組換え細胞培養からのタンパク質、および天然配列サイトカインの生物学的に活性な同等物を含む。

用語「添付文書」は、治療剤製品の使用に関する症状、用法、用量、投与、禁忌および／または警告についての情報を含有する、治療剤製品の市販のパッケージに慣用的に含まれる指示書をいう。

用語「遺伝子」とは、（ａ）本発明明細書中に開示されたＤＮＡ配列の少なくとも１つを含有する遺伝子；（ｂ）本明細書中に開示されたＤＮＡ配列によってコードされるアミノ酸配列をコードするいずれかのＤＮＡ配列、および／または（ｃ）本明細書中に開示されたコーディング配列の相補体にハイブリダイズするいずれかのＤＮＡ配列をいう。好ましくは、該用語はコーディングならびに非コーディング領域を含み、好ましくは、正常な遺伝子発現に必要な全ての配列を含む。

用語「遺伝子標的化」とは、ゲノムＤＮＡの断片を哺乳動物細胞に導入する場合に起こり、断片が局在化し、内因性相同配列と組換えられる相同組換えのタイプをいう。相同組換えによる遺伝子標的化は、特異的ゲノム配列を特別なデザインの外因性ＤＮＡで置き換えるための組換えＤＮＡ技術を使用する。

用語「相同組換え」とは、相同ヌクレオチド配列の部位における２つのＤＮＡ分子またはクロマチドの間のＤＮＡ断片の交換をいう。

用語「標的遺伝子」（あるいは、「標的遺伝子配列」または「標的ＤＮＡ配列」ともいう）とは、相同組換えによって修飾されるべきいずれかの核酸分子、ポリヌクレオチド、または遺伝子をいう。標的配列は無傷遺伝子、エキソンまたはイントロン、調節配列または遺伝子の間のいずれかの領域を含む。標的遺伝子は、特別な遺伝子の部分、または個々のゲノムＤＮＡ中の遺伝子座を含むことができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子の「破壊」は、ゲノムＤＮＡの断片が局所化し、内因性相同配列と組換えられる場合に起こり、該破壊は天然遺伝子またはその部分の欠失、または天然遺伝子中の突然変異であり、あるいは該破壊は天然遺伝子の機能的不活化である。別法として、配列の破壊は、遺伝子捕獲ベクターを用いる非特異的挿入不活化によって生じさせることができる（すなわち、ランダムに挿入された導入遺伝子を含有し、それを発現する非ヒトトランスジェニック動物；例えば、２００２年８月２０日に発行された米国特許第６，４３６，７０７号参照）。これらの配列の破壊または修飾は挿入、ミスセンス、クレームシフト、欠失、または置換、またはＤＮＡ配列の置き換え、またはそのいずれかの組合せを含む。挿入は、動物、植物、真菌、昆虫、原核生物またはウイルス起源のものであってよい全遺伝子の挿入を含む。破壊は、例えば、その生産を部分的にまたは完全に阻害することによって、あるいは正常な遺伝子産物の活性を増強することによって正常な遺伝子産物を改変することができる。該破壊はナル（ｎｕｌｌ）破壊であり、ここに、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子の有意な発現はない。

用語「天然発現」とは、野生型マウスに存在する発現レベルでの、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子によってコードされる全長ポリペプチドの発現をいう。かくして、内因性ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子の「天然発現」がない破壊とは、単一細胞、選択された細胞、または哺乳動物の細胞の全ての内因性ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子によってコードされたポリペプチドの少なくとも部分の発現の部分的または完全な低下をいう。

用語「ノックアウト」とは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子の破壊をいい、該破壊の結果：天然遺伝子の機能的不活化；天然遺伝子またはその部分の欠失；または天然遺伝子における突然変異がもたらされる。

用語「ノックイン」とは、特異的ヒトＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−コーディング遺伝子またはその改変体のいずれかをコードするヒトｃＤＮＡでのマウスオルソログ（または他のマウス遺伝子）の置き換えをいう（すなわち、破壊の結果、天然マウス遺伝子と天然ヒト遺伝子との置き換えが起こる）。

用語「構築体」または「標的化構築体」とは、標的組織、細胞系または動物にトランスフェクトすべき人工的に組み立てられたＤＮＡセグメントをいう。典型的には、標的化構築体は特に興味のある遺伝子または核酸配列、マーカー遺伝子および適当な制御配列を含むであろう。本明細書中で提供されるように、標的化構築体はＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０標的化構築体を含む。「ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０標的化構築体」は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子の少なくとも１つの部分に対して相同であるＤＮＡ配列を含み、宿主細胞中のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子において破壊を生じさせることができる。

用語「トランスジェニック細胞」とは、そのゲノム内に、遺伝子標的化の方法によって、破壊され、修飾され、改変され、または完全にまたは部分的に置き換えられたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子を含有する細胞をいう。

用語「トランスジェニック動物」とは、そのゲノム内に、本明細書中に記載された方法、または当該分野で良く知られた方法によって破壊され、またはそうでなければ修飾されまたは突然変異された特異的遺伝子を含有する動物をいう。好ましくは、非ヒトトランスジェニック動物は哺乳動物である。より好ましくは、該哺乳動物はラットまたはマウスのようなげっ歯類である。加えて、「トランスジェニック動物」はヘテロ接合性動物（すなわち、１つの欠陥がある対立遺伝子および１つの野生型対立遺伝子）またはホモ接合性動物（すなわち、２つの欠陥がある対立遺伝子）であって良い。胚は動物の定義内に入ると考えられる。動物の提供は、接合によるかまたは他の方法によるかを問わず、または胚が出産に至るか否かを問わず、イン・ウテロでの胚または胎児の提供を含む。

本明細書中で用いるように、用語「選択マーカー」および「位置選択マーカー」とは、該遺伝子を運ぶ細胞のみがある条件下で生存し、および／または成長するのを可能とする生成物をコードする遺伝子をいう。例えば、導入されたネオマイシン耐性（Ｎｅｏ^ｒ）遺伝子を発現する植物および動物細胞は化合物Ｇ４１８に対して耐性である。Ｎｅｏ^ｒ遺伝子マーカーを運ばない細胞はＧ４１８によって殺傷される。他の陽性選択マーカーは当業者に知られているか、または当業者の考え内のものである。

本明細書中で用いる用語「変調する」または「変調」とは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子の機能、発現、活性、あるいはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子に関連する表現型の減少、阻害、低下、軽減、増加または増強をいう。

本明細書中で用いる用語「軽減する」または「軽減」とは、異常または兆候を含めた、疾患、病気、障害または表現型の減少、低下または排除をいう。

用語「異常」とは、病理学的疾患および挙動的観察を含めた、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０が関連するいずれの病気、障害、疾患または表現型もいう。

（表１）

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表１（続き））

（表２）

％アミノ酸配列同一性＝
（ＡＬＩＧＮ−２によって決定された２つのポリペプチド配列間の同一にマッチングするアミノ酸残基の数）÷（ＰＲＯポリペプチドのアミノ酸残基の合計数）＝
５÷１５＝３３．３％
（表３）

％アミノ酸配列同一性＝
（ＡＬＩＧＮ−２によって決定された２つのポリペプチド配列間の同一にマッチングするアミノ酸残基の数）÷（ＰＲＯポリペプチドのアミノ酸残基の合計数）＝
５÷１０＝５０％
（表４）

％アミノ酸配列同一性＝
（ＡＬＩＧＮ−２によって決定された２つの拡散配列間の同一にマッチングするヌクレオチドの数）÷（ＰＲＯ−ＤＮＡ核酸配列のヌクレオチドの合計数）＝
６÷１４＝４２．９％
（表５）

％アミノ酸配列同一性＝
（ＡＬＩＧＮ−２によって決定された２つの核酸配列間の同一にマッチングするヌクレオチドの数）÷（ＰＲＯ−ＤＮＡ核酸配列のヌクレオチドの合計数）＝
４÷１２＝３３．３％
ＩＩ．本発明の組成物および方法
Ａ．全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド
本発明は、本出願においてはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドというポリペプチドをコードする新しく同定され単離されたヌクレオチド配列を提供する。特に、以下の実施例においてさらに詳細に開示するように、種々のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡが同定され、単離されている。別々の表現ラウンドで生じたタンパク質には異なるＰＲＯ番号を与えることができるが、ＵＮＱ番号はいずれかの与えられたＤＮＡおよびコードされたタンパク質についてユニークであり、変化されないことを注記する。しかしながら、簡単のために、本明細書中においては、本明細書中に開示された全長天然核酸分子によってコードされたタンパク質、ならびにＰＲＯのこれまでの定義に含まれる全てのさらなる天然相同体および改変体は、それらの起源または調製の態様にかかわらず、「ＰＲＯ／数」という。

以下の実施例に開示するように、種々のｃＤＮＡクローンはＡＴＣＣに寄託されている。それらのクローンの現実のヌクレオチド配列は、当該分野におけるルーチン的方法を用いて寄託されたクローンの配列決定によって当業者によって容易に決定できる。予測されるアミノ酸配列は、ルーチン的技量を用いてヌクレオチド配列から決定することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドおよび本明細書中に記載されたコーディング核酸については、出願人らは、何がその時に利用可能な配列情報で最良に同定可能なリーディングフレームであるかを突き止めた。

Ｂ．ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド改変体
本明細書中に記載された全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに加えて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体を調製することができると考えられる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体は、適当なヌクレオチド変化をＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ＤＮＡに導入することによって、および／または所望のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの合成によって調製することができる。当業者であれば、アミノ酸変化は、グリコシル化部位の数または位置の変化、または膜繋留特徴の改変などの、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの翻訳後プロセスを改変することができるのを認識するであろう。

天然全長配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドにおける、または本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの種々のドメインにおける変動は、例えば、米国特許第５，３６４，９３４号に記載された保存的および非保存的突然変異についての技術およびガイドラインのいずれかを用いて成すことができる。変動はＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする１以上のコドンの置換、欠失または挿入であって良く、その結果、天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと比較して、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアミノ酸配列の変化をもたらす。通常、該変動は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのドメインの１以上におけるいずれかの他のアミノ酸での少なくとも１つのアミノ酸の置換による。いずれのアミノ酸残基が所望の活性に悪影響することなく挿入し、置換し、または欠失することができるかを決定するにおけるガイドラインは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの配列を相同な既知のタンパク質分子のそれと比較し、高相同性の領域で成されたアミノ酸配列変化の数を最小化することによって見出すことができる。アミノ酸置換は、ロイシンのセリンでの置換、すなわち、保存的アミノ酸置換などの、同様な構造および／または化学的特性を有する別のアミノ酸で１つのアミノ酸を置き換える結果であり得る。挿入または欠失は、所望により、約１ないし５アミノ酸の範囲とすることができる。許容される改変は、配列中のアミノ酸の挿入、欠失または置換を系統的に行い、全長または成熟天然配列によって呈される活性について、得られた改変体を試験することによって決定することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド断片は本明細書中で提供される。そのような断片はＮ−末端またはＣ−末端において切形することができ、あるいは例えば、全長天然タンパク質と比較した場合に、内部残基を欠くことができる。ある種の断片は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの所望の生物学的活性に必須でないアミノ酸残基を欠く。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０断片は、多数の慣用的技術のいずれかによって調製することができる。所望のペプチド断片は化学的に合成することができる。別のアプローチは、酵素消化によって、例えば、特定のアミノ酸残基によって規定される部位においてタンパク質を切断することが知られている酵素でタンパク質を処理することによって、あるいは適当な制限酵素でＤＮＡを消化し、所望の断片を単離することによって、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０断片を生じさせることを含む。なお別の適当な技術はポリメラーゼ鎖反応（ＰＣＲ）によって、所望のポリペプチド断片をコードするＤＮＡ断片を単離し、増幅することを含む。ＤＮＡ断片の所望の末端を規定するオリゴヌクレオチドは、ＰＣＲにおいて５’および３’プライマーにおいて使用される。好ましくは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド断片は、本明細書中に開示された天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドとともに、少なくとも１つの生物学的および／または免疫学的活性を共有する。

対象の保存的置換を好ましい置換の見出しの下で表６に示す。そのような置換が生物学的活性の変化をもたらすとき、表６に例示的置換と命名された、またはアミノ酸クラスに言及してさらに以下に記載されるより実質的な変化が好ましくは導入され、産物がスクリーニングされる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの機能または免疫学的同一性における実質的修飾は、（ａ）例えば、シートまたはラセン立体配座としての、置換の領域におけるポリペプチド骨格の構造、（ｂ）標的部位における分子の電荷または疎水性、または（ｃ）側鎖の嵩を維持することに対するそれらの効果が有意に異なる置換を選択することによって達成される。天然に生じる残基は、通常の側鎖特性に基づいて群に分けられる：
アミノ酸は、それらの側鎖の特性における同様性に従って群に分けることができる（Ａ．Ｌ．Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ、ｉｎＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｅｃｏｎｄｅｄ．，７３−７５頁，ＷｏｒｔｈＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９７５年））：

別法として、天然に生じる残基は共通の側鎖特性に基づいて群に分けることができる：

非保存的置換は、別のクラスに代えてこれらのクラスの１つのメンバーで交換することを含むであろう。そのような置換された残基もまた保存的置換部位に、より好ましくは残存する（非保存的）部位に導入することもできる。

該変動は、オリゴヌクレオチド−媒介（部位−特異的）突然変異誘発、アラニンスキャンニング、およびＰＣＲ突然変異誘発などの当該分野で公知の方法を用いてなすことができる。部位−特異的突然変異誘発［Ｃａｒｔｅｒら、Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．，１３：４３３１頁（１９８６年）；Ｚｏｌｌｅｒｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．，１０：６４８７頁（１９８７年）］、カセット突然変異誘発［Ｗｅｌｌｓｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，３４：３１５頁（１９８５年）］、制限選択突然変異誘発［Ｗｅｌｌｓｅｔａｌ．，Ｐｈｉｌｏｓ．Ｔｒａｎｓ．Ｒ．Ｓｏｃ．ＬｏｎｄｏｎＳｅｒＡ，３１７：４１５頁（１９８６年）］または他の公知の技術をクローン化されたＤＮＡに対して行って、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０改変体ＤＮＡを生じさせることができる。

スキャンニングアミノ酸分析を使用して、連続配列に沿って１以上のアミノ酸を同定することもできる。好ましいスキャンニングアミノ酸の中には、相対的に小さな中性アミノ酸がある。そのようなアミノ酸残基はアラニン、グリシン、セリンおよびシステインを含む。アラニンは典型的にはこの群内で好ましいスキャンニングアミノ酸である。なぜならば、それはベータ−炭素を超えて側鎖を排除し、改変体の主な鎖立体配座を改変しにくいからである［ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍａｎｄＷｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１−１０８５頁（１９８９年）］。アラニンは、典型的には、やはり好ましい。なぜならば、それは最も普通のアミノ酸だからである。さらに、それは埋もれたおよび露出された位置双方でしばしば見出される［Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，ＴｈｅＰｒｏｔｅｉｎｓ，（Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，Ｎ．Ｙ．）；Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１５０：１（１９７６）］。アラニン置換が適当な量の改変体を生じないとき、等電子アミノ酸を用いることができる。

Ｃ．ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の修飾
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの共有結合修飾は本発明の範囲内に含まれる。共有結合修飾の１つのタイプは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの標的化アミノ酸残基を、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの選択された側鎖またはＣ−末端残基と反応することができる有機誘導体化剤と反応させることを含む。二官能性剤での誘導体化は、例えば、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体を精製するための方法で用いられる水不溶性支持体マトリックスまたは表面にＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを架橋するのに、またはその逆で有用である。普通に使用される架橋剤は、例えば、１，１−ビス（ジアゾアセチル）−２−フェニルエタン、グルタルアルデヒド、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、例えば、４−アジドサリチル酸とのエステル、３，３’−ジチオビス（スクシンイミジルプロピオネート）などのジスクシンイミジルエステルを含めたホモ二官能性イミドエステル、ビス−Ｎ−マレイミド−１，８−オクタンなどの二官能性マレイミド、およびメチル−３−［（ｐ−アジドフェニル）ジチオ］プロピオンアミドなどの剤を含む。

他の修飾は、各々、対応するグルタミルおよびアスパルチル残基へのグルタミニルおよびアスパラギニル残基の脱アミド化、プロリンおよびリシンのヒドロキシル化、セリルまたはスレオニル残基のヒドロキシル基のリン酸化、リシン、アルギニンおよびヒスチジン側鎖のα−アミノ基のメチル化［Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：ＳｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ．，ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，７９−８６頁（１９８３年）］、Ｎ−末端アミンのアセチル化、およびいずれかのＣ−末端カルボキシル基のアミド化を含む。

本発明の範囲内に含まれるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの共有結合修飾の別のタイプは、ポリペプチドの天然グリコシル化パターンを改変することを含む。「天然グリコシル化パターンを改変する」は、ここでの目的では、（下に存在するグリコシル化部位を除去することによって、または化学的および／または酵素的手段によってグリコシル化を欠失することによって）天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドで見出される１以上の炭水化物部位を欠失すること、および／または天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに存在しない１以上のグリコシル化部位を加えることを意味することを意図する。加えて、該語句は、存在する種々の炭水化物部位の天然における変化および特性を含む、天然タンパク質のグリコシル化における定性的変化を含む。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドへのグリコシル化部位の付加は、アミノ酸配列を改変することによって達成することができる。該改変は、例えば、１以上のセリンまたはスレオニン残基の（Ｏ−結合グリコシル化部位のために）天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０への付加、またはそれによる置換によって成すことができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０アミノ酸配列は、所望により、特に、所望のアミノ酸に翻訳され得るコドンが生じるように、予め選択された塩基において、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡを突然変異させることによって、ＤＮＡレベルでの変化を通じて改変することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド上の炭水化物部位の数を増加させる別の手段は、ポリペプチドへのグリコシドの化学的または酵素的カップリングによる。そのような方法は、例えば、１９８７年９月１１日に公開されたＷＯ８７／０５３３０、およびＡｐｌｉｎａｎｄＷｒｉｓｔｏｎ，ＣＲＣＣｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２５９−３０６頁（１９８１年）に記載されている。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに存在する炭水化物部位の除去は、化学的にまたは酵素的に、あるいはグリコシル化のための標的として働くアミノ酸残基についてコードするコドンの突然変異的置換によって達成することができる。化学的脱グリコシル化技術は当該分野で知られており、例えば、Ｈａｋｉｍｕｄｄｉｎ，ら、Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．，２５９：５２頁（１９８７年）およびＥｄｇｅｅｔａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１１８：１３１頁（１９８１年）によって記載されている。ポリペプチド上の炭水化物部位の酵素的切断は、Ｔｈｏｔａｋｕｒａｅｔａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．，１３８：３５０（１９８７年）によって記載された種々のエンド−およびエキソ−グリコシダーゼの使用によって達成することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの共有結合修飾の別のタイプは、米国特許第４，６４０，８３５号；第４，４９６，６８９号；第４，３０１，１４４号；第４，６７０，４１７号；第４，７９１，１９２号または第４，１７９，３３７号に記載されたようにして、種々の非タンパク質性ポリマーの１つ、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール、またはポリオキシアルキレンにＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを連結されることを含む。

本発明のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、別の異種ポリペプチドまたはアミノ酸配列に融合したＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを含むキメラ分子を形成するように修飾することもできる。

そのようなキメラ分子は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと、抗タグ抗体が選択的に結合することができるエピトープを供するタグポリペプチドとの融合を含む。該エピトープタグは、一般には、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアミノ−またはカルボキシル−末端に置かれる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのそのようなエピトープ−タグ化形態の存在は、タグポリペプチドに対する抗体を用いて検出することができる。また、エピトープタグの提供は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドが、抗タグ抗体、またはエピトープタグに結合するアフィニティマトリックスの別のタイプを用いてアフィニティ精製によって容易に精製することを可能にする。種々のタグポリペプチドおよびそれらの各抗体は当該分野でよく知られている。その例として、ポリ−ヒスチジン（ポリ−ｈｉｓ）またはポリ−ヒスチジン−グリシン（ポリ−ｈｉｓ−ｇｌｙ）タグ；ｆｌｕＨＡタグポリペプチドおよびその抗体１２ＣＡ５［Ｆｉｅｌｄｅｔａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，８：２１５９−２１６５頁（１９８８年）］；それに対するｃ−ｍｙｃタグおよび８Ｆ９、３Ｃ７、６Ｅ１０、Ｇ４、Ｂ７および９Ｅ１０抗体［Ｅｖａｎｅｔａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄＣｅｌｌｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，５：３６１０−３６１６頁（１９８５年）］；および単純疱疹ウイルス糖タンパク質Ｄ（ｇＤ）タグおよびその抗体［Ｐａｂｏｒｓｋｙｅｔａｌ．，ＰｒｏｔｅｉｎＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，３（６）：５４７−５５３頁（１９９０年）］が挙げられる。他のタグポリペプチドとして、Ｆｌａｇ−ペプチド（Ｈｏｐｐら、ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，６：１２０４−１２１０頁（１９８８年））；ＫＴ３エピトープペプチド［Ｍａｒｔｉｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５５：１９２−１９４頁（１９９２年）］；α−チューブリンエピトープペプチド［Ｓｋｉｎｎｅｒｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６６：１５１６３−１５１６６頁（１９９１年）］；およびＴ７遺伝子１０タンパク質ペプチドタグ［Ｌｕｔｚ−Ｆｒｅｙｅｒｍｕｔｈｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８７：６３９３−６３９７頁（１９９０年）］を含む。

キメラ分子は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと、免疫グロブリンまたは免疫グロブリンの特定の領域との融合を含むことができる。（「免疫接着」ともいう）キメラ分子の二価形態では、そのような融合はＩｇＧ分子のＦｃ領域に対するものとすることができる。Ｉｇ融合は、好ましくは、Ｉｇ分子内の少なくとも１つの可変領域の代わりのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの可溶性（膜貫通ドメイン欠失または不活化）形態の置換を含む。本発明の特に好ましい態様において、免疫グロブリン融合はヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ３、またはＩｇＧ１分子のヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３領域を含む。免疫グロブリン融合の生産については、１９９５年６月２７日に発行された米国特許第５，４２８，１３０号も参照されたし。

Ｄ．ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの調製
以下の記載は、主として、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０核酸を含有するベクターで形質転換またはトランスフェクトされた細胞を培養することによるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの生産に関する。もちろん、当該分野で良く知られた代替方法を使用して、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを調製することができると考えられる。例えば、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０配列、またはその部分は、固相技術を用いる直接的ペプチド合成によって生産することができる［例えば、Ｓｔｅｗａｒｔｅｔａｌ．，Ｓｏｌｉｄ−ＰｈａｓｅＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｗ．Ｈ．ＦｒｅｅｍａｎＣｏ．，ＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ（１９６９年）；Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８５：２１４９−２１５４頁（１９６３年）参照］。イン・ビトロタンパク質合成は、手動技術を用い、または自動化によって行うことができる。自動合成は、例えば、製造業者の指示を用い、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＰｅｐｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ（ＦｏｓｔｅｒＣｉｔｙ，ＣＡ）を用いて達成することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの種々の部分は別々に化学的に合成し、化学的または酵素的方法を用いて合わせて、全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを生産することができる。

１．ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡの単離。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ｍＲＮＡを保有し、それを検出可能なレベルで発現すると考えられる組織から調製されたｃＤＮＡライブラリーから得ることができる。従って、ヒトＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−ＤＮＡは、便宜には、実施例に記載されたような、ヒト組織から調製されたｃＤＮＡライブラリーから得ることができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−コーディング遺伝子は、ゲノムライブラリーから、あるいは公知の合成手法（例えば、自動核酸合成）によって得ることもできる。

ライブラリーは、対象の遺伝子またはそれによってコードされるタンパク質を同定するために設計された（ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、または少なくとも約２０ないし８０塩基のオリゴヌクレオチドに対する抗体などの）プローブでスクリーニングすることができる。選択されたプローブでのｃＤＮＡまたはゲノムライブラリーのスクリーニングは、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ（ＮｅｗＹｏｒｋ：ＣｏｄｅＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，１９８９）に記載されたような、標準的な手法を用いて行うことができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードする遺伝子を単離するための別の手段は、ＰＣＲ方法［Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，（上記）：Ｄｉｅｆｆｅｎｂａｃｈｅｔａｌ．，ＰＣＲＰｒｉｍｅｒ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ（ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＬａｂｏｒａｔｏｒｙＰｒｅｓｓ，１９９５）］を用いることである。

以下の実施例は、ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングするための技術を記載する。プローブとして選択されたオリゴヌクレオチド配列は偽陽性が最小化されるのに十分な長さであって、十分に明瞭であるべきである。オリゴヌクレオチドは、好ましくは、それが、スクリーニングすべきライブラリー中のＤＮＡへのハイブリダイゼーションに際して検出できるように標識される。標識の方法は当該分野でよく知られており、^３２Ｐ−標識ＡＴＰのような放射性方式、ビオチニル化または酵素標識の使用を含む。中程度のストリンジェンシーおよび高いストリンジェンシーを含めたハイブリダイゼーション条件は、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（上記）に提供されている。

そのようなライブラリースクリーニング方法で同定された配列を比較し、ＧｅｎＢａｎｋなｄｐの公のデータベースまたは他の私的な配列データベースに寄託し、そこで入手可能な他の公知の配列に対して整列させることができる。分子の規定された領域内での、または全長配列を横切っての（アミノ酸またはヌクレオチドレベルいずれかにおける）配列同一性は、当該分野で知られ、本明細書中に記載された方法を用いて決定することができる。

タンパク質コーディング配列を有する核酸は、最初に本明細書中で開示された推定アミノ酸配列を用い、および必要であれば、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，（上記）に記載された慣用的なプライマー延長手法を用い、選択されたｃＤＮＡまたはゲノムライブラリーをスクリーニングして、ｃＤＮＡに逆転写できないｍＲＮＡの前駆体およびプロセッシング中間体を検出することによって得ることができる。
２．宿主細胞の選択および形質転換
宿主細胞は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド生産について本明細書に記載された発現またはクローニングベクターでトランスフェクトし、または形質転換し、プロモーターを誘導し、形質転換体を選択し、または所望の配列をコードする遺伝子を増幅するのに適切なように修飾された慣用的栄養培地中で培養する。培地、温度、ｐＨ等の培養条件は、過度の実験なくして当業者が選択することができる。一般に、細胞培養の生産性を最大化するための原理、プロトコルおよび実用上の技術は、ＭａｍｍａｌｉａｎＣｅｌｌＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ，Ｍ．Ｂｕｔｌｅｒ，ｅｄ．（ＩＲＬＰｒｅｓｓ，１９９１）およびＳａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，（上記）に見出すことができる。

真核生物細胞トランスフェクションおよび原核生物細胞形質転換の方法、例えば、ＣａＣｌ_２、ＣａＰＯ_４、リポソーム−媒介およびエレクトロポレーションは当業者に知られている。用いる宿主細胞に依存して、形質転換は、そのような細胞に適切な標準的技術を用いて行われる。Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，（上記）に記載された塩化カルシウムを使用するカルシウム処理、またはエレクトロポレーションは、一般には、原核生物で用いられる。Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓでの感染は、Ｓｈａｗｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，２３：３１５頁（１９８３年）および１９８９年６月２９日に公開されたＷＯ８９／０５８５９によって記載されたように、ある種の植物細胞の形質転換で用いられる。そのような細胞壁がない哺乳動物細胞では、ＧｒａｈａｍａｎｄＶＡＮＤＥＲＥｂ，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ，５２：４５６−４５７頁（１９７８年）のリン酸カルシウム沈殿方法が使用できる。哺乳動物宿主細胞系トランスフェクションの一般的態様は、米国特許第４，３９９，２１６号に記載されている。酵母への形質転換は、典型的には、ＶａｎＳｏｌｉｎｇｅｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂａｃｔ．，１３９：９４６頁（１９７７年）およびＨｓｉａｏｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．（ＵＳＡ），７６：３８２９頁（１９７９年）の方法に従って行われる。しかしながら、核マイクロインジェクション、エレクトロポレーション、無傷細胞との細菌プロトプラスト融合、またはポリカチオン、例えば、ポリブレン、ポリオルチンなどの、ＤＮＡを細胞に導入するための他の方法を用いることもできる。哺乳動物細胞を形質転換するための種々の技術については、Ｋｅｏｗｎｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓＩｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１８５：５２７−５３７頁（１９９０年）およびＭａｎｓｏｕｒｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３６：３４８−３５２頁（１９８８年）参照。

ベクター中のＤＮＡをクローニングし、または発現させるための適当な宿主細胞は、ここでは、原核生物、酵母、または高等真核生物細胞を含む。適当な原核生物として、限定されるものではないが、グラム−陰性またはグラム−陽性生物、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉなどのＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅなどのユーバクテリアが挙げられる。Ｅ．ｃｏｌｉＫ１２株ＭＭ２９４（ＡＴＣＣ３１，４４６）；Ｅ．ｃｏｌｉＸ１７７６（ＡＴＣＣ３１，５３７）；Ｅ．ｃｏｌｉ株Ｗ３１１０（ＡＴＣＣ２７，３２５）およびＫ５７７２（ＡＴＣＣ５３，６３５）などの種々のＥ．ｃｏｌｉが公に入手可能である。他の適当な原核生物宿主細胞は、ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａなどのＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ，例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ、Ｐｒｏｔｅｕｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、例えば、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｅｒｒａｔｉａ、例えば、Ｓｅｒｒａｔｉａｍａｒｃｅｓｃａｎｓ、およびＳｈｉｇｅｌｌａ、並びにＢ．ｓｕｂｔｉｌｉｓおよびＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓなどのＢａｃｉｌｌｉ（例えば、１９８９年４月１２日に公開されたＤＤ２６６，７１０に開示されたＢ．ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ４１Ｐ）、Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａなどのＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ、およびＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓを含む。これらの例は限定的であるというよりはむしろ説明的である。株Ｗ３１１０は１つの特に好ましい宿主または親宿主である。なぜならば、それは組換えＤＮＡ産物発酵のための通常の宿主株だからである。好ましくは、宿主細胞は最小量のタンパク質分解酵素を分泌する。例えば、株Ｗ３１１０は、宿主に対して内因性であるタンパク質をコードする遺伝子中に遺伝的突然変異を行うように修飾することができ、そのような宿主の例はＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０株１Ａ２；完全な遺伝子型ｔｏｎＡｐｔｒ３を有するＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０株９Ｅ４；完全な遺伝子型ｔｏｎＡｐｔｒ３ｐｈｏＡＥ１５（ａｒｇＦ−ｌａｃ）１６９ｄｅｇＰｏｍｐＴｋａｎ^ｒを有するＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０株２７Ｃ７（ＡＴＣＣ５５，２４４）；完全な遺伝子型ｔｏｎＡｐｔｒ３ｐｈｏＡＥ１５（ａｒｇＦ−ｌａｃ（１６９ｄｅｇＰｏｍｐＴｒｂｓ７ｉｌｖＧｋａｎ^ｒを有するＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０株３７Ｄ６；非カナマイシン耐性ｄｅｇＰ欠失突然変異を持つ株３７Ｄ６であるＥ．ｃｏｌｉＷ３１１０株４０Ｂ４；および１９９０年８月７日に発行された米国特許第４，９４６，７８３号に開示された突然変異体ペリプラズムプロテアーゼを有するＥ．ｃｏｌｉ株を含む。

原核生物に加えて、フィラメント状真菌または酵母などの真核生物微生物は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、もしくはＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードするベクターのための適当なクローニングまたは発現宿主である。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅは、通常に用いられる下等真核生物宿主微生物である。他のものはＳｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ（ＢｅａｃｈａｎｄＮｕｒｓｅ，Ｎａｔｕｒｅ，２９０：１４０頁［１９８１年］；１９８５年５月２日に公開されたＥＰ１３９，３８３）；例えば、Ｋ．ｌａｃｔｉｓ（ＭＷ９８−８Ｃ．ＣＢＳ６８３、ＣＢＳ４５７４；Ｌｏｕｖｅｎｃｏｕｒｔら、Ｊ．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．，１５４（２）：７３７−７４２頁［１９８３年］）、Ｋ．ｆｒａｇｉｌｉｓ（ＡＴＣＣ１２，４２４）、Ｋ．ｂｕｌｇａｒｉｃｕｓ（ＡＴＣＣ１６，０４５）、Ｋ．ｗｉｃｋｅｒａｍｉｉ（ＡＴＣＣ２４，１７８）、Ｋ．ｗａｌｔｉｉ（ＡＴＣＣ５６，５００）、Ｋ．ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｒｕｍ（ＡＴＣＣ３６，９０６；ＶａｎｄｅｎＢｅｒｇｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，８：１３５頁（１９９５年））、Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ、およびＫ．ｍａｒｘｉａｎｕｓなどのＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ宿主（米国特許第４，９４３，５２９号；Ｆｌｅｅｒｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９：６４８−９７５頁（１９９１年））；ｙａｒｒｏｗｉａ（ＥＰ４０２，２２６）；Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ（ＥＰ１８３，０７０；Ｓｒｅｅｋｒｉｓｈｎａｅｔａｌ．，Ｊ．ＢａｓｉｃＭｉｃｒｏｂｉｏｌ．，２８：２６５−２７８頁［１９８８年］）；Ｃａｎｄｉｄａ；ＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａＲｅｅｓｉａ（ＥＰ２４４，２３４）；ＮｅｕｒｏｓｐｏｒａＣＲＡＳＳＡ（Ｃａｓｅら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７６：５２５９−５２６３頁［１９７９年］）；Ｓｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ（１９９０年１０月３１日に公開されたＥＰ３９４，５３８）などのＳｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ；および例えば、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ（１９９１年１月１０日に公開されたＷＯ９１／００３５７）などのフィラメント状真菌、およびＡ．ｎｉｄｕｌａｎｓ（Ｂａｌｌａｎｃｅｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１１２：２８４−２８９頁［１９８３年］；Ｔｉｌｂｕｒｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，２６：２０５−２２１頁［１９８３年］；Ｙｅｌｔｏｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：１４７０−１４７４頁［１９８４年］）およびＡ．ｎｉｇｅｒ（ＫｅｌｌｙａｎｄＨｙｎｅｓ，ＥＭＢＯＪ．，４：４７５−４７９頁［１９８５年］）などのＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ宿主を含む。メチル向性酵母はここでは適当であり、限定されるものではないが、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ、Ｐｉｃｈｉａ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ、およびＲｈｏｄｏｔｏｒｕｌａよりなる属から選択される、メタノール上で成長することができる酵母を含む。酵母のこのクラスの例である特別な種のリストは、Ｃ．Ａｎｔｈｏｎｙ、ＴｈｅＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆＭｅｔｈｙｌｏｔｒｏｐｈｓ，２６９頁（１９８２年）に見出すことができる。

グリコシル化ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現に適した宿主細胞は、多細胞生物から誘導される。無脊椎細胞の例はＤｒｏｓｏｐｈｉｌａＳ２およびＳｐｏｄｏｐｔｅｒａＳｆ９のような昆虫細胞、ならびに植物細胞を含む。有用な哺乳動物宿主細胞系の例はチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）およびＣＯＳ細胞を含む。より具体的な例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１系（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣＣＲＬ１６５１）；ヒト胚性腎臓系（懸濁培養における成長でサブクローンされた２９３または２９３細胞、Ｇｒａｈａｍｅｔａｌ．，Ｊ．ＧｅｎＶｉｒｏｌ．，３６：５９頁（１９７７年））；チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ（ＣＨＯ，ＵｒｌａｕｂａｎｄＣｈａｓｉｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４２１６頁（１９８０年））；マウスＳｅｒｔｏｌｉ細胞（ＴＭ４，Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．，２３：２４３−２５１頁（１９８０年））；ヒト肺細胞（Ｗ１３８，ＡＴＣＣＣＣＬ７５）；ヒト肝臓細胞（ＨｅｐＧ２，ＨＢ８０６５）；およびマウス乳頭腫瘍（ＭＭＴ０６０５６２，ＡＴＣＣＣＣＬ５１）を含む。適当な宿主細胞の選択は、当該分野における技量内と見なされる。
３．複製可能なベクターの選択および使用
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする核酸（例えば、ｃＤＮＡまたはゲノムＤＮＡ）は、クローニング（ＤＮＡの増幅）のための、または発現のための複製可能なベクターに挿入することができる。種々のベクターが公に入手可能である。ベクターは、例えば、プラスミド、コスミド、ウイルス粒子またはファージの形態であり得る。適当な核酸配列は種々の手法によってベクターに挿入することができる。一般に、ＤＮＡは、当該分野で公知の技術を用いて適当な制限エンドヌクレアーゼ部位に挿入される。ベクター成分として、一般には、限定されるものではないが、シグナル配列の１以上、複製起点、１以上のマーカー遺伝子、エンハンサーエレメント、プロモーター、および転写終止配列が挙げられる。これらの成分の１以上を含有する適当なベクターの構築は、当業者に知られた標準的な連結技術を使用する。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは直接的のみならず、シグナル配列、または成熟タンパク質またはポリペプチドのＮ−末端に特異的な切断部位を有する他のポリペプチドであってよい異種ポリペプチドとの融合ペプチドとして組換えにより生産することができる。一般には、シグナル配列はベクターの成分であってよく、あるいはそれは、ベクターに挿入されるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードするＤＮＡの一部であってよい。シグナル配列は、例えば、アルカリ性ホスファターゼ、ペニシラナーゼ、ｌｐｐ、または熱安定性エンテロトキシンＩＩリーダーの群から選択される原核生物シグナル配列であり得る。酵母の選択では、シグナル配列は、例えば、酵母インベルターゼリーダー、アルファ因子リーダー（ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓおよびＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ α−因子リーダーを含む；後者は米国特許第５，０１０，１８２号に記載されている）、酸ホスファターゼリーダー、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓグルコアミラーゼリーダー（１９９０年４月４日に公開されたＥＰ３６２，１７９）または１９９０年１１月１５日に公開されたＷＯ９０／１３６４６に記載されたシグナルであってよい。哺乳動物細胞発現においては、同一または関連種の分泌されたポリペプチドからのシグナル配列、ならびにウイルス分泌リーダーのような哺乳動物シグナル配列を用いて、タンパク質の分泌を指示することができる。

発現およびクローニングベクターは、共に、ベクターが１以上の選択された宿主細胞において複製できるようにする核酸配列を含有する。そのような配列は種々の細菌、酵母およびウイルスでよく知られている。プラスミドｐＢＲ３２２からの複製起点はほとんどのグラム−陰性菌で適しており、２μプラスミド起点は酵母で適当であり、種々のウイルス起点（ＳＶ４０、ポリオーマ、アデノウイルス、ＶＳＶまたはＢＰＶ）は哺乳動物細胞におけるクローニングベクターで有用である。

発現およびクローニングベクターは、典型的には、選択性マーカーともいわれる選択遺伝子を含有するであろう。典型的な選択遺伝子は、（ａ）抗生物質または他のトキシン、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、メトトレキセート、またはテトラサイクリンに対する耐性を付与し、（ｂ）栄養要求性欠陥を補い、または（ｃ）複合培地から入手できない臨界的栄養素を供給するタンパク質をコードする。例えば、ＢａｃｉｌｌｉについてのＤ−アラニンラセマーゼをコードする遺伝子。

哺乳動物細胞についての適当な選択性マーカーの例は、細胞成分の同定が、ＤＨＦＲまたはチミジンキナーゼなどの、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードする核酸を摂取するのを可能とするものである。適当な宿主細胞は、野生型ＤＨＦＲを使用する場合には、Ｕｒｌａｕｂｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：４２１６頁（１９８０年）によって記載されたように調製され、増殖された、ＤＨＦＲ活性が欠乏したＣＨＯ細胞系である。酵母で用いるのに適した選択遺伝子は、酵母プラスミドＹＲｐ７に存在するｔｒｐ１遺伝子である［Ｓｔｉｎｃｈｃｏｍｂｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２８２：３９（１９７９）；Ｋｉｎｇｓｍａｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，７：１４１頁（１９７９年）；Ｔｓｃｈｅｍｐｅｒら、Ｇｅｎｅ，１０：１５７頁（１９８０年）］。ｔｒｐ１遺伝子は、トリプトファンにおいて増殖する能力を欠く酵母の突然変異体株、例えば、ＡＴＣＣＮｏ．４４０７６またはＰＥＰ４−１［Ｊｏｎｅｓ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，８５：１２頁（１９７７年）］についての選択マーカーを供する。

発現およびクローニングベクターは、通常、ｍＲＮＡを合成するためのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードする核酸配列に操作可能に連結されたプロモーターを含有する。種々の潜在的宿主細胞によって認識されるプロモーターはよく知られている。原核生物宿主で用いるのに適したプロモーターはβ−ラクタマーゼおよびラクトースプロモーター系［Ｃｈａｎｇｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２７５：６１５頁（１９７８年）；Ｇｏｅｄｄｅｌｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２８１：５４４頁（１９７９年）］、アルカリ性ホスファターゼ、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系［Ｇｏｅｄｄｅｌ，ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．，８：４０５７頁（１９８０年）；ＥＰ３６，７７６］、およびｔａｃプロモーターなどのハイブリッドプロモーター［ｄｅＢｏｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８０：２１−２５頁（１９８３年）］を含む。細菌系で用いるプロモーターは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡに操作可能に連結されたシャイン−ダルガルノ（Ｓ．Ｄ．）配列をやはり含有するであろう。

酵母宿主で用いられる適当な促進配列の例として、３−ホスホグリセリン酸キナーゼ［Ｈｉｔｚｅｍａｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５５：２０７３頁（１９８０年）］、またはエノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸、デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセリン酸ムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースホスフェートイソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、およびグルコキナーゼのような他の解糖酵素［Ｈｅｓｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ａｄｖ．ＥｎｚｙｍｅＲｅｇ．，７：１４９頁（１９６８年）；Ｈｏｌｌａｎｄ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１７：４９００頁（１９７８年）］についてのプロモーターが挙げられる。

成長条件によって制御される転写のさらなる利点を有する誘導性プロモーターである他の酵母プロモーターは、アルコールデヒドロゲナーゼ２、イソチトクロームＣ、酸ホスファターゼ、窒素代謝に関連する分解酵素、メタロチオネイン、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、およびマルトースおよびガラクトース資化を担う酵素についてのプロモーター領域である。酵母発現で用いられる適当なベクターおよびプロモーターはＥＰ７３，６５７にさらに記載されている。

哺乳動物宿主細胞におけるベクターからのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０転写は、例えば、ポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス（１９８９年７月５日に公開されたＵＫ２，２１１，５０４）、（アデノウイルス２などの）アデノウイルス、ウシパピローマウイルス、鳥類肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルスおよびシミアンウイルス４０（ＳＶ４０）などのウイルスのゲノムから、異種哺乳動物プロモーター、例えば、アクチンプロモーターまたは免疫グロブリンプロモーターから、および熱−ショックプロモーターから得られるプロモーターによって制御されるが、但し、そのようなプロモーターは宿主細胞系に適合するものとする。

高等真核生物によるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡの転写は、エンハンサー配列をベクターに挿入することによって増加させることができる。エンハンサーは、プロモーターに作用してその転写を増加させる、通常は約１０ないし３００ｂｐのＤＮＡのシス−作用性エレメントである。多くのエンハンサー配列は、今日、哺乳動物遺伝子（グロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテインおよびインスリン）から知られている。しかしながら、典型的には、真核生物細胞ウイルスからのエンハンサーが用いられるであろう。その例は、複製起点（ｂｐ１００ないし２７０）の後期側のＳＶ４０エンハンサー、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後期側のポリオーマエンハンサー、およびアデノウイルスエンハンサーを含む。エンハンサーは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０コーディング配列に対して５’または３’の位置においてベクターにスプライシングできるが、好ましくは、プロモーターから５’側の部位に位置する。

真核生物宿主細胞（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、または他の多細胞生物からの有核細胞）で用いられる発現ベクターもまた、転写の終止、およびｍＲＮＡの安定化に必要な配列を含むであろう。そのような配列は、通常、真核生物またはウイルスＤＮＡまたはｃＤＮＡの５’および、場合によっては、３’非翻訳領域から得られる。これらの領域は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするｍＲＮＡの非翻訳部分におけるポリアデニル化断片として転写されるヌクレオチドセグメントを含有する。

組換え脊椎動物細胞培養でのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの合成に適合させるのに適したなお他の方法、ベクター、および宿主細胞は、Ｇｅｔｈｉｎｇｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２９３：６２０−６２５頁（１９８１年）；Ｍａｎｔｅｉｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２８１：４０−４６頁（１９７９年）；ＥＰ１１７，０６０；およびＥＰ１１７，０５８に記載されている。
４．遺伝子増幅／発現の検出
遺伝子増幅および／または発現は、本明細書中で提供される配列に基づき、適当な標識されたプローブを用い、例えば、慣用的なサザーンブロッティング、ｍＲＮＡの転写を定量するためのノーザンブロッティング［Ｔｈｏｍａｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，７７：５２０１−５２０５頁（１９８０年）］、ドットブロッティング（ＤＮＡ分析）、またはイン・サイチュハイブリダイゼーションによって直接的に試料中で測定することができる。別法として、ＤＮＡデュプレックス、ＲＮＡデュプレックス、およびＤＮＡ−ＲＮＡハイブリッドデュプレックスまたはＤＮＡ−タンパク質デュプレックスを含めた、特異的デュプレックスを認識できる抗体を使用することができる。該抗体は、次に、標識することができ、表面でのデュプレックスの形成に際して、デュプレックスに結合した抗体の存在を検出することができるように、デュプレックスが表面に結合した場合、アッセイを行うことができる。

別法として、遺伝子発現は、細胞または組織セクションの免疫組織化学的染色、および細胞培養または体液のアッセイのような免疫学的方法によって測定して、遺伝子産物の発現を直接的に定量することができる。免疫組織化学的染色および／または試料流体のアッセイで有用な抗体はモノクローナルまたはポリクローナルいずれかであってよく、いずれかの哺乳動物において調製することができる。便宜には、抗体は、天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対して、本明細書中で提供されるＤＮＡ配列に基づく合成ペプチドに対して、またはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ＤＮＡに融合し、かつ特異的抗体エピトープをコードする外因性配列に対して調製することができる。
５．ポリペプチドの精製
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの形態は、培養基から、または宿主細胞溶解物から回収することができる。膜に結合するとき、適当な洗剤溶液（例えば、トリトン−Ｘ−１００）を用い、または酵素切断によって膜から放出することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現で使用される細胞は、凍結−解凍サイクリング、音波処理、機械的破壊、または細胞溶解剤などの種々の物理的または化学的手段によって破壊することができる。

組換え細胞タンパク質またはポリペプチドからＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを精製するのが望ましいであろう。以下の手法は：イオン−交換カラムでの分画；エタノール沈殿；逆相ＨＰＬＣ；シリカまたはＤＥＡＥなどのカチオン−交換樹脂でのクロマトグラフィー；クロマトフォーカシング；ＳＤＳ−ＰＡＧＥ；硫酸アンモニウム沈殿；例えば、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−７５を用いるゲル濾過；ＩｇＧなどの汚染物を除去するためのプロテインＡＳｅｐｈａｒｏｓｅカラム；およびＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのエピトープ−タグ化形態に結合する金属キレーティングカラムによる適当な精製手法の例である。タンパク質精製の種々の方法を使用することができ、そのような方法は当該分野で公知であり、例えば、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１８２頁（１９９０年）；Ｓｃｏｐｅｓ，ＰｒｏｔｅｉｎＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，ＮｅｗＹｏｒｋ（１９８２年）に記載されている。選択された精製工程は、例えば、用いる生産プロセスおよび生成した特定のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの性質に依存する。

Ｅ．ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの使用
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列（またはそれらの相補体）は、染色体および遺伝子マッピングにおける、ならびにアンチセンスＲＮＡおよびＤＮＡの発生におけるハイブリダイゼーションプローブとしての使用を含めた、分子生物学の技術において種々の適用を有する。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０核酸もまた、本明細書中に記載した組換え技術によるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの調製で有用であろう。

全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子、またはその部分は、ｃＤＮＡライブラリーのためのハイブリダイゼーションプローブとして用いて、全長ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ｃＤＮＡを単離し、または本明細書中に開示された天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０配列に対して所望の配列同一性を有するなお他のｃＤＮＡ（例えば、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたは他の種からのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの天然に生じる改変体をコードするもの）を単離することができる。所望により、プローブの長さは約２０ないし約５０塩基であろう。ハイブリダイゼーションプローブは、全長天然ヌクレオチド配列の少なくとも部分的に新規な領域に由来することができ、ここに、それらの領域は過度の実験なくして決定することができ、あるいは天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０のプロモーター、エンハンサーエレメントおよびイントロンを含めたゲノム配列に由来することができる。その例として、スクリーニング方法は、公知のＤＮＡ配列を用いてＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子のコーディング領域を単離して、約４０塩基の選択されたプローブを合成することを含む。ハイブリダイゼーションプローブは、^３２Ｐまたは^３５Ｓなどの放射性ヌクレオチド、またはアビジン／ビオチンカップリング系を介してプローブにカップリングされたアルカリ性ホスファターゼなどの酵素標識を含めた種々の標識によって標識することができる。本発明のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子のそれに相補的な配列を有する標識されたプローブを用いて、ヒトｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡまたはｍＲＮＡのライブラリーをスクリーニングして、そのようなライブラリーのいずれのメンバーがプローブにハイブリダイズするかを決定することができる。ハイブリダイゼーション技術は後の実施例においてさらに詳細に記載する。

本出願において開示されたいずれのＥＳＴ配列も、本明細書中に開示された方法を用い、プローブとして同様に使用することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０核酸の他の有用な断片は、標的ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ｍＲＮＡ（センス）またはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ＤＮＡ（アンチセンス）配列に結合することができる一本鎖核酸配列（ＲＮＡまたはＤＮＡいずれか）を含むアンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドを含む。アンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドは、本発明によると、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ＤＮＡのコーディング領域の断片も含む。そのような断片は、一般には、少なくとも約１４ヌクレオチド、好ましくは約１４ないし３０ヌクレオチドを含む。所与のタンパク質をコードするｃＤＮＡ配列に基づき、アンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドを駆動する能力は、例えば、ＳｔｅｉｎおよびＣｏｈｅｎ（ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４８：２６５９頁，１９８８年）およびｖａｎｄｅｒＫｒｏｌｅｔａｌ．，（ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ６：９５８頁，１９８８年）に記載されている。

標的核酸配列へのアンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドの結合の結果、デュプレックスの増強された分解、転写または翻訳の未成熟終止を含めたいくつかの手段の１つによって、または他の手段によって、標的配列の転写または翻訳をブロックするデュプレックスが形成される。かくして、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の発現をブロックするのに用いることができる。アンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドは、さらに、修飾された糖−ホスホジエステル骨格（またはＷＯ９１／０６６２９に記載されたような他の糖結合）を有するオリゴヌクレオチドを含み、そのような糖結合は内因性ヌクレアーゼに対して耐性である。耐性糖結合を持つそのようなオリゴヌクレオチドはイン・ビボで安定である（すなわち、酵素分解に抵抗することができ）が、標的ヌクレオチド配列に結合することができる配列特異性を保有する。

センスまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドの他の例は、ＷＯ９０／１００４８に記載されたもののような、ポリ−（Ｌ−リシン）などの標的核酸配列に対するオリゴヌクレオチドの親和性を増加させる有機部位、他の部位に共有結合したオリゴヌクレオチドを含む。なおさらに、エリピチシンなどのインターカレーティング剤、およびアルキル化剤または金属錯体をセンスまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドに結合させて、標的ヌクレオチド配列に対するアンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドの結合特異性を修飾することができる。

アンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドは、例えば、ＣａＰＯ_４−媒介ＤＮＡトランスフェクション、エレクトロポレーションを含めたいずれかの遺伝子導入方法によって、あるいはエプスタイン−バールウイルスなどの遺伝子導入ベクターを用いることによって、標的核酸配列を含有する細胞に導入することができる。好ましい手法において、アンチセンスまたはセンスオリゴヌクレオチドを適当なレトロウイルスベクターに挿入する。標的核酸配列を含有する細胞を、イン・ビボまたはエクス・ビボいずれかにて組換えレトロウイルスベクターと接触させる。適当なレトロウイルスベクターとして、限定されるものではないが、マウスレトロウイルスＭ−ＭｕＬ部位、Ｎ２（Ｍ−ＭｕＬＶに由来するレトロウイルス）に由来するもの、またはＤＣＴ５Ａ、ＤＣＴ５ＢおよびＤＣＴ５Ｃと命名された二重コピーベクター（ＷＯ９０／１３６４１参照）が挙げられる。

また、センスまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＷＯ９１／０４７５３に記載されたように、リガンド結合分子とのコンジュゲートの形成によって、標的ヌクレオチド配列を含有する細胞に導入することもできる。適当なリガンド結合分子として、限定されるものではないが、細胞表面受容体、成長因子、他のサイトカイン、あるいは細胞表面受容体に結合する他のリガンドが挙げられる。好ましくは、リガンド結合分子のコンジュゲーションは、その対応する分子または受容体に結合し、またはセンスまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはそのコンジュゲートしたバージョンの細胞への進入をブロックするリガンド結合分子の能力に実質的に干渉しない。

別法として、センスまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＷＯ９０／１０４４８に記載されたように、オリゴヌクレオチド−脂質複合体の形成によって、標的核酸配列を含有する細胞に導入することができる。該センスまたはアンチセンスオリゴヌクレオチド−脂質複合体は、好ましくは、内因性リパーゼによって細胞内で解離される。

アンチセンスまたはセンスＲＮＡまたはＤＮＡ分子は、一般には、長さが少なくとも５塩基、長さが約１０塩基、長さが約１５塩基、長さが約２０塩基、長さが約２５塩基、長さが約３０塩基、長さが約３５塩基、長さが約４０塩基、長さが約４５塩基、長さが約５０塩基、長さが約５５塩基、長さが約６０塩基、長さが約６５塩基、長さが約７０塩基、長さが約７５塩基、長さが約８０塩基、長さが約８５塩基、長さが約９０塩基、長さが約９５塩基、長さが約１００塩基またはそれ以上である。

該プローブをＰＣＲ技術で使用して、密接に関連するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０コーディング配列の同定用の配列のプールを生じさせることもできる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を用いて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子をマッピングするために、および遺伝的障害を持つ個体の遺伝子分析のために、ハイブリダイゼーションプローブを構築することもできる。本明細書中で提供されるヌクレオチド配列は、イン・サイチュハイブリダイゼーション、公知の染色体マーカーに対する連鎖分析、およびライブラリーでのハイブリダイゼーションスクリーニングなどの公知の技術を用いて染色体および染色体の特異的領域にマッピングすることができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０についてのコーディング配列が別のタンパク質に結合するタンパク質をコードする場合（例えば、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０が受容体である場合）、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをアッセイで用いて、結合相互作用に関与する他のタンパク質または分子を同定することができる。そのような方法によって、受容体／リガンド結合相互作用の阻害剤を同定することができる。そのような結合相互作用に関与するタンパク質を用いて、結合相互作用のペプチドまたは小分子阻害剤またはアゴニストについてスクリーニングすることもできる。また、受容体ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を用いて、関連するリガンドを単離することができる。スクリーニングアッセイを設計して、天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対する受容体の生物学的活性を模倣するリード化合物を見出すことができる。そのようなスクリーニングアッセイは、それらを、小分子薬物候補を同定するのに特に適当とする、化学ライブラリーの高−スループットスクリーニングに使用できるアッセイを含むであろう。考えられる小分子として、合成有機または無機化合物が挙げられる。該アッセイは、タンパク質−タンパク質結合アッセイ、生化学的スクリーニングアッセイ、免疫アッセイおよび細胞ベースのアッセイを含めた種々のフォーマットで行うことができ、それらは、当該分野でよく特徴付けられている。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする核酸、またはその修飾形態を用いて、次に、治療的に有用な試薬の開発およびスクリーニングで有用なトランスジェニック動物または「ノックアウト」動物いずれかを創製することもできる。トランスジェニック動物（例えば、マウスまたはラット）は、導入遺伝子を含有する細胞を有する動物であり、その導入遺伝子は、親の、例えば、胚段階において動物または動物の先祖に導入することができる。導入遺伝子は、トランスジェニック動物がそれから発生する細胞のゲノムに組み込まれるＤＮＡである。本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡを発現する細胞を含有するトランスジェニック動物を創製するために用いられる確立された技術およびゲノム配列に従って、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするゲノムＤＮＡをクローン化するのに用いることができるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡを提供する。当該分野で知られたいずれかの技術を用いて、標的遺伝子導入遺伝子を動物に導入して、トランスジェニック動物の創始系を生産することができる。そのような技術として、限定されるものではないが、前核マイクロインジェクション（米国特許第４，８７３，１９１号、第４，７３６，８６６号および第４，８７０，００９号）；生殖系へのレトロウイルス媒介遺伝子導入（ＶａｎｄｅｒＰｕｔｔｅｎ，ｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，８２：６１４８−６１５２頁（１９８５年））；胚性幹細胞における遺伝子標的化（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，ｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，５６：３１３−３２１頁（１９８９年））；遺伝子捕獲ベクターを用いる非特異的挿入不活化（米国特許第６，４３６，７０７号）；胚のエレクトロポレーション（Ｌｏ，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，３：１８０３−１８１４頁（１９８３年））；および精子−媒介遺伝子導入（Ｌａｖｉｔｒａｎｏ，ｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，５７：７１７−７２３頁（１９８９年））；等が挙げられる。典型的には、特定の細胞は、組織−特異的エンハンサーによるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０導入遺伝子取り込みのために標的化されるであろう。胚段階において動物の生殖系に導入されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする導入遺伝子のコピーを含むトランスジェニック動物を用いて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡの増大した発現の効果を調べることができる。そのような動物は、例えば、その過剰発現に関連した病理学的疾患からの保護を付与すると考えら得る試薬についてのテスター動物として用いることができる。本発明のこの局面によると、動物を該試薬で処理し、導入遺伝子を担う未処理動物と比較した、病理学的疾患の低下した発生率は、病理学的疾患についての潜在的治療介入を示すであろう。

別法として、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの非ヒト相同体を用いて、動物の胚性幹細胞に導入された、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする内因性遺伝子およびＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする改変されたゲノムＤＮＡ間の相同組換えの結果として、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０タンパク質をコードする欠陥または改変遺伝子を有するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０「ノックアウト」動物を構築することができる。好ましくは、該ノックアウト動物は哺乳動物である。より好ましくは、該哺乳動物はラットまたはマウスなどのげっ歯類である。例えば、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡを用いて、確立された技術に従い、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするゲノムＤＮＡをクローン化することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするゲノムＤＮＡの部分を欠失させ、または組込みをモニターするのに用いることができる選択性マーカーをコードする遺伝子などの別の遺伝子で置き換えることができる。典型的には、数キロベースの（５’および３’末端双方における）未改変フランキングＤＮＡがベクターに含まれる［例えば、相同組換えベクターの記載については、ＴｈｏｍａｓａｎｄＣａｐｅｃｃｈｉ，Ｃｅｌｌ，５１：５０３頁（１９８７年）参照］。該ベクターは（例えば、エレクトロポレーションによって）胚性幹細胞系に導入し、導入されたＤＮＡが内因性ＤＮＡと相同組換えされた細胞を選択する［例えば、Ｌｉｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，６９：９１５頁（１９９２年）］。次いで、選択された細胞を動物（例えば、マウスまたはラット）の胚盤胞に注入して、凝集キメラを形成する［例えば、Ｂｒａｄｌｅｙ，ｉｎＴｅｒａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａｓａｎｄＥｍｂｒｙｏｎｉｃＳｔｅｍＣｅｌｌｓ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ，Ｅ．Ｊ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ，ｅｄ．（ＩＲＬ，Ｏｘｆｏｒｄ，１９８７），１１３−１５２頁］。次いで、キメラ胚を適当な偽妊娠メス仮腹動物に移植し、該胚を出産させて、「ノックアウト」動物を作成することができる。それらの胚細胞において相同組換えされたＤＮＡを保有する子孫は標準的な技術によって同定し、それを用いて、当該動物の全部の細胞が相同組換えされたＤＮＡを含有する動物を育種することができる。ノックアウト動物は、例えば、ある種の病理学的疾患に対して防御するそれらの能力について、およびＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の不存在による病理学的疾患のそれらの発生について特徴付けることができる。

加えて、ノックアウトマウスは、薬物標的についての遺伝子機能および医薬的用途の発見において、ならびに所与の標的に関連する潜在的オン−ターゲット副作用の測定において高度に情報的であり得る。遺伝子機能および生理学はマウスおよびヒトの間でかなりよく保存されている。というのは、それらは共に哺乳動物であって、種の間でかなり保存された同様の数の遺伝子を含有するからである。例えば、最近、マウス染色体１６の９８％はヒトオルソログを有することが記載されている（Ｍｕｒａｌｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２９６：１６６１−７１頁（２００２年））。

胚性幹（ＥＳ）細胞における遺伝子標的化は、ヒト病気に関連する多くの遺伝子においてナル突然変異を持つマウスの構築を可能としたが、全ての遺伝的病気がナル突然変異に帰属できるのではない。マウス遺伝子座を破壊し、突然変異を持つヒトカウンターパートを導入し得る遺伝子置き換え（ノック−イン）についての方法を確立することによって、ヒト病気の価値あるマウスモデルを設計することができる。引き続いて、ヒトタンパク質を標的化するイン・ビボ薬物実験を行うことができる（Ｋｉｔａｍｏｔｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌＲｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，２２２：７４２−４７頁（１９９６年））。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする核酸を遺伝子治療で用いることもできる。遺伝子治療適用においては、遺伝子を細胞に導入して、例えば、欠陥遺伝子の置き換えのために、治療的に有効な遺伝子産物のイン・ビボ合成を達成する。「遺伝子治療」は継続する効果が単一の処理によって達成される慣用的遺伝子治療、および治療上有効なＤＮＡまたはｍＲＮＡの一回または反復した投与を含む、遺伝子治療剤の投与を共に含む。アンチセンスＲＮＡおよびＤＮＡは、イン・ビボである種の遺伝子の発現をブロックするための治療剤として用いることができる。短いアンチセンスオリゴヌクレオチドは細胞に輸入することができ、そこでそれらは細胞膜によりその制限された摂取によって引き起こされたその低い細胞内濃度にもかかわらず阻害剤として作用することが既に示されている（Ｚａｍｅｃｎｉｋｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８３：４１４３−４１４６頁［１９８６年］）。該オリゴヌクレオチドを修飾して、例えば、未荷電基によってそれらの負に荷電したホスホジエステル基を置換することにより、それらの摂取を増強することができる。

核酸を生きた細胞に導入するために利用できる種々の技術がある。該技術は、核酸がイン・ビトロにて培養細胞に、または意図した宿主の細胞にイン・ビボで導入されたか否かに依存して変化する。イン・ビトロで哺乳動物細胞に核酸を導入するのに適した技術はリポソーム、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、細胞融合、ＤＥＡＥ−デキストラン、リン酸カルシウム沈殿方法等の使用を含む。現在好ましいイン・ビボ遺伝子導入技術は、ウイルス（典型的にはレトロウイルス）ベクターでのトランスフェクション、およびウイルス被膜タンパク質−リポソーム媒介トランスフェクションを含む（Ｄｚａｕｅｔａｌ．，ＴｒｅｎｄｓｉｎＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１１，２０５−２１０頁［１９９３年］）。いくつかの状況においては、細胞表面膜タンパク質または標的細胞に対して特異的な抗体、標的細胞上の受容体に対するリガンド等の標的細胞を標的化する剤を核酸源に供するのが望ましい。リポソームを使用する場合、エンドサイトーシスに関連する細胞表面膜タンパク質に結合するタンパク質を標的化のために、および／または摂取を容易とするために用いることができる。例えば、特定の細胞型に対して向性であるキャプシドタンパク質またはその断片、サイクリングにおいて内部化を受けるタンパク質に対する抗体、細胞内局所化を標的とし、細胞内半減期を増強するタンパク質。受容体−媒介エンドサイトーシスの技術は、例えば、Ｗｕｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６２，４４２９−４４３２頁（１９８７年）；およびＷａｇｎｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８７，３４１０−３４１４頁（１９９０年）に記載されている。遺伝子作成および遺伝子治療のプロトコルのレビューについては、Ａｎｄｅｒｓｏｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２５６，８０８−８１３頁（１９９２年）参照。

本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、タンパク質電気泳動目的のための分子量マーカーとして使用することもでき、単離された核酸配列はそれらのマーカーを組換えにより発現するのに用いることができる。

本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする核酸分子またはその断片は、染色体同定で有用である。この点に関し、新しい染色体マーカーを同定する継続的な必要性が存在する。というのは、現実の配列データに基づく、比較的少数の染色体マーカー試薬が現在入手可能なのに過ぎないからである。本発明の各ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０核酸分子は、染色体マーカーとして用いることができる。

本発明のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドおよび核酸分子は組織タイピングにつき診断的に用いることもでき、本発明のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、好ましくは、同一組織型の正常な組織と比較して、病気組織において、相互と比較して１つの組織において異なって発現され得る。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０核酸分子は、ＰＣＲ、ノーザン分析、サザーン分析およびウエスタン分析のためのプローブを作成するための用途を見出すであろう。

本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、治療剤として使用することもできる。本発明のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、公知の方法に従って処方して、医薬上有用な組成物を調製することができ、それにより、このＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０産物は医薬上許容される担体ビヒクルと混合して合わされる。治療的処方物は、凍結乾燥処方または水性溶液の形態で、任意の生理学的に許容される担体、賦形剤または安定化剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ１６ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０年））と、所望の程度の純度を有する有効成分とを混合することによって貯蔵のために調製される。許容される担体、賦形剤または安定化剤は用いる用量および濃度において受容体に対して非毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸などの緩衝剤；アスコルビン酸を含めた抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンまたはリシンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース、デキストリンを含めた単糖、二糖および他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；マンニトールまたはソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの塩−形成対イオン；および／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）またはＰＥＧなどのノニオン界面活性剤を含む。

イン・ビボ投与で用いるべき処方は滅菌されなければならない。これは、凍結乾燥および復元の前に、またはそれに続いて、滅菌濾過膜を通じる濾過によって容易に達成される。

治療組成物は、ここでは、一般には、滅菌アクセスポートを有する容器、例えば、皮下注射針によって刺すことができるストッパーを有する静脈内溶液バッグまたはバイアル内に置かれる。

投与の経路は、公知の方法、例えば、静脈内、腹腔内、脳内、筋肉内、眼内、病巣内経路、局所投与による、あるいは除放系による注射または注入による。

本発明の医薬組成物の用量および所望の薬物濃度は、考えられる特定の用途に依って変化し得る。適当な用量または投与の経路の決定は、通常の医師の技量内である。動物実験は、ヒト療法についての有効用量の決定のための信頼できるガイダンスを提供する。有効用量の種間スケーリングは、Ｍｏｒｄｅｎｔｉ，Ｊ．ａｎｄＣｈａｐｐｅｌｌ，Ｗ．”Ｔｈｅｕｓｅｏｆｉｎｔｅｒｓｐｉｃｅｓｓｃａｌｉｎｇｉｎｔｏｘｉｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ” ＩｎＴｏｘｉｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓａｎｄＮｅｗＤｒｕｇＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，Ｙａｃｏｂｉｅｔａｌ．，Ｅｄｓ．，ＰｅｒｇａｍｏｎＰｒｅｓｓ，ＮｅｗＹｏｒｋ１９８９年，４２−９６頁によって規定された原理に従って行うことができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたはそのアゴニストまたはアンタゴニストのイン・ビボ投与を用いる場合、通常の用量は、投与の経路に依存して、１日当たり約１０ｎｇ／ｋｇないし１００ｍｇ／ｋｇ哺乳動物体重またはそれ以上、好ましくは約１μｇ／ｋｇ／日ないし１０ｍｇ／ｋｇ／日で変化し得る。特定の用量および送達の方法に関するガイダンスは文献に供される；例えば、米国特許第４，６５７，７６０号；第５，２０６，３４４号；または第５，２２５，２１２号参照。異なる処方が異なる治療化合物および異なる障害で効果的であり、１つの器官または組織を標的とする投与は、例えば、別の器官または組織に対するものとは異なる方法での送達を必要とし得ると予測される。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの徐放投与が、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの投与を必要とするいずれかの病気または障害の治療に適した放出特徴を持つ処方で望まれる場合、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのマイクロカプセル化が考えられる。徐方のための組換えタンパク質のマイクロカプセル化が、ヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、インターフェロン−（ｒｈＩＦＮ−）、インターロイキン−２、およびＭＮｒｇｐ１２０で首尾よく行われてきた。Ｊｏｈｎｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．，２：７９５−７９９頁（１９９６年）；Ｙａｓｕｄａ，Ｂｉｏｍｅｄ．Ｔｈｅｒ．，２７：１２２１−１２２３頁（１９９３年）；Ｈｏｒａｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，８：７５５−７５８頁（１９９０年）；Ｃｌｅｌａｎｄ，”ＤｅｓｉｇｎａｎｄＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＳｉｎｇｌｅＩｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎＶａｃｃｉｎｅｓＵｓｉｎｇＰｏｌｙｌａｃｔｉｄｅＰｏｌｙｇｌｙｃｏｌｉｄｅＭｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅＳｙｓｔｅｍｓ”，ｉｎＶａｃｃｉｎｅＤｅｓｉｇｎ：ＴｈｅＳｕｂｕｎｉｔａｎｄＡｄｊｕｖａｎｔＡｐｐｒｏａｃｈ，ＰｏｗｅｌｌａｎｄＮｅｗｍａｎ，ｅｄｓ，（ＰｌｅｎｕｍＰｒｅｓｓ：ＮｅｗＹｏｒｋ，１９９５），４３９−４６２頁；ＷＯ９７／０３６９２、ＷＯ９６／４００７２、ＷＯ９６／０７３９９；および米国特許第５，６５４，０１０号。

これらのタンパク質の除放処方は、その生体適合性および広い範囲の生分解性特質のためポリ−乳酸−コグリコール酸（ＰＬＧＡ）ポリマーを用いて開発された。ＰＬＧＡ、乳酸およびグリコール酸の分解性生物はヒト身体内で迅速にクリアできる。さらに、このポリマーの分解性は、その分子量および組成に依存して数ヶ月から数年の間調整することができる。Ｌｅｗｉｓ，”Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｒｅｌｅａｓｅｏｆｂｉｏａｃｔｉｖｅａｇｅｎｔｓｆｒｏｍｌａｃｔｉｄｅ／ｇｌｙｃｏｌｉｄｅｐｏｌｙｍｅｒ”，ｉｎ：Ｍ．ＣｈａｓｉｎａｎｄＲ．Ｌａｎｇｅｒ（Ｅｄｓ．），ＢｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅＰｏｌｙｍｅｒｓａｓＤｒｕｇＳｙｓｔｅｍｓ（ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ：ＮｅｗＹｏｒｋ，１９９０），１−４１頁。

本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを模倣する（アゴニスト）またはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの効果を妨げる（アンタゴニスト）ものを同定するための化合物をスクリーニングする方法を含む。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを模倣するアゴニストは、負の表現型が、そのゲノムがＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物での発見に基づいて観察される場合に特に治療的に価値があろう。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの効果を妨げるアンタゴニストは、非ヒトトランスジェニックノックアウトマウスでの観察に基づいて陽性表現型が観察される場合に特に治療的に価値があろう。アンタゴニスト薬物候補についてのスクリーニングアッセイは、本明細書中で同定された遺伝子によってコードされたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに結合し、それと複合体化し、あるいはそうでなければ他の細胞タンパク質とコードされたポリペプチドとの相互作用に干渉する化合物を同定するように設計される。そのようなスクリーニングアッセイは、化学ライブラリーの高−スループットスクリーニングに使用できるアッセイを含み、それらを、小分子薬物候補を同定するのに特に適したものとする。

該アッセイは、当該分野で良く特徴付けられている、タンパク質−タンパク質結合アッセイ、生化学スクリーニングアッセイ、イムノアッセイ、および細胞−ベースのアッセイを含めた種々のフォーマットで行うことができる。

アンタゴニストのための全てのアッセイは、それらが、これらの２つの化合物が相互作用するのを可能とする条件下で、かつそれに十分な時間でここに同定された核酸によってコードされたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと薬物候補とを接触させることを必要とする点で共通する。

結合アッセイにおいては、相互作用は結合であって、形成された複合体は反応混合物中で単離し、または検出することができる。ここに同定された遺伝子によってコードされるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、または薬物候補は固相上に、または、マイクロタイタープレート上に、共有結合または非共有結合によって固定化される。非共有結合は、一般には、固体表面をＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの溶液でコーティングし、乾燥することによって達成される。別法として、固定化すべきＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに特異的な固定化された抗体、例えば、モノクローナル抗体を用いて、それを固体表面に係留することができる。該アッセイは、検出可能な標識によって標識してもよい非固定化成分を固定化された成分、例えば、係留された成分を含有する被覆表面に加えることによって行われる。反応が完了すると、非反応成分を、例えば、洗浄によって除去し、固体表面に係留された複合体を検出する。元来非固定化成分が検出可能な標識を担う場合、表面に固定化された標識の検出は、複合体化が起こったことを示す。元来非固定化成分が標識を担わない場合、複合体化は、例えば、固定化された複合体に特異的に結合する標識された抗体を用いることによって検出することができる。

候補化合物が、本明細書中で同定された遺伝子によってコードされる特定のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに相互作用するが、それに結合しないとき、そのポリペプチドとのその相互作用は、タンパク質−タンパク質相互作用を検出するのによく知られた方法によってアッセイすることができる。そのようなアッセイは、例えば、架橋、共−免疫沈澱、およびグラジエントまたはクロマトグラフィーカラムを通す共精製などの常套のアプローチを含む。加えて、タンパク質−タンパク質相互作用は、ＣｈｅｖｒａｙａｎｄＮａｔｈａｎｓ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：５７８９−５７９３頁（１９９１年）によって開示されたＦｉｅｌｄｓおよび共同研究者（ＦｉｅｌｄｓａｎｄＳｏｎｇ，Ｎａｔｕｒｅ（Ｌｏｎｄｏｎ），３４０：２４５−２４６頁（１９８９年）；Ｃｈｉｅｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８８：９５７８−９５８２頁（１９９１年））によって記載された酵母−ベースの遺伝子系を用いることによってモニターすることができる。酵母ＧＡＬ４などの多くの転写アクチベーターは２つの物理的に区別されるモジュラードメインよりなり、１つはＤＮＡ−結合ドメインとして作用し、他方は転写−活性化度面として機能する。これまでの刊行物に記載された酵母発現系（一般に、「２−ハイブリッド系」という）は、この特性を利用し、２つのハイブリッドタンパク質を使用し、１つは、標的タンパク質はＧＡＬ４のＤＮＡ−結合ドメインに融合したものであり、もう１つは、候補活性化タンパク質が活性化ドメインに融合したものである。ＧＡＬ−４−活性化プロモーターの制御下でのＧＡＬ１−ｌａｃＺレポーター遺伝子の発現は、タンパク質−タンパク質相互作用を介するＧＡＬ４活性の復元に依存する。相互作用ポリペプチドを含有するコロニーは、β−ガラクトシダーゼについての発色性基質で検出される。２−ハイブリッド技術を用いる２つの特異的タンパク質の間のタンパク質−タンパク質相互作用を同定するための完全なキット（ＭＡＴＣＨＭＡＫＥＲ（商標））はＣｌｏｎｔｅｃｈから商業的に入手可能である。このシステムは、特異的タンパク質相互作用に関与するタンパク質ドメインをマッピングし、ならびにこれらの相互作用で臨界的なアミノ酸残基を突き詰めるように拡大することもできる。

本明細書中で同定されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子、および他の細胞内または細胞外成分の相互作用に干渉する化合物は以下のように試験することができる：通常、２つの産物の相互作用および結合を可能とする条件下で、かつそれを可能とする時間の間、該遺伝子および細胞内または細胞外成分の産物を含有する反応混合物を調製する。結合を阻害する候補化合物の能力を試験するために、反応を試験化合物の不在下および存在下で行う。加えて、プラセボを第三の反応混合物に加えて、陽性対照として供することができる。混合物に存在する試験化合物および細胞内または細胞外成分の間の結合（複合体形成）は前記したようにモニターされる。試験化合物を含有する反応混合物中ではなく、対照反応中での複合体の形成が、試験化合物が、試験化合物およびその反応パートナーの相互作用に干渉することを示す。

アンタゴニストについてアッセイするためには、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを、特定の活性についてスクリーニングすべき化合物と共に細胞に加えることができ、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの存在下で注目する活性を阻害する化合物の能力は、該化合物がＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対してアンタゴニストであることを示す。別法として、アンタゴニストは、競合阻害アッセイに適した条件下で、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドおよび潜在的アンタゴニスト、膜−結合ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド受容体または組換え受容体と合わせることによって検出することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、受容体に結合したＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド分子の数を用いて、潜在的アンタゴニストの効率を測定できるように、放射能などにより標識することができる。受容体をコードする遺伝子は、当業者に知られた多数の方法、例えば、リガンドパニングおよびＦＡＣＳソーティングによって同定することができる。Ｃｏｌｉｇａｎｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎ．，１（２）：５章（１９９１年）。好ましくは、発現クローニングを使用し、ポリアデニル化ＲＮＡはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対して応答性である細胞から調製され、このＲＮＡから作成されたｃＤＮＡライブラリーをプールに分け、それを用いて、ＣＯＳ細胞、またはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに応答性でない他の細胞をトランスフェクトする。スライドガラス上で成長させるトランスフェクトされた細胞を標識されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに暴露する。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、部位−特異的プロテインキナーゼに対する認識部位のヨウ素化、またはそれを含めることを包含する種々の手段によって標識することができる。固定およびインキュベーションに続いて、該スライドをオートラジオグラフィー分析に付す。陽性プールを同定し、サブプールを調製し、相互作用サブプーリングおよび再スクリーニングプロセスを用いて再度トランスフェクトし、結局、推定受容体をコードする単一のクローンが得られる。

受容体同定のための代替のアプローチとして、標識されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは細胞膜、または受容体分子を発現する抽出調製物と光親和性結合させることができる。架橋した物質はＰＡＧＥによって分解し、Ｘ−線フィルムに暴露する。受容体を含有する標識された複合体を切り出し、ペプチド断片に分解し、タンパク質ミクロ−配列決定に付すことができる。ミクロ−配列決定から得られたアミノ酸配列を用いて、縮重オリゴヌクレオチドプローブの組を設計して、ｃＤＮＡライブラリーをスクリーニングし、推定受容体をコードする遺伝子を同定し得る。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対するアンタゴニストの効果を評価するにおける別のアプローチは、野生型マウスにＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０アンタゴニストに投与して、公知のノックアウト表現型を模倣することであろう。かくして、最初に注目するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子をノックアウトし、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子をノックアウトし、または破壊した結果として得られた表現型を観察することとなろう。引き続いて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対するアンタゴニストを野生型マウスに投与することによって、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対するアンタゴニストの効率を評価することができよう。効果的なアンタゴニストは、ノックアウトマウスにおいて最初に観察された表現型効果を模倣すると予測される。

同様に、非ヒトトランスジェニックマウスにＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０アゴニストを投与することによってＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対するアゴニストの効果を評価して、公知の陰性ノックアウト表現型を軽減できよう。かくして、最初に、対象のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子をノックアウトし、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子をノックアウトし、または破壊した結果としての得られた表現型を観察する。引き続いて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを非ヒトトランスジェニックマウスに投与することによって、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対するアゴニストの効果を評価することができよう。効果的なアゴニストは、ノックアウト動物において最初に観察された陰性表現型効果を軽減すると予測される。

アンタゴニストについての別のアッセイにおいて、受容体を発現する哺乳動物細胞または膜調製物を、候補化合物の存在下で、標識されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと共にインキュベートする。次いで、この相互作用を増強し、またはブロックする化合物の能力を測定することができよう。

潜在的アンタゴニストのより具体的な例は、免疫グロブリンとＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドとの融合に結合するオリゴヌクレオチド、特に、限定するものではないが、ポリ−およびモノクローナル抗体および抗体断片、単一鎖抗体、抗イディオタイプ抗体、およびそのような抗体または断片のキメラまたはヒト化バージョン、ならびにヒト抗体および抗体断片を含めた抗体を含む。別法として、潜在的アンタゴニストは密接に関連するタンパク質、例えば、受容体を認識するが、影響を与えず、それにより、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの作用を阻害するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの突然変異した形態であってよい。

別の潜在的ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドアンタゴニストは、アンチセンス技術を用いて調製されたアンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡ構築体であり、例えば、アンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡ分子が、標的化ｍＲＮＡにハイブリダイズし、タンパク質の翻訳を妨げることによって、ｍＲＮＡの翻訳を直接的にブロックするように作用する。アンチセンス技術を用いて、三重ラセン形成またはアンチセンスＤＮＡまたはＲＮＡを通じて遺伝子発現を制御することができ、その方法の双方は、ポリヌクレオチドのＤＮＡまたはＲＮＡへの結合に基づく。例えば、ここに、成熟ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列の５’コーディング部分を用いて、長さが約１０ないし４０塩基対のアンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドを設計する。ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、転写に関与する遺伝子の領域（三重ラセン−Ｌｅａｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．，６：３０７３頁（１９７９年）；Ｃｏｏｎｅｙｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４１：４５６頁（１９８８年）；Ｄｅｒｖａｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５１：１３６０頁（１９９１年））に対して相補的であり、それにより、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの転写および生産を妨げるように設計される。アンチセンスＲＮＡオリゴヌクレオチドはイン・ビボにてｍＲＮＡにハイブリダイズし、ｍＲＮＡ分子のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドへの翻訳をブロックする（アンチセンス−Ｏｋａｎｏ，Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，５６：５６０頁（１９９１年）；ＯｌｉｇｏｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓａｓＡｎｔｉｓｅｎｓｅＩｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆＧｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ（ＣＲＣＰｒｅｓｓ：ＢｏｃａＲａｔｏｎ，ＦＬ，１９８８））。前記したオリゴヌクレオチドは、アンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡがイン・ビボで発現されて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの生産を阻害するように、細胞に送達することもできる。アンチセンスＤＮＡを用いる場合、例えば、標的遺伝子ヌクレオチド配列の約−１０および＋１０位置の間の翻訳−開始部位に由来するオリゴデオキシリボヌクレオチドが好ましい。

潜在的アンタゴニストは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの活性部位、受容体結合部位、または成長因子または他の関連結合部位に結合し、それにより、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの正常な生物学的活性をブロックする小分子を含む。小分子の例として、限定されるものではないが、小さなペプチドまたはペプチド様分子、好ましくは可溶性ペプチド、および合成非ペプチジル有機または無機化合物が挙げられる。

リボザイムは、ＲＮＡの特異的切断を触媒することができる酵素的ＲＮＡ分子である。リボザイムは、相補的標的ＲＮＡへの配列特異的ハイブリダイゼーション、続いての、エンドヌクレオ溶解性切断によって作用する。潜在的ＲＮＡ標的内の特異的リボザイム切断部位は、公知の技術によって同定することができる。さらなる詳細については、例えば、Ｒｏｓｓｉ，ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｌｏｇｙ，４：４６９−４７１頁（１９９４年）、および（１９９７年９月１８日に公開された）ＰＣＴ公開番号ＷＯ９７／３３５５１参照。

転写を阻害するのに用いられる三重ラセン形成における核酸分子は、一本鎖であって、デオキシヌクレオチドから構成されるべきである。これらのオリゴヌクレオチドの塩基組成は、それが、一般には、デュプレックスの１つのストランド上のプリンまたはピリミジンの捕獲可能なストレッチを必要とするＨｏｏｇｓｔｅｅｎ塩基対合規則を介して三重ラセン形成を阻害するように設計される。さらなる詳細については、例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ９７／３３５５１（上記）参照。

これらの小分子が、前記したスクリーニングアッセイのいずれかの１以上によって、および／または当業者によく知られたいずれかの他のスクリーニング技術によって同定することができる。

ここに開示された分子の診断および治療的使用は、後に開示し、記載する陽性機能アッセイヒットに基づくこともできる。

Ｆ．抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体
本発明は、ここに治療および／または診断剤としての用途を見出すことができる抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体を提供する。例示的な抗体として、ポリクローナル、モノクローナル、ヒト化、二特異的、およびヘテロコンジュゲート抗体が挙げられる。
１．ポリクローナル抗体
ポリクローナル抗体は、好ましくは、関連抗原およびアジュバントの複数皮下（ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射によって動物において生起される。（特に、合成ペプチドを用いる場合）関連抗原を、免疫化すべき種において免疫原性であるタンパク質にコンジュゲートするのが有用であろう。例えば、抗原は、二官能性または誘導体化剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を通じてのコンジュゲーション）、（リシン残基を通じる）Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、ＳＯＣｌ_２、またはＲおよびＲ^１が異なるアルキル基であるＲ^１Ｎ＝Ｃ＝ＮＲを用い、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、血清アルブミン、ウシチログロブリン、または大豆トリプシン阻害剤にコンジュゲートさせることができる。

動物は、例えば、１００μｇまたは５μｇのタンパク質またはコンジュゲート（各々、ウサギまたはマウス用）を、３容量のフロイントの完全アジュバントと合わせ、該溶液を複数部位において皮内注射することによって、抗原、免疫原性コンジュゲート、または誘導体に対して免疫化する。１ヵ月後、複数部位における皮下注射によって、フロイントの完全アジュバント中のペプチドまたはコンジュゲートの元の量の１／５ないし１／１０倍で動物をブースター注射する。７日ないし１４日後に、動物から採血し、血清を抗体力価についてアッセイする。力価プラトーまで動物にブースター注射する。コンジュゲートは、タンパク質融合として組換え細胞培養で作成することもできる。また、ミョウバンなどの剤の凝集は、免疫応答を促進するのに適切に用いられる。
２．モノクローナル抗体
モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５頁（１９７５年）によって最初に記載されたハイブリドーマ方法を用いて作成することができ、あるいは組換えＤＮＡ分子によって作成することができる（米国特許第４，８１６，５６７号）。

ハイブリドーマ方法においては、マウス、またはハムスターのような適当な宿主動物を前記のように免疫化して、免疫化で用いられるタンパク質に特異的に結合し得る抗体を生産し、または生産することができるリンパ球を誘導する。別法として、リンパ球はイン・ビトロで免疫化することができる。免疫化の後、リンパ球を単離し、次いで、ポリエチレングリコールなどの適当な融合剤を用いてミエローマ細胞系と融合させて、ハイブリドーマ細胞を形成する（Ｇｏｄｉｎｇ，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９−１０３頁（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，１９８６））。

かく調製したハイブリドーマ細胞を適当な培養基中に撒き、成長させ、その培地は、好ましくは、融合していない親ミエローマ細胞の成長または生存を阻害する１以上の物質（融合パートナーともいう）を含有する。例えば、親ミエローマが酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠くとき、ハイブリドーマのための選択培養基は、典型的には、ヒポキサンチン、アミノプテリン、およびチミジンを含有し（ＨＡＴ培地）、その物質はＨＧＰＲＴ−欠乏細胞の成長を妨げる。

好ましい融合パートナーミエローマ細胞は、効果的に融合し、選択された抗体生産細胞による抗体の安定した高レベル生産を支持し、融合していない親細胞に対して選択される選択培地に対して感受性であるものである。好ましいミエローマ細胞系は、ＳａｌｋＩｎｓｔｉｔｕｔｅＣｅｌｌＤｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣａｌｉｆｏｒｎｉａＵＳＡから入手可能なＭＯＰＣ−２１およびＭＰＣ−１１マウス腫瘍に由来するもの、およびＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖｅｒｇｉｎｉａ，ＵＳＡから入手可能な誘導体、例えば、Ｘ６３−Ａｇ８−６５３細胞のようなマウスミエローマ系である。ヒトミエローマおよびマウス−ヒトへテロミエローマ細胞系もまた、ヒトモノクローナル抗体の生産について記載されている（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１頁（１９８４年）；およびＢｒｏｄｅｕｒｅｔａｌ．，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｙＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，５１−６３頁（ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＹｏｒｋ，１９８７））。

ハイブリドーマ細胞がその中で成長している培養基は、抗原に向けられたモノクローナル抗体の生産についてアッセイする。好ましくは、ハイブリドーマ細胞によって生産されたモノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈澱によって、またはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）もしくは酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）などのイン・ビトロ結合アッセイによって測定される。

モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎｅｔａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０頁（１９８０年）に記載されたＳｃａｔｃｈａｒｄ分析によって測定することができる。

所望の特異性、親和性、および／または活性の抗体を生産するハイブリドーマ細胞が一旦同定されれば、クローンは、限界希釈手法によってサブクローンし、標準的な方法によって成長させることができる（Ｇｏｄｉｎｇ，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ，５９−１０３頁（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，１９８６））。この目的での適当な培養基として、例えば、Ｄ−ＭＥＭまたはＲＰＭＩ−１６４０倍地が挙げられる。加えて、ハイブリドーマ細胞は、例えば、マウスへの細胞の腹腔内注射によって、動物中の腹水腫瘍としてイン・ビボで成長させることができる。

サブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体は、例えば、（例えば、プロテインＡまたはプロテインＧ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅを用いる）アフィニティクロマトグラフィー、またはイオン交換クロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析等の慣用的な抗体精製手法によって培養基、腹水液または血清から適切に分離される。

モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、（例えば、マウス抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを用いることによって）慣用的な手法を用いて容易に単離され、配列決定される。ハイブリドーマ細胞はそのようなＤＮＡの好ましい源として供される。一旦単離されれば、ＤＮＡを発現ベクターに入れることができ、次いで、これを、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、シミアンＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または抗体タンパク質を生産しないミエローマ細胞などの宿主にトランスフェクトされて、組換え宿主細胞中でのモノクローナル抗体の合成を得ることができる。抗体をコードするＤＮＡの細菌中での組換え発現に関するレビュー論文は、Ｓｋｅｒｒａｅｔａｌ．，Ｃｕｒｒ．ＯｐｉｎｉｏｎｉｎＩｍｍｕｎｏｌ．，５：２５６−２６２頁（１９９３年）およびＰｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖｓ．１３０：１５１−１８８頁（１９９２年）を含む。

モノクローナル抗体または抗体断片は、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２−５５４頁（１９９０年）を用いて生じた抗体ファージライブラリーから単離することができる。Ｃｌａｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８頁（１９９１年）およびＭａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１−５９７頁（１９９１年）は、各々、ファージライブラリーを用いるマウスおよびヒト抗体の単離を記載する。引き続いての刊行物は、鎖シャッフリングによる高親和性（ｍＭ範囲）ヒト抗体の生産（Ｍａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９−７８３（１９９２））、ならびに非常に大きなファージライブラリーを構築するための戦略としての組合せ感染およびイン・ビボ組換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅｅｔａｌ．，Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ．Ｒｅｓ．２１：２１６５−２２６６頁（１９９３年））を記載する。かくして、これらの技術は、モノクローナル抗体の単離のための伝統的なモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術に対する実行可能な代替法である。

抗体をコードするＤＮＡは、例えば、相同マウス配列に代えてヒト重鎖および軽鎖定常ドメイン（Ｃ_ＨおよびＣ_Ｌ）配列で置き換えることによって（米国特許第４，８１６，５６７号；およびＭｏｒｒｓｏｎ，ｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１頁（１９８４年））、あるいは免疫グロブリンコーディング配列を、非免疫グロブリンポリペプチド（異種ポリペプチド）についてのコーディング配列の全てまたは一部と融合させることによって、キメラまたは融合抗体ポリペプチドを生産するように修飾することができる。非免疫グロブリンポリペプチド配列は抗体の定常ドメインに代えて置き換えることができ、あるいはそれらは抗体の１つの抗原組合せ部位の可変ドメインに代えて置き換えて、抗原に対する特異性を有する１つの抗原組合せ部位、および異なる抗原に対する特異性を有するもう１つの抗原組合せ部位を含むキメラ二価抗体を作成する。
３．ヒトおよびヒト化抗体
本発明の抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体は、さらに、ヒト化抗体またヒト抗体を含むことができる。非ヒト（例えば、マウス）抗体のヒト化形態はキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、または非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有する（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２または抗体の他の抗原結合サブ配列など）その断片である。ヒト化抗体はヒト免疫グロブリン（受容体抗体）を含み、そこでは、受容体の相補性決定領域（ＣＤＲ）からの残基が、所望の特異性、親和性および能力を有するマウス、ラットまたはウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲからの残基によって置き換えられている。いくつかの例においては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられている。ヒト化抗体は、受容体抗体において、または輸入されたＣＤＲまたはフレームワーク配列いずれにおいても見出されない配列を含むこともできる。一般には、ヒト化抗体は、ＣＤＲ領域の全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのそれに対応し、およびＦＲ領域の全てまたは実質的に全てがヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである少なくとも１つ、典型的には２つの可変領域の実質的に全てを含むであろう。ヒト化抗体は、所望により、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも部分、典型的には、ヒト免疫グロブリンのそれも含むであろう［Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５頁（１９８６年）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２９頁（１９８８年）；およびＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９３−５９６頁（１９９２年）］。

非ヒト抗体をヒト化するための方法は当該分野で良く知られている。一般に、ヒト化抗体は、非ヒトである源からそれに導入された１以上のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基はしばしば「輸入」残基といい、これは典型的には「輸入」の可変ドメインから取られる。ヒト化は、ヒト抗体の対応する配列に代えてげっ歯類ＣＤＲまたはＣＤＲ配列で置き換えることによって、Ｗｉｎｔｅｒおよび共同研究者「Ｊｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２−５２５頁（１９８６年）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３−３２７頁（１９８８年）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４−１５３６頁（１９８８年）」の方法に従って実質的に行うことができる。したがって、そのような「ヒト化」抗体はキメラ抗体であり（米国特許第４，８１６，５６７号）、実質的に無傷ヒト可変ドメインよりは少ないものが、非ヒト種からの対応する配列によって置き換えられている。現実的には、ヒト化抗体は、典型的には、ヒト抗体であり、いくつかのＣＤＲ残基および、おそらくは、いくつかのＦＲ残基がげっ歯類抗体中の類似の部位からの残基によって置き換えられている。

ヒト化抗体を作成するのに用いられる、軽鎖および重鎖双方の、ヒト可変ドメインの選択は、抗体がヒト治療用途を意図する場合には、抗原性およびＨＡＭＡ応答（ヒト抗マウス抗体）を低下させるのは非常に重要である。いわゆる「ベストフィット」方法によると、げっ歯類抗体の可変ドメインの配列は、公知のヒト可変ドメイン配列の全ライブラリーに対してスクリーニングされる。げっ歯類のそれに最も近いヒトＶドメイン配列が同定されており、それ内のヒトフレームワーク領域（ＦＲ）はヒト化抗体で許容される（Ｓｉｍｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６頁（１９９３年）；Ｃｈｏｔｈｉａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１頁（１９８７年））。もう１つの方法は、軽鎖または重鎖の特定のサブ群の全てのヒト抗体のコンセンサス配列に由来する特定のフレームワーク領域を用いる。同一のフレームワークは、いくつかの異なるヒト化抗体で用いることができる（Ｃａｒｔｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｌｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５頁（１９９２年）；Ｐｒｅｓｔａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３頁（１９９３年））。

さらに、抗体は、抗原に対する高い結合親和性および他の好都合な生物学的特性が保持されてヒト化されるのが重要である。この目標を達成するには、好ましい方法によると、ヒト化抗体は、親およびヒト化配列の三次元モデルを用い、親配列および種々の概念的ヒト化産物の分析のプロセスによって調製される。三次元免疫グロブリンモデルは通常に入手可能であり、当業者が精通している。選択された候補免疫グロブリン配列の可能性のある三次元立体配座構造を説明し、それを呈するコンピュータープログラムが入手可能である。これらのディスプレイの精査は、候補免疫グロブリン配列の機能における残基のありそうな役割の分析、すなわち、その抗原に結合する候補免疫グロブリンの能力に影響する残基の分析を可能とする。このように、ＦＲ残基を、標的抗原に対する増大した親和性のような望まれる抗体特徴が達成されるように、受容体および輸入配列から選択し、組合せることができる。一般に超可変領域残基は、抗原結合に影響することに直接的かつ最も実質的に関与する。

ヒト化抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体の種々の形態が考えられる。例えば、ヒト化抗体は、所望により１以上の細胞傷害性剤とコンジュゲートされて、免疫コンジュゲートを生じる、Ｆａｂのような抗体断片であってよい。別法として、ヒト化抗体は、無傷ＩｇＧ１抗体などの無傷抗体であってよい。

ヒト化に対する代替法として、ヒト抗体を作成することができる。例えば、今日、免疫化に際して、内因性免疫グロブリン生産の不在下でヒト抗体の完全なレパートリーを生産することができるトランスジェニック動物（例えば、マウス）を生産するのが可能である。例えば、キメラおよび生殖系突然変異体マウスにおける抗体重鎖連結領域（Ｊ_Ｈ）遺伝子のホモ接合性欠失の結果、内因性抗体の生産が完全に阻害されることが記載されている。ヒト生殖系免疫グロブリン遺伝子アレイのそのような生殖系突然変異体マウスへの導入の結果、抗原攻撃に際して、ヒト抗体の生産がもたらされるであろう。Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ａｃａｄ．Ａｃｉｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：２５５１頁（１９９３年）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５−２５８頁（１９９３年）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎｅｔａｌ．，ＹｅａｒｉｎＩｍｍｕｎｏ．７：３３頁（１９９３年）；米国特許第５，５４５，８０６号、第５，５６９，８２５号、第５５９１，６６９号（全てＧｅｎＰｈａｒｍ）；第５，５４５，８０７号；およびＷＯ９７／１７８５２参照。

別法として、ファージディスプレイ技術（ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３４８：５５２−５５３頁［１９９０年］）を用いて、免疫化されていないドナーからの免疫グロブリン可変（Ｖ）ドメイン遺伝子レパートリーから、イン・ビトロにてヒト抗体および抗体断片を生産することができる。この技術に従うと、抗体Ｖドメイン遺伝子は、Ｍ１３またはｆｄなどのフィラメント状バクテリオファージの主たるまたは従たる被膜タンパク質遺伝子いずれかにイン−フレームにてクローン化され、ファージ粒子の表面の機能的抗体断片としてディスプレイされる。フィラメント状粒子はファージゲノムの一本鎖ＤＮＡコピーを含有するので、抗体の機能的特性に基づく選択の結果、やはり、それらの特性を呈する抗体をコードする遺伝子が選択される。かくして、該ファージはＢ−細胞の特性のいくつかを模倣する。ファージディスプレイは、例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ，ＫｅｖｉｎＳ．ａｎｄＣｈｉｓｗｅｌｌ，ＤａｖｉｄＪ．，ＣｕｒｒｅｎｔＯｐｉｎｉｏｎｉｎＳｔｒｕｃｔｕｒａｌＢｉｏｌｏｇｙ３：５６４−５７１頁（１９９３年）にレビューされている種々のフォーマットで行うことができる。Ｖ−遺伝子セグメントのいくつかの源をファージディスプレイで用いることができる。Ｃｌａｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８頁（１９９１年）は、免疫化マウスの脾臓に由来するＶ遺伝子の小さなランダムなコンビナトリアルライブラリーから抗オキサゾロン抗体の多様なアレイを単離した。免疫化されていないヒトドナーからのＶ遺伝子のレパートリーを構築することができ、（自己抗原を含めた）抗原の多様なアレイに対する抗体は、Ｍａｒｋｓｅｔａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７頁（１９９１年）、またはＧｒｉｆｆｉｔｈｅｔａｌ．，ＥＭＢＯＪ．１２：７２５−７３４頁（１９９３年）によって記載された技術に実質的に従って単離することができる。また、米国特許第５，５６５，３３２号および第５，５７３，９０５号参照。

前記したように、ヒト抗体はイン・ビトロ活性化Ｂ細胞によって作成することもできる（米国特許第５，５６７，６１０号および第５，２２９，２７５号参照）。
４．抗体断片
ある状況においては、全抗体よりはむしろ抗体断片を用いる利点がある。断片のより小さなサイズは迅速なクリアランスを可能とし、固体腫瘍への改良されたアクセスに導くことができる。

抗体断片の生産のために種々の技術が開発されている。伝統的には、これらの断片は無傷抗体のタンパク質分解消化を介して誘導された（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏｅｔａｌ．，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄＢｉｏｐｈｙｓｉｃａｌＭｅｔｈｏｄｓ２４：１０７−１１７頁（１９９２年）；およびＢｒｅｎｎａｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２２９：８１頁（１９８５年）参照）。しかしながら、これらの断片は、今日、組換え宿主細胞によって直接的に生産することができる。Ｆａｂ、ＦｖおよびＳｃＦｖ抗体断片は、全てＥ．ｃｏｌｉにおいて発現させ、それから分泌させることができ、かくして、大量のこれらの断片の容易な生産が可能となる。抗体断片は前記した抗体ファージライブラリーから単離することができる。別法として、Ｆａｂ’−ＳＨ断片は、Ｅ．ｃｏｌｉから直接的に回収することができ、化学的にカップリングしてＦ（ａｂ’）_２断片を形成することができる（Ｃａｒｔｅｒｅｔａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１０：１６３−１６７頁（１９９２年））。別のアプローチによると、Ｆ（ａｂ’）_２断片は組換え宿主細胞培養から直接的に単離することができる。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含む増大したイン・ビボ半減期を持つＦａｂおよびＦ（ａｂ’）_２断片は米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。抗体断片の生産のための他の技術は当業者に明らかであろう。選択された抗体は一本鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ９３／１６１８５；米国特許第５，５７１，８９４号；および米国特許第５，５８７，４５８号参照。ＦｖおよびｓＦｖは定常領域を欠いた無傷組合せ部位を持つ唯一の種であり；かくして、それらはイン・ビボ使用の間に低下した非特異的結合に適している。ｓＦｖ融合タンパク質を構築して、ｓＦｖのアミノまたはカルボキシ末端いずれかにおけるエフェクタータンパク質の融合を得ることができる。ＡｎｔｉｂｏｄｙＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ｅｄ．Ｂｏｒｒｅｂａｅｃｋ，ｓｕｐｒａ参照。例えば、米国特許第５，６４１，８７０号に記載されているように、抗体断片は「線状抗体」であってもよい。そのような線状抗体断片は非特異的または特異的であってよい。
５．二特異的抗体
二特異的抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープに対する結合特異性を有する抗体である。例示的な二特異的抗体は本明細書中に記載されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０タンパク質の２つの異なるエピトープに結合することができる。他のそのような抗体は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０結合部位を、もう１つのタンパク質についての結合部位と組合せることができる。別法として、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０アームを、Ｔ−細胞受容体分子（例えば、ＣＤ３）などの白血球、またはＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩ（ＣＤ３２）およびＦｃγＲＩＩＩ（ＣＤ１６）などのＩｇＧ（ＦｃγＲ）に対するＦｃ受容体上のトリガー分子に結合するアームと組み合わせて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−発現細胞に対する細胞防御メカニズムに焦点を当て、それを突き止めることができる。また、二特異的抗体を用いて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する細胞に対する細胞傷害性剤を突き詰めることもできる。これらの抗体はＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−結合アーム、および細胞傷害性剤（例えば、サポリン、抗インターフェロン−α、ビンカアルカロイド、リシンＡ鎖、メトトレキセートまたは放射性同位体ハプテン）に結合するアームを保有する。二特異的抗体は全長抗体または抗体断片（例えば、Ｆ（ａｂ’）_２二特異的抗体）として調製することができる。

ＷＯ９６／１６６７３は二特異的抗ＥｒｂＢ２／抗ＦｃγＲＩＩＩ抗体を記載し、および米国特許第５，８３７，２３４号は二特異的抗ＥｒｂＢ２／抗ＦｃγＲＩ抗体を開示する。二特異的抗ＥｒｂＢ２／Ｆｃα抗体はＷＯ９８／０２４６３に示されている。米国特許第５，８２１，３３７号は、二特異的抗ＥｒｂＢ２／抗ＣＤ３抗体を教示する。

二特異的抗体を作成する方法は当該分野で公知である。全長二特異的抗体の伝統的な生産は２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の共発現に基づき、そこでは、２つの鎖は異なる特異性を有する（Ｍｉｌｌｓｔｅｉｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３０５：５３７−５３９頁（１９８３年））。免疫グロブリン重鎖および軽鎖のランダムな分類のため、これらのハイブリドーマ（クワドローム）は、そのうち１つのみが正しい二特異的構造を有する１０の異なる抗体分子の潜在的混合物を生産する。通常はアフィニティクロマトグラフィー工程によってなされる正しい分子の精製はむしろ煩雑であり、産物の収率は低い。同様な手法がＷＯ９３／０８８２９、およびＴｒａｕｎｅｃｋｅｒｅｔａｌ．，ＥＭＢＯＪ．１０：３６５５−３６５９頁（１９９１年）に開示されている。

異なるアプローチによると、所望の結合特異性（抗体−抗原組合せ部位）を持つ抗体可変ドメインを免疫グロブリン定常ドメイン配列に融合させる。好ましくは、該融合は、ヒンジ、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３領域の少なくとも一部を含むＩｇＧ重鎖定常ドメインとのものである。融合の少なくとも１つに存在する、軽鎖結合に必要な部位を含有する第一の重鎖定常領域（Ｃ_Ｈ１）を有するのが好ましい。免疫グロブリン重鎖融合および、所望であれば、免疫グロブリン軽鎖をコードするＤＮＡを別々の発現ベクターに挿入し、適当な宿主細胞に共トランスフェクトする。これは、構築で用いる３つのポリペプチド鎖の等しくない比率が所望の二特異的抗体の最適な収率を供する場合に、３つのポリペプチド断片の相互の割合を調整する際により大きな柔軟性を提供する。しかしながら、等しい比率の少なくとも２つのポリペプチド鎖の発現の結果大きな収率がもたらされる場合、あるいは比率が所望の鎖組合せの収率に優位な影響を有しない場合、２つまたは全ての３つのポリペプチド鎖についてのコーディング配列を単一の発現ベクターに挿入することが可能である。

本発明は、１つのアームにおける第一の結合特異性を持つハイブリッド免疫グロブリン重鎖、および他のアームにおける（第二の結合特異性を供する）ハイブリッド免疫グロブリン重鎖−軽鎖対から構成される二特異的抗体を提供する。この非対称構造は、望まない免疫グロブリン鎖組合せからの所望の二特異的化合物の分離を容易とすることが判明した。というのは、二特異的分子のただ１つの半分における免疫グロブリン軽鎖の存在は、分離の容易な方法を提供するからである。このアプローチは、ＷＯ９４／０４６９０に開示されている。二特異的抗体を作成するためのさらなる詳細については、例えば、Ｓｕｒｅｓｈｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ１２１：２１０頁（１９８６年）参照。

米国特許第５，７３１，１６８号に記載された別のアプローチによると、抗体分子の対の間の界面は、組換え細胞培養から回収されるヘテロダイマーのパーセンテージを最大化するように作成することができる。好ましい界面はＣ_Ｈ３ドメインの少なくとも一部を含む。この方法において、第一の抗体分子の界面からの１以上の小さなアミノ酸側鎖をより大きな側鎖（例えば、チロシンまたはトリプトファン）で置き換える。大きな側鎖と同一または同様なサイズの補充的「キャビティー」が、大きなアミノ酸側鎖をより小さなもの（例えば、アラニンまたはスレオニン）で置き換えることによって第二の抗体分子の界面に作り出される。これは、ホモダイマーなどの他の望まない最終産物よりもヘテロダイマーの収率を増加させるメカニズムを提供する。

二特異的抗体は架橋されたまたは「ヘテロコンジュゲート」抗体を含む。例えば、へテロコンジュゲートにおける抗体の１つをアビジンにカップリングさせ、他方をビオチンにカップリングさせることができる。そのような抗体は、例えば、望まない細胞に対して免疫系の細胞を標的化するのに（米国特許第４，６７６，９８０号）、およびＨＩＶ感染の治療のために（ＷＯ９１／００３６０、ＷＯ９２／２００３７３、およびＥＰ０３０８９）提案されている。ヘテロコンジュゲート抗体は、いずれかの便宜な架橋方法を用いて作成することができる。適当な架橋剤は当該分野で良く知られており、多数の架橋技術と共に米国特許第４，６７６，９８０号に開示されている。

抗体断片から二特異的抗体を作成するための技術もまた文献に記載されている。例えば、二特異的抗体は化学結合を用いて調製することができる。Ｂｒｅｎｎａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２２９：８１頁（１９８５年）は、無傷抗体がタンパク質分解により切断されて、Ｆ（ａｂ’）_２断片を生じる手法を記載する。これらの断片はチオール複合体化剤亜ヒ酸ナトリウムの存在下で還元されて、隣接チオールを安定化し、分子間ジスルフィド形成を妨げる。次いで、生じたＦａｂ’断片はチオニトロベンゾエート（ＴＮＢ）誘導体に変換される。次いで、メルカプトエチルアミンでの還元によって、Ｆａｂ’−ＴＮＢ誘導体の１つはＦａｂ’−チオールに再度変換され、他のＦａｂ’−ＴＮＢ誘導体の等モル量と混合されて、二特異的抗体を形成する。生じた二特異的抗体は、酵素の選択的固定化のための剤として用いることができる。

最近の進歩は、Ｅ．ｃｏｌｉからのＦａｂ’−ＳＨ断片の直接的回収を容易としており、これは科学的にカップリングされて、二特異的抗体を形成することができる。Ｓｈａｌａｂｙｅｔａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７５：２１７−２２５頁（１９９２年）は、十分にヒト化された二特異的抗体Ｆ（ａｂ’）_２分子の生産を記載する。各Ｆａｂ’断片はＥ．ｃｏｌｉから別々に分泌され、イン・ビトロでの指向された化学カップリングに付され、二特異的抗体を形成する。各形成された二特異的抗体は、ＥｒｂＢ２受容体を過剰発現する細胞および正常なヒトＴ細胞に結合することができ、ならびにヒト乳癌標的に対するヒト細胞傷害性リンパ球の溶解性活性をトリガーすることができた。組換え細胞培養から直接的に二特異的抗体断片を作成し、単離するための種々の技術もまた記載されている。例えば、二特異的抗体は、ロイシンジッパーを用いて生産されている。Ｋｏｓｔｅｌｎｙｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５４７−１５５３頁（１９９２年）。ＦｏｓおよびＪｕｎタンパク質からのロイシンジッパーペプチドは、遺伝子融合によって２つの異なる抗体のＦａｂ’部分に連結された。抗体ホモポリマーはヒンジ領域において還元されて、モノマーを形成し、次いで、再度酸化されて、抗体ヘテロダイマーを形成した。この方法は、抗体ホモダイマーの生産で利用することもできる。Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：６４４４−６４４８頁（１９９３年）によって記載された「ダイヤボディー」技術は、二特異的抗体断片を作成するための代替メカニズムを提供した。該断片は、同一鎖上の２つのドメインの間での対合を可能とするには余りにも短いリンカーによってＶ_Ｌに連結されたＶ_Ｈを含む。したがって、１つの断片のＶ_ＨおよびＶ_Ｌドメインが強制的に別の断片の相補的Ｖ_ＬおよびＶ_Ｈドメインと対合され、それにより、２つの抗原結合部位を形成する。単一鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）ダイマーの使用による二特異的抗体の断片を作成するための別の戦略も報告されている。Ｇｒｕｂｅｒｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５２：５３６８頁（１９９４年）参照。

二価を超える抗体が考えられる。例えば、三特異的抗体を調製することができる。Ｕｔｔｅｔａｌ．，Ａｉｎｎｕｎｏｌ．１４７：６０頁（１９９１年）。
６．へテロコンジュゲート抗体
ヘテロコンジュゲート抗体もまた本発明の範囲内にある。ヘテロコンジュゲート抗体は２つの共有結合された抗体から構成される。そのような抗体は、例えば、免疫系細胞を望まない細胞に標的化し［米国特許第４，６７６，９８０号］、およびＨＩＶ感染を治療するために［ＷＯ９１／００３６０；ＷＯ９２／２００３７３；ＥＰ００３０８９］提案されている。抗体は、架橋剤に関係するものを含めた、合成タンパク質化学における公知の方法を用いてイン・ビトロで調製することができる。例えば、イムノトキシンは、ジスルフィド交換反応を用い、またはチオエーテル結合を形成することによって構築することができる。この目的での適当な試薬の例は、イミノチオレートおよびメチル−４−メルカプトブチルイミデート、および例えば、米国特許第４，６７６，９８０号に開示されたものを含む。
７．多価抗体
多価抗体は、抗体が結合する抗原を発現する細胞によって二価抗体よりも速く内部化（および／または異化）することができる。本発明の抗体は、３以上の抗原結合部位（例えば、四価抗体）をもつ（ＩｇＭクラス以外である）多価抗体とすることができ、これは、抗体のポリペプチド鎖をコードする核酸の組換え発現によって容易に生産することができる。多価抗体はダイマー化ドメインおよび３以上の抗原結合部位を含むことができる。好ましいダイマー化ドメインはＦｃ領域またはヒンジ領域を含む（またはそれよりなる）。このシナリオにおいて、抗体は、Ｆｃ領域、およびＦｃ領域に対してアミノ末端側の３以上の抗原結合部位を含むであろう。好ましい多価抗体は３ないし約８、好ましくは４つの抗原結合部位を含み（またはそれよりなる）。多価抗体は少なくとも１つのポリペプチド鎖（好ましくは２つのポリペプチド鎖）を含み、ポリペプチド鎖は２以上の可変ドメインを含む。例えば、ポリペプチド鎖はＶＤ１−（Ｘ１）_ｎ−ＶＤ２−（Ｘ２）_ｎ−Ｆｃを含むことができ、ＶＤ１は第一の可変ドメインであり、ＶＤ２は第二の可変ドメインであり、ＦｃはＦｃ領域の１つのポリペプチド鎖であり、Ｘ１およびＸ２はアミノ酸またはポリペプチドを表し、およびｎは０または１である。例えば、ポリペプチド鎖は：ＶＨ−ＣＨ１−フレキシブルなリンカー−ＶＨ−ＣＨ１−Ｆｃ領域鎖；またはＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１−Ｆｃ領域鎖を含むことができる。ここでは、多価抗体は、好ましくは、さらに、少なくとも２の（好ましくは４の）軽鎖可変ドメインポリペプチドを含む。ここでは、多価抗体は、例えば、約２ないし約８の軽鎖可変ドメインポリペプチドを含むことができる。ここで考えられる軽鎖可変ドメインポリペプチドは軽鎖可変ドメインを含み、所望により、さらに、ＣＬドメインを含む。
８．エフェクター機能の作成
エフェクター機能に関して本発明の抗体を修飾して、例えば、抗体の抗原−依存性細胞−媒介細胞傷害性（ＡＤＣＣ）および／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を増強させるのが望ましいであろう。これは、１以上のアミノ酸置換を抗体のＦｃ領域に導入することによって達成することができる。別法として、あるいは加えて、システイン残基をＦｃ領域に導入し、それにより、この領域における鎖間ジスルフィド結合の形成を可能とする。かく生じたホモダイマー抗体は、改良された内部化能力および／または増加した補体−媒介細胞殺傷および抗体−依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を有することができる。Ｃａｒｏｎｅｔａｌ．，Ｊ．ＥｘｐＭｅｄ．１７６：１１９１−１１９５頁（１９９２年）およびＳｈｏｐｅｓ，Ｂ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８：２９１８−２９２２頁（１９９２年）参照。増強された抗腫瘍活性を持つヘテロダイマー抗体は、Ｗｏｌｆｆｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ３５：２５６０−２５６５頁（１９９３年）に記載されたようなヘテロ二官能性架橋剤を用いて調製することもできる。別法として、デュアルＦｃ領域を有する抗体を作成することができ、それにより、増強された補体溶解およびＡＤＣＣ能力を有することができる。Ｓｔｅｖｅｎｓｏｎｅｔａｌ．，Ａｎｔｉ−ＣａｎｃｅｒＤｒｕｇＤｅｓｉｇｎ３：２１９−２３０頁（１９８９年）参照。抗体の血清中半減期を増加させるためには、例えば、米国特許第５，７３９，２７７号に記載されているように、サルベージ受容体結合エピトープを抗体（特に、抗体断片）に取り込むことができる。本明細書中で用いるように、用語「サルベージ受容体結合エピトープ」とは、ＩｇＧ分子のイン・ビボ血清中半減期を増加させることを担うＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３またはＩｇＧ_４）のＦｃ領域のエピトープをいう。
９．イムノコンジュゲート
本発明は、化学療法剤、成長阻害剤、トキシン（例えば、細菌、真菌、植物または動物起源の酵素的に活性なトキシン、またはその断片）、または放射性同位体（すなわち、放射性コンジュゲート）などの細胞傷害性剤にコンジュゲートした抗体を含むイムノコンジュゲートにも関する。

そのようなイムノコンジュゲートの生成で有用な化学療法剤は前記した。用いることができる酵素的に活性なトキシンおよびその断片はジフテリアＡ鎖、ジフテリアトキシンの非結合活性断片、（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａからの）エキソトキシンＡ鎖、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ−サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンチンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ−Ｓ）、モモルジカカランティア阻害剤、クルシン、クロチン、サパノナリア・オフィシナリス阻害剤、ゲロニン、マイトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、およびトリコテセンを含む。種々の放射性核種が、ラジオコンジュゲーテッド抗体の生産のために入手可能である。その例は^２１２Ｂｉ、^１３１Ｉ、^１３１Ｉｎ、^９０Ｙ、および^１８６Ｒｅを含む。抗体および細胞傷害性剤のコンジュゲートは、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオール）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、イミノチオラン（ＩＴ）、（ジメチルアジピミデートＨＣＬなどの）イミドエステルの二官能性誘導体、（スベリン酸ジスクシンイミジルなどの）活性エステル、（グルタルアルデヒドなどの）アルデヒド、（ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなどの）ビス−アジド化合物、（ビス（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミンなどの）ビス−ジアゾニウム誘導体、（トリレン２，６−ジイソシアネートなどの）ジイソシアネート、および（１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンなどの）ビス−活性フッ素化合物を含む。例えば、リシンイムノトキシンはＶｉｔｅｔｔａら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３８：１０９８頁（１９８７年）に記載されているように調製することができる。炭素−１４−標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドの抗体へのコンジュゲーションのための例示的なキレート剤である。ＷＯ９４−１１０２６参照。

抗体、およびカリケアミシン、メイタンシノイド、トリコセン、およびＣＣ１０６５のような１以上の小分子トキシン、およびトキシン活性を有するこれらのトキシンの誘導体のコンジュゲートもここでは考えられる。
メイタンシンおよびメイタンシノイド
本発明は、１以上のメイタンシノイド分子にコンジュゲートした、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体（全長または断片）を提供する。

メイタンシノイドはチューブリン重合を阻害することによって作用する有糸分裂阻害剤である。メイタンシンは、東アフリカの低木Ｍａｙｔｅｍｕｓｓｅｒｒａｔａから最初に単離された（米国特許第３，８９６，１１１号）。引き続いて、ある種の微生物もまたメイタンシノールおよびＣ−３メイタンシノールエステルなどのメイタンシノイドを生産することが発見された（米国特許第４，１５１，０４２号）。合成メイタンシノールおよびその誘導体および類似体は、例えば、ここに引用してその開示を明示的に援用する、米国特許第４，１３７，２３０号号；同第４，２４８，８７０号；同第４，２５６，７４６号；同第４，２６０，６０８号；同第４，２６５，８１４号；同第４，２９４，７５７号；同第４，３０７，０１６号；同第４，３０８，２６８号；同第４，３０８，２６９号；同第４，３０９，４２８号；同第４，３１３，９４６号；同第４，３１５，９２９号；同第４，３１７，８２１号；同第４，３２２，３４８号；同第４，３３１，５９８号；同第４，３６１，６５０号；同第４，３６４，８６６号；同第４，４２４，２１９号；同第４，４５０，２５４号；同第４，３６２，６６３号；および同第４，３７１，５３３号に開示されている。
メイタンシノイド−抗体コンジュゲート
それらの治療指数を改良する試みにおいて、メイタンシンおよびメイタンシノイドは、腫瘍細胞抗原に特異的に結合する抗体にコンジュゲートされた。メイタンシノイドを含有するイムノコンジュゲート、およびそれらの治療的使用は、ここに引用してその開示を明示的に援用する、例えば、米国特許第５，２０８，０２０号、第５，４１６，０６４号および欧州特許ＥＰ０４２５２３５Ｂ１に開示されている。Ｌｉｕｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９３：８６１８−８６２３頁（１９９６年）は、ヒト結直腸癌に対して向けられたモノクローナル抗体Ｃ２４２に連結されたＤＭ１と命名されたメイタンシノイドを含むイムノコンジュゲートを記載した。該コンジュゲートは培養された結腸癌細胞に対して高度に細胞傷害性であることが判明し、イン・ビボ腫瘍成長アッセイにおいて抗腫瘍活性を示した。Ｃｈａｒｉら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５２：１２７−１３１頁（１９９２年）はイムノコンジュゲートを記載しており、そこでは、メイタンシノイドは、ジスルフィドリンカーを介して、ヒト結腸癌細胞系上の抗原に結合するマウス抗体Ａ７に、またはＨＥＲ−２／ｎｅｕ癌遺伝子に結合するもう１つのマウスモノクローナル抗体ＴＡ．１にコンジュゲートされた。ＴＡ．１−メイタンシノイドコンジュゲートの細胞傷害性は、細胞当たり３×１０^５ＨＥＲ−２表面抗原を発現する、ヒト乳癌細胞系ＳＫ−ＢＲ−３についてイン・ビトロで試験された。薬物コンジュゲートは、抗体分子当たりのメイタンシノイド分子の数を増加させることによって増大され得る遊離メイタンシノイド薬物と同様な程度の細胞傷害性を達成した。Ａ７−メイタンシノイドコンジュゲートは、マウスにおいて低い全身細胞傷害性を示した。
抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体−メイタンシノイドコンジュゲート（イムノコンジュゲート）
抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体−メイタンシノイドコンジュゲートは、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体を、抗体またはメイタンシノイド分子いずれかの生物学的活性を有意に減少させることなくメイタンシノイド分子に化学的に連結させることによって調製される。抗体分子当たりコンジュゲートした平均３ないし４のメイタンシノイド分子は、抗体の機能または溶解性に負に影響することなく標的細胞の細胞傷害性を増強する効率を示したが、トキシン／抗体の１つの分子でさえ裸の抗体よりも細胞傷害性を増強させると予測される。メイタンシノイドは当該分野で良く知られており、公知の技術によって合成し、または天然源から単離することができる。適当なメイタンシノイドは、例えば、米国特許第５，２０８，０２０号、および先に言及した他の特許および非特許文献に開示されている。好ましいメイタンシノイドはメイタンシノール、および種々のメイタンシノールエステルなどの、メイタンシノール分子の芳香族環において、または他の位置において修飾されたメイタンシノール類似体である。

例えば、米国特許第５，２０８，０２０号またはＥＰ特許０４２５２３５Ｂ１、およびＣｈａｒｉｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５２：１２７−１３１頁（１９９２年）に開示されたものを含めた、抗体−メイタンシノイドコンジュゲートを作成するための当該分野で知られた多くの連結基がある。連結基は、前記特許に開示された、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸不安定基、光不安定基、ペプチダーゼ不安定基、またはエステラーゼ不安定基を含み、ジスルフィド基およびチオエーテル基が好ましい。

抗体およびメイタンシノイドのコンジュゲートは、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオール）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、イミノチオラン（ＩＴ）、（ジメチルアジピミデートＨＣＬなどの）イミドエステルの二官能性誘導体、（スベリン酸ジスクシンイミジルのような）活性エステル、（グルタルアルデヒドのような）アルデヒド、（ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなどの）ビス−アジド化合物、（ビス（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミンなどの）ビス−ジアゾニウム誘導体、（トリレン２，６−ジイソシアネートなどの）ジイソシアネート、および（１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンなどの）ビス−活性フッ素化合物のような種々の二官能性タンパク質カップリング剤を用いて作成することができる。特に好ましいカップリング剤は、ジスルフィド結合を供するための、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）（Ｃａｒｌｓｓｏｎｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．１７３：７２３−７３７頁［１９７８年］）およびＮ−スクシンイミジル−４−（２−ピリジルチオ）ペンタノエート（ＳＰＰ）を含む。

リンカーは、リンクのタイプに依存して、種々の位置においてメイタンシノイド分子に結合させることができる。例えば、エステル結合は、慣用的なカップリング技術を用いるヒドロキシルとの反応によって形成することができる。反応は、ヒドロキシル基を有するＣ−３位置、ヒドロキシルメチルで修飾されたＣ−１４位置、ヒドロキシル基で修飾されたＣ−１５位置、およびヒドロキシル基を有するＣ−２０位置において起こることができる。結合はメイタンシノールまたはメイタンシノールアナログのＣ−３位置において形成される。
カリケアミシン
対象の別のイムノコンジュゲートは、１以上のカリケアミシン分子にコンジュゲートした抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体を含む。抗体のカリケアミシンファミリーは、サブ−ピコモラーの濃度において二本鎖ＤＮＡ破断を生じさせることができる。カリケアミシンファミリーのコンジュゲートの調製については、米国特許第５，７１２，３７４号、第５，７１４，５８６号、第５，７３９、１１６号、第５，７６７，２８５号、第５，７７０，７０１号、第５，７７０，７１０号、第５，７７３，００１号、第５，８７７，２９６号（すべてＡｍｅｒｉｃａｎＣｙａｎａｍｉｄＣｏｍｐａｎｙ）参照。用いることができるカリケアミシンの構造アナログは、限定されるものではないが、γ_１ ^Ｉ、α_２ ^Ｉ、α_３ ^Ｉ、Ｎ−アセチル−γ_１ ^Ｉ、ＰＳＡＧおよびθ^Ｉ _１を含む（Ｈｉｎｍａｎｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５３：３３３６−３３４２頁（１９９３年），Ｌｏｄｅｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５８：２９２５−２９２８頁（１９９８年）およびＡｍｅｒｉｃａｎＣｙａｎａｍｉｄに対する前記した米国特許）。抗体がコンジュゲートすることができるもう１つの抗腫瘍薬物は、抗葉酸であるＱＦＡである。カリケアミシンおよびＱＦＡは、共に、細胞内作用部位を有し、原形質膜を容易には通過しない。したがって、抗体媒介内部化を通じてのこれらの剤の細胞接種はそれらの細胞傷害性効果を大いに増強させる。
他の細胞傷害性剤
本発明の抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体にコンジュゲートすることができる他の抗腫瘍剤は、ＢＣＮＵ、ストレプトゾイシン、ビンクリスチンおよび５−フルオロウラシル、米国特許第５，０５３，３９４号、第５，７７０，７１０号に記載された集合的にＬＬ−Ｅ３３２８８複合体として知られた剤のファミリー、ならびにエスペラミシン（米国特許第５，８７７，２９６号）を含む。

用いることができる酵素的に活性なトキシンおよびその断片は、ジフテリアＡ鎖、ジフテリアトキシンの非結合性活性断片、（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａからの）エキソトキシンＡ鎖、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、α−サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンチンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、およびＰＡＰ−Ｓ）、モモルジカカランティア阻害剤、クルシン、クロチン、サパオナリア・アフィシナリス阻害剤、ゲロニン、マイトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシンおよびトリコテセンを含む。例えば、１９９３年１０月２８日に公開されたＷＯ９３／２１２３２参照。

本発明では、さらに、抗体およびヌクレオ溶解性活性をもつ化合物（例えば、リボヌクレアーゼまたはデオキシリボヌクレアーゼなどのＤＮＡエンドヌクレアーゼ；ＤＮａｓｅ）の間で形成されたイムノコンジュゲートが考えられる。

腫瘍の選択的破壊のためには、抗体は高度に放射性の原子を含むことができる。種々の放射性同位体が、ラジオコンジュゲートした抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体の生産のために入手できる。その例はＡｔ^２１１、Ｉ^１３１、Ｉ^１２５、Ｙ^９０、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８、Ｓｍ^１５３、Ｂｉ^２１２、Ｐ^３２、Ｐｂ^２１２、およびＬｕの放射性同位体を含む。コンジュゲートを診断のために用いる場合、それはシンチグラフィー研究のための放射性原子、Ｔｃ^９９ｍまたはＩ^１２３、または再度ヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガンまたは鉄などの（磁気共鳴イメージング、ｍｒｉとしても知られた）核磁気共鳴（ＮＭＲ）イメージングのためのスピン標識を含むことができる。

放射性−または他の標識は公知の方法でコンジュゲートに取り込むことができる。例えば、ペプチドは、生合成することができるか、あるいは、例えば、水素の代わりにフッ素−１９を含む適当なアミノ酸前駆体を用いて化学的アミノ酸合成によって合成することができる。ｔｃ^９９ｍまたはＩ^１２３、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８およびＩｎ^１１１などの標識はペプチド中のシステイン残基を介して結合させることができる。イットリウム−９０はリシン残基を介して結合させることができる。ＩＯＤＯＧＥＮ方法（Ｆｒａｋｅｒｅｔａｌ．，（１９７８年）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．８０：４９−５７頁）を用いて、ヨウ素―１２３を取り込むことができる。「ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓｉｎＩｍｍｕｎｏｓｃｉｎｔｉｇｒａｐｈｙ」（Ｃｈａｔａｌ，ＣＲＣＰｒｅｓｓ１９８９は他の方法を詳細に記載する。

抗体および細胞傷害性剤のコンジュゲートは、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート、イミノチオラン（ＩＴ）、（ジメチルアジピミデートＨＣＬなどの）イミドエステルの二官能性誘導体、（スベリン酸ジスクシンイミジルなどの）活性エステル、（グルタルアルデヒドなどの）アルデヒド、（ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミンなどの）ビス−アジド化合物、（ビス（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミンなどの）ビス−ジアゾニウム誘導体、（トリレン２，６−ジイソシアネートのような）ジイソシアネート、および（１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンなどの）ビス−活性フッ素などの種々の二官能性タンパク質カップリング剤を用いて作成することができる。例えば、リシンイムノトキシンはＶｉｔｅｔｔａｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２３８：１０９８頁（１９８７年）に記載したように調製することができる。炭素−１４−標識１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドの抗体へのコンジュゲーションのための例示的キレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６参照。リンカーは細胞における細胞傷害性薬物の放出を容易とする「切断可能リンカー」であってよい。例えば、酸−不安定リンカー、ペプチダーゼ−感受性リンカー、光不安定リンカー、ジメチルリンカーまたはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈ５２：１２７−１３１頁（１９９２年）；米国特許第５，２０８，０２０号）を用いることができる。

別法として、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体および細胞傷害性剤を含む融合タンパク質は、例えば、組換え技術またはペプチド合成によって作成することができる。ＤＮＡの長さは、相互に隣接した、またはコンジュゲートの所望の特性を破壊しないリンカーペプチドをコードする領域によって分離されたコンジュゲートの２つの部分をコードする各領域を含むことができる。

本発明は、腫瘍プレ標的化で利用するために抗体を（ストレプトアビジンなどの）「受容体」にコンジュゲートすることができることを提供し、抗体−受容体コンジュゲートは患者に投与され、続いて、洗浄剤を用いて循環から未結合コンジュゲートを除去し、次いで、細胞傷害性剤（例えば、放射性ヌクレオチド）にコンジュゲートされた「リガンド」（例えば、アビジン）を投与する。
１０．イムノリポソーム
本明細書中に開示された抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体はイムノリポソームとして処方することもできる。「リポソーム」は、種々のタイプの脂質、リン脂質、および／または界面活性剤から構成される小さなベシクルであり、これは薬物の哺乳動物への送達で有用である。リポソームの成分は、生物学的膜の脂質配列と同様に、二相形成にて、通常は配置される。抗体を含有するリポソームは、Ｅｐｓｔｅｉｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８２：３６８８頁（１９８５年）；Ｈｗａｎｇら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ７７：４０３０頁（１９８０年）；米国特許第４，４８５，０４５号および第４，５４４，５４５号；および１９９７年１０月２３日に公開されたＷＯ９７／３８７３１に記載されたような当該分野で公知の方法によって調製される。増強された循環時間を持つリポソームは米国特許第５，０１３，５５６号に開示されている。

特に有用なリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロールおよびＰＥＧ−誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＰＥ）を含む脂質組成物で逆相蒸発方法によって生じさせることができる。リポソームは規定されたポアサイズのフィルターを通して押し出して、所望の直径をもつリポソームを得る。本発明の抗体のＦａｂ’断片は、ジスルフィド相互交換反応を介して、Ｍａｒｔｉｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５７：２８６−２８８頁（１９８２年）に記載されたようにリポソームにコンジュゲートさせることができる。化学療法剤は所望により、リポソーム内に含有される。Ｇａｂｉｚｏｎｅｔａｌ．，Ｊ．ＮａｔｉｏｎａｌＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ．８１（１９）：１４８４頁（１９８９年）参照。
１１．抗体の医薬組成物
本明細書中で同定されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに特異的に結合する抗体、ならびに前記したスクリーニングアッセイによって同定された他の分子は、医薬組成物の形態で種々の傷害の治療のために投与することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドが細胞内にあって、全抗体が阻害剤として用いられるとき、内部化抗体が好ましい。しかしながら、リポフェクションまたはリポソームを用いて抗体、または抗体断片を細胞に送達することもできる。抗体断片を用いる場合、標的タンパク質の結合ドメインに特異的に結合する最も小さい阻害性断片が好ましい。例えば、抗体の可変領域配列に基づいて、標的タンパク質配列に結合する能力を保有するペプチド分子を設計することができる。そのようなペプチドは化学的に合成し、および／または組換えＤＮＡ技術によって生産することができる。例えば、Ｍａｒａｓｃｏｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９０：７８８９−７８９３頁（１９９３年）参照。ここでは、処方は、治療すべき特定の適応症に必要な１を超える活性化合物、好ましくは、相互に悪影響しない補充的活性を持つ化合物を含有することもできる。別法として、あるいは加えて、組成物は、例えば、細胞傷害性剤、サイトカイン、化学療法剤、または成長阻害剤などのその機能を増強させる剤を含むことができる。そのような分子は、意図される目的で有効な量で組合せて存在させる。

有効成分は、例えば、コアセルベーション技術によって、界面重合によって調製されるマイクロカプセル、例えば、各々、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフィア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、およびナノカプセル）における、またはマイクロエマルジョンにおける、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセルに捕獲することもできる。そのような技術はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，（上記）に開示されている。

イン・ビボ投与で用いるべき処方は滅菌されなければならない。これは、滅菌濾過膜を通じての濾過によって容易に達成される。

徐放製剤を調製することができる。徐放製剤の適当な例は、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスを含み、そのマトリックスは成型品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態である。徐放マトリックスの例として、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）Ｌ−グルタミン酸およびγエチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮＤＥＯＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーおよび酢酸ロイプロリドから構成される注射マイクロスフェア）などの分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、およびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。エチレン−酢酸ビニルおよび乳酸−グリコール酸などのポリマーは１００日間に渡っての分子の放出を可能とするが、ある種のヒドロゲルはより短い時間でタンパク質を放出する。カプセル化抗体が長時間体内に留まる場合、それらは３７℃の水分に曝露された結果として、変性または凝集しかねず、その結果、生物学的活性は失われ、免疫原性はおそらく変化する。合理的な戦略は、関係するメカニズムに依存して安定化について工夫することができる。例えば、もし凝集メカニズムがチオ−ジスルフィド交換を通じての分子間Ｓ−Ｓ結合であると発見されれば、安定化は、スルフヒドリル残基を修飾し、酸性溶液から凍結乾燥し水分含有量を制御し、適当な添加剤を用い、そして特異的ポリマーマトリックス組成物を開発することによって達成することができる。

Ｇ．抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体の使用
本発明の抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体は、神経学的障害；心血管、内皮または血管新生疾患；免疫学的障害；腫瘍学的障害；胚発生障害または致死性、または代謝異常に対して種々の治療的および／または診断的用途を有する。例えば、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０のための診断アッセイで使用することができ、例えば、特異的細胞、組織、または血清におけるその発現（およびある場合には差別的発現）を検出する。競合結合アッセイ、直接的または間接的サンドウィッチアッセイおよび不均一相または均一相いずれかで行われる免疫沈澱アッセイなどの当該分野で知られた種々の診断アッセイ技術を用いることができる［Ｚｏｌａ，ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＡＭａｎｕａｌｏｆＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ＣＲＣＰｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．（１９８７年）１４７−１５８頁］。診断アッセイで用いる抗体は検出可能な部位で標識することができる。検出可能な部位は検出可能なシグナルを直接的にまたは間接的に生じさせることができるべきである。例えば、検出可能な部位は^３Ｈ、^１４Ｃ、^３２Ｐ、^３５Ｓまたは^１２５Ｉなどの放射性同位体、フルオレセインイソチオシアネート、ローダミンまたはルシフェリンなどの蛍光またはケミルミネセント化合物、あるいはアルカリ性ホスファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼまたはホースラディッシュペルオキシダーゼなどの酵素であって良い。Ｈｕｎｔｅｒｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，１４４：９４５頁（１９６２年）；Ｄａｖｉｄｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１３：１０１４頁（１９７４年）；Ｐａｉｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．，４０：２１９頁（１９８１年）；およびＮｙｇｒｅｎ，Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．ａｎｄＣｙｔｏｃｈｅｍ．，３０：４０７頁（１９８２年）によって記載された方法を含めた、抗体を検出可能な部位にコンジュゲートさせるための当該分野で公知のいずれの方法も使用することができる。

抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体は、組換え細胞培養または天然源からのＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアフィニティ精製でやはり有用である。このプロセスにおいては、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対する抗体を、当該分野で良く知られた方法を用い、Ｓｅｐｈａｄｅｘ樹脂または濾紙のような適当な支持体に固定化する。次いで、固定化された抗体を、精製すべきＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを含有する試料と接触させ、その後、固定化された抗体に結合した、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを除いた試料中の実質的に全ての物質を除去する適当な溶媒で支持体を洗浄する。最後に、抗体からＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを放出する別の適当な溶媒で支持体を洗浄する。

以下の実施例は説明目的でのみ掲げ、断じて本発明の範囲を限定する意図ではない。

本明細書中で引用された全ての特許および刊行物文献は、ここに引用してその全体を援用する。

実施例で言及する商業的に入手可能な試薬は、特に示さない限りは、製造業者の指示に従って用いた。ＡＴＣＣ受託番号によって、以下の実施例中で、および明細書を通じて確認される細胞の源は、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡである。
実施例１：新規ポリペプチドおよびそれをコードするｃＤＮＡを同定するための細胞外ドメイン相同性スクリーニング
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔの公のデータベースからの約９５０の分泌タンパク質からの（存在するならば、分泌シグナル配列を含めた）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列を用いて、ＥＳＴデータベースをサーチした。ＥＳＴデータベースは、公のデータベース（例えば、Ｄａｙｈｏｆｆ，ＧｅｎＢａｎｋ）、および所有されたデータベース（例えば、ＬＩＦＥＳＥＱ（商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含むものであった。該サーチは、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳に対するＥＣＤタンパク質配列の比較として、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ−２（Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０頁（１９９６年））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしなかった７０（ある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアとの比較をクラスター化し、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ）でコンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。

この細胞外ドメイン相同性スクリーニングを用い、ｐｈｒａｐを用い、コンセンサスＤＮＡ配列を他の同定されたＥＳＴ配列に対して組み立てた。加えて、得られたコンセンサスＤＮＡ配列は、しばしば、（常ではない）反復サイクルのＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ−２およびｐｈｒａｐを用いて拡大して、前記したＥＳＴ配列の源を用いる限り、コンセンサス配列を拡大した。

前記で得られたコンセンサス配列に基づいて、次いで、オリゴヌクレオチドを合成し、それを用いて、プローブとして用いられる対象配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定して、ＰＲＯポリペプチドについての全長コーディング配列のクローンを単離した。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般には、２０ないし３０ヌクレオチドの範囲であり、しばしば、長さが約１００ないし１０００ｂｐのＰＣＲ産物を与えるように設計する。プローブ配列は、典型的には、長さが４０ないし５５ｂｐである。ある場合には、コンセンサス配列が約１ないし１．５ｋｂｐよりも大きな場合には、追加のオリゴヌクレオチドを合成する。全長クローンについてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするためには、ＰＣＲプライマー対で、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙに従ってＰＣＲ増幅によって、ライブラリーからのＤＮＡをスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の１つを用いて対象の遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡクローンを単離するのに用いたｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡからのもののような商業的に入手可能な試薬を用いて標準的方法によって構築した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターに平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切なサイズとし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤなど；ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓら、Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０頁（１９９１年））に規定された向きにクローン化した。
実施例２：アミラーゼスクリーニングによるｃＤＮＡクローンの単離
１．オリゴｄＴ起点ｃＤＮＡライブラリーの調製
ｍＲＮＡは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ（ＦａｓｔＴｒａｃｋ２）からの試薬およびプロトコルを用いて注目する組織から単離した。このＲＮＡを用いて、ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ（ＳｕｐｅｒＳｉｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍ）からの試薬およびプロトコルを用い、ベクターｐＲＫ５ＤにおいてオリゴｄＴ起点ｃＤＮＡライブラリーを作成した。この手法においては、二本鎖ｃＤＮＡは１０００ｂｐよりも大きなサイズとし、ＳａｌＩ／ＮｏｔＩ連結ｃＤＮＡをＸｈｏＩ／ＮｏｔＩ切断ベクターにクローン化した。ｐＲＫ５Ｄは、ｓｐ６転写開始部位、続いて、ＸｈｏＩ／ＮｏｔＩｃＤＮＡクローニング部位に先行するＳｆｉＩ制限酵素部位を有するクローニングベクターである。
２．ランダム起点ｃＤＮＡライブラリーの調製
２次ｃＤＮＡライブラリーを作成して、１次ｃＤＮＡクローンの５’末端を優先的に表した。ｓｐ６ＲＮＡは（前記）１次ライブラリーから表示させ、これを用いて、ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓからの試薬およびプロトコル（前記したＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔＰｌａｓｍｉｄＳｙｓｔｅｍ）を用い、ベクターｐＳＳＴ−ＡＭＹ．０においてランダム起点ｃＤＮＡライブラリーを生じさせた。この手法において、二本鎖ｃＤＮＡを５００ないし１０００ｂｐのサイズとし、ＮｏｔＩアダプターに平滑連結し、ＳｆｉＩで切断し、ＳｆｉＩ／ＮｏｔＩ切断ベクターにクローン化した。ｐＳＳＴ−ＡＭＹ．０は、ｃＤＮＡクローニング部位およびマウスアミラーゼ配列（分泌シグナル無しの成熟配列）に先行する酵母アルコールデヒドロゲナーゼプロモーター、続いて、クローニング部位の後の酵母アルコールデヒドロゲナーゼターミネータを有するクローニングベクターである。かくして、アミラーゼ配列にイン・フレーム融合されたこのベクターにクローン化されたｃＤＮＡは、適切にトランスフェクトされた酵母コロニーからのアミラーゼの分泌に導くであろう。
３．形質転換および検出
前記段落２に記載したライブラリーからのＤＮＡを、エレクトロコンピテントＤＨ１０Ｂ細菌（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，２０ｍｌ）を加えた氷で冷却した。次いで、製造業者に推奨されるように、細菌およびベクター混合物をエレクトロポレーションに付した。引き続いて、ＳＯＣ培地（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，１ｍｌ）を加え、混合物を３７℃にて３０分間インキュベートした。続いて、形質転換体を、アンピシリンを含有する２０の標準１５０ｍｍＬＢプレートに平板培養し、１６時間インキュベートした（３７℃）。陽性クローンをプレートから掻き落とし、標準プロトコル、例えば、ＣｓＣｌ−グラジエントを用いて細菌ペレットからＤＮＡを単離した。次いで、精製されたＤＮＡを以下の酵母プロトコルに運んだ。

酵母方法は３つのカテゴリーに分けた：（１）プラスミド／ｃＤＮＡ組合せベクターでの酵母の形質転換；（２）酵母クローン分泌アミラーゼの検出および単離；（３）酵母コロニーからの直接的なインサートのＰＣＲ増幅、および配列決定およびさらなる分析のためのＤＮＡの精製。

用いた酵母株はＨＤ５６−５Ａ（ＡＴＣＣ−９０７８５）であった。該株は以下の遺伝子型を有する：ＭＡＴアルファ、ｕｒａ３−５２、ｌｅｕ２−３、ｌｅｕ２−１１２、ｈｉｓ３−１１、ｈｉｓ３−１５、ＭＡＬ^＋、ＳＵＣ^＋、ＧＡＬ^＋。好ましくは、欠陥のある翻訳後経路を有する酵母突然変異体を使用することができる。そのような突然変異体はｓｅｃ７１、ｓｅｃ７２、ｓｅｃ６２においてトランスロケーション欠陥対立遺伝子を有することができ、切形ｓｅｃ７１が最も好ましい。別法として、これらの遺伝子の正常な操作に干渉する（アンチセンスヌクレオチドおよび／またはリガンドを含めた）アンタゴニスト、この翻訳後経路に関与する他のタンパク質（例えば、ＳＥＣ６１ｐ、ＳＥＣ７２ｐ、ＳＥＣ６２ｐ、ＳＥＣ６３ｐ、ＴＤＪ１ｐまたはＳＳＡ１ｐ−４ｐ）またはこれらのタンパク質の複合体形成もまた、好ましくは、アミラーゼ−発現酵母と組み合わせて使用することもできる。

形質転換は、Ｇｉｅｔｚｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．，２０：１４２５頁（１９９２年）によって概説されたプロトコルに基づいて行った。次いで、形質転換された細胞を寒天からＹＥＰＤ複合体培地ブロス（１００ｍｌ）に接種し、３０℃にて一晩増殖させた。ＹＥＰＤブロスは、Ｋａｉｓｅｒｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＹｅａｓｔＧｅｎｅｔｉｃｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，ＮＹ，２０７頁（１９９４年）に記載されているように調製した。次いで、一晩の培養を約２×１０^６細胞／ｍｌ（ほぼＯＤ_６００＝０．１）まで新鮮なＹＥＰＤブロス（５００ｍｌ）に希釈し、１×１０^７細胞／ｍｌ（ほぼＯＤ_６００＝０．４ないし０．５）まで再度増殖させた。

次いで、細胞を収穫し、５，０００ｒｐｍにおける５分間のＳｏｒｖａｌＧＳ３ローター中のＧＳ３ローターボトルへの導入によって形質転換のために調製し、上清を捨て、次いで、滅菌水に再度懸濁させ、ＤｅｃｋｍａｎＧＳ−６ＫＲ遠心機において３，５００ｒｐｍで５０ｍｌファルコンチューブ中で再度遠心した。上清を捨て、細胞を引き続いてＬｉＡｃ／ＴＥ（１０ｍｌ，１０ｍＭトリス−ＨＣｌ、１ｍＭＥＤＴＡｐＨ７．５，１００ｍＭＬｉ_２ＯＯＣＣＨ_３）で洗浄し、ＬｉＡｃ／ＴＥ（２．５ｍｌ）に再度懸濁させた。

形質転換は、調製された細胞（１００μｌ）を新たに変性された一本鎖サケ精巣ＤＮＡ（ＬｏｆｓｔｒａｎｄＬａｂｓ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）と混合し、遠心機チューブ中でＤＮＡ（１μｇ，容量＜１０μｌ）を形質転換することによって行った。混合物はボルテクシングによって軽く混合し、次いで、４０％ＰＥＧ／ＴＥ（６００μｌ，４０％ポリエチレングリコール−４０００、１０ｍＭトリス−ＨＣｌ、１ｍＭＥＤＴＡ、１００ｍＭＬｉ_２ＯＯＣＣＨ_３、ｐＨ７．５）を加えた。混合物を軽く混合し、３０分間攪拌しながら３０℃にてインキュベートした。次いで、細胞を４２℃にて１５分間熱ショックを与え、反応容器を遠心機中で１２，０００ｒｐｍにて５ないし１０秒間遠心し、デカントし、ＴＥ（５００μｌ、１０ｍＭトリス−ＨＣｌ、１ｍＭＥＤＴＡｐＨ７．５）に再懸濁させ、続いて再度遠心した。次いで、細胞をＴＥ（１ｍｌ）に希釈し、アリコット（２００μｌ）を、１５０ｍｍ増殖プレート（ＶＷＲ）中で予め調製された選択培地上に延ばした。

別法として、複数の小さな反応の代わりに、単一の大規模な反応を用いて形質転換を行い、試薬の量はそれに従ってスケールアップした。

用いた選択培地は、Ｋａｉｓｅｒｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＹｅａｓｔＧｅｎｅｔｉｃｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，ＮＹ，２０８−２１０頁（１９９４年）に記載されているように調製したウラシルを欠く合成完全デキストロース寒天（ＳＣＤ−Ｕｒａ）であった。形質転換体を３０℃にて２ないし３日間増殖させた。

コロニー分泌アミラーゼの検出は、選択増殖培地中に赤色澱粉を含ませることによって行った。Ｂｉｅｌｙｅｔａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１７２：１７６−１７９頁（１９８８年）によって記載された手法に従い、澱粉を赤色色素（ＲｅａｃｔｉｖｅＲｅｄ−１２０、Ｓｉｇｍａ）にカップリングさせた。カップリングされた澱粉は、０．１５％（ｗ／ｖ）の最終濃度にてＳＣＤ−Ｕｒａ寒天プレートに取り込み、リン酸カリウムで７．０のｐＨに緩衝した（５０ないし１００ｍＭ最終濃度）。

陽性コロニーを拾い、新鮮な培地（１５０ｍｍプレート上）に画線培養して、よく単離された同定可能な単一コロニーを得た。アミラーゼ分泌について陽性であるよく単離された単一コロニーは、緩衝されたＳＣＤ−Ｕｒａ寒天への赤色澱粉の直接的取り込みによって検出した。陽性コロニーは、直接的に可視化された陽性コロニーの周りの明瞭なハローをもたらす、澱粉を分解するそれらの能力によって測定した。
４．ＰＣＲ増幅によるＤＮＡの単離
陽性コロニーが単離されると、その一部は爪楊枝によって拾い、９６ウェルプレート中の滅菌水（３０μｌ）に希釈した。この時点において、陽性コロニーを凍結し、引き続いての分析のために貯蔵し、あるいは直ちに増幅した。細胞のアリコット（５μｌ）を、０．５μｌＫｌｅｎｔａｑ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）；４．０μｌ１０ｍＭｄＮＴＰ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ−Ｃｅｔｕｓ）；２．５μｌＫｅｎｔａｑ緩衝液（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）；０．２５μｌ順方向オリゴ１；０．２５μｌ逆方向オリゴ２；１２．５μｌ蒸留水を含有する２５μｌ容量中のＰＣＲ反応のための鋳型として用いた。順方向オリゴヌクレオチド１の配列は以下の通りであった：

（配列番号：８１）
逆方向オリゴヌクレオチド２の配列は：

（配列番号：８２）であった。次いで、ＰＣＲを以下のように行った：

オリゴヌクレオチドの下線を施した領域は、各々、ＡＤＨプロモーター領域とアミラーゼ領域にアニールし、インサートが存在しない場合、ベクターｐＳＳＴ−ＡＭＹ．０からの３０７ｂｐ領域を増幅した。典型的には、これらのオリゴヌクレオチドの５’末端の最初の１８ヌクレオチドは配列決定プライマーのためのアニーリング部位を含有した。かくして、空のベクターからのＰＣＲ反応の全産物は３４３ｂｐであった。しかしながら、シグナル配列−融合ｃＤＮＡの結果、かなり長いヌクレオチド配列がもたらされた。

ＰＣＲに続き、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，ｓｕｐｒａによって記載されたように、トリス−ホウ酸塩−ＥＤＴＡ（ＴＢＥ）緩衝系を用いる１％アガロースゲルでのアガロースゲル電気泳動によって、反応のアリコット（５μｌ）を調べた。４００ｂｐよりも大きい単一の強力なＰＣＲ産物をもたらすクローンは、さらに、９６ＱｉａｑｕｉｃｋＰＣＲクリーン−アップカラム（ＱｉａｇｅｎＩｎｃ．，Ｃｈａｔｓｗｏｒｔｈ，ＣＡ）での精製の後にＤＮＡ配列決定によって分析した。
実施例３：単一アルゴリズム分析を用いるｃＤＮＡクローンの単離
種々のポリペプチド−コーディング核酸配列は、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された所有される単一配列発見アルゴリズムをＥＳＴに際して適用することによって同定し、並びにクラスター化し、公の（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または私的な（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）データベースからＥＳＴ断片を組み立てた。単一配列アルゴリズムは、考慮する配列または配列断片の５’−末端における第一および、任意により、第二のメチオニンコドン（ＡＴＧ）の周囲のＤＮＡヌクレオチドの特性に基づき、分泌シグナルスコアを計算する。第一のＡＴＧに続いてのヌクレオチドは、いずれの停止コドンもなくして少なくとも３５の明確なアミノ酸をコードしなければならない。もし第一のＡＴＧがアミノ酸を必要とするならば、第二のＡＴＧは調べない。もしいずれも要件を満たさないならば、候補配列はスコア取りしない。ＥＳＴ配列が真正なシグナル配列を含有するか否かを決定するために、ＡＴＧコドンのまわりのＤＮＡおよび対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメーター）の組を用いてスコア取りする。このアルゴリズムの使用の結果、多数のポリペプチドをコードする核酸配列の同定がもたらされた。

前記実施例１ないし３に記載された技術を用い、多数の全長ｃＤＮＡクローンは、本明細書中に開示されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ１１２４もしくはＰＲＯ１０２６ポリペプチドをコードするものとして同定された。次いで、これらのｃＤＮＡは、ブダペスト条約の規定のもとに、以下の表７に示したように、ＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，１０８０１ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＢｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ２０１１０−２２０９，ＵＳＡ（ＡＴＣＣ）に寄託された。加えて、ＰＲＯ９２１６５ポリペプチドをコードするＤＮＡ３４０３９２の配列は、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＢ０２８７１４から同定され；ＰＲＯ８５１４３ポリペプチドをコードするＤＮＡ３４０３９４の配列はＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＦ３２９４８８から同定され；ＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡ１９３９６３の配列はＧｅｎＢａｎｋ受託番号：Ｌ０８１７７から同定された。

これらの寄託は、特許手続の目的の微生物の寄託の国際的承認に関するブダペスト条約の規定、およびその下での規則（ブダペスト条約）に従ってなされた。これは、寄託の日から３０年の間の寄託の生きた培養の維持を保証する。該寄託はブダペスト条約の期間の下で、かつ関連米国特許の発行に際し、またはいずれかの米国または外国特許出願の公衆への公開に際してのいずれか早くに、公衆への寄託の培養の子孫の永久かつ制限されない利用可能性を保証し、かつ３５ＵＳＣ１２２条およびそれに従う長官の規則（８８６ＯＧ６３８に特別に言及する３７ＣＦＲ１．１４条を含む）に従ってそれに対して権利がある米国特許商標局長官によって決定された者への該子孫の利用可能性を保証するＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．およびＡＴＣＣの間の合意に従って、ＡＴＣＣによって利用可能とされるであろう。

本出願の譲受人は、もし適当な条件下で培養した場合に、寄託された材料の培養が死滅し、または失われ、または破壊されれば、該材料はそのもう１つで通知に際して迅速に置き換えられるであろうことに合意した。寄託された材料の利用可能性は、その特許法に従っていずれかの政府の当局に許可された権利に反して本発明を実施するライセンスと解釈されるべきではない。
実施例４：ヒトＰＲＯ１９４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ１６８］
コンセンサスＤＮＡ配列は、前記実施例１に記載したように、ｐｈｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここではＤＮＡ１９４６４とする。ＤＮＡ１９４６４コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ１９４についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）は、ＤＮＡ１９４６４配列に従って合成した。加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、コンセンサスＤＮＡ１９４６４配列から構築した。

全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ１９４遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児肺組織（ＬＩＢ２５）から単離した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ１９４［ここではＤＮＡ２６８４４−１３９４と命名］についての全長ＤＮＡ配列（配列番号：１）およびＰＲＯ１９４についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＤＮＡ２６８４４−１３９４の全ヌクレオチド配列を図１に示す（配列番号：１）。クローンＤＮＡ２６８４４−１３９４は、ヌクレオチド位置８１ないし８３における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置８７３ないし８７５の停止コドンで終わる単一のオープンリーディグフレームを含有する（図１）。予測されるポリペプチド前駆体は２６４アミノ酸の長さである（図２）。図２に示される全長ＰＲＯ１９４タンパク質は、約２９，６６５ダルトンの見積もられた分子量および約９．３４のｐＩを有する。図２に示された全長ＰＲＯ１９４配列（配列番号：２）の分析は、図２に示された種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明する。クローンＤＮＡ２６８４４−１３９４は１９９８年６月２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０９９２６が割り当てられている。

全長ＰＲＯ１９４ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それが、いずれかの公知のヒトタンパク質に対して有意な配列同様性を呈しないことを示唆する。しかしながら、Ｄａｙｈｏｆｆデーターベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１９４アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列、ＨＵＭＯＲＦＴ１で、ＣＥＴ０７Ｆ１０５、ＡＴＦＣＡ９１２、Ｆ６４９３４、ＹＤＪＸＥＣＯＬＩ、ＡＴＡＦ０００６５７１９Ｆ２９Ｇ２０．１９、Ｈ７０００２、Ｓ７６９８０、Ｈ６４９３４およびＳ７６３８５の間のいくらかの相同性を示した。
実施例５：ヒトＰＲＯ２２０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ１９４］
コンセンサスＤＮＡ配列は、前記実施例１に記載したように、他の同定されたＥＳＴ配列に対して組立て、ここに、コンセンサス配列はここではＤＮＡ２８７４９と命名される。ＤＮＡ２８７４９コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して、注目する配列を含み、プローブとして用いられるｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲで同定し、ＰＲＯ２２０についての全長コーディング配列のクローンを単離した。

ＰＣＲプライマーの対（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＴＣＡＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＴＴＡＴＴＧＧＣＣ−３’（配列番号：８３）
逆方向ＰＣＲプライマー５’−ＡＴＡＣＣＡＧＣＴＡＴＡＡＣＣＡＧＧＣＴＧＣＧ−３’（配列番号：８４）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ２８７４９配列から構築した：
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＡＡＣＡＧＴＡＡＧＴＧＧＴＴＴＧＡＴＧＣＴＣＴＴＣＣＡＡＡＴＣＴＡＧＡＧＡＴＴＣＴＧＡＴＧＡＴＴＧＧＧ−３’（配列番号：８５）。

全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ２２０遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児肺から単離した。前記したように単離したクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ２２０についての全長ＤＮＡ配列［ここではＤＮＡ３２２９８−１１３２と命名］およびＰＲＯ２２０についての誘導されるタンパク質配列を与えた。

ＤＮＡ３２２９８−１１３２の全ヌクレオチド配列を図３に示す（配列番号：３）。クローンＤＮＡ３２２９８−１１３２は、ヌクレオチド位置４８０ないし４８２における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置２６０４ないし２６０６の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する（図３）。予測されるポリペプチド前駆体は７０８アミノ酸の長さである（図４；配列番号：４）。クローンＤＮＡ３２２９８−１１３２は１９９７年９月１６日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＡＴＣＣ２０９２５７が割り当てられている。

全長ＰＲＯ２２０のアミノ酸配列の分析は、それが、ロイシンリッチな反復タンパク質およびニューロンロイシン−リッチな反復タンパク質１を含めた、ロイシンリッチな反復タンパク質スーパーファミリーのメンバーに対して相同性を有することを示す。
実施例６：ヒトＰＲＯ２４１ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ２１５］
コンセンサスＤＮＡ配列は、前記実施例１に記載したように、他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここではＤＮＡ３０８７６と命名される。ＤＮＡ３０８７６コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ２４１についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＧＧＡＡＡＴＧＡＧＴＧＣＡＡＡＣＣＣＴＣ−３’（配列番号：８６）
逆方向ＰＣＲプライマー５’−ＴＣＣＣＡＡＧＣＴＧＡＡＣＡＣＴＣＡＴＴＣＴＧＣ−３’（配列番号：８７）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ３０８７６配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＧＧＧＴＧＡＣＧＧＴＧＴＴＣＣＡＴＡＴＣＡＧＡＡＴＴＧＣＡＧＡＡＧＣＡＡＡＡＣＴＧＡＣＣＴＣＡＧＴＴ−３’（配列番号：８８）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ２４１遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児腎臓組織（ＬＩＢ２９）から単離した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ２４１［ここでは、ＤＮＡ３４３９２−１１７０と命名］についての全長ＤＮＡ配列（配列番号：５）、およびＰＲＯ２４についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＤＮＡ３４３９２−１１７０の全ヌクレオチド配列を図５に示す（配列番号：５）。クローンＤＮＡ３４３９２−１１７０は、ヌクレオチド位置２３４ないし２３６において見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置１３７１ないし１３７３の停止コドンで終了する、単一のオープンリーディングフレームを含有する（図５）。予測されるポリペプチド前駆体は３７９アミノ酸の長さである（図６）。図６に示される全長ＰＲＯ２４１タンパク質は、約４３，３０２ダルトンの見積もられた分子量、および約７．３０のｐＩを有する。クローンＤＮＡ３４３９２−１１７０は１９９７年１２月１０日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＡＴＣＣ２０９５２６が割り当てられている。

全長ＰＲＯ２４１ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それが、種々のビグリカンプロテオグリカンタンパク質に対して有意な相同性を保有することを示唆し、それにより、ＰＲＯ２４１は新規なビグリカンホモログペプチドであることを示す。
実施例７：ヒトＰＲＯ２８４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ２４７］
２つのｃＤＮＡ配列を、実施例２に記載されたアミラーゼスクリーニングで単離し、それらのｃＤＮＡ配列はここではＤＮＡ１２９８２およびＤＮＡ１５８８６と命名する。次いで、ＤＮＡ１２９８２およびＤＮＡ１５８８６配列をクラスター化し、整列させ、ここではＤＮＡ１８８３２と命名されるコンセンサスヌクレオチド配列を生起させた。

ＤＮＡ１８８３２コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドプローブを生じさせ、それを用いて、前記実施例２のパラグラフ１に記載されたように調製されたヒト胎盤ライブラリー（ＬＩＢ８９）をスクリーニングした。クローニングベクターはｐＲＫ５Ｂであり（ｐＲＫ５Ｂは、ＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体であり；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１））、ｃＤＮＡのサイズカットは２８００ｂｐ未満であった。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー１（１８８３２．ｅｓｔ．ｆ）５’−ＴＣＧＴＡＣＡＧＴＴＡＣＧＣＴＣＴＣＣＣ−３’（配列番号：８９）
順方向ＰＣＲプライマー２（１８８３２．ｆ）５’−ＣＴＴＧＡＧＧＡＧＣＧＴＣＡＧＡＡＧＣＧ−３’（配列番号：９０）
逆方向ＰＣＲプライマー（１８８３２．ｒ）５’−ＡＴＡＡＣＧＡＡＴＧＡＡＧＣＣＴＣＧＴＧ−３’（配列番号：９１）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するＤＮＡ１８８３２配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ（１８８３２．ｐ）
５’−ＧＣＴＡＡＴＡＴＣＴＧＴＡＡＧＡＣＧＧＣＡＧＣＴＡＣＡＧＣＡＧＧＣＡＴＣＡＴＴＧ−３’（配列番号：９２）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーを用い、ＰＲＯ２８４遺伝子をコードするクローンを単離した。

ヌクレオチド位置１６７ないし１６９の見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置１０２２ないし１０２４に見出される停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する全長クローンを同定した（図７；配列番号：７）。予測されるポリペプチド前駆体は２８５アミノ酸の長さであり、ほぼ３２，１９０ダルトンの計算された分子量、およびほぼ９．０３の見積もられたｐＩを有する。図８に示す全長ＰＲＯ２８４配列（配列番号：８）の分析は、以下の：約アミノ酸１ないし約アミノ酸２４の単一ペプチド、約アミノ酸７６ないし約アミノ酸９６、および約アミノ酸１７１ないし約アミノ酸１９５の膜貫通ドメイン、および約アミノ酸１５３ないし約アミノ酸１５６の潜在的Ｎ−グリコシル化部位の存在を示す。クローンＵＮＱ２４７（ＤＮＡ２３３１８−１２１１）は１９８８年４月２１日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０９７８７が割り当てられている。

全長ＰＲＯ２８４ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それがいずれかの公知のタンパク質に対して有意な配列同様性を保有しないことを示唆する。しかしながら、Ｄａｙｈｏｆｆデーターベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ２８４アミノ酸配列、および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列、ＪＱ０１２４、ＣＥＬＥ０４Ａ４５、ＡＢ００６４５１１、ＡＦ０３０１６２１、ＩＭ２３ＹＥＡＳＴ、Ｓ７１１９４、ＮＩＡＣＵＣＭＡ、ＩＭ１７ＹＥＡＳＴ、Ｉ５０４７９およびＨＵＭＺＦＨＰ１の間のある程度の相同性を示した。
実施例８：ヒトＰＲＯ３３１ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ２９２］
コンセンサスＤＮＡ配列は、前記実施例１に記載されたように、ｐｈｒａｐを用い、他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列をここではＤＮＡ３６６８５と命名する。ＤＮＡ３６６８５コンセンサス配列、およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴ配列番号２２２８９９０に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ３３１についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。

ＰＲＯ３３１の決定のために、順方向および逆方向ＰＣＲプライマーを合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＧＣＣＴＴＴＧＡＣＡＡＣＣＴＴＣＡＧＴＣＡＣＴＡＧＴＧＧ−３’（配列番号：９３）
逆方向ＰＣＲプライマー５’−ＣＣＣＣＡＴＧＴＧＴＣＣＡＴＧＡＣＴＧＴＴＣＣＣ−３’（配列番号：９４）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するＰＲＯ３３１の決定のために構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＴＡＣＴＧＣＣＴＣＡＴＧＡＣＣＴＣＴＴＣＡＣＴＣＣＣＴＴＧＣＡＴＣＡＴＣＴＴＡＧＡＧＣＧＧ−３’
（配列番号：９５）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ３３１遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児脳から単離した（ＰＲＯ３３１）。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ３３１［ここではＤＮＡ４０９８１−１２３４と命名；配列番号：９；図９参照］についての全長ＤＮＡ配列、およびＰＲＯ３３１についての誘導されたタンパク質配列（図１０；配列番号：１０参照）を与えた。

全ヌクレオチド配列は図９に示され、１９９７年１１月７日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０９４３９が割り当てられている。

全長ＰＲＯ３３１ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それの一部がＬＩＧ−１タンパク質に対して有意な相同性を保有することを示唆し、それにより、ＰＲＯ３３１は新規なＬＩＧ−１−関連タンパク質であり得ることを示す。
実施例９：ヒトＰＲＯ３５４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ３１１］
発現された配列タグ（ＥＳＴ）ＤＮＡデーターベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）をサーチし、アルファ−トリプシン間で阻害剤重鎖に対して、および相互に対してある程度の相同性を保有する種々のＥＳＴ配列が同定された。次いで、それらの相同ＥＳＴ配列を整列させ、コンセンサス配列が得られた。次いで、反復されたサイクルのＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐを用い、得られたコンセンサスＤＮＡ配列を延長して、公のＥＳＴデーターベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および私的なＥＳＴＤＮＡデーターベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）から導かれた相同ＥＳＴ配列を用いるのが可能な限り、コンセンサス配列を延長した。延長された組立配列はここではＤＮＡ３９６３３と命名する。前記サーチは、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較をクラスター化し、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）でコンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。

ＤＮＡ３９６３３コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ３５４についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般には、２０ないし３０ヌクレオチドの範囲であり、しばしば、長さが約１００ないし１０００ｂｐのＰＣＲ産物を与えるように設計される。プローブの配列は典型的には長さが４０ないし５５ｂｐである。ある場合には、コンセンサス配列が約１ないし１．５ｋｂｐよりも大きな場合には、追加のオリゴヌクレオチドを合成する。全長クローンについてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ライブラリーからのＤＮＡを、ＰＣＲプライマー対で、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙに従ってＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の１つを用い、注目する遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマーを合成した：
順方向ＰＣＲプライマー（３９６３３．ｆ１）５’−ＧＴＧＧＧＡＡＣＣＡＡＡＣＴＣＣＧＧＣＡＧＡＣＣ−３’（配列番号：９６）
順方向ＰＣＲプライマー（３９６３３．ｆ２）５’−ＣＡＣＡＴＣＧＡＧＣＧＴＣＴＣＴＧＧ−３’（配列番号：９７）
逆方向ＰＣＲプライマー（３９６３３．ｒ１）５’−ＡＧＣＣＧＣＴＣＣＴＴＣＴＣＣＧＧＴＴＣＡＴＣＧ−３’（配列番号：９８）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ３９６３３から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＴＧＧＡＡＧＧＡＣＣＡＣＴＴＧＡＴＡＴＣＡＧＴＣＡＣＴＣＣＡＧＡＣＡＧＣＡＴＣＡＧＧＧＡＴＧＧＧ−３’
（配列番号：９９）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ３５４遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児腎臓から単離した（ＬＩＢ２２７）。ｃＤＮＡライブラリーを用いて、ＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡからのもののような商業的に入手可能な試薬を用い、標準的な方法によって、ｃＤＮＡクローンを単離した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターに平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適当なサイズとし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１））へ規定された向きにクローン化した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ３５４についての全長ＤＮＡ配列［ここでは、ＤＮＡ４４１９２−１２４６と命名］（配列番号：１１）およびＰＲＯ３５４についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＤＮＡ４４１９２−１２４６の全ヌクレオチド配列は図１１に示す（配列番号：１１）。クローンＤＮＡ４４１９２−１２４６は、ヌクレオチド位置７２ないし７４における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置２１５４−２１５６の停止コドンにおいて終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する（図１１）。予測されるポリペプチド前駆体は６９４アミノ酸の長さである（図１２；配列番号：１２）。図１２に示された全長ＰＲＯ３５４タンパク質は、約７７，４００ダルトンの見積もられた分子量および約９．５４のｐＩを有する。クローンＤＮＡ４４１９２−１２４６は１９９７年１２月１０日にＡＴＣＣに寄託されており、ＡＴＣＣ受託番号ＡＴＣＣ２０９５３１が割り当てられている。

全長ＰＲＯ３５４ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それが、アルファ−トリプシン間阻害剤重鎖タンパク質に対して有意な相同性を保有することを示唆し、それにより、ＰＲＯ３５４が新規なアルファ−トリプシン間阻害剤重鎖タンパク質ホモログであり得ることを示す。
実施例１０：ヒトＰＲＯ３５５ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ３１２］
コンセンサスＤＮＡ配列を、前記実施例１に記載されたように、ＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐを用い、他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここではＤＮＡ３５７０２と命名される。ＤＮＡ３５７０２コンセンサス配列に基づいて、オリゴヌクレオチドを合成して：１）興味のある配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ３５５についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。

順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは以下のように合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＧＧＣＴＴＣＴＧＣＴＧＴＴＧＣＴＣＴＴＣＴＣＣＧ−３’（配列番号：１００）
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＧＴＡＣＡＣＴＧＴＧＡＣＣＡＧＴＣＡＧＣ−３’（配列番号：１０１）
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＡＴＣＡＴＣＡＣＡＧＡＴＴＣＣＣＧＡＧＣ−３’（配列番号：１０２）
逆方向ＰＣＲプライマー５’−ＴＴＣＡＡＴＣＴＣＣＴＣＡＣＣＴＴＣＣＡＣＣＧＣ−３’（配列番号：１０３）
逆方向ＰＣＲプライマー５’−ＡＴＡＧＣＴＧＴＧＴＣＴＧＣＧＴＣＴＧＣＴＧＣＧ−３’（配列番号：１０４）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ３５７０２配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＧＣＧＧＣＡＣＴＧＡＴＣＣＣＣＡＣＡＧＧＴＧＡＴＧＧＧＣＡＧＡＡＴＣＴＧＴＴＴＡＣＧＡＡＡＧＡＣＧ−３’（配列番号：１０５）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対の１つでＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドを用いて、ＰＲＯ３５５遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児肝臓組織から単離した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ３５５についての全長ＤＮＡ配列［ここでは、ＤＮＡ３９５１８−１２４７と命名］（配列番号：１３）およびＰＲＯ３５５についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＤＮＡ３９５１８−１２４７の全ヌクレオチド配列は図１３に示す（配列番号：１３）。クローンＤＮＡ３９５１８−１２４７は、ヌクレオチド位置２２ないし２４における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置１３４２ないし１３４４の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する（図１３）。予測されるポリペプチド前駆体は４４０アミノ酸の長さである（図１４；配列番号：１４）。図１４に示された全長ＰＲＯ３５５タンパク質は、約４８，２４０ダルトンの見積もられた分子量および約４．９３のｐＩを有する。加えて、シグナルペプチドを含めた注目する領域、細胞外ドメインにおけるＩｇ反復、潜在的Ｎ−グリコシル化部位、および潜在的膜貫通ドメインは図１４に示す。クローンＤＮＡ３９５１８−１２４７は、１９９７年１２月１０日にＡＴＣＣに寄託されＡＴＣＣ受託番号ＡＴＣＣ２０９５２９が割り当てられている。

全長ＰＲＯ３５５ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それの部分が、ＣＲＴＡＭタンパク質に対して有意な相同性を保有することを示唆し、それにより、ＰＲＯ３５５がＣＲＴＡＭタンパク質であり得ることを示す。
実施例１１：ヒトＰＲＯ５３３ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ３４４］
ＥＳＴ配列受託番号ＡＦ００７２６８、マウス線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ−１５）を用いて、種々の公のＥＳＴデータベース（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ、Ｄａｙｈｏｆｆなど）をサーチした。該サーチは、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳に対するＥＣＤタンパク質配列の比較として、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を用いて行った。サーチの結果、ＧｅｎｂａｎｋＥＳＴＡＡ２２０９９４がヒットし、それは、ＳｔｒａｔａｇｅｎｅＮＴ２ニューロン前駆体９３７２３０として確認された。

ＧｅｎｂａｎｋＥＳＴＡＡ２２０９９４配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）全長コーディング配列のクローンを単離するためにプローブとして用いた。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは２０ないし３０ヌクレオチドの範囲となることができ（典型的には約２４）、長さが１００ないし１０００ｂｐのＰＣＲ産物を与えるように設計される。プローブの配列は典型的には長さが４０ないし５５ｂｐ（典型的には、約５０）である。全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、ＰＣＲプライマー対にて、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙに従い、ＰＣＲ増幅によってスクリーングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、注目する遺伝子をコードするクローンを単離した。

全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、後に同定されるＰＣＲプライマーでＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ５３３遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡはヒト胎児網膜から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するのに用いたｃＤＮＡライブラリーは、商業的に入手可能な試薬（例えば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ；Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，等）を用い、標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターへ平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適当なサイズとし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１））に規定された向きでクローン化した。

ｃＤＮＡクローンをその全部を配列決定した。ＰＲＯ５３３の全長ヌクレオチド配列を図１５に示す（配列番号：１５）。クローンＤＮＡ４９４３５−１２１９は、ヌクレオチド位置４５９ないし４６１の見かけの翻訳開始部位を持つ単一のオープンリーディングフレームを含有する（図１５；配列番号：１５）。予測されるポリペプチド前駆体は２１６アミノ酸の長さである（図１６；配列番号：１６）。クローンＤＮＡ４９４３５−１２１９は１９９７年１１月２１日にＡＴＣＣに寄託し、ＡＴＣＣ受託番号ＡＴＣＣ２０９４８０が割り当てられている。

全長配列のＢＬＡＳＴ−２およびＦａｓｔＡ配列整列分析に基づき、ＰＲＯ５３３は線維芽細胞成長因子に対してアミノ酸配列同一性を示す（５３％）。
前記手法で用いたオリゴヌクレオチド配列は以下のものであった：
ＦＧＦ１５順方向：５’−ＡＴＣＣＧＣＣＣＡＧＡＴＧＧＣＴＡＣＡＡＴＧＴＧＴＡ−３’（配列番号：１０６）；
ＦＧＦ１５プローブ：５’−ＧＣＣＴＣＣＣＧＧＴＣＴＣＣＣＴＧＡＧＣＡＧＴＧＣＣＡＡＡＣＡＧＣＧＧＣＡＧＴＧＴＡ−３’（配列番号：１０７）；
ＦＧＦ１５逆方向：５’−ＣＣＡＧＴＣＣＧＧＴＧＡＣＡＡＧＣＣＣＡＡＡ−３’（配列番号：１０８）；
実施例１２：ヒトＰＲＯ５４１ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ３４２］
コンセンサス配列は前記実施例１に記載したように種々のＥＳＴ配列に対して得られ、ここに、得られたコンセンサス配列はＤＮＡ４２２５９と命名される。ＤＮＡ４２２５９コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ５４１についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＧＧＡＣＡＧＡＡＴＴＴＧＧＧＡＧＣＡＣＡＣＴＧＧ−３’（配列番号：１０９）
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＣＣＡＡＧＡＧＴＡＴＡＣＴＧＴＣＣＴＣＧ−３’（配列番号：１１０）
逆方向ＰＣＲプライマー５’−ＡＧＣＡＣＡＧＡＴＴＴＴＣＴＣＴＡＣＡＧＣＣＣＣＣ−３’（配列番号：１１１）
逆方向ＰＣＲプライマー５’−ＡＡＣＣＡＣＴＣＣＡＧＣＡＴＧＴＡＣＴＧＣＴＧＣ−３’（配列番号：１１２）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ４２２５９配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＣＡＴＴＣＡＧＧＴＧＴＴＣＴＧＧＣＣＣＴＧＴＡＴＧＴＡＣＡＣＡＴＴＡＴＡＣＡＣＡＧＧＴＣＧＴＧＴＧ−３’（配列番号：１１３）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対の１つでのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ５４１遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児腎臓組織（ＬＩＢ２２７）から単離した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ５４１についての全長ＤＮＡ配列［ここでは、ＵＮＱ３４２（ＤＮＡ４５４１７−１４３２）と命名］（配列番号：１７）およびＰＲＯ５４１についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＵＮＱ３４２（ＤＮＡ４５４１７−１４３２）の全ヌクレオチド配列は図１７に示す（配列番号：１７）。クローンＵＮＱ３４２（ＤＮＡ４５４１７−１４３２）は、ヌクレオチド位置４６９ないし４７１において見かけの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置１９６９ないし１９７１の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する（図１７）。予測されるポリペプチド前駆体は５００アミノ酸の長さである（図１８）。図１８に示された全長ＰＲＯ５４１タンパク質は約５６，８８８ダルトンの見積もられた分子量および約８．５３のｐＩを有する。図１８に示された全長ＰＲＯ５４１配列（配列番号：１８）の分析は以下の存在を証明する：約アミノ酸１ないし約アミノ酸２０のシグナルペプチド、約アミノ酸１６５ないし約アミノ酸１８６、約アミノ酸１９６ないし約アミノ酸２１８、約アミノ酸１３４ないし約アミノ酸１４６、約アミノ酸９６ないし約アミノ酸１０８、および約アミノ酸５８ないし約アミノ酸７７の、細胞外タンパク質ＳＣＰ／Ｔｐｘ−１／Ａｇ５／ＰＲ１／Ｓｃ７に対して相同性を有するアミノ酸配列ブロック、および約アミノ酸２８ないし約アミノ酸３１の潜在的Ｎ−グリコシル化部位。クローンＵＮＱ３４２（ＤＮＡ４５４１７−１４３２）は１９９８年５月２７日にＡＴＣＣに寄託されており、ＡＴＣＣ受託番号２０９９１０が割り当てられている。

全長ＰＲＯ５４１ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それが、トリプシン阻害剤タンパク質に対して有意な配列同様性を保有することを示唆し、それにより、ＰＲＯ５４１が新規なトリプシン阻害剤であり得ることが示される。より詳しくは、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ５４１アミノ酸配列、および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列、Ｄ４５０２７１、ＡＢ００９６０９１、ＪＣ５３０８、ＣＲＳ３ＨＯＲＳＥ、ＴＰＸ１ＨＵＭＡＮ、ＨＥＬＯＨＥＬＨＯ、ＧＥＮ１４３５１、Ａ２８１１２１、ＣＥＴ０５Ａ１０４およびＰＷ１１４８５の間の有意な相同性を証明した。
実施例１３：ヒトＰＲＯ７２５ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ３９０］
コンセンサス配列は、前記実施例１に記載されたように種々のＥＳＴ配列に対して得られた。このコンセンサス配列、およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号４２４２０９０内に含まれるＥＳＴ配列の間の観察された相同性に基づき、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号４２４２０９０は購入し、そのインサートを入手し、配列決定した。

前記実施例２に記載されたアミラーゼスクリーニングで単離されたｃＤＮＡ配列はここではＤＮＡ４３３０１と命名する。次いで、ＤＮＡ４３３０１配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ）および私的なＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較した。相同性サーチは、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較をクラスター化し、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）を用いてコンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列はここではＤＮＡ４５４５８と命名する。ＤＮＡ４５４５８コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドプローブを作成し、それを用いて、前記実施例２のパラグラブ１に記載されたように調製されたヒト胎児脳（ＬＩＢ１５３）ライブラリーをスクリーニングした。クローニングベクターはｐＲＫ５Ｂ（ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１））であり、ｃＤＮＡサイズカットは２８００ｂｐ未満であった。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー（４５４５８．ｆ１）５’−ＣＣＡＡＡＣＴＣＡＣＣＣＡＧＴＧＡＧＴＧＴＧＡＧＣ−３’（配列番号：１１４）
逆方向ＰＣＲプライマー（４５４５８．ｒ１）５’−ＴＧＧＧＡＡＡＴＣＡＧＧＡＡＴＧＧＴＧＴＴＣＴＣＣ−３’（配列番号：１１５）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ４５４５８配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ（４５４５８．ｐ１）
５’−ＣＴＴＧＴＴＴＴＣＡＣＣＡＴＴＧＧＧＣＴＡＡＣＴＴＴＧＣＴＧＣＴＡＧＧＡＧＴＴＣＡＡＧＣＣＡＴＧＣＣ−３’（配列番号：１１６）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、前記で隔離されるＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ７２５遺伝子をコードするクローンを単離した。

ヌクレオチド位置１６１ないし１６３において見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置４５５ないし４５７で見出される停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する全長クローン（ここでは、ＤＮＡ５２７５８−１３９９として確認される）が同定された（図１９；配列番号：１９）。予測されたポリペプチド前駆体は９８アミノ酸の長さであり、ほぼ１１，０８１ダルトンの計算された分子量およびほぼ６．６８の見積もられたｐＩを有する（図２０；配列番号：２０）。図２０に示された全長ＰＲＯ７２５配列（配列番号：２０）の分析は以下のものの存在を証明する：約アミノ酸１ないし約アミノ酸２０のシグナルペプチド、約アミノ酸７２ないし約アミノ酸７５の潜在的Ｎ−グリコシル化部位、および約アミノ酸６３ないし約アミノ酸７０のチロシンキナーゼリン酸化部位。クローンＤＮＡ５２７５８−１３９９は１９９８年４月１４日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０９７７３が割り当てられている。

全長ＰＲＯ７２５ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それがいずれかの公知のタンパク質に対して有意な配列同様性を保有しないことを示唆する。しかしながら、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ７２５アミノ酸配列、および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列、ＰＯＬＢＬＶＡＵ、ＰＳＳＰ＿ＲＡＴ、ＣＥＬＣ３６Ｃ５７、ＡＦ０１９２３４１、Ｉ４８８６２、ＰＲ１２４９８、ＰＰ１０１２５、ＰＲ２６８６１、Ａ６４５２７およびＰＷ２０４９５の間のある程度の相同性を証明した。
実施例１４：ヒトＰＲＯ９３７ポリペプドをコードするｃＤＮＡの単離［ＵＮＱ４７４］
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔの公のタンパク質データベースからの約９５０の公知の分泌タンパク質の（もしあれば、分泌シグナルを含めた）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列を用いて、発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースをサーチした。ＥＳＴデータベースは公のＥＳＴデータベース（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ）および所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含むものであった。サーチは、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳に対するＥＣＤタンパク質配列の比較として、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。

コンセンサスＤＮＡ配列は、潜在的分泌タンパク質をコードするものとして、前記した分析を用いて同定された。この配列はここではＤＮＡ４９６５１．ｉｎｉｔと命名される。加えて、次いで、反復されたサイクルのＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐを用いて拡大して、前記したＥＳＴ配列の源を用いてできる限り配列を拡大した。拡大された組立配列をここでは「ＤＮＡ４９６５１」という。

ＤＮＡ４９６５１コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ９３７についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般には、２０ないし３０ヌクレオチドの範囲であり、しばしば、長さが約１００ないし１０００ｂｐのＰＣＲ産物を与えるように設計する。プローブ配列は、典型的には、長さが４０ないし５５ｂｐである。いくつかの場合において、コンセンサス配列が約１ないし１．５ｋｂｐよりも大きな場合、追加のオリゴヌクレオチドを合成する。全長クローンについてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、ＰＣＲプライマー組にて、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙに従い、ＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の１つを用い、注目する遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー（４９６５１．ｆ１）５’−ＣＴＣＣＧＴＧＧＴＡＡＡＣＣＣＣＡＣＡＧＣＣＣ−３’（配列番号：１１７）および
逆方向ＰＣＲプライマー（４９６５１．ｒ１）５’−ＴＣＡＣＡＴＣＧＡＴＧＧＧＡＴＣＣＡＴＧＡＣＣＧ−３’（配列番号：１１８）。
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するＤＮＡ４８６５１配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ（４９６５１．ｐ１）
５’−ＧＧＴＣＴＣＧＴＧＡＣＴＧＴＧＡＡＧＣＣＡＴＧＴＴＡＣＡＡＣＴＡＣＴＧＣＴＣＡＡＡＣＡＴＣＡＴＧＡＧ−３’（配列番号：１１９）。

全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、前記で確認されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ９３７遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児腎臓組織（ＬＩＢ２２７）から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するのに用いたｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡからのような商業的に入手可能な試薬を用いて標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターへ平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適切なサイズとし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ２５３：１２７８−１２８０（１９９１））に規定された向きでクローン化した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ９３７についての全長ＤＮＡ配列［ここでは、ＵＮＱ４７４（ＤＮＡ５６４３６−１４４８）と命名］（配列番号：２１）、およびＰＲＯ９３７についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＵＮＱ４７４（ＤＮＡ５６４３６−１４４８）の全ヌクレオチド配列は図２１に示す（配列番号：２１）。それはヌクレオチド位置４９９ないし５０１における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置２１６７ないし２１６９で見出される停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する（図２１；配列番号：２１）。予測されるポリペプチド前駆体は５５６アミノ酸の長さである、ほぼ６２，４１２ダルトンの計算された分子量、およびほぼ６．６２の見積もられたｐＩを有する。図２２に示される全長ＰＲＯ９３７配列（配列番号：２２）の分析は以下の特徴の存在を証明する：約アミノ酸１ないし２２におけるシグナルペプチド；約アミノ酸５１５ないし５２３におけるＡＴＰ／ＧＴＰ−結合部位モチーフＡ（Ｐ−ループ）；約アミノ酸５１４ないし５１７における潜在的Ｎ−グリコシル化部位；約アミノ酸５４ないし７４、１０６ないし１５６、２３８ないし２７９、３０９ないし３４５、４２３ないし４５９、および４６８ないし５０５におけるグリピカン相同性の部位。

クローンＵＮＱ４７４（ＤＮＡ５６４３６−１４４８）は１９９８年５月２７日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０９９０２が割り当てられている。

全長ＰＲＯ９３７ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それが、グリピカンタンパク質に対して有意な配列同様性を保有することを示唆し、それにより、ＰＲＯ９３７は新規なグリピカンタンパク質であり得ることが示される。さらに詳しくは、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ９３７アミノ酸配列、および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＧＰＣＫＭＯＵＳＥ、ＧＰＣ２ＲＡＴ、ＧＰＣ５ＨＵＭＡＮ、ＧＰＣ３ＨＵＭＡＮ、ＰＲ３０１６８、ＣＥＣ０３Ｈ１２２、ＧＥＮ１３８２０、ＨＳ１１９Ｅ２３１、ＨＤＡＣＤＲＯＭＥ、およびＡＦ０１７６３７１の間の有意な相同性を証明した。
実施例１５：ヒトＰＲＯ１０１４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ４９７］
コンセンサスＤＮＡ配列を、前記実施例１に記載したようにｐｈｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立て、ここに、得られたコンセンサス配列はＤＮＡ４９８１１と命名される。ＤＮＡ４９８１１配列およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２６１２２０７の間の観察された相同性に基づき、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２６１２２０７を購入し、そのインサートを入手し、配列決定し、ここに、得られた配列は図２３に示す（配列番号：２３）。

ＤＮＡ配列決定はＰＲＯ１０１４についての全長ＤＮＡ配列［ここでは、ＵＮＱ４９７（ＤＮＡ５６４０９−１３７７）と命名］（配列番号：２３）およびＰＲＯ１０１４についての導かれるタンパク質配列を与えた。

ＵＮＱ４９７（ＤＮＡ５６４０９−１３７７）の全ヌクレオチド配列は図２３に示す（配列番号：２３）。クローンＵＮＱ４９７（ＤＮＡ５６４０９−１３７７）は、ヌクレオチド位置６６ないし６８における見掛けの翻訳開始部位を持ち、ヌクレオチド位置９６６ないし９６８における停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する（図２３）。予測されるポリペプチド前駆体は３００アミノ酸の長さである（図２４；配列番号：２４）。図２４に示された全長ＰＲＯ１０１４タンパク質は約３３，６５５ダルトンの見積もられた分子量、および約９．３１のｐＩを有する。クローンＵＮＱ４９７（ＤＮＡ５６４０９−１３７７）は１９９８年５月２０日にＡＴＣＣに寄託され、受託番号２０９８８２を有する。配列に関しては、寄託されたクローンは正しい配列を含み、ここで提供される配列は公知の配列決定技術に基づくと理解される。

全長ＰＲＯ１０１４ポリペプチドのアミノ酸配列の分析は、それがレダクターゼに対して配列同一性を保有することを示唆し、それにより、ＰＲＯ１０１４がレダクターゼファミリーの新規なメンバーであり得ることを示す。

配列番号：２４のアミノ酸配列をさらに分析すると、推定シグナルペプチドは配列番号：２４の約アミノ酸１ないし１９である。ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ依存性プロテインキナーゼリン酸化部位は配列番号：２４の約アミノ酸３０ないし３３および５８ないし６１である。短い鎖のアルコールデヒドロゲナーゼファミリータンパク質は配列番号：２４の約アミノ酸１６５ないし２０２、３７ないし４９、１１２ないし１２２、および２１０ないし２１９である。これらのドメインおよび本明細書中で提供されるいずれかの他のアミノ酸の対応するヌクレオチドは、本明細書中に提供される配列を仮定すれば、ルーチン的に決定することができる。
実施例１６：ヒトＰＲＯ１１２０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ５５９］
コンセンサスＤＮＡ配列は、前記実施例１に記載されたようにｐｈｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここではｃｏｎｓｅｎ０３５２と命名される。次いで、ｃｏｎｓｅｎ０３５２配列は、反復されたサイクルのＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐを用いて拡大して、前記したＥＳＴ配列の源をできる限り用いてコンセンサス配列まで拡大した。拡大されたコンセンサス配列はここではＤＮＡ３４３６５と命名される。ＤＮＡ３４３６５コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ１１２０についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー：５’−ＧＡＡＧＣＣＧＧＣＴＧＴＣＴＧＡＡＴＣ−３’（配列番号：１２０）、５’−ＧＧＣＣＡＧＣＴＡＴＣＴＣＣＧＣＡＧ−３’（配列番号：１２１）、５’−ＡＡＧＧＧＣＣＴＧＣＡＡＧＡＧＡＡＧ−３’（配列番号：１２２）、５’−ＣＡＣＴＧＧＧＡＣＡＡＣＴＧＴＧＧＧ−３’（配列番号：１２３）、５’−ＣＡＧＡＧＧＣＡＡＣＧＴＧＧＡＧＡＧ−３’（配列番号：１２４）、および５’−ＡＡＧＴＡＴＴＧＴＣＡＴＡＣＡＧＴＧＴＴＣ−３’（配列番号：１２５）；
逆方向ＰＣＲプライマー：５’−ＴＡＧＴＡＣＴＴＧＧＧＣＡＣＧＡＧＧＴＴＧＧＡＧ−３’（配列番号：１２６）、および５’−ＴＣＡＴＡＣＣＡＡＣＴＧＣＴＧＧＴＣＡＴＴＧＧＣ−３’（配列番号：１２７）。

加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するＲＮＡ３４３６５コンセンサス配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ：
５’−ＣＴＣＡＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＣＧＧＡＧＣＧＧＣＣＧＧＴＧＡＡＴＣＧＧＴＴＴＣＡＣＴＴＧ−３’（配列番号：１２８）。

全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、前記で確認されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＣＲ１１２０遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト胎児腎臓組織から単離した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ１１２０についての全長ＤＮＡ配列（ここではＤＮＡ４８６０６−１４７９と命名）［図２５，配列番号：２５］；ＰＲＯ１１２０についての誘導されたタンパク質配列を与えた。

ＰＲＯ１１２０の全コーディング配列は図２５に示される（配列番号：２５）。クローンＤＮＡ４８６０６−１４７９は、ヌクレオチド位置６０８ないし６１０における見掛けの翻訳開始部位、およびヌクレオチド位置３２０９ないし３２１１における見掛けの停止コドンを持つ単一のオープンリーディングフレームを含む。予測されるポリペプチド前駆体は８６７アミノ酸の長さである。図２６に示された全長ＰＲＯ１１２０タンパク質（配列番号：２６）は約１００，１５６ダルトンの見積もられた分子量および約９．４４のｐＩを有する。ＰＲＯ１１２０ポリペプチドのさらなる特徴は約アミノ酸１ないし１７におけるシグナルペプチド；約アミノ酸８６ないし９８におけるスルファターゼシグニチャー；約アミノ酸８７ないし１０６、１３３ないし１４６、２１６ないし２２９、２９１ないし３２０、および３６５ないし３７５におけるスルファターゼに対する相同性の領域；および約アミノ酸６５ないし６８、１１２ないし１１５、１３２ないし１３５、１４９ないし１５２、１７１ないし１７４、１９８ないし２０１、２４１ないし２４５、５６１ないし５６４、６０８ないし６１１、７１７ないし７２０、７５４ないし７５７、７６４ないし７６７における潜在的Ｎ−グリコシル化部位を含む。

図２６に示される全長配列（配列番号：２６）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２配列整列分析を用いるＤａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１１２０アミノ酸配列、および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＥＬＫ０９Ｃ４１、ＧＬ６ＳＨＵＭＡＮ、Ｇ６５１６９、ＮＣＵ８９４９２１、ＢＣＵ４４８５２１、Ｅ６４９０３、ＰＲ５１３５５、ＳＴＳＨＵＭＡＮ、ＧＡ６ＳＨＵＭＡＮ、およびＩＤＳＭＯＵＳの間の有意な相同性を明らかにした。クローンＤＮＡ４８６０６−１４７９は１９９８年７月１日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３０４０が割り当てられている。
実施例１７：ヒトＰＲＯ１１８２ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ５９６］
前記実施例３に記載されたシグナル配列アルゴリズムの使用は、ここでは１４６６４７と命名されたＩｎｃｙｔｅデータベースからの単一ＥＳＴクラスター配列の同定を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）で、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列をここではＤＮＡ５６０３３と命名する。

ＤＮＡ５６０３３コンセンサス配列、およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２５９５１９５内に含まれるＥＳＴ配列の間の観察された配列相同性に徴して、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２５９５１９５は購入し、ｃＤＮＡインサートが得られ、配列決定した。このインサートは全長タンパク質をコードすることが判明した。図２７に示されるｃＤＮＡインサートの配列はここではＤＮＡ５９８４８−１５１２と命名される。

クローンＤＮＡ５９８４８−１５１２は、ヌクレオチド位置６７ないし６９における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置８８０ないし８８２の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含む（図２７；配列番号：２７）。予測されるポリペプチド前駆体は２７１アミノ酸の長さである（図２８；配列番号：２８）。図２８に示される全長ＰＲＯ１１８２タンパク質は約２８，６６５ダルトンの見積もられた分子量、および約５．３３のｐＩを有する。図２８に示される全長ＰＲＯ１１８２配列（配列番号：２８）の分析は、以下の存在を証明する：約アミノ酸１ないし約アミノ酸２５のシグナルペプチド、約アミノ酸２４７ないし約アミノ酸２５６のＣ−型レクチンドメインタンパク質に対する相同性を有するアミノ酸ブロック、および約アミノ酸４４ないし約アミノ酸７７のＣ１ｑドメインタンパク質に対して相同性を有するアミノ酸配列ブロック。クローンＤＮＡ５９８４８−１５１２は１９９８年８月４日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３０８８が割り当てられている。

図２８に示される全長配列（配列番号：２８）のＷＵＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３４．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１１８２アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＰＳＰＤＢＯＶＩＮ、ＣＬ４３ＢＯＶＩＮ、ＣＯＮＧＢＯＶＩＮ、ＰＷ１８７８０、ＰＲ４５００５、ＰＲ５３２５７およびＣＥＬＥＧＡＰ７１の間の有意な相同性を証明した。
実施例１８：ヒトＰＲＯ１３２５ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＯ６８５］
前記実施例３に記載されたシグナル配列アルゴリズムの使用は、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクラスター配列番号１３９５２４と命名される、ＩｎｃｙｔｅデータベースからのＥＳＴクラスター配列の同定を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）で、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列をここではＤＮＡ５６１１５と命名する。

ＤＮＡ５６１１５配列、およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号３７４４０７９内に含まれるＥＳＴ配列の間の配列相同性に徴し、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号３７４４０７９を購入し、ｃＤＮＡインサートを入手し、配列決定した。このｃＤＮＡインサートの配列を図２９に示し、ここではＤＮＡ６６６５９−１５９３と命名する。

クローンＤＮＡ６６６５９−１５９３は、ヌクレオチド位置５１ないし５３における見かけの翻訳開始部位を持ち、ヌクレオチド位置２５４７ないし２５４９の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含む（図２９；配列番号：２９）。予測されるポリペプチド前駆体は８３２アミノ酸の長さである（図３０）。図３０に示された全長ＰＲＯ１３２５タンパク質は約９４，４５４ダルトンの見積もられた分子量および約６．９４のｐＩを有する。図３０に示された全長ＰＲＯ１３２５配列（配列番号：３０）の分析は、以下のものの存在を証明する：約アミノ酸１ないし約アミノ酸１８のシグナルペプチド、約アミノ酸２９２ないし約アミノ酸３１７、約アミノ酸４５１ないし約アミノ酸４７０、約アミノ酸５０１ないし約アミノ酸５２０、約アミノ酸６０７ないし約アミノ酸６２７、約アミノ酸７５１ないし約アミノ酸７７０の膜貫通ドメイン、約アミノ酸４９７ないし約アミノ酸５１８のロイシンジッパーパターン配列、および約アミノ酸２７ないし約アミノ酸３０、約アミノ酸５４ないし約アミノ酸５７、約アミノ酸６０ないし約アミノ酸６３、約アミノ酸位置１２３ないし約アミノ酸位置１２６、約アミノ酸位置１４１ないし約アミノ酸位置１４４、約アミノ酸位置１６５ないし約アミノ酸位置１６８、約アミノ酸位置３６４ないし約アミノ酸位置３６７、約アミノ酸位置４７６ないし約アミノ酸位置４７９、約アミノ酸位置４９６ないし約アミノ酸位置４９９、約アミノ酸位置５７２ないし約アミノ酸位置５７５、約アミノ酸位置６０３ないし約アミノ酸位置６０６、約アミノ酸位置６９９ないし約アミノ酸位置７０２の潜在的Ｎ−グリコシル化部位。クローンＤＮＡ６６６５９−１５９３は１９９８年９月２２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３２６９が割り当てられている。

図３０に示された全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１３２５アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＥＬＲ０４Ｅ５＿１、ＣＥＬＺＫ７２１＿５、ＣＥＬＣ３０Ｅ１＿５、ＣＥＬＣ３０Ｅ１＿６、ＣＥＬＣ３０Ｅ１＿２、ＣＥＹ３７Ｈ２Ｃ＿１、ＣＥＬＣ３０Ｅ１＿７、ＣＥＬＴ０７Ｈ８＿７およびＥ６４００６の間の有意な相同性を証明した。
実施例１９：ヒトＰＲＯ１３８２ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ７１８］
前記実施例に記載された方法を用い、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴ番号２７１９を、公知のタンパク質をコードしない７０以上のＢＬＡＳＴスコアを有する注目する配列として同定した。ＥＳＴ番号２７１９のヌクレオチド配列をここでは［ＤＮＡ４２８４２］と命名する。ＤＮＡ４２８４２配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ１３８２についての全長コーディング配列のクローンを同定するためのプローブとして用いた。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマーＡＣＧＧＣＴＣＡＣＣＡＴＧＧＧＣＴＣＣＧ（４２８４２．ｆ１；配列番号：１２９）
逆方向ＰＣＲプライマーＡＧＧＡＡＧＡＧＧＡＧＣＣＣＴＴＧＧＡＧＴＣＣＧ（４２８４２．ｒ１；配列番号：１３０）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブを、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ４２８４２配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブＣＧＴＧＣＴＧＧＡＧＧＧＣＡＡＧＴＧＴＣＴＧＧＴＧＧＴＧＴＧＣＧＡＣＴＣＧＡＡＣ（４２８４２．ｐ１；配列番号：１３１）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、前記で同定されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ１３８２遺伝子をコードするクローンを単離した。ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡはヒト乳癌腫から単離した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ１３８２についての全長ＤＮＡ配列（ここではＤＮＡ６６５２６−１６１６と命名）［図３１、配列番号：３１］；およびＰＲＯ１３８２についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＰＲＯ１３８２の全コーディング配列は図３１に示される（配列番号：３１）。クローンＤＮＡ６６５２６−１６１６は、ヌクレオチド位置３３７ないし３３９における見掛けの翻訳開始部位、およびヌクレオチド位置９４０ないし９４２の見掛けの停止コドンを持つ単一のオープンリーディングフレームを含む。予測されるポリペプチド前駆体は２０１アミノ酸の長さである。図３２に示された全長ＰＲＯ１３８２（配列番号：３２）は約２１，８０８ダルトンの見積もられた分子量、および約９．０４のｐＩを有する。さらなる特徴は約アミノ酸１ないし２７のシグナルペプチド；約アミノ酸２９ないし３２および８８ないし９１の潜在的Ｎ−グリコシル化部位；および約アミノ酸９２ないし１２６、１５９ないし１７８、および１９１ないし２００におけるＣ１ｑタンパク質に対する相同性の領域を含む。

図３２に示される全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１３８２アミノ酸配列およびＤａｙｈｏｆｆ配列番号ＣＥＲＬＲＡＴの間の有意な相同性を明らかにした。また、相同性は、ＰＲＯ１３８２アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＥＲＢ＿ＨＵＭＡＮ、Ｓ７６９７５＿１、Ａ４１７５２、ＨＵＭＣ１ＱＢ２＿１、Ａ５７１３１、ＣＡ１Ａ＿ＨＵＭＡＮ、ＡＣＲ３＿ＭＯＵＳＥ、およびＣＯＬＥ＿ＬＥＰＭＡの間で明らかとされた。

クローンＤＮＡ６６５２６−１６１６は１９９８年９月９日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３２４６が割り当てられた。
実施例２０：ヒトＰＲＯ１４１０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ７２８］
前記実施例３に記載されたシグナル配列アルゴリズムの使用は、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクラスター配列番号９８５０２と命名された、ＩｎｃｙｔｅデータベースからのＥＳＴクラスター配列の同定を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）で、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列をここではＤＮＡ５６４５１と命名する。

ＤＮＡ５６４５１配列およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号１２５７０４６内に含まれるＥＳＴ配列の間の配列相同性に徴して、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号１２５０４６を購入し、ｃＤＮＡインサートが得られ、配列決定した。このｃＤＮＡインサートの配列を図３３に示し、ここではＤＮＡ６８８７４−１６２２と命名する。

クローンＤＮＡ６８８７４−１６２２は、ヌクレオチド位置１５２ないし１５４における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置８６６ないし８６８の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含む（図３３；配列番号：３３）。予測されるポリペプチド前駆体は２３８アミノ酸の長さである（図３４）。図３４に示された全長ＰＲＯ１４１０タンパク質は約２５，２６２ダルトンの見積もられた分子量、および約６．４４のｐＩを有する。図３４に示された全長ＰＲＯ１４１０配列（配列番号：３４）の分析は、以下の存在を証明する：約アミノ酸１ないし２０のシグナルペプチド、約アミノ酸１９４ないし約アミノ酸２２０の膜貫通ドメイン、および約アミノ酸１３２ないし約アミノ酸１３５の潜在的Ｎ−グリコシル化部位。クローンＤＮＡ６８８７４−１６２２は１９９８年９月２２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３２７７が割り当てられている。

図３４に示された全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１４１０アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｉ４８６５２、Ｐ＿Ｒ７６４６６、ＨＳＭＨＣ３Ｗ３６Ａ＿２、ＥＰＢ４＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｒ１４２５６、ＥＰＡ８＿ＭＯＵＳＥ、Ｐ＿Ｒ７７２８５、Ｐ＿Ｗ１３５６９、ＡＦ０００５６０＿１、およびＡＳＦ１＿ＨＥＬＡＮの間の有意な相同性を証明した。
実施例２１：ヒトＰＲＯ１５５５ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ７６３］
前記実施例３に記載されたシグナル配列アルゴリズムの使用は、ここでは［ＤＮＡ１０３１６］とも言われる、ＥＳＴクラスター番号５２１と命名される、ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）データベースからのＥＳＴクラスター配列の同定を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）およびＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）で、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列をここでは「ＤＮＡ５６３７４」と命名する。

ＤＮＡ５６３７４配列およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴ番号２８５５７６９内に含まれるＥＳＴ配列の間の配列相同性に徴して、ＥＳＴ番号２８５５７６９を購入し、ｃＤＮＡインサートを入手し、配列決定した。ＥＳＴ番号２８５５７６９は雌乳房脂肪組織から構築されたライブラリーに由来した。このｃＤＮＡインサートの配列を図３５に示し、ここではＤＮＡ７３７４４−１６６５と命名する。

図３５に示される全長クローンは、ヌクレオチド位置９０ないし９２における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置８２８ないし８３０で見出される停止コドンで終わる単一のオープンリーディングフレームを含有した（図３５；配列番号：３５）。予測されるポリペプチド前駆体（図３６、配列番号：３６）は２４６アミノ酸の長さである。ＰＲＯ１５５５はほぼ２６，２６１ダルトンの計算された分子量およびほぼ５．６５の見積もられたｐＩを有する。さらなる特徴は：約アミノ酸１ないし３１におけるシグナルペプチド；約アミノ酸１１ないし３１、および１９５ないし２１７における膜貫通ドメイン；約アミノ酸１１１ないし１１４における潜在的Ｎ−グリコシル化部位；約アミノ酸２ないし５、９８ないし１０１、および１９１ないし１９４における潜在的カゼインキナーゼＩＩリン酸化部位；および約アミノ酸１４６ないし１５１、および１９２ないし１９７における潜在的Ｎ−ミリストイル化部位を含む。

図３６に示される全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１５５５アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＹＫＡ４＿ＣＡＥＥＬ、ＡＢ０１４５４１＿１、ＨＶＳＸ９９５１８＿２、ＳＳＵ６３０１９＿１、ＧＥＮ１４２８６、ＭＭＵ６８２６７＿１、ＸＰ２＿ＸＥＮＬＡ、ＩＣＰ４＿ＨＳＶ１１、Ｐ＿Ｗ４０２００、およびＡＥ００１３６０＿１の間のいくらかの相同性を明らかとした。

クローンＤＮＡ７３７４４−１６６５は１９９８年１０月６日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３３２２が割り当てられている。
実施例２２：ヒトＰＲＯ１５５６ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ７６４］
前記実施例３に記載されたシグナル配列アルゴリズムの使用は、ここでは「ＤＮＡ１０３９８」とも言われる、ＥＳＴクラスター番号１０３１５８と命名される、ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）データベースからのＥＳＴクラスター配列の同定を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）およびＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータプログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）で、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列をここではＤＮＡ５６４１７と命名する。

ＤＮＡ５６４１７配列、およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴ番号９５９３３２の間の配列相同性に徴して、ＥＳＴ番号９５９３３２を購入し、ｃＤＮＡインサートが得られ、配列決定した。このｃＤＮＡインサートの配列は図３７に示され、ここではＤＮＡ７６５２９−１６６６と命名される。

図３７に示される全長クローンは、ヌクレオチド位置８５ないし８７における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置８９２ないし８９４で見出される停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含有する（図３７；配列番号：３７）。予測されるポリペプチド前駆体（図３８、配列番号：３８）は２６９アミノ酸の長さである。ＰＲＯ１５５６はほぼ２８，００４ダルトンの計算された分子量、およびほぼ５．８０の見積もられたｐＩを有する。さらなる特徴は：約アミノ酸１ないし２４におけるシグナルペプチド配列；約アミノ酸１１ないし２５および２２６ないし２４３における膜貫通ドメイン；約アミノ酸１８２ないし１８５における潜在的Ｎ−グリコシル化部位；約アミノ酸７０ないし７３における潜在的ｃＡＭＰ−およびｃＧＭＰ−依存性プロテインキナーゼリン酸化部位；および約アミノ酸２９−３４、３５−３９、１１７−１２２、１２１−１２６、１２５−１３０、１５４−１５９、１６６−１７１、２４１−２４６、２４６−２５１、２４７−２５２、２４９−２５４、２５０−２５５、２５１−２５６、２５２−２５７、２５３−２５８、２５４−２５９、２５５−２６０、２５６−２６１、２５７−２６２、および２５９−２６４における潜在的Ｎ−ミリストイル化部位を含む。

図３８に示された全長配列（配列番号：３８）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１５５６アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｔ８Ｆ５＿４、Ｒ２３Ｂ＿ＭＯＵＳＥ、ＣＡＮＳ＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｗ４１６４０、ＤＳＵ５１０９１＿１、ＴＰ２Ｂ＿ＣＨＩＣＫ、ＤＶＵ２０６６０＿１、Ｓ４３２９６、Ｐ＿Ｒ２３９６２、およびＢＲＮ１＿ＨＵＭＡＮの間のいくらかの相同性を明らかにした。

クローンＤＮＡ７６５２９−１６６６は１９９８年１０月６日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３３１５が割り当てられている。
実施例２３：ヒトＰＲＯ１７６０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ８３３］
前記実施例３に記載されたシグナル配列アルゴリズムの使用は、ＩｎｃｙｔｅデータベースからのＥＳＴクラスター配列の同定を可能とした。次いで。このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、現存の相同性を同定した。ＥＳＴの１以上は前立腺腫瘍ライブラリーに由来した。相同性サーチはコンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られるコンセンサス配列をここではＤＮＡ５８７９８と命名する。

ＤＮＡ５８７９８配列およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴ３３５８７４５の間の配列相同性に徴して、このＥＳＴを含むクローンを購入し、ｃＤＮＡインサートが得られ、配列決定した。図３９に示されるこのｃＤＮＡインサートの配列をここではＤＮＡ７６５３２−１７０２と命名する。

図３９に示される全長クローンは、ヌクレオチド位置６０ないし６２における見掛けの翻訳停止部位をもち、かつ、ヌクレオチド位置６２４ないし６２６で見出される停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含んだ（図３９；配列番号：３９）。予測されるポリペプチド前駆体（図４０，配列番号：４０）は１８８アミノ酸の長さである。モチーフはさらに図４０に示される。ＰＲＯ１７６０はほぼ２１，０４２ダルトンの計算された分子量およびほぼ５．３６の見積もられたｐＩを有する。クローンＤＮＡ７６５３２−１７０２は１９９８年１１月１７日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３４７３が割り当てられている。

図４０に示された全長配列（配列番号：４０）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１７６０アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＣＥＬＴ０７Ｆ１２＿２、Ｔ２２Ｊ１８＿１６、ＡＴＦ１Ｃ１２＿３、ＡＰＥ３＿ＹＥＡＳＴ、Ｐ＿Ｗ２２４７１、ＳＡＵ５６９０８＿１、ＳＣＰＡ＿ＳＴＲＰＹ、ＡＴＡＣ００４２３８１７、ＳＡＰＵＲＣＬＵＳ＿２およびＡＦ０４１４６８＿９の間の配列同一性を明らかにした。
実施例２４：ヒトＰＲＯ１７８７ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ８４９］
コンセンサスＤＮＡ配列はｐｈｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立てて、前記実施例１に記載されたように、組立体を形成した。このコンセンサス配列はここでは「ＤＮＡ４５１２３」と命名される。該組立体で同定されるＩｎｃｙｔｅＥＳＴ３６１８５４９に対するＤＮＡ４５１２３の相同性、並びに本明細書中で提供する他の発見および情報に基づいて、このＥＳＴを含むクローンを購入し、配列決定した。該クローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ１７８７についての全長ＤＮＡ配列（ここでは、ＤＮＡ７６５１０−２５０４）およびＰＲＯ１７８７についての導かれるタンパク質配列を与えた。

ＤＮＡ７６５１０−２５０４の全コーディング配列は図４１に含まれる（配列番号：４１）。クローンＤＮＡ７６５１０−２５０４は、配列番号：４１のヌクレオチド配列１６３ないし１６５における見掛けの翻訳開始部位、およびヌクレオチド配列９７０ないし９７２における見掛けの停止コドンを含む。シグナルペプチド、膜貫通ドメイン、Ｌ−グリコシル化部位、Ｎ−ミリストイル化部位、およびキナーゼリン酸化部位の大まかな位置を図４２に示す（配列番号：４２）。予測されるポリペプチド前駆体は２６９アミノ酸の長さである。クローンＤＮＡ７６５１０−２５０４は１９９８年１１月１７日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３４７７が割当されている。図４２で示された全長ＰＲＯ１７８７タンパク質は約２９，０８２ダルトンの見積もられた分子量、および約９．０２のｐＩを有する。

図４２に示された全長配列（配列バ勘合：４２）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１７８７アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＭＹＰ０＿ＲＡＴ、ＭＹＰ０＿ＨＵＭＡＮ、ＭＹＰ０＿ＢＯＶＩＮ、ＧＥＮ１２８３８、ＨＳＳＣＮ２Ｂ２＿１、ＡＦ００７７８３＿１、ＨＳＵ９０７１６＿１、Ｐ＿Ｗ４２０１５、ＸＬＵ４３３３０＿１およびＡＦ０６０２３１＿１の間の配列同一性を明らかにした。
実施例２５：ヒトＰＲＯ１８６８ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ８５９］
コンセンサスＤＮＡ配列を、前記実施例１に記載されたように、ｐｈｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここではＤＮＡ４９８０３と命名される。ＤＮＡ４９８０３コンセンサス配列、およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２９９４６８９内に含まれるＥＳＴ配列の間の観察された相同性に基づき、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号２９９４６８９を購入し、そのインサートが得られる配列決定した。そのインサートの配列を図４３に示し、ここではＤＮＡ７７６２４−２５１５と命名される。

ＤＮＡ７７６２４−２５２５の全ヌクレオチド配列は図４３に示される（配列番号：４３）。クローンＤＮＡ７７６２４−２５１５は、ヌクレオチド位置５１ないし５３における見掛けの翻訳開始部位を持ち、ヌクレオチド位置９８１ないし９８３の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含む（図４３）。予測されるポリペプチド前駆体は３１０アミノ酸の長さである（図４４）。図４４に示される全長ＰＲＯ１８６８タンパク質は約３５，０２０ダルトンの見積もられた分子量および約７．９０のｐＩを有する。図４４に示される全長ＰＲＯ１８６８配列（配列番号：４４）の分析は、以下の存在を証明する：約アミノ酸１ないし約アミノ酸３０のシグナルペプチド、約アミノ酸２４３ないし約アミノ酸２６３の膜貫通ドメイン、約アミノ酸１０４ないし約アミノ酸１０７、および約アミノ酸１９２ないし約アミノ酸１９５の潜在的Ｎ−グリコシル化部位、約アミノ酸１０７ないし約アミノ酸１１０のｃＡＭＰ−およびｃＧＭＰ−依存性タンパク質キナーゼリン酸化部位、約アミノ酸１０６ないし約アミノ酸１０９、および約アミノ酸２９６ないし約アミノ酸２９９のカゼインキナーゼＩＩリン酸化部位、約アミノ酸６９ないし約アミノ酸７７のチロシンキナーゼリン酸化部位、および約アミノ酸２６ないし約アミノ酸３１、約アミノ酸２１５ないし約アミノ酸２２０、約アミノ酸２２６ないし約アミノ酸２３１、約アミノ酸２４３ないし約アミノ酸２４８、約アミノ酸２４４ないし約アミノ酸２４９、および約アミノ酸２６２ないし約アミノ酸２６７の潜在的Ｎ−ミリストール化。クローンＤＮＡ７７６２４−２５１５は１９９８年１２月２２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３５５３が割り当てられている。

図４４に示された全長配列（配列番号：４４）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１８６８アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＨＧＳ＿ＲＣ７５、Ｐ＿Ｗ６１３７９、Ａ３３＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｗ１４１４６、Ｐ＿Ｗ１４１５８、ＡＭＡＬ＿ＤＲＯＭＥ、Ｐ＿Ｒ７７４３７、Ｉ３８３４６、ＮＣＭ２＿ＨＵＭＡＮおよびＰＴＰＤ＿ＨＵＭＡＮの間の有意な相同性を証明した。
実施例２６：ヒトＰＲＯ４３２６ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ１８８３］
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔの公のデータベースからの約９５０の公知の分泌タンパク質からの（もしあれば、分泌シグナル配列を含めた）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列を用いて、ＥＳＴデータベースをサーチした。ＥＳＴデータベースは公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）、および所有されたＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含むものであった。サーチは、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳に対するＥＣＤタンパク質配列の比較として、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較をプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。

コンセンサスＤＮＡ配列は、ｐｈｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここではＤＮＡ８５７６７と命名される。ＤＮＡ８５７６７コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して、１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって増幅し、および２）ＰＲＯ４３２６についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般には、２０ないし３０ヌクレオチドの範囲であり、しばしば、長さが約１００ないし１０００ｂｐのＰＣＲ産物を与えるように設計される。プローブ配列は典型的には長さが４０ないし５５ｂｐである。いくつかの場合には、コンセンサス配列が約１ないし１．５ｋｂｐよりも大きな場合には、追加のオリゴヌクレオチドを合成した。全長クローンについてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ライブラリーからのＤＮＡを、ＰＣＴプライマーにて、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ｓｕｐｒａに従い、ＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の１つを用い、注目する遺伝子をコードするクローンを単離した。
ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’−ＣＧＡＧＧＴＧＣＡＧＡＴＣＧＡＧＧＴＧＴＣＧＣ−３’（配列番号：１３２）
逆方向ＰＣＲプライマー５’−ＧＧＣＡＣＴＧＣＡＧＧＡＧＡＡＣＣＴＣＡＴＧＧＴＣ−３’（配列番号：１３３）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ８５７６７配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ
５’−ＣＡＧＣＡＧＧＴＧＧＡＧＧＡＧＣＴＣＴＴＴＧＧＧＣＴＧＧＡＧＧＡＴＴＡＣＴＧＧＴＧＣ−３’（配列番号：１３４）
ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡは、ヒト骨髄組織から単離した。ｃＤＮＡクローンを単離するのに用いたｃＤＮＡライブラリーは、Ｉｎｖｉｒｔｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡからのもののような商業的に入手可能な試薬を用いて標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターに平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適当なサイズとし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５ＢはＳｔｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８ないし１２８０（１９９１））に規定された向きでクローン化した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ４３２６についての全長ＤＮＡ配列（ここでは、ＤＮＡ９１７７９−２５７１と命名）［図４５、配列番号：４５］；（ＵＮＱ１８８３）およびＰＲＯ４３２６についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＵＮＱ１８８３の全ヌクレオチド配列（ＤＮＡ９１７７９−２５７１）は図４５に示す（配列番号：４５）。クローンＵＮＱ１８８３（ＤＮＡ９１７７９−２５７１）は、ヌクレオチド位置３９８ないし４００における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置３２３３ないし３２３５の停止コドンにおいて終了する単一のオープンリーディングフレームを含む（図４５）。予測されるポリペプチド前駆体は９４５アミノ酸の長さである（図４６）。図４６に示される全長ＰＲＯ４３２６タンパク質は約１０３，６３８ダルトンの見積もられた分子量および約５．９４のｐＩを有する。図４６に示される全長ＰＲＯ４３２６配列（配列番号：４６）の分析は、図４６に示される種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明する。クローンＵＮＱ１８８３（ＤＮＡ９１７７９−２５７１）は、１９９９年３月１６日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３８４４が割り当てられている。

図４６に示される全長配列（配列番号：４６）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析が、ＰＲＯ４３２６アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＲＮＵ８７３０６＿１、Ｐ＿Ｗ７８９００、ＭＭＵ７２６３４＿１、ＡＦ０５５６３４＿１、Ｐ＿Ｗ７８８９９、Ｐ＿Ｗ７８９０１、ＡＢ００５２９７＿１、ＴＳＰ１＿ＣＨＩＣＫ、ＳＳＰＯ＿ＢＯＶＩＮおよびＣＦＵ５５９３５＿１の間の有意な相同性を証明した。
実施例２７：ヒトＰＲＯ４３３２ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ１８８７］
天然ヒトＰＲＯ４３３２ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローン（ＤＮＡ１００２７２−２９６９）は、初代ｃＤＮＡクローンの５’末端を優先的に表すヒト乳癌腫ｃＤＮＡライブラリーにおいて、酵母スクリーニングを用いて同定した。

クローンＤＮＡ１００，２７２−２９６９は、ヌクレオチド位置４８３ないし４８５における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置８０７ないし８０９の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含む（図４７；配列番号：４７）。予測されるポリペプチド前駆体は１０８アミノ酸の長さである（図４８；配列番号：４８）。図４８に示される全長ＰＲＯ４３３２タンパク質は約１２０５５ダルトンの見積もられた分子量および約４．６９のｐＩを有する。図４８に示される全長ＰＲＯ４３３２配列（配列番号：４８）のの分析は、図４８に示される種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、これらの重要なポリペプチドとジメインについて与えられた位置は前記したものに近い。クローンＤＮＡ１００２７２−２６６９は、２０００年７月２５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−２２９９が割り当てられている。

図４８に示される全長配列（配列番号：４８）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ４３３２アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆデータ中の配列の間の配列同一性を証明しなかった。
実施例２８：ヒトＰＲＯ４３４６ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ１９００］
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔの公のデータベースからの約９５０の公知の分泌タンパク質からの（もしあれば、分泌シグナル配列を含めた）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列を用いて、ＥＳＴデータベースをサーチした。ＥＳＴデータベースは公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）、および所有されたＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含むものであった。サーチは、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳に対するＥＣＤタンパク質配列の比較として、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較をプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。

ＰＲＯ４３４６をコードするコンセンサスＤＮＡ配列は、ｐｈｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列は、ここでは「ＤＮＡ８１２４３」と命名される。

ＤＮＡ８１２４３コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲプライマーによって同定し、および２）ＰＲＯ４３４６についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般には、２０ないし３０ヌクレオチドの範囲であり、しばしば、長さが約１００ないし１０００ｂｐのＰＣＲ産物を与えるように設計される。プローブ配列は、典型的には、長さが４０ないし５５ｂｐである。ある場合には、コンセンサス配列が約１ないし１．５ｋｂｐより大きな場合には、追加のオリゴヌクレオチドを合成する。全長クローンについてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ＰＣＲプライマー対にて、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ｓｕｐｒａに従い、ライブラリーからのＤＮＡをＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の１つを用い、注目する遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’ＧＡＣＡＴＡＴＧＣＴＧＣＣＧＣＴＴＣＣＡＣＴＣＣ３’（配列番号：１３５）および
逆方向ＰＣＲプライマー５’ＴＣＴＣＴＴＣＴＣＣＧＣＣＴＧＣＴＴＣＣＴＣＡＧＣ３’（配列番号：１３６）。

加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ８１２４３配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ５’ＧＡＣＡＡＣＴＴＣＴＣＴＧＧＣＧＡＡＧＣＴＣＴＣＴＧＧＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＴＡＧＣＡＧＧ３’（配列番号：１３７）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、前記で確認されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ４３４６遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡはヒト骨髄から単離した。ｃＤＮＡライブラリーを用いて、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡからのもののような商業的に入手可能な試薬を用い、標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターに平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適当なサイズとし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＴＫＤ；ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）参照）に規定された向きにクローン化した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ４３４６についての全長ＤＮＡ配列（ここでは、ＤＮＡ８６５９４−２５８７と命名）［図４９、配列番号：４９］；およびＰＲＯ４３４６についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＰＲＯ４３４６の全コーディング配列は図４９に示す（配列番号：４９）。クローンＤＮＡ８６５９４−２５８７は、ヌクレオチド位置２１８ないし２２０における見掛けの翻訳開始部位、およびヌクレオチド位置１８２３ないし１８２５における見掛けの停止コドンを持つ単一のプライマーンリーディングフレームを含む。予測されるポリペプチド前駆体は５３５アミノ酸の長さである（図５０：配列番号：５０）。ＤＮＡ８６５９４−２５８７と命名されるクローンＤＮＡ８６５９４−２５８７（ＵＮＱ１９００）は１９９９年３月３０日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０３８９４が割り当てられている。図５０に示される全長ＰＲＯ４３４６タンパク質は約５９７１６ダルトンの見積もられた分子量および約６．３６のｐＩを有する。

図５０に示された全長配列（配列番号：５０）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ４３４６アミノ酸および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列（配列およびここに取り込まれた関連テキスト）：Ｐ＿Ｗ７８９１６、ＨＳ４５Ｐ２１＿１、ＨＳ４５Ｐ２１＿３、ＨＳＵ９０５５２＿１、ＨＳ４５Ｐ２１＿４、Ｐ＿Ｗ７１５９２、Ｓ３７５８３、ＨＳＡＪ０３１４７＿４、ＭＯＧ＿ＨＵＭＡＮおよびＡＦ０９６８７０＿１の間の相同性を明らかにした。
実施例２９：ヒトＰＲＯ４４００ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ１９２５］
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔの公のデータベースからの約９５０の公知の分泌タンパク質からの（もしあれば、分泌シグナル配列を含めた）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列を用いて、ＥＳＴデータベースをサーチした。ＥＳＴデータベースは公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）、および所有されたＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）およびＧｅｎｅｎｔｅｃｈからの所有されたＥＳＴを含んだ。サーチは、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳に対するＥＣＤタンパク質配列の比較として、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較をプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。

ＰＲＯ４４００をコードするコンセンサスＤＮＡ配列は、反復サイクルのｐｈｒａｐを用い、他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここでは「ＤＮＡ７７６３４」と命名する。

７７６３４コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含有するｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ４４００についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般には、２０ないし３０ヌクレオチドの範囲であり、しばしば、長さが約１００ないし１０００ｂｐのＰＣＲ産物を与えるように設計される。プローブ配列は、典型的には長さが４０ないし５５ｂｐである。いくつかの場合においてコンセンサス配列が約１ないし１，５ＫＢＰよりも大きな場合、追加のオリゴヌクレオチドを合成する。全長クローンについてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ＰＣＲプライマー対にて、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ｓｕｐｒａに従い、ライブラリーからのＤＮＡをＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の１つを用い、注目する遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’ＧＣＴＧＣＴＧＣＣＧＴＣＣＡＴＧＣＴＧＡＴＧ３’（配列番号：１３８）および
逆方向ＰＣＲプライマー５’ＣＴＣＧＧＧＧＡＡＴＧＴＧＡＣＡＴＣＧＴＣＧＣ３’（配列番号：１３９）
加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ７７６３４配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ５’ＧＣＴＧＣＣＧＴＣＣＡＴＧＣＴＧＡＴＧＴＴＴＧＣＧＧＴＧＡＴＣＧＴＧＧ３’（配列番号：１４０）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、前記で確認されたＰＣＲ４プライマー対でのＰＣＲ増幅によって、ライブラリーからのＤＮＡをスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ４４００遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡはヒト腺癌細胞系から単離した。ｃＤＮＡライブラリーを用いて、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡからのもののような商業的に入手可能な試薬を用い、標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターに平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適当なサイズにし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＲＫＤ；ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１））に規定した向きでクローン化した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ４４００についての全長ＤＮＡ配列（ここではＤＮＡ８７９７４−２６０９と命名）［図５１、配列番号：５１］；およびＰＲＯ４４００についての導かれたタンパク質配列を与えた。

ＰＲＯ４４００の全コーディング配列を図５１に示す（配列番号：５１）。クローンＤＮＡ８７９７４−２６０９は、ヌクレオチド位置２７ないし２９における見掛けの翻訳開始部位、およびヌクレオチド配列１０２６ないし１０２８における見掛けの停止コドンを持つ単一のオープンリーディングフレームを含む。予測されるポリペプチド前駆体は３３３アミノ酸の長さである（図５２；配列番号：５２）。ＤＮＡ８７９７４−２６０９と命名されたクローンＤＮＡ８７９７４−２６０９（ＵＮＱ１９２５）は１９９９年４月２７日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣに受託番号２０３９６３が割り当てられている。図５２に示される全長ＰＲＯ４４０６タンパク質は約３８６１８ダルトンの見積もられた分子量、および約９．２７のｐＩを有する。

図５２に示された全長配列（配列番号：５２）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５の分析は、ＰＲＯ４４００アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＡＦ０３３８２７＿１、ＡＦ０７０５９４＿１、ＡＦ０２２７２９＿１、ＣＥＣ３４Ｆ６＿４、ＳＹＦＢ＿ＴＨＥＴＨ、Ｇ７０４０５、ＳＤ＿ＤＲＯＭＥ、Ｓ６４０２３、ＡＬＫ１＿ＹＥＡＳＴおよびＶＧ０４＿ＨＳＶＩＩの間の相同性を明らかにした。
実施例３０：ヒトＰＲＯ６００３ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ２５１４］
天然ヒトＰＲＯ６００３ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローン（ＤＮＡ８３５６８−２６９２）は、初代ｃＤＮＡクローンの５’末端を優先的に表すヒト胎児腎臓ｃＤＮＡライブラリーにおいて、酵母スクリーニングを用いて、同定した。

クローンＤＮＡ８３５６８−２６９２は、ヌクレオチド位置６３８ないし６４０における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置２２２５ないし２２２７の停止コドンで終了する単一オープンリーディングフレームを含む（図５３；配列番号：５３）。予測されるポリペプチド前駆体は５２９アミノ酸の長さである（図５４；配列番号：５４）。図５４に示す全長ＰＲＯ６００３は約５９，５８３ダルトンの見積もられた分子量および約６．３６のｐＩを有する。図５４に示された全長ＰＲＯ６００３配列（配列番号：５４）の分析は、図５４に示すように種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、それらの重要なポリペプチドドメインについて与えられた位置は前記したのに似ている。クローンＤＮＡ８３５６８−２６９２は１９９９年７月２０日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−３８６が割り当てられている。

図５４に示された全長配列（配列番号：５６）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ６００３アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列Ｐ＿Ｗ５８９８６、ＰＴＮＤ７＿１、ＹＫＺ３＿ＹＥＡＳＴ、ＣＥＫ０４Ｂ１２＿１、ＡＢ０１４４６４＿１、ＰＣＵ０７０５９＿１、Ｓ３１２１３、ＣＥＬＦ２５Ｅ２＿２、ＡＦ０３６４０８＿１、およびＡＢ００７９３２＿１の間の配列同一性を証明した。
実施例３１：ヒトＰＲＯ６０９４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ２５４２］
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔの公のデータベースからの約９５０の公知の分泌タンパク質からの（もしあれば、分泌シグナル配列を含めた）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列を用いて、ＥＳＴデータベースをサーチした。ＥＳＴデータベースは所有されたＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）、および所有されたＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含んだ。サーチは、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳に対するＥＣＤタンパク質配列の比較として、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較をプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。

コンセンサスＤＮＡ配列は、前記したように、ｐｈｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここではＤＮＡ９４６２１と命名される。いくつかの場合、ＤＮＡ９４６２１コンセンサス配列は、反復サイクルのＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐを用いて拡大して、前記したＥＳＴ配列の源をできる限り用いて当該中間コンセンサス配列まで拡大された中間コンセンサスＤＮＡ配列に由来する。

ＤＮＡ９４６２１コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＴプライマーによって同定し、および２）ＰＲＯ６０９４についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般には、２０ないし３０ヌクレオチドの範囲であり、しばしば、長さが約１００ないし１０００ｂｐのｐＣＲ産物を与えるように設計される。プローブ配列は、典型的には、長さが４０ないし５５ｂｐである。いくつかの場合には、コンセンサス配列は約１ないし１．５ｋｂｐより大きな場合には、追加のオリゴヌクレオチドを合成する。全長クローンについてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ＰＣＲプライマー対にて、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ｓｕｐｒａに従い、ライブラリーからのＤＮＡをＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の１つを用い、注目する遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
順方向ＰＣＲプライマー５’ＧＧＡＧＡＧＧＴＧＧＡＴＣＡＣＴＣＧＡＣＣＣＧ’（配列番号：１４１）および
逆方向ＰＣＲプライマー５’ＡＣＡＴＧＣＣＡＧＧＧＡＣＴＣＣＴＣＣＧＡＡＡＣ３’（配列番号：１４２）。

加えて、合成オリゴヌクレオチドハイブリダイゼーションプローブは、以下のヌクレオチド配列を有するコンセンサスＤＮＡ９４６２１配列から構築した。
ハイブリダイゼーションプローブ５’ＧＴＧＧＡＴＣＡＣＴＣＧＡＣＣＣＧＣＴＴＡＡＴＴＴＣＧＧＡＴＣＣＴＧＴＧＣＴＧＣＴＧ’（配列番号：１４３）
全長クローンの源についてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、該ライブラリーからのＤＮＡを、前記で確認されたＰＣＲプライマー対でのＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびＰＣＲプライマーの１つを用い、ＰＲＯ６０９４遺伝子をコードするクローンを単離した。

ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡはヒト副腎組織から単離した。ｃＤＮＡライブラリーを用いて、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡからのもののような商業的に入手可能な試薬を用い、標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターに平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適当なサイズとし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＴＫＤ；ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）参照）に規定された向きにクローン化した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、ＰＲＯ６０９４についての全長ＤＮＡ配列（ここでは、ＤＮＡ９６９９５−２７０９と命名）［図５５、配列番号：５５］；およびＰＲＯ６０９４についての導かれたタンパク質配列を与えた。

前記で確認にされた全長クローンが、ヌクレオチド位置１９７ないし１９９における見掛けの翻訳開始部位およびヌクレオチド位置３，２６６ないし３，２６８の停止シグナルを持つ単一のオープンリーディングフレームを含んだ（図５５，配列番号：５５）。予測されるポリペプチド前駆体は１，０２３アミノ酸の長さであり、ほぼ１１１，６８２ダルトンの計算された分子量、およびほぼ４．７２の見積もられたｐＩを有する。図５６に示された全長ＰＲＯ６０９４配列（配列番号：５６）の分析は、図５６に示された種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、それらの重要なポリペプチドドメインについて与えられた位置は前記したのに似ている。クローンＤＮＡ９６９９５−２７０９は１９９９年８月３日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−４７５が割り当てられている。

図５６に示された全長配列（配列番号：５６）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ６０９４アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ＡＢ０２３１４４＿１、Ｉ５２６５７、ＸＬＸＯＬＬ＿１、Ｐ＿Ｗ４０２２４、ＤＡＦ＿ＣＡＶＰＯ、ＨＳＢＭＰ１６＿１、Ｐ＿Ｐ８０６１８、ＧＥＮ１０６５５、Ｐ＿Ｐ９４７７４、およびＰ＿Ｒ６６６８３の間の配列同一性を証明した。
実施例３２：ヒトＰＲＯ６２４４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ２５６４］
天然ヒトＰＲＯ６２４４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローン（ＤＮＡ１０８７４３−２７２２）は、初代ｃＤＮＡクローンの５’末端を優先的に表すヒトｃＤＮＡライブラリーにおいて、酵母スクリーニングを用いて同定した。

クローンＤＮＡ１０８７４３−２７２２は、ヌクレオチド位置１８ないし２０における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置１２１８ないし１２２０の停止コドンで終了する単一のオープンリーディングフレームを含む（図５７；配列番号：５７）。予測されるポリペプチド前駆体は４００アミノ酸の長さである（図５８；配列番号：５８）。図５８に示された全長ＰＲＯ６２４４タンパク質は約４４，８７６ダルトンの見積もられた分子量および約８．３２のｐＩを有する。図５８に示された全長ＰＲＯ６２４４配列（配列番号：５８）の分析は、図５８に示された種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、それらの重要なポリペプチドドメインについて与えられる位置は前記したのに似ている。クローンＤＮＡ１０８７４３−２７２２は１９９９年８月１０日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−５０８が割り当てられている。

図５８に示される全長配列（配列番号：５８）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いるＤａｙｈｏｆｆデータベース（バ−ジョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ６２４４アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｐ＿Ｗ２９６７６；Ｉ４５８８７；ＹＮ９９＿ＹＥＡＳＴ；Ｓ６３４０３；Ｓ７５４８１；ＲＳ２＿ＳＰＩＣＩ；ＨＧＳ＿ＲＫ１４２；Ａ４４８１１；およびＳＴＲＧＴＦＪＡ＿１の間の配列同一性を証明した。
実施例３３：ヒトＰＲＯ９８２０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローン［ＵＮＱ３０２２］
ＤＮＡ１０８７６９−２７６５は、Ｇｅｎｅｎｅｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された所有されたシグナル配列発見アルゴリズムを、ＥＳＴ並びに公の（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または私的な（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）データベースからのクラスター化され、組み立てられたＥＳＴ断片に適用することによって同定された。シグナル配列アルゴリズムは、考慮すべき配列または配列断片の５’−末端における第一および、所望により、第二のメチオニンコドン（ＡＴＧ）の周囲のＤＮＡヌクレオチドの特性に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。第一のＡＴＧに続くヌクレオチドは、いずれの停止コドンもなくして少なくとも３５の明瞭なアミノ酸をコードするに違いない。もし第一のＡＴＧが必要なアミノ酸を有するならば、第二のＡＴＧは調べない。もしいずれも要件を満たさなければ、候補配列はスコア取りしない。ＥＳＴ配列が真正なシグナル配列を含有するかを決定するために、ＤＮＡ、およびＡＴＧコドンの場合の対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）の組を用いてスコア取りする。

前記したシグナル配列アルゴリズムの使用は、ここではＤＮＡ８５０６１とも命名されるここではＤＮＡ２０８９５と命名される、ＩｎｃｙｔｅデータベースからのＥＳＴ配列の同定を可能とした。

ＤＮＡ８５０６１配列に基づき、クローン番号３１１００６２Ｈ１をＩｎｃｙｔｅから購入し、ヒト外分泌腺組織からのｃＤＮＡインサートが得られ、配列決定した。ここに、ｃＤＮＡインサートが全長タンパク質をコードすることが判明した。このｃＤＮＡインサートの配列は、ここではＤＮＡ１０８７６９−２７６５と命名される。

クローンＤＮＡ１０８７６９−２７６５は、ヌクレオチド位置１３３ないし１３５における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置１８３４ないし１８３６で終了する単一のオープンリーディングフレームを含む（図５９；配列番号：５９）。予測されるポリペプチド前駆体は５６７アミノ酸の長さである（図６０；配列番号：６０）。図６０に示す全長ＰＲＯ９８２０タンパク質は約６５１１８ダルトンの見積もられた分子量および約８．３３のｐＩを有する。図６０に示された全長ＰＲＯ９８２０（配列番号：６０）の分析は、図６０に示された種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、それらの重要なポリペプチドドメインについて与えられた位置は前記したのに似ている。クローンＤＮＡ１０８７６９−２７６５は１９９９年１０月１９日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−８６１が割り当てられている。

図６０に示される全長配列（配列番号：６０）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ９８２０アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｓ４３７２０；ＬＰＨ＿ＨＵＭＡＮ；Ｐ＿Ｗ９３００２；ＡＢ０１００８９Ｓ３＿１；ＡＢ００９６６６Ｓ２＿１；ＪＣ５９２５；ＰＳＵ２６０２５＿１；Ｓ５０７５６；Ｐ＿Ｗ５６０２４；およびＰ＿Ｗ５３４６９の間の配列同一性を証明した。
実施例３４：ヒトＰＲＯ９８２８ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ３０２７］
コンセンサスＤＮＡ配列は、前記実施例１に記載されたように、ｐｈｒａｐを用いて他の核酸配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここではＤＮＡ１３９８１４と命名される。ＤＮＡ１３９８１４コンセンサス配列に基づき、オリゴヌクレオチドを合成して：１）注目する配列を含むｃＤＮＡライブラリーをＰＣＲによって同定し、および２）ＰＲＯ９８２８についての全長コーディング配列のクローンを単離するためのプローブとして用いた。順方向および逆方向ＰＣＲプライマーは、一般には、２０ないし３０ヌクレオチドの範囲であり、しばしば、長さが約１００ないし１０００ｂｐのＰＣＲ産物を与えるように設計される。プローブ配列は、典型的には、長さが４０ないし５５ｂｐである。いくつかの場合には、コンセンサス配列が約１ないし１．５ｋｂｐより大きな場合には、追加のオリゴヌクレオチドを合成する。全長クローンについてのいくつかのライブラリーをスクリーニングするために、ＰＣＲプライマー対にて、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ｓｕｐｒａに従い、ライブラリーからのＤＮＡをＰＣＲ増幅によってスクリーニングした。次いで、陽性ライブラリーを用いて、プローブオリゴヌクレオチドおよびプライマー対の１つを用い、注目する遺伝子をコードするクローンを単離した。

ＰＣＲプライマー（順方向および逆方向）を合成した：
５’−ＡＡＴＣＴＣＡＧＣＡＣＣＡＧＣＣＡＣＴＣＡＧＡＧＣＡ−３’（配列番号：１４４）
５’−ＧＴＴＡＡＡＧＡＧＧＧＴＧＣＣＣＴＴＣＣＡＧＣＧＡ−３’（配列番号：１４５）
５’−ＴＡＴＣＣＣＡＡＴＧＣＣＴＣＣＣＣＡＣＴＧＣＴＣ−３’（配列番号：１４６）
５’−ＧＡＴＧＡＡＣＴＴＧＧＣＧＡＡＧＧＧＧＣＧＧＣＡ−３’（配列番号：１４７）
ｃＤＮＡライブラリーの構築のためのＲＮＡはヒト胎児肝臓組織から単離した。ｃＤＮＡライブラリーを用いて、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡからのもののような商業的に入手可能な試薬を用い、標準的な方法によって構築した。ｃＤＮＡはＮｏｔＩ部位を含有するオリゴｄＴを起点とし、ＳａｌＩヘミキナーゼ処理したアダプターに平滑連結し、ＮｏｔＩで切断し、ゲル電気泳動によって適当なサイズとし、ユニークなＸｈｏＩおよびＮｏｔＩ部位において、適当なクローニングベクター（例えば、ｐＲＫＢまたはｐＴＫＤ；ｐＲＫ５ＢはＳｆｉＩ部位を含有しないｐＲＫ５Ｄの前駆体である；Ｈｏｌｍｅｓｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５３：１２７８−１２８０（１９９１）参照）に規定された向きにクローン化した。

前記したように単離されたクローンのＤＮＡ配列決定は、全長ＰＲＯ９８２８ポリペプチドについての全長ＤＮＡ配列（ここでは、ＤＮＡ１４２２３８−２７６８と命名［図６１、配列番号：６１］）およびＰＲＯ９８２８ポリペプチドについての導かれたタンパク質配列を与えた。

前記で同定された全長クローンは、ヌクレオチド位置２３２ないし２３４における見掛けの翻訳開始部位、およびヌクレオチド位置９８５ないし９８７における停止シグナルを持つ単一のプライマーオープンリーディングフレームを含んだ（図６１、配列番号：６１）。予測されるポリペプチド前駆体は２５１アミノ酸の長さであり、ほぼ２７，９５４ダルトンの計算された分子量およびほぼ９．２２の見積もられたｐＩを有する。図６２に示される全長ＰＲＯ９８２８配列（配列番号：６２）のの分析は、図６２に示された種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、それらの重要にポリペプチドドメインについて与えられた位置は前記と似ている。染色体マッピングは、ＰＲＯ９８２８−コーディング核酸がヒトにおいて染色体１２ｐ１３にマップされることを示す。クローンＤＮＡ１４２２３８−２７６８は１９９９年１０月５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−８１９が割り当てられている。

図６２に示された全長配列（配列番号：６２）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ９８２８アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列Ｐ＿Ｙ０８５８１、ＡＢ０１８１２２＿１、ＦＧＦ３＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｒ７０８２４、Ｓ５４４０７、Ｐ＿Ｒ８０７８０、Ｐ＿Ｙ２３７６１、Ｐ＿Ｗ９２３１２、ＯＭＦＧＦ６＿１およびＰ＿Ｒ８０８７１の間の配列同一性を証明した。
実施例３５：ヒトＰＲＯ１０２７４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ３１２２］
Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔの公のデータベースからの約９５０の公知の分泌タンパク質からの（もしあれば、分泌シグナル配列を含めた）細胞外ドメイン（ＥＣＤ）配列を用いて、ＥＳＴデータベースをサーチした。ＥＳＴデータベースは１）公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋおよびＭｅｒｃｋ／ＷａｓｈｉｎｇｔｏｎＵｎｉｖ．）、２）所有されたＥＳＴデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）、および３）Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈからの所有されたＥＳＴデータベースを含んだ。サーチは、ＥＳＴ配列の６フレーム翻訳に対するＥＣＤタンパク質配列の比較として、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２［Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，２６６：４６０−４８０（１９９６）］を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較をプログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。

コンセンサスＤＮＡ配列は、前記したようにｐａｒａｐを用いて他のＥＳＴ配列に対して組み立てた。このコンセンサス配列はここでは「ＤＮＡ１２０４４４」と命名される。いくつかの場合には、コンセンサス配列は、反復サイクルはＢＬＡＳＴおよびｐｈｒａｐを用いて拡大して、前記したＥＳＴ配列の源をできる限り用いて中間コンセンサスＤＮＡ配列まで拡大されたその中間コンセンサス配列に由来する。

次いで、ＥＳＴクローン番号４５２２３４７はＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡから購入し、そのクローンのｃＤＮＡインサートが得られ、全部を配列決定した。

前記したクローンから得られたインサートのＤＮＡ配列決定は全長ｐｒｏ１０２７４ポリペプチドについての全長ＤＮＡ配列（ここでは、ＤＮＡ１３９６８６−２８２３［図６３、配列番号：６３］）およびそのＰＲＯ１０２７４ポリペプチドについての導かれたタンパク質配列を与えた。

前記で同定された全長クローンは、ヌクレオチド位置２ないし４における見掛けの翻訳開始部位およびヌクレオチド位置１４１２ないし１４１４における停止コドンを持つ単一のオープンリーディングフレームを含んだ（図６３、配列番号：６３）。予測されるポリペプチド前駆体は４７０アミノ酸の長さであり、ほぼ５２１１８ダルトンの計算された分子料およびほぼ５．０６の見積もられたｐＩを有する。図６４に示された全長ＰＲＯ１０２７４配列（配列番号：６４）の分析は、図６４に示された種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、それらの重要なポリペプチドドメインについて与えられた位置は前記したのに似ている。クローンＤＮＡ１３９６８６−２８２３は２０００年２が節２日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１２６４が割り当てられている。

図６４に示された全長配列（配列番号：６４）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１０２７４アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：ａｆ１５１８４８＿１、ｃｅｃ２７ｈ６＿４、ｃｅｂ０４９１＿２、ｃｅｌｆ３６ｈ１２＿２、ｃｅｔ０５ｇ５＿１０、ｙｎｐ７＿ｃａｅｅｌ、ｃｅｌｃ１６ｃ８＿１７、ｐ＿ｗ６１５３３、ｒｄａｘｘ＿１ＡＮＤｈｓｆ０８１１＿１の間の配列同一性を証明した。
実施例３６：ヒトＰＲＯ１６０９０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ５７８３］
ＤＮＡ１４４８４４−２８４３は、Ｇｅｎｅｎｅｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．（ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）によって開発された所有されたシグナル配列発見アルゴリズムを、ＥＳＴ並びに公の（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および／または私的な（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）データベースからのクラスター化され、組み立てられたＥＳＴ断片に適用することによって同定された。シグナル配列アルゴリズムは、考慮すべき配列または配列断片の５’−末端における第一および、所望により、第二のメチオニンコドン（ＡＴＧ）の周囲のＤＮＡヌクレオチドの特性に基づいて分泌シグナルスコアを計算する。第一のＡＴＧに続くヌクレオチドは、いずれの停止コドンもなくして少なくとも３５の明瞭なアミノ酸をコードするに違いない。もし第一のＡＴＧが必要なアミノ酸を有するならば、第二のＡＴＧは調べない。もしいずれも要件を満たさなければ、候補配列はスコア取りしない。ＥＳＴ配列が真正なシグナル配列を含有するかを決定するために、ＤＮＡ、およびＡＴＧコドンの周りの対応するアミノ酸配列を、分泌シグナルに関連することが知られている７つのセンサー（評価パラメータ）の組を用いてスコア取りする。

前記シグナル配列アルゴリズムの使用は、ここでは１６０７３５８と命名される、ＩｎｃｙｔｅデータベースからのＥＳＴクラスター配列の同低を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋおよび所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ）（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｌａｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にてクラスター化し、コンセンサス配列ＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列はここではＤＮＡ８７９６６と命名する。

ＤＮＡ８７９６６配列およびＩｎｃｙｔｅデータベースからのクローン番号１６０７３５８内に含まれるＥＳＴ配列の間の観察された配列相同性に徴して、クローン番号１６０７３５８を購入し、ｃＤＮＡインサートが得られ、配列決定した。ここに、ｃＤＮＡインサートは全長タンパク質をコードすることが判明した。このｃＤＮＡインサートの配列を図６５に示し、ここでは、ＤＮＡ１４４８４４−２８４３と命名する。

クローンＤＮＡ１４４８４４−２８４３は、ヌクレオチド位置８８ないし９０における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置５２３ないし５２５の停止コドンで終了する単一オープンリーディングフレームを含む（図６５；配列番号：６５）。予測されるポリペプチド前駆体は１４５アミノ酸の長さである（図６６；配列番号：６６）。図６６に示す全長ＰＲＯ１６９０９タンパク質は約１６，６１８ダルトンの見積もられた分子量および約５．２６のｐＩを有する。図６６に示される全長ＰＲＯ１６０９０配列（配列番号：６６）の分析は図６６に示された種々の重要にポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、それらの重要なポリペプチドドメインについて与えられた位置は前記したのに似ている。クローンＤＮＡ１４４８４４−２８４３は２０００年３月２１日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１５３６が割り当てられている。

図６６に示される全長配列（配列番号：６６）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１６０９０アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列：Ｐ＿Ｗ６２７７２、ＡＦ１６１０８０＿１、Ｔ０４７９８、Ｄ８４１３１＿１、Ｄ８８３５８＿１、ＧＵＮＡ＿ＭＩＣＢＩ、Ｔ１６２５１、ＡＦ００１６２８＿１、ＡＦ１７６７８４＿１、およびＴ２６０８１の間の配列同一性を証明した。
実施例３７：ヒトＰＲＯ１９６４４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ５８２５］
前記実施例に記載したシグナル配列アルゴリズムの使用は、ＩｎｃｙｔｅデータベースからのＥＳＴクラスター配列の同定を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含んだ種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６）を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列をここではＤＮＡ６０７６５という。ＤＮＡ６０７６５に徴して、ＤＮＡ１３９５９２−２８６６を同定した。

図６７に示される（ここではＤＮＡ１３９５９２−２８６６という）全長クローンは、ヌクレオチド位置１９２ないし１９４における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置１１２２ないし１１２４の停止コドンで終了する単一オープンリーディングフレームを含む（図６７；配列番号：６７）。予測されるＰＲＯ１９６４４ポリペプチド前駆体（図６８、配列番号：６８）は８８２アミノ酸の長さである。ＰＲＯ１９６４４はほぼ９８４２８ダルトンの計算された分子量およびほぼ８．８９の見積もられたｐＩを有する。

図６８に示される全長配列（配列番号：６８）のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ１９６４４アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列（配列およびここに一体化されたテキスト）：ＰＷ５６５３８の間の相同性を証明した。

クローンＤＮＡ１３９５９２−２８６６は２０００年３月２８日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−１５８７が割り当てられている。
実施例３８：ヒトＰＲＯ２１３４０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ５８９２］
天然ヒトＰＲＯ２１３４０ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローン（ＤＮＡ１７６７７５−２９５７）を、初代ｃＤＮＡクローンの５’末端を優先的に表すヒト組織の混合物に由来するｃＤＮＡライブラリーにおいて、酵母スクリーニングを用いて同定した。

クローンＤＮＡ１７６７７５−２９５７は、ヌクレオチド位置１２８ないし１３０における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置２４８９ないし２４９１の停止コドンで終了する単一オープンリーディングフレームを含む（図６９；配列番号：６９）。予測されるポリペプチド前駆体は７８７アミノ酸の長さである（図７０；配列番号：７０）。図７０に示される全長ＰＲＯ２１３４０タンパク質は約８７９３４ダルトンの見積もられた分子量および約５．４９のｐＩを有する。図７０に示される全長ＰＲＯ２１３４０（配列番号：７０）の分析は、図７０に示される種々の重要なポリペプチドドメインの存在を証明し、ここに、それらの重要なポリペプチドドメインについて与えられた位置は前記したのに似ている。クローンＤＮＡ１７６７７５−２９５７は２０００年７月２５日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号ＰＴＡ−２３０３が割り当てられている。

図７０に示される全長配列（配列番号：７０）のＡＬＩＧＮ−２配列整列分析を用いる、Ｄａｙｈｏｆｆデータベース（バージョン３５．４５ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ３５）の分析は、ＰＲＯ２１３４０アミノ酸配列および以下のＤａｙｈｏｆｆ配列ＭＦＴＭＤＣＩＩＩ＿１、ＨＳＡ１３３００５＿１、ＡＤＯ２＿ＨＵＭＡＮ、Ｐ＿Ｒ８７０３６、Ｓ１８９６８、Ｐ＿Ｗ４４１２０、ＡＦ１６７４０３＿１、ＡＦ１７１９３１＿１、ＡＦ０２９８９９＿１およびＡＦ０２９９００＿１の間の配列同一性を証明した。
実施例３９：ヒトＰＲＯ１０２６ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ５１１］
前記実施例３に記載されたシグナル配列アルゴリズムの使用は、ＩｎｃｙｔｅデータベースからのＥＳＴクラスターの同定を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ）および所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含んだ種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６）を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にて、クラスター化し、コンセンサスＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列をここではＤＮＡ５６４３４という。

ＤＮＡ５６４３４配列、およびＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン番号１２２７４９１内に含まれるＥＳＴ配列の間の観察された配列相同性に徴して、ＩｎｃｙｔｅＥＳＴクローン１２２７４９１を購入し、ｃＤＮＡインサートが得られ、配列決定した。このインサートは全長タンパク質をコードすることが判明した。このｃＤＮＡインサートの配列を図７７に示し、ここではＤＮＡ５９６１３−１４１７と命名される。

ＤＮＡ５９６１３−１４１７の全ヌクレオチド配列を図７７に示す（配列番号：７７）。クローンＤＮＡ５９６１３−１４１７は、ヌクレオチド位置２３３ないし２３５における見掛けの翻訳開始部位を持ち、かつヌクレオチド位置９４４ないし９４６の停止コドンで終了する単一オープンリーディングフレームを含む（図７７）。予測されるポリペプチド前駆体は２３７アミノ酸の長さである（図７８）。図７８に示す全長ＰＲＯ１０２６タンパク質は約２５，２８４ダルトンの見積もられた分子量および約５．７４のｐＩを有する。クローンＤＮＡ５９６１３−１４１７はＡＴＣＣに寄託した。配列に関しては、寄託されたクローンは正しい配列を含有し、本明細書中に提供される配列は公知の配列決定技術に基づくと理解される。

配列番号：７８のアミノ酸配列を分析し、推定シグナルペプチドは配列番号：７８の約アミノ酸１ないし２５におけるものである。Ｎ−グリコシル化部位は約アミノ酸４５ないし４８、７３ないし７６、１０７ないし１１０、１１８ないし１２１、１３２ないし１３５、１７２ないし１７５、１７５ないし１７８、および１８５ないし１８８におけるものである。Ａｒｔｈｒｏｐｏｄｄｅｆｅｎｓｉｎｓ保存領域は配列番号：７８の約アミノ酸１７６ないし１８２におけるものである。クリングルドメインは配列番号：７８の約アミノ酸１２８で開始し、ｌｙ−６／ｕ−ＰＡＲドメインは配列番号：７８の約アミノ酸６で始まる。これらのアミノ酸配列および他のものの対応するヌクレオチドは、本明細書中に提供された配列を仮定すればルーチン的に決定することができる。

ＰＲＯ１０２６はそれに対していくらかの配列同一性を有するＤａｙｈｏｆｆデータベースで現れる表示は以下の通りである：ＳＳＣ２０Ｆ１０＿１；ＳＦ０４１０８３；Ｐ＿Ｗ２６５７９；Ｓ４４２０８；ＪＣ２３９４；ＰＳＴＡ＿ＤＩＣＤＩ；Ａ２７０２０；Ｓ５９３１０；ＲＡＧ１＿ＲＡＢＩＴ；およびＭＵＳＢＡＬＢＣ１＿１
実施例４０：ヒトＰＲＯ１１２４ポリペプチドをコードするｃＤＮＡクローンの単離［ＵＮＱ１８９１９］
前記実施例３に記載されたシグナル配列アルゴリズムの使用は、Ｉｎｃｙｔｅデータベースからの単一ＥＳＴクラスターへ配列の同定を可能とした。次いで、このＥＳＴクラスター配列を、公のＥＳＴデータベース（例えば、ＧｅｎＢａｎｋおよび所有されたＥＳＴＤＮＡデータベース（ＬＩＦＥＳＥＱ）（登録商標），ＩｎｃｙｔｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｌａｓ，ＰａｌｏＡｌｔｏ，ＣＡ）を含む種々の発現された配列タグ（ＥＳＴ）データベースと比較して、存在する相同性を同定した。相同性サーチは、コンピュータープログラムＢＬＡＳＴまたはＢＬＡＳＴ２（Ａｌｔｓｈｕｌｅｔａｌ．，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２６６：４６０−４８０（１９９６））を用いて行った。公知のタンパク質をコードしない７０（またはある場合には９０）以上のＢＬＡＳＴスコアをもたらす比較を、プログラム「ｐｈｒａｐ」（ＰｈｉｌＧｒｅｅｎ，ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｇＷａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｓｅａｔｔｌｅ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ）にてクラスター化し、コンセンサス配列ＤＮＡ配列に組み立てた。それから得られたコンセンサス配列はここではＤＮＡ５６０３５と命名する。

ＤＮＡ５６０３５コンセンサス配列、およびＩｎｃｙｔｅクローン番号２７６７６４６内に含まれるＥＳＴ配列の間の観察された配列相同性に徴して、Ｉｎｃｙｔｅクローン番号２７６７６４６を購入し、ｃＤＮＡインサートが得られ、配列決定した。このインサートは全長タンパク質をコードすることが判明した。このｃＤＮＡインサートの配列を図７５に示し、ここでは、ＤＮＡ６０６２９−１４８１と命名する。

図７５に示された全長クローンは、ヌクレオチド位置２５ないし２７における見掛けの翻訳開始位置を持ち、かつヌクレオチド位置２７８２ないし２７８４に見出される停止コドンで終了する単一オープンリーディングフレームを含む（図７５；配列番号：７５）。予測されるポリペプチド前駆体（図７６；配列番号：７６）は９１９アミノ酸の長さである図５４に示す全長ＰＲＯ１１２４はほぼ１０１，２８２ダルトンの見積もられた分子量、およびほぼ５．３７の見積もられたｐＩを有する。クローンＤＮＡ６０６２９−１４８１は１９９８年６月１６日にＡＴＣＣに寄託され、ＡＴＣＣ受託番号２０９９７９が割り当てられている。寄託されたクローンは現実の配列を有し、他方、通常および重要でない誤差を含み得る現在の配列決定技術に基づく表示のみをここに提供すると理解される。

全長配列のＷＵ−ＢＬＡＳＴ２配列整列分析に基づき、ＰＲＯ１１２４は、塩化物チャネルタンパク質およびＥＳＡＭ−１に対して有意なアミノ酸配列同一性を示す。具体的には、以下のＤａｙｈｏｆｆ表示はＥＣＬＣ＿ＢＯＶＩＮ、ＡＦ００１２６１＿１、Ｐ＿Ｗ０６５４８、ＳＳＣ６Ａ１０＿１、ＡＦ００４３５５＿１、Ｓ７６６９１、ＡＦ０１７６４２、ＢＹＵ０６８６６＿２、ＣＳＡ＿ＤＩＣＤＩおよびＳＡＵ４７１３９＿２に対して配列同一性を有すると同定された。
実施例４１：ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの役割を調べるために、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子における破壊を、相同組換えまたはレトロウイルス挿入技術によって生じさせた。具体時には、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０遺伝子における破壊を含むトランスジェニックマウス（すなわち、ノックアウトマウス）を、遺伝子標的化または遺伝子捕獲いずれかによって創製した。サザーンブロック分析によって突然変異を確認して、５’および３’末端双方での正しい標的化を確認した。遺伝子−特異的遺伝子型分けをゲノムＰＣＲによって行って、挿入の部位に近接するエクソンにアニールするプライマーを用いるＲＴ−ＰＣＲによって示されるように、内因性天然転写体の喪失を確認した。標的化ベクターを１２９株ＥＣ細胞にエレクトロポレーションし、標的化されたクローンを同定した。標的化クローンを宿主胚盤胞にマイクロインジェクションして、キメラを生じさせた。キメラをＣ５７動物で育種して、Ｆ１ヘテロ接合体を得た。ヘテロ接合体を交差させて、Ｆ２野生型、ヘテロ接合体およびホモ接合体コホールトが得られ、これを表現型分析で用いた。稀には、もし十分でないＦ１ヘテロ接合体が生産されればＦ１ｈｅｔｓを野生型Ｃ５７マウスに育種して、十分なヘテロ接合体を生じさせ、コホールトについて育種して、表現型について分析した。すべての表現型分析は、誕生から１２ないし１６週間後に行った。
結果のまとめ
４１．１ＤＮＡ２１８４４−１３９４（ＵＮＱ１６８）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ２６８４４−１３９４）と命名される。（ＵＮＱ１６８）ＰＲＯ１９４ポリペプチドをコードする遺伝子を破壊した。これらの実験についての遺伝子特異的用法は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子は、ヌクレオチド参照：ＮＭ＿０２５６９３またはアクセション：ＮＭ０２５６９３ＮＩＤ：ｇｉ２１３１３３７５ｒｅｆＮＭ０２５６９３．１ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ５７３０５７８Ｎ０８遺伝子（５７３０５７８Ｎ０８Ｒｉｋ）；タンパク質参照：Ｑ９Ｄ８Ｕ２またはアクセション：Ｑ９Ｄ８Ｕ２ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）。５７３０５７８Ｎ０８Ｒｉｋタンパク質（ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ５７３０５７８Ｎ０８）遺伝子）。ＭＯＵＳＰＳＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０８０６５２またはアクセション：ＮＭ０８０６５２ＮＩＤ：ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ５７３０５７８Ｎ０８遺伝子（ＭＧＣ１５３９７）と同様なｇｉ１８０８７８１２ｒｅｆＮＭ０８０６５２．１Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９６ＨＶ５またはアクセション：Ｑ９６ＨＶ５ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。仮定タンパク質。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ５７３０５７８Ｎ０８遺伝子、ヒトＭＧＣ１５３９７のオルソログ（ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ５７３０５７８Ｎ０８遺伝子と同様）である。別名は２９０００１０Ｋ０２Ｒｉｋを含む。ＭＧＣ１５３９７は、シグナルペプチドおよび６つの膜貫通セグメントよりなる仮定原形質膜タンパク質である。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．２６有意性＝０．８７９３５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２３平均同腹子サイズ＝７
突然変異型：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入はコーディングエクソン１および２の間で起こった（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２５６９３．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発見は、骨格筋、骨および脂肪を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされたすべての１３の成人組織試料で検出された。これは正常な小腸で上昇する。ＲＴ−ＰＣＲ分析は、転写体が分析した（−／−）マウス（Ｆ−９７）で存在しなかったことを明らかとした。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認された。
４１．１．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ２６８４４−１３９４（ＵＮＱ１６８）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト仮定膜タンパク質のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、ＬＰＳ攻撃に対する増大した平均血清ＴＮＦ−アルファ、ＭＣＰ１およびＩＬ−６応答によってマークされる免疫学的以上をもたらした。加えて、雄ノックアウトは、トリグリセリドレベルの有意な増加並びに増大した合計体脂肪を呈した。雄ホモ接合性（−／−）およびヘテロ接合性（＋／−）マウスは共に増大した骨ミネラル密度測定を示した。雌（−／−）マウスもまた、増大した骨−関連測定を示した。転写体はＲＴ−ＰＣＴによると不存在であった。
（ｂ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、正常な生理学では、傷または負傷に応答し、傷または負傷からの修復を開始し、外来性生物に対する生来のおよび獲得した防御を準備するかなり複雑でしばしば複数の相互連結生物学的経路の発現または結果である。これらの正常な生理学的経路が、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己に対する反応として、またはそれらの組合せとして、応答の強度に直接的に関連して追加の傷または負傷を引き起こす場合に、病気または病理が起こる。

これらの病気の形成は、しばしば、多工程経路を含み、しばしば、多くの異なる生物学的系／経路を含むが、これらの経路の１以上における臨界点における介入は軽減または治療効果を有することができる。治療的介入は、有害なプロセス／経路の拮抗作用または有益なプロセス／経路の刺激いずれかによって起こり得る。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は哺乳動物の免疫応答の十分な構成要素である。Ｔ細胞は、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己−分子に関連する抗原を認識する。抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面にＭＨＣ分子と共に提示され得る。該Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対して健康の脅威を持ち出すこれらの変化した細胞を排除する。Ｔ細胞はヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞を含む。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体の認識に続いて大いに増殖する。ヘルパーＴ細胞は、また、種々のサイトカイン、すなわち、リンホカインを分泌し、これはＢ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、および免疫応答に参加する種々の他の細胞の活性化で中枢的な役割を演じる。

多くの免疫応答においては、炎症細胞は負傷または感染の部位に浸潤する。移動する細胞は、侵された組織の組織学的調査によって判断できるように、好中球、好酸球、単球またはリンパ球性であり得る。ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．ＪｏｈｎＥ．Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９４，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．
多くの免疫関連病が知られており、広範に研究されてきた。そのような病気は（慢性関節リウマチ、免疫媒介腎臓病、肝臓胆管美容、炎症性長疾患（ＩＢＤ）、乾癬および喘息のような）免疫−媒介炎症病、非−免疫−媒介炎症病、感染症、免疫不全病、新形成、および移植片拒絶などを含む。免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症性障害の治療で同定された。

免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症性障害の治療でここでは同定された。免疫関連病は、１つの場合には、免疫応答を抑制することによって治療できよう。免疫刺激性活性を有する分子を阻害する中和抗体の使用は、免疫−媒介および炎症病の治療で役に立つであろう。免疫応答を阻害する分子を利用して（直接的に、または抗体アゴニストの使用を介したタンパク質）、免疫応答を阻害し、かくして、免疫関連病を軽減することができる。

以下のテストを行った：
急性相応答：
テストの記載：細菌リポ多糖（ＬＰＳ）はエンドトキシンであり、それ自体は急性相応答および全身炎症の優れたインデューサーである。レベルＩＬＰＳマウスに、２６ゲージの針を用い、２００μＬ滅菌生理食塩水中の致死下用量のＬＰＳを腹腔内（ｉ．ｐ．）を注射した。該用量は注射から３時間後の１μｇ／ｇ体重でテストしたマウスの平均体重に基づくものであった；次いで、１００μＬの血液試料を採取し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ機器でＴＮＦａ、ＭＣＰ−１およびＩＬ−６の存在について分析した。

結果：
（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、ＬＰＳ攻撃に対して増大した平均血清ＩＬ−６、ＭＣＰ１およびＴＮＦ−アルファ応答を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：６／４／８
まとめると、ＬＰＳエンドトキシン攻撃は、ＰＲＯ１９４ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏したノックアウトマウスは、それらの野生型同腹子と比較した場合に、免疫学的異常を呈することを示した。特に、突然変異体マウスは、ＬＰＳエンドトキシンで攻撃した場合に、免疫学的応答（ＴＮＦ−アルファ、ＭＣＰ１およびＩＬ−６生産）を誘導する増大した能力を呈し、顕著なプロ炎症性応答を示す。ＩＬ−６はＢ細胞活性化のより遅い段階に寄与する。加えて、ＩＬ−６は、急性相応答および全身炎症を誘導するにおいて非常に重要な役割を果たす。これは、ＰＲＯ１９４ポリペプチドのアンタゴニスト（阻害剤）が免疫系を誘導し、この効果が、白血病および他のタイプの癌の場合における、およびＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者におけるような個体に有益であろう場合に用途を見出すであろうことを示唆する。従って、ＰＲＯ１９４ポリペプチドまたはそのアゴニストは免疫系を阻害するにおいて有益である。例えば、移植片拒絶または移植片−対−宿主病の場合において有害な免疫応答を阻害するための有用な候補であろう。
（ｃ）表現型分析：心臓学
心血管、生物学の領域においては、標的は、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール（高コレステロール血症）および上昇した血清トリグリセリド（高トリグリセリド血症）のような異脂肪血症、糖尿病および／または肥満の治療のためにここでは同定された。表現型テストは、血清コレステロールおよびトリグリセリドの測定を含んだ。

血中脂質
手法：４つの野生型、４つのヘテロ接合体および８つのホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。高いコレステロールレベルおよび増大したトリグリセリド血中レベルは、心血管病および／または糖尿病の発生において認められた危険因子である。血中脂質の測定は、血中脂質レベルを調節する生物学的スイッチの発見を容易とする。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管病に対する危険性を低下させるのに有用であろう。これらの血液化学テストでは、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて測定を記録した。

結果：
雄（−／−）ノックアウトマウスは、それらの野生型同腹子対象と比較した場合に、トリグリセリドレベルの有意な増加を示した。

前記でまとめたように、雄（−／−）マウスは、それらの性が合致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、顕著に増大したトリグリセリドレベルを呈した。しかしながら、インスリンレベルおよびグルコース耐性テストは共に異常を示さなかった。トリグリセリドレベルは有意に上昇したので、ＰＲＯ１９４遺伝子が欠乏した突然変異体マウスは心血管病に対するモデルとして供することができる。ＰＲＯ１９４ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は、トリグリセリドのような血中脂質を調節するにおいて有用であろう。かくして、ＰＲＯ１９４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、または高トリグリセリド血症および／または肥満のような心血管病の治療で有用であろう。
（ｄ）骨代謝および放射線学表現型分析
骨代謝の領域では、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、並びに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４つの野生型、４つのヘテロ接合体および８つのホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、容量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

マウスはアベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｌ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスをＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットホームに腹臥位置で乗せた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度（ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および合計組織質量（ＴＴＭ）を注目する領域（ＲＯＩ）［すなわち、全身、脊椎、および両大腿］で測定した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合に、増大した平均パーセント全体脂肪を呈した。加えて、増大した平均骨ミネラル密度は、雄ホモ接合性（−／−）およびヘテロ接合性（＋／−）マウス双方において呈された。雌（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、増加した平均骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、合計体骨ミネラル密度（ＢＭＤ）、大腿骨ミネラル密度および脊椎骨ミネラル密度を呈した。

分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ：
（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合に、増大した平均合計体脂肪、骨ミネラル密度、骨ミネラル含有量、ＢＭＣ／ＬＢＭ、および全身および大腿骨ミネラル密度を呈した。これらの結果は、ノックアウト突然変異体表現型が骨粗鬆症のような骨異常に関連することを示す。骨粗鬆症は、骨の異常な厚化および硬化、および骨の異常な脆性によって特徴付けられる疾患である。それ自体、ＰＲＯ１９４ポリペプチドまたはそのアゴニストは骨粗鬆症の治療で有益であろう。増大した骨ミネラル含有量および全身および大腿骨ミネラル密度に関連する表現型は、これらの効果を模倣する剤（例えば、ＰＲＯ１９４ポリペプチドのアンタゴニスト）が骨治癒で有用であろうことを示唆する。

（ｅ）発現プロフィール
発現プロフィール分析は、ＵＮＱ１６８が正常な小腸で上昇していることを示す。かくして、この遺伝子は腸における生来の免疫に関与するらしい。
４１．２ＤＮＡ３２２９８−１１３２（ＵＮＱ１９４）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ３２２９８−１１３２と命名された）ＰＲＯ２２０ポリペプチド（ＵＮＱ１９４）をコードする遺伝子を破壊した。これらの実験のための遺伝子特異的情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：Ｄ４９８０２またはアクセション：Ｄ４９８０２ＮＩＤ：ロイシン−リッチな反復タンパク質についての１３６９９０５ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓｍＲＮＡ；タンパク質参照：Ｐ９７８６０またはアクセション：Ｐ９７８６０ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＬＥＵＣＩＮＥ−ＲＩＣＨＲＥＰＥＡＴＰＲＯＴＥＩＮＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＦＲＡＧＭＥＮＴ）。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０１８３３４またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓロイシンリッチ反復ニューロン３（ＬＲＲＮ３）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９Ｈ３Ｗ５またはアクセション：Ｑ９Ｈ３Ｗ５ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＨＹＰＯＴＨＥＴＩＣＡＬ７９．４ＫＤＡＰＲＯＴＥＩＮ（ＮＥＵＲＯＮＡＬＬＥＵＣＩＮＥ−ＲＩＣＨＲＥＰＥＡＴＰＲＯＴＥＩＮ−３）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＬｒｒｎ３（ロイシンリッチ反復タンパク質、ニューロン）、ヒトＬＲＲｌ３（ロイシンリッチ反復ニューロン３）のオルソログである。別名はＮＬＲＲ−３；ＮＬＲＲ３；ＦＬＪ１１１２９；およびロイシンリッチ反復タンパク質、ニューロン３を含む。

ＬＲＲＮ３は細胞外セグメント、膜貫通セグメント、および短い細胞質Ｃ末端よりナルＩ型原型質膜タンパク質である。細胞外セグメントはシグナルペプチド、いくつかのロイシン−リッチ反復、免疫グロブリン−様ドメイン、およびフィブロネクチンＩＩＩ型ドメインから構成され；細胞質ドメインはクラトリン−媒介エンドサイトーシスモチーフを含有する。免疫グロブリン−様ドメインおよびフィブロネクチンＩＩＩ型ドメインは典型的にはタンパク質−タンパク質相互作用に関与するので、ＬＲＲＮ３は細胞接着またはシグナル変換分子として機能できる（Ｔａｎｉｇｕｃｈｉｅｔａｌ．，ＢｒａｉｎＲｅｓＭｏｌＢｒａｉｎＲｅｓ：３６（１）：４５−５２（１９９６）；Ｆｕｋａｍａｃｈｉｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７７（４６）；４３５４９−５２（２００２））。ＬＲＲＮ３発現プラスミドでトランスフェクトされた線維芽細胞においては、ＬＲＲＮ３はクラトリン−被覆小胞におけるＥＧＦの内部化を容易とするようであり、Ｒａｓ−ＭＡＰＫシグナリングを増強する（Ｆｕｋａｍａｃｈｉｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７７（４６）：４３５４９−５２（２００２））。ＬＲＲＮ３の発現は発生する脳において最高であり、負傷した脳においてアップレギュレートされ、タンパク質は神経系の発生および維持において役割を演じることができる（Ｔａｎｉｇｕｃｈｉｅｔａｌ．，ＢｒａｉｎＲｅｓＭｏｌＢｒａｉｎＲｅｓ；３６（１）：４５−５２（１９９６）；Ｉｓｈｉｉｅｔａｌ．，ＢｒａｉｎＲｅｓＭｏｌＢｒａｉｎＲｅｓ；４０（１）：１４８−５２（１９９６）；Ｆｕｋａｍａｃｈｉｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７７（４６）：４３５４９−５２（２００２））。

標的化または遺伝子捕獲突然変異は株１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ−由来胚幹（ＥＳ）細胞において生じる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１ヘテロ接合性動物を作成した。これらの子孫を相互に交配させて、Ｆ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫を得た。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物が得られて、Ｆ２マウスが作成される。レベルＩ表現型分析をこの世代からのマウスで行った。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝２．０８有意性＝０．３５２８７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．３２平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＤ４９８０２．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料のうち、脳、脊髄、目、脾臓、肝臓、および脂肪において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．２．１（配された遺伝子：ＤＮＡ３２２９８−１１３２（ＵＮＱ１９４）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ホモ接合性突然変異体マウスは、それらの性が一致した野生型同腹子および履歴平均と比較した場合、増大した平均パーセント体脂肪および脂肪質量ならびに異常な骨−関連測定を呈した。加えて、ホモ接合性突然変異体マウスは、それらの性が一致した野生型同腹こと比較した場合、増大したインスリン感受性と共に増強されたグルコース耐性を呈した。突然変異体マウスは、開放場テストにおいて減少した発生を呈し、これは鬱病性障害を示す。ホットプレートの結果は、増強された侵害受容応答または増大した感度を示唆する。標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。

（ｂ）骨代謝および放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的を、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、並びに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４つの野生型、４つのヘテロ接合体および８つのホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、容量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

骨ミクロＣＴ分析
手法：また、ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定を得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４つの野生型および８つのホモ接合性マウスから採取した。測定は、腰椎５小柱骨容量、小柱厚み、結合密度、および中間幹大腿合計骨領域および皮質厚みを採取した。μＣＴ４０スキャンは、骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。多数の骨を試料ホールダーに載せ、自動的にスキャンした。機器ソフトウェアを用いて、分析用の注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターを、１６マイクロメーター分解能で第５腰椎（ＬＶ５）において分析し、骨皮質パラメーターを、２０マイクロメーターの分解能にて大腿中間幹で分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄および雌（−／−）両マウスは、それらの性の一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、増大した平均パーセント合計体脂肪を呈した。雌（−／−）マウスは、増大した平均合計体脂肪も呈した。
ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均大腿中間幹皮質厚みおよび断面積を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ
ＤＥＸＡによって分析された（−／−）マウスは、これらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に、減少した骨測定を呈し、異常な骨障害を示唆する。加えて、雄および雌両突然変異体（−／−）マウスは、肥満表現型を示唆する体脂肪の増大した平均パーセンテージも呈した。これらの観察は、ＰＲＯ２２０ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏した突然変異体マウスは、脂肪の蓄積に関連する代謝障害のみならず肥満に関連し得る一般的代謝障害を反映する異常な骨測定に至ることを示唆する。これは、（増強されたグルコース耐性を示す）血液化学分析と組み合わされて、突然変異体マウスが、インスリンレベルの変化無しであるが、増強されたグルコース耐性によって示されるように、増大したインスリン感受性を呈した。かくして、ＰＲＯ２２０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、肥満または他の代謝病のような傷害の治療または予防で有用であろう。

（ｃ）表現型分析：代謝−血液化学／グルコース耐性
代謝の領域においては、標的を、糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は、血液グルコース測定を含む。マウスについて血液化学テストを実行するために、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いた。代謝の領域においては、糖尿病の治療のために標的を同定することができる。血液化学表現型は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するためのグルコース代謝テストを含む。異常なグルコース耐性テスト結果は、限定されるものではないが、以下の障害または疾患：糖尿病１型および２型、症候群Ｘ、種々の心血管病および／または肥満を示すことができる。

手法：２匹の野生型および４匹のホモ接合性マウスをこのアッセイで用いた。グルコース耐性テストは、哺乳動物における損なわれたグルコースホメオスタシスを規定するための標準である。グルコース耐性テストは、Ｌｉｆｅｓｃａｎグルコメーターを用いて行った。動物に、２０％溶液として送達されるＤ−グルコースを２ｇ／ｋｇで腹腔内注射し、注射から０、３０、６０および９０分後に血中グルコースレベルを測定した。分析したｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
グルコース耐性テスト：テストした突然変異体（−／−）マウスは、それらの性の一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合、増強したグルコース耐性を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ：
これらの実験において、突然変異体（−／−）マウスは、それらの性の一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、全ての３つのテストした間隔において、正常な絶食グルコースの存在下で増大したまたは増強されたグルコース耐性を示した。加えて、高インスリン血症は（−／−）マウスで明らかでなかった。かくして、ノックアウトマウスは、増大したインスリン感受性または損なわれたグルコースホメオスタシスの反対の表現型パターンを呈し、ＰＲＯ２２０ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子に対するそのようなアンタゴニスト（阻害剤）は、損なわれたグルコースホメオスタシスの治療で有用であろう。

（ｄ）表現型分析：ＣＮＳ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥過敏障害、脅迫障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボ有効化標的を同定することに焦点を当てた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、パニック発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

手法：
挙動スクリーニングを、４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。全ての挙動テストは、低下した生存性がより初期のテストを必要としないのであれば、１２および１６週齢の間で行った。これらのテストは開放場を含んで、不安、活動レベルおよび探求を測定した。

開放場テスト：
既知の薬物のいくつかの標的は開放場テストにおいて表現型を呈してきた。これらはセラトニントランスポーター、ドーパミントランスポーター（Ｇｉｒｏｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９６Ｆｅｂ１５；３７９（６５６６）：６０６−１２）、およびＧＡＢＡ受容体（Ｈｏｍａｎｉｃｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．１９９７Ａｐｒ１５；９４（８）：４１４３−８）のノックアウトを含む。自動開放場アッセイは、情緒状態に関連する変化および学習に関連する探求パターンに取り組むよう慣用化されている。まず、場（４０×４０ｃｍ）をマウスについて比較的大きいように選択し、かくして、探求に関連する運動活動の変化をピックアップするように設計した。加えて、鼻でつつくこと、探求に特異的に関連する活動を可能とするように床に４つの穴があった。いくつかの因子を設計して、このテストに関連する情緒状態を高めた。開放場テストは、マウスをテストし、なされた測定がチャンバーでの対象の最初の経験である第一の実験手法である。加えて、開放−場は明るく光をつけた。全てのこれらの因子は新規かつ開放されたスペースに関連する天然の不安を高めるであろう。探求活動のパターンおよび程度、および特に、中央−対−合計移動距離の比率は、次いで、不安または鬱病に対する感受性に関連する変化を識別することができるであろう。３つの異なるレベルにおける赤外線を備えた大きな活動舞台（４０ｃｍ×４０ｃｍ、ＡｃｃｕＳｃａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓからのＶｅｒｓａＭａｘ動物活動モニタリングシステム）を用いて、立ち上がり、穴のつつき、および運動活動を記録した。動物を中心に入れ、その活動を２０分間測定した。このテストからのデーターを４回の４分の間隔で分析した。合計移動距離（ｃｍ）、垂直運動の数（立ち上がり）、穴のつつきの数、および中心ないし合計距離比率を記録した。

新しい環境に対する通常の習慣的応答を呈するマウスについての性癖を、５分間隔にわたってのその水平方向運動活動を総じての変化を測定することによって変化した。経時的な活動の変化のこの計算された勾配は、移動した絶対的な合計距離よりはむしろ正規化されたものを用いて決定する。該傾きは、５回の間隔の各々における正規化された活動を通じての回帰曲線から決定した。通常の性癖は、負の傾きの値によって表される。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：５／４／８
結果：
開放場活動テストの間に、顕著な差が観察された。雄（−／−）マウスは、それらの性に一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合に、中心領域における増大したメジアン合計時間を呈し、これは、突然変異体における減少した不安様応答を示す。かくして、ノックアウトマウスは、鬱病性障害、統合失調症および／または双極性障害に合致する表現型を示した。かくして、ＰＲＯ２２０ポリペプチドおよびそのアゴニストは、鬱病性障害に関連する徴候の治療または軽減で有用であろう。

ホットプレートテスト
テストの記載：侵害受容についてのホットプレートテストは、各マウスを小さな包まれた５５℃のホットプレート上に置くことによって行われる。後足応答（舐める、振る、またはジャンプする）に対する潜伏を記録し、ホットプレート上の最大時間は３０秒であった。各動物は１回テストする。

結果：
突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子対照と比較した場合に、応答に対して低下した潜伏を呈した（例えば、増大した感受性の差）。これらは、増大した侵害受容応答を示唆する。
４１．３ＤＮＡ３４３９２−１１７０（ＵＮＱ２１５）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ３４３９２−１１７０と命名された）ＰＲＯ２４１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ２１５）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ０２５７１１またはアクセション：ＮＭ０２５７１１ＮＩＤ：ｇｉ１３３８５１６９ｒｅｆＮＭ０２５７１１．１Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓａｓｐｏｒｉｎ（Ａｓｐｎ）；タンパク質参照：Ｑ９９ＭＱ４またはアクセション：Ｑ９９ＭＱ４ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＡＳＰＯＲＩＮＰＲＥＣＵＲＳＯＲ。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０１７６８０またはアクセション：ＮＭ０１７６８０ＮＩＤ：ｇｉ１６５９６６７７ｒｅｆＮＭ０１７６８０．２Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓａｓｐｏｒｉｎ（ＬＲＲクラス１）（ＡＳＰＮ）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＢＸＮ１またはアクセション：Ｑ９ＢＸＮ１ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＡＳＰＯＲＩＮＰＲＥＣＵＲＳＯＲ。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＡｓｐｎ（アスポリン）、ヒトＡＳＰＮ（アスポリン［ＬＲＲクラス１］）のオルソログである。別名はＰＬＡＰ１、ＳＬＲＲ１Ｃ、４６３１４０１Ｇ０９Ｒｉｋ、ＦＬＪ２０１２９、小さなロイシンリッチのタンパク質１Ｃ、および歯周靭帯関連タンパク質１を含む。

ＡＳＰＮは、コラーゲンに結合し、細胞外マトリックスと会合する分泌されたロイシンリッチな反復−含有タンパク質である。ＡＳＰＮはシグナルペプチド、推定プロペプチド、４つのアミノ−末端システイン、１０のロイシンリッチな反復、および２つのＣ−末端システインよりなる。Ｎ末端はやはりユニークなアスパルテートリッチな領域を含有する。ＡＳＰＮは、骨格、軟骨および結合組織を発達させるにおいて主として発現される。比較的高いレベルのＡＳＰＮは変形性関節症の関節軟骨、大動脈、子宮、心臓および肝臓で見出される。ＡＳＰＮは、コラーゲンフィブリルの組織化または安定化を変調するにおいて、および歯周靭帯組織におけるミネラル化マトリックスの形成において役割を演じるであろう（Ｌｏｒｅｎｚｏｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７６（１５）：１２２０１−１１（２００１）；Ｈｅｎｒｙｅｔａｌ．，Ｊ，ＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７６（１５）：１２２１２−２１（２００１）；Ｙａｍａｄａｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ；２７５（２）：２７９−８６（２００１））。

標的化された、または遺伝子捕獲突然変異は株１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ−由来胚性幹（ＥＳ）細胞において生じる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１へテロ接合性動物を作成した。これらの子孫を相互に交配させてＦ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫を作成した。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合には、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物が得られ、Ｆ２マウスが作成される。レベルＩ表現型分析をこの世代からのマウスで行った。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．１２有意性＝０．９４０２２（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２３平均同腹子サイズ＝７
突然変異の型：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＡＦ３１６８２５．１）
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、肝臓および骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３人の成人組織試料で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．３．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ３４３９２−１１７０（ＵＮＱ２１５）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒトアスポリン（ＬＲＲクラス１）（ＡＳＰＮ）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、突然変異体（−／−）マウスにおいておそらくは増大したインスリン感受性と共に増大したグルコース耐性がもたらされた。雄および雌双方の（−／−）マウスは、減少した骨−関連測定を呈した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認した。

（ｂ）表現型分析：代謝−血液化学／グルコース代謝
代謝の領域においては、標的は、糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は血中グルコース測定を含む。マウスについて血液化学テストを行うために、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いた。代謝の領域においては、標的は、糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するためのグルコース耐性テストを含む。異常なグルコース耐性テスト結果は、限定されるものではないが、以下の障害または疾患を示すことができる：１型および２型糖尿病、症候群Ｘ、種々の心血管病および／または肥満。

手法：２匹の野生型および４匹のホモ接合性マウスのコホールトをこのアッセイで用いた。グルコース耐性テストは、哺乳動物において損なわれたグルコースホメオスタシスを規定するための標準である。グルコース耐性テストは、Ｌｉｆｅｓｃａｎグルコメーターを用いて行った。動物には、２０％溶液として送達されるＤ−グルコースを２ｇ／ｋｇにて腹腔内注射し、注射から０、３０、６０および９０分後に血中グルコースレベルを測定した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
グルコース耐性テスト：テストした雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合に、増強されたグルコース耐性を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ：
これらの実験においては、雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、テストした全ての３つの間隔において正常な絶食グルコースの存在下で増加したまたは増強されたグルコース耐性を示した。加えて、高インスリン血症は（−／−）マウスにおいて明らかでなかった。かくして、ノックアウトマウスは損なわれたグルコースホメオスタシスの反対表現型パターンを呈し、それ自体、ＰＲＯ２４１ポリペプチドに対するアンタゴニスト（阻害剤）、またはそのコーディング遺伝子は、損なわれたグルコースホメオスタシスおよび／または種々の心血管病の治療で有用であろう。

（ｃ）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、並びに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定した。これらは：
・大腿および脊椎についての骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

ＤＥＸＡ分析−テストの記載：
手法：４つの野生型、４つのホモ接合体および８つのホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、容量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

アベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｌ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によってマウスを麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスを、ＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位置に乗せた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および合計組織質量（ＴＴＭ）を注目する領域（ＲＯＩ）［すなわち、全身、脊椎、および双方の大腿］で測定した。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：また、ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定を得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから取った。測定は腰椎５小柱骨容量、小柱の厚み、結合密度および中央幹大腿合計骨領域および皮質の厚みを取った。μＣＴ４０スキャンは、骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンした。機器ソフトウェアを用いて、分析のために注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターを１６ミクロンの分解能において第五腰椎（ＬＶ５）において分析し、骨皮質パラメーターを２０μメーターの分解能にて大腿中間幹において分析した。

結果：
雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した同腹子対照と比較して、より低い全身用量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ＞１標準偏差）、全身骨ミネラル密度（１標準偏差）、および大腿骨ミネラル密度（１標準偏差）を呈した。雄（−／−）マウスは、野生型同腹子と比較して、減少した小柱骨容量、数および結合密度ならびに中間幹大腿合計面積を呈した。

これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが、骨折に導く減少した密度およびおそらくは脆性を伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様に、有意な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ２４１ポリペプチドまたはそのアゴニストは骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であるらしい。加えて、ＰＲＯ２４１ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために重要であろう；他方、ＰＲＯ２４１ポリペプチドに対するアンタゴニスト、またはそのコーディング遺伝子は、関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアを含めた異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。
４１．４ＤＮＡ２３３１８−１２１１（ＵＮＱ２４７）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ２３３１８−１２１１と命名される）ＰＲＯ２８４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ２４７）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ０２４２７３またはアクセション：ＮＭ０２４２７３ＮＩＤ：ｇｉ１３３５７２１５ｒｅｆＮＭ０２４２７３．１ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ４９３０４５５Ｃ２１遺伝子（４９３０４５５Ｃ２１Ｒｉｋ）；タンパク質参照：Ｑ９９ＬＳ９またはアクセション：Ｑ９９ＬＳ９ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。Ｍ５−１４タンパク質と同様。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０１６５８９またはアクセション：ＮＭ０１６５８９ＮＩＤ：ｇｉ７７０６１２４ｒｅｆＮＭ０１６５８９．１Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ染色体３オープンリーディングフレーム１（Ｃ３ｏｒｆ１）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＮＰＬ８またはアクセション：Ｑ９ＮＰＬ８ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。Ｃ３ｏｒｆ１仮定タンパク質。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ４９３０４５５Ｃ２１遺伝子、ヒトＣ３ｏｒｆ１（染色体３オープンリーディングフレーム１）のオルソログである。別名は２８１００２１Ｃ２１ＲｉｋおよびＭ５−１４タンパク質を含む。

Ｃ３ｏｒｆ１はＴｉｍ１７／Ｔｉｍ２２／Ｔｉｍ２３ファミリードメインよりなる仮定タンパク質トランスロカーゼサブユニットである。これらのドメインは内部ミトコンドリアタンパク質Ｔｉｍ１７、Ｔｉｍ２２、およびＴｉｍ２３で見出される。これらのタンパク質は、ミトコンドリア外側膜（Ｔｏｍ）のプレ−タンパク質トランスロカーゼと共に、細胞質からのタンパク質がそこを通ってミトコンドリアマトリックスに進入するトランスロカーゼチャネルを形成する。ミトコンドリアマトリックスタンパク質は、この複合体（ＰｆａｍアクセションＰＦ０２４６６）と会合したＡＴＰａｓｅを提供する。Ｃ３ｏｒｆ１発現は広く分布するが、特に、骨格および心筋で高い（Ｅｓｃａｒｃｅｌｌｅｒｅｔａｌ．，ＤＮＡＳｅｑ；１１（３−４）：３３５−８（２０００））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝２０．８４有意性＝０．００００３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．００平均同腹子サイズ＝６
突然変異の型：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入は、コーディングエクソン５および６の間のイントロンで起こった（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２４２７３．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料で検出した。
致死性のため、転写体発現分析は行わなかった。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認した。
ＵＮＱ２４７は初期発生の間に普遍的に発現される。
４１．４．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ２３３１８−１２１１（ＵＮＱ２４７）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト染色体３オープンリーディングフレーム１（Ｃ３ｏｒｆ１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）突然変異体の致死がもたらされた。（＋／−）マウスは減少した骨−関連測定を呈した。

致死性の胚発生異常に関連する議論：
ノックアウトマウスにおける胚致死性は、通常、限定されるものではないが、神経変性病、血管新生疾患、炎症病を含めた種々の深刻な発生の問題に由来し、あるいは、ここに、該遺伝子／タンパク質は多くの細胞型において基本的な細胞シグナリングプロセスで重要な役割を有する。加えて、胚致死は潜在的癌モデルとして有用である。同様に、対応するヘテロ接合性（＋／−）突然変異体動物は、それらが、ノックアウトされた遺伝子の機能に関して高度に情報的な手掛かりを明らかにする表現型および／または病理学報告を呈する場合に特に有用である。例えば、ＥＰＯノックアウト動物は、胚致死であったが、胚についての病理学報告はＲＢＣのかなりの欠如を示した。

（ｂ）病理学
顕微鏡的観察：胚致死性のためテストしなかった。１２．５日に、５４の観察された胚があった：３０の（＋／−）胚、１３の（＋／＋）胚、１０の再吸収モル、および１の未決定。致死は、１２．５胚日前に起こる。

遺伝子の発現：ＬａｃＺ活性は免疫組織化学分析によって組織のパネルで検出されなかった。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：１／２／０
（ｃ）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、並びに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定した。テストは：
・大腿および脊椎についての骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感受性の測定のためのミクロＣＴ
を含んだ。

Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４つの野生型および４つのヘテロ接合体のコホールトをこのアッセイでテストしたデュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔された動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、容量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

マウスはアベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｇ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスを、ＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位置で乗せた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度（ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および全組織質量（ＴＴＭ）を注目する領域（ＲＯＩ）［すなわち、全身、脊椎および両方の大腿］測定した。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定を得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４匹の野生型および８匹のヘテロ接合性マウスのコホールトから取った。測定は、腰椎５小柱骨容量、小柱の厚み、結合密度および中間幹大腿全骨面積および皮質の厚みを取った。μＣＴ４０スキャンは骨の質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンした。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメートル分解能において第五腰椎（ＬＶ５）において分析し、骨皮質パラメーターは２０μメートルの分解能において大腿中間幹において分析した。

結果：
雄へテロ接合性（＋／−）マウスは、野生型同腹子と比較した場合に、減少した骨ミネラル含有量（１標準偏差）および骨ミネラル密度（１標準偏差）測定を有した。また、雌へテロ接合体（＋／−）は、野生型同腹子と比較して、減少した骨ミネラル含有量、ＤＭＣ／ＬＢＭ、全身骨ミネラル密度（１標準偏差）、大腿骨ミネラル密度（１標準偏差）および脊椎骨ミネラル密度（１標準偏差）を示した。雄ヘテロ接合体（＋／−）は、性が一致した（＋／＋）同腹子と比較して、減少した小柱骨容量、数、厚み、および結合密度を示した。中間幹大腿皮質厚みもまた野生型同腹子と比較して減少した。かくして、ＰＲＯ２８４ポリペプチドをコードする遺伝子は正常な骨発生で必須に違いない。
４１．５ＤＮＡ４０９８１−１２３４（ＵＮＱ２９２）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ４０９８１−１２３４と命名された）ＰＲＯ３３１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ２９２）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ１７８７２５またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ６４３０５５６Ｃ１０遺伝子（６４３０５５６Ｃ１０Ｒｉｋ）；タンパク質参照：Ｑ８ＢＧＨ８またはアクセション：Ｑ８ＢＧＨ８ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。脳腫瘍関連タンパク質ＮＡＧ１４とわずかに同様；ヒト遺伝子配列参照：ＸＭ０４５２７１またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ＫＩＡＡ１５８０タンパク質ＫＩＡＡ１５８０）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＨＣＪ２またはアクセション：Ｑ９ＨＣＪ２ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＫＩＡＡ１５８０ＰＲＯＴＥＩＮ（ＦＲＡＧＭＥＮＴ）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ６４３０５５６Ｃ１０遺伝子、ヒトＮＧＬ−１（ネトリン−Ｇ１リガンド）のオルソログである。別名はＮＧＬ−１、ｍＫＩＡＡ１５８０、ネトリン−Ｇ１リガンド、およびＫＩＡＡ１５８０を含む。

ＮＧＬ−１は、軸索ガイダンス共−受容体ネトリン−Ｇ１、視床皮質で発現される脂質係留タンパク質に対するリガンドとして機能する線条体および皮質ニューロンで発現されるＩ型原形質膜タンパク質である。ＮＧＬ−１はシグナルペプチド、ロイシンリッチの反復、免疫グロブリン−様ドメイン、膜貫通セグメントおよび短い細胞質Ｃ末端よりなる。ＮＧＬ−１はそのロイシンリッチな反復を介してネトリン−Ｇ１と相互作用する。さらに、Ｃ−末端細胞質セグメントは細胞内シグナル変換タンパク質と相互作用できる。ＮＧＬ−１は、発生の間に線条および大脳皮質に対する視床皮質軸索の成長を促進するにおいて役割を演じる（Ｌｉｎｅｔａｌ．，ＮａｔＮｅｕｒｏｓｃｉ；６（１２）：１２７０−６（２００３））。

標的化された、または遺伝子捕獲突然変異は株１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ−由来胚性幹（ＥＳ）細胞において生じる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１へテロ接合性動物を得た。これらの子孫を相互に交配させてＦ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫を得た。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合、Ｆ１へテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物が得られ、Ｆ２マウスを得た。レベルＩ表現型分析はこの世代からのマウスで行った。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．６１有意性＝０．７３６０５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹子サイズ＝９
突然変異の型：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＡＫ０４８３２２．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、肺、骨格筋および骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料で検出した。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．５．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ４０９８１−１２３４（ＵＮＱ２９２）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒトネトリン−Ｇ１リガンド（ＮＧＬ−１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、ＬＰＳ攻撃に対する増大したＩＬ−６および平均血清ＴＮＦ−アルファ応答をもたらした。加えて、突然変異体（−／−）マウスは学習された無益の減少を呈した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認した。

（ｂ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、正常な生理学において、傷または負傷に応答するのに臨界的であり、傷または負傷からの修復を開始し、外来性生物に対する先天的および獲得防御を備えるかなり複雑でしばしば複数の相互に連結した生物学的経路の発現または結果である。病気または病理は、これらの正常な生理学的経路が、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己異端に対する反応として、またはこれらの組合せとして、応答の強度に直接的に関連して、さらなる傷または負傷を引き起こす場合に起こる。

これらの病気の発生は、しばしば、多工程経路を含み、しばしば、多数の異なる生物学的系／経路を含むが、これらの経路の１以上における臨界点での介入は軽減または治療効果を有することができる。治療的介入は、有害なプロセス／経路の拮抗作用または有益なプロセス／経路の刺激いずれかによって起こり得る。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は哺乳動物免疫応答の重要な構成要素である。Ｔ細胞は、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己−分子に関連する抗原を認識する。抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面にＭＨＣ分子と共に提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対する健康の脅威を与えるこれらの変化した細胞を排除する。Ｔ細胞はヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞を含む。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体の認識に続いてかなり増殖する。ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、および免疫応答に参加する種々の他の細胞の活性化において中枢的な役割を演じる種々のサイトカイン、すなわち、リンホカインを分泌する。

多くの免疫応答において、炎症細胞は負傷または感染の部位に浸潤する。移動する細胞は、犯された組織の組織学的調査によって判断できるように、好中球、好酸球、単球またはリンパ球性であり得る。ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．ＪｏｈｎＥ．Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９４，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．
多くの免疫関連病が知られており、広範に研究されてきた。そのような病気は（慢性関節リュウマチ、免疫媒介腎臓病、肝臓胆管病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬および喘息のような）免疫−媒介炎症病、非−免疫−媒介炎症病、感染症、免疫不全病、新形成および移植片拒絶などを含む。免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症障害の治療のために同定した。

免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症障害の治療のためにここでは同定された。免疫関連病は、１つの例において、免疫応答を抑制することによって治療することができよう。免疫刺激性活性を有する分子を阻害する中和抗体の使用は、免疫−媒介および炎症病の治療で有益であろう。免疫応答を阻害する分子を利用して（直接的に、または抗体アゴニストの使用を介するタンパク質）、免疫応答を阻害し、かくして、免疫関連病を軽減することができる。

以下のテストを行った：
急性相応答：
テストの記載：細菌リポ多糖（ＬＰＳ）はエンドトキシンであり、それ自体は、急性相応答および全身炎症の優れたインデューサーである。レベルＩＬＰＳマウスに、２６ゲージ針を用い、致死下用量の２００μＬ滅菌生理食塩水中のＬＰＳを腹腔内（ｉ．ｐ．）注射した。該用量は、注射から３時間後に１μｇ／ｇ体重でテストしたマウスの平均体重に基づき；ついで、１００ｕｌの血液試料を採取し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ機器にてＴＮＦａ、ＭＣＰ−１およびＩＬ−６の存在について分析した。

結果（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、ＬＰＳ攻撃に対して増大した平均血清ＩＬ−６およびＴＮＦ−アルファ応答を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：６／４／８
まとめると、ＬＰＳエンドトキシン攻撃は、ＰＲＯ３３１ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏したノックアウトマウスは、それらの野生型同腹子と比較した場合に、免疫学的異常を呈することを示した。特に、突然変異体マウスは、ＬＰＳエンドトキシンで攻撃した場合に、免疫学的応答（ＴＮＦ−アルファおよびＩＬ−６生産）を誘導する増大した能力を呈し、これは、顕著なプロ炎症性応答を示す。ＩＬ−６は、Ｂ細胞の活性化のより遅い段階に寄与する。加えて、ＩＬ−６は、急性相応答および全身性炎症を誘導するにおいて臨界的な役割を演じる。これは、ＰＲＯ３３１ポリペプチドのアンタゴニスト（阻害剤）が免疫系を刺激し、この効果が白血病、および他のタイプの癌、およびＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者の場合におけるように、個体に対して有益であろうことを示唆する。従って、ＰＲＯ３３１ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫応答を阻害するにおいて有用であり、例えば、移植片拒絶または移植片−対−宿主病の場合において、有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であろう。

（ｃ）表現型分析：ＣＮＳ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥過敏障害、脅迫障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボ有効化標的を同定することに焦点を当てた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、パニック発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

手法：
挙動スクリーニングは、４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。全ての挙動テストは、低下した生存性がより早いテストを必要とするのでなければ、１２および１６週齢の間で行った。

尾懸濁液テスト：
尾懸濁液テストは、げっ歯類において鬱病−様挙動についてのモデルとして開発された手法である。この特別な状況においては、マウスをその尾を６分間懸濁させ、応答において、マウスはその位置から逃げようともがく。ある時間の後、マウスのもがきは減少し、これは学習された無益パラディグムのタイプとして解釈される。無効なデータ（すなわち、テスト期間における持ち上げたその尾）の動物は分析から排除する。

結果：
（−／−）マウスは、尾懸濁液テストの間に増大した応答時間を示した。これらの結果は、学習した無益の減少を示す。かくして、突然変異体マウスは鬱病に関連する表現型を示した。
４１．６ＤＮＡ４４１９２−１２４６（ＵＮＱ３１１）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ４４１９２−１２４６と命名される）ＰＲＯ３５４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ３１１）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿１７２４７１またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓアルファ間（グロブリン）阻害剤Ｈ５（Ｉｔｉｈ５）；タンパク質参照：Ｑ８０ＶＧ０またはアクセション：Ｑ８０ＶＧ０ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。アルファトリプシン間阻害剤重鎖５；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０３０５６９またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓアルファ間（グロブリン）阻害剤Ｈ５（ＩＴＩＨ５）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ８６ＵＸ２またはアクセション：Ｑ８６ＵＸ２ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。アルファトリプシン間阻害剤重鎖５。

注目するマウス遺伝子はＩｔｉｈ５（アルファ間（グロブリン）阻害剤Ｈ５）、ヒトＩＴＩＨ５のオルソログである。別名はＥ１３０１０６Ｂ０２、５４３０４０８Ｍ０１Ｒｉｋ、およびアルファトリプシン間阻害剤重鎖前駆体５を含む。

ＩＴＩＨ５は、アルファ−トリプシン間阻害剤（ＩＴＩ）ファミリーの分泌プロテアーゼ阻害剤の重鎖サブユニットである。ＩＴＩホロタンパク質は、典型的には、軽鎖および重鎖の可変セットよりなる。ＩＴＩＨ５はシクナルペプチド、ｖｏｎＷｉｌｌｅｂｒａｎｄ因子Ａ型ドメイン、およびＩＴＩ重鎖Ｃ−末端よりなる。ｖｏｎＷｉｌｌｅｂｒａｎｄ因子Ａ型ドメインは、典型的には、細胞外タンパク質で見出され、金属−依存性接着部位を介して細胞外マトリックスへの接着を媒介する（ＳＭＡＲＴアクセションＳＭ００３２７）。ＩＴＩ重鎖Ｃ−末端ドメインはＩＴＩの重鎖サブユニットで見出される。重鎖サブユニットは、それ自体、トリプシンプロテアーゼ阻害活性は有しない。むしろ、それはヒアルロン酸と相互作用し、細胞外マトリックスの安定性を促進する（Ｓａｌｉｅｒｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＪ；３１５（ＰＴ１）：１−９（１９９６））。ＩＴＩＨ５の喪失は、乳癌の発生において役割を演じることができる（Ｈｉｍｍｅｌｆａｒｂｅｔａｌ．，；ＣａｎｃｅｒＬｅｔｔ；２０４（１）：６９−７７（２００４））。

標的化された、または遺伝子捕獲突然変異は株１２９５ｖＥｖ^ＢＲＤ−由来胚性幹（ＥＳ）細胞で生じる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１へテロ接合性動物を得た。それらの子孫を相互に交配させてＦ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫を得た。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合には、Ｆ１へテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖＢＮ^ＢＲＤ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物が得られ、Ｆ２マウスを得る。レベルＩ表現型分析は、この世代からのマウスで行った。

ＣＨＩ−Ｓｑ＝１．８９有意性０．３８７７６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２９平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ＿１７２４７１．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人の組織試料で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．６．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ４４１９２−１２４６）ＵＮＱ３１１）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒトアルファ間（グロブリン）阻害剤Ｈ５（ＩＴＩＨ５）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスの末梢血液中のＣＤ４細胞の増大した平均パーセンテージがもたらされた。雄（−／−）マウスは精巣変性を呈したが、雄受精能の徴候はなかった。雌（−／−）マウスは、有意に増大した尿酸レベルを示した。また、ノックアウトマウスは、脾臓および骨髄双方においてヘモシデリン色素の増大した量を示した。この遺伝子は、発現が、マイクロアレイ分析によって測定して侵入的胸管癌腫が一致して減少する見地から興味深い（データは示さず）。精巣変性は、腫瘍発生における役割を示唆する。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）病理学
顕微鏡観察：３匹の雄（−／−）マウスは、精巣変性に特徴的な温和な病巣を呈した。分析のために入手された６匹の（−／−）マウスのうち、２匹の（−／−）マウス（Ｍ−１０９およびＦ−１３４）は、脾臓および骨髄の双方においてヘモシデリン色素の増大した量を呈し、さらなる２匹の（−／−）マウス（Ｆ−７４およびＦ−１１１）は、脾臓においてのみ増大したヘモシデリンを呈した。１匹のノックアウトマウス（Ｍ−１１３）は、
多病巣急性および肉芽腫性炎症を呈した。

遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学分析によって組織のパネルでは検出されなかった。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：０／１／６
（ｃ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、通常の生理学においては、傷または負傷に対する応答に臨界的であり、傷または負傷からの修復を開始させ、および外来性生物に対する生来のおよび獲得した防御を備えるかなり複雑で、しばしば複数の相互連結生物学的経路の発現または結果である。病気または病理は、これらの正常な生理学的経路が、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己に対する反応として、またはこれらの組合せとして、応答の強度に直接的に関連してさらなる傷または負傷を引き起こす場合に起こる。

これらの病気の発生は、しばしば、多工程経路を含み、かつしばしば、複数の異なる生物学的系／経路を含むが、これらの経路の１以上における臨界点での介入は軽減または治療効果を有することができる。治療的介入は、有害なプロセス／経路の拮抗作用または有益なプロセス／経路の刺激いずれかによって起こり得る。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物免疫応答の重要な構成要素である。Ｔ細胞は、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己−分子に関連する抗原を認識する。抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面にＭＨＣ分子とともに提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対する健康の脅威をもたらすこれらの変化した細胞を排除する。Ｔ細胞はヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞を含む。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体の認識に続いてかなり増殖する。また、ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、および免疫応答に参加する種々の他の細胞の活性化において中枢的な役割を演じる種々なサイトカイン、すなわち、リンホカインを分泌する。

多くの免疫応答においては、炎症細胞は負傷または感染の部位に浸潤する。移動する細胞は、侵された組織の組織学的調査によって判断できるように、好中球、好酸球、単球またはリンパ球性であり得る。ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．ＪｏｈｎＥ．Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９４，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．
多くの免疫関連病が知られており、かなり研究されてきた。そのような病気は（慢性関節リウマチ、免疫媒介腎臓病、肝臓胆管病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬および喘息のような）免疫−媒介炎症病、非免疫―媒介炎症病、感染症、免疫不全病、新形成、および移植片拒絶などを含む。免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症障害の治療のために同定された。

免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症性障害の治療のためにここでは同定された。免疫関連病は、１つの例において、免疫応答を抑制することによって治療されよう。免疫刺激活性を有する分子を阻害する中和抗体の使用は、免疫−媒介および炎症性疾患の治療で有益であろう。免疫応答を阻害する分子を利用して（直接的に、または抗体アゴリストの使用を介するタンパク質）、免疫応答を阻害し、かくして、免疫関連病を軽減することができる。

以下のテストを行った：
蛍光−活性化細胞−ソーティング（ＦＡＣＳ）分析
手法：
Ｔリンパ球を評価するためのＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞受容体、Ｂリンパ球のためのＣＤ１９、および白血球マーカーとしてのＣＤ４５、およびナチュラルキラー細胞のための汎ＮＫを含めた、末梢血液からの免疫細胞組成のＦＡＣＳ分析を行った。該ＦＡＣＳ分析は２匹の野生型および６匹のホモ接合性マウスで行い、胸腺、骨髄およびリンパ節に由来する細胞を含んだ。

これらの実験において、分析された細胞は胸腺、末梢血液、脾臓、骨髄およびリンパ節から単離した。フローサイトメトリーは、単核細胞集団におけるＣＤ４およびＣＤ８陽性Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞および単球の相対的割合を決定するように設計した。Ｂｅｃｔｏｎ−ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ３−レーザーＦＡＣＳマシーンを用いて、免疫状態を評価した。表現型アッセイおよびスクリーニングについては、このマシーンは、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比率に加えて、ＣＤ４＋／ＣＤ８−、ＣＤ８＋／ＣＤ４−、ＮＫ、Ｂ細胞および単球の数を記録する。

単核細胞プロフィールは、６系統特異的抗体：ＣＤ４５ＰｅｒＣＰ、抗−ＴＣＲｂＡＰＣ、ＣＤ４ＰＥ、ＣＤ８ＦＩＴＣ、汎−ＮＫＰＥ、およびＣＤ１９ＦＩＴＣのパネルで、各マウスからの溶解された末梢血液の単一試料を染色することによって誘導された。２つのＦＩＴＣおよびＰＥ標識抗体は相互に排除する細胞型を染色する。試料は、ＣｅｌｌＱｕｅｓｔｓｏｆｔｗａｒｅを備えたＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを用いて分析した。

結果：
ＦＡＣＳ：（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、ＣＤ４細胞の増大した平均パーセンテージを呈した。かくして、ＰＲＯ３５４ポリペプチドをコードする遺伝子のノックアウトは、Ｔ細胞集団の増加を引き起こす。これらの観察から、ＰＲＯ３５４ポリペプチド、またはＰＲＯ３５４をコードする遺伝子は、Ｔ細胞増殖の負のレギュレーターとして作用するように見える。かくして、ＰＲＯ３５４ポリペプチド、またはそのアゴニストは、顕著なＴ−細胞増殖が自己免疫疾患（例えば、慢性関節リウマチ患者）で起こるように存在する場合に、Ｔ−細胞増殖の負のレギュレーターとして有益であろう。加えて、ＰＲＯ３５４ポリペプチドは、皮膚移植片拒絶を妨げるに置いて特に有用であろう。

（ｄ）血液化学
テストの記載：ＬｅｘｉｃｏｎＧｅｎｅｔｉｃｓはマウスについて血液化学テストを行うためのその臨床的設定においてＣＯＢＡＳＩｎｔｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いる。

結果：
雌（−／−）マウスは、野生型同腹子と比較して尿酸レベルの有意な減少を示した。腎臓が損なわれた他の徴候は観察されなかった。
４１．７ＤＮＡ３９５１８−１２４７（ＵＮＱ３１２）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ３９５１８−１２４７と命名された）ＰＲＯ３５５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ３１２）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿０１８７７０またはアクセション：ＮＭ＿０１８７７０ＮＩＤ：ｇｉ９０５５１７３ｒｅｆＮＭ＿０１８７７０．１Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ免疫グロブリンスーパーファミリー、メンバー４（Ｉｇｓｆ４）；タンパク質参照：Ｑ９ＣＲＹ３またはアクセション：Ｑ９ＣＲＹ３ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。３１００００１Ｉ０８ＲＩＫＰＲＯＴＥＩＮ（ＦＲＡＧＭＥＮＴ）。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０１４３３３またはアクセション：ＮＭ＿０１４３３３ＮＩＤ：ｇｉ２２０９５３４６ｒｅｆＮＭ＿０１４３３３．２Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ免疫グロブリンスーパーファミリー、メンバー４（ＩＧＳＦ４）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＢＹ６７またはアクセション：Ｑ９ＢＹ６７ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＮＥＣＴＩＮ−ＬＩＫＥＰＲＯＴＥＩＮ２。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＩｇｓｆ４（免疫グロブリンスーパーファミリー、メンバー４）ヒトＩＧＳＦ４のオルソログである。別名はＲＡ１７５Ａ、ＲＡ１７５Ｂ、ＲＡ１７５Ｃ、ＲＡ１７５Ｎ、ＳｇＩＧＳＦ、ＳｙｎＣａｍ、ＢＬ２、ＳＴ１７、ＮＥＣＬ２、ＴＳＬＣ１、ＳＹＮＣＡＭ、ネクチン−様タンパク質２、２９０００７３Ｇ０６Ｒｉｋ；３１００００１Ｉ０８Ｒｉｋ、免疫スーパーファミリータンパク質Ｂ１２、および肺癌１における主要サプレッサーを含む。

ＩＧＳＦ４は、肺上皮細胞における細胞−細胞境界に局所化する免疫グロブリンスーパーファミリーに属する膜糖タンパク質である（Ｉｔｏｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ；６３（１９）：６３２０−６（２００３））。ＩＧＳＦ４は細胞接着に参画し、非−小細胞肺および食道扁平細胞癌腫において腫瘍サプレッサーとして作用する（Ｆｕｋｕｈａｒａｅｔａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ；２２（４０）：６１６０−５（２００３）；Ｗａｔａｂｅｅｔａｌ．，ＨｉｓｔｏｌＨｉｓｔｏｐａｔｈｏｌ；１８（４）；１３２１−９（２００３））。ＩＧＳＦ４の細胞質領域はその腫瘍サプレッサー活性に対して臨界的であると考えられるタンパク質モチーフを含有する（Ｍａｏｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ；６３（２２）：７９７９−８５（２００３））。ＩＳＧＦ４はＭＰＰ３と会合し、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ腫瘍サプレッサーＤｉｓｃｓｌａｒｇｅ（Ｄ１ｇ）のヒトホモログ、おそらくはＩＧＳＦ４およびＭＭＰ３は同一の細胞−細胞の相互作用に関与し、その破壊は悪性疾患に導くであろう（Ｆｕｋｕｈａｒａｅｔａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ；２３（２）：６２９（２００４），Ｆｕｋｕｈａｒａｅｔａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ；２２（４０）：６１６０−５（２００３））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝１．４６有意性＝０．４８１５４（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１９平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルスの挿入は、コーディングエクソン１および２の間で起こった（アクセション：ＡＦ４３４６６３）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は胚性幹（ＥＳ）細胞において、およびＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
ＲＴ−ＰＣＲ分析は、転写体は心臓において存在せず、分析された（−／−）マウス（Ｍ−１７９）において脳で低下したことを明らかにした。
４１．７．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ３９５１８−１２４７（ＵＮＱ３１２）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒト免疫グロブリンスーパーファミリー、メンバー４（ＩＧＳＦ４）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおける増大した探求応答が増大した。（−／−）はＬＰＳ攻撃に対する増大したＴＮＦ−アルファ応答も呈した。突然変異体（−／−）マウスは、成長の遅延および異常な骨測定の徴候も示した。雄（−／−）マウスは増大した平均血清トリグリセリドレベルを呈した。転写体は心臓では存在せず、ＲＴ−ＰＣＲによって測定されたように脳で低下した。

（ｂ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、正常な生理学においては、傷または負傷に対する応答で臨界的であり、傷または負傷からの修復を開始させ、外来性生物に対する生来のおよび獲得された防御を備えるかなり複雑で、しばしば複数の相互連結生物学的経路の発現または結果である。病気または病理は、これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に関連して直接的に、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己に対する反応として、またはこれらの組合せとしてのいずれかでさらなる傷または負傷を引き起こす場合に起こる。

これらの病気の発生は、しばしば、多工程経路および、しばしば、複数の異なる生物学的系／経路を含むが、これらの経路の１以上における臨界点での介入は、軽減または治療効果を有することができる。治療的介入は、有害なプロセス／経路の拮抗作用、または有益なプロセス／経路の刺激によって起こり得る。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は哺乳動物免疫応答の重要な構成要素である。Ｔ細胞は、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己−分子に関連する抗原を認識する。該抗原は抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面にＭＨＣ分子とともに提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対する健康脅威をもたらすこれらの変化した細胞を排除する。Ｔ細胞はヘルパーＴ細胞および細胞傷害Ｔ細胞を含む。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原―ＭＨＣ複合体の認識に続いてかなり増殖する。ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、および免疫応答に参加する種々の他の細胞の活性化において中枢的な役割を演じる種々のサイトカイン、すなわち、リンホカインを分泌する。

多くの免疫応答においては、炎症細胞は負傷または乾癬の部位に浸潤する。移動する細胞は、侵された組織の組織学的調査によって判断できるように、好中球、好酸球、単球またはリンパ球性であり得る。ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．ＪｏｈｎＥ．Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９４，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．
多くの免疫関連病が知られており、かなり研究されてきた。そのような病気は（慢性関節リウマチ、免疫媒介腎臓病、肝臓胆管病、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、乾癬および喘息のような）免疫−媒介炎症病、非免疫―媒介炎症病、感染症、免疫不全病、新形成、および移植片拒絶などを含む。免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症障害の治療のために同定された。

以下のテストを行った：
急性相応答：
テストの記載：細菌リポ多糖（ＬＰＳ）はエンドトキシンであって、それ自体は、急性相応答および全身炎症の優れたインデューサーである。レベルＩＬＰＳマウスに、２６ゲージ針を用い、２００μＬ滅菌生理食塩水中の致死下用量のＬＰＳを腹腔内（ｉ．ｐ．）注射した。該用量は注射から３時間後の１μｇ／ｇ体重でテストしたマウスの平均体重に基づき；次いで、１００ｕｌ血液試料を採取し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ機器でＴＮＦａ、ＭＣＰ−１、およびＩＬ−６の存在について分析した。

結果：
（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、ＬＰＳ攻撃に対する増大した平均血清ＴＮＦ−アルファ応答を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：８／４／８
まとめると、ＬＰＳエンドトキシン攻撃は、ＰＲＯ３５５ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏したノックアウトマウスは、それらの野生型同腹子と比較した場合に、免疫学的異常を呈することを示した。特に、突然変異体マウスは、ＬＰＳエンドトキシンで攻撃した場合に、免疫学的応答（ＴＮＦ−アルファ生産）を誘導する増大した能力を呈し、これは、顕著なプロ炎症性応答を示す。これは、ＰＲＯ３５５ポリペプチドのアンタゴニスト（阻害剤）は免疫系を刺激し、白血病、および他のタイプの癌、ならびにＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者の場合におけるように個体に対してこの効果が有益であろう場合に用途を見出すであろうことを示唆する。従って、ＰＲＯ３５５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、免疫応答を阻害するにおいて有用であり、例えば、移植片拒絶または移植片―対−宿主病の場合において、有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であろう。

（ｃ）表現型分析：ＣＮＣ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫障害、精神分裂症、認識障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボで確認された標的を同定するのに焦点をあてた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、恐慌発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

手法：
挙動スクリーニングは４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。全ての挙動テストは、低下した生存性がより早いテストを必要とするのでなければ１２および１６週齢の間で行った。これらのテストは不安、活動レベルおよび探求を測定するための開放場を含むものであった。

開放場テスト：
既知の薬物のいくつかの標的は開放場テストにおいて表現型を呈してきた。これらはセラトニントランスポーター、ドーパミントランスポーター（Ｇｉｒｏｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９６Ｆｅｂ１５；３７９（６５６６）：６０６−１２）、およびＧＡＢＡ受容体（Ｈｏｍａｎｉｃｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．１９９７Ａｐｒ１５；９４（８）：４１４３−８）のノックアウトを含む。自動開放場アッセイは、情緒状態に関連する変化および学習に関連する探求パターンに取り組むよう慣用化されている。まず、場（４０×４０ｃｍ）をマウスについて比較的大きいように選択し、かくして、探求に関連する運動活動の変化をピックアップするように設計した。加えて、鼻でつつくこと、探求に特異的に関連する活動を可能とするように床に４つの穴があった。いくつかの因子を設計して、このテストに関連する情緒状態を高めた。開放場テストは、マウスをテストし、なされた測定がチャンバーでの対象の最初の経験である第一の実験手法である。加えて、開放−場は明るく光をつけた。全てのこれらの因子は新規かつ開放されたスペースに関連する天然の不安を高めるであろう。探求活動のパターンおよび程度、および特に、中央−対−合計移動距離の比率は、次いで、不安または鬱病に対する感受性に関連する変化を識別することができるであろう。３つの異なるレベルにおける赤外線を備えた大きな活動舞台（４０ｃｍ×４０ｃｍ、ＡｃｃｕＳｃａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓからのＶｅｒｓａＭａｘ動物活動モニタリングシステム）を用いて、立ち上がり、穴のつつき、および運動活動を記録した。動物を中心に入れ、その活動を２０分間測定した。このテストからのデータを５回の４分の間隔で分析した。合計移動距離（ｃｍ）、垂直運動の数（立ち上がり）、穴のつつきの数、および中心ないし合計距離比率を記録した。

新しい環境に対する通常の習慣的応答を呈するマウスについての性癖を、５回の間隔にわたってのその水平方向運動活動を総じての変化を測定することによって変化した。経時的な活動の変化のこの計算された勾配は、移動した絶対的な合計距離よりはむしろ正規化されたものを用いて決定する。該傾きは、５回の間隔の各々における正規化された活動を通じての回帰曲線から決定した。通常の性癖は、負の傾きの値によって表される。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：５／４／８
結果：
顕著な差が開放場活動テストの間に観察された。（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合に、増加した移動合計距離および立ち上がり活性を呈し、これは、突然変異体における新しい環境に対する増大した探求応答を示す。かくして、ノックアウトマウスは過剰活動に合致する表現型を示した。かくして、ＰＲＯ３５５ポリペプチドおよびそのアンタゴニストは、過剰活動に関連する徴候の治療または軽減で有用であろう。

逆転スクリーニングテスト：
挙動スクリーニングを４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。すべての挙動テストは、低下した生存性がより早いテストを必要とするのでなければ、１２および１６週齢の間に行った。これらのテストは、不安点活動レベル探求を測定するための開放視野を含んだ。

逆転スクリーニングテストデータ：
逆転スクリーニングを用いて、運動強度／協調を測定する。訓練していないマウスを、金属ロッド上に水平に設置した四角（７．５ｃｍ×７．５ｃｍ）ワイヤースクリーンの頂部に個々においた。次いで、マウスがスクリーンの底に位置するようにロッドを１８０度回転した。以下の挙動応答を１分間のテストセッションにわたって記録した：落下、登らないおよび登る。

＊記号は顕著な差を示す。

落下応答について（−／−）または（＋／−）マウスおよび（＋／＋）マウスの間で５０％のポイントの差がある場合、運動強度結合が明らかである。登らない０／８または１／８（−／−）または（＋／−）マウスは、損なわれた運動協調を示す。登る７／８または８／８（−／−）または（＋／−）マウスは増強された運動協調を示す。

結果：
逆転スクリーンテストは基本的な感覚および運動観察を測定するために設計される：全ての８匹の（−／−）マウスがスクリーンから落下し、他方、０／４（＋／＋）マウスが落下した場合に、顕著な差が逆転スクリーンテストの間に観察された。しかしながら、これらの突然変異体で観察された過敏は、運動協調の結果を解釈する場合に考慮すべきでない。

（ｄ）骨代謝および体診断剤
（１）組織質量および無脂肪体質量測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

マウスをアベルチン（１．２５％２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｌ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスを、ＤＥＸＡスキャンのために、ＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｍａｒＩｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位置に置いた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度（ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および合計組織質量（ＴＴＭ）を、注目する領域（ＲＯＩ、すなわち、全身、脊椎および双方の大腿）において測定した。

体の測定（身長および体重）：
体の測定：身長および体重の測定はほぼ１６週齢に行った。

結果：
（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴手段と比較した場合に、減少した平均体重および減少した平均身長を呈した。器官の重量も減少したが、これは、減少した平均体重および身長の測定に合致する。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：１７／３８／１４
（２）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、ここでは、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するために同定した。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

Ｄｅｘａ分析―テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体をこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、容量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

マウスをアベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｌ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスを、ＤＥＸＡスキャンのために、ＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位置に置いた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度（ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および合計組織質量（ＴＴＭ）を、注目する領域（ＲＯＩ）［すなわち、全身、脊椎および双方の大腿］において測定した。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴも用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定を得た。１つの脊椎および１つの大腿を４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は腰椎５脊椎小柱骨要領、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを取った。μＣＴ４０スキャンは、骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンした。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメーターの分解能にて第五腰椎（ＬＶ５）において分析し、骨皮質パラメーターは２０マイクロメートルの分解能にて大腿中間幹にて分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄および雌双方の（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、全身および脊椎において減少した平均の無脂肪体質量、骨ミネラル含有量、および骨ミネラル密度を呈した。突然変異体についての骨ミネラル含有量指標（ＢＭＣ／ＬＢＭ）もまた減少し、その差は雄においてより顕著であった。

ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した骨脊椎小柱骨容量、数および結合密度、および減少した平均大腿中間幹断面積を呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ，４／４／７
まとめ
これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが、骨折または骨−関連病に導く減少した密度およびおそらくは脆性を伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な、有意な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ３５５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用なように見える。加えて、ＰＲＯ３５５ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために重要であり；他方、ＰＲＯ３５５ポリペプチドに対するアンタゴニスト（阻害剤）は、関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアを含めた異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。加えて、ＤＥＸＡによって分析される（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に、顕著に減少した無脂肪体質量を呈し、これは、これらの突然変異体における成長の遅延を示唆する。これは、減少した体重および身長（および減少した器官重量）の観察とあいまって、悪液質または他の成長障害のような組織を消費する疾患を示唆する。かくして、ＰＲＯ３５５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、悪液質および／または他の組織消費病のような成長障害の治療または予防で有用であろう。

（ｅ）表現型分析：心臓学
心血管生物学の領域では、標的は、ここでは、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール（高コレステロール血症）および上昇した血清トリグリセリド（高トリグリセリド血症）のような脂質異常血症、糖尿病および／または肥満の治療のために同定した。表現型テストは血清コレステロールおよびトリグリセリドの測定を含んだ。

血中脂質
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。高コレステロールレベルおよび増大したトリグリセリド血中レベルは、心血管病および／または糖尿病の発生において認識された危険因子である。血中脂質の測定は、血中脂質レベルを調節する生物学的スイッチの発見を容易とする。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管病に対する危険を低下させるのに有用であろう。これらの血液化学テストにおいては、コレステロール測定はＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて記録した。

結果：前記でまとめたように、（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、顕著に増大したトリグリセリドレベルを呈した。かくして、ＰＲＯ３５５遺伝子が欠乏した突然変異体マウスは、心血管病に対するモデルとして供することができる。ＰＲＯ３５５ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は、トリグリセリドのような血中脂質を調節するにおいて有用であろう。かくして、ＰＲＯ３５５ポリペプチドまたはそのアゴニストは高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、糖尿病および／または肥満のような心血管病の治療で有用であろう。
４１．８ＤＮＡ４９４３５−１２１９（ＵＮＱ３３４）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ４９４３５−１２１９と命名される）ＰＲＯ５３３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ３３４）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿００８００３またはアクセション：ＮＭ＿００８００３ＮＩＤ：６６７９７７６ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ線維芽細胞成長因子１５（Ｆｇｆ１５）；タンパク質参照：Ｏ３５６２２またはアクセション：Ｏ３５６２２ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲ−１５ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＦＧＦ−１５）。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿００５１１７またはアクセション：ＮＭ＿００５１１７ＮＩＤ：１５０１１９２２ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ線維芽細胞増殖因子１９（ＦＧＦ１９）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｏ９５７５０またはアクセション：Ｏ９５７５０ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲ−１９ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＦＧＦ−１９）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＦＧＦ１５（線維芽細胞成長因子１５）、ヒトＦＧＦ１９（線維芽細胞成長因子１９）のオルソログである。

ＦＧＦ１９、線維芽細胞成長因子ファミリーのメンバーは、線維芽細胞成長因子受容体４（ＦＧＦＲ４）に対するリガンドとして機能する分泌タンパク質である（Ｘｉｅｅｔａｌ．，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ；１１（１０）７２９−３５（１９９９）；Ｈａｒｍｅｒｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；４３（３）：６２９−４０（２００４））。ＦＧＦ１９は胎児脳で強く発現し、脳および内部耳の発生に関与するようである（Ｎｉｓｈｉｍｕｒａｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ；１４４４（１）：１４８−５１（１９９９）；Ｌａｄｈｅｒｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ；２９０（５４９８）：１９６５−７（２０００））。ＦＧＦ１９は肝臓コレステロール７アルファ−ヒドロキシラーゼ（ＣＹＰ７Ａ１）の発現、胆汁酸生合成における最初かつ律速工程を抑制し、その結果、肝臓コレステロールの異化および排出を調節する（Ｈｏｌｔｅｔａｌ．，ＧｅｎｅｓＤｅｖ；１７（１３）：１５８１−９１（２００３））。

ＦＧＦ１９を発現するトランスジェニックマウスは増大したエネルギー消費および茶色の脂肪の塊を呈したが、減少した総じての脂肪の塊、肝臓トリグリセリド、および肝臓アセチルＣｏＡカルボキシラーゼ２を呈し、これは、ＦＧＦ１９がエネルギー代謝において役割を演じることを示唆する（Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎｅｔａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ；１４３（５）：１７４１−７（２００２））。しかしながら、トランスジェニックマウスにおけるＦＧＦ１９の異所性発現は肝臓腫瘍の発生をもたらし、これは、ＦＧＦ１９が肝臓細胞癌腫において役割を演じるであろうことを示唆する（Ｎｉｃｈｏｌｅｓｅｔａｌ．，ＡｍＪＰａｔｈｏｌ；１６０（６）：２２９５−３０７（２００２））。

Ｗｒｉｇｈｔおよび共同研究者（ＤｅｖＢｉｏｌ；２６９（１）：２６４−７５（２００４））は、Ｆｇｆ１５−欠乏マウスを用い、内部耳発生におけるマウスＦｇｆ１５の役割を調べた。彼らは、マウスＦｇｆ１５またはヒトＦＧＦ１９がニワトリ外植体アッセイにおいて耳マーカーの発現を誘導するのに十分であるが、Ｆｇｆ１５を欠くマウス胚は耳の異常を有しないことを見出した。彼らは、マウスＦｇｆ１５がヒトＦＧＦ１９のオルソログであるが、マウスにおいて耳誘導またはパターンニングにユニークには必要でないと結論した。

Ｆｕおよび共同研究者（Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１４５（６）：２５９４−６０３（２００４）は、ＦＧＦ１９が代謝速度を増大させ、ダイエットおよびレプチン−欠乏糖尿病を逆行させることを報告した。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝５．９６有意性＝０．０５０７７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１３平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１および２を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ＿００８０３．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料のうち、脳；脊髄；目；胸腺；腎臓；および胃、小腸および大腸で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．８．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ４９４３５−１２１９（ＵＮＱ３３４）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒト線維芽細胞成長因子１９（ＦＧＦ１９）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて成長の遅延および減少した骨測定がもたらされた。（−／−）マウスは、オボアルブミン攻撃に対する減少した血清ＩｇＧ２ａ応答を呈した。加えて、突然変異体（−／−）マウスは、減少した平均血清インスリンレベルを呈した。減少した生存性もまたホモ接合性（−／−）マウスに存在した（１９．２５が予測される場合に観察された１０）。（誕生後１０ないし１２日における）ジェノタイピングによると、ホモ接合体の半分が死亡した。標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。

（ｂ）骨代謝および骨診断剤
（１）組織質量および無脂肪体質量測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および４匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。
デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

マウスをアベルチン（１．２５％２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｌ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスを、ＤＥＸＡスキャンのために、ＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位置に置いた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度（ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および合計組織質量（ＴＴＭ）を、注目する領域（ＲＯＩ、すなわち、全身、脊椎および双方の大腿）において測定した。

体測定（身長および体重）：
体測定：身長および体重の測定は、ほぼ１６週齢に行った。

結果：
雄および雌双方の（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均体重および減少した平均身長を呈し、その差はオス（−／−）マウスにおいてより顕著であった。
（２）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、ここでは、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するために同定した。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

Ｄｅｘａ分析―テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および４匹のホモ接合体をこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、容量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴも用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定を得た。１つの脊椎および１つの大腿を４匹の野生型および４匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は腰椎５脊椎小柱骨容量、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを取った。μＣＴ４０スキャンは、骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンした。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメータは１６マイクロメーターの分解能にて第五腰椎（ＬＶ５）において分析し、骨皮質パラメータは２０マイクロメートルの分解能にて大腿中間幹にて分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄（−／−）マウスは、それらの性が合致する（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合の、減少した平均合計組織質量および無脂肪体質量を呈した。しかしながら、野生型合計組織質量および無脂肪体質量は履歴対照よりも高かった。また、雄突然変異体マウスは、減少した平均骨ミネラル含有量および骨ミネラル密度関連測定を呈した。加えて、雌ノックアウト（−／−）はより低い大腿骨ミネラル密度を示したが、野生型は履歴対照よりも高かった。

ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均脊椎小柱骨容量、数、厚み、および結合密度、および減少した平均大腿中間幹基質厚みおよび断面積を呈した。これらの変化は、雄（−／−）マウスの低下した体サイズのためであろう。

まとめ
これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが、骨折に導く低下した密度および恐らくは脆性を伴う骨質量の減少によって特徴づけられる骨粗鬆症と同様な、骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示し、これは骨−関連病を示す。かくして、ＰＲＯ５３３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用なように見える。加えて、ＰＲＯ５３３ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は、骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために重要であり；他方、ＰＲＯ５３３ポリペプチドに対するアンタゴニストは、関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアを含めた異常な骨代謝に伴う炎症疾患を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。加えて、ＤＥＸＡによって分析される（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に顕著に減少した合計組織質量および無脂肪体質量を呈し、これはこれらの突然変異体における成長の遅延を示唆する。これは、減少した体重および身長の観察とあいまって、悪疫質または他の成長障害のような組織消費疾患を示唆する。かくして、ＰＲＯ５３３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、悪疫質および／または他の組織消費病のような成長障害の治療または予防で有用であろう。表現型分析は、ホモ接合体の低下した生存率も示した。（誕生後１０日ないし１２日における）ジェノタイピングの時点までに、半分のホモ接合体は死滅した。

（ｃ）血液化学
血液化学分析は、マウスについて血液化学テストを行うためのその臨床的設定においてＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて行った。

インスリンデータ：
テストの記載：ＬｅｘｉｃｏｎＧｅｎｅｔｉｃｓは、マウスについての定量的インスリンアッセイを行うためのその臨床的設定においてＣｏｂｒａＩＩシリーズ自動−ガンマカウンティングシステムを用いる。

結果：
雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均血清インスリンレベルを呈した。

まとめ：
ＰＲＯ５３３ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏した突然変異体（−／−）マウスは、成長の遅延、低下した生存率および組織消費病に合致した表現型を示す。インスリンレベルは異常に低く、これは糖尿病を示し得る。かくして、ＰＲＯ５３３ポリペプチドのアンタゴニストまたは阻害剤またはそのコーディング遺伝子はこれらの代謝および成長関連効果を模倣するであろう。他方、ＰＲＯ５３３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、糖尿病または他の組織消費病のような代謝障害の予防および／または治療で有用であろう。

（ｄ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、正常な生理学においては、傷または負傷に対する応答で臨界的であり、傷または負傷からの修復を開始させ、外来性生物に対する生来のおよび獲得された防御を備えるかなり複雑で、しばしば複数の相互連結生物学的経路の発現または結果である。病気または病理は、これらの正常な生理学的経路が、応答の強度に関連して直接的に、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己に対する反応として、またはこれらの組合せとしてのいずれかでさらなる傷または負傷を引き起こす場合に起こる。

以下のテストを行った：
オボアルブミン挑戦
手法：このアッセイは野生型およびホモ接合体について行った。ニワトリオボアルブミン（ＯＶＡ）は、マウスにおいて抗原−特異的免疫応答を実験するためにモデルタンパク質として通常用いられるＴ−細胞依存性抗原である。ＯＶＡは非毒性であって、不活性であり、従って、もし免疫応答が誘導されないとしても、動物に対して害を引き起こさないであろう。ＯＶＡに対するマウス免疫応答は、Ｔ細胞応答を誘導するための免疫優性ペプチドが同定されている程度までよく特徴付けられている。抗−ＯＶＡ抗体は、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＺＡ）を用い、免疫化の８ないし１０日後に検出可能であり、抗体の異なるイソタイプの決定は、複雑なプロセスについてのさらなる情報を与え、これは遺伝子工学作成マウスにおける欠乏した応答に導くであろう。

前記したように、このプロトコルは、抗原−特異的免疫応答を生起させるマウスの能力を評価する。同一には、フロイントの完全アジュバントに乳化した５０ｍｇのニワトリオボアルブミンを腹腔内注射し、１４日後に、抗−オボアルブミン抗体（ＩｇＭ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２サブクラス）の血清力価を測定した。血清試料中のＯＶＡ−特異的抗体の量は、９６−ウェル試料プレートをスキャンする機器によって生じる光学密度（ＯＤ）値に比例する。データは、各血清試料の系列希釈の組について集めた。

この攻撃の結果：
（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、オボアルブミン攻撃に対する減少した平均血清ＩｇＧ２ａ応答を呈した。かくして、これらのノックアウトマウスは、Ｔ−細胞依存性ＯＶＡ抗原に対するＯＶＡ−特異的抗体応答を誘導する減少した能力を呈した。

まとめると、オボアルブミン攻撃実験は、ＰＲＯ５３３ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏したノックアウトマウスが、それらの野生型同腹子と比較した場合に、免疫学的異常を呈することを示す。特に、突然変異体マウスは、Ｔ−細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃した場合に、免疫学的応答を誘導する減少した能力を呈した。かくして、ＰＲＯ５３３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、（Ｔ細胞増殖のような）免疫系を刺激するのに有用であり、この効果が、白血病、および他のタイプの癌の場合における、およびＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者におけるような、個体に対して有用である場合に用途を見出すであろう。従って、ＰＲＯ５３３ポリペプチドの阻害剤（アンタゴニスト）は免疫応答を阻害するのに有用であり、かくして、例えば、移植片拒絶または移植片−対−宿主病の場合に、有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であろう。
４１．９ＤＮＡ４５４１７−１４３２（ＵＮＱ３４２遺伝子破壊）を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ４５４１７−１４３２と命名される）ＰＲＯ５４１ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ３４２）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ０３１４０２またはアクセション：ＮＭ０３１４０２ＮＩＤ：１３８７８２３６ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＣｏｃｏａｃｒｉｓｐ（Ｃｏｃｏａｃｒｉｓｐ−係属）；タンパク質参照：Ｑ９９ＭＭ６またはアクセション：Ｑ９９ＭＭ６ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＣＯＣＯＡＣＲＩＳＰ．ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０３１４６１またはアクセション：ＮＭ０３１４６１ＮＩＤ：２１３１４７４０ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＣｏｃｏａＣｒｉｓｐ（ＬＯＣ８３６９０）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９Ｈ３３またはアクセション：Ｑ９Ｈ３３６ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＰＵＴＡＴＩＶＥＳＥＣＲＥＴＯＲＹＰＲＯＴＥＩＮＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＣＯＣＯＡＣＲＩＳＰ）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＣｏｃｏａｃｒｉｓｐ（Ｃｏｃｏａｃｒｉｓｐタンパク質）、ヒトＣｏｃｏａＣｒｉｓｐのオルソログである。

ＣｏｃｏａＣｒｉｓｐはシグナルペプチド、ＳＣＰ−様細胞外タンパク質ドメイン、およびＬＣＣＬドメインよりなる仮定分泌タンパク質である。ＳＣＰ−様細胞外タンパク質ドメインは、精子成熟に関連すると考えられる精子−被覆糖タンパク質および昆虫からの毒アレルゲン（ＰｆａｍアクセションＰＦ００１８８）のような広く種々の真核生物細胞外タンパク質で見出される。ＬＣＣＬドメインは、リポ多糖結合、並びに細胞シグナリングのような他の機能に関与するようである（ＰｆａｍアクセションＰＦ０３８１５）。

標的化された、または遺伝子捕獲突然変異は株１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ−由来胚性幹（ＥＳ）細胞で生じる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１ヘテロ接合性動物を生じさせた。これらの子孫を相互に交配させて、Ｆ２野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性突然変異体子孫を生じさせた。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合には、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物が得られ、Ｆ２マウスが得られる。レベルＩ表現型分析は、この世代からのマウスで行った。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝３．１５有意性＝０．２０７３１（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＢＣ０４０７６８．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は胚性幹（ＥＳ）細胞において、およびＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．９．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ４５４１７−１４３２（ＵＮＱ３４２）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒトＣｏｃｏａＣｒｉｓｐのオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、突然変異体（−／−）マウスにおいて成長の遅延および異常な骨測定がもたらされた。加えて、（−／−）マウスは、増大した皮膚線維芽細胞増殖を呈した。ミクロアレイ分析は、乳房腫瘍および前立腺癌においてアップレギュレートされるＵＮＱ３４２を示す。ＵＮＱ３４２は、腫瘍侵入を助ける細胞外タンパク質分解を調節するのを助けるトリプシン阻害剤であるプロテアーゼ阻害剤１５（ヒトＰＩ１５）に対して高い同様性の領域を有する。遺伝子破壊はサザーンブロットによって確認した。
（ｂ）骨代謝および体診断剤
（１）組織質量および無脂肪体質量測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のヘテロ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

マウスをアベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｇ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスをＤＥＸＡスキャンのためにＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットホーム上に腹臥位置で置いた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度（ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および合計組織質量（ＴＴＭ）を、注目する領域（ＲＯＩ、すなわち、全身、脊椎および双方の大腿）で測定した。

体測定（身長および体重）：
体測定：身長および体重の測定はほぼ１６週齢に行った。

結果：
（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均体重および減少した平均身長を呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：１５／３９／２１
（２）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定した。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：
ＤＥＸＡ：（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均合計組織質量および無脂肪体質量を呈した。これらの突然変異体マウスは、それらの性が一致した同腹子および履歴平均と比較して、減少した平均骨ミネラル含有量も呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ
これらの結果は、ノックアウト突然変異体が、骨折または骨−関連病に導く減少した密度および恐らくは脆性が伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な、骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ５４１ポリペプチドまたはそのアゴニストは、骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であるように見える。加えて、ＰＲＯ５４１ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は、骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために重要であり；他方、ＰＲＯ５４４ポリペプチドに対するアンタゴニストは、関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアを含めた異常な骨代謝を伴う炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。加えて、ＤＥＸＡによって分析される（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に、減少した合計組織質量および無脂肪体質量を呈し、これはそれらの突然変異体における成長の遅延を示唆する。これは、減少した体重および身長の観察とあいまって、悪液質または他の成長障害のような組織消費疾患を示唆する。かくして、ＰＲＯ５４１ポリペプチドまたはそのアンタゴニストは、悪液質および／または他の組織消費病のような成長障害の治療または予防で有用であろう。

（ｃ）成人皮膚細胞増殖：
手法：皮膚細胞は１６週齢動物（２匹の野生型および４匹のホモ接合体）から単離した。これらを初代線維芽細胞培養に発生させ、線維芽細胞増殖速度を厳密に制御されたプロトコルで測定した。過剰−増殖および過少−増殖表現型を検出するこのアッセイの能力は、ｐ５３およびＫｕ８０で示されている。増殖はＢｒｄｕ一体化で測定した。

具体的には、これらの実験において、皮膚線維芽細胞増殖アッセイを用いた。標準化された培養における細胞の数の増加は、相対的増殖能力の尺度として用いた。初代線維芽細胞は、野生型および突然変異体マウスから採取された皮膚バイオプシーから確立された。５万細胞の二連または三連培養を平板培養し、６日間成長させた。培養期間の最後に、培養に存在する細胞の数を、エレクトロニック粒子カウンターを用いて測定した。

結果：（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、増大した皮膚線維芽細胞増殖速度を呈した［分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：２／０／４］。

かくして、ホモ接合性突然変異体マウスは過剰−増殖表現型を示した。これらの観察によって示唆されるように、ＰＲＯ５４１ポリペプチドまたはそのアゴニストは腫瘍サプレッサーとして機能でき、異常な細胞増殖を減少させるにおいて有用であろう。
４１．１０ＤＮＡ５２７５８−１３９９（ＵＮＱ３９０）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ５２７５８−１３９９と命名される）ＰＲＯ７２５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ３９０）を破壊した。これらの実験のための遺伝子特異的情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ００９１３６またはアクセション：ＮＭ００９１３６ＮＩＤ：ｇｉ６６７７８７６ｒｅｆＮＭ００９１３６．１Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓｓｃｒａｐｉｅ応答遺伝子１（Ｓｃｒｇ１）；タンパク質参照：Ｏ８８７４５またはアクセション：Ｏ８８７４５ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＳＣＲＡＰＩＥ−ＲＥＳＰＯＮＳＩＶＥＰＲＯＴＥＩＮ１ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＳＣＲＧ−１）。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ００７２８１またはアクセション：ＮＭ００７２８１ＮＩＤ：ｇｉ６００５８６９ｒｅｆＮＭ００７２８１．１Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓｓｃｒａｐｉｅ応答タンパク質１（ＳＣＲＧ１）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｏ７５７１１またはアクセション：Ｏ７５７１１ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＳＣＲＡＰＩＥ−ＲＥＳＰＯＮＳＩＶＥＰＲＯＴＥＩＮ１ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＳＣＲＧ−１）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＳｃｒｇ１（ｓｃｒａｐｉｅ応答性遺伝子１）、ヒトＳＣＲＧ１のオルソログである。別名はＳＣＲＧ−１を含む。

ＳＣＲＧ１は中枢神経系で主として発現される推定分泌タンパク質である。９８−アミノ酸タンパク質はシグナルペプチド、特徴的なシステイン分布パターン、およびマウス、ラット、およびヒト種の間で高度に保存された３５−アミノ酸セグメントよりなる。ＳＣＲＧ１発現は神経膠細胞およびニューロンで起こる（Ｄａｎｄｏｙ−Ｄｒｏｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７３（１３）：７６９１−７（１９９８）；Ｄｒｏｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７３（２９）：１８０１５−８（１９９８）；Ｄｒｏｎｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ；７０（１）：１４０−９（２０００））。さらに、ＳＣＲＧ１はイン・ビトロおよびイン・ビボにて密なコア小胞と会合するように見え、これは、ＳＣＲＧ１がニューロン細胞の分泌経路に関連することを示唆する（Ｄａｎｄｏｙ−Ｄｒｏｎｅｔａｌ．，ＥｕｒＪＮｅｕｒｏｓｃｉ；１８（９）：２４４９−５９（２００３））。

ＳＣＲＧ１は脳負傷または感染剤に対する応答において神経膠細胞活性化で役割を演じることができる。さらに、ＳＣＲＧ１は、クオイツフェルト−ヤコブ病、ジャーマン−シュトラウスラー−シェインケル症候群、クールー、スクラピー、およびウシ海綿状脳障害のような伝搬性進行性神経−変性病に応答する延長されたかつ広く広まった神経膠細胞活性化に関与すると提唱されている。延長されたかつ広まった神経膠細胞活性化は脳機能に対して有害なようである故に、ＳＣＲＧ１は神経−変性プロセスにおいて役割を演じるであろう（Ｄａｎｄｏｙ−Ｄｒｏｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７３（１３）：７６９１−７（１９９８）；Ｄｒｏｎｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７３（２９）：１８０１５−８（１９９８））。

標的化された、または遺伝子捕獲突然変異は株１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ−由来胚性幹（ＥＳ）細胞で生じる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１ヘテロ接合性動物を生じさせた。これらの子孫を相互交配させて、Ｆ２野生型、ヘテロ接合性およびホモ接合性突然変異体子孫を生じさせた。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合には、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物が得られ、Ｆ２マウスを生じさせる。レベルＩ表現型分析はこの世代からのマウスで行った。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．５４有意性＝０．７６４６８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２８平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ００９１３６．２）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、肝臓、骨格筋、心臓および脂肪を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．１０．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ５２７５８−１３９９（ＵＮＱ３９０）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトスクラピー応答性タンパク質１（ＳＣＲＧ１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、増大した平均パーセント全身脂肪および合計脂肪質量がもたらされた。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）骨代謝および体診断剤：骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、並びに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

ＤＥＸＡ結果：雌突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、増大した平均パーセント全身脂肪および合計脂肪質量を呈した。この表現型は、脂質異常血症によってマークされる肥満または代謝障害に関連する。かくして、ＰＲＯ７２５ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子のアンタゴニスト（または阻害剤）はこの陰性表現型を模倣すると予測されるであろう。他方、ＰＲＯ７２５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、これらの代謝障害の予防および／または治療で有用であろう。
４１．１１ＤＮＡ５６４３６−１４４８（ＵＮＱ４７４）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ５６４３６−１４４８と命名される）ＰＲＯ９３７ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ４７４）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ００８１５０またはアクセション：ＮＭ００８１５０ＮＩＤ：ｎａＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓグリピカン４（Ｇｐｃ４）；タンパク質参照Ｐ５１６５５またはＧＰＣ４ＭＯＵＳＥＰ５１６５５ＧＬＹＰＩＣＡＮ−４ＰｒｅｃｕｒｓｏｒＫ−ＧＬＹＰＩＣＡＮ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ００１４４８またはアクセション：ＮＭ００１４４８ＮＩＤ：ｎａＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓグリピカン４（ＧＰＣ４）に対応し；ヒトタンパク質配列は参照：Ｏ７５４８７またはＧＰＣ４ＨＵＭＡＮＯ７５４８７ＧＬＹＰＩＣＡＮ−４ＰＲＥＣＵＲＳＯＲＫ−ＧＬＹＰＩＣＡＮに対応する。

注目するマウス遺伝子はＧｐｃ４（グリピカン４）、ヒトＧＰＣ４のオルソログである。別名はＫ−グリピカンを含む。

ＧＰＣ４は、線維芽細胞成長因子およびエンドスタチンのような、ポリカチオン性ホルモンに結合し、それを変調するグリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）−繋留細胞外ヘパラン硫酸プロテオグリカンである（Ｆｒａｎｓｓｏｎ，ＩｎｔＪＢｉｏｃｈｅｍＣｅｌｌＢｉｏｌ；３５（２）：１２５−９（２００３）；Ｇａｌｌｉｅｔａｌ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；１３０（２０）：４９１９−２９（２００３）；Ｋａｒｕｍａｎｃｈｉｅｔａｌ．，ＭｏｌＣｅｌｌ；７（４）：８１１−２２（２００１））。ＧＰＣ４は脳の発生、腎臓の発生、および骨再形成に参加するようである（Ｗａｔａｎａｂｅｅｔａｌ．，ＪＣｅｌｌＢｉｏｌ；１３０（５）：１２０７−１８（１９９５）；Ｋａｒｕｍａｎｃｈｉｅｔａｌ．，ＭｏｌＣｅｌｌ；７（４）：８１１−２２（２００１）；Ｇａｌｌｉｅｔａｌ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；１３０（２０）：４９１９−２９（２００３）；Ｓｈｅｕｅｔａｌ．，ＪＢｏｎｅＭｉｎｅｒＲｅｓ；１７（５）：９１５−２２（２００２））。

染色体Ｘ上のグリピカン３（ＧＰＣ３）およびＧＰＣ４遺伝子における欠失は、誕生前および誕生後過剰成長、内臓および骨格の異常、および胚腫瘍発生によって特徴付けられる、シンプソン−ゴバリ−ベメル症候群の表現型における可変性を説明するようである（Ｖｅｕｇｅｌｅｒｓｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ；５３（１）：１−１１（１９９８）；Ｈｕｂｅｒｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ；２２５（１−２）：９−１６（１９９８））。
このプロジェクトはＸ−リンクされている：
性別および遺伝子型によるＸ−リンク遺伝子分布のまとめ
（雄キメラからのアグーティ子のみを含める）

標的化された、または遺伝子捕獲突然変異は株１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ−由来胚性幹（ＥＳ）細胞において生じる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１ヘテロ接合性動物を生じさせた。これらの子孫を相互に交配させて、Ｆ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫を生じさせる。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合には、Ｆ１へテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物を生じ、Ｆ２マウスを生じさせる。レベルＩ表現型分析はこの世代からのマウスで行った。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝３０．９８有意性＝０．０００００（ｈｏｍ／ｎ）＝０．４９平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン３を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ００８１５０．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストした１３の成人組織試料の中で、目；脾臓；腎臓；肝臓；胃；小腸；および結腸；心臓；および脂肪で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．１１．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ５６４３６−１４４８（ＵＮＱ４７４）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトグリピカン４（ＧＰＣ４）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、雄（０／−）のマウスにおいて貧血がもたらされた。この突然変異はＸ−リンク遺伝子におけるものである。雄および雌双方の野生型マウスを分析し、他方、雄ヘミ接合性突然変異体マウスのみを分析した。雄へミ接合性（野生型）およびヘミ接合性突然変異体マウスを、各々、（０／＋）および（０／−）と命名する。

雄ヘミ接合性突然変異体マウスは、それらの性が一致した野生型同腹子および履歴平均と比較した場合に、貧血の兆候を示した。加えて、（−／−）マウスは、オボアルブミン攻撃に対する減少したＩｇＧ２ａ応答を示した。ＵＮＱ４７４はＴ７単球上のみで特異的にアップレギュレートされる（データは示さず）。（−／−）マウスは減少した平均血清グルコースレベルを呈したが、正常な成長があり、インスリンおよびグルコース耐性テストは正常であった。加えて、ヘミ接合性（０／−）突然変異体マウスは、合計体脂肪の減少した平均パーセントおよび異常な骨関連測定を呈した。標的遺伝子の破壊は、サザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。

以下のテストを行った：
血液学分析：
テストの記載：血液テストはＡｂｂｏｔｔのＣｅｌｌ−Ｄｙｎ３５００Ｒ、自動血液学アナライザーによって行う。その特徴のいくつかは５−部分ＷＢＣデファレンシャルを含む。「患者」報告は全部で２２パラメーターにわたってカバーすることができる。

結果：
雄（０／−）マウスは、それらの性が一致した野生型（０／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均赤血球細胞カウントおよび減少した平均ヘモグロビンおよびヘマトクリットレベルを呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：６／４／１２
これらの結果は貧血を伴う表現型に関連する。かくして、ＰＲＯ９３７ポリペプチド、そのアゴニスト、またはＰＲＯ９３７ポリペプチドについてのコーディング遺伝子は正常な赤血球細胞生産に必須であるに違いなく、それ自体は、貧血または低ヘマトクリットが関連する血液障害の治療で有用であろう。

オボアルブミン挑戦
手法：このアッセイは７匹の野生型および８匹のホモ接合体で行った。ニワトリオボアルブミン（ＯＶＡ）は、マウスにおける抗原−特異的免疫応答を研究するためのモデルタンパク質として通常用いられるＴ−細胞依存性抗原である。ＯＶＡは非毒性であって、不活性であり、従って、もし免疫応答が誘導されないとしても、動物に害を引き起こさないであろう。ＯＶＡに対するマウス免疫応答は、Ｔ細胞応答を誘導するための免疫優性ペプチドが同定される程度によく特徴付けられている。抗−ＯＶＡ抗体は酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＺＡ）を用い、免疫化から８日ないし１０日後に検出可能であり、抗体の異なるイソタイプの決定は、遺伝子工学作成マウスにおける欠陥がある応答に導き得る複雑なプロセスについてのさらなる情報を与える。

前記したように、このプロトコルは、抗原−特異的免疫応答を生起させるマウスの能力を評価する。動物には、フロイントの完全アジュバント中に乳化させた５０ｍｇのニワトリオボアルブミンを腹腔内注射し、１４日後に、抗−オボアルブミン抗体（ＩｇＭ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２サブクラス）の血清力価を測定した。血清試料中のＯＶＡ−特異的抗体の量は、９６−ウェル試料プレートをスキャンする機器によって生じた光学密度（ＯＤ）値に比例する。データは、各血清試料の系列希釈の組について収集した。

この攻撃の結果：（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に、オボアルブミン攻撃に対する減少した平均血清ＩｇＧ２ａ応答を呈した。かくして、これらのノックアウトマウスは、Ｔ−細胞依存性ＯＶＡ抗原に対するＯＶＡ−特異的抗体応答を誘導する減少した能力を呈した。

まとめると、オボアルブミン攻撃実験は、ＰＲＯ９３７ポリペプチドをコードする遺伝子に欠陥があるノックアウトマウスが、それらの野生型同腹子と比較した場合に、免疫学的異常を呈することを示す。突然変異体マウスは、Ｔ−細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃した場合に、免疫学的応答を誘導する減少した能力を呈した。これは、ＰＲＯ９３７ポリペプチドまたはそれらのアゴニストが、（Ｔ細胞増殖のような）免疫系を刺激し、白血病、および他のタイプの癌の場合において、およびＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者におけるように、個体に有益であろうことを示唆する。従って、ＰＲＯ９３７ポリペプチドの阻害剤（アンタゴニスト）は免疫応答を阻害するにおいて有用であり、例えば、移植片拒絶または移植片−対−宿主病の場合において、有害な免疫応答を抑制する有用な候補であろう。

（ｃ）骨代謝および体診断剤：骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定した。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定も得た。１つの脊椎および１つの大腿を４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は、腰椎５脊椎小柱骨容量、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを採取した。μＣＴ４０スキャンは、骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンされた。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメートル分解能において第５腰椎脊椎（ＬＶ５）において分析し、骨皮質パラメーターは２０μメートルの分解能において大腿中間幹で分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄（０／−）マウスは、それらの性が一致した（０／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に減少した平均パーセント合計体脂肪を呈した。
ミクロ−ＣＴ：雄（０／−）マウスは、それらの性が一致した（０／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、増大した平均大腿中間幹皮質厚みおよび減少した平均大腿中間幹断面積を呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
これらの結果は、異常な骨測定または骨−関連病に関連する陰性表現型を呈した。合計体脂肪の減少は、組織消費疾患または表現型を示唆する。

（ｄ）表現型分析：代謝−血液化学
代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は血中グルコース測定を含む。ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を、マウスで血液化学テストを行うために用いた。代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。

結果：
（−／−）マウスは、性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に減少した平均血清グルコースの減少を呈した。しかしながら、突然変異体マウス（−／−）は正常な体重増加、成長、インスリンおよびグルコース耐性を示した。
４１．１２ＤＮＡ５６４０９−１３７７（ＵＮＱ４９７）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ５６４０９−１３７７と命名される）ＰＲＯ１０１４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ４９７）を破壊した。これらの実験のための遺伝子特異的情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ１９８０３０またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ発現配列ＡＩ０４７８２０（ＡＩ０４７８２０）；タンパク質参照：Ｑ８ＶＣＲ２またはアクセション：Ｑ８ＶＣＲ２ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ヒドロキシステロイド１７−ベータデヒドロゲナーゼ１１；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ１７８１３５またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ短鎖デヒドロゲナーゼ／レダクターゼ９（ＳＣＤＲ９）と同様；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ７Ｚ５Ｐ４またはアクセション：Ｑ７Ｚ５Ｐ４ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。短鎖デヒドロゲナーゼ／レダクターゼ９。

注目するマウス遺伝子はＡＩ０４７８２０（発現された配列ＡＩ０４７８２０）、ヒトＳＣＤＲ９（短鎖デヒドロゲナーゼ／レダクターゼ９）のオルソログである。別名はＰＡＮ１Ｂ−様およびアルコールデヒドロゲナーゼＰＡＮ１Ｂ−様を含む。ＳＣＤＲ９は短鎖アルコールのＮＡＤ（Ｐ）Ｈ−依存性還元を触媒する仮定オキシドレダクターゼである。該タンパク質はシグナルペプチド、およびＮＡＤ（Ｐ）Ｈ−結合セグメントおよびアルコール共−基質結合セグメントよりなる短鎖デヒドロゲナーゼドメインを含有する（ＰｆａｍアクセションＰＦ００１０６）。ＳＣＤＲ９の細胞位置は曖昧であり；バイオインフォーマティック分析は、ＳＣＤＲ９が小胞体または原形質膜に局所化されることを示唆する。

標的化された、または遺伝子捕獲突然変異は株１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ−由来胚性幹（ＥＳ）細胞で生じる。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１ヘテロ接合性動物が生じる。これらの子孫を相互交配させて、Ｆ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫が生じる。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合には、Ｆ１ヘテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物が得られ、Ｆ２マウスが生じる。レベルＩ表現型分析はこの世代からのマウスで行った。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝６．１２有意性＝０．０４６８９（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１６平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１および２を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＢＣ０１９４２７．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨格筋および骨を除いて、胚性幹（ＥＳ）細胞において、およびＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブルダーゼーション分析によって確認した。
４１．１２．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ５６４０９−１３７７（ＵＮＱ４９７）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト短鎖デヒドロゲナーゼ／レダクターゼ９（ＳＣＤＲ９）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、雄突然変異体（−／−）マウスが増大した小柱数および結合密度、および減少した中間幹大腿断面積を示す結果がもたらされた。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認した。

（ｂ）骨代謝および体診断剤：骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定も得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は、腰椎５脊椎小柱骨容量、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを採取した。μＣＴ４０スキャンは骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンされた。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメートル分解能において第五腰椎（ＬＶ５）で分析し、骨皮質パラメーターは２０μメートルの分解能にて大腿中間幹で分析した。

結果：
雄突然変異体（−／−）マウスは、野生型同腹子と比較して、増大した小柱および結合密度を呈した。加えて、中間幹大腿合計面積は野生型同腹子と比較して減少したように見えた。これらの結果は、ノックアウト突然変異体表現型が骨粗鬆症のような骨異常に関連し得ることを示す。骨の異常な厚化および硬化、および骨の異常な脆性によって特徴付けられる疾患である。それ自体、ＰＲＯ１０１４ポリペプチドまたはそのアゴニストは骨粗鬆症の治療で有益であろう。増大した小柱数および結合密度に関連する表現型は、これらの効果を模倣する剤（例えば、ＰＲＯ１０１４ポリペプチドのアンタゴニスト）が骨治癒において役割を演じることを示唆する。
４１．１３ＤＮＡ４８６０６−１４７９（ＵＮＱ５５９）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては（ＤＮＡ４８６０６−１４７９と命名される）ＰＲＯ１１２０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ５５９）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異した遺伝子マウスはヌクレオチド参照：ＢＣ０６２９００またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２０１０００４Ｎ２４遺伝子、ｍＲＮＡ（ｃＤＮＡクローンＭＧＣ：８６０９６ＩＭＡＧＥ：６８１００８５）；タンパク質参照：Ｑ８ＣＦＧ０またはアクセション：Ｑ８ＣＦＧ０ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。細胞外スルファターゼＳｕｌｆ−２前駆体（ＥＣ３．１．６．−）（ＭＳｕｌｆ−２）。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０１８８３７、またはグルコサミン−６−スルファターゼ（ＳＵＬＦ２）と同様；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ８ＩＷＵ５またはアクセション：Ｑ８ＩＷＵ５ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。細胞外スルファターゼＳｕｌｆ−２前駆体（ＥＣ３．１．６．−）（ＨＳｕｌｆ２）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＳｕｌｆ２（スルファターゼ２）、ヒトＳＵＬＦ２のオルソログである。別名はｍＫＩＡＡ１２４７、２０１０００４Ｎ２４Ｒｉｋ、ＨＳＵＬＦ−２、ＫＩＡＡ１２４７、および細胞外スルファターゼＳＵＬＦ−２を含む。

ＳＵＬＦ２はヘパリン内で適当な関係にあるグルコサミン６−硫酸に対して高い選択性を持つ細胞外エンドスルファターゼである（Ｍｏｒｉｍｏｔｏ−Ｔｏｍｉｔａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７７（５１）：４９１７５−８５（２００２））。酵素前駆体は、重複するシグナルペプチドおよび膜貫通セグメントおよびスルファターゼドメインよりなる約８９０アミノ酸のタンパク質であると予測される（Ｐｆａｍアクセション番号ＰＦ００８８４）。ＳＵＬＦ２は内部タンパク質分解により処理され、分泌される。ＳＵＬＦ２は細胞接着、基底膜、および細胞外マトリックスバリア機能、細胞成長、および細胞分化のようなプロセスにおいてヘパラン硫酸プロテオグリカン相互作用を変調することができる（Ｍｏｒｉｍｏｔｏ−Ｔｏｍｉｔａｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７７（５１）：４９１７５−８５（２００２）。

標的化された、または遺伝子捕獲突然変異は株１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ−由来胚性幹（ＥＳ）細胞である。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６Ｊアルビノマウスに交配させて、Ｆ１ヘテロ接合性動物を生じさせた。これらの子孫を相互交配させて、Ｆ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫を生じさせた。稀な場合には、例えば、非常に少数のＦ１マウスしかキメラから得られない場合には、Ｆ１へテロ接合性マウスを１２９ＳｖＥｖ^Ｂｒｄ／Ｃ５７ハイブリッドマウスに交配させて、相互交配のためのさらなるヘテロ接合性動物が得られ、Ｆ２マウスを生じさせる。レベルＩ表現型分析はこの世代からのマウスで行った。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．１６有意性＝０．９２３３８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２３平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入は、コーディングエクソン２および３の間のイントロンで起こった（ＮＣＢＩアクセションＡＫ０３４７１２．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨格筋および骨を除いて、胚性幹（ＥＳ）細胞において、および全ての１３の成人組織試料で検出された。
ＲＴ−ＰＣＲ分析は、転写体が分析した（−／−）マウス（Ｍ−１６６）において存在しないことを明らかとした。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認した。
４１．１３．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ４８６０６−１４７９（ＵＮＱ５５９）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトスルファターゼ２（ＳＵＬＦ２）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、雄（−／−）のマウスにおいて増大した不安−関連応答がもたらされた。加えて、突然変異体（−／−）マウスは減少した組織質量および減少した体重、ならびに減少した骨関連測定を呈した。雌ノックアウト（−／−）は、トリグリセリドレベルの有意な減少を示したが、コレステロールレベルは増大する傾向を示した。転写体はＲＴ−ＰＣＲによると存在しなかった。

（ｂ）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

マウスをアベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｌ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスを、ＤＥＸＡスキャンのために、ＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位置に置いた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度（ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および合計組織質量（ＴＴＭ）を、注目する領域（ＲＯＩ）［すなわち、全身、脊椎および双方の大腿］において測定した。
骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定も得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は、腰椎５脊椎小柱骨容量、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを採取した。μＣＴ４０スキャンは骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンされた。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメートル分解能において第五腰椎（ＬＶ５）で分析し、骨皮質パラメーターは２０μメートルの分解能にて大腿中間幹で分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均合計組織質量および無脂肪体質量および骨ミネラル含有量を呈した。雄突然変異体（−／−）マウスも、それらの性が一致した同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した無脂肪体質量を呈した。

ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）は、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均大腿中間幹断面積を呈した。

これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが、骨折または他の骨−関連病に導く減少した密度および、恐らくは、脆性を伴った骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ１１２０ポリペプチドまたはそのアゴニストが骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であるらしい。加えて、ＰＲＯ１１２０ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために有用であり；他方、ＰＲＯ１１２０ポリペプチドに対するアンタゴニストは関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアを含めた異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。加えて、ＤＥＸＡによって分析された（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に、顕著に減少した合計組織質量および無脂肪体質量を呈し、これはこれらの突然変異体における成長の遅延を示唆する。また、雄（−／−）マウスは履歴平均と比較して減少した体重を示した。これは、悪液質または他の成長障害のような組織消費疾患を示唆する。かくして、ＰＲＯ１１２０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、悪液質および／または他の組織消費病のような成長障害の治療または予防で有用であろう。

（ｃ）表現型分析：血液学
心血管生物学の領域においては、標的は、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール（高コレステロール血症）および上昇した血清トリグリセリド（高トリグリセリド血症）のような異常脂質血症、癌および／または肥満の治療のためにここでは同定された。

表現型テストは血清コレステロールおよびトリグリセリドの測定を含むものであった。加えて、炎症アッセイを行って、アテローム性動脈硬化症の炎症構成要素についての潜在的標的を同定した。

血中脂質
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。高コレステロールおよび増大したトリグリセリド血中レベルは、心血管病および／または糖尿病の発生において認識された危険因子である。血中脂質の測定は、血中脂質レベルを調節する生物学的スイッチの発見を容易とする。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管病に対する危険性を低下させるのに有用であろう。これらの血液化学テストにおいては、コレステロール測定はＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて記録した。

結果：前記でまとめたように、雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、トリグリセリドレベルの有意な減少（ｐ＝０．０４４８８）およびコレステロールレベルを増加させる傾向（ｐ＝０．０５８５７）を呈した。かくして、ＰＲＯ１１２０遺伝子を欠乏する突然変異体マウスは、代謝障害を研究するためのモデルとして供することができる。ＰＲＯ１１２０ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は血中脂質を調節するにおいて有用であろう。

（ｄ）表現型分析：ＣＮＳ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫障害、精神分裂症、認識障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボで確認された標的を同定するのに焦点をあてた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、恐慌発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

開放場テスト：
既知の薬物のいくつかの標的は開放場テストにおいて表現型を呈してきた。これらはセラトニントランスポーター、ドーパミントランスポーター（Ｇｉｒｏｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９６Ｆｅｂ１５；３７９（６５６６）：６０６−１２）、およびＧＡＢＡ受容体（Ｈｏｍａｎｉｃｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．１９９７Ａｐｒ１５；９４（８）：４１４３−８）のノックアウトを含む。自動開放場アッセイは、情緒状態に関連する変化および学習に関連する探求パターンに取り組むよう慣用化された。まず、場（４０×４０ｃｍ）をマウスについて比較的大きいように選択し、かくして、探求に関連する運動活動の変化をピックアップするように設計した。加えて、鼻でつつくこと、探求に特異的に関連する活動を可能とするように床に４つの穴があった。いくつかの因子を設計して、このテストに関連する情緒状態を高めた。開放場テストは、マウスをテストし、なされた測定がチャンバーでの対象の最初の経験である第一の実験手法である。加えて、開放−場は明るく光をつけた。全てのこれらの因子は新規かつ開放されたスペースに関連する天然の不安を高めるであろう。探求活動のパターンおよび程度、および特に、中央−対−合計移動距離の比率は、次いで、不安または鬱病に対する感受性に関連する変化を識別することができるであろう。３つの異なるレベルにおける赤外線を備えた大きな活動舞台（４０ｃｍ×４０ｃｍ、ＡｃｃｕＳｃａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓからのＶｅｒｓａＭａｘ動物活動モニタリングシステム）を用いて、立ち上がり、穴のつつき、および運動活動を記録した。動物を中心に入れ、その活動を２０分間測定した。このテストからのデータを５回の４分の間隔で分析した。合計移動距離（ｃｍ）、垂直運動の数（立ち上がり）、穴のつつきの数、および中心ないし合計距離比率を記録した。

新しい環境に対する通常の習慣的応答を呈するマウスについての性癖を、５回の間隔にわたってのその水平方向運動活動を総じての変化を測定することによって変化した。経時的な活動の変化のこの計算された勾配は、移動した絶対的な合計距離よりはむしろ正規化されたものを用いて決定する。該傾きは、５回の間隔の各々における正規化された活動を通じての回帰曲線から決定した。通常の性癖は、負の傾きの値によって表される。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：５／４／８
結果：
顕著な差が開放場活動テストの間に観察された。雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合に、中心領域における減少したメジアン合計時間を呈した。このタイプの挙動は増大した不安様応答と合致する。ノックアウトマウスは、軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患および／または双極性障害による不安；過剰活動；感覚障害；脅迫障害、精神分裂症または妄想個性に関連する不安関連障害と合致する表現型を示した。かくして、ＰＲＯ１１２０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、そのような神経学的障害の治療、または不安障害に関連する兆候の軽減で有用であろう。
４１．１４ＤＮＡ５９８４８−１５１２（ＵＮＱ５９６）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ５９８４８−１５１２と命名される）ＰＲＯ１１８２ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ５９６）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＡＫ００３１２１またはアクセション：ＡＫ００３１２１ＮＩＤ：１２８３３５８３ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ成人雄心臓ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ全長豊富化ライブラリー、クローン：１０１０００１Ｈ１６：ＣＯＬＬＥＣＴＩＮ３４に対するホモログ、十分なインサート配列；タンパク質参照：Ｑ９ＤＣ７５またはアクセション：Ｑ９ＤＣ７５ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。１０１０００１Ｈ１６ＲＩＫＰＲＯＴＥＩＮ。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照ＮＭ０２４０２７またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓコレクチンサブファミリーメンバー１１（ＣＯＬＥＣ１１）、転写体改変体１；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＢＷＰ８またはアクセション：Ｑ９ＢＷＰ８ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。仮定タンパク質。

注目するマウス遺伝子はＣｏｌｅｃ１１（コレクチンサブファミリーメンバー１１）、ヒトＣＯＬＥＣ１１のオルソログである。別名は１０１０００１Ｈ１６ＲｉｋおよびＭＧＣ３２７９を含む。

ＣＯＬＥＣ１１は結合タンパク質として機能するようであるコレクチンファミリーの推定分泌タンパク質である。ＣＯＬＥＣ１１はシグナルペプチド、コラーゲン三重ラセン反復（ＰｆａｍアクセションＰＦ０１３９１）、およびレクチンＣ−型ドメイン（ＰｆａｍアクセションＰＦ０００５９）よりなる。ＣＯＬＥＣ１１の一般的ドメイン組織化を呈するコレクチンは、生来の免疫性において重要な役割を演じる。それらは微生物を認識し、それに結合し、凝集およびオプソニン化によって微生物の接着およびファゴサイトーシスを増強する。コレクチンは肺界面活性剤の成分としても機能し、または呼吸器系感染に対して保護する（Ｈｉｃｋｌｉｎｇｅｔａｌ．，ＪＬｅｕｋｏｃＢｉｏｌ；７５（１）：２７−３３（２００４））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝３．６６有意性＝０．１６０５６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．３０平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＡＫ００３１２１．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料の中で、脳、脾臓、腎臓、肝臓、心臓、および脂肪で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．１４．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ５９８４８−１５１２（ＵＮＱ５９６）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトコレクチンサブファミリーメンバー１１（ＣＯＬＥＣ１１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、突然変異体（−／−）マウスにおいて成長の遅延がもたらされた。異常な骨−関連測定もまた該（−／−）マウスによって呈された。（−／−）マウスは、減少した成長／体重増加に関連する減少した血清トリグリセリドおよび増加した血清グルコースも呈した。雄および雌双方の（−／−）マウスは、履歴平均と比較して減少した心拍（＜２標準偏差）を示した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）骨代謝および体診断剤
（１）組織質量および無脂肪体質量の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体をこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

マウスをアベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｌ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によって麻酔し、身長および体重を測定し、次いで、マウスを、ＤＥＸＡスキャンのために、ＰＩＸＩｍｕｓＴＭデンシトメーター（ＬｕｎａｒＩｎｃ．）のプラットフォーム上に腹臥位置に置いた。ＬｕｎａｒＰＩＸＩｍｕｓソフトウェアを用い、骨ミネラル密度（ＢＭＤ）および脂肪組成（％脂肪）および合計組織質量（ＴＴＭ）を、注目する領域（ＲＯＩ、すなわち、全身、脊椎および双方の大腿）において測定した。

結果：
雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均体重、身長および成長を呈した。

心拍：
雄および雌突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、平均心拍の有意な減少（＜２標準偏差）を呈した。

（２）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、並びに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：
ＤＥＸＡ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均合計組織質量、無脂肪体質量、脂肪（％）および脂肪（グラム）を呈した。しかしながら、（＋／＋）マウスは履歴平均よりも高い体重を有した。これらの記載した変化に加えて、雄突然変異体（−／−）マウスは、減少した骨ミネラル密度および関連測定も呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均大腿中間幹断面積を呈した。

これらの結果は、ノックアウトマウスが、骨折に導く減少した密度および、恐らくは、脆性を伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な有意な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ１１８２ポリペプチドまたはそのアゴニストは骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であるように見える。加えて、ＰＲＯ１１８２ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために有用であろう；他方、ＰＲＯ１１８２ポリペプチドに対するアンタゴニストまたはそのコーディング遺伝子は、関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアを含めた異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。

まとめると、ＥＤＸＡによって分析された（−／−）マウスは体重の顕著な減少、合計組織質量、無脂肪体質量の減少、および減少した骨ミネラル含有量および密度を呈し、これはこれらの突然変異体における成長の遅延を示唆する。かくして、ＰＲＯ１１８２ポリペプチドまたはそのアゴニストは正常な成長および／または成長代謝に必須であるに違いなく、従って、成長障害、悪液質または他の組織消費病の治療または予防で有用であろう。

（ｃ）表現型分析：心臓学
心血管生物学の領域においては、標的は、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール（高コレステロール血症）および上昇した血清トリグリセリド（高トリグリセリド血症）のような異常脂質血症、糖尿病および／または肥満の治療のためにここでは同定された。表現型テストには血清コレステロールおよびトリグリセリドの測定が含まれた。

血中脂質
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。高コレステロールおよび増大したトリグリセリド血中レベルは、心血管病および／または糖尿病の発生において認識された危険因子である。血中脂質の測定は、血中脂質レベルを調節する生物学的スイッチの発見を容易とする。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管病に対する危険性を低下させるのに有用であろう。これらの血液化学テストにおいては、測定はＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて記録した。

結果：
雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均血清トリグリセリドレベルおよび増大した平均血清グルコースレベルを呈したが（正常なインスリンレベルおよびグルコース耐性テストであった）。まとめると、これらのノックアウト突然変異体マウスは、観察された減少した体重、成長および身長の測定と合致する脂質関連表現型を呈した。
４１．１５ＤＮＡ６６６５９−１５９３（ＵＮＱ６８５）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ６６６５９−１５９３と命名される）ＰＲＯ１３２５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ６８５）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ１７２２５７またはアクセション：ＮＭ１７２２５７ＮＩＤ：ｇｉ２６９８６５５０ｒｅｆＮＭ１７２２５７．１Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ仮定タンパク質ＬＯＣ２１４５９７（ＬＯＣ２１４５９７）；タンパク質参照：Ｑ９２２Ｒ２またはアクセション：Ｑ９２２Ｒ２ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。仮定タンパク質ＦＬＪ２０１７４（断片）と同様。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０１５９９６またはアクセション：ＮＭ０１５９９６ＮＩＤ：ｇｉ７７０５７５６ｒｅｆＮＭ０１５９９６．１ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＣＧＩ−４０タンパク質（ＣＧＩ−４０）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９Ｙ３５７またはアクセション：Ｑ９Ｙ３５７ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＣＧＩ−４０タンパク質。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＢＣ０２３９５７（ｃＤＮＡ配列ＢＣ０２３９５７）、ヒトＣＧＩ−４０（ＣＧＩ−４０タンパク質）のオルソログである。別名はＭＧＣ３６４０７、ＭＧＣ５８９６７、Ｂ９３００９６Ｏ１９を含む。

ＣＧＩ−４０は原形質膜に局所化された仮定マルチスパン膜貫通タンパク質である。それはシグナルペプチド、比較的大きな細胞外ドメイン、および９つの膜貫通ドメインよりなる。ＣＧＩ−４０の分子機能は知られていない；しかしながら、それは構造的にはＣ．ｅｌｅｇａｌｓｓｉｄ−１と同様である（系統的ＲＮＡ干渉欠陥ＳＩＤ−１、推定膜貫通タンパク質、系統的ＲＮＡｉ可能化［８７．９ｋＤ］［ｓｉｄ−１］）（Ｌａｉｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ；１０（５）：７０３−１３（２０００））。Ｓｉｄ−１は二本鎖ＲＮＡを細胞に輸送し、系統的ＲＮＡ干渉−媒介遺伝子をＣ．ｅｌｅｇａｎｓにおいてサイレントとする（Ｗｉｎｓｔｏｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ；２９５（５５６４）：２４５６−９（２００２）；ＦｅｉｎｂｅｒｇａｎｄＨｕｎｔｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ；３０１（５６３９）：１５４５−７（２００３））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝２．７４有意性＝０．２５３９６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．３１平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１および２を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ１７２２５７．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料の中で、脊髄および目のみで検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．１５．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ６６６５９−１５９３（ＵＮＱ６８５）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトＣＧＩ−４０タンパク質（ＣＧＩ−４０）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて多病巣変性筋肉障害および腎臓細葉細胞の変化がもたらされた。また、突然変異体（−／−）マウスは減少した平均合計組織質量、無脂肪体質量および脂肪質量（％およびｇ）ならびに減少した骨−関連測定を呈した。また、（−／−）マウスはオボアルブミン攻撃に対する減少した血清ＩｇＧ１応答、および増大した平均血小板カウントも呈した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、通常の生理学においては、傷または負傷に対する応答に臨界的であり、傷または負傷からの修復を開始させ、および外来性生物に対する生来のおよび獲得した防御を備えるかなり複雑で、しばしば複数の相互連結生物学的経路の発現または結果である。病気または病理は、これらの正常な生理学的経路が、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己に対する反応として、またはこれらの組合せとして、応答の強度に直接的に関連してさらなる傷または負傷を引き起こす場合に起こる。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物免疫応答の重要な構成要素である。Ｔ細胞は、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己−分子に関連する抗原を認識する。抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面にＭＨＣ分子とともに提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対する健康の脅威をもたらすこれらの変化した細胞を排除する。Ｔ細胞はヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞を含む。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体の認識に続いてかなり増殖する。また、ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、および免疫応答に参加する種々の他の細胞の活性化において中枢的な役割を演じる種々なサイトカイン、すなわち、リンホカインホカインを分泌する。

以下のテストを行った：
オボアルブミン攻撃
手法：このアッセイは７匹の野生型および８匹のホモ接合体で行った。ニワトリオボアルブミン（ＯＶＡ）は、マウスにおける抗原−特異的免疫応答を研究するためのモデルタンパク質として通常用いられるＴ−細胞依存性抗原である。ＯＶＡは非毒性であって、不活性であり、従って、免疫応答が誘導されなくても、動物に対して害は引き起こさないであろう。ＯＶＡに対するマウス免疫応答は、Ｔ細胞応答を誘導するための免疫優性ペプチドが同定される程度によく特徴付けられている。抗−ＯＶＡ抗体は、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＺＡ）を用い、免疫化の８日ないし１０日後に検出することができ、異なるイソタイプの抗体の測定は、遺伝子工学作成マウスにおける欠陥がある応答に導き得る複雑なプロセスについてさらなる情報を与える。

前記したように、このプロトコルは、抗原−特異的免疫応答を生起させるマウスの能力を評価する。動物は、フロイントの完全アジュバントに乳化した５０ｍｇのニワトリオボアルブミンを腹腔内注射し、１４日後に抗−オボアルブミン抗体（ＩｇＭ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２サブクラス）の血清力価を測定した。血清試料中のＯＶＡ−特異的抗体の量は、９６−ウエル試料プレートをスキャンする機器によって生じる光学密度（ＯＤ）値に比例する。データは各血清試料の系列希釈の組について収集した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：７／４／８
この攻撃の結果：
突然変異体（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に、オボアルブミン攻撃に対して減少した平均血清ＩｇＧ１応答を呈した。かくした、これらのノックアウトマウスは、Ｔ−細胞依存性ＯＶＡ抗原に対するＯＶＡ−特異的抗体応答を誘導する減少した能力を呈した。まとめると、オボアルブミン攻撃実験は、ＰＲＯ１３２５ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏したノックアウトマウスが、それらの野生型同腹子と比較した場合に、免疫学的異常を呈することを示す。突然変異体マウスは、Ｔ−細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃した場合、免疫学的応答を誘導する減少した能力を呈した。これは、ＰＲＯ１３２５ポリペプチドまたはそれらのアゴニストが（Ｔ細胞増殖のような）免疫系を刺激することができる有用な剤であり、白血病、および他のタイプの癌の場合における、およびＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者におけるような、この効果が個人に対して有益であろう場合の用途を見出すであろうことを示唆する。従って、ＰＲＯ１３２５ポリペプチドの阻害剤（アンタゴニスト）は免疫応答を阻害するにおいて有用であり、例えば、移植片拒絶または移植片−対−宿主病の場合において有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であろう。

血液学分析：
テストの記載：血液テストはＡｂｂｏｔｔのＣｅｌｌ−Ｄｙｎ３５００Ｒ、自動血液学アナライザーによって行う。その特徴のいくつかは５−部分ＷＢＣディファレンシャルを含む。「患者」報告は全部で２２のパラメーターをカバーすることができる。

結果：
（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に，増大した平均血小板カウントを呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：８／４／９
かくして、ＤＮＡ６６６５９−１５９３遺伝子が欠乏した突然変異体マウスの結果、凝固障害に関連する表現型がもたらされた。この点に関して、ＰＲＯ１３２５ポリペプチドの阻害剤またはアンタゴニストはヘモフィリアのような異常な血液凝固に関連する障害を治療するのに有用であろう。

（ｃ）病理学
顕微鏡観察：分析で入手した６匹の（−／−）マウスは、好酸球性、線状の喪失、空胞化、収縮した繊維、および核の中心化（好塩基性および増大した核）によって骨格筋において特徴付けられる軽度ないし中程度多病巣変性筋肉障害を呈した。該変化は個々の繊維内に存在し、筋肉中に広く散らばっていた。いくつかの領域においては炎症性分が存在し、個々の筋肉繊維の凝固性壊死に関連する浸潤性顆粒球およびマクロファージが伴った。これらの知見は炎症性および変性筋肉障害の診断を確認する。加えて、３／３雌（−／−）マウスは膵臓細葉細胞の細胞質の変化を呈し、これは、それらの細胞の基底領域における粗い小胞体の低下を反映する。変化は膵臓細葉細胞で観察された。

遺伝子の発現：ＬａｃＺ活性は免疫組織化学分析によって組織のパネルにおいて検出されなかった。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：２／１／６
（ｄ）骨代謝および放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および皮質骨双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定も得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は、腰椎５脊椎小柱骨容量、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを採取した。μＣＴ４０スキャンは骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンされた。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメートル分解能において第五腰椎（ＬＶ５）で分析し、皮質骨パラメーターは２０μメートルの分解能にて大腿中間幹で分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄および雌双方の（−／−）マウスは、それらの性が一致した同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均合計組織質量および平均無脂肪組織質量（雄については１標準偏差）を呈した。雄および雌双方の（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較して、減少した脂肪（５）および脂肪（グラム）を示した。雌（−／−）マウスは増大したＢＭＣ／ＬＢＭ比率も示した。
ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、顕著に減少した平均脊椎小柱骨容量、数、厚み、結合密度を呈した。突然変異体マウスの低下した体サイズはこれらの結果を解釈する場合に考慮されなければならない。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ：
これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが、骨折に導く減少した密度および、恐らくは、脆性を伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な有意に減少した骨測定を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ１３２５ポリペプチドまたはそのアゴニストは骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であるように見える。加えて、ＰＲＯ１３２５ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために有用であろう；他方、ＰＲＯ１３２５ポリペプチドに対するアンタゴニストまたはそのコーディング遺伝子は関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアを含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。

まとめると、ＤＥＸＡによって分析された（−／−）マウスは体重の顕著な減少、合計組織、無脂肪体質量の減少、減少した脂肪含有量および減少した骨ミネラル含有量および密度を呈し、これは、これらの突然変異体における成長の遅延を示唆する。かくして、ＰＲＯ１３２５ポリペプチドまたはそのアゴニストは正常な成長および／または成長代謝で必須に違いなく、従って、成長障害、悪液質または他の組織消費病の治療または予防で有用であろう。（先に示した）病理学的知見は、これらの突然変異体（−／−）マウスが筋肉質量枯渇（特に、多病巣変性筋肉障害）を呈する事実を確認する。
４１．１６ＤＮＡ６６５２６−１６１６（ＵＮＱ７１８）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ６６５２６−１６１６と命名される）ＰＲＯ１３８２ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ７１８）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ１７５６３１またはアクセション：ＮＭ１７５６３１ＮＩＤ：ｇｉ２８２７４６８９ｒｅｆＮＭ１７５６３１．１Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓセレベリン４前駆体タンパク質（Ｃｂｌｎ４）；タンパク質参照：Ｑ８ＢＭＥ９またはアクセション：Ｑ８ＢＭＥ９ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。セレベリン−様糖タンパク質１前駆体（セレベリン４）；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０８０６１７またはアクセション：ＮＭ０８０６１７ＮＩＤ：２１３１３６２６ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓセレベリン前駆体−様１（ＣＢＬＮＬ１）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＮＴＵ７またはアクセション：Ｑ７ＮＴＵ７ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＣＥＲＥＢＥＬＬＩＮ−ＬＩＫＥＧＬＹＣＯＰＲＯＴＥＩＮＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＤＪ８８５Ａ１０．１）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＣｂｌｎ４（セレベリン４前駆体タンパク質）、ヒトＣＢＬＮＬ１（セレベリン前駆体−様１）のオルソログである。別名はセレベリン−様糖タンパク質１およびｄＪ８８５Ａ１０．１を含む。

ＣＢＬＮＬ１はシグナルペプチドおよび補体成分Ｃ１ｑドメインよりなる分泌タンパク質のようである。Ｃ１ｑの折畳みは腫瘍壊死因子（ＳＭＡＲＴアクセションＳＭ００１１０）のそれと同様である。ＣＢＬＮＬ１の機能は現在知られていないが、それは、構造的には、脳および副腎双方でニューロモジュレーターとして機能するファミリーメンバープレセレベリン（ＣＢＬＮ１）と同様である（Ｍａｚｚｏｃｃｈｉｅｔａｌ．，ＪＣｌｉｎＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌＭｅｔａｂ；８４（２）：６３２−５（１９９９）；Ｐａｎｇｅｔａｌ．，ＪＮｅｕｒｏｓｃｉ；２０（１７）：６３３３−９（２０００））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝２．３４有意性＝０．３０９９８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１８平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ１７５６３１．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料の中で、脳；脊髄；目；胸腺；および胃、小腸および結腸で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．１６．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ６６５２６−１６１６（ＵＮＱ７１８）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒトセレベリン前駆体−様１（ＣＢＬＮＬ１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、雌突然変異体（−／−）マウスがホーム−ケージ活動テストの間に減少した歩行カウントを呈するという観察をもたらした。しかしながら、雄（−／−）マウスは開放場テストの間に増大した不安を呈した。雄および雌双方の（−／−）マウスは尿酸レベルの有意な増加を示した。加えて、雄（−／−）マウスは減少した骨−関連測定を呈した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）表現型分析：ＣＮＳ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥多動性障害、強迫障害、精神分裂症、認識障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボで確認された標的を同定するのに焦点をあてた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、恐慌発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

手法：
挙動スクリーニングは４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。全ての挙動テストは、低下した生存率がより早いテストを必要とするのでなければ、１２および１６週齢の間に行った。

日周期テストの記載：
雌マウスをテストの初日の午後４時に、４８．２ｃｍ×２６．５ｃｍホームケージに個々に収容し、食物および水を自由に与える。動物を１２時間の明／暗サイクルに曝露し、午前７時に明かりをつけ、午後７時に明かりを消す。システムソフトウェアは動物の運動によって引き起こされたビーム遮断の数を記録し、ビームの遮断は自動的に歩行に分割される。活動は３日のテストの間に６０回の１時間の間隔で記録される。データを生じさせ、１時間毎に記録されたメジアン活動レベル（日周期リズム）および３日間のテスト期間にわたっての各明／暗サイクルの間のメジアン合計活動（運動活動）によって表示する。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：８／０／８
結果：
雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、ホーム−ケージの活動テストの間に軽度の活動低下を呈した。

前記でまとめたように、ホーム−ケージ活動テストの間に差が観察された。（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に、観察された期間の間に減少した歩行カウントを呈し、これは突然変異体における異常な日周期リズム応答を示唆する。これらの結果は無気力に合致する。

新しい環境に対する通常の習慣的応答を呈するマウスについての性癖を、５回の間隔にわたってのその水平方向運動活動を総じての変化を測定することによって変化した。経時的な活動の変化のこの計算された勾配は、移動した絶対的な合計距離よりはむしろ正規化されたものを用いて決定する。該傾きは、５回の間隔の各々における正規化された活動を通じての回帰曲線から決定した。通常の性癖は、負の傾きの値によって表される。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
開放場活動テストの間に差が観察された。雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合、中心領域における減少したメジアン合計時間を呈した。このタイプの挙動は増大した不安様応答に合致する。ノックアウトマウスは、軽度ないし中程度不安、一般的な医学的疾患による不安、および／または双極性障害；過剰活動；感覚障害；強迫障害、精神分裂症または妄想個性に関連する不安関連障害に合致する表現型を示した。かくして、ＰＲＯ１３８２ポリペプチドまたはそのアゴニストは、そのような神経学的障害の治療、または不安障害に関連する兆候の軽減で有用であろう。

（ｃ）血液化学
テストの記載：ＬｅｘｉｃｏｎＧｅｎｅｔｉｃｓは、マウスについて血液化学テストを行うためのその臨床的設定においてＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いる。

結果：
（−／−）マウスは野生型同腹子と比較して尿酸レベルの有意な増加を示した（雌ｐ＝０．０４１５６；雄ｐ＝０．０１３８３）。腎臓損傷の他の症状は観察されなかった。

（ｄ）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および皮質骨双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：
ＤＥＸＡ：雄ノックアウト（−／−）は骨ミネラル含有量および骨ミネラル密度測定の減少を示した。
雌へテロ接合体（＋／−）およびホモ接合体（−／−）は、野生型同腹子と比較して、合計組織質量、無脂肪体質量および骨ミネラル含有量の増加を示した。
ミクロＣＴ：雄ノックアウトは履歴平均よりも減少した小柱骨容量（１標準偏差）および厚み（１標準偏差）を示した。中間幹大腿合計面積もまた雄ノックアウトで減少した。しかしながら、野生型測定は履歴平均よりも高かった。

これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ１３８２ポリペプチドは骨ホメオスタシスを維持するために、および骨−関連障害の治療において有用であり、他方、ＰＲＯ１３８２ポリペプチドのアンタゴニストまたは阻害剤、またはそのコーディングＤＮＡは異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。
４１．１７ＤＮＡ６８８７４−１６２２（ＵＮＱ７２８）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ６８８７４−１６２２と命名された）ＰＲＯ１４１０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ７２８）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＡＫ０８７６１５またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ２日妊娠成人メス卵管ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ全長豊富化ライブラリー、クローン：Ｅ２３００２５Ｌ２４産物：仮定タンパク質、十分なインサート配列；タンパク質参照：Ｑ８Ｃ２Ｚ８またはアクセション：Ｑ８Ｃ２Ｚ８ＮＩＢ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。仮定タンパク質：ヒト遺伝子配列参照：仮定タンパク質（ＬＯＣ２２１０９１）と同様なＮＭ２０３４２２またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ８ＮＤ９４またはアクセション：Ｑ８ＮＤ９４ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。仮定タンパク質。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子およびヒトオルソログは仮定タンパク質をコードする。別名はＭＧＣ６１７０７を含む。

仮定タンパク質はシグナルペプチド、フィブロネクチン３型ドメイン、およびＣ−末端膜貫通セグメントを含有するＩ型原形質膜タンパク質のようである。フィブロネクチン３型ドメインは広く種々の細胞内および細胞外タンパク質で見出され、タンパク質−タンパク質相互作用に関与する（ＳＭＡＲＴアクセションＳＭ０００６０）。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．０９有意性＝０．９５７４５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹子サイズ＝９
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＡＫ０８７６１５．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．１７．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ６８８７４−１６２２（ＵＮＱ７２８）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒト仮定膜タンパク質のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、雌突然変異体（−／−）マウスが減少したインスリンレベルと共に血清グルコースの上昇したレベルを呈するという観察がもたらされた。加えて、雄ノックアウトは減少した合計組織質量および骨−ミネラル密度測定を示した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）表現型分析：代謝−血液化学／血清グルコースレベル
代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は血中グルコース測定を含む。マウスについて血液化学テストを行うために、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いた。代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。異常なグルコーステストの結果は、限定されるものではないが、以下の障害または疾患：糖尿病１型および２型、症候群Ｘ、種々の心血管病および／または肥満を示すことができる。

手法：４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトをこのアッセイで用いた。

結果：
血液化学：雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、増加した平均血清グルコースレベルを呈した。加えて、（−／−）マウスはインスリンの減少したレベルを示した。かくして、ノックアウトマウスは、異常なインスリンレベル（低）および上昇したレベルの絶食血清グルコースを伴う損なわれたグルコースホメオスタシスの表現型パターンを呈し、これは、糖尿病またはプレ−糖尿病疾患を示す。これらの結果に基づき、ＰＲＯ１４１０ポリペプチド（またはそのアゴニスト）は、損なわれたグルコース代謝および／または糖尿病の治療で有用であろう。

（ｃ）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および皮質骨双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：ＤＥＸＡ：雄ノックアウト（−／−）は、性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較して、合計組織質量および骨ミネラル密度測定の減少を示した。
ミクロＣＴ：雄ノックアウトは、減少した小柱骨容量および厚みならびに中間幹大腿合計面積を示した。

これらの結果は、雄ノックアウト突然変異体マウスが、骨折に導く減少した密度および、恐らくは、脆性を伴う骨質量の減少によって特徴づけられる骨粗鬆症と同様な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ１４１０ポリペプチドは骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であり、骨治癒のために、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために有用であり、他方、ＰＲＯ１４１０ポリペプチドのアンタゴニストまたは阻害剤またはそのコーディングＤＮＡは、骨粗鬆症と同様な異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。
４１．１８ＤＮＡ７３７４４−１６６５（ＵＮＱ７６３）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ７３７４４−１６６５と命名された）ＰＲＯ１５５５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ７６３）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ０２２４１８またはアクセション：ＮＭ０２２４１８ＮＩＤ：ｎａＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ仮定タンパク質、クローン１−２（ＡＢ０３０１８３）；タンパク質参照：Ｑ９ＪＭＧ３またはＱ９ＪＭＧ３Ｑ９ＪＭＧ３ＭＲＮＡ、ＣＯＭＰＬＥＴＥＣＤＳ，ＣＬＯＮＥ：１−２２０１０００４Ｏ２０ＲＩ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０３１４３４またはアクセション：ＮＭ０３１４３４ＮＩＤに対応し：ｎａＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ仮定タンパク質ＭＧＣ５４４２（ＭＧＣ５４４２）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＢＶＴ８またはＱ９ＢＶＴ８Ｑ０ＢＶＴ８ＳＩＭＩＬＡＲＴＯＨＹＰＯＴＨＥＴＩＣＡＬＰＲＯＴＥＩＮ，ＣＬＯＮＥ１−２に対応する。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２０１０００４Ｏ２０遺伝子、ヒトＣ７ｏｒｆ２１（染色体７オープンリーディングフレーム２１）のオルソログである。別名はＳＢ１４４およびＭＧＣ５４４２を含む。

Ｃ７ｏｒｆ２１はシグナルペプチド、ユビキチンファミリードメイン（ＰｆａｍアクセションＰＦ００２４０）、および２つのＣ−末端膜貫通セグメントよりなる仮定タンパク質である。このタンパク質の細胞位置は明らかでないが、バイオインフォマティック分析はＣ７ｏｒｆ２１が分泌できることを示唆する。ユビキチンファミリードメインはＳＵＭＯ、ＮＥＤＤ８、およびＡｐｇ１２のようなユビキチン−様タンパク質に見出される。ユビキチン−様タンパク質は標的タンパク質との連結を受け、それにより、プロテオソーム分解、細胞周期進行、細胞シグナリング、および免疫認識のような生物学的プロセスを媒介する（Ｙｅｈｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ；２４８（１−２）：１−１４（２０００）；Ｈｏｃｈｓｔｒａｓｓｅｒ，ＮａｔＣｅｌｌＢｉｏｌ；２（８）：Ｅ１５３−７（２０００）；Ｈｏｃｈｓｔｒａｓｓｅｒ，Ｃｅｌｌ；１０７（１）：５−８（２００１））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝１．８０有意性＝０．４０６５７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹子サイズ＝９
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１および２を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２２４１８．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、肺、骨格筋、および骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．１８．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ７３７４４−１６６５（ＵＮＱ７６３）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒト染色体７オープンリーディングフレーム２１（Ｃ７ｏｒｆ２１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて、増大した平均絶対単球カウントがもたらされた。（−／−）マウスは、異常な骨測定を伴う減少した合計体脂肪を呈した。加えて、（−／−）マウスは日周期リズムテストの間に増大した運動活動も呈した。雄（−／−）マウスは損なわれたグルコース耐性を示したが、インスリンレベルは正常であった。遺伝子破壊はサザーンブロットによって確認された。

日周期テストの記載：
雌マウスをテストの初日の午後４時に、４８．２ｃｍ×２６．５ｃｍホームケージに個々に収容し、食物および水を自由に与える。動物を１２時間の明／暗サイクルに曝露し、午前７時に明かりをつけ、午後７時に明かりを消す。システムソフトウェアは動物の運動によって引き起こされたビーム遮断の数を記録し、ビームの遮断は自動的に歩行に分割される。活動は３日のテストの間に６０回の１時間の間隔で記録される。データを生じさせ、１時間毎に記録されたメジアン活動レベル（日周期リズム）および３日間のテスト期間にわたっての各明／暗サイクルの間のメジアン合計活動（運動活動）によって表示する。かくして、突然変異体（−／−）マウスが重度の過剰活動性であることを呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、馴化期間の双方の暗相の間に増大したメジアン歩行カウントを呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：８／０／８
前記でまとめたように、ホーム−ケージ活動テストの間に顕著な差が観察された。これらの結果は、暗期間の間における増大した運動活性と合致する。これらの知見は、突然変異体（−／−）マウスが過剰活動性であることを示唆し、これは、異常な日周期リズムパターンに関連する神経学的障害を示唆する。ＰＲＯ１５５５ポリペプチドのアンタゴニストまたは阻害剤は、この神経学的表現型を模倣すると予測されるであろう。他方、ＰＲＯ１５５５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、そのような神経学的障害の治療で有用であろう。

（ｃ）骨代謝および体診断剤：骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および皮質骨双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

Ｄｅｘａ分析―テストの記載：
手法：デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、容量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

ＣＡＴ−スキャンプロトコル：
マウスにＣＴコントラスト剤、Ｏｍｎｉｐａｑｕｅ３００（ＮｙｃｏｍｅｄＡｍｅｒｓｈａｍ，ｍｌ当たり３００ｍｇのヨウ素、動物当たり０．２５ｍｌ、または２．５０ないし３．７５ｇヨウ素／ｋｇ体重）を腹腔内注射した。ケージ中で〜１０分間休息させた後、次いで、アベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｌ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によってマウスを鎮痛させた。テストベッド上に腹臥させた麻酔動物にて、ＭｉｃｒｏＣＡＴスキャナー（ＩｍＴｅｋ，Ｉｎｃ．）を用い、ＣＡＴ−スキャンを行った。三次元イメージは、ＩｍＴｅｋ３ＤＲＥＣＯＮソフトウェアを用い、ワークステーションのクラスターにてＦｅｌｄｋａｍｐアルゴリズムによって復元した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄および雌の双方の（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均パーセント合計体脂肪および平均合計脂肪質量を呈した。雄突然変異体は増加した無脂肪体質量および平均大腿骨ミネラル密度も呈した。雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した野生型同腹子と比較して、減少した合計組織質量を示したが、野生型マウスは履歴対照よりも高かった。
ミクロ−ＣＴ：雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、増大した平均大腿中間幹皮質厚みを呈したが、野生型は履歴平均よりも高かった。加えて、雄（−／−）マウスの小柱骨容量、数および欠乏密度は増加したが、野生型の測定は履歴平均よりも低かった。
ＣＡＴ−スキャン：テストした２匹の２（−／−）マウスは減少した腹内脂肪、恐らくは、拡大した腎臓を呈した。

まとめると、（−／−）マウスは、それらの性が一致した（（＋／＋）同腹子と比較した場合に、減少した平均合計体脂肪および脂肪質量を呈した。これらの観察は、異常脂質血症または脂肪貯蔵枯渇または他の代謝障害に関連する組織消費障害を示唆する。ＣＡＴスキャンの結果は、腎臓が同様に拡大していることを示す。加えて、突然変異体（−／−）マウスは異常な骨発生を呈した。かくして、ＰＲＯ１５５５ポリペプチドのアンタゴニストまたは阻害剤またはＰＲＯ１５５５コーディング遺伝子はこの陰性代謝表現型を模倣すると予測されるであろう。同様に、ＰＲＯ１５５５ポリペプチドまたはそのアゴニストは正常な代謝および／または成長発達で必須であり、この観察された陰性表現型に関連する関連成長、または代謝障害の治療で有用であろう。
（ｄ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、正常な生理学では、傷または負傷に応答し、傷または負傷からの修復を開始し、外来性生物に対する生来のおよび獲得した防御を準備するかなり複雑でしばしば複数の相互連結生物学的経路の発現または結果である。これらの正常な生理学的経路が、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己に対する反応として、またはそれらの組合せとして、応答の強度に直接的に関連して追加の傷または負傷を引き起こす場合に、病気または病理が起こる。

多くの免疫応答においては、炎症細胞は負傷または感染の部位に浸潤する。移動する細胞は、侵された組織の組織学的調査によって判断できるように、好中球、好酸球、単球またはリンパ球性であり得る。ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｅｄ．ＪｏｈｎＥ．Ｃｏｌｉｇａｎ，１９９４，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．
多くの免疫関連病が知られており、広範に研究されてきた。そのような病気は（慢性関節リウマチ、免疫媒介腎臓病、肝臓胆管病、炎症性長疾患（ＩＢＤ）、乾癬および喘息のような）免疫−媒介炎症病、非−免疫−媒介炎症病、感染症、免疫不全病、新形成、および移植片拒絶などを含む。免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症性障害の治療で同定された。

以下のテストを行った：
（１）血液学分析：
テストの記載：血液テストはＡｂｂｏｔｔのＣｅｌｌ−Ｄｙｎ３５００Ｒ、自動血液学アナライザーによって行う。その特徴のいくつかは５−部分ＷＢＣディファレンシャルを含む。「患者」報告は全部で２２パラメーターにわたってカバーすることができる。

結果：
（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、増大した平均絶対単球カウントを呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：７／４／８
まとめると、血液学結果は、ホモ接合性突然変異体マウスがそれらの同腹子対象と比較して増大した単球カウントを呈することを示し、これは、マクロファージの前駆体の上昇したレベルを示す。これらの結果は、ホモ接合性（−／−）ノックアウトマウスが陽性免疫学的表現型を呈することを示す。これらの免疫学的知見は、ＰＲＯ１５５５ポリペプチドの阻害剤（アンタゴニスト）が、（Ｔ細胞増殖のような）免疫系を刺激し、白血病、および他のタイプの癌の場合における、およびＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者におけるような、個体に対してこの効果が有益である場合に用途を見出す重要な剤であろうことを示唆する。従って、ＰＲＯ１５５５ポリペプチドまたはそのアゴニストは免疫応答を阻害するにおいて役割を演じ、例えば、移植片拒絶または移植片−対−宿主病の場合において、有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であろう。

（ｅ）表現型分析：代謝−血液化学／グルコース耐性
代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は血中グルコース測定を含む。ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈ）は、マウスについて血液化学テストを行うために用いた。代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するためのグルコース耐性テストを含む。異常なグルコース耐性テストの結果は、限定されるものではないが、以下の障害または疾患：糖尿病１型および２型、症候群Ｘ、種々の心血管病および／または肥満を含むことができる。

手法：４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトをこのアッセイで用いた。グルコース耐性テストは、哺乳動物における損なわれたグルコースホメオスタシスを規定するための標準である。グルコース耐性テストは、Ｌｉｆｅｓｃａｎグルコメーターを用いて行った。動物に、２０％溶液として送達されるＤ−グルコースを２ｇ／ｋｇにて腹腔内注射し、血中グルコースレベルを注射から０、３０、６０および９０分後に測定した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
これらの実験は、雄（−／−）マウスが、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、テストした全ての３つの間隔において正常絶食グルコースの存在下で損なわれたグルコース耐性を呈することを示した。加えて、高インスリン血症は（−／−）マウスでは明らかでなかった。残りの臨床化学データでは異常は見られなかった。かくして、ノックアウトマウスは損なわれたグルコースホメオスタシスの表現型パターンを呈し、それ自体、ＰＲＯ１５５５ポリペプチドに対するアンタゴニストはこれらの代謝効果を模倣すると予測されるであろう。同様に、ＰＲＯ１５５５ポリペプチドまたはそのアンタゴニストは、損なわれたグルコースホメオスタシスの治療で有用であろう。
４１．１９ＤＮＡ７６５２９−１６６６（ＵＮＱ７６４）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ７６５２９−１６６６と命名される）ＰＲＯ１５５６ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ７６４）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ１９７９９１またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２３１００４４Ｈ１０遺伝子（２３１００４４Ｈ１０Ｒｉｋ）；タンパク質参照：Ｑ８ＶＣＤ８またはアクセション：Ｑ８ＶＣＤ８ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。仮定２７．０ｋＤａタンパク質。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ２０６５３８またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ仮定タンパク質ＬＯＣ２８４３６１（ＬＯＣ２８４３６１）、転写体改変体２；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ８Ｎ５４１またはアクセション：Ｑ８Ｎ５４１ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＬＯＣ１２６１２２（仮定タンパク質）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２３１００４４Ｈ１０遺伝子、ヒト仮定タンパク質ＬＯＣ２８４３６１のオルソログである。別名はＩＮＭ０２、ＡＡＡＳ７６４、ＭＧＣ３３２０３、および２３１００４４Ｈ１０Ｒｉｋを含む。

仮定タンパク質はシグナルペプチドおよびＣ−末端膜貫通セグメントよりなり、該タンパク質はＩ型原形質膜タンパク質であることを示唆する。オルソログヒト遺伝子は、膜貫通セグメントを欠く、シグナルペプチドおよび多様なＣ−末端よりなる第二の改変体をコードする。この改変体は分泌されると予測される。

Ｃｈｉ−Ｓ９．＝３．２７有意性＝０．１９４９３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入はコーディングエクソン１および２の間のイントロンで起こった（ＮＣＢＩアクセションＮＭ１９７９９１．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨格筋、骨および脂肪を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料で検出された。
ＲＴ−ＰＣＲ分析は、転写体が分析した（−／−）マウス（Ｍ−１８４）で存在しないことを明らかとした。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認された。
４１．１９．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ７６５２９−１６６６（ＵＮＱ７６４）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒト仮定膜タンパク質のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、雄（−／−）マウスにおいて増強されたグルコース耐性および減少した受精能がもたらされた。雌ノックアウトは有意に増大したビリルビンレベルおよび減少したリンレベルを示した。雄ノックアウトは減少した小柱骨測定を示した。雌（−／−）マウスは増大した不安−関連応答を呈した。転写体はＲＴ−ＰＣＲによると存在しなかった。

新しい環境に対する通常の習慣的応答を呈するマウスについての性癖を、５回の間隔にわたってのその水平方向運動活動を総じての変化を測定することによって変化した。経時的な活動の変化のこの計算された勾配は、移動した絶対的な合計距離よりはむしろ正規化されたものを用いて決定する。該傾きは、５回の間隔の各々における正規化された活動を通じての回帰曲線から決定した。通常の性癖は、負の傾きの値によって表される。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
開放場活動テストの間に顕著な差が観察された。雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合に、中心領域において減少したメジアン合計時間を呈した。このタイプの挙動は増大した不安様応答に合致する。ノックアウトマウスは、軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安、および／またはニ極障害；過剰活動性；感覚障害；脅迫障害、精神分裂症または妄想個性に関連する不安関連障害に合致する表現型を示した。かくして、ＰＲＯ１５５６ポリペプチドまたはそのアゴニストは、そのような神経学的障害の治療、または不安障害に関連する兆候の軽減で有用であろう。

（ｃ）表現型分析：代謝−血液化学
（１）グルコース耐性
代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は血中グルコース測定を含む。マウスについて血液化学テストを行うために、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いた。代謝の領域においては、標的を糖尿病の測定のために同定することができる。血液化学表現型分析は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するためのグルコース耐性テストを含む。異常なグルコース耐性テストの結果は、限定されるものではないが、以下の障害または疾患：糖尿病１型および２型、症候群Ｘ、種々の心血管病および／または肥満を含むことができる。

手法：４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトをこのアッセイで用いた。グルコース耐性テストは、哺乳動物において損なわれたグルコースホメオスタシスを規定するための標準である。グルコース耐性テストは、Ｌｉｆｅｓｃａｎグルコメーターを用いて行った。動物に、２０％溶液として送達されるＤ−グルコースを２ｇ／ｋｇにて腹腔内注射し、血中グルコースレベルを注射から０、３０、６０および９０分後に測定した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍｏ：４／４／８
結果：
これらの実験は、雄（−／−）マウスが、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、テストした全ての３つの間隔において正常絶食グルコースの存在下で増強されたグルコース耐性を呈することを示した。雄（−／−）マウスは減少した血清グルコースレベルも示した。加えて、高インスリン血症は（−／−）マウスにおいて明らかでなかった。残りの臨床化学データでは異常は見られなかった。かくして、ノックアウトマウスは損なわれたグルコースホメオスタシスの反対表現型パターンを呈し、それ自体、ＰＲＯ１５５６ポリペプチドに対するアンタゴニストまたはそのコーディング遺伝子は損なわれたグルコースホメオスタシスの治療で有用であろう。

（２）ビリルビン／リン
雌ノックアウトマウス（−／−）は、血清ビリルビンの有意に上昇したレベルを示した（ｐ＝０．０４３９９）。リンレベルは雄マウスにおいて優位に減少した（ｐ＝０．０４６２０３）。

（ｄ）体診断剤
受精能
結果：
分析のために入手可能な単一の雄（−／−）マウスは受精不能であった。育種および４回の交配から６０日後に子供は生まれなかった。雄突然変異体は健康なように見えて腹部圧力によって陰茎勃起を誘導させることができ、雌交配において膣プラグが観察され、これは、受精不能は精子の欠陥に最もよるようであると示唆する。

結果：
ミクロＣＴ：雄ノックアウト（−／−）は、野生型同腹子と比較した場合、小柱結合密度および中間幹大腿厚みおよび合計面積の減少を示した。これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが、骨折に導く減少した密度および、恐らくは、脆性を伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ１５５６ポリペプチドまたはそのアゴニストは骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であるらしい。加えて、ＰＲＯ１５５６ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために重要であろう；他方、ＰＲＯ１５５６ポリペプチドに対するアンタゴニストまたはそのコーディング遺伝子は、関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアを含めた、異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。
４１．２０ＤＮＡ７６５３２−１７０２（ＵＮＱ８３３）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ７６５３２−１７０２と命名される）ＰＲＯ１７６０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ８３３）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＡＫ００６６５８またはアクセション：ＡＫ００６６５８ＮＩＤ：ｎａＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ成人雄精巣ｃＤＮＡ、産物：仮定プロテアーゼ関連（ＰＡ）ドメイン含有タンパク質、十分なインサート配列；タンパク質参照：ＢＡＢ２４６９３または命名されていないタンパク質産物［Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ］；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０３２３１９またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ染色体２オープンリーディングフレーム７（Ｃ２ｏｒｆ７）に対応し；ヒトタンパク質配列は参照：ＮＰ１１５６９５または染色体２オープンリーディングフレーム７に対応する。

注目するマウス遺伝子は仮定タンパク質、ヒトＣ２ｏｒｆ７（染色体２オープンリーディングフレーム７）のオルソログである。

Ｃ２ｏｒｆ７はシグナルペプチド、プロテアーゼ−関連（ＰＡ）ドメインまたはＮ−末端膜貫通領域を有すると予測される。ＰＡドメインは植物小胞ソーティング受容体において、および種々のプロテアーゼおよびＲＩＮＧ−型亜鉛フィンガーファミリー（ＩｎｔｅｒＰｒｏＩＰＲ００３１３７）において観察されている。ＰＡ−型領域を含有するが、Ｃ２ｏｒｆ７がプロテアーゼであることを示唆するものは他に何もない。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝３．１６有意性＝０．２０６４０（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入はコーディングエクソン１および２の間のイントロンで起こった（ＮＣＢＩアクセションＡＫ００６６５８）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨格筋および胃、小腸、および結腸を除いて、胚性幹（ＥＳ）細胞において、およびＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
ＲＴ−ＰＣＲ分析は、転写体は分析した（−／−）マウス（Ｆ−７０）においては、腎臓では低下し、脾臓では存在しないことを明らかにした。
４１．２０．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ７６５２３−１７０２（ＵＮＱ８３３）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒト染色体２オープンリーディングフレーム７（Ｃ２ｏｒｆ７）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて増大した腰椎測定がもたらされた。転写体は、ＲＴ−ＰＣＲによって測定して、脾臓では存在せず、腎臓では低下した。

（ｂ）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および皮質骨双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：
ノックアウト（−／−）マウスは、それらの野生型同腹子と比較して増大した腰椎５脊椎測定を呈した。かくして、ＰＲＯ１７６０ポリペプチドをコードする遺伝子をノックアウトすると、その結果、骨−関連病を示唆する表現型がもたらされる。かくして、ＰＲＯ１７６０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、骨粗鬆症のような異常な骨発生に関連する疾患を治療するのに有用であろう。
４１．２１ＤＮＡ７６５１０−２５０４（ＵＮＱ８４９）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ７６５１０−２５０４と命名される）ＰＲＯ１７８７ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ８４９）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＡＫ０９０２７８またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ１６日新生雄延髄ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ全長豊富化ライブラリー、クローン：Ｇ６３００３３Ｋ１９産物に対応する：ＰＲＯＴＥＩＮＺＥＲＯＲＥＬＡＴＥＤＰＲＯＴＥＩＮ（ＭＹＥＬＩＮＰＲＯＴＥＩＮＺＥＲＯ−ＬＩＫＥ１）［Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ］、十分なインサート配列と同様；タンパク質参照：ＸＰ１２９５６５またはＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１１１０００７Ａ１０［Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ］；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ００３９５３またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓミエリンタンパク質ゼロ−様１（ＭＰＺＬ１）；ヒトタンパク質配列は参照：ＮＰ００３９４４またはミエリンタンパク質ゼロ−様１；タンパク質ゼロ関連［Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ］に対応する。

注目するマウス遺伝子はＭｐｚｌ１（ミエリンタンパク質ゼロ−様１、１１１０００７Ａ１０Ｒｉｋであり、これはヒトＭＰＺＬ１のオルソログである。別名はＰＺＲおよびタンパク質ゼロ関連を含む。

ＭＰＺＬ１は、細胞外マトリックスタンパク質フィブロネクチンに対する受容体として機能するようであるＩ型膜タンパク質である（Ｚａｎｎｅｔｔｉｎｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＪ；３７０（Ｐｔ２）：５３７−４９（２００３））。ＭＰＺＬ１はシグナルペプチド、免疫グロブリンＶ型ドメイン、膜貫通ドメイン、および２つのタンデム免疫受容体チロシン−ベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含有する。ＭＰＺＬ１の活性化に際しては、ＩＴＩＭはチロシンリン酸化され、その結果、ＳＨＰ−２（Ｓｒｃ相同性ホスファターゼ２型）が動員され、活性化される（Ｚｈａｏｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ：２７７（１０）：７８８２−８（２００２）；ＺｈａｏａｎｄＺｈａｏ，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７５（８）：５４５３−９（２０００））。ＭＰＺＬ１は広く発現されるが、心臓、胎盤、腎臓および膵臓において特に豊富である（ＺｈａｏａｎｄＺｈａｏ，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７３（４５）：２９３６７−７２（１９９８））。ＭＰＺＬ１に加えて、ＩＴＩＭを欠く２つの他のイソ形態が、交互のスプライシングによって起こる。ＭＰＺＬ１は細胞移動性および発生に関与するらしい（Ｚａｎｎｅｔｔｉｎｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＪ；３７０（Ｐｔ２）：５３７−４９（２００３））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝５．１０有意性＝０．０７８１８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：レトロウイルスの挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルスの挿入はコーディングエクソン１および２の間で起こった（アクセションＡＫ０９０２７８）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は胚性幹（ＥＳ）細胞において、およびＲＴ−ＰＣＲによってテストした全ての１３の成人組織試料において検出された。
ＲＰ−ＰＣＲ分析は、転写体が、分析した（−／−）マウス（Ｍ−１２６）において、脾臓では存在せず、３０ＰＣＲサイクルにおいて心臓では大いに低下したことを明らかにした。
４１．２１．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ７６５１０−２５０４（ＵＮＱ８４９）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトミエリンタンパク質ゼロ−様１（ＭＰＺＬ１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、突然変異体（−／−）マウスが増大した腰椎測定を呈するという観察をもたらした。転写体は、ＲＴ−ＰＣＲによって測定して、脾臓では存在せず、心臓では大いに低下した。

結果：
ノックアウト（−／−）マウスは、それらの野生型同腹子と比較して、増大した小柱数と共に増大した腰椎５脊椎測定を呈した。かくして、ＰＲＯ１７８７ポリペプチドをコードする遺伝子をノックアウトすれば、その結果、骨−関連病を示唆する表現型がもたらされる。かくして、ＰＲＯ１７８７ポリペプチドまたはそのアゴニストは、異常な骨発生に関連する疾患を治療するのに有用であろう。
４１．２２ＤＮＡ７７６２４−２５２５（ＵＮＱ８５９）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ７７６２４−２５１５と命名される）ＰＲＯ１８６８ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ８５９）が破壊された。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ０２３２７７またはアクセション：ＮＭ０２３２７７ＮＩＤ：１２９６３６１２ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ連結細胞接着分子３（Ｊｃａｍ３）；タンパク質参照：Ｑ９ＥＰＫ４またはアクセション：Ｑ９ＥＰＫ４ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＪＵＮＣＴＩＯＮＡＬＡＤＨＥＳＩＯＮＭＯＬＥＣＵＬＥ−２，ＪＡＭ−２（１１１０００２Ｎ２３ＲＩＫＰＲＯＴＥＩＮ）。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ０３２８０１またはアクセション：ＮＭ０３２８０１ＮＩＤ：２１７０４２８５ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ連結接着分子３（ＪＡＭ３）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ８ＷＷＬ８またはアクセション：Ｑ８ＷＷＬ８ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。接合接着分子３。

注目するマウス遺伝子はＪａｍ３（接合接着分子３）、ヒトＪＡＭ３のオルソログである。別名はＪＡＭ−３、Ｊｃａｍ３、１１１０００２Ｎ２３Ｒｉｋ、ＦＬＪ１４５２９、および接合細胞接着分子３を含む。

ＪＡＭ３は、細胞接着分子、および白血球上で発現されるベータ２−インテグリンＭａｃ−１に対するカウンター−受容体、および上皮および内皮細胞の密接連結において発現される連結接着分子ＪＡＭ２として機能するＩ型原形質膜タンパク質である。該タンパク質はシグナルペプチド、２つの免疫グロブリン−様折畳み、膜貫通セグメント、および４６−アミノ酸細胞質セグメントよりなる（Ａｒｒａｔｅｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７６（４９）：４５８２６−３２（２００１）；Ｓａｎｔｏｓｏｅｔａｌ．，ＪＥｘｐＭｅｄ；１９６（５）：６９−９１（２００２）；Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７７（３１）：２７５８９−９２（２００２）；Ｐａｌｍｅｒｉｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７５（２５）：１９１３９−４５（２０００））。ＪＡＭ３発現は血小板、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、および樹状細胞で検出されてきた（Ｌｉａｎｇｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ；１６８（４）：１６１８−２６（２００２））。

ＪＡＭ３は、ＪＡＭ２を発現する内皮細胞の密接連結を介して第二のリンパ系器官および炎症の部位への免疫細胞の移動を媒介するようである（Ａｒｒａｔｅｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７６（４９）：４５８２６−３２（２００１）；Ｌｉａｎｇｅｔａｌ．，ＪＩｍｍｕｎｏｌ；１６８（４）：１６１８−２６（２００２））。さらに、ＪＡＭ３は、ＪＡＭ３を発現する沈積された血小板を介して内皮から露出された負傷血管系を通じてＭａｃ−１を発現する免疫細胞の移動を容易とするようである（Ｓａｎｔｏｓｏｅｔａｌ．，ＪＥｘｐＭｅｄ；１９６（５）：６７９−９１（２００２））。これらの生物学的役割は、ＪＡＭ３がアテローム性血栓を含めた炎症病の治療的介入に対する新しい標的であり得ることを示唆する（Ｃｈａｖａｋｉｓｅｔａｌ．，ＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓｔ；８９（１）：１３７（２００３））。ＪＡＭ３は心臓発生、および酷いヒト先天性心臓血管低形成左側心臓にも関与し得る（Ｐｈｉｌｌｉｐｓｅｔａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ；７９（４）：４７５−８（２００２））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝３．００有意性＝０．２２３１３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１７平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２３２７７．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料のうち、脳、脊髄および目のみで検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．２２．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ７７６２４−２５１５（ＵＮＱ８５９）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト関節接着分子３（ＪＡＭ３）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて成熟先天性核レンズ白内障がもたらされた。（−／−）マウスは増大した運動活動（開放場テストにおける過剰活動性）も呈した。突然変異体（−／−）マウスは、サイズがより小さく、減少した体重、および減少した平均合計組織質量、無脂肪体質量および合計脂肪質量である顕著な成長遅延を呈した。雄（−／−）マウスは受精不能であり、欠陥がある精子形成を伴う性機能低下を呈した。加えて、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈの育種コロニーにおいては、ノックアウトマウスはメンデルの頻度で表されず−ＵＮＱ８５９（−／−）マウスの約５０％が誕生後に脂肪する。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）骨代謝および体診断剤
（１）組織質量および無脂肪体質量測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：デュアルＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

一般的観察：
分析した４匹のアルビノ（−／−）マウスは白内障を呈した。白内障はさらなる調査に際して黒色およびアグーティ（−／−）マウスでも観察され、該表現型はアルビノ突然変異体においてより顕著であった。

結果：
（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均体重および減少した平均身長を呈した。

受精能：
分析のために入手可能な雄（−／−）マウスは４回の交配および４０日の育種の後に子供を作らなかった。

（２）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・小柱および皮質骨双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

ＣＡＴ−スキャンプロトコル：
マウスにＣＴコントラスト剤、Ｏｍｎｉｐａｑｕｅ３００（ＮｙｃｏｍｅｄＡｍｅｒｓｈａｍ，ｍｌ当たり３００ｍｇのヨウ素、動物当たり０．２５ｍｌ、または２．５０ないし３．７５ｇヨウ素／ｋｇ体重）を腹腔内注射した。ケージ中で〜１０分間休息させた後、次いで、アベルチン（１．２５％の２，２，２−トリブロモエタノール、２０ｍｇ／ｋｇ体重）の腹腔内注射によってマウスを鎮痛させた。テストベッド上に腹臥させた麻酔動物にて、ＭｉｃｒｏＣＡＴスキャナー（ＩｍＴｅｋ，Ｉｎｃ．）を用い、ＣＡＴ−スキャンを行った。三次元イメージは、ＩｍＴｅｋ３ＤＲＥＣＯＮソフトウェアを用い、ワークステーションのクラスターにてＦｅｌｄｋａｍｐアルゴリズムによって復元した。

結果：ＤＥＸＡ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均合計組織質量、無脂肪体質量、および合計脂肪質量を呈した。加えて、雄ノックアウト（−／−）マウスは、野生型同腹子と比較して増大したＢＭＣ／ＬＢＭ比率を示した。
ＣＡＴ−スキャン：分析で入手可能な雄（−／−）マウスの双方（Ｍ−１４７およびＭ−１８６）は中程度により小さな精巣を呈し、性機能低下を示唆する。雄（−／−）マウスは野生型同胞（０．２１４ｇ）および履歴データ（０．０５８ｇの標準偏差での０．２１６ｇ）と比較して、減少した精巣重量（０．１３７ｇの平均）を呈した。単一の（＋／−）雄マウスは顕著に拡大された左側精巣を呈し（Ｍ−１４８）、これは炎症のような獲得された病巣によるものであろう。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／５／９
病理学
肉眼での観察：白内障は（−／−）マウスの全てにおいて認められた。
顕微鏡観察：（−／−）マウスは先天性核レンズ白内障を呈し、これはこれらの突然変異体マウスで見られた主な目病巣に過ぎなかった。加えて、分析のために入手可能な雄（−／−）マウスは小さな精巣および精巣上体を呈した。欠陥があるまたは阻止された精子形成が、生殖細胞の数および割合のかなりの変化を伴って全ての輪精細管で認められ；少数の細管はＳｅｒｔｏｌｉ細胞で専らライニングされていた。多数の巨細胞およびアポトーシス生殖細胞があったが、非常に少数の成熟精子細胞しか精巣小体および輪精細管で存在しなかった。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は免疫組織化学分析によって組織のパネルで検出されなかった。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：２／１／１０
まとめ
診断／放射線学および病理学的実験は、突然変異体（−／−）マウスが、低い体重および減少した平均合計組織質量、無脂肪体質量および合計体脂肪によってマークされる顕著な成長遅延を呈することを示す。該雄マウスは欠陥がある精子形成、受精不能および性機能低下を伴う酷い生殖系障害も示す。ヘテロ接合性雄（＋／＋）マウスは炎症性疾患にリンクされた生殖性障害の兆候をやはり示した。加えて、病理学報告は、突然変異体（−／−）マウスが酷い先天性核レンズ白内障を有することを示す。かくして、ＰＲＯ１８６８ポリペプチドをコードする遺伝子をノックアウトすると、酷い成長、生殖系および眼科障害を引き起こす。ＰＲＯ１８６８ポリペプチドまたはＰＲＯ１８６８ポリペプチドをコードする遺伝子のアンタゴニストまたは阻害剤はこれらの陰性表現型疾患を模倣すると予測される。かくして、ＰＲＯ１８６８ポリペプチドをコードする遺伝子は特に雄において正常な成長および生殖系の発生で必須なようである。

（ｃ）心血管表現型分析：
心血管生物学の領域においては、表現型テストを行って、心血管、内皮または脈管形成障害の治療のための潜在的標的を同定した。１つのそのような表現型テストは、網膜動静脈比率（Ａ／Ｖ比率）を測定して、種々の目の異常を伝達するための眼底写真およびアンジオグラフィーを含んだ。異常なＡ／Ｖ比率は、高血圧の血管病（および高血圧を引き起こすいずれかの病気、例えば、アテローム性動脈硬化症）、糖尿病、または眼科障害に対応する他の目の病気に関連し得るそのような全身病または障害を知らせる。そのような目の異常は、限定されるものではないが、以下のものを含むことができる：網膜異常は網膜形成不全、種々の網膜障害、再狭窄、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑ディストロフィー、シュタルガルト病、先天性停滞夜盲症、コロイデレミア、回転萎縮、レーバー先天性黒内症、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴーガー症候群、サルディーノマインツェル症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデット−ビエドル症候群、アルポート症候群、アルストーム症候群、コクカイメイ症候群、先天性形成異常スポンジロエピフィサリア、フリン−アイルド症候群、フリードリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベール−シュノベルグ病、レフスム病、ケアルンス−サイレ症候群、ワーデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリードュンスドローム、シュティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラン症候群、バッセン−コロンツベイグ症候群、無ベータ−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖尿、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスである。

手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。眼底フォトグラフィーは、Ｈａｗｅｓおよび共同著者に従って修飾されたＫｏｗａＧｅｎｅｓｉｓ小動物眼底カメラを用い、意識がある動物で行った（Ｈａｗｅｓｅｔａｌ．，１９９９ＭｏｌｅｃｕｌａｒＶｉｓｉｏｎ１９９９；５：２２）。フルオレセインの腹腔内注射は、核調査について、直接的光眼底イメージおよび蛍光アンジオグラムの獲得を可能とした。直接的眼科変化に加えて、このテストは、糖尿病およびアテローム性硬化症のような全身病、または他の網膜異常に関連する網膜変化を検出することができる。正常な光下で眼底の写真を供した。アンジオグラフィー写真は、目の動脈および静脈の調査を可能とした。加えて、静脈に対する動脈の比率（Ａ／Ｖ）を目について測定した。

眼科分析は、前記したプロトコルを用い、生じさせたＦ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫で行った。具体的には、Ａ／Ｖ比率を測定し、ＫｏｗａＣＯＭＩＴ＋ソフトウェアにて眼底イメージに従って計算した。このテストは膨張した瞳孔を通じてカラー写真を撮り：イメージは多くの病気を検出し、分類するのを助ける。静脈に対する動脈の比率（Ａ／Ｖ）は（血管の分岐前で測定した）静脈直径に対する動脈直径の比率である。多くの病気、すなわち、糖尿病、心血管障害、乳頭浮腫、目萎縮、あるいは（色素性網膜炎として知られた）網膜変性または網膜異形成、視覚の問題または盲目のような他の目の異常は該比率に影響するであろう。かくして、野生型（＋／＋）同腹子と比較した、ホモ接合性（−／−）およびヘテロ接合性（＋／−）突然変異体子孫における増大した動脈−対−静脈比率をもたらす表現型観察は、そのような病理学的疾患を示すであろう。

結果：
全ての８匹の（−／−）マウスは異なる程度の成熟白内障を呈した。網膜の動脈−対−静脈比率（Ａ／Ｖ）は、白内障からのブロックのため（−／−）マウスでは測定できないであろう。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／５／８
まとめると、ＰＲＯ１８６８ポリペプチドをコードするＤＮＡ７７６２４−２５１５（ＵＮＱ８５９）として同定された遺伝子をノックアウトすることによって、ホモ接合性突然変異体子孫は、白内障形成および／または他の眼科障害に関連する表現型を呈する。そのような検出された眼科変化は、心血管全身病に最も普通には関連する。特に、白内障形成は、血液凝固カスケードにおける乱れに関連する心血管合併症を示し得る。白内障はヒトダウン症候群、ハレマン−シュトライフ症候群、レーヴェ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、トリソミー１３−１５疾患、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリ病、甲状腺機能低下症、コンラディ症候群のような全身病にも関連する。かくして、ＰＲＯ１８６８コーディング遺伝子のアンタゴニストは、同様な病理学的変化に導き、他方、アゴニストは、白内障形成および／またはその基礎となる心血管病または眼科障害の予防において治療剤として有用であろう。

新しい環境に対する通常の習慣的応答を呈するマウスについての性癖を、５回の間隔にわたってのその水平方向運動活動を総じての変化を測定することによって変化した。経時的な活動の変化のこの計算された勾配は、移動した絶対的な合計距離よりはむしろ正規化されたものを用いて決定する。該傾きは、５回の間隔の各々における正規化された活動を通じての回帰曲線から決定した。通常の性癖は、負の傾きの値によって表される。

結果：
開放場活動テストの間に顕著な差が観察された。（−／−）マウスは、性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合に、増大した合計移動距離および立ち上がり活性を呈し、これは突然変異体における新しい環境に対する増大した探求応答を示す。かくして、ノックアウトマウスは過剰活動に合致する表現型を示した。これらの観察に徴して、ＰＲＯ１８６８ポリペプチドおよびそのアゴニストは、過剰活動に関連する兆候の治療または軽減で有用であろう。
４１．２３ＤＮＡ９１７７９−２５７１（ＵＮＱ１８８３）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ９１７７９−２５７１と命名された）ＰＲＯ４３２６ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ１８８３）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウスの遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ０２８７７０またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓｕｎｃ−５ホモログＢ（Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ）（Ｕｎｃ５ｂ）；タンパク質参照：Ｑ８Ｋ１Ｓ３またはアクセション：Ｑ８Ｋ１Ｓ３ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ネトリン受容体Ｕｎｃ５ｈ２。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ１７０７４４またはアクセション：ＮＭ１７０７４４ＮＩＤ：ｇｉ２５０１４１０４ｒｅｆＮＭ１７０７４４．１Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ膜貫通受容体Ｕｎｃ５Ｈ２（ＵＮＣ５Ｈ２）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ８ＩＺＪ１またはアクセション：Ｑ８ＩＺＪ１ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。膜貫通受容体ＵＮＣ５Ｈ２。

注目するマウス遺伝子はＵｎｃ５ｂ（ｕｎｃ−５ホモログＢ［Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ］）、ヒトＵＮＣ５Ｂのオルソログである。別名はＵｎｃ５ｈ２、６３３０４１５Ｅ０２Ｒｉｋ、ｕｎｃ５ホモログ（Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ）２、ｐ５３ＲＤＬ１、膜貫通受容体Ｕｎｃ５Ｈ２、および死亡および生命のためのｐ５３−調節受容体を含む。

ＵＮＣ５Ｂは、Ｉ型原形質膜タンパク質であって、化学排斥軸索ガイダンスリガンドネトリン−１に対する受容体である（Ｌｅｏｎａｒｄｏｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ；３８６（６６２７）：８３３−８（１９９７））。該タンパク質はシグナルペプチド、２つの免疫グロブリンドメイン、２つのトロンボスポンジンタイプ−１モチーフ、膜貫通セグメント、ＺＵ−５ドメイン、ＤＣＣ−結合ドメイン、およびＣ−末端死滅ドメインよりなる。ＵＳＣ５Ｂは、その天然のＧＴＰ−結合形態におけるＧプロテインサブユニットＧｉ−アルファ２と相互反応することによってｃＡＭＰ合成を刺激することができ、Ｇｉ−アルファ２による阻害からアデニリルシクラーゼを開放する。ＵＮＣ５Ｂは軸索ガイダンスで役割を演じ、免疫細胞化学走性に参画するようである（Ｋｏｍａｔｓｕｚａｋｉｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ；２９７（４）：８９８−９０５（２００２））。ネトリン−１の不存在下では、ＵＮＣ５Ｂはアポトーシスを誘導することによって腫瘍サプレッサーとして機能できる（Ｔｈｉｅｂａｕｌｔｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ；１００（７）：４１７３−８（２００３）；Ｌｌａｍｂｉｅｔａｌ．，ＥＭＢＯＪ；２０（１１）：２７１５−２２（２００１）；Ｔａｎｉｋａｗａｅｔａｌ．，ＮａｔＣｅｌｌＢｉｏｌ；５（３）：２１６−２３（２００３））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝２２．００有意性＝０．００００２（ｈｏｍ／ｎ）＝０．００平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入はコーディングエクソン１および２の間のイントロンで起こった（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２９７７０．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、胸腺、骨格筋、骨および脂肪を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料で検出された。
致死性のため、転写体発現分析は行わなかった。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認した。
４１．２３．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ９１７７９−２５７１（ＵＮＱ１８８３）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒトｕｎｃ−５ホモログＢ（Ｃ．エレガンス）（ＵＮＣ５Ｂ）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）突然変異体の致死性がもたらされた。亜硝酸塩尿症が（＋／−）マウスで観察された。加えて、雌（＋／−）マウスは増大した合計体脂肪含有量を示した。

致死性の胚性発生異常に関連する議論：
ノックアウトマウスにおける胚致死性は、通常、限定されるものではないが、神経−変性病、血管新生疾患、炎症病、あるいは遺伝子／タンパク質が多くの細胞型における基本的な細胞シグナリングプロセスで重要な役割を有する場合を含めた、種々の深刻な発生の問題に由来する。加えて、胚致死は潜在的癌モデルとして有用である。同様に、対応するヘテロ接合性（＋／−）突然変異体動物は、それらが、ノックアウトされた遺伝子の機能に関する高度に情報的な手掛かりを明らかにする表現型および／または病理学報告を呈する場合に特に有用である。例えば、ＥＰＯノックアウトマウスは胚致死であるが、胚についての病理学報告はＲＢＣの大きな欠如を示した。

（ｂ）病理学
肉眼での観察：１２．５日の（−／−）胚は中程度に阻止された成長を呈した。
顕微鏡観察：１２．５日において、６３の胚が観察された：１４の（−／−）胚、２８の（＋／−）胚、１２の（＋／＋）胚、および９の再吸収モル。正常な器官形成が１２．５日の（−／−）胚で観察されたが、脳および脊髄を除いて全ての器官のサイズにおいて一般的な低下があった。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学によって分析された組織のパネル内では脳で検出された。

（ｃ）血液化学−尿検査
分析した８匹のヘテロ接合性（＋／−）マウスのうち、７匹が亜硝酸炎尿症を呈した。

（ｄ）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

Ｄｅｘａ分析―テストの記載：
手法：４匹の野生型、および４匹のヘテロ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、用量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

結果：
雌へテロ接合体（＋／−）は、性が一致した同腹子および履歴平均と比較して、増大した合計体脂肪含有量を示したが、異常な脂質代謝を示唆する血中トリグリセリドの変化はなかった。
４１．２４ＤＮＡ１００２７２−２９６９（ＵＮＱ１８８７）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ１００２７２−２９６９と命名される）ＰＲＯ４３３２ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ１８８７）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＡＫ０１４７０９またはアクセション：ＡＫ０１４７０９ＮＩＤ：１２８５２７２４ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ０日新生頭部ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ全長豊富化ライブラリー、クローン：４８３３４１６Ｉ０９：ＣＧ５９０１ＰＲＯＴＥＩＮ、十分なインサート配列に関連；タンパク質参照：Ｑ９ＣＵＳ９またはシグナルペプチドペプチダーゼ−様３（ＳＰＰ−様３タンパク質）（膜内プロテアーゼ２）（ＩＭＰ２）（プレセニリン−様タンパク質４）；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ１３９０１５またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓシグナルペプチドペプチダーゼ３（ＳＰＰＬ３）に対応し；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ８ＴＣＴ６またはアクセション：Ｑ８ＴＣＴ６ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。プレセニリン−様タンパク質４（ＥＣ３．４．９９．−）（ＳＰＰＬ３タンパク質）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はプレセニリン−様タンパク質４、ヒトＳＰＰＬ３（シグナルペプチドペプチダーゼ３）のオルソログである。別名は４８３３４１６Ｉ０９Ｒｉｋ、ＩＭＰ２、ＰＳＬ４、ＤＫＦＺＰ５８６Ｃ１３２４、細胞内プロテアーゼ、およびプレセニリン−様タンパク質４を含む。

ＳＰＰＬ３は、プレタンパク質から切断されたシグナルペプチドの膜内タンパク質分解を触媒する小胞体の膜に局所化される推定プレセニリン−タイプのアスパラギン酸プロテアーゼである。ＳＰＰＬ３のようなシグナルタンパク質ペプチダーゼは細胞シグナリング、細胞調節、およびタンパク質プロセッシングに関与する（Ｗｅｉｈｏｆｅｎｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ；２９６（５５７６）：２２１５−８（２００２）；Ｇｒｉｇｏｒｅｎｋｏｅｔａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｍｏｓｃ）；６７（７）：８２６−３５（２００２）；ＸｉａａｎｄＷｏｌｆｅ，ＪＣｅｌｌＳｃｉ；１１６（Ｐｔ１４）：２８３９−４４（２００３）；Ｕｒｎｙｅｔａｌ．，ＧｅｎｅＥｘｐｒＰａｔｔｅｒｎｓ；３（５）：６８５−９１（２００３））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝２．１２有意性＝０．３４６８６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２１平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入はコーディングエクソン６および７の間で起こった（ＮＣＢＩアクセションＡＫ０１４７０９．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料のうち、脳、脊髄、腎臓および心臓で検出された。
ＲＴ−ＰＣＲ分析は、転写体が分析された（−／−）マウス（Ｍ−１８５）で存在しないことを明らかにした。より大きな転写体は、ヌクレオチド配列分析によって測定されるように、レトロウイルスベクターからの断片の標的転写体へのスプライシングのため（−／−）マウスにおいて双方の組織でやはり検出された。しかしながら、レトロウイルスベクター配列におけるイン−フレーム停止コドンは、この転写体の翻訳を破壊すると予測された。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認された。
４１．２４．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ１００２７２−２９６９（ＵＮＱ１８８７）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトシグナルペプチドペプチダーゼ３（ＳＰＰＬ３）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて成長の遅延および減少した受精能がもたらされた。（−／−）マウスは多数の神経学的異常も呈した。加えて、突然変異体（−／−）マウスは減少したトリグリセリドおよび平均絶食血清グルコースレベルを呈した。ＬａｃＺの発現は精子を含む輪精細管で観察された。転写体はＲＴ−ＰＣＲによると存在しなかった。

（ｂ）体診断−組織質量および無脂肪体質量測定−Ｄｅｘａ
（１）Ｄｅｘａ分析−テスト記載：
手法：デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

一般的観察：
（−／−）マウスはそれらの（＋／＋）同腹子よりも小さく、乱れた挙動を呈した。

体測定（身長および体重）：
体の測定：身長および体重の測定はほぼ１６週齢に行った。

結果：
雄および雌双方の（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均体重および減少した平均身長を呈した。

受精能：
雄および雌双方の（−／−）マウスは損なわれた受精能を呈した。分析のために入手可能な単一の雄（−／−）マウスは受精不能であった。６０日の育種および４回の交配の後に子供は生まれなかったが、突然変異体は健康であるが小さいように見えた。陰茎の勃起は腹部圧力によって誘導でき、膣プラグが雌接合で観察された。しかしながら、プラグは柔軟で形成不良であり、膣を十分には満たさず、突然変異体における可能な付属的性腺または精子血管を示す。分析のために入手可能な３匹の雌（−／−）マウスはより小さな同腹子を生じ、これは、突然変異体における減少した受精能をさらに示唆する。

（２）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

Ｄｅｘａ分析―テストの記載：
手法：デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、用量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常な感受性の測定も得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は、腰椎５脊椎小柱骨容量、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを採取した。μＣＴ４０スキャンは骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンした。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメートル分解能において第五腰椎（ＬＶ５）で分析し、骨皮質パラメーターは２０マイクロメートルの分解能にて大腿中間幹で分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄および雌双方の（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、顕著に減少した平均合計組織質量および無脂肪体質量を呈した。雄（−／−）突然変異体は減少した平均骨ミネラル含有量および骨ミネラル密度−関連測定も呈した。
ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均脊椎小柱骨容量および厚み、および顕著に減少した平均大腿中間幹断面積および皮質厚みを呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：５／４／８
まとめ：
（−／−）マウスはサイズがかなり小さく、体重の顕著な減少を示し、これらの動物における成長遅延を示唆する。病理学的観察はいずれの組織病理学的病巣を明らかにしなかったが、陰性表現型は成長遅延を伴う組織消費疾患を示す。突然変異体雄（−／−）マウスは減少した骨−関連測定も呈した。かくして、ＰＲＯ４３３２ポリペプチドまたはそのアゴニストは正常な成長および／または成長代謝に必須であるに違いなく、従って悪液質または他の組織消費病のような成長障害の治療または予防で有用であろう。

（ｃ）表現型分析：ＣＮＳ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥活動性障害、強迫障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボで確認された標的を同定するのに焦点をあてた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、パニック発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。
手法：
挙動スクリーニングは４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。全ての挙動テストは、低下した生存率がより早いテストを必要とするのでなければ、１２および１６週齢の間に行った。これらのテストは不安、活動レベルおよび探求を測定するための開放場を含んだ。

機能的観察バッテリー
テストの記載：ＦＯＢは肉眼での感覚および運動欠陥を測定するために動物に適用される状況のシリーズである。肉眼での神経学的機能を評価するＩｒｗｉｎ神経学スクリーニングからのテストのサブセットを用いる。一般に、短い持続、接触、嗅覚および視覚刺激を動物に適用して、正常に検出し、応答するそれらの能力を測定する。これらの単純なテストはほぼ１０分を要し、マウスはテストの最後にそのホームケージに戻す。

尾懸濁液分析：
テストの記載：尾懸濁液テストは、げっ歯類において鬱病−様挙動についてのモデルとして開発された手法である。この特別な状況においては、マウスをその尾を６分間懸濁させ、応答において、マウスはその位置から逃げようともがく。ある時間の後、マウスのもがきは減少し、これは学習された無益パラダイムのタイプとして解釈される。

結果：
基本的感覚および運動観察：
機能的観察バッテリーの間に多数の異常が認められた。テストした８匹の（−／−）マウスのうち、５匹が２０秒の尾懸濁液テストに異常な応答を呈し、３匹は振る挙動を呈し、２匹は巡回挙動を呈した。無益に対する応答に関しては、（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、尾懸濁液テストの間に減少したメジアン不動時間を呈した。

開放場テスト：
既知の薬物のいくつかの標的は開放場テストにおいて表現型を呈してきた。これらはセラトニントランスポーター、ドーパミントランスポーター（Ｇｉｒｏｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．１９９６Ｆｅｂ１５；３７９（６５６６）：６０６−１２）、およびＧＡＢＡ受容体（Ｈｏｍａｎｉｃｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ．１９９７Ａｐｒ１５；９４（８）：４１４３−８）のノックアウトを含む。自動開放場アッセイは、情緒状態に関連する変化および学習に関連する探求パターンに取り組むよう慣用化されている。まず、場（４０×４０ｃｍ）をマウスについて比較的大きいように選択し、かくして、探求に関連する運動活動の変化をピックアップするように設計した。加えて、鼻でつつくこと、探求に特異的に関連する活動を可能とするように床に４つの穴があった。いくつかの因子を設計して、このテストに関連する情緒状態を高めた。開放場テストは、マウスをテストし、なされた測定がチャンバーでの対象の最初の経験である第一の実験手法である。加えて、開放場は明るく光をつけた。全てのこれらの因子は新規かつ開放されたスペースに関連する天然の不安を高めるであろう。探求活動のパターンおよび程度、および特に、中央−対−合計移動距離の比率は、次いで、不安または鬱病に対する感受性に関連する変化を識別することができるであろう。３つの異なるレベルにおける赤外線を備えた大きな活動舞台（４０ｃｍ×４０ｃｍ、ＡｃｃｕＳｃａｎＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓからのＶｅｒｓａＭａｘ動物活動モニタリングシステム）を用いて、立ち上がり、穴のつつき、および運動活動を記録した。動物を中心に入れ、その活動を２０分間測定した。このテストからのデータを５回の４分の間隔で分析した。合計移動距離（ｃｍ）、垂直運動の数（立ち上がり）、穴のつつきの数、および中心ないし合計距離比率を記録した。

新しい環境に対する通常の習慣的応答を呈するマウスについての性癖を、５回の間隔にわたってのその水平方向運動活動を総じての変化を測定することによって変化した。経時的な活動の変化のこの計算された勾配は、移動した絶対的な合計距離よりはむしろ正規化されたものを用いて決定する。該傾きは、５回の間隔の各々における正規化された活動を通じての回帰曲線から決定した。通常の習慣性は、負の傾きの値によって表される。

結果：
（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、開放場テストの間に減少したメジアン合計タイム−イン−センターを呈し、これは、突然変異体における増大した不安様応答を示唆する。（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合、開放場テストの間に減少した正規化した傾きを呈し、これは、新しいものに対する加速された馴化応答を示唆する。

まとめると、開放場テストならびに機能的観察バッテリーテストは、重症ないし中程度不安、過剰活動；感覚障害；強迫障害、統合失調症または妄想個性に関連し得る関連乱れ挙動を伴う顕著な増大した不安に関連する表現型を明らかにした。ＰＲＯ４３３２ポリペプチドまたはコーディング遺伝子のアンタゴニストまたは阻害剤は、これらの神経学的異常を模倣すると予測されるであろう。他方、ＰＲＯ４３３２ポリペプチドまたはそのアンタゴニストは、そのような神経学的障害の予防または治療で有用であろう。
分析されたｗｅｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：８／０／８
聴覚驚愕反射のプレパルス阻害
聴覚驚愕反射のプレパルス障害は、うるさい１２０デシベル（ｄＢ）驚愕−誘導トーンよりもより柔らかい（プレパルス）トーンが先行する場合に起こる。ＰＰＩパラダイムは６つの異なる試験タイプよりなり（７０ｄＢバックグラウンドノイズ、１２０ｄＢ単独、７４ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ４、７８ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ８、８２ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ１２、および９０ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ２０）、各々は合計３６回のトライアルの間に偽ランダム順序で６回反復した。刺激に対する最大応答（Ｖｍａｘ）を各トライアルタイプについて平均した。１００に等しい、またはそれ未満の１２０ｄＢ平均値を持つ動物は分析から排除する。プレパルスが驚愕刺激に対する動物の応答を阻害するパーセントを計算し、グラフ化する。

結果：
突然変異体（−／−）マウスは、外部の聴衆刺激に対して応答する減少した能力を示す減少した驚愕応答に対する傾向を呈した。

（ｄ）表現型分析：心臓学
心血管生物学の分野においては、標的は、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール（高コレステロール血症）および上昇した血清トリグリセリド（高トリグリセリド血症）のような異常脂質血症、糖尿病および／または肥満の治療のためにここでは同定した。表現型テストは、血清コレステロールおよびトリグリセリドの測定を含んだ。

血中脂質
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。高コレステロールレベルおよび増大したトリグリセリド血中レベルは、心血管病および／または糖尿病の発生において認識された危険因子である。血中脂質の測定は、血中脂質レベルを調節する生物学的スイッチの発見を容易とする。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管病の危険性を低下させるのに有用であろう。これらの血液化学テストにおいては、測定は、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて記録した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、減少した平均血清トリグリセリドレベル（ｐ＝０．０１４）を呈した。

前記でまとめたように、ホモ接合性（−／−）突然変異体マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、（正常なレベルと比較して）減少した平均血清トリグリセリドレベルを呈した（分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８）。

かくして、ＰＲＯ４３３２が欠乏した突然変異体マウスは、特に、異常な脂質代謝に関連する病気について心血管病のモデルとして供することができる。ＰＲＯ４３３２ポリペプチドのアンタゴニストまたは阻害剤は、血中脂質を調節するにおいて、および正常なトリグリセリドレベルおよび脂肪代謝を特に維持するにおいて有用であり、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心疾患、発作、種々の冠動脈病、および／または肥満または糖尿病のような心血管病の治療で有用であろう。

血清グルコースレベル
代謝の分野においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は血中グルコース測定を含む。マウスについて血液化学テストを行うために、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いた。代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。異常なグルコーステストの結果は、限定されるものではないが、以下の障害または疾患：糖尿病１型および２型、症候群Ｘ、種々の心血管病および／または肥満を示すことができる。

手法：４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスをこのアッセイで用いた。

結果：
血液化学：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した血清絶食血清グルコースレベルを呈した。

かくして、ノックアウトマウスは、糖尿病またはプレ−糖尿病疾患で起こるであろう損なわれたグルコースホメオスタシスとは反対の表現型パターンを呈した。前記で示した血液化学はこれらの知見と合致する。これらの結果に基づき、ＰＲＯ４３３２ポリペプチドのアンタゴニストまたは阻害剤は、損なわれたグルコース代謝および／または糖尿病の治療で有用であろう。
４１．２５ＤＮＡ８６５９４−２５８７（ＵＮＱ１９００）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ８６５９４−２５８７と命名される）ＰＲＯ４３４６ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ１９００）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿１７２７９３またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡＤ３３００１２Ｄ１１遺伝子（Ｄ３３００１２Ｄ１１Ｒｉｋ）；タンパク質参照：Ｑ８ＢＪＥ２またはアクセッション：Ｑ８ＢＪＥ２ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＣＤＮＡＦＬＪ３２５３５ＦＩＳと僅かに同様；ヒト遺伝子配列参照：ＡＹ３５８３５８またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓクローンＤＮＡ８６５９４ＶＤＬＳ１９００（ＵＮＱ１９００）；ヒトタンパク質配列は参照：ＡＡＱ８８７２４またはＶＤＬＳ１９００（Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ）に対応する。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡＤ３３００１２Ｄ１１遺伝子、ヒトブチロフィリン３のオルソログである。別名はＢｔｎ３、Ｂ４３０２０８Ｉ０１、およびブチロフィリン３を含む。

ブチロフィリン３は受容体として機能するらしいＩ型原形質膜タンパク質である。５３６−アミノ酸タンパク質はシグナルペプチド、２つの免疫グロブリンドメイン（ＰｆａｍアクセッションＰＦ０００４７）、膜貫通セグメント、およびＳＰＲＹドメイン（ＰｆａｍアクセッションＰＦ０００６２２）よりなる。免疫グロブリンドメインは、通常、タンパク質−タンパク質相互作用に関与する。ＳＰＲＹドメインは、小胞体のルーメンからのカルシウムの放出をゲートする、リアノジン受容体およびＩＰ３受容体で見出される。ブチロフィリン３は、乳腺における乳−脂肪液滴の分泌を媒介するにおいて役割を演じると考えられる、ブチロフィリンサブファミリー１のメンバーＡ１（ＢＴＮ１Ａ１）に同様である（ＪａｃｋａｎｄＭａｔｈｅｒ，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２６５（２４）：１４４８１−６（１９９０）；Ｉｓｈｉｉｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ；１２４５（３）：２８５−９２（１９９５））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝１．０３有意性＝０．５９７４１（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２６平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１および２を標的化した（シグナル配列およびＩｇＶドメインはノックアウトにおいては除去された）（ＮＣＢＩアクセッションＮＭ１７２７９３．１）。
野生型は発現パネル：標的遺伝子の発現は、肺および骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料で検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．２５．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ８６５９４−２５８７（ＵＮＱ１９００）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒトブチロフィリン３のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、オボアルブミンに対する増大したＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ応答がもたらされた。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症性障害の治療のためにここでは同定された。免疫関連病は、、免疫応答を抑制することによって治療されよう。免疫刺激活性を有する分子を阻害する中和抗体の使用は、免疫−媒介および炎症性疾患の治療で有益であろう。免疫応答を阻害する分子を利用して（直接的に、または抗体アゴニストの使用を介するタンパク質）、免疫応答を阻害し、かくして、免疫関連病を軽減することができる。

前記したように、このプロトコルは、抗原−特異的免疫応答を生起させるマウスの能力を評価する。動物は、フロイントの完全アジュバントに乳化した５０ｍｇのニワトリオボアルブミンを腹腔内注射し、１４日後に抗−オボアルブミン抗体（ＩｇＭ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２サブクラス）の血清力価を測定した。血清試料中のＯＶＡ−特異的抗体の量は、９６−ウエル試料プレートをスキャンする機器によって生じる光学密度（ＯＤ）値に比例する。データは各血清試料の系列希釈の組について収集した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：８／４／９
この攻撃の結果、
（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）の同腹子および履歴平均と比較した場合、オボアルブミン攻撃に対して増大した平均血清ＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ応答を呈した。かくして、これらのノックアウトマウスは、Ｔ−細胞依存性ＯＶＡ抗原に対するＯＶＡ−特異的抗体応答を誘導する増大した能力を呈した。

まとめると、オボアルブミン攻撃実験は、ＰＲＯ４３４６ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏したノックアウトマウスは、それらの野生型同腹子と比較した場合に免疫学的異常を呈することを示す。特に、突然変異体マウスは、Ｔ−細胞依存性ＯＶＡ抗原で攻撃した場合に、免疫学的応答を誘導する増大した能力を呈した。かくして、ＰＲＯ４３４６ポリペプチドの阻害剤またはアンタゴニストは、（Ｔ細胞増殖のような）免疫系を刺激するにおいて有用であり、この効果が、白血病、および他のタイプの癌の場合における、およびＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者におけるような、個人に有益である場合に用途を見出すであろう。従って、ＰＲＯ４３４６ポリペプチドまたはそのアゴニストは免疫応答を阻害するのに有用であり、かくして、例えば、移植片拒絶または移植片−対−宿主病の場合に、有害な免疫応答を抑制するための有用な候補であろう。

ＦＡＣＳおよびＢｉａＣｏｒｅ結合実験
結合アッセイは、共にＦＡＣＳおよびＢｉａＣｏｒｅ結合アッセイによって行った。ＵＮＱ１９００−ＥＣＤ−ＦｃをチップおよびＢｉａＣｏｒｅアッセイテスト２７５タンパク質に被覆して、ＵＮＱ１９００−ＥＣＤ−Ｆｃ被覆チップに対する結合を測定した。以下のタンパク質はＵＮＱ１９００：ＥＧＦＬ８（ＮＧ３とも呼ばれる）、ＮＴ３、ＮＴ４、ＢＤＮＦ、ＦＧＦ８およびＩＮＦ−ガンマに結合した。また、ＵＮＱ１９００およびＥＧＦＬ８（ＮＧ３）の間の結合もＦＡＣＳによって観察され、ＵＮＱ１９００ＦＡＣＳ分析はＵＮＱ１９００とのＥＧＦＬ８（ＮＧ３）結合を示した。ＢＤＮＦはグルコース代謝およびエネルギー消費を調節することが示されている（Ｃｈａｌｄａｋｏｖｅｔａｌ．，ＭｅｄＳｃｉＭｏｎｉｔ．９（１０）：ＨＹ１９−２１（２００３）；Ｋｕｒｏｄａｅｔａｌ．、Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ５２（２）；２０３−８（２００３）；Ｎｏｎｏｍｕｒａｅｔａｌ．，ＩｎｔＪＥｘｐＤｉａｂａｔｅｓＲｅｓ．２（３）：２０１−９（２００１））。ＢＤＮＦ，ＮＴ３およびＮＴ４は感覚ニューロンに対する親和因子である（ＡｎａｎｄＰ．ＰｒｏｇＢｒａｉｎＲｅｓ．１４６：４７７−９２（２０４）；Ｆｒｉｔｚｓｃｈｅｔａｌ．，ＰｒｏｇＢｒａｉｎＲｅｓ．１４６：２６５−７８（２００４）；Ｅｒｉｃｋｓｏｎｅｔａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２１（２）：５８１−９（２００１）。ＵＮＱ１９００は感覚ニューロンにおいて強く発現される。

イン・サイチュハイブリダイゼーション実験
イン・サイチュハイブリダイゼーションはＥ１３．５マウス胚で測定した。ＥＧＦＬ８（ＮＧ３）およびＵＮＱ１９００は、神経系において、および血管のサブセットにおいて発現されることが判明した。ＵＮＱ１９００は低レベルで普遍的にも発現された。Ｅ１３．５マウス手足はＵＮＱ１９００発現ならびにＥＧＦＬ８発現を示したが、ＵＮＱ１９００発現はＥＧＦＬ８のようには制限されなかったが、最も強いＵＮＱ１９００シグナルがＥＧＦＬ８の場合のように同一の組織で見出された。イン・サイチュハイブリダイゼーション実験もマウスＭＣＨ６６腎臓腫瘍セクションで行い、これもやはり、ＵＮＱ１９００がこれらの腫瘍細胞で発現されることを示した。横紋筋肉腫Ａ６７６異種移植片腫瘍セクションの免疫蛍光染色は、ＥＧＦＬ８（ＮＧ３）が腫瘍血管のこのサブセットで発現されることを示した。
４１．２６ＤＮＡ８７９７４−２６０９（ＵＮＱ１９２５）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ８７９７４−２６０９と命名される）ＰＲＯ４４００ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ１９２５）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿０２８１１７またはアクセッション：ＮＭ＿０２８１１７ＮＩＤ：ｇｉ２１３１２４１５ｒｅｆＮＭ＿０２８１７．１ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２６０００１６Ｌ０３遺伝子（２６０００１６Ｌ０３Ｒｉｋ）；タンパク質参照：Ｑ９Ｄ０Ｐ２またはアクセッション：Ｑ９Ｄ０Ｐ２ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。２６０００１６Ｌ０３Ｒｉｋタンパク質。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿１３０４６８またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓのデルマタン４スルホトランスフェラーゼ１（Ｄ４ＳＴ１）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９６Ｐ９４またはアクセッション：Ｑ９６Ｐ９４ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。デルマタン−４−スルホトランスフェラーゼ−１（デルマタン４―スルホトランスフェラーゼ）。ＨＵＭＡＮＳＰＴＲＮＲＤＢ。

注目するマウス遺伝子はＤ４ｓｔ１（デルマタン４スルホトランスフェラーゼ１）、ヒトＤ４ＳＴ１のオルソログである。別名は２６０００１６Ｌ０３Ｒｉｋ、デルマタン−４−スルホトランスフェラーゼ−１、ＨＤ４ＳＴ、Ｄ４ＳＴ−１、およびＨＮＫ１ＳＴを含む。

Ｄ４ＳＴ１は、ＩＩ型膜タンパク質であって、デルマタン硫酸の生合成の間に、アルファ−連結イズロン酸（すなわち、ＩｄｏＵＡ−ＧａｌＮＡｃ）でＣ−３において置換されたＧａｌＮＡｃの４−Ｏ−硫酸化を触媒する酵素である。該タンパク質は短い細胞質Ｎ末端、シグナルアンカー、および小胞体のルーメンに局所化する触媒ドメインよりなる。ほとんどの組織はＤ４ＳＴ１を発現するが、それは下垂体、胎盤、子宮および甲状腺において特に高い。Ｄ４ＳＴ１は、細胞外マトリックス組立、細胞接着、細胞移動、細胞増殖、ニューライト外植、創傷修復、および抗凝固プロセスにおいて役割を演じる、デルマタン硫酸プロテオグリカンの合成のための重要な酵素である（Ｍｉｋａｍｉｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７８（３８）：３６１１５−２７（２００３）；Ｅｖｅｒｓｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７６（３９）：３６３４４−５３（２００１））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．８７有意性＝０．６４６６８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２４平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２８１１７．２）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨格筋および脂肪を除いて、胚性幹（ＥＳ）細胞において、およびＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．２６．１（ＤＮＡ８７９７４−２６０９（ＵＮＱ１９２５）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトデルマタン４スルホトランスフェラーゼ１（Ｄ４ＳＴ１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて、成長の遅延を示唆する、減少した平均体重および身長、減少した合計組織質量、無脂肪体質量、および減少した合計体脂肪をもたらした。（−／−）マウスは増強された感覚運動ゲーティング／注意も呈し、（−／−）マウスは減少した不安−関連応答も呈した。眼科異常が（−／−）マウスで認められ、これは、網膜変性の初期兆候と合致する。（−／−）マウスは減少した平均絶食血清グルコースレベルと共に増強されたグルコース耐性を示した。同様に、（−／−）マウスはトリグリセリド血中レベルの減少を示した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）表現型分析：代謝−血液化学／グルコース耐性
代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は血中グルコース測定を含む。マウスについて血液化学テストを行うために、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いた。代謝の領域においては、標的を糖尿病の測定のために同定することができる。血液化学表現型分析は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するためのグルコース耐性テストを含む。異常なグルコース耐性テストの結果は、限定されるものではないが、以下の障害または疾患：糖尿病１型および２型、症候群Ｘ、種々の心血管病および／または肥満を含むことができる。

手法：２匹の野生型および４匹のホモ接合性マウスのコホールトをこのアッセイで用いた。グルコース耐性テストは、哺乳動物において損なわれたグルコースホメオスタシスを規定するための標準である。グルコース耐性テストは、Ｌｉｆｅｓｃａｎグルコメーターを用いて行った。動物に、２０％溶液として送達されるＤ−グルコースを２ｇ／ｋｇにて腹腔内注射し、血中グルコースレベルを注射から０、３０、６０および９０分後に測定した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍｏ：４／４／８
結果：
（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均絶食血清グルコースおよび増強されたグルコース耐性を呈した。同様に、以下に示すように、突然変異（−／−）マウスは、（特に、雌（−／−）マウスにおいて）減少したトリグリセリド血中レベルを呈した。かくして、ノックアウトマウスは損なわれたグルコースホメオスタシスの反対の表現型パターンを呈し、それ自体、ＰＲＯ４４００ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子に対するアンタゴニストは、損なわれたグルコースホメオスタシス、および糖尿病で見出されるような異常なグルコース代謝に伴う病気の治療で有用であろう。

（ｃ）心血管表現型分析：
心血管生物学の領域においては、表現型テストを行って、心血管、内皮または血管新生疾患の治療のための潜在的標的を同定した。１つのそのような表現型テストは、網膜動静脈比率（Ａ／Ｖ比率）を測定して、種々の眼の異常を伝達するための眼底写真およびアンジオグラフィーを含んだ。異常なＡ／Ｖ比率は、高血圧の血管病（および高血圧を引き起こすいずれかの病気、例えば、アテローム性動脈硬化症）、糖尿病、または眼科障害に対応する他の目の病気に関連し得るそのような全身病または障害を知らせる。そのような眼の異常は、限定されるものではないが、以下のものを含むことができる：網膜異常は網膜形成不全、種々の網膜障害、再狭窄、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮、色素性網膜炎、黄斑ジストロフィー、シュタルガルト病、先天性停滞夜盲症、コロイデレミア、回転萎縮、レーバー先天性黒内症、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルヴーガー症候群、サルディーノマインツェル症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデット−ビエドル症候群、アルポート症候群、アルストーム症候群、コクカイメイ症候群、先天性形成異常スポンジロエピフィサリア、フリン−アイルド症候群、フリードリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベール−シュノベルグ病、レフスム病、ケアルンス−サイレ症候群、ワーデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリードュンスドローム、シュティックラー症候群、カロチン血症、シスチン蓄積症、ウォルフラン症候群、バッセン−コロンツベイグ症候群、無ベータ−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖尿、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスである。

手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。眼底フォトグラフィーは、Ｈａｗｅｓおよび共同著者に従って修飾されたＫｏｗａＧｅｎｅｓｉｓ小動物眼底カメラを用い、意識がある動物で行った（Ｈａｗｅｓｅｔａｌ．，１９９９ＭｏｌｅｃｕｌａｒＶｉｓｉｏｎ１９９９；５：２２）。フルオレセインの腹腔内注射は、各調査について、直接的光眼底イメージおよび蛍光アンジオグラムの獲得を可能とした。直接的眼科変化に加えて、このテストは、糖尿病およびアテローム性硬化症のような全身病、または他の網膜異常に関連する網膜変化を検出することができる。正常な光下で眼底の写真を供した。アンジオグラフィー写真は、目の動脈および静脈の調査を可能とした。加えて、静脈に対する動脈の比率（Ａ／Ｖ）を目について測定した。

眼科分析は、前記したプロトコルを用い、生じさせたＦ２野生型、ヘテロ接合性、およびホモ接合性突然変異体子孫で行った。具体的には、Ａ／Ｖ比率を測定し、ＫｏｗａＣＯＭＩＴ＋ソフトウェアにて眼底イメージに従って計算した。このテストは膨張した瞳孔を通じてカラー写真を撮り：イメージは多くの病気を検出し、分類するのを助ける。静脈に対する動脈の比率（Ａ／Ｖ）は（血管の分岐前で測定した）静脈直径に対する動脈直径の比率である。多くの病気、すなわち、糖尿病、心血管障害、乳頭浮腫、目萎縮、あるいは（色素性網膜炎として知られた）網膜変性または網膜異形成、視覚の問題または盲目のような他の眼の異常は該比率に影響するであろう。かくして、野生型（＋／＋）同腹子と比較した、ホモ接合性（−／−）およびヘテロ接合性（＋／−）突然変異体子孫における増大した動脈−対−静脈比率をもたらす表現型観察は、そのような病理学的疾患を示すであろう。

結果：
眼底：散在性脱色が（−／−）マウスの網膜で認められた。１匹の（−／−）マウス（Ｆ−１３１）は突起した目ディスク血管を呈し、これは増大した頭蓋内に圧力を示唆する。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
この実験においては、ヘテロ接合性（−／−）マウスは軽い脱色スポットを伴う不均一な網膜バックグラウンドを呈し、これは網膜変性の初期兆候を示す。加えて、ホモ接合性マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合に突起した目ディスク血管を呈し、これは増大した頭蓋内圧力を示す。まとめると、ＰＲＯ４４００ポリペプチドをコードするＤＮＡ８７９７４−２６０９として同定された遺伝子をノックアウトすることによって、ホモ接合性突然変異体子孫は、網膜変性に関連する表現型を呈する。そのような検出された網膜変化は、最も普通には、高血圧の血管病（および／または高血圧を引き起こすいずれかの病気、例えば、アテローム性動脈硬化症）、糖尿病、または網膜変性のような眼科障害に対応する他の眼の病気に関連する心血管全身病または障害に関連する。かくして、ＰＲＯ４４００コーディング遺伝子のアンタゴニストは同様な病理学的網膜変化に導き、他方、アゴニストは、アテローム性動脈硬化症、または網膜変性を含めた他の眼科障害、および（前記で示した）この疾患に関連する病気の治療における治療剤として有用であろう。

（ｄ）骨代謝および体診断
（１）組織質量および無脂肪体質量の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体をこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量（ＴＴＭ）の変化を同定した。

体の測定（身長および体重）：
体の測定：身長および体重の測定はほぼ１６週齢において行った。

結果：
（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均体重および減少した平均身長を呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：２９／５３／２２
（２）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

Ｄｅｘａ分析―テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、用量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常な感受性の測定も得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は、腰椎５脊椎小柱骨容量、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを採取した。μＣＴ４０スキャンは骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンされた。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメートル分解能において第五腰椎（ＬＶ５）で分析し、骨皮質パラメーターは２０マイクロメートルの分解能にて大腿中間幹で分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄および雌（−／−）マウスは、共に、減少した合計体脂肪含有量を呈し、雄マウスは減少した合計組織質量および無脂肪体質量を呈した。
ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴手段と比較した場合、減少した平均脊椎小柱骨容量、数、厚みおよび結合密度を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／９
まとめると、（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合、減少した体重および身長、減少した平均合計組織質量および無脂肪体質量、減少した合計体脂肪および脂肪質量、および減少した脊椎骨測定を呈した。これらの観察は、成長遅延表現型を示唆する。加えて、突然変異体（−／−）マウスは異常な骨測定を呈した。かくして、ＰＲＯ４４００ポリペプチドまたはそのアゴニストは、正常な成長および骨発生で有用であり、骨粗鬆症および／または組織消費疾患のような関連する成長または代謝障害の治療で有用であろう。

（ｅ）表現型分析：ＣＮＳ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥活動性障害、強迫障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボで確認された標的を同定するのに焦点をあてた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、パニック発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

ストレス−誘導高体温：
テストの記載：ストレスー誘導高体温（ＳＩＨ）は、不安−惹起刺激によって誘導された自律神経過剰活動の測定である。該方法は、１０分間離した２つの直腸体温測定を採取することを含む。ＳＩＨはストレス−増強温度（Ｔ２）から基礎体温（Ｔ１）を差し引くことによって決定される。デルタ値の差（Ｔ２−Ｔ１＝デルタＴ）は、自律神経過剰活動またはＳＩＨの重症度を示す。ＳＩＨに関連する体温の上昇は、第二の直腸体温測定に対して予測される不安の兆候である。より低いデルタＴ値は、減少した不安様応答を示唆する。
結果：
不安：（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、ストレス−誘導高体温に対する抵抗性を呈し、これは減少した不安様応答を示唆する。

まとめ：
突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合、ストレス−誘導高体温に対する抵抗性を呈し、これは突然変異体における減少した不安様応答を示す。かくして、ノックアウトマウスは鬱病性障害、統合失調症および／または双極性障害と合致する表現型を呈した。かくして、ＰＲＯ４４００ポリペプチドおよびそのアゴニストは、鬱病性障害に関連する兆候の治療または軽減で有用であろう。

プレパルス阻害テスト（ＰＰＩ）：
聴覚驚愕反射のプレパルス障害は、うるさい１２０デシベル（ｄＢ）驚愕−誘導トーンよりもより柔らかい（プレパルス）トーンが先行する場合に起こる。ＰＰＩパラダイムは６つの異なる試験タイプよりなり（７０ｄＢバックグラウンドノイズ、１２０ｄＢ単独、７４ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ４、７８ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ８、８２ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ１２、および９０ｄＢ＋１２０ｄＢ−ｐｐ２０）、各々は合計３６回のトライアルの間に偽ランダム順序で６回反復した。刺激に対する最大応答（Ｖｍａｘ）を各トライアルタイプについて平均した。１００に等しい、またはそれ未満の１２０ｄＢ平均値を持つ動物は分析から排除する。プレパルスが驚愕刺激に対する動物の応答を阻害するパーセントを計算し、グラフ化する。

結果：
感覚運動ゲーティング／注意：プレパルス阻害テストの間に、（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合に、ｐｐ４、ｐｐ８およびｐｐ１２において増大した阻害を呈し、これは、突然変異体における増強された感覚運動ゲーディング／注意を示唆する。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：８／０／８
４１．２７ＤＮＡ８３５６８−２６９２（ＵＮＱ２５１４）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ８３６８−２６９２と命名される）ＰＲＯ６００３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ２５１４）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿０２６１６２またはアクセッション：ＮＭ＿０２６１６２ＮＩＤ：１６７５７９７１ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１２００００７Ｌ２４遺伝子（１２００００７Ｌ２４Ｒｉｋ）；タンパク質参照：Ｑ９ＤＣ１１またはアクセッション：Ｑ９ＤＣ１１ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。１２００００７Ｌ２４ＲＩＫＰＲＯＴＥＩＮ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０３２８１２またはアクセッション：ＮＭ＿０３２８１２ＮＩＤ：１７５１１２１２ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ腫瘍内皮マーカー７−関連前駆体（ＴＥＭ７Ｒ）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９６ＰＤ９またはアクセッション：Ｑ９６ＰＤ９ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＴＵＭＯＲＥＮＤＯＴＨＥＬＩＡＬＭＡＲＫＥＲ７−ＲＥＬＡＴＥＤＰＲＥＣＵＲＳＯＲ。

注目するマウス遺伝子はＰｌｘｄｃ２を含有するプレキシンドメイン２、ヒトＰＬＸＤＣ２のオルソログである。別名はＴｅｍ７ｒ、１２００００７Ｌ２４Ｒｉｋ、ＦＬＪ１４６２３、腫瘍内皮マーカー７−関連、および腫瘍内皮マーカー７関連前駆体を含む。

ＰＬＸＤＣ２は、比較的大きな細胞外ドメイン、膜貫通セグメント、および系統発生的に保存された細胞質ドメインよりなるＩ型原形質膜タンパク質である。ＰＬＸＤＣ２の細胞外ドメインはシグナルペプチドおよびプレキシン／セマフォリン／インテグリンドメインを含有し、これは、プレキシン、セマフォリンおよびインテグリンに見出される。プレキシンは神経および上皮組織の発生を調節し、セマフォリンは神経成長円錐の崩壊を媒介し、およびインテグリンは表皮細胞の移動および接着を媒介する（ＳＭＡＲＴアクセッションＳＭ００４２３）。ヒトにおいては、ＰＬＸＤＣ２は腫瘍からの内皮で高度に発現される。しかしながら、マウスにおいては、ＰＬＸＤＣ２は腫瘍からの内皮のみならず、正常な肺および骨格筋の内皮においても発現される。ＰＬＸＤＣ２は抗−脈管形成療法による癌の治療のための標的であり得る。（Ｃａｒｓｏｎ−Ｗａｌｔｅｒｅｔａｌ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ；６１（１８）：６６４９−５５（２００１）；Ｓｔ．Ｃｒｏｉｘｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ；２８９（５４８２）：１１９７−２０２（２０００））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝１．８９有意性＝０．３８７７６（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２９平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン２を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２６１６２．２）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨格筋；胃、小腸および結腸；および脂肪を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．２７．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ８３５６８−２６９２（ＵＮＱ２５１４）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
２を含有するヒトプレキシンドメイン（ＰＬＸＤＣ２）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて増大した鬱病−様応答がもたらされた。突然変異マウスは成長の遅延されたおよび異常な骨−関連の測定を呈した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）表現型分析：ＣＮＳ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥活動性障害、強迫障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボで確認された標的を同定するのに焦点をあてた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、パニック発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

手法：
挙動スクリーニングは４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。全ての挙動テストは、低下した生存性がより早いテストを必要とするのでなければ１２および１６週齢の間で行った。

尾懸濁液分析：
テストの記載：尾懸濁液テストは、げっ歯類において鬱病−様挙動についてのモデルとして開発された手法である。この特別な状況においては、マウスをその尾を６分間懸濁させ、応答において、マウスはその位置から逃げようともがく。ある時間の後、マウスのもがきは減少し、これは学習された無益パラダイムのタイプとして解釈される。無効なデータを持つ（すなわち、テスト期間の間にその尾を持ち上げた）動物は分析から排除される。

結果：
当惑に対する応答：（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、尾懸濁液テストの間に増大したメジアン不動時間を呈し、これは突然変異体における増大した鬱病―様応答を示唆する。かくして、ノックアウトマウスは、鬱病性障害、統合失調症および／または双極性障害に合致する表現型を呈した。かくして、ＰＲＯ６００３ポリペプチドおよびそのアゴニストは、鬱病性障害に関連した兆候の治療または軽減で有用であろう。

（ｃ）骨代謝および体診断
（１）組織質量および無脂肪体質量の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量の変化（ＴＴＭ）を同定した。

結果：
雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均体重および平均身長を呈した。

骨ミクロＣＴ分析：
手法：ミクロＣＴを用いて、ＢＭＤの非常に感受性の測定も得た。１つの脊椎および１つの大腿を、４匹の野生型および８匹のホモ接合性マウスのコホールトから採取した。測定は、腰椎５脊椎小柱骨容量、小柱厚み、結合密度および中間幹大腿合計骨面積および皮質厚みを採取した。μＣＴ４０スキャンは骨質量および人工物についての詳細な情報を提供した。複数の骨を試料ホールダーに入れ、自動的にスキャンされた。機器ソフトウェアを用いて、分析のための注目する領域を選択した。小柱骨パラメーターは１６マイクロメートル分解能において第五腰椎（ＬＶ５）で分析し、骨皮質パラメーターは２０マイクロメートルの分解能にて大腿中間幹で分析した。

結果：
ＤＥＸＡ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均質量−関連測定（合計組織質量および無脂肪体質量）および減少した平均骨ミネラル−関連測定（骨ミネラル含有量、および合計体、脊椎および大腿における骨ミネラル密度）を呈し、これは、雄突然変異体における成長の遅延および骨異常を示唆する。

ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、顕著に減少した平均脊椎小柱骨容量、数、厚み、および欠乏密度、および減少した平均大腿中間幹皮質厚みおよび断面積を呈した。

これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスは、減少した平均体重および身長、ならびに骨折に導く減少した密度および、恐らくは、脆性を伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な、有意な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ６００３またはそのアゴニストは骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であろう。加えて、ＰＲＯ６００３またはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために有用であり；他方、ＰＲＯ６００３またはそのコーディング遺伝子に対するアンタゴニストは、異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。

かくして、まとめると、ＤＥＸＡによって分析された（−／−）マウスはサイズがかなり小さく、体重および身長の顕著な減少、ならびに合計組織、無脂肪体質量の減少、および減少した骨ミネラル含有量および密度を呈し、これはこれらの突然変異体における成長の遅延を示唆する。これらの観察は、組織消費疾患および／または成長の遅延に合致する。かくして、ＰＲＯ６００３ポリペプチドまたはそのアゴニストは正常な成長および／または成長代謝に必須であるに違いなく、従って、成長障害、悪液質または他の組織消費病の治療または予防で有用であろう。
４１．２８ＤＮＡ９６９９５−２７０９（ＵＮＱ２５４２）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ９６９９５−６０９４と命名される）ＰＲＯ６０９４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ２５４２）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＢＣ０６５１２９またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ発現配列ＡＩ８４３９１８、ｍＲＮＡ（ｃＤＮＡクローンＭＧＣ８６０２８ＩＭＡＧＥ：３０３６２６５１）、完全ｃｄｓ；タンパク質参照：Ｑ８Ｃ４２０またはアクセッション：Ｑ８Ｃ４２０ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。刺針術誘導遺伝子１；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０２１１１５またはアクセッション：ＮＭ＿０２１１１５ＮＩＤ：１０８６３９１４ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ発作関連６ホモログ（マウス）−様（ＳＥＺ６Ｌ）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＢＹＨ１または発作６−様タンパク質前駆体ｇｉ│１３６０３３９８│ｄｂｊ│ＢＡＢ４０９７０．１│ＳＥＺ６Ｌ「Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｃｅ」に対応する。

注目するマウス遺伝子は発現された配列ＡＩ８４３９１８、ヒトＳＥＺ６Ｌ（発作関連６ホモログ（マウス−様）のオルソログである。別名はＡＩＧ１、Ａｃｉｇ１、ｍＫＩＡＡ０９２７、ＫＩＡＡ０９２７、刺針術誘導遺伝子１、および発作関連遺伝子６（マウス）−様を含む。

ＳＥＺ６Ｌは、シグナルペプチド、交互ＣＵＢ（ＰｆａｍアクセッションＰＦ００４３１）およびＳｕｓｈｉ（ＰｆａｍアクセッションＰＦ０００８４）ドメイン、膜貫通セグメント、および短い細胞質セグメントよりなる仮定Ｉ型原形質膜タンパク質である。ＣＵＢおよびＳｕｓｈｉドメインは一般には、タンパク質−タンパク質相互作用に関連する。ＳＥＺ６Ｌは、ある種のタイプの小細胞肺癌に関与する候補腫瘍サプレッサー遺伝子である（Ｎｉｓｈｉｏｋａｅｔａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ；１９（５４）：６２５１−６０（２０００））。しかしながら、このタンパク質の機能は測定されていない。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝３．４５有意性＝０．１７８４１（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１６平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン２および３を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＡＫ０８３２２９．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、肺、腎臓、肝臓、骨格筋および骨を除いて、胚性幹ＥＳ細胞において、およびＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．２８．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ９６９９５−２７０９（ＵＮＱ２５４２）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト発作関連６ホモログ（マウス）−様（ＳＥＺ６Ｌ）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）マウスにおいて、減少した運動活性がもたらされた。加えて、突然変異体（−／−）マウスは、減少した平均絶対リンパ球カウントを呈した。雌突然変異体（−／−）マウスは減少した骨ミネラル含有量および密度、ならびに減少したＢＭＣ／ＬＢＭ比率を示した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

免疫学の領域においては、標的は、炎症および炎症性障害の治療のためにここでは同定された。免疫関連病は、１つの例において、免疫応答を抑制することによって治療されよう。免疫刺激活性を有する分子を阻害する中和抗体の使用は、免疫−媒介および炎症性疾患の治療で有益であろう。免疫応答を阻害する分子を利用して（直接的に、または抗体アゴニストの使用を介するタンパク質）、免疫応答を阻害し、かくして、免疫関連病を軽減することができる。

以下のテストを行った：
血液学分析：
テストの記載：血液テストはＡｂｂｏｔｔのＣｅｌｌ−Ｄｙｎ３５００Ｒ、自動血液学アナライザーによって行われる。その特徴のいくつかは５−部分ＷＢＣディファレンシャルを含む「患者」報告は全部で２２パラメーターにわたってカバーすることができる。

結果：
血液学：（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均合計白血球細胞カウントを呈した。該減少は（−／−）マウスにおける減少した平均絶対リンパ球カウントによるものであった。

（ｃ）表現型分析：ＣＮＣ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥活動性障害、強迫障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボで確認された標的を同定するのに焦点をあてた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、パニック発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

結果：
一般的および探求活性：（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、開放場テストにおける減少したメジアン合計移動距離を呈した。立ち上がり挙動は８匹の（−／−）マウスのうち７匹で、および８匹の（＋／＋）マウスのうち１で存在しなかった。これらの結果は、（−／−）マウスにおいて減少した運動活性と合致する。

日周性テストの記載：
雌マウスをテストの初日の午後４時に、４８．２ｃｍ×２６．５ｃｍホームケージに個々に収容し、食物および水を自由に与える。動物を１２時間の明／暗サイクルに曝露し、午前７時に明かりをつけ、午後７時に明かりを消す。システムソフトウェアは動物の運動によって引き起こされたビーム遮断の数を記録し、ビームの遮断は自動的に歩行に分割される。活動は３日のテストの間に６０回の１時間の間隔で記録される。データを生じさせ、１時間毎に記録されたメジアン活動レベル（概日リズム）および３日間のテスト期間にわたっての各明／暗サイクルの間のメジアン合計活動（運動活動）によって表示する。

結果：
突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、１時間および１２時間の馴化期間の間に、およびホーム−ケージ活性テストの全ての明−暗期間の間に、歩行カウントの顕著な減少を呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：８／０／８
これらの結果は、概日リズムの抑制を示し、開放場テストの間に観察された結果と合わせると、（−／−）マウスにおける顕著な低−運動活性を示唆する。これらの結果は、嗜眠または鬱病性障害と合致する。ＰＲＯ６０９４ポリペプチドまたはＰＲＯ６０９４コーディング遺伝子のアンタゴニストまたは阻害剤は、この挙動を模倣すると予測されるであろう。同様に、ＰＲＯ６０９４ポリペプチドまたはそのアンタゴニストは、鬱病性障害または他の減少した不安−様兆候を含めたそのような神経学的障害の治療で有用であろう。

（ｄ）骨代謝−放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：
ＤＥＸＡ：雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した骨ミネラル含有量および密度−関連測定を呈した。雌（−／−）マウスについての平均骨ミネラル含有量指標（ＢＭＣ／ＬＢＭ）もまた減少した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが、骨折に導く減少した密度および、おそらくは、脆性を伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な、有意な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ６０９４またはそのアゴニストは、骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であるように見える。加えて、ＰＲＯ６０９４またはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療のために有用であり；他方、ＰＲＯ６０９４またはそのコーディング遺伝子に対するアンタゴニストは、関節炎、骨粗鬆症およびオステオペニアンを含めた異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。
４１．２９ＤＮＡ１０８７４３−２７２２（ＵＮＱ２５６４）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ１０８７４３−２７２２と命名される）ＰＲＯ６２４４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ２５６４）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである；突然変異したマウス突然変異遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿０２８７６６またはアクセッション：ＮＭ＿０２８７６６ＮＩＤ：ｇｉ２１３１１８９０ｒｅｆＮＭ＿０２８７６６．１ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１２０００１５Ａ２２遺伝子（１２０００１５Ａ２２Ｒｉｋ）：タンパク質参照：Ｑ９ＤＢＳ１またはアクセッション：Ｑ９ＤＢＳ１ＮＩＤ；Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。１２０００１５Ａ２２Ｒｉｋタンパク質（ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１２０００１５Ａ２２遺伝子）；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０２４３３４またはアクセッション：ＮＭ＿０２４３３４ＮＩＤ：ｇｉ１３２３６５８６ｒｅｆＮＭ＿０２４３３４．１Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ仮定タンパク質ＭＧＣ３２２２（ＭＧＣ３２２２）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９ＢＴＶ４またはアクセッション：Ｑ９ＢＴＶ４ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。仮定タンパク質ＦＬＪ１４９７１（仮定タンパク質ＦＬＪ１４８５１）に対応する。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１２０００１５Ａ２２遺伝子、ヒト仮定タンパク質ＭＧＣ３２２２のオルソログである。別名はＤＫＦＺｐ５８６Ｇ１９１９を含む。

ＭＧＣ３２２２は仮定一体化膜タンパク質である。該タンパク質は４つの膜貫通セグメントよりなり、他の同定可能なドメインは含まない。ＭＧＣ３２２２は小胞体に位置すると予測される。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝２．６１有意性＝０．２７０７８（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入はコーディングエクソン１および２の間のイントロンで起こった（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２８７６６．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨格筋および骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料において検出された。
ＲＴ−ＰＣＲ分析は、転写体が分析した（−／−）マウス（Ｍ−２０７）において存在しないことを明らかとした。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認された。
４１．２９．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ１０８７４３（ＵＮＱ２５６４）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト仮定一体化膜タンパク質のオルソログをコードする突然変異の結果、突然変異体（−／−）マウスにおいて増大した不安−関連応答がもたらされた。転写体は、ＲＴ−ＰＣＲによると存在しなかった。

手法：
挙動スクリーニングは４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。全ての挙動テストは、低下した生存性がより早いテストを必要とするのでなければ１２および１６週齢の間で行った。これらのテストは、不安、活動レベルおよび探求を測定するための開放場を含んだ。

一般的観察：
突然変異体（−／−）マウスは、ストレスに対する減少した高体温応答を呈したが、ベースライン温度は上昇に向かう傾向にあった。

結果：
突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合、中心領域において減少したメジアン合計時間を呈した。加えて，（−／−）マウスは、ストレスに対する減少した高体温応答を示したが、ベースライン温度は上昇に向かう傾向を示した。開放場挙動は、増大した不安様応答に合致する。ノックアウトマウスは、軽度ないし中程度不安、一般的な医学的疾患による不安、および／または双極性障害；過剰活動；感覚障害；強迫障害、統合失調症または妄想個性に関連する不安関連障害と合致する表現型を示した。かくして、ＰＲＯ６２４４ポリペプチドまたはそのアゴニストは、そのような神経学的障害の治療、または不安障害に関連する兆候の軽減で有用であろう。
４１．３０ＤＮＡ１０８７６９−２７６５（ＵＮＱ３０２２）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ１０８７６９−２７６５と命名された）ＰＲＯ９８２０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ３０２２）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿１４５８３５またはアクセッション：ＮＭ＿１４５８３５ＮＩＤ：２２００３８８１ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓラクターゼ−様（Ｌｃｔｌ−係属）；タンパク質参照：Ｑ８Ｋ１Ｆ９またはアクセッション：Ｑ８Ｋ１Ｆ９ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。Ｋｌｏｔｈｏ−ＬＰＨ関連タンパク質；ヒト遺伝子配列参照：マウスｋｌｏｔｈｏラクターゼ−フロリジンヒドロラーゼ関連タンパク質（ＫＬＰＨ）のＮＭ＿２０７３３８またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓのようなオルソログ；ヒトタンパク質配列は参照：マウスｋｌｏｔｈｏラクターゼ−フロリジンヒドロラーゼ関連タンパク質のＮＰ＿９９７２２１またはそのようなオルソログ（Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ）ｇｉ│３７１８２５７９│ｇｂ│ＡＡＱ８９０９１．１│ＫＰＶＷ３０２２（Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ）に対応する。

注目するマウス遺伝子はＬｃｔｌ（ラクターゼ−様）、ヒトＫＬＰＨのオルソログ（マウスｋｌｏｔｈｏラクターゼ−フロリジンヒドロラーゼ−関連タンパク質のオルソログ）である。別名はＫＬＰＨ、Ｅ１３０１０４Ｉ０５Ｒｉｋ、およびｋｌｏｔｈｏ−ＬＰＨ関連を含む。

ＫＬＰＨはファミリー１グリコシダーゼとして機能するようであるＩ型膜タンパク質である。該タンパク質はシグナルペプチド、グリコシダーゼヒドロラーゼ（ファミリー１）ドメインの、およびＣ−末端膜貫通セグメントよりなる。このドメインを持つタンパク質は、２以上の炭水化物の間、または炭水化物および非−炭水化物部位の間のグリコシド結合の加水分解を触媒する（ＩｎｔｅｒＰｒｏアクセッションＩＰＲ００１３６０）。ＫＬＰＨは小胞体に局所化され、主として、腎臓および皮膚で発現される（Ｉｔｏｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｉｍＢｉｏｐｈｙｓＡｃｔａ；１５７６（３）３４１−５（２００２））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．６６有意性＝０．７１８３７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２９平均同腹子サイズ＝６
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１ないし４を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ１４５８３５．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた１３の成人組織試料のうち、目；胸腺；および胃、小腸および結腸のみで検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。
４１．３０．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ１０８７６９−２７６５（ＵＮＱ３０２２）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
マウスｋｌｏｔｈｏラクターゼ−フロリジンヒドロラーゼ関連タンパク質（ＫＬＰＨ）のヒト様オルソログのオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、ヘテロ接合体（＋／−）およびホモ接合体（−／−）においてより高い単球カウントがもたらされた。遺伝子破壊はサザーンブロットによって確認された。

以下のテストを行った：
蛍光−活性化細胞−ソーティング（ＦＡＣＳ）分析
手法：
Ｔリンパ球を評価するためのＣＤ４、ＣＤ８およびＴ細胞受容体、Ｂリンパ球についてのＣＤ１９、白血球マーカーとしてのＣＤ４５、およびナチュラルキラー細胞についての汎ＮＫを含めた、末梢血液からの免疫細胞組成のＦＡＣＳ分析を行った。ＦＡＣＳ分析は２匹の野生型および６匹のホモ接合性マウスで行い、胸腺、脾臓、骨髄およびリンパ節に由来する細胞を含んだ。

これらの実験において、分析された細胞は胸腺、末梢血液、脾臓、骨髄およびリンパ節から単離された。フローサイトメトリーは、単核細胞集団におけるＣＤ４およびＣＤ８陽性Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞および単球の相対的割合を決定するように設計された。Ｂｅｃｔｏｎ―ＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ３−レーザーＦＡＣＳマシーンを用いて、免疫状態を評価した。表現型アッセイおよびスクリーニングでは、このマシーンは、ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比率に加えて、ＣＤ４＋／ＣＤ８−、ＣＤ８＋／ＣＤ４−、ＮＫ、Ｂ細胞および単球の数を記録する。

単核細胞プロフィールは、６つの系統−特異的抗体：ＣＤ４５ＰｅｒＣＰ、抗−ＴＣＲｂＡＰＣ、ＣＤ４ＰＥ、ＣＤ８ＦＩＴＣ、汎−ＮＫＰＥ、およびＣＤ１９ＦＩＴＣのパネルで、各マウスからの溶解された末梢血液の単一試料を染色することによって誘導された。２つのＦＩＴＣおよびＰＥ標識抗体は相互に排他的な細胞型を染色する。ＣｅｌｌＱｕｅｓｔソフトウェアにてのＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを用い、試料を分析した。

結果：
単球カウントは、それらの性が一致とした野生型同腹子および履歴平均と比較して、ヘテロ接合体（＋／−）およびホモ接合体（−／−）においてより高いように見えた。かくして、ホモ接合体およびヘテロ接合体は、共に、マクロファージの前駆体である単球のより高いレベルを有するように見える。これらの免疫学的知見は、免疫応答を刺激するためのＰＲＯ９８２０ポリペプチドの阻害剤またはアンタゴニストに対する役割を示唆する。
４１．３１ＤＮＡ１４２２３８−２７６８（ＵＮＱ３０２７）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ１４２２３８−２７６８と命名される）ＰＲＯ９８２８ポリペプチドコードする遺伝子（ＵＮＱ３０２７）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ０２２６７５またはアクセション：ＮＭ＿０２２６７５ＮＩＤ：１２０８３５８８ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ線維芽細胞成長因子２３（Ｆｇｆ２３）；タンパク質参照：Ｑ９ＥＰＣ２またはアクセション：Ｑ９ＥＰＣ２ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲ−２３ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＦＧＦ−２３）；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０２０６３８またはアクセション：ＮＭ＿０２０６３８ＮＩＤ：１５０５５５４７ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ線維芽細胞成長因子２３（ＦＧＦ２３）；ヒトタンパク質配列参照：Ｑ９ＧＺＶ９またはアクセション：Ｑ９ＧＺＶ９ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＦＩＢＲＯＢＬＡＳＴＧＲＯＷＴＨＦＡＣＴＯＲ−２３ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＦＧＦ−２３）（ＴＵＭＯＲ−ＤＥＲＩＶＥＤＨＹＰＯＰＨＯＳＰＨＡＴＥＭＩＡＩＮＤＵＣＩＮＧＦＡＣＴＯＲ）。

注目するマウス遺伝子はＦｇｆ２３（線維芽細胞成長因子２３）、ヒトＦＧＦ２３のオルソログである。別名はＡＤＨＲ、ＨＹＰＦ、ＨＰＤＲ２、腫瘍−由来低リン酸塩血症誘導因子、および低リン酸塩血症ビタミンＤ−抵抗性くる病−２（常染色体優性）を含む。

ＦＧＦ２３は、脳の腹側外側視床核で主として発現される線維芽細胞成長因子ファミリーの分泌ペプチドである。タンパク質はリン酸とビタミンＤ代謝を調節する受容体のリガンドとして機能する。（Ｙａｍａｓｈｉｔａｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ；２７７（２）：４９４−８（２０００）；Ｓａｉｔｏｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７８（４）：２２０６−１１（２００３））。ＦＧＦ２３は腎臓末端側細管においてホスフェートの再吸収を阻害する（Ｂｏｗｅｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ；２８４（４）：９７７−８１（２００１））。さらに、ＦＧＦ２３は腎臓において１−アルファ−ヒドロキシラーゼの発現を減少させ、循環における１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ（３）を低下させる（Ｓｈｉｍａｄａｅｔａｌ．，ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ；１１３（４）：５６１−８（２００４））。

Ｓｈｉｍａｄａおよび同僚（ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ；１１３（４）：５６１−８（２００４））は、ＦＧＦ２３−欠乏マウスを用い、ＦＧＦ２３の生理学的役割を調べた。彼らは、腎臓のホスフェート再吸収および血清１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ（３）が、野生型マウスにおけるよりもＦＧＦ２３ホモ接合性ナルマウスにおいてより高いことを見い出した。さらに、得られた低リン酸塩血症は、副甲状腺ホルモンの作用とは独立しており、ＦＧＦ２３がホスフェートホメオスタシスを調節する主なホルモンであることを示唆する。

タンパク質分解に対する耐性をもたらし、ホルモンの活性を延長するＦＧＦ２３遺伝子における突然変異は、常染色体優性低リン酸塩血症くる病（ＡＤＨＲ）表現型の根本的な原因のようである（ＴｈｅＡＤＨＲＣｏｎｓｏｒｔｉｕｍ，ＮａｔＧｅｎｅｔ；２６（３）：３４５−８（２０００）；Ｓｈｉｍａｄａｅｔａｌ．，ＪＣｌｉｎＩｎｖｅｓｔ：１１３（４）：５６１−８（２００４））。さらに、ＦＧＦ２３の過剰発現は腫瘍−誘導くる病／骨軟化症（Ｓｈｉｍａｄａｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ；９８（１１）：６５００−５（２００１））およびＸ−連鎖低リン酸塩血症くる病／骨軟化症（Ｙａｍａｚａｋｉｅｔａｌ．，ＪＣｌｉｎＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌＭｅｔａｂ；８７（１１）：４９５７−６０（２００２）；Ｊｏｎｓｓｏｎｅｔａｌ．，ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ；３４８（１７）：１６５６−６３（２００３））を引き起こすようである。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝３．７８有意性＝０．１５１２４（ｈｏｍ／ｎ）＝０．３５平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２２６５７．２）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、胚性幹（ＥＳ）細胞において、および腎臓；骨格筋；胃、小腸および結腸；および脂肪を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。

ＲＴ−ＰＣＴ分析は明らかにした。
４１．３１．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ１４２２３８−２７６８（ＵＮＱ３０２７）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト線維芽細胞成長因子２３（ＦＧＦ２３）のオルソログをコードする遺伝の突然変異の結果、はびこらない小さな（−／−）マウスがもたらされた。ホモ接合性突然変異体マウスはそれらの野生型同腹子よりも小さく、顕著に減少した体重および身長を呈した。それらがはびこらないため、突然変異体を６週齢までに安楽死させるか、または剖検に移した。顕微鏡分析は、分析用に入手できるホモ接合性突然変異体において散在する骨ジストロフィーおよび転移性カルシウム沈着を明らかにした。ヘテロ接合体は、それらの野生型同腹子と比較して、減少したレベルのトリグリセリドおよび増加したホスフェートを示した。ヘテロ接合体（＋／−）は、Ｂ細胞の増加並びに減少した好塩基球、ＣＤ４およびＮＫ細胞も示した。加えて、雄ヘテロ接合性マウスは、それらの性が一致した野生型同腹子および履歴平均と比較した場合、開放場活性テストの間に増大した不安様応答を呈した。他の顕著な表現型はヘテロ接合性マウスでは観察されなかった。

標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。

（ｂ）骨代謝および体診断
組織質量および無脂肪体質量の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：野生型、ヘテロ接合体およびホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量の変化（ＴＴＭ）を同定した。

結果：
一般的観察：（−／−）マウスはそれらの（＋／＋）同腹子よりも小さく、誕生後にほとんどまたは全く体重が増えず、ひだのある毛および目のドレナージを呈した。４週齢において、６匹の（−／−）マウスを分析のために病理学に移した。残りの（−／−）マウスをそれらの酷い健康のため６週齢で安楽死させた。

雄および雌（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、顕著に減少した平均体重を呈した。
身長：分析のために（−／−）マウスは入手できなかった。

（ｃ）病理学
顕微鏡観察：（−／−）マウスは、顕著な散在性骨ジストロフィーおよび中程度の転移性カルシウム沈着を呈した。転移性カルシウム沈着は気管、小腸および大動脈においてよく記載されていた。皮質および脊椎骨における軟骨コアの滞留および鼻甲介および頭蓋冠骨の厚化、並びに骨幹の骨内膜表面への網状骨の付着によって特徴付けられる、骨の血管があるミネラル化が観察された。正常に高い骨代謝回転を持つ領域における骨芽細胞は、正常な概観を有したが、他の領域における圧倒的に大部分の骨芽細胞は異常であった。異常な骨芽細胞は、正常なものの５倍までのサイズであり、しばしば、脊椎内骨髄スペースを満たした。侵された骨芽細胞および骨細胞の細胞質は、豊富な好塩基性物質、おそらくはマトリックスタンパク質によって膨らんでいた。カルシウム×ホスフェートの積は、組織の転移性カルシウム沈着が起こると期待されるレベルをはるかに超えていることが判明した。ミネラル化は、腎臓および十二指腸でのカルシウム吸収の領域、および特にカルシウム沈着の傾向がある結合組織エレメントを有する大動脈、器官、および胃粘膜下組織での領域に執拗に存在した。腎臓の変化は比較的穏やかであり、弓状血管近くに位置する近位細管にその分布は制限されていた。胸腺および脾臓におけるリンパ節枯渇も観察された。

まとめると、ノックアウトマウスは、病巣的に拡大された骨芽細胞、および骨ミネラル化における異常を呈し、これは骨ジストロフィーに合致する。ヒトにおいては、透析は骨ジストロフィー（腎臓骨ジストロフィー）の普通の原因である。ヒトにおいて余り普通でない原因は、常染色体優性低リン酸塩血症くる病および癌遺伝子性骨軟化症に関連する遺伝子突然変異である。かくして、このノックアウトはヒトにおける骨ジストロフィーの良好なモデルとなり得る。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は、免疫組織化学分析によって組織のパネルでは観察されなかった。

（ｄ）表現型分析：心臓学
心血管生物学の領域においては、標的は、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール（高コレステロール血症）および上昇したトリグリセリド（高トリグリセリド血症）のような異常な脂質血症、糖尿病および／または肥満の治療のためにここでは同定された。表現型テストは血清コレステロールおよびトリグリセリドの測定を含んだ。

血液脂質
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。高コレステロールレベルおよび増大したトリグリセリド血中レベルは、心血管病および／または糖尿病の発生において認識された危険因子である。血中脂質の測定は、血中脂質レベルを調節する生物学的スイッチの発見を容易とする。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管病に対する危険性を低下させるのに有用であろう。これらの血液化学テストにおいては、ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用い、コレステロール測定を記録した。

結果：
雌ヘテロ接合体（＋／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均血清トリグリセリドレベルを呈した。

かくして、ＰＲＯ９８２８をコードする遺伝子が欠乏した突然変異体マウスは、心血管病、特に、脂質異常血症に関連する病気の治療のためのモデルとして供することができる。

（ｅ）血液化学
血液化学分析は、マウスについて血液化学テストを行うためのその臨床設定においてＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて行った。

結果：
雄ヘテロ接合体（＋／−）は、それらの野生型の性が一致した同腹子と比較して増大したホスフェートレベルを示した（ｐ＝０．０２６３６）。この観察は、病理学報告で見出される骨−関連異常がＣａ^＋＋／ＰＯ_４ ^−２代謝の調節不全によるものであることを示す。

（ｆ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、通常の生理学においては、傷または負傷に対する応答に臨界的であり、傷または負傷からの修復を開始させ、および外来性生物に対する生来のおよび獲得した防御を備えるかなり複雑で、しばしば複数の相互連結生物学的経路の発現または結果である。病気または病理は、これらの正常な生理学的経路が、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己に対する反応として、またはこれらの組合せとして、応答の強度に直接的に関連してさらなる傷または負傷を引き起こす場合に起こる。

結果：
ヘテロ接合性（＋／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、末梢血液において、ＣＤ４細胞、好塩基球およびナチュラルキラー細胞の減少した平均パーセンテージ、およびＢ細胞の増加した平均パーセンテージを呈した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｐｍ：６／９／０
まとめると、ＦＡＣＳの結果は、ヘテロ接合性突然変異体マウスが、減少したＴ細胞集団並びにナチュラルキラー細胞の減少した平均パーセンテージによってマークされる免疫学的異常を示すことを示し（これは、ＰＲＯ９８２８遺伝子のノックアウトに関連する陰性表現型のインジケーターである）。ナチュラルキラー細胞はウイルス感染に関する防御の最初のラインである。というのは、その細胞はウイルス免疫性および腫瘍に対する防御に関連付けられてきたからである。ナチュラルキラー細胞またはＮＫ細胞は、抗体−依存性細胞−媒介細胞傷害性においてエフェクターとして作用し、予めの免疫化または活性化の必要性無くして、イン・ビトロにてある種のリンパ系腫瘍細胞系を殺傷するその能力によって同定されてきた。しかしながら、宿主防御におけるそれらの公知の機能は、いくつかの細胞内病原体、特にヘルペスウイルスでの感染の初期相におけるものである。かくして、ＰＲＯ９８２８ポリペプチドおよびそのアゴニストは健康な免疫系のために重要であり、特にウイルス感染の間に免疫系を刺激するにおいて有用であろう。

（ｇ）表現型分析：ＣＮＳ／神経学
神経学の領域においては、分析は、ここでは、鬱病、全身性不安障害、注意欠陥活動性障害、強迫障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害を含めた神経学的および精神学的障害の治療のためのイン・ビボで確認された標的を同定するのに焦点をあてた。神経学的障害は、限定されるものではないが：軽度ないし中程度不安、一般的医学的疾患による不安障害、特定できない不安障害、全身性不安障害、パニック発作、広場恐怖症に伴う恐慌障害、広場恐怖症を伴わない恐慌障害、心的外傷後ストレス障害、社会恐怖症、特定の恐怖症、物質−発生不安障害、急性アルコール離脱症候群、脅迫障害、広場恐怖症、双極性障害ＩまたはＩＩ、特に特定されない双極性障害、気分循環性障害、鬱病性障害、主要鬱病性障害、気分障害、物質−発性気分障害を含めた「不安障害」と定義されるカテゴリーを含む。加えて、不安障害は、限定されるものではないが、以下のタイプ：妄想、反社会、回避性、境界性人格障害、依存性、演技性、自己愛性、脅迫、分裂病質、および分裂性を含めた人格障害に適用することができる。

手法：
挙動スクリーニングは４匹の野生型、４匹のヘテロ接合性および８匹のホモ接合性突然変異体マウスのコホールトで行った。全ての挙動テストは、低下した生存性がより早いテストを必要とするのでなければ１２および１６週齢の間で行った。これらのテストは、不安、活動レベルおよび探求を測定するための開放場を含むものであった。

結果：
雄（＋／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、開放場テストの間に増大したメジアン合計タイム−イン−センターを呈し、これは、増大した不安様応答を示唆する。ヘテロ接合性（＋／−）マウスは、軽度ないし中程度不安、一般的な医学的疾患による不安、および／または双極性障害；過剰活動；感覚障害；強迫障害、統合失調症または妄想個性に関連する不安関連障害に合致する表現型を示した。かくして、ＰＲＯ９８２８ポリペプチドまたはそのアンタゴニストは、そのような神経学的障害の治療、または不安障害に関連する兆候の軽減において有用であろう。
４１．３２ＤＮＡ１３９６８６−２８２３（ＵＮＱ３１２２）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ１３９６８６−２８２３と命名された）ＰＲＯ１０２７４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ３１２２）を破壊した。これらの実験のための遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＸＭ＿２０３９３６またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１２０００１５Ｆ２３遺伝子（１２０００１５Ｆ２３Ｒｉｋ）；タンパク質参照：Ｑ７ＴＮＦ２またはアクセション：Ｑ７ＴＮＦ２ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。仮定タンパク質（断片）；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０１８１４５またはアクセション：ＮＭ＿０１８１４５ＮＩＤ：ｇｉ８９２２５３１ｒｅｆＮＭ＿０１８１４５．１Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ仮定タンパク質ＦＬＪ１０５７９（ＦＬＪ１０５７９）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９６ＴＣ７またはアクセション：Ｑ９６ＴＣ７ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。大脳タンパク質−１０。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ１２０００１５Ｆ２３遺伝子、ヒト化低タンパク質ＦＬＪ１０５７９（ＦＬＪ１０５７９）のオルソログである。

ＦＬＪ１０５７９はシグナルペプチドを含有する約４７０アミノ酸の仮定分泌タンパク質である。このタンパク質の機能は知られていないが、それは、ＤＮＡ修復において役割を演じるＤＮＡフォトリアーゼに関連するであろう。さらに、該タンパク質は「推定Ｔ−細胞タンパク質チオシンホスファターゼ−相互作用タンパク質」として規定されている（ＮＣＢＩアクセションＣＡＣ３９４８０）。バイオインフォーマティック分析は、該仮定タンパク質が小胞体に位置するであろうことを示唆する。

Ｃｈｉ−ｓｑ．＝２．９７有意性＝０．２２６３０（ｈｏｍ／ｎ）＝０．３４平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入はコーディングエクソン５および６の間のイントロンで起こった（ＮＣＢＩアクセションＢＣ０５５７５４．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨を除いてＲＴ−ＰＣＲによってテストされたすべての１３の成人組織試料で検出された。
ＲＴ−ＰＣＲ分析は、転写体が分析された（−／−）マウス（Ｍ−１５６）で存在しなしことを明らかにした。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認された。
４１．３２．１（ＤＮＡ１３９６８６−２８２３（ＵＮＱ３１２２）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト仮定タンパク質（ＦＬＪ１０５７９）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異体の結果、突然変異体（−／−）マウスが、減少した骨−関連測定を伴う異常な骨代謝の兆候並びに成長遅延の兆候を呈するという観察をもたらした（マウスはより小さく、減少した身長を示した）。転写体はＲＴ−ＰＣＲによると存在しなかった。

（ｂ）骨代謝および体診断
（１）組織質量および無脂肪体質量の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量の変化（ＴＴＭ）を同定した。

結果：
突然変異体（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均身長を呈した。

結果：
ＤＥＸＡ：雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、全身および大腿において、減少した平均骨ミネラル含有量および骨ミネラル密度を呈した。また、雌（−／−）マウスは、減少した平均骨ミネラル含有量指標も呈した。雄ノックアウトは、減少した全身容量骨ミネラル密度および大腿骨ミネラル密度を示した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ
これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが、骨折に導く減少した密度および、恐らくは、脆性を伴う骨質量の減少によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な、有意な骨喪失を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ１０２７４ポリペプチドまたはそのアゴニストは骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用なように見える。加えて、ＰＲＯ１０２７４ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療で有用であろう；他方、ＰＲＯ１０２７４ポリペプチドのアンタゴニスト（阻害剤）は、関節炎または骨粗鬆症のような異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。（−／−）マウスが減少した身長を示したという観察もまた、成長の遅延を示すものであった。

４１．３３ＤＮＡ１４４８４４−２８４３（ＵＮＱ５７８３）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験において、（ＤＮＡ１４４８４４−２８４３と命名される）ＰＲＯ１６０９０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ５７８３）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＤＴＦＴ５７８３（ＬＯＣ３２７９５７）と同様なＸＭ＿２８２９９３またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ；タンパク質参照：ＸＰ２８２９９３またはＤＴＦＴ５７８３と同様［Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ］；ヒト遺伝子配列参照；ＮＭ＿２０７１０３またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＤＴＦＴ５７８３（ＵＮＱ５７８３）に対応し；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９６ＭＤ０またはアクセション：Ｑ９６ＭＤ０ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。仮定タンパク質ＦＬＪ３２５８０。

注目するマウス遺伝子は、（ＤＴＦＴ５７８３と同様な）ＬＯＣ３２７９５７、ヒトＵＮＱ５７８３（ＤＴＦＴ５７８３）のオルソログである。

ＵＮＱ５７８３は、ＩＩ型原形質膜タンパク質または分泌タンパク質のようである約１３０アミノ酸の仮定タンパク質である（Ｃｌａｒｋｅｔａｌ．，ＧｅｎｏｍｅＲｅｓ；１３（１０）：２２６５−７０（ＰＭＩＤ１２９７５３０９）（２００３）；Ｏｔａｅｔａｌ．，ＮａｔＧｅｎｅｔ；３６（１）：４０−５（ＰＭＩＤ１４７０２０３９）（２００４））。マウスおよびヒトオルソログの双方は、単一のアンカーまたは単一のペプチドいずれかとして機能するＮ−末端ペプチドを含有し；他のドメインは検出されなかった。

Ｃｈｉ−ｓｑ＝０．００有意性＝１．０００００（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２５平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１および２を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＸＭ＿２８２９９３．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、目、骨格筋、骨および心臓を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認された。

４１．３３．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ１４４８４４−２８４３（ＵＮＱ５７８３）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト仮定膜タンパク質のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、貧血がもたらされた。（−／−）マウスは、減少した平均血清アルブミンレベル、増加した平均血清コレステロールレベルおよび増加した血清グルコースレベルを呈した。また、雄突然変異体（−／−）マウスは増大した体重も呈した。また、雄（−／−）マウスは増大した平均合計組織質量および無脂肪体質量も呈した。雌（−／−）マウスは増大した脂肪パーセンテージおよび合計脂肪質量（ｇ）を示した。遺伝子破壊はサザーンブロットによって確認された。

結果：
血液学：（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均合計赤血球細胞カウント、ヘモグロビンレベル、およびヘマトクリットを呈した。貧血は大赤血球（上昇したＭＣＶ）および正色素性（正常なＭＣＨＣ）であり、再生貧血を示唆するが、網状赤血球は示されなかった。後に示すように、アルブミンの血清レベルは減少し−タンパク質の喪失および貧血は慢性出血を示唆する。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：６／４／８
これらの結果は貧血に関連する表現型に関する。かくして、ＰＲＯ１６０９０ポリペプチドは、そのアゴニスト、またはＰＲＯ１６０９０ポリペプチドについてのコーディング遺伝子は、正常な赤血球細胞の生産で必須に違いなく、それ自体は、貧血または低ヘマトクリットに関連する血液障害の治療で有用であろう。

結果：
雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子突然変異体と比較した場合、増大した平均体重を呈した。
（２）骨代謝：放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

Ｄｅｘａ分析―テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、骨の変化を同定した。麻酔した動物を調べ、骨ミネラル含有量（ＢＭＣ）、ＢＭＣ／ＬＢＭ比率、容量骨ミネラル密度（ｖＢＭＤ）、全身ＢＭＤ、大腿ＢＭＤおよび脊椎ＢＭＤを測定した。

結果：
ＤＥＸＡ：雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、増大した平均合計組織質量および無脂肪体質量を呈した。雌（−／−）マウスは増大した脂肪（％）および脂肪（ｇ）を示した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ
これらの結果は、ノックアウト突然変異体マウスが異常な体測定を呈することを示す。具体的には、ＤＥＸＡによって分析された（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合、顕著に増加した合計組織質量および無脂肪体質量、および増加した体重および脂肪（％）および（ｇ）を呈し、これはこれらの突然変異体における肥満を示唆する。これらの結果は、上昇したコレステロールレベルが検出された血液テストと合致する。かくして、ＰＲＯ１６０９０ポリペプチドおよび／またはそのコーディング遺伝子が正常な脂肪および／または脂質代謝に必須である。

（ｄ）表現型分析：心臓学
心血管生物学の領域においては、標的は、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール（高コレステロール血症）および上昇したトリグリセリド（高トリグリセリド血症）の様な異常脂質血症、糖尿病および／または肥満の治療のためにここでは同定した。表現型テストは、血清コレステロールおよびトリグリセリドの測定を含んだ。
血中脂質
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。高コレステロールレベルおよび増大したトリグリセリド血中レベルは、心血管病および／または糖尿病の発生において認識された危険因子である。血中脂質の測定は、血中脂質レベルを調節する生物学的スイッチの発見を容易とする。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管病についての危険性を低下させるのに有用であろう。これらの血液化学テストにおいて、コレステロール測定はＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて記録した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均突然変異体比較した場合、減少した平均血清アルブミンレベルを呈した。加えて、（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、増大した平均血清コレステロールレベルを呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／５／８
前記でまとめたように、ホモ接合性（−／−）突然変異体マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均突然変異体比較した場合、増大した平均血清コレステロールレベルを呈した。トリグリセリドの変化は観察されなかった。

かくして、ＰＲＯ１６０９０が欠乏した突然変異体マウスは、心血管病、特に、異常なコレステロール代謝に関連した病気についてのモデルとして供することができる。ＰＲＯ１６０９０ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は、血中脂質を調節するにおいて、および特に正常なコレステロールを維持するにおいて有用であろう。かくして、ＰＲＯ１６０９０ポリペプチドは高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、および／または肥満または糖尿病のような心血管病の治療で有用であろう。
４１．３４ＤＮＡ１３９５９２−２８６６（ＵＮＱ５８２５）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ１３９５９２−２８６６と命名された）ＰＲＯ１９６４４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ５８２５）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿０２０２５９またはアクセション：ＮＭ＿０２０２５９ＮＩＤ：９９３８０１９ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓハリマウス−相互作用タンパク質（Ｈｈｉｐ）；タンパク質参照：Ｑ９ＷＵ５９またはＱ９ＷＵ５９Ｑ９ＷＵ５９ＨＥＤＧＥＨＯＧ−ＩＮＴＥＲＡＣＴＩＮＧＰＲＯＴＥＩＮ；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０２２４７５またはアクセション：ＮＭ＿０２２４７５ＮＩＤ：２０１４３９７２ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓハリマウス相互作用タンパク質（ＨＨＩＰ）に対応し；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９６ＱＶ１またはＱ９６ＱＶ１ＨＥＤＧＥＨＯＧ−ＩＮＴＥＲＡＣＴＩＮＧＰＲＯＴＥＩＮに対応する。

注目するマウス遺伝子はＨｈｉｐ（ハリマウス−相互作用タンパク質）ヒトＨＨＩＰのオルソログである。別名はＨｉｐ、Ｈｉｐ１、ハリマウス−相互作用、ＦＬＪ２０９９２、およびハリマウス−相互作用タンパク質を含む。

ＨＨＩＰは、胚発生の間に形態形成を調節する膜−係留細胞外シグナリングタンパク質であり、ハリマウスタンパク質と結合するＩ型原形質膜タンパク質である。ＨＨＩＰはハリマウスタンパク質シグナリングの負のレギュレーターとして機能する。ハリマウスタンパク質は隣接細胞においてＨＨＩＰ発現を誘導し、ハリマウスタンパク質との結合によってさらにハリマウスシグナリングを減衰させ、それにより、その同族受容体の活性化を阻害する。ＨＨＩＰの可溶性形態は脳で検出されている（ＣｈｕａｎｇａｎｄＭｃＭａｈｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ；３９７（６７２０）：６１７−２１（１９９９）；Ｃｏｕｌｏｍｂｅｅｔａｌ．，ＭｏｌＣｅｌｌＮｅｕｒｏｓｃｉ；２５（２）：３２３−３３（２００４））。

ＨＨＩＰの生物学的役割はＨＨＩＰノックアウトマウスで調べられてきた。Ｃｈｕａｎｇおよび同僚；ＧｅｎｅｓＤｅｖ；１７（３）：３４２−７（２００３）は、ＨＨＩＰホモ接合性ヌルマウスにおいてＨＨＩＰシグナリングがアップレギュレートされ、胚および骨格発生に欠陥があることを示した。さらに、彼らは、ＨＨＩＰが、ハリマウスおよび線維芽細胞成長因子シグナリングの間の相互作用を含むメカニズムによって初期肺分岐を調節することを示した。彼らは、ＨＨＩＰが、ハリマウスおよび線維芽細胞成長因子シグナル変換を変調することに関与するらしいと結論した。Ｋａｗａｈｉｒａおよび同僚（Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；１３０（２０）：４８７１−９（２００３））は、ＨＨＩＰホモ接合性ヌルマウスにおいて、膵臓形態形成、島形成、および内分泌細胞増殖が損なわれ、繊維芽細胞増殖因子１０発現が低下することを示した。彼らは、ＨＨＩＰ機能の喪失が膵臓エンラーゲ内のハリマウスシグナリングを増加させ、膵臓発生の初期の段階において線維芽細胞成長因子シグナリングを減少させ、観察された膵臓発生表現型の少なくとも一部を引き起こすと結論した。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝６．３７有意性＝０．０４１４１（ｈｏｍ／ｎ）＝０．１１平均同腹子サイズ＝４
突然変異のタイプ：レトロウイルス挿入（ＯＳＴ）
レトロウイルス挿入はコーディングエクソン４および５の間のイントロンで起こった（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０２０２５９．３）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、胚性幹（ＥＳ）細胞において、および骨格筋、骨および脂肪を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
致死のため、転写体発現分析は行わなかった。標的遺伝子の破壊は逆ＰＣＲによって確認した。

４１．３４．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ１３９５９２−２８６６（ＵＮＱ５８２５）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトハリマウス−相互作用タンパク質（ＨＨＩＰ）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、（−／−）突然変異体の致死性がもたらされた。（−／−）突然変異体はゲノタイピングの時点で死滅していた。ヘテロ接合性（＋／−）マウスは、平均血清コレステロールの有意な増大を示した。雌および雄（＋／−）マウスは増大した体重を示した。

致死性の胚発生異常に関連する理論：
ノックアウトマウスにおける胚致死性は、通常、限定されるものではないが、神経−変性病、脈管形成障害、炎症病、または遺伝子／タンパク質が多くの細胞型における基本的細胞シグナリングプロセスにおいて重要な役割を有する場合を含めた、種々の深刻な発生問題に由来する。加えて、胚致死は潜在的癌モデルとして有用である。同様に、対応するヘテロ接合性（＋／−）突然変異体動物は、それらが、ノックアウトされた遺伝子の機能に関する高度に情報的な手掛かりを明らかにする表現型および／または病理学報告を呈する場合に特に有用である。例えば、ＥＰＯノックアウトマウスは胚致死であるが、胚についての病理学報告はＲＢＣのかなりの欠如を示した。

（ｂ）病理学
顕微鏡観察：１２．５日において、４４の観察された胚があった：５つの（−／−）胚、１８の（＋／−）胚、９つの（＋／＋）胚、１１の再吸収モル、および１つの決定的でないもの。
遺伝子発現：ＬａｃＺ活性は免疫組織化学分析によって組織のパネルで検出されなかった。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：２／１／４
（ｃ）表現型分析：心臓学
心血管生物学の領域においては、標的は、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病、高コレステロール（高コレステロール血症）および上昇したトリグリセリド（高トリグリセリド血症）の様な異常脂質血症、糖尿病および／または肥満の治療のためにここでは同定した。表現型テストは、血清コレステロールおよびトリグリセリドの測定を含んだ。
血中脂質
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。高コレステロールレベルおよび増大したトリグリセリド血中レベルは、心血管病および／または糖尿病の発生において認識された危険因子である。血中脂質の測定は、血中脂質レベルを調節する生物学的スイッチの発見を容易とする。血中脂質レベルを上昇させる因子の阻害は、心血管病についての危険性を低下させるのに有用であろう。これらの血液化学テストにおいて、コレステロール測定はＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を用いて記録した。

結果：
雄ヘテロ接合性（＋／−）マウスは平均血清コレステロールの有意な増加を呈した（ｐ＝０．０１）。加えて、雄および雌双方のヘテロ接合性（＋／−）マウスは、それらの野生型同腹子および履歴平均と比較して、増大した体重を示した。

かくして、ＰＲＯ１９６４４ポリペプチドコーディング遺伝子が欠乏した突然変異体マウスは、心血管病についてのモデルとして供することができる。ＰＲＯ１９６４４ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は、血中脂質を調節するにおいて、特に、正常なコレステロール代謝を維持するにおいて有用であろう。かくして、ＰＲＯ１９６４４ポリペプチドは、高血圧、アテローム性動脈硬化症、心不全、発作、種々の冠動脈病または糖尿病のような心血管病の治療で重要であろう。
４１．３５ＤＮＡ１７６７７５−２９５７（ＵＮＱ５９８２）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ１７６７７５−２９５７と命名された）ＰＲＯ２１３４０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ５９８２）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿１５３３９７またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓジスインテグリンおよびメタロプロテアーゼドメイン３２（Ａｄａｍ３２）；タンパク質参照：Ｑ８Ｋ４１０またはアクセション：Ｑ８Ｋ４１０ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＡＤＡＭ３２；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿１４５００４。アクセション：ＮＭ＿１４５００４ＮＩＤ：２１４５０７１２ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ仮定タンパク質ＭＧＣ２６８９９（ＭＧＣ２６８９９）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ８ＴＣ２７またはアクセション：Ｑ８ＴＣ２７ＮＩＤ：ＨｏｍｏＳａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ジスインテグリンおよびメタロプロテイナーゼドメイン１８（仮定タンパク質ＭＧＣ２６８９９）と同様。

注目するマウス遺伝子はＡｄａｍ３２（ジスインテグリンおよびメタロプロテアーゼドメイン３２）、ヒトＡＤＡＭ３２のオルソログである。別名は仮定タンパク質ＭＧＣ２６８９９および「ジスインテグリンおよびメタロプロテアーゼドメイン３２」を含む。

ＡＤＡＭ３２は、分子の細胞外セグメント上にジスインテグリンおよびメタロプロテアーゼドメインを保有する、精巣に主として発現されるＩ型原形質膜タンパク質である。（Ｃｈｏｉｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ；３０４：１５１−６２（２００３））。一般に、ＤＡＡＭファミリータンパク質は、それらのジスインテグリンドメインを介して細胞表面または細胞外マトリックスタンパク質と相互作用し、タンパク質分解、および成長因子、サイトカイン、細胞接着分子および受容体のようなタンパク質の放出を触媒する（Ｗｈｉｔｅｅｔａｌ．，ＣｕｒｒＯｐｉｎＣｅｌｌＢｉｏｌ；１５（５）：５９８−６０６（２００３）；Ｄｕｆｆｙｅｔａｌ．，ＴｈｒｏｍｂＨａｅｍｏｓｔ；８９（４）：６２２−３１（２００３））。ＡＤＡＭ３２ｍＲＮＡは減数分裂前相の間に合体期精子細胞で最初観察され、ＡＤＡＭ３２は精子発生または受精に関与することを示唆する（Ｃｈｏｉｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ；３０４：１５１−６２（２００３）；Ｔａｌｂｏｔｅｔａｌ．，ＢｉｏｌＲｅｐｒｏｄ；６８（１）：１−９（２００３））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．２５有意性＝０．８８０８５（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹子サイズ＝７
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン３および５を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ１５３３９７．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、肝臓、骨格筋、および骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーションによって確認した。
４１．３５．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ１７６７７５−２９５７（ＵＮＱ５９８２）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型のまとめ：
ヒト「ジスインテグリンおよびメタロプロテイナーゼドメイン３２」（ＡＤＡＭ３２）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、雌ホモ接合性（−／−）およびヘテロ接合性（＋／−）マウスにおいて増大した合計体脂肪をもたらした。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）骨代謝および体診断
組織質量および無脂肪質量の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量の変化（ＴＴＭ）を同定した。

結果：
ＤＥＸＡ：雌ホモ接合性（−／−）およびヘテロ接合性（＋／−）マウスはそれらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、顕著に増大した平均パーセント合計体脂肪および合計脂肪質量を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
これらの結果は、ホモ接合性（−／−）およびヘテロ接合性（＋／−）マウスは共に肥満型の表現型を呈することを示す。これらのデータは、ＰＲＯ２１３４０ポリペプチドコーディング遺伝子が、脂肪代謝を負に調節するように働くことを示唆する。かくして、ＰＲＯ２１３４０ポリペプチドおよび／またはそのコーディング遺伝子は、正常な脂肪代謝に、および肥満および／またはＩＩ型糖尿病のような異常な脂肪代謝に関連する障害の予防で必須である。
４２．３６ＤＮＡ３４０３９２（ＵＮＱ１７８２６）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ３４０３９２と命名された）ＰＲＯ９２１６５ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ１７８２６）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿０３０７０７またはアクセション：ＮＭ＿０３０７０７ＮＩＤ：ｇｉ１３５４０５０４ｒｅｆＮＭ＿０３０７０７．１Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓマクロファージスカベンジャー受容体２（Ｍｓｒ２）；タンパク質参照Ｑ９ＥＱＹ５またはアクセション：Ｑ９ＥＱＹ５ＮＩＤ：ＭＵＳｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＭＭＡＮ−ＧＰＲＯＴＥＩＮＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＩＦＧＰ２）；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０５２９３９またはアクセション：ＮＭ＿０５２９３９ＮＩＤ：ｇｉ２１３１４７６３ｒｅｆＮＭ＿０５２９３９．２ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＦｃ受容体−様タンパク質３（ＦＣＲＨ３）；ヒトタンパク質配列は参照Ｑ９６Ｐ３１またはアクセション：Ｑ９６Ｐ３１ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。ＳＨ２ＤＯＭＡＩＮ−ＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＰＨＯＳＰＨＡＴＡＳＥＡＮＣＨＯＲＰＲＯＴＥＩＮ２Ａ。

注目するマウス遺伝子はＭｓｒ２（マクロファージスカベンジャー受容体２）、ヒトＦＣＲＨ３（Ｆｃ受容体−様タンパク質３）のオルソログである。別名はＩｇＳＲ、ＩＦＧＰ２、ＭＭＡＮ−ｇ、９３３０１５８Ｆ１２、２８１０４３９Ｃ１７Ｒｉｋ、免疫グロブリンスカベンジャー受容体、ＳＰＡＰ２、およびＳＨ２ドメイン−含有ホスファターゼアンカータンパク質２を含む。

ＦＣＲＨ３およびマウスオルソログＭｓｒ２は、白血球Ｆｃ受容体に構造的に関連するタンパク質のファミリーのメンバーである。マウスオルソログＭｓｒ２は主として脳で発現される仮定分泌タンパク質であるが、ヒトオルソログＦＣＲＨ３は主としてＢ細胞で発現されるＩ型原形質膜タンパク質である（Ｇｕｓｅｌｎｉｋｏｖｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ；５４（２）：８７−９５（２００２））。

マウスオルソログＭｓｒ２はシグナルペプチド、いくつかの免疫グロブリン−様ドメイン、およびＣ−末端スカベンジャー受容体スーパーファミリー−関連ドメインよりなる（Ｇｕｓｅｌｎｉｋｏｖｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ；５４（２）：８７−９５（２００２））。Ｍｓｒ２の機能は知られていないが、免疫グロブリン−様ドメイン（ＳＭＡＲＴアクセションＳＭ００４１０）およびスカベンジャー受容体ドメイン（ＰｆａｍアクセションＰＦ００５３０）はタンパク質−タンパク質相互作用に関与するようである。Ｍｓｒ２は、マクロファージによる修飾されたＬＤＬの接種を媒介し、アテローム性度脈硬化症プラーク形成に寄与する。スカベンジャー受容体Ｍｓｒ１およびＣＤ３６の機能の喪失を保障しないようである。（Ｋｕｎｊａｔｈｏｏｒｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７７（５１）：４９９８２−８（２００３））。

ヒトオルソログＦＣＲＨ３はシグナルペプチド、いくつかの免疫グロブリン−様ドメイン、膜貫通セグメント、およびコンセンサス免疫受容体チロシン−ベースの活性化または抑制性シグナリングモチーフを含有する細胞質Ｃ−末端から構成される。チロシン−リン酸化ＦＣＲＨ３はタンパク質チロシンキナーゼＳｙｋおよびＺａｐ７０と、およびタンパク質チロシンホスファターゼ、ＳＨＰ−１およびＳＨＰ−２と会合する。さらに、ＳＨＰ−１とチロシンリン酸化ＦＣＲＨ３との相互作用はＳＨＰ−１活性を刺激する。かくして、ＦＣＲＨ３は受容体として機能するようであり、Ｂ細胞機能または発生において役割を演じる（Ｄａｖｉｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ；９８（１７）：９７７２−７（２００１）；Ｘｕｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ；２９３（３）：１０３７−４６（２００２））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝１．９８有意性＝０．３７１９９（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２９平均同腹子サイズ＝９
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン３および６を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ０３０７０７．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、胚性幹（ＥＳ）細胞において、および肝臓および骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．３６．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ３４０３９２（ＵＮＱ１７８２６）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
マクロファージスカベンジャー受容体２（Ｍｓｒ２）をコードする遺伝子の突然変異の結果、増大した平均体重、平均合計組織質量、無脂肪体質量、パーセント体脂肪および合計体脂肪を持つより大きな（−／−）マウスがもたらされた。（−／−）マウスは末梢血液においてＣＤ８細胞の減少したパーセンテージも呈した。遺伝子破壊はサザーンブロットによって確認した。

（ｂ）骨代謝および骨診断
（１）組織質量および無脂肪体質量の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載：
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量の変化（ＴＴＭ）を同定した。

結果：
雌突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した同腹子と比較して、増大した平均体重を呈した。

結果：
ＤＥＸＡ：雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、増大した平均合計組織質量、無脂肪体質量、脂肪（％）および脂肪（ｇ）を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ
これらの結果は、雌ノックアウト突然変異体マウスが異常な体測定を呈することを示す。具体的には、ＤＥＸＡによって分析された（−／−）は、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合、顕著に増大した合計組織質量、無脂肪体質量、パーセント体脂肪、および合計脂肪質量および増大した体重を呈し、これは、これらの突然変異体における肥満および／または成長関連障害を示唆する。これらのデータは、ＰＲＯ９２１６５ポリペプチドをコードするＤＮＡ３４０３９２遺伝子が成長代謝を調節するよう働くことを示唆する。かくして、ＰＲＯ９２１６５ポリペプチドおよび／またはそのコーディング遺伝子は、正常な脂肪および／または脂質代謝で必須であり、ならびに正常な成長パターンを維持するにおいて重要である。加えて、ＰＲＯ９２１６５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、成長障害および／または肥満の治療または予防で有用であろう。

（ｃ）免疫学表現型分析
免疫関連および炎症病は、通常の生理学においては、傷または負傷に対する応答に臨界的であり、傷または負傷からの修復を開始させ、および外来性生物に対する生来のおよび獲得した防御を備えるかなり複雑で、しばしば複数の相互連結生物学的経路の発現または結果である。病気または病理は、これらの正常な生理学的経路が、異常な調節または過剰な刺激の結果として、自己に対する反応として、またはこれらの組合せとして、応答の強度に直接的に関連してさらなる傷または負傷を引き起こす場合に起こる。

Ｔリンパ球（Ｔ細胞）は、哺乳動物免疫応答の重要な構成要素である。Ｔ細胞は、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）内の遺伝子によってコードされる自己−分子に関連する抗原を認識する。抗原は、抗原提示細胞、ウイルス感染細胞、癌細胞、移植片などの表面にＭＨＣ分子と共に提示され得る。Ｔ細胞系は、宿主哺乳動物に対する健康の脅威をもたらすこれらの変化した細胞を排除する。Ｔ細胞はヘルパーＴ細胞および細胞傷害性Ｔ細胞を含む。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞上の抗原−ＭＨＣ複合体の認識に続いてかなり増殖する。また、ヘルパーＴ細胞は、Ｂ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、および免疫応答に参加する種々の他の細胞の活性化において中枢的な役割を演じる種々なサイトカイン、すなわち、リンホカインを分泌する。

結果：
ＦＡＣＳ：突然変異体（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、ＣＤ８細胞の減少した平均パーセンテージを呈した。（雄ではなく）雌は、胸腺においてより少ないＣＤ８＋細胞を有した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：７／４／８
これらの結果は、ホモ接合性（−／−）ノックアウトマウスが陰性免疫学的表現型を呈することを示す。ＣＤ８＋分子は、抗原認識においてＴ−細胞受容体と共働し、特に、ＭＨＣクラスＩ分子の不変部分のみに特異的に結合する共−受容体分子である。抗原認識の間に、ＣＤ８＋分子はＴ−細胞受容体の構成成分とＴ−細胞表面で会合して、細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ−細胞を形成する。かくして、ＰＲＯ９２１６５ポリペプチドまたはそのアゴニストは、ＭＨＣクラスＩ経路を含むＴ−細胞媒介応答で重要であり、細胞傷害性Ｔ細胞がサイトゾル病原体に対する宿主防御で必要である場合に有益であろう。対照的に、ＰＲＯ９２１６５ポリペプチドのアンタゴニストまたは阻害剤は、ＣＤ８＋細胞の平均パーセンテージの欠乏をもたらす陰性表現型を模倣すると予測され、従って、ＭＨＣクラスＩ欠乏がもたらされるであろう。１つのそのような病気モデルは、細胞−表面ＭＨＣクラスＩ分子のほとんど完全な不存在がある場合に起こる。この疾患を持つ患者は、ＭＨＣクラスＩ分子をコードするｍＲＮＡの正常なレベル、およびＭＨＣクラスＩタンパク質の生産の正常なレベルを有する。しかしながら、これらの個体は、特に、ＣＤ８＋Ｔ細胞の欠如のため免疫不全である。この結果、ほとんど全ての病原体に対する応答が臨界的に抑制される酷い免疫不全病がもたらされる。
４１．３７ＤＮＡ３４０３９４（ＵＮＱ１１８３１）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ３４０３９４と命名される）ＰＲＯ８５１４３ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ１１８３１）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿１５３０９０またはアクセション：ＮＭ＿１５３０９０ＮＩＤ：ｇｉ２３３４６５１２ｒｅｆＮＭ＿１５３０９０．１ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＩＦＧＰ１（ＩＦＧＰ１）；タンパク質参照：Ｑ８Ｒ４Ｙ０またはアクセション：Ｑ８Ｒ４Ｙ０ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。ＩＦＧＰ１；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０５２９３８またはアクセション：ＮＭ＿０５２９３８ＮＩＤ：ｇｉ２１３６１８３５ｒｅｆＮＭ＿０５２９３８．２ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＦｃ受容体−様タンパク質１（ＦＣＲＨ１）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｑ９６ＬＡ６またはアクセション：Ｑ９６ＬＡ６ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。Ｆｃ受容体−様タンパク質１。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡＡ２３００２０Ｇ２２遺伝子、ヒトＦＣＲＨ１（Ｆｃ受容体−様タンパク質１）のオルソログである。別名はＦｃｒｈ１、ＩＦＧＰ１、ＢＸＭＡＳ１、ＩＲＴＡ５、ＤＸＭＡＳ１−様タンパク質１およびＦｃ受容体−様タンパク質１を含む。

ＦＣＲＨ１は、免疫グロブリンのＦｃ領域に対する受容体として機能するようであるＩ型原形質膜タンパク質である。該タンパク質はシグナルペプチド、３つの免疫グロブリン−様ドメイン、膜貫通セグメント、および免疫受容体チロシン−ベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭＳ）を含有する９９−アミノ酸細胞質Ｃ末端よりなる。ＦＣＲＨ１は、主として、休止および生殖中心Ｂ細胞、および種々のリンパ系悪性疾患において発現され、免疫応答を調節するにおいて役割を演じるようである（Ｄａｖｉｓｅｔａｌ．，ＰｒｏｃＮａｔｌＡｃａｄＳｃｉＵＳＡ；９８（１７）：９７７２−７（２００１）；Ｍｉｌｌｅｒｅｔａｌ．，Ｂｌｏｏｄ；９９（８）：２６６２−９（２００２）；Ｇｕｓｅｌｎｉｋｏｖｅｔａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ；５４（２）：８７−９５（２００２））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．６８有意性＝０．７１１７７（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２１平均同腹子サイズ＝８
突然変異体のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン２ないし６を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＮＭ１５３０９０．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、骨格筋、骨および脂肪を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．３７．１（ＤＮＡ３４０３９４（ＵＮＱ１１８３１）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトＦｃ受容体−様タンパク質１（ＦＣＲＨ１）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、異常な骨−関連測定がもたらされた。遺伝子破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）骨代謝および診断／放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：
ミクロ−ＣＴ：雄突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、増大した平均脊椎小柱骨容量、数、および厚みを呈した。ノックアウトマウスは、野生型同腹子と比較して中間幹大腿皮質厚みの減少を示した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
これらの結果は、突然変異体（−／−）マウスが、骨折に導く骨質量の減少および、恐らくは、脆性によって特徴づけられる骨粗鬆症と同様な、骨喪失（脊椎小柱における減少した容量および厚み）を伴う異常な骨代謝に関連する異常な骨−関連測定または陰性表現型の兆候を示した。かくして、ＰＲＯ８５１４３ポリペプチドまたはそのアゴニストは、骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であるように見える。加えて、ＰＲＯ８５１４３ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子は骨ホメオスタシスを維持するのに有用であり、骨治癒において、または関節炎または骨粗鬆症の治療で重要であり；他方、ＰＲＯ８５１４３ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子に対するアンタゴニストは、関節炎または骨粗鬆症のような異常な骨代謝に関連する炎症病を含めた異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。
４１．３８ＤＮＡ６０６２９−１４８１（ＵＮＱ１８９１９）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ６０６２９−１４８１と命名された）ＰＲＯ１１２４ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ１８９１９）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＡＫ０３３５９１またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ成体雄盲腸ｃＤＮＡ、ＲＩＫＥＮ全長豊富化ライブラリー、クローン：９１３００２０Ｌ０７産物：ＣＡＬＣＩＵＭ−ＡＣＴＩＶＡＴＥＤＣＨＬＯＲＩＤＥＣＨＡＮＮＥＬＰＲＯＴＥＩＮ２［Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ］、十分なインサート配列にわずかに同様；タンパク質参照：ＸＰ＿１３１２６２または発現された配列ＡＩ５０４７０１［Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ］；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿０１２１２８またはアクセション：ＮＭ＿０１２１２８ＮＩＤ：ｇｉ１２０２５６６６ｒｅｆＮＭ＿０１２１２８．２Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ塩化物チャネル、カルシウム活性化、ファミリーメンバー４（ＣＬＣＡ４）に対応する；ヒトタンパク質配列は参照Ｑ９ＵＮＦ７またはアクセション：Ｑ９ＵＮＦ７ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）に対応する。カルシウム−活性化塩化物チャネルタンパク質２。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ９１３００２０Ｌ０７遺伝子、ヒトＣＬＣＡ４（塩化物チャネル、カルシウム活性化、ファミリーメンバー４）のオルソログである。別名はＣＬＣＡ６、ＣａＣＣ、ＣａＣＣ２、ｈＣＬＣＡ４、カルシウム活性化塩化物チャネル、および塩化物チャネルカルシウム活性化。

ＣＬＣＡ４は、主として、肺および消化管の上皮で発現される塩化物チャネルである。約９００アミノ酸のタンパク質はシグナルペプチド、（該ポリペプチドの中央近くに位置する）ｖｏｎＷｉｌｌｅｂｒａｎｄ因子ドメイン、（該ポリペプチドのＣ末端近くに位置する）フィブロネクチンドメイン、および膜貫通ドメインとして機能するようである４つの疎水性セグメントよりなる。ＣＬＣＡ４ポリペプチドはタンパク質分解プロセッシングを受けて、機能的な塩化物チャネルのサブユニットを形成することができる。ＣＬＣＡ４塩化物チャネルの活性は、カルシウム／カルモジュリン−依存性プロテインキナーゼＩＩによって触媒されるリン酸化によって刺激される（Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｅｔａｌ．，ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ；２７０（５２）：３１０１６−２６（１９９５）；Ａｇｎｅｌｅｔａｌ．，ＦＥＢＳＬｅｔｔ；４５５（３）：２９５−３０１（１９９９）；Ｐａｕｌｉｅｔａｌ．，ＣｌｉｎＥｘｐＰｈａｒｍａｃｏｌＰｈｙｓｉｏｌ；２７（１１）：９０１−５（２０００））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝２．９１有意性＝０．２３２８３（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２２平均同腹子サイズ＝９
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＡＫ０３３５９１．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、胚性幹（ＥＳ）細胞において、およびＲＴ−ＰＣＲによってテストされる１３の成人組織試料の中で、脳；目；胸腺；肝臓；および胃、小腸および結腸において検出された。
標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．３８．１（破壊された遺伝子：ＤＮＡ６０６２９−１４８１（ＵＮＱ１８９１９）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト塩化物チャネル、カルシウム活性化、ファミリーメンバー４（ＣＬＣＡ４）のオルソログをコードする遺伝子の突然変異の結果、ＬＰＳ攻撃に対して増大したＴＮＦ−アルファ応答がもたらされた。突然変異体（−／−）マウスは、減少した平均体重および身長、および異常な骨−関連測定を伴う成長異常も示した。ホモ接合性（−／−）マウスは、増大したまたは改善されたグルコース耐性も示した。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

以下のテストを行った：
急性相応答：
テストの記載：細菌リポ多糖（ＬＰＳ）はエンドトキシンであって、それ自体は、急性相応答および全身炎症の優れたインデューサーである。レベルＩのＬＰＳマウスに、２６ゲージ針を用い、２００Ｌ滅菌生理食塩水中のＬＰＳの致死下用量を腹腔内（ｉ．ｐ．）に注射した。該用量は、注射から３時間後に１ｇ／ｇ体重でテストしたマウスの平均重量に基づいており；次いで、１００ｕｌの血液試料を採取し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ機器にて、ＴＮＦａ、ＭＣＰ−１、およびＩＬ−６の存在について分析した。

結果：
（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、ＬＰＳ攻撃に対する増大した平均血清ＴＮＦ−アルファ応答を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：７／４／８
まとめると、ＬＰＳエンドトキシン攻撃は、ＰＲＯ１１２４ポリペプチドをコードする遺伝子が欠乏したノックアウトマウスは、それらの野生型同腹子と比較した場合に、免疫学的異常を呈することを示した。特に、突然変異体マウスは、ＬＰＳエンドトキシンで攻撃した場合、免疫学的応答（ＴＮＦ−α生産）を誘導する増大した能力を呈し、これは、顕著なプロ炎症応答を示す。これは、ＰＲＯ１１２４ポリペプチドのアンタゴニスト（阻害剤）が免疫系を刺激し、白血病および他のタイプの癌の場合において、およびＡＩＤＳ患者のような免疫寛容患者においてのように、この効果が個人に対して有益であろう場合に用途を見出すであろうことを示唆する。従って、ＰＲＯ１１２４ポリペプチドまたはそのアゴニストは免疫応答を阻害するにおいて有用であり、例えば、移植片拒絶または移植片−対−宿主病の場合に、有害なヒト応答を抑制するための有用な候補であろう。

（ｃ）骨代謝および体診断
（１）組織質量および無脂肪体質量の測定−Ｄｅｘａ
Ｄｅｘａ分析−テストの記載
手法：４匹の野生型、４匹のヘテロ接合体および８匹のホモ接合体のコホールトをこのアッセイでテストした。デュアルエネルギーＸ−線吸収測定（ＤＥＸＡ）を首尾よく用いて、合計組織質量の変化（ＴＴＭ）を同定した。

結果：
雌（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した平均体重および平均身長を呈し、これは、ノックアウトマウスが成長の遅延の兆候を示すことを示す。かくして、ＰＲＯ１１２４ポリペプチドまたはそのアゴニストが、正常な成長および発生を維持するにおいて有用であろう。

（２）骨代謝および放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：
ＤＥＸＡ：対照野生型およびホモ接合性ノックアウト雌（−／−）マウスの間で合計体脂肪含有量に明瞭な差があるが、ノックアウトマウスは正常な値を示しており、対照マウスは上昇したレベル（正常な値よりも大）を示している。同様な状況が血中トリグリセリドレベルで観察される。
ミクロＣＴ：雄ノックアウト（−／−）は野生型同腹子と比較して、減少した小柱骨容量、数および結合密度を示すが、野生型マウスは履歴平均よりも高かった。

（ｄ）表現型分析：代謝−血液化学／グルコース耐性
代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は血中グルコース測定を含む。ＣＯＢＡＳＩｎｔｅｇｒａ４００（ｍｆｒ：Ｒｏｃｈｅ）を、マウスについて血液化学テストを行うために用いた。代謝の領域においては、標的は糖尿病の治療のために同定することができる。血液化学表現型分析は、インスリン感受性およびグルコース代謝の変化を測定するためのグルコース耐性を含む。異常なグルコース耐性テスト結果は、限定されるものではないが、以下の障害または疾患：糖尿病１型、または２型、症候群Ｘ、種々の心血管病および／または肥満を示すことができる。

手法：２匹の野生型および４匹のホモ接合体マウスのコホールトをこのアッセイで用いた。グルコース耐性テストは、哺乳動物において損なわれたグルコースホメオスタシスを規定するための標準である。グルコース耐性テストは、Ｌｉｆｅｓｅａｎグルコメーターを用いて行った。動物に、２０％溶液として送達されるＤ−グルコース２ｇ／ｋｇで腹腔内注射し、注射から０、３０、６０および９０分後に血中グルコースレベルを測定した。分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
結果：
グルコース耐性テスト：テストした突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子と比較した場合、増強されたグルコース耐性を呈した。
分析されたｗｔ／ｈｅｔ／ｈｏｍ：４／４／８
まとめ：
これらの実験において、突然変異体（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、テストした全ての３つの間隔において、正常な絶食グルコースの存在下で増大したまたは増強されたグルコース耐性を示した。加えて、高インスリン血症は（−／−）マウスでは明らかでなかった。かくして、ノックアウトマウスは、増大したインスリン感受性と共に、損なわれたグルコースホメオスタシスと反対の表現型パターンを呈し、ＰＲＯ１１２４ポリペプチドまたはそのコーディング遺伝子に対するそのようなアンタゴニストは、損なわれたグルコースホメオスタシスおよび／または種々の心血管病の治療で有用であろう。
４１．３９ＤＮＡ５９６１３−１４１７（ＵＮＱ５１１）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ５９６１３−１４１７と命名される）ＰＲＯ１０２６ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ５１１）を破壊した。これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＢＣ０２６８２８またはアクセション：ＢＣ０２６８２８ＮＩＤ：ＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２２１０４１５Ｆ１３遺伝子、クローンＭＧＣと同様な、２００７２４２４ＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ：２５８９５ＩＭＡＧＥ：４２１８３３３；タンパク質参照：Ｑ９Ｄ７５０またはアクセション：Ｑ９Ｄ７Ｓ０ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。２２１０４１５Ｆ１３ＲＩＫＰＲＯＴＥＩＮ。ＭＯＵＳＥＳＰＴＲＮＲＤＢ；ヒト遺伝子配列参照：ＡＹ３５８４６９またはＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓクローンＤＮＡ５９６１３ホスホリパーゼ阻害剤（ＵＮＱ５１１）；ヒトタンパク質配列は参照：ＡＡＱ８８８３３に対応する。アクセション：ＡＡＱ８８８３３ＮＩＤ：Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ（ヒト）。ホスホリパーゼ阻害剤。

注目するマウス遺伝子はＲＩＫＥＮｃＤＮＡ２２１０４１５Ｆ１３遺伝子、ヒト「クローンＤＮＡ５９６１３ホスホリパーゼ阻害剤（ＵＮＱ５１１）ｍＲＮＡ」のオルソログである。注目する遺伝子は、ホスホリパーゼＡ２阻害剤ドメイン（ＰｆａｍアクセションＰＦ０２９８８）および重複するＣＤ５９抗原ドメイン（ＩｎｔｅｒＰｒｏアクセションＩＰＲ００１５２６）を含有する推定分泌タンパク質をコードする。ホスホリパーゼＡ２阻害剤およびＣＤ５９抗原ドメインを持つタンパク質はハブ蛇（Ｔｒｉｍｅｒｅｓｕｒｕｓｆｌａｖｏｖｉｒｉｄｉｓ）血清中に存在し、ハブ蛇毒ホスホリパーゼＡ２イソ酵素を阻害する（Ｎｏｂｕｈｉｓａｅｔａｌ．，ＥｕｒＪＢｉｏｃｈｅｍ；２４９（３）：８３８−４５（１９９７））。マウスおよびヒトにおけるこのタンパク質の生物学的役割は知られていない。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝０．６７有意性＝０．７１４９０（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２７平均同腹子サイズ＝７
突然変異体のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１および２を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＡＫ００８９４０．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、脾臓、肺および骨格筋を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．３９．１（破壊された：ＤＮＡ５９６１３−１４１７（ＵＮＱ５１１）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒト「クローンＤＮＡ５９６１３ホスホリパーゼ阻害剤（ＵＮＱ５１１）ｍＲＮＡ」のオルソログをコートする遺伝子突然変異の結果、骨ミネラル含有量の減少がもたらされた。遺伝子の破壊はサザーンブロットによって確認された。

（ｂ）骨代謝および放射線学表現型分析
骨代謝の領域においては、標的は、関節炎、骨粗鬆症、オステオペニアおよび大理石骨病の治療のために、ならびに骨治癒を促進する標的を同定するためにここでは同定された。
テストは：
・大腿および脊椎での骨ミネラル密度の測定のためのＤＥＸＡ
・腰椎および骨皮質双方についての骨ミネラル密度の非常に高い分解能および非常に高い感度の測定のためのミクロＣＴ
を含むものであった。

結果：
雌（−／−）マウスは減少した骨ミネラル含有量を呈した。これらの結果は雌ノックアウト突然変異体マウスが、骨折に導く骨質量の減少および、恐らくは、脆性によって特徴付けられる骨粗鬆症と同様な、減少した骨ミネラル含有量（喪失）を伴う異常な骨代謝を呈することを示す。かくして、ＰＲＯ１０２６ポリペプチドは骨ホメオスタシスを維持するにおいて有用であり、骨治癒のために、または関節炎または骨粗鬆症の治療のため有用であり、他方、ＰＲＯ１０２６ポリペプチドまたはそのコーディングＤＮＡのアンタゴニストまたは阻害剤は、骨粗鬆症と同様な異常なまたは病理学的骨障害に導くであろう。
４１．４０ＤＮＡ１９３９６３（ＵＮＱ８３４４）遺伝子破壊を含むマウスの創製および分析
これらのノックアウト実験においては、（ＤＮＡ１９３９６３と命名される）ＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子（ＵＮＱ８３４４）を破壊した。
これらの実験についての遺伝子の特別な情報は以下の通りである：突然変異したマウス遺伝子はヌクレオチド参照：ＮＭ＿１８３０３１またはＭｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓエプスタイン−バールウイルス誘導遺伝子２（Ｅｂｉ２）；タンパク質参照：Ｑ７ＴＭＶ７またはアクセション：Ｑ７ＴＭＶ７ＮＩＤ：Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ（マウス）に対応する。仮定タンパク質；ヒト遺伝子配列参照：ＮＭ＿００４９５１またはアクセション：ＮＭ＿００４９５１ＮＩＤ：１４５７７９１５ＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓＨｏｍｏｓａｐｉｅｎｓエプスタイン−バールウイルス誘導遺伝子２（リンパ球−特異的Ｇプロテイン−カップルド受容体）（ＥＢＩ２）；ヒトタンパク質配列は参照：Ｐ３２２４９またはＥＢＩ２ＨＵＭＡＮＰ３２２４９ＥＢＶ−ＩＮＤＵＣＥＤＧＰＲＯＴＥＩＮ−ＣＯＵＰＬＥＤＲＥＣＥＰＴＯＲに対応する。

注目するマウス遺伝子はＥｂｉ２（エブスタイン−バールウイルス誘導遺伝子２）、ヒトＥＢＩ２（エプスタイン−バールウイルス誘導遺伝子２［リンパ球−特異的Ｇプロテイン−カップルド受容体］）のオルソログである。

ＥＢＩ２は、エプスタイン−バールウイルス感染に対する応答においてＢリンパ球で発現されるロドプシンファミリーのＧプロテイン−カップルド受容体である。ＥＢＩ２の発現は前骨髄球細胞系、単球細胞系、アメリカヤマゴボウ、マイトジェン−刺激Ｂ細胞、脾臓、扁桃、末梢血液単核細胞および肺でも検出される。この受容体についてのリガンドおよび下流シグナリング経路は知られておらず、しかしながら、ＥＢＩ２はＦ２Ｒ（凝固因子ＩＩ［トロンビン］受容体）に対して構造的に最も同様である（Ｂｉｒｋｅｎｂａｃｈｅｔａｌ．，ＪＶｉｒｏｌ；６７（４）：２２０９−２０（１９９３））。ＥＢＩ２は細胞移動に関与し得る（Ｃａｈｉｒ−ＭｃＦａｒｌａｎｄｅｔａｌ．，ＪＶｉｒｏｌ；７８（８）：４１０８−１９（２００４））。

Ｃｈｉ−Ｓｑ．＝３．３７有意性＝０．１８５５９（ｈｏｍ／ｎ）＝０．２０平均同腹子サイズ＝８
突然変異のタイプ：相同組換え（標準）
コーディングエクソン１を標的化した（ＮＣＢＩアクセションＡＫ０８７９５１．１）。
野生型発現パネル：標的遺伝子の発現は、胚性幹（ＥＳ）細胞において、および骨格筋および骨を除いて、ＲＴ−ＰＣＲによってテストされた全ての１３の成人組織試料において検出された。
ＱＣ発現：標的遺伝子の破壊はサザーンハイブリダイゼーション分析によって確認した。
４１．４０．１（破壊された：ＤＮＡ１９３９６３（ＵＮＱ８３４４）についての）表現型分析
（ａ）総じての表現型まとめ：
ヒトエプスタイン−バールウイルス誘導遺伝子２（リンパ球−特異的Ｇプロテイン−カップルド受容体）（ＥＢＩ２）のオルソログをコートする遺伝子の突然変異の結果、異常な骨−関連測定がもたらされた。遺伝子破壊はサザーンブロットによって確認された。

結果：
ＤＥＸＡ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した骨ミネラル密度を呈した。
ミクロ−ＣＴ：雄（−／−）マウスは、それらの性が一致した（＋／＋）同腹子および履歴平均と比較した場合、減少した小柱骨容量（１標準偏差）、数および結合密度を呈した。

まとめ：
ＤＥＸＡによって分析された雄（−／−）マウスは、それらの（＋／＋）同腹子と比較した場合、減少した骨測定を呈し、異常な骨障害を示唆する。これらの観察は、ＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子に欠陥がある雄突然変異体マウスが、異常な骨測定に関連する代謝障害に導くことを示唆する。かくして、ＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたはそのアゴニストは、骨−関連障害の治療または予防で有用であろう。
実施例４２：ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０のハイブリダイゼーションプローブとしての使用
以下の方法は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列のハイブリダイゼージョンプローブとしての使用を記載する。

本明細書中で開示される全長または成熟ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのコーディング配列を含むＤＮＡは、ヒト組織ｃＤＮＡライブラリーまたはヒト組織ゲノムライブラリーにおいて（ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの天然に生じる改変体をコードするもののような）相同ＤＮＡについてスクリーニングするためのプローブとして使用される。

ハイブリダイゼーション、およびいずれかのライブラリーＤＮＡを含有するフィルターの洗浄は以下の高ストリンジェンシー条件下で行う。放射性標識ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０−由来プローブのフィルターへのハイブリダイゼーションは、５０％ホルムアミド、５× ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ、０．１％ピロリン酸ナトリウム、５０ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ６．８、２×デンハルト溶液、および１０％デキストラン硫酸の溶液中で４２℃にて２０時間行う。フィルターの洗浄は、０．１× ＳＳＣおよび０．１％ＳＤＳの水性溶液中で４２℃にて行う。

次いで、全長天然配列ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡに対して所望の配列同一性を有するＤＮＡは、当該分野で公知の標準的技術を用いて同定することができる。
実施例４３：Ｅ．ｃｏｌｉにおけるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の発現
本実施例は、Ｅ．ｃｏｌｉにおける組換え発現による、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの非グリコシル化形態の調製を示す。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を、まず、選択されたＰＣＲプライマーを用いて増幅する。プライマーは、選択された発現ベクター上の制限酵素部位に対応する制限酵素部位を含有すべきである。種々の発現ベクターを使用することができる。適当なベクターの例は、アンピシリンおよびテトラサイクリン耐性についての遺伝子を含有するｐＢＲ３２２（Ｅ．ｃｏｌｉ由来；Ｂｏｌｉｖａｒｅｔａｌ．，Ｇｅｎｅ，２：９５（１９７７））である。該ベクターを制限酵素で消化し、リン酸化する。次いで、ＰＣＲ増幅配列をベクターに連結する。ベクターは、好ましくは、抗生物質耐性遺伝子、ｔｒｐプロモーター、ポリｈｉｓリーダー（最初の６つのＳＴＩＩコドン、ポリｈｉｓ配列、およびエンテロキナーゼ切断部位を含む）、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０コーディング領域、ラムダ転写ターミネーター、およびａｒｇＵ遺伝子をコートする配を含む。

次いで、連結混合物を用いて、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，ｓｕｐｒａに記載された方法を用い、選択されたＥ．ｃｏｌｉ株を形質転換する。形質転換体を、ＬＢプレート上で増殖するそれらの能力によって同定し、次いで、抗生物質耐性コロニーを選択する。プラスミドＤＮＡを単離し、制限分析およびＤＮＡ配列決定によって確認する。

選択されたクローンは、抗生物質を補足したＬＢブロスのような液体培養基中で一晩増殖させることができる。引き続いて、一晩培養を用いて、より大きな規模の培養を接種することができる。次いで、細胞を所望の光学密度まで増殖させ、その間に、発現プロモーターのスイッチを入れる。

細胞をさらに数時間培養した後、細胞を遠心によって収穫することができる。遠心によって得られた細胞ペレットを当該分野で公知の種々の剤を用いて可溶化することができ、次いで、可溶化されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０タンパク質を、タンパク質の密接な結合を可能とする条件下で金属キレート化カラムを用いて精製することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０は、以下の手法を用い、ポリ−Ｈｉｓタグ化形態でＥ．ｃｏｌｉにおいて発現させることができる。まず、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードするＤＮＡを、選択されたＰＣＲプライマーを用いて増幅する。プライマーは選択された発現ベクター上の制限酵素部位に対応する制限酵素部位、および効果的かつ信頼性がある翻訳開始、金属キレート化カラムでの迅速な精製、およびエンテロキナーゼでのタンパク質分解除去を供する他の有用な配列を含有するであろう。次いで、ＰＣＲ−増幅ポリ−Ｈｉｓタグ化配列を発現ベクターに連結し、これを用いて株５２（Ｗ３１１０ｆｕｈＡ（ｔｏｎＡ）ｌｏｎｇａｌＥｒｐｏＨｔｓ（ｈｔｐＲｔｓ）ｃｌｐＰ（ｌａｃＩｑ）に基づいてＥ．ｃｏｌｉ宿主を形質転換する。形質転換体を、まず、３ないし５のＯ．Ｄ．６００に到達するまで、振盪しつつ、３０℃にて、５０ｍｇ／ｍｌカルベニシリンを含有するＬＢ中で増殖させる。次いで、培養を、（３．５７ｇ（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４、０．７１ｇのクエン酸ナトリウム・２Ｈ２Ｏ、１．０７ｇのＫＣｌ、５．３６ｇのＤｉｆｃｏ酵母エキス、５００ｍＬ水中の５．３６ｇのＳｈｅｆｆｉｅｌｄヒカーゼＳＦ、並びに１１０ｍＭＭＰＯＳ、ｐＨ７．３、０．５５％（ｗ／ｖ）グルコースおよび７ｍＭＭｇＳＯ_４）を混合することによって調製されたＣＲＡＰ培地に５０ないし１００倍希釈し、振盪しつつ、３０℃にてほぼ２０ないし３０時間増殖させる。試料を取り出して、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析によって発現を確認し、バルク培養を遠心して、細胞をペレット化する。精製および再折畳みまで細胞ペレットを凍結する。

０．５ないし１Ｌ発酵（６ないし１０ｇペレット）からのＥ．ｃｏｌｉペーストを、７Ｍグアニジン、２０ｍＭトリス、ｐＨ８緩衝液中に１０容量（ｗ／ｖ）にて再懸濁させる。固体亜硫酸ナトリウムおよびテトラチオン酸ナトリウムを、各々、０．１Ｍおよび０．０２Ｍの最終濃度まで加え、溶液を４℃にて一晩攪拌する。この工程の結果、スルフィトール化によってブロックされた全てのシステイン残基を持つ変性されたタンパク質がもたらされる。この溶液をＢｅｃｋｍａｎ超遠心機で４０，０００ｒｐｍで３０分間遠心する。上澄みを３ないし５容量の金属キレートカラム緩衝液（６Ｍグアニジン、２０ｍＭトリス、ｐＨ７．４）で希釈し、０．２２ミクロンフィルターを通して濾過して、清澄化する。清澄化された抽出物を金属キレートカラム緩衝液中で平衡化した５ｍｌのＱｉａｇｅｎＮｉ−ＮＴＡ金属キレートカラムに負荷する。カラムを、５０ｍＭイミダゾール（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ，Ｕｔｒｏｌグレード）を含有するさらなる緩衝液、ｐＨ７．４で洗浄する。タンパク質を、２５０ｍＭイミダゾールを含有緩衝液で溶出する。所望のタンパク質を含有する画分をプールし、４℃にて貯蔵する。そのアミノ酸配列に基づいて計算された消光係数を用い、２８０ｎｍにおけるその吸光度によってタンパク質濃度を見積もる。

タンパク質は、２０ｍＭトリス、ｐＨ８．６、０．３ＭＮａＣｌ、２．５Ｍ尿素、５ｍＭシステイン、２０ｍＭグリシンおよび１ｍＭＥＤＴＡよりなる新たに調製された再折畳み緩衝液にゆっくりと試料を希釈することによって再度折り畳む。再折畳み容量は、最終タンパク質濃度が５０ないし１００マイクログラム／ｍｌの間となるように選択される。再折畳み溶液を４℃にて１２ないし３６時間温和に攪拌する。ＴＦＡを０．４％の最終濃度まで加えることによって（ほぼ３のｐＨ）、再折畳み反応をクエンチする。タンパク質のさらなる精製前に溶液を０．２２ミクロンフィルターに通して濾過し、アセトニトリルを２ないし１０％最終濃度まで加える。再度折り畳まれたタンパク質を、０．１％ＴＦＡの移動緩衝液を用い、ＰｏｒｏｓＲ１／Ｈ逆相カラムでのクロマトグラフィーに付し、１０ないし８０％のアセトニトリルのグラジエントで溶出する。Ａ２８０吸光度を持つ画分のアリコットを、ＳＤＳポリアクリルアミドゲルで分析し、均一な再度折り畳まれたタンパク質を含有する画分をプールする。一般に、ほとんどのタンパク質の適切に再度折り畳まれた種はアセトニトリルの最低濃度で溶出される。というのは、それらの種は、逆相樹脂との相互作用から保護されたそれらの疎水性内部が最もコンパクトだからである。凝集した種は、通常、より高いアセトニトリル濃度で溶出する。所望の形態からタンパク質の誤って折り畳まれた形態を分解するのに加えて、逆相工程は試料からエンドトキシンも除去する。

所望の折り畳まれたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを含有する画分をプールし、溶液に向けられた窒素の温和な気流を用い、アセトニトリルを除去する。透析によって、または処方緩衝液中で平衡化されたＧ２５Ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）樹脂を用いるゲル濾過によってタンパク質を、０．１４Ｍ塩化ナトリウムおよび４％マンニトールを含む２０ｍＭＨｅｐｅｓ、ｐＨ６．８に処方し、滅菌濾過する。
実施例４４：哺乳動物細胞におけるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の発現
本発明実施例は、哺乳動物細胞における組換え発現による、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの潜在的にグリコシル化された形態の調製を説明する。

ベクター、ｐＲＫ５（１９８９年３月１５日に公開されたＥＰ３０７，２４７参照）を発現ベクターとして使用する。所望により、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ＤＮＡを選択された制限酵素でｐＲＫ５に連結して、Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，ｓｕｐｒａに記載されたようなリガンド方法を用いるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ＤＮＡの挿入を可能とする。得られたベクターはｐＲＫ５−ＰＲＯ１９４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２８４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３３１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９３７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０１４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４１０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７６０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７８７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１８６８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３２６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３３２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４００、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６００３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６０９４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６２４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０２７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１６０９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９６４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２１３４０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９２１６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ８５１４３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０２６もしくはｐＲＫ５−２３３７０と呼ばれる。

選択された宿主細胞は２９３細胞であってよい。ヒト２９３細胞（ＡＴＣＣＣＣＬ１５７３）を、胎児子牛血清および、所望により、栄養成分および／または抗生物質を補足したＤＭＥＭのような培地中で組織培養プレートにて密集するまで増殖させる。約１０μｇのｐＲＫ５−ＰＲＯ１９４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２８４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３３１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９３７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０１４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４１０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７６０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７８７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１８６８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３２６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３３２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４００、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６００３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６０９４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６２４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０２７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１６０９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９６４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２１３４０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９２１６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ８５１４３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０２６もしくはｐＲＫ５−２３３７０ＤＮＡを、ＶＡＲＮＡ遺伝子［Ｔｈｉｍｍａｐｐａｙａｅｔａｌ．，Ｃｅｌｌ，３１：５４３（１９８２）］をコードする約１μｇのＤＮＡと混合し、１ｍＭトリス−ＨＣｌ、０．１ｍＭＥＤＴＡ、０．２２７ＭＣａＣｌ_２の５００μｌに溶解させる。この混合物に、５０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３５）、２８０ｍＭＮａＣｌ、１．５ｍＭＮａＰＯ_４の５００μｌを滴下し、沈殿を２５℃にて１０分間形成させる。沈殿を懸濁させ、２９３細胞に加え、３７℃にて約４時間沈降させる。培養基を吸引除去し、ＰＢＳ中の２ｍｌの２０％グリセロールを３０秒間で加える。次いで、２９３細胞を無血清培地で洗浄し、新鮮な培地を加え、細胞を約５日間インキュベートする。

トランスフェクションからほぼ２４時間後に、培養基を除去し、培養基（単独）、または２００μＣｉ／ｍｌ ^３５Ｓ−システインおよび２００μＣｉ／ｍｌ ^３５Ｓ−メチオニンを含有する培養基と交換した。１２時間のインキュベーションの後、条件培地を集め、スピンフィルターで濃縮し、１５％ＳＤＳゲルに負荷する。処理されたゲルを乾燥し、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの存在を明らかにするために選択された時間の間、フィルムに曝露する。トランスフェクトされた細胞を含有する培養はさらに（無血清倍地中での）インキュベーションを受けることができ、該培地を選択されたバイオアッセイでテストする。

別の技術において、Ｓｏｍｐａｒｙｒａｃｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，１２：７５７５（１９８１）によって記載されたデキストラン硫酸方法を用い、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を２９３細胞に一過的に導入することができる。２９３細胞をスピナーフラスコ中で最大密度まで増殖させ、７００μｇのｐＲＫ５−ＰＲＯ１９４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２８４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３３１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９３７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０１４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４１０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７６０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７８７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１８６８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３２６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３３２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３４６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４００、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６００３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６０９４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６２４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０２７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１６０９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９６４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２１３４０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９２１６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ８５１４３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０２６もしくはｐＲＫ５−ＰＲＯ２３３７０ＤＮＡを加える。細胞を、まず、遠心によってスピナーフラスコから濃縮し、ＰＢＳで洗浄する。ＤＮＡ−デキストラン沈殿を４時間細胞ペレット上でインキュベートする。細胞を２０％グリセロールで９０秒間処理し、組織培養基で洗浄し、組織培養基、５μｇ／ｍｌウシインスリンおよび０．１μｇ／ｍｌのウシトランスフェリンを含有するスピナーフラスコに再度導入する。約４日後に、条件培地を遠心し、濾過して、細胞およびデブリスを除去する。次いで、発現されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を含有する試料を濃縮し、透析および／またはカラムクロマトグラフィーのようないずれかの選択された方法によって精製することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をＣＨＯ細胞中で発現させることができる。ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２８４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３３１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ３５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５３３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ５４１、ｐＲＫ５−ＰＲＯ７２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９３７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０１４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３２５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１３８２、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１４１０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１５５６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７６０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１７８７、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１８６８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３２６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４３３２、Ｐｒｋ５−ＰＲＯ４３４６、ｐＲＫ５−ＰＲＯ４４００、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６００３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６０９４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ６２４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９８２８、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０２７４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１６０９０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１９６４４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ２１３４０、ｐＲＫ５−ＰＲＯ９２１６５、ｐＲＫ５−ＰＲＯ８５１４３、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１１２４、ｐＲＫ５−ＰＲＯ１０２６もしくはｐＲＫ５−ＰＲＯ２３３７０は、ＣａＰＯ_４またはＤＥＡＥ−デキストランのような公知の試薬を用い、ＣＨＯ細胞にトランスフェクトすることができる。前記したように、細胞培養をインキュベートし、培養基（単独）、または培地を、^３５Ｓ−メチオニンのような放射性標識を含有する培地で培地を交換することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの存在を判断した後、培養基を無血清培地で交換することができる。好ましくは、培養を約６日間インキュベートし、次いで、条件培地を収穫する。次いで、発現されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を含有する培地を濃縮し、いずれかの選択された方法によって精製することができる。

エピトープ−タグ化ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を宿主ＣＨＯ細胞中で発現させることもできる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をｐＲＫ５ベクターからサブクローンすることができる。サブクローンインサートはＰＣＲを受けて、ポリ−ｈｉｓタグのような選択されたエピトープタグと共にバキュロウイルス発現ベクターにイン・フレーム融合させることができる。次いで、ポリ−ｈｉｓタグ化ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０インサートを、安定なクローンの選択のために、ＤＨＦＲのような選択マーカーを含有するＳＶ４０駆動ベクターにサブクローンすることができる。最後に、ＣＨＯ細胞をＳＶ４０駆動ベクターで（前記したように）トランスフェクトすることができる。標識を前記したように行って、発現を確認することができる。次いで、発現されたポリ−Ｈｉｓタグ化ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を含有する培養基を濃縮し、Ｎｉ^２＋−キレートアフィニティークロマトグラフィーのようないずれかの選択された方法によって精製することができる。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を、一過性発現手法によってＣＨＯおよび／またはＣＯＳ細胞において、またはもう１つの安定な発現手法によってＣＨＯ細胞において発現させることもできる。

ＣＨＯ細胞における安定な発現は以下の手法を用いて行われる。タンパク質はＩｇＧ構築体（イムノアドヘシン）として発現され、そこでは、各タンパク質の可溶性形態（例えば、細胞外ドメイン）についてのコーディング配列が、ヒンジ、ＣＨ２およびＣＨ２ドメインを含有するＩｇＧ１定常領域配列に融合され、および／またはポリ−Ｈｉｓタグ化形態である。

ＰＣＲ増幅の後、各ＤＮＡを、Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，Ｕｎｉｔ３．１６，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ（１９９７）に記載された標準的技術を用い、ＣＨＯ発現ベクターにサブクローンする。ＣＨＯ発現ベクターは、注目するＤＮＡの５’および３’側に適合する制限部位を有して、ｃＤＮＡの便宜なシャトリングを可能とするように構築される。ＣＨＯ細胞における発現を用いるベクターはＬｕｃａｓｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．２４：９（１７７４−１７７９（１９９６））に記載されている通りであり、ＳＶ４０初期プロモーター／エンハンサーを用いて、注目するｃＤＮＡおよびジヒドロフォレートレダクターゼ（ＤＨＦＲ）の発現を駆動する。ＤＨＦＲ発現は、トランスフェクションに続いてのプラスミドの安定な維持のための選択を可能とする。

１２マイクログラムの所望のプラスミドＤＮＡを、商業的に入手可能なトランスフェクション試薬Ｓｕｐｅｒｆｅｃｔ（登録商標）（Ｑｉａｇｅｎ）、Ｄｏｓｐｅｒ（登録商標）またはＦｕｇｅｎｅ（登録商標）（ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ）を用い、ほぼ１０００万ＣＨＯ細胞に導入する。細胞をＬｕｃａｓｅｔａｌ．，ｓｕｐｒａに記載されたように増殖させる。ほぼ３×１０^７細胞を、後に記載するさらなる増殖および生産のためにアンプル中に凍結させる。

水浴中にいれることによって、プラスミドＤＮＡを含有するアンプルを解凍し、ボルテッキシングによって混合する。内容物を、１０ｍＬの培地を含有する遠心管にピペットでいれ、１０００ｒｐｍにおいて５分間遠心する。上清を吸引し、細胞を１０ｍＬの選択培地（５％の０．２μｍ透析濾過胎児ウシ血清を含む０．２μｍ濾過ＰＳ２０）に再懸濁させる。次いで、細胞を、９０ｍＬの選択培地を含有する１００ｍＬスピナーにアリコットする。１ないし２日後に、細胞を、１５０ｍＬ選択増殖培地を充填した２５０ｍＬスピナーに移し、３７℃にてインキュベートする。さらに２ないし３日後に、２５０ｍＬ、５００ｍＬおよび２０００ｍＬのスピナーに３×１０^５細胞／ｍＬを撒く。細胞培地を、遠心および生産培地中への再懸濁によって新鮮な培地と交換する。いずれの適当なＣＨＯ培地を使用することもできるが、１９９２年６月１６日に発行された米国特許第５，１２２，４６９号に記載された生産培地を現実には用いることができる。３Ｌ生産スピナーに１．２×１０^６細胞／ｍＬを撒く。０日めに、細胞数ｐＨを測定する。１日めに、スピナーをサンプリングし、濾過空気の散布を開始する。２日めに、スピナーをサンプリングし、温度を３３℃に移し、３０ｍＬの５００ｇ／Ｌグルコースおよび０．６ｍＬの１０％発泡防止剤（例えば、３５％ポリジメチルシロキサンエマルジョン、ＤｏｗＣｏｒｎｉｎｇ３６５医療グレードエマルジョン）を取る。生産を通じて、必要であれば、ｐＨを調整して、それを７．２程度に維持する。１０日後に、または生存率が７０％を下回るまで低下するまで、細胞培養を遠心、および０．２２μｍフィルターを通しての濾過によって収穫する。濾液を４℃にて保存するか、または精製のために直ちにカラムに負荷する。

ポリ−Ｈｉｓタグ化構築体では、タンパク質をＮｉ−ＮＴＡカラム（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて、精製する。イミダゾールを条件培地に５ｍＭの濃度まで加える。条件培地を、０．３ＭＮａＣｌおよび５ｍＭイミダゾールを含有する２０ｍＭＨｅｐｅｓ，ｐＨ７．４、緩衝液中に平衡化させた６ｍｌのＮｉ−ＮＴＡカラムに４℃にて４ないし５ｍｌ／分の流速でポンプで送液する。負荷の後、カラムをさらなる平衡緩衝液で洗浄し、タンパク質を、０．２５Ｍイミダゾールを含有する平衡緩衝液で溶出させる。かなり精製されたタンパク質を、引き続いて、２５ｍｌのＧ２５Ｓｕｐｅｒｆｉｎｅ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）カラムにて、１０ｍＭＨｅｐｅｓ、０．１４ＭＮａＣｌおよび４％マンニトールを含有する貯蔵緩衝液、Ｐｈ６．８中に脱塩し、−８０℃で貯蔵する。

イムノアドヘシン（Ｆｃ−含有）構築体を以下のようにして条件培地から精製する。条件培地を、２０ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ６．８で平衡化してある５ｍｌのプロテインＡカラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）にポンプで送液する。負荷の後、１００ｍＭクエン酸、ｐＨ３．５での溶出前に、カラムを平衡化緩衝液で十分に洗浄する。溶出したタンパク質を、２７５μＬの１Ｍトリス緩衝液、ｐＨ９を含有するチューブへの１ｍｌの画分を集めることによって直ちに中和する。かなり精製されたタンパク質を、引き続いて、ポリ−Ｈｉｓタグ化タンパク質について前記したように貯蔵緩衝液中に脱塩する。均一性はＳＤＳポリアクリルアミドゲルによって、およびエドマン分解によるＮ−末端アミノ酸配列決定によって評価する。
実施例４５：酵母におけるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の発現
以下の方法は酵母におけるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の組換え発現を記載する。

まず、ＡＤＨ２／ＧＨＰＤＨプロモーターから、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の細胞内生産または分泌のために酵母発現ベクターを構築する。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０およびプロモーターをコードするＤＮＡを、選択されたプラスミド中の適当な制限酵素部位に挿入して、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の細胞内発現を指令する。分泌のためには、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードするＤＮＡを、ＡＤＨ２／ＧＡＰＤＨプロモーター、天然ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０シグナルペプチドまたは他の哺乳動物シグナルペプチド、または例えば、酵母アルファ−因子またはインベルターゼ分泌シグナル／リーダー配列、およびＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の発現のための（もし必要であれば）リンカ配列をコードするＤＮＡと共に、選択されたプラスミドにクローン化することができる。

次いで、酵母株ＡＢ１１０のような酵母細胞を、前記した発現プラスミドで形質転換し、選択された発酵培地中で培養することができる。形質転換された酵母上清は、１０％トリクロロ酢酸での沈殿、およびＳＤＳ−ＰＡＧＥによる分離、続いての、クーマシーブルー染色でのゲルの染色によって分析することができる。

ひき続いて、組換えＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を単離し、遠心によって発酵培地から酵母細胞を取り出し、次いで、選択されたカートリッジフィルターを用いて培地を濃縮することによって精製することができる。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を含有する濃縮物を、選択されたカラムクロマトグラフィー樹脂を用いてさらに精製することができる。
実施例４６：バキュロウイルス−感染昆虫細胞におけるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の発現
以下の方法は、バキュロウイルス−感染昆虫細胞におけるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の組換え発現を記載する。

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードする配列を、バキュロウイルス発現ベクター内に含まれるエピトープタグの上流に融合させる。そのようなエピトープタグはポリ−ｈｉｓタグおよび（ＩｇＧのＦｃ領域のような）免疫グロブリンタグを含む。ｐＶＬ１３９３（Ｎｏｖａｇｅｎ）のような商業的に入手可能なプラスミドに由来するプラスミドを含めた、種々のプラスミドを使用することができる。簡単に述べれば、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０をコードする配列、または膜貫通タンパク質の細胞外ドメインをコードする配列、または成熟タンパク質をコードする配列のようなＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０のコーディング配列の所望の部分を、もし該タンパク質が細胞外であれば、５’および３’領域に相補的なプライマーでのＰＣＲによって増幅される。５’プライマーはフランキング（選択された）制限酵素部位を取り込むことができる。次いで、産物をそれらの選択された制限酵素で消化し、発現ベクターにサブクローンする。

組換えバキュロウイルスは、（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬから商業的に入手可能な）リポフェクチンを用い、前記プラスミドおよびＢａｃｕｌｏＧｏｌｄ（商標）ウイルスＤＮＡ（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）をＳｐｏｄｏｐｔｅｒａｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（「Ｓｆ９」）細胞（ＡＴＣＣＣＲＬ１７１１）に共トランスフェクトすることによって作られる。２８℃における４ないし５日間のインキュベーションの後、放出されたウイルスを収穫し、さらなる増幅のために用いる。ウイルス感染およびタンパク質発現は、Ｏ’Ｒｅｉｌｌｅｙｅｔａｌ．，Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｖｅｃｔｏｒｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，Ｏｘｆｏｒｄ：ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ（１９９４）によって記載されているように行われる。

次いで、発現されたポリ−ｈｉｓタグ化ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を、例えば、以下のようにＮｉ^２＋−キレートアフィニティークロマトグラフィーによって精製することができる。Ｒｕｐｅｒｔｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：１７５−１７９（１９９３）によって記載されているように、抽出物を組換えウイルス−感染Ｓｆ９細胞から調製する。簡単に述べると、Ｓｆ９細胞を洗浄し、音波処理緩衝液（２５ｍＬＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．９；１２．５ｍＭＭｇＣｌ_２；０．１ｍＭＥＤＴＡ；１０％グリセロール；０．１％ＮＰ−４０；０．４ＭＫＣｌ）に再懸濁し、氷上で２０秒間２回音波処理する。音波処理物を遠心によって清澄化し、上清を負荷緩衝液（５０ｍＭホスフェート３００ｍＭＮａＣｌ、１０％グリセロール、ｐＨ７．８）に５０倍希釈し、０．４５μｍフィルターを通して濾過する。Ｎｉ^２＋−ＮＴＡアガロースカラム（Ｑｉａｇｅｎから商業的に入手可能）を５ｍＬのベッド容量で調製し、２５ｍＬの水で洗浄し、２５ｍＬの負荷緩衝液で平衡化する。濾過された細胞抽出物を、１分当たり０．５ｍＬでカラムに負荷する。カラムを負荷緩衝液でベースラインＡ_２８０まで洗浄し、その時点で画分収集を開始する。次いで、カラムを２次洗浄緩衝液（５０ｍＭホスフェート；３００ｍＭＮａＣｌ、１０％グリセロール、ｐＨ６．０）で洗浄し、非特異的に結合したタンパク質を溶出させる。再度Ａ_２８０ベースラインに到達した後、カラムに、２次洗浄緩衝液中の０ないし５００ｍＭイミダゾールグラジエントを生じさせる。１ｍＬ画分を集め、ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび銀染色またはアルカリ性ホスファターゼにコンジュゲートしたＮｉ^２＋−ＮＴＡ（Ｑｉａｇｅｎ）でのウエスタンブロットによって分析する。溶出されたＨｉｓ_１０−タグ化ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０を含有する画分をプールし、負荷緩衝液に対して透析する。

別法として、ＩｇＧタグ化（またはＦｃタグ化）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の精製は、例えば、プロテインＡまたはプロテインＧカラムクロマトグラフィーを含めた公知のクロマトグラフィー技術を用いて行うことができる。
実施例４７：ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）を用いる組織発現プロファイリング
遺伝子発現情報を含む所有されたデータベース（ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標），ＧｅｎｅＬｏｇｉｃＩｎｃ．，Ｇａｉｓｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）を、その発現が他の腫瘍および／または正常な組織と比較して、注目する特別な腫瘍組織において有意にアプレギュレートされるポリペプチド（およびそれらのコーディング核酸）を同定する試みで分析した。具体的には、ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）データベースの分析は、ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）データベース、または所有されたＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）データベースで用いるためのＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．で書かれ開発された所有されたソフトウェアで用いるための、ＧｅｎｅＬｏｇｉｃＩｎｃ．，Ｇｉｓｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤを通じて入手可能ないずれかのソフトウェアを用いて行った。分析中での陽性ヒトの率は、例えば、組織特異性、腫瘍特異性、および正常な必須のおよび／または正常な増殖している組織での発現レベルを含めたいくつかの基準に基づく。以下に、ＧｅｎｅＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）データベースの分析から判断してその組織発現プロフィールが、他の腫瘍および／または正常な組織と比較して、特異的腫瘍または複数腫瘍での高い組織発現および発現の有意なアップレギュレーション、および正常な必須のおよび／または正常な増殖している組織での所望により比較的低い発現を証明する分子のリストを掲げる。これらの発現プロファイリングは、その結果が実施例４１に開示されたいくつかのＵＮＱ遺伝子で行った。
実施例４８：癌性腫瘍においてＵＮＱ遺伝子のアップレギュレーションを検出するためのマイクロアレイ分析
しばしば、数千の遺伝子配列を含有する核酸マイクロアレイは、それらの正常なカウンターパートと比較して病気になった組織で異なって発現される遺伝子を同定するのに有用である。核酸マイクロアレイを用い、テスト、およびテストからの対照ｍＲＮＡ試料および、対照組織試料を逆転写し、標識して、ｃＤＮＡプローブを得る。次いで、ｃＤＮＡプローブを、固体支持体に固定化した核酸のアレイにハイブリダイズさせる。該アレイは、アレイの各メンバーの配列および位置が知られているように構成する。例えば、ある病気状態で発現されることが知られている遺伝子の選択は、固体支持体上でアレイ化することができる。特定のアレイメンバーと標識されたプローブとのハイブリダイゼーションは、プローブが由来する試料がその遺伝子を発現することを示す。テスト（病気組織）試料からのプローブのハイブリダイゼーションシグナルがもし対照（正常組織）試料からのプローブのハイブリダイゼーションシグナルよりも大きければ、病気組織で過剰発現された遺伝子または複数遺伝子を同定する。この結果の意味するところは、病気となった組織における過剰発現されたタンパク質は、病気状態の存在に対する診断マーカーとしてのみならず、病気状態の治療用の治療標的としても有用であるということである。

核酸のハイブリダイゼーションの方法、およびマイクロアレイ技術は当該分野で良く知られている。１つの例においては、ハイブリダイゼーションおよびプローブのための核酸、スライドの具体的調製、およびハイブリダイゼーション条件は、全て、２００１年３月３０日に出願され、ここに引用して援用するＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ０１／１０４８２に詳細に記載されている。

本実施例においては、種々のヒト組織に由来する癌性腫瘍を、特定の癌性腫瘍で過剰発現されるポリペプチドを同定する試みにおいて、異なる組織タイプおよび／または非−癌性ヒト組織からの癌性腫瘍に対してアップレギュレートされる遺伝子発現について調べた。ある実験においては（しばしば同一患者からの）同一組織タイプの癌性ヒト腫瘍組織および非−癌性ヒト腫瘍組織が得られ、ＵＮＱポリペプチド発現について分析した。加えて、種々の異なるヒト腫瘍のいずれかからの癌性ヒト腫瘍組織が得られ、肝臓、腎臓および肺を含めた上皮起源の非−癌性ヒト組織をプールすることによって調製された「普遍的」上皮対照試料と比較した。プールされた組織から単離されたｍＲＮＡは、これらの異なる組織からの発現された遺伝子産物の混合物を表す。プールされた対照試料を用いるマイクロアレイハイブリダイゼーション実験により、２−色分析で直線状プロットが得られた。次いで、２−色分析で得られた線の傾きを用いて、各実験内で（テスト：対照検出）の比率を正規化した。次いで、種々の実験からの正規化された比率を比較し、これを用いて、遺伝子発現のクラスタリングを同定した。かくして、プールされた「普遍的対照」試料は、単純な２−試料比較において効果的な相対的遺伝子発現決定を可能としたのみならず、いくつかの実験にわたってのマルチ−試料比較も可能とした。

本実験においては、本明細書中で記載されたＵＮＱポリペプチド−コーディング核酸配列に由来する核酸プローブをマイクロアレイの作成で用い、種々の腫瘍組織からのＲＮＡをそれに対するハイブリダイゼーションで用いた。本発明の種々のＵＮＱポリペプチドがそれらの正常なカウンターパート組織と比較して、種々のヒト腫瘍組織で有意に過剰発現されることを示すこれらの実験の結果を以下に示す。さらに、以下に示す分子の全ては、「普遍的」上皮対照におけるのと比較してそれらの特異的主要組織で有意に過剰発現される。前記したように、これらのデータは、本発明のＵＮＱポリペプチドが１以上の癌性腫瘍の存在についての診断マーカーとして有用であるのみならず、それらの腫瘍の治療用の治療標的としても働くことを示す。マイクロアレイは、その結果を実施例４１に開示するいくつかのＵＮＧ遺伝子で行った。
実施例４９：ＵＮＱｍＲＮＡ発現の定量的分析
このアッセイにおいては、５’ヌクレアーゼアッセイ（例えば、ＴａｑＭａｎ（登録商標））リアル−タイム定量的ＰＣＲ（例えば、ＡＢＩＰｒｉｚｍ７７００ＳｅｑｕｅｎｃｅＤｅｔｅｃｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍ（登録商標）（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓＤｉｖｉｓｉｏｎ，ＦｏｓｔｅｒＣｉｔｙ，ＣＡ））を用いて、他の癌性腫瘍または正常な非−癌性組織と比較して、癌性腫瘍または複数腫瘍で有意に過剰発現される遺伝子を発見した。５’ヌクレアーゼアッセイ反応は、ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ酵素の５’エキソヌクレアーゼ活性を利用して、リアルタイムで遺伝子発現をモニターする蛍光ＰＣＲ−ベースの技術である。（その配列が遺伝子または注目するＥＳＴ配列に基づく）２つのオリゴヌクレオチドプライマーを用いて、ＰＣＲ反応に典型的なアンプリコンを得る。第三のオリゴヌクレオチドまたはプローブは、２つのＰＣＲプライマーの間に位置するヌクレオチド配列を検出するように設定される。該プローブはＴａｑＤＮＡポリメラーゼ酵素によって延長できず、レポーター蛍光色素およびクエンチャーで蛍光色素標識する。レポーター色素からのいずれかのレーザー−誘導発光は、２つの色素がそれらがプローブ上に存在するように一緒に近くに位置する場合、クエンチング色素によって消光される。ＰＣＲ増幅反応の間に、ＴａｑＤＮＡポリメラーゼ酵素は鋳型−依存的にプローブを切断する。得られたプローブ断片は溶液中で解離し、放出されたレポーター色素からのシグナルは、第二のフルオロフォアの消光効果がない。レポーター色素の１つの分子は各新しい合成された分子につき遊離され、未消光レポーター色素の検出は、データの定量的な解釈のための基礎を提供する。

５’ヌクレアーゼ手法は、ＡＢＩＰｒｉｓｍ７７００ＴＭＳｅｑｕｅｎｃｅＤｅｔｅｃｔｉｏｎのようなリアル−タイム定量的ＰＣＲデバイスで行う。該システムはサーモサイクラー、レーザー、電荷−結合デバイス（ＣＣＤ）カメラおよびコンピューターよりなる。該システムはサーモサイクラーで９６−ウエル様式で試料を増幅する。増幅の間に、レーザー誘導蛍光シグナルを、全ての９６ウエルについてのファイバーオプティックスケーブルを通してリアル−タイムで収集し、ＣＣＤで検出する。該システムは、機器を実行し、およびデータを分析するためのソフトウェアを含む。

該スクリーニングのための出発物質は、種々の異なる癌性組織から単離されたｍＲＮＡであった。ｍＲＮＡは正確に、例えば、蛍光測定により定量される。陰性対照として、ＲＮＡをテストすべき癌性組織と同一の組織タイプの種々の正常な組織から単離した。

５’ヌクレアーゼアッセイデータは、まず、Ｃｔ、または閾値サイクルとして表される。これは、レポーターシグナルが蛍光のバックグラウンドレベルを超えて蓄積されるサイクルと定義される。ΔＣｔ値を、癌ｍＲＮＡ結果を正常なヒトｍＲＮＡ結果と比較した場合、核酸試料中の特定の標的配列の出発コピーの相対的数の定量的測定として用いる。１つのＣｔユニットは１つのＰＣＲサイクルまたは正常に対するほぼ２倍の相対的増加に対応し、２ユニットは４倍の相対的増加に対応し、３ユニットは８倍の相対的増加に対応するなどであるので、２以上の異なる組織の間のｍＲＮＡ発現の相対的増加倍数を定量的に測定することができる。この技術を用い、分子は、（同一および異なる組織ドナー双方からの）それらの正常な非−癌性カウンターパート組織と比較した特定の腫瘍で有意に過剰発現されると同定され、かくして、哺乳動物における癌の診断および治療のための優れたポリペプチド標的を表す。ＵＮＱ遺伝子についての具体的な値は実施例４１に開示する。
実施例５０：イン・サイチュハイブリダイゼーション
イン・サイチュハイブリダイゼーションは、細胞または組織調製物内の核酸配列の検出および突き止めのための強力かつ多様な技術である。それは、例えば、遺伝子発現の部位を同定し、転写の組織分布を分析し、ウイルス感染を同定し、突き止め、特異的ｍＲＮＡ合成の変化を追跡し、および染色体マッピングを助けるのに有用であろう。

イン・サイチュハイブリダイゼーションは、ＰＣＲ−生成^３３Ｐ−標識リボプローブを用い、ＬｕａｎｄＧｉｌｌｅｔｔ，ＣｅｌｌＶｉｓｉｏｎ１：１６９−１７６（１９９４）によるプロトコルの最適化バージョンに従って行った。簡単に述べると、ホルマリン−固定され、パラフィン包埋されたヒト組織を切片化し、脱パラフィン化し、プロテイナーゼＫ（２０Ｇ／ｍＬ）にて３７℃にて１５分間除タンパクし、ＬｕａｎｄＧｉｌｌｅｔｔ，ｓｕｐｒａによって記載されたようにイン・サイチュハイブリダイゼーションのためのさらなる処理を行った。［^３３−Ｐ］ＵＴＰ−標識アンチセンスリボプローブをＰＣＲ産物から生じさせ、５５℃にて一晩ハイブリダイズさせた。スライドをＫｏｄａｋＮＴＢ２核トラックエマルジョンに浸漬し、４週間曝露した。
^３３Ｐ―リボプローブ合成
６．０μｌ（１２５ｍＣｉ）の^３３Ｐ−ＵＴＰ（ＡｍｅｒｓｈａｍＢＦ１００２，ＳＡ＜２０００Ｃｉ／ミリモル）をｓｐｅｅｄｖａｃ乾燥した。乾燥した^３３Ｐ−ＵＴＰを含有する各チューブに、以下の成分を加えた；
２．０μｌの５×転写緩衝液
１．０μｌのＤＴＴ（１００ｍＭ）
２．０μｌのＮＴＰミックス（２．５ｍＭ：１０μ；１０ｍＭのＧＴＰ，ＣＴＰおよびＡＴＰの各々＋１０μｌのＨ_２Ｏ）
１．０μｌのＵＴＰ（５０μｍ）
１．０μｌのＲｎａｓｉｎ
１．０μｌのＤＮＡ鋳型（１μｇ）
１．０μｌのＨ_２Ｏ
１．０μｌのＲＮＡポリメラーゼ（ＰＣＲ産物用、Ｔ３＝ＡＳ、Ｔ７＝Ｓ、通常）。

該チューブを３７℃にて１時間インキュベートした。１．０μｌのＲＱ１ＤＮａｓｅを加え、続いて、３７℃にて１５分間インキュベートした。９０μｌのＴＥ（１０ｍＭトリスｐＨ７．６／１ｍＭＥＤＴＡｐＨ８．０）を加え、混合物をＤＥ８１紙上にピペットで乗せた。残りの溶液をＭｉｃｒｏｃｏｎ−５０限外濾過ユニットに負荷し、プログラム１０を用いて回転させた（６分）。濾過ユニットを第二のチューブ上に倒立させ、プログラム２を用いて回転させた（３分）。最後の回収回転の後、１００μｌのＴＥを加えた。１μｌの最終産物をＤＥ８１紙上にピペットで乗せ、６ｍｌのＢＩＯＦＬＵＯＲＩＩでカウントした。

プローブをＴＢＥ／尿素ゲルで泳動させた。１ないし３μｌのプローブまたは５μｌのＲＮＡＭｒｋＩＩＩを３μｌの負荷緩衝液に加えた。３分間９５℃加熱ブロックで加熱した後、プローブを直ちに氷に載せた。ゲルのウエルをフラッシュし、試料を負荷し、１８０ないし２５０ボルトで４５分間泳動させた。ゲルをサランラップで包み、−７０℃のフリーザー中の増感スクリーンを備えたＸＡＲフィルムに１時間ないし１晩曝露した。
^３３Ｐ−ハイブリダイゼーション
Ａ．凍結されたセクションの予備処理
スライドをフリーザーから取り出し、アルミニウムトレイに乗せ、室温で５分間解凍した。トレイを５５℃のインキュベーター中に５分間入れて、凝縮を低下させた。スライドをヒュームフード中の氷上の４％パラホルムアルデヒド中で１０分間固定し、室温にて５分間０．５×ＳＳＣ中で洗浄した（２５ｍｌ２０×ＳＳＣ＋９７５ｍｌＳＱＨ_２Ｏ）。０．５μｌ／ｍｌのプロテイナーゼＫ中での３７℃における１０分間の除タンパク（２５０ｍｌの予め温めたＲＮａｓｅ−フリーＲＮＡｓｅ緩衝液中の１２．５μｌの１０ｍｇ／ｍｌストック）後、セクションを０．５×ＳＳＣ中で室温にて１０分間洗浄した。セクション５、各々２分間７０％、９５％、１００％エタノール中で脱水した。

Ｂ．パラフィン−包埋セクションの予備処理
スライドを脱パラフィン化し、ＳＱＨ_２Ｏに入れ、室温にて、毎回５分間、２×ＳＳＣ中で２回濯いだ。セクションを、２０μｇ／ｍｌプロテイナーゼＫ（２５０ｍｌのＲＮａｓｅ−フリーＲＮａｓｅ緩衝液中の５００μｌの１０ｍｇ／ｍｌ；３７℃、１５分間）−ヒト胚、または８×プロテイナーゼＫ（２５０ｍｌのＲｎａｓｅ緩衝液中１００μｌ、３７℃、３０分）−ホルマリン組織中で除タンパクした。０．５×ＳＳＣ中での引き続いての濯ぎ、および脱水を前記したように行った。

Ｃ．プレハイブリダイゼーション
スライドを、Ｂｏｘ緩衝液（４×ＳＳＣ、５０％ホルムアミド）−飽和濾紙でライニングしたプラスチックボックスに入れた。

Ｄ．ハイブリダイゼーション
スライド当たり１．０×１０^６ｃｐｍプローブおよび１．０μｌのｔＲＮＡ（５０ｍｇ／ｍｌストック）を９５℃にて３分間加熱した。スライドを氷で冷却し、４８μｌのハイブリダイゼーション緩衝液をスライド当たり加えた。ボルテッキシングの後、５０μｌの^３３Ｐミックスをスライド上の５０μｌのプレハイブリダイゼーションに加えた。スライドを５５℃にて一晩インキュベートした。

Ｅ．洗浄
洗浄を室温にて２×ＳＳＣ、ＥＤＴＡで２×１０分行い、（４００ｍｌ２０×ＳＳＣ＋１６ｍｌ０．２５ＭＥＤＴＡ、Ｖ_ｆ＝４Ｌ）、続いて３７℃にて３０分間ＲＮａｓｅＡ処理を行った（２５０ｍｌＲｎａｓｅ緩衝液中の５００μｌの１０ｍｇ／ｍｌ＝２０μｇ／ｍｌ）。スライドを２×ＳＳＣ、ＥＤＴＡで２×１０分間室温で洗浄した。ストリンジェンシー洗浄条件は以下の通りであった：５５℃における２時間、０．１×ＳＳＣ、ＥＤＴＡ（２０ｍｌ２０×ＳＳＣ＋１６ｍｌＥＤＴＡ、Ｖ_ｆ＝４Ｌ）。

Ｆ．オリゴヌクレオチド
イン・サイチュ分析は、本明細書中に開示された種々のＤＮＡ配列で行った。これらの分析で使用したオリゴヌクレオチドは、添付の図面に示したように核酸（またはその相補体）に対して相補的であるように得られた。

Ｇ．結果
イン・サイチュ分析は、その結果が実施例４１に開示された本明細書中に開示された種々のＤＮＡ配列で行った。
実施例５１：ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０に結合する抗体の調製
本実施例はＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０に特異的に結合するモノクローナル抗体の調製を説明する。

モノクローナル抗体を生産する技術は当該分野で調べられており、例えば、Ｇｏｄｉｎｇ，ｓｕｐｒａに記載されている。使用することができる免疫原は、精製されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを含有する融合タンパク質、および細胞表面で組換えＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する細胞を含む。免疫原の選択は、過度な実験無くして当業者が行うことができる。

Ｂａｌｂ／ｃのようなマウスを、フロイントの完全アジュバント中に乳化したＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０免疫原で免疫化し、１ないし１００マイクログラムの量で皮下または腹腔内注射する。別法として、免疫原はＭＰＬ−ＴＤＭアジュバント（ＲｉｂｉＩｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｈａｍｉｌｔｏｎ，ＭＴ）に乳化し、動物の後足肉趾に注射する。次いで、免疫化されたマウスに、選択されたアジュバント中に乳化されたさらなる免疫原で１０ないし１２日後にブースター注射する。その後、数週間、マウスにさらなる免疫化注射をブースター注射することもできる。血清試料は、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体を検出するためのＥＬＩＳＡアッセイでのテストのために眼窩後出血によってマウスから周期的に得ることができる。

適当な抗体力価が検出された後、抗体に対して「陽性」である動物に、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０の最終静脈内注射を注射することができる。３ないし４日後にマウスを犠牲にし、脾臓細胞を収穫する。次いで、（３５％ポリエチレングリコールを用い）、ＡＴＣＣ、Ｎｏ．ＣＲＬ１５９７から入手可能なＰ３Ｘ６３ＡｇＵ．１のような選択されたマウス骨髄細胞系に脾臓を融合させる。融合はハイブリドーマー細胞を生じさせ、次いで、これを、ＨＡＴ（ヒポキサンチン、アミノプテリンおよびチミジン）培地を含有する９６ウエル組織培養プレート中で平板培養して、非−融合細胞、ミエローマハイブリッド、および脾臓細胞ハイブリッドの増殖を阻害することができる。

ハイブリドーマー細胞を、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０に対する反応性についてＥＬＩＳＡでスクリーニングする。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０に対する所望のモノクローナル抗体を分泌する「陽性」ハイブリドーマー細胞の決定は、当該分野における技量の範囲内のものである。

陽性ハイブリドーマー細胞を同系間Ｂａｌｂ／ｃマウスに腹腔内注射して、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０モノクローナル抗体を含有する腹水液を生産させることができる。別法として、ハイブリドーマー細胞を組織培養フラスコまたはローラーボトル中で増殖させることができる。腹水液中で生産したモノクローナル抗体の精製は、硫酸アンモニウム沈殿、続いて、ゲル排除クロマトグラフィーを用いて達成することができる。別法として、抗体のプロテインＡまたはプロテインＧへの結合に基づくアフィニティークロマトグラフィーを使用することができる。
実施例５２：特異的抗体を用いるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの精製
天然または組換えＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドはタンパク質精製の分野における種々の標準的な技術によって精製することができる。例えば、ｐｒｏ−ＰＲＯ１９４、ｐｒｏ−ＰＲＯ２２０、ｐｒｏ−ＰＲＯ２４１、ｐｒｏ−ＰＲＯ２８４、ｐｒｏ−ＰＲＯ３３１、ｐｒｏ−ＰＲＯ３５４、ｐｒｏ−ＰＲＯ３５５、ｐｒｏ−ＰＲＯ５３３、ｐｒｏ−ＰＲＯ５４１、ｐｒｏ−ＰＲＯ７２５、ｐｒｏ−ＰＲＯ９３７、ｐｒｏ−ＰＲＯ１０１４、ｐｒｏ−ＰＲＯ１１２０、ｐｒｏ−ＰＲＯ１１８２、ｐｒｏ−ＰＲＯ１３２５、ｐｒｏ−ＰＲＯ１３８２、ｐｒｏ−ＰＲＯ１４１０、ｐｒｏ−ＰＲＯ１５５５、ｐｒｏ−ＰＲＯ１５５６、ｐｒｏ−ＰＲＯ１７６０、ｐｒｏ−ＰＲＯ１７８７、ｐｒｏ−ＰＲＯ１８６８、ｐｒｏ−ＰＲＯ４３２６、ｐｒｏ−ＰＲＯ４３３２、ｐｒｏ−ＰＲＯ４３４６、ｐｒｏ−ＰＲＯ４４００、ｐｒｏ−ＰＲＯ６００３、ｐｒｏ−ＰＲＯ６０９４、ｐｒｏ−ＰＲＯ６２４４、ｐｒｏ−ＰＲＯ９８２０、ｐｒｏ−ＰＲＯ９８２８、ｐｒｏ−ＰＲＯ１０２７４、ｐｒｏ−ＰＲＯ１６０９０、ｐｒｏ−ＰＲＯ１９６４４、ｐｒｏ−ＰＲＯ２１３４０、ｐｒｏ−ＰＲＯ９２１６５、ｐｒｏ−ＰＲＯ８５１４３、ｐｒｏ−ＰＲＯ１１２４、ｐｒｏ−ＰＲＯ１０２６もしくはｐｒｏ−ＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、成熟ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド、またはｐｒｅ−ＰＲＯ１９４、ｐｒｅ−ＰＲＯ２２０、ｐｒｅ−ＰＲＯ２４１、ｐｒｅ−ＰＲＯ２８４、ｐｒｅ−ＰＲＯ３３１、ｐｒｅ−ＰＲＯ３５４、ｐｒｅ−ＰＲＯ３５５、ｐｒｅ−ＰＲＯ５３３、ｐｒｅ−ＰＲＯ５４１、ｐｒｅ−ＰＲＯ７２５、ｐｒｅ−ＰＲＯ９３７、ｐｒｅ−ＰＲＯ１０１４、ｐｒｅ−ＰＲＯ１１２０、ｐｒｅ−ＰＲＯ１１８２、ｐｒｅ−ＰＲＯ１３２５、ｐｒｅ−ＰＲＯ１３８２、ｐｒｅ−ＰＲＯ１４１０、ｐｒｅ−ＰＲＯ１５５５、ｐｒｅ−ＰＲＯ１５５６、ｐｒｅ−ＰＲＯ１７６０、ｐｒｅ−ＰＲＯ１７８７、ｐｒｅ−ＰＲＯ１８６８、ｐｒｅ−ＰＲＯ４３２６、ｐｒｅ−ＰＲＯ４３３２、ｐｒｅ−ＰＲＯ４３４６、ｐｒｅ−ＰＲＯ４４００、ｐｒｅ−ＰＲＯ６００３、ｐｒｅ−ＰＲＯ６０９４、ｐｒｅ−ＰＲＯ６２４４、ｐｒｅ−ＰＲＯ９８２０、ｐｒｅ−ＰＲＯ９８２８、ｐｒｅ−ＰＲＯ１０２７４、ｐｒｅ−ＰＲＯ１６０９０、ｐｒｅ−ＰＲＯ１９６４４、ｐｒｅ−ＰＲＯ２１３４０、ｐｒｅ−ＰＲＯ９２１６５、ｐｒｅ−ＰＲＯ８５１４３、ｐｒｅ−ＰＲＯ１１２４、ｐｒｅ−ＰＲＯ１０２６もしくはｐｒｅ−ＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、注目するＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに対して特異的な抗体を用いる免疫アフィニティークロマトグラフィーによって精製される。一般に、免疫アフィニティーカラムは、抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０ポリペプチド抗体を活性化されたクロマトグラフィー樹脂に共有結合カップリングさせることによって構築される。

ポリクローナル免疫グロブリンは、硫酸アンモニウムでの沈殿によって、または固定化されたプロテインＡ（ＰｈａｒｍａｃｉａＬＫＢＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）での精製によって免疫血清から調製される。同様に、モノクローナル抗体は、硫酸アンモニウム沈殿、または固定化されたプロテインＡでのクロマトグラフィーによってマウス腹水液から調製される。部分的に精製された免疫グロブリンを、ＣｎＢｒ−活性化ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（商標）（ＰｈａｒｍａｃｉａＬＫＢＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）のようなクロマトグラフィー樹脂に共有結合させる。抗体を樹脂にカップリングさせ、樹脂をブロックし、誘導体樹脂を製造業者の指示に従って洗浄する。

そのような免疫アフィニティーカラムは、可溶性形態のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを含有する細胞から画分を調製することによってＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの精製で利用される。この調製は、洗剤の添加によって、または当該分野で良く知られた他の方法によって、全細胞、または分別遠心を介して得られた細胞下画分の可溶化によって導かれる。別法として、シグナル配列を含有する可溶性ポリペプチドは、細胞がそこで培養される培地へ有用な量で分泌させることができる。

可溶性ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド−含有調製物を免疫アフィニティーカラムに通し、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの優先的吸収を可能とする条件下でカラムを洗浄する（例えば、洗剤の不存在下での高イオン強度緩衝液）。次いで、カラムを、抗体／ＰＲＯ１９４、抗体／ＰＲＯ２２０、抗体／ＰＲＯ２４１、抗体／ＰＲＯ２８４、抗体／ＰＲＯ３３１、抗体／ＰＲＯ３５４、抗体／ＰＲＯ３５５、抗体／ＰＲＯ５３３、抗体／ＰＲＯ５４１、抗体／ＰＲＯ７２５、抗体／ＰＲＯ９３７、抗体／ＰＲＯ１０１４、抗体／ＰＲＯ１１２０、抗体／ＰＲＯ１１８２、抗体／ＰＲＯ１３２５、抗体／ＰＲＯ１３８２、抗体／ＰＲＯ１４１０、抗体／ＰＲＯ１５５５、抗体／ＰＲＯ１５５６、抗体／ＰＲＯ１７６０、抗体／ＰＲＯ１７８７、抗体／ＰＲＯ１８６８、抗体／ＰＲＯ４３２６、抗体／ＰＲＯ４３３２、抗体／ＰＲＯ４３４６、抗体／ＰＲＯ４４００、抗体／ＰＲＯ６００３、抗体／ＰＲＯ６０９４、抗体／ＰＲＯ６２４４、抗体／ＰＲＯ９８２０、抗体／ＰＲＯ９８２８、抗体／ＰＲＯ１０２７４、抗体／ＰＲＯ１６０９０、抗体／ＰＲＯ１９６４４、抗体／ＰＲＯ２１３４０、抗体／ＰＲＯ９２１６５、抗体／ＰＲＯ８５１４３、抗体／ＰＲＯ１１２４、抗体／ＰＲＯ１０２６もしくは抗体／ＰＲＯ２３３７０ポリペプチド結合を破壊する条件下で溶出させ、（例えば、ほぼｐＨ２ないし３のような低いｐＨ緩衝液または尿素またはチオシアネートイオンのようなカオトロープの高濃度）、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを集める。
実施例５３：薬物のスクリーニング
本発明は、種々の薬物スクリーニング技術のいずれかにおいて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたはその結合断片を用いることによって化合物をスクリーニングするのに特に有用である。そのようなテストで使用されるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたは断片は、溶液中で遊離しているが、固体支持体に付着されており、細胞表面で生じ、または細胞内に位置する。薬物スクリーニングの１つの方法は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたは断片を発現する組換え核酸で安定に形質転換される真核生物または原核生物宿主細胞を利用する。薬物は、競合結合アッセイでそのような形質転換された細胞に対してスクリーニングされる。生きたまたは固定化された形態いずれかのそのような細胞を、標準的な結合アッセイで用いることができる。例えば、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたは断片、およびテストすべき剤の間の複合体の形成を測定することができる。別法として、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドおよび、その標的細胞、またはテストすべき剤によって引き起こされた標的受容体の間の複合体形成の減少を調べることができる。

かくして、本発明は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド−関連病または障害に影響しえる薬物またはいずれかの他の剤をスクリーニングする方法を提供する。これらの方法は、そのような剤を、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたはその断片と接触させ、（Ｉ）該剤およびＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたは断片の間の複合体の存在について、または（ｉｉ）ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたは断片および細胞の間の複合体の存在につき、当該分野で良く知られた方法によってアッセイすることを含む。そのような競合結合アッセイにおいては、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたは断片を典型的には標識する。適当なインキュベーションの後、遊離ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたは断片を結合形態で存在するそれから分離し、遊離または未複合体化標識の量は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに結合し、またはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド／細胞複合体に干渉する特定の剤の能力の尺度である。

薬物スクリーニングのためのもう１つの技術は、ポリペプチドに対して適当な結合親和性を有する化合物についての高スループットスクリーニングを提供し、これは１９８４年９月１３日に公開されたＷＯ８４／０３５６４に詳細に記載されている。簡単に述べれば、非常に多数の異なる小さなペプチドテスト化合物を、プラスチックピンまたはいくつかの他の表面のような固体基材上で合成する。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドへ適応するので、ペプチドテスト化合物はＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと反応し、洗浄する。結合したＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドが、当該分野で良く知られた方法によって検出される。精製されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドは、前記した薬物スクリーニング技術で用いるために直接プレートに被覆することもできる。加えて、非−中和抗体を用いて、ペプチドを捕獲し、それを固体支持体に固定化することができる。

本発明では、競合薬物スクリーニングアッセイの使用も考えられ、そこでは、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドに特異的に結合できる中和抗体が、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたはその断片への結合に付き、テスト化合物と競合する。このようにして、抗体を用いて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドと１以上の抗原決定基を共有するいずれのペプチドの存在も検出することができる。
実施例５４：合理的薬物設計
合理的薬物設計の目標は、注目する生物学的に活性なポリペプチド（すなわち、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド）の、またはそれらが相互作用する小分子、例えば、アゴニスト、アンタゴニストまたは阻害剤の構造的アナログを生産することである。これらのうちのいずれかを用いて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのより活性なまたは安定な形態である。あるいはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの機能をイン・ビボで増強し、またはそれに干渉する薬物を作成することができる（ｃ．ｆ．，Ｈｏｄｇｓｏｎ，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，９：１９−２１（１９９１））
１つのアプローチにおいて、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドまたはＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド−阻害剤複合体の３時限構造はｘ−線結晶学によって、コンピューターモデリングによってまたは最も典型的には、２つのアプローチの組合せによって決定される。ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの形状および電荷の双方を確認して、構造を解明し、分子の活性部位を決定しなければならない。頻度は低いが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの構造に関する有用な情報は、相同タンパク質の構造に基づくモデリングによって獲得することができる。双方の場合において、関連構造情報を用いて、類似のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチド−様分子を設計し、または効果的な阻害剤を同定する。合理的薬物設計の有用な例は、ＢｒａｘｔｏｎａｎｄＷｅｌｌｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，３１：７７９６−７８０１（１９９２）によって示されたような改良された活性または安定性を有する、あるいはＡｔｈａｕｄａｅｔａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１１３：７４２−７４６（１９９３）によって示されたような天然ペプチドの阻害剤、アゴニストまたはアンタゴニストとして作用する分子を含むことができる。

また、前記したように、機能的アッセイによって選択された標的−特異的抗体を単離し、次いで、その結晶構造を解明することも可能である。このアプローチは、特に、引き続いての薬物設計が基礎にすることができるファルマコアを生じさせる。機能的な薬理学的に活性な抗体に対する抗−イディオタイプ抗体（抗−ｉｄｓ）を生じさせることによってタンパク質結晶学を全く回避することが可能である。鏡像の鏡像として、抗−ｉｄｓの結合部位はもとの受容体のアナログであると予測されよう。次いで、抗−ｉｄを用いて、化学的にまたは生物学的に生産されたペプチドのバンクからペプチドを同定し、単離することができよう。次いで、単離されたペプチドをファルマコアとして作用させられるであろう。

本発明によって、Ｘ−線結晶学のような分析実験を行うために、十分な量のＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを利用可能とすることができる。加えて、本明細書中で提供されたＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドアミノ酸配列の知識は、Ｘ−線結晶学のかわりに、またはそれに加えて、コンピューターモデリング技術を使用するものに対するガイダンスを提供するであろう。

図１は、天然配列ＰＲＯ１９４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：１）を示し、配列番号：１はここで「ＤＮＡ２６８４４−１３９４」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１６８）。図２は図１に示した配列番号：１のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：２）を示す。図３は、天然配列ＰＲＯ２２０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：３）を示し、配列番号：３はここで「ＤＮＡ３２２９８−１１３２」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１９４）。図４は、図３に示した配列番号：３のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：４）を示す。図５は、天然配列ＰＲＯ２４１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：５）を示し、配列番号：５はここで「ＤＮＡ３４３９２−１１７０」と命名されるクローンである（ＵＮＱ２１５）。図６は、図５に示した配列番号：５のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：６）を示す。図７は、天然配列ＰＲＯ２８４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：７）を示し、配列番号：７はここで「ＤＮＡ２３３１８−１２１１」と命名されるクローンである（ＵＮＱ２４７）。図８は、図７に示した配列番号：７のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：８）を示す。図９は、天然配列ＰＲＯ３３１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：９）を示し、配列番号：９はここで「ＤＮＡ４０９８１−１２３４」と命名されるクローンである（ＵＮＱ２９２）。図１０は、図９に示した配列番号：９のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：１０）を示す。図１１は、天然配列ＰＲＯ３５４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：１１）を示し、配列番号：１１はここで「ＤＮＡ４４１９２−１２４６」と命名されるクローンである（ＵＮＱ３１１）。図１２は、図１１に示した配列番号：１１のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：１２）を示す。図１３は、天然配列ＰＲＯ３５５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：１３）を示し、配列番号：１３はここで「ＤＮＡ３９５１８−１２４７」と命名されるクローンである（ＵＮＱ３１２）。図１４は、図１３に示した配列番号：１３のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：１４）を示す。図１５は、天然配列ＰＲＯ５３３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：１５）を示し、配列番号：１５はここで「ＤＮＡ４９４３５−１２１９」と命名されるクローンである（ＵＮＱ３３４）。図１６は、図１５に示した配列番号：１５のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：１６）を示す。図１７は、天然配列ＰＲＯ５４１ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：１７）を示し、配列番号：１７はここで「ＤＮＡ４５４１７−１４３２」と命名されるクローンである（ＵＮＱ３４２）。図１８は、図１７に示した配列番号：１７のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：１８）を示す。図１９は、天然配列ＰＲＯ７２５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：１９）を示し、配列番号：１９はここで「ＤＮＡ５２７５８−１３９９」と命名されるクローンである（ＵＮＱ３９０）。図２０は、図１９に示した配列番号：１９のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：２０）を示す。図２１は、天然配列ＰＲＯ９３７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：２１）を示し、配列番号：２１はここで「ＤＮＡ５６４３６−１４４８」と命名されるクローンである（ＵＮＱ４７４）。図２２は、図２１に示した配列番号：２１のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：２２）を示す。図２３は、天然配列ＰＲＯ１０１４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：２３）を示し、配列番号：２３はここで「ＤＮＡ５６４０９−１３７７」と命名されるクローンである（ＵＮＱ４９７）。図２４は、図２３に示した配列番号：２３のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：２４）を示す。図２５は、天然配列ＰＲＯ１１２０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：２５）を示し、配列番号：２５はここで「ＤＮＡ４８６０６−１４７９」と命名されるクローンである（ＵＮＱ５５９）。図２６は、図２５に示した配列番号：２５のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：２６）を示す。図２７は、天然配列ＰＲＯ１１８２ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：２７）を示し、配列番号：２７はここで「ＤＮＡ５９８４８−１５１２」と命名されるクローンである（ＵＮＱ５９６）。図２８は、図２７に示した配列番号：２７のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：２８）を示す。図２９は、天然配列ＰＲＯ１３２５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：２９）を示し、配列番号：２９はここで「ＤＮＡ６６６５９−１５９３」と命名されるクローンである（ＵＮＱ６８５）。図３０は、図２９に示した配列番号：２９のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：３０）を示す。図３１は、天然配列ＰＲＯ１３８２ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：３１）を示し、配列番号：３１はここで「ＤＮＡ６６５２６−１６１６」と命名されるクローンである（ＵＮＱ７１８）。図３２は、図３１に示した配列番号：３１のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：３２）を示す。図３３は、天然配列ＰＲＯ１４１０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：３３）を示し、配列番号：３３はここで「ＤＮＡ６８８７４−１６２２」と命名されるクローンである（ＵＮＱ７２８）。図３４は、図３３に示した配列番号：３３のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：３４）を示す。図３５は、天然配列ＰＲＯ１５５５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：３５）を示し、配列番号：３５はここで「ＤＮＡ７３７４４−１６６５」と命名されるクローンである（ＵＮＱ７６３）。図３６は、図３５に示した配列番号：３５のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：３６）を示す。図３７は、天然配列ＰＲＯ１５５６ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：３７）を示し、配列番号：３７はここで「ＤＮＡ７６５２９−１６６６」と命名されるクローンである（ＵＮＱ７６４）。図３８は、図３７に示した配列番号：３７のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：３８）を示す。図３９は、天然配列ＰＲＯ１７６０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：３９）を示し、配列番号：３９はここで「ＤＮＡ７６５３２−１７０２」と命名されるクローンである（ＵＮＱ８３３）。図４０は、図３９に示した配列番号：３９のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：４０）を示す。図４１は、天然配列ＰＲＯ１７８７ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：４１）を示し、配列番号：４１はここで「ＤＮＡ７６５１０−２５０４」と命名されるクローンである（ＵＮＱ８４９）。図４２は、図４１に示した配列番号：４１のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：４２）を示す。図４３は、天然配列ＰＲＯ１８６８ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：４３）を示し、配列番号：４３はここで「ＤＮＡ７７６２４−２５１５」と命名されるクローンである（ＵＮＱ８５９）。図４４は、図４３に示した配列番号：４３のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：４４）を示す。図４５は、天然配列ＰＲＯ４３２６ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：４５）を示し、配列番号：４５はここで「ＤＮＡ９１７７９−２５７１」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１８８３）。図４６は、図４５に示した配列番号：４５のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：４６）を示す。図４７は、天然配列ＰＲＯ４３３２ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：４７）を示し、配列番号：４７はここで「ＤＮＡ１００２７２−２９６９」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１８８７）。図４８は、図４７に示した配列番号：４７のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：４８）を示す。図４９は、天然配列ＰＲＯ４３４６ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：４９）を示し、配列番号：４９はここで「ＤＮＡ８６５９４−２５８７」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１９００）。図５０は、図４９に示した配列番号：４９のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：５０）を示す。図５１は、天然配列ＰＲＯ４４００ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：５１）を示し、配列番号：５１はここで「ＤＮＡ８７９７４−２６０９」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１９２５）。図５２は、図５１に示した配列番号：５１のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：５２）を示す。図５３は、天然配列ＰＲＯ６００３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：５３）を示し、配列番号：５３はここで「ＤＮＡ８３５６８−２６９２」と命名されるクローンである（ＵＮＱ２５１４）。図５４は、図５３に示した配列番号：５３のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：５４）を示す。図５５は、天然配列ＰＲＯ６０９４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：５５）を示し、配列番号：５５はここで「ＤＮＡ９６９９５−２７０９」と命名されるクローンである（ＵＮＱ２５４２）。図５６は、図５５に示した配列番号：５５のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：５６）を示す。図５７は、天然配列ＰＲＯ６２４４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：５７）を示し、配列番号：５７はここで「ＤＮＡ１０８７４３−２７２２」と命名されるクローンである（ＵＮＱ２５６４）。図５８は、図５７に示した配列番号：５７のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：５８）を示す。図５９は、天然配列ＰＲＯ９８２０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：５９）を示し、配列番号：５９はここで「ＤＮＡ１０８７６９−２７６５」と命名されるクローンである（ＵＮＱ３０２２）。図６０は、図５９に示した配列番号：５９のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：６０）を示す。図６１は、天然配列ＰＲＯ９８２８ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：６１）を示し、配列番号：６１はここで「ＤＮＡ１４２２３８−２７６８」と命名されるクローンである（ＵＮＱ３０２７）。図６２は、図６１に示した配列番号：６１のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：６２）を示す。図６３は、天然配列ＰＲＯ１０２７４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：６３）を示し、配列番号：６３はここで「ＤＮＡ１３９６８６−２８２３」と命名されるクローンである（ＵＮＱ３１２２）。図６４は、図６３に示した配列番号：６３のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：６４）を示す。図６５は、天然配列ＰＲＯ１６０９０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：６５）を示し、配列番号：６５はここで「ＤＮＡ１４４８４４−２８４３」と命名されるクローンである（ＵＮＱ５７８３）。図６６は、図６５に示した配列番号：６５のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：６６）を示す。図６７は、天然配列ＰＲＯ１９６４４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：６７）を示し、配列番号：６７はここで「ＤＮＡ１３９５９２−２８６６」と命名されるクローンである（ＵＮＱ５８２５）。図６８は、図６７に示した配列番号：６７のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：６８）を示す。図６９は、天然配列ＰＲＯ２１３４０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：６９）を示し、配列番号：６９はここで「ＤＮＡ１７６７７５−２９５７」と命名されるクローンである（ＵＮＱ５９８２）。図７０は、図６９に示した配列番号：６９のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：７０）を示す。図７１は、天然配列ＰＲＯ９２１６５ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：７１）を示し、配列番号：７１はここで「ＤＮＡ３４０３９２」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１７８２６）。図７２は、図７１に示した配列番号：７１のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：７２）を示す。図７３は、天然配列ＰＲＯ８５１４３ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：７３）を示し、配列番号：７３はここで「ＤＮＡ３４０４９４」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１１８３１）。図７４は、図７３に示した配列番号：７３のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：７４）を示す。図７５は、天然配列ＰＲＯ１１２４ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：７５）を示し、配列番号：７５はここで「ＤＮＡ６０６２９−１４８１」と命名されるクローンである（ＵＮＱ１８９１９）。図７６は、図７５に示した配列番号：７５のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：７６）を示す。図７７は、天然配列ＰＲＯ１０２６ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：７７）を示し、配列番号：７７はここで「ＤＮＡ５９６１３−１４１７」と命名されるクローンである（ＵＮＱ５１１）。図７８は、図７７に示した配列番号：７７のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：７８）を示す。図７９は、天然配列ＰＲＯ２３３７０ｃＤＮＡのヌクレオチド配列（配列番号：７９）を示し、配列番号：７９はここで「ＤＮＡ１９３９６３」と命名されるクローンである（ＵＮＱ８３４４）。図８０は、図７９に示した配列番号：７９のコーディング配列に由来するアミノ酸配列（配列番号：８０）を示す。

Claims

ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する表現型を同定する方法であって、該方法は：
（ａ）そのゲノムがＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を包含する非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定すること；そして、
（ｃ）該測定された生理学的特徴を、性別の一致した野生型動物の生理学的特徴と比較することを含み、該野生型動物の該生理学的特徴とは異なる該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を、該非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に由来する表現型として同定する方法。
前記非ヒトトランスジェニック動物は、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊についてヘテロ接合性である、請求項１に記載の方法。
性別の一致した野生型同腹子と比較して前記非ヒトトランスジェニック動物によって呈される前記表現型は以下：神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常のうちの少なくとも１つである請求項１に記載の方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である請求項３に記載の方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である請求項３に記載の方法。
前記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである請求項３に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である請求項３に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である請求項３に記載の方法。
前記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である請求項３に記載の方法。
前記眼の異常は網膜異常である請求項３に記載の方法。
前記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する請求項３に記載の方法。
前記網膜異常は色素性網膜炎に合致する請求項１０に記載の方法。
前記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる請求項１０に記載の方法
前記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する請求項１０に記載の方法。
前記眼の異常は白内障である請求項３に記載の方法。
前記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患と合致する請求項１５に記載の方法。
前記発生異常は胚死または生存率低下を含む請求項３に記載の方法。
前記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である請求項３に記載の方法。
前記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である請求項３に記載の方法。
前記骨代謝異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、または大理石骨病である請求項３に記載の方法。
前記非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して以下の生理学的特徴：開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセント増大；平均体重増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体質量（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ））の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死の内の少なくとも１つを示す請求項１に記載の方法。
そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物から誘導される単離細胞。
前記単離細胞は、マウス細胞である請求項２２に記載の単離された細胞。
前記マウス細胞は、胚性幹細胞である請求項２３に記載の単離された細胞。
前記非ヒトトランスジェニック動物が、性別一致野生型同腹子と比較した場合、以下の表現型：神経学的障害；心血管障害、内皮障害または血管形成障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常の内の少なくとも１つを示す請求項２２に記載の単離された細胞。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型を調節する剤を同定する方法であって、該方法は、
（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること、
（ｂ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定すること、
（ｃ）（ｂ）の測定された生理学的特徴を性別の一致した野生型動物の生理学的特徴と比較することであって、ここで、該野生型動物の生理学的特徴と異なる該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴が、該非ヒトトランスジェニック動物での遺伝子破壊から生じる表現型として同定されること、
（ｄ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物に、試験剤を投与すること、および
（ｅ）該試験剤が、該非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に関連した同定された表現型を調節するかどうかを決定すること
を包含する方法。
前記遺伝子破壊に関連した前記表現型は、神経学的障害；心血管障害、内皮障害または血管形成障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学障害；骨代謝性異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を包含する請求項２６に記載の方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である請求項２７に記載の方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である、請求項２７に記載の方法。
前記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである請求項２７に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である請求項２７に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である請求項２７に記載の方法。
前記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である請求項２７に記載の方法。
前記眼の異常は網膜異常である請求項２７に記載の方法。
前記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する請求項２７に記載の方法。
前記網膜異常は色素性網膜炎に合致する請求項３４に記載の方法。
前記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる請求項３４に記載の方法。
前記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する請求項３４に記載の方法。
前記眼の異常は白内障である請求項２７に記載の方法。
前記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患と合致する請求項３９に記載の方法。
前記発生異常は胚死または生存率低下を含む請求項２７に記載の方法。
前記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である請求項２７に記載の方法。
前記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である請求項２７に記載の方法。
前記骨代謝異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、または大理石骨病である請求項２７に記載の方法。
前記非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して以下の生理学的特徴：開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセント増大；平均体重増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体質量（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ））の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死の内の少なくとも１つを示す請求項２６に記載の方法。
請求項２６の方法によって同定される剤。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである請求項４６に記載の剤。
前記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項４７に記載の剤。
前記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項４７に記載の剤。
（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物によって呈される生理学的特徴を測定すること；
（ｃ）（ｂ）の該測定された生理学的特徴を性が一致した野生型動物の生理学的特徴と比較することであって、ここで、該野生型動物によって呈された該生理学的特徴と異なる該非ヒトトランスジェニック動物によって呈される生理学的特徴が遺伝子破壊に関連する生理学的特徴として同定されること；
（ｄ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与すること；そして、
（ｅ）遺伝子破壊に関連する該生理学的特徴が変調されたか否かを判断することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する生理学的特徴を変調する剤を同定する方法。
前記非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して以下の生理学的特徴：開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセント増大；平均体重増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体質量（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ））の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死の内の少なくとも１つを示す請求項５０に記載の方法。
請求項５０に記載の方法によって同定された剤。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである請求項５２に記載の剤。
前記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項５３に記載の剤。
前記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項５３に記載の剤。
（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物によって呈された挙動を観察すること；
（ｃ）（ｂ）の該観察された挙動を性が一致する野生型動物の観察された挙動と比較することであって、ここで、該野生型動物によって呈される該観察された挙動とは異なる該非ヒトトランスジェニック動物によって呈された観察された挙動が遺伝子破壊に関する挙動と同定されること；
（ｄ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与すること；そして、
（ｅ）該剤が遺伝子破壊に関連する挙動を変調するか否かを判断することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する挙動を変調する剤を同定する方法。
前記挙動は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である請求項５６に記載の方法。
前記挙動は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である請求項５６に記載の方法。
前記挙動は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである請求項５６に記載の方法。
前記挙動は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である請求項５６に記載の方法。
前記挙動は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である請求項５６に記載の方法。
前記挙動は、鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である請求項５６に記載の方法。
請求項５６に記載の方法によって同定された剤。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである請求項６３に記載の剤。
前記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項６４に記載の剤。
前記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項６４に記載の剤。
（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）該非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与すること；そして、
（ｃ）該試験剤が神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を、該非ヒトトランスジェニック動物において軽減し、または変調するか否かを判断することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子における破壊に関連する神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常を軽減または変調する剤を同定する方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である請求項６７に記載の方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である請求項６７に記載の方法。
前記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである請求項６７に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である請求項６７に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である請求項６７に記載の方法。
前記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である請求項７３に記載の方法。
前記眼の異常は網膜異常である請求項６７に記載の方法。
前記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する請求項６７に記載の方法。
前記網膜異常は色素性網膜炎に合致する請求項７４に記載の方法。
前記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる請求項７４に記載の方法。
前記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する請求項７４に記載の方法。
前記眼の異常は白内障である請求項６７に記載の方法。
前記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患である請求項７９に記載の方法。
前記発生異常は胚死または生存率低下を含む請求項６７に記載の方法。
前記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である請求項６７に記載の方法。
前記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である請求項６７に記載の方法。
前記骨代謝異常または障害は、関節炎、骨粗鬆症、または大理石骨病である請求項６７に記載の方法。
前記非ヒトトランスジェニック動物は、性別の一致した野生型同腹子と比較して以下の生理学的特徴：開放野外試験の間に増大した不安様応答；開放野外試験の間に減少した不安様応答；開放野外試験の間の過剰活動；開放野外試験の間の過少活動；開放野外試験の間の予備的活動増大；開放野外試験の間の予備的活動減少；歩行数が減少したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；歩行数が増大したことを含めたホーム−ケージ活動試験の間の異常な概日リズム；新たな環境に対する習慣性応答増大；ストレスに誘発された高熱に対する耐性増大；逆転スクリーン試験の間の運動協調が損傷を受けたこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が増大したこと；尾部靭帯試験の間の欝様応答が減少したこと；プレパルス阻害試験の間の刺激応答減少；プレパルス阻害試験の間の知覚運動通門／注意力の増強；ホットプレート試験における潜伏応答の減少；眼科学的異常；網膜色素脱失；白内障；減少した心拍；インシュリン感受性が増大したこと；平均血清グルコース濃度増大；平均血清グルコース濃度減少；平均血清コレステロール濃度増大；平均血清トリグリセリド濃度増大；平均トリグリセリド濃度減少；グルコース寛容性増強；グルコース寛容性の損傷；平均血清インシュリン濃度減少；尿酸濃度増大；尿酸濃度減少；血清リン酸濃度減少；血清リン酸濃度増大；ビリルビン濃度増大；亜硝酸塩尿症増大；平均血清アルブミン減少；肝臓障害；ナチュラルキラー細胞の平均百分率の減少；ＣＤ４細胞の平均百分率の増大；ＣＤ４細胞の平均百分率の減少；ＣＤ８＋細胞の平均百分率の減少；好塩基性細胞減少；リンパ球減少；平均単核細胞絶対数増大；大球性貧血；赤血球細胞数減少；ヘモグロビン減少およびヘマトクリット減少；平均血小板数増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ１応答増大；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答減少；オボアルブミン誘発に対する平均血清ＩｇＧ２ａ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＭＣＰ―１応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＴＮＦ−アルファ応答増大；ＬＰＳ誘発に対する平均血清ＩＬ−６応答増大；皮膚線維芽細胞増殖増大；脾臓および骨髄の両方におけるヘモジデリン色素増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセント増大；平均体重増大；総組織質量増大（ＴＴＭ）；上体質量（ＬＢＭ）増大；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；脊椎ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；ＢＭＣ／ＬＢＭ比増大；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）増大；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）増大；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の増大；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の増大；総体脂肪および総脂肪質量の平均パーセントの減少；平均体重の減少；平均体長の減少；総組織質量（ＴＴＭ））の減少；上体質量（ＬＢＭ）の減少；大腿骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；脊椎骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；ＢＭＣ／ＬＢＭ比の減少；骨ミネラル密度（ＢＭＤ）の減少；骨ミネラル含量（ＢＭＣ）の減少；骨ミネラル体積密度（ｖＢＭＤ）の減少；平均大腿骨中央部皮質厚みおよび断面積の減少；平均脊椎結節骨量、数および結合密度の減少；骨形成異常および転移性石灰化；腹腔内脂肪の減少；成長遅延；発達異常；多病巣性急性および肉芽腫性炎症；男性不妊症；女性不妊症；精巣変性；男性性機能低下；精子形成欠陥または停止；精巣重量の減少；炎症および変性ミオパシー；膵臓の腺房細胞における変動；腎臓肥大化；腎臓障害；筋肉障害；全臓器サイズでの全般的減少を伴う発育停止；生育可能性減少を伴う成長遅延；および胚性致死の内の少なくとも１つを示す請求項６７に記載の方法。
請求項６７に記載の方法によって同定された剤。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである請求項８６に記載の剤。
前記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項８７に記載の剤。
前記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項８７に記載の剤。
請求項６７に記載の方法によって同定される治療剤。
（ａ）試験剤を、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する宿主細胞と接触させること；そして、
（ｂ）該試験剤が、該宿主細胞によるＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を変調するか否かを判断することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を変調する剤を同定する方法。
請求項９１の記載の方法によって同定される剤。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである請求項９２に記載の剤。
前記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項９３に記載の剤。
前記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項９３に記載の剤。
（ａ）そのゲノムが、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含む非ヒトトランスジェニック動物を供すること；
（ｂ）（ａ）該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴を測定すること；
（ｃ）（ｂ）の該測定された生理学的特徴を、性が一致した野生型動物の生理学的特徴と比較することであって、ここで、該野生型動物の該生理学的特徴とは異なる該非ヒトトランスジェニック動物の生理学的特徴は、該非ヒトトランスジェニック動物における遺伝子破壊に由来する状態と同定されること；
（ｄ）（ａ）の該非ヒトトランスジェニック動物に試験剤を投与すること；そして、
（ｅ）非ヒトトランスジェニック動物における、遺伝子破壊に関連した同定された該状態に対する該試験剤の効果を評価することを包含する、
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連する疾患に影響できる治療剤を評価する方法。
前記疾患が神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害；脂質代謝障害；または発生異常である請求項９６に記載の方法。
請求項９６に記載の方法によって同定された治療剤。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである請求項９８に記載の治療剤。
前記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項９９に記載の治療剤。
前記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項９９に記載の治療剤。
請求項９８に記載の治療剤を含む医薬組成物。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害または胚性致死を治療または防止または緩和する方法であって、該方法は、すでにその障害を有し得るか、またはその障害を有する傾向があり得るか、またはその障害が防止されるべき状態にありうるそのような処置の必要な対象に、治療上有効量の請求項９４に記載のの治療剤、またはそれのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該障害または疾患を有効に治療または防止または緩和することを包含する、方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である請求項１０３に記載の方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である請求項１０３に記載の方法
前記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである請求項１０３に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である請求項１０３に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である請求項１０３に記載の方法。
前記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である請求項１０３に記載の方法。
前記眼の異常は網膜異常である請求項１０３に記載の方法。
前記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する請求項１０３に記載の方法。
前記網膜異常は色素性網膜炎に合致する請求項１１０に記載の方法。
前記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる請求項１１０に記載の方法。
前記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致する請求項１１０に記載の方法。
前記眼の異常は白内障である請求項１０３に記載の方法。
前記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患である請求項１１５に記載の方法。
前記発生異常は胚死または生存率低下を含む請求項１０３に記載の方法。
前記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である請求項１０３に記載の方法。
前記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である請求項１０３に記載の方法。
前記骨代謝異常または障害が関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である請求項１０３に記載の方法。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子における破壊に関連した神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害または発生異常を緩和または調節する剤を同定する方法であって、該方法は、
（ａ）非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物を提供することであって、該培養物の各細胞が、ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を含むこと、；
（ｂ）該細胞培養物に、試験剤を投与すること、そして
（ｃ）該試験剤が、該培養物における神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；眼の異常；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝の異常または障害または発生異常を緩和または調節するかどうかを決定することを包含する方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間に増大した不安様応答である請求項１２１に記載の方法。
前記神経学的障害は、開放野外活動試験の間の減少した不安様応答である請求項１２１に記載の方法。
前記神経学的障害は、ホーム−ケージ活動試験の間における異常な概日リズムである請求項１２１に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調増大である請求項１２１に記載の方法。
前記神経学的障害は、逆転スクリーン試験の間における運動協調損傷である請求項１２１に記載の方法。
前記神経学的障害は鬱病、全身性不安障害、注意欠乏障害、睡眠障害、運動亢進症、強迫性障害、統合失調症、認知障害、痛覚過敏および感覚障害である請求項１２１に記載の方法。
前記眼の異常は網膜異常である請求項１２１に記載の方法。
前記眼の異常は視覚の問題または盲目に合致する請求項１２１に記載の方法。
前記網膜異常は色素性網膜炎に合致する請求項１２８に記載の方法。
前記網膜異常は網膜変性または網膜異形成によって特徴付けられる請求項１２８に記載の方法。
前記網膜異常は、網膜異形成、未熟児網膜症を含めた種々の網膜障害、水晶体後線維増殖、血管新生緑内障、加齢黄斑変性、糖尿病性黄斑浮腫、角膜血管新生、角膜移植片血管新生、角膜移植片拒絶、網膜／脈絡膜血管新生、角の血管新生（ルベオーシス）、眼内血管新生疾患、血管再狭窄、動静脈奇形（ＡＶＭ）、髄膜腫、血管腫、血管線維腫、甲状腺過形成（グレーブス病を含む）、角膜および他の組織移植、網膜動脈閉塞または閉鎖；網膜血管系の二次的萎縮を引き起こす網膜変性、色素性網膜炎、黄斑変性、シュタルガルト病、先天性停在性夜盲症、コロイデレミア、回転状萎縮、レーバー先天性黒内障、網膜分離障害、ヴァーグナー症候群、アッシャー症候群、ツェルウェーガー症候群、サルディーノ−マインザー症候群、セニア−ロッケン症候群、バルデー・ビードル症候群、アルポート症候群、アルストレム症候群、コケイン症候群、先天性脊椎・骨端形成症、フリン−エアード症候群、フリートリッヒ運動失調、ハルグレン症候群、マーシャル症候群、アルベルス−シェーンベルグ病、レフサム病、キーンズ・セイアー症候群、ワールデンブルグ症候群、アラジル症候群、筋緊張性ジストロフィー、オリーブ橋小脳萎縮、ピエール−マリー・ダンスドローム、スティックラー症候群、カロチン症、シスチン蓄積症、ウルフラン症候群、バッセン・コーンツヴァイク症候群、無β−リポタンパク血症、色素失調症、バッテン病、ムコ多糖症、ホモシスチン尿症、またはマンノシドーシスに合致するに合致している請求項１２８に記載の方法。
前記眼の異常は白内障である請求項１２１に記載の方法。
前記白内障はヒトダウン症候群、ハレルマン−ストレフ症候群、ロウ症候群、ガラクトース血症、マルファン症候群、１３−１５トリソミー、アルポート症候群、筋緊張性ジストロフィー、ファブリー病、副甲状腺機能低下またはコンラディ症候群などの全身性疾患である請求項１３３に記載の方法。
前記発生異常は胚死または生存率低下を含む請求項１２１に記載の方法。
前記心血管障害、内皮障害または血管新生障害は、糖尿病などの動脈病；乳頭浮腫；眼萎縮；アテローム性動脈硬化症；狭心症；急性心筋梗塞などの心筋梗塞、心肥大、および鬱血性心不全などの心不全；高血圧、炎症性血管炎、レイノー病およびレイノー現象；動脈瘤および動脈再狭窄；血栓性静脈炎、リンパ管炎、およびリンパ浮腫などの静脈およびリンパ系障害；末梢血管疾患；血管腫瘍、例えば、血管腫（毛細血管および海綿状血管）、グロームス腫瘍、毛細血管拡張症、細菌性血管腫症、血管内皮腫、血管肉腫、血管周囲細胞腫、カポージ肉腫、リンパ管腫、およびリンパ管肉腫などの癌；腫瘍血管新生；創傷、熱傷、および他の組織損傷などの外傷、インプラント固着、瘢痕、虚血再灌流障害；関節リウマチ；脳血管疾患；急性腎不全などの腎疾患、または骨粗鬆症である請求項１２１に記載の方法。
前記免疫学的障害は、全身性エリテマトーデス；関節リウマチ；若年性慢性関節炎；脊椎関節病；全身性硬化症（強皮症）；特発性炎症性筋障害（皮膚筋炎、多発性筋炎）；シェーグレン症候群；全身性血管炎；サルコイドーシス；自己免疫性溶血性貧血（免疫性汎血球減少症、発作性夜間血色素尿病）；自己免疫性血小板減少症（特発性血小板減少性紫斑病、免疫性血小板減少症）；甲状腺炎（グレーブス病、橋本甲状線炎、若年性リンパ性甲状腺炎、萎縮性甲状腺炎）；糖尿病；免疫性腎疾患（糸球体腎炎、尿細管間質性腎炎）；多発性硬化症、特発性脱髄性多発性ニューロパシーまたはギヤン−バレー症候群、および慢性炎症性脱髄性多発性ニューロパシーなどの中枢および末梢神経の脱髄疾患；感染性肝炎（Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型、Ｅ型肝炎および他の肝不親和性ウイルス）、自己免疫慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、肉芽腫性肝炎、および硬化性胆管炎などの肝胆道系疾患；炎症性腸疾患（潰瘍性結腸炎：クローン病）；グルテン感受性腸炎、およびホイップル病；水泡性皮膚疾患、多形紅斑、および接触性皮膚炎を含めた自己免疫または免疫性皮膚疾患、乾癬；喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、食物過敏症、および蕁麻疹などのアレルギー性疾患；好酸球性肺炎、特発性胚線維症および過敏性肺炎などの肺の免疫学的病気；または移植片拒絶および移植片対宿主病を含めた移植関連の疾患である請求項１２１に記載の方法。
前記骨代謝の異常または障害が関節炎、骨粗鬆症または大理石骨病である請求項１２１に記載の方法。
請求項１２１に記載の方法によって同定された剤。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドのアゴニストまたはアンタゴニストである請求項１３９に記載の剤。
前記アゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項１４０に記載の剤。
前記アンタゴニストが抗ＰＲＯ１９４、抗ＰＲＯ２２０、抗ＰＲＯ２４１、抗ＰＲＯ２８４、抗ＰＲＯ３３１、抗ＰＲＯ３５４、抗ＰＲＯ３５５、抗ＰＲＯ５３３、抗ＰＲＯ５４１、抗ＰＲＯ７２５、抗ＰＲＯ９３７、抗ＰＲＯ１０１４、抗ＰＲＯ１１２０、抗ＰＲＯ１１８２、抗ＰＲＯ１３２５、抗ＰＲＯ１３８２、抗ＰＲＯ１４１０、抗ＰＲＯ１５５５、抗ＰＲＯ１５５６、抗ＰＲＯ１７６０、抗ＰＲＯ１７８７、抗ＰＲＯ１８６８、抗ＰＲＯ４３２６、抗ＰＲＯ４３３２、抗ＰＲＯ４３４６、抗ＰＲＯ４４００、抗ＰＲＯ６００３、抗ＰＲＯ６０９４、抗ＰＲＯ６２４４、抗ＰＲＯ９８２０、抗ＰＲＯ９８２８、抗ＰＲＯ１０２７４、抗ＰＲＯ１６０９０、抗ＰＲＯ１９６４４、抗ＰＲＯ２１３４０、抗ＰＲＯ９２１６５、抗ＰＲＯ８５１４３、抗ＰＲＯ１１２４、抗ＰＲＯ１０２６もしくは抗ＰＲＯ２３３７０抗体である請求項１４０に記載の剤。
請求項１２１に記載の方法によって同定された治療剤。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した表現型を調節する方法であって、該方法は、すでに該表現型を示し得るか、または該表現型を有する傾向があり得るか、または該表現型が防止されるべき状態にあり得るような対象に、有効量の請求項４６に記載の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該表現型を有効に調節することを包含する、方法。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した生理学的特徴を調節する方法であって、該方法は、すでに該生理学的特徴を示し得るか、または該生理学的特徴を有する傾向がありうるか、または該生理学的特徴が防止されるべき状態にありうるような対象に、有効量の請求項５２の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該生理学的特徴を有効に調節することを包含する、方法。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した作用を調節する方法であって、該方法は、すでに該作用を示し得るか、または該作用を有する傾向がありうるか、または該作用が防止されるべき状態にありうるような対象に、有効量の請求項６３の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該作用を有効に調節することを包含する、方法。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドの発現を調節する方法であって、該方法は、該ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドを発現する宿主細胞に、請求項９２の有効量の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該ポリペプチドの発現を有効に調節することを包含する、方法。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した症状を調節する方法であって、該方法は、すでに該症状を有し得るか、または該症状を有する傾向がありうるか、または該症状が防止されるべき状態にありうるような対象に、治療上有効な量の請求項９８の治療剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与し、それにより該症状を有効に調節することを包含する方法。
ＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊に関連した神経学的障害；心血管障害、内皮障害、または血管新生障害；免疫学的障害；腫瘍学的障害；骨代謝性異常または障害；または発生異常を治療または防止または緩和する方法であって、該方法は、非ヒトトランスジェニック動物細胞培養物であって、該培養物の各細胞がＰＲＯ１９４、ＰＲＯ２２０、ＰＲＯ２４１、ＰＲＯ２８４、ＰＲＯ３３１、ＰＲＯ３５４、ＰＲＯ３５５、ＰＲＯ５３３、ＰＲＯ５４１、ＰＲＯ７２５、ＰＲＯ９３７、ＰＲＯ１０１４、ＰＲＯ１１２０、ＰＲＯ１１８２、ＰＲＯ１３２５、ＰＲＯ１３８２、ＰＲＯ１４１０、ＰＲＯ１５５５、ＰＲＯ１５５６、ＰＲＯ１７６０、ＰＲＯ１７８７、ＰＲＯ１８６８、ＰＲＯ４３２６、ＰＲＯ４３３２、ＰＲＯ４３４６、ＰＲＯ４４００、ＰＲＯ６００３、ＰＲＯ６０９４、ＰＲＯ６２４４、ＰＲＯ９８２０、ＰＲＯ９８２８、ＰＲＯ１０２７４、ＰＲＯ１６０９０、ＰＲＯ１９６４４、ＰＲＯ２１３４０、ＰＲＯ９２１６５、ＰＲＯ８５１４３、ＰＲＯ１１２４、ＰＲＯ１０２６もしくはＰＲＯ２３３７０ポリペプチドをコードする遺伝子の破壊を包含する、細胞培養物に、有効量の請求項１３９の剤、またはそのアゴニストまたはアンタゴニストを投与して、それにより該障害を有効に治療または防止または緩和することを包含する方法。