JP2008161495A - コラーゲン組成物、及びその製造方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 架橋コラーゲンと、乳糖とを含有し、
前記架橋コラーゲン100重量部に対して前記乳糖が1〜30重量部であり、
前記コラーゲンが魚由来のコラーゲンである。
Description
(1)コラーゲン溶液に架橋剤を導入し、溶液をゲル化する方法。
(2)コラーゲン溶液に架橋を惹起する光線を照射し、溶液をゲル化する方法。
(3)コラーゲン溶液に中性緩衝液を加えてコラーゲンの線維化を惹起させ、コラーゲン線維ネットワークから構成されるゲルを得る方法。
架橋コラーゲンと、
乳糖
とを含有することを特徴とするコラーゲン組成物によって解決される。
架橋コラーゲンと、
乳糖とを含有し、
前記架橋コラーゲン100重量部に対して前記乳糖が1〜30重量部である
ことを特徴とするコラーゲン組成物によって解決される。
ゲル化コラーゲンに乳糖を添加する乳糖添加工程
とを有することを特徴とするコラーゲンゲル組成物の製造方法によって解決される。
コラーゲン溶液に架橋剤を添加してゲル化させるゲル化工程と、
ゲル化コラーゲンに乳糖を添加する乳糖添加工程
とを有することを特徴とするコラーゲンゲル組成物の製造方法によって解決される。
[魚由来のコラーゲンの作成]
(1) ヒラメのリン酸緩衝液でのホモジナイズ処理
凍結されたヒラメの皮をピンセット・鋏で取り、細かく切った。このヒラメの皮の細片85gに1000mLのリン酸緩衝液(リン酸一水素二ナトリウム21.7gとリン酸二水素一カリウム0.78gとを水に加えて1000mLとしたもの)を加え、ホモジナイズした。同リン酸緩衝液で1時間洗浄し、静置後、上澄み液をガーゼで濾過し、水で洗浄(1回の洗浄時間は1時間)を2回した。
(2) ペプシン処理
上記のヒラメ溶液にペプシン0.2gを加え、更に0.5M酢酸溶液を加えて1000mLとし、そして5℃で24時間攪拌した。
(3) コラーゲンの精製
ペプシン処理を終えた溶液を100000g×1時間の条件下で超遠心分離を行い、可溶性上清を分取した。この可溶性上清を0.7MのNaCl/0.5M酢酸溶液で5℃で24時間掛けて透析した。
このようにしてコラーゲン溶液を得た。
EDC(1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド・塩酸塩)を1%の割合で上記のコラーゲン溶液に添加・溶解させ、5℃で4日間掛けて反応を行わせた。得られた反応物に水を加えて洗浄した後、100000g×1時間の条件下で超遠心分離を行った。この操作を3回繰り返した。
上記のようにして得られた乳糖処理のEDC架橋魚由来コラーゲンをヌードマウスの背部皮下に0.3g注入した。又、比較の為、乳糖処理していないEDC架橋魚由来コラーゲン(水分を凍結乾燥により半分除去)をヌードマウスの背部皮下に0.3g注入した。そして、注入部の状況を目視で観察したので、その結果を表−1に示す。
観察結果
1%乳糖溶液処理EDC架橋魚由来コラーゲン 22日間皮下に膨れ保持
4.7%乳糖溶液処理EDC架橋魚由来コラーゲン 90日以上皮下に膨れ保持
10%乳糖溶液処理EDC架橋魚由来コラーゲン 6日間皮下に膨れ保持
乳糖溶液未処理EDC架橋魚由来コラーゲン 4日間皮下に膨れ保持
表−1から判る通り、本発明になる乳糖処理された架橋コラーゲンは、体内において、長期間に亘って維持されるものである。
実施例1におけるコラーゲン含有溶液(a溶液)2.5mLを、予め、注射用水を移動相として充填したゲル濾過カラムに添加した。そして、出て来た溶液を廃棄し、カラム上端に溶液が無くなってから、カラムの上端に注射用水の移動相3mLを加え、ゲル濾過し、濾過された液3mLを採取し、更に0.22μmのメンブランフィルターを通過させた。このようにしてコラーゲン溶液を得た。
実施例1において、架橋剤として用いたEDCの代わりに、グルタルアルデヒドを用いて同様に行った。
代 理 人 宇 高 克 己
Claims (12)
- 架橋コラーゲンと、
乳糖
とを含有することを特徴とするコラーゲン組成物。 - 架橋コラーゲンと、
乳糖とを含有し、
前記架橋コラーゲン100重量部に対して前記乳糖が1〜30重量部である
ことを特徴とするコラーゲン組成物。 - 架橋コラーゲンは1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド・塩酸塩によって架橋されたコラーゲンである
ことを特徴とする請求項1又は請求項2のコラーゲン組成物。 - コラーゲンが魚由来コラーゲンである
ことを特徴とする請求項1〜請求項3いずれかのコラーゲン組成物。 - 生体内に埋め込まれて使用される材料である
ことを特徴とする請求項1〜請求項4いずれかのコラーゲン組成物。 - 生体内に埋め込まれて使用される美容整形材料である
ことを特徴とする請求項1〜請求項5いずれかのコラーゲン組成物。 - コラーゲン溶液に架橋剤を添加してゲル化させるゲル化工程と、
ゲル化コラーゲンに乳糖を添加する乳糖添加工程
とを有することを特徴とするコラーゲンゲル組成物の製造方法。 - 乳糖添加工程で添加される乳糖は濃度が0.5〜10%の乳糖水溶液である
ことを特徴とする請求項7のコラーゲン組成物の製造方法。 - 架橋剤が1−エチル−3−(3−ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド・塩酸塩である
ことを特徴とする請求項7又は請求項8のコラーゲン組成物の製造方法。 - コラーゲンが魚由来コラーゲンである
ことを特徴とする請求項7〜請求項9いずれかのコラーゲン組成物の製造方法。 - 生体内に埋め込まれて使用される材料の製造方法であることを特徴とする請求項7〜請求項10いずれかのコラーゲン組成物の製造方法。
- 生体内に埋め込まれて使用される美容整形材料の製造方法であることを特徴とする請求項7〜請求項11いずれかのコラーゲン組成物の製造方法。
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