JP2007523958A - 改良された特性を有するβ−1,3−グルカンの製造方法 - Google Patents
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Abstract
Description
例1:スクレログルカン含有溶液の粘度の増加
蒸留水100mlにスクレログルカン(ActigumCS6、Degussa社)1gを添加し、スクリュー攪拌器を使用して20℃で24時間攪拌した。引続きこのスクレログルカン含有溶液10mlをサーモハーケ粘度計(RotoviscoC1)に37℃でせん断速度10/秒で入れた。引続き酵素としてエンド−β(1,3)−グルカナーゼ(Megazyme)の蒸留水1.53mg/mlを含有する溶液1mlを入れ、測定を開始した。
蒸留水100mlにスクレログルカン(ActigumCS6、Degussa社)1gを添加し、プロペラ攪拌器を使用して20℃で24時間攪拌した。引続き溶液を37℃に加熱し、1,3−β−グルカナーゼ(Glucanex、Novozymes)の蒸留水2mg/mlを含有する酵素溶液1mlを添加した。この溶液を37℃で3時間、一定に攪拌して保持し、引続き純粋アルコール(VMRNo.100943)1000mlに入れた。引続きフィルターシーブ(メッシュ幅70μm)を使用して溶解しない沈殿物を溶液から分離し、分離した沈殿物を20℃で乾燥し、ミルを用いて粉末にした。
蒸留水100mlにスクレログルカン(ActigumCS6、Degussa社)1gを入れ、スクリュー攪拌器を使用して20℃で24時間攪拌した。引続き1500rcfで30分間遠心分離し、溶液を分離し、沈殿物に蒸留水500mlを添加した。これから得られる懸濁液を磁気攪拌器で30分攪拌し、前記工程(遠心分離、上澄み液の除去、再取り入れ、および懸濁液の攪拌)を5回繰り返した。最後の遠心分離工程の後に溶液を除去し、残留物を−20℃で凍結した。引続き凍結した残留物を0.01hPaで24時間凍結乾燥し、引続きこのうち50mgを蒸留水10ml中で懸濁した。この懸濁液に1,3−β−グルカナーゼ(Glucanex、Novozymes)の蒸留水2ml/mlを含有する酵素溶液1mlを添加し、得られた溶液をサーモハーケ粘度計(RotoviscoC1)に37℃およびせん断速度10/秒で入れた。引続き測定を開始した。
蒸留水2080gにスクレログルカンブイヨン(Degussa社)520gを入れ、高せん断攪拌器を使用して25℃で2時間攪拌し、引続き10%NaOH溶液を使用して溶液のpH値を5.2〜5.4の値に調節し、酵素粉末(SafizymCP、Safisis)2.6gを溶液に入れ、これを少量ずつ200gに分けた。個々の部分を引続きオービタル振動器に37℃で1〜6時間入れた。それぞれ1時間後に個々の部分を振動器から取り、溶液を分離し、ブルックフィールド粘度計(LVTD、30rpm)で測定した。
スクレログルカン150g(ActigumCS6、Degussa社)を蒸留水20lに80℃で2時間で高性能攪拌器を使用して攪拌しながら溶解した。引続き溶液を37℃に冷却し、SafizymCP(Safisis)24gを添加した。この懸濁液を37℃で2.5時間攪拌し、引続き溶液を再び80℃に加熱した。引続き濾過部材(FloM、CECA)500gを添加し、懸濁液をフィルタープレス(Eurofiltec)で濾過した。濾過液を80%エタノール40lに入れ、得られた凝結物をフィルターシーブ(メッシュ幅70μm)で濾過した。最後に凝結物を炉内で60℃で乾燥し、グリッドグラインダー(Retsch)で粉砕した。
Claims (22)
- β−1,3−グルカンの製造方法において、グルカン含有マトリックスを15〜60℃の温度および4.0〜10.0のpH値でβ(1,3)−グルカナーゼ活性を有するプロテインを用いて処理することを特徴とするβ−1,3−グルカンの製造方法。
- β−1,3−グルカンがβ−1,6−グルコース側鎖を有する請求項1記載の方法。
- プロテインがβ(1,3)−グルカナーゼである請求項1または2記載の方法。
- プロテインがβ(1,4)−グルカナーゼ活性を有する請求項1から3までのいずれか1項記載の方法。
- β(1,3)−グルカナーゼ活性を有するプロテインの濃度が反応混合物に対して0.001〜3.0質量%、有利に0.01〜1.0質量%、特に0.1〜0.5質量%である請求項1から4までのいずれか1項記載の方法。
- 20〜40℃の温度および特に室温で実施する請求項1から5までのいずれか1項記載の方法。
- グルカン含有マトリックスが固体含量に対して20〜99.9質量%、特に50〜99質量%の溶剤割合を有する発酵ブイヨン、培養基、懸濁液またはミセル、ヒドロコロイド、または粉末組成物である請求項1から6までのいずれか1項記載の方法。
- 発酵ブイヨンまたは培養基が溶解しない固体、細胞成分および/または細胞断片を含有する請求項1から7までのいずれか1項記載の方法。
- 水溶液としてミセル、ヒドロコロイドまたは粉末組成物を使用する請求項1から8までのいずれか1項記載の方法。
- マトリックスが溶剤として水を含有する請求項1から9までのいずれか1項記載の方法。
- 使用されるマトリックスを攪拌する請求項1から10までのいずれか1項記載の方法。
- マトリックスのpH値が5.0〜7.0である請求項1から11までのいずれか1項記載の方法。
- 酵素による処理の時間が15分〜24時間、特に1〜6時間である請求項1から12までのいずれか1項記載の方法。
- 連続的に実施する請求項1から13までのいずれか1項記載の方法。
- グルカン含有マトリックスを酵素処理の後に70〜150℃、特に80〜140℃の温度で熱処理する請求項1から14までのいずれか1項記載の方法。
- 熱処理を1〜60分、特に2〜30分実施する請求項15記載の方法。
- グルカン含有マトリックスを引続き濾過および/または遠心分離する請求項1から16までのいずれか1項記載の方法。
- グルカンを、有利に蒸発、凍結乾燥または沈殿により分離する請求項1から17までのいずれか1項記載の方法。
- 請求項1から18までのいずれか1項記載の方法により製造されたβ−1,3−グルカン。
- 改良された冷水溶解性および/または溶解しない成分の減少した割合および/または増加した粘度および/または水溶液中の減少した不透明度および/または改良された濾過能力を有する請求項19記載のβ−1,3−グルカン。
- 少なくとも未処理β−1,3−グルカン90〜99.9%、β(1,3)−グルカナーゼ活性を有するプロテイン0.005〜0.1質量%および充填剤、不活性希釈剤またはミセルのような少なくとも1つの他の内容物質0〜10質量%を含有する固体組成物。
- 化粧用途および/または身体の手入れおよび健康用手入れおよび/または栄養および食品産業および/または石油搬送への請求項1から18までのいずれか1項記載の方法により製造されたβ−1,3−グルカンの使用。
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