JP2007513609A - 腫瘍壊死因子αの調節のための組成物及び方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の理解を助けるために、多数の用語及び成句は以下のように定義される。
インターロイキン18(IL−18)は、先天性及び適応免疫応答の両方において役割を有する多機能サイトカインである。IL−18は、広範囲のTh1またはTh2関連自己免疫疾患における効果について研究されてきた(Okamuraら,Nature,378:88−91(1995);Nakanishiら,Cytokine Growth Factor Rev.,12:53−72(2001);Okamuraら,Adv.Immunol.,70:281−312(1998))。IL−1及びIL−18は構造類似性を有するIL−1ファミリーに属し、プロセシングのためにカスパーゼ1を必要とする(Bazanら,Nature,379:591(1996);及びGuら,Science,275:206−209(1997))。IL−18はまた、IL−1受容体関連キナーゼ(IRAK)の補充、腫瘍壊死因子(TNF)受容体関連因子6とのIRAK複合体の形成及びIκBα/NF−κBのカスケードの活性化を含めた類似のシグナル伝達経路を誘因する(Kojimaら,Biochem.Biophys,Res.Commun.,244:183−186(1998);Matsumotoら,Biochem.Biophys.Res.Commun.,234:454−457(1997);及びRobinsonら,Immunity,7:571−581(1997))。IL−1サイトカインファミリーのメンバーは自己免疫疾患及び炎症性疾患において病理学的役割を発揮すると考えられている。なぜならば、IL−1及びIL−18活性を阻止すると関節リウマチ及び全身炎症を持っている被験者の病気重篤度を低下させるからである(Arend,Adv.Immunol.,54:167−227(1993);Dinarello,Blood,87:2095−2147(1996);Novickら,Immunity,10:127−136(1999);及びBandaら,J.Immunol.,170:2100−2105(2003))。しかしながら、ヒトNK及びKG−1細胞系のような少数の細胞系しかIL−18に応答しないのでIL−18誘導遺伝子の研究を妨げるものがある。加えて、これらの細胞系はIL−18に応答するが、IL−18応答性を発現させるためには補助刺激因子、例えばIL−2、IL−12またはIL−15を必要とする(Ahnら,J.Immunol.,195:2125−2131(1997);Ohtsukiら,Anticancer Rev.,17:3253−3258(1997);Lauwerysら,J.Immunol.,165:1847−1853(2000);及びHoshinoら,J.Immunol.,162:51−59(1999))。補助刺激因子が必要なことから、遺伝子発現のIL−18誘導の独立評価が妨げられる。
本発明は、IL−32タンパク質、ホモログ、バリアント及びミュータント(例えば、配列番号3、4、6)をコードする核酸を提供する。幾つかの実施態様では、本発明は、ハイブリダイズし得るポリヌクケオチド配列が天然IL−32遺伝子のTNFα誘導活性を維持しているタンパク質をコードする限り、高ストリンジェシー条件下で配列番号3、4、6にハイブリダイズし得るポリヌクレオチド配列を提供する。幾つかの実施態様では、天然IL−32遺伝子のTNFα誘導活性を保持しているタンパク質は野生型IL−32と80%相同、好ましくは90%相同、より好ましくは95%相同、最も好ましくは99%相同である。特に好ましい実施態様では、IL−32生物活性を保持しているタンパク質は連続アミノ酸配列LKARMHQAIERFYDKMQNAESGRGQV(配列番号13)をコードし、野生型IL−32(IL−32α、IL−32β、IL−32γ、IL−32δ)と99%相同である核酸配列を含む。幾つかの好ましい実施態様では、核酸配列は配列番号14に記載のアミノ酸配列をコードしない。これらの実施態様のサブセットでは、核酸配列は配列番号15(エキソン4に隣接してエキソン3)に記載されている配列を含む。好ましい実施態様では、ハイブリダイゼーション条件は核酸結合複合体の融点(Tm)に基づき、定義のセクションで上記した定義「ストリンジェンシー」を与える。
他の実施態様では、本発明はIL−32ポリペプチド配列をコードするIL−32ポリヌクレオチド配列を提供する。IL−32ポリペプチド(例えば、配列番号7、8、10)は図4に記載されている。本発明の他の実施態様はIL−32タンパク質の断片、融合タンパク質または機能的均等物を提供する。本発明の更に他の実施態様では、各種IL−32ホモログ及びミュータントに相当する核酸配列は適当な宿主細胞においてIL−32ホモログ及びミュータントを発現させる組換えDNA分子を作成するために使用され得る。本発明の幾つかの実施態様ではポリヌクレオチドは天然精製産物であり得、他の実施態様ではポリペプチドは化学合成手順の生成物であり得、更に他の実施態様ではポリペプチドは原核または真核宿主を用いて(例えば、培養されている細菌、酵母、高級植物、昆虫及び哺乳動物により)産生され得る。幾つかの実施態様では、組換え産生法で使用される宿主に応じて、本発明のポリペプチドはグリコシル化されていても、またはグリコシル化されていなくてもよい。他の実施態様では、本発明のポリペプチドは当初のメチオニンアミノ酸残基をも含み得る。
本発明のポリヌクレオチドは、ポリペプチドを組換え技術により産生するために使用され得る。例えば、ポリヌクレオチドはポリペプチドを発現させるための各種発現ベクターの1つに組み込まれ得る。本発明の幾つかの実施態様では、ベクターには染色体、非染色体及び合成DNA配列(例えば、SV40の誘導体、細菌プラスミド、ファージDNA;バキュロウィルス、酵母プラスミド、プラスミドとファージDNAの組み合わせから誘導されるプラスミド、ウイルスDNA(例:ワクシニア、アデノウイルス、鶏痘ウイルス及び仮性狂犬病))が含まれるが、これらに限定されない。宿主において複製可能であり、生存可能である限り、任意のベクターが使用できると考えられる。
1)細菌ベクター:pQE70、pQE60、pQE−9(Qiagen)、pBS、pD10、phagescript、psiX174、pbluescript SK、pBSKS、pNH8A、pNH16a、pNH18A、pNH46A(Stratagene);ptrc99a、pKK223−3、pKK233−3、pDR540、pRIT5(Pharmacia)、及び
2)真核ベクター:pWLNEO、pSV12CAT、pOG44、pXT1、pSG(Stratagene)pSVK3、pBPV、pMSG、pSVL(Pharmacia)
が含まれるが、これらに限定されない。宿主中で複製可能であり、製造可能である限り、他のプラスミドまたはベクターも使用可能である。本発明の幾つかの実施態様では、哺乳動物発現ベクターは複製起点、適当なプロモーター及びエンハンサー、更に必要なリボソーム結合部位、ポリアデニル化部位、スプライスドナー及びアクセプター部位、転写終結配列及び5’フランキング非転写配列を含む。他の実施態様では、SV40スプライスに由来するDNA配列及びポリアデニル化部位が必要な非転写遺伝因子を与えるために使用され得る。
更なる実施態様で、本発明は上記構築物を含む宿主細胞を提供する。本発明の幾つかの実施態様では、前記宿主細胞は高級真核細胞(例えば、哺乳動物または昆虫細胞)である。本発明の他の実施態様では、宿主細胞は下級真核細胞(例えば、酵母細胞)である。本発明の更に別の実施態様では、宿主細胞は原核細胞(例えば、細菌細胞)であり得る。宿主細胞の具体例には大腸菌、ねずみチフス菌(Salmonella typhimurium)、枯草菌、シュードミナス属、ストレプトミセス属、ストレプトコッカス属及びスタフィロコッカス属中の各種種、並びにサッカロミセス・セレビシエ、分裂酵母(Schizosaccharomycees pombe)、ショウジョウバエS2細胞、ヨトウSf9細胞、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞、サル腎臓線維芽細胞のCOS−7株、C127、3T3、293、293T、ヒーラ細胞及びBHK細胞系が含まれるが、これらに限定されない。
本発明はまた、組換え細胞培養物からIL−32を回収し、精製するための方法を提供する。これらの方法には硫酸アンモニウムまたはエタノール沈降、酸抽出、アニオンまたはカチオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィー、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー及びレシチンクロマトグラフィーが含まれるが、これらに限定されない。本発明の他の実施態様では、必要に応じて、成熟タンパク質の立体配置を完成させる際にタンパク質リフォルディングステップを使用し得る。本発明の更に他の実施態様では、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)が最終精製ステップのために使用され得る。
本発明はまた、IL−32の全部または一部を含む融合タンパク質を提供する。従って、本発明の幾つかの実施態様では、ポリペプチドのコード配列は、異なるポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む融合遺伝子の一部として導入され得る。このタイプの発現系は、IL−32タンパク質の免疫原性断片を産生したい状況下で使用されると考えられる。
本発明の更に他の実施態様はIL−32のミュータントまたはバリアント形態を提供する。治療または予防効果、または安定性(例えば、エキソビボの保存寿命及び/またはインビボでのタンパク質分解に対する耐性)を高めるような目的でIL−32の活性を有するペプチドの構造を修飾させることができる。この修飾ペプチドは本明細書で定義されているIL−32タンパク質の活性を有するペプチドの機能均等物と見なされる。アミノ酸置換、欠失または付加等によりアミノ酸配列が変更されている修飾ペプチドが産生され得る。幾つかの実施態様では好ましいIL−32バリアントにはIL−32アゴニスト(例えば、TNFα誘導活性を有するIL−32バリアント)が含まれ、他の好ましいIL−32バリアントにはIL−32アンタゴニスト(例えば、TNFα誘導活性を持たず、野生型IL−32タンパク質のTNFα誘導活性を阻害するIL−32バリアント)が含まれる。
IL−32タンパク質を検出できるように抗体が作成され得る。前記抗体は各種免疫原を用いて作成され得る。1実施態様では、免疫原は、ヒトIL−32を認識する抗体を作成するためのヒトIL−32ペプチドである。前記抗体にはポリクローナル、モノクローナル、キメラ、単鎖、Fab断片及びFab発現ライブラリーが含まれるが、これらに限定されない。
本発明は更に、IL−32ポリヌクレオチド配列の全部または一部、IL−32ポリペプチド、抗体を含めたIL−32生物活性の阻害剤またはアンタゴニストを単独でまたは少なくとも1つの他の物質(例えば、安定化化合物)と組み合わせて含み得、滅菌の生体適合性医薬用担体中の形態で投与され得る医薬組成物を提供する。前記担体には食塩水、緩衝食塩水、デキストロース及び水が含まれるが、これらに限定されない。
本発明は、炎症誘発性サイトカイン応答(例えば、TNFα産生)を変更できる薬物をスクリーニングするための標的としてIL−32を用いるための方法及び組成物を提供する。
下記実施例は本発明の特定の好ましい実施態様及び態様を示し、更に説明するために提示するものであり、本発明の範囲を限定するものと解釈されない。
野生型ヒトA549肺癌細胞(A549−WT)はIL−18Rαを発現するが、IL−18Rβを発現しない。よって、A549細胞において機能性IL−18受容体を発現させるために、A549細胞にIL−18Rβ鎖発現ベクターをトランスフェントした。簡単に説明すると、トランスフェクションの前日に、ヒト肺癌A549細胞(3×105/ウェル)を6ウェルプレートに接種した。次いで、細胞をOpti−MEM(カリフォルニア州カールスバッドに所在のInvitrogen)(2ml)で洗浄し、新鮮培地(1ml)において25分間インキュベートした。各ウェルあたりのトランスフェクション混合物溶液を、Opti−MEM(100μl)中にリポフェクタミン2000(5μl)を混合し、その後組織培養フードにおいて5分間インキュベートすることにより調製した。次いで、プラスミドDNAのpTARGET/huIL−18Rβ(Kimら,J.Immunol.,166:148−154(2001))(2μg)を添加した後、20分間インキュベートした。トランスフェクション混合物溶液をウェルに添加し、プレートを37℃で更に4時間インキュベートした。各ウェルに10% FCSを含有する細胞培地(2ml)を添加することによりトランスフェクションを停止した。翌日、細胞をトリプシン処理し、15cmプレートに移した。細胞がプレートに接着したら、培地を800μg/mlのネオマイシン(G418,Invitrogen)を含有する新鮮培地と交換した。選択培地は3日毎に、個々のコロニーが現れる(〜10〜14日)まで新鮮培地と交換した。円形3MMペーパーの小片を滅菌し、トリプシンで湿らし、その後各コロニーを選ぶために使用した。コロニーを、1ml/ウェルの選択培地を収容している24ウェルプレートに移した。106細胞が得られるまで各コロニーを増殖させ、次いで各コロニーをトランスフェクトした遺伝子の発現についてRT−PCRにより試験し、24時間IL−18刺激後細胞培地中のIL−6及びIL−8を測定するバイオアッセイにおいて試験した。3コロニーはRT−PCR及びバイオアッセイによりポジティブであった。単クローンを得るために限界希釈培養物を作成した。
余り記載されていない遺伝子産物の機能を調べるために、NK4 cDNA(図3のIL−32α参照)をNK92細胞(参照により本明細書に含まれるとする上掲のDahlら(1992))から配列決定するためにpGEMT−Easy(Promega)にクローン化した後、インサートを大腸菌での発現のためにはpPROEX/Hta(Invitrogen)または哺乳動物発現のためにはpTARGET(Promega)に移した。組換えNKを大腸菌で発現させ、組換えタンパク質のN末端にHis6タグを導入することによりTALONアフィニティーカラム(Invitrogen)により精製した。TALONアフィニティー精製したタンパク質をサイズ排除クロマトグラフィー(Superdex 75,AKTAFPLC)にかけ、タバコエッチウイルス(Invitrogen)を用いて4℃で16時間消化して、His6タグを除去した。切断された組換えタンパク質をリン酸緩衝液(20mM,pH9)で透析した。この物質は後にイオン交換クロマトグラフィー(HiTrapQFF,AKTAFPLC)にかけた。3つの連続ステップ(Hisタグアフィニティークロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー及びイオン交換クロマトグラフィー)を用いて精製した組換えNKタンパク質は10% SDS−PAGEゲル中約20kDaの均一バンドとして流れ、その後クーマシーブルーにより染色した(図2のパネルA参照)。
IL−32遺伝子の構造及びそのヒトゲノム内での局在化を分析した。IL−32をヒトNK92細胞系からRT−PCRによりクローン化し、IL−2(50pg/ml)及びIL−15(200pg/ml)の存在下で培養した。この目的のために以下のプライマー、すなわちセンス5’−CTGTCCCGAG TCTGGACTT−3’(配列番号1)及びアンチセンス5’−GCAAAGGTGG TGGTCAGTAT C−3’(配列番号2)を用いた。図3及び5に示すように、IL−32の3つのスプライスバリアント(IL−32αは配列番号3及びジェンバンク受託番号AY495331として;IL−32βは配列番号4及びジェンバンク受託番号AY495332として;IL−32δは配列番号5及びジェンバンク受託番号AY495333として開示されている)はNK92細胞から誘導したRNAから同定され、別のスプライスバリアント(IL−32γは配列番号6及びジェンバンク受託番号BK004065として開示されている)は以前はNK4転写物(ジェンバンク受託番号NM_004221)として報告されていた。よって、IL−32は選択的mRNAスプライシングのために少なくとも4つのバリアントとして発現される。
IL−32の各種ヒト組織における発現をノーザンブロットにより調べた。簡単に説明すると、IL−32α及びアクチンcDNAインサートをプラスミドベクターから適当な制限酵素を用いて切除し、サイズ分画し、GeneClean IIキット(カリフォルニア州カールスバッドに所在のQ−BIO gene)を用いて精製した。cDNAをクレノウ酵素(マサチューセッツ州ビバリーに所在のNew England Biolabs)を用いるランダムプライミングにより32P−dCTP(マサチューセッツ州ボストンに所在のNEN Life Science)で標識した。各種組織からのヒトポリ(A)+RNAを含有する膜(ヒトMTNブロットII)をcDNAプローブとインキュベートし、その結合をオートラジオグラフィーにより検出した。図8Aに示すように、1.2kbのIL−32転写物が多くの組織が検出され、他の細胞タイプに比して免疫細胞において高レベルのIL−32が検出された。免疫組織におけるIL−32 mRNAの高い発現は、ブロットをアクチン断片で再プローブすることにより明らかなようにローディングの差に起因しなかった。
本実施例は、カッパB(IκB)のシグナル伝達分子阻害剤及びp38マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ(MAPK)に対するサイトカインIL−32の効果を評価するために実施した実験の詳細を記載する。簡単に説明すると、マウスRAW264.7マクロファージ細胞を5μg/mlのポリミキシンB(オハイオ州ベッドフォードに所在のBedford Lab)の存在下でIL−32α(50ng/ml)で指定時間(分)刺激した。細胞をキナーゼ溶解緩衝液(Hanら,J.Biol.Chem.,277:47167−47174(2002))で溶解した。細胞内容物を10% SDS−PAGEゲルで分離し、ニトロセルロース膜に移し、この膜はその後3% BSAでブロックした。膜を家兎抗IκBでプローブし、ヤギ抗アクチン(カリフォルニア州サンタクルーズに所在のSanta Cruz Biotechnology)で標準化した。図11Aに示すように、IL−32αは時間依存的にIκB分解を誘導し、処理から15分後に始まり、45分で最高レベルに達し、90分後に回復した。
組換えIL−32α(または、IL−32β、IL−32δ及びIL−32γ)を大腸において発現させ、実施例2に記載されている3連続ステップを用いて精製する。精製IL−32α(約5mg)をAffi−gel 15アガロースビーズ(カリフォルニア州ヘラクレスに所在のBio−Rad Laboratories)上に固定化する。いろいろな可能性ある受容体源(例えば、ヒト血清、またはIL−32αに応答してTNFαを分泌するRaw264.7細胞のような細胞のライゼート)をIL−32αアフィニティーカラムにかける。IL−32αアフィニティーカラムを十分に洗浄し、その後IL−32受容体を溶離緩衝液(例えば、50mM クエン酸,100mM NaCl,pH2.5)で溶離する。直ちに、溶離フラクションを2M トリス塩基で中和する。このようにして単離したIL−32結合タンパク質を更に化学分析(例えば、エドマン分解によりペプチド配列分析及び/または質量分析)及びバイオアッセイ(例えば、精製または組換え受容体をRaw264.7細胞によるIL−32α誘導TNFα分泌を阻止する能力について調べる)により特性づける。標準IL−32結合タンパク質は(TNFBPで観察されたものと類似の)IL−32生物学的活性を阻害する能力を有していると考えられる。標準IL−32結合タンパク質の他のタイプは(IL−6リガンド結合鎖で観察されたものと同様の)IL−32生物学的活性を強化する能力をも有していると考えられる。
本実施例は、マウスにおいてIL−32抗体及びIL−32アンタゴニスト(例えば、可溶性IL−32受容体、ドミナントネガティブIL−32バリアント、小分子阻害剤等)のコラーゲン誘発関節炎(CIA)を治療するための治療薬としての効果を評価するために実施した実験の詳細を記載する。簡単に説明すると、当業界で公知のように(Bandaら,Arthritis Rheum.,46:3065(2002))、CIAを8〜10週齢のDBA/1Jマウス(メーン州バーハーバーに所在のJackson Laboratories)においてII型ウシコラーゲン(CII)を皮内注射することにより誘発させる。0日目及び21日目に、各マウスに不完全フロイントアジュバント中に200μgのCII及び200μgの不活化結核菌(ミシガン州デトロイトに所在のDifco)を含有する注射液(100μl)を与える。マウスを21〜42日の間3日毎にIP注射として与えた3つの治療、すなわち2mg/マウスの正常家兎IgG;2mg/マウスのHiTrap Protein G HP(スウェデンのウプサラに所在のAmersham Pharmacia Biotech AB)を用いて作成した中和家兎抗IL−32;及び2mg/マウスの組換えIL−32アンタゴニスト(例えば、IL−32受容体−IgG1 Fc融合タンパク質またはドミナントネガティブIL−32バリアント)の1つで治療する。42日目に、マウス(各群5匹と5匹の未処理マウス)を麻酔及び頸椎脱臼により屠殺する。
肢、足首及び膝の組織学的所見を採点する。データは0〜5のスケールに基づいて炎症、パンヌス、軟膏損傷及び硬骨損傷について平均スコア及び全スコアとして表す。
IL−32αは大量のTNFα及びMIP−2を誘導し、図6Aに示すように両サイトカインの産生を用量依存的に増加させた。その後、IL−32αの生物学的活性を完全C末端を有するIL−32βの生物学的活性と比較した。IL−32βはマウスマクロファージRaw細胞系においてIL−32αと同等レベルのTNFα及びMIP−2を誘導した(図6B)。実験はすべてポリミキシンB(5μg/ml)の存在下で実施したが、大腸菌で産生させた組換えタンパク質のエンドトキシン汚染の可能性は除外できなかった。
5週齢の雌Balb/cマウスをフロイント完全アジュバント(Sigma)中に乳化させたrIL−32β抗原(20μg)を用いて免疫化した。14日目及び21日目に、マウスにフロイント完全アジュバント(Sigma)中に乳化させた抗原を静脈内及び腹腔内注射した。3回注射した後、マウスを屠殺し、脾臓を無菌的に収集し、脾細胞を融合のために得た。簡単に説明すると、1×107個の脾細胞及び1×106個のNS−1マウスミエローマ細胞(ATCC)をポリエチレングリコール1500(インディアナ州インディアナポリスに所在のRoche Applied Science)を用いて融合した。融合細胞を10% FCS及びHATを含むハイブリドーマ増殖培地において1×106/mlで再懸濁させ、96ウェルにおいて平板培養した。2週間後、ハイブリドーマの培養上清を間接ELISAで滴定した。モノクローナル抗体のクラス及びサブクラスはIMMUNO−TYPEマウスモノクローナル抗体アイソタイピングキット(カリフォルニア州サンジェゴに所在のBD Bioscience)を用いて製造業者の指示に従って決定した。
本実施例は、マウスにおいてデキストラン硫酸ナトリウム(DSS)誘発大腸炎を治療するための治療薬としてのIL−32抗体及びIL−32アンタゴニスト(例えば、可溶性IL−32受容体、ドミナントネガティブIL−32バリアント、小分子阻害剤等)の効果を評価するために実施した実験の詳細を説明する。
本実施例は、熱死滅させた座瘡プロピオニバクテリウム(P.acnes)でプライミングしたマウス(Fas/FasL媒介肝疾患のモデル)においてLPS誘発肝障害を治療するための治療薬としてのIL−32抗体及びIL−32アンタゴニスト(例えば、可溶性IL−32受容体、ドミナントネガティブIL−32バリアント、小分子阻害剤等)の効果を評価するために実施した実験の詳細を説明する。
本実施例は、虚血性損傷に応答して組織血管新生を刺激するための治療薬としてのIL−32抗体及びIL−32アンタゴニスト(例えば、可溶性IL−32受容体、ドミナントネガティブIL−32バリアント、小分子阻害剤等)の効果を評価するために実施した実験の詳細を説明する。
Claims (44)
- 配列番号15と少なくとも80%同一であり、IL−32をコードし、IL−32のエキソン3及びエキソン4を実質的に隣接関係で含む配列を含む精製核酸。
- IL−32が配列番号7のアミノ酸配列を含むα−イソ型である請求項1に記載の核酸。
- IL−32が配列番号8のアミノ酸配列を含むβ−イソ型である請求項1に記載の核酸。
- IL−32が配列番号10のアミノ酸配列を含むδ−イソ型である請求項1に記載の核酸。
- 配列がIL−32のイントロン4を欠いている請求項1に記載の核酸。
- 配列が配列15と少なくとも90%同一である請求項1に記載の核酸。
- 配列が配列番号3、配列番号4及び配列番号6からなる群から選択される請求項1に記載の核酸。
- 配列が異種プロモーターに機能し得る形で連結されている請求項1に記載の核酸。
- 核酸がベクター内に含まれている請求項8に記載の核酸。
- 請求項9に記載のベクターを含む宿主細胞。
- 請求項1の核酸によりコードされる精製タンパク質。
- IL−32が配列番号7のアミノ酸配列を含むα−イソ型である請求項11に記載のタンパク質。
- IL−32が配列番号8のアミノ酸配列を含むβ−イソ型である請求項11に記載のタンパク質。
- IL−32が配列番号10のアミノ酸配列を含むδ−イソ型である請求項1に記載のタンパク質。
- IL−32がγ−イソ型でない請求項11に記載のタンパク質。
- IL−32が配列番号14のアミノ酸配列を含まない請求項11に記載のタンパク質。
- IL−32が細菌細胞、酵母細胞、昆虫細胞及び哺乳動物細胞からなる群から選択される細胞において発現される組換えタンパク質である請求項11に記載のタンパク質。
- 組換えタンパク質が融合タンパク質である請求項17に記載のタンパク質。
- 請求項11に記載のタンパク質に結合する抗体。
- 抗体がモノクローナル抗体である請求項19に記載の抗体。
- 請求項20に記載のモノクローナル抗体のFab断片。
- モノクローナル抗体が32−4及び32−9から選択される請求項20に記載のモノクローナル抗体。
- モノクローナル抗体がヒト化モノクローナル抗体である請求項20に記載のモノクローナル抗体。
- モノクローナル抗体が標的細胞によるIL−32誘導TNFα産生を抑制する請求項20に記載のモノクローナル抗体。
- モノクローナル抗体が標的細胞においてIL−32誘導IκB分解を抑制する請求項20に記載のモノクローナル抗体。
- モノクローナル抗体が標的細胞において迅速なIL−32誘導p38 MAPKリン酸化を抑制する請求項20に記載のモノクローナル抗体。
- 少なくとも1つの細胞をTNFα産生を誘導するのに適した条件下でIL−32タンパク質と接触させることを含むTNFα産生の誘導方法。
- IL−32タンパク質をα−イソ型、β−イソ型、γ−イソ型及びδ−イソ型からなる群から選択される請求項27に記載の方法。
- 少なくとも1つの細胞が白血球からなる請求項27に記載の方法。
- 白血球を単核及びマクロファージからなる群から選択する請求項29に記載の方法。
- a)被験者及びIL−32に結合する抗体を用意し、b)前記被験者に前記抗体を投与することを含む被験者の治療方法。
- IL−32をα−イソ型、β−イソ型、γ−イソ型及びδ−イソ型からなる群から選択する請求項31に記載の方法。
- 被験者が自己免疫疾患を有している、自己免疫疾患を有していると疑われる、または自己免疫疾患を有する恐れがある請求項31に記載の方法。
- 自己免疫疾患が多発性硬化症、重症筋無力症、自己免疫性神経障害、自己免疫性ぶどう膜炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、原発性胆汁性肝硬変、自己免疫性肝炎、自己免疫性溶血性貧血、悪性貧血、自己免疫性血小板減少症、1型糖尿病、グレーブス病、橋本病、自己免疫性卵巣炎及び睾丸炎、側頭動脈炎、抗リン脂質症候群、脈管炎、ベーチェット病、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、強皮症、多発性筋炎、皮膚筋炎、脊椎関節症、シェーグレン症候群、乾せん、疱疹状皮膚炎、尋常性天疱瘡及び白斑からなる群から選択される請求項33に記載の方法。
- 抗体がヒトモノクローナル抗体及びヒト化マウスモノクローナル抗体からなる群から選択される請求項31に記載の方法。
- 投与が自己免疫疾患の少なくとも1つの症状を緩和するのに適した条件下で行われる請求項33に記載の方法。
- 被験者が敗血症患者である請求項31に記載の方法。
- a)請求項11に記載のIL−32タンパク質及び少なくとも1つの薬物候補を用意すること、
b)前記IL−32タンパク質の少なくとも1つの活性に対する前記薬物候補の効果を分析すること
を含むIL−32阻害剤のスクリーニング方法。 - IL−32がα−イソ型、β−イソ型、γ−イソ型及びδ−イソ型からなる群から選択される組換えタンパク質である請求項38に記載の方法。
- 薬物候補がIL−32反応性モノクローナル抗体及びドミナントネガティブIL−32バリアントからなる群から選択される請求項38に記載の方法。
- IL−32タンパク質の少なくとも1つの活性がTNFα発現の上方制御を含む請求項38に記載の方法。
- a)被験者及び請求項11に記載のIL−32タンパク質を用意すること、
b)前記IL−32タンパク質を前記被験者に投与すること
を含む被験者の治療方法。 - IL−32がα−イソ型、β−イソ型、γ−イソ型及びδ−イソ型からなる群から選択される組換えタンパク質である請求項42に記載の方法。
- 被験者が癌を有している、癌を有していると疑われる、または癌を有する恐れがある請求項42に記載の方法。
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Family Cites Families (29)
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US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
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GB9214857D0 (en) * | 1992-07-13 | 1992-08-26 | Medical Res Council | Human nucleic acid fragments and their use |
IL121860A0 (en) | 1997-08-14 | 1998-02-22 | Yeda Res & Dev | Interleukin-18 binding proteins their preparation and use |
US6706491B1 (en) | 1999-04-09 | 2004-03-16 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Reagents and methods for identifying and modulating expression of genes regulated by p21 |
AU4347701A (en) | 2000-03-01 | 2001-09-12 | Corixa Corp | Compositions and methods for the detection, diagnosis and therapy of hematological malignancies |
EP1341804A4 (en) * | 2000-11-17 | 2005-08-24 | Nuvelo Inc | NEW NUCLEIC ACIDS AND POLYPEPTIDES |
WO2002048310A2 (en) | 2000-12-15 | 2002-06-20 | Genetics Institute, Llc | Methods and compositions for diagnosing and treating rheumatoid arthritis |
AU2001256599A2 (en) | 2001-04-18 | 2002-10-28 | Serono Genetics Institute S.A. | Full-length human cDNAs encoding potentially secreted proteins |
CA2448253A1 (en) * | 2001-05-25 | 2002-11-28 | Genset S.A. | Human cdnas and proteins and uses thereof |
WO2002096943A1 (en) | 2001-05-25 | 2002-12-05 | Asahi Kasei Kabushiki Kaisha | Stat6-activating genes |
US20030092616A1 (en) | 2001-05-25 | 2003-05-15 | Akio Matsuda | STAT6 activation gene |
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US20030073623A1 (en) * | 2001-07-30 | 2003-04-17 | Drmanac Radoje T. | Novel nucleic acid sequences obtained from various cDNA libraries |
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Non-Patent Citations (4)
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JPN6009057390, "Genome Biology", 2002, Vol.3, No.7, research0035.1−0035.17 * |
JPN6009057391, "Journal of Immunology", 1992, Vol.148, pp.597−603 * |
JPN6009057392, ""Homo sapiens natural killer cell transcript 4, mRNA (cDNA clone MGC:32101 IMAGE:4873608)", Accession No. BC018782, BC018782.1, [online], National Center for Biotechnology Information, 2003年 * |
JPN6010049133, "Science", September 2003, Vol.301, pp.1895−1898 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2012050446A (ja) * | 2003-11-12 | 2012-03-15 | Regents Of The Univ Of Colorado A Body Corporate | 腫瘍壊死因子αの調節のための組成物及び方法 |
JP2016529881A (ja) * | 2013-07-03 | 2016-09-29 | イムノキュア アーゲーImmunoqure Ag | ヒト抗il−32抗体 |
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