JP2007512021A5 - - Google Patents
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Description
一実施形態において、上記方法は、サンプルから、例えば核酸増幅によって、核酸を合成する工程を包含する。好ましい核酸増幅反応は、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、リガーゼ連鎖反応(LCR)、鎖置換増幅(Strand Displacement Amplification)(SDA)、転写媒介性増幅(Transcription−Mediated Amplification)(TMA)、ローリングサークル増幅(Rolling Circle Amplification)(RCA)、およびQβレプリカーゼ(Q beta replicase)からなる群より選択される。
Claims (59)
- Staphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種の分析のために適切な核酸塩基配列を含む、PNAプローブ。
- Staphylococcus aureus以外の2種以上のStaphylococcus種の分析のために適切な核酸塩基配列を含む、PNAプローブ。
- 請求項1〜2に記載のPNAプローブであって、前記Staphylococcus種の標的配列は、rRNA、rDNA、またはrRNAの相補体もしくはrDNAの相補体である、PNAプローブ。
- 請求項1〜2に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus epidermidisの分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus epidermidis rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus epidermidis rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1〜2に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus hominisの分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus hominis rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus hominis rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1〜2に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus haemolyticusの分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus haemolyticus rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus haemolyticus rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1〜2に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus lugdunensisの分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus lugdunensis rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus lugdunensis rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1〜2に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus saprophyticusの分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus saprophyticus rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus saprophyticus rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus epidermidisと、Staphylococcus aureus以外の1種以上の他のStaphylococcus種との分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus epidermidis rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus epidermidis rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus hominisと、Staphylococcus aureus以外の1種以上の他のStaphylococcus種との分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus hominis rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus hominis rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus haemolyticusと、Staphylococcus aureus以外の1種以上の他のStaphylococcus種との分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus haemolyticus rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus haemolyticus rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus lugdunensisと、Staphylococcus aureus以外の1種以上の他のStaphylococcus種との分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus lugdunensis rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus lugdunensis rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1に記載のPNAプローブであって、Staphylococcus saprophyticusと、Staphylococcus aureus以外の1種以上の他のStaphylococcus種との分析のために適切な核酸塩基配列を含み、該PNAプローブは、Staphylococcus saprophyticus rRNAの標的配列もしくはStaphylococcus saprophyticus rDNAの標的配列または該rRNAの標的配列の相補体もしくは該rDNAの標的配列の相補体に対して、相補的である、PNAプローブ。
- 請求項1、2、または9〜13に記載のPNAプローブであって、該プローブの少なくとも一部は、
TCT−AAC−ATG−TTC−TTT(配列番号1)、
TCT−AGT−CTG−TTC−TTT(配列番号2)、
TCT−AAT−ATA−TTC−CTT(配列番号3)、
TCT−AAT−ATA−TAC−TTT(配列番号4)、
GCT−CCA−AAT−GGT−TAC(配列番号5)
TCC−TCG−TCT−GTT−CGC(配列番号6)、
CTC−CTT−ATC−TGT−TCG−C(配列番号7)、および
CTC−CTT−GTC−TGT−TCG−C(配列番号8)、
CTT−CTC−ATC−TGT−TCG−C(配列番号9)、
TCC−TCG−TCC−GTT−CGC(配列番号10)、
TCC−TTG−TCC−GTT−CGC(配列番号11)、
から選択される核酸塩基配列もしくはその相補体に対して少なくとも約86%同一である、PNAプローブ。 - 請求項1、2、または9〜13に記載のPNAプローブであって、該プローブの少なくとも一部は、
TCT−AAC−ATG−TTC−TTT(配列番号1)、
TCT−AGT−CTG−TTC−TTT(配列番号2)、
TCT−AAT−ATA−TTC−CTT(配列番号3)、
TCT−AAT−ATA−TAC−TTT(配列番号4)、
GCT−CCA−AAT−GGT−TAC(配列番号5)
TCC−TCG−TCT−GTT−CGC(配列番号6)、
CTC−CTT−ATC−TGT−TCG−C(配列番号7)、および
CTC−CTT−GTC−TGT−TCG−C(配列番号8)、
CTT−CTC−ATC−TGT−TCG−C(配列番号9)、
TCC−TCG−TCC−GTT−CGC(配列番号10)、
TCC−TTG−TCC−GTT−CGC(配列番号11)、
から選択される、PNAプローブ。 - 請求項1、2、または9〜13に記載のPNAプローブであって、前記プローブ配列は、長さが8サブユニット〜17サブユニットである、PNAプローブ。
- 請求項1、2、または9〜13に記載のPNAプローブであって、該プローブは、少なくとも1つの検出可能な部分で標識されている、PNAプローブ。
- 請求項17に記載のPNAプローブであって、前記検出可能な部分は、結合体、分枝型検出系、発色団、フルオロフォア、スピン標識、放射性同位体、酵素、ハプテン、アクリジニウムエステル、および発光化合物からなる群より選択される、PNAプローブ。
- 請求項17に記載のPNAプローブであって、該PNAプローブは、自己報告プローブである、PNAプローブ。
- 請求項19に記載のPNAプローブであって、該プローブは、PNA Linear Beaconである、PNAプローブ。
- 請求項1、2、または9〜13に記載のPNAプローブであって、該PNAプローブは、標識されていない、PNAプローブ。
- 請求項21に記載のPNAプローブであって、該プローブは、支持体に結合されている、PNAプローブ。
- 請求項1、2、または9〜13に記載のPNAプローブであって、該プローブは、スペーサーまたはリンカーをさらに含む、PNAプローブ。
- 請求項1、2、または9〜13に記載のPNAプローブであって、インサイチュハイブリダイゼーションが、Staphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種の分析のために使用される、PNAプローブ。
- 請求項1〜24に記載の1つ以上のPNAプローブと、Staphylococcus aureusの分析のための少なくとも1つのPNAプローブと、を含む、PNAプローブセット。
- 請求項25に記載のPNAプローブセットであって、前記プローブは、2種以上のStaphylococcus種の独立した分析のために別々に標識されている、PNAプローブセット。
- 請求項25に記載のPNAプローブセットであって、前記1つ以上のPNAプローブはPNAプローブを含み、該PNAプローブにおいて各プローブの少なくとも一部は、
TCC−TCG−TCT−GTT−CGC(配列番号6)、
CTC−CTT−ATC−TGT−TCG−C(配列番号7)、
CTC−CTT−GTC−TGT−TCG−C(配列番号8)、
CTT−CTC−ATC−TGT−TCG−C(配列番号9)、
TCC−TCG−TCC−GTT−CGC(配列番号10)、
TCC−TTG−TCC−GTT−CGC(配列番号11)、
から選択される、PNAプローブセット。 - 請求項25に記載のPNAプローブセットであって、前記Staphylococcus
aureusの分析のための少なくとも1つのPNAプローブは、請求項1〜24に記載の1つ以上のPNAプローブとは別々に標識されている、PNAプローブセット。 - 請求項28に記載のPNAプローブセットであって、前記Staphylococcus
aureusの分析のための少なくとも1つのPNAのうちの1つの少なくとも一部は、GCT−TCT−CGT−CCG−TTCから選択される、PNAプローブセット。 - 請求項1〜24に記載の1つ以上のPNAプローブと、Staphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種の分析のための少なくとも1つのPNAブロッキングプローブと、を含む、PNAプローブセット。
- 請求項30に記載のPNAプローブセットであって、Staphylococcus aureusの分析のためのPNAブロッキングプローブをさらに含む、PNAプローブセット。
- 請求項31に記載のPNAプローブセットであって、前記Staphylococcus
aureusの分析のためのPNAブロッキングプローブのうちの少なくとも一部は、
TCC−TCG−TCT−GTT−CGC(配列番号6)、
CTC−CTT−ATC−TGT−TCG−C(配列番号7)、
CTC−CTT−GTC−TGT−TCG−C(配列番号8)、
CTT−CTC−ATC−TGT−TCG−C(配列番号9)、
TCC−TCG−TCC−GTT−CGC(配列番号10)、
TCC−TTG−TCC−GTT−CGC(配列番号11)、
から選択される、PNAプローブセット。 - サンプル中にあるStaphylococcus aureus以外のStaphylococcus種の分析のための方法であって、該方法は、
a)請求項1〜24に記載のPNAプローブのうちの少なくとも1つを、該サンプルと接触させる工程、
b)該PNAプローブを、該サンプル中にあるStaphylococcus aureus以外のStaphylococcus種の標的配列に対してハイブリダイズさせる工程、および
c)該ハイブリダイゼーションを検出する工程であって、該ハイブリダイゼーションの検出は、該サンプルにおけるStaphylococcus aureus以外のStaphylococcus種の存在、正体、および/または量を示す、工程、
を包含する、方法。 - 2種以上のStaphylococcus種の分析のための方法であって、該方法は、
a)請求項1〜24に記載のPNAプローブセットを、該サンプルと接触させる工程、
b)該PNAプローブを、該サンプルにあるStaphylococcus種の標的配列に対してハイブリダイズさせる工程、および
c)該ハイブリダイゼーションを検出する工程であって、該ハイブリダイゼーションの検出は、該サンプルにおけるStaphylococcus種の存在、正体、および/または量を示す、工程、
を包含する、方法。 - 請求項33〜34に記載の方法であって、前記2種以上のStaphylococcus種は、Staphylococcus aureusと、Staphylococcus
aureus以外の1種以上のStaphylococcus種とである、方法。 - Staphylococcus aureus以外のStaphylococcus種のコホートの分析のための、請求項33〜35に記載の方法。
- 請求項36に記載の方法であって、前記検出されるStaphylococcus aureus以外のStaphylococcus種のコホートは、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌、臨床的に重要なコアグラーゼ陰性ブドウ球菌、または臨床的に重要なコアグラーゼ陰性ブドウ球菌の部分集合である、方法。
- 請求項33〜37に記載の方法であって、前記プローブは、独立して検出可能であるか、非独立的に検出可能であるか、または独立して検出可能であるものと非独立的に検出可能であるものとの組み合わせであり、該プローブは、わずか一塩基だけ互いに異なり、該プローブは、系統的に関連する生物の部分的に保存された標的領域に対して相補的であるかまたは実質的に相補的である、方法。
- 請求項38に記載の方法であって、プローブまたはプローブセットが、Staphylococcus aureus特異的プローブと、Staphylococcus schleiferi標的との間の交差ハイブリダイゼーションを排除または減少するために使用される、方法。
- 請求項33〜39に記載の方法であって、Staphylococcus aureusと、Staphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種とが、同時かつ独立的に検出される、方法。
- 請求項33〜40に記載の方法であって、前記分析は、インサイチュで行われる、方法。
- 請求項41に記載の方法であって、前記分析は、蛍光インサイチュハイブリダイゼーションにより行われる、方法。
- 請求項33〜40に記載の方法であって、該方法は、標的配列を含む核酸を検出するために使用され、該核酸は、反応において合成または増幅されている、方法。
- 請求項43に記載の方法であって、好ましい核酸合成反応または核酸増幅反応は、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)、リガーゼ連鎖反応(LCR)、鎖置換増幅(SDA)、転写媒介性増幅(TMA)、ローリングサークル増幅(RCA)、およびQβレプリカーゼからなる群より選択される、方法。
- 請求項33〜44に記載の方法であって、該方法は、
非標的配列に対する前記PNAプローブのハイブリダイゼーションを減少または排除するために、少なくとも1つのブロッキングプローブを添加する工程、
をさらに包含する、方法。 - 請求項33〜40に記載の方法であって、前記標的配列は、表面に固定される、方法。
- 請求項33〜40に記載の方法であって、前記PNAプローブは、表面に固定される、方法。
- 請求項33〜40に記載の方法であって、前記PNAプローブは、アレイの一構成成分である、方法。
- 請求項33〜48に記載の方法であって、前記サンプルは、生物学的サンプルである、方法。
- 請求項49に記載の方法であって、前記生物学的サンプルは、血液、尿、分泌物、汗、痰、糞便、粘液、またはそれらの培養物である、方法。
- サンプルにおけるStaphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種の分析のためのアッセイを実施するために適切なキットであって、該キットは、
a)請求項1〜24に記載のPNAプローブ、および
b)該アッセイを実施するために必要な他の試薬または組成物、
を備える、キット。 - 請求項51に記載のキットであって、必要に応じてサンプル中に存在する、Staphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種と、少なくとも1種の他の微生物とが、独立して、検出、同定、および/または定量される、キット。
- 請求項52に記載のキットであって、必要に応じてサンプル中に存在する、Staphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種と、Staphylococcus aureusとが、独立して、検出、同定、および/または定量される、キット。
- 請求項51〜53に記載のキットであって、必要に応じてサンプル中に存在する、Staphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種が、検出、同定、および/または定量され、抗菌剤に対する該Staphylococcus種の感受性が、決定される、キット。
- 請求項51〜54に記載のキットであって、検出されるStaphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種は、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌、臨床的に重要なコアグラーゼ陰性ブドウ球菌、または臨床的に重要なコアグラーゼ陰性ブドウ球菌の部分集合である、キット。
- 請求項51〜55に記載のキットであって、該キットは、インサイチュハイブリダイゼーションにおいて使用される、キット。
- 請求項56に記載のキットであって、該キットは、Staphylococcus aureus以外の1種以上のStaphylococcus種とStaphylococcus aureusとの、同時の独立的(多重)同定のための蛍光インサイチュハイブリダイゼーションアッセイにおいて使用される、キット。
- 請求項51〜55に記載のキットであって、該キットは、リアルタイムPCRアッセイのために使用される、キット。
- 請求項51〜58に記載のキットであって、該キットは、臨床標本またはその培養物などの、臨床サンプルを検査するために使用される、キット。
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