JP2007320867A - 消化性潰瘍の予防・治療剤および食品 - Google Patents
消化性潰瘍の予防・治療剤および食品 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2007320867A JP2007320867A JP2006150735A JP2006150735A JP2007320867A JP 2007320867 A JP2007320867 A JP 2007320867A JP 2006150735 A JP2006150735 A JP 2006150735A JP 2006150735 A JP2006150735 A JP 2006150735A JP 2007320867 A JP2007320867 A JP 2007320867A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- matsutake
- culture
- ulcer
- extract
- mycelium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Abandoned
Links
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
【課題】マツタケ(Tricholoma matsutake)を利用して、安全で、長期間投与・摂取可能な、消化性潰瘍の予防・治療のための薬剤および食品を提供する。
【解決手段】マツタケ(Tricholoma matsutake)、特にはマツタケFERM BP−7304株、の菌糸体、培養物(Broth)または子実体(胞子を含む)のいずれかをそのまま、あるいはその乾燥物、あるいはそれらの抽出物(例えば熱水抽出液、アルカリ溶液抽出液、またはそれら抽出液の有機溶媒抽出液)を含有する、消化性潰瘍(非ステロイド性抗炎症剤誘発タイプやストレスによる誘発タイプの潰瘍など)の予防・治療のための薬剤および食品。
【選択図】なし
【解決手段】マツタケ(Tricholoma matsutake)、特にはマツタケFERM BP−7304株、の菌糸体、培養物(Broth)または子実体(胞子を含む)のいずれかをそのまま、あるいはその乾燥物、あるいはそれらの抽出物(例えば熱水抽出液、アルカリ溶液抽出液、またはそれら抽出液の有機溶媒抽出液)を含有する、消化性潰瘍(非ステロイド性抗炎症剤誘発タイプやストレスによる誘発タイプの潰瘍など)の予防・治療のための薬剤および食品。
【選択図】なし
Description
本発明は、動物やヒトにおける消化性潰瘍の予防・治療のための薬剤および食品に関する。本発明の薬剤および食品は、医薬品として投与することができるだけでなく、種々の形態、例えば、保健機能食品(特定保健用食品、栄養機能食品)やいわゆる健康食品(いずれも飲料を含む)、または飼料として飲食物の形で与えることも可能である。さらには、口中に一時的に含むものの、そのほとんどを口中より吐き出す形態、例えば、歯磨き剤、洗口剤、チューインガム、うがい剤などの形で与えることも、あるいは鼻から吸引させる吸入剤の形で与えることも可能である。
消化性潰瘍は、胃液・消化液の攻撃力と、胃・十二指腸等の消化管粘膜の防御力の不均衡により発生し、消化管粘膜壁が傷つけられたり、抉られたりして、病変部位が粘膜下層より深くなった状態をいう。その病因として、(i)ヘリコバクター・ピロリ(Helicobacter pylori)感染、(ii)非ステロイド性抗炎症剤(例えばアスピリン、ジクロフェナク、インドメタシン、イブプロフェン、ケトプロフェン、等)の投与、(iii)胃酸過多による消化活性の亢進、(iv)クローン病などが挙げられているものの、その病態や進行は複雑で多岐にわたり、いまだ不明の部分が多い。
消化性潰瘍の症状としては、炎症や痙攣、穿孔に伴う潰瘍痛、腸内ガス産生に伴う腹部膨満感や重圧感、悪心や嘔吐、食欲不振、胸焼け、出血(吐血、下血)などがある。そのため、日常動作が辛くなり、QOL(quality of life;生活の質)に大きな影響を与える。本潰瘍は40〜50歳代に多くみられ、男性に多く発生する。平成8年10月の患者調査(厚生労働省)によれば、日本の消化性潰瘍患者数は約116万人と推定されている。近年、除菌治療の発達により、ヘリコバクター・ピロリ感染陽性率が低下する一方で、高齢者の生活習慣病罹患時の非ステロイド性抗炎症剤の使用頻度が増加しており、高齢社会の到来に伴う発症リスク増大が危惧されている。
消化性潰瘍の治療では、食事療法と薬物療法を併用した内科的治療が基本とされる。そして薬物療法では、ヘリコバクター・ピロリを除菌する抗菌剤、攻撃因子を抑制する薬剤(例えば制酸剤、抗コリン剤、抗ガストリン剤、H2−ブロッカー、プロトンポンプ阻害剤、等)、防御因子を増強する薬剤(例えば粘膜保護剤、組織修復促進剤、粘液分泌促進剤、粘膜循環改善剤、等)、粘膜血流や粘液分泌を調節する薬剤が用いられている。これら治療により、症状はいったん治癒するものの、易再発性という問題点が指摘されている。さらに、ヘリコバクター・ピロリの除菌が、逆流性食道炎や胃粘膜の糜爛の発生、不完全な除菌による耐性菌出現、副作用の増加等につながるおそれがあることも指摘されている。それゆえ新規の抗潰瘍のための薬剤や食品の開発が期待されている。
ところで、きのこ類は多用な生物活性を有することから、古くから日本人の健康に寄与してきた。例えばマツタケ〔Tricholoma matsutake(S. Ito & Imai)Sing.〕については、特公昭57−1230号公報(特許文献1)に、マツタケ菌糸体の液体培養物を熱水または希アルカリ溶液で抽出して得られる抽出液から分離精製されたエミタニン−5−A、エミタニン−5−B、エミタニン−5−C、およびエミタニン−5−Dに、サルコーマ180細胞の増殖阻止作用があることが開示され、特許第2767521号公報(特許文献2)には、マツタケ子実体の水抽出物から分離精製された分子量20〜21万のタンパク質(サブユニットの分子量10〜11万)が抗腫瘍活性を有することが開示されている。
さらに、本発明者らにより、マツタケ熱水抽出液、マツタケアルカリ溶液抽出液、あるいはこれら抽出液の陰イオン交換樹脂吸着画分が免疫増強活性を有することが見出されている(国際公開第01/49308号パンフレット(特許文献3))。本発明者らはまた、マツタケの特定の菌糸体由来の部分精製画分にストレス負荷回復促進作用があることも見出した(特開2003−050227号公報(特許文献4))。
上述のようにマツタケには抗腫瘍活性、免疫増強活性、ストレス負荷回復促進作用などの種々の生理活性が含まれることが見出されている。しかしながら、本発明者の知る限りにおいて、マツタケが消化性潰瘍に対して優れた予防・治療効果を有するということについては、これまで報告がされていない。
本発明者は、マツタケが消化性潰瘍に対し優れた予防・治療効果を有することを新たに見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち本発明の課題は、マツタケを利用した消化性潰瘍の予防・治療剤および食品を提供することにある。
本発明は、マツタケ(Tricholoma matsutake)またはその抽出物を含む、消化性潰瘍の予防・治療剤および食品に関する。
また本発明は、マツタケ(T. matsutake)が菌糸体、培養物(Broth)または子実体(胞子を含む)である、上記消化性潰瘍の予防・治療剤および食品に関する。
また本発明は、マツタケ(T. matsutake)がFERM BP−7304株である、上記消化性潰瘍の予防・治療剤および食品に関する。
また本発明は、マツタケ(T. matsutake)がFERM BP−7304株の菌糸体の乾燥粉末である、上記消化性潰瘍の予防・治療剤および食品に関する。
また本発明は、マツタケ抽出物が、FERM BP−7304株の菌糸体の熱水抽出液、アルカリ溶液抽出液、またはそれら抽出液の有機溶媒抽出液である、上記消化性潰瘍の予防・治療剤および食品に関する。
本発明により、安全で、安定的に大量供給が可能な、消化性潰瘍の予防・治療のための薬剤および食品が提供される。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品に用いられるマツタケ〔Tricholoma matsutake(S. Ito & Imai)Sing.〕は、菌糸体、培養物(Broth)、子実体のいずれの形態のものも用いることができ、生でも乾燥したものでもよい。本発明では子実体は胞子も含むものとする。これら菌糸体、培養物(Broth)、子実体の各抽出物も用いることができる。
本発明では特にマツタケFERM BP−7304株が好ましく用いられる。
マツタケFERM BP−7304株は、本出願人によって新規菌株として従前に出願され(国際公開第02/30440号パンフレット)、独立行政法人産業技術総合研究所((旧)工業技術院生命工学研究所)に平成12年9月14日に寄託されている。このマツタケFERM BP−7304株は、京都府亀岡市で採取したマツタケCM6271株から子実体組織を切り出し、試験管内で培養することにより菌糸体継代株を得たものであり、株式会社クレハ 生物医学研究所で維持している。
マツタケFERM BP−7304株の子実体の形態は、「原色日本新菌類図鑑(1)」(今関六也・本郷次雄編、保育社、昭和32年発行)プレート(plate)9頁および26頁に記載のマツタケ子実体に合致するものであった。
マツタケFERM BP−7304株の継代は、エビオス寒天斜面培地で実施することができる。マツタケFERM BP−7304株の菌糸体をエビオス寒天平板培地に接種すると、白色の菌糸が放射状に密に生育し、大きなコロニーを形成する。走査型電子顕微鏡で観察すると、太さ1〜2μmの枝状の菌糸体が無数に存在し、菌糸体側部に数μm程度の突起物が時々みられる。該菌株の菌糸体を大量培養する場合は、液体培地に接種し、静置培養、振盪培養、タンク培養等により行うことができる。
なお、マツタケFERM BP−7304株は、もっぱら菌糸体の形状で継代維持または培養することが可能であるが、子実体の形状となることもある。
マツタケFERM BP−7304株の菌学的性質は以下のとおりである。
(1)麦芽エキス寒天培地における培養的・形態的性質
白色の菌糸が放射状に密に生育してコロニーを形成する。接種30日目のコロニー径は約4cmである。
白色の菌糸が放射状に密に生育してコロニーを形成する。接種30日目のコロニー径は約4cmである。
(2)ツアペック寒天培地、オートミール寒天培地、合成ムコール寒天培地、およびフェノールオキシダーゼ反応検定用培地における培養的・形態的性質
上記いずれの培地においても、接種後1ヶ月経過しても菌糸の発育はほとんどみられない。
上記いずれの培地においても、接種後1ヶ月経過しても菌糸の発育はほとんどみられない。
(3)YpSs寒天培地における培養的・形態的性質
白色の光沢を有し、マット状に生育する。接種30日目の生育距離は約5mmである。
白色の光沢を有し、マット状に生育する。接種30日目の生育距離は約5mmである。
(4)グルコース・ドライイースト寒天培地における培養的・形態的性質
白色の光沢を有し、マット状に生育する。接種30日目の生育距離は約2mmである。
白色の光沢を有し、マット状に生育する。接種30日目の生育距離は約2mmである。
(5)最適生育温度および生育範囲
滅菌処理した液体培地(3%グルコース、0.3%酵母エキス、pH7.0)10mLの入った100mL容三角フラスコに、マツタケFERM BP−7304株の種菌約2mgを接種し、5〜35℃の種々の温度でそれぞれ培養し、28日目にフラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定した。その結果、菌体質量は5〜15℃の範囲で直線的に増加し、15〜25℃の範囲で緩やかに増加した。27.5℃以上ではほとんど増殖しなかった。最適生育温度は15〜25℃である。
滅菌処理した液体培地(3%グルコース、0.3%酵母エキス、pH7.0)10mLの入った100mL容三角フラスコに、マツタケFERM BP−7304株の種菌約2mgを接種し、5〜35℃の種々の温度でそれぞれ培養し、28日目にフラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定した。その結果、菌体質量は5〜15℃の範囲で直線的に増加し、15〜25℃の範囲で緩やかに増加した。27.5℃以上ではほとんど増殖しなかった。最適生育温度は15〜25℃である。
(6)最適生育pHおよび生育範囲
液体培地(3%グルコース、0.3%酵母エキス)のpHを1モル/L塩酸または1モル/L水酸化カリウムで調整し、pH3.0〜8.0の種々の培地を調製して菌体の生育pHを調べた。すなわち各培地をフィルター滅菌し、培地10mLを滅菌済100mL容三角フラスコに分注した。マツタケFERM BP−7304株の種菌約2mgを接種後、22℃で培養し、フラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定した。その結果、菌体の生育限界はpH3.0〜7.0、最適生育pHは4.0〜6.0であった。
液体培地(3%グルコース、0.3%酵母エキス)のpHを1モル/L塩酸または1モル/L水酸化カリウムで調整し、pH3.0〜8.0の種々の培地を調製して菌体の生育pHを調べた。すなわち各培地をフィルター滅菌し、培地10mLを滅菌済100mL容三角フラスコに分注した。マツタケFERM BP−7304株の種菌約2mgを接種後、22℃で培養し、フラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定した。その結果、菌体の生育限界はpH3.0〜7.0、最適生育pHは4.0〜6.0であった。
(7)対峙培養による帯線形成の有無
エビオス寒天平板培地に、マツタケFERM BP−7304株のブロック(約3mm×3mm×3mm)と、公知の13種類のマツタケ株(例えば、IFO 6915株;(財)発酵研究所)の各ブロック(約3mm×3mm×3mm)とを、約2cm間隔に対峙して植菌し、22℃で3週間培養した後、両コロニー境界部に帯線が生じるか否かを判定した。
エビオス寒天平板培地に、マツタケFERM BP−7304株のブロック(約3mm×3mm×3mm)と、公知の13種類のマツタケ株(例えば、IFO 6915株;(財)発酵研究所)の各ブロック(約3mm×3mm×3mm)とを、約2cm間隔に対峙して植菌し、22℃で3週間培養した後、両コロニー境界部に帯線が生じるか否かを判定した。
その結果、マツタケFERM BP−7304株は、公知のマツタケ株(13種類)のいずれの株に対しても明確な帯線を形成しなかった。なお、マツタケでは異株間対峙培養で帯線は生じないとされており、公知のマツタケ株(13種類)間についても、明確な帯線を形成した組み合わせはなかった。
(8)栄養要求性
滅菌処理した菌根菌用合成培地(「太田培地」。Ohtaら、"Trans. Mycol. Soc. Jpn.", 31, 323-334, 1990)10mLの入った100mL容三角フラスコに、マツタケFERM BP−7304株の種菌約2mgを接種し、22℃で培養し、42日目にフラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定したところ、菌体441mgが得られた。
滅菌処理した菌根菌用合成培地(「太田培地」。Ohtaら、"Trans. Mycol. Soc. Jpn.", 31, 323-334, 1990)10mLの入った100mL容三角フラスコに、マツタケFERM BP−7304株の種菌約2mgを接種し、22℃で培養し、42日目にフラスコから菌体を取り出し、蒸留水でよく洗浄した後に乾燥させ、質量を測定したところ、菌体441mgが得られた。
上記菌根菌用合成培地中の炭素(C)源であるグルコースの代わりに、28種類の糖質関連物質のいずれか1つを加えた各培地に、マツタケFERM BP−7304株を接種して培養し、培養終了後、菌体質量を測定した。その結果、菌体質量が多かった糖質関連物質から菌体質量が少なかった糖質関連物質を順に示せば、以下のとおりである。
小麦デンプン>トウモロコシデンプン>デキストリン>メチルβグルコシド>セロビオース>マンノース>フラクトース>アラビノース>ソルビトール>グルコース>ラクトース>グリコーゲン>マンニトール>リボース>マルトース>トレハロース>ガラクトース>ラフィノース>メリビオース>N−アセチルグルコサミン。
なお、セルロース、ダルチトール、シュークロース、キシロース、メチルαグルコシド、イヌリン、イノシトール、およびソルボースでは、菌の発育はほとんどみられなかった。
次に、上記菌根菌用合成培地中の窒素(N)源である酒石酸アンモニウムの代わりに、15種類の窒素関連物質のいずれか1つを加えた各培地に、マツタケFERM BP−7304株を接種して培養し、培養終了後、菌体質量を測定した。
その結果、菌体質量が多かった窒素関連物質から菌体質量が少なかった窒素関連物質を順に示せば、以下のとおりである。
コーンスティープリカー>大豆ペプトン>ミルクペプトン>硝酸アンモニウム>硫酸アンモニウム>酒石酸アンモニウム>炭酸アンモニウム>アスパラギン>リン酸アンモニウム>塩化アンモニウム>硝酸ナトリウム>肉エキス>酵母エキス>カザミノ酸>クロレラ>トリプトーン>硝酸カリウム。
さらに、上記合成培地中のミネラルおよびビタミン類のうち、特定の1成分を除去した培地に、マツタケFERM BP−7304株を接種して培養し、培養終了後、菌体質量を測定した。
その結果、塩化カルシウム・二水和物、硫酸マンガン(II)・五水和物、硫酸亜鉛・七水和物、硫酸コバルト・七水和物、硫酸銅・五水和物、硫酸ニッケル・六水和物、塩酸アミン、ニコチン酸、葉酸、ビオチン、塩酸ピリドキシン、塩化カーチニン、アデニン硫酸・二水和物、または塩酸コリンのいずれか1つを培地から除いても、菌体質量にほとんど影響がなかった。
一方、硫酸マグネシウム・七水和物、塩化鉄(II)、またはリン酸二水素カリウムのいずれか1つを培地から除くと、菌体質量は顕著に減少した。すなわち、マグネシウム、鉄、リン、およびカリウムは、マツタケFERM BP−7304株の増殖に必須と考えられる。
(9)DNA塩基組成(GC含量)
GC含量は49.9%である。
GC含量は49.9%である。
(10)RAPD法により生成するDNAパターン
6種類の異なるPCR(Polymerase Chain Reaction)用プライマー(10mer)をそれぞれ単独で用いるRAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)法により生成するDNAパターンについて、マツタケFERM BP−7304株と、公知の44種類のマツタケ株(例えば、IFO 6915株;(財)発酵研究所)とを比較したところ、マツタケFERM BP−7304株は、公知のマツタケ株(44種類)のいずれとも異なるDNAパターンを示した。
6種類の異なるPCR(Polymerase Chain Reaction)用プライマー(10mer)をそれぞれ単独で用いるRAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)法により生成するDNAパターンについて、マツタケFERM BP−7304株と、公知の44種類のマツタケ株(例えば、IFO 6915株;(財)発酵研究所)とを比較したところ、マツタケFERM BP−7304株は、公知のマツタケ株(44種類)のいずれとも異なるDNAパターンを示した。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品は、有効成分として、(i)マツタケFERM BP−7304株(例えば、当該株の菌糸体、培養物(Broth)または子実体)の生のものをそのまま、あるいはこれを乾燥粉末としたもの、(ii)マツタケFERM BP−7304株の熱水抽出液(例えば、当該株の菌糸体、培養物(Broth)または子実体の、熱水抽出液)、(iii)マツタケFERM BP−7304株のアルカリ溶液抽出液(例えば、当該株の菌糸体、培養物(Broth)または子実体の、アルカリ溶液抽出液)、(iv)マツタケFERM BP−7304株の熱水抽出液および/またはアルカリ溶液抽出液の、有機溶媒抽出液などを含む態様が好ましく例示されるが、これら例示に限定されるものではない。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケFERM BP−7304株の菌糸体としては、例えば、培養により得られる菌糸体(すなわち培養菌糸体)と培地との混合物から適当な除去手段(例えば、濾過)により培地を除去しただけの状態で使用することもできるし、あるいは、培地を除去した後の菌糸体から適当な除去手段(例えば、凍結乾燥)により水分を除去した菌糸体乾燥物の状態で使用することもでき、さらには前記菌糸体乾燥物を粉砕した菌糸体乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケFERM BP−7304株の培養物(Broth)としては、例えば、培養により得られる菌糸体(すなわち培養菌糸体)と培地との混合物の状態で使用することもできるし、あるいは、前記混合物から適当な除去手段(例えば、凍結乾燥)により水分を除去した培養物(Broth)乾燥物の状態で使用することもでき、さらには前記培養物(Broth)乾燥物を粉砕した培養物(Broth)乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
上記培養工程は、特に限定されるものでなく、一般にマツタケ菌を培養する方法を任意に用いることができるが、例えば、マツタケFERM BP−7304株(「マツタケ菌I」)を固形培地または液体培地で培養または保存してマツタケ菌IIを得る工程、前記マツタケ菌IIを静置液体培養してマツタケ菌IIIを得る工程、前記マツタケ菌IIIを振盪培養してマツタケ菌IVを得る工程、前記マツタケ菌IVを100L未満の小型培養装置を用いて、培養液中に通気を行わない攪拌培養してマツタケ菌Vを得る工程、前記マツタケ菌Vを100L以上の中型・大型培養装置を用いて深部攪拌培養してマツタケ菌VIを得る工程、前記マツタケ菌VIを100L以上の中型・大型培養装置を用いて深部攪拌培養してマツタケ菌VIIを得る工程、および前記マツタケ菌VIIを100L以上の中型・大型培養装置を用いて深部撹拌培養してマツタケ菌VIIIを得る工程、からなる培養方法(国際公開第2004/038009号パンフレット)が、マツタケ菌の生理活性を損うことなく大量生産できるという点から好適に用いられる。
〈マツタケ菌Iを培養または保存してマツタケ菌IIを得る工程〉
用いる培地としては、一般にマツタケ菌を培養する栄養源基質を有する培地であれば特に制限なく使用することができる。例えば、太田培地(Ohtaら、"Trans. Mycol. Soc. Jpn.", 31, 323-334, 1990)、MMN培地(Marx, D. H., "Phytopathology", 59:153-163, 1969)、浜田培地(浜田、"マツタケ", 97-100, 1964)等が挙げられるが、これら例示に限定されるものでない。
用いる培地としては、一般にマツタケ菌を培養する栄養源基質を有する培地であれば特に制限なく使用することができる。例えば、太田培地(Ohtaら、"Trans. Mycol. Soc. Jpn.", 31, 323-334, 1990)、MMN培地(Marx, D. H., "Phytopathology", 59:153-163, 1969)、浜田培地(浜田、"マツタケ", 97-100, 1964)等が挙げられるが、これら例示に限定されるものでない。
固形培地用の固形化剤としては、カラギーナン、マンナン、ペクチン、寒天、カードラン、デンプン、アルギン酸等が好適例として挙げられる。これらのうち寒天が好ましい。
使用可能な培地の栄養源基質には、炭素源、窒素源、無機元素源などが挙げられる。
上記炭素源としては、米デンプン、小麦粉デンプン、バレイショデンプン、サツマイモデンプン等のデンプン類;デキストリン、アミロペクシン等の多糖類;マルトース、シュクロース等の少糖類;フラクトース、グルコース等の単糖類などが挙げられる。さらに麦芽エキスを挙げることができる。マツタケ菌の生長速度から、グルコースなどの単糖類が好ましい時期と、デンプン類が好ましい時期とがあるので、時期に応じた炭素源を選択し、必要に応じて組合せて使用する。
上記窒素源としては、酵母エキス、乾燥酵母、コーンスティーブリカー、大豆粉、大豆ペプトンなどの天然由来物質や、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、尿素などが挙げられる。これらは単独で、あるいは組合せて用いることができる。一般に生長速度を考慮すると、天然由来物質、特に酵母エキスが好ましい。
上記無機元素源は、リン酸および微量元素を供給するために使用される。例を挙げると、リン酸塩のほか、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、マンガン、銅、鉄などの金属イオンの無機塩(例えば、硫酸塩、塩酸塩、硝酸塩、リン酸塩、等)があり、必要量を培地中に溶解する。
また、培地にビタミンB1などのビタミン類、アミノ酸類を添加することもできる。
さらに、使用するマツタケ菌の性質に応じて、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質などを添加することができる。植物抽出物としては、果菜類、根菜類、葉菜類などの抽出物が例示される。有機酸としては、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、フマル酸、乳酸などが例示される。核酸関連物質としては、市販の核酸、核酸抽出物、酵母、酵母エキスなどが例示される。
固形培地を調製する場合、炭素源の使用量は、好ましくは10〜100g/L、より好ましくは10〜50g/L、特に好ましくは20〜30g/Lである。
窒素源の使用量は、窒素元素相当量で0.005〜0.1モル/Lが好ましく、より好ましくは0.007〜0.07モル/L、特に好ましくは0.01〜0.05モル/Lである。
リン酸塩の使用量は、リン元素相当量で0.001〜0.05モル/Lが好ましく、より好ましくは0.005〜0.03モル/L、特に好ましくは0.01〜0.02モル/Lである。さらに他の無機塩、ビタミン類、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質など、マツタケ菌の性質に応じて適宜添加することができる。また、調製した栄養源基質溶液のpHを、好ましくは4〜7、より好ましくは4.5〜6.0、特に好ましくは5.0〜5.5とする。
〈静置液体培養〉
次に、マツタケ菌II(マツタケ菌Iを固形培地または液体培地で培養または保存したマツタケ菌)を静置液体培養してマツタケ菌IIIを製造する方法について記載する。
通常、100mL〜2L容の三角フラスコを用いて行う。
次に、マツタケ菌II(マツタケ菌Iを固形培地または液体培地で培養または保存したマツタケ菌)を静置液体培養してマツタケ菌IIIを製造する方法について記載する。
通常、100mL〜2L容の三角フラスコを用いて行う。
この静置液体培養は、液体培地にマツタケ菌IIを接種することにより開始する。
接種したマツタケ菌IIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物と、接種したマツタケ菌IIを含有する培養液との体積比(「接種時拡大倍率」)が好ましくは2〜50倍、より好ましくは3〜30倍となる量の液体培地を使用する。
接種したマツタケ菌IIを含有する培養液中のマツタケ菌IIの乾燥菌糸体質量と、接種したマツタケ菌IIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物の体積比(「初発菌糸体濃度」)を、好ましくは0.05〜3g/L、より好ましくは0.1〜2g/Lとなるように、液体培地にマツタケ菌IIを含有する培養液を接種する。
接種したマツタケ菌IIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物と、接種したマツタケ菌IIを含有する培養液との体積比(「接種時拡大倍率」)が好ましくは2〜50倍、より好ましくは3〜30倍となる量の液体培地を使用する。
接種したマツタケ菌IIを含有する培養液中のマツタケ菌IIの乾燥菌糸体質量と、接種したマツタケ菌IIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物の体積比(「初発菌糸体濃度」)を、好ましくは0.05〜3g/L、より好ましくは0.1〜2g/Lとなるように、液体培地にマツタケ菌IIを含有する培養液を接種する。
該静置液体培養での培養温度は15〜30℃が好ましく、より好ましくは20〜25℃であり、培養期間は30〜400日間が好ましく、より好ましくは120〜240日間である。培養期間が30日未満、あるいは400日超では、大量培養に適した生育能を有するマツタケ菌IIIを得ることが困難となる。
静置液体培養後の培養液中の乾燥菌糸体含有量(単位:g/L)を初発菌糸体濃度との比(「菌糸体増加率」)が、2〜25倍となるように培養することが、生育能の点から好ましい。
静置液体培養に使用する液体培地は、その浸透圧を、好ましくは0.01〜0.8MPa、より好ましくは0.02〜0.7MPa、特に好ましくは0.03〜0.5MPaとなるように、栄養源基質を使用する。
静置液体培養に用いる栄養源基質として、マツタケ菌Iを培養する固形培地と同じ炭素源、窒素源、無機元素源、ビタミンB1などのビタミン類、アミノ酸類等を使用することができる。
炭素源の使用量は、好ましくは10〜100g/L、より好ましくは20〜60g/L、特に好ましくは25〜45g/Lである。通常、グルコース等の単糖類を使用する。
窒素源の使用量は、窒素元素相当量で0.005〜0.1モル/Lが好ましく、より好ましくは0.007〜0.07モル/L、特に好ましくは0.01〜0.05モル/Lである。
リン酸塩を使用する場合は、リン元素相当量で0.001〜0.05モル/Lが好ましく、より好ましくは0.005〜0.03モル/L、特に好ましくは0.01〜0.02モル/Lになるようにする。
さらに、他の無機塩、ビタミン類、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質など、マツタケ菌の性質に応じて適宜添加することができる。
調製した栄養源基質溶液のpHを、好ましくは4〜7、より好ましくは4.5〜6.5、特に好ましくは5.0〜6.0とする。
マツタケ菌IIIを含有する静置液体培養による培養液の一部若しくは全部を、マツタケ菌IIを含有する培養液(若しくは培養物)と同様に静置液体培養の接種源として、再度、静置液体培養工程で使用することもできる。
〈振盪培養〉
次いで、マツタケ菌III(マツタケ菌IIを静置液体培養して得られたマツタケ菌)を振盪培養して、マツタケ菌IVを製造する方法について記載する。
通常、300mL〜5L容の三角フラスコを用いて行う。
次いで、マツタケ菌III(マツタケ菌IIを静置液体培養して得られたマツタケ菌)を振盪培養して、マツタケ菌IVを製造する方法について記載する。
通常、300mL〜5L容の三角フラスコを用いて行う。
この振盪培養は、液体培地にマツタケ菌IIIを接種することにより開始する。
接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物と、接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液との体積比(「接種時拡大倍率」)が、好ましくは2〜50倍、より好ましくは3〜30倍、特に好ましくは5〜10倍となる量の液体培地を使用する。
接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物と、接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液との体積比(「接種時拡大倍率」)が、好ましくは2〜50倍、より好ましくは3〜30倍、特に好ましくは5〜10倍となる量の液体培地を使用する。
なお、接種時拡大倍率に見合う培養液の量を確保するために、静置液体培養を複数の培養装置を用いて製造することもできる。
接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液中のマツタケ菌IIIの乾燥菌糸体質量と、接種したマツタケ菌IIIを含有する培養液と液体培地とを合せた混合物の体積比(「初発菌糸体濃度」)を、好ましくは0.05〜3g/L、より好ましくは0.1〜2g/Lとなるように、液体培地にマツタケ菌IIIを含有する培養液を接種する。
振盪培養では、培養温度は15〜30℃が好ましく、より好ましくは20〜25℃であり、培養期間は7〜50日間が好ましく、より好ましくは14〜28日間である。
振盪培養では、培養温度は15〜30℃が好ましく、より好ましくは20〜25℃であり、培養期間は7〜50日間が好ましく、より好ましくは14〜28日間である。
振盪培養に要する動力として、通常、三角フラスコ内の培養液単位体積あたりの攪拌所要動力0.05〜0.4kW/m3を用いる。
静置液体培養後の培養液中の乾燥菌糸体含有量(単位:g/L)と初発菌糸体濃度との比(「菌糸体増加倍率」)が2〜25倍となるように培養することが、生育能の点で好ましい。
振盪培養に使用する液体培地は、その浸透圧を、好ましくは0.01〜0.8MPa、より好ましくは0.02〜0.7MPa、特に好ましくは0.03〜0.5MPaとなるように、栄養源基質を使用する。
振盪培養に用いられる栄養源基質として、マツタケ菌IIを培養する液体培地と同じ炭素源、窒素源、無機元素源、ビタミンB1などのビタミン類、アミノ酸類を使用することができる。
炭素源の使用量は、好ましくは10〜100g/L、より好ましくは20〜60g/L、特に好ましくは25〜45g/Lである。通常、グルコース等の単糖類を使用する。
窒素源の使用量は、窒素元素相当量で0.005〜0.1モル/Lが好ましく、より好ましくは0.007〜0.07モル/L、特に好ましくは0.01〜0.05モル/Lである。
リン酸塩の使用量は、リン元素相当量で0.001〜0.05モル/Lが好ましく、より好ましくは0.005〜0.03モル/L、特に好ましくは0.01〜0.02モル/Lになるようにする。
さらに、他の無機塩、ビタミン類、アミノ酸類、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質など、マツタケ菌の性質に応じて適宜添加することができる。
調製した栄養源基質溶液のpHを、好ましくは4〜7、より好ましくは4.5〜6.5、特に好ましくは5.0〜6.0とする。
〈攪拌培養〉
次に、攪拌培養により、マツタケ菌V、マツタケ菌VI、マツタケ菌VII、マツタケ菌VIIIを製造する方法について記載する。
次に、攪拌培養により、マツタケ菌V、マツタケ菌VI、マツタケ菌VII、マツタケ菌VIIIを製造する方法について記載する。
この攪拌培養は、液体培地にマツタケ菌(IV〜VII)を接種することにより開始する。以下の説明において、マツタケ菌IVは、マツタケ菌IIIを振盪培養して得られるマツタケ菌をいい;マツタケ菌Vは、マツタケ菌IVを100L未満の小型培養装置を用いて培養液中に通気を行わない撹拌培養を行って得られたマツタケ菌をいい;マツタケ菌VIは、マツタケ菌Vを100L以上の中型・大型培養装置を用いて深部撹拌培養して得られたマツタケ菌をいい;マツタケ菌VIIは、マツタケ菌VIを100L以上の中型・大型培養装置を用いて深部撹拌培養して得られたマツタケ菌をいい;マツタケ菌VIIIは、マツタケ菌VIIを100L以上の中型・大型培養装置を用いて深部撹拌培養して得られたマツタケ菌をいう。
攪拌培養で用いる液体培地は、次のようにして調製することができる。
栄養源基質は、振盪培養で使用する、炭素源、窒素源、無機元素源、ビタミンB1などのビタミン類、アミノ酸類と同じものを使用することができる。
栄養源基質は、振盪培養で使用する、炭素源、窒素源、無機元素源、ビタミンB1などのビタミン類、アミノ酸類と同じものを使用することができる。
炭素源の使用量は、好ましくは10〜100g/L、より好ましくは20〜60g/L、特に好ましくは25〜45g/Lである。デンプン類を好ましく使用できる。
攪拌を行う培養液中の浸透圧に影響するグルコースなどの単糖類を併用する場合、その使用量は、好ましくは0.1〜60g/L、より好ましくは0.5〜40g/L、特に好ましくは0.7〜20g/Lである。
窒素源の使用量は、窒素元素相当量で0.005〜0.1モル/Lが唖好ましく、より好ましくは0.007〜0.07モル/L、特に好ましくは0.01〜0.05モル/Lである。
リン酸塩の使用量は、リン元素相当量で0.001〜0.05モル/Lが好ましく、より好ましくは0.005〜0.03モル/L、特に好ましくは0.01〜0.05モル/Lである。
さらに、他の無機塩、ビタミン類、アミノ酸類、植物抽出物、有機酸、核酸関連物質など、マツタケ菌の性質に応じて適宜、添加することができる。
調製した栄養源基質溶液のpHを、好ましくは4〜7、より好ましくは4.5〜6.5、特に好ましくは5.0〜6.0とする。
攪拌培養に使用する液体培地は、その浸透圧を、好ましくは0.01〜0.8MPa、より好ましくは0.02〜0.7MPa、特に好ましくは0.03〜0.5MPaとなるように、栄養源基質を使用する。
攪拌培養の培養温度は、15〜30℃、好ましくは20〜25℃とする。
接種したマツタケ菌(IV〜VII)を含有する培養液と液体培地とを合せた混合物と、接種したマツタケ菌(IV〜VII)を含有する培養液との体積比(「接種時拡大倍率」)が、好ましくは2〜50倍、より好ましくは3〜30倍、特に好ましくは5〜10倍となる量の液体培地を使用する。
接種したマツタケ菌(IV〜VII)を含有する培養液中のマツタケ菌(IV〜VII)の乾燥菌糸体質量と、接種したマツタケ菌(IV〜VII)を含有する培養液と液体培地とを合せた混合物の体積比(「初発菌糸体濃度」)を、好ましくは0.01〜5g/L、より好ましくは0.05〜3g/L、特に好ましくは0.1〜2g/Lとなるように、液体培地にマツタケ菌(IV〜VII)を含有する培養液を接種する。
攪拌培養で得られるマツタケ菌(V〜VII)を、さらに攪拌培養の母菌として用いる場合の培養日数は、3〜20日間が好ましく、特には5〜14日間である。
これらの培養日数後に、マツタケ菌(V〜VII)の乾燥菌糸体含有量が、好ましくは0.5〜10g/L、より好ましくは1〜8g/L、特に好ましくは1〜6g/Lになっている培養液は、攪拌培養に適した生育能を有するマツタケ菌(V〜VII)を含有している。
静置液体培養後の培養液中の乾燥菌糸体含有量(単位:g/L)と初発菌糸体濃度との比(「菌糸体増加率」)が2〜25倍となるように培養することが、生育能の点で好ましい。
他方、攪拌培養で得られるマツタケ菌(V〜VIII)を、マツタケ菌糸体として分離する場合の培養日数は5〜30日間であり、好ましくは7〜20日間、特に好ましくは10〜15日間である。
これらの培養日数から、炭素源の資化速度が著しく低下した時を培養終了とするのが好ましいが、適宜、製造サイクル、製造コスト等の製造形態に合せて決定することができる。
静置液体培養後の培養液中の乾燥菌糸体含有量(単位:g/L)と初発菌糸体濃度との比(「菌糸体増加倍率」)が35〜100倍となるように培養することが、工業的な生産の点で好ましい。
マツタケ菌IVを含有する振盪培養で製造した培養液を、100L以上の中型、および大型培養槽などの培養装置による攪拌培養工程で使用することもできる。
攪拌培養に使用する培養装置は、通気攪拌ができ、無菌性が確保できれば特に制限なく使用することが可能で、必要に応じて通気することができ、または通気装置を装着できるものを使用する。したがって、通常の、小型、中型および大型の培養槽、またはジャーファーメンターを使用することができる。
100L未満のジャーファーメンターまたは小型培養槽を用いて、マツタケ菌IVの培養を行いマツタケ菌Vを製造する場合、液体培地中に通気せずに、攪拌培養を行うのが好ましい。100L未満のジャーファーメンターまたは小型培養槽で通気を行って培養すると、菌糸が凝集し、成長点が欠失して母菌としての生育能が損われる場合があるからである。
また、100L以上の中型、および大型培養槽などの培養装置により工業スケールで深部攪拌培養を行う場合、必要に応じて通気を行う。この場合の通気量は0.05〜1.0vvm、特には0.2〜0.5vvmとするのが好ましい。
攪拌培養における攪拌は、培養初期では培養液単位体積あたりの所要攪拌動力で制御する。通常、0.01〜2kW/m3、好ましくは0.05〜1kW/m3の範囲で攪拌を行うことにより、マツタケ菌糸体が良好に生育する。培養初期を過ぎれば菌が生育を始め、酸素供給量が不足し、さらに、生育した菌糸体の分散が不十分になるので、適宜、攪拌の強度を大きくすることが必要になる。当該深部攪拌では、培養初期には低通気、低撹拌速度で培養し、培養後期には高通気、高攪拌速度で培養するのが好ましい。
深部攪拌培養から得られたマツタケ菌糸体の分離・回収は、常法によって行うことができる。例えば、フィルタープレスなどによる濾過、遠心分離などである。
得られた菌糸体は、例えば蒸留水により充分に洗浄してから、次の熱水抽出工程を実施するのが好ましい。また抽出効率が向上するように、破砕物または粉体の状態に加工するのが好ましい。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケFERM BP−7304株の子実体としては、例えば、子実体をそのままで、または子実体を破砕した状態で使用することもできるし、あるいは、子実体から適当な除去手段(例えば、凍結乾燥)により水分を除去した子実体乾燥物の状態で使用することもでき、さらには、前記子実体乾燥物を粉砕した子実体乾燥物粉末の状態で使用することもできる。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケFERM BP−7304株の熱水抽出液は、例えば培養により得られるマツタケFERM BP−7304株の菌糸体(すなわち培養菌糸体)、培養物(Broth)、または子実体を熱水で抽出することにより得ることができる。
熱水抽出に用いる熱水の温度は、マツタケFERM BP−7304株に含有される消化性潰瘍の予防・治療効果を示す成分が、熱水抽出液中に充分に抽出される温度である限り特に限定されるものではないが、60〜100℃程度が好ましく、80〜98℃程度がより好ましい。
菌糸体または子実体を熱水抽出に用いる場合には、抽出効率が向上するように、破砕物または粉体の状態に加工することが好ましい。
また抽出の際には、抽出効率が向上するように、攪拌または振盪しながら実施するのが好ましい。抽出時間は、例えば、菌糸体の状態(例えば、破砕物または粉体の状態に加工した場合にはその加工状態)、熱水の温度、または攪拌若しくは振盪の有無若しくは条件に応じて、適宜決定することができるが、通常1〜6時間程度であり、2〜3時間程度が好ましい。
得られた熱水抽出液は、不要物が混在する状態で、そのまま、本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤の有効成分として用いることもできるし、あるいは不溶物を除去してから、さらにはそこから抽出液中の低分子画分(好ましくは分子量3500以下の画分)を除去してから、本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤の有効成分として用いることもできる。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品における有効成分として用いられ得るマツタケFERM BP−7304株のアルカリ抽出液は、例えば、上述したマツタケFERM BP−7304株の熱水抽出液の製造方法において、熱水の代わりにアルカリ溶液を用いること以外は、上記熱水抽出液の製造方法に準じた方法により得ることができる。
アルカリ溶液抽出に用いるアルカリ溶液としては、特に限定されるものではないが、例えば、アルカリ金属(ナトリウム、カリウムなど)の水酸化物、特には水酸化ナトリウムの水溶液を用いることができる。アルカリ溶液のpHは8〜13が好ましく、9〜12がより好ましい。アルカリ溶液抽出は0〜30℃程度で実施するのが好ましく、0〜25℃程度がより好ましい。抽出時間は、例えば、菌糸体残渣の状態(例えば、破砕物または粉体の状態に加工した場合にはその加工状態)、アルカリ溶液のpH若しくは温度、または攪拌若しくは振盪の有無若しくは条件に応じて、適宜決定することができるが、通常30分間〜5時間程度であり、1〜3時間程度が好ましい。得られたアルカリ溶液抽出液は、そのまま、あるいは所望により中和処理を実施してから、本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品に用いる。
さらに、熱水抽出液および/またはアルカリ溶液抽出液に、有機溶媒(例えば、クロロホルム、メタノール、エーテル、エタノール、酢酸エチル、ヘキサン等)またはそれらの混合物(例えば、クロロホルムとメタノールとの混合液)を加えて、好ましくは15〜30℃の温度で30分間〜5時間程度、攪拌することにより、有機溶媒可溶層若しくは水可溶層に移行する画分を回収して、本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品に用いることもできる。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品は、有効成分であるマツタケ、特にはマツタケFERM BP−7304株、あるいはその抽出物を、単独で、あるいは所望により薬剤学的に許容し得る担体とともに、ヒトや動物に投与することができる。
本発明において「消化性潰瘍の予防・治療」とは、動物やヒトなどにおいて、消化性潰瘍発症の予防、消化性潰瘍発症後(病的状態)の治療を意味するが、消化性潰瘍の発症を遅延・抑制せしめる効果も含む。また消化性潰瘍により誘発され得る疾患の発症防止効果も含む。したがって、本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品の投与・摂取時期は、特に限定されるものではないが、日常的に継続投与・摂取するのが好ましい。
本発明における消化性潰瘍の予防・治療効果は、消化性潰瘍のタイプ(急性、慢性)・病因、等を問うものでなく、いずれのタイプの消化性潰瘍に対しても奏功し得る。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品の投与・摂取剤型としては特に限定されるものでなく、例えば、散剤、細粒剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、エキス剤、若しくは丸剤等の経口剤、または注射剤、外用液剤、軟膏剤、座剤、局所投与のクリーム、点眼薬などの非経口剤を挙げることができる。
経口剤は、例えば、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、澱粉、コーンスターチ、白糖、乳糖、ぶどう糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、デキストリン、ポリビニルピロリドン、結晶セルロース、大豆レシチン、ショ糖、脂肪酸エステル、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ケイ酸マグネシウム、無水ケイ酸、または合成ケイ酸アルミニウムなどの賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、希釈剤、保存剤、着色剤、香料、矯味剤、安定化剤、保湿剤、防腐剤、または酸化防止剤等を用いて、常法により製造することができる。
非経口投与方法としては、注射(皮下、静脈内など)等が例示される。なかでも注射剤が最も好適に用いられる。
例えば、注射剤の調製においては、有効成分の他に生理食塩水若しくはリンゲル液等の水溶性溶剤、植物油若しくは脂肪酸エステル等の非水溶性溶剤、ブドウ糖若しくは塩化ナトリウム等の等張化剤、溶解補助剤、安定化剤、防腐剤、懸濁化剤、または乳化剤などを任意に用いることができる。
また、本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品は、徐放性ポリマーなどを用いた徐放性製剤の手法を用いて投与してもよい。例えば、本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品をエチレンビニル酢酸ポリマーのペレットに取り込ませて、このペレットを治療すべき組織中に外科的に移植することができる。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品は、これに限定されるものではないが、マツタケFERM BP−7304株あるいはその抽出物等の有効成分を0.01〜99質量%、好ましくは0.1〜80質量%の量で含有することができる。
本発明の消化性潰瘍の予防・治療剤および食品を用いる場合の投与・摂取量は、被投与者の年齢、性別、体重、または投与・摂取方法などに応じて適宜決定することができ、経口的にまた非経口的に投与・摂取することが可能である。
また、投与・摂取形態も医薬品に限定されるものではなく、種々の形態、例えば、保健機能食品(特定保健用食品、栄養機能食品)やいわゆる健康食品(いずれも飲料を含む)、または飼料として飲食物の形で与えることも可能である。さらには、口中に一時的に含むものの、そのほとんどを口中より吐き出す形態、例えば、歯磨き剤、洗口剤、チューインガム、うがい剤などの形で与えることも、あるいは鼻から吸引させる吸入剤の形で与えることも可能である。例えば、マツタケFERM BP−7304株あるいはその抽出物等の有効成分を、添加剤(食品添加剤など)として、所望の食品(飲料を含む)、飼料、歯磨剤、洗口剤、チューインガム、またはうがい剤等に添加することができる。
なお、上記において、特定保健用食品は、その食品が持つ健康機能の表示が認められる食品(食品ごとに厚生労働省の許可を必要とする)をいい、栄養機能食品は栄養成分の機能を明記できる食品(厚生労働省が作成した規格基準を満たす必要あり)をいい、いわゆる健康食品とは上記保健機能食品以外の食品一般を広く意味するもので、健康補助食品等を含むものである。
次に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の技術的範囲はこれらの実施例によってなんら限定されるものでない。
消化性潰瘍の治療法開発のため、物理的・化学的処理によって動物の胃や十二指腸に人為的に作成した潰瘍モデルが考案されている(竹内孝治、岡山充明、”モデル動物の作製と維持”の「消化管」項、(株)エル・アイ・シー、382〜400頁、2004年)。
急性の消化性潰瘍モデルとして、シェイ(Shay)潰瘍、水浸ストレス潰瘍、薬物潰瘍(アスピリン潰瘍、インドメタシン潰瘍、ヒスタミン潰瘍など)、粘膜壊死誘発潰瘍(エタノール潰瘍、酢酸潰瘍など)、システアミン潰瘍、メピリゾール潰瘍などがある。慢性の消化性潰瘍モデルとして、システアミン潰瘍、メピリゾール潰瘍、ヒスタミン・カルバコール潰瘍、インドメタシン・ヒスタミン潰瘍、酢酸潰瘍などがある。
そこで、以下の実施例では、実験的に急性潰瘍、慢性潰瘍を作成した損傷モデルを用いて、消化性潰瘍に対するCM6271の作用を調べた。
(実施例1)
[マツタケ菌糸体粉末の調製]
株式会社クレハ 生物医学研究所で樹立および維持しているマツタケCM6271株(マツタケFERM BP−7304株)の菌糸体を、滅菌済み培地(3%グルコース、0.3%酵母エキス、pH6.0)100mLの入った500mL容三角フラスコ20本に接種し、22℃で250rpmの振盪培養機で4週間培養を行った。培養終了後、培養物(Broth)を濾紙濾過により菌糸体を分離し、蒸留水で充分に洗浄した後、凍結乾燥した。得られた乾燥物を粉砕して菌糸体粉末(以下、単に「CM6271」とも記す)20gを得た。
[マツタケ菌糸体粉末の調製]
株式会社クレハ 生物医学研究所で樹立および維持しているマツタケCM6271株(マツタケFERM BP−7304株)の菌糸体を、滅菌済み培地(3%グルコース、0.3%酵母エキス、pH6.0)100mLの入った500mL容三角フラスコ20本に接種し、22℃で250rpmの振盪培養機で4週間培養を行った。培養終了後、培養物(Broth)を濾紙濾過により菌糸体を分離し、蒸留水で充分に洗浄した後、凍結乾燥した。得られた乾燥物を粉砕して菌糸体粉末(以下、単に「CM6271」とも記す)20gを得た。
(実施例2)
[インドメタシン誘発の急性潰瘍に対するCM6271の作用]
発症にプロスタグランジン代謝が関連する損傷モデルである「インドメタシン誘発の急性実験的潰瘍」に対するCM6271の作用を調べた。
[インドメタシン誘発の急性潰瘍に対するCM6271の作用]
発症にプロスタグランジン代謝が関連する損傷モデルである「インドメタシン誘発の急性実験的潰瘍」に対するCM6271の作用を調べた。
(i)試験動物
日本チャールス・リバー(株)から7週齢の雄性Crl:CD(SD)ラットを購入し、1週間予備飼育の後、8週齢で試験に供した。なお飼育は、温度22±5℃、湿度50±10%、12時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
日本チャールス・リバー(株)から7週齢の雄性Crl:CD(SD)ラットを購入し、1週間予備飼育の後、8週齢で試験に供した。なお飼育は、温度22±5℃、湿度50±10%、12時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
(ii)潰瘍の誘発方法
インドメタシン溶液(Sigma-Aldrich社)30mg/kg(液量として10mL/kg)をラット背部皮下に注射することにより行った。
インドメタシン溶液(Sigma-Aldrich社)30mg/kg(液量として10mL/kg)をラット背部皮下に注射することにより行った。
(iii)CM6271の投与
CM6271は、0.5%メチルセルロース400CP(信越化学工業(株)製)溶液に懸濁したものを用いた。
CM6271は、0.5%メチルセルロース400CP(信越化学工業(株)製)溶液に懸濁したものを用いた。
(iv)実験群構成、処置および結果
上記雄性Crl:CD(SD)ラットを無作為に下記のようにA〜Cの3群(各群:n=8)に分け、CM6271(上記(iii))または0.5%メチルセルロース400CP(溶媒のみ)を10日間連続投与(投与量は下記各群に示すとおり)し、この連続経口投与の最終投与後10分間経過後、インドメタシン溶液(上記(ii)に示す薬剤)をラット背部皮下に注射した。
上記雄性Crl:CD(SD)ラットを無作為に下記のようにA〜Cの3群(各群:n=8)に分け、CM6271(上記(iii))または0.5%メチルセルロース400CP(溶媒のみ)を10日間連続投与(投与量は下記各群に示すとおり)し、この連続経口投与の最終投与後10分間経過後、インドメタシン溶液(上記(ii)に示す薬剤)をラット背部皮下に注射した。
〈ラットの実験群構成〉
A群(対照群。溶媒投与): 0.5%メチルセルロース400CP(0.2mL/匹/日)経口投与(10日間)+インドメタシン溶液を背部皮下注射、
B群(CM6271投与群): CM6271(500mg/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+インドメタシン溶液を背部皮下注射、
C群(CM6271投与群): CM6271(2,000g/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+インドメタシン溶液を背部皮下注射。
A群(対照群。溶媒投与): 0.5%メチルセルロース400CP(0.2mL/匹/日)経口投与(10日間)+インドメタシン溶液を背部皮下注射、
B群(CM6271投与群): CM6271(500mg/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+インドメタシン溶液を背部皮下注射、
C群(CM6271投与群): CM6271(2,000g/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+インドメタシン溶液を背部皮下注射。
注射後、7時間絶食・絶水下に放置した後、胃を摘出した。摘出した胃の内容物を排出した後、2%ホルマリン溶液10mLを注入して食道側および十二指腸側の両端を動脈クレンメで結紮し、2%ホルマリン溶液中で固定した。固定後、胃を大彎に沿って切開し、実体顕微鏡を用いて潰瘍発生の有無を観察するとともに、潰瘍のサイズを測定した。結果を表1に示す。潰瘍係数(ulcer index)は各個体の潰瘍全長の平均mmで表示した。抑制率(%)は〔A群の潰瘍係数(mm)−CM6271投与群(B群、C群)の潰瘍係数(mm)〕×100/〔A群の潰瘍係数(mm)〕(%)で示した。
表1に示す結果から明らかなように、インドメタシン誘発のラット胃潰瘍病変は、CM6271の投与により用量依存的に軽減された。特に、C群(2,000mg/kg投与群)の潰瘍係数は、A群(溶媒対照群)よりも有意に低かった。すなわち、CM6271は、インドメタシン注射により誘導される胃損傷を防止する作用を有することが示唆された。
(実施例3)
[アスピリン誘発の急性潰瘍に対するCM6271の作用]
アスピリン誘発潰瘍の発症メカニズムは、薬物による胃粘膜直接刺激作用や胃粘膜内プロスタグランジン・レベル低下、胃運動抑制、胃粘膜バリア破壊に伴う胃酸の逆拡散などと推定されており、インドメタシン誘発潰瘍とは発症病変に種差があると報告されている。
[アスピリン誘発の急性潰瘍に対するCM6271の作用]
アスピリン誘発潰瘍の発症メカニズムは、薬物による胃粘膜直接刺激作用や胃粘膜内プロスタグランジン・レベル低下、胃運動抑制、胃粘膜バリア破壊に伴う胃酸の逆拡散などと推定されており、インドメタシン誘発潰瘍とは発症病変に種差があると報告されている。
(i)試験動物
日本チャールス・リバー(株)から7週齢の雄性Crl:CD(SD)ラットを購入し、1週間予備飼育の後、8週齢で試験に供した。なお飼育は、温度22±5℃、湿度50±10%、12時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
日本チャールス・リバー(株)から7週齢の雄性Crl:CD(SD)ラットを購入し、1週間予備飼育の後、8週齢で試験に供した。なお飼育は、温度22±5℃、湿度50±10%、12時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
(ii)潰瘍の誘発方法
アスピリン溶液(Sigma-Aldrich社)300mg/kg(液量として10mL/kg)をラット背部皮下に注射することにより行った。
アスピリン溶液(Sigma-Aldrich社)300mg/kg(液量として10mL/kg)をラット背部皮下に注射することにより行った。
(iii)CM6271の投与
CM6271は、0.5%メチルセルロース400CP(信越化学工業(株)製)溶液に懸濁したものを用いた。
CM6271は、0.5%メチルセルロース400CP(信越化学工業(株)製)溶液に懸濁したものを用いた。
(iv)実験群構成、処置および結果
上記雄性Crl:CD(SD)ラットを無作為に下記のようにD〜Fの3群(各群:n=8)に分け、CM6271(上記(iii))または0.5%メチルセルロース400CP(溶媒のみ)を10日間連続投与(投与量は下記各群に示すとおり)し、この連続経口投与の最終投与後10分間経過後、アスピリン溶液(上記(ii)に示す薬剤)をラット背部皮下に注射した。
上記雄性Crl:CD(SD)ラットを無作為に下記のようにD〜Fの3群(各群:n=8)に分け、CM6271(上記(iii))または0.5%メチルセルロース400CP(溶媒のみ)を10日間連続投与(投与量は下記各群に示すとおり)し、この連続経口投与の最終投与後10分間経過後、アスピリン溶液(上記(ii)に示す薬剤)をラット背部皮下に注射した。
〈ラットの実験群構成〉
D群(対照群。溶媒投与): 0.5%メチルセルロース400CP(0.2mL/匹/日)経口投与(10日間)+アスピリン溶液を背部皮下注射、
E群(CM6271投与群): CM6271(500mg/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+アスピリン溶液を背部皮下注射、
F群(CM6271投与群): CM6271(2,000g/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+アスピリン溶液を背部皮下注射。
D群(対照群。溶媒投与): 0.5%メチルセルロース400CP(0.2mL/匹/日)経口投与(10日間)+アスピリン溶液を背部皮下注射、
E群(CM6271投与群): CM6271(500mg/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+アスピリン溶液を背部皮下注射、
F群(CM6271投与群): CM6271(2,000g/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+アスピリン溶液を背部皮下注射。
注射後、5時間絶食・絶水下に放置した後、胃を摘出した。摘出した胃の内容物を排出した後、2%ホルマリン溶液10mLを注入して食道側および十二指腸側の両端を動脈クレンメで結紮し、2%ホルマリン溶液中で固定した。固定後、胃を大彎に沿って切開し、実体顕微鏡を用いて潰瘍発生の有無を観察するとともに、潰瘍のサイズを測定した。結果を表2に示す。潰瘍係数(ulcer index)は各個体の潰瘍全長の平均mmで表示した。抑制率(%)は〔D群の潰瘍係数(mm)−CM6271投与群(E群、F群)の潰瘍係数(mm)〕×100/〔D群の潰瘍係数(mm)〕(%)で示した。
表2に示す結果から明らかなように、アスピリン誘発のラット胃潰瘍病変は、実施例2の場合と同様に、CM6271の投与により用量依存的に軽減された。すなわち、CM6271は、非ステロイド系薬物注射により誘導される胃損傷を防止する作用を有することが示唆された。
(実施例4)
[水浸拘束ストレス誘発の急性潰瘍に対するCM6271の作用]
精神的あるいは肉体的ストレスが胃潰瘍を引き起こすことが臨床的に知られており、拘束や低温環境、電撃負荷を用いた動物疾患モデルが作成されている。これらの中で、水浸拘束ストレス潰瘍モデルは、発生率の高さや実験の容易さ、薬物に対して高感受性のため、抗潰瘍薬評価のモデルとして汎用されている。
[水浸拘束ストレス誘発の急性潰瘍に対するCM6271の作用]
精神的あるいは肉体的ストレスが胃潰瘍を引き起こすことが臨床的に知られており、拘束や低温環境、電撃負荷を用いた動物疾患モデルが作成されている。これらの中で、水浸拘束ストレス潰瘍モデルは、発生率の高さや実験の容易さ、薬物に対して高感受性のため、抗潰瘍薬評価のモデルとして汎用されている。
(i)試験動物
日本チャールス・リバー(株)から7週齢の雄性Crl:CD(SD)ラットを購入し、1週間予備飼育の後、8週齢で試験に供した。なお飼育は、温度22±5℃、湿度50±10%、12時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
日本チャールス・リバー(株)から7週齢の雄性Crl:CD(SD)ラットを購入し、1週間予備飼育の後、8週齢で試験に供した。なお飼育は、温度22±5℃、湿度50±10%、12時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
(ii)潰瘍の誘発方法
ラットをストレス・ケージに入れ、23±1℃の水槽内に胸部まで浸した。7時間絶食・絶水下に放置することにより行った。
ラットをストレス・ケージに入れ、23±1℃の水槽内に胸部まで浸した。7時間絶食・絶水下に放置することにより行った。
(iii)CM6271の投与
CM6271は、0.5%メチルセルロース400CP(信越化学工業(株)製)溶液に懸濁したものを用いた。
CM6271は、0.5%メチルセルロース400CP(信越化学工業(株)製)溶液に懸濁したものを用いた。
(iv)実験群構成、処置および結果
上記雄性Crl:CD(SD)ラットを無作為に下記のようにG〜Iの3群(各群:n=6)に分け、CM6271(上記(iii))または0.5%メチルセルロース400CP(溶媒のみ)を10日間連続投与(投与量は下記各群に示すとおり)し、この連続経口投与の最終投与後30分間経過後、ラットをストレス・ケージに入れ、23±1℃の水槽内に胸部まで浸し、7時間絶食・絶水下に放置した(上記(ii)の処置)後、水槽から引き上げ、胃を摘出した。
上記雄性Crl:CD(SD)ラットを無作為に下記のようにG〜Iの3群(各群:n=6)に分け、CM6271(上記(iii))または0.5%メチルセルロース400CP(溶媒のみ)を10日間連続投与(投与量は下記各群に示すとおり)し、この連続経口投与の最終投与後30分間経過後、ラットをストレス・ケージに入れ、23±1℃の水槽内に胸部まで浸し、7時間絶食・絶水下に放置した(上記(ii)の処置)後、水槽から引き上げ、胃を摘出した。
〈ラットの実験群構成〉
G群(対照群。溶媒投与): 0.5%メチルセルロース400CP(0.2mL/匹/日)経口投与(10日間)+水浸拘束(7時間)、
H群(CM6271投与群): CM6271(500mg/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+水浸拘束(7時間)、
I群(CM6271投与群): CM6271(2,000g/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+水浸拘束(7時間)。
G群(対照群。溶媒投与): 0.5%メチルセルロース400CP(0.2mL/匹/日)経口投与(10日間)+水浸拘束(7時間)、
H群(CM6271投与群): CM6271(500mg/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+水浸拘束(7時間)、
I群(CM6271投与群): CM6271(2,000g/kg/回)を1日2回、経口投与(10日間)+水浸拘束(7時間)。
摘出した胃の内容物を排出した後、2%ホルマリン溶液10mLを注入して食道側および十二指腸側の両端を動脈クレンメで結紮し、2%ホルマリン溶液中で固定した。固定後、胃を大彎に沿って切開し、実体顕微鏡を用いて潰瘍(出血性胃粘膜障害)発生の有無を観察するとともに、潰瘍のサイズを測定した。結果を表3に示す。潰瘍係数(ulcer index)は各個体の潰瘍全長の平均mmで表示した。抑制率(%)は〔G群の潰瘍係数(mm)−CM6271投与群(H群、I群)の潰瘍係数(mm)〕×100/〔G群の潰瘍係数(mm)〕(%)で示した。
表3に示す結果から明らかなように、水浸拘束誘発のラット胃潰瘍病変は、実施例2および3の場合と同様に、CM6271の投与により用量依存的に軽減された。すなわち、CM6271は、非ステロイド系薬物注射だけでなく、ストレス負荷により誘導される胃損傷を防止する作用を有することが示唆された。
(実施例5)
[酢酸誘発の慢性潰瘍に対するCM6271の作用]
慢性的胃潰瘍モデルは、化学物質や焼灼、クランピング・コーチゾン処理などにより作成することができ、既存損傷の治癒や再燃・再発機転メカニズム、および薬物の治癒効果を調べるのに重要と考えられている。中でも、酢酸潰瘍は、ヒト潰瘍治癒過程との類似性や作成の簡便さなどの理由のため、薬物の評価に汎用されている。
[酢酸誘発の慢性潰瘍に対するCM6271の作用]
慢性的胃潰瘍モデルは、化学物質や焼灼、クランピング・コーチゾン処理などにより作成することができ、既存損傷の治癒や再燃・再発機転メカニズム、および薬物の治癒効果を調べるのに重要と考えられている。中でも、酢酸潰瘍は、ヒト潰瘍治癒過程との類似性や作成の簡便さなどの理由のため、薬物の評価に汎用されている。
(i)試験動物
日本チャールス・リバー(株)から7週齢の雄性Crl:CD(SD)ラットを購入し、1週間予備飼育の後、8週齢で試験に供した。なお飼育は、温度22±5℃、湿度50±10%、12時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
日本チャールス・リバー(株)から7週齢の雄性Crl:CD(SD)ラットを購入し、1週間予備飼育の後、8週齢で試験に供した。なお飼育は、温度22±5℃、湿度50±10%、12時間明暗サイクルの環境下にある飼育室で行った。
(ii)潰瘍の誘発方法
Takagiらの方法〔Takagi K, Okabe S. and Suzuki R., A new method for the production of chronic gastric ulcer in rats and the effects of several drugs on its healing, "Jpn J Pharmacol.", 19: 418-426, 1970〕に準じた。すなわち、ラットの前壁の胃体部と幽門前庭部境界の漿膜面に20%酢酸水溶液50μLを注入し、次いで、腹部を縫合、飼育用ケージに収容した。なお、手術当日は絶食・絶水とし、翌日から通常の飼育を行った。
Takagiらの方法〔Takagi K, Okabe S. and Suzuki R., A new method for the production of chronic gastric ulcer in rats and the effects of several drugs on its healing, "Jpn J Pharmacol.", 19: 418-426, 1970〕に準じた。すなわち、ラットの前壁の胃体部と幽門前庭部境界の漿膜面に20%酢酸水溶液50μLを注入し、次いで、腹部を縫合、飼育用ケージに収容した。なお、手術当日は絶食・絶水とし、翌日から通常の飼育を行った。
(iii)CM6271の投与
CM6271は、0.5%メチルセルロース400CP(信越化学工業(株)製)溶液に懸濁したものを用いた。
CM6271は、0.5%メチルセルロース400CP(信越化学工業(株)製)溶液に懸濁したものを用いた。
(iv)実験群構成、処置および結果
上記雄性Crl:CD(SD)ラットに上記(ii)の処置を行い、術後5日目にラットを下記のとおり無作為にJ〜Kの2群(各群:n=8)に分け、CM6271(上記(iii))または0.5%メチルセルロース400CP(溶媒のみ)を10日間連続投与(投与量は下記各群に示すとおり)した。
上記雄性Crl:CD(SD)ラットに上記(ii)の処置を行い、術後5日目にラットを下記のとおり無作為にJ〜Kの2群(各群:n=8)に分け、CM6271(上記(iii))または0.5%メチルセルロース400CP(溶媒のみ)を10日間連続投与(投与量は下記各群に示すとおり)した。
J群(対照群。溶媒投与): 0.5%メチルセルロース400CP(0.2mL/匹/日)を10日間連続経口投与、
K群(CM6271投与群): 2,000g/kg/回)を1日2回、10日間連続経口投与。
K群(CM6271投与群): 2,000g/kg/回)を1日2回、10日間連続経口投与。
上記連続経口投与の最終投与翌日に、5時間絶食・絶水下に放置した後、エーテル麻酔下、胃を摘出し、2%ホルマリン溶液10mLを注入して固定した。固定後、胃を大彎に沿って切開し、実体顕微鏡を用いて潰瘍発生の有無を観察するとともに、潰瘍のサイズを測定した。結果を表4に示す。潰瘍係数(ulcer index)は各個体の潰瘍全長の平均mmで表示した。抑制率(%)は〔J群の潰瘍係数(mm)−K群の潰瘍係数(mm)〕×100/〔J群の潰瘍係数(mm)〕(%)で示した。
表4に示す結果から明らかなように、酢酸誘発のラット胃潰瘍病変は、CM6271の投与によりに有意に軽減された。すなわち、CM6271は、酢酸注入により誘導される胃損傷を防止する作用を有することが示唆された。
(まとめ)
急性および慢性のラット胃潰瘍モデルを用いて、CM6271の作用を調べた。
急性および慢性のラット胃潰瘍モデルを用いて、CM6271の作用を調べた。
急性発症モデルであるインドメタシン処置ラット、アスピリン処置ラット、および水浸拘束処置ラットにおいては、CM6271は胃潰瘍の生成(潰瘍係数)を有意に抑制促進した。
慢性発症モデルである酢酸処置ラットにおいては、CM6271は胃潰瘍の生成を有意に抑制促進した。
以上のことから、CM6271が、急性・慢性のいずれの消化性潰瘍に対しても、優れた潰瘍生成抑制効果を奏するということができる。
Claims (10)
- マツタケ(Tricholoma matsutake)またはその抽出物を含む、消化性潰瘍の予防・治療剤。
- マツタケ(T. matsutake)が菌糸体、培養物(Broth)または子実体(胞子を含む)である、請求項1記載の消化性潰瘍の予防・治療剤。
- マツタケ(T. matsutake)がFERM BP−7304株である、請求項1または2記載の消化性潰瘍の予防・治療剤。
- マツタケ(T. matsutake)がFERM BP−7304株の菌糸体の乾燥粉末である、請求項1〜3のいずれか1項に記載の消化性潰瘍の予防・治療剤。
- マツタケ抽出物が、FERM BP−7304株の菌糸体の熱水抽出液、アルカリ溶液抽出液、またはそれら抽出液の有機溶媒抽出液である、請求項1〜4のいずれか1項に記載の消化性潰瘍の予防・治療剤。
- マツタケ(Tricholoma matsutake)またはその抽出物を含む、消化性潰瘍の予防・治療のための食品。
- マツタケ(T. matsutake)が菌糸体、培養物(Broth)または子実体(胞子を含む)である、請求項6記載の食品。
- マツタケ(T. matsutake)がFERM BP−7304株である、請求項6または7記載の食品。
- マツタケ(T. matsutake)がFERM BP−7304株の菌糸体の乾燥粉末である、請求項6〜8のいずれか1項に記載の食品。
- マツタケ抽出物が、FERM BP−7304株の菌糸体の熱水抽出液、アルカリ溶液抽出液、またはそれら抽出液の有機溶媒抽出液である、請求項6〜9のいずれか1項に記載の食品。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006150735A JP2007320867A (ja) | 2006-05-30 | 2006-05-30 | 消化性潰瘍の予防・治療剤および食品 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2006150735A JP2007320867A (ja) | 2006-05-30 | 2006-05-30 | 消化性潰瘍の予防・治療剤および食品 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2007320867A true JP2007320867A (ja) | 2007-12-13 |
Family
ID=38853986
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2006150735A Abandoned JP2007320867A (ja) | 2006-05-30 | 2006-05-30 | 消化性潰瘍の予防・治療剤および食品 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2007320867A (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105031256A (zh) * | 2015-07-10 | 2015-11-11 | 包莉丽 | 一种用于治疗消化性溃疡的中药 |
-
2006
- 2006-05-30 JP JP2006150735A patent/JP2007320867A/ja not_active Abandoned
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105031256A (zh) * | 2015-07-10 | 2015-11-11 | 包莉丽 | 一种用于治疗消化性溃疡的中药 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101228951B (zh) | 生物复合多糖高效营养液的制作方法 | |
JP2009084288A (ja) | ストレス負荷回復促進用医薬組成物及び新規マツタケ株 | |
CN111011856A (zh) | 用于缓解胃病的组合物、其制备方法及用于缓解胃病的食品 | |
JP3960393B2 (ja) | 健康組成物 | |
JP4587442B2 (ja) | 新規な高脂血症治療剤および食品 | |
CN106038614B (zh) | 蛹虫草多糖食用菌酵素复方饮液及其制备方法 | |
JP4498924B2 (ja) | ラクトバシラス・カゼイ亜種カゼイ増殖促進用組成物 | |
JP4000946B2 (ja) | 冬虫夏草の新規製造方法及び得られた冬虫夏草とその使用 | |
JP2007320867A (ja) | 消化性潰瘍の予防・治療剤および食品 | |
JPH0930981A (ja) | 免疫賦活組成物 | |
JP2006158396A (ja) | サボテンの乳酸菌発酵物の製造のための新規な乳酸菌菌株及びこれを用いたサボテン発酵物の製造方法 | |
US6465218B1 (en) | Biologically active substance and process of preparing the same | |
JP4618770B2 (ja) | 新規な血圧降下剤および食品 | |
JP2007269700A (ja) | 肝炎予防・治療剤および食品 | |
JP4587441B2 (ja) | 新規な糖尿病治療剤および食品 | |
JP2007269702A (ja) | 抗癌剤副作用の軽減剤および食品 | |
JP2007320868A (ja) | 癌における鎮痛・抗炎症剤および食品 | |
JP4143530B2 (ja) | 魚類冷水病ワクチン | |
JP2007320869A (ja) | 肥満の予防・治療剤および食品 | |
US20040126392A1 (en) | Cancer preventive agent and food | |
JP4422404B2 (ja) | 感染予防・治療剤および食品 | |
CN116606761B (zh) | 一种能够缓解类风湿性关节炎的动物双歧杆菌乳亚种BLa19及其应用 | |
JPH04144678A (ja) | プソイドモナスの変異株yzh株とこの株の応用により851yzh栄養液の製造方法 | |
TWI358266B (ja) | ||
JP2007269701A (ja) | 血栓症予防・治療剤および食品 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090508 |
|
A762 | Written abandonment of application |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A762 Effective date: 20111110 |