JP2007119472A - 人類のＨＩＦ−１α遺伝子と調節ネットの下流の関連遺伝子を封鎖する一類のクロマチン・ペプチド（Ｃｈｒｏｍａｔｉｎｐｅｐｔｉｄｅｓ） - Google Patents

Abstract

【課題】ＨＩＦ−１α遺伝子と調節ネットの下流の関連遺伝子を封鎖することが可能なクロマチン・ペプチドを提供する。
【解決手段】人間の細胞酸欠反応のルートを封鎖する一種のクロマチン・ペプタイドは関連の転写因子のDNA親和構造ドメイン序列とその生体工分子あるいはデリバティブであり，5-100のアミノ酸の残基を含む。HIF-1α因子のプロモ−タ−（Promoter）あるいはその表現する転写因子に駆動される４０以上の下流の遺伝子のプロモ−タ−（Promoter）としっかりに結び付けられて，長い時間に細胞の解糖系/あるいは免疫炎症反応と/あるいは血管発生反応の細胞酸欠反応の分子のルートが封鎖できる。そして，長期的に末期ガン細胞あるいは慢性細胞が酸欠の条件でコントロールできないほど増殖することを止めることができる。
【選択図】図１Ａ

Description

発明の詳細な説明

技術分野
当発明が人類遺伝子グループ学と悪性腫瘍生物自分治療方法/技術分野に属している。具体的に言うと，本発明は人類のHIF-1α遺伝子と調節ネットの下流の関連遺伝子を封鎖する一類のクロマチン・ペプチド薬物分子，および腫瘍治療用薬物を造るためにクロマチンペプチド薬物分子の用途。クロマチンペプチドは一種のオリゴマーのペプチドであって生物の体のうちのいくつかの因子の分解産物とその産物らの生体工学分子で、普通5-100aaを含めている。それはある転写因子とDNA結合ドメイン/DNA-binding Domain(DNA？合域)の一こま。

当技術上のクロマチンペプチドは転写因子ーHIF-1αが調節ネットでHIF-1αの関連転写因子と遵助蛋白的分解？物およびその生体工学分子で，そのクロマチンペプチドには同源アミノ酸序列があり，実は転写因子と補助蛋白とHIF-1αコード遺伝子と関連遺伝子に結び合ったDNA-Binding Domain。これらのクロマチン・ペプチドはしっかりとHIF-の1αエンコード遺伝子と関連遺伝子のエンハンサー（Enhancer）/プロモ−タ−（Promoter）/サイレンサー（Silencer）に結び付いてこれらの遺伝子のクロマチン運行軌道を再構造して、長い間これらの遺伝子の表現を閉鎖して、それによって長い間細胞の累進増殖/細胞糖分解.反応を閉鎖して、免疫の炎症反応と血管反応などの細胞の酸欠反応（hypoxia response）が発生するドミノ/Domino式の遺伝子転写調節カスケード（Transcriptional regulatory cascades）を封鎖して、それによって長期にわたり中末期の癌の細胞あるいは慢性炎症の細胞は酸欠の条件の下に制御できずに増殖することを閉鎖して癌細胞のプロクッシマール・エンド侵潤を招き炎症反応と急激に悪化することを招く遠端移転の血管発生反応を終止する。これらの分子はガン細胞の悪性増殖、浸潤と移動することを予防，治療用の薬物に用いられている。その薬物はガンを抜本的に改善できる。

背景技術
生物の内でのすべての反応が二つの方向(すなわち順反応と逆反応)で調節されている。この二つの方向の調節のおかげで生物の生命活動のバランスが維持できるようになってきた。その調節は必ず相互的に関連している二つの調節分子に及んでいる。生物進化節約原理のとおりに，一種の分子は一つの方向での調節を完成した後で全体的に構造が変わる、あるいは1級の構造が変化されて、それの促進した反応を弱まるか抑えるかその逆の方向の調節の分子になってしまう。クロマチンペプタイドとそ前身を転写因子は機能の上でお互いに抵抗するで、このような方式を通して、共通の出所の分子はCisとTransの2つの方向の調節を完成する。

毎日に多くの人は悪性腫瘍で死になる。一方，その他に多くの人は九死に一生を得て、ガンを持ちながら長い時間に生きる。甚だしきに至っては全全快する；更に多くの人は体内は癌細胞を持つが、全然病状が表れていない。ある証拠によると，毎日人間の体内30-100のガン細胞を生んで、体の中で絶えず発生して消滅しているそうだ。しかし普通ガン細胞のが絶えずを生むため病気にかかっている人がいない。人類の体の自身は癌を抑える粘り強い能力を表して甚だしきに至っては治愈する能力も見える。それでは体は一体どんな方式を通して多くの患者のガンを直したのか，ガン細胞はまたどんな構造で、体のコントロールを逃れて、多くの患者を死なせるのか？人間の体に生物活性なある転写分子とDNAと結び合ったDomain/DNA-binding Domainの一こまであるクロマチンペプチドがあることが発見された。遺伝子の転写の過程で、転写分子の特異性をもって調節エレメント/プロモ−タ−（Promoter）を識別し結び付けて遺伝子転写を促進する。そして，構造が変わって，調節エレメントを離す。転写遺伝子によって発生される下流遺伝子ドミノ式の連続の反応は外部の条件例えば酸素の供給不足に制限されて，中止される場合に表された転写蛋白が過剰的に累積する。そうして，プロティナーゼ/proteasome反応が激発し分解されてクロマチンペプチドになる。そのクロマチンペプチドは依然として本来の転写遺伝子のＤＮＡ―基質に対しての特別な？和力親切力を持っていて，調整されている下流遺伝子の結び合うポイントに結びつけられてフィードバックとして遺伝子の表現を封鎖する。多くの腫瘍が発生/悪化する原因はガンの元遺伝子が過剰的に転写することである。その転写は生体固有的な「カギ切る密封反応」を通して自分のあるいは下流調節されている遺伝子の過剰的な表現を封鎖してしっかりと所在している細胞の悪性増殖を止める。これはガンにかけても全快になるあるいはガンをもちながら長い時間に生存できる患者もたくさんいる重要な原因かもしれない。でも，もっと多くの患者が悪性遺伝子の過剰的な持続表現に招かれた細胞の過剰増殖に死なれる。患者の体内に十分な「カギ切る密封反応」が触発できるクロマチンペプチドがなくて，悪性遺伝子の過剰表現が封鎖できないかもしれない。だから、クロマチンペプチドあるいはその分子を合成し補充して悪性遺伝子の過剰的表現を封鎖し，そして腫瘍細胞の悪性化増殖を止めるという方法はガンを治す最高の道になる可能性がないわけではない。私たちはある肝心な悪性遺伝子表現を封鎖できるクロマチンペプチドを発見した。

クロマチンペプチドは生命体が固有しているも一種の抜本的な薬物―抗体とよく似ているところがたくさんある。しかも両方にもそれぞれの特別な機能もある。異なる方面で異なる機能があって、体の健康維持と生命延続に役に立っている。抗体は1種類の蛋白質で、いくつかの外因性の病原体の特有な抗原を識別して結び付けて、補体の反応を誘発して、有害な病原体を分解して除き去る；体は遺伝子の再構造を通じて6万種類以上の異なっている抗原に対応する抗体をエンコードしだすことができて、その中はただとても少しの部分が大量にクローンされて使われる：ある種類の病原体が体の中に侵入する時、抗体は抗原１つの型がひとつの鍵に対してように適当な形を識別し結合して、抗原と互いに錠-カギの構造が形成している適当な形を持っている抗体を分泌する細胞がクローンされて使われる；だから、免疫反応と抗体は生命の進化してくる専門的な外因性病原体の侵入を防衛する生理機能だ。クロマチンペプチドは1種の因子分解からのオリゴマーのペプチドで、転写因子とそれによって駆動されている下流の遺伝子のポロモター上に特有なDNA-binding Domain序列を識別して結び付けて、ポロモターを封鎖し遺伝子の制御できない表現を止める。実際に細胞の自主的な生長と増殖することはそのクロマチンの型版に規範されている遺伝子の転写のドミノ式の連続の動作なので、この続けて動いているネットがいくつかの細胞の内外の要素に妨げられて邪魔される時（たとえば酸欠のため細胞の分裂遺伝子の活動を誘発させる十分なATP供給がない時）、この遺伝子の表現カスケードの上流に転写因子蛋白質が堆積し過ぎるようになって、プロティナーゼの複合体/proteasome/水分解反応を奮い立たせて、これらのごみを分解して落とす。その中で転写因子とその作用しているの底の物DNAに識別と親和される構造地域/DNA-binding Domain/の一部分が保留しておかれて基質DNAとて結びつけて、この制御できなくなった遺伝子表現カスケードと細胞の成長/増殖の活動密封し閉鎖してくる。ツカの切られた鍵のように、鎖の穴を密封して、その他の鍵でドアを開けることを遮断してくる。だから，遺伝子鍵/転写因子の鍵切り反応とクロマチンペプチドは生命進化の過程で形成した内因性遺伝子激変の所為で遺伝子表現がコントロールー出来ないことを防止するための生理機能。つまり，抗体とクロマチンペプチドは両方とも体を保護し生命を維持するという責任を負う。抗体は主に外で、外来の敵を抵抗して，外因性病元を体に堪忍できるレベルに消滅する。一方，クロマチンペプチドが主に内で，内部の反逆者を鎮めて，悪性遺伝子の過剰的な表現を体の堪忍できるレベルに抑える。この二つのシステムは「一歩退いて有利な位置を保ちながら，相手を制する」というような方式で保護を行っているので，病原体が過剰に増殖して，ある数に達する子と限りに免疫反応が誘発させて対応抗体を選択して，一定の数量にクローンするようになる。悪性の転写因子が過剰に累積した初めて，「鍵切る反応」が触発できて，十分なクロマチンペプチドを分解しだす。でも生体自分の防衛能力が全部の敵が打ち負されないで，生命の恒久的な生存が維持できない場合もある。ワクチンを注射することやクロマチンペプチドを補充する方式を通じて、生命自身の防衛の能力を強めて、生命の更に長い継続を守ることができる。周知のように、100年前に、人類はワクチンでたくさんの致命的な外因性の病原体-細菌とウイルス性疾患をみごとに制御した。今、関連クロマチンペプタイドを補充する方法で、内因性の病原体-悪質な細胞の疾病を制御することができる。

この数年来、大量の研究が行われた。多方面の証拠によると、生体が確かに上述の蛋白質の「カギ切る密封反応」とクロマチンペプチド防衛システムを進化しだしたそうだ。生物の体内に確かに活性の悪質な細胞と悪質な累進性増殖と細胞の酸欠の生理的反応を閉鎖するクロマチンペプチドが存在する。

転写因子とその誘導されたクロマチンペプチドは機能上で抵抗し合っている。このような蛋白質/誘導体のペプチドが機能上で抵抗する現象がある： HIF-1α/C-FOS/C-Mycこの三つの細胞増殖のスタート遺伝子のプロモ−タ−にCis-転写調節素子（つまり分化されたTrans-転写調節素子）がある。HIF-1αの上の赤血球の発生Cis-NFE2素子，C-FOSの上のB-の細胞の発生の Cis-MITFの素子とC-Myc上でT-細胞の発生するCis-NFAT素子、それらは細胞の発育が熟した時で、組織を分化する機能のある遺伝子グループをスタートさせると同時に、HIF-1α/C-FOS/C-Myc遺伝子の転写運動のクロマチン軌道で、胚胎の乾細胞の転写因子の結合ポイントを密封して、それによって細胞のクロマチン表現型を再構造、胚胎期の乾細胞の累進性増殖の表現型を成熟期の分化細胞の動態平衡性の増殖表現型に再構造させた。

多くの悪性腫瘍は速やかに増殖するが、一定の数に達すると，酸欠で停止する。分子のシステムから分析すれば，細胞の増殖を誘発するには十分な酸素と栄養が必要だが，上流の悪性遺伝子の過剰な持続転写が大量のエネルギーが要らないので酸素が不足になる時下流の遺伝子増殖活動が終止されるけど，上流の悪性遺伝子の過剰的な持続転写を止めてこない。だから，エネルギー欠乏は直接に下流細胞の増殖遺伝子活動を止めて，下流遺伝子からの終止信号を受けた初めて上流の悪性遺伝子転写が止まるのだ。悪性転写遺伝子が過剰的に累積することによる発生されたプロティナーゼの複合体反応から出来たクロマチンペプチドは終止信号を伝えて完成する。蛋白質/蛋白質あるいは蛋白質/DNAの間の特徴性識別と結合は生命の通信活動の基本的な方式である。両方の間の結合は普通に構造の象眼/「カギ−錠」方式の結合である。この構造ドメイン序列はほとんど疎水なアミノ酸からなっているもので，アミノ酸がフリーの状態では水に溶けにくいため，蛋白水解酵素に分解されにくい。両者が結合状態になっても，プロティナーゼが近づけにくいのため構造ドメイン部分が分解できない。このような化学特性はいつもプロティナーゼ反応の中でその構造が難を逃れる。疎水ペプチドの半減期は完全な序列を持っている蛋白のより長くて，有効な機能の薬の分量ずっと低い。その他に、私達は選んだ薬物治療用のクロマチンペプタイドが多くのアルカリ性のアミノ酸を含んで、弱酸環境のガンの塊の部位に薬物が集中することに有利である。

二種類の全序列を持っている分子の調節のサブユニット/構造ドメインの間は結び付けて、機能サブユニットの構成変化と機能行使を誘発することができて、それから二種類の分子は互いに分離して、ダイナミックの機能あるいは情報の手渡しの逆の調節/Trans-regulating機能と言う作用を実現する；一つの分解分子の構造ドメインとほかの一つの全序列分子のと結びつける時，静態の恒久の正の調節/Cis-regulating表現型.の結合が形成できる。だから，クロマチンぺプチドズ/転写遺伝子は生命分子ネットの安定の反応であるが，遺伝子表現ネットの「カギ切る密封反応」は細胞クロマチンのステンシル表現型の安定な反応で，細胞を安定な表現型に封鎖させる。ダイナミックの不安定から静態の安定になるということは細胞/システム増殖の動態平衡の原理である。上述したように、細胞の自主的な増殖活動は細胞の内での有限な空間に制限される。遺伝子表現と表現物の蛋白質の作用のこのドミノ式の交し合った一定の方向のある運動は実際には1種の多数の遺伝子の群のスイッチの連動で、１つの遺伝子グループはスタートして、活動した後ですぐ閉鎖して、次の下流の遺伝子グループの活動をスタートさせる；すべての蛋白質が正の方向の活動に完成した後に、次の活動のために空間を譲るのに自分を分解しなければならない；次の蛋白質の連動が出来るようになるために時にはまだ蛋白質の表現あるいは作用を閉鎖しなければならなくい；そこで生体は長期の進化の中で、機能活動のスタートと閉鎖の二つの動作が完成できるラバー・サビンー調和反応があるような蛋白質分子が積み出された。

たくさんの健康な細胞を代価としている伝統的な殺傷治療方法は増殖している細胞に対象している。でも実際に，多くの大切な健康な細胞例えば骨髄上皮細胞などの増殖は腫瘍細胞よりもっと早い。これは伝統的な化学療法、放射線治療と漢方医の治療法の共通の弊害。免疫の治療と遺伝子治療は悪質な細胞が選択できる、特に抗体血管の治療が甚だしきに至っては正常な細胞を傷つけないままで済ます。免疫治療に効果がない原因は普通に腫瘍細胞の特徴性を持つ免疫元がないことである。いまの研究結果によれば，自然に発生する悪性腫瘍細胞の抗原と正常な細胞の区別はただ数量が違っていることで，本質上で両方が同じだそうである。上述の遺伝子治療に作用がないのは薬物の作用のターゲットが間違えられたのである。遺伝子製品である瞬間表現した後ですぐ消えてくるダイナミックmRNAあるいは蛋白質を薬物のターゲットとすると，一時的に細胞の悪性な動作が一時的に変化し邪魔しか出来ない，その悪性な表現型が変化し封鎖できない。安定で静態なノーマル遺伝子ドミノ式の鉦？のDNAの軌道と遺伝子表現の調節素子を薬物のターゲットとさえすれば細胞の悪性表現型を恒久に変えて封鎖して根治ができるようになる。

今悪質な遺伝子の重要性を密封することに気づく人がいる。現在研究の焦点はRNAiで悪質な遺伝子を密封するのだ。試験の条件の下に、一定の実りがある。しかし，いまいくつかのとても克服できない困難に直面している、例えば、安定性の問題、細胞膜と核膜の通透運送の問題など、そのため実際の応用にとても大きい困難がある。その他のいくつかの化学の薬物で遺伝子を密封する方法が、特徴性.が低いため、医療の実践にも用いにくい。

「自然」という雑誌は2003年5月に三つの評論がHIF-1α遺伝子を話題になった。酸欠の環境に誘発機能のあるこの因子は一つのグループの遺伝子をスタートさせて，救急効能を行われていることを叙述した（Kirsty Minton THERAPEUTICS：It's suffocating in here! Nature Reviews May 2003 Vol 3 No 5）。体のある部分が傷で血が不足になる時HIF-1α遺伝子が救急車のようなものになって，まず当該システムの糖分解反応をスタートさせて，酸素のない環境にATPエネルギーを生み出して，窒息される細胞に酸素を提供して急場を救う，同時に生物の110信号でバクテリオファージと中性の粒の細胞好中球走化性因子（neutrophil）などの免疫の細胞を指揮して死亡した細胞と細胞間質をきちんと整理しにきて、生きている細胞に生存の空間を与える。また生物120信号で辺りのシステムの毛細血管を指揮してここへ成長して，酸欠のシステムに血液を輸送する。でもこの体の救急車は時によってはいい限りない。悪性腫瘍細胞が成長する時と慢性炎症細胞が炎症を起こし始める時この救急車が放火犯になっ手しまう。腫瘍細胞の糖分解をスタートさせて，ATPを生み出して酸欠のため窒息しそうになるガン細胞を助ける。免疫炎症反応を呼んで壊死する組織を取り除いて，生きるガン細胞に生存するに必要な空間と浸潤の機会を与える。ほかに，血管を誘導してガン細胞のところへ成長させて，ガン細胞に新しい酸素を提供させる上に移る機会をも提供させた。要するに，私たちの体はまだ是非をはっきりさせる知恵が進化していない。HIF-1α転写因子によってスタートさせたこの救急車は良性な人体組織のダメージを鎮める。一方，上述したようなクロマチン・ペプチドのカギきる反応の窒息環境に腫瘍細胞を急速に助け出す。それによって一部分のガンになる患者が病状の悪化で死なれる。

では，どんな状況で，腫瘍細胞の悪性増殖はこのクロマチン・ペプチドの密封反応を誘発して，体の自己治療を実現するのか。またどんな状況で，こんな密封反応を誘発し損ねて，体のコントロールから逃れるのか。細胞増殖の第一の制限は酸素である。細胞が増殖している時，一定の空間で細胞の数が多くなるに連れて，細胞の密度が高まる一方で，酸素とブドウ糖の数量を少なくなって，そして，細胞の増殖も遅くなって，とうとう止まってしまう。すなわち，細胞増殖の力とその数量が反比例となっている。そのまま増殖して，最後に一定の細胞数量と大きさがある身体の組織の塊が出てくる。皮膚の疎酸密封が一つの典型的な生理の例証である。皮膚の最も中の層のバシラル細胞は血管に接近して、十分な酸素を得て外側へ増殖し、酸素の減少が増殖のスピードを緩めて、表皮末端細胞/End cellが酸欠のため分裂を停止して、細胞核が縮まってしおれる状態になる。

腫瘍の酸欠密封は一つの典型的な病理の例証である。ある信号の遺伝子激変は細胞を外部の信号のコントロールを離れられるようになって，例えば接触抑えが狂ってしまうと，細胞が絶えずに増殖して，酸素を一つの細胞の分裂を止める臨界点まで減らす。その時細胞は萎れてしまい、あるいは睡眠状態になってしまう。

上述の最低臨界値にスタートさせた細胞増殖の密封の分子構造は：MYC類転写因子が下流の細胞増殖の遺伝子グループをスタートして，下流の細胞増殖遺伝子のドミノ式表現の連発な動作を推進して，細胞分裂の道に辿り着く。酸素が臨界値に近づくと，この動作は停止する。MYC類転写因子の数量は最高の臨界値に累積すると，プロティナーゼ/proteasomeの反応を誘導/アクティブして，細胞の増殖プロモーターと細胞の密封分子が分解されてクロマチン・ペプチドになって，この細胞増殖を促進する転写因子の遺伝子表現を封鎖する；MYC類のカギ切り・ペプチドの密封反応が制御できなくなったら、HIF-1α類のカギ切り・ペプチドの密封反応が腫瘍細胞の栄養とエネルギーの提供を制限するようになる。体が多方面でたくさんの方法で悪性細胞の制御できない増殖が抵抗できると言う能力は体の自己治療システムである。これは人間の長期的に進化した実りである。

体のある組織の細胞クロマチンが激変すれば、あるいは遺伝子が突然に変異したら，HIF-1α酸欠の誘導という方法が効果を失う，細胞の悪性増殖、浸潤と移動が下記の三つの段階で窒息性クロマチン・ペプチドの閉鎖を逃れる。まず，HIF-1α腫瘍細胞の中の糖分解をスタートさせて細胞の酸欠環境に対する忍耐力を高める。これは一番目の腫瘍が元での累積的な増殖段階である。それから，免疫炎症反応を誘発して死んだ細胞を取り除いて，生きているガン細胞に生存の空間を提供し，浸潤の機会を与える。これは二番目の腫瘍の元での浸潤段階である。最後に，血管が誘導されてガン細胞へ成長させて，ガン細胞が新しい酸素を得て，さらに移動できるようになってしまう。これは三番目の腫瘍がほかのところへ移動して，急激に悪化する段階である。細胞の悪性の増殖と停止はそれぞれ細胞増殖の転写因子とカギ切る封鎖反応で分解されたクロマチン・ぺプチドズを通して実現さらた。MYC類転写因子とHIF-1α転写因子から分解されたクロマチン・ペプチドが細胞の悪性発生と移動を封鎖して，その増殖、浸潤と転換を緩める。

ここで特別に指摘すべきのは悪性細胞と正常な細胞が栄養とエネルギーの供給と需要の方面で，巨大な違いがあることだ。あるデーターによると，細胞が成長するに要るエネルギーと栄養は細胞の活性を維持するに必要なのよりずっと多いそうだ。悪性腫瘍細胞の成長が制御できないので，正常な細胞の成長より速度は速い，もっとたくさんの栄養とエネルギーを消耗すている。有名な外科医Moses Judah Folkmanの発見によると，悪性の腫瘍が発生するとともにたくさんの血管も成長するそうだ。これは腫瘍細胞が自分に酸素の提供を高めることを通して，エネルギーと栄養を得る一つの方法である。それだけでなく，悪性腫瘍はヘモグロビンの生成を促進することを通して酸素なし代謝すなわち糖分解をスタートさせて酸素とブドウ糖の 細胞膜と血管を通すスピードを高めて酸素とエネルギーの供給不足を解決する。Folkmanは抗体血管の治療の概念を出して、悪性腫瘍の細胞の酸素とエネルギーの供給を制限するのに着手する。但し、目前に抗体血管治療に用いられる薬物のターゲットは血管の成長を促進する生成素ー遺伝子表現の産物である。例えばEndostatin，Angeostatinなどの腫瘍血管に発生を抑える用の薬物は血管と互いに反応して刺激の因子例えばVEGFを生み出して，働くようになってくる。血管の形成素の元ー遺伝子エンコードが切っていないため治療中抗体血管の形成素の変わり物あるいは抗体血管を耐えずに補充しなければいけない。

腫瘍細胞の増殖と転換がコントロールが出来なくなると，患者の病状が悪化する一方で，とうとう死に至る。この方面から見れば，患者の病状がいくら悪化しても，HIF-1α因子から分解されたクロマチン・ぺプチドズで細胞の悪化を止めると，病状を安定させることができて、生命を救う。一方，細胞の悪性の増殖にはHIF-1αの方法の以外に，ほかの方法をある。しかし，すべての実体の腫瘍の成長はエネルギーと栄養の制限を突破しなければならぬ。そのため，すべての悪性の腫瘍の成長にとって，HIF-1α転写遺伝子とそれの調節された転写因子の表現が必要だ。HIF-1αが主導している酸素制限とMYC類調節の停泊地依頼及び接触抑制ルートを突破する腫瘍の悪性成長に対して，私たちの設計した封鎖剤は細胞の表現型を悪性から正常に変える。ほかに腫瘍の塊を酸素とエネルギーの欠乏で死なせるあるいは萎れらせる。

要するに，わたしたちは体の中で酸欠制限因子であるHIF-1αの作用と腫瘍が発生する過程での作用を分析した。当時に関連の転写因子から分解されたクロマチン・ペプチドと形成の元の効能抵抗作用およびクロマチン・ペプチドが遺伝子のクロマチンの型である/サイレンサー（Silencer）インハンス（Enhancer）/プロモ−タ−（Promoter）に結び付いてから出たカギ切る反応も分析された。それらの分析を基づいて，私たちは悪性腫瘍の根本的に治す薬物としてクロマチン・ぺプチドズを発明した。そして，一連の実験でその効果と安全性を検証した。

発明の内容
本発明に及んでいるクロマチン・ペプチドは実に人間の体が自分で誘発された細胞の糖分解と免疫の炎症反応および血管反応のトミノ式の遺伝子表現活動カスケードの転写因子から形成/分解されたオリゴマーとその生体工学分子である。これらの転写因子は腫瘍細胞の悪性増殖、浸潤と転換をスダートさせる。だが，これらの転写因子から形成/分解されたクロマチン・ペプチドが腫瘍細胞の悪性成長と侵？、転換を封鎖する。それのおかげでたくさんのガンの患者は「自然に治る」ことが実現できる。当技術は人間の体でガン遺伝子の元を封鎖しガン細胞のエネルギーの提供を切って，ガン細胞を死なせる，あるいは悪性腫瘍の細胞表現型を変えるという役割を持っているいくつかのクロマチン・ペプチドあるいはそれのデリバティブを選ぶことを含めている。このクロマチン・ペプチドは人間の各種類の悪性腫瘍（髄性が出所とする流体の腫瘍を含む）の予防と治療に使えられて，予防作用と根本的に治す治療効果を持っている生物活性薬物と生体工学薬物である。

本発明の目的は：
1．人間のガン細胞の酸欠反応を止める一種のクロマチン・ペプチド薬物分子を提供する。この種類の分子は関連転写因子のDNA？和？？域序列あるいはその生体工学分子とデリバティブで，5-100のアミノ酸の残基を含めて，HIF-1α遺伝子のポロもーターあるいはその表現された転写因子に駆動されている40個以上の下流遺伝子のプロモ−タ−にしっかりと結び付くことができる。上述の分子は細胞の糖分解/免疫炎症起し反応/血管反応の細胞酸欠反応の分子のルートが恒久に封鎖できて，中末期のガン細胞あるいは慢性炎症細胞が酸欠の環境でのコントロールできない増殖をとめる。そして，細胞にプロクッサーマール・エンド（proximal end）浸潤の炎症とファー・エンド転換の血管発生反応を恒久に封鎖させ，ガン細胞の悪性過剰増殖と浸潤、転換を予防/治療する。

2．第1項のクロマチン・ペプチドが序列リストの序列1-21の中いかなる一種あるいは多種から選ばれた。

3、第2項のクロマチン・ペプチドの薬物の分子によって、第2項の指した21のクロマチン・ペプチドのいかなる1種の少ないとも三つの同源アミノ酸を持っていて，HIF-1α遺伝子あるいはその中/下流関連遺伝子DNA-？和？？域が封鎖できる3-100個のアミノ酸のペプチドとそのデリバティブである。

４、以上の第１-３項のいかなる一種のクロマチン・ペプチドによって，それはHIF-1αおよびその関連遺伝子HREコントロール素子を結ぶつけて密封するいかなるアミノ酸のシリーズTrans-のクロマチン・ペプチドで，5-100のアミノ酸からなっている。

５、以上の第１-３項のいかなる一種のクロマチン・ペプチドによって、それはHIF-1αおよびその関連遺伝子XRE素子を結ぶつけて密封するいかなるアミノ酸のシリーズCis-クロマチン・ペプチドで，5-100のアミノ酸からなっている。

６、以上の第１-３項のいかなる一種のクロマチン・ペプチドによって、それはHIF-1α転写因子調節ネットの関連遺伝子を結び付けて密封するいかなるアミノ酸のシリーズのクロマチン・ペプチドで，5-100のアミノ酸からなっている。

７、上の第二項の２１のアミノ酸序列のクロマチン・ペプチドあるいは最小の三つアミノ酸の同源の構造を持っているすべてのクロマチン・ペプチドにアミノ酸を取り除くあるいは添加して，それによって生み出された細胞酸欠反応の道を封鎖するすべてのクロマチン・ペプチドのデリバティブ，あるいはクロマチン・ペプチドの末端とラタレール・チェーン遺伝子を装飾してできる細胞酸欠反応の道を封鎖するすべてのクロマチン・ペプチドのデリバティブは細胞膜と核膜の通透性を改善し薬物の半減期と安定性を変えて，クロマチン・ペプチドの細胞酸欠反応を止める力を高める。

８、薬学の有効量を含める以上の第１-７項のいかなる一種/多種のクロマチン・ペプチド/そのデリバティブと薬学の受け入れることができるキャリヤーがある薬物の組み合わせたもの。

９、以上の第１-７項のいかなる一項のクロマチン・ペプチド/そのデリバティブ/それらを含めている組み合わせたものが人間/動物の悪性腫瘍を治療する用の薬物の作成上の役割。

１０、第８項による薬物の組み合わせたものは注射製剤あるいはカプセルおよび病状を緩和する薬物。

１１、第１-７項のいかなる一項のクロマチン・ペプチド/そのデリバティブの特徴は六つのTrans-転写因子HIFA/PAS/NPA1/SIM1/SIM2/NPA3の中のいかなるひとつあるいは多数の酸欠反応素子のHRE (hypoxia response element) 5'-[AG]CGTG-3'に結びつくことと五つのCis-転写因子ARNT/ARN2/BMAL/CLOC/NPA2の中のいかなる一つあるいは多数のXRE (XENOBIOTIC RESPONSE ELEMENT) 5'-caCGTGct-3'の素子に結び付くことだ。
HIF-1α蛋白転写因子の調節素子を分析することによって，HIF-1α遺伝子の中/下流の調節素子ができる。ランダム・ペプチド技術と天然密封剤の構造の特徴を分析することによって生体工学分子ができる。

HIF-1α遺伝子の中/下流の調節素子密封剤―クロマチン・ペプチド薬物分子は細胞酸欠反応の道であるDNA-親和構造ドメインが封鎖できる。

HIF-1α遺伝子の中/下流の調節素子密封剤―クロマチン・ペプチド薬物分子はHIF-1αエンコード遺伝子およびその中/下流の関連遺伝子が封鎖できる。しかし，高い特別性があるので，HIF-1αエンコード遺伝子およびその中/下流の関連遺伝子を封鎖しても，ほかの遺伝子の活動に影響を与えない。ほかに，正常な細胞等位基因DNA-親和構造ドメインより，腫瘍細胞のHIF-1α遺伝子及びその中流/下流調節素子密封剤―クロマチン・ペプチド薬物分子に対して，もっと親和力がある。

これらの薬物分子は細胞膜，核膜を通して，ターゲット部分に着く。だから，筋肉注射、皮膚浸透と静脈点滴の方法や腫れている部分に直接に注射することと薬を飲むなどの方法で薬をあげる。患者の具体的な状況（例えば体重，年齢，具体的な病状及医者の臨床経験）で薬の量が決められるけれど，普通一日に0.005-30mgを上げる。一回あるいは何回であげる，どちらにしてもいい。

これらの薬物分子が化学加工を受けていないので，胃酸とペプシンの消化と加水分解によわいから，直接に飲んでいけない。しかし，末端とラたレール・チェーンを化学加工すれば，胃酸とペプシンの消化と水分解に耐えるようになって，直接に飲むことができる。

これらの薬物分子が酸欠反応の遺伝子表現を封鎖することで腫瘍細胞の糖分解の方法でエネルギーを提供することを止めて，悪性細胞をエネルギーの欠乏で死なせる。
これらの薬物分子がHIF-1α遺伝子及びその中/下流関連遺伝子を封鎖することで腫瘍細胞による誘発したガンの塊の辺りの炎症を制限するあるいは完全にとめて，招かれたガン細胞の辺りの身体組織の浸潤を止める。

これらの薬物分子がHIF-1α遺伝子及びその中/下流関連遺伝子を封鎖することで悪性腫瘍細胞による誘発した血管の生成を終止して，悪性細胞の急速てきな増殖による急激な悪化と血液としている媒介の転換を緩めるあるいは終止する。

これらの薬物分子は器官と組織の正常な代謝に悪い影響を与えず，組織と細胞の更新を交渉せず，人の成長と発育にも影響なし，だから，人の体に絶対安全だ。
これらの薬物分子はいろいろな原因で誘発されたすべての実体の元がある悪性腫瘍の治療と予防に用いられる。骨髄のこぶと実体の出所の流体の悪性腫瘍例えばT細胞の白血病とＢ細胞の白血病を含んでいる。

これらの薬物分子はポリペプチドの化学合成、遺伝子工学菌発酵、動物遺伝子工学、と転写因子の発酵などの方法でできる。すべての方法は本技術分野の普通な技術人員に分かる。

当発明の内容はHIF-1α遺伝子及びその調節ネットの関連遺伝子の封鎖に用いられる一種の薬物分子を含めている。これらの薬物分子が各種の形状の薬物になることができて，元注射あるいは静脈注射、皮膚浸透、筋肉注射、カプセルを飲むなどの方法で，各種、各期間の実体出所の腫瘍の悪性転化の疾病を予防して治療することに用いる。人体の正常な細胞，組織と器官にダメージを与えないままに人体に生まれつきの天然分子と生体工学分子を補充し，ガンになった細胞を取り除く能力を高めて，腫瘍の悪性転化を緩めるあるいはガンを徹底に根治する。

当特許は薬物の分子の設計に関わって，酸欠反応/hypoxia responseの三つの効能（細胞の糖分解と免疫の炎症起こし反応および血管反応）の遺伝子グループ（遺伝子が４０以上）の調節素子に結び付いている転写遺伝子のクラスタリングを分析して，この遺伝子グループの共用している上流の転写遺伝子に検索される。HIF-1α転写遺伝子は酸欠反応の蛋白分支素で，酸素と温度に調節されて，細胞を酸素反応表現型から酸欠反応表現型に転換して，細胞の悪性増殖、浸潤と転換を誘発する。

当発明の内容は遺伝子のデータ・ベースから二種（１１個）HIF-1α関連遺伝子因子を検査する。一種は酸欠反応素子のHRE (hypoxia response element) 5'-[AG]CGTG-3'の中の六つの転写因子HIFA/PAS/NPA1/SIM1/SIM2/NPA3に結び付いている。ほかの一種はXRE (XENOBIOTIC RESPONSE ELEMENT) 5'-caCGTGct-3'素子の五つのCis-転写因子ARNT/ARN2/BMAL/CLOC/NPA2に結び付いている。HRE類とXRE類転写因子は互いに協力して、違う元と同じ元のダイマー複合素子を形成して，それぞれ遺伝子の転写の正と逆の調節に責任を負っている。HRE-素子のTrans-転写因子は遺伝子転写をスタートさせ，XRE素子のCis-転写因子は遺伝子転写を封鎖させる。

当発明の内容は遺伝子データ・ベースから検出した上述の１１個のHIF-1α関連転写因子から分解されたデリバティブのクロマチン・ペプチドと１３個の生体工学分子（総計２４個の薬物分子）を含めている。その中に三対の分子に同じアミノ酸序列を持つので，実は２１個の薬物分子（序列表と表１，２に参照）がある。それらは正の方向の調節Trans-Regulationの転写因子から形成するのか，逆の方向の調節のCi-Regulationの転写因子から形成するのかに関わらず，天然なのかそれともそれらの生体工学分子のかにも関係なし，両方とも酸欠反応hypoxia responseが封鎖できる。私たちはHRE素子とXRE素子類のクロマチン・ペプチドをそれぞれCPHTrans-n（Chromatin Peptide of HIF-1α Trans-Regulation）とCPHCis-n (Chromatin Peptide of HIF-1α Ci-Regulation)と名付けた。クロマチン・ペプタイドを設計する証拠とクロマチン・ペプタイド薬物のタゲート、クロマチン・ペプタイドのデリバティブの前身分類は表１に参照する。

私たちの分析によって，HRE素子のHIFA/PAS/ NPA1/SIM1/SIM2などの五つのTrans-転写因子には１０ペプタイド同源構造（NH₂- Arg Lys Glu Lys Ser Arg Asp Ala Ala Arg-COOH）があるほかに共通な１２ペプタイド同じ長さの構造ドメイン（NH₂-Lys Glu Lys Ser Lys Asn Ala Ala Arg Thr Arg Arg-COOH）もあるそうだ。これらの同源と同長の構造ドメインシリーズおよびそのデリバティブであるポリペプチドの序列も私たち設計した薬物分子の序列（序列リスト）である。

私たちの分析によって，XRE素子のARNT/ARN2/BMAL/CLOC/NPA2/AHRなどの六つのCis-転写因子には９ペプタイド同源構造ドメイン（NH₂- His Ser Glu Ile Glu Arg Arg Arg Arg-COOH）があるほかに共通な１２ペプタイド同じ長さの構造ドメイン（NH₂-Arg Glu Ala His Ser Gln Ile Glu Lys Arg Arg Arg-COOH）もあるそうだ。これらの同源と同長の構造ドメインシリーズおよびそのデリバティブであるポリペプチドの序列も私たち設計した薬物分子の序列（序列リスト）である。

当発明を基礎として設計された薬物分子には明確なターゲットがある。薬物分子がHIF-1α遺伝子の調節区域のサイレンサー（Silencer）/エンハンサー（Enhancer）/プロモ−タ−（Promoter）に結び付いている。調節ネットと転写因子HIF-1αの関連の中流と下流の関連因子にも薬物分子の結合ポイントがある。

HIF-1α遺伝子及びその調節ネットの関連遺伝子を封鎖する活性クロマチン・ペプタイドの発明はある生体機能反応を維持する遺伝子転写調節カスケード/Transcriptional regulatory cascadesの分析から始めたのだ。この遺伝子転写調節カスケードの理論によると，すべての生体機能反応はトミノ式の遺伝子転写調節カスケードで実現されるそうだ。このカスケードは関連遺伝子からなっていてる。上流因子が下流因子の調節素子に結び付き，下流の蛋白転写因子の表現をスタートさせる。それと同時に，全部の転写因子がエンコード自分の遺伝子のプロモ−タ−（Promoter）/サイレンサー（Silencer）/エンハンサー（Enhancer）と結合できる。そのような何度の転写因子の連動を通して，最後に機能遺伝子グループの協同表現をスタートさせて，機能を実現する。

悪性腫瘍細胞の分子構造がとても複雑だが，すべての種類の悪性細胞に適用する一つの簡単的で正しい定義がある。それは細胞の/Runaway Proliferation，良性の細胞の増殖と更新が体の微環境にコントロールされる。正常な細胞が三つの蛋白作用方法で体あるいはほかの細胞にことロールされて，それぞれ細胞の間に直接接触通信，間接分子通信と酸素/栄養供給にコントロールされる。この三つの方法がそれぞれの細胞表現型の転換スイッチ，蛋白の分枝素子C-Myc/ C-FOS/HIF-1αで実現される。三つの異なる細胞増殖蛋白ネットの下流に細胞の増殖/分化/死亡機能の遺伝子グループが繋がって，上流が各種の組織/器官の発生Trans-転写調節因子と組織の分化Cis-転写調節因子にスタートし封鎖される。

これはHIF-1αのチャンネル―酸素と栄養のコントロールと悪性腫瘍の関係：細胞の更新と増殖が普通の代謝よりもっとたくさんの栄養と酸素が要る。十分な血液供給があって，細胞組織が十分に成長できる。皮膚の表皮細胞とガン細胞の塊の肝心細胞が血液と酸素供給の不足で増殖が停止し死亡になる。この様な体の機能でたくさんの初期のガンの患者が自然に治る。近年来，これについていろいろな研究が行われた。多くの末期ガン患者のうちでの腫瘍細胞のサイジュー悪性増殖，侵？和異位移動がコントロールを逃れる。この細胞増殖を逃れる体の酸素コントロール出口が酸欠誘発因子/Hypoxia-inducible factorと言う転写因子HIF-1αだ。酸素含有量の正常な条件の下で、HIF-1αは水酸基に溶けられてペプタイドのリンクの酵素の複合物の成分V蛋白と互いに結合する。最後にubiquitinize（泛？化）されて分解してしまう。酸素が不足すればHIF-1αのubiquitinize（泛？化）が抑えなれる。HIF-1αの作用４０以上の遺伝子の転写をスタートさせる、赤血球生成素/ブドウ糖粛紹子/糖酵素/血管の内皮の増殖因子などの酸欠の条件で細胞が生存するための三つの機能反応のルートを含めている。三つの機能反応のルートは下の述のように：その一は酸素なしでATPエネルギー分子が生産できる葡萄糖酵解が誘発させられ，腫瘍細胞の酸欠に対する堪忍度が高まって酸欠条件の下で悪性増殖を誘発する。その二は免疫炎症反応の誘発。糖分解している腫瘍細胞が炎症細胞を自分の区域に移動させると言う信号を出して，大食細胞.と中性の粒の細胞（neutrophil）を含める炎症細胞を循環システムから引き出させて酸欠のガン組織に近付かせる。この反応が炎症細胞を駆動して，腫瘍区域の死んだ細胞を取り除かせて，生きている細胞を周りに浸潤させる。その三が血管生成反応の誘発。酸欠の環境にある腫瘍細胞が周りの毛細血管に信号を出して，腫れる塊の区域へ成長させて，ガン細胞に血液を提供させるようになる。この反応でガン細胞が酸素と血液を得て，そして，血管を通して別のところに移動する。

細胞の間の酸素供給調節ネットの中断がHIF-1αおよびその関連遺伝子の無秩序な表現を招き，ガン細胞が体のコントロールから逃れる。表面から見れば，蛋白作用ネット/カスケードの中断のためだそうだ。実際，蛋白のネット通信の中断がただ蛋白/酸素の不足のためでそれを表現する遺伝子DNAの欠陥ではないと，細胞を一時に増殖させる。細胞の増殖分解が終わったら，遺伝子転写調節カスケードが規範され本来の個体発育の過程で形成した正常なクロマチンの軌道に戻らせて，細胞をそれぞれに非増殖状態に駆動させる。

腫瘍細胞の悪性/累進性マ増殖が発生できて，維持できるのが上述のクロマチンの軌道に欠陥があって，細胞増殖を誘発した後で，上流の転写因子が細胞の機能代謝遺伝子グループの転写カスケードを駆動するのではない，細胞増殖をコントロール遺伝子グループの転写カスケードに駆動されて，細胞を増殖させるのである。

実際、大部分のガン細胞の悪性発生はある表型細胞の正常な遺伝子転写活動の軌道を修飾する蛋白/遺伝子（通常に腫瘍の抑制遺伝子と言われる）の欠陥で遺伝子の転写活動の脱軌と関係する。表面から見える現象と逆にガン細胞が体のコントロールを逃れることが上述の細胞増殖のコントロールネットの異常な時間と過剰な表現から始まる。細胞の悪化が悪性優位を選ぶと言う規律としたに述べる分枝素子因子だ凡愚フィード・バックずみ車という構造で維持できて，速まる。

腫瘍の悪性増殖が蛋白軌道から逃れるではなくて，Cis-蛋白で修飾されたDNA/クロマチン軌道から逃れたのだ。Cis-蛋白/DNA-binding Proteinでこの軌道を修復し完全したから初めて，悪性蛋白の過剰な表現とガン細胞のコントロールできない/Runaway増殖を有効に抑えて，悪性腫瘍の根本的に治す治療効果を実現する。だから，ミクロ遺伝子転写調節カスケードが蛋白作用調節カスケードを駆動し維持して，マクロの細胞増殖表象を示す。細胞増殖の分子ルートがDNA/クロマチンCis調節軌道に規範される上流の遺伝子転写調節ルートと遺伝子ルートに駆動される蛋白作用の調節ルートを含める。

ガンの発生システムが複雑で，関連遺伝子がたくさんある。総合に分析すれば，細胞の無秩序の繁殖のシステムがC-Myc/ C-FOS/HIF-1α調節ネットから逃れるには三つのルートがある。ほかの原因で細胞が無秩序に繁殖することがないわけではない。HIF-1α及びその調節ネットを封鎖する下流遺伝子がすべての元の異なるコントロールできない/Runaway実体細胞の繁殖に対する抑制作用がある。まず，HIF-1αルートからコントロールを逃れる細胞の無秩序な繁殖を直接に止める。次に，すべてのでところがある実体腫瘍の悪性繁殖と移動がHIF-1αの過剰表現をアクティブして酸欠発酵でガン細胞にエネルーギを与え，炎症反応をアクティブして悪性細胞に停泊地と空間を与え、血管増殖を誘発して急激に悪化と移動することを招く。クロマチン・ペプタイド薬物でHIF-1α遺伝子軌道を再構造させると，酸欠発酵反応のルートを切って，ガンの塊の辺りの過度炎症反応を抑えて，血管が癌の塊に向って成長することを抑制して，ガン細胞組織の繁殖，浸潤と移動を緩めて，あるいは徹底に抑制する。そのため，HIF-1α遺伝子及び関連遺伝子を封鎖するクロマチン・ペプタイド遺伝子封鎖剤がすべての実体腫瘍に広い治療効果がある。

私たちが設計したクロマチン・ペプタイドには普通のポリペプタイドより半減期がずっと長い。動物実験で腫瘍の辺りに注射あるいは静脈でクロマチン・ペプタイドをあげる。人間の乳腺ガン細胞株の0404 MDA-MB-435，人間の結腸の癌細胞の株HCTなどに移植されるBALB/c-nuの腫瘍と動物の腫瘍の細胞の株S-の180に移植される昆明のネズミの腫瘍に対して著しい抑制作用がある，しかも病理切片が薬物で処理された腫瘍サンプルの中心部分にガン細胞が大量に死亡したことを現した。（実例に参照）理論上で，クロマチン・ペプタイドは永遠に関連なガンの誘発遺伝子封鎖できない。人間の体の知恵があるので，普通に体は自分でガン変細胞が取り除ける。人がガンになるのは体のうちの防護システムに欠陥が出るのだ。しかし，こんな欠陥が直せる。私たち設計したクロマチン・ペプタイド薬物が大部分のガン変細胞を死なせるほかに，ガン変細胞の表現型をも変える。持続的にこれらの薬物の分子を使って、大いに体内の癌細胞の数量を下げることができる。そうすると，一、体のうちのガン細胞の数量が人体の自分で取り除ける限度に下がる。二、悪性細胞の増殖はコントロールされたので，体の免疫や代謝及び器官、組織の機能が回復し強くなってくる。悪性細胞に対する監視と清掃の力も湖上させる。最も重要なのは、悪性増殖を処理する体の力を回復させるために時間と機会が取れる。

人間遺伝子データ・ベースを検査し分析することを通して，転写因子HIF-1αエンコード遺伝子と関連中/下流転写遺伝子を封鎖するクロマチン・ペプタイド封鎖剤を設計し検証する。しかも，その中のいくつかの封鎖剤に封鎖されたバーシック・グループの序列位置をチェックした。表１、２と序列表による。

目前の研究結果と資料によると，これらのっクロマチン・ペプタイドは糖分解炎症反応、血管成長反応と関係のない転写因子を封鎖することがある。正常な細胞の繁殖と代謝に要る調節ルートを切り離す可能性もあるそうだ。例えば，上流プロモ−タ−の遺伝子調節素子に対する分析によれば、HIF-1αのプロモ−タ−の中の骨髄発生の遺伝子分枝素子のMZF1 Trans-、神経発生のHEN Cis-、上皮組織発生のTAP4 Cis-、と赤血球発生のNFE2 Cis-素子がHIF-1αエンコード遺伝子を封鎖して，骨髄と上皮組織の更新と代謝に影響を与えるかもしれない。ほかに，調節ネットHIF-1αに下流の関連遺伝子に対して分析を行って、たくさん類似する現象もあるそうだ。しかし，たくさんの動物学安全試験が私たちの設計したクロマチン・ペプタイドでがん細胞のHIF-1α遺伝子を封鎖させると，実験を受けた動物の健康がを傷つけなかったことを表明した。動物の安全試験の薬の分量は5mg/kg体重（設計の人体の薬品使用量6.25倍に相当する）で，ネズミとウサギの成長発育が悪い影響をうけなっかた（実例による）。１、成人の体のほとんどの組織が表現量が少ない、甚だしきに至っては表現しない。ダメージを受けた組織たけに表現量が高い。成年の生物の中で，HIF-1αが主に酸欠救急と関わるようだ。２、転写因子に構成されたのは調節ネットで、直接なルートではない。HIF-1αの調節ルートのほかにHIF-1αの関連細胞増殖と組織発生、代謝が別のルートもある。３、細胞増殖の酸欠コントロールのルートの分枝素子-HIF-1αの調節素子HRE/XREと空間コントロールのルートの分枝素子-C-MYCの調節素子RE（5'-CAC[GA]TG-3'）と供給コントロールのルートの分枝素子-C-FOSのクロマチン・ペプタイドの同源？？域を互いに比較して，HREの天然Trans-クロマチン・ペプタイドとC-MYC/C-FOSのクロマチン・ペプタイドの間に十分の長さのある同源構造がないことが発見された。だから私たちの発明したHIF-1αのルートを封鎖するTrans-クロマチン・ペプタイドがC-MYC/C-FOSのルートの生物機能を干渉しないで，直接通信と間接通信にコントロールされる生体の細胞の更新と分化などの正常な機能にも邪魔しない。

これらのクロマチン・ペプタイド薬物分子のガン細胞のHIF-1α遺伝子に対する封鎖が非常に専一性があることが現れる。一、HIF-1α遺伝子が封鎖される正常な細胞が少ないが，がん細胞の対立遺伝子はクロマチン・ペプタイドと結合できる。その原因が正常な細胞のHIF-1αエンコード遺伝子の区域のDNAが縮まっていて，クロマチン・ペプタイドに結合しにくいことか知れない。一方，悪性細胞のエンコード遺伝子がアクティブにされて，広がる状態になって，クロマチン・ペプタイドの薬物分子に結合やすい。二、正常細胞にとガン細胞の転写調節因子HIF-1αネット調節の関連がないDNA区域に封鎖剤の結合ポイントがない。

これらのクロマチン・ペプタイドが同時にHIF-1α遺伝子自らの転写とHIF-1α転写因子に駆動される細胞酸欠反応（細胞の糖分解と免疫炎症反応および血管更新反応）を招く４０以上の機能遺伝子の転写を封鎖して，ガン細胞がサイジュー酸欠条件で悪性増殖すると炎症反応で回りの組織に浸潤すると新しい血管を通して，前身に遺伝すると言うHIF-1αルートをも封鎖する。

詔些染色？？能？被用来同？封倣HIF-1α基因本身的粛？和HIF-1α粛？因子所嘔？的？致？胞缺？反？（糖酵解反？，免疫炎症反？和血管新生反？）的超症40个功能基因的粛？；从而？倣了癌？胞原位缺？条件下的？性■殖，通症炎症反？向製近？？侵？和通症新生血管向全身粛
移的HIF-1α途径。

大切なのはこれらのクロマチン・ペプタイドが体のたくさんの組織の更新と増殖が要る重要な細胞増殖/Cycle蛋白の活動カスケードを直接に封鎖しない，Cycle遺伝子グループの転写をスタートさせる共同の転写因子E2素子/ E2F1転写因子をも封鎖しない。酸欠環境でのガン細胞の増殖/浸潤/移動ルートを封鎖しかない。だから，体の正常な細胞に有害ではない，選択性があって，主要細胞の悪性増殖/浸潤/移動を止める。大多数の組織で発生する癌の根本的に治す薬物になれる。

人間の遺伝子調節ネットが非常に複雑で，たくさんの部分の調節ネットの秘密を明けるのが長い時間がかかる。このような情況に考慮を入れて私たちは主にクロマチン・ペプタイド薬物のターゲットの特異性測定と動物学実験で設計した薬物の安全性を検定する。

これらのクロマチン・ペプタイド薬物分子がただガン細胞の悪性増殖/浸潤/移動のルートを封鎖する。大部分の癌細胞エネルギーと栄養に不足するため死亡する。一方，HIF-1α調節が狂うため分化される細胞から出る悪性腫瘍細胞のクローンに依然として流暢な細胞の機能活動あるいは細胞死亡の遺伝子転写調節カスケードの運動の流暢なクロマチン軌道がある。それを通して，細胞が機能活動に入って，病に利用される。分化細胞に寿命が有限で，最後に全部自然に死ぬ。乾細胞の起源の腫瘍の細胞クローンはHIF-1αを密封した後で潜伏な少量の生きている転化細胞が依然として分裂と分化の力を持っている。クロマチン・ペプタイドが封鎖ターゲットから落ちるあるいは細胞分裂すると，再発する可能性がある。こんな場合にHIF-1αクロマチン・ペプタイドを補充して，長い時間に封鎖状態を維持させる。消化器と生殖システム及び外表皮のガン塊が薬物で死なせた後で自然落ちて排出される。しかし，ほかの部分で，細胞が死んでも，腫瘍が大きすぎると，細胞と組織の正常な機能に影響を与えるため，手術あるいはほかの方法で取り除かなければならない。比較的に大きな腫瘍組織に対して，手術をするとともに持続にクロマチン・ペプタイドで残る腫瘍細胞の悪化ルートを切って，各タイプのガンを無毒に根本的に治すことができる。

実施例
以下の実例で当発明を説明する。

実例の１
序列表の中の1−21のポリペプチドを固相？合成技？（SPPS）で合成する。プロテクターで保護されるアミノ酸を階段的に長くされたオリゴマーのペプチドのチェンに結合させる。このオリゴマーのペプチドのチェンが安定な粒に固定してあので簡単なフィルター技術でペプタイドを試薬、溶剤と分け離す。、合成が終わった後に、キャリヤーの上からチェンを下りてきて、純化させる。

実例の２
HIF-1α遺伝子のプロモ−タ−のHRE素子とHIF-1α転写因子の下流遺伝子のプロモ−タ−を封鎖する１４のクロマチン・ペプタイド（すなわちHRE素子を封鎖する１４のTrans-クロマチン・ペプタイドのArg Arg Lys Glu Lys Ser Arg Asp Ala Ala Arg Ser Arg Arg）。雌のマウスに前肢の脇で人間の結腸癌のひどく移転したこぶの株HCTを接種させる。接種量が一匹に５００万。五日後に一日一回に5mg/kg（体重）の比率で上述の１４のペプタイド薬物の溶液を腫瘍の周りに直接に注射する。一組に２５匹に薬物治療組と生理塩対照組と分ける。２１日後にマウスを殺して，体から腫瘍を取り出して，その重さを量った後で4％のホルムアルデヒドの中に入れる。パラフィンの切片をキシロール１、２で各１０分にデー・ワックスさせるそしてアルコールで処理され，蘇木精で染色して、また0.5％の赤いアルコールの液体で染色する。アルコールで処理された後で中性のゴムで切り輪を密封する。

結果が下のように
腫瘍の重さ抑制率＝（１−治療組の腫瘍の平均重さ ？ ×100%=86.4%
対照組の腫瘍の平均重さ
薬物治療組の中で４匹のマウスの腫瘍が完全に消える。病理切り輪は薬物処理組の腫瘍の中央部分がたくさんの死に体と細胞の欠片が現れることと腫れた塊のへりの癌細胞は依然として活躍していることを示している。

薬物のため動物の体重が著しい変化がないのでこの薬物が実験をうけた動物にとって毒性が低いことが判断できる。図１（Ａ）と（Ｂ）に示すように顕微鏡で腫瘍の中心部分の細胞形態を観察（X200）分析し写真を撮った。

実例の３
HIF-1α因子のプロモ−タ−HRE/XRE素子とHIF-1α転写下流遺伝子を封鎖するクロマチンの１０ペプタイド：すなわちHRE素子を封鎖する１０のTrans-クロマチン・ペプタイドのNH₂-Arg Lys Glu Lys Ser Arg Asp Ala Ala Arg？COOHとXRE素子を封鎖する９のCis-クロマチン・ペプタイドのNH₂-His Ser Glu Ile Glu Arg Arg Arg Arg？COOHである。この二種類のクロマチン・プペタイドが選択して，ガン細胞の悪性増殖/浸潤/移動にいかなければならない細胞酸欠反応ルートを封鎖する。正常な細胞がこのルートに行かないので，ガン患者と手術を受けた患者のよくある病状の再発を抑えて予防することに用いられて，無毒の根本的に治す治療効果を実現する。

18-20g体重の雌性の昆明のマウスの前足のわきの下で動物の骨肉腫のこぶの株S-180を接種する。すべてのネズミには250万の細胞を接種した。生理食塩水対照組、高剤量の組（5mg/kg）、中薬量の組（2mg/kg）と低薬の量の組（0.5mg/kg）を設けられてある。一組に３０匹だった。接種された二日目に一回/日腫瘍の辺りに薬物を注射してあげる。五日目，十日目，十四日目に手で触る方法で腫瘍の成長状況を判断して，腫瘍の発生率を計算する。接種を行った十四日目にマウスを殺して腫瘍の重量を量った。

十四日目の平均腫瘍重量で腫瘍の抑制率を計算させる。高中低薬量処理組がそれぞれ94.4%,69.5%と34.5%だ。統計によると，対照組に比べて，高中組にきわめて著しい相違（P<0.01）があって、低薬量組に著しい相違（P<0.05）がある。

実例の４
HRE素子を封鎖する１０のTrans-クロマチン・ペプタイドNH₂-Lys Arg Lys Glu Lys Ser Arg Asp Ala Ala Arg？COOHで人間の乳腺ガンを抑制する実験（動物で）だ。
18-20gの雌マウスBALB/c-nuの前肢の脇に人間の乳腺ガン細胞の株0404 MDA-MB-435を注射した。一匹に５００万を接種された。接種した十四日目に組を分ける。まず，腫れの大きさが100-200MM3の実験動物を選び出して，ランダムに生理塩水対照組、低薬量処理組（0.5mg/kg体重）、中薬量処理組（2mg）、と高薬量（5mg）組の四つの組に分けた。一組に１６匹。組を分けた後で毎日一回に腫瘍の周りに直接に注射をあげる。薬物をあげたあとで三日一回に腫瘍の体積を測る。２１日目にマウスを殺して腫瘍の体積と重量を測る。

実例の５
患者の肺ガンが骨髄まで移した。ほかの部分は範囲が広いから肺部に放射線治療を行う。HIF-1α遺伝子プロモ−タ−HRE素子とHIF-1α転写因子の下流遺伝子を封鎖する１４のクロマチン・ペプタイドArg Arg Lys Glu Lys Ser Arg Asp Ala Ala Arg Ser Arg Argを五日一回に注射してあげる。一回に2mgで，一ヶ月が一つのコースとした。そして，抗生物質で併発感染を制御して、5日間後に骨格の痛い病状は軽減して、20日間後に骨の痛い病状は消えてなくなって、3ヶ月の後で全部の腫瘍は消えてなくなる。

実例の６
中末期の小細胞肺ガンで、肝臓に軽微に移してきた。封鎖剤のArg Lys Glu Lys Ser Arg Asp Ala Ala Arg Cys Arg Argで腫瘍HIF-1α遺伝子のプロモ−タ−HRE素子とHIF-1α転写因子の下流遺伝子のクロマチン・ペプタイドを封鎖する。十日一回に静脈で薬をあげる。一回に5mg。１５日の後で呼吸困難と痛い病状がすべて消えてなくなる。９０日目に痰の鏡検を繰り返し、癌細胞に落ちることがなくて、100日目に検査が行われて悪質な細胞がない。

実例の７
犬の乳腺ガンで、腫れの大きさは約45mm×50mmだ。１５日一回に0.5mgの薬（Lys Arg Ala Ser Arg Asn Lys Ser Glu Lys Lys Arg Arg）を腫れ部分に直接に注射で上げる。２０日目に塊が完全に消えてしまった。

動物の安全性実験
安全実験の１
HIF-1αルートの封鎖剤がウサギに対する急性毒性の実験
体重が1.5kg-1.7kgの健康な成年ウサギを五匹/一組で組み分ける。密度が0.5mg/mlの封鎖剤の生理塩水の溶液をウサギの腹腔から注射する。0.5g/kgの比例で注射量が決められる．対照組が生理塩水が注射され，４８時間後，一時間一回にウサギに肛門の温度を測る。４８時間ない体温が正常だと言う結果が出た。

安全実験の２
HIF-1αルートの封鎖剤がマウスに対する毒性の実験
体重が20-25gの健康なマウスを２４匹（雄雌それぞれ１２匹）/一組で組み分ける。それぞれに1−21項のクロマチン・ペプタイドを腹腔から注射してあげる。20-25g/kg の比率で0.25mlの密度が2mg/mlの封鎖剤の生理塩水（0.5mg）の溶液で注射する。対照組が生理食塩水を注射する。注射した後の七日に中枢の神経システム、心臓血管システム、皮膚、毛、自主神経システム、胃腸システム、粘膜、目、呼吸システムと生殖システムの変化を観察する。そして48時間以内に毎時間肛門の温度を一回に測る。対照組が生理食塩水を注射する。結果、48時間以内、すべてのマウスの体温は正常だ。薬品使用組とは対照組がそれぞれの各行の観察指標に異常な変化がない。

安全実験の３
HIF-1αルートの封鎖剤がウサギに対する急性毒性の実験
体重が1.3kg-1.5kgの健康な成年ウサギを五匹/一組で組み分ける。密度が0.5mg/mlの封鎖剤の生理塩水の溶液をウサギの腹腔から注射する。0.5g/kgの比例で注射量が決められる．対照組が生理塩水を注射する。１８０日に一日一回に中枢の神経システム、心臓血管システム、皮膚、毛、自主神経システム、胃腸システム、粘膜、目、呼吸システムと生殖システムの変化を観察する。そして48時間以内に毎時間肛門の温度を一回に測る。薬品使用組とは対照組がそれぞれの各行の観察指標に異常な変化がない。

未治療対照組。 治療組。

Claims (11)

1. 人間の細胞酸欠反応のルートを封鎖する一種のクロマチン・ペプタイドは関連の転写因子のDNA親和構造ドメインと序列とその生体工分子あるいはデリバティブで，5-100のアミノ酸の残基を含めている。HIF-1α因子のプロモ−タ−（Promoter）あるいはその表現する転写因子に駆動される４０以上の下流の遺伝子のプロモ−タ−（Promoter）としっかりに結び付けられテ，長い時間に細胞の糖分解と /あるいは免疫炎症反応と /あるいは血管発生反応の細胞酸欠反応の分子のルートが封鎖できる。そして，長期的に末期ガン細胞あるいは慢性細胞が酸欠の条件でコントロールできないほど増殖することを止める。
2. 特許請求１によるクロマチン・ペプタイド分子は表2の序列１-２１の中のいかなる一種あるいは多種だ。
3. 特許請求２に要求によるクロマチン・ペプタイド分子と権利要求２に指す２１個のクロマチン・ペプタイドのいかなる最小三つのアミノ酸同源を持っているシリーズのいかなる一種のHIF-1α遺伝子あるいはその中/下流関連遺伝子DNA-親和ビンディンブ・ドメイン/DNA-BindingDormainの５-１００のアミノ酸あるいはペプタイドのデリバティブだ。
4. 特許請求の１-３のいかなる一項のクロマチン・ペプタイドはHIF-1α HRE調節素子を結び付けれ封鎖されるいかなるアミノ酸シリーズのTrans-クロマチン・ペプタイドで，５-１００アミノ酸からなっている。
5. 特許請求１-３によるいかなる一項のクロマチン・ペプタイドはHIF-1α XRE素子を結び付けられ封鎖させるいかなるアミノ酸シリーズ序列のCis―クロマチン・ペプタイドで、５-１００アミノ酸からなっている。
6. 特許請求１-３によるいかなる一項のクロマチン・ペプタイドはHIF-1α転写因子調節ネットの関連遺伝子のいかなるアミノ酸序列のクロマチン・ペプタイドで、５-１００アミノ酸からなっている。
7. 特許請求２に指された２１アミノ酸序列のクロマチン・ペプタイドあるいは最少三つのアミノ酸同源構造のクロマチン・ペプタイドがアミノ酸削除/添加されて出される細胞酸欠ルートを封鎖するすべてのクロマチン・ペプタイドのデリバティブで，あるいはこれらのクロマチン・ペプタイド末端/レタレール・チェーン？？遺伝子グループを加工し出した細胞酸欠ルートを封鎖するすべてのクロマチン・ペプタイドのデリバティブだ。
8. 薬学要求量を含めている権利要求１-７のいかなる一項の一種あるいは多種のクロマチン・ペプタイド/そのデリバティブと薬学に受けられるキャリヤーのある薬物組み合わせたもの。
9. 特許請求１-７のいかなる一項のクロマチン・ペプタイド/そのデリバティブ/それらをを含める組み合わせたものが人間あるいは動物の悪性腫瘍の治療薬物の作成の作用。
10. 特許請求８の薬物の組み合わせたものは注射製剤あるいはカプセルと緩和剤である。
11. 特許請求１-７の中のいかなる一項のクロマチン・ペプタイドあるいはそのデリバティブの特徴は六つのTrans転写因子HIFA/PAS/NPA1/SIM1/SIM2/NPA3の中のいかなる一つ/多数の酸欠反応素子HRE (hypoxia response element) 5'-[AG]CGTG-3'あるいは五つのCis-転写因子ARNT/ARN2/BMAL/CLOC/NPA2の中のいかなる一つ/多数のXRE (XENOBIOTIC RESPONSE ELEMENT) 5'-caCGTGct-3'素子に結び付けらていることである。

Images