JP2007077043A - ピロリン酸アナログ及びピロリン酸アナログ合成方法 - Google Patents

Abstract

【課題】新規骨格を有するピロリン酸アナログを合成する。
【解決手段】スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合してスクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を生成し、続いて、スクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を酸化又は硫化して本スクアリン酸誘導体を生成する。このようにして合成されたスクアリン酸誘導体は、ピロリン酸アナログとなりうる。
【選択図】 なし

Description

本発明は、スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合してできるピロリン酸アナログ、及びスクアリン酸アミドとリン酸との縮合によるピロリン酸アナログ合成方法に関する。

ピロリン酸は、リン酸を脱水縮合してなる化合物であり、高いエネルギーを有し生体内ではエネルギー源として用いられる。ピロリン酸をもつ化合物としては、例えば、ヌクレオシドジリン酸、ヌクレオシドトリリン酸、サイクリックＡＤＰリボース、イソペンテニルピロリン酸などがある。これらは、天然物として自然界に存在しており、特に、生体内で重要な働きを担っている。

化学的に構造や性質が類似し、類似した化学的特性を有する化合物を類縁体又は類似体と略する。また、これらは、アナログといわれている。アナログは、その化合物自体の働き、活性等を研究する上で重要な役割を果たしている。従来、ピロリン酸化合物の類縁体（以下、ピロリン酸アナログという）として、ピロホスホン酸、ピロホスホン酸、ジホスホン酸等が紹介されている（非特許文献１参照）。また、スルファモイルリン酸（非特許文献２参照）が開示されている。また、無機ピロリン酸を模した化合物であるメチレンビスホスホン酸は、抗癌活性を有する化合物として医薬上の有用性が報告されており（非特許文献３参照）、近年、その構造類似体も多く報告されている。メチレンビスホスホン酸はまた、骨粗鬆症治療薬としても有用であるとの報告もされている（非特許文献４参照）。

ロシアン・ジャーナル・オブ・ケミストリ ２００２年、２８巻、ｐ．４５０−４５４ テトラヘドロン ２００４年、６０巻、ｐ．２１８７−２１９０ バイオドラッグス ２００４年 １８巻 ｐ．２６９−２７８ Louis D Quin A Guide to Organophosphorus Chemistry ヴァイリーインターサイエンス ２０００年 ｐ．３６６

ところが、従来のピロリン酸アナログは、化学構造及び類似化学物質に限定されており、生体内におけるピロリン酸の潜在的重要性と比べれば、ピロリン酸アナログの生理活性物質としての利用は依然として不十分である。

そこで、本発明は、新規骨格を有するピロリン酸アナログ、及び新規骨格を有するピロリン酸アナログを合成することができるピロリン酸アナログ合成方法を提供することを目的とする。

スクアリン酸は、大きく分極した２つのカルボニル基とｐＫ_ａ１が０．５４、ｐＫ_ａ２が３．４８の２価の強酸性の水酸基をもつ四員環構造の化合物である。すなわち、大きな負電荷をもつ４つの酸素が結合したシクロブテン誘導体であり、その立体的及び電気的な特性がリン酸と類似しているため、リン酸アナログとしての活性を有することが期待できる。また、分極したカルボニル基は、強い水素結合能をもち、スクアリン酸のモノ置換体も分子内に大きな電荷の偏りをもつユニークな化合物である。

そこで、本発明の発明者らは、このスクアリン酸をピロリン酸の１つのリン酸基のアナログとして用い、リン酸とスクアリン酸が結合した構造が、ピロリン酸のアナログとして機能しうることを予想した。発明者らは、その観点から化合物の合成可能性と安定性とを誠意検討したところ、スクアリルアミドとリン酸基とがＰ−Ｎ結合を介して脱水縮合したスクアリルアミドリン酸が安定な化合物として合成可能で、且つ様々な誘導体に誘導可能な汎用性の高いピロリン酸ミミックとなりうることを見出した。また、この過程で有用な合成中間体として亜リン酸スクアリルアミダイト化合物を見出した。また、亜リン酸スクアリルアミダイト化合物を酸により活性化することで、スクアリルアミドリン酸を合成することができることを見出した。

すなわち、本発明に係るピロリン酸アナログは、スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合してできるスクアリン酸誘導体であり下記化学式（１）で表されることを特徴とする。

また、化学式（１）で表されるピロリン酸アナログは、下記化学式（２）で表されるスクアリルアミドホスホロアミダイト化合物の酸化又は硫化により得られる。

化学式（１）、（２）中、Ｙは、酸素原子又は硫黄原子であり、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を含む。或いは、Ｒ１，Ｒ２は互いに結合して５員環若しくは６員環を形成したものである。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。

そして更に、本発明に係るピロリン酸アナログは、スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合してできるスクアリン酸骨格を有するヌクレオシド誘導体であり、下記化学式（３）で表されることを特徴とする。

化学式（３）中、Ｚは、水酸基、２−シアノエトキシ、２−（４−ニトロフェニル）エトキシ、若しくは化学式（４）で表される官能基である。化学式（３）において、Ｒ５はリン酸保護基であり、Ｒ６，Ｒ７は互いに同一か又は異なり、Ｒ６，Ｒ７は、水素原子、アシル基、置換基を有してもよいシリル基を含む。若しくはＲ６，Ｒ７は、互いに結合して形成されるイソプロピリデン基である。Ｅは、保護基を有してもよい核酸塩基である。化学式（４）において、Ｒ８、Ｒ９は、同一又は異なるアルキル基であるか又はＲ８とＲ９とが互いに結合して環状構造をなす。

また、化学式（３）で表される化合物は、下記化学式（２）で表されるスクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を出発物質として合成される。

化学式（２）中、Ｙは、酸素原子又は硫黄原子であり、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を含む。或いは、Ｒ１，Ｒ２は互いに結合して５員環若しくは６員環を形成したものである。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。

本発明によれば、生体内で重要な働きをするピロリン酸化合物の新規構造を有するアナログを製造することができ、医薬品、農薬、阻害剤等の化学分野で有効に活用できる。

以下、本発明について詳細に説明する。

本発明の第１の実施の形態として示すピロリン酸アナログは、下記一般式（１）で表されるスクアリン酸誘導体である。

但し、化学式（１）中、Ｙは、酸素原子又は硫黄原子であり、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を含む。或いは、Ｒ１，Ｒ２は互いに結合して５員環若しくは６員環を形成したものである。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。

上記一般式（１）において、Ｙは、酸素原子又は硫黄原子であるが、特に、酸素であることが好ましい。Ｒ１，Ｒ２は、同一か又は異なるアルキル基であり、Ｒ１，Ｒ２が互いに結合して５員環又は６員環を形成していてもよい。このようなＲ１，Ｒ２としては、例えば、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基等があげられる。また、Ｒ１，Ｒ２が互いに結合して環状構造をとる場合、Ｒ１，Ｒ２が結合した窒素原子を含めて、ピロリジン−１−イル基、ピペリジン−１−イル基等があげられる。

Ｒ３は、水素原子、リン酸基の保護基である。ここで、リン酸基保護基とは、一般にＤＮＡ、ＲＮＡ等を合成する際にリン酸基の保護基として用いられているものであれば限定されない。好ましくは、メチル基、２−シアノエチル基、２−（４−ニトロフェニル）エチル基、２−トリメチルシリルエチル基などである。また、Ｒ４は、水素原子、アルキル基である。ここで、アルキル基としては、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基等があげられる。

このピロリン酸アナログとして機能するスクアリン酸誘導体は、下記化学式（２）で表されるスクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を出発物質として酸化又は硫化により得られる。

化学式（２）中、Ｙは、酸素原子又は硫黄原子を表し、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を含む。或いは、Ｒ１，Ｒ２が互いに結合して５員環若しくは６員環を形成してもよい。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸の保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。

また、本発明の第２の実施形態として示す化合物は、下記化学式（３）で表され、スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合してできるスクアリン酸骨格を有するヌクレオシド誘導体であり、ピロリン酸アナログとして機能する。

但し、化学式（３）において、Ｚは、水酸基、２−シアノエトキシ、２−（４−ニトロフェニル）エトキシ、若しくは下記化学式（４）で表される官能基である。

化学式（４）においてＲ８，Ｒ９としては、例えば、メチル基、エチル基、１−プロピル基、２−プロピル基等があげられる。また、Ｒ１，Ｒ２が互いに結合して環状構造をとる場合、Ｒ８，Ｒ９が結合した窒素原子を含めて、ピロリジン−１−イル基、ピペリジン−１−イル基等があげられる。

化学式（２）において、Ｒ５はリン酸保護基を表す。リン酸保護基とは、一般にＤＮＡ、ＲＮＡ等を合成する際にリン酸基の保護基として用いられているものであれば限定されない。好ましくは、メチル基、２−シアノエチル基、２−（４−ニトロフェニル）エチル基、２−トリメチルシリルエチル基などである。また、Ｒ６，Ｒ７は、同一又は異なり、水素原子、アシル基、シリル基、置換基を有するシリル基、若しくはＲ６，Ｒ７が互いに結合して形成されるイソプロピリデン基を表す。ここでアシル基は、炭素数２〜１０の置換基を有してもよいアシル基であれば、特に限定されないが、好ましくは、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、ベンゾイル基、フェノキシアセチル基、４−クロロベンゾイル基、４−メトキシベンゾイル基などがあげられる。

Ｅは、保護基を有してもよいヌクレオシド誘導体を表し、核酸塩基、保護基を有する核酸塩基を含む。核酸塩基とは、アデニン−９−イル、グアニン−９−イル、ウラシル−１−イル、チミン−１−イル、シトシン−１−イル等を表し、保護基とは、炭素数２〜１０のアシル基、トリチル基、置換基を有してもよいトリチル基を示す。アシル基の例としては、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、ベンゾイル基、フェノキシアセチル基、４−クロロベンゾイル基、４−メトキシベンゾイル基等があげられる。また、置換基を有してもよいトリチル基の例としては、４，４’−ジメトキシトリチル基などが例示できるが、これに限定されない。

また、上記核酸塩基と保護基との組合せでなるＥの具体例としては、６−Ｎ−ベンゾイルアデニン−９−イル、６−Ｎ−アセチルアデニン−９−イル、６−Ｎ−（４，４’ジメトキシトリチル）アデニン−９−イル、４−Ｎ−（４，４’−ジメトキシトリチル）シトシン−１−イル、２−Ｎ−イソブチルグアニン−９−イルがあげられるが、これらに限定されない。

本発明の実施の形態におけるピロリン酸アナログを合成する方法としては、スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合して下記化学式（５）で表されるスクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を生成し、続いて、スクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を酸化又は硫化して化学式（６）で表されるスクアリン酸誘導体を生成する。このようにして合成されたスクアリン酸誘導体は、ピロリン酸アナログとなりうる。

化学式中、Ｙは、酸素原子又は硫黄原子であり、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基である。或いは、Ｒ１，Ｒ２は互いに結合して５員環若しくは６員環を形成したものである。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。

以下、本発明を、実施例を用いて詳細に説明する。なお、本発明の範囲は、以下に示す実施例に限定されるものではない。
［実施例１］
２−シアノエチル−Ｎ−（２−メトキシ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−Ｎ’，Ｎ’−ジイソプロピルホスホロアミデートの合成
既知の化合物である３−アミノ−４−メトキシシクロブテン−１，２−ジオン（０．４ｍｍｏｌ、５０．８ｍｇ）を乾燥アセトニトリル４ｍｌに入れ、ジイソプロピルエチルアミン（０．６ｍｍｏｌ、７７．５ｍｇ）と、Ｏ−（２−シアノエチル）Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルクロロホスフィン（０．４４ｍｍｏｌ、１０４ｍｇ）とを加えて、アルゴン雰囲気下、室温で１時間攪拌した。その後、酸化剤としてｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキサイド（１．６ｍｍｏｌ、１７９μＬ）を更に加えて１時間室温で攪拌した。反応終了後、シリカゲルクロマトグラフィ（Ｃ２ＯＯ、３ｇ）を用いて、溶剤として１％トリエチルアミン添加クロロホルム／メタノール０％から５％の溶液を用いて精製し、８０．７ｍｇの標題化合物を得た。収率は５９％であった。

標的化合物の同定
標題化合物に対して、ＣＤＣｌ_３を溶媒として^１Ｈ−ＮＭＲ、^１３Ｃ−ＮＭＲ、^３１Ｐ−ＮＭＲ測定を行った。^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果、δ＝１．０９−１．１３ｐｐｍ（quartet、４Ｈ）、１．２２−１．２５ｐｐｍ（triplet、１２Ｈ）、２．９７−３．０１（quartet、５Ｈ）にシグナルが観測された。また、^１３Ｃ−ＮＭＲ測定の結果、δ＝１９．８５、１９．９１、２２．６９、２２．７２、４６．１０、４６．９２、４６．９６、６０．５０、６０．８６、１１７．４０、１２８．３６、１２９．１７、１８３．１４、１８７．８４であった。^３１Ｐ−ＮＭＲは、δ＝５．７３であった。

ＥＳＩＭＳ計算により、Ｃ_１４Ｈ_２３Ｎ_３Ｏ_３Ｐ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３４４．１３７５、found３４４．１４０８であった。この結果から、標題化合物が下記化学式（７）で表される２−シアノエチル−Ｎ−（２−メトキシ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−Ｎ’，Ｎ’−ジイソプロピルホスホロアミデートであると同定された。

［実施例２］
○原料合成１
５’−アミノ−５’−Ｎ−（２−メトキシ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−デオキシシチジンの合成
既知の化合物である５’−アミノ−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２’，３−Ｏ−イソプロピリデン−５’−デオキシシチジン（１．５７ｍｍｏｌ、９１５ｍｇ）をメタノール（１０ｍＬ）に溶解し、ジイソプロピルエチルアミン（０．５ｍｍｏｌ、１３５μＬ）を加えてから、３，４−ジメトキシ−３−シクロブテン−１，２−ジオン（１．５７ｍｍｏｌ、２２３ｍｇ）を加え、室温で０．５時間攪拌した。反応溶液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィ（Ｃ−２００、２０ｇ）を用いて、溶剤として１％トリエチルアミン添加クロロホルム／ヘキサン０％から５０％の溶液を用いて精製し、標題化合物を得た。

標題化合物の同定
標題化合物に対して、５００ＭＨｚ ^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った結果を示す。測定は、重ＤＭＳＯを用いて７５℃下にて行った。^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果、δ＝１．２６ｐｐｍ（singlet、３Ｈ）、１．４５ｐｐｍ（multiplet、３Ｈ）、３．５９−３．６９ｐｐｍ（２Ｈ、multiplet）、３．７３ｐｐｍ（singlet、６Ｈ）、４．０３ｐｐｍ（multiplet、１Ｈ）、４．２０ｐｐｍ（multiplet、２Ｈ）、４．７３ｐｐｍ（multiplet、１Ｈ）、４．８６ｐｐｍ（broad、１Ｈ）、５．６４ｐｐｍ（multiplet、１Ｈ）、６．８３−６．８４ｐｐｍ（multiplet、４Ｈ）、７．１４−７．２７ｐｐｍ（multiplet、９Ｈ）、７．４４−７．４６ｐｐｍ（doublet、１Ｈ）、８．５５ｐｐｍ（broad、１Ｈ）であった。この結果から、標題化合物が下記化学式（８）で表される５’−アミノ−５’−Ｎ−（２−メトキシ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−デオキシシチジンであることがわかった。

○原料合成２
５’−アミノ−５’−Ｎ−（２−アミノ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−デオキシシチジンの合成
原料合成例１で合成した５’−アミノ−５’−Ｎ−（２−メトキシ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−デオキシシチジン（１．０２ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）をメタノール（５ｍＬ）に溶解し、２Ｍ ＮＨ_３／メタノール（１．５ｍＬ）に入れ、室温で１時間攪拌した。反応終了後、ドライシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＮＨ_２、２０ｇ＋５ｇ）を用いて、溶剤としてクロロホルム／ヘキサンの０％から１００％の溶液を用いて精製し、０．６３ｍｇの標的化合物を得た。収率は６３％であった。

ＥＳＩＭＳ計算、Ｃ_３７Ｈ_３７Ｎ_５Ｏ_８［Ｍ＋Ｎａ］^＋ ７０２．２５４０、found７０２．６４５５であった。この結果から、標題化合物が下記化学式（９）で表される２−シアノエチル−Ｎ−（２−メトキシ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−Ｎ’，Ｎ’−ジイソプロピルホスホロアミデートの合成であると同定された。

○標題化合物の合成
５’−（２−（（２−シアノエトキシ）−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）ホスホリルアミノ−３，４−ジオキソ−シクロブテン−１−イル−アミノ）５’−デオキシ−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデンシチジンの合成
原料合成２で合成した５’−アミノ−５’−Ｎ−（２−アミノ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２’，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−デオキシシチジン（０．３ｍｍｏｌ、２０４ｍｇ）を乾燥アセトニトリル（４ｍＬ）に入れ、ジイソプロピルエチルアミン（１０７ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、（２−シアノエトキシ）Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルアミノクロロホスフィン（４７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を入れてアルゴン雰囲気下室温で１時間攪拌した。その後、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド（２８４μＬ、１．２ｍｍｏｌ）を加えて１時間室温で攪拌した。反応終了後、クロロホルム（２０ｍＬ）、水（２０ｍＬ）で抽出し、有機層を水（２０ｍＬ）で２回洗浄し、硫酸ナトリウムを入れて乾燥した。その後、溶媒を留去した後、シリカゲルクロマトグラフィ（Ｃ２００、１０ｇ）を用いて、溶剤として１％トリエチルアミン添加クロロホルム／メタノール０％から５％の溶液で精製し、２７９ｍｇの標的化合物を得た。

標的化合物の同定
標題化合物に対して、５００ＭＨｚ ^１Ｈ−ＮＭＲ測定を行った結果を示す。測定は、重ＤＭＳＯを用いて７５℃下にて行った。^１Ｈ−ＮＭＲ測定の結果、及び^３１Ｐ−ＮＭＲの測定結果、
δ＝１．２６ｐｐｍ（singlet、３Ｈ）、１．４５ｐｐｍ（multiplet、３Ｈ）、３．５９−３．６９ｐｐｍ（２Ｈ、multiplet）、３．７３ｐｐｍ（singlet、６Ｈ）、４．０３ｐｐｍ（multiplet、１Ｈ）、４．２０ｐｐｍ（multiplet、２Ｈ）、４．７３ｐｐｍ（multiplet、１Ｈ）、４．８６ｐｐｍ（broad、１Ｈ）、５．６４ｐｐｍ（multiplet、１Ｈ）、６．８３−６．８４ｐｐｍ（multiplet、４Ｈ）、７．１４−７．２７ｐｐｍ（multiplet、９Ｈ）、７．４４−７．４６ｐｐｍ（doublet、１Ｈ）、８．５５ｐｐｍ（broad、１Ｈ）であった。この結果から、標題化合物が下記化学式（１０）で表される５’−アミノ−５’−Ｎ−（２−メトキシ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−デオキシシチジンであることがわかった。

この方法により合成された５’−アミノ−５’−Ｎ−（２−メトキシ−３，４−ジオキシシクロブテン−１−イル）−４−Ｎ−ジメトキシトリチル−２，３’−Ｏ−イソプロピリデン−５’−デオキシシチジンは、ピロリン酸アナログとして機能しうる構造を有する。

Claims (7)

1. スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合してできるスクアリン酸誘導体であり下記化学式（１）で表されるピロリン酸アナログ。
   

   

   （但し、化学式（１）中、Ｙは、酸素原子又は硫黄原子であり、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を含む。或いは、Ｒ１，Ｒ２は互いに結合して５員環若しくは６員環を形成したものである。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。）
2. 下記化学式（２）で表されるスクアリルアミドホスホロアミダイト化合物の酸化又は硫化により得られることを特徴とする請求項１記載のピロリン酸アナログ。
   

   

   （但し、化学式（２）中、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を含む。或いは、Ｒ１，Ｒ２は互いに結合して５員環若しくは６員環を形成したものである。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。）
3. スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合してできるスクアリン酸骨格を有するヌクレオシド誘導体であり下記化学式（３）で表されるピロリン酸アナログ。
   

   

   

   （但し、化学式（３）において、Ｚは、水酸基、２−シアノエトキシ、２−（４−ニトロフェニル）エトキシ、若しくは化学式（４）で表される官能基である。化学式（３）において、Ｒ５はリン酸保護基であり、Ｒ６，Ｒ７は互いに同一か又は異なり、Ｒ６，Ｒ７は、水素原子、アシル基、置換基を有してもよいシリル基を含む。若しくはＲ６，Ｒ７は、互いに結合して形成されるイソプロピリデン基である。Ｅは、保護基を有してもよい核酸塩基である。化学式（４）において、Ｒ８、Ｒ９は、同一又は異なるアルキル基であるか又はＲ８とＲ９とが互いに結合して環状構造をなす。）
4. 下記化学式（２）で表されるスクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を出発物質とすることを特徴とする請求項３記載のピロリン酸アナログ。
   

   

   （但し、化学式（２）中、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を含む。或いは、Ｒ１，Ｒ２は互いに結合して５員環若しくは６員環を形成したものである。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。）
5. 上記ヌクレオシド誘導体は、保護基としてジメトキシトリチル基を有することを特徴とする請求項３記載のピロリン酸アナログ。
6. 上記ヌクレオシド誘導体は、デオキシチジン誘導体であることを特徴とする請求項５記載のピロリン酸アナログ。
7. スクアリン酸アミドとリン酸とを縮合して下記化学式（５）で表されるスクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を生成し、
   上記スクアリルアミドホスホロアミダイト化合物を酸化又は硫化して下記化学式（６）で表されるスクアリン酸誘導体であるピロリン酸アナログを生成するピロリン酸アナログ合成方法。
   

   

   

   （但し、化学式中、Ｙは、酸素原子又は硫黄原子であり、Ｒ１，Ｒ２は互いに同一か又は異なるアルキル基、アリール基、又はヘテロアリール基を含む。或いは、Ｒ１，Ｒ２は互いに結合して５員環若しくは６員環を形成したものである。また、Ｒ３は、水素原子、リン酸保護基であり、Ｒ４は、水素原子又はアルキル基である。）