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Description
この上に記述した方法を用いて勾配を生じさせたが、ここでは、アクリル酸および1,7−オクタジエンを単量体として用いた。勾配を分析する(図3に示す)ことで酸官能基の濃度が勾配の長さ方向に沿って低くなることが分かる。個別に行った2つの実験で、前記勾配表面上でヒト線維芽細胞およびメラニン細胞を標準的培養条件(血清を使用)下で培養した。
本発明の好適な実施態様は次のとおりである。
1. i)単量体源から少なくとも1種のプラズマ単量体を基質の表面に付着させ、かつ前記単量体を付着させている間、前記単量体および/または前記表面を相互に関連させて動かすことで非均一プラズマ重合表面を生じさせるか、或は
ii)空間的に離れて位置する少なくとも2つの単量体源から少なくとも1種のプラズマ単量体を前記表面に付着させることで非均一プラズマ重合表面を生じさせ、そして
iii)前記プラズマ重合表面の少なくとも一部に結合体を導入することで前記結合体が非均一表面を形成するようにするが、前記結合体が細胞が増殖または付着し得る表面を与える、
ことで得ることができる基質。
2. 前記結合体がカルボキシルまたはアミン官能基を含んで成る上記1記載の基質。
3. 前記結合体が細胞、代謝産物、薬学的に活性のある薬剤;ホルモン、抗体、酵素、受容体を包含する蛋白質;DNA、RNA、蛋白質断片、ペプチド、ポリペプチドを包含する巨大分子;リガンド、プロテオグリカン、炭水化物、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、毒性試薬体および化学種から成る群から選択される上記1記載の基質。
4. 前記結合体が固定または吸着される生物学的実体を含んで成る上記1記載の基質。
5. 前記生物学的実体が蛋白質または蛋白質断片である上記4記載の基質。
6. 前記結合体が前記プラズマ重合表面の官能基と共有結合で相互作用している上記1記載の細胞基質。
7. 前記結合体が前記プラズマ重合体表面に固定されている上記1記載の基質。
8. 前記結合体が前記プラズマ重合体表面の官能基と化学的に結合している上記1記載の基質。
9. 前記結合体が前記プラズマ重合表面の官能基と非共有結合で相互作用している上記1記載の基質。
10. 細胞が前記プラズマ重合表面の結合体と相互作用する上記1記載の基質。
11. 前記単量体が揮発性アルコールである上記1記載の基質。
12. 前記単量体が揮発性酸である上記1記載の基質。
13. 前記単量体が揮発性アミンである上記1記載の基質。
14. 前記単量体が揮発性炭化水素である上記1記載の基質。
15. 前記単量体が揮発性フルオロカーボンである上記1記載の基質。
16. 前記単量体がエチレンオキサイド型分子である上記1記載の基質。
17. 前記単量体が揮発性シロキサンである上記1記載の基質。
18. 前記単量体がN−ビニルピロリドン、アリルアルコール、アクリル酸、オクタ−1,7−ジエン、アリルアミン、パーフルオロヘキサン、テトラエチレングリコールのモノアリルエーテルおよびヘキサメチルジシロキサン(HMDSO)から成る群から選択される上記1記載の基質。
19. 前記重合体が単一種の単量体から作られたものである上記1記載の基質。
20. 前記単量体が本質的にエチレン系不飽和有機化合物から成る上記17記載の基質。
21. 前記単量体が本質的に単一種のエチレン系不飽和有機化合物から成る上記18記載の基質。
22. 前記単量体がエチレンオキサイド型分子から成る上記19記載の基質。
23. 前記単量体が2種以上のエチレン系不飽和有機化合物の混合物から成る上記18記載の基質。
24. 前記化合物が炭素原子が20個以下の数で含有するアルケン、カルボン酸、アルコールおよびアミンから成る群から選択される上記18記載の基質。
25. 前記重合体が共重合体である上記1記載の基質。
26. 前記共重合体が少なくとも1種の有機単量体と少なくとも1種の炭化水素を含んで成る上記23記載の基質。
27. 前記単量体が少なくとも6.6x10-2ミリバールの蒸気圧を示す重合性単量体である上記1記載の基質。
28. 前記単量体1種または2種以上が前記表面に空間的に離れて位置する点の状態で付着している上記1記載の基質。
29. 前記単量体1種または2種以上が前記表面に軌道または線の状態で付着している上記1記載の基質。
30.前記線、軌道または点の化学的組成および/または官能性が長さ方向に沿って非均一である上記26または27記載の基質。
31. 前記線、軌道または点の化学的組成および/または官能性が高さ方向に非均一である上記1記載の基質。
32. 前記表面が非結合表面を与えるようにエチレン−オキサイド型単量体の重合体で構成されていてプラズマが付着しない領域を含んで成る上記1記載の基質。
33. 該基質がガラス、プラスチック、ニトロセルロース、ポリフッ化ビニリデン(PVdF)、ポリカーボネート、ポリ(メタアクリル酸メチル)、ナイロン、金属、セラミック、石英、複合構造体およびケイ素ウエーハから成る群から選択される上記項のいずれか記載の基質。
34. 前記プラスチックがポリエチレンテレフタレート、高密度ポリエチレン、低密度ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレンおよびポリスチレンから成る群から選択される上記33記載の基質。
35. 基質を含んで成る細胞培養装置であって、前記基質の少なくとも1つの表面の少なくとも一部に非均一プラズマ重合体表面を付着させることで得ることができる表面を含有する細胞培養装置。
36. 上記項いずれか記載の基質を含んで成る細胞培養装置。
37. 該装置が検定用製品の一部である上記35または36記載の細胞培養装置。
38. 前記検定用製品がマイクロアレイである上記37記載の細胞培養装置。
39. 前記検定用製品がマイクロタイタープレートである上記37記載の細胞培養装置。
40. 前記検定用製品がマイクロ流体工学素子または一部を含んで成る上記37記載の細胞培養装置。
41. 上記1から34のいずれか記載の基質を細胞の培養で用いる使用。
42. 上記1から34のいずれか記載の基質を細胞の分離で用いる使用。
43. i)上記1記載の基質を準備し、
ii)前記基質の表面を選別することで前記表面に結合した細胞の結合特性を決定するが、前記結合特性は、それが前記表面に結合する位置で識別可能であり、そして
iii)前記結合特性を用いて細胞の識別を行う、
段階を含んで成る生物学的分子を選別する方法。
本発明の好適な実施態様は次のとおりである。
1. i)単量体源から少なくとも1種のプラズマ単量体を基質の表面に付着させ、かつ前記単量体を付着させている間、前記単量体および/または前記表面を相互に関連させて動かすことで非均一プラズマ重合表面を生じさせるか、或は
ii)空間的に離れて位置する少なくとも2つの単量体源から少なくとも1種のプラズマ単量体を前記表面に付着させることで非均一プラズマ重合表面を生じさせ、そして
iii)前記プラズマ重合表面の少なくとも一部に結合体を導入することで前記結合体が非均一表面を形成するようにするが、前記結合体が細胞が増殖または付着し得る表面を与える、
ことで得ることができる基質。
2. 前記結合体がカルボキシルまたはアミン官能基を含んで成る上記1記載の基質。
3. 前記結合体が細胞、代謝産物、薬学的に活性のある薬剤;ホルモン、抗体、酵素、受容体を包含する蛋白質;DNA、RNA、蛋白質断片、ペプチド、ポリペプチドを包含する巨大分子;リガンド、プロテオグリカン、炭水化物、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、毒性試薬体および化学種から成る群から選択される上記1記載の基質。
4. 前記結合体が固定または吸着される生物学的実体を含んで成る上記1記載の基質。
5. 前記生物学的実体が蛋白質または蛋白質断片である上記4記載の基質。
6. 前記結合体が前記プラズマ重合表面の官能基と共有結合で相互作用している上記1記載の細胞基質。
7. 前記結合体が前記プラズマ重合体表面に固定されている上記1記載の基質。
8. 前記結合体が前記プラズマ重合体表面の官能基と化学的に結合している上記1記載の基質。
9. 前記結合体が前記プラズマ重合表面の官能基と非共有結合で相互作用している上記1記載の基質。
10. 細胞が前記プラズマ重合表面の結合体と相互作用する上記1記載の基質。
11. 前記単量体が揮発性アルコールである上記1記載の基質。
12. 前記単量体が揮発性酸である上記1記載の基質。
13. 前記単量体が揮発性アミンである上記1記載の基質。
14. 前記単量体が揮発性炭化水素である上記1記載の基質。
15. 前記単量体が揮発性フルオロカーボンである上記1記載の基質。
16. 前記単量体がエチレンオキサイド型分子である上記1記載の基質。
17. 前記単量体が揮発性シロキサンである上記1記載の基質。
18. 前記単量体がN−ビニルピロリドン、アリルアルコール、アクリル酸、オクタ−1,7−ジエン、アリルアミン、パーフルオロヘキサン、テトラエチレングリコールのモノアリルエーテルおよびヘキサメチルジシロキサン(HMDSO)から成る群から選択される上記1記載の基質。
19. 前記重合体が単一種の単量体から作られたものである上記1記載の基質。
20. 前記単量体が本質的にエチレン系不飽和有機化合物から成る上記17記載の基質。
21. 前記単量体が本質的に単一種のエチレン系不飽和有機化合物から成る上記18記載の基質。
22. 前記単量体がエチレンオキサイド型分子から成る上記19記載の基質。
23. 前記単量体が2種以上のエチレン系不飽和有機化合物の混合物から成る上記18記載の基質。
24. 前記化合物が炭素原子が20個以下の数で含有するアルケン、カルボン酸、アルコールおよびアミンから成る群から選択される上記18記載の基質。
25. 前記重合体が共重合体である上記1記載の基質。
26. 前記共重合体が少なくとも1種の有機単量体と少なくとも1種の炭化水素を含んで成る上記23記載の基質。
27. 前記単量体が少なくとも6.6x10-2ミリバールの蒸気圧を示す重合性単量体である上記1記載の基質。
28. 前記単量体1種または2種以上が前記表面に空間的に離れて位置する点の状態で付着している上記1記載の基質。
29. 前記単量体1種または2種以上が前記表面に軌道または線の状態で付着している上記1記載の基質。
30.前記線、軌道または点の化学的組成および/または官能性が長さ方向に沿って非均一である上記26または27記載の基質。
31. 前記線、軌道または点の化学的組成および/または官能性が高さ方向に非均一である上記1記載の基質。
32. 前記表面が非結合表面を与えるようにエチレン−オキサイド型単量体の重合体で構成されていてプラズマが付着しない領域を含んで成る上記1記載の基質。
33. 該基質がガラス、プラスチック、ニトロセルロース、ポリフッ化ビニリデン(PVdF)、ポリカーボネート、ポリ(メタアクリル酸メチル)、ナイロン、金属、セラミック、石英、複合構造体およびケイ素ウエーハから成る群から選択される上記項のいずれか記載の基質。
34. 前記プラスチックがポリエチレンテレフタレート、高密度ポリエチレン、低密度ポリエチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレンおよびポリスチレンから成る群から選択される上記33記載の基質。
35. 基質を含んで成る細胞培養装置であって、前記基質の少なくとも1つの表面の少なくとも一部に非均一プラズマ重合体表面を付着させることで得ることができる表面を含有する細胞培養装置。
36. 上記項いずれか記載の基質を含んで成る細胞培養装置。
37. 該装置が検定用製品の一部である上記35または36記載の細胞培養装置。
38. 前記検定用製品がマイクロアレイである上記37記載の細胞培養装置。
39. 前記検定用製品がマイクロタイタープレートである上記37記載の細胞培養装置。
40. 前記検定用製品がマイクロ流体工学素子または一部を含んで成る上記37記載の細胞培養装置。
41. 上記1から34のいずれか記載の基質を細胞の培養で用いる使用。
42. 上記1から34のいずれか記載の基質を細胞の分離で用いる使用。
43. i)上記1記載の基質を準備し、
ii)前記基質の表面を選別することで前記表面に結合した細胞の結合特性を決定するが、前記結合特性は、それが前記表面に結合する位置で識別可能であり、そして
iii)前記結合特性を用いて細胞の識別を行う、
段階を含んで成る生物学的分子を選別する方法。
Claims (5)
- i)単量体源から少なくとも1種のプラズマ単量体を基質の表面に付着させ、かつ前記単量体を付着させている間、前記単量体および/または前記表面を相互に関連させて動かすことで非均一プラズマ重合表面を生じさせるか、或は
ii)空間的に離れて位置する少なくとも2つの単量体源から少なくとも1種のプラズマ単量体を前記表面に付着させることで非均一プラズマ重合表面を生じさせ、そして
iii)前記プラズマ重合表面の少なくとも一部に結合体を導入することで前記結合体が非均一表面を形成するようにするが、前記結合体が細胞が増殖または付着し得る表面を与える、
ことで得ることができる基質。 - 基質を含んで成る細胞培養装置であって、前記基質の少なくとも1つの表面の少なくとも一部に非均一プラズマ重合体表面を付着させることで得ることができる表面を含有する細胞培養装置。
- 請求項1記載の基質を細胞の培養で用いる使用。
- 請求項1記載の基質を細胞の分離で用いる使用。
- i)請求項1記載の基質を準備し、
ii)前記基質の表面を選別することで前記表面に結合した細胞の結合特性を決定するが、前記結合特性は、それが前記表面に結合する位置で識別可能であり、そして
iii)前記結合特性を用いて細胞の識別を行う、
段階を含んで成る生物学的分子を選別する方法。
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