JP2006505799A - Nmrを使用する配列決定のための新規方法 - Google Patents
Nmrを使用する配列決定のための新規方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2006505799A JP2006505799A JP2004560266A JP2004560266A JP2006505799A JP 2006505799 A JP2006505799 A JP 2006505799A JP 2004560266 A JP2004560266 A JP 2004560266A JP 2004560266 A JP2004560266 A JP 2004560266A JP 2006505799 A JP2006505799 A JP 2006505799A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- oligosaccharide
- experimental
- nmr spectroscopy
- property
- nmr
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N24/00—Investigating or analyzing materials by the use of nuclear magnetic resonance, electron paramagnetic resonance or other spin effects
- G01N24/08—Investigating or analyzing materials by the use of nuclear magnetic resonance, electron paramagnetic resonance or other spin effects by using nuclear magnetic resonance
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
- Y10T436/143333—Saccharide [e.g., DNA, etc.]
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- High Energy & Nuclear Physics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Description
本発明は、多糖の組成情報および配列情報を分析するための方法に関する。
ヘパリンおよび硫酸ヘパラングリコサミノグリカンは、種々の生理状態および病理学的状態に関する酸性多糖複合体である。生物学の種々の領域における進歩は、血栓症(Petitouら、1999)、新脈管形成(Sasisekharanら、1997)、ウイルス侵襲(Chenら、1997;Fryら、1999;Shuklaら、1999)および腫瘍増殖(Hulettら、1999;Vlodavskyら、1999;Liuら、2002)を含めた重要な生物学的プロセスにおけるHSGAGの強力な役割を解明した(CasuおよびLindahl、2001;Lindahl、2000;SasisekharanおよびVenkataraman、2000;Shriverら、2002)。HSGAGポリマーの繰り返し単位は、ウロン酸(U)を含む二糖であり、ウロン酸は、α−D−グルコサミン残基(A)に1→4に結合した二つの異なるエピ異性体形態−α−L−イズロン(I)またはβ−D−グルクロン(G)中に存在し得る。ウロン酸の2−O位置、グルコサミンの3−Oおよび6−O位置における硫酸化およびグルコサミンのN位置の硫酸化またはアセチル化の形態中の二糖単位内に変異がある(CasuおよびLindahl、2001)。
本発明は、一部は、オリゴ糖(例えば、HSGAG)を分析するための分析手段に関する。オリゴ糖の配列および/または組成の決定は、重要な生物学的プロセスにおけるオリゴ糖の構造−機能関係を解明するのに役立つ。
ヘパリンおよびヘパラン硫酸グリコサミノグリカン(HSGAG)は、多数のシグナル伝達分子、酵素、病原体に結合し、かつ細胞増殖および発生から抗凝血およびウイルス侵入までにわたる重要な生物学的プロセスを調節する、細胞表面多糖類である。ヘパリンは、数十年間、種々の臨床応用において抗凝血剤として広く使用されている。HSGAGの異質性および複雑性は、それらの精製および構造機能関係の特徴付けに対する重要な課題を呈示する。
1.セミカルバジド
2.ジラールP試薬
3.ジラールT試薬
4.p−アミノ安息香酸エチルエステル
5.ビオチン−x−ヒドラジド
6.2−アミノベンズアミド
7.2−アミノピリジン
8.アントラニル酸
9.5−[(4,6−ジクロロトリアジン−2−イル)アミノ]−フルオレセイン
10.8−アミノナフタレン−1,3,6−トリスルホン酸
11.2−アミノアクリドン。
合成ペンタサッカリドP1およびP2(AT−III結合のための、ヘパリンの活性配列に対応する)は、M.Petitou,Sanofi−Synthelabo,Toulouse,Franceから寄贈された。デカサッカリドH10(親切にも、R.J.Linhardt(University of Iowa)により寄贈された)を、ブタ粘膜ヘパリンのヘパリナーゼ消化物を、以前に記載されるように(Toidaら,1996)、AT−IIIカラムで分画することにより得た。
オリゴ糖サンプルを、2mgのペンタサッカリドおよび150μgのH10を0.5mlのD2O 99.99%に溶解することによって調製した。H10中の常磁性イオンによって引き起こされたシグナルの拡がりに起因して、重水素化EDTAをサンプルに添加して、これらのイオンを除去した(Nevilleら,1989)。1H−NMRスペクトルを、残りの水シグナルの予備飽和および12秒のリサイクル遅延を伴うBruker AMX 500分光光度計で、500MHzにおいて60℃で記録した;45°パルスを使用した。2D DQF−COSY(二重量子フィルタ(Double Quantum Filtered)−COSY)およびTOCSYを、TPPI(時間比例相増加(Time Proportional Phase Incrementation))を使用して相敏感モードで測定し、シフトした平方正弦ベル関数(shifted square sine− bell function)を、フーリエ変換の前に適用した。各FIDについて32回および512回の走査を、それぞれ、ペンタサッカリドおよびデカサッカリドに使用した。
オリゴ糖の組成分析を、以前に記載されるように(Venkataramanら,1999)、30μMサンプルの徹底的な酵素消化、続いて、キャピラリー電気泳動(CE)によって完了した。簡潔には、1nmolのオリゴ糖に、25mM 酢酸ナトリウム、100mM NaCl、5mM 酢酸カルシウム緩衝液(pH7.0)中で、200nMのヘパリナーゼI、II、およびIIIを添加した。反応を、30℃で一晩進め、次いで、泳動緩衝液(50mM Tris/リン酸塩/10μM硫酸デキストラン、pH2.5)を用いて逆極性でCEにより分析した。
PENは、一連の、+または−サインビットとしてウロン酸の二進法オン/オフ状態およびエピマー化として二糖構成ブロックの硫酸化パターンをコードする数値表記法である。これは、サイン付き16進法符号化スキーム(signed hexadecimal coding scheme)(Venkataramanら,1999)をもたらす。PENフレームワークは、本来、U−A二糖構築ブロック(Di)をコードするために開発されたが、このフレームワークを、ウロン酸単糖(U)を表すための基数(base)4コードおよびグルコサミン単糖(A)を表すための基数8コードに数学的に分解した(図1)。ΔU−A連結について、G/I位置において使用される*は、ウロン酸のエピマー状態が未確認であることを示すことに注意のこと。A−U連結を示すサイン付き16進法コードが、本来のPENフレームワークから、Aをコードする3つの二進法ディジットおよびUをコードする2つの二進法ディジットの再配列(rearrangement)を含むことに注意することもまた重要である。再配列の結果として、+および−サインは、ウロン酸のエピマー状態の代わりに、グルコサミンの6−O硫酸化(ここで+は、硫酸化されていないことを示し、−は、硫酸化されていることを示す)を表すために使用される。なぜなら、6−O硫酸化は、A−U二糖コードの最も左の位置にあるからである。従って、A−U二糖を表すために追加された「余分の」二進法ディジットはなく、本発明者らは、サイン付きの基数1616進法コードをなお使用する。さらに、PENフレームワークもまた、ウロン酸のエピマーおよび硫酸化状態をコードする2ビットで、グルコサミンの硫酸化状態をコードする3ビットを移項することにより、A−U二糖単位(Di’)をコードするために使用した(表1)。NMRデータおよびCEデータから得た情報を、Aに示す。列1〜3は、グルコサミン残基の間の連結の数を示す(灰色で着色)。列4のウロン酸は、NMRデータから得た。列5〜7は、CEデータから得た、ウロン酸とグルコサミンとの間の連結を示す。単糖組成を満足する配列およびA−U連結情報(Di’)を、Bに示す。CEデータからのU−A連結の適用は、LNMRを最後の正しい配列にする。
(実施例1:五糖類P1)
単糖類のアノマープロトンのいくつかの特徴的な化学シフトが、五糖類の1DプロトンNMRスペクトルにおいて観察された(図2A)。1Dプロトンシグナルを、2D COSYスペクトルおよびTOCSYスペクトルと共に使用して、単糖類を帰属した。5.648ppm、5.438ppmおよび5.041ppmにおけるシグナルパターンを、N−硫酸化グルコサミン(ANS,6X)のアノマープロトンに帰属した。さらに、これらの全てのグルコサミンの6−O硫酸化を、TOCSYによって確認した。3.43/57.5ppmにおけるシグナルは、還元末端に結合したO−メチル基の存在を示す。さらに、還元末端におけるメチル基の存在もまた、代表的な還元末端の炭素の化学シフト(92〜93ppm)の非存在を説明する。5.251および4.635における化学シフトは、それぞれI2SおよびGと一致する。5.648および5.438におけるアノマープロトンのシグナルは、それぞれANS,6S−I2SおよびANS,6S−Gから生じるとして、さらに区別される。
1=n2=1)を決定した。さらに、結合Di’=[−516(ANS,6S−I2S);−616(ANS,6S−G)]もまた、NMRデータから得られた。NMRデータからのこの情報に基づいて、2つの可能な(LNMR)五糖類配列が存在し得る:58 14 58 24 58(ANS,6S−I2S−ANS,6S−G−ANS,6S,OMe)および58 24 58 14 58(ANS,6S−G−ANS,6S−I2S−ANS,6S,OMe)。
1Dプロトンスペクトル(図2B)から、シグナルパターン(5.64/99.6ppm、5.50/98.1ppmにおけるアノマーピーク)は、N−硫酸化,6−O−硫酸化グルコサミン(ANS,6S)および余分の3−Oスルフェート基を有するA*と一致する。実施例1と同様に、3.43/57.5ppmにおけるシグナルパターンは、メチル化された還元末端を有するグルコサミンに対応する。また、5.64ppmにおけるアノマー化学シフトは、実施例1に示されるように、Gに結合したANS,6Sから生じる。5.20/101.7ppmおよび4.78/72.4ppmにおけるシグナルは、I2S残基のH1およびH5と一致し、そして4.6/103.3ppmにおけるアノマーシグナルは、Gと一致する(MulloyおよびJohnson,1987;Yatesら、1996)。従って、Ui=[14(I2S);24(G)]およびAi=[58;58(ANS,6S);78(A*)]である。この場合において、本発明者らは、Di’の2つの要素のうちの一方のみを、[−616(ANS,6S−G)]と規定した。NMRデータからの妨害を制約として組み込むことによって、本発明者らは、LNMR=2の配列を得た:58 24 78 14 58(ANS,6S−G−A*−I2S−ANS,6S,OMe)および78 14 58 24 58(A*−I2S−ANS,6S−G−ANS,6S,OMe)。
最初の2つの合成五糖類の例は、本発明者らのアプローチの方法論を明らかに概説するが、この方法は、より長く、より複雑なヘパリン由来のオリゴ糖類(H10)によって、よりよく説明される。この配列は、現在、ヘパリン由来のオリゴ糖類配列のうちで、これまでの最も複雑なものである。大きな努力が、H10の単離および配列決定につぎ込まれたことを指摘することが、重要である(Toidaら、1996)。その複雑さに起因して、過去において、その構造決定における不正確さが存在し、そしてほんの最近、分析ツールの組み合わせを使用して、この配列が確立された(Venkataramanら、1999;Shriverら、2000)。NMR分光法が、過去において、その配列を確証するために使用された(Shriverら、2000)が、単糖類の組成のみが確立され、そして決定された配列に基づくNMRデータの解析に、偏りが存在した。これらの例を使用して、本発明者らは、複雑なヘパリン由来のオリゴ糖類の構造の、偏りのない帰属を提供する際の本発明者らのアプローチの融通性を強調する。
化学シフトは、標準としてのプロピオン酸トリメチルシリル(TSP)よりも下のppmとして与える。
b−非還元性ΔUユニットによる後のANS,6S残基のH4化学シフト。
Claims (28)
- オリゴ糖の組成を決定する方法であって、該方法は、NMR分光法を用いて該オリゴ糖の第1の特性の測定値を得る工程、および第2の実験法により該オリゴ糖の第2の特性の測定値を得る工程を包含し、ここで該第1の特性および該第2の特性は、該組成を決定する、方法。
- 請求項1に記載の方法であって、前記オリゴ糖の第2の特性は、キャピラリー電気泳動によって測定される、方法。
- オリゴ糖を分析する方法であって、該方法は、第1の実験法によって該オリゴ糖の二糖連結の第1の型の測定値を得る工程、および第2の実験法により該オリゴ糖の二糖の第2の型の測定値を得て、該オリゴ糖を分析する工程を包含する、方法。
- 請求項3に記載の方法であって、前記二糖連結の第1の型は、NMR分光法によって測定される、方法。
- 請求項3に記載の方法であって、前記二糖連結の第2の型は、キャピラリー電気泳動によって測定される、方法。
- オリゴ糖を分析する方法であって、該方法は、NMR分光法により該オリゴ糖の第1の特性を同定する工程、およびキャピラリー電気泳動により該オリゴ糖の第2の特性を同定して、該オリゴ糖を分析する工程、を包含する、方法。
- 請求項1または4に記載の方法であって、該方法は、前記NMR分光法および前記第2の実験法からの前記測定値と一致する前記オリゴ糖のあり得る配列を決定する工程をさらに包含する、方法。
- 請求項1または4に記載の方法であって、該方法は、前記NMR分光法からの前記測定値に基づいて、あり得る配列のリストを構成する工程、および前記第2の実験法の前記測定値と一致しない、該あり得る配列のリストから配列を排除する工程をさらに包含する、方法。
- 請求項1、3、4、7または8に記載の方法であって、前記第2の実験法は、前記オリゴ糖またはそのフラグメントの還元末端または非還元末端を区別する、方法。
- 請求項9に記載の方法であって、前記第2の実験法は、化学的分解を含む、方法。
- 請求項9に記載の方法であって、前記第2の実験法は、末端標識を含む、方法。
- 請求項1、3、4、7または8に記載の方法であって、前記第2の実験法は、前記オリゴ糖またはそのフラグメントの還元末端のサインを決定する、方法。
- 請求項12に記載の方法であって、前記還元末端のサインは、キャピラリー電気泳動によって決定される、方法。
- 請求項1、2、4、6、7または8に記載の方法であって、前記NMR分光法は、前記オリゴ糖またはそのフラグメントの硫酸化パターンの決定を含む、方法。
- 請求項1、3、4、7または8に記載の方法であって、前記第2の実験法は、前記二糖連結の第2の型の前記硫酸化パターンの決定を可能にする、方法。
- 請求項1〜8のいずれか1項に記載の方法であって、該方法は、前記オリゴ糖のさらなる特性の尺度を、第3の実験法によって得て、該第3の実験法から得た測定値と一致しない配列をさらに排除する工程をさらに包含する、方法。
- 請求項1、2、4、6、7または8に記載の方法であって、前記NMR分光法は、1Dプロトンまたは2D COSY/TOCSYである、方法。
- 請求項1、2、4、6、7または8に記載の方法であって、前記NMR分光法は、そのインタクトな形態で前記オリゴ糖に対して行われる、方法。
- 請求項1、3、4、7または8に記載の方法であって、前記第2の実験法は、前記オリゴ糖をフラグメント化形態に消化する工程を包含する、方法。
- 請求項19に記載の方法であって、前記フラグメント化形態は、酵素的消化により生成される、方法。
- 請求項20に記載の方法であって、前記酵素的消化は、完全である、方法。
- 請求項1に記載の方法であって、前記NMRは、還元末端および非還元末端の両方を同定および定量するために行われる、方法。
- オリゴ糖のあり得る配列のリストを生成する方法であって、該方法は、該オリゴ糖の特性のセットを、NMR分光法および第2の実験法を行うことにより規定する工程であって、ここで該NMR分光法は、二糖連結の第1の型の測定値を提供し、該第2の実験法は、二糖連結の第2の型の測定値を提供する、工程、および該オリゴ糖の特性の該セットに基づいて、あり得る配列のリストを構築する工程、を包含する、方法。
- 請求項23に記載の方法であって、前記NMR分光法は、前記オリゴ糖の単糖組成の尺度を含む、方法。
- 請求項23に記載の方法であって、該方法は、非文字値として前記特性を表すデータ構造をさらに含む、方法。
- 請求項25に記載の方法であって、前記データ構造は、単糖の各型についての値を含む、方法。
- 請求項25に記載の方法であって、前記データ構造は、二糖連結の各型についての値をコードする、方法。
- 請求項25に記載の方法であって、前記値は、二進法である、方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US38194002P | 2002-05-20 | 2002-05-20 | |
PCT/US2003/015850 WO2004055491A2 (en) | 2002-05-20 | 2003-05-20 | Novel method for sequence determination using nmr |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009187897A Division JP2009300452A (ja) | 2002-05-20 | 2009-08-13 | Nmrを使用する配列決定のための新規方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2006505799A true JP2006505799A (ja) | 2006-02-16 |
JP4657726B2 JP4657726B2 (ja) | 2011-03-23 |
Family
ID=32595013
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004560266A Expired - Fee Related JP4657726B2 (ja) | 2002-05-20 | 2003-05-20 | Nmrを使用する配列決定のための新規方法 |
JP2009187897A Pending JP2009300452A (ja) | 2002-05-20 | 2009-08-13 | Nmrを使用する配列決定のための新規方法 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009187897A Pending JP2009300452A (ja) | 2002-05-20 | 2009-08-13 | Nmrを使用する配列決定のための新規方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US7508206B2 (ja) |
EP (1) | EP1590648A4 (ja) |
JP (2) | JP4657726B2 (ja) |
AU (1) | AU2003302219B8 (ja) |
CA (1) | CA2486456C (ja) |
WO (1) | WO2004055491A2 (ja) |
Families Citing this family (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2341412A1 (en) * | 1998-08-27 | 2000-03-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed heparinases derived from heparinase i and ii |
JP4824170B2 (ja) * | 1999-04-23 | 2011-11-30 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | ポリマーを表記するためのシステムおよび方法 |
WO2001066772A2 (en) * | 2000-03-08 | 2001-09-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Heparinase iii and uses thereof |
ES2324701T3 (es) * | 2000-09-12 | 2009-08-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Metodos y productos relacionados con heparina de peso molecular bajo. |
AU2440802A (en) | 2000-10-18 | 2002-04-29 | Massachusetts Inst Technology | Methods and products related to pulmonary delivery of polysaccharides |
WO2004069152A2 (en) | 2002-05-03 | 2004-08-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Δ4,5 glycuronidase and uses thereof |
EP1590648A4 (en) * | 2002-05-20 | 2007-04-18 | Massachusetts Inst Technology | NEW TECHNIQUE FOR MRI SEQUENCE DETERMINATION |
AU2003243396A1 (en) | 2002-06-03 | 2003-12-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed polysaccharide lyases derived from chondroitinase b |
JP4606712B2 (ja) * | 2003-01-08 | 2011-01-05 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | 2−oスルファターゼ組成物および関連の方法 |
US7507570B2 (en) * | 2004-03-10 | 2009-03-24 | Massachusetts Institute Of Technology | Recombinant chondroitinase ABC I and uses thereof |
US20060057638A1 (en) * | 2004-04-15 | 2006-03-16 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and products related to the improved analysis of carbohydrates |
US20060127950A1 (en) * | 2004-04-15 | 2006-06-15 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and products related to the improved analysis of carbohydrates |
WO2006088491A2 (en) | 2004-06-29 | 2006-08-24 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions related to the modulation of intercellular junctions |
US20060154894A1 (en) * | 2004-09-15 | 2006-07-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Biologically active surfaces and methods of their use |
US7767420B2 (en) | 2005-11-03 | 2010-08-03 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Heparan sulfate glycosaminoglycan lyase and uses thereof |
WO2007120478A2 (en) * | 2006-04-03 | 2007-10-25 | Massachusetts Institute Of Technology | Glycomic patterns for the detection of disease |
CA2674493C (en) | 2007-01-05 | 2017-05-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions of and methods of using sulfatases from flavobacterium heparinum |
CN102206690A (zh) * | 2011-03-13 | 2011-10-05 | 广元市海鹏生物科技有限公司 | 一种肝素寡糖的制备方法 |
CN106093379A (zh) * | 2016-06-08 | 2016-11-09 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 一种氨基脲衍生化试剂及其快速检测卡 |
EP3273239A1 (en) * | 2016-07-19 | 2018-01-24 | Laboratorios Farmacéuticos Rovi, S.A. | Procedure of analysis of glycosaminoglycans, heparins and their derivatives by nuclear magnetic resonance |
CN110376235B (zh) * | 2019-07-18 | 2020-09-15 | 浙江大学 | 基于核磁共振技术的三尖杉宁碱的空间相关谱测试方法 |
US20230408611A1 (en) * | 2020-11-24 | 2023-12-21 | The Johns Hopkins University | Magnetic resonance imaging of glycogen and other polysaccharides by magnetic coupling with water |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5284558A (en) * | 1990-07-27 | 1994-02-08 | University Of Iowa Research Foundation | Electrophoresis-based sequencing of oligosaccharides |
JPH06506830A (ja) * | 1991-05-07 | 1994-08-04 | オックスフォード・グリコシステムズ・リミテッド | オリゴ糖の配列決定 |
Family Cites Families (45)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3962699A (en) * | 1974-07-15 | 1976-06-08 | Brunson Raymond D | Switch closure responsive logic signal generation means |
US7339604B1 (en) * | 1992-02-19 | 2008-03-04 | 8X8, Inc. | Videoconferencing arrangement having multi-purpose digital still camera |
US5607859A (en) | 1994-03-28 | 1997-03-04 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and products for mass spectrometric molecular weight determination of polyionic analytes employing polyionic reagents |
US6217863B1 (en) | 1995-10-30 | 2001-04-17 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed polysaccharide lyases derived from heparinase I |
ES2312178T3 (es) * | 1996-08-30 | 2009-02-16 | Institut Pasteur | Procedimiento de clasificacion de moleculas antifungicas activas en la actividad glucanosiltransferasa. |
TW557327B (en) * | 1996-11-08 | 2003-10-11 | Hayashibara Biochem Lab | Kojibiose phosphorylase, its preparation and uses |
US6689604B1 (en) * | 1998-03-20 | 2004-02-10 | National Research Council Of Canada | Lipopolysaccharide α-2,3 sialyltransferase of Campylobacter jejuni and its uses |
US6190522B1 (en) * | 1998-04-24 | 2001-02-20 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Analysis of carbohydrates derivatized with visible dye by high-resolution polyacrylamide gel electrophoresis |
US7056504B1 (en) * | 1998-08-27 | 2006-06-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed heparinases derived from heparinase I and II |
CA2341412A1 (en) * | 1998-08-27 | 2000-03-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed heparinases derived from heparinase i and ii |
US6699705B2 (en) * | 1999-02-01 | 2004-03-02 | National Research Council Of Canada | Campylobacter glycosyltransferases for biosynthesis of gangliosides and ganglioside mimics |
US6429302B1 (en) * | 1999-02-02 | 2002-08-06 | Chiron Corporation | Polynucleotides related to pancreatic disease |
JP4824170B2 (ja) * | 1999-04-23 | 2011-11-30 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | ポリマーを表記するためのシステムおよび方法 |
WO2001066772A2 (en) * | 2000-03-08 | 2001-09-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Heparinase iii and uses thereof |
ES2324701T3 (es) * | 2000-09-12 | 2009-08-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Metodos y productos relacionados con heparina de peso molecular bajo. |
AU2440802A (en) | 2000-10-18 | 2002-04-29 | Massachusetts Inst Technology | Methods and products related to pulmonary delivery of polysaccharides |
EP1358458B1 (en) * | 2000-10-19 | 2012-04-04 | Target Discovery, Inc. | Mass defect labeling for the determination of oligomer sequences |
EP1397484A4 (en) | 2001-03-27 | 2005-05-25 | Massachusetts Inst Technology | METHODS AND PRODUCTS RELATED TO DIMERIZATION OF FIBROBLAST GROWTH FACTORS |
AU2002312146A1 (en) * | 2001-05-30 | 2002-12-09 | Triad Therapeutics, Inc. | Nuclear magnetic resonance-docking of compounds |
US7157277B2 (en) * | 2001-11-28 | 2007-01-02 | Neose Technologies, Inc. | Factor VIII remodeling and glycoconjugation of Factor VIII |
US7317091B2 (en) * | 2002-03-01 | 2008-01-08 | Xencor, Inc. | Optimized Fc variants |
JP4828795B2 (ja) * | 2002-03-11 | 2011-11-30 | モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 硫酸化多糖類の分析 |
WO2004069152A2 (en) * | 2002-05-03 | 2004-08-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Δ4,5 glycuronidase and uses thereof |
EP1590648A4 (en) * | 2002-05-20 | 2007-04-18 | Massachusetts Inst Technology | NEW TECHNIQUE FOR MRI SEQUENCE DETERMINATION |
AU2003243396A1 (en) | 2002-06-03 | 2003-12-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed polysaccharide lyases derived from chondroitinase b |
JP4606712B2 (ja) * | 2003-01-08 | 2011-01-05 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | 2−oスルファターゼ組成物および関連の方法 |
US7407810B2 (en) * | 2003-09-04 | 2008-08-05 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Methods and apparatus for characterizing polymeric mixtures |
JP4548702B2 (ja) * | 2003-10-02 | 2010-09-22 | キヤノン株式会社 | 撮像装置および撮像システム |
US7851223B2 (en) | 2004-02-27 | 2010-12-14 | Roar Holding Llc | Method to detect emphysema |
US7507570B2 (en) * | 2004-03-10 | 2009-03-24 | Massachusetts Institute Of Technology | Recombinant chondroitinase ABC I and uses thereof |
US20060057638A1 (en) * | 2004-04-15 | 2006-03-16 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and products related to the improved analysis of carbohydrates |
WO2005110438A2 (en) | 2004-04-15 | 2005-11-24 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and products related to the intracellular delivery of polysaccharides |
US20060127950A1 (en) * | 2004-04-15 | 2006-06-15 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and products related to the improved analysis of carbohydrates |
US7358346B2 (en) * | 2004-04-23 | 2008-04-15 | L'oreal | C-glycosides, uses thereof |
WO2006088491A2 (en) | 2004-06-29 | 2006-08-24 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions related to the modulation of intercellular junctions |
US20060154894A1 (en) * | 2004-09-15 | 2006-07-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Biologically active surfaces and methods of their use |
WO2006072004A2 (en) * | 2004-12-30 | 2006-07-06 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for analyte measurement test time |
WO2006076627A2 (en) | 2005-01-12 | 2006-07-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions related to modulating the extracellular stem cell environment |
US20090156477A1 (en) * | 2005-03-29 | 2009-06-18 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions and Methods for Regulating Inflammatory Responses |
US20090105463A1 (en) * | 2005-03-29 | 2009-04-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions of and Methods of Using Oversulfated Glycosaminoglycans |
US7691612B2 (en) * | 2005-11-03 | 2010-04-06 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Heparan sulfate glycosaminoglycan lyase and uses thereof |
US7767420B2 (en) * | 2005-11-03 | 2010-08-03 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Heparan sulfate glycosaminoglycan lyase and uses thereof |
WO2007120478A2 (en) | 2006-04-03 | 2007-10-25 | Massachusetts Institute Of Technology | Glycomic patterns for the detection of disease |
US7541806B2 (en) * | 2006-06-24 | 2009-06-02 | Forschungszentrum Julich Gmbh | Method for molecule examination by NMR spectroscopy |
CA2674493C (en) * | 2007-01-05 | 2017-05-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions of and methods of using sulfatases from flavobacterium heparinum |
-
2003
- 2003-05-20 EP EP03810037A patent/EP1590648A4/en not_active Withdrawn
- 2003-05-20 US US10/441,970 patent/US7508206B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-05-20 AU AU2003302219A patent/AU2003302219B8/en not_active Ceased
- 2003-05-20 WO PCT/US2003/015850 patent/WO2004055491A2/en active Application Filing
- 2003-05-20 CA CA2486456A patent/CA2486456C/en not_active Expired - Fee Related
- 2003-05-20 JP JP2004560266A patent/JP4657726B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-06-24 US US12/144,995 patent/US7728589B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-10-29 US US12/261,000 patent/US7737692B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2009
- 2009-08-13 JP JP2009187897A patent/JP2009300452A/ja active Pending
-
2010
- 2010-05-05 US US12/774,335 patent/US8018231B2/en not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5284558A (en) * | 1990-07-27 | 1994-02-08 | University Of Iowa Research Foundation | Electrophoresis-based sequencing of oligosaccharides |
JPH06506830A (ja) * | 1991-05-07 | 1994-08-04 | オックスフォード・グリコシステムズ・リミテッド | オリゴ糖の配列決定 |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
JPN6009017053, Vito Ferro et al., "Determination of the composition of the oligosaccharide phosphate fraction of Pichia (Hansenula) hol", Carbohydrate Research, 20020205, Vol.337 No.2, pp.139−146 * |
JPN6009017055, Ernst Haslinger et al., "Sequential Analysis Oligosaccharide Structures by Modern NMR Techniques", Liebigs Annalen der Chemie, 199007, No.7, pp.713−714 * |
JPN6009017057, Pauline M.Rudd et al., "Oligosaccharide sequencing technology", nature, 199707, Vol.388 No.6638, pp.205−207 * |
JPN6009017058, 松田和雄, "オリゴ糖の構造研究", 澱粉科学, 1981, Vol.28 No.2, pp.100−108 * |
JPN6009017059, 戸井田敏彦 他, "ヘパラン硫酸およびヘパラン硫酸オリゴ糖の構造解析", Trends In Glycoscience and Clycotechnology, 199803, Vol.10 No.52, pp.125−136 * |
JPN6009017060, 久松眞 他, "NMRとFAB−MSによるオリゴ糖の構造解析", 化学と生物, 19921025, Vol.30 No.10, pp.649−655 * |
JPN6010064599, Ganesh Venkataraman et al., "Sequencing Complex Polysaccharides", SCIENCE, 1999, Vol.286, pp.537−542 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US7728589B2 (en) | 2010-06-01 |
AU2003302219A1 (en) | 2004-07-09 |
US7737692B2 (en) | 2010-06-15 |
AU2003302219B2 (en) | 2009-02-19 |
US20080278164A1 (en) | 2008-11-13 |
US20090045811A1 (en) | 2009-02-19 |
WO2004055491A8 (en) | 2007-05-18 |
AU2003302219B8 (en) | 2009-03-26 |
WO2004055491A3 (en) | 2007-04-05 |
JP2009300452A (ja) | 2009-12-24 |
US20100216176A1 (en) | 2010-08-26 |
CA2486456A1 (en) | 2004-07-01 |
EP1590648A4 (en) | 2007-04-18 |
EP1590648A2 (en) | 2005-11-02 |
JP4657726B2 (ja) | 2011-03-23 |
US8018231B2 (en) | 2011-09-13 |
US20040092037A1 (en) | 2004-05-13 |
CA2486456C (en) | 2012-07-17 |
US7508206B2 (en) | 2009-03-24 |
WO2004055491A2 (en) | 2004-07-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2009300452A (ja) | Nmrを使用する配列決定のための新規方法 | |
JP4824170B2 (ja) | ポリマーを表記するためのシステムおよび方法 | |
Shriver et al. | Sequencing of 3-O sulfate containing heparin decasaccharides with a partial antithrombin III binding site | |
ES2324701T3 (es) | Metodos y productos relacionados con heparina de peso molecular bajo. | |
Korir et al. | Advances in the separation, sensitive detection, and characterization of heparin and heparan sulfate | |
Guerrini et al. | A novel computational approach to integrate NMR spectroscopy and capillary electrophoresis for structure assignment of heparin and heparan sulfate oligosaccharides | |
Gheysen et al. | Rapid identification of common hexapyranose monosaccharide units by a simple TOCSY matching approach | |
Wang et al. | Sequencing the oligosaccharide pool in the low molecular weight heparin dalteparin with offline HPLC and ESI–MS/MS | |
Duan et al. | An automated, high-throughput method for interpreting the tandem mass spectra of glycosaminoglycans | |
ES2894898T3 (es) | Método de análisis de glicosaminoglicanos, heparinas y sus derivados por resonancia magnética nuclear | |
An et al. | Oligosaccharide mapping analysis by HILIC-ESI-HCD-MS/MS for structural elucidation of fucoidan from sea cucumber Holothuria floridana | |
Wang et al. | Recent advances in mass spectrometry analysis of low molecular weight heparins | |
Cros et al. | Combined NMR and molecular modeling study of an iduronic acid-containing trisaccharide related to antithrombotic heparin fragments | |
Sasisekharan | Novel method for sequence determination using NMR | |
Beecher et al. | Screening enoxaparin tetrasaccharide SEC fractions for 3-O-sulfo-N-sulfoglucosamine residues using [1 H, 15 N] HSQC NMR | |
Capila et al. | Methods for structural analysis of heparin and heparan sulfate | |
Gardini et al. | Saturated tetrasaccharide profile of enoxaparin. An additional piece to the heparin biosynthesis puzzle | |
D'Arcy et al. | Preliminary investigation into the purification, NMR analysis, and molecular modelling of chondroitin sulphate epitopes | |
Guerrini et al. | NMR in the Characterization of Complex Mixture Drugs | |
Pojasek et al. | Structural characterization of glycosaminoglycans | |
Zhu et al. | Sequencing analysis of heparin reducing terminals with orthogonal chromatographic approaches | |
Raman et al. | Informatics Concepts to Decode Structure-Function Relationships of Glycosaminoglycans | |
Serianni | 13C-1H Spin-Coupling Constants in Furanosyl Rings: Application to Oligonucleotide Structure Determination |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20060412 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090414 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20090714 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20090722 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090813 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20090813 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090907 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20091204 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100107 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100105 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20100316 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100716 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20100823 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20100921 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20101109 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20101111 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20101202 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20101222 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140107 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4657726 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |