JP2006177803A - 液体の吐出方法及びマイクロアレイの製造方法 - Google Patents
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Abstract
本発明は、繰り返し利用する際においても、生体物質を吐出する際の吐出安定性を向上させた液体の吐出方法及びそれを利用したマイクロアレイの製造方法を提供することを目的としている。
【解決手段】
生体物質を含む液体に吐出安定化剤としてホスホリルコリン基含有不飽和化合物単位からなる重合体又はこれを含む共重合体を添加し、当該吐出安定化剤を含む液体をインクジェット方式により吐出する生体物質を含む液体の吐出方法により、上記課題を解決する。前記共重合体は、ホスホリルコリン基含有不飽和化合物単位(a1)と(メタ)アクリル酸エステル単位(a2)とを構成単位として含むことが好ましい。
【選択図】 なし
Description
しかしながら、試料溶液としてタンパク質等の固相表面に付着し易い生体物質を用いた場合、液滴吐出ヘッドの内壁に生体物質が付着してしまい、液滴吐出ヘッド内を洗浄しても付着した生体物質を取除くことができず、流路性能が著しく変化して、吐出性能を下げるなどのおそれがあった。
表面処理過程(S1)では、固相担体(例:ガラス基板等)の表面に、生体物質の固定化に適した表面処理(コーティング処理)を行う。表面処理としては、例えば、アミノ基、エポキシ基、アルデヒド基、チオール基、又はカルボキシル基などの生体物質と結合可能な官能基を固相担体表面に導入する方法が挙げられる。具体的には、例えばアミノシラン、エポキシアミン又はポリ−L−リジン等によりコーティングする方法が挙げられる。なお、表面処理方法は、上記例示に限定されるものではなく、従来公知の表面処理方法を適宜用いてもよい。
次に、生体物質及び吐出安定化剤を含む試料溶液の調製を行う。試料溶液の調製方法は、吐出安定化剤を添加する以外は、従来公知の方法を用いて調製することができる。吐出安定化剤を添加する順序は、特に限定されず、いつの時点で添加してもよい。但し、生体物質の構造を一層安定化し得るという観点からは、無機の塩、あるいは低分子量から中分子量の水溶性化合物などを添加することが好ましい。
供給過程(S3)では、インクジェット方式により上記のように調製した試料溶液を上記のように表面処理した固相担体上に供給する。
上記のように固相担体上に吐出され、着弾した試料溶液を乾燥し、固定化する。試料溶液の固定化過程は、従来公知の手法で行われる。具体的には、例えば、基板を加熱することにより、試料溶液を乾燥し、固定化させることができる。なお、固定化方法は、当該方法に限定するものではなく、例えば、試料によっては高湿度環境で乾燥を防止し、固定化する方がよい場合もあり、試料によって最適な固定化手段が選択される。
本実施形態のマイクロアレイの製造方法によれば、吐出する生体物質を含む液体中に吐出安定化剤としてホスホリルコリン基含有不飽和化合物単位からなる重合体又はこれを含む共重合体を添加しているので、タンパク質等の固相表面に付着し易い生体物質を含む液体を用いた場合においても、上記重合体又は共重合体がタンパク質等の生体物質の周囲を覆い、安定化させるので、タンパク質等の生体物質が液滴吐出ヘッドの内壁に付着して、流路性能を低下させることを回避し得る。よって、インクジェット方式により生体物質を含む液体を吐出する際の吐出安定性を向上させることが可能となる。特に、液滴吐出ヘッド内の液体を除去し、リン酸緩衝液等の洗浄液により洗浄した後、試料溶液を再充填した場合においても、吐出安定性を向上させることが可能となる。
試料溶液の調製
ホスホリルコリン基含有不飽和化合物単位からなる重合体又はこれを含む共重合体(以下、PCポリマーという)としてMPCとBMA(ブチルメタクリレート)のモル比3:7の共重合体の5%水溶液を調製し、リン酸緩衝液(PBS:Phosphate Buffer Solution)で10倍に希釈した。その後、この溶液に牛血清アルブミン(BSA:Bovine Serum Alubumin)を10mg/mlの濃度で溶解し、試料溶液を調整した。
試料溶液の調製
調製例1においてPCポリマーを添加しない以外は調製例1と同様の方法により、比較例としての試料溶液を準備した。
図1及び図2に示すような静電駆動方式の液滴吐出ヘッドを用いて、調製例1と比較調製例1の試料溶液について吐出試験を行った。
吐出試験は、各々の溶液について、液滴吐出ヘッドに充填直後、1万回吐出を行い、液滴の平均重量を測定した。結果を表1に示す。
Claims (11)
- 生体物質を含む液体に吐出安定化剤としてホスホリルコリン基含有不飽和化合物単位からなる重合体又はこれを含む共重合体を添加し、当該吐出安定化剤を含む液体をインクジェット方式により吐出することを特徴とする生体物質を含む液体の吐出方法。
- 前記共重合体が、ホスホリルコリン基含有不飽和化合物単位(a1)と(メタ)アクリル酸エステル単位(a2)とを構成単位として含む、請求項1に記載の吐出方法。
- 前記共重合体が、さらに、前記(a1)及び(a2)以外のビニル化合物単位(a3)を構成単位として含む、請求項2に記載の吐出方法。
- 前記共重合体が、ホスホリルコリン基含有不飽和化合物単位(a1)と前記(a1)及び(a2)以外のビニル化合物単位(a3)とを構成単位として含む、請求項1に記載の吐出方法。
- 前記ホスホリルコリン基含有不飽和化合物単位(a1)が、2−メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン単位である、請求項1〜4のいずれかに記載の吐出方法。
- 前記構成単位(a1)/前記構成単位(a2)のモル比が、100/0〜30/70(但し、(a1)/(a2)が100/0の場合を除く)である、請求項2に記載の吐出方法。
- 前記構成単位(a3)が、前記共重合体の全構成単位を100モル%とした場合に、0〜95モル%(但し、0モル%の場合を除く)含まれる、請求項3に記載の吐出方法。
- 前記構成単位(a1)/前記構成単位(a3)のモル比が、100/0〜5/95(但し、(a1)/(a3)が100/0の場合を除く)である、請求項4に記載の吐出方法。
- 前記液体中の前記吐出安定化剤の濃度が0.005〜500mg/mlとなるように、前記液体中に前記吐出安定化剤を添加する、請求項1〜8のいずれかに記載の吐出方法。
- 前記インクジェット方式が、圧電駆動方式又は静電駆動方式である、請求項1〜9のいずれかに記載の吐出方法。
- 請求項1〜10のいずれかに記載の吐出方法を用いて、前記液体を固相担体上に吐出し、前記液体中に含まれる生体物質を当該固相担体上に固定することを特徴とするマイクロアレイの製造方法。
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