JP2005524601A5

JP2005524601A5 -

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Publication number: JP2005524601A5
Application number: JP2002526826A
Authority: JP
Filing date: 2001-09-17
Publication date: 2008-10-16

Description

【特許請求の範囲】
【請求項１】抗原を、一重項酸素および一重項酸素の発生源からスーパーオキシドまたは過酸化水素を生成し得る抗体と接触させることを含む、抗原をスーパーオキシドまたは過酸化水素に曝露する方法。
【請求項２】一重項酸素の発生源が感作剤である、請求項１記載の方法。
【請求項３】感作剤が抗体に接合される、請求項２記載の方法。
【請求項４】感作剤が、プテリン、フラビン、ヘマトポルフィリン、テトラキス(４-スルホナトフェニル)ポルフィリン、ビピリジルルテミウム(ＩＩ)複合体、ローズベンガル染料、キノン、ローダミン染料、フタロシアニンおよびハイポクレリンからなる群から選択される、請求項３記載の方法。
【請求項５】抗原が脂肪酸または低密度リポタンパク質である、請求項１記載の方法。
【請求項６】抗原が細胞上に存在する、請求項１記載の方法。
【請求項７】一重項酸素が細胞の照射から生じる、請求項１記載の方法。
【請求項８】抗体介在性スーパーオキシドまたは過酸化水素生成によって生成した過酸化水素の生成を調節する剤を同定するための方法であって、下記ステップ:
a) 一重項酸素からスーパーオキシドまたは過酸化水素を生成し得る抗体を含む組成物を、剤と接触させ、分子酸素存在下にアッセイ溶液中の混合物を形成すること、
b) 混合物を照射し、分子酸素から一重項酸素を生成すること、ここで該一重項酸素が抗体により過酸化水素またはスーパーオキシドに還元され、スーパーオキシドジスムターゼが酸化水素を形成する、
c) 形成された過酸化水素を検出すること、そして
d) 検出された過酸化水素を適当なコントロールと比較し、それによってどのように剤が過酸化水素の生成を調節するかを決定すること、を含む方法。
【請求項９】調節が過酸化水素生成の阻害である、請求項８記載の方法。
【請求項１０】調節が過酸化水素生成の生成である、請求項８の方法。
【請求項１１】照射が紫外線による、請求項８記載の方法。
【請求項１２】照射が可視光による、請求項８記載の方法。
【請求項１３】可視光照射が感作剤と抗体組成物とを混合することをさらに含む、請求項８記載の方法。
【請求項１４】形成された過酸化水素の検出が、過酸化水素について蛍光基質を持つ蛍光手段による、請求項８の方法。
【請求項１５】抗原を用いて抗体免疫活性を検出するために免疫アッセイを実施するための方法であって、下記ステップ:
a) 一重項酸素生成媒質中で、抗原または抗体を含む第一試薬を含む組成物が固定化されている基質を、第一試薬と反応性である抗原または抗体を含む第二組成物と接触させ、固定化された抗原-抗体複合体を形成すること、ここで該抗体が、酸素存在下に一重項酸素からスーパーオキシドまたは過酸化水素を生成する、そして、
b) 抗体生成スーパーオキシドまたは過酸化水素を検出すること、それによって、抗原との抗体免疫活性を検出すること、を含む方法。
【請求項１６】形成された複合体を照射することをさらに含む、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】照射が紫外線による、請求項１５記載の方法。
【請求項１８】照射が可視光による、請求項１５記載の方法。
【請求項１９】可視光照射が、感作剤と抗体とを混合することをさらに含む、請求項１８記載の方法。
【請求項２０】第一組成物が抗原であり、第二組成物が抗体である、請求項１５記載の方法。
【請求項２１】第一組成物が抗体であり、第二組成物が抗原である、請求項１５記載の方法。
【請求項２２】ステップ(ｂ)がスーパーオキシドを検出する、請求項１５記載の方法。
【請求項２３】ステップ(ｂ)が過酸化水素を検出する、請求項１５記載の方法。
【請求項２４】体液中の抗原の存在を検出するための方法であって、下記ステップ：
ａ）抗原とスーパーオキシドまたは過酸化水素を生成し得る抗体との複合体を固定化すること、そして、
ｂ）抗体によって生成されたスーパーオキシドまたは過酸化水素を検出すること、を含む方法。
【請求項２５】抗原が薬剤である、請求項２記載の方法。
【請求項２６】抗原がホルモンである、請求項２記載の方法。
【請求項２７】体液が血液または尿である、請求項２記載の方法。
【請求項２８】過酸化水素を生成し得るＴ細胞受容体を含む組成物。

amplex red アッセイがＨ_２Ｏ_２に加えてタンパク質-過酸化水素誘導体を検出するかもしれないとの懸念は、この方法で測定された見かけのＨ _２Ｏ _２濃度が、照射されたタンパク質がサンプルから除外されるかどうかに独立的であるため、無視されている。

抗体は、起源または抗原特異性にかかわらず、一重項分子酸素（^１Ｏ_２）から過酸化水素（Ｈ_２Ｏ_２）をつくり、それによって同分子中で認識および殺作用（Wentworth et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 97, 10930 (2000)）を潜在的に調整する。この発見に関する潜在的な化学的および生物学的重要性からして、この過程の抗体内での基本メカニズムおよび構造的位置を検討した。これらの組合せ試験から、他のタンパク質とは異なり、抗体が、水と一重項酸素との前例のない一連の化学反応を触媒できる。