JP2005500016A5 - - Google Patents
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Claims (55)
- 昆虫及び脊椎動物における少なくとも１つのシグナル伝達経路の一部であるポリペプチドをコードする核酸配列であって、「Ｄａｕｇｈｔｅｒ ｏｆ Ｌｅｇｌｅｓｓ」（ＤＯＬＬ）遺伝子、並びにその相同体、断片、誘導体、そして機能及び構造類似体であることを特徴とする、核酸配列。
- 前記シグナル伝達経路がＷｎｔシグナル伝達経路であることを特徴とする、請求項１に記載の核酸配列。
- 配列番号１に示されるようなヌクレオチド配列を含んでなるキイロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）ｄｏｌｌ遺伝子（ｄｄｏｌｌ）であることを特徴とする、請求項２に記載の核酸配列。
- 配列番号６に示されるようなショウジョウバエＤｏｌｌポリペプチドの断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を含んでなるポリペプチドをコードしていることを特徴とする、請求項３に記載の核酸配列。
- 配列番号２に示されるようなヌクレオチド配列を含んでなるヒトｄｏｌｌ−１遺伝子（ｈｄｏｌｌ−１）であることを特徴とする、請求項２に記載の核酸配列。
- 配列番号７に示されるようなヒトＤｏｌｌ（ｈＤｏｌｌ−１）ポリペプチドの断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を含んでなるポリペプチドをコードしていることを特徴とする、請求項５に記載の核酸配列。
- 配列番号３に示されるようなヌクレオチド配列を有するヒトｄｏｌｌ−２遺伝子（ｈｄｏｌｌ−２）であることを特徴とする、請求項２に記載の核酸配列。
- 配列番号８に示されるようなヒトＤｏｌｌポリペプチド（ｈＤｏｌｌ−２）の断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を含んでなるポリペプチドをコードしていることを特徴とする、請求項７に記載の核酸配列。
- 配列番号４に示されるようなヌクレオチド配列を含んでなるマウスｄｏｌｌ−１遺伝子（ｍｄｏｌｌ−１）であることを特徴とする、請求項２に記載の核酸配列。
- 配列番号９に示されるようなマウスＤｏｌｌポリペプチド（ｍＤｏｌｌ−１）の断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を含んでなるポリペプチドをコードしていることを特徴とする、請求項９に記載の核酸配列。
- 配列番号５に示されるようなヌクレオチド配列を含んでなるマウスｄｏｌｌ−２遺伝子（ｍｄｏｌｌ−２）であることを特徴とする、請求項２に記載の核酸配列。
- 配列番号１０に示されるようなマウスＤｏｌｌポリペプチド（ｍＤｏｌｌ−２）の断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を含んでなるポリペプチドをコードしていることを特徴とする、請求項１１に記載の核酸配列。
- 昆虫及び脊椎動物における少なくとも１つのシグナル伝達経路の一部であるポリペプチドであって、「Ｄａｕｇｈｔｅｒ ｏｆ Ｌｅｇｌｅｓｓ」（ＤＯＬＬ）タンパク質、並びにその相同体、断片、誘導体、そして機能及び構造類似体であることを特徴とする、ポリペプチド。
- 前記シグナル伝達経路がＷｎｔシグナル伝達経路であることを特徴とする、請求項１３に記載のポリペプチド。
- 配列番号６に示されるようなアミノ酸配列を有するキイロショウジョウバエＤｏｌｌタンパク質であることを特徴とする、請求項１４に記載のポリペプチド。
- 配列番号６に示されるようなＤｏｌｌポリペプチドの断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を有することを特徴とする、請求項１５に記載のポリペプチド。
- 配列番号７に示されるようなアミノ酸配列を有するヒトＤｏｌｌタンパク質（ｈＤＯＬＬ−１）であることを特徴とする、請求項１４に記載のポリペプチド。
- 配列番号７に示されるようなＤｏｌｌポリペプチドの断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を有することを特徴とする、請求項１７に記載のポリペプチド。
- 配列番号８に示されるようなアミノ酸配列を有するヒトＤｏｌｌタンパク質（ｈＤＯＬＬ−２）であることを特徴とする、請求項１４に記載のポリペプチド。
- 配列番号８に示されるようなＤｏｌｌポリペプチドの断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を有することを特徴とする、請求項１９に記載のポリペプチド。
- 配列番号９に示されるようなアミノ酸配列を有するマウスＤｏｌｌ−１タンパク質（ｍＤＯＬＬ−１）であることを特徴とする、請求項１４に記載のポリペプチド。
- 配列番号９に示されるようなＤｏｌｌポリペプチドの断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を有することを特徴とする、請求項２１に記載のポリペプチド。
- 配列番号１０に示されるようなアミノ酸配列を有するマウスＤｏｌｌ−２タンパク質（ｍＤＯＬＬ−２）であることを特徴とする、請求項１４に記載のポリペプチド。
- 配列番号１０に示されるようなＤｏｌｌポリペプチドの断片又は全配列に対して５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を有することを特徴とする、請求項２３に記載のポリペプチド。
- 低い全体アミノ酸配列同一性と、保存ドメインにおける５０％〜１００％、好ましくは１００％の配列同一性を含んでなるポリペプチドをコードしていることを特徴とする、請求項２に記載の核酸配列。
- 前記保存ドメインがＤＨＤドメインであることを特徴とする、請求項２５に記載の核酸配列。
- 前記保存ドメインがＰＨＤフィンガーであることを特徴とする、請求項２６に記載の核酸配列。
- 配列番号１、２、３、４、又は５に由来する、長さ２０〜１００ヌクレオチド、好ましくは２０〜６０ヌクレオチド、及び最も好ましくは２０〜５０ヌクレオチドの断片を含むことを特徴とする、請求項２に記載の核酸配列。
- ハイブリダイゼーションプローブとして使用される、請求項２８に記載の核酸配列。
- 配列番号１、２、３、４、又は５からなる群から選択される、ショウジョウバエ若しくは脊椎動物のｄｏｌｌ遺伝子又はその断片をコードする核酸分子を含んでなるベクター。
- 真核及び原核発現ベクターからなる群から選択される、請求項３０に記載のベクター。
- 哺乳動物細胞、酵母細胞、植物細胞、昆虫細胞、又は細菌細胞からなる群から選択される、請求項３１のベクターを含んでなる宿主細胞。
- ａ）完全なｄｏｌｌ ｃＤＮＡ配列又はその一部を含有する核酸配列を単離する工程；
ｂ）ｄｏｌｌ ｃＤＮＡ又はその断片を細菌、哺乳動物、植物、酵母、又は昆虫の細胞において組換え的に発現させる工程；
ｃ）前記細胞においてタンパク質産生を誘導する工程；
ｄ）Ｄｏｌｌタンパク質を精製する工程を含んでなる、Ｄｏｌｌタンパク質、その断片、誘導体、及び類似体の調製方法。 - 工程ａ）が、脊椎動物若しくは無脊椎動物のｃＤＮＡ若しくはゲノムライブラリーからのｄｏｌｌ ｃＤＮＡを包含する核酸分子の単離を含む、請求項３３に記載の方法。
- 工程ｂ）が、完全長若しくは先端切断（truncated）ｄｏｌｌをコードするＤＮＡの、誘導可能な真核若しくは原核発現ベクター内に含有されるエピトープタグ及び切り離し部位への融合と、割り当てた宿主細胞を前記発現ベクターで形質転換する工程を含む、請求項３３に記載の方法。
- エピトープタグ付き配列、抗体、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼタンパク質、β−ガラクトシダーゼ、及びアルカリホスファターゼからなる群から選択される異種アミノ酸配列へ融合したＤｏｌｌポリペプチドを含んでなるキメラタンパク質。
- Ｄｏｌｌポリペプチドが、ｄＤｏｌｌ、ｈＤｏｌｌ−１、ｈＤｏｌｌ−２、ｍＤｏｌｌ−１、及びｍＤｏｌｌ−２からなる群から選択されることを特徴とする、請求項３６に記載のキメラタンパク質。
- 抗Ｄｏｌｌ抗体への抗体結合部位を含んでなる、完全長Ｄｏｌｌポリペプチド又はその断片を含むことを特徴とする、請求項１４に記載のポリペプチド。
- Ｄｏｌｌポリペプチドを特異的に認識する抗体であって、ポリクローナル及びモノクローナル抗体とその断片からなる群から選択される、前記抗体。
- ショウジョウバエ、マウス、ラット、ウサギ、ニワトリ、カエル、ブタ、又はヒツジからなる群から選択される生物の使用を含んでなり、前記生物は、増加又は低下若しくは皆無のｄｏｌｌ発現を示すか、又は少なくとも１つの組織若しくは臓器において突然変異したＤｏｌｌポリペプチドを発現する、破壊されたＷｎｔ機能により誘導される疾患を研究するためか又は薬物スクリーニングのためのアッセイ。
- 前記生物がｄｏｌｌ遺伝子を異種トランス遺伝子として発現することを特徴とする、請求項４０に記載のアッセイ。
- 前記ｄｏｌｌ遺伝子が、欠失、点突然変異、異種ＤＮＡ挿入、及び逆位からなる群から選択される突然変異を含むことを特徴とする、請求項４０に記載のアッセイ。
- 細胞の運命、分化、又は増殖の障害からなる群から選択される状態の処置への治療及び診断の方法の開発への、Ｄｏｌｌタンパク質、その相同体、誘導体、及び断片の使用。
- 細胞の運命、分化、又は増殖の障害からなる群から選択される状態の診断への治療及び診断の化合物の開発への、Ｄｏｌｌタンパク質、その相同体、誘導体、及び断片の使用。
- 前記治療若しくは診断の化合物が、ショウジョウバエ及び脊椎動物のＤｏｌｌタンパク質相同体とその断片、そしてその抗体及び抗体断片からなる群から選択されることを特徴とする、請求項４４に記載のＤｏｌｌタンパク質、その相同体、誘導体、及び断片の使用。
- 細胞の運命、分化、又は増殖の障害からなる群から選択される状態の処置への治療及び／又は診断の化合物の開発への、ｄｏｌｌ核酸、その相同体、誘導体、及び断片の使用と、個体へのその適用。
- 細胞の運命、分化、又は増殖の障害からなる群から選択される状態の処置への治療及び診断の方法の開発への、ｄｏｌｌ核酸、その相同体、誘導体、及び断片の使用と、個体へのその適用。
- 前記治療若しくは診断の化合物が、ｄｏｌｌアンチセンスＤＮＡ若しくはＲＮＡ、ｄｏｌｌ二本鎖ＲＮＡ、及び、ｄｏｌｌ機能に干渉する化学的若しくは天然に存在する化合物からなる群から選択されることを特徴とする、請求項４６に記載のｄｏｌｌ核酸、その相同体、誘導体、及び断片の使用。
- Ｄｏｌｌポリペプチドの断片を含んでなるペプチド。
- ｈＤｏｌｌ−１、ｈＤｏｌｌ−２、ｍＤｏｌｌ−１、ｍＤｏｌｌ−２、及びショウジョウバエＤｏｌｌのＮ末端領域に４０〜６０のアミノ酸を含んでなる、請求項４９に記載のペプチド。
- Ｄｏｌｌ相同性ドメイン（ＤＨＤ）を含んでなる、請求項５０に記載のペプチド。
- Ｗｎｔ経路においてＤｏｌｌ機能に干渉する、化学的化合物、有機産物、ポリペプチド若しくはペプチドの同定へのスクリーニング方法における、ＤＨＤの使用。
- タンパク質−タンパク質相互作用に基づいたスクリーニングアッセイにおける、請求項５２に記載のＤＨＤの使用。
- 前記スクリーニングアッセイが、in vitro タンパク質−タンパク質相互作用アッセイと宿主細胞におけるタンパク質−タンパク質相互作用アッセイを含んでなる群から選択される、請求項５３に記載のＤＨＤの使用。
- Ｄｏｌｌともう１つのタンパク質との間の相互作用を特異的に阻害する化合物のスクリーニングアッセイにおける、請求項５２に記載のＤＨＤの使用。
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