JP2005351889A5 - - Google Patents
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Claims (35)
- 少なくとも１種類の標的物質を認識する物質をサンプル中の標的物質の濃度と発色の強さが一次的な相関関係になる濃度で表面に固定化した後に非標的物質の非特異吸着を阻害する処理を施した支持体、少なくとも１種類の該標的物質に対する酵素標識抗体、少なくとも１種類の該酵素標識抗体を発色させた後の反応産物が水不溶性となる基質およびそれらを収容する少なくとも１つの容器を含んでなり、該容器中で抗体抗原反応および発色反応させ、かつ標的物質を認識する物質が前記支持体表面に、サンプル量に対して２ｃｍ２／ｍｌ以上の面積となるように固定化されている、該支持体表面の発色によってサンプル中の標的物質を検出することを特徴とする酵素免疫学的キット。
- 少なくとも１種類の標的物質を認識する物質をサンプル中の標的物質の濃度と発色の強さが一次的な相関関係になる濃度で表面に固定化した後に非標的物質の非特異吸着を阻害する処理を施し、さらに少なくとも１種類の既知濃度の標的物質を反応させた支持体、少なくとも１種類の該標的物質に対する酵素標識抗体、少なくとも１種類の該酵素標識抗体を発色させた後の反応産物が水不溶性となる基質およびそれらを収容する少なくとも１つの容器を含んでなり、該容器中で抗体抗原反応および発色反応させ、かつ標的物質を認識する物質が前記支持体表面に、サンプル量に対して２ｃｍ２／ｍｌ以上になるように固定化されている、該支持体表面の既知濃度の標的物質が反応している部分とそれ以外の部分の発色の比較によって未知濃度のサンプル中の標的物質の濃度を測定することを特徴とする酵素免疫学的キット。
- さらに、同時に該支持体表面の発色によってサンプル中の標的物質を検出するとともに該支持体表面の既知濃度の標的物質が反応している部分とそれ以外の部分の発色の比較によって未知濃度のサンプル中の標的物質の濃度を測定することを特徴とする請求項２に記載の酵素免疫学的キット。
- 標的物質を認識する物質を含む溶液と支持体を接触させることで支持体の表面に標的物質を認識する物質を固定化する酵素免疫学的キットであって、固定化する際の前記溶液中の標的物質を認識する物質の濃度が０．１〜２０μｇ／ｍｌである請求項１〜３のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- さらに、固定化する際のｐＨが６．５〜８．０である請求項４記載の酵素免疫学的キット。
- さらに、標的物質に対する酵素標識抗体の濃度が０．１〜２０μｇ／ｍｌである請求項４または５に記載の酵素免疫学的キット。
- 前記標的物質を認識する物質が標的物質に対する抗体であって、かつ該抗体がポリクローナル抗体であることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 前記支持体が、棒状、板状またはくぼみを有した形状であることを特徴とする請求項１〜７のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 前記酵素標識抗体がモノクローナル抗体である、請求項１〜８のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- モノクローナル抗体がヒトインターロイキンに対する抗体である請求項９記載の酵素免疫学的キット。
- 前記ヒトインターロイキンがＩＬ−６またはＩＬ−８である請求項１０に記載の酵素免疫学的キット。
- モノクローナル抗体がヒトＩＬ−６のアミノ酸配列の１４９〜１７３番のアミノ酸からなる断片を認識するモノクローナル抗体である請求項１１に記載の酵素免疫学的キット。
- モノクローナル抗体がヒトＩＬ−６のアミノ酸配列の１５３〜１６２番のアミノ酸からなる断片を認識するモノクローナル抗体である請求項１１に記載の酵素免疫学的キット。
- 前記酵素標識抗体の酵素がホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−Ｄ−ガラクトシダーゼのいずれかから選択される、請求項１〜１３のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 前記酵素標識抗体の酵素がホースラディッシュペルオキシダーゼであり、かつ、前記基質が、３−アミノ−９−エチルカルバゾール、５−アミノサリチル酸、４−クロロ−１−ナフトール、ｏ−フェニレンジアミン、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンズチアゾリン−６−スルフォン酸）、３，３−ジアミノベンジジン、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン、ｏ−ジアニシジン、３，３−ジメトキシベンジジンのいずれかを含んだ溶液から選択される、請求項１〜１４のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 前記酵素標識抗体の酵素がアルカリフォスファターゼであり、かつ前記基質が、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリルフォスフェート、ニトロブルーテトラゾリウム、ｐ−ニトロフェニルリン酸のいずれかを含んだ溶液から選択される、請求項１〜１５のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 前記酵素標識抗体の酵素がβ−Ｄ−ガラクトシダーゼであり、かつ、前記基質がｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトシドまたは５−ブロモ−４−クロロ−３−インドール−β−Ｄ−ガラクトピラノシドのいずれかを含んだ溶液から選択される、請求項１〜１６のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 前記標的物質がサイトカイン、黄色ブドウ球菌外毒素、Ａ群連鎖球菌外毒素のいずれかである、請求項１〜１７のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 前記サイトカインが、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−γのいずれかである、請求項１８に記載の酵素免疫学的キット。
- 前記黄色ブドウ球菌外毒素またはＡ群連鎖球菌外毒素がスーパー抗原である、請求項１８に記載の酵素免疫学的キット。
- 前記スーパー抗原がＳＥＡ、ＳＥＢ、ＳＥＣ、ＳＥＤ、ＳＥＥ、ＳＥＨ、ＳＥＩ、ＳＥＪ、ＴＳＳＴ−１、ＳＰＥＡ、ＳＰＥＣ、ＳＰＥＦ、ＳＰＥＧ、ＳＰＥＨのいずれかである、請求項２０に記載の酵素免疫学的キット。
- 高サイトカイン血症、黄色ブドウ球菌、Ａ群β溶血性連鎖球菌のいずれかが原因の疾患を迅速に判定するための、請求項１〜２１のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 支持体表面の発色を測定装置により数値化し、該数値を用いて発色を定量化する請求項１〜２２のいずれかに記載の酵素免疫学的キットであって、支持体から反射した光を４００〜７００ｎｍの範囲で分光し、各波長毎の反射率を測定してＸＹＺまたはＬ ＊ ａ＊ ｂ＊で表色系におけるパラメーターを測定することを特徴とする酵素免疫学的キット。
- 標的物質を認識する物質を被覆した部分を有する支持体、サンプルおよび標的物質に対する酵素標識抗体を同時にインキュベーションするインキュベーション工程と、反応産物が水不溶性となる基質によって発色させる発色工程の２段階の反応工程からなり、インキュベーション工程において、標的物質を認識する物質が前記支持体表面に、サンプル量に対して、２ｃｍ ２／ｍｌ以上になるように添加し、かつ発色反応後の支持体表面の色を目視によって判断することを特徴とする、サンプル中の標的物質を検出するための方法。
- 標的物質を認識する物質で被覆された部分を有する支持体に標的物質を認識する物質を固定化する際の標的物質を認識する物質の溶液の濃度が０．１〜２０μｇ／ｍｌであり、ｐＨが６．５〜８．０である、請求項２４に記載のサンプル中の標的物質を検出するための方法。
- 発色工程において用いる標的物質に対する酵素標識抗体の濃度が０．１〜２０μｇ／ｍｌである請求項２４または２５に記載のサンプル中の標的物質を検出するための方法。
- 請求項２４〜２６のいずれかに記載の方法であって、発色反応後の支持体表面の色を目視によって判断することを特徴とする、サンプル中の標的物質濃度を測定するための方法。
- 請求項２４２６のいずれかに記載の方法であって、かつ発色反応後の支持体表面の色を機器によって数値化し、それを用いて発色を定量することを特徴とする、サンプル中の標的物質を検出するための方法。
- 試料から反射された光を４００〜７００ｎｍの範囲で分光し、各波長ごとの反射率を測定して表色系におけるパラメーターを測定する請求項２４〜２８のいずれかに記載の方法であって、表色系がＸＹＺまたはＬ＊ａ＊ｂ＊であることを特徴とするサンプル中の標的物質を検出するための方法。
- 前記インキュベーション工程と発色工程との間に、洗浄工程を含む、請求項２４〜２９のいずれかに記載の方法。
- サンプルの量が２００μｌ以下である、請求項２４〜３０のいずれかに記載のサンプル中の標的物質を検出するための方法。
- 標的物質を認識する物質で被覆された部分を有する支持体の当該標的物質を認識する物質で被覆された部分の一部および被覆されていない部分の一部の少なくとも一方に、少なくとも１種類の既知濃度の標的物質を反応させた後、既知濃度の標的物質が反応している部分とそれ以外の部分の発色の比較によって未知濃度のサンプル中の標的物質濃度を測定する、請求項２４〜３１のいずれかに記載のサンプル中の標的物質を検出するための方法。
- 請求項２４〜３２のいずれかに記載された方法であって、標的物質を認識する物質で被覆された部分を有する支持体が、少なくとも２種類の、異なる濃度の標的物質を認識する物質で被覆されており、少なくとも２カ所の発色具合を比較することによってサンプル中の標的物質濃度を測定する方法。
- サイトカインを検出し、高サイトカイン血症を診断する請求項１８、１９および２２のいずれかに記載の酵素免疫学的キット。
- 黄色ブドウ球菌外毒素またはＡ群β溶血性連鎖球菌外毒素を検出し、黄色ブドウ球菌またはＡ群β溶血性連鎖球菌が原因の疾患を診断する請求項２０または２１に記載の酵素免疫学的キット。
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