JP2005179291A - β−エンドルフィン産生促進剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 優れた効果を発揮するβ−エンドルフィン産生促進剤としてテルミナリア、セイヨウオトギリソウ、トウキンセンカ、ジャイアントケルプより選ばれる1種又は2種以上の抽出物を用いる。得られたβ−エンドルフィン産生促進剤は、皮膚におけるβ−エンドルフィンの産生を促進することにより、皮膚にリラックス効果を与えるとともに、ストレスに起因する種々の皮膚症状を予防あるいは改善することが可能である。特に、細胞賦活作用や美白作用に基づく皮膚症状の予防や改善を図ることができる。本発明により予防や改善が図られる皮膚症状の例としては、しわ,たるみ,しみ,くすみ,乾燥,肌荒れなどを挙げることができる。
【選択図】 なし
Description
テルミナリアの樹皮及び根1kgにメタノールを9リットル加え、室温で7日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、抽出乾燥物を得た。得られた抽出乾燥物を0.8重量%となるように1,3−ブチレングリコール水溶液に溶解し、テルミナリア抽出物を得た。
セイヨウオトギリソウの全草1kgに50重量%1,3−ブチレングリコール水溶液を9リットル加え、室温で7日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、抽出乾燥物を得た。得られた抽出乾燥物を2.0重量%となるように50重量%1,3−ブチレングリコール水溶液に溶解し、ウスベニアオイ抽出物を得た。
トウキンセンカの花1kgに50重量%エタノール水溶液を9リットル加え、室温で7日間浸漬した。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、抽出乾燥物を得た。得られた抽出乾燥物を2.0重量%となるように50重量%1,3−ブチレングリコール水溶液に溶解し、トウキンセンカ抽出物を得た。
ジャイアントケルプ(Macrocystis pyrifera)の全草1kgに3%塩化ナトリウム水溶液を9リットル加え、室温でホモジナイズした。抽出液をろ過して回収し、溶媒を除去した後、抽出乾燥物を得た。
試料には、製造例1〜4にて調製したテルミナリア抽出物(試料1)、セイヨウオトギリソウ抽出物(試料2)、トウキンセンカ抽出物(試料3)、及びジャイアントケルプ抽出物(試料4)を用いた。評価は、以下の手順で行った。ヒト表皮細胞を1ウェル当たり2.0×104個となるように96穴マイクロプレートに播種した。播種培地には、市販のダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)に5%のウシ胎児血清を添加したものを用いた。24時間培養後、任意の濃度の試料を添加した試験培地に交換し、さらに48時間培養した。培養後に培養上清中に分泌されたβ−エンドルフィン産生量をELISA法により定量した。また、同時に細胞数を計測し、細胞当たりのβ−エンドルフィン産生量を算出した。各試料の評価結果を、ブランクの細胞あたりのβ−エンドルフィン産生量を100とした場合の相対値にて表1及び表2に示す。なお、表中の**は、t検定における有意確率P値に対し、有意確率1%未満の危険率(P<0.01)で有意差が認められたものを表したものである。
評価は、試料としてヒトβ−エンドルフィンを用い、以下の手順で行った。ヒト表皮細胞を1ウェル当たり2.0×104個となるように96穴マイクロプレートに播種した。播種培地には、市販のダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)に5%のウシ胎児血清を添加したものを用いた。24時間培養後、任意の濃度の試料を添加した試験培地に交換し、さらに24時間培養した。次いで3−(4,5−ジメチル−2−チアゾリル)−2,5−ジフェニルテトラゾリウムブロミド(MTT)を100μg/mL含有する培地に交換して2時間培養し、テトラゾリウム環の開環により生じるフォルマザンを2−プロパノールにて抽出し、マイクロプレートリーダーにて550nmの吸光度を測定した。同時に濁度として650nmにおける吸光度を測定し、両測定値の差により細胞賦活作用を評価した。評価結果を、試料無添加のブランクにおける細胞賦活作用を100とした場合の相対値にて表3に示す。なお、表中の**は、t検定における有意確率P値に対し、有意確率1%未満の危険率(P<0.01)で有意差が認められたものを表したものである。
評価は、試料としてヒトβ−エンドルフィンを用い、以下の手順で行った。正常ヒト真皮線維芽細胞を1ウェル当たり2.0×104個となるように96穴マイクロプレートに播種した。播種培地には、ダルベッコ改変イーグル培地(DMEM)に1%のウシ胎児血清を添加したものを用いた。24時間培養後、任意の濃度の試料を添加した試験培地に交換し、さらに48時間培養した。次いで3−(4,5−ジメチル−2−チアゾリル)−2,5−ジフェニルテトラゾリウムブロミド(MTT)を400μg/mL含有する培地に交換して2時間培養し、テトラゾリウム環の開環により生じるフォルマザンを2−プロパノールにて抽出し、マイクロプレートリーダーにて550nmの吸光度を測定した。同時に濁度として650nmにおける吸光度を測定し、両測定値の差により細胞賦活作用を評価した。評価結果を、試料無添加のブランクにおける細胞賦活作用を100とした相対値にて表4に示す。なお、表中の**は、t検定における有意確率P値に対し、有意確率1%未満(P<0.01)を表したものである。
評価は、試料としてヒトβ−エンドルフィンを用い、以下の手順で行った。正常ヒト表皮メラニン細胞を1ウェル当り3.0×104個となるように96ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地にはクラボウ社製Medium154Sを用いた。24時間後にMedium154Sによって各濃度に調整した試料液に交換し、さらに48時間培養した。次に、1重量%Triton−X含有リン酸緩衝液75μLに交換し、細胞を完全に溶解させた。その50μLを粗酵素液とし、これに基質となる50μLの0.05重量%L−ドーパ含有リン酸緩衝液を加え、37℃で2時間静置した。基質添加直後と反応終了時の405nmの吸光度をマイクロプレートリーダーにて測定し、生成したドーパメラニン量を測定した。同時に各試料におけるタンパク量を測定し、タンパク量当たりのドーパメラニン生成量を算出した。チロシナーゼ活性阻害作用として、試料無添加のブランクにおけるタンパク量あたりのドーパメラニン生成量を100とした相対値にて表5に示した。なお、表中の**は、t検定における有意確率P値に対し、有意確率1%未満(P<0.01)を表したものである。
(1)スクワラン 10.0(重量%)
(2)ステアリン酸 2.0
(3)水素添加パーム核油 0.5
(4)水素添加大豆リン脂質 0.1
(5)セタノール 3.6
(6)親油型モノステアリン酸グリセリン 2.0
(7)グリセリン 10.0
(8)パラオキシ安息香酸メチル 0.1
(9)アルギニン(20重量%水溶液) 15.0
(10)精製水 40.7
(11)カルボキシビニルポリマー(1重量%水溶液) 15.0
(12)β−エンドルフィン産生促進剤 1.0
製法:(1)〜(6)の油相成分を80℃にて加熱溶解する。一方(7)〜(10)の水相成分を80℃にて加熱溶解する。これに前記油相成分を攪拌しながら加え、ホモジナイザーにより均一に乳化する。乳化終了後、(11)を加え、冷却を開始し、40℃にて(12)を加え、均一に混合する。
(1)β−エンドルフィン産生促進剤 3.0(重量%)
(2)クエン酸 0.1
(3)ステビア 0.01
(4)精製水 93.89
(5)エリスリトール 3.0
製法:(1)〜(5)を均一に混合する。
Claims (1)
- テルミナリア、セイヨウオトギリソウ、トウキンセンカ、ジャイアントケルプより選ばれる1種又は2種以上の抽出物を含有するβ−エンドルフィン産生促進剤。
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