JP2005179250A - 抗血小板凝集組成物 - Google Patents

Abstract

【課題】 現在、血栓症を解決するために、血栓の生成を抑制する抗血栓剤及び血栓形成予防剤と、生成された血栓を溶解させる血栓溶解剤の研究開発が主に行われているが、特異性がないため、生体内においては血栓以外の部分にも影響を及ぼし、生体内に残存した場合、出血等を引き起こす可能性がある。そこで最近では、医薬品による治療よりは食生活を通じて病気を予防し、体質を調節又は活性化させる機能を持った成分又は食品成分に対する研究も注目されているが、風味や性状等に問題があるために幅広い飲食品に使用できなかったり、実用域の活性が弱い等の問題があった。本発明は、幅広い飲食品に使用可能な抗血小板凝集組成物及びそれを含有する飲食品を提供することを目的とする。
【解決手段】 アムラーの果実、果汁又はそれらの抽出物を含有することにより、上記課題を解決する。
【選択図】 なし

Description

本発明は、アムラーの果実、果汁又はそれらの抽出物を含有する抗血小板凝集組成物及びそれを含有する飲食品に関する。

血栓は、フィブリノーゲンというタンパク質が活性化され、フィブリンに転換されながら、血小板、白血球等と共に、不溶性の重合体となって血管の内壁に固まってできる。身体が正常なときには、この血栓のもととなるフィブリンを溶かす働きをする線溶酵素が血栓予防をするが、線溶酵素が不足するとフィブリンを溶解できなくなり、血栓ができるようになる。
形成された血栓は血管に沈着し、血管の断面積を減少させ、血液の循環を阻害し、その結果、血液が細胞及び組職で栄養分と酸素を正常に供給することができず、また、細胞及び組織の老廃物を排出できなくなり、毒性物質が蓄積される等の問題点が発生するようになる。
血管の中で、血栓といわれる血液の固まりが引き起こす症状を広義の血栓症（以下、単に「血栓症」と記載した場合は、広義の血栓症をいう）と呼び、血栓が原因になって起こる病態は狭義の血栓症と塞栓症に分けられる。狭義の血栓症は血栓が形成個所で血流を部分的に又は完全に閉塞することによる症状で、塞栓症は血栓が形成個所から剥がれて血流によって移動し、他の個所で血流を部分的に又は完全に閉塞することによって起こる病態のことを指す。
このような血栓症は血栓が生じた血管の部位によって多様な疾病を誘発するようになる。その中でも特に脳血管や心臓血管に生じた場合には脳卒中、脳出血、脳梗塞、心不全症、心筋梗塞、心臓麻痺等深刻な症状が発生し、半身不随を引き起こし、ひどい場合には死亡することもある。

現在、血栓症を解決するために、血栓の生成を抑制する抗血栓剤及び血栓形成予防剤と、生成された血栓を溶解させる血栓溶解剤の研究開発が主に行われている。
抗血栓剤又は血栓形成予防剤としては、血管壁への血小板の付着を阻害することで血液の凝固を阻害するアスピリンと、体内の内因性血液凝固経路を遮断するヘパリン（Ｈｅｐａｒｉｎ）、クマリン（Ｃｏｕｍａｒｉｎ）等が現在臨床で使われている。また最近はエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、プロスタサイクリン（Ｐｒｏｓｔａｃｙｃｌｉｎｅ；ＰＧ１２）誘導体等が商品化されている。しかし、これら薬剤は特異性がないため、生体内においては血栓以外の部分にも影響を及ぼし、生体内に残存した場合、出血等を引き起こす可能性がある。その他に、ヒルジン（Ｈｉｒｕｄｉｎ）、合成抗トロンビン（Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎ）、チクロピジン（Ｔｉｃｌｏｐｉｄｉｎ）等の抗血栓活性も報告されているが、まだ実用化には至っていない。
血栓溶解剤としては、ストレプトキナーゼ（Ｓｔｒｅｐｔｏｋｉｎａｓｅ）、ウロキナーゼ（Ｕｒｏｋｉｎａｓｅ）のようなプラスミノゲンアクチベーター（Ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ）を血栓が生成された患者に静脈注射して、体内の血栓溶解系を活性化する治療法が一般的に使われている。これらが血栓を溶解させる効果は、幾多の臨床実験で立証されたが、抗血栓剤又は血栓形成予防剤と同様、血栓に対する特異性が無く、血栓を治療する間に全身出血する等の副作用がある。また組職型プラスミノゲンアクチベーター（ｔｉｓｓｕｅ−ｔｙｐｅ ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ，ｔＰＡ）は血栓に対する選択性が高く、理想的な血栓溶解剤と考えられたが、実際に臨床治療に適用した結果、程度の差はあるが相変らず全身出血等の副作用があった。また血液内での半減期が非常に短く、薬効の持続時間が短いため、体内で薬効を維持するためには投与量が多くなければならず、そのため治療費用が従来の血栓溶解剤に比べ非常に高いという問題点がある。

このような医薬品が血栓の生成予防に使用されてはいるものの、血栓除去にあまり著しい効果を現わすことが無く、深刻な副作用を誘発する場合があるため、最近では、医薬品による治療よりは食生活を通じて病気を予防し、体質を調節又は活性化させる機能を持った成分又は食品成分に対する研究も注目されるようになってきている。
食品成分としては、ナットウキナーゼや多価不飽和脂肪酸、グルコサミン、タマネギの薄皮（例えば、特許文献１参照。）等の素材が知られているが、風味や性状等に問題があり、幅広く食品に応用できなかった。
また、最近では、キウイフルーツ抽出物（例えば、特許文献２参照。）についての特許が公開されたが、中性域での活性が弱いという欠点がある。

特開２００２−１７１９３４号公報（第２頁） 特開２００３−１７１２９４号公報（第２頁−５頁）

本発明の課題は、幅広い飲食品に使用可能な抗血小板凝集組成物及びそれを含有する飲食品を提供することにある。

本発明者らは様々な天然植物を利用して抗血小板凝集成分を捜す目的で、多角的に研究検討した結果アムラーの果実、果汁、それらの抽出物に優れた抗血小板活性があることを見出し、本発明を完成させた。

本発明で得られたアムラーの果実、果汁又はそれらの抽出物を含有する抗血小板凝集組成物は、血小板凝集試験の結果から、血小板凝集物の生成を抑制する効果が高いことがわかった。
アムラーは、昔から人間が日常食生活に使用してきた天然植物由来なので、従来使用していた薬剤とは違い、体内で出血を起こす副作用が無く安全である。
本発明はアムラーの果実、果汁又はそれらの抽出物を含有する抗血小板凝集組成物を各種飲食品及び医薬品等に利用して、血小板凝集物の生成を抑制することで脳出血、脳梗塞、心筋梗塞、動脈硬化及び冠状動脈症のような心血関係疾患を予防することができる。

本願発明に用いるアムラーとは、学名：エンビリカ・オフィシナル（Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）又は、フィランサス・エンブリカ（Ｐｈｙｌｌａｎｔｈｕｓ ｅｍｂｉｌｉｃａ）といい、トウダイグサ科コミカンソウ属に属する落葉の亜高木であり、インドからマレーシア地域及び中国南部にかけて分布しており、インドが原産地と考えられている。また、各地方又は言語により、各々固有の名称があり、余柑子、油甘、奄摩勒、エンブリック・ミロバラン、アーマラキー、マラッカノキ、マラッカツリー、インディアングーズベリー、アロンラ、アミラ、アミラキ、アミラキャトラ、ネリカイ、ネルリ、タシャ、カユラカ、ケムラカ、ナックホンポン等とも称されている。

本発明において用いられるアムラーの部位としては特に限定されるものではないが、果実が挙げられる。その形態は、特に限定するものではなく、未熟果実、完熟果実、乾燥果実、果汁、果汁粉末等のいずれでも良い。
果汁又は果汁粉末を用いる場合は、そのままでも使用できるが、生果実又は乾燥果実等、水不溶性成分を含む物を使用する場合は、抽出により、水不溶性成分が除去されていることが好ましい。
抽出の際、生果実を使用する場合は、種子を除去した後、水を添加又は無添加で、抽出効率を高めるためにミキサー等により破砕、均質化したものを用いることが好ましい。
乾燥果実を使用する場合は、抽出効率を高めるために４０メッシュ以下の粒度になるように粉砕されていることが好ましい。

抽出方法は、抽出溶媒、抽出温度等、特に限定されるものではなく、抽出溶媒としては、水、塩基、酸、その他食塩水等の非有機溶媒を使うことができ、好ましくは、水、塩基、酸の群より選ばれる１種以上である。
酸又は塩基を抽出溶媒で使う場合、抽出物を中和させることが好ましい。中和反応によって生成された塩は、透析法やゲル濾過等、公知の方法により、取り除くことができる。水を抽出溶媒として用いた場合には、上記のような中和反応は必要なく、生成された塩を取り除く必要もないため、水を用いることが更に好ましい。
この時使用する酸としては、特に限定するものではなく、大部分の酸を使うことができるが、好ましくは、塩酸、硫酸より選ばれる１種又は両者の併用である。
また、塩基としては、特に限定するものではなく、大部分の塩基を使うことができるが、好ましくは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムより選ばれる１種又は両者の併用である。
抽出に使用される酸又は塩基の濃度は、特に限定するものではなく、酸又は塩基の強さによって変化するが、０．０１〜０．５モルの濃度を使用することが好ましい。

上記の抽出において、本願出願人が先に出願した特願２００３−２０９５４２で示したペクチナーゼの他、セルラーゼ等の酵素を併用することも可能である。
更に、上記の抽出において、抽出残渣に対して再度抽出工程を１回又はそれ以上繰り返すことで、抽出率が向上し、収率が向上するので、好ましい。この場合の抽出に用いる溶媒は、同じでも良いし、別の溶媒を用いても良い。

上記の果汁又は抽出物は、そのままでも使用できるが、濾過や遠心分離により、不溶性物質を取り除くことにより、抗血小板活性が高くなり、応用範囲も広がるので好ましい。
不溶性物質を取り除いた後、果汁又は抽出液をそのまま又は濃縮した後にエタノールを加えて得られる上澄みを回収したものは、更に抗血小板活性が高くなるので好ましい。エタノールの濃度としては、特に限定するものではないが、効果の点より、１０〜９０％が好ましく、１０〜３０％が更に好ましい。
抽出物はそのままでの使用も可能だが、必要であれば噴霧乾燥や凍結乾燥等の手段により乾燥粉末化させて使用することも可能である。

本願発明において抗血小板凝集とは、血小板の凝集を抑制することをいい、単に抗血小板（Ａｎｔｉｐｌａｔｅｌｅｔ）ともよばれる。抗血小板活性は、例えば、血小板凝集測定機（Ａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒ）を使用して、血小板の浮遊液（Ｐｌａｔｅｌｅｔ ｒｉｃｈ ｐｌａｓｍａ）に、凝集を惹起させる物質（ＡＤＰ、エピネフリン、コラーゲン、アラキドン酸等）を加えた時の血小板凝集率を測定する方法により確認することができる。

本願発明の抗血小板凝集組成物は、飲食品、医薬品、飼料等に応用でき、好ましくは、人が手軽に摂食できる飲食品が好ましい。
本願発明における飲食品とは溶液、懸濁物、粉末、固体成形物等経口摂取可能な形態であれば良く特に限定するものではない。より具体的には、即席麺、レトルト食品、缶詰、電子レンジ食品、即席スープ・みそ汁類、フリーズドライ食品等の即席食品類、清涼飲料、果汁飲料、野菜飲料、豆乳飲料、コーヒー飲料、茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、栄養飲料、アルコール飲料等の飲料類、パン、パスタ、麺、ケーキミックス、から揚げ粉、パン粉等の小麦粉製品、飴、キャラメル、チューイングガム、チョコレート、クッキー、ビスケット、ケーキ、パイ、スナック、クラッカー、和菓子、デザート菓子等の菓子類、ソース、トマト加工調味料、風味調味料、調理ミックス、たれ類、ドレッシング類、つゆ類、カレー・シチューの素類等の調味料、加工油脂、バター、マーガリン、マヨネーズ等の油脂類、乳飲料、ヨーグルト類、乳酸菌飲料、アイスクリーム類、クリーム類等の乳製品、冷凍食品、魚肉ハム・ソーセージ、水産練り製品等の水産加工品、畜肉ハム・ソーセージ等の畜産加工品、農産缶詰、ジャム・マーマレード類、漬け物、煮豆、シリアル等の農産加工品、栄養食品、錠剤、カプセル等が例示される。

本願発明において、抗血小板凝集組成物又は、飲食品等に加工する際に、各種栄養成分を強化することができる。
強化できる栄養成分としては、ビタミンＡ、ビタミンＢ_１、ビタミンＢ_２、ビタミンＢ_６、ビタミンＢ_１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ナイアシン（ニコチン酸）、パントテン酸、葉酸等のビタミン類、リジン、スレオニン、トリプトファン等の必須アミノ酸類や、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅等のミネラル類及び、例えば、α−リノレン酸、ＥＰＡ、ＤＨＡ、月見草油、オクタコサノール、カゼインホスホペプチド（ＣＰＰ）、カゼインカルシウムペプチド（ＣＣＰ）、水溶性食物繊維、不溶性食物繊維、オリゴ糖等の人の健康に寄与する物質類、その他の食品や食品添加物として認可されている有用物質の１種又は２種以上が使用できる。

以下本発明を、実施例にて詳細に説明するが、次の実施例は、本発明の範囲を限定するものではない。

（実施例１）抗血小板凝集組成物の調製１
アムラー乾燥果実を４０メッシュ以下に粉砕し、その粉末８０グラムに、蒸溜水２リットルを入れ、５５℃で３時間抽出した。その後、遠心分離し、その上清を濾過し、抽出物と残渣を分離した。その残渣に蒸溜水２リットルを入れ、同条件でもう１回繰り返し抽出し、それぞれの抽出液をあわせた後、凍結乾燥し、本願発明の抗血小板凝集組成物Ａを３５ｇ得た。

（試験例１）抗血小板活性の確認
本願発明の抗血小板凝集組成物の抗血小板活性を、血小板凝集測定機（Ａｇｇｒｅｇｏｍｅｔｅｒ）を使用して、健常人の血小板の浮遊液（ｐｌａｔｅｌｅｔ ｒｉｃｈ ｐｌａｓｍａ）４００μｌに、試料８０μｌを添加したのち、凝集を惹起させる物質としてＡＤＰ（１ｍｇ／ｍｌ溶液）２０μｌを加え、５分後の血小板凝集率を測定した。
別途、対照として水（試料濃度０ｍｇ／ｍｌ）を添加して、同じ方法で血小板凝集率を測定した。測定された血小板凝集率から、下記の数式によって、対照に対する抗血小板活性（％）を計算した。
抗血小板活性（％）＝（対照の血小板凝集率−試料添加時の血小板凝集率）／対照の血小板凝集率×１００
試料濃度として、２．５、５．０、７．５ｍｇ／ｍｌで測定した結果を、表１に示す。

上記表１の結果により、本願発明の抗血小板凝集組成物が高い抗血小板活性を示すことが確認できた。また抽出物の濃度を増加させることによって比例的に抗血小板活性も増加することが確認できた。

（実施例２）抗血小板凝集組成物の調製２
アムラー乾燥果実を４０メッシュ以下に粉砕し、その粉末８０グラムに、蒸溜水２リットルを入れ、５５℃で３時間抽出した。その後、遠心分離し、その上清を濾過し、抽出物と残渣を分離した。その残渣に蒸溜水２リットルを入れ、同条件でもう１回繰り返し抽出し、それぞれの抽出液をあわせて、減圧濃縮し、２００ミリリットルとした。この濃縮液にエタノールを加え、２５０ミリリットルになるように調製（最終エタノール濃度２０％）した後、４℃で２４時間静置して、不溶性成分を沈殿させた。沈澱物を遠心分離で分離除去し、上清を減圧乾燥後、水１リットルに再溶解し、濾過して不溶性成分除去後、濾液を凍結乾燥して本願発明の抗血小板凝集組成物Ｂを２９ｇ得た。
同様にして、エタノールの終濃度を４０％，６０％，８０％にして、本願発明の抗血小板凝集組成物Ｃ，Ｄ，Ｅを、それぞれ、２７ｇ，２６ｇ，２５ｇ得た。

（試験例２）抗血小板活性の確認
実施例２で得られた抗血小板凝集組成物Ｂ〜Ｅについて、５．０ｍｇ／ｍｌの試料濃度で、試験例１と同様にして抗血小板活性を測定した。
また、実施例２における、８０％エタノールでの沈殿画分についても同様にして試料を調製し、抗血小板活性を測定した。
その結果を表２に示した。

上記表２の結果により、抗血小板活性画分はエタノール可溶性画分に含まれ、２０％エタノールで沈殿を除去した画分が最も活性が高いことがわかった。

（実施例３）抗血小板凝集組成物含有食品（錠菓）の調製
実施例２で得られた抗血小板凝集組成物Ｂ ５０ｇ、乳糖３０ｇ、ＤＨＡ含有粉末油脂（サンコートＤＹ−５；太陽化学株式会社製）１２ｇ、ショ糖脂肪酸エステル４ｇ、ヨーグルト香料４ｇを混合し、１錠が３００ｍｇになるように打錠して、本願発明の抗血小板凝集組成物含有飲食品（錠菓）を得た。

（実施例４）抗血小板凝集組成物含有飲料（野菜果汁混合飲料）の調製
実施例２で得られた抗血小板凝集組成物Ｂ １ｇ及び、グアーガム分解物（サンファイバーＲ；太陽化学株式会社製）３ｇを市販の野菜果汁混合飲料１００ｍｌに添加混合溶解して、本願発明の抗血小板凝集組成物含有飲食品（野菜果汁混合飲料）を得た。

本発明の実施態様ならびに目的生成物を挙げれば以下の通りである。
（１） アムラーの果実、果汁又はそれらの抽出物を含有することを特徴とする抗血小板凝集組成物。
（２） アムラーの果実又は果汁の抽出物が、アムラー果実又は果汁から水、塩基、酸のいずれかにより抽出されていることを特徴とする前記（１）記載の抗血小板凝集組成物。
（３） アムラーの果実又は果汁の抽出物が、アムラー果実又は果汁から水により抽出されていることを特徴とする前記（１）又は（２）記載の抗血小板凝集組成物。
（４） アムラーの果実又は果汁の抽出物、又は果汁から、エタノールにより分画されていることを特徴とする前記（１）〜（３）いずれか記載の抗血小板凝集組成物。
（５） アムラーの果実又は果汁の抽出物、又は果汁から、エタノールにより可溶性成分として分画されていることを特徴とする前記（１）〜（４）いずれか記載の抗血小板凝集組成物。
（６） エタノールで分画する際のエタノール濃度が、１０〜９０％であり、その可溶性画分であることを特徴とする前記（５）記載の抗血小板凝集組成物。
（７） エタノールで分画する際のエタノール濃度が、１０〜３０％であり、その可溶性画分であることを特徴とする前記（５）又は（６）記載の抗血小板凝集組成物。
（８） 前記（１）〜（７）いずれか記載の抗血小板凝集組成物を含有することを特徴とする飲食品。
（９） 前記（１）〜（７）いずれか記載の抗血小板凝集組成物を含有することを特徴とする医薬品。
（１０） 前記（１）〜（７）いずれか記載の抗血小板凝集組成物を含有することを特徴とする飼料。

本発明で得られたアムラーの果実、果汁又はそれらの抽出物を含有する抗血小板凝集組成物は、血管壁への血小板の付着を阻害し、血小板凝集物の生成を抑制する抗血小板活性が高く、各種飲食品及び医薬品等に利用して、血小板凝集物の生成を抑制することで脳出血、脳梗塞、心筋梗塞、動脈硬化及び冠状動脈症のような心血関係疾患を予防することができる。

Claims (4)

1. アムラーの果実、果汁又はそれらの抽出物を含有することを特徴とする抗血小板凝集組成物。
2. アムラーの果実又は果汁の抽出物が、アムラー果実又は果汁から水、塩基、酸の群より選ばれる１種以上を用いて抽出されたものであることを特徴とする請求項１記載の抗血小板凝集組成物。
3. アムラーの果実又は果汁の抽出物、又は果汁からエタノールにより分画された可溶性画分であることを特徴とする請求項１又は２記載の抗血小板凝集組成物。
4. 請求項１〜３いずれか記載の抗血小板凝集組成物を含有することを特徴とする飲食品。