JP2005000168A - 核酸の検出方法 - Google Patents
核酸の検出方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2005000168A JP2005000168A JP2004151490A JP2004151490A JP2005000168A JP 2005000168 A JP2005000168 A JP 2005000168A JP 2004151490 A JP2004151490 A JP 2004151490A JP 2004151490 A JP2004151490 A JP 2004151490A JP 2005000168 A JP2005000168 A JP 2005000168A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- nucleic acid
- labeling
- immobilized
- nucleic acids
- hybridization
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6834—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase
- C12Q1/6837—Enzymatic or biochemical coupling of nucleic acids to a solid phase using probe arrays or probe chips
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
Abstract
【解決手段】以下の工程を含む。A)標的核酸と非共有結合(塩基対)結合を形成するのに適した核酸又は核酸アナログが固定化された表面を得ること、B)アナライト核酸の溶液から、検出すべき標的核酸の固定化核酸上への非−ストリンジェントなハイブリダイゼーションを行うこと、C)分析混合物の核酸を標識化エレメントで標識化すること、D)場合により、表面を洗浄液で繰り返し処理して弱く結合した核酸を除去すること、及びE)表面に残っている核酸対を、それらに結合した標識化ユニットを利用し、光学的、分光光学的、電気的、機械的又は磁気的な検出法で検出すること、ここで、工程B)及びC)は任意の順序で行うことができる。
【選択図】なし
Description
A)標的核酸と非共有結合(塩基対)結合を形成するのに適した核酸又は核酸アナログが固定化された表面を得ること、
B)分析物(アナライト)核酸の溶液から、検出すべき標的核酸の固定化核酸上への非−ストリンジェントなハイブリダイゼーションを行うこと、
C)分析混合物の核酸を標識化ユニットで標識化すること、
D)場合により、弱く結合した核酸を除去するために表面を洗浄液で繰り返し処理すること、及び
E)表面に残っている核酸対を、それらに結合した標識化ユニットを利用し、光学的、分光光学的、電気的、機械的又は磁気的な検出法で検出すること、
からなる方法に関する。
従って、本発明はまた様々な核酸の混合物から標的核酸を検出する方法であって、以下の工程:
A)標的核酸と非共有結合(塩基対)結合を形成するのに適した核酸又は核酸アナログが固定化された表面を得ること、
B')分析混合物の核酸を標識化ユニットで標識化すること、
C')標識化核酸の固定化核酸上への非−ストリンジェントなハイブリダイゼーションを行うこと、
D)場合により、弱く結合した核酸を除去するために表面を洗浄液で繰り返し処理すること、及び
E)表面に残っている核酸対を、それらに結合した標識化ユニットを利用し、光学的、分光光学的、電気的、機械的又は磁気的な検出法で検出すること、
からなる方法に関する。
−発現プロファイリング:RNAアナライト混合物、又はRNAアナライト混合物を用いる酵素反応後に得られる対応DNA混合物(例、cNDA)、の非ストリンジェントな条件下でのハイブリダイゼーション。次いで、RNA混合物又はDNA混合物を標識体(labeling entity)とカップリングさせた後、ストリンジェントな洗浄工程を適用する。
−SNP(一塩基多型):SNPを含有するDNA混合物又酵素反応後に得られる対応DNA混合物とDNA混合物との非ストリンジェントな条件下でのハイブリダイゼーション。次いで、DNA混合物と標識体(labeling entity)とのカップリング後、ストリンジェントな洗浄工程を適用する。
−増幅遺伝子の検出:増幅及び/又は非増幅遺伝子を含有するDNA混合物のハイブリダイゼーション、又は酵素反応で得られた対応するDNA混合物のDNA混合物との非ストリンジェントな条件下でのハイブリダイゼーション。次いで、DNA混合物と標識体(labeling entity)とのカップリング、次いでストリンジェントな洗浄工程の適用。
非ストリンジェントなハイブリダイゼーションにおいて達成されるシグナル強度が選択すべきハイブリダイゼーション反応においても保持されるので、密接に関連した核酸のハイブリダイゼーションによる区別が向上している。
・標的核酸の連結を、非ストリンジェントなハイブリダイゼーションの前又は後に行うことができる。
・ハイブリダイゼーション以外の方法で標識化ユニットを標的核酸に結合(カップリング)させるので、標的の配列に無関係である。
・標識化に使用できる様々な標識化ユニットの選択肢が当技術分野の当業者には既知である。そのため、種々の方法でDNAアレイを読み取ることが可能である。
実施例
実施例1 標識化の前及び後における区別の比較
5'-アミノを修飾した、アレル特異的なオリゴヌクレオチドを、あらかじめアミン基を有するポリマーで被覆しておいた酸化シリコンチップ上に共有結合的に固定化して2つのDNAチップを調製した。共有結合による固定化はホモ二官能性架橋試薬(交差リンカー)(homobifunctional cross-linker)BS3 (ビス-スルホ-スクシンイミジル スベラート、Pierce)を用いて行った。アレル−特異的オリゴヌクレオチドの配列は以下の通りである。
5'-amino-ttt ttt ttt cct aac tcg aac cc (配列番号:1)(試料C)
5'-amino-ttt ttt ttt cct aac ttg aac cc (配列番号:2)(試料T)
チップのサイズは1cm2であった。アレル特異的オリゴヌクレオチドをチップの表面に5μlづつ、2連で固定化し、チップあたり4スポットとなるようにした。
5'-ビオチン-ttg tgt ttg tct gcg acc (配列番号:3)
また、非ビオチニル化プライマーの配列は以下の通りである。
5'-ccc aac acc aaa tat aca cca (配列番号:4)
5'-ビオチン-tt gtgtttgtct gcgacccaga atcactgggg ttcAagttag ggttcagatc tgagccaggt tagggggtta atgtcagggg gtaaagatta ggaggttggt gtatatttgg tgttggg (配列番号:5)
(式中、AはSNP部位を表す。)
PCR生成物2×50μlをMicrocon-3カラム(Millipore供給、MWCO=3,000)で遠心分離して脱塩した。脱塩したPCR生成物を0.11N NaOH、0.9M NaCl、0.005%SDSの混合物45μlに溶解した。アルカリ性の標的溶液を同等に調製した2つのDNAチップに適用し、25℃で10分間インキュベートした。
19名の様々な患者由来のDNAを、そのCETP-Tagl遺伝子型に関し、先行技術に対応する遺伝子型解析法(例えば、Pyrosequencing)で検討した。次いで、19名の異なる患者のDNAを標準的な方法により、ビオチニル化プライマーと非ビオチニル化プライマーを用いてPCRで増幅した。ビオチンプライマーの配列は以下の通りである。
5'-ビオチン-ttg tgt ttg tct gcg acc (配列番号:3)
また、非ビオチニル化プライマーの配列は以下の通りである。
5'-ccc aac acc aaa tat aca cca (配列番号:4)
5'-ビオチン-tt gtgtttgtct gcgacccaga atcactgggg ttcRagttag ggttcagatc tgagccaggt tagggggtta atgtcagggg gtaaagatta ggaggttggt gtatatttgg tgttggg (配列番号:6)
(R=A又はG)
5'-アミノが修飾された、アレル−特異的なオリゴヌクレオチドを、アミン基を含有するポリマーで被覆した酸化シリコンチップ上に固定化し、19個のDNAチップを調製した。共有結合的な固定化はホモ二官能性架橋試薬(交差リンカー)BS3 (ビス-スルホ-スクシンイミジル スベラート、Pierce)を用いて行った。アレル−特異的オリゴヌクレオチドの配列は以下の通りである。
5'-アミノ-ttt ttt ttt cct aac tcg aac cc (配列番号:1)(Gアレル特異的)及び
5'-アミノ- ttt ttt ttt cct aac ttg aac cc (配列番号:2) (Aアレル特異的)
チップの大きさは1cm2であった。アレル特異的オリゴヌクレオチドをチップの表面に2連で固定化しチップあたり4スポットとなるようにした。
結果を表2に示す。19の遺伝型のうち、18の遺伝型が正確に決定された。一例(患者13)の場合、ホモ接合性のG−アレルを担っている患者をヘテロ接合性の患者と決定した。
Claims (19)
- 様々な核酸の混合物から標的核酸を検出する方法であって、以下の工程:
A)標的核酸と非共有結合(塩基対)結合を形成するのに適した核酸又は核酸アナログが固定化された表面を得ること、
B)アナライト核酸の溶液から、検出すべき標的核酸の固定化核酸上への非−ストリンジェントなハイブリダイゼーションを行うこと、
C)分析混合物の核酸を標識化エレメントで標識化すること、
D)場合により、表面を洗浄液で繰り返し処理して弱く結合した核酸を除去すること、及び
E)表面に残っている核酸対を、それらに結合した標識化ユニットを利用し、光学的、分光光学的、電気的、機械的又は磁気的な検出法で検出すること、
を含む方法。 - 以下の工程:
A)標的核酸と非共有結合(塩基対)結合を形成するのに適した核酸又は核酸アナログが固定化された表面を得ること、
B)アナライト核酸の溶液から、検出すべき標的核酸の固定化核酸上への非−ストリンジェントなハイブリダイゼーションを行うこと、
C)分析混合物の核酸を標識化エレメントで標識化すること、
D)場合により、弱く結合した核酸を除去するために、表面を洗浄液で繰り返し処理すること、及び
E)表面に残っている核酸対を、それらに結合した標識化ユニットを利用し、光学的、分光光学的、電気的、機械的又は磁気的な検出法で検出すること、
を含む請求項1記載の方法。 - 以下の工程:
A)標的核酸と非共有結合(塩基対)結合を形成するのに適した核酸又は核酸アナログが固定化された表面を得ること、
B')分析混合物の核酸を標識化エレメントで標識化すること、
C')標識化核酸の固定化核酸上への非−ストリンジェントなハイブリダイゼーションを行うこと、
D)場合により、弱く結合した核酸を除去するために、表面を洗浄液で繰り返し処理すること、及び
E)表面に残っている核酸対を、それらに結合した標識化ユニットを利用し、光学的、分光光学的、電気的、機械的又は磁気的な検出法で検出すること、
を含む請求項1記載の方法。 - 洗浄工程がストリンジェントであり、熱的に調節した緩衝液であって、その温度がアナライト核酸の固定化核酸上へのハイブリダイゼーションにおいて選択される温度より高い温度である緩衝液を用いて行う、請求項1記載の方法。
- 洗浄工程がストリンジェントであり、そのイオン強度がアナライト核酸の固定化核酸上へのハイブリダイゼーションにおいて選択されるアナライト溶液のイオン強度よりも低い緩衝液を用いて行う、請求項1記載の方法。
- ストリンジェントな洗浄工程を、少なくとも一つのナトリウム−塩素緩衝液であって、その緩衝液の濃度が、固定化核酸上へのハイブリダイゼーションのために選択されるナトリウム−塩素濃度より低い緩衝液を用いて行う。請求項5記載の方法。
- 検出すべき核酸が、標識化ユニットが連結されているか、それで被覆されたリガンド結合受容体分子と結合するリガンドとカップリングしている、請求項1記載の方法。
- 受容体がアビジン、ニュートラアビジン及びストレプトアビジンから選択され、リガンドがビオチンである、請求項7記載の方法。
- 受容体が抗体であり、リガンドが抗原である、請求項7記載の方法。
- 標的核酸とリガンドの連結が酵素的若しくは化学的な方法、あるいはインターカレーションにより行われる、請求項1記載の方法。
- 標識化ユニットがナノ粒子、金属複合体及び/又はAu、Ag、Pt、Pd、及びCからなる群から選択される元素に基づくクラスターである、請求項1記載の方法。
- 標識化ユニットの分子量が10,000g/molより大きいものである、請求項1記載の方法。
- 標識化ユニットを検出工程E)より前に又はその間に増強する、請求項1記載の方法。
- 表面が一組の異なる固定化された核酸又は核酸アナログを有する、請求項1記載の方法。
- 検出すべき核酸がリガンドとしてのビオチンと連結されており、標識化が受容体としてのアビジン、ニュートラアビジン又はストレプトアビジンで被覆した金粒子を用いて行われる、請求項1記載の方法。
- 検出すべき核酸が抗原と連結されており、標識化が抗体で被覆した金粒子を用いて行われる、請求項1記載の方法。
- 金粒子がオートメタログラフィー反応により増強され、核酸の検出が光学的又は電気的に行われる、請求項15記載の方法。
- 金粒子がオートメタログラフィー反応により増強され、核酸の検出が光学的又は電気的に行われる、請求項16記載の方法。
- 標的核酸をリボ核酸の発現プロファイリングのために、一塩基多型(SNP)の分析のために、又は増幅した遺伝子の分析のために検出する、請求項1記載の方法。
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10322912A DE10322912A1 (de) | 2003-05-21 | 2003-05-21 | Verfahren zum Nachweis von Nukleinsäuren |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005000168A true JP2005000168A (ja) | 2005-01-06 |
JP4477936B2 JP4477936B2 (ja) | 2010-06-09 |
Family
ID=33039244
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2004151490A Active JP4477936B2 (ja) | 2003-05-21 | 2004-05-21 | 核酸の検出方法 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20050014174A1 (ja) |
EP (1) | EP1479781B1 (ja) |
JP (1) | JP4477936B2 (ja) |
AT (1) | ATE413470T1 (ja) |
AU (1) | AU2004202326B2 (ja) |
CA (1) | CA2467610A1 (ja) |
DE (2) | DE10322912A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7165510B2 (en) * | 2003-11-04 | 2007-01-23 | Dennis Lee Hakes | Bovine germicide application device |
DE102004033586A1 (de) * | 2004-07-06 | 2006-01-26 | Imtec Immundiagnostika Gmbh | Verfahren zur Auswertung von Biochips |
US8563329B2 (en) | 2005-05-02 | 2013-10-22 | Anp Technologies, Inc. | Polymer conjugate enhanced bioassays |
WO2008039998A2 (en) * | 2006-09-28 | 2008-04-03 | President And Fellows Of Harvard College | Methods for sequencing dna |
EP2445230A4 (en) | 2009-06-17 | 2016-05-18 | Panasonic Ip Corp America | HEARING AID |
CN103620392B (zh) | 2011-04-28 | 2017-05-17 | 皇家飞利浦有限公司 | 具有光学不均匀性的测定的评估方法及装置 |
WO2014116812A2 (en) * | 2013-01-24 | 2014-07-31 | Northwestern University | Phenolic coatings and methods of making and using same |
Family Cites Families (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4743535A (en) * | 1984-11-07 | 1988-05-10 | Miles Inc. | Hybridization assay employing labeled probe and anti-hybrid |
US6040138A (en) * | 1995-09-15 | 2000-03-21 | Affymetrix, Inc. | Expression monitoring by hybridization to high density oligonucleotide arrays |
DE69316801T2 (de) * | 1992-07-20 | 1998-05-20 | Yakult Honsha Kk | Spezies-Spezifische Oligonukleotide gegen Bifidobakterien und Verfahren zum Nachweis unter Verwendung derselben |
US5521289A (en) * | 1994-07-29 | 1996-05-28 | Nanoprobes, Inc. | Small organometallic probes |
US20020172953A1 (en) * | 1996-07-29 | 2002-11-21 | Mirkin Chad A. | Movement of biomolecule-coated nanoparticles in an electric field |
US6361944B1 (en) * | 1996-07-29 | 2002-03-26 | Nanosphere, Inc. | Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses therefor |
IL124322A (en) * | 1998-05-04 | 2002-05-23 | Technion Res & Dev Foundation | Detection of an entity in a sample |
IL126776A (en) * | 1998-10-27 | 2001-04-30 | Technion Res & Dev Foundation | A method of investing gold |
AU7637601A (en) * | 2000-07-01 | 2002-01-14 | Clondiag Chip Tech Gmbh | Method for qualitative and/or quantitative detecting of molecular interactions on probe arrays |
FR2829580B1 (fr) * | 2001-09-07 | 2004-02-13 | Bio Merieux | Procede de lecture, de detection ou de quantification, hybrides ou complexes utilises dans ce procede et biopuce mettant en oeuvre ledit procede |
-
2003
- 2003-05-21 DE DE10322912A patent/DE10322912A1/de not_active Withdrawn
-
2004
- 2004-05-12 DE DE502004008376T patent/DE502004008376D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-05-12 US US10/844,769 patent/US20050014174A1/en not_active Abandoned
- 2004-05-12 AT AT04011220T patent/ATE413470T1/de not_active IP Right Cessation
- 2004-05-12 EP EP04011220A patent/EP1479781B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-05-18 CA CA002467610A patent/CA2467610A1/en not_active Abandoned
- 2004-05-21 JP JP2004151490A patent/JP4477936B2/ja active Active
- 2004-05-21 AU AU2004202326A patent/AU2004202326B2/en not_active Ceased
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20050014174A1 (en) | 2005-01-20 |
DE10322912A1 (de) | 2004-12-16 |
ATE413470T1 (de) | 2008-11-15 |
JP4477936B2 (ja) | 2010-06-09 |
AU2004202326A1 (en) | 2004-12-09 |
AU2004202326B2 (en) | 2008-06-12 |
EP1479781B1 (de) | 2008-11-05 |
DE502004008376D1 (de) | 2008-12-18 |
CA2467610A1 (en) | 2004-11-21 |
EP1479781A1 (de) | 2004-11-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Paleček et al. | Electrochemistry of nucleic acids and development of DNA sensors | |
JP4618886B2 (ja) | サンプル中の標的の検出 | |
JP2008525822A (ja) | ポリヌクレオチド配列のdna検出/認識用ナノ電子装置 | |
US20070259359A1 (en) | Nanoelectronic Detection of Biomolecules Employing Analyte Amplification and Reporters | |
JP2006517786A (ja) | 未増幅dnaを用いた直接的snp検出 | |
Lu et al. | Voltammetric determination of the Alzheimer’s disease-related ApoE 4 gene from unamplified genomic DNA extracts by ferrocene-capped gold nanoparticles | |
WO2005108612A2 (en) | Nanoscale biosensor device, system and technique | |
US20090075275A1 (en) | Nucleic acid probe-immobilized substrate and method of detecting the presence of target nucleic acid by using the same | |
TWI242601B (en) | Carrier for gene detection and its use for detecting validity of interferon therapy | |
JP2004132954A (ja) | 一個または複数個の分析物を検出するための方法および装置、ならびに装置の使用 | |
US20130065780A1 (en) | Label-Free Multiplexing Bioassays Using Fluorescent Conjugated Polymers and Barcoded Nanoparticles | |
JP4477936B2 (ja) | 核酸の検出方法 | |
WO2007114931A2 (en) | Nanoelectronic detection of biomolecules employing analyte amplification and reporters | |
JP2023540499A (ja) | 分子電子センシングのための単一分子ナノ粒子ナノワイヤ | |
TW200936767A (en) | Method and device for detection of nucleic acids and/or polypeptides | |
JP5214941B2 (ja) | 単一プローブ分子素子及び単一プローブ分子素子の製造方法 | |
KR101397793B1 (ko) | 인터컬레이터가 컨쥬게이트된 금속 나노입자를 이용한 핵산의 검출방법 | |
JP4635707B2 (ja) | 検出表面と該検出表面の作製方法、並びにプローブ物質の固定密度制御方法 | |
Diessel et al. | Online resistance monitoring during autometallographic enhancement of colloidal Au labels for DNA analysis | |
JP4706074B2 (ja) | 生体分子固定化用の三脚型機能性界面分子とこれを用いた遺伝子検出デバイス | |
Ge et al. | Glutaraldehyde-modified electrode for nonlabeling voltammetric detection of p16 INK4A gene | |
KR101262644B1 (ko) | 트롬빈 표지를 포함하는 샌드위치 타입의 표적 dna 검출용 키트 | |
KR101991593B1 (ko) | 공진 주파수 이동현상을 이용한 유전자 돌연변이 검출용 센서 | |
JP3917640B2 (ja) | 核酸プローブ固定化基体を用いた標的核酸の存在を検出する方法 | |
JP2001013103A (ja) | 走査型電気化学顕微鏡による試料核酸断片の検出方法および定量方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20061127 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20080911 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20091006 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20091030 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100104 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20100216 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20100312 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130319 Year of fee payment: 3 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130319 Year of fee payment: 3 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130319 Year of fee payment: 3 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |