JP2004501893A - アミロイドの集塊の沈着により特徴付けられる疾患の治療のための薬剤の調製のための、パモイックアシッドもしくはその誘導体の一つ、またはその類似体の一つの使用 - Google Patents

Abstract

一般式（Ｉ）
【化１】

（式中、基Ｒ１およびＲ５は明細書に記載の通りである）を有するパモイックアシッドまたはその誘導体、またはその医薬上許容される塩の一つの、アミロイド集塊の沈着により特徴づけられる疾患の治療のための医薬の調製のための使用を開示する。

Description

【０００１】
本明細書に開示する発明は、パモイックアシッドまたはその誘導体の一つ、またはその類似体の一つ、または医薬上許容されるこれらの塩の一つの、アミロイドの集塊の沈着により特徴付けられる疾患の治療のための薬剤の調製のための使用に関する。
【０００２】
アミロイドの沈着および神経細胞骨格異常の存在は、アルツハイマー病（ＡＤ）のもっとも顕著な兆候である。該疾患の最終病態は全中枢神経系に関わるが、初期段階ではこれら２つの現象が主として大脳皮質を冒し、それら自体は完結した症状ではないが、該疾患の発症において避けられないものである（Ｃｈｅｎ Ｍ． （１９９８） Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ ３ａ， ３２−３７）。
【０００３】
一般に、構成するタンパク質に関係なく、物質アミロイドは直径７−８ｎｍの繊維から成り、コグノ レッド（Ｃｏｇｎｏ Ｒｅｄ）に対するアフィニティを有し、かつ水に溶けないという特徴を有する。ＡＤにおいて、アミロイド繊維は細胞の外部に、脳細胞内空間内に、および皮質の中膜、および髄膜の動脈（ｍｅｎｉｎｇｅａｌ ａｒｔｅｒｉｏｌｅｓ）に蓄積し、３つの異なる巨視的異常、その存在または中枢神経系においてアミロイドが沈着した周囲におけるニューロンプロセスの異常において差がある老人斑およびびまん性老人斑、および平滑筋繊維と内弾性板の間の動脈の壁へアミロイド繊維が浸潤したことの現われであるアミロイド脈管障害、の形成を招く。
【０００４】
アミロイドおよびらせん状のフィラメントの形成に加えて、非常に重篤なシナプスの消耗（ｒａｒｅｆａｃｔｉｏｎ）が、ＡＤに罹患している患者の皮質に認められている。該疾患の最終段階ではニューロンの接触の約８０−９０％が破壊され、そしてこの異常が痴呆に関し、実際に病理学的に関連する現象である。痴呆の傾向を分析すると、アミロイドは該疾患の初期の主要な異常であり、そして、ニューロン内のらせん状のフィラメントはニューロンの疲労に介在する現象であり、ニューロンは最終的にはそのシナプスの接触を失い、精神機能の低下という臨床上の結果を生じる。
【０００５】
現在のところ凝集形態でのみ毒性であるとみなされているβアミロイドの特定のタイプ、βＡ_１−４２の溶解形態が、アルツハイマー患者の記憶および認識機能の進行性の喪失に関与している。該疾患の初期段階で産生されるβＡ_１−４２は、アセチル−ＣｏＡの輸送をもたらすＡＣｈの合成を刺激するピルベートデヒドロゲナーゼの活性を抑制し、この神経伝達物質の放出を減らし、シナプスの接合を変化させ、そして該疾患の原因であるコリン作用の欠損を引き起こす（Ｈｏｓｈｉ Ｍ．， Ｔａｋａｓｈｉｍａ Ａ．， Ｍｕｒａｙａｍａ Ｍ．， Ｙａｓｕｋｔａｋｅ Ｋ．， Ｙｏｓｈｉｄａ Ｎ．， Ｉｓｈｉｇｕｒｏ Ｋ．， Ｉｍａｈｏｒｉ Ｋ． （１９９７） Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２７２：４， ２０３８−２０４１）。
【０００６】
多数の色素が特異的な様式でアミロイド繊維に結合し、これらの中でもっとも重要なのがコグノ レッド（ＣＲ）であることが公知である（Ｌｏｒｅｎｚｏ Ａ． ａｎｄ Ｙａｎｋｎｅｒ Ｂ．Ａ， １９９４ ＰＮＡＳ ９１； １２２４３−１２２４７）。
この色素によりアミロイド繊維の複屈折が増大し、そして、色素と基質（繊維）の間の特異的相互作用を示す特徴的な円偏光二色性を生じ、組織におけるアミロイドの診断検出が容易となる。
【０００７】
β−アミロイドタンパク質（βＡ）は、アミロイドタンパク質のプレカーサー（βＡＰＰ）における多数の特異的酵素の加水分解活性から得られる（Ｖａｓｓａｒ Ｒ． ｅｔ ａｌ． １９９９ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８６； ７３５−７４０）。
β−アミロイドフラグメントが神経毒作用を誘導し得るメカニズムは多様である。まず、免疫組織学的研究により、老人斑において、炎症性インターロイキン（ＩＬ−１、ＩＬ−６）、補足因子、他の炎症性因子およびリソソームヒドロラーゼの存在が明らかにされた。β−アミロイドタンパク質が、ＩＬ−１、ＩＬ−６およびＩＬ−８の小神経膠細胞による合成および分泌を刺激し、そして次いで、急性の炎症の細胞毒メカニズムを活性化し得ることが立証されている（Ｓａｂｂａｇｈ Ｍ．Ｎ．， Ｇａｌａｓｋｏ Ｄ．， Ｔｈａｌ Ｊ．Ｌ． （１９９７） Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｖｉｅｗ ３， １−１９）。
【０００８】
アミロイドの集塊の沈着により特徴づけられる疾患には、アルツハイマー病に加えて、ダウン症候群、「オランダ型」アミロイドーシスに伴う遺伝性脳出血、慢性の炎症に伴うアミロイドーシス、多発性骨髄腫および他の血液βリンパ球様細胞障害に伴うアミロイドーシス、ＩＩ型糖尿病に伴うアミロイドーシス、クロイツフェルト−ヤコブ病、ゲルストマン−ストロイスラーシンドローム、クールー病、ヒツジの疾患スクレイピーなどのプリオン疾患に伴うアミロイドーシスが含まれる。
【０００９】
しかし、一般に、βＡにより引き起こされる障害は、
１．アミロイド形成の異常；
２．細胞外の毒性（ｅｘｏｃｙｔｏｘｉｃｉｔｙ）に対するニューロンの脆弱性の増大；
３．低血糖障害に対するニューロンの脆弱性の増大；
４．カルシウムホメオスタシスの異常；
５．酸化障害の増大；
６．炎症メカニズムの活性化；
７．小神経膠細胞の活性化；
８．リソソームプロテアーゼの誘導；
９．タウタンパク質リン酸化の異常；
１０．アポトーシスの誘導；
１１．膜障害
とまとめることができる。
【００１０】
厳密な理論的視点から、βＡ−誘導性の障害を減らすことは、種々の治療的手段：
１．ＡＰＰの代謝を変化させるセクレターゼインヒビターを用いてβＡの産生を減らす（αセクレターゼを増すか、またはβおよびγセクレターゼを減らす）；
２．βＡの凝集を防ぐまたは妨げる；
３．βＡのクリアランスを増す；
４．カルシウムホメオスタシスを元に戻すことにより、βＡの神経毒作用を抑える；
５．フリーラジカルにより生じる毒性を抑える；
６．細胞外の毒から保護する；
７．炎症応答により引き起こされる損傷を減らす；
８．変化した銅−亜鉛平衡を正す；
９．ニューロンのアポトーシスを阻止する；
ことにより取り組むことができる（Ｓａｂｂａｇｈ Ｍ．Ｎ．， Ｇａｌａｓｋｏ Ｄ．， Ｔｈａｌ Ｊ．Ｌ． （１９９７） Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｖｉｅｗ ３， １−１９）。
【００１１】
今日のところ、アルツハイマー病の根本原因であるアミロイド形成のプロセスを妨げる、遅延する、または阻止することができる特別な治療法はない。
実際のところ、この疾患の処置のために現在用いられている治療法はもっぱら症状に基づくものであり、そして、異なる側面に作用するのであるが、基本的には、学習および記憶を調節している神経伝達物質のメカニズムのみを妨害するものである。最も一般的に用いられている分子には、タクリン、ドンゼピル（ｄｏｎｅｚｅｐｉｌ）およびリバスティグミンなどの可逆的アセチルコリンエステラーゼが挙げられる。
【００１２】
さらに現時点では、アルツハイマー病の診断に利用できる唯一の診断手段は行動試験および臨床スコアであり、ラジオグラフィー法またはシンチグラフィー法は、正確に言えば適当にトレーシングすることができないことのために、依然としてアルツハイマータイプ型の変性と他の変性現象とを正確に区別することができない。
【００１３】
アルツハイマー病の治療において遭遇する難点、その重篤さ、およびそれを診断する難しさのために、該疾患を治療することができるまたはそれを減速させることができる新規薬剤を同定することが望まれているだけでなく、その診断のためのラジオグラフィー法もしくはシンチグラフィー法に用いられる化合物を開発することも望まれている。
【００１４】
それゆえ、パモイックアシッドまたはその誘導体の一つ、またはその類似体の一つ、またはその医薬上許容される塩の一つ、または文献に開示され、および文献にて公知の該酸の誘導体が、アルツハイマー病およびアミロイドの集塊の沈着により特徴づけられる疾患の治療および予防にかなり効果的な薬剤であることが立証されたことは、驚くべきことである。
【００１５】
この知見の内容に関しては、以下に示すパモイックアシッドの新規誘導体が見出されており、これらは、前記疾患の治療に非常に効果的であり、そして、アミロイド集塊の沈着により特徴付けられる疾患の治療のための薬剤の調製に有用な薬剤であることが立証されている。
【００１６】
実際、一般式（Ｉ）
【化１４】

（式中、
１　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
２　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ（ＣＨ_３）_２
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
３　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ_２Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
４　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ_６Ｈ_１１
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
５　　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ_３
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
６　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ（ＣＨ_３）_３
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
）を有するパモイックアシッドの誘導体が特許Ｎ^ｏＥＳ４３２４１６に開示されているが、これらの化合物に関して、用途についてはいかなる記載もなく、権利請求もされていない。
【００１７】
式中、
７　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＮＨＣ_６Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
である誘導体が、特許Ｎ^ｏＪＰ７１３８３４７に、ナイロン繊維の調製に有用な試薬として開示されている。
【００１８】
式中、
８　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＮＨ−ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ_３）_２）−ＣＯＯＨ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
である誘導体が、Ｒｅｅｔｚ， Ｍａｎｆｒｅｄ Ｔ． ｅｔ ａｌ； Ｃｈｅｍ． Ｃｏｍｍｕｎ， （Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ）（１９９８）， （１９）， ２０７５−２０７６に、ＨＩＶ−１プロテアーゼのインヒビターとして開示されている。
【００１９】
式中、
９ Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＨ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣＨ_３
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
である誘導体が、Ｐｕｐｅｌｉｎ， Ｊｅａｎ Ｐｉｅｒｒｅ； Ｅｕｒ． Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．−Ｃｈｉｍ． Ｔｈｅｒ． （１９７８）， １３（４）， ３８１−５に、抗炎症活性を有する薬剤として開示されている。
【００２０】
式中、
１０ Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＨ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣＨ_２ＣＨ_３
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
である誘導体が、特許Ｎ^ｏＤＥ１９４５２５４に開示されており、そこでは、この化合物の塩とストレプトマイシンとにより、結核の治療のための薬剤としてその効果が長期持続性となることが開示されている。
【００２１】
式中、
１１　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣ_６Ｈ_５
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１２　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝
【化１５】

Ｒ３＝−ＣＨ_２−
である誘導体が、Ｄｏｒｏｇｏｖ， Ｍ．Ｖ．； Ｋｈｉｍ． Ｋｈｉｍ． Ｔｅｋｈｎｏｌ． （１９９６）， ３９（４−５）， １７０−１７２に開示されているが、それに関して用途は示されていない。
【００２２】
式中、
１３ Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ_２
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
である誘導体が、Ｋｉｅｌｋｉｅｗｉｃｚ， Ｊｅｄｒｚｅｊ， ｅｔ ａｌ．； Ｐｏｌｉｍｅｒｙ （Ｗａｒｓａｗ）（１９８４）， ２９（６）， ２１６−１９に開示されているが、その用途は示されていない。
【００２３】
式中、
１４ Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
であるこの化合物は、１，１’−メチレン−ジ（２−ナフトール）であり、これは米国特許第４，１４７，８０６号に抗炎症剤および鎮痛薬として開示されている。
【００２４】
式中、
１５ Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＨ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
であるこの化合物は、パモイックアシッドであり、抗駆虫薬として（ピランテルパモエート）、もしくは癌の治療において（オクテオチドパモエート）用いられる薬物中、対イオンとして有用な薬剤として開示されている。
【００２５】
本明細書に記載する発明の対象はそれゆえ、一般式（Ｉ）：
【化１６】

（式中、
Ｒ１およびＲ５は、同一または異なっていてよく、ＣＯＯＲ６、ＣＯＮＨ６、ＳＯ_２Ｒ６、ＳＯ_２ＮＨＲ６、ＳＯ_３Ｒ６、ＯＲ６、ＣＯＲ６、ＮＨＲ６、Ｒ６；
Ｒ６は、Ｈ、またはＲ７で置換されていてよい、直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の１〜５の炭素原子を有するアルキル鎖またはフェニル；
Ｒ７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＲ８Ｒ９、
【００２６】
【化１７】

【００２７】
Ｒ８およびＲ９は、同一または異なっていてよく、Ｈ、１〜５の炭素原子を有するアルキル；
Ｒ２およびＲ４は、同一または異なっていてよく、Ｈ、ＯＨ、ＮＨＲ６、ＯＣＯ−Ｒ１０−ＮＲ８Ｒ９、
【００２８】
【化１８】

【００２９】
Ｒ１０は、直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の１〜５の炭素原子を有するアルキル鎖；
Ｒ３は、−［ＣＨ_２］ｎ−、−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ１１）−、
ｎは、１〜４の整数、
Ｒ１１は、直鎖もしくは分枝鎖の１〜５の炭素原子を有するアミノ基により置換されるアルキル、アルキルアミノＣ_１−Ｃ_５、ジアルキルアミノＣ_１−Ｃ_５、ＯＨ、アルキルオキシＣ_１−Ｃ_５）
を有するパモイックアシッドまたはその誘導体の一つ、またはその類似体の一つ、またはこれらの医薬上許容される塩の一つの、アミロイドの集塊の沈着により特徴づけられる疾患の治療のための薬剤の調製のための使用である。
【００３０】
式（Ｉ）の化合物中、好ましい一つは、パモイックアシッド、および特にナトリウムパモエートである。
本明細書中に開示する発明のさらなる対象は、アミロイドの集塊の沈着により特徴づけられる疾患の診断のための診断キットの調製のための、前記式（Ｉ）の化合物の使用である。
【００３１】
実際、本明細書中に開示する発明による化合物は、画像診断法において一般に使用される元素の原子をその分子構造中に原子に含んでよい。例えば、炭素、水素、窒素、酸素、ヨウ素およびインジウムのラジオアイソトープをその分子構造に導入することができる。より詳細には、式（Ｉ）の化合物はそれ自体の分子構造の炭素、水素、窒素、酸素の元素の少なくとも一つを対応する放射性アイソトープで置換することができ、または、少なくとも一つの放射性ヨウ素原子を有し、または放射性インジウムとの錯体の形態にある。
【００３２】
そのようなアイソトープは、ＰＥＴ（ポジトロンエミッショントモグラフィー）、ＳＰＥＣＴ（シングルフォトンエミッションコンピュータ化トモグラフィー）および二次元シンチグラフィーなどの技術に有用である。別法として、本発明による化合物は、放射性アイソトープまたは放射能を通さない物質として有用な元素の原子（例えばヨウ素）を含むと否とによらず、画像診断法に一般に用いられる元素、例えばガドリニウム（ＮＭＲ）およびテクニチウム（シンチグラフィー法）などに対する錯化剤として用いることができる。
【００３３】
この診断的使用に基づいて、本発明による化合物は、前記の疾患の予防にも有用である。
本明細書中に開示する発明のさらなる対象は、一般式（Ｉ）
【００３４】
【化１９】

【００３５】
（式中、Ｒ１およびＲ５は、同一であるかまたは異なっていてよく、ＣＯＯＲ６、ＣＯＮＨ６、ＳＯ_２Ｒ６、ＳＯ_２ＮＨＲ６、ＳＯ_３Ｒ６、ＯＲ６、ＣＯＲ６、ＮＨＲ６、Ｒ６；
Ｒ６は、Ｈまたは、Ｒ７により置換される直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の１〜５の炭素原子を有するアルキル鎖またはフェニル；
Ｒ７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＲ８Ｒ９、
【００３６】
【化２０】

【００３７】
Ｒ８およびＲ９は同一または異なっていてよく、Ｈ、１〜５の炭素原子を有するアルキル；
Ｒ２およびＲ４は、同一または異なっていてよく、Ｈ、ＯＨ、ＮＨＲ６、ＯＣＯ−Ｒ１０−ＮＲ８Ｒ９、
【００３８】
【化２１】

【００３９】
Ｒ１０は、直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の１〜５の炭素原子を有するアルキル鎖；
Ｒ３は、−［ＣＨ_２］ｎ−、−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ１１）−、
ｎは、１〜４の整数、
Ｒ１１は、直鎖もしくは分枝鎖の１〜５の炭素原子を有するアミノ基により置換されるアルキル、アルキルアミノＣ_１−Ｃ_５、ジアルキルアミノＣ_１−Ｃ_５、ＯＨ、アルキルオキシＣ_１−Ｃ_５、
ただし、置換基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、
【００４０】
１　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
２　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ（ＣＨ_３）_２
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
３　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ_２Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
４　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ_６Ｈ_１１
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
５　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ_３
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
６　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ（ＣＨ_３）_３
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
７　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＮＨＣ_６Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１１　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣ_６Ｈ_５
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１２　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝
【化２２】

Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１３　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ_２
Ｒ３＝−ＣＨ_２−；
１４　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１５　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＨ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
ではない）
を有する新規化合物である。
【００４１】
本明細書に開示する発明のさらなる対象は、一般式（Ｉ）
【化２３】

【００４２】
（式中、
Ｒ１およびＲ５は、−ＣＯＯＲ６、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は前記の意義を有する）の化合物の調製法であって、Ｒ６がＨである一般式（Ｉ）の化合物をハロゲン化剤、例えばＳＯＣｌ_２またはＰＣｌ_５などで処理して対応するアシルクロライドを得、次いで２５〜６０℃の範囲の温度で２〜２４時間、Ｒ６−ＯＨアルコールと１：６のモル比で攪拌下に反応させる、または例えば化学量のＲ６−ＯＨを含むジメチルホルムアミドなどの不活性無水溶媒中で反応させることに特徴づけられる方法である。
【００４３】
本明細書に開示する発明のさらなる対象は、式（Ｉ）の化合物：
【化２４】

【００４４】
（式中、
Ｒ１およびＲ５はＣＯＮＨＲ６、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６は前記の意義を有する）の調製法であって、Ｒ６がＨである一般式（Ｉ）を有する化合物をＳＯＣｌ_２またはＰＣｌ_５などのハロゲン化剤と反応させて対応するアシルクロライドを得、またはＤＣＣ、ＥＥＤＱなどのカップリング剤を用い、次いで２５〜６０℃の範囲の温度で２〜２４時間Ｒ６−ＮＨ_２アミンと６対１のモル比で、または化学量のＲ６−ＮＨ_２を含む不活性無水溶媒中で反応させることに特徴づけられる方法である。
【００４５】
本明細書に開示する発明のさらなる対象は、式（Ｉ）の化合物：
【化２５】

（式中、
Ｒ２およびＲ４は、ＯＨ、
Ｒ１およびＲ５は、ＳＯ_３Ｒ６、ＳＯ_２ＮＨＲ６、
Ｒ３は、−ＣＨ（Ｒ１１）−、
Ｒ１１は、前記の意義を有する）の調製法であって、以下の反応スキーム１；式「ａ」の化合物を氷酢酸中でＲ１１−ＣＨＯアルデヒドと９０℃から１５０℃の温度で反応させて一般式「ｂ」を有する化合物を得た後、一般式「ｂ」の化合物をハロゲン化剤、例えばＳＯＣｌ_２またはＰＣｌ_５で処理して対応するスルホニルクロライドを得、次いでＲ６−ＯＨアルコールと反応させて一般式「ｄ」を有する化合物を得る、またはＲ６−ＮＨ_２アミンと反応させて一般式「ｅ」を有する化合物を得る、に従って行うことに特徴づけられる方法である。
【００４６】
【化２６】

【００４７】
本明細書に開示する発明のさらなる対象は、式（Ｉ）の化合物：
【化２７】

【００４８】
（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、ＯＲ６および／またはＮＨＲ６；
Ｒ３は、−ＣＨ（Ｒ１１）、
Ｒ６およびＲ１１は、前記の意義を有する）の調製法であって、以下の反応スキーム２：式Ａの化合物をＲ１１−ＣＨＯアルデヒドと酸環境中、例えば酢酸中で反応させ、式Ｂ、ＣおよびＤに対応する化合物の混合物を得、これをクロマトグラフィーにより分離および精製し、これらを塩基の存在下でハロゲン化アルキルＲ６−Ｘと反応させ、次いで酸または塩基環境中で脱プロトン化し、対応するナフチルエーテルＥ、ＦおよびＧを得、これらをＮａＮＯ_２硫酸溶液で処理して、化合物Ｈ、ＩおよびＬを得る、に従い行うことに特徴づけられる方法である。
【００４９】
【化２８】

【００５０】
本明細書中に開示する発明のさらなる対象は、一般式（Ｉ）：
【化２９】

（式中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、前記の意味を有する、
ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、
１　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
２　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ（ＣＨ_３）_２
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
３　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ_２Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
４　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ_６Ｈ_１１
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
５　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ_３
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
６　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ（ＣＨ_３）_３
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
７　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＮＨＣ_６Ｈ_５
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１１　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣ_６Ｈ_５
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１２　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝
【化３０】

Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１３　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ_２
Ｒ３＝−ＣＨ_２−；
１４　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
１５　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＨ
Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
Ｒ３＝−ＣＨ_２−
ではない）を有する化合物を活性成分として、および医薬上許容される賦形剤および／または希釈剤を含む医薬組成物である。
本発明をさらに説明するいくつかの実施例を以下に示す。
【００５１】
実施例１
（２Ｒ）−２−（アセトキシ）−４−（ ｛ ３−カルボキシ−１− ［ （３−カルボキシ−２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル ］ −２−ナフチル ｝ オキシ）−Ｎ ， Ｎ ， Ｎ−トリメチル−４−オキソ−１−ブタンアミニウムクロライド（ＳＴ１７２２）の調製
【００５２】
【化３１】

【００５３】
２．３９ｇ（０．０１モル）のアセチルＬ−カルニチンクロライド、２ｍｌの無水ＣＨ_２Ｃｌ_２、および１．１ｍｌ（０．０１５モル）のチオニルクロライドの溶液を、室温にて４時間攪拌した。溶媒を除去し、次いで残る固体を無水ＣＨ_２Ｃｌ_２にて３回洗浄した。オイル、即ちアセチルＬ−カルニチンクロライドのアシルクロライドのオイルを得、これをそのまま次のステップに用いた。
【００５４】
２．５８ｇ（０．０１モル）のアセチルＬ−カルニチンクロライドのアシルクロライド、３．８８ｇ（０．０１モル）のパモイックアシッドおよび１０ｍｌのＮ−メチル−２−ピロリジノンの懸濁液を一晩攪拌下に置いた。エチルエーテルで沈殿させた後、黄色固体を得た（７ｇ）。こうして得られた粗生成物を、ＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨ９０：１０にて溶離するシリカゲルカラム上でのクロマトグラフィーにより精製し、未反応のパモイックアシッドを回収し、次いでＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨ８５：１５にて溶離して生成物を回収した。溶媒を除去後、１．２ｇの（２Ｒ）−２−（アセトキシ）−４−（｛３−カルボキシ−１−［（３−カルボキシ−２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル］−２−ナフチル｝オキシ）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソ−１−ブタンアミニウムクロライドを得た。収率＝１９．７％、Ｍ．Ｐ．＝１８５℃で分解、［α］_Ｄ ^２０＝−１７．５°、
【００５５】
^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，３００ＭＨｚ）， δ ７．１−８．５（ｍ， １０Ｈ，Ｈ−Ａｒ）， ５．５０ （ｍ， １Ｈ， −Ｃ−ＣＨ−Ｃ−Ｎ）， ４．７６ （ｓ， ２Ｈ， Ａｒ−ＣＨ _２ −Ａｒ）， ３．７０ （ｍ， ２Ｈ， −ＣＨ _２ −Ｎ）， ３．１１ （ｓ， ９Ｈ， −Ｎ−ＣＨ _３ ）， ２．８５ （ｍ， ２Ｈ， −ＣＨ _２ −ＣＯＯ−）， ２．０１ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ _３ −ＣＯＯ−）。
【００５６】
Ｋ．Ｆ．＝１．４％
Ｃ_３２Ｈ_３２ＮＯ_９Ｃｌに関して算定し、存在する水の量に対して校正したＣ、Ｈ、Ｎ値：Ｃ、６３．００；Ｈ、５．２９；Ｎ、２．３０；実測値Ｃ、６０．４５；Ｈ、５．８３；Ｎ、２．８７。
【００５７】
実施例２
（２Ｒ）−２−（アセチルオキシ）−４−（ ｛ １− ［ （２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル ］ −２−ナフチル ｝ オキシ）−Ｎ ， Ｎ ， Ｎ−トリメチル−４−オキソ−１−ブタンアミニウムクロライド（ＳＴ１７４５）の調製
【００５８】
【化３２】

【００５９】
２．３９ｇ（０．０１モル）のアセチルＬ−カルニチンクロライド、２ｍｌの無水ＣＨ_２Ｃｌ_２、および１．１ｍｌ（０．０１５モル）のチオニルクロライドの溶液を、室温にて４時間攪拌した。溶媒を除去し、次いで残る固体を３回無水ＣＨ_２Ｃｌ_２にて洗浄した。オイル、すなわちアセチルＬ−カルニチンクロライドのアシルクロライドを得、これを次のステップにそのまま用いた。
【００６０】
２．５８ｇ（０．０１モル）のアセチルＬ−カルニチンクロライドのアシルクロライドのＣＨ_３ＣＮ（５ｍｌ）溶液に、３ｇ（０．０１モル）の１，１’−メチレン−ジ（２−ナフトール）（ＳＴ１８５９）を添加した。混合液を室温にて一晩攪拌した。エチルエーテルで沈殿させた後、粗生成物を得た。この生成物をジエチルエーテルで洗浄し、真空下に乾燥し、次いでシリカゲルクロマトグラフィー（９：１ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ混合物）により精製した。生成物を含み、ＴＬＣにより調整したフラクションを合わせた。溶媒を除去して２ｇ（０．００３８モル）の（２Ｒ）−２−（アセチルオキシ）−４−（｛１−［｛２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル］−２−ナフチル｝オキシ）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソ−１−ブタンアミニウムクロライド（ＳＴ１７４５）を得た。収率３８％。
【００６１】
^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ， ３００ＭＨｚ）， δ１０．０５ （ｓ， １Ｈ， −ＯＨ）， ７．１５−８．３（ｍ， １２Ｈ，Ｈ−Ａｒ）， ５．５５ （ｍ， １Ｈ， −Ｃ−ＣＨ−Ｃ−Ｎ）， ４．６５ （ｓ， ２Ｈ， Ａｒ−ＣＨ _２ −Ａｒ）， ３．６−３．９（ｍ， ２Ｈ， −ＣＨ _２ −Ｎ）， ３．１０（ｓ， ９Ｈ， −Ｎ−ＣＨ _３ ）， ２．９５ （ｍ， ２Ｈ， −ＣＨ _２ −ＣＯＯ−）， ２．００ （ｓ， ３Ｈ， ＣＨ _３ −ＣＯＯ−）
Ｋ．Ｆ．＝４．４％
【００６２】
Ｃ_３０Ｈ_３２ＮＯ_５Ｃｌに関して算定し、存在する水の量に対して校正したＣ、Ｈ、Ｎ値：Ｃ、６９．０２；Ｈ、６．１８；Ｎ、２．６８；実測値Ｃ、６８．６；Ｈ、６．３；Ｎ、２．６１。
【００６３】
実施例３
２ − （ ｛ １ −［ （２ − ヒドロキシ − １ − ナフチル）メチル ］− ２ − ナフチル ｝ オキシ） − ２ − オキソエタンアミニウムクロライド（ＳＴ１９１３ ） の調製
【化３３】

２ｍｌのトルエン中２ｇ（０．０１１モル）のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−グリシン（ＢＯＣ−ＧＬＹ−ＯＨ）の溶液に、０．６２ｇ（０．１１モル）のＫＯＨおよび２ｍｌのＨ_２Ｏを添加した。
水を除去するために、混合液を共沸蒸留（１５０℃）に供した。得られた溶液を０℃にて集め、次いで０．８５ｍｌのイソブタノール、１１μｌ（ｄ＝０．９２、０．１ｍｍｏｌ）のＮ−メチル−モルホリン、および１．６８ｍｌのイソブチルクロロホルムアミド（ｄ＝１．００４、０．０１２８モル）を添加した。反応混合液を０℃にて２時間攪拌した。
【００６４】
次いで、１．６５ｇの１，１’−メチレン−ジ（２−ナフトール）（ＳＴ１８５９）（０．００５５モル）および０．６２ｇのＫＯＨの、１５ｍｌのＨ_２Ｏ中の溶液を調製した。この溶液を反応混合液に添加し、次いで室温にて攪拌した。１時間後、ｐＨをＨＣｌ３Ｎで調整し、相を分離した。有機相、トルエンを、ＮａＯＨ３ＮでｐＨ９へと調整した２０ｍｌのＨ_２Ｏで抽出し、次いで中性までＨ_２Ｏで洗浄した。分離した有機相をＮａ_２ＳＯ_４にて乾燥し、次いで溶媒を除去して粗生成物を得た。ｎ−ヘキサン／エチルアセテート８：２からの再結晶化の後、０．２ｇの生成物を得、これを１ｍｌのトリフルオロ酢酸に、ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルコニル加水分解のために溶解した。２０分後、固体の沈殿を得、これを濾過し、次いでｎ−エキサン／ジエチルエーテル８：２の混合液で洗浄した。得られた生成物をメタノールに溶解し、１００ｍｌのＭｅＯＨで溶離するＡ２１／Ｃｌ−樹脂に通して、６０ｍｇの２−（｛１−［（２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル］−２−ナフチル｝オキシ）−２−オキソエタンアミニウムクロライド（ＳＴ１９１３）を得た。
【００６５】
^１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ， ３００ＭＨｚ）， δ９．６（ｓ， １Ｈ， −ＯＨ）， ８．７（ｓ， ３Ｈ， −ＮＨ _３ ）， ７．２−８．４ （ｍ， １２Ｈ，Ｈ−Ａｒ）， ４．７（ｓ， ２Ｈ， Ａｒ−ＣＨ _２ −Ａｒ）， ３．７２ （ｓ， ２Ｈ， Ｃ−ＣＨ _２ −Ｎ）。
Ｋ．Ｆ．＝１．２％
【００６６】
Ｃ_３０Ｈ_２０ＮＯ_３Ｃｌに関して算定し、存在する水の量に対して校正したＣ、Ｈ、Ｎ値：Ｃ、７０．１４；Ｈ、５．１２；Ｎ、５．３６；実測値Ｃ、６９．１；Ｈ、５．４；Ｎ、３．３。
【００６７】
実施例４
２−（ ｛ ４− ［ （３− ｛［ ２−（ジエチルアンモニオ）エトキシ ］ カルボニル ｝ −２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル ］ −３−ヒドロキシ−２−ナフトイル ｝ オキシ）−Ｎ ， Ｎ−ジエチルエタンアミニウムジクロライド（ＳＴ１８００）の調製
【００６８】
【化３４】

【００６９】
３．８８ｇ（０．０１モル）のパモイックアシッド（ＳＴ１６４１）を４．３６ｇのチオニルクロライド（０．０６モル）に懸濁し、次いで８０℃にて５時間還流した。終了時、溶媒を真空下に除去し、次いで残存物をジエチルエーテルで洗浄した。得られたアシルクロライドを３０ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２に懸濁し、次いで０．７ｍｌのＮ，Ｎ−ジエチルエタノールを滴下した。混合液を室温にて一晩攪拌した。終了時、白色固体を得、これを濾過し、ｎ−エキサン／エチルアセテート８：２の混合液で洗浄し、０．５ｇの２−（｛４−［（３−｛［２−（ジエチルアンモニオ）エトキシ］カルボニル｝−２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−ナフトイル｝オキシ）−Ｎ，Ｎ−ジエチルエタンアミニウムジクロライド（ＳＴ１８００）を得た。
【００７０】
^１Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ_３， ３００ＭＨｚ）， δ １０．０５ （ｓ， ２Ｈ， −ＯＨ）， ７．１−８．４ （ｍ， １０Ｈ，Ｈ−Ａｒ）， ４．８５（ｓ， ２Ｈ， Ａｒ−ＣＨ _２ −Ａｒ）， ４．５５（ｔ， ４Ｈ， −Ｏ−ＣＨ _２ −ＣＨ_２−Ｎ）， ３．０（ｔ， ４Ｈ， −Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ _２ −Ｎ）， ２．７５（ｍ， ８Ｈ， −Ｎ−ＣＨ _２ −ＣＨ_３）， １．０（ｔ， １２Ｈ， −Ｎ−ＣＨ_２−ＣＨ _３ ）．
Ｋ．Ｆ．＝０．８％
【００７１】
Ｃ_３５Ｈ_４４Ｎ_２Ｏ_６Ｃｌ_２に関して算定し、存在する水の量に対して校正したＣ、Ｈ、Ｎ値：Ｃ、６３．７２；Ｈ、６．７２；Ｎ、４．２４；実測値Ｃ、６３．５；Ｈ、５．８７；Ｎ、４．６。
【００７２】
実施例５
β−アミロイド_{２５−３５}ペプチドにおけるナトリウムパモエート（ＳＴ１６４１）の抗凝集作用の評価
ナトリウムパモエート２ｍＭおよびリン酸バッファー２００ｍＭ、ｐＨ５からなる２５０μｌの溶液に、２５０μｌの２ｍＭのβＡ_{２５−３５}水溶液（ｃａｔ． Ｂａｃｈｅｍ ｎ° Ｈ−１１９２．０００１）を添加した。１ｍＭのナトリウムパモエート、１ｍＭのβＡ_{２５−３５}および１００ｍＭ、ｐＨ５からなる５００μｌのリン酸バッファー溶液をこうして得た。
同じプロセスを、ナトリウムパモエートが存在しないコントロールサンプルに関して行なった。
２４時間室温に置いた後、サンプルおよびコントロールを１２０００ｒｐｍにて２０分間遠心分離し、上清から沈降した固体を分離した。沈降した固体に２５０μｌの水を添加した。室温にて３時間後、サンプルを再び１２０００ｒｐｍにて２０分間遠心分離した。遠心分離後、コントロールと異なり、サンプル中に固体は全く認められなれなかった。この結果により、ナトリウムパモエートによる、フィブリルにおけるβＡ_{２５−３５}ペプチドの凝集の完全な阻害が立証された。
【００７３】
実施例６
β−アミロイド _１−４２ ペプチドにおけるナトリウムパモエート（ＳＴ１６４１）の抗凝集作用の評価
βＡ_１−４２ペプチドにおけるナトリウムパモエートの抗凝集作用を、以下の方法に従いチオフラビンＴの結合を測定することにより評価した。
０．２２ｍＭのβＡ_１−４２ペプチド（ｃａｔ． Ｂａｃｈｅｍ ｎ°Ｈ−１３６８．０５００）を３７℃にてトリスバッファー１００ｍＭ、ｐＨ７．４中で、単独に、またはナトリウムパモエートの存在下で５日間インキュベートした。ペプチド対ナトリウムパモエートのモル比は一般に、１：８、１：４および１：２であった。
【００７４】
溶液を１３０００ｒｐｍにて５分間遠心分離し、次いで上清を除去した。沈殿を５００μｌのＨ_２Ｏにて洗浄し、次いで１３０００ｒｐｍにて５分間遠心分離した。沈殿において、フィブリル形態の集塊を、６００μｌの、グリシン−ＮａＯＨバッファー５０ｍＭ、ｐＨ９．４に溶解したチオフラビンＴ（ＴｈＴ）２μＭを用いて検出した。５分間のインキュベーション後、５００μｌのサンプルを石英のキュベットに移し、次いで蛍光シグナルを４２０ｎｍの励起および４８０ｎｍの発光スペクトルにて、蛍光分光光度計にて検出した。これらの条件において、蛍光シグナルはアミロイド集塊の量に比例する（Ｌｅ Ｖｉｎｅ， Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ， ｖｏｌ． ３０９ ｐｐ ２７４−２８４）。
【００７５】
この実験において、ナトリウムパモエートは、フィブリル形態のβＡ_１−４２集塊の形成を確実かつ投与量依存的に減らすことが判明した。効果は顕著であり、その低下はコントロールに対して７０％にも達した。
フィブリルの形成の阻害をさらに、インキュベーション時間の関数として測定した。１〜５日間のインキュベーションを行なった際、ナトリウムパモエートはチオフラビンＴの結合を低下させる効力に関し、漸進的な増加を示した。
【００７６】
実施例７
β−アミロイド _１−４２ ペプチドにおけるＳＴ化合物の抗凝集作用の評価
ＳＴ１６４１、ＳＴ１７２２、ＳＴ１８５９、ＳＴ１７４５、ＳＴ１８００、ＳＴ１９１３の、βＡ_１−４２の重合化を妨げる能力を、以下の方法でチオフラビナ「Ｔ」結合アッセイを用いて評価した（Ｍ．Ａ． ＦＩｎｄｅｉｓ， Ｓ．Ｍ． Ｍｏｌｉｎｅａｕｘ； Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ３０９， ４８７−４８８ （１９９９））；βＡ_１−４２ペプチド（１ｍｇ／ｍｌ）をＨ_２Ｏ／ＣＨ_３ＣＮ（１：１）中に溶解し、凍結乾燥し、ＤＭＳＯ＋ＰＢＳ中に溶解し、ついで３７℃にて８日間インキュベートした。ペプチドを次いで超音波処理し、そして、ＰＢＳ（１：５）中に溶解した。９６ウェルのプレートに、βＡ_１−４２の溶液（４０μｌ／ウェル）およびＳＴ試験化合物（５０μｌ／ウェル、０．８〜１００μＭの濃度）からなる溶液を調製した。５０μｌの凝集していないβＡ_１−４２を１５分後に各ウェルに添加し、次いでプレートを一晩３７℃にて攪拌しながらインキュベートした。チオフラビナ「Ｔ」（１０μＭ）およびＮａ_２ＨＰＯ_４×２Ｈ_２Ｏ（５０μＭ）溶液（ｐＨ６．５）を含む２００μｌの反応混合液を次いで各ウェルに添加した。蛍光を４５０ｎｍの励起および４８２ｎｍの発光スペクトルにて、９６ウェルの蛍光測定プレートリーダーを３０秒の範囲内で用いて測定した。この実験条件において、蛍光の程度はβＡ_１−４２重合ペプチドの量に関連した。
表１は、ＳＴ試験化合物のＤＥ_５０値を示す。
【００７７】
【表１】

【００７８】
実施例８
前もって形成したフィブリル形態のβ−アミロイド _１−４２ の集塊の、ナトリウムパモエート（ＳＴＰ１６４１）による分解
この実験は、前もって凝集したβＡ_１−４２ペプチドにおけるナトリウムパモエートの抗凝集能力を評価するために、以下の方法に従って行なった。
βＡ_１−４２ペプチドを、４８時間３７℃にて、実施例６に記載した条件にて凝集させた。ナトリウムパモエートを添加した（ペプチド：パモエート比１：８）。
これらの条件において、ナトリウムパモエートはチオフラビンＴの結合を減じるのに非常に効果的であることが判明した。
【００７９】
ナトリウムパモエートとのインキュベーションにより、ナトリウムパモエートとインキュベートしなかったコントロールと比較して、蛍光が７０％低下した。
この結果は、ナトリウムパモエートが、βＡ_１−４２の繊維構造に対してア−ポステリオリに抗凝集作用を発揮し得ることを立証するものである。
【００８０】
実施例９
ナトリウムパモエート（ＳＴ１６４１）により誘導される、トリプシンの消化に対するβ−アミロイド _１−４２ ペプチドの抵抗性の低下
βＡ_１−４２ペプチドを１５μｌのＮａＯＨ０．１Ｍに溶解した。溶液を１５μｌのＴＲＩＳバッファー１００ｍＭでｐＨ７．４とし、これに３０μｌのバッファーのみ、またはナトリウムパモエートを含む３０μｌのバッファー溶液を添加した。βＡ_１−４２ペプチドの最終濃度は０．２２ｍＭであり、ナトリウムパモエートの最終濃度は０．０５５〜１．７６ｍＭであり、従って、βＡ_１−４２ペプチド：ナトリウムパモエート比は４：１〜１：８とした。
【００８１】
こうして調製したサンプルを３７℃にて５日間インキュベートした。この条件において、βＡ_１−４２ペプチドは、その構造がランダムコイルからβ−シートへと変化しているフィブリル形態の集塊を形成した（Ｚａｇｏｒｓｋｉ Ｍ．Ｇ． ｅｔ ａｌ． １９９９”Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｆａｃｔｏｒｓ Ａｆｆｅｃｔｉｎｇ Ａｍｙｌｏｉｄ β Ｐｅｐｔｉｄｅ Ａｍｙｌｏｉｄｏｇｅｎｉｃｉｔｙ” Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ３０９： １８９−２０４）。５日間のインキュベーション後、２４μｇのトリプシン（Ｍｅｒｃｋ）を各サンプルに添加し、攪拌し、次いで１分間１３０００ｒｐｍで遠心分離した。サンプルを次いで、３７℃にて１時間インキュベートした。
【００８２】
この期間が経過した時、混合液を５分間１３０００ｒｐｍで遠心分離し、５０μｌの上清を除去し、次いで沈殿を４０μｌのＨＣＯＯＨおよび１０μｌの０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液で溶解した。
この時点で、サンプルを定量ＨＰＬＣ分析のために準備した。ナトリウムパモエートとインキュベートしたサンプルのＨＰＬＣ特性を、ペプチド単独を用いて得られたものと比較し、それによりβＡ_１−４２ペプチドを定量した。
【００８３】
トリプシンは前記の条件で、３０から５０％のβＡ_１−４２ペプチドを加水分解することができた。高投与量（ペプチド：パモエート比１：８）にて、５０％以上、および低投与量（１：４）にて４０％以上、ナトリウムパモエートにより、βＡ_１−４２のトリプシンによる加水分解が増した。
【００８４】
実施例１０
β−アミロイド _{２５−３５} により誘導される神経毒性のナトリウムパモエート（ＳＴ１６４１）による阻害
ナトリウムパモエートの潜在的な神経保護活性を確認するために、妊娠１６−１８日のラット胎児の脳の顕微解剖により得られる一次皮質神経培養物を用いた。脳組織を牛胎児血清の存在下で培養し、次いで神経膠の増殖を、インキュベーション培地に抗有糸分裂剤シトシンアラビノシドを３日目および５日目に添加することにより阻害した（Ａｎｄｒｅｏｎｉ ｅｔ ａｌ． １９９７ Ｅｘｐ． Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ １４８： ２８１−２８７）。細胞培養物をβＡ_{２５−３５}ペプチドに５−７日間、ナトリウムパモエートの存在下または不在下に曝した。神経保護活性を、カイニン酸により誘導される神経毒性条件に関して評価して、神経毒性剤に対するナトリウムパモエートの活性の特異性およびその効果的な抗凝集活性を確認した。ナトリウムパモエートが細胞をその変性から保護する能力も、培養培地中牛胎児血清の不在下で培養した神経細胞において評価した。この場合、播種後２４時間で、培地を、血清を含まず、グルタミン、インシュリン、トランスフェリン、プトレッシン、プロゲステロン、ナトリウムセレナイトおよびヘペスを含む培地で置き換えた。
【００８５】
実験方法
小脳皮質の神経の一次培養物を、妊娠１６−１８日目のラットの胎児脳から採取し、牛胎児血清中で培養した。インキュベーション３日および５日目に、神経膠の増殖を、シストッシンアラビノシドを抗有糸分裂剤として用いて阻害した。
培養物を２５および５０μＭの濃度のβＡ_{２５−３５}ペプチドに、播種の翌日から５日〜７日間曝した。
【００８６】
βＡ_{２５−３５}ペプチドは、ペプチド自体と等モル濃度またはそれより低濃度のナトリウムパモエートと共に培養物に添加した。
神経毒に対する保護を、比色分析法および比重分析法を用い、画像分析機で評価した。
得られた結果は、ナトリウムパモエートがβＡ_{２５−３５}により誘導される毒性に対して完全な保護を提供し得ることを示している。
【００８７】
【表２】
表２

【００８８】
実施例１１
Ｋ^＋の欠乏により誘導される小脳顆粒細胞のアポトーシスのナトリウムパモエート（ＳＴ１６４１）による低下
誕生８日目のラットの小脳から単離した顆粒細胞は約１週間で生化学的および形態学的に分化し、形態学的に成熟し、そして、グルタメート性介在ニューロンの表現型を有するようになる（Ｇａｌｌｏ ｅｔ ａｌ． １９８２ ＰＮＡＳ ７９： ７９１９−７９２３）。培養培地から血清を除去し、カリウムイオンの細胞外濃度（２５ｍＭ）をそれが脱分極条件となる程度まで（５ｍＭ）下げると、アポトーシスによる細胞死が約２４時間で得られる。
【００８９】
プログラムされたニューロンの死は、多くの生理学的プロセスのみならず多くの神経変性疾患、ＡＤ、パーキンソン病気、ハンチントン舞踏病、および筋萎縮性側索硬化症などにも認められる現象である。ＡＤの場合、アポトーシスとアミロイド自体の産生を調節するプレセニル２（ＰＳ２）遺伝子のβＡ突然変異の存在の間に密接な関連があることが認められている。実際、ＰＳ２変異が存在するＡＤの場合、脳および血漿βＡ_１−４２の典型的な増加も検出されており（Ｓｃｈｅｕｎｅｒ Ｄ．， Ｅｃｋｍａｎ Ｃ．， Ｊｅｎｓｅｎ Ｍ．， Ｓｏｎｇ Ｘ．， Ｃｉｔｒｏｎ Ｍ．， Ｓｕｚｕｋｉ Ｎ．， Ｂｉｒｄ Ｔ．Ｄ．， Ｈａｒｄｙ Ｊ．， Ｈｕｔｔｏｎ Ｍ．， Ｋｕｋｕｌｌ Ｗ．， Ｌａｅｓｏｎ Ｅ．， Ｌｅｖｙ−Ｌａｈａｄ Ｅ．， Ｖｉｉｔａｎｅｎ Ｍ．， Ｐｅｓｋｉｎｄ Ｅ．， Ｓｅｌｋｏｅ Ｄ．， Ｙｕｎｋｉｎ Ｓ． （１９９６） Ｎａｔ． Ｍｅｄ． ２， ８６４−８７０．）；しかも、ＰＣ１２中で発現されるＰＳ２遺伝子の変異形態はアポトーシスを引き起こしている（Ｗｏｌｏｚｉｎ Ｂ．， Ｉｗａｓａｋｉ Ｋ．， Ｄ’Ａｄａｍｉｏ Ｌ． （１９９６） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７４， １７１０−１７１３）。
【００９０】
この実験モデルにより、小脳顆粒細胞の神経アポトーシスにより、アミロイドプレカーサーＡＰＰのプロセシングに関してアミロイドを生成する代謝過程に都合のよい変化が生じている「自燃的（ｓｅｌｆ−ｆｕｅｌｌｉｎｇ）」βＡ産出系を得ることが可能となる。βＡレベルの増加は、今度は、プログラムされた細胞死に好都合である。この実験環境において、試験物質の潜在的効力を、ＫＣｌを培地から減らした後の所定の時間（２４、４８および７２時間）における細胞の生存に関して測定した。
【００９１】
実験方法
ＫＣｌ２５ｍＭを含む培養培地に維持した誕生８日目のラットの脳顆粒細胞一次培養物において、培養６日後に細胞を^３５Ｓ−メチオニンで標識した。
アポトーシスを、血清を除去することおよび２５ｍＭから５ｍＭへＫＣｌ濃度を下げることにより誘導した。
この状況は、インビトロでの神経求心路遮断条件、または神経組織細胞に侵入および存在している樹状突起および軸索枝の切除を意味する。
【００９２】
アポトーシスの結果として、βＡが過剰に産生された。
培養物を１μＭ〜１００μＭの範囲の濃度のナトリウムパモエートと共にインキュベートした。
毒性に対する保護を、２４、４８および７２時間にて、細胞の生存能力に関して評価した。
【００９３】
結果
この実験で得られた結果は、１０μＭの濃度のナトリウムパモエートが、アポトーシスプロセス中のアミロイド形成により誘導される損傷に対して保護作用（８９％の保護）を有することを示した。
【００９４】
実施例１２
ＳＴ１８５９の、「インビボでの」血液脳関門通過能
死亡後のＡＤの脳切片の試験により、フィブリル化アミロイド集塊からなる多くの細胞外老人斑の存在が明らかである。ベータアミロイドペプチドの存在と該疾患の重篤度の間の関連性は、ペプチドフィブリルの形成の阻害がこの病気の治療に効果的な手段となる可能性があることが示唆するものである。ＳＴ１８５９は「インビトロで」ベータアミロイドの凝集を阻害したが、無傷の血液脳関門を通過するその透過性を試験するために、^１４Ｃ（Ｓ．Ａ．５０μＣｉ／ｍＭ）で標識したＳＴ１８５９を１８μＣｉ／ラットの投与量で正常ラットに静脈内注射した。脳および血液を、注射の３０分後に採取し、血液を次いで遠心分離し（３０００ＲＰＭ×１５分）、そして得られた血清は水で１：２０に希釈し、脳組織は水中１：２０ｗ／ｖにて均質化した。各サンプルに次いで４ｍｌの水性サンプル用のシンチレーション液を添加した。放射能の量を、自動β−カウンター（Ｐａｃｋａｒｄ ４６００）を用いてカウントした。ＤＰＭで示したデータ（表１）を各サンプルの重量または体積に対して標準化した。この実験で得られた結果は、ＳＴ１８５９が血清／脳＜１の速度で血液脳関門を通過できることを示した（表３）。
【００９５】
【表３】

Claims (27)

1. 一般式（Ｉ）
   

   

   （式中、
   Ｒ１およびＲ５は、同一または異なっていてよく、ＣＯＯＲ６、ＣＯＮＨＲ６、ＳＯ_２Ｒ６、ＳＯ_２ＮＨＲ６、ＳＯ_３Ｒ６、ＯＲ６、ＣＯＲ６、ＮＨＲ６、Ｒ６；
   Ｒ６は、Ｈ、またはＲ７により置換される、直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の１〜５の炭素原子を有するアルキル鎖またはフェニル；
   Ｒ７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＲ８Ｒ９、
   

   

   Ｒ８およびＲ９は、同一または異なっていてよく、Ｈ、１〜５の炭素原子を有するアルキル；
   Ｒ２およびＲ４は、同一または異なっていてよく、Ｈ、ＯＨ、ＮＨＲ６、ＯＣＯ−Ｒ１０−ＮＲ８Ｒ９、
   

   

   Ｒ１０は、直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の１〜５の炭素原子を有するアルキル鎖；
   Ｒ３は、−［ＣＨ_２］ｎ−、−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ１１）−、
   ｎは、１〜４の整数、Ｒ１１は直鎖もしくは分枝鎖の、１〜５の炭素原子を有する、アミノ基により置換されるアルキル、アルキルアミノＣ_１−Ｃ_５、ジアルキルアミノＣ_１−Ｃ_５、ＯＨ、アルキルオキシＣ_１−Ｃ_５）
   を有する化合物およびその医薬上許容される塩；ただし、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は、
   １　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ_２Ｃ_６Ｈ_５
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   ２　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ（ＣＨ_３）_２
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   ３　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ_２Ｈ_５
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   ４　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ_６Ｈ_１１
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   ５　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣＨ_３
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   ６　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＣ（ＣＨ_３）_３
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   ７　　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＮＨＣ_６Ｈ_５
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   １１　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣ_６Ｈ_５
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   １２　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
   Ｒ２＝Ｒ４＝
   

   

   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   １３　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＣＯＣＨ＝ＣＨ_２
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−；
   １４　　Ｒ１＝Ｒ５＝−Ｈ
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   １５　　Ｒ１＝Ｒ５＝−ＣＯＯＨ
   Ｒ２＝Ｒ４＝−ＯＨ
   Ｒ３＝−ＣＨ_２−
   ではない。
2. （２Ｒ）−２−（アセチルオキシ）−４−（｛３−カルボキシ−１−［（３−カルボキシ−２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル］−２−ナフチル｝オキシ）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソ−１−ブタンアミニウムクロライド。
3. （２Ｒ）−２−（アセチルオキシ）−４−（｛１−［（２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル］−２−ナフチル｝オキシ）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−４−オキソ−１−ブタンアミニウムクロライド。
4. ２−（｛１−［（２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル］−２−ナフチル｝オキシ）−２−オキソエタンアミニウムクロライド。
5. ２−（｛４−［（３−｛［２−（ジエチルアンモニオ）エトキシ］カルボニル｝−２−ヒドロキシ−１−ナフチル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−ナフトイル｝オキシ）−Ｎ，Ｎ−ジエチルエタンアミニウムジクロライド。
6. 薬剤としての使用のための、請求項１−５記載の化合物。
7. 一般式（Ｉ）の化合物
   

   

   （式中、
   Ｒ１およびＲ５は、−ＣＯＯＲ６、
   Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ５は請求項１に示す意味を有する）
   の調製法であって、Ｒ６がＨである一般式（Ｉ）の化合物をハロゲン化剤で処理して対応するアシルクロライドを得、これを次いでＲ６−ＯＨアルコールと１対６のモル比で、または化学量のＲ６−ＯＨを含む不活性無水溶媒中で、攪拌下に反応させることに特徴づけられる方法。
8. 式（Ｉ）の化合物
   

   

   （式中、
   Ｒ１およびＲ５は、ＣＯＮＨＲ６、
   Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ６は、請求項１に示す意味を有する）の調製法であって、Ｒ６がＨである一般式（Ｉ）を有する化合物をハロゲン化剤で処理して対応するアシルクロライドを得、またはカップリング剤を用い、次いでＲ６−ＮＨ_２アミンと６対１のモル比で、または化学量のＲ６−ＮＨ_２を含む不活性無水溶媒中で攪拌下に反応させることに特徴づけられる方法。
9. 式（Ｉ）の化合物
   

   

   （式中、
   Ｒ２およびＲ４は、ＯＨ；
   Ｒ１およびＲ５は、ＳＯ_３Ｒ６、ＳＯ_２ＮＨＲ６；
   Ｒ３は、−ＣＨ（Ｒ１１）−、
   Ｒ６およびＲ１１は、請求項１に示す意味を有する）の調製法であって、以下の反応スキーム１；式「ａ」の化合物をＲ１１−ＣＨＯアルデヒドと氷酢酸中で９０℃から１５０℃の温度で反応させて一般式「ｂ」を有する化合物を得、次いで一般式「ｂ」の化合物をハロゲン化剤で処理して対応するスルホニルクロライドを得、次いでＲ６−ＯＨアルコールと反応させて一般式「ｄ」を有する化合物を得る、またはＲ６−ＮＨ_２アミンと反応させて一般式「ｅ」を有する化合物を得る；
   

   

   に従って行なうことに特徴づけられる方法。
10. 一般式（Ｉ）の化合物
    

    

    （式中、
    Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４およびＲ５は、ＯＲ６および／またはＮＨＲ６；
    Ｒ３は、−ＣＨ（Ｒ１１）−、
    Ｒ６およびＲ１１は、請求項１に示す意味を有する）の調製法であって、以下の反応スキーム２；式Ａの化合物を酸環境中でＲ１１−ＣＨＯアルデヒドと反応させて式Ｂ、ＣおよびＤに対応する化合物の混合物を得、これを分離および精製し、これらの化合物を塩基の存在下でＲ６−Ｘハロゲン化アルキルと反応させて、次いで酸環境中で脱プロトン化して対応するナフチルエーテルＥ、Ｆ、Ｇを得、これらをＮａＮＯ_２の硫酸溶液で処理をして、化合物Ｈ、ＩおよびＬを得る；
    

    

    に従って行うことに特徴づけられる方法。
11. 請求項１−５記載の化合物を活性成分として、および少なくとも一つの医薬上許容される賦形剤および／または希釈剤を含む医薬組成物。
12. 一般式（Ｉ）
    

    

    （式中、
    Ｒ１およびＲ５は、同一または異なっていてよく、ＣＯＯＲ６、ＣＯＮＨＲ６、ＳＯ_２Ｒ６、ＳＯ_２ＮＨＲ６、ＳＯ_３Ｒ６、ＯＲ６、ＣＯＲ６、ＮＨＲ６、Ｒ６；
    Ｒ６は、Ｈ、またはＲ７で置換されていてよい、直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の１〜５の炭素原子を有するアルキル鎖またはフェニル；
    Ｒ７は、ＯＨ、ＣＯＯＨ、ＳＯ_３Ｈ、ＮＲ８Ｒ９、
    

    

    Ｒ８およびＲ９は、同一または異なっていてよく、Ｈ、１〜５の炭素原子を有するアルキル；
    Ｒ２およびＲ４は、同一または異なっていてよく、Ｈ、ＯＨ、ＮＨＲ６、ＯＣＯ−Ｒ１０−ＮＲ８Ｒ９、
    

    

    Ｒ１０は、直鎖もしくは分枝鎖の飽和もしくは不飽和の１〜５の炭素原子を有するアルキル鎖；
    Ｒ３は、−［ＣＨ_２］ｎ−、−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ（Ｒ１１）−、
    ｎは、１〜４の整数である、
    Ｒ１１は、直鎖もしくは分枝鎖の１〜５の炭素原子を有するアミノ基により置換されるアルキル、アルキルアミノＣ_１−Ｃ_５、ジアルキルアミノＣ_１−Ｃ_５、ＯＨ、アルキルオキシＣ_１−Ｃ_５）
    を有するパモイックアシッドまたはその誘導体の一つ、またはその医薬上許容される塩の一つの、アミロイド集塊の沈着により特徴づけられる疾患の治療のための薬剤の調製のための使用。
13. アミロイドの集塊の沈着により特徴づけられる疾患が、アルツハイマー病、ダウン症候群、オランダ型アミロイドーシスに伴う遺伝性脳出血、慢性の炎症に伴うアミロイドーシス、多発性骨髄腫および他の血液Ｂリンパ球細胞障害に伴うアミロイドーシス、ＩＩ型糖尿病に伴うアミロイドーシス、およびプリオン病、クールー病気または羊のスクレイピーに伴うアミロイドーシスにから成る群から選択される、請求項１２記載の使用。
14. プリオン病に伴うアミロイドーシスが、クロイツフェルツ−ヤコブ病およびゲルストマン−ストロイスラーシンドロームから成る群から選択される、請求項１３記載の使用。
15. 化合物がパモイックアシッドのナトリウム塩である、請求項１２−１４記載の使用。
16. アミロイドの集塊の沈着により特徴づけられる疾患の診断のための、請求項１２記載の少なくとも一つの化合物を含む診断キット。
17. 化合物の、炭素、水素、窒素または酸素の元素の少なくとも一つを対応する放射性アイソトープで置換したものである、請求項１６記載のキット。
18. 化合物が、少なくとも一つの放射性ヨウ素の原子を有する、請求項１６記載のキット。
19. 請求項１７−１８記載のアイソトープを有するか否かによらず、化合物が一つの金属放射性アイソトープを組み込んだ形態である、請求項１６記載のキット。
20. 金属が、インジウム、ガドリニウム、およびテクニチウムから成る群から選択される、請求項１９記載のキット。
21. 画像診断法を用いる診断のための、請求項１６−２０記載のキットの使用。
22. 画像診断法が、ＰＥＴ、ＳＰＥＣＴ、ＮＭＲ、およびシンチグラフィー法から成る群から選択される、請求項２１記載の使用。
23. シンチグラフィー法が、二次元シンチグラフィーである、請求項２２記載の使用。
24. 炭素、水素、窒素または酸素の元素の少なくとも一つが対応する放射性アイソトープで置換されている、請求項１２記載の化合物。
25. 少なくとも一つの放射性ヨウ素原子を有する、請求項１２記載の化合物。
26. 請求項２４−２５記載の放射性アイソトープを有するか否かによらず、画像診断に用いられる元素を組み込んだものである、請求項１２記載の化合物。
27. 組み込まれた元素が、インジウム、ガドリニウム、およびテクニチウムから成る群から選択される、請求項２６記載の化合物。