JP2004089137A

JP2004089137A - 培養装置および培地交換方法

Info

Publication number: JP2004089137A
Application number: JP2002258029A
Authority: JP
Inventors: Hiroki Hibino; 日比野　浩樹; Hiroyuki Irie; 入江　洋之; Akira Inoue; 井上　晃; Hideki Koyanagi; 小柳　秀樹
Original assignee: Olympus Corp
Current assignee: Olympus Corp
Priority date: 2002-09-03
Filing date: 2002-09-03
Publication date: 2004-03-25

Abstract

【課題】簡易な構成で培地交換作業の自動化を図る。
【解決手段】細胞を培養する細胞培養部２と、培地Ａを貯留する培地貯留部３とを備え、細胞培養部２が、その上部に、該細胞培養部２内に収容されている培地Ａの上方から培地貯留部３に貯留されている培地Ａを供給可能な供給口２ａと、細胞培養部２内に収容されている培地Ａの液位が所定の液位に達したときに、培地Ａを細胞培養部２外に流出させる流出口２ｂとを備える培養装置１を提供する。
【選択図】　図１

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
この発明は、培養装置および培地交換方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】
従来より、間葉系幹細胞等の幹細胞は、様々な組織に分化でき、その組織を再生することができる細胞として知られている。間葉系幹細胞は、骨髄液等に含まれている。しかしながら、骨髄液等から採取可能な間葉系幹細胞はごく微量であり、組織の再生に必要な量の間葉系幹細胞を得るためには、骨髄液等に含まれる間葉系幹細胞を培養することにより増殖させる必要がある。
【０００３】
間葉系幹細胞を培養するには、患者から採取した骨髄液を平坦な培養容器上に播種して、適当な培地内において培養する。骨髄液内の赤血球や白血球などの造血系の細胞は培地内に浮遊する一方、間葉系幹細胞は培養容器の底面に付着して増殖する性質を有している。したがって、培地交換によって造血系の細胞を廃棄することにより、培養容器の底面に付着して増殖した間葉系幹細胞のみを抽出することが可能となる。
【０００４】
【特許文献１】
特公平３−６９５０８号公報（第１頁、第１図）
【特許文献２】
特公平３−５７７４４号公報（第７頁、第４図）
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
従来、培地交換作業は、作業者が培養容器を持ち上げて傾斜させ培養容器から培地を流出させた後に、新たな培地を電動ピペット等によって培養容器内に供給していた。
しかしながら、多種の細胞を培養する場合には、作業者による培地交換作業は現実的ではなく、これを自動化する必要がある。この場合に、作業者による培地交換作業をそのまま装置に置き換えたのでは、装置が複雑になる不都合がある（例えば、特許文献１、特許文献２参照。）。
【０００６】
この発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、簡易な構成で培地交換作業の自動化を図ることができる培養装置および培地交換方法を提供することを目的としている。
【０００７】
【課題を解決するための手段】
上記目的を達成するために、この発明は、以下の手段を提供する。
請求項１に係る発明は、細胞を培養する細胞培養部と、培地を貯留する培地貯留部とを備え、前記細胞培養部が、その上部に、該細胞培養部内に収容されている培地の上方から前記培地貯留部に貯留されている培地を供給可能な供給口と、細胞培養部内に収容されている培地の液位が所定の液位に達したときに、培地を細胞培養部外に流出させる流出口とを備える培養装置を提供する。
【０００８】
この発明によれば、培地貯留部に貯留されている培地が供給口から供給されると、細胞培養部内に培地が貯留される。供給口は、細胞培養部内に収容されている培地の上方から培地を供給するので、供給口が細胞培養部内の培地に接触することがなく、廃培地によって汚染されることがない。また、供給口から新たな培地を供給されることにより、細胞培養部内の培地の液位が所定の液位に達すると、培地は流出口から細胞培養部外に流出させられるので、細胞培養部内の培地が順次新たな培地へと入れ替わり、簡易に培地交換されることになる。
【０００９】
請求項２に係る発明は、請求項１に記載の培養装置において、前記培地貯留部の液位が、前記細胞培養部の液位よりも高い位置に配置され、重力により培地を供給する培養装置を提供する。
この発明によれば、重力を利用して培地を供給できるので、動力を低減して装置を簡易なものとすることができる。
【００１０】
請求項３に係る発明は、請求項１または請求項２に記載の培養装置において、前記培地貯留部から細胞培養部への培地の流量を調節する流量調節手段が設けられている培養装置を提供する。
この発明によれば、流量調節手段の作動により、細胞培養部に供給される培地の流量を適正な量に調節することが可能となる。したがって、培地を徐々に供給することにより連続的に培地交換を行い、あるいは、定期的に培地の流量を増大させることにより定期的に培地交換を行うことが可能となる。
【００１１】
請求項４に係る発明は、請求項３に記載の培養装置において、前記流量調節手段が、前記培地貯留部または前記細胞培養部を昇降させて、前記培地貯留部内の液位の前記細胞培養部内の液位に対する相対的な高さを調節する昇降手段である培養装置を提供する。
この発明によれば、昇降手段の作動により培地貯留部または細胞培養部の一方が他方に対して昇降させられ、両者内に収容されている培地の液位の相対的な高さが調節される。これにより、培地貯留部内の液位を細胞培養部内の液位より高くし、その相対的な高さを増減することにより、培地貯留部から細胞培養部へ供給される培地の流量を調節することが可能となる。
【００１２】
請求項５に係る発明は、請求項１から請求項４のいずれかに記載の培養装置において、前記細胞培養部が、筒状の側壁と、該側壁内に密封状態に嵌合される底面部材と、前記側壁の上部に設けられた流出口と前記底面部材との相対的な高さを変更可能な相対高さ変更手段とを備える培養装置を提供する。
この発明によれば、筒状の側壁と、該側壁内に嵌合される底面部材とにより構成された細胞培養部内に培地を貯留して細胞の培養が行われる。培地交換を行う際には、相対高さ変更手段を作動させることにより、筒状の側壁に対して底面部材を相対的に上昇させることで、細胞培養部の深さを低減していき、培地を側壁の上部から外部に流出させることが可能となる。
【００１３】
請求項６に係る発明は、請求項１に記載の培養装置において、前記細胞培養部の下方に廃培地貯留部が設けられた容器本体と、前記細胞培養部において細胞の培養を行う中立位置から前記容器本体を傾斜させる揺動手段とを備える培養装置を提供する。
この発明によれば、揺動手段を作動させて容器本体を中立位置に配することにより、細胞培養部内に培地と細胞とを混合したものを貯留して細胞の培養が行われる。また、培地交換時には、揺動手段を作動させて、容器本体を中立位置から傾斜させることにより、細胞培養部の液位を変化させ、流出口から培地を排出する。細胞培養部の下方には廃培地貯留部が設けられているので、排出された培地は廃培地貯留部に貯留されることになる。
【００１４】
請求項７に係る発明は、請求項６に記載の培養装置において、前記容器本体内の細胞培養部の上方に、培地貯留部が固定され、該培地貯留部の上部に、該培地貯留部に収容されている培地の液位が所定の液位に達したときに、培地を細胞培養部に流出させる流出口が設けられ、該培地貯留部の流出口と前記細胞培養部の流出口とが、前記容器本体の揺動方向に沿って逆方向に配置されている培養装置を提供する。
【００１５】
この発明によれば、揺動手段を作動させて、容器本体を一方向に傾斜させることにより細胞培養部から廃培地貯留部へ培地を排出した後に、揺動手段により容器本体を逆方向に傾斜させることにより、細胞培養部の上方に配されている培地貯留部内の培地の液位をを変化させて、その流出口から培地を流出させる。培地貯留部の下方には細胞培養部が設けられているので、培地貯留部の流出口から排出された培地は細胞培養部に供給され、培地交換が行われることになる。
【００１６】
請求項８に係る発明は、細胞を培養する細胞培養部に、培地を貯留する培地貯留部から培地を供給し、前記細胞培養部から培地を溢れさせることにより、細胞培養部内の培地を交換する培地交換方法を提供する。
細胞培養部に培地貯留部から培地を供給すると新たに供給された培地は細胞培養部内に既に貯留されている培地と混合され、一部が細胞培養部から溢れて排出される。そして、培地貯留部からの培地の供給を継続することにより、既に貯留されていた培地が新たに供給された培地に徐々に置き換わり、培地交換が行われることになる。
【００１７】
【発明の実施の形態】
この発明の第１の実施形態に係る培養装置および培地交換方法について、図１を参照して、以下に説明する。
本実施形態に係る培養装置１は、細胞を培養する細胞培養部２と、培地Ａを貯留する培地貯留部３と、不要となった培地である廃培地Ａ’を貯留する廃培地貯留部４とを備えている。
培地貯留部３には、その底部に、培地を流出させる供給管５が接続されている。供給管５の途中位置には、流出する培地Ａの流量を調節するための流量調節バルブ６が配置されている。
【００１８】
前記細胞培養部２は、上方を開口した有底筒状の容器であって、内部に培地Ａを貯留可能に設けられている。上部開口２ａは、前記培地貯留部３からの培地Ａを受け入れる供給口を構成している。また、細胞培養部２は、貯留している培地Ａの液位が所定の高さ以上になったときに、その上縁に配されている流出口２ｂから培地Ａ’を溢れさせるように構成されている。
前記廃培地貯留部４は、前記細胞培養部２の下方に配置され、細胞培養部２の流出口２ｂから流出する培地Ａ’を受け止めることができるようになっている。
【００１９】
このように構成された本実施形態に係る培養装置１によれば、細胞培養部２内に適当な培地Ａを貯留し、かつ、培地Ａ内に細胞を投入した状態で、所定の培養条件、例えば、３７±０．５℃、５％ＣＯ_２濃度に保持することにより、細胞の培養が行われる。細胞、特に、間葉系の幹細胞は、細胞培養部２の底面２ｃに付着して成長する。
【００２０】
この場合において、本実施形態に係る培養装置１では、流量調節バルブ６を調節することにより、適当な流量の培地Ａが、培地貯留部３から供給管５を介して、常時、細胞培養部２に滴下される。すなわち、細胞の培養中に培地Ａ内から栄養分が消費される以上の速度で、培地貯留部３から新たな培地Ａを滴下させることにより、栄養分が常時補給され、適正な培養条件が達成されることになる。
【００２１】
また、新たな培地Ａを供給されることにより、細胞培養部２内の培地Ａの液位が上昇する。この場合において、培地Ａの液位が細胞培養部２の流出口２ｂを超えると、該流出口２ｂから溢れた培地Ａ’が細胞培養部２から流出し、その下方に配されている廃培地貯留部４に排出される。したがって、本実施形態に係る培養装置１によれば、細胞培養部２の培地Ａが常時入れ替えられるので。常に適正な培養条件下において細胞の培養を行うことが可能となる。しかも、細胞培養部２への新たな培地Ａの供給を細胞培養部２の上方から滴下させることにより行い、かつ、廃培地Ａ’の排出を細胞培養部２から溢れさせることにより行うので、培地交換の際に外部部材を培地Ａに接触させることがなく、細菌等の感染を防止することができる。
【００２２】
なお、上記実施形態においては、培地貯留部３から細胞培養部２への培地Ａの供給を、微小流量で継続して行うことにより、細胞培養部２内の培地Ａを常時入れ替えていく培地交換方法を提供しているが、これに代えて、定期的に所定量の培地Ａを供給する方法を採用してもよい。
また、細胞の培養を開始した後の所定期間は、細胞を細胞培養部２の底面２ｃに定着させる必要があるため、培地Ａを循環させないように静定させ、所定期間経過後から継続的な滴下を開始してもよい。
【００２３】
また、上記実施形態においては、培地貯留部３から培地Ａを供給することで、細胞培養部２内の培地Ａの液位を上昇させ、細胞培養部２から培地Ａを溢れさせることで培地Ａの交換を行うこととしたが、これに代えて、図２に示されるように構成してもよい。すなわち、図２に実線で示す水平位置の細胞培養部２内において細胞を培養し、鎖線で示すように細胞培養部２を傾斜させて、培地Ａの液位を変動させ、これによって培地交換を行うようにしてもよい。
【００２４】
また、この場合に、培地貯留部からの供給管５の他に、トリプシンのような蛋白質分解酵素の供給管７を設けておき、細胞の培養が終了した後に、トリプシンを細胞培養部２に供給して、細胞培養部２の底面２ｃに付着している細胞を剥離させることにしてもよい。
【００２５】
次に、この発明の第２の実施形態に係る培養装置１０について、図３を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る培養装置１０は、第１の実施形態に係る培養装置１と同様の細胞培養部２と、培地Ａを貯留する培地貯留部３と、該培地貯留部３内の培地Ａと細胞培養部２内の培地Ａとを連絡する連絡管１１と、培地貯留部３の液位の高さを調節する昇降装置１２とを備えている。
【００２６】
前記連絡管１１は、柔軟に折り曲げ可能な材質からなり、その一端が培地貯留部３内の培地Ａ内に開口し、他端が細胞培養部２内の培地Ａ内に開口し、その内部全体に培地Ａが充満している。これにより、連絡管１１内の培地Ａは、液位の高い方から低い方へ流れるようになっている。
【００２７】
前記昇降装置は、例えば、エアシリンダやボールネジのような直動機構である。この昇降機構は、例えば、前記培地貯留部を搭載し、該培地貯留部内の培地の液面の高さを細胞培養部内の培地の液面の高さより常に高くなるように、培地貯留部を一定速度で上昇させるようになっている。
【００２８】
このように構成された本実施形態に係る培養装置１０の作用について、以下に説明する。
本実施形態に係る培養装置１０によれば、細胞培養部２内に適当な培地Ａを貯留し、かつ、培地Ａ内に細胞を投入した状態で、所定の培養条件、例えば、３７±０．５℃、５％ＣＯ_２濃度に保持することにより、細胞の培養が行われる。
【００２９】
この場合において、本実施形態に係る培養装置１０によれば、昇降装置１２を作動させることにより、培地貯留部３を上昇させる。これにより、培地貯留部３内に貯留されている培地Ａの液面の高さが細胞培養部２内に貯留されている培地Ａの液面の高さよりも相対的に高い位置に配置される。したがって、培地貯留部３と細胞培養部２の培地Ａどうしを連絡している連絡管１１内の培地Ａは、培地貯留部３から細胞培養部２側へと移動する。
【００３０】
その結果、細胞培養部２には常に新しい培地Ａが供給される。そして、細胞培養部２内の培地Ａが所定の液位に達すると、培地Ａは細胞培養部２の上縁に配されている流出口２ｂから流出して、その下方に配されている廃培地貯留部（図示略）に排出される。この状態においては、細胞培養部２内の培地Ａの液面の高さは一定の高さに保持されるので、これに合わせて培地貯留部３の上昇速度を調節することにより、培地貯留部３内の培地Ａの液面と細胞培養部２内の培地Ａの液面との相対高さを一定に保持して、培地貯留部３から細胞培養部２への培地Ａの流量を一定値に設定することができる。
【００３１】
このように、本実施形態に係る培養装置１０によれば、培地貯留部３を上昇させるだけで、細胞培養部２内の培地Ａを常時入れ替えることができる。なお、昇降装置１２による培地貯留部３の上昇を定期的に行うことにより、培地貯留部３から細胞培養部２への培地Ａの供給を定期的に断続して行うことにしてもよい。
【００３２】
また、上記実施形態においては、細胞培養部２の液面に対して培地貯留部３の液面が常に高くなるように培地貯留部３を上昇させることとしたが、これに代えて、培地貯留部３を固定し、細胞培養部２を下降させることにしてもよい。
【００３３】
次に、この発明の第３の実施形態に係る培養装置２０について、図４および図５を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る培養装置２０は、図４に示されるように、円筒状の側壁２１と該側壁２１内を上下に移動可能な底面部材２２とにより構成される細胞培養部２３と、側壁２１の外側に設けられた円環状の廃培地貯留部２４と、前記底面部材２２を昇降可能な昇降装置（相対高さ変更手段）２５とを備えている。
【００３４】
前記細胞培養部２３を構成する側壁２１内面と底面部材２２との間は、例えば、図示しないＯリングのようなシール部材によって、内部の培地Ａが漏洩しないように密封されている。
前記細胞培養部２３の上方には、図示しない培地貯留部から新たな培地Ａを供給する供給管２６が配置されている。
【００３５】
このように構成された本実施形態に係る培養装置２０の作用について以下に説明する。
本実施形態の培養装置２０により細胞を培養するには、まず、図４に示されるように、昇降装置２５を作動させることにより、底面部材２２を側壁２１の上端の流出口２１ａに対して所定距離だけ下降させた位置に停止させ、供給管２６から新たな培地Ａを供給する。この培地Ａ内に、培養すべき細胞を混合する。そして、この状態で、所定の培養条件、例えば、３７±０．５℃、５％ＣＯ_２濃度に保持することにより、細胞の培養が行われる。
【００３６】
次に、本実施形態の培養装置２０において培地の交換を行う場合には、図５に示されるように、昇降装置２５を作動させることにより、側壁２１内部において底面部材２２を上昇させる。これにより、細胞培養部２３内の液面の高さが上昇し、側壁２１の上端の流出口２１ａを超えた時点で、培地Ａが側壁２１の流出口２１ａから溢れ、側壁２１の外部に配置されている廃培地貯留部２４に排出される。そして、細胞培養部２３内の培地Ａが所定量排出された時点で昇降装置２５を作動させ、底面部材２２を下降させることにより、新たな培地Ａを収容可能なスペースを設ける。その後に、供給管２６から新たな培地Ａを細胞培養部２３内に供給することにより、培地交換が行われることになる。
【００３７】
このように本実施形態に係る培養装置２０によれば、昇降装置２５の作動による底面部材２２の昇降動作だけで、培地Ａを簡易に交換することができる。
なお、本実施形態においては、昇降装置２５の作動により底面部材２２を側壁２１に対して昇降させることとしたが、これに代えて、底面部材２２を固定し、側壁２１を昇降させることによって、同等の効果を得るようにしてもよい。
また、側壁２１を円筒状としたが、これに限定されるものではなく、内部に底面部材２２を密封可能かつ昇降可能に嵌合させることができれば、任意の形状の筒状部材を側壁２１としてもよい。
【００３８】
次に、この発明の第４の実施形態に係る培養装置３０について、図６から図１０を参照して以下に説明する。
本実施形態に係る培養装置３０は、図６および図７に示されるように、密封可能な容器本体３１と、該容器本体３１を一水平軸線３２回りに揺動させる揺動装置３３とから構成されている。容器本体３１の内部には、培地Ａを貯留する培地貯留部３４と、細胞を培養する細胞培養部３５と、不要となった培地Ａ’を貯留する廃培地貯留部３６とが上から順に設けられている。
【００３９】
前記廃培地貯留部３６は、前記容器本体３１の底部に形成されている。前記細胞培養部３５および前記培地貯留部３４は、それぞれ容器本体３１の底面３１ａに平行な平板状の底面部材３４ａ，３５ａと、該底面部材３４ａ，３５ａの周囲に立ち上がる側壁３１ａ，３１ｂ，３１ｃ，３１ｄ，３４ｂ，３５ｂとから底面部材３４ａ，３５ａ上に培地Ａを貯留可能に形成されている。
【００４０】
本実施形態では、容器本体３１が直方体状に形成されており、培地貯留部３４および細胞培養部３５の底面部材３４ａ，３５ａは、それぞれ長方形の平板状に形成されている。各底面部材３４ａ，３５ａの４辺から立ち上がる４つの側壁の内、３つ辺から立ち上がる３つの側壁は、それぞれ容器本体３１の側壁３１ａ，３１ｂ，３１ｃ，３１ｄにより構成されている。残りの１つの辺は容器本体３１の内面から離れた位置に配置され、その辺から立ち上がる側壁３４ｂ，３５ｂは、容器本体３１の内面に対して間隔をあけて平行に設けられている。また、それらの側壁３４ｂ，３５ｂと容器本体３１の内面との間には、底面部材３４ａ，３５ａの上下の空間を連通する連通孔３７，３８がそれぞれ設けられている。
【００４１】
また、前記側壁３４ｂ，３５ｂの上方には、底面部材３４ａ，３５ａ上の培地Ａを連通孔３７，３８へ流出させる流出口３９，４０がそれぞれ設けられている。これらの流出口３９，４０は、図６に示される容器本体３１の揺動方向に沿って反対方向に向かって開口している。したがって、容器本体３１を軸線３２回りに回転させて一方向に傾けると一方の底面部材３４ａ（３５ａ）上の培地Ａは流出口３９（４０）から遠ざけられて底面部材３４ａ（３５ａ）上に保持されるが、他方の底面部材３５ａ（３４ａ）上の培地Ａは流出口４０（３９）から溢れ、連通孔３８（３７）を介してより下方へ流出するようになっている。
【００４２】
このように構成された本実施形態に係る培養装置３０の作用について以下に説明する。
本実施形態に係る培養装置３０において細胞を培養するには、図６および図７に示されるように、揺動装置３３を作動させて、容器本体３１の底面および底面部材３４ａ，３５ａが水平に配される位置に停止させる。そして、細胞培養部３５内に適当な培地Ａと細胞とを投入し、所定の培養条件下に配することにより細胞が培養される。
【００４３】
次いで、本実施形態に係る培養装置３０において細胞培養部３５内の培地Ａを交換するには、まず、図８に示されるように、揺動装置３３を作動させて容器本体３１を一方向に傾ける。これにより、培地貯留部３４内の培地Ａは、流出口３９から遠ざけられて培地貯留部３４内に保持される。一方、細胞培養部３５内の培地Ａは、流出口４０から溢れ、連通孔３８を介してその下方に配されている廃培地貯留部３６へ流出する。
【００４４】
その後に、図９に示されるように、揺動装置３３を作動させて容器本体３１を上記とは逆方向に傾ける。これにより、今度は、培地貯留部３４内の培地Ａが、流出口３９から溢れ、連通孔３７を介してその下方に配されている細胞培養部３５内に流れ込む。一方、細胞培養部３５に残っていた培地Ａと、培地貯留部３４から流れ込んだ新たな培地Ａとは流出口４０から遠ざけられて細胞培養部３５内に保持される。
そして、図１０に示されるように、再度、揺動装置３３を作動させて容器本体３１を水平位置に戻すことにより、新たな培地Ａを貯留した細胞培養部３５内において、細胞の培養が継続され、廃培地Ａ’が廃培地貯留部３６に貯留されることになる。
【００４５】
このように、本実施形態に係る培養装置３０によれば、揺動装置３３を作動させるだけで、培地交換作業を容易に行うことができるという効果がある。また、密封可能な容器本体３１内において、細胞の培養および培地交換作業が行われるので、外部から細菌等が侵入することを防止でき、また、培地交換作業時に生ずる培地Ａの飛沫が周囲環境に飛散すること等を防止することができる。
【００４６】
なお、本実施形態においては、培地Ａの交換が１回だけ可能な培養装置３０について例示して説明したが、これに代えて、培地貯留部３４を複数段にわたって設け、隣接する培地貯留部３４の流出口３９を揺動方向に沿って逆方向に開口させておくことにより、複数回にわたる培地交換を密封された容器本体３１内において行うことにしてもよい。また、図５に示した容器本体３１の外部から、培地貯留部３４内にあらたな培地Ａを常に供給できるようにしておいてもよい。
また、廃培地Ａ’に含まれる浮遊細胞を回収する目的で、細胞培養部３５からの流出口４０あるいは連通孔３８に細胞を捕獲するフィルタ（図示略）を設けることにしてもよい。
【００４７】
また、揺動装置３３による揺動を１軸回りに揺動させることとしたが、これに代えて、相互に交差する２軸回りに揺動させることにしてもよい。この場合には、細胞培養部３５への供給対排出を１：３、２：２、３：１等任意の比率に設定することができる。また、供給するものとしては培地の他、成長因子やトリプシン等が考えられる。また排出するものとしては、廃培地の他、トリプシンによって剥がされた細胞が考えられる。
【００４８】
また、培養する細胞は、間葉系幹細胞のみならず、ＥＳ細胞、体性幹細胞、骨細胞、軟骨細胞や神経細胞等でもよい。
また、細胞培養部には、生体組織補填材として、例えば、βリン酸三カルシウム多孔体等のセラミックス多孔体のブロックや顆粒、あるいはコラーゲン、ポリ乳酸、多孔性のメタル等を配置しておいてもよい。
【００４９】
【発明の効果】
以上説明したように、この発明に係る培養装置および培地交換方法によれば、細胞培養部内の培地の液位を変動させて細胞培養部内から培地を排出させることにより、簡易に培地を交換することができるという効果を奏する。
【図面の簡単な説明】
【図１】この発明の第１の実施形態に係る培養装置を示す模式図である。
【図２】図１の培養装置の変形例を示す模式図である。
【図３】この発明の第２の実施形態に係る培養装置を示す模式図である。
【図４】この発明の第３の実施形態に係る培養装置を示す模式図である。
【図５】図４の培養装置における培地放出状態を示す模式図である。
【図６】この発明の第４の実施形態に係る培養装置を示す斜視図である。
【図７】図６の培養装置における培養状態を示す模式図である。
【図８】図６の培養装置における培地排出状態を示す模式図である。
【図９】図６の培養装置における培地供給状態を示す模式図である。
【図１０】図６の培養装置における培地交換後の培養状態を示す模式図である。
【符号の説明】
１，１０，２０，３０　培養装置
２，２３，３５　細胞培養部
２ａ　供給口
２ｂ，２１ａ，３９，４０　流出口
３，３４　培地貯留部
４，２４，３６　廃培地貯留部
６　流量調節手段
１２　昇降装置（昇降手段）
２１　側壁
２２　底面部材
２５　昇降装置（相対高さ変更手段）
３１　容器本体
３３　揺動手段

Claims

細胞を培養する細胞培養部と、培地を貯留する培地貯留部とを備え、
前記細胞培養部が、その上部に、該細胞培養部内に収容されている培地の上方から前記培地貯留部に貯留されている培地を供給可能な供給口と、細胞培養部内に収容されている培地の液位が所定の液位に達したときに、培地を細胞培養部外に流出させる流出口とを備える培養装置。
前記培地貯留部の液位が、前記細胞培養部の液位よりも高い位置に配置され、重力により培地を供給する請求項１に記載の培養装置。
前記培地貯留部から細胞培養部への培地の流量を調節する流量調節手段が設けられている請求項１または請求項２に記載の培養装置。
前記流量調節手段が、前記培地貯留部または前記細胞培養部を昇降させて、前記培地貯留部内の液位の前記細胞培養部内の液位に対する相対的な高さを調節する昇降手段である請求項３に記載の培養装置。
前記細胞培養部が、筒状の側壁と、該側壁内に密封状態に嵌合される底面部材と、前記側壁の上部に設けられた流出口と前記底面部材との相対的な高さを変更可能な相対高さ変更手段とを備える請求項１から請求項４のいずれかに記載の培養装置。
前記細胞培養部の下方に廃培地貯留部が設けられた容器本体と、前記細胞培養部において細胞の培養を行う中立位置から前記容器本体を傾斜させる揺動手段とを備える請求項１に記載の培養装置。
前記容器本体内の細胞培養部の上方に、培地貯留部が固定され、
該培地貯留部の上部に、該培地貯留部に収容されている培地の液位が所定の液位に達したときに、培地を細胞培養部に流出させる流出口が設けられ、
該培地貯留部の流出口と前記細胞培養部の流出口とが、前記容器本体の揺動方向に沿って逆方向に配置されている請求項６に記載の培養装置。
細胞を培養する細胞培養部に、培地を貯留する培地貯留部から培地を供給し、前記細胞培養部から培地を溢れさせることにより、細胞培養部内の培地を交換する培地交換方法。