JP2003535906A - アジュバントの組み合わせとしてのｑｓ−２１及びｉｌ−１２ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 有効量のＩＬ−１２及びＱＳ−２１を含んでなるアジュバント組成物が開示される。抗原の混合物並びに有効量のＩＬ−１２及びＱＳ−２１を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる免疫原性のワクチン及び製薬学的組成物もまた開示される。これらの組成物は、少なくとも一つの抗原に対する機能性の細胞性及び体液性免疫応答を引き出す。開示する組成物を使用する方法もまた開示される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 発明の背景 ＩＬ−１２は、主に樹状細胞、マクロファージ及び好中球により生産されそし
て１型免疫応答及び細胞性免疫の発生において必須の役割を果たすヘテロダイマ
ーサイトカインである（Ｂｒｕｎｄａ，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｂｉｏｌ．５
５：２８０−２８８（１９９４）；Ｓｃｏｔｔ ａｎｄ Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ
，Ｓｅｍｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：２８５−２９１（１９９７））。様々な動
物モデルにおけるいくつかの研究からの結果は、ｒＩＬ−１２が感染症及び転移
性疾患に対する予防もしくは治療ワクチンのアジュバントとして大きな見込みを
有するという認識に裏付けを与える（Ｒｏｄｏｌｆｏ ａｎｄ Ｃｏｌｏｍｂｏ
，Ｍｅｔｈｏｄｓ １９：１１４−１２０（１９９９）；Ｓｃｏｔｔ ａｎｄ
Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ，Ｓｅｍｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：２８５−２９１（１
９９７））。）。最近、ｒＩＬ−１２はＲＳＶの天然のＦタンパク質のアジュバ
ントとして使える可能性を有することが報告された（Ｈａｎｃｏｃｋ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｖｉｒａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：５７−７２（２０００））。ＢＡＬ
Ｂ／ｃマウスにおいて、ｒＩＬ−１２は、水酸化アルミニウムアジュバントに吸
着した場合に（Ｆ／ＡｌＯＨ）、より均衡のとれたそして２型表現型の方に偏向
していないＴ細胞応答を引き出すＦタンパク質の能力を高めることが結果から示
唆された。しかしながら、ｒＩＬ−１２との共調合（ｃｏ−ｆｏｒｍｕｌａｔｉ
ｏｎ）は、Ｆ／ＡｌＯＨにより引き出される全ての２型応答を完全には調節しな
かった。すなわち、Ｆ／ＡｌＯＨとｒＩＬ−１２でプライミングしたマウスの攻
撃の際に、ＩＬ−５依存性肺好酸球増加が依然として認められた。さらに、最近
のフェーズＩ臨床試験からのデータ（Ａｔｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．
Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．３：４０９−４１７（１９９７））はまた、高用量のｒ
ＩＬ−１２が日常的なワクチン接種における使用にはあまりに反応原性（ｒｅａ
ｃｔｏｇｅｎｉｃ）であり得ることも示唆する。

【０００２】 Ｆタンパク質に対する免疫応答の質及び量を向上する高度に精製されたサポニ
ンＱＳ−２１（Ｋｅｎｓｉｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４６：４
３１−４３７（１９９１））の能力が報告されている（Ｈａｎｃｏｃｋ ｅｔ
ａｌ．，Ｖａｃｃｉｎｅ １３：３９１−４００（１９９５）；Ｈａｎｃｏｃｋ
ｅｔ ａｌ．，Ｖｉｒｏｌ．７０：７７８３−７７９１（１９９６））。Ｆ／
ＡｌＯＨと比較して、Ｆ／ＱＳ−２１でのナイーブマウスのワクチン接種は、優
勢なＧ１からＧ２ａサブクラスへのＦタンパク質特異的Ｉｇ生産の変化と関連す
る増大した血清中和力価の発生をもたらした。攻撃の際に、肺におけるＭＨＣク
ラスＩ拘束ＣＤ８^＋Ｔ細胞及びタンパク質特異的抗体分泌細胞によりもたらされ
る抗原依存性キラー細胞活性の増加もあった。重要なことには、ＩＬ−５依存性
肺好酸球増加の有意な減少があった。しかしながら、臨床データは、この配合物
におけるＱＳ−２１が注入直後の局所急性毒性と関連したことを示唆している。

【０００３】 発明の要約 本発明は、有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２並びに任意の生理学的に許容し
うる賦形剤を含んでなるアジュバント組成物に関する。本発明はまた、組成物が
実質的な３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡを含んでならない、有効量
のＱＳ−２１及びＩＬ−１２並びに任意の生理学的に許容しうる賦形剤を含んで
なるアジュバント組成物にも関する。本発明はさらに、組成物が約１μｇ未満の
３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡ、より好ましくは約０．５μｇ未満
の３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡ、そしてさらにより好ましくは約
０．０００１μｇ（１Ｕｇ）未満の３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡ
を含んでなる、有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２並びに任意の生理学的に許容
しうる賦形剤を含んでなるアジュバント組成物に関する。好ましい態様として、
アジュバント組成物は３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡを含有しない
。本発明はまた、組成物が約０．０５μｇ未満のＩＬ−１２を含んでなる、有効
量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２並びに任意の生理学的に許容しうる賦形剤を含ん
でなるアジュバント組成物にも関する。一つの態様として、本発明は、有効量の
ＱＳ−２１及びＩＬ−１２並びに任意の生理学的に許容しうる賦形剤から本質的
になるアジュバント組成物に関する。

【０００４】 本発明の特定の態様として、ＱＳ−２１は脊椎動物に投与した場合に実質的な
局所毒性を引き起こさない量で存在する。本発明の別の態様として、ＩＬ−１２
は脊椎動物に投与した場合に実質的に反応原性でない量で存在する。本発明の好
ましい態様として、ＱＳ−２１は脊椎動物に投与した場合に実質的な局所毒性を
引き起こさない量で存在し、そしてＩＬ−１２は脊椎動物に投与した場合に実質
的に反応原性でない量で存在する。好ましくは、アジュバント組成物は有効量の
ＱＳ−２１及びＩＬ−１２を含んでなる。本明細書において用いる場合、ＱＳ−
２１及びＩＬ−１２の有効量は、組成物のアジュバント活性を維持しながら、同
様の免疫学的効果に必要とされるもう一方の非存在下での各成分の量に対して、
ＱＳ−２１もしくはＩＬ−１２のいずれかまたはＱＳ−２１及びＩＬ−１２の両
方の減少した量の使用を与える量である。本発明の好ましい態様として、ＩＬ−
１２は約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在する。別の好ましい態様として、
ＱＳ−２１は約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在する。好ましくは、ＱＳ−
２１及びＩＬ−１２の組み合わせは相乗アジュバント効果を引き起こす。本発明
の一つの態様として、ＩＬ−１２は組換えヒトＩＬ−１２である。

【０００５】 本発明はさらに、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＩＬ−１２及びＱＳ−
２１を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる免疫原性組成物に関する。本
発明はまた、アジュバント組成物が実質的な３−Ｏ−デアシル化モノホスホリル
リピドＡを含んでならない、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及
びＩＬ−１２を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる免疫原性組成物にも
関する。本発明はまた、アジュバント組成物が約１μｇ未満の３−Ｏ−デアシル
化モノホスホリルリピドＡ、より好ましくは約０．５μｇ未満の３−Ｏ−デアシ
ル化モノホスホリルリピドＡ、そしてさらにより好ましくは約０．０００１μｇ
（１Ｕｇ）未満の３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡを含んでなる、少
なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２を含んでなるアジ
ュバント組成物を含んでなる免疫原性組成物にも関する。好ましい態様として、
アジュバント組成物は３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡを含有しない
。本発明はまた、組成物が約０．０５μｇ未満のＩＬ−１２を含んでなる、少な
くとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２含んでなるアジュバ
ント組成物を含んでなる免疫原性組成物にも関する。一つの態様として、本発明
は、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２及び任意の
生理学的に許容しうる賦形剤から本質的になるアジュバント組成物を含んでなる
免疫原性組成物に関する。

【０００６】 免疫原性組成物の特定の態様として、ＱＳ−２１は脊椎動物に投与した場合に
実質的な局所毒性を引き起こさない量で存在する。本発明の別の態様として、Ｉ
Ｌ−１２は脊椎動物に投与した場合に実質的に反応原性でない量で存在する。本
発明の好ましい態様として、ＱＳ−２１は脊椎動物に投与した場合に実質的な局
所毒性を引き起こさない量で存在し、そしてＩＬ−１２は脊椎動物に投与した場
合に実質的に反応原性でない量で存在する。本発明の好ましい態様として、ＩＬ
−１２は約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在する。別の好ましい態様として
、ＱＳ−２１は約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在する。好ましくは、ＱＳ
−２１及びＩＬ−１２は相乗アジュバント効果を引き起こす。本発明の一つの態
様として、ＩＬ−１２は組換えヒトＩＬ−１２である。本発明の一つの態様とし
て、抗原はウイルス抗原である。好ましい態様として、抗原はＲＳウイルスＦタ
ンパク質もしくはその機能性部分である。別の態様として、抗原は細菌抗原であ
る。この態様として、好ましい抗原は型の決定できないヘモフィルス・インフル
エンザ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）からのＰ４タンパク
質もしくはその機能性部分である。

【０００７】 本発明はまた、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１
２を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる組成物の免疫学的に有効な量を
脊椎動物に投与することを含んでなり、それにより脊椎動物において抗原に対す
る免疫応答を引き出す、抗原に対する免疫応答を引き出す方法にも関する。本発
明はさらに、組成物が実質的な３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡを含
んでならない、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２
を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる組成物の免疫学的に有効な量を脊
椎動物に投与することを含んでなり、それにより脊椎動物において抗原に対する
免疫応答を引き出す、抗原に対する免疫応答を引き出す方法に関する。本発明は
また、組成物が約１μｇ未満の３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡ、好
ましくは約０．５μｇ未満の３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡ、そし
てより好ましくは約０．０００１μｇ（１Ｕｇ）未満の３−Ｏ−デアシル化モノ
ホスホリルリピドＡを含んでなる、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−
２１及びＩＬ−１２を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる組成物の免疫
学的に有効な量を脊椎動物に投与することを含んでなり、それにより脊椎動物に
おいて抗原に対する免疫応答を引き出す、抗原に対する免疫応答を引き出す方法
にも関する。本発明はさらに、組成物が約０．０５μｇ未満のＩＬ−１２を含ん
でなる、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２含んで
なるアジュバント組成物を含んでなる組成物の免疫学的に有効な量を脊椎動物に
投与することを含んでなり、それにより脊椎動物において抗原に対する免疫応答
を引き出す、抗原に対する免疫応答を引き出す方法に関する。一つの態様として
、本発明は、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２及
び任意の生理学的に許容しうる賦形剤から本質的になるアジュバント組成物を含
んでなる組成物の免疫学的に有効な量を脊椎動物に投与することを含んでなる、
抗原に対する免疫応答を引き出す方法に関する。

【０００８】 方法の特定の態様として、ＱＳ−２１は脊椎動物に投与した場合に実質的な局
所毒性を引き起こさない量で存在する。本発明の別の態様として、ＩＬ−１２は
脊椎動物に投与した場合に実質的に反応原性でない量で存在する。本発明の好ま
しい態様として、ＱＳ−２１は脊椎動物に投与した場合に実質的な局所毒性を引
き起こさない量で存在し、そしてＩＬ−１２は脊椎動物に投与した場合に実質的
に反応原性でない量で存在する。

【０００９】 本発明の好ましい態様として、ＩＬ−１２は約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量
で存在する。別の好ましい態様として、ＱＳ−２１は約０．０１ｎｇ〜約５０μ
ｇの量で存在する。好ましくは、ＱＳ−２１及びＩＬ−１２は相乗アジュバント
効果を引き起こす。本発明の一つの態様として、ＩＬ−１２は組換えヒトＩＬ−
１２である。本発明の一つの態様として、抗原はウイルス抗原である。好ましい
態様として、抗原はＲＳウイルスＦタンパク質もしくはその機能性部分である。
別の態様として、抗原は細菌抗原である。この態様として、好ましい抗原は型の
決定できないヘモフィルス・インフルエンザからのＰ４タンパク質もしくはその
機能性部分である。一つの態様として、免疫応答は体液性応答、細胞性応答、も
しくは体液性及び細胞性応答の両方よりなる群から選択される応答を含んでなる
。

【００１０】 発明の詳細な記述 ワクチン接種により誘導される防御免疫は、病原体を阻止するかもしくは除く
ために適切な免疫応答を引き出すワクチンの能力に依存している。病原体により
、これは細胞性及び／もしくは体液性免疫応答を必要とし得る。免疫応答におけ
るヘルパーＴ細胞の役割に関する現在のパラダイムは、Ｔ細胞をそれらが生産す
るサイトカインに基づいてサブセットに分類できること、及びこれらの細胞にお
いて認められる別個のサイトカインプロフィールがそれらの機能を決定すること
である。このＴ細胞モデルには２つの主要なサブセット：細胞性及び体液性免疫
応答の両方を増大するＩＬ−２及びインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）を生産
するＴｈ１細胞、並びに体液性免疫応答を増大するＩｌ−４、ＩＬ−５及びＩＬ
−１０を生産するＴｈ２細胞が含まれる（Ｍｏｓｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２６：２３４８（１９８６））。免疫する生物体におけるい
っそう強い免疫応答を得るため、特定のタイプの応答に免疫応答を向けるため、
そして抗原保有因子に対する宿主抵抗性を強化するためには、たいてい、抗原の
免疫原性効能を高めることが望ましい。抗原と共に投与する抗原の免疫原性を高
める物質はアジュバントとして知られている。

【００１１】 様々な動物モデルにおけるいくつかの研究からの結果は、組換えＩＬ−１２（
ｒＩＬ−１２）が感染症及び転移性疾患に対する予防もしくは治療ワクチンのア
ジュバントとして見込みを有するという認識に裏付けを与える（Ｒｏｄｏｌｆｏ
ａｎｄ Ｃｏｌｏｍｂｏ，Ｍｅｔｈｏｄｓ １９：１１４−１２０（１９９９
）；Ｓｃｏｔｔ ａｎｄ Ｔｒｉｎｃｈｉｅｒｉ，Ｓｅｍｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．１４６：４３１−４２７（１９９１））。ＲＳＶ Ｆタンパク質に対する免疫
応答の質及び量を向上するＩＬ−１２の能力が報告されている（Ｈａｎｃｏｃｋ
ｅｔ ａｌ．，Ｖａｃｃｉｎｅ １３：３９１−４００（１９９５）；Ｈａｎ
ｃｏｃｋ ｅｔ ａｌ．，J.Ｖｉｒｏｌ ７０：７７８３−７７９１（１９９６
））。

【００１２】 本明細書において記述する研究は、ＱＳ−２１がＩＬ−１２と相乗作用を有す
ることができそして全身的な体液性及び細胞性免疫応答の誘発を可能にすること
を示す。従って、ＩＬ−１２及びＱＳ−２１は一緒になって、抗原に対する機能
性の細胞性及び体液性免疫応答を引き出すための強力なアジュバントの組み合わ
せをなす。この相乗作用は、総アジュバント量の減少及び／もしくは単独で使用
する場合に望ましくない効果を有する可能性があるいずれかのアジュバント成分
の量の減少を与える。

【００１３】 アジュバント組成物は、有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２を含んでなる。本
明細書において用いる場合、ＱＳ−２１の有効量は、少なくとも一つの抗原に関
するアジュバント組成物のアジュバント活性（例えば、体液性応答の誘発、細胞
傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答の誘発、もしくは体液性応答及びＣＴＬ応答の
両方の誘発）を維持しながら組成物におけるＩＬ−１２の減少した量の使用を可
能にする量である。ＩＬ−１２の有効量は、少なくとも一つの抗原に関するアジ
ュバント組成物のアジュバント活性（例えば、体液性応答の誘発、ＣＴＬ応答の
誘発、もしくは体液性応答及びＣＴＬ応答の両方の誘発）を維持しながら組成物
におけるＱＳ−２１の減少した量の使用を可能にする量である。本明細書におい
て用いる場合、ＱＳ−２１及びＩｌ−１２の有効量は、成分のアジュバント活性
を維持しながら、少なくとも一つの抗原に関する同様の免疫学的効果に必要とさ
れるもう一方の非存在下での各成分の量に対して、ＱＳ−２１もしくはＩＬ−１
２のいずれかまたはＱＳ−２１及びＩＬ−１２の両方の減少した量の使用を与え
る量である。

【００１４】 有効量は相加的であるかもしくは相乗作用を有することができ；しかしながら
、好ましくは、有効量は相乗作用を有する。すなわち、ＩＬ−１２及びＱＳ−２
１の組み合わせの相加的もしくは相乗効果は、所望の免疫応答を引き出すために
最適であると考えられないかもしれないＩＬ−１２、ＱＳ−２１、もしくはＩＬ
−１２及びＱＳ−２１の両方の量の使用を与える。本明細書において用いる場合
、組み合わせたアジュバント（ＱＳ−２１及びＩＬ−１２）の相乗効果は、個々
に用いる場合に、特にアジュバント組成物において用いるレベルでのＩＬ−１２
のアジュバント効果及び特にアジュバント組成物において用いるレベルでのＱＳ
−２１のアジュバント効果の合計より大きい効果である。ＩＬ−１２、ＱＳ−２
１、もしくはＩＬ−１２及びＱＳ−２１の両方の減少した量の使用は、より高用
量のＩＬ−１２及びＱＳ−２１と関連する可能性がある毒性及び反応原性のよう
な不都合な作用を減少することにおいて有益であることができる。ＱＳ−２１及
びＩＬ−１２の有効量は、一方のアジュバントの特定した減少用量を利用しそし
て所望のアジュバント活性を維持しながら第二のアジュバントの増加する量の影
響をモニターする用量曲線実験により決定することができる。

【００１５】 好ましい態様として、ＩＬ−１２は、アジュバント組成物を投与する哺乳動物
において実質的に反応原性でない量で存在する。すなわち、ＩＬ−１２は、好ま
しくは、組成物を投与する哺乳動物において許容できない応答を引き起こさない
量で組成物において存在する。好ましい態様として、ＩＬ−１２は、実質的な熱
、悪心、嘔吐、口腔口内炎、肝機能不全検査、リンパ球減少症、貧血、好中球減
少症、高血糖症、血小板減少症及び／もしくは低アルブミン血症を引き起こさな
い量で存在する。一つの態様として、ＩＬ−１２は約０．０１ｎｇ〜約５０μｇ
の量で存在する。例えば、ＩＬ−１２は約０．０１ｎｇ〜約３５μｇ、もしくは
約０．０１ｎｇ〜約２０μｇ、もしくは約０．０１ｎｇ〜約１５μｇ、もしくは
約０．０１ｎｇ〜約１０μｇ、もしくは約０．０１ｎｇ〜約５μｇの量で存在す
ることができる。特定の態様として、ＩＬ−１２は約０．０１μｇ〜約１．０μ
ｇの量で存在する。一つの態様として、ＩＬ−１２は約０．０５μｇ未満の量で
存在する。特定の投与量は、処置する哺乳動物の年齢、体重及び医学的症状、並
びに投与の方法及び抗原により決まる。適当な用量は、本明細書において提供す
るガイダンスに従って当業者により容易に決定される。

【００１６】 ＩＬ−１２は、任意の適当な供給源から得ることができる。好ましくは、ＩＬ
−１２は組換えＩＬ−１２（ｒＩＬ−１２）であり、すなわち、それを組換えＤ
ＮＡ方法論により製造することができ；例えば、ヒトＩＬ−１２をコードする遺
伝子はクローン化されそして宿主系において発現されており、大量の純粋なヒト
ＩＬ−１２の製造を可能にする。本発明において同様に有用であるのは、ＩＬ−
１２の生物学的に活性のあるサブユニットもしくはフラグメントである。さらに
、ある種のＴリンパ球系統は高レベルのＩＬ−１２を生産し、従って、容易に入
手可能な供給源を提供する。組換えヒト及びマウスＩＬ−１２の商業的製造業者
には、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｉｎｃ．（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ
，ＭＡ）が包まれる（公開国際特許出願ＷＯ ９０／０５１４７も参照）。

【００１７】 ＱＳ−２１は、キラヤ・サポナリア（Ｑｕｉｌｌａｊａ ｓａｐｏｎａｒｉａ
）粗抽出物から精製されるサポニンであり、そしてＫｅｎｓｉｌ及びＭａｒｃｉ
ａｎｉにより記述されている（米国特許第５，０５７，５４０号）。本発明の好
ましい態様として、ＱＳ−２１は、組成物を投与する哺乳動物において実質的な
局所毒性を引き起こさない量で組成物において存在する。特定の態様として、Ｑ
Ｓ−２１は約５０μｇ未満、そしてより好ましくは約２０μg未満の量で組成物
において存在する。好ましい態様として、ＱＳ−２１は１０μg未満、より好ま
しくは約４μｇ未満、そしてさらにより好ましくは約１μｇ未満の量で組成物に
おいて存在する。例えば、ＱＳ−２１は約０．０１ｎｇ〜約３５μｇ、もしくは
約０．０１ｎｇ〜約２０μｇ、もしくは約０．０１ｎｇ〜約１５μｇ、もしくは
約０．０１ｎｇ〜約１０μｇ、もしくは約０．０１ｎｇ〜約５μｇの量で存在す
ることができる。一つの態様として、ＱＳ−２１は約０．８μｇ以下の量で存在
する。

【００１８】 本発明はさらに、任意の生理学的もしくは製薬学的に許容しうる賦形剤と一緒
に、本明細書において記述するアジュバント組成物及び一つもしくはそれ以上の
抗原を含んでなる免疫原性のワクチンもしくは製薬学的組成物に関する。本明細
書において用いる場合、免疫原性組成物は、組成物を投与する哺乳動物において
免疫応答を引き出す組成物である。引き出される免疫応答は、体液性もしくは細
胞性であることができる。本明細書において用いる場合、ワクチン組成物は、組
成物を投与する哺乳動物において免疫応答を引き出しそして組成物の抗原もしく
は関連生物体での後の攻撃もしくは感染から哺乳動物を防御する組成物である。

【００１９】 本明細書において用いる場合、ＲＳＶに対する防御のような「防御」は、組成
物中の抗原もしくは関連生物体、例えばＲＳＶにより引き起こされる疾患の症状
発現に対して（部分的もしくは完全に）防御する脊椎動物（例えば哺乳動物）に
おける免疫応答の発生をさす。ＲＳＶウイルスにより引き起こされる疾患に対し
て防御される脊椎動物は、ＲＳＶに感染する可能性があるが、免疫処置なしに起
こるより低い程度であり；ＲＳＶに感染する可能性があるが、疾患症状を示さず
；もしくはＲＳＶに感染する可能性があるが、免疫処置なしに起こるより少ない
疾患症状を示す。あるいはまた、ＲＳＶにより引き起こされる疾患に対して防御
される脊椎動物は、ウイルスにさらされるにもかかわらず、ＲＳＶウイルスに全
く感染しなくなる可能性がある。

【００２０】 組成物の抗原成分は、医学的もしくは獣医学的に重要な実質的に任意の抗原、
抗原決定基もしくはハプテン、及び特に免疫原性（例えばＣＴＬ応答）の増加が
所望される抗原から選択することができる。例えば、抗原は細菌、ウイルス、リ
ケッチア、真菌、寄生虫もしくはそれらの生成物、または細菌、ウイルス、リケ
ッチア、真菌もしくは寄生虫の抽出物から得られる精製されたもしくは部分的に
精製された抗原の形態であることができ、あるいは抗原は花粉、塵埃、鱗屑、も
しくはこれらの抽出物のようなアレルゲンであることができる。抗原はまた、有
毒昆虫もしくは爬虫類から得られる毒もしくは毒液の形態であることもできる。
好ましくは、抗原は、その有毒なもしくは有害な性質が減少されるかもしくはな
くされておりそして本発明の組成物において適当な宿主に導入した場合に抗原の
調製に使用した特定の微生物、微生物の抽出物もしくは生成物に対する抗体をそ
の中で生産することにより能動免疫を誘導するかまたはアレルゲンの場合には特
定のアレルゲンによるアレルギーの症状を軽減することにおいて役立つ形態であ
る。抗原は単独でもしくは組み合わせて用いることができ；例えば、複数の細菌
抗原、複数のウイルス抗原、複数のマイコプラズマ抗原、複数のリケッチア抗原
、複数の真菌抗原、複数の寄生虫抗原、複数の細菌もしくはウイルストキソイド
、複数のアレルゲン、または前述の生成物の任意の組み合わせを本発明のアジュ
バント組成物と組み合わせることができる。

【００２１】 本発明のアジュバントの組み合わせは、ヒト及び非ヒト脊椎動物に感染するウ
イルス、細菌、真菌もしくは寄生性微生物からのものを包含するがこれらに限定
されるものではない多種多様な病原性微生物からの、または癌細胞もしくは腫瘍
細胞からの多種多様な抗原を含有する免疫原性組成物における使用のために適し
ている。抗原は、タンパク質から得られるペプチドもしくはポリペプチド、並び
に下記のもの：糖類、タンパク質、ポリ−もしくはオリゴヌクレオチド、癌もし
くは腫瘍細胞、または他の高分子成分のいずれかのフラグメントを含んでなるこ
とができる。ある場合には、一つより多くの抗原が免疫原性組成物に含まれる。

【００２２】 本発明のアジュバントの組み合わせを含有する望ましいウイルスワクチンには
、限定されず、ヒト免疫不全ウイルス、ＲＳウイルス、パラインフルエンザウイ
ルス１−３型、インフルエンザウイルス、単純ヘルペスウイルス、ヒトサイトメ
ガロウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒト
パピローマウイルス、ポリオウイルス、ロタウイルス、カリシウイルス、麻疹ウ
イルス、流行性耳下腺炎ウイルス、風疹ウイルス、アデノウイルス、狂犬病ウイ
ルス、イヌジステンバーウイルス、コロナウイルス、パルボウイルス、伝染性鼻
気管炎ウイルス、ネコ白血病ウイルス、ネコ伝染性腹膜炎ウイルス、鳥類伝染性
ファブリーキウス嚢病ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、マレク病ウイルス
、ブタ繁殖呼吸障害症候群ウイルス、ウマ動脈炎ウイルス及び様々な脳炎ウイル
スにより引き起こされる疾患の予防及び／もしくは処置に関するものが包含され
る。

【００２３】 本発明のアジュバントの組み合わせを含有する望ましい細菌ワクチンには、限
定されず、ヘモフィルス・インフルエンザ（型を決定できる及び型を決定できな
い両方）、ヘモフィルス・ソムナス（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｓｏｍｎｕｓ）
、モラクセラ・カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）
、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕ
ｍｏｎｉａｅ）、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕ
ｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコッカス・アガラクティエ（Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、ストレプトコッカス・ファエカリス
（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、ヘリコバクター・ピロリ
（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）、ナイセリア・メニンジティディ
ス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、ナイセリア・ゴノレエ
（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、クラミジア・トラコマティ
ス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、クラミジア・ニューモニ
エ（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クラミジア・シッタシ（Ｃ
ｈｌａｍｙｄｉａ ｐｓｉｔｔａｃｉ）、ボルデテラ・パターシス（Ｂｏｒｄｅ
ｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、サルモネラ・チフィ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌ
ａ ｔｙｐｈｉ）、サルモネラ・チフィムリウム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙ
ｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、サルモネラ・コレレスイス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｃ
ｈｏｌｅｒａｅｓｕｉｓ）、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃ
ｏｌｉ）、シゲラ（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）、ビブリオ・コレレ（Ｖｉｂｒｉｏ ｃ
ｈｏｌｅｒａｅ）、コリネバクテリウム・ジフテリエ（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、マイコバクテリウム・ツベルクローシス
（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、マイコバクテリ
ウム・アビウム（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｖｉｕｍ）−マイコバクテリ
ウム・イントラセルラー（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕ
ｌａｒｅ）複合体、プロテウス・ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｍｉｒａｂｉｌ
ｉｓ）、プロテウス・ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ）、スタ
ヒロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、
クロストリジウム・テタニ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ）、レプト
スピラ・インテロガンス（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓ）、
ボレリア・ブルグドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、
パスツレラ・ヘモリティカ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃａ
）、パスツレラ・マルトシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｍｕｌｔｏｃｉｄａ）
、アクチノバシラス・プルロニューモニエ（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐ
ｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）及びマイコプラズマ・ガリセプチカム（Ｍｙ
ｃｏｐｌａｓｍａ ｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ）により引き起こされる疾患の
予防及び／もしくは処置に関するものが包含される。一つの態様として、抗原は
、型を決定できないヘモフィルス・インフルエンザのＰ４タンパク質もしくはそ
の機能性部分である。

【００２４】 本発明のアジュバントの組み合わせを含有する真菌病原体に対する望ましいワ
クチンには、限定されず、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｉｓ）、ブラス
トミセス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ）、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）、コクシジ
オイデス（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｄｅｓ）、クリプトコックス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ）及びヒストプラスマ（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ）により引き起こされる
疾患の予防及び／もしくは処置に関するものが包含される。

【００２５】 本発明のアジュバントの組み合わせを含有する寄生虫に対する望ましいワクチ
ンには、限定されず、リーシュマニア・メジャー（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ ｍａ
ｊｏｒ）、アスカリス（Ａｓｃａｒｉｓ）、トリキュリス（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ
）、ジアルジア（Ｇｉａｒｄｉａ）、シストソーマ（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ）
、クリプトスポリジウム（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、トリコモナス（
Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ）、トキソプラスマ・ゴンジイ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ
ｇｏｎｄｉｉ）及びニューモシスティス・カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ
ｃａｒｉｎｉｉ）により引き起こされる疾患の予防及び／もしくは処置に関す
るものが包含される。

【００２６】 本発明のアジュバントの組み合わせを含有する、脊椎動物宿主における治療も
しくは予防抗癌効果を引き出すための望ましいワクチンには、限定されず、前立
腺特異的抗原、癌胎児性抗原、ＭＵＣ−１、Ｈｅｒ２、ＣＡ−１２５及びＭＡＧ
Ｅ−３を包含する癌抗原もしくは腫瘍関連抗原を利用するものが包含される。

【００２７】 本発明のアジュバントの組み合わせを含有する、脊椎動物宿主におけるアレル
ゲンに対する応答を和らげるための望ましいワクチンには、アレルゲンもしくは
そのフラグメントを含有するものが包含される。そのようなアレルゲンの例は、
引用することにより本明細書に組み込まれる米国特許５，８３０，８７７及び公
開国際特許出願第ＷＯ ９９／５１２５９号に記述されており、そして花粉、昆
虫毒、動物鱗屑、真菌胞子及び（ペニシリンのような）薬剤を包含する。ワクチ
ンは、アレルギー反応の既知の原因であるＩｇＥ抗体の生産を妨げる。

【００２８】 本発明のアジュバントの組み合わせを含有する、脊椎動物宿主におけるアミロ
イド沈着を特徴とする疾患を予防もしくは治療するための望ましいワクチンには
、アミロイドペプチドタンパク質（ＡＰＰ）の一部を含有するものが包含される
。この疾患は、アルツハイマー病、アミロイドーシスもしくはアミロイド性疾患
（ａｍｙｌｏｉｄｏｇｅｎｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ）と様々に呼ばれる。β−アミ
ロイドペプチド（Ａβペプチドとも呼ばれる）はＡＰＰの４２アミノ酸フラグメ
ントであり、これはβ及びγセクレターゼ酵素によるＡＰＰのプロセシングによ
り生成され、そして以下の配列を有する： Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His Gln Lys Leu Val
Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys Gly Ala Ile Ile Gly Leu Met Val
Gly Gly Val Val Ile Ala（配列番号：１） ある患者において、アミロイド沈着は凝集したＡβペプチドの形態をとる。意
外にも、単離されたＡβペプチドの投与は、脊椎動物宿主におけるアミロイド沈
着のＡβペプチド成分に対する免疫応答を誘導することが現在見出されている（
公開国際特許出願第ＷＯ ９９／２７９４４号）。従って、本発明のワクチンは
、本発明のアジュバントの組み合わせに加えてＡβペプチド、並びにＡβペプチ
ドのフラグメント及びＡβペプチドもしくはそのフラグメントに対する抗体を含
む。Ａβペプチドの一つのそのようなフラグメントは、以下の配列を有する２８
アミノ酸ペプチドである（米国特許４，６６６，８２９）： Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His Gln Lys Leu Val
Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys（配列番号：２） 好ましい態様として、抗原はＲＳウイルス抗原である。パラミクソウイルス科
（ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）の負鎖ウイルスであるＲＳウイルス（ＲＳ
Ｖ）は、特に幼児及び乳児における下側肺路疾患（ｌｏｗｅｒ ｐｕｌｍｏｎａ
ｒｙ ｔｒａｃｔ ｄｉｓｅａｓｅ）の主要な原因である。ＲＳＶは２種の顕著
な外包膜糖タンパク質、融合（Ｆ）タンパク質及び付着（Ｇ）タンパク質を含有
し、これらはウイルスの感染性にとって重要であり、従って、ＲＳＶに対するサ
ブユニットワクチンの設計のための合理的な標的として使える。本発明はＲＳＶ
Ｆタンパク質抗原に関して本明細書において例示するが、本発明は本発明の組
成物におけるＲＳＶ Ｆタンパク質抗原の使用に限定されないと理解される。

【００２９】 ＲＳＶ Ｆタンパク質の野生型（天然の）ヌクレオチド及びアミノ酸配列は当
該技術分野において既知である（Ｃｏｌｌｉｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ（ＵＳＡ）８１：７６８３−７６８７（１９８４）；
米国特許第５，６３９，８５３号；米国特許第５，７２３，１３０号）。本発明
における使用のために適当なＲＳＶタンパク質には、完全なＲＳＶ Ｆタンパク
質並びにＲＳＶ Ｆタンパク質の機能性部分が包含される。例えば、機能性部分
は、哺乳動物に投与した場合に抗体応答を誘導する能力を保持するタンパク質の
部分であることができる。そのような免疫原性部分の例は、ＲＳＶ Ｆタンパク
質のアミノ酸位置２８３−３１５、２８９−３１５及び２９４−２９９を含んで
なるポリペプチドである。これらの領域は、中和及び抗融合抗体の両方を引き出
すＲＳＶ Ｆタンパク質のエピトープを含む（Ｐａｒａｄｉｓｏ ｅｔ ａｌ．
，米国特許５，６３９，８５３）。あるいはまた、その天然のダイマー形態（１
４０ｋＤ）のＲＳＶ Ｆタンパク質を用いることができる（Ｐａｒａｄｉｓｏ
ｅｔ ａｌ．，米国特許５，２２３，２５４）。

【００３０】 本発明のＦタンパク質及びポリペプチドは、部分的もしくは実質的に精製する
（例えば均質に精製する）ことができ、そして／または他のタンパク質を実質的
に含まない。あるいはまた、本発明のＦタンパク質もしくはポリペプチドは、当
該技術分野において既知である方法を用いて化学的に合成するかもしくは組換え
的に製造することができる（例えば、Ｂｒｏａｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐｅｒ
ｉｍｅｎｔａｌ Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓ
ｉｏｎ，ｅｄ．Ｍ．Ｉｎｏｕｙｅ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８３）
ｐ．８３；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ Ｅｄ．，ｅｄ．Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（Ｃｏ
ｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９
８９）１６及び１７章を参照）。本発明のタンパク質及びポリペプチドは、様々
な方法により組換え体細胞培養物から単離するかもしくは（例えば均質に）精製
することができる。これらには、陰イオンもしくは陽イオン交換クロマトグラフ
ィー、エタノール沈殿、アフィニティークロマトグラフィー及び高速液体クロマ
トグラフィー（ＨＰＬＣ）が包含されるがこれらに限定されるものではない。使
用する特定の方法は、ポリペプチドの性質及び宿主細胞の選択により決まり；適
切な方法は当業者に容易に明らかである。

【００３１】 適当なＲＳＶ Ｆタンパク質にはまた、１個もしくはそれ以上のアミノ酸改変
を有するＲＳＶタンパク質もしくはその一部も包含される。本明細書において用
いる場合、「改変」及びその誘導体はアミノ酸における改変を意味するものとす
る。改変には、１個もしくはそれ以上のアミノ酸の挿入、欠失及び／もしくは置
換が包含される。例えば、改変（１個もしくは複数）は、好ましくは、保存的ア
ミノ酸改変であることができ、もしくは天然のＦタンパク質の３次元配置を保持
することができる。さらに、Ｆタンパク質の機能にとって、特に免疫原性にとっ
て必須であるアミノ酸を当該技術分野において既知である方法により同定するこ
とができる。特に有用な方法には、保存されるアミノ酸の同定、部位特異的突然
変異誘発及びアラニン走査突然変異誘発（例えば、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎ
ｄ Ｗｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１−１０８５（１９８９））
、結晶化並びに核磁気共鳴が包含される。これらの方法により製造する改変され
たタンパク質もしくはポリペプチドは、免疫原性及び抗原性を包含する特定の生
物学的活性について試験することができる。

【００３２】 特に、適切なアミノ酸改変は、疎水性、塩基性もしくは酸性特性、電荷、極性
、サイズ、官能基（例えば−ＳＨもしくはグリコシル化部位）の有無、及び芳香
族特性を包含するいくつかの規準に基づいて行うことができる。上記の特性に基
づく同様のグループへの様々なアミノ酸の割り当ては、当業者に容易に明らかで
あり；さらに適切なアミノ酸改変はまた、Ｂｏｗｉｅ ｅｔ ａｌ．（Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ ２４７：１３０６−１３１０（１９９０））に見出すこともできる。

【００３３】 本発明のタンパク質抗原（例えばＦタンパク質もしくはポリペプチド）はまた
、追加成分に融合したタンパク質アミノ酸配列の全部もしくは一部を含んでなる
融合タンパク質であることもできる。放射性同位体及び抗原性標識のような追加
成分は、ポリペプチドの単離及び精製を助けるためもしくはポリペプチドの半減
期を延ばすために選択することができる。一つの態様として、タンパク質抗原は
、ＲＳＶ Ｇタンパク質アミノ酸配列（Ｗｅｒｔｚ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９２：４０７５−４０７９（１９８５）
；Ｓａｔａｋｅ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１３（２１）
：７７９５−７８１０（１９８５））の全部もしくは一部に融合したＦタンパク
質アミノ酸配列の全部もしくは一部を含んでなる融合タンパク質であるＦタンパ
ク質もしくはポリペプチドである。

【００３４】 本発明はまた、任意の生理学的に許容しうる賦形剤と一緒に、抗原（例えばＲ
ＳＶ Ｆタンパク質もしくはポリペプチド）をコードする核酸分子並びに有効量
のＩＬ−１２及びＱＳ−２１を含んでなる組成物にも関する。そのような組成物
は、本明細書において免疫原性核酸組成物もしくは免疫原性ＤＮＡ組成物と称し
、そして脊椎動物の遺伝子免疫処置のために有用である。「遺伝子免疫処置」と
いう用語は、本明細書において用いる場合、病原性因子、特にＲＳＶに対して向
けられる核酸ワクチンでの脊椎動物、特に哺乳動物の接種をさし、免疫応答の誘
発及び好ましくはＲＳＶに対する脊椎動物の防御をもたらす。「免疫原性核酸組
成物」もしくは「免疫原性ＤＮＡ組成物」は、本明細書において用いる場合、ポ
リペプチド抗原、特にＲＳＶ Ｆタンパク質もしくはポリペプチドをコードする
核酸分子を含んでなる核酸構築物である。核酸構築物はまた、転写プロモーター
要素、エンハンサー要素、スプライシングシグナル、終結及びポリアデニル化シ
グナル、並びに他の核酸配列を含むこともできる。免疫原性核酸組成物は、本明
細書において記述するような有効量のＩＬ−１２及びＱＳ−２１と投与する。

【００３５】 免疫原性核酸組成物は、標準的な方法により製造することができる。例えば、
免疫原性核酸組成物を構築するために、既知の方法を用いて、ＲＳＶ Ｆタンパ
ク質もしくはポリペプチドをコードする核酸（例えばＤＮＡ）を発現ベクターに
挿入することができる（Ｍａｎｉａｔｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ ｅｄｉ
ｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐ
ｒｅｓｓ（１９８９）を参照）。標準的な方法を用いて、個々の脊椎動物に免疫
原性核酸組成物を接種する（すなわち、免疫原性核酸組成物を投与する）。脊椎
動物には、通常の無毒の生理学的に許容しうる担体もしくは賦形剤を含有する投
薬配合物において皮下に、静脈内に、腹腔内に、皮内に、筋肉内に、局所的に、
経口的に、直腸に、鼻に、頬に、膣に、吸入スプレーにより、もしくは移植レザ
バーにより接種することができる。あるいはまた、粒子加速装置（「遺伝子銃」
）の使用により脊椎動物に免疫原性核酸組成物を接種する。それを投与する形態
（例えば、カプセル剤、錠剤、液剤、乳剤）は、一つにはそれを投与する経路に
より決まる。例えば、粘膜投与には、点鼻薬、吸入剤もしくは座薬を用いること
ができる。特定の態様として、核酸構築物をトランスフェクション促進因子と共
投与する。好ましい態様として、トランスフェクション促進因子はブピビカイン
（ｂｕｐｉｖｉｃａｉｎｅ）である（米国特許５，５９３，９７２）。

【００３６】 免疫原性組成物の一つもしくは複数の抗原成分の量は、一つには抗原の本質、
並びに宿主の年齢、体重及び医学的症状、並びに投与の方法により変わる。適当
な用量はまた、当業者により容易に決定される。免疫原性組成物の用量の数及び
投与量処方計画もまた当業者により容易に決定される。ある場合において、アジ
ュバントの組み合わせのアジュバント特性は、必要とされる用量の数もしくは投
与量処方計画の時間クールを減らすことができる。

【００３７】 免疫原性組成物は、アジュバント組成物のアジュバント量を用いる。「アジュ
バント量」という用語は、本明細書において用いる場合、体液性応答、ＣＴＬ応
答、もしくは体液性及びＣＴＬ応答の両方を引き出すために十分なアジュバント
組成物の量（もしくはＱＳ−２１もしくはＩＬ−１２以外のアジュバント（１つ
もしくは複数）の量）をさす。好ましくは、アジュバント量は、免疫原性組成物
の１つもしくはそれ以上の抗原に関する免疫応答を高めるかもしくは改変するた
めに十分である。好ましくは、３つもしくはそれ以上のアジュバントを用いる場
合、アジュバント量は、免疫原性組成物の２つもしくはそれ以上の抗原に関する
免疫応答を高めるかもしくは改変するために十分である。

【００３８】 本発明の組成物は、植物油もしくはその乳濁液、水酸化アルミニウム、リン酸
アルミニウム、界面活性物質、例えば、ヘキサデシルアミン、オクタデシルアミ
ノ酸エステル、オクタデシルアミン、リゾレシチン、ジメチル−ジオクタデシル
アンモニウムブロミド、Ｎ，Ｎ−ジオクタデシル−Ｎ’−Ｎビス（２−ヒドロキ
シエチル−プロパンジアミン）、メトキシヘキサデシルグリセロール及びプルロ
ニックポリオール；ポリアミン、例えば、ピラン、硫酸デキストラン、ポリＩＣ
、アクルボポル（ａｃｒｂｏｐｏｌ）；ペプチド、例えば、ムラミルジペプチド
、ジメチルグリシン、タフトシン；免疫刺激複合体；油乳濁液；ＭＰＬ^Ｒ（３−
Ｏ−デアシル化モノホルホリルリピドＡ；ＲＩＢＩ ＩｍｍｕｎｏＣｈｅｍ Ｒ
ｅｓｅａｒｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ｍｏｎｔａｎａ）のようなリポ
多糖類；並びにミネラルゲルのような追加のアジュバントを場合により含んでな
ることができる。本発明の抗原はまた、リポソーム、蝸牛殻（ｃｏｃｈｌｅａｔ
ｅｓ）、ポリ−ラクチド、ポリ−グリコリド及びポリ−ラクチド−コ−グリシド
のような生分解性ポリマー、もしくはＩＳＣＯＭＳ（免疫刺激複合体）に導入す
ることもでき、そして補足有効成分を用いることもできる。好ましい態様として
、本発明のアジュバント、免疫原性ワクチンもしくは製薬学的組成物は実質的な
ＭＰＬ^Ｒを含んでならない。本明細書において用いる場合、「実質的なＭＰＬ^Ｒ 」は、組成物に追加のアジュバント性（ａｄｊｕｖａｎｔｉｃｉｔｙ）を与える
ＭＰＬの量を意味するものとする。あるいはまた、アジュバント、免疫原性ワク
チンもしくは製薬学的組成物は、約１μｇ未満、好ましくは約０．５μｇ未満、
そしてより好ましくは約１Ｕｇ未満の量のＭＰＬ^Ｒを含んでなることができる。
本発明の組成物はまた、細菌毒素及びそれらの弱毒化誘導体と組み合わせて投与
することもできる。本発明の組成物はまた、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−１５、
ＩＦＮ−γ及びＧＭ−ＣＳＦを包含するがこれらに限定されるものではない他の
リンホカインと組み合わせて投与することもできる。

【００３９】 本発明のＲＳＶ Ｆタンパク質は、免疫応答を調節するかもしくは高めるため
に別の分子に連結することができる。適当な担体タンパク質には、哺乳動物への
投与のために安全でありそして担体として免疫学的に有効である細菌毒素が包含
される。例には、百日咳、ジフテリア及び破傷風トキソイド、並びにジフテリア
トキソイドの無毒の変異体ＣＲＭ_１９７のような無毒の突然変異体タンパク質（
交差反応物質（ＣＲＭ））が包含される。少なくとも一つのＴ細胞エピトープを
含有する天然の毒素もしくはトキソイドのフラグメントもまた、抗原の担体とし
て有用である。抗原及び担体分子のコンジュゲートを製造する方法は当該技術分
野において周知であり、そして例えばＤｉｃｋ ａｎｄ Ｂｕｒｒｅｔ，Ｃｏｎ
ｔｒｉｂ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：４８−１１４（Ｃｒｕ
ｓｅ ＪＭ，Ｌｅｗｉｓ ＲＥ Ｊｒ，ｅｄｓ；Ｂａｓｅｄ，Ｋｒａｇｅｒ（１
９８９）及び米国特許第５，３６０，８９７号（Ａｎｄｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ
．）に見出すことができる。本発明の抗原はまた、明礬上に吸着することもでき
る。

【００４０】 本発明の組成物は、任意の生理学的もしくは製薬学的に許容しうる賦形剤もし
くは媒質を含んでなることができる。特定の生理学的媒質には、水、緩衝食塩水
、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレ
ングリコール）及びデキストロース溶液を包含することができるがこれらに限定
されるものではない。選択した媒質における有効成分（１つもしくは複数）の最
適濃度は、周知の方法に従って実験によって決定することができ、そして所望す
る最終的な製薬学的配合物により決まる。組成物はまた、注入可能な液体溶液も
しくは懸濁液を調製するために常法で免疫学的に許容しうる希釈剤もしくは担体
と混合することもできる。処置する疾患もしくは症状により、経口、食事、局所
、膣、直腸、皮内、経皮（例えば、引用することにより本明細書に組み込まれる
公開国際出願ＷＯ ９８／２０７３４を参照）、非経口（例えば、静脈内、動脈
内、筋肉内、皮下注入）、吸入（例えば、気管支内、眼内、鼻内もしくは経口吸
入、点鼻薬）を包含するがこれらに限定されるものではない様々な投与経路が可
能である。他の適当な投与方法には、再充電可能なもしくは生分解性の装置及び
持効性ポリマー装置を包含することもできる。本発明の製薬学的組成物はまた、
他の因子との組み合わせ治療の一部として投与することもできる。

【００４１】 本発明はさらに、抗原の混合物並びに有効量のＩＬ−１２及びＱＳ−２１を含
んでなりそして生理学的に許容しうる賦形剤を場合により含んでなる免疫原性組
成物の免疫学的に有効な量を脊椎動物、例えば哺乳動物宿主に投与することを含
んでなる、ＲＳＶ抗原のような抗原に対する免疫応答を引き出す方法に関する。
本発明はまた、抗原の混合物並びに有効量のＩＬ−１２及びＱＳ−２１を含んで
なり、そして生理学的に許容しうる賦形剤を場合により含んでなる免疫原性組成
物の免疫学的に有効な量を脊椎動物に投与することを含んでなる、脊椎動物にお
ける体液性もしくはＣＴＬ由来の免疫応答を引き出す方法にも関する。本明細書
において用いる場合、免疫原性組成物の「免疫学的に有効な」用量は、免疫応答
を引き出すために適当な用量である。特定の投与量は、年齢、体重により決まり
、組成物は、生理食塩水もしくはエタノール、グリセロールもしくはプロピレン
グリコールのようなポリオールのような製薬学的もしくは生理学的に許容しうる
賦形剤において場合により投与することができる。本明細書において記述するよ
うな免疫処置のために適当な脊椎動物には、霊長類（例えばヒト）、ウシ、ヒツ
ジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、モルモット、ラット、マウス、または他
のウシ、ヒツジ、ウマ、イヌ、ネコ、げっ歯類もしくはネズミ種が包含されるが
これらに限定されるものではない。

【００４２】 本発明を以下の非限定的な実施例によってさらに記述する。本明細書において
引用する全ての参考文献、特許及び特許出願の全内容は、引用することにより本
明細書に組み込まれる。

【００４３】 実施例 以下の実施例は、他に詳細に記述する場合を除いて、当業者に周知でありそし
て日常的である標準的な技術を用いて実施する。以下の実施例は例示目的のため
に示し、そして本発明の範囲を限定すると決して解釈されるべきではない。

【００４４】 実施例１ ＱＳ−２１及び組換え（ｒ）ＩＬ−１２と共調合したＲＳＶ Ｆタンパク質でワ
クチン接種したＢＡＬＢ／ｃマウスの全身的体液性免疫応答 これらの実験の目的は、ＱＳ−２１及び組換えＩＬ−１２と調合したＲＳＶ
Ｆタンパク質での免疫が、いずれかのアジュバント単独での免疫後に得られるも
のより大きい機能性血清抗体力価を引き出すことができるかどうかを決定するこ
とであった。実験において、天然のＦタンパク質は、ＲＳＶのＡ２株に感染した
Ｖｅｒｏ細胞（ＡＴＣＣ Ｎｏ．ＣＣＬ８１）からイオン交換クロマトグラフィ
ーにより精製した。タンパク質は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及び抗原捕獲ＥＬＩＳＡに
より概算した場合に９５％より大きく純粋であった。ＱＳ−２１及びｒＩＬ−１
２は、それぞれ、Ａｑｕｉｌａ ＢｉｏＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎ
ｃ．（Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒ，ＭＡ）及びＧｅｎｅｔｉｃｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ
（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）から入手した。ナイーブメスＢＡＬＢ／ｃマウス
（８−１０週の年齢）は、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉ
ｅｓ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＥ）から入手し、そして天然のＦタンパク質（
３μｇ／用量）で０及び４週に筋肉内にワクチン接種した。ワクチンは、Ｆタン
パク質を減少する用量（１．０、０．１、０．０１μｇ）のｒＩＬ−１２と調製
し（Ｆ／ｒＩＬ−１２）そして次善用量のＱＳ−２１（０．８μｇ）と共調合す
るように調製した。コントロールマウスにはＱＳ−２１なしのＦ／ｒＩＬ−１２
、２０もしくは０．８μｇのＱＳ−２１と混合したＦタンパク質、もしくはＰＢ
ＳのみにおけるＦタンパク質を注入した。追加のコントロールマウスには、ＲＳ
ＶのＡ２株での実験感染（〜２Ｘ１０^６ｐｆｕ）後にワクチン接種した。鼻内感
染（０．０５ｍｌ）は、注入可能な麻酔（ケタミン（６０ｍｇ／ｋｇ）及びキシ
ラジン（２−５ｍｇ／ｋｇ），Ｔｈｅ Ｂｕｔｌｅｒ Ｃｏ．，Ｄｕｂｌｉｎ
ＯＨ）下で行った。

【００４５】 相乗平均血清ＩｇＧ及び中和抗体力価（±１標準偏差）は、第二期ワクチン接
種の２週後に、それぞれ、終点ＥＬＩＳＡ及びプラーク減少中和試験により決定
した。中和力価は、補体（Ｃ）の供給源として５％（Ｖ／Ｖ）モルモット血清（
ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ，Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ）の存在下（＋）
もしくは非存在下（−）でウイルスのＡ２株に対して決定した。中和力価は、ウ
ェル当たりのフォーカス数における６０％の減少（ウイルスコントロールに対し
て）を示す血清希釈の逆数として計算した。有意な差（ｐ＜０．０５）は、ＪＭ
Ｐ^Ｒ統計解析ソフトウェア（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｉｎｃ．，Ｃａｒｙ
，ＮＣ）を用いてＴｕｋｅｙ−Ｋｒａｍｅｒ ＨＳＤ多重比較によりｌｏｇ変換
後に決定した。グループ当たり５匹のマウスであった。全ての動物は、Ａｍｅｒ
ｉｃａｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ａｃｃｒｅｄｉｔａｔｉｏｎ ｏ
ｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅにより認定を受けた施設に
おいて収容した。結果 表１に示す結果は以前のデータを裏付け、そしてＩＬ−１２なしの最適用量の
ＱＳ−２１（２０．０μｇ）でのワクチン接種が、実験感染後に認められるもの
と大きさ及び機能において同様である全身的な体液性及び細胞性免疫応答を引き
起こすことを示した。抗−Ｆタンパク質ＩｇＧ１及びＩｇＧ２ａ力価並びに補体
補助中和力価（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ａｓｓｉｓｔｅｄ ｎｅｕｔｒａｌｉｚ
ｉｎｇ ｔｉｔｅｒ）は、第二期ワクチン接種の２週後に有意に高められた。一
方、ＩＬ−１２なしに次善用量のＱＳ−２１（０．８μｇ）と混合したＦタンパ
ク質でのワクチン接種は、Ｆ／ＱＳ−２１（２０．０μｇ）と比較した場合に有
意に低い血清抗体力価をもたらした。これらの結果はまた、（ＱＳ−２１なしに
）ＰＢＳのみにおいて調合したＦ／ｒＩＬ−１２（０．０１〜１．０μｇ）での
免疫処置が有意な補体補助血清中和力価を生じないことも示した。

【００４６】 組み合わせると、これらの結果は、ＱＳ−２１及びｒＩＬ−１２が強力なアジ
ュバント配合物をなすことを示した。０．８μｇのＱＳ−２１及びｒＩＬ−１２
間の相乗作用は、機能性血清抗体の発生に関して明らかであった。表１は、０．
８μｇのＱＳ−２１及びｒＩＬ−１２と調合したＦタンパク質での第二期ワクチ
ン接種の２週後に生じた抗体力価を示す。１．０、０．１もしくは０．０１μｇ
のｒＩＬ−１２への０．８μｇのＱＳ−２１の添加は、ＱＳ−２１なしのＦ／ｒ
ＩＬ−１２、もしくはＦ／ＱＳ−２１（０．８μｇ）のみの注入後に生じるもの
より有意に大きいＩｇＧ２ａ及び補体補助中和力価をもたらした。さらに、補体
補助中和力価は、実験感染後に生じるものと有意に異ならなかった。Ｆ／ｒＩＬ
−１２（１．０〜０．０１μｇ）と０．８μｇのＱＳ−２１でワクチン接種した
マウスからの血清をＱＳ−２１なしにＦ／ｒＩＬ−１２で免疫処置したマウスの
ものと比較した場合、抗−Ｆタンパク質特異的ＩｇＧ１力価における有意な差は
認められなかった。ＲＳＶ中和力価を誘導することにｒＩＬ−１２及びＱＳ−２
１間の相乗作用は、実施した４回研究のうち３回において認められた。

【００４７】 実施例２ ＱＳ−２１及びｒＩＬ−１２と共調合したＦタンパク質でワクチン接種したＢＡ
ＬＢ／ｃマウスの脾臓における抗原依存性キラー活性の決定 これらの実験の目的は、ＱＳ−２１及びｒＩＬ−１２と調合したＦタンパク質
での免疫処置が、いずれかのアジュバント単独での免疫処置後に得られるものよ
り大きい抗原依存性キラー細胞活性を引き出すことができるかどうかを決定する
ことであった。実験では、天然のＦタンパク質を精製し、そして実施例１におい
て記述したようにワクチンを調製し、ナイーブメスＢＡＬＢ／ｃマウスに投与し
た。抗原依存性キラー細胞の存在を決定するために、第二期免疫処置の２週後に
全部の脾臓細胞を集め、そして同系のＲＳＶ感染刺激細胞（ｓｔｉｍｕｌａｔｏ
ｒ ｃｅｌｌｓ）の存在下で６日培養した。その後、エクフェター細胞（１０％
の熱不活性化ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩ １６４０において連続的に３倍希釈
した）を標準的な^５１Ｃｒ遊離アッセイにおいて抗原依存性キラー細胞活性に関
してＲＳＶ感染及びコントロール同系標的細胞に対して試験した。図１Ｆにおい
て、エフェクター：標的比は１００：１であった。グループ当たり５匹のマウス
であった。結果 図１Ａ−１Ｆに示す結果は以前に公開されたデータを裏付け、そしてＦ／ＱＳ
−２１（２０．０μｇ）での免疫処置が、抗原依存性キラー細胞活性における顕
著な増加を引き起こすことを示した（図１Ａ及びＦ）。一方、次善用量のＱＳ−
２１（０．８μｇ）と混合したＦタンパク質でのワクチン接種は、顕著な抗原依
存性キラー細胞活性を引き出さなかった（図１Ｃ及びＦ）。これらの結果はまた
、ＰＢＳのみにおいて調合したＦ／ｒＩＬ−１２（０．０１〜１．０μｇ）が検
出可能な抗原依存性キラー細胞を生じないことを示す初期の報告を立証した（図
１Ｄ及びＦ）。

【００４８】 しかしながら、組み合わせると、これらの結果は、ＱＳ−２１及びｒＩＬ−１
２がＦタンパク質の強力なアジュバント配合物をなすことを示した。データは、
０．８μｇのＱＳ−２１が、１．０もしくは０．１μｇのｒＩＬ−１２と相乗作
用を有しそして実験感染もしくはＦ／ＱＳ−２１（２０μｇ）でのワクチン接種
後に誘導されるものとレベルにおいて同様であるＢＡＬＢ／ｃマウスの脾臓にお
ける抗原依存性キラー細胞前駆体をＦタンパク質が生成できるようにすることを
示した。キラー細胞活性は、３３：１のエフェクター：標的比で、Ｆ／ｒＩＬ−
１２（１．０μｇ）（図１Ｄ）もしくはＦ／ＱＳ−２１（０．８μｇ）（図１Ｃ
）でのワクチン接種後に得られるものよりそれぞれ５及び３倍大きかった。図１
Ｆは第二の実験からのデータを示し、ここで、０．８μｇのＱＳ−２１は、１０
０：１のエフェクター：標的比で、０．１もしくは１．０μｇのｒＩＬ−１２と
相乗作用を有した。機能性の細胞性免疫応答の発生に関するｒＩＬ−１２及びＱ
Ｓ−２１間の相乗作用は、２０．０μｇのＱＳ−２１をワクチンに用いた場合に
認められなかった（図１Ａ）。４．０μｇのＱＳ−２１の用量では相乗作用への
傾向があるようであった。Ｆ／ＡｌＯＨでワクチン接種したマウスの脾臓におい
て顕著なキラー細胞活性は認められなかった。ＲＳＶに感染してない同系コント
ロール標的に対する細胞溶解は認められなかった（図１）。抗原依存性キラー細
胞活性を生じることに関するｒＩＬ−１２及びＱＳ−２１間の相乗作用は、実施
した３回の研究のうち３回において認められた。

【００４９】

【表１】

【００５０】^ａ Ｆ／ＰＢＳとＱＳ−２１（２０．０μｇ）もしくはＦ／ＰＢＳでワクチン接
種したマウスのＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ及びＣ補助中和抗体力価に対するＰ＜０．
０５。^ｂ Ｆ／ＰＢＳ ＱＳ−２１（０．８μｇ）のみでワクチン接種したマウスから
のＩｇＧ２ａ及びＣ補助中和力価に対するＰ＜０．０５。^ｃ ０．８μｇのＱＳ−２１と共調合したＦ／ｒＩＬ−１２（１．０〜０．０１
μｇ）でワクチン接種した匹敵するマウスからのＩｇＧ２ａ及びＣ補助中和力価
に対するＰ＜０．０５。

【００５１】 実施例３ Ｔｈ２ヘルパーＴ細胞を誘導する傾向がある抗原、ＲＳＶ Ｇタンパク質により
引き出される全身的体液性免疫応答に対するＱＳ−２１及びｒＩＬ−１２を含ん
でなるアジュバントの影響 この実験の目的は、Ｔｈ２ヘルパーＴ細胞応答を誘導する傾向があるウイルス
抗原により引き出される体液性免疫応答に対するｒＩＬ−１２とＱＳ−２１のア
ジュバント特性を決定することであった。この目的のために、次善用量（０．８
μｇ）のＱＳ−２１と共調合した天然のＧタンパク質により誘導される免疫応答
に対するｒＩＬ−１２の影響を調べた。実験では、ナイーブメスＢＡＬＢ／ｃマ
ウス（７−１０週の年齢）を筋肉内に１μｇの天然のＧタンパク質でプライミン
グした。タンパク質は、ＲＳＶのＡ２株に感染したＶｅｒｏ細胞から免疫アフィ
ニティークロマトグラフィーにより精製し、そしてＳＤＳ ＰＡＧＥ電気泳動に
より概算した場合に９５％より大きく純粋であった。タンパク質は、ＰＢＳのみ
において調製するか、次善用量（０．８μｇ）のＱＳ−２１と混合するか、もし
くは次善用量（０．８μｇ）のＱＳ−２１と１０倍増加する用量のマウスｒＩＬ
−１２（０．０１、０．１もしくは１．０μｇのｒＩＬ−１２）と混合した。コ
ントロールマウスは、最適用量（２０．０μｇ）のＱＳ−２１と調合したで３μ
ｇのＦもしくは１μｇのＧタンパク質のいずれかでプライミングした。

【００５２】 相乗平均終点ＩｇＧ抗体力価の決定（ＥＬＩＳＡによる）のために初期ワクチ
ン接種の４週後に血清を集めた。相乗平均血清中和抗体力価は、ウイルスのＡ２
株に対するプラーク減少中和試験により確かめた。中和力価は、補体（Ｃ）の供
給源として５％モルモット血清の存在下（＋）もしくは非存在下（−）で決定し
た。中和力価は、ウェル当たりのフォーカス数における６０％の減少（ウイルス
コントロールに対して）を示す血清希釈の逆数として計算した。有意な差（ｐ＜
０．０５）は、ＪＭＰ^Ｒ統計ソフトウェア（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｉｎ
ｃ．，Ｃａｒｙ，ＮＣ）を用いてＴｕｋｅｙ−Ｋｒａｍｅｒ ＨＳＤ多重比較検
定によりｌｏｇ変換後に決定した。ＩｇＧの統計分析には、１００未満の終点力
価に５０の値を割り当てた。結果 ＲＳＶ Ｇタンパク質は詳細に研究されており、そしてＢＡＬＢ／ｃマウスに
おけるＴｈ２ヘルパーＴ細胞応答の強力な誘導物質であることが示されている。
ｒＩＬ−１２は次善用量（０．８μｇ）のＱＳ−２１と相乗作用を有しそしてＲ
ＳＶ Ｆタンパク質により引き出されるＴｈ１ヘルパーＴ細胞応答を高めること
ができるので（表１及び図１）、Ｔｈ２ Ｔ細胞応答を引き出す抗原（Ｇタンパ
ク質）により引き出されるものに対するｒＩＬ−１２の影響を調べた。ＱＳ−２
１は、Ｇタンパク質により誘導されるＴｈ２ヘルパーＴ細胞応答の優位性を減ら
さないことが既知である。実験では、Ｔｈ２及びＴｈ１ヘルパーＴ細胞応答の発
生に対するｒＩＬ−１２の影響をモニターするために、生成する血清抗−Ｇタン
パク質ＩｇＧ１及びＩｇＧ２ａ力価をそれぞれ用いた。表２に示すデータは、０
．０１μｇのｒＩＬ−１２が次善用量（０．８μｇ）のＱＳ−２１のアジュバン
ト特性を回復させそして抗−Ｇタンパク質ＩｇＧ１力価を誘導することを示した
。ＩｇＧ１力価は、Ｇ／ＰＢＳと比較した場合に高められ、そしてさらに、最適
用量（２０．０μｇ）のＱＳ−２１でのワクチン接種後に引き出されるものと有
意に異ならなかった。０．０１μｇより大きいｒＩＬ−１２の用量では、抗−Ｇ
タンパク質ＩｇＧ１力価の有意な差は認められなかった。Ｇ／ＱＳ−２１（０．
８μｇ）への０．０１〜１．０μｇのｒＩＬ−１２の添加は、ＩｇＧ２ａ力価の
発生に影響を及ぼさなかった。さらに、補体の存在下で決定した全ての中和力価
は検出できず、そしてｌｏｇ_１０ １．３未満であった。唯一の例外は、Ｇタン
パク質と最適用量（２０．０μｇ）のＱＳ−２１でワクチン接種したマウスから
の血清であった（中和力価＝ｌｏｇ_１０ １．７）。従って、データは、ｒＩＬ
−１２が、Ｔｈ２ヘルパーＴ細胞応答を引き出す傾向がある抗原に対する応答を
補助する次善用量（０．８μｇ）のＱＳ−２１の能力も回復できることを裏付け
た。

【００５３】

【表２】

【００５４】^‡ ０．８μｇのＱＳ−２１と増加する用量のマウスｒＩＬ−１２（０．０〜１
．０μｇ／用量）と混合した１．０μｇのＧタンパク質でＢＡＬＢ／ｃマウスを
プライミングした。追加のコントロールマウスは、ＰＢＳのみにおいて調製する
か、２０．０μｇのＱＳ−２１、もしくは２０．０μｇのＱＳ−２１と１．０μ
ｇのＩＬ−１２と混合したＧタンパク質でプライミングした。^† 相乗平均血清終点ＩｇＧ力価（ｌｏｇ_１０ ±１標準偏差）は、ＥＬＩＳＡ
により決定した。グループ当たり５匹のマウスであった。^ａ ｒＩＬ−１２なしのＧ／ＱＳ−２１（２０．０μｇ）でプライミングしたマ
ウスからのＩｇＧ１抗体力価に対するｐ＞０．０５。^ｂ Ｇ／ＱＳ−２１（０．８μｇ）と０．０１μｇのｒＩＬ−１２でプライミン
グしたものを除く全てのマウスからのＩｇＧ１抗体力価に対するｐ＜０．０５。

【００５５】 実施例４ 肺好酸球増加に関してＢＡＬＢ／ｃマウスをプライミングするＱＳ−２１と共調
合したＲＳＶ Ｇタンパク質の能力を回復させるｒＩＬ−１２の能力 この実験の目的は、ｒＩＬ−１２及びＱＳ−２１を含んでなるアジュバントが
、攻撃後の肺好酸球増加に関してマウスをプライミングする天然のＧタンパク質
の特性に対してどのような影響を有するかを確かめることであった。好酸球増加
は、ＣＤ４^＋ヘルパーＴｈ２細胞及びサイトカイン、インターロイキン−５に依
存している。実験では、ナイーブメスＢＡＬＢ／ｃマウス（７−１０週の年齢）
を筋肉内に１μｇの天然のＧタンパク質でプライミングした。タンパク質は、Ｒ
ＳＶのＡ２株に感染したＶｅｒｏ細胞から免疫アフィニティークロマトグラフィ
ーにより精製し、そしてＳＤＳ ＰＡＧＥにより概算した場合に９５％より大き
く純粋であった。タンパク質は、ＰＢＳのみにおいて調製するか、次善用量のＱ
Ｓ−２１（０．８μｇ／用量）と混合するか、もしくは次善用量のＱＳ−２１（
０．８μｇ／用量）と１０倍増加する用量のマウスｒＩＬ−１２（０．０１、０
．１もしくは１．０μｇのｒＩＬ−１２）と混合した。コントロールマウスは、
最適用量（２０．０μｇ）のＱＳ−２１と混合した３μｇのＦもしくは１μｇの
Ｇタンパク質のいずれかでプライミングした。

【００５６】 次に、マウスを初期ワクチン接種の４週後に攻撃した。鼻内攻撃（０．０５ｍ
ｌ）は、注入可能な麻酔（ケタミン及びキシラジン）下で行った。その５日後に
気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）を行った。好酸球の相対パーセンテージは、Ｄｉｆｆ
−Ｑｕｉｋ（Ｄａｄｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｍｉａｍｉ，ＦＬ）で染
色したスライド上の少なくとも４００個の白血球の検査後に記述したように確か
めた。有意な差（ｐ＜０．０５）は、ＪＭＰ^Ｒ統計ソフトウェア（ＳＡＳ Ｉｎ
ｓｔｉｔｕｔｅ Ｉｎｃ．，Ｃａｒｙ，ＮＣ）を用いてＴｕｋｅｙ−Ｋｒａｍｅ
ｒ ＨＳＤ多重比較検定によりｌｏｇ変換後に決定した。結果 表３に示す結果は、増加する用量のｒＩＬ−１２と共調合したＧ／ＱＳ−２１
（０．８μｇ）でプライミングしたＢＡＬＢ／ｃマウスの攻撃の５日後の肺にお
ける好酸球増加の平均パーセントを示す。データは、ｒＩＬ−１２が次善用量（
０．８μｇ）のＱＳ−２１のアジュバント特性を高めそしてＴｈ２ヘルパーＴ細
胞応答を引き出すＧタンパク質の生来の傾向を促進することを示した。Ｇ／ＱＳ
−２１（０．８μｇ）に加えるｒＩＬ−１２の量を増やすにつれて、肺好酸球増
加は、最適用量（２０．０μｇ）のＱＳ−２１と共調合したＧタンパク質でのワ
クチン接種後に認められるものと同等のレベルまで統計的に高められた。従って
、Ｇ／ＱＳ−２１（０．８μｇ）と１．０μｇのｒＩＬ−１２でプライミングし
たマウスの肺好酸球増加は、攻撃後にＧ／ＱＳ−２１（２０．０μｇ）でプライ
ミングしたマウスのものと同等であった。データはさらに、１．０μｇのｒＩＬ
−１２がＧ／ＱＳ−２１（２０．０μｇ）により引き起こされるＴｈ２ヘルパー
Ｔ細胞応答の優位性を減らさないことを示した。Ｆ／ＱＳ−２１での免疫処置は
、ＢＡＬＢ／ｃマウスに攻撃後の肺好酸球増加の素因を与えなかった。

【００５７】

【表３】

【００５８】^† ＰＢＳにおいて調製するか、０．８もしくは２０μｇのＱＳ−２１と混合す
るか、または０．８μｇのＱＳ−２１と１０倍増加する用量のマウスｒＩＬ−１
２と混合した１μｇの天然のＧタンパク質でＢＡＬＢ／ｃマウスをプライミング
した。コントロールマウスは、ＱＳ−２１と混合した３μｇのＦでプライミング
した。４週後にマウスをＲＳＶのＡ２株で攻撃した。攻撃の５日後に少なくとも
４００個の白血球の検査後に好酸球の平均相対パーセンテージを決定した。グル
ープ当たり５匹のマウスであった。^‡ これらの数字は、相対平均好酸球％である。統計的差は、ｌｏｇ変換後に決
定した。^ａ Ｇ／ＱＳ−２１（０．８μｇ）と０．０１〜１．０μｇのｒＩＬ−１２及び
Ｇ／ＱＳ−２１（２０．０μｇ）でプライミングしたマウスからの好酸球％に対
するｐ＜０．０５。Ｇ／ＰＢＳ及びＦ／ＱＳ−２１に対するｐ＞０．０５。^ｂ ｒＩＬ−１２なしのＧ／ＱＳ−２１（２０．０μｇ）に対するｐ＞０．０５
。

【００５９】 実施例５ ＱＳ−２１と共調合した型を決定できないヘモフィルス・インフルエンザからの
組換え非脂質化Ｐ４タンパク質により引き出される全身的体液性免疫応答に対す
るｒＩＬ−１２の影響 この実験の目的は、細菌抗原により引き起こされる体液性免疫応答に対するｒ
ＩＬ−１２及びＱＳ−２１を含んでなるアジュバントの影響を確かめることであ
った。この目的のために、ＱＳ−２１と混合した場合に型を決定できないヘモフ
ィルス・インフルエンザからの非脂質化組換えＰ４（ｒＰ４）タンパク質により
誘導される免疫応答に対するｒＩＬ−１２の影響を調べた。実験では、ナイーブ
メスＢＡＬＢ／ｃマウス（７−１０週の年齢）に１０μｇのｒＰ４タンパク質を
０及び４週に皮下にワクチン接種した。タンパク質は、ＰＢＳのみにおいて調製
するか、次善用量（０．８μｇ／用量）のＱＳ−２１と混合するか、もしくは次
善用量（０．８μｇ／用量）のＱＳ−２１と１０倍増加する用量のマウスｒＩＬ
−１２（０．０１、０．１もしくは１．０μｇのｒＩＬ−１２）と混合した。追
加のコントロールマウスは、ｒＩＬ−１２なしに最適用量（２０．０μｇ）のＱ
Ｓ−２１もしくはリン酸アルミニウム（ＡｌＰＯ、１００．０μｇ／用量）と調
合したｒＰ４タンパク質で免疫処置した。相乗平均終点ＩｇＧ力価の決定（ＥＬ
ＩＳＡによる）のために初期及び第二期ワクチン接種の４及び２週後にそれぞれ
血清を集めた。有意な差（ｐ＜０．０５）は、ＪＭＰ^Ｒ統計ソフトウェアを用い
てＴｕｋｅｙ−Ｋｒａｍｅｒ ＨＳＤ多重比較検定によりｌｏｇ変換後に決定し
た。結果 表４に示す結果は、ｒＩＬ−１２が次善用量のＱＳ−２１と一緒になって作用
しそして細菌抗原、型を決定できないヘモフィルス・インフルエンザのｒＰ４タ
ンパク質により引き起こされる全身的体液性免疫応答を増大することを示した。
ｒＩＬ−１２なしのｒＰ４／ＱＳ−２１（０．８μｇ）での免疫処置と比較した
場合に、ｒＰ４／ＱＳ−２１（０．８μｇ／用量）と０．０１、０．１もしくは
１．０μｇのｒＩＬ−１２での免疫処置は、第二期ワクチン接種の２週後に有意
に大きい血清抗−ｒＰ４ ＩｇＧ２ａ力価をもたらした。ＩｇＧ２ａ力価はまた
、ｒＰ４／ＡｌＰＯでのワクチン接種後に生じるものよりも有意に大きかった。
これらの力価は、ｒＩＬ−１２なしに最適用量（２０．０μｇ）のＱＳ−２１と
混合したｒＰ４タンパク質により誘導されるマウスのものと有意に異ならなかっ
た。次善用量のＱＳ−２１と混合したｒＰ４タンパク質への１．０μｇのｒＩＬ
−１２の添加はまた、ｒＰ４／ＰＢＳもしくはｒＰ４／ＡｌＰＯでのワクチン接
種と比較した場合に有意に増加したＩｇＧ１力価ももたらした。従って、データ
は、ｒＩＬ−１２が細菌及びウイルス抗原の両方に対する次善用量（０．８μｇ
）のＱＳ−２１のアジュバント特性を増大できることを裏付けた。初期ワクチン
接種の４週後に抗−ｒＰ４ ＩｇＧ力価における統計学的に有意な差はなかった
。

【００６０】

【表４】

【００６１】^‡ 相乗平均ＩｇＧ抗体力価（ｌｏｇ_１０ ±１標準偏差）は、第二期ワクチン
接種の２週後に集めた血清に対してＥＬＩＳＡにより決定した。グループ当たり
５匹のマウスであった。^† ＢＡＬＢ／ｃマウスに１０．０μｇのｒＰ４タンパク質を０及び４週に皮下
にワクチン接種した。タンパク質は、ＱＳ−２１（０．８μｇ）と示す増加する
量の組換えｒＩＬ−１２と調合した。コントロールマウスには、ｒＩＬ−１２な
しに、ＰＢＳにおいて調製した、ＱＳ−２１（２０．０μｇ／用量）と混合した
、もしくはリン酸アルミニウム（ＡｌＰＯ、１００μｇ／用量）に吸着したｒＰ
４を注入した。^ａ ｒＩＬ−１２なしのｒＰ４／ＰＢＳ、ｒＰ４／ＡｌＰＯ及びｒＰ４／ＱＳ−
２１（０．８）からの総ＩｇＧもしくはＩｇＧ２ａ抗体力価に対するｐ＜０．０
５。^ｂ ｒＰ４／ＰＢＳ及びｒＰ４／ＡｌＰＯからの総ＩｇＧ１抗体力価に対するｐ
＜０．０５。

【００６２】 実施例６ ＱＳ−２１と混合した型を決定できないヘモフィルス・インフルエンザからの組
換え脂質化Ｐ４タンパク質により引き出される全身的体液性免疫応答に対するｒ
ＩＬ−１２の影響 この実験の目的は、脂質化された細菌抗原により引き起こされる体液性免疫応
答に対するｒＩＬ−１２及びＱＳ−２１を含んでなるアジュバントの影響を決定
することであった。この目的のために、型を決定できないヘモフィルス・インフ
ルエンザからの組換え脂質化Ｐ４（ｒＬＰ４）タンパク質により誘導される免疫
応答に対するｒＩＬ−１２及びＱＳ−２１の影響を試験した。実験では、ナイー
ブメスＢＡＬＢ／ｃマウス（８−１０週の年齢）に５μｇのｒＬＰ４タンパク質
を０及び４週に筋肉内にワクチン接種した。タンパク質は、ＰＢＳのみにおいて
調製するか、５倍増加する用量（０．８−２０．０μｇ）のＱＳ−２１、１０倍
増加する用量のマウスｒＩＬ−１２（０．０１、０．１もしくは１．０μｇのｒ
ＩＬ−１２）、もしくはＱＳ−２１及びｒＩＬ−１２の示す組み合わせと混合し
た。相乗平均終点ＩｇＧ力価の決定（ＥＬＩＳＡによる）のために初期及び第二
期ワクチン接種の４及び２週後にそれぞれ血清を集めた。有意な差（ｐ＜０．０
５）は、ＪＭＰ^Ｒ統計ソフトウェアを用いてＴｕｋｅｙ−Ｋｒａｍｅｒ ＨＳＤ
多重比較検定によりｌｏｇ変換後に決定した。結果 表５及び６は、それぞれ、初期及び第二期ワクチン接種の４及び２週後の抗−
ｒＬＰ４ ＩｇＧ力価を示す。これらの結果は、ＱＳ−２１もしくはｒＩＬ−１
２が単独でｒＬＰ４に対する体液性免疫応答の発生を高めるための優れたアジュ
バントであることを示した。これは、増加した抗−ｒＬＰ４ ＩｇＧ２ａ力価に
より最もよく認められた。例えば、免疫処置の４週後に、ｒＬＰ４／ｒＩＬ−１
２（０．０１μｇ）もしくはｒＬＰ４／ｒＩＬ−１２（１．０μｇ）でプライミ
ングしたマウスの力価は、ＰＢＳのみにおいて調製したｒＬＰ４を注入したマウ
スからの血清と比較した場合にそれぞれ１０及び１００倍増加した（表５）。同
様に、ｒＬＰ４／ＱＳ−２１（４．０μｇ）もしくはｒＬＰ４／ＱＳ−２１（２
０．０μｇ）でプライミングしたマウスのＩｇＧ２ａ力価は、１００倍増大した
（表５）。同様の結果が、第二期ワクチン接種の２週後に認められた（表６）。
しかしながら、脂質化された細菌抗原では、次善用量のｒＩＬ−１２及びＱＳ−
２１を組み合わせて使用した場合に相乗作用がないようであった。

【００６３】

【表５】

【００６４】^† ＰＢＳのみにおいて調製するか、示す用量（０．８−２０．０μｇ）のＱＳ
−２１、１０倍増加する用量のマウスｒＩＬ−１２（０．０１、０．１もしくは
１．０μｇのｒＩＬ−１２）、もしくはＱＳ−２１及びｒＩＬ−１２の組み合わ
せと混合した５μｇのｒＬＰ４タンパク質で筋肉内にＢＡＬＢ／ｃマウスをプラ
イミングした。^ａ これらの数字は相乗平均終点抗体力価±１標準偏差である。グループ当たり
５匹のマウスであった。

【００６５】

【表６】

【００６６】^† ＢＡＬＢ／ｃマウスに５μｇのｒＬＰ４タンパク質を０及び４週に筋肉内に
ワクチン接種した。タンパク質はＰＢＳのみにおいて調製するか、示す用量（０
．８−２０．０μｇ）のＱＳ−２１、１０倍増加する用量のマウスｒＩＬ−１２
（０．０１、０．１もしくは１．０μｇのｒＩＬ−１２）、もしくはＱＳ−２１
及びｒＩＬ−１２の組み合わせと混合した。^ａ これらの数字は相乗平均終点ＩｇＧ力価±１標準偏差である。グループ当た
り５匹のマウスであった。

【００６７】 本発明は、その好ましい態様に関して特に示しそして記述しているが、添付の
請求項により包含される本発明の範囲からそれずに形態及び詳細における様々な
改変をその中に行うことができると当業者により理解される。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１Ａ−１Ｆは、ｒＩＬ−１２及びＱＳ−２１と共調合したＲＳＶ Ｆタンパ
ク質でワクチン接種したＢＡＬＢ／ｃマウスの脾臓における抗原依存性キラー細
胞前駆体を示す。図１Ａ−１Ｅにおいて、Ｆタンパク質を用量当たり１．０μｇ
のｒＩＬ−１２（詰まった丸）もしくはＰＢＳのみ（開いた丸）と調製した。ワ
クチンを用量当たり２０．０（図１Ａ）、４．０（図１Ｂ）、０．８（図１Ｃ）
もしくは０．０（図１Ｄ）μｇのＱＳ−２１と共調合した。コントロールマウス
（図１Ｅ）にはＰＢＳのみにおけるＱＳ−２１（２０μｇ）を注入するか（開い
た四角）、もしくはＲＳＶのＡ２株を実験的に感染させた（〜２Ｘ１０^６ｐｆｕ
）（開いた三角）。図１Ｆは、Ｆタンパク質をＰＢＳのみにおいて、もしくは０
．８μｇのＱＳ−２１及び減少する用量（１．０〜０．０１μｇ）のｒＩＬ−１
２と調製した別個の実験を示す。エフェクター細胞を抗原依存性キラー細胞活性
に関してＲＳＶ感染（実線もしくは詰まった棒）及びコントロール（破線もしく
は開いた棒）同系標的細胞に対して試験した；エフェクター：標的比は１００：
１であった。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 37/04 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＯ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ， ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，Ｉ Ｓ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ， ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，Ｐ Ｔ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ， ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4C084 AA01 AA02 BA04 BA08 BA22 CA18 CA26 DA12 DA39 NA05 ZB09 4C085 AA03 AA34 AA38 BA09 BA10 BA12 BA13 BA14 BA16 BA18 BA21 BA22 BA24 BA49 BA53 BA59 BA60 BA63 BA69 BA71 BA73 BA75 BA78 BA83 BA88 BA89 CC07 CC08 DD86 FF13 FF18 4C088 AB01 NA05 ZB09

Claims (61)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 組成物が約１μｇ未満の３−Ｏ−デアシル化モノホスホリル
   リピドＡを含んでなる、有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２を含んでなるアジュ
   バント組成物。
2. 【請求項２】 該組成物が約０．５μｇ未満の３−Ｏ−デアシル化モノホス
   ホリルリピドＡを含んでなる請求項１のアジュバント組成物。
3. 【請求項３】 該組成物が約０．０００１μｇ未満の３−Ｏ−デアシル化モ
   ノホスホリルリピドＡを含んでなる請求項２のアジュバント組成物。
4. 【請求項４】 生理学的に許容しうる賦形剤をさらに含んでなる請求項１の
   アジュバント組成物。
5. 【請求項５】 該ＩＬ−１２が、脊椎動物に投与した場合に実質的に反応原
   性でない量で存在する請求項３のアジュバント組成物。
6. 【請求項６】 該ＱＳ−２１及びＩＬ−１２が相乗アジュバント効果を引き
   起こす請求項１〜５のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
7. 【請求項７】 該ＩＬ−１２が組換えヒトＩＬ−１２である請求項１〜５の
   いずれか一つに記載のアジュバント組成物。
8. 【請求項８】 該ＩＬ−１２が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在する
   請求項１〜５のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
9. 【請求項９】 該ＱＳ−２１が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在する
   請求項１〜５のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
10. 【請求項１０】 組成物が実質的な３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピ
    ドＡを含まない、有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２を含んでならない、アジュ
    バント組成物。
11. 【請求項１１】 生理学的に許容しうる賦形剤をさらに含んでなる請求項１
    ０のアジュバント組成物。
12. 【請求項１２】 該ＩＬ−１２が、脊椎動物に投与した場合に実質的に反応
    原性でない量で存在する請求項１０のアジュバント組成物。
13. 【請求項１３】 該ＱＳ−２１及びＩＬ−１２が相乗アジュバント効果を引
    き起こす請求項１０〜１２のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
14. 【請求項１４】 該ＩＬ−１２が組換えヒトＩＬ−１２である請求項１０〜
    １２のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
15. 【請求項１５】 該ＩＬ−１２が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在す
    る請求項１０〜１２のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
16. 【請求項１６】 該ＱＳ−２１が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在す
    る請求項１０〜１２のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
17. 【請求項１７】 組成物が約０．０５μｇ未満のＩＬ−１２を含んでなる、
    有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２を含んでなるアジュバント組成物。
18. 【請求項１８】 生理学的に許容しうる賦形剤をさらに含んでなる請求項１
    ７のアジュバント組成物。
19. 【請求項１９】 該ＩＬ−１２が、脊椎動物に投与した場合に実質的に反応
    原性でない量で存在する請求項１７のアジュバント組成物。
20. 【請求項２０】 該ＱＳ−２１及びＩＬ−１２が相乗アジュバント効果を引
    き起こす請求項１７〜１９のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
21. 【請求項２１】 該ＩＬ−１２が組換えヒトＩＬ−１２である請求項１７〜
    １９のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
22. 【請求項２２】 該ＩＬ−１２が約０．０１ｎｇ〜約０．０５μｇの量で存
    在する請求項１７〜１９のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
23. 【請求項２３】 該ＱＳ−２１が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在す
    る請求項１７〜１９のいずれか一つに記載のアジュバント組成物。
24. 【請求項２４】 有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２から本質的になるアジ
    ュバント組成物。
25. 【請求項２５】 アジュバント組成物が約１μｇ未満の３−Ｏ−デアシル化
    モノホスホリルリピドＡを含んでなる、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱ
    Ｓ−２１及びＩＬ−１２を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる免疫原性
    組成物。
26. 【請求項２６】 該アジュバント組成物が約０．５μｇ未満の３−Ｏ−デア
    シル化モノホスホリルリピドＡを含んでなる請求項２５の免疫原性組成物。
27. 【請求項２７】 該アジュバント組成物が約０．０００１μｇ未満の３−Ｏ
    −デアシル化モノホスホリルリピドＡを含んでなる請求項２６の免疫原性組成物
    。
28. 【請求項２８】 該ＩＬ−１２が、脊椎動物に投与した場合に実質的に反応
    原性でない量で存在する請求項２７の免疫原性組成物。
29. 【請求項２９】 アジュバント組成物が実質的な３−Ｏ−デアシル化モノホ
    スホリルリピドＡを含まない、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１
    及びＩＬ−１２を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる免疫原性組成物。
30. 【請求項３０】 該ＩＬ−１２が、脊椎動物に投与した場合に実質的に反応
    原性でない量で存在する請求項２９の免疫原性組成物。
31. 【請求項３１】 組成物が約０．０５μｇ未満のＩＬ−１２を含んでなる、
    少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２を含んでなるア
    ジュバント組成物を含んでなる免疫原性組成物。
32. 【請求項３２】 該ＩＬ−１２が、脊椎動物に投与した場合に実質的に反応
    原性でない量で存在する請求項３１の免疫原性組成物。
33. 【請求項３３】 該ＱＳ−２１及びＩＬ−１２が相乗アジュバント効果を引
    き起こす請求項２５〜３２のいずれか一つに記載の免疫原性組成物。
34. 【請求項３４】 該ＩＬ−１２が組換えヒトＩＬ−１２である請求項２５〜
    ３２のいずれか一つに記載の免疫原性組成物。
35. 【請求項３５】 該ＩＬ−１２が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在す
    る請求項２５〜３０のいずれか一つに記載の免疫原性組成物。
36. 【請求項３６】 該ＩＬ−１２が約０．０１ｎｇ〜約０．０５μｇの量で存
    在する請求項３１〜３２のいずれか一つに記載の免疫原性組成物。
37. 【請求項３７】 該ＱＳ−２１が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在す
    る請求項２５〜３２のいずれか一つに記載の免疫原性組成物。
38. 【請求項３８】 該抗原が細菌抗原である請求項２５〜３２のいずれか一つ
    に記載の免疫原性組成物。
39. 【請求項３９】 該抗原が型の決定できないヘモフィルス・インフルエンザ
    からのＰ４タンパク質もしくはその機能性部分である請求項３８に記載の免疫原
    性組成物。
40. 【請求項４０】 該抗原がウイルス抗原である請求項２５〜３２のいずれか
    一つに記載の免疫原性組成物。
41. 【請求項４１】 該抗原がＲＳウイルスＦタンパク質もしくはその機能性部
    分である請求項４０に記載の免疫原性組成物。
42. 【請求項４２】 場合により生理学的に許容しうる賦形剤をさらに含んでな
    る項２５〜３２のいずれか一つに記載の免疫原性組成物。
43. 【請求項４３】 少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ
    −１２から本質的になるアジュバント組成物を含んでなる免疫原性組成物。
44. 【請求項４４】 組成物が約１μｇ未満の３−Ｏ−デアシル化モノホスホリ
    ルリピドＡを含んでなる、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及び
    ＩＬ−１２を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる組成物の免疫学的に有
    効な量を脊椎動物に投与することを含んでなり、それにより脊椎動物において抗
    原に対する免疫応答を引き出す、抗原に対する免疫応答を引き出す方法。
45. 【請求項４５】 方法に用いる該組成物が約０．５μｇ未満の３−Ｏ−デア
    シル化モノホスホリルリピドＡを含んでなり、それにより脊椎動物において抗原
    に対する免疫応答を引き出す請求項４４の方法。
46. 【請求項４６】 方法に用いる該組成物が約０．０００１μｇ未満の３−Ｏ
    −デアシル化モノホスホリルリピドＡを含んでなり、それにより脊椎動物におい
    て抗原に対する免疫応答を引き出す請求項４５の方法。
47. 【請求項４７】 該ＩＬ−１２が脊椎動物において実質的に反応原性でない
    量で存在する請求項４６の方法。
48. 【請求項４８】 組成物が実質的な３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピ
    ドＡを含まない、少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１
    ２を含んでなるアジュバント組成物を含んでなる組成物の免疫学的に有効な量を
    脊椎動物に投与することを含んでなり、それにより脊椎動物において抗原に対す
    る免疫応答を引き出す、抗原に対する免疫応答を引き出す方法。
49. 【請求項４９】 該ＩＬ−１２が脊椎動物において実質的に反応原性でない
    量で存在する請求項４８の方法。
50. 【請求項５０】 組成物が約０．０５μｇ未満のＩＬ−１２を含んでなる、
    少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ−１２を含んでなるア
    ジュバント組成物を含んでなる組成物の免疫学的に有効な量を脊椎動物に投与す
    ることを含んでなり、それにより脊椎動物において抗原に対する免疫応答を引き
    出す、抗原に対する免疫応答を引き出す方法。
51. 【請求項５１】 該ＩＬ−１２が脊椎動物において実質的に反応原性でない
    量で存在する請求項５０の方法。
52. 【請求項５２】 該ＱＳ−２１及びＩＬ−１２が相乗アジュバント効果を引
    き起こす請求項４８〜５１のいずれか一つに記載の方法。
53. 【請求項５３】 該ＩＬ−１２が組換えヒトＩＬ−１２である請求項４８〜
    ５１のいずれか一つに記載の方法。
54. 【請求項５４】 該ＩＬ−１２が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在す
    る請求項４８もしくは４９のいずれか一つに記載の方法。
55. 【請求項５５】 該ＩＬ−１２が約０．０１ｎｇ〜約０．０５μｇの量で存
    在する請求項５０もしくは５１のいずれか一つに記載の方法。
56. 【請求項５６】 該ＱＳ−２１が約０．０１ｎｇ〜約５０μｇの量で存在す
    る請求項４８〜５１のいずれか一つに記載の方法。
57. 【請求項５７】 該抗原が細菌抗原である請求項４８〜５１のいずれか一つ
    に記載の方法。
58. 【請求項５８】 該抗原が型の決定できないヘモフィルス・インフルエンザ
    からのＰ４タンパク質もしくはその機能性部分である請求項５７に記載の方法。
59. 【請求項５９】 該抗原がウイルス抗原である請求項４８〜５１のいずれか
    一つに記載の方法。
60. 【請求項６０】 該抗原がＲＳウイルスＦタンパク質もしくはその機能性部
    分である請求項５９に記載の方法。
61. 【請求項６１】 少なくとも一つの抗原並びに有効量のＱＳ−２１及びＩＬ
    −１２から本質的になるアジュバント組成物を含んでなる組成物の免疫学的に有
    効な量を脊椎動物に投与することを含んでなり、それにより脊椎動物において抗
    原に対する免疫応答を引き出す、抗原に対する免疫応答を引き出す方法。