JP2003535118A - 中枢神経系障害の治療におけるグラチラマーアセテート（共重合体１）の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、炎症性非自己免疫中枢神経系（ＣＮＳ）疾患を治療するため、該疾患の症状を軽減するため、マトリクス金属結合タンパク分解酵素の活性を阻害するため、およびＴリンパ球によるサイトカイン産生を抑制するために、共重合体１（グラチラマーアセテート）を投与することに関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本出願は、２０００年６月５日に出願された米国シリアル番号０９/５８７．
５２３の一部継続出願であり、該出願の優先権を主張し、該出願の内容は、参照
により本願明細書の開示内容の一部とする。

【０００２】 本出願を通して、種々の参照文献が、括弧内にアラビア数字を用いて引用され
る。これら引用文献の完全な引用は、本明細書の末尾に見ることができる。これ
ら刊行物は、その全体を参照により本出願の開示内容の一部とし、本発明が属す
る技術分野の状況をより完全に説明する。

【０００３】 ［本発明の分野］ 本発明は、炎症性非自己免疫中枢神経系（ＣＮＳ）疾患を有する哺乳類の被検
体もしくは該疾患に遺伝的に罹患しやすい哺乳類の被検体を治療するか、または
該疾患の症状を軽減する方法を提供する。

【０００４】 ［背景］ 脊椎動物の神経系は、脳および脊髄から成る中枢神経系と、末梢に広がる神経
から成る末梢神経系に分けられる（２２）。多くの神経細胞の軸索は、特殊な形
質膜の積み重ねであるミエリン鞘で覆われている。軸索の周囲を取り囲むグリア
細胞がミエリン鞘を作り出す。ＣＮＳにおいてこれらグリア細胞は、稀突起神経
膠細胞と称される。個々の稀突起神経膠細胞により形成されるミエリンの各領域
は、ランビエ絞輪と称される無髄区域により、次の領域から分離される（２２）
。

【０００５】 ミエリン鞘は、軸索の電気絶縁体として機能し、軸索における全電気的活性を
ランビエ絞輪に限定する。

【０００６】 成人の間にみられる一般的なタイプのＣＮＳ疾患の一つとして、多発性硬化症
がある。この病状は脱髄疾患である。多発性硬化症は、一次性脱髄および軸索傷
害により病理学的に特徴付けられる、慢性、しばしば進行性の、炎症性ＣＮＳ疾
患である。多発性硬化症の患者において、脱髄ニューロンによる活動電位の伝達
は遅い（２２）。多発性硬化症の病因は未知であるが、多発性硬化症の幾つかの
免疫学的特徴、並びに多発性硬化症とある種の主要組織適合遺伝子複合体の対立
遺伝子との適度な関連が、多発性硬化症が免疫介在性疾患であるという推測の裏
付けとなった（１７、３３、５５）。自己免疫の仮説は、自己免疫（アレルギー
）脳脊髄炎（ＥＡＥ）実験モデルにより裏付けられ、この実験モデルにおいて、
ある種のミエリン構成成分を遺伝的に罹患しやすい動物に注入すると、Ｔリンパ
球介在性ＣＮＳ脱髄に至る（５８）。

【０００７】 何人かの研究者は、多発性硬化症のきっかけとして活性化Ｔリンパ球を考える
。彼らは、Ｔリンパ球が血液脳バリア（blood brain barrier；BBB）をＣＮＳ実
質組織へ一旦通過すると、Ｔリンパ球が、小グリア細胞による抗原提示の後、再
活性化されると仮定した（５３）。白血球の組織への侵入は、内皮細胞への接着
および内皮バリアを横切る移動を含む複数ステップのプロセスである。

【０００８】 近年の証拠により、Ｔリンパ球がＣＮＳ実質組織に侵入するためには、白血球
によるマトリクス金属結合タンパク分解酵素（ＭＭＰs）の発現が必要であるこ
とが示唆されている（４２、７７、８８）。ＭＭＰは、活性部位を有するタンパ
ク分解酵素であり、当該活性部位において、変化しない（invarinat）亜鉛がＭ
ＭＰのプロペプチド領域でシステイン残基に結合し、ＭＭＰを不活性状態に維持
する（５０、８９）。活性化剤が、システインと亜鉛の相互作用を混乱させ、活
性部位を露出させ、その結果、触媒反応を起こすことができる。

【０００９】 ＭＭＰsの不適当な発現が、悪性神経膠腫、発作およびアルツハイマー病の病
因に関与することが推測されている。更に、幾つかのラインの証拠により、多発
性硬化症の疾患プロセスにおけるＭＭＰsの役割が示唆されている（３７、９１
）。この点において、小グリア細胞、星状細胞および潜入する白血球上にある免
疫組織化学的に同定されたＭＭＰs（具体的にはＭＭＰ−３、−７、−９および
ー１２）は、多発性硬化症被検体の検死解剖された脳（４、１８、２１、４７、
５７）およびＥＡＥ動物の脳（１６、３７）に存在することが幾つかのグループ
により今日文書で報告されている。血清サンプルの分析により、ＭＭＰ−９のレ
ベルは、健康なコントロールと比べて多発性硬化症患者において有意に増大する
ことが明らかにされ；多発性硬化症集団内において、血清ＭＭＰ−９レベルは、
安定した状態の期間に比べて臨床上の再発期間において高い（４０）。更に、血
清ＭＭＰ−９レベルは、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）により検出される、ガドリニ
ウムにより増大する病巣の数と関連している（４０、８４）。

【００１０】 ＭＭＰsの病原性役割と一致して、ＭＭＰsの活性を阻害するために開発された
幾つかのヒドロキサム酸塩系薬剤（例えばＧＭ６００１、Ｒｏ３１−９７９０お
よびＢＢ−１１０１）は、ＥＡＥの発症および重症度を軽減することが見出され
た（３２、３４、４３、５２）。

【００１１】 小グリア細胞活性化の有名な方法は、これら細胞とＴリンパ球との間の非抗原
特異的相互作用であると信じられている（１９、２０、６７）。この主張は、培
養研究で得られた幾つかの発見により裏付けられている。例えば、ヒトＴリンパ
球とヒト小グリア細胞とが相互作用し、有意な量のＴＮＦ−αおよびＩＬ−１０
を生成する（１４、１５）。小グリア細胞に対するＴ−リンパ球の影響は、非常
に効果的な小グリア細胞の刺激物質であるリポ多糖類の小グリア細胞に対する影
響力と同じである。Ｔ−リンパ球と小グリア細胞との間の相互作用は、抗原もし
くはＭＨＣ拘束を必要としないという観察において、研究者らは追加の裏付けを
見出した。また、マウスの顔面神経切除モデルにおいて、Ｔ細胞はＣＮＳに潜入
して小グリア細胞のまわりで集合すること、並びにこのことはＩＬ−１βおよび
ＴＮＦ−αの増加と対応することが、実験により示された（６１）。対宿主性移
植片病（ＧＶＨＤ）モデルにおいて、活性化小グリア細胞クラスターは、Ｔ細胞
の潜入物と常に密接に関連していた（６８）。

【００１２】 ＴＮＦ−αは、このプロセスに関与する種々の接着分子の発現をアップレギュ
レートすることにより、内皮を横切るリンパ球の移動に影響を及ぼすことができ
（７６）、脱髄プロセスに関係している。実際、ＴＮＦ−αは、脳のミエリン産
生細胞である稀突起神経膠細胞のアポトーシス死をインビトロで直接誘導し（２
６、４５、７１）、ＴＮＦ−αを硝子体内（intravitreal）注入すると、マウス
の視神経軸索の脱髄を引き起こす（１２）。その上、ＴＮＦ−αはプロ炎症性で
ある。ＴＮＦ−αのレベルは、多発性硬化症患者の血清、脳脊髄液、および脳病
巣で増大することが見出され、疾患の活性と関連している（１３、３５、６２、
７２）。また、ＴＮＦ−αは、ＥＡＥの病原性に関係しており、ＴＮＦ−αに対
する抗体もしくは可溶性ＴＮＦ−αレセプターの投与が、ＥＡＥの転移を予防し
、自己免疫性脱髄を排除する（６３、６９、７０）。

【００１３】 ＩＬ−１２は、別のプロ炎症性サイトカインであり、これは、ＩＦＮ−γおよ
びＴＮＦ−α/βを分泌するプロ炎症性Ｔｈ１サブセットへと中立（uncommitted
）Ｔ−リンパ球を変える際に重要な役割を果たす（９１）。また、ＩＬ−１βは
、炎症性応答を促進し、多発性硬化症と関連している（６６）。

【００１４】 Ｔｈ２サブセットは、ＩＬ−４、ＩＬ−１０およびＩＬ−１３を産生し、体液
性免疫を調節し、局所性炎症を低減する。ＩＬ−４およびＩＬ−１０はともに、
ナイーブ前駆体のＴｈ１細胞への分化を抑制することができる（９１）。ＩＬ−
４は、Ｂリンパ球およびマクロファージの活性化を促進し、抗体のクラススイッ
チングを刺激する（２２）。

【００１５】 ＩＬ−１３は、重要な免疫調節活性を備えたＴｈ２サイトカインである。最も
よく知られたＩＬ−１３介在性機能は、ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞のＴｈ２表現型
への分化を引き起こす能力である（７５）。ＩＬ−１３の抗炎症性機能には、活
性化単球もしくは肺胞マクロファージによるプロ炎症性サイトカインの産生を抑
制する効果（８１）、１５−リポオキシゲナーゼの誘導（５１）、およびプロス
タグランジンＥ２（ＰＧＥ２）形成の抑制（２７）が含まれる。ＣＮＳにおける
ＩＬ−１３の機能およびグリア細胞に対するＩＬ−１３の機能は、充分に明らか
にされていない（８７）。

【００１６】 ＩＬ−１０は、単球/マクロファージ、Ｔリンパ球、およびマスト細胞を含む
種々の細胞により産生される抗炎症性サイトカインである。ＣＮＳにおいて、Ｉ
Ｌ−１０の可能性のある供給源は、小グリア細胞（８６）および星状細胞（４９
）等である。ＩＬ−１０は、重要な抗炎症特性を有する。第一に、ＩＬ−１０は
、単核食細胞系の細胞タイプを含む多くの細胞タイプによるプロ炎症性サイトカ
インの産生を抑制し；実際、ＩＬ−１０は、単球、マクロファージ、および小グ
リア細胞により産生されるＴＮＦ−αおよびＩＬ−１２の産生を抑制することが
示された（３、９、１０、２４、３８）。また、ＩＬ−１０は、Ｔリンパ球にア
ネルギー（不活性もしくは無応答）を起こす際にある役割を果たす（２）。ＩＬ
−１０の抗炎症性機能には、その他、抗原提示プロセスに対する抑制効果が含ま
れる。ＩＬ−１０でマクロファージ/小グリア細胞を処理すると、抗原提示に必
須な分子、例えばＭＨＣクラスII（２４）および共刺激分子Ｂ７−１およびＢ７
−２（３６）の発現がダウンレギュレートした。最後に、抗炎症性分子としての
ＩＬ−１０の役割は、ＩＬ−１０欠損マウスの表現型により裏付けられ；これら
マウスは慢性大腸炎を発症し、これは、プロ炎症性Ｔｈ１細胞によって媒介され
ると思われる（８、２３、３９）。

【００１７】 上述のサイトカインは、誘導性であり、このことは、これらサイトカインがあ
る刺激に応答して産生されることを意味する。対照的に、ＩＬ−６はＢリンパ球
を活性化し（２２）、構成的である。

【００１８】 ［本発明の概要］ 本発明は、炎症性非自己免疫中枢神経系（ＣＮＳ）疾患を有する哺乳類の被検
体を治療するか、または該疾患の症状を軽減する方法であって、該炎症性非自己
免疫ＣＮＳ疾患を治療するのに効果的な量および効果的な期間で、該被検体にグ
ラチラマーアセテート（共重合体１）を投与することを具備する方法を提供する
。

【００１９】 また、本発明は、炎症性非自己免疫ＣＮＳ疾患を発症する危険な状態にある哺
乳類の被検体を治療する方法であって、該被検体に発症し得る炎症性非自己免疫
ＣＮＳ疾患の重症度を最小にするか、または該疾患の発症を予防するのに効果的
な量および効果的な期間で、該被検体にグラチラマーアセテート（共重合体１）
を投与することを具備する方法を含む。

【００２０】 更に、本発明は、マトリクス金属結合タンパク分解酵素の活性を阻害する方法
であって、該マトリクス金属結合タンパク分解酵素をグラチラマーアセテート（
共重合体１）と接触させることを具備する方法を含む。

【００２１】 更に、本発明は、活性化Ｔリンパ球によりサイトカインの産生を抑制する方法
であって、サイトカインの産生を抑制するのに必要な量で、該活性化Ｔリンパ球
をグラチラマーアセテート（共重合体１）と接触させることを具備する方法を含
む。

【００２２】 また、本発明は、炎症性非自己免疫中枢神経系（ＣＮＳ）疾患を治療するため
、もしくは該疾患の症状を軽減するための薬学的組成物であって、哺乳類被検体
において該炎症性非自己免疫ＣＮＳ疾患を治療するのに効果的な量および効果的
な期間で該被検体に投与される薬学的組成物を調製する際のグラチラマーアセテ
ート（共重合体１）の使用を提供する。

【００２３】 更に、本発明は、炎症性非自己免疫ＣＮＳ疾患を発症する危険な状態にある哺
乳類の被検体を治療するための薬学的組成物であって、該被検体に発症し得る炎
症性非自己免疫ＣＮＳ疾患の重症度を最小にするか、もしくは該疾患の発症を予
防するのに効果的な量および効果的な期間で該被検体に投与される薬学的組成物
を調製する際のグラチラマーアセテート（共重合体１）の使用に関する。

【００２４】 更に、本発明は、マトリクス金属結合タンパク分解酵素の活性を阻害するため
の薬学的組成物を調製する際のグラチラマーアセテート（共重合体１）の使用を
含む。

【００２５】 また、本発明は、活性化Ｔリンパ球によりサイトカインの産生を抑制するため
の薬学的組成物を調製する際のグラチラマーアセテート（共重合体１）の使用を
提供する。

【００２６】 ［発明の詳細な説明］ 非自己免疫疾患は、罹患した被検体に対して有意な免疫介在性ダメージがない
ことにより特徴づけられる状態をいう。

【００２７】 しばしば、炎症性疾患は、患部に血流が増大し、その結果、痛みを生じるかも
しれない膨張および温度の上昇に至る状態として特徴づけられる。

【００２８】 本出願で用いられる炎症性非自己免疫疾患は、中枢神経系に影響を及ぼす任意
の疾患を含むが、自己免疫成分を含まず、疾患に罹患した被検体における炎症性
応答と関連している。炎症性非自己免疫疾患には、とりわけ、アルツハイマー病
、パーキンソン病、ＨＩＶ脳症、脳腫瘍、緑内障、神経障害、痴呆、中枢神経系
感染、中枢神経系細菌感染、髄膜炎、発作、および頭部外傷が含まれる。

【００２９】 本発明は、炎症性非自己免疫中枢神経系（ＣＮＳ）疾患を有する哺乳類の被検
体を治療するか、または該疾患の症状を軽減する方法であって、該炎症性非自己
免疫ＣＮＳ疾患を治療するのに効果的な量および効果的な期間で、該被検体にグ
ラチラマーアセテート（ＧＡすなわち共重合体１）を投与することを具備する方
法を含む。

【００３０】 一つの態様において、該哺乳類の被検体はヒトである。

【００３１】 別の態様において、該疾患はアルツハイマー病である。

【００３２】 更なる態様において、該疾患はパーキンソン病である。

【００３３】 更に別の態様において、該疾患はＨＩＶ脳症である。

【００３４】 更なる態様において、該疾患は脳腫瘍である。

【００３５】 別の態様において、該疾患は緑内障である。

【００３６】 更なる態様において、該疾患は神経障害もしくは痴呆である。

【００３７】 別の態様において、該疾患はＣＮＳ感染である。

【００３８】 一つの態様において、該ＣＮＳ感染は細菌性感染である。

【００３９】 別の態様において、該細菌性感染は髄膜炎である。

【００４０】 更なる態様において、該疾患は発作に起因する。

【００４１】 更に別の態様において、該疾患は頭部外傷に起因する。

【００４２】 本発明は、投与ルートが、経口、静脈内、筋内、皮下、腹腔内、経皮、鼻もし
くは直腸である態様を含む。好ましい投与ルートは、経口および皮下注入である
。

【００４３】 一つの態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、約
０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲にある。

【００４４】 別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、約１
ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲にある。

【００４５】 更なる態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、約
５ｍｇ〜約５０ｍｇの範囲にある。

【００４６】 更に別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、
約１０ｍｇ〜約３０ｍｇの範囲にある。

【００４７】 一つの態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、約
２０ｍｇである。

【００４８】 別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、約０
．０５ｍｇ/ｋｇ体重〜約５０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある。

【００４９】 更なる態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、約
０．１ｍｇ/ｋｇ体重〜約１０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある。

【００５０】 更なる態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、約
０．１ｍｇ/ｋｇ体重〜約１．０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある。

【００５１】 別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量は、約０
．３ｍｇ/ｋｇ体重である。

【００５２】 一つの態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の用量は、約３
０日ごとに１回〜約１日に１回の頻度で投与される。好ましい態様において、グ
ラチラマーアセテート（共重合体１）の用量は、約７日ごとに１回〜約１日に１
回の頻度で投与される。より好ましい態様において、グラチラマーアセテート（
共重合体１）の用量は、約１日に１回の頻度で投与される。

【００５３】 別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）は、被検体にサイ
トカインアンタゴニストが更に投与される治療プログラムの一部として投与され
る。

【００５４】 また、本発明は、炎症性非自己免疫ＣＮＳ疾患を発症する危険な状態にある哺
乳類の被検体を治療する方法であって、該被検体に発症し得る炎症性非自己免疫
ＣＮＳ疾患の重症度を最小にするか、もしくは該疾患の発症を予防するのに効果
的な量および効果的な期間で、該被検体にグラチラマーアセテート（共重合体１
）を投与することを含む方法に関する。

【００５５】 一つの態様において、該被検体はヒトであり、該危険な状態は慢性的な医学的
病状に対する遺伝的素因と関連している。

【００５６】 別の態様において、該疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病、緑内障、
痴呆、神経障害、発作および脳腫瘍から成る群より選択される。

【００５７】 更なる態様において、投与ルートは、経口、静脈内、筋内、皮下、腹腔内、経
皮、鼻もしくは直腸である。

【００５８】 更に、本発明は、マトリクス金属結合タンパク分解酵素の活性を阻害する方法
であって、該マトリクス金属結合タンパク分解酵素をグラチラマーアセテート（
共重合体１）と接触させることを具備する方法を含む。

【００５９】 一つの態様において、該マトリクス金属結合タンパク分解酵素はＭＭＰ−９で
ある。

【００６０】 別の態様において、該マトリクス金属結合タンパク分解酵素は被検体中にある
。

【００６１】 一つの態様において、該被検体はヒトである。

【００６２】 更に、本発明は、活性化Ｔリンパ球によりサイトカインの産生を抑制する方法
であって、サイトカインの産生を抑制するのに必要な量で該活性化Ｔリンパ球を
グラチラマーアセテート（共重合体１）と接触させることを具備する方法を提供
する。

【００６３】 一つの態様において、該サイトカインはＩＬ−１である。

【００６４】 別の態様において、該サイトカインはＩＬ−４である。

【００６５】 更なる態様において、該サイトカインはＩＬ−６である。

【００６６】 更に別の態様において、該サイトカインはＩＬ−１０である。

【００６７】 更なる態様において、該サイトカインはＩＬ−１２である。

【００６８】 別の態様において、該サイトカインがＩＬ−１３である。

【００６９】 更なる態様において、該サイトカインはＴＮＦ−ａである。

【００７０】 一つの態様において、該サイトカインは被検体中にある。

【００７１】 別の態様において、該被検体はヒトである。

【００７２】 また、本発明は、炎症性非自己免疫中枢神経系（ＣＮＳ）疾患を治療するため
、もしくは該疾患の症状を軽減するための薬学的組成物であって、哺乳類被検体
において該炎症性非自己免疫ＣＮＳ疾患を治療するのに効果的な量および効果的
な期間で該被検体に投与される薬学的組成物を調製する際のグラチラマーアセテ
ート（共重合体１）の使用を含む。

【００７３】 該使用の一つの態様において、該哺乳類の被検体はヒトである。

【００７４】 該使用の別の態様において、該疾患はアルツハイマー病である。

【００７５】 該使用の更なる態様において、該疾患はパーキンソン病である。

【００７６】 該使用の更に別の態様において、該疾患はＨＩＶ脳症である。

【００７７】 該使用の更なる態様において、該疾患は脳腫瘍である。

【００７８】 該使用の別の態様において、該疾患は緑内障である。

【００７９】 該使用の更なる態様において、該疾患は神経障害もしくは痴呆である。

【００８０】 該使用の別の態様において、該疾患はＣＮＳ感染である。

【００８１】 該使用の一つの態様において、該ＣＮＳ感染は細菌性感染である。

【００８２】 該使用の別の態様において、該細菌性感染は髄膜炎である。

【００８３】 該使用の更なる態様において、該疾患は発作に起因する。

【００８４】 該使用の更に別の態様において、該疾患は頭部外傷に起因する。

【００８５】 本発明は、投与ルートが、経口、静脈内、筋内、皮下、腹腔内、経皮、鼻もし
くは直腸である使用の態様を含む。好ましい投与ルートは、経口および皮下注入
である。

【００８６】 該使用の一つの態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与
量は、約０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲にある。

【００８７】 該使用の別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量
は、約１ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲にある。

【００８８】 該使用の更なる態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与
量は、約５ｍｇ〜約５０ｍｇの範囲にある。

【００８９】 該使用の更に別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投
与量は、約１０ｍｇ〜約３０ｍｇの範囲にある。

【００９０】 該使用の一つの態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与
量は、約２０ｍｇである。

【００９１】 該使用の別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量
は、約０．０５ｍｇ/ｋｇ体重〜約５０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある。

【００９２】 該使用の更なる態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与
量は、約０．１ｍｇ/ｋｇ体重〜約１０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある。

【００９３】 該使用の更なる態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与
量は、約０．１ｍｇ/ｋｇ体重〜約１．０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある。

【００９４】 該使用の別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量
は、約０．３ｍｇ/ｋｇ体重である。

【００９５】 該使用の一つの態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の用量
は、約３０日ごとに１回〜約１日に１回の頻度で投与される。該使用の好ましい
態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）の用量は、約７日ごとに
１回〜約１日に１回の頻度で投与される。該使用のより好ましい態様において、
グラチラマーアセテート（共重合体１）の用量は、約１日に１回の頻度で投与さ
れる。

【００９６】 該使用の別の態様において、グラチラマーアセテート（共重合体１）は、被検
体にサイトカインアンタゴニストが更に投与される治療プログラムの一部として
投与される。

【００９７】 また、本発明は、炎症性非自己免疫ＣＮＳ疾患を発症する危険な状態にある哺
乳類の被検体を治療するための薬学的組成物であって、該被検体に発症し得る炎
症性非自己免疫ＣＮＳ疾患の重症度を最小にするか、もしくは該疾患の発症を予
防するのに効果的な量および効果的な期間で該被検体に投与される薬学的組成物
を調製する際のグラチラマーアセテート（共重合体１）の使用に関する。

【００９８】 該使用の一つの態様において、該被検体はヒトであり、該危険な状態は慢性的
な医学的病状に対する遺伝的素因と関連している。

【００９９】 該使用の別の態様において、該疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病、
緑内障、痴呆、神経障害、発作および脳腫瘍から成る群より選択される。

【０１００】 該使用の更なる態様において、投与ルートは、経口、静脈内、筋内、皮下、腹
腔内、経皮、鼻もしくは直腸である。

【０１０１】 更に、本発明は、マトリクス金属結合タンパク分解酵素の活性を阻害するため
の薬学的組成物を調製する際のグラチラマーアセテート（共重合体１）の使用を
含む。

【０１０２】 該使用の一つの態様において、該マトリクス金属結合タンパク分解酵素はＭＭ
Ｐ−９である。

【０１０３】 該使用の別の態様において、該マトリクス金属結合タンパク分解酵素は被検体
中にある。

【０１０４】 該使用の一つの態様において、該被検体はヒトである。

【０１０５】 更に、本発明は、活性化Ｔリンパ球によりサイトカインの産生を抑制するため
の薬学的組成物を調製する際のグラチラマーアセテート（共重合体１）の使用を
提供する。

【０１０６】 該使用の一つの態様において、該サイトカインはＩＬ−１である。

【０１０７】 該使用の別の態様において、該サイトカインはＩＬ−４である。

【０１０８】 該使用の更なる態様において、該サイトカインはＩＬ−６である。

【０１０９】 該使用の更に別の態様において、該サイトカインはＩＬ−１０である。

【０１１０】 該使用の更なる態様において、該サイトカインはＩＬ−１２である。

【０１１１】 該使用の別の態様において、該サイトカインがＩＬ−１３である。

【０１１２】 該使用の更なる態様において、該サイトカインはＴＮＦ−ａである。

【０１１３】 該使用の一つの態様において、該サイトカインは被検体中にある。

【０１１４】 該使用の別の態様において、該被検体はヒトである。

【０１１５】 ＣＯＰＡＸＯＮＥ（登録商標）は、グラチラマーアセテート（以前は共重合体
−１として公知）のブランド名である。ＣＯＰＡＸＯＮＥ（登録商標）の有効成
分であるグラチラマーアセテートは、４つの天然存在アミノ酸：Ｌ−グルタミン
酸、Ｌ−アラニン、Ｌ−チロシン、およびＬ−リジンを、それぞれ0.141、0.427
、0.095、および0.338の平均モル分率で含有する合成ポリペプチドの酢酸塩から
成る。グラチラマーアセテートの平均分子量は、4,700〜11,000ダルトンである
。化学的にグラチラマーアセテートは、Ｌ−アラニン、Ｌ−リジンおよびＬ−チ
ロシンとＬ−グルタミン酸の重合体、酢酸塩と称される。その構造式は、以下の
とおりである： (Ｇｌｕ，Ａｌａ，Ｌｙｓ，Ｔｙｒ)_X・ＸＣＨ₃ＣＯＯＨ (Ｃ₅Ｈ₉ＮＯ₄・Ｃ₃Ｈ₇ＮＯ₂・Ｃ₆Ｈ₁₄Ｎ₂Ｏ₂・Ｃ₉Ｈ₁₁ＮＯ₃)_X・ＸＣ₂Ｈ₄Ｏ₂ ＣＡＳ − １４７２４５−９２−９ （９２）。

【０１１６】 共重合体１（Ｃｏｐ−１）は、薬学的に許容し得る担体を含有する薬学的組成
物に製剤化することができる。ここで使用される「薬学的に許容し得る担体」に
は、任意かつ全ての溶媒、アジュバント、沈殿防止剤、乳化剤、分散媒、被覆剤
、抗菌および抗真菌剤、等張および吸収遅延剤、甘味料、香味増強剤などが含ま
れる。薬学的に許容し得る担体は、調味料、甘味料、および特定の経口治療組成
物を調製するために必要とされ得る緩衝液および吸収剤等のその他の材料を含む
がこれらに限定されない広範な材料から調製することができる。このような媒質
および薬剤の薬学的に活性な物質との使用は、当該技術分野で周知である。慣用
的な媒質もしくは薬剤が有効成分と不適合である場合を除いては、治療組成物に
おけるこのような媒質および薬剤の使用が想定される。

【０１１７】 共重合体１は、当業者に利用可能な手法を用いて、当該技術分野で公知の任意
の形態に製剤化することができる。共重合体１は、他の食物の形態と混合して、
固体、半固体、懸濁もしくは乳濁の形態で消費されてもよい。一つの態様におい
て、当該組成物は、当業者に利用可能な技術を用いて、カプセル剤もしくは錠剤
に製剤化される。しかし、本組成物は、別の簡便な形態、例えば注入可能な液剤
もしくは懸濁剤、スプレー用液剤もしくは懸濁剤、ローション剤、ガム、ロゼン
ジ、食物もしくはスナックアイテムに製剤化されてもよい。食物、スナック、ガ
ムもしくはロゼンジアイテムは、任意の経口摂取可能な成分、例えば、甘味料、
調味料、オイル、デンプン、タンパク質、果実もしくは果実抽出物、野菜もしく
は野菜抽出物、穀物、動物性脂肪もしくはタンパク質を含有することができる。
従って、本組成物は、シリアル、スナックアイテム、例えば、チップ、バー、ガ
ムドロップ、咀嚼可能なキャンディー、またはゆっくり溶解するロゼンジに製剤
化することができる。また、共重合体１は、適切な製剤および計量された投薬ユ
ニットを用いて、ドライ散剤もしくは計量された用量の吸入用液剤、または点鼻
薬および鼻用スプレーとして投与することもできる。

【０１１８】 当業者であれば、本発明の精神から逸脱することなく、共重合体１において構
造的に関連のあるアミノ酸を容易に置換することができる。本発明は、チロシン
、グルタミン酸、アラニンもしくはリジンに構造的に関連のあるアミノ酸を含有
し、かつ誘導に対してポリクローナル抗体の産生を刺激する能力を有するポリペ
プチドおよびペプチドを含む。このような置換は、ＣＮＳ疾患の症状を抑制もし
くは軽減する能力において実質的に同等の生物学的活性を保持する。これらの置
換は、構造的に関連のあるアミノ酸の置換、例えば、チロシン、グルタミン酸、
アラニンもしくはリジンとほぼ同じ電荷、疎水性および大きさを有するアミノ酸
の置換である。例えば、リジンはアルギニンおよびヒスチジンと構造的に関連が
あり；グルタミン酸はアスパラギン酸と構造的に関連があり；チロシンはセリン
、トレオニン、フェニルアラニンおよびトリプトファンと構造的に関連があり；
アラニンはバリン、ロイシンおよびイソロイシンと構造的に関連がある。これら
およびその他の保存的な置換、例えば構造的に関連のある合成アミノ酸は、本発
明により想定される。

【０１１９】 更に、共重合体１は、ｌ−もしくはｄ−アミノ酸から構成することができる。
当業者に公知のとおり、ｌ−アミノ酸は、多くの天然タンパク質に存在する。し
かし、ｄ−アミノ酸は、商業的に入手可能なものであり、共重合体１を作成する
ために使用されるアミノ酸の幾つかもしくは全てをｄ−アミノ酸と置換すること
ができる。本発明は、ｌ−アミノ酸から本質的に成る共重合体１、並びにｄ−ア
ミノ酸から本質的に成る共重合体１を想定する。

【０１２０】 ［実験の詳細］ 手法 ＰＢＭＣの単離 以前に記載されたとおり、正常なボランティアからヘパリンを加えた血液を集
め、それをフィコール−ハイパーク（Pharmacia Biotech, Mississauga, Ontari
o）遠心にかけ、末梢血液の単核性細胞（ＰＢＭＮＣｓ）を得た（１５）。細胞
を２回洗浄した後、水平T-25フラスコ（Nunc, Becton Dickinson, Mississauga,
Ontario）内で、血清フリー培地ＡＩＭ−Ｖ（GIBCO/BRL）に、100万〜200万/ｍ
Ｌの密度で懸濁し、それに１ｎｇ/ｍＬの抗ＣＤ３抗体（OKT3, compliments of
Jack Antel, Montreal, Canada）を加えた。抗ＣＤ３抗体を添加してから３時間
後、付着した単球を死滅させるために、T-25フラスコを水平から垂直の位置に置
いた。そのほとんどがリンパ球である浮遊細胞を、３７℃で７２時間放置した。
この７２時間の間、ＭＮＣ集団をフローサイトメトリー分析することにより、Ｃ
Ｄ３＋細胞が全細胞集団の約９０％を構成し、約６０％ＣＤ４＋および３０％Ｃ
Ｄ８＋の比率であることが示された。Ｂリンパ球（ＣＤ１９＋）およびＮＫ細胞
（ＣＤ５６＋）は、全ＭＮＣ集団の５〜６％を構成していたが、単球（ＣＤ１４
＋）は検出されなかった。これ以降、ＭＮＣ集団における細胞の大部分がＴリン
パ球であることから、これらをＴリンパ球と呼ぶことにする。

【０１２１】 共重合体１処理 ＣＤ３ライゲーションの開始から３時間後、即ちT-25フラスコを水平から垂直
の位置に変えたときに、リン酸緩衝化塩類溶液に希釈した共重合体１（１〜50μ
ｇ/ｍＬ）を培養物に添加した。細胞を３７℃で６９時間放置し、その後細胞を
集め、計数し、フレッシュなＡＩＭ−Ｖに500,000細胞/ｍＬの密度で再懸濁した
。共重合体１による２回目の処理を施した後、細胞を３７℃で更に３時間放置し
た。その後、500μＬ（250,000細胞）の懸濁液を、後述の泳動アッセイのために
取っておいた。あるいは、100μＬ（50,000細胞）の細胞懸濁液を、予め小グリ
ア細胞もしくはＵ９３７単球様細胞（下記参照）を含有する９６ウェルプレート
の各ウェルに添加した。この実験は、Ｔリンパ球を共重合体１で７２時間処理す
ることを含み、共重合体１は２度の時点で投与された。共重合体１処理の７２時
間後、Ｔリンパ球の純度は、未処理のコントロールの純度と同じであった。幾つ
かの実験において、組換えＩＦＮβ−１ｂをポジティブコントロールとして使用
した。

【０１２２】 単球リッチな培養物 単球リッチな培養物を産生するために、２×10⁵ ＰＢＭＣを100μＬのＡＩＭ
−Ｖ培地に懸濁し、９６ウェルプレートの各ウェルに入れた。１時間後、浮遊細
胞を除去し、付着性の単球を残した。フレッシュな100μＬのＡＩＭ−Ｖをウェ
ルごとに添加し、培養物を３７℃に維持した。共重合体１を、９６ウェルプレー
ト中の細胞に直接添加した。

【０１２３】 ＭＭＰsアッセイ 細胞によるＭＭＰsの産生が共重合体１によって影響を受けるか否か検討する
にあたり、ＭＭＰsは分泌酵素であるため、細胞のコンディション培地を使用し
た。本来は、T-25フラスコ内に含有される浮遊Ｔリンパ球のために、１ｍＬのコ
ンディション培地を吸い取り、１分間遠心して細胞を除去した。上清を集め、４
×ゲルローディングＳＤＳ緩衝液と３．１比率（ｖ/ｖ）で混合し、ザイモグラ
フィーアッセイで使用した。同様に、９６ウェルプレートのウェル内の単球のた
めに、コンディション培地を集め、ミクロ遠心し（microfuge）、４×ゲルロー
ディングＳＤＳ緩衝液と混合した。

【０１２４】 ザイモグラフィーは、ゼラチンが更にゲルに添加される点を除いて、本質的に
ＳＤＳ−ＰＡＧＥである（７７、８２）。ＳＤＳ−ＰＡＧＥにおいてタンパク質
を分子量に基いて溶解した後、ＳＤＳを除去するためにゲルをTriton X-100緩衝
液で洗浄し、これによりタンパク質が再生される。カルシウム含有「反応緩衝液
」（７７）において、ゼラチナーゼ（ＭＭＰ−２および−９）は、そのすぐ近傍
でゼラチンを分解する（ＭＭＰsの他のメンバーも著量で存在すれば検出される
）。全タンパク質に結合するクマシーブルーで染色し、脱染した後、ゼラチナー
ゼを含有する領域は、そのすぐ近傍でゼラチンが分解されたために、ダークなバ
ックグラウンドに対して明るいバンドとして現れた。ＭＭＰバンドのサイズは、
細胞により産生されるＭＭＰ量を反映しており、このことはＮＩＨイメージ分析
ソフトウェアにより記録された。泳動バンドの分子量が、ＭＭＰの種類を明らか
にし、これにより、以前のウェスタンブロット分析および免疫沈降反応が確かで
あることが確認された（７７、８２）。

【０１２５】 ザイモグラフィーにおける細胞コンディション培地の分析は、特定の培養によ
り産生されるＭＭＰs量を反映したものである。ＭＭＰタンパク質レベルに対す
る共重合体１の影響とは無関係に、共重合体１が、ＭＭＰs活性の阻害剤である
か否かを決定するために、ＢＨＫ細胞由来の上清（多くの研究室でスタンダード
なＭＭＰs供給源である）、またはＴ−リンパ球由来の上清を、ゼラチン含有Ｓ
ＤＳ−ＰＡＧＥで電気泳動により溶解した。ゼラチン分解活性の進行する間に、
共重合体１を上述のTriton-100洗浄液および「反応緩衝液」に添加した。ＭＭＰ
活性の阻害剤は、ゼラチナーゼによるゼラチンの分解を妨害し、得られたゼラチ
ナーゼのバンドサイズは、阻害剤なしに含まれるゼラチナーゼのバンドサイズと
比べて小さい。

【０１２６】 移動アッセイ Ｔリンパ球の移動能力を検討するために、500μＬの2.5％胎仔ウシ血清（ＦＣ
Ｓ）含有ＡＩＭ−Ｖ中の２×10⁵ Ｔリンパ球を、ボイデンチャンバー（Collabor
ative Biomedical Products, Bedford, Maryland）のトップコンパートメントに
播いた。このチャンバーは、上面をフィブロネクチンでプレコーティングされた
ポリカーボネートのメンブレンフィルター（直径９ｍｍ、孔３μｍ）により仕切
られた２つのコンパートメントから成る。フィブロネクチンは、基底膜を模倣す
るために使用した。

【０１２７】 移動チャンバーの底部コンパートメントは、10％ＦＣＳ補充ＡＩＭ−Ｖを含有
し；底部チャンバーにおける高濃度のＦＣＳは、方向性勾配として機能した（７
７）。３７℃で５時間の後、低部チャンバーの中味を集め、移動したＴリンパ球
の数をコールターカウンター（Coulter Counter）Ｚ１で数えた。

【０１２８】 小グリア細胞 胎児小グリア細胞を、Lee et alにより記載されたプロトコールを用いて法的
および治療的流産で得られた脳から単離した（４１）。試料の在胎齢は、１４週
から２０週までに及んでいた。９５％の純度を超える2.5×10⁴ 小グリア細胞を
、９６ウェルプレートのウェルごとに平板培養した。小グリア細胞の培養培地は
、５％ＦＣＳ、0.1％デキストロースを補充した最少必須培地であった。共培養
ののために、ＡＩＭ−Ｖ中に50,000のＴリンパ球を含有する100μＬ（上述）を
、小グリア細胞の培養培地に25,000の小グリア細胞（またはＵ９３７単球様細胞
、下記参照）を予め含有する９６ウェルプレートの各ウェルに添加した。２４時
間後、コンディション培地を、ＥＬＩＳＡによるサイトカイン定量のために集め
た。

【０１２９】 成人の小グリア細胞を、難治性てんかんを治療するために外科的切除を受けた
患者の切除された脳組織から単離した。９５％の純度を超える小グリア細胞を、
前述のプロトコールを用いて得た（９０）。胎児の対応部分について記載したの
と同じ方法で、Ｔリンパ球との相互作用のために細胞を使用した。

【０１３０】 また、ヒトのプロ単球様細胞株Ｕ９３７を使用した。この細胞株のメンバーは
、５０ｎｇ/ｍＬのプロテインキナーゼＣアクチベーター、ホルボール−１２−
ミリステート−１３−アセテート（ＰＭＡ）（０〜４８時間）、および１００Ｕ
/ｍＬのインターフェロンγ（ＩＦＮγ）（４８〜７２時間）で連続して処理す
ると、形態学および細胞表面分子の発現による評価において小グリア細胞のよう
になる。

【０１３１】 ＩＦＮγ処理から１〜３日後の細胞を使用した。小グリア細胞と同様、25,000
のＰＭＡ/ＩＦＮγ処理Ｕ９３７細胞を予め含有する９６ウェルプレートの各ウ
ェルに、ＡＩＭ−Ｖ中の50,000のＴリンパ球を添加し、共培養から２４時間後に
コンディション培地を集めた。

【０１３２】 サイトカインおよびケモカインアッセイ 小グリア細胞−Ｔリンパ球共培養のコンディション培地におけるサイトカイン
タンパク質レベルを、BioSource International（Montreal, Canada）から購入
した酵素結合イムノソルベント検定法（ＥＬＩＳＡ）キットを用いて測定した。

【０１３３】 ケモカインおよびケモカインレセプターの発現は、白血球のＣＮＳへの流入を
制御する重要なメカニズムであると現在認識されている。多発性硬化症患者の病
巣における、ケモカインＩＰ−１０およびそのレセプターＣＸＣＲ３のアップレ
ギュレーションが有名である（７４）。共重合体１がＣＸＣＲ３レセプターの発
現に影響を及ぼすか否か決定するために、フローサイトメトリーを使用した。活
性化Ｔリンパ球もしくはＵ９３７細胞は、２５μｇ/ｍＬの共重合体１で１〜３
日間処理した。

【０１３４】 結果 ＭＭＰsに対する共重合体１の影響 活性化Ｔリンパ球は、培養培地にＭＭＰ−９を分泌し、これは抗ＣＤ３ライゲ
ーションの２〜３日の間にピークに達した（図１）。抗ＣＤ３活性化Ｔリンパ球
を共重合体１（２５μｇ/ｍＬ、１日、２日もしくは３日）で処理しても、コン
トロールと比較してＭＭＰ−９の産生に影響を及ぼすことはなく（図１）、高濃
度の共重合体１（５０μｇ/ｍＬ）で処理しても影響を及ぼすことはなかった。
また、ＭＭＰ−９の単球産生も、共重合体１による影響を受けなかった。対照的
に、以前の報告と一致して（７７）、ＩＦＮβ−１ｂで処理されたＴリンパ球は
、コントロールのＴリンパ球と比較してＭＭＰ−９の産生が低下した（図１）。

【０１３５】 ゼラチナーゼバンドのサイズ（ＭＭＰ−９）は、コントロールと比較して、共
重合体１により用量依存的に小さくなるため、共重合体１がＭＭＰ阻害活性を有
することが、図２により実証される。対照的に、ＭＭＰ−９の産生を阻害するＩ
ＦＮβ−１ｂ（図１）は、ＭＭＰ酵素活性の直接的な阻害剤ではない。これらの
結果は、共重合体１がＭＭＰ酵素活性の阻害剤であることを示す。

【０１３６】 細胞移動に対する共重合体１の影響 図３Ａは、Ｔリンパ球を共重合体１（２５μｇ/ｍＬ）で１日、２日もしくは
３日間前処理しても、共重合体１がＴリンパ球の移動を阻害しないことを示す。
同様に、Ｔリンパ球を種々の濃度の共重合体１（１〜５０μｇ/ｍＬ）で３日間
前処理しても、活性化Ｔ−リンパ球のトランス移動に影響を及ぼすことはなかっ
た（図３Ｂ）。

【０１３７】 別シリーズの実験において、１０ｎｇ/ｍＬの単球化学誘導タンパク質（ＭＣ
Ｐ）−１もしくはＭＣＰ−３を底部チャンバーに置き、化学走性シグナルとして
機能させた。このような条件下、グラチラマーで前処理したＴリンパ球の移動速
度も、コントロールの移動速度と変らなかった。

【０１３８】 Ｔリンパ球/小グリア細胞の培養に対する共重合体１の影響 ＰＭＡ/ＩＦＮγ処理されたＵ９３７細胞も、抗ＣＤ３活性化Ｔリンパ球も、
単独では、検出可能なレベルのＴＮＦ−αを産生しなかった。しかし、ＩＬ−１
０は、Ｕ９３７で検出されたが、Ｔリンパ球のコンディション培地では検出され
なかった（図４）。２４時間共培養した際、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１０のレベ
ルに相当な増加が観察された。ＰＭＡ/ＩＦＮγ処理されたＵ９３７細胞と遭遇
する前にＴ−リンパ球を共重合体１で処理すると、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１０
の産生は用量依存的に低下した（図４）。ＰＭＡ/ＩＦＮγ処理したＵ９３７細
胞を共重合体１で前処理しても、その後のＴリンパ球−Ｕ９３７相互作用におけ
るサイトカイン産生に影響を及ぼすことがなかったため、共重合体１の影響は、
主としてＴリンパ球に対するものであると思われる。

【０１３９】 また、活性化Ｔリンパ球とＰＭＡ/ＩＦＮγ処理したＵ９３７との相互作用は
、２つのＴｈ２様抗炎症性サイトカイン、ＩＬ−４およびＩＬ−１３のアップレ
ギュレーションにつながった（図５）が、その産生量は、ＩＬ−１０もしくはＴ
ＮＦ−αよりおよそログ倍低かった。Ｔリンパ球とＰＭＡ/ＩＦＮγ処理したＵ
９３７を共培養した際、このＩＬ−４およびＩＬ−１３の産生は、共重合体１に
より有意に低下し、この低下は、プロ炎症性サイトカインＩＬ−１２についても
観察された（図５）。要するに、抗ＣＤ３ライゲートＴリンパ球を共重合体１で
前処理（７２時間）すると、Ｔリンパ球−Ｕ９３７相互作用で調査された全ての
誘導性サイトカインが抑制されるという結果に至った。

【０１４０】 共重合体１は、抗ＣＤ３処理後に形成されるＴリンパ球集合体の数もしくは大
きさを減少させないため、Ｔリンパ球とＵ９３７を共培養した際のサイトカイン
産生の低下に対する共重合体１の影響は、Ｔリンパ球の増殖が低下した結果では
なく、このことは、共重合体１がＴリンパ球の増殖に有意に影響を及ぼさないこ
とを示している。実際、共重合体１処理の７２時間後、細胞の総数を数えると、
細胞数は、コントロール（24±２×10³）に対し、共重合体１（５、25、および5
0μｇ/ｍＬ）で処理したグループ（それぞれ、26±１×10³、26±２×10³、およ
び22±１×10³）で同等であった。全ての試験状況において、同数のＴリンパ球
を小グリア細胞もしくはＵ９３７細胞に添加した。

【０１４１】 胎児の小グリア細胞は、単独では、検出可能な量のＩＬ−１０もしくはＴＮＦ
−αを培養培地に分泌しない；よって、これらの細胞は、単独の成人の小グリア
細胞と同様にみえる（１４、１５）。活性化Ｔリンパ球と共培養した際、著量の
ＩＬ−１０およびＴＮＦ−αを産生した（それぞれ、139±４および1068±68ｎ
ｇ/ｍＬ、図６）。共重合体１で前処理されたＴリンパ球について、Ｔ−リンパ
球−小グリア細胞の共培養で得られるＩＬ−１０およびＴＮＦ−αは、有意に減
少した（図６）。実際、共重合体１による低下は、用量依存的に起こった（図６
）。

【０１４２】 Ｔリンパ球とヒト神経細胞由来の成人小グリア細胞との相互作用は、検出不可
能なレベルからＩＬ−１０およびＴＮＦ−αのアップレギュレーションにつなが
り、このことはＩＬ−１βについても同じであった。ＩＬ−６は、小グリア細胞
によって高レベルで構成的に発現した（図７）。Ｔリンパ球を共重合体１で前処
理すると、誘導性サイトカイン（ＩＬ−１β、ＩＬ−１０およびＴＮＦ−α）が
用量依存的に阻害された。同様に、共重合体１は、構成的サイトカイン、ＩＬ−
６の発現を低下させた（図７）。

【０１４３】 （５０Ｕ/ｍＬ ＩＬ−２の存在下でさえ）不活性なＴリンパ球と小グリア細胞
の共培養は、ＴＮＦ−αの産生を増大させる結果にならないため、Ｔリンパ球が
、抗ＣＤ３抗体で活性化されなければならないことに注目されたい。更に、共重
合体１を共培養時に添加しても、サイトカイン産生に対する減少効果は起こらな
いため、Ｔリンパ球は共重合体１で前処理されることが必要である。

【０１４４】 成人の小グリア細胞がインビトロで活性化Ｔリンパ球と遭遇すると、小グリア
細胞の形態が、分岐/二極性形態からアメーバ状の丸みを帯びた形態に変化する
ことを図８は実証する（１４）。しかし、Ｔリンパ球を共重合体１で前処理する
と、Ｔリンパ球と小グリア細胞を共培養した際の小グリア細胞の形態変化は、減
少した。このことは、活性化Ｔリンパ球と共培養した際のヒト小グリア細胞もし
くはＰＭＡ/ＩＦＮγ処理Ｕ９３７細胞についても同じであった。結局、小グリ
ア細胞が形態変化しないということは、Ｔリンパ球の共重合体１による前処理が
、小グリア細胞と相互作用する能力を低下させることを示唆する。

【０１４５】 ケモカインに対する共重合体１の影響 活性化Ｔリンパ球を共重合体１で処理しても、ＣＸＣＲ３の発現が、処理から
１〜３日後に低下しないことを図９は示す；このネガティブな結果は、Ｕ９３７
細胞株についても同じであった（図１０）。また、ＣＸＣＲ４の発現を評価した
ところ、共重合体１処理に対して応答しないことが分かった。

【０１４６】 議論 共重合体１、すなわちグラチラマーアセテート（ＧＡ）は、チロシン、アラニ
ン、グルタミン酸、およびリジンのランダムな合成線状共重合体の不均一混合物
である。この薬剤は、多発性硬化症を治療する際に効果的である。

【０１４７】 多発性硬化症における共重合体１の作用機序は、免疫応答を抑制する能力に基
くものであり、これは、当該疾患の臨床的症状発現に特異的に影響を及ぼす。本
発明は、共重合体１が、ＣＮＳ抗炎症および再髄鞘形成などの別の生物学的活性
を有することを実証する。これらの発見により、多発性硬化症以外の更なる適応
症に共重合体１の潜在的な治療効果を広げる可能性が高まる。

【０１４８】 種々の遺伝的背景のＭＨＣクラスII分子に結合し、その結果、Ｔ細胞応答を阻
害する共重合体１の能力は、共重合体１が一般的な免疫抑制剤として機能し得る
という仮説につながった。

【０１４９】 インビボ動物モデルから得られた結果、および共重合体１で治療された多発性
硬化症患者から得られた結果より、多くの場合、多発性硬化症もしくはＥＡＥに
影響を及ぼす投薬プロトコールにおける共重合体１の投与は、非特異的免疫抑制
を誘導しないことが示唆される。むしろ、多発性硬化症およびＥＡＥにおける共
重合体１の有益な治療効果は、おそらく抗原特異的サプレッサーＴ細胞により媒
介される。

【０１５０】 一方、種々のプロトコールを用いた共重合体１の投与（高い用量および/また
は頻度の高い投与）は、インビボで正常反応性（alloreactivity）を妨害し、実
験的ＧＶＨＤを予防し、マウスモデルにおける皮膚および甲状腺の移植（engraf
ment）に対して有益な効果を有していることが示された。これら共重合体１の効
果は、抗原呈示細胞上のＭＨＣ分子による呈示用抗原と競合する共重合体１の能
力によっておそらく媒介され、これは用量依存的であることが示されている。こ
の仮説に対する別の証拠は、Ｄ−共重合体１が、マウスＧＶＨＤモデルにおいて
非常に活性があるという事実である。実際、Ｄ−共重合体１は、Ｌ−共重合体１
より１０倍高い活性を有する。従って、多発性硬化症の治療に用いたよりも高い
用量の共重合体１を用いることにより、一般的な免疫抑制剤として機能し、これ
により多発性硬化症以外の適応症に対して臨床的に適切なものとすることができ
る。

【０１５１】 抗原呈示細胞上のクラスII分子に対する共重合体１の強い結合を考慮して、共
重合体１がＴ細胞介在性免疫応答を妨害できるか否かを調査するための研究を計
画した。共重合体１は、インビトロでＭＢＰに対するＴ細胞の応答を用量依存的
に阻害することが報告されている（５、１１、５８、６０、７８、８０）。共重
合体１とＭＢＰの間の交叉反応のため、この阻害効果は、ＭＨＣクラスII分子へ
の結合に対する競合だけでなく、Ｔ細胞認識に関連するメカニズムにも起因し得
る（１、７３）。しかし、共重合体１の阻害能力は、非交叉反応性Ｔ細胞反応に
も及ぶことが示された（７、６０、７９、８３）。この場合、阻害効果は、おそ
らくＭＨＣクラスII分子への結合に対する競合によるものである。

【０１５２】 共重合体１は、ＭＨＣ拘束に関係なく（無差別の結合）、マウスおよびヒトの
抗原呈示細胞に用量依存的に結合する（２９、３０）。共重合体１のＭＨＣクラ
スII分子への結合は、抗クラスII抗体を用いた特異的阻害により実証された（３
０）。種々の精製ＨＬＡ−ＤＲ分子と共重合体１との直接的相互作用に関する証
拠が、最近報告された（２８）。更に、共重合体１は競合して、ＭＨＣクラスII
分子に既に結合した抗原と置き換わることが示された（３０、３１、７９）。Ｍ
ＨＣクラスII分子への結合は、迅速かつ効率的であり（３０）、この相互作用に
処理は必要でないと思われる（２９）。

【０１５３】 近年の研究により、共重合体１により再発−鎮静している多発性硬化症患者か
ら単離したリンパ球は、未処理の多発性硬化症患者の細胞と比較すると、フィブ
ロネクチンバリアを横切って移動する能力が有意に低下することが観察された（
５９）。フィブロネクチンは、基底膜のモデルとして使用された。フィブロネク
チンバリアを横切る白血球の移動は、マトリクス金属結合タンパク分解酵素の発
現と関連しているため（４２、７７、８８）、ＭＭＰsに対する共重合体１の影
響を評価することは関心が高かった。本発明は、共重合体１がＭＭＰ−９酵素の
活性を阻害するが、Ｔリンパ球もしくは単球によってＭＭＰ−９の産生を低下さ
せないことを示す。この阻害は、リンパ球のトランス移動を変化させない。

【０１５４】 共重合体１がＭＭＰ酵素活性の阻害剤であるという発見は、白血球の移動に無
関係なＭＭＰ介在性効果と関連している。例えば、多くのサイトカイン（例えば
ＴＮＦ−αおよびＴＧＦ−α）、サイトカインレセプター（例えばＴＮＦＲs、
ＩＬ−６Ｒα）、および接着分子（例えばＬ−セレクチン、ＶＣＡＭ）は、前駆
体で合成され、前駆体は、活性剤となるのにタンパク分解処理を必要とする。こ
れら「コンバターゼ」もしくは「シェダーゼ（shedase）」の正体は、未解明の
ままであり、おそらく金属結合タンパク分解酵素（アダマリシン（adamalysins
））の別のグループのメンバーであるが、ＭＭＰは、前駆分子（例えばプロ−Ｔ
ＮＦ−α）を活性型（例えばＴＮＦ−α）に変換する能力を有するため、ＣＮＳ
内のプロ炎症性環境をつくる（９１）。本発明は、共重合体１によるＭＭＰ酵素
活性の阻害を実証し、この阻害は、プロサイトカインのサイトカインへの変換を
減少させ、その結果、非炎症性環境（milieu）に至る。

【０１５５】 多くの細胞が、生存のために細胞外マトリクス（ＥＣＭ）分子への付着に依存
していることが充分に報告されている。これら細胞の細胞外マトリクス基質から
の解離は、結果として、「anoikis」と称される現象、アポトーシスに至る（６
４、６５）。ＭＭＰsは、細胞外マトリクスのターンオーバーの生理学的メディ
エイターであるため、ＭＭＰの異常発現および活性は、細胞外マトリクスの完全
な状態を混乱させ、その結果、細胞接着および細胞死を変化させることができる
（８５）。グラチラマーアセテート（共重合体１）は、ＭＭＰ活性の阻害剤とし
て作用することにより、細胞外マトリクスの混乱を防止し、細胞外マトリクスか
らの細胞の解離を防止することができる。その結果、神経細胞の死が減少し、こ
れにより疾患の進行が遅くなる。また、ＭＭＰは、細胞の分化、移動および炎症
のように多様なプロセスを管理する細胞−ＥＣＭ相互作用に関係している。発達
する神経系において、ＭＭＰファミリーのメンバーは、脈管形成、神経成長円錐
の伸長、および稀突起神経膠細胞によるプロセス形成を制御する。

【０１５６】 また、ＭＭＰsは、抗炎症性サイトカインの産生を抑制することができ、この
ことは、ＥＡＥ動物をＭＭＰ阻害剤で処理すると、抗炎症性サイトカインＩＬ−
４がＣＮＳ内で増加するという発見によって提案されたが（４３）、この活性の
メカニズムはまだ説明されていない。ＣＮＳ内での異常なＭＭＰの発現の結果に
は、その他、ミエリンの破壊における直接的な役割（４８）、並びに炎症の伝播
につながる脳炎誘発性ミエリンフラグメントの形成（１６、５６）が含まれる。
共重合体１がＭＭＰ酵素活性を阻害するという本発見は、これら観察に関連があ
り、ＣＮＳの抗炎症性環境（milieu）につながり得る。

【０１５７】 Ｔリンパ球が小グリア細胞と遭遇することが、多くのサイトカインの重要な供
給源である。Ｔリンパ球を共重合体１で前処理すると、Ｔリンパ球−小グリア細
胞（もしくはＵ９３７細胞）相互作用で検査した全サイトカインが実質的に減少
した。

【０１５８】 免疫デビエイションは、近年注目を集めた概念である。この概念は、中立（un
committed）Ｔリンパ球が、Ｔｈ１ルート（ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１２もしくはＴ
ＮＦ−α等のプロ炎症性サイトカインを産生する）、またはＴｈ２経路（ＩＬ−
４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１３もしくはトランスホーミング増殖因子βs（ＴＧＦ
−βs）等のＴｈ２様抗炎症性サイトカインを産生する）の何れかを経て分化で
きるという観察に由来する。ＴＧＦ−βsを産生する細胞は、Ｔｈ３細胞とも称
される。ある疾患に対する感受性は、主要なＴｈ１もしくはＴｈ２応答に起因し
ている（４６）。

【０１５９】 抗原とは無関係なシステムを用いた実験の開示により、以下のことが示唆され
る。ＴＮＦ−α、ＩＬ−４、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２およびＩＬ−１
３等の全サイトカインは、Ｔリンパ球−小グリア細胞の相互作用において抑制さ
れ、非炎症性環境（milieu）をつくり出すため、共重合体１は、ＣＮＳ内でＴｈ
１もしくはＴｈ２タイプのサイトカインに対して優先的に影響を及ぼすことがな
い。

【０１６０】 共重合体１は、検査した全サイトカイン（プロ炎症性および抗炎症性）の分泌
を減少させたが、ＣＮＳ状況に対する患者の治療は、Ｔリンパ球介在性炎症を最
終的に減少させるであろう。炎症の減少は、当該疾患の重症度を軽くするであろ
う。炎症は、ニューロンおよび軸索の破壊とも関連しているため、炎症性ＣＮＳ
疾患においてニューロンおよび軸索の完全な状態も良くなるであろう。更に、Ｃ
ＮＳ疾患を発症する危険のある個人を、共重合体１で処理して、当該疾患の発症
を予防したりその重症度を軽くしたりすることができる。その上、稀突起神経膠
細胞を殺傷することができるサイトカイン、ＴＮＦ−αの産生が低下すると（２
５、４４、４５、６９）、患者のＣＮＳにおいて、共重合体１により稀突起神経
膠細胞の消失度および脱髄は減少するであろう。加えて、共重合体１は、サイト
カインの分泌を阻害することにより、細胞のダメージおよび破壊の原因となるフ
リーラジカルの生成を減少させることができる。従って、共重合体１は、ＣＮＳ
炎症と関連した症状を軽減するだけでなく、ＣＮＳ疾患自体の進行を遅らせるで
あろう。

【０１６１】

【参照文献】

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１は、Ｔリンパ球によるＭＭＰ−９の産生に対して、共重合体
１（グラチラマーアセテート(ＧＡ)）の影響がないことを示す。薬剤処理なし（
コントロール）、あるいは２５μｇ/ｍＬの共重合体１もしくは１０００ＩＵ/ｍ
Ｌの組換えインターフェロンβ−１ｂの存在下において、ＡＩＭ−Ｖコンディシ
ョン培地を、抗ＣＤ３活性化Ｔリンパ球から集めた。以前に報告されているとお
り、インターフェロンβ（ＩＦＮ−β）は、ＭＭＰ−９のＴリンパ球産生を阻害
したが（７７）、共重合体１は、ＭＭＰ−９タンパク質レベルに影響を及ぼさな
かった。同様の結果が、処理１日後の単球から得られた。各時点におけるコンデ
ィション培地を、等量のＴリンパ球を有する培養物から集めた。

【図２】 図２は、共重合体１がＭＭＰ−９の酵素活性の阻害剤であること
を実証する。ザイモグラム展開の間のインキュベーション緩衝液に共重合体１が
存在すると、ＭＭＰ活性の発現は阻害される。対照的に、ＩＦＮβ−１ｂは、直
接的なＭＭＰ活性の阻害剤ではないが、図１で実証されるとおり、ＭＭＰ−９の
産生を減少させる。ポジティブコントロール、ＴＩＭＰ−１およびフェナントロ
リン（Ｐｈｅ）は、このアッセイでＭＭＰ活性を阻害することが示される。図２
Ａは、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞由来のＭＭＰ−９（最も強いバンド
）を示し、図２Ｂは、Ｔリンパ球により産生されるＭＭＰ−９を示す。

【図３】 図３は、共重合体１が、フィブロネクチンチャンバーを横切るＴ
リンパ球の移動を阻害することを示す。図３Ａは、Ｔリンパ球を２５μｇ/ｍＬ
の共重合体１で１、２もしくは３日間処理しても、コントロールと比較して、フ
ィブロネクチンバリアを横切る細胞のその後の移動に影響がないことを実証する
。対照的に、細胞をＩＦＮβ−１ｂ（１０００ＩＵ/ｍＬ）で３日間処理すると
、以前に報告されているとおり（７７）、移動は２０〜５０％減少した。図３Ｂ
においても同様、Ｔリンパ球を種々の濃度の共重合体１で３日間処理しても、移
動に影響はなかった。値は、それぞれ３回の分析の平均値±ＳＥＭであり、それ
ぞれの用量応答実験のコントロールに対する％で表した。

【図４】 図４は、活性化Ｔリンパ球を共重合体１で前処理すると、Ｔリン
パ球−Ｕ９３７相互作用で生成されるＩＬ−１０およびＴＮＦ−αの産生が抑制
されることを示す。活性化Ｔリンパ球は、単独で、検出不可能なＩＬ−１０もし
くはＴＮＦ−αを産生し；ＰＭＡ/ＩＦＮγで前処理したＵ９３７細胞は、検出
可能なＩＬ−１０を有するが、ＴＮＦ−αレベルは無視できる。サイトカインは
、共培養した際に有意に増大し、これは、Ｔリンパ球を共重合体１で前処理する
ことにより用量依存的に減少する。値は、３回の分析の平均値±ＳＥＭである。

【図５】 図５は、活性化Ｔリンパ球を共重合体１で処理すると、Ｔリンパ
球−Ｕ９３７相互作用において、ＩＬ−４、ＩＬ−１２およびＩＬ−１３が抑制
されることを報告する。Ｔリンパ球もＰＭＡ/ＩＦＮγで前処理したＵ９３７細
胞も、検出可能な量のＩＬ−４、ＩＬ−１２もしくｈＩＬ−１３をコンディショ
ン培地に分泌しない。これらサイトカインのレベルは、共培養により増大したが
、そのレベルは、ＩＬ−１０もしくはＴＮＦ−αのレベルと比較して低く（図４
）；Ｔリンパ球−Ｕ９３７相互作用におけるＩＬ−４、ＩＬ−１２およびＩＬ−
１３の量は、それぞれ１３、１２、６２ｐｇ/ｍＬである。これらは、Ｔリンパ
球を共重合体１で前処理することにより用量依存的に減少する。

【図６】 図６は、Ｔリンパ球と胎児小グリア細胞を共培養した際のサイト
カインの産生が、共重合体１により低下することを実証する。値は、３回もしく
は４回の分析の平均値±ＳＥＭであり、コントロールのＴリンパ球−小グリア細
胞共培養（即ち、０μｇ/ｍＬ共重合体１）に対する％で表す。コントロールの
Ｔリンパ球−小グリア細胞共培養におけるＴＮＦ−αの量は、１０６８±６８ｐ
ｇ/ｍＬで、ＩＬ−１０の量は、１３９±４ｐｇ/ｍＬであった。

【図７】 図７は、成人の小グリア細胞とＴリンパ球を共培養した際の、サ
イトカイン産生に対する共重合体１の影響を表す。Ｔリンパ球も小グリア細胞も
、単独では、ＩＬ−１β、ＩＬ−１０もしくはＴＮＦ−αを発現しない。小グリ
ア細胞と活性化Ｔリンパ球を共培養した際、２４時間後に誘導されるサイトカイ
ンのレベルは、ＴＮＦ−αが１０１２±８６ｐｇ/ｍＬ、ＩＬ−１βが１８±２
ｐｇ/ｍＬ、ＩＬ−１０が４６±２ｐｇ/ｍＬであった。ＩＬ−６は、小グリア細
胞で構成的に発現するが（１０１０±２１５ｐｇ/ｍＬ）、Ｔリンパ球では構成
的に発現しない。Ｔリンパ球を共重合体１で前処理すると、小グリア細胞と共培
養した際の誘導性サイトカインのレベルは減少し、ＩＬ−６の発現レベルも低下
した。値は、３回の培養の平均値＋ＳＥＭである。

【図８Ａ】 図８Ａ〜Ｄは、Ｔリンパ球と小グリア細胞を共培養した際の小
グリア細胞の形態を示す。 図８Ａは、成人の小グリア細胞が、培養時にほとんど双極性の形態であること
を示す。

【図８Ｂ】 図８Ｂは、Ｔリンパ球が単一の細胞もしくは細胞塊として存在
することを実証する。

【図８Ｃ】 図８Ｃは、Ｔリンパ球が、共重合体１の非存在下で小グリア細
胞と共培養されると、双極性の小グリア細胞が、丸みをおびた/アメーバ様の形
態になることを報告する（幾つかの小グリア細胞を矢印により示す）。

【図８Ｄ】 図８Ｄが表すとおり、この形態学的変換は、Ｔリンパ球を共重
合体１で処理することにより妨害される。 図８Ａ〜Ｄは、同じ倍率、４００×である。

【図９】 図９は、共重合体１が、Ｔリンパ球におけるＣＸＣＲ３およびＣ
ＸＣＲ４発現に影響を及ぼさないことを報告する。全てのＴリンパ球が、時間０
において抗ＣＤ３抗体で活性化され、３時間で、共重合体１（２５μｇ/ｍＬ）
を幾つかの培養物に添加した。１日目（図９Ａおよび９Ｂ）、２日目（図９Ｃお
よび図９Ｄ）および３日目（図９Ｅおよび９Ｆ）に、細胞を取り出し染色した。
アイソタイプコントロール抗体を、コントロールおよび共重合体１処理Ｔリンパ
球を染色するために使用し、これらの蛍光は変らなかった。従って、コントロー
ルＴリンパ球のアイソタイプ染色のみを表示する。

【図１０】 図１０は、共重合体１が、Ｕ９３７細胞におけるＣＸＣＲ３お
よびＣＸＣＲ４発現に影響を及ぼさないことを実証する。時間０において、細胞
を共重合体１（２５μｇ/ｍＬ）で処理するか、あるいは未処理のまま置いた。
１日目（図１０Ａおよび１０Ｂ）もしくは３日目（図１０Ｃおよび１０Ｄ）に、
細胞を取り出し染色した。アイソタイプコントロール抗体を、コントロールおよ
び共重合体１処理細胞を染色するために使用し、これらの蛍光は変らなかった。
従って、コントロールＵ９３７細胞のアイソタイプ染色のみを表示する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 25/16 Ａ６１Ｐ 25/28 25/28 27/06 27/06 29/00 29/00 31/04 31/04 31/18 31/18 35/00 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１ Ａ６１Ｋ 37/64 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＯ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＣ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ， ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，Ｉ Ｎ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ， ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，Ｐ Ｌ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ， ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 シャボー、ソフィー カナダ国、ジー０アール・２ワイ０、ケベ ック州、ベル、サン・ダミアン、シーピー 400、リュ・ケリー 20 Ｆターム(参考） 4C076 AA01 AA93 BB25 BB29 CC01 CC04 4C084 AA02 AA19 BA01 BA09 BA23 CA62 DC32 MA02 MA31 MA52 MA56 MA59 MA60 MA63 MA66 NA05 NA14 ZA011 ZA021 ZA151 ZA161 ZA331 ZB111 ZB112 ZB351 ZC022 ZC202 ZC551

Claims (46)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 炎症性非自己免疫中枢神経系（ＣＮＳ）疾患を有する哺乳類
   の被検体を治療するか、または前記疾患の症状を軽減する方法であって、前記炎
   症性非自己免疫ＣＮＳ疾患を治療するのに効果的な量および効果的な期間で、前
   記被検体にグラチラマーアセテート（共重合体１）を投与することを含む方法。
2. 【請求項２】 前記哺乳類の被検体がヒトである請求項１に記載の方法。
3. 【請求項３】 前記疾患がアルツハイマー病である請求項１に記載の方法。
4. 【請求項４】 前記疾患がパーキンソン病である請求項１に記載の方法。
5. 【請求項５】 前記疾患がＨＩＶ脳症である請求項１に記載の方法。
6. 【請求項６】 前記疾患が脳腫瘍である請求項１に記載の方法。
7. 【請求項７】 前記疾患が緑内障である請求項１に記載の方法。
8. 【請求項８】 前記疾患が神経障害もしくは痴呆である請求項１に記載の方
   法。
9. 【請求項９】 前記疾患がＣＮＳ感染である請求項１に記載の方法。
10. 【請求項１０】 前記ＣＮＳ感染が細菌性感染である請求項９に記載の方法
    。
11. 【請求項１１】 前記細菌性感染が髄膜炎である請求項１０に記載の方法。
12. 【請求項１２】 前記疾患が発作に起因する請求項１に記載の方法。
13. 【請求項１３】 前記疾患が頭部外傷に起因する請求項１に記載の方法。
14. 【請求項１４】 前記投与ルートが、経口、静脈内、筋内、皮下、腹腔内、
    経皮、鼻もしくは直腸である請求項１に記載の方法。
15. 【請求項１５】 前記投与ルートが経口である請求項１４に記載の方法。
16. 【請求項１６】 前記投与ルートが皮下注入である請求項１４に記載の方法
    。
17. 【請求項１７】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量が、
    約０．０５ｍｇ/ｋｇ体重〜約５０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある請求項１４に記載
    の方法。
18. 【請求項１８】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量が、
    約０．１ｍｇ/ｋｇ体重〜約１０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある請求項１７に記載の
    方法。
19. 【請求項１９】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量が、
    約０．１ｍｇ/ｋｇ体重〜約１．０ｍｇ/ｋｇ体重の範囲にある請求項１８に記載
    の方法。
20. 【請求項２０】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量が、
    約０．３ｍｇ/ｋｇ体重である請求項１９に記載の方法。
21. 【請求項２１】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量が、
    約０．１ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲にある請求項１４に記載の方法。
22. 【請求項２２】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量が、
    約１．０ｍｇ〜約１００ｍｇの範囲にある請求項２１に記載の方法。
23. 【請求項２３】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量が、
    約１０ｍｇ〜約３０ｍｇの範囲にある請求項２２に記載の方法。
24. 【請求項２４】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の投与量が、
    約２０ｍｇである請求項２３に記載の方法。
25. 【請求項２５】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の用量が、約
    ３０日ごとに１回〜約１日に１回の頻度で投与される請求項１４に記載の方法。
26. 【請求項２６】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の用量が、約
    ７日ごとに１回〜約１日に１回の頻度で投与される請求項２５に記載の方法。
27. 【請求項２７】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）の用量が、約
    １日に１回の頻度で投与される請求項２６に記載の方法。
28. 【請求項２８】 前記グラチラマーアセテート（共重合体１）が、治療プロ
    グラムの一部として投与され、該治療プログラムの間に前記被検体にサイトカイ
    ンアンタゴニストが更に投与される請求項１に記載の方法。
29. 【請求項２９】 炎症性非自己免疫中枢神経系（ＣＮＳ）疾患を発症する危
    険な状態にある哺乳類の被検体を治療する方法であって、前記被検体に発症し得
    る炎症性非自己免疫ＣＮＳ疾患の重症度を最小にするか、もしくは前記疾患の発
    症を予防するのに効果的な量および効果的な期間で、前記被検体にグラチラマー
    アセテート（共重合体１）を投与することを含む方法。
30. 【請求項３０】 前記被検体がヒトであり、前記危険な状態が慢性的な医学
    的病状に対する遺伝的素因と関連している請求項２９に記載の方法。
31. 【請求項３１】 前記疾患が、アルツハイマー病、パーキンソン病、緑内障
    、痴呆、神経障害、発作および脳腫瘍から成る群より選択される請求項２９に記
    載の方法。
32. 【請求項３２】 前記投与ルートが、経口、静脈内、筋内、皮下、腹腔内、
    経皮、鼻もしくは直腸である請求項２９に記載の方法。
33. 【請求項３３】 マトリクス金属結合タンパク分解酵素の活性を阻害する方
    法であって、前記マトリクス金属結合タンパク分解酵素をグラチラマーアセテー
    ト（共重合体１）と接触させることを含む方法。
34. 【請求項３４】 前記マトリクス金属結合タンパク分解酵素がＭＭＰ−９で
    ある請求項３３に記載の方法。
35. 【請求項３５】 前記マトリクス金属結合タンパク分解酵素が被検体中にあ
    る請求項３４に記載の方法。
36. 【請求項３６】 前記被検体がヒトである請求項３５に記載の方法。
37. 【請求項３７】 活性化Ｔリンパ球によりサイトカインの産生を抑制する方
    法であって、サイトカインの産生を抑制するのに必要な量で前記活性化Ｔリンパ
    球をグラチラマーアセテート（共重合体１）と接触させることを含む方法。
38. 【請求項３８】 前記サイトカインがＩＬ−１である請求項３７に記載の方
    法。
39. 【請求項３９】 前記サイトカインがＩＬ−４である請求項３７に記載の方
    法。
40. 【請求項４０】 前記サイトカインがＩＬ−６である請求項３７に記載の方
    法。
41. 【請求項４１】 前記サイトカインがＩＬ−１０である請求項３７に記載の
    方法。
42. 【請求項４２】 前記サイトカインがＩＬ−１２である請求項３７に記載の
    方法。
43. 【請求項４３】 前記サイトカインがＩＬ−１３である請求項３７に記載の
    方法。
44. 【請求項４４】 前記サイトカインがＴＮＦ−ａである請求項３７に記載の
    方法。
45. 【請求項４５】 前記サイトカインが被検体中にある請求項３７に記載の方
    法。
46. 【請求項４６】 前記被検体がヒトである請求項４５に記載の方法。