JP2003525858A

JP2003525858A - 少なくともジフテリア、灰白髄炎および破傷風に対する多価ｔ．ｄ．ポリオワクチン

Info

Publication number: JP2003525858A
Application number: JP2000583561A
Authority: JP
Inventors: ジャン・ルネ・カルティエ; パトリック・ラロシュ
Original assignee: AVENTIS PASTEUR
Current assignee: AVENTIS PASTEUR
Priority date: 1998-11-26
Filing date: 1999-11-25
Publication date: 2003-09-02
Also published as: EP1131094B1; AU759221B2; CZ20011860A3; AU1390100A; PT1131094E; EP1131094A1; CA2352617A1; ZA200103634B; WO2000030678A1; ATE281176T1; NZ511933A; DE69921682T2; PL347719A1; DK1131094T3; DE69921682D1; EP1004314A1; ES2228175T3

Abstract

(57)【要約】本発明は、１ｍｌあたり１．２ｍｇ未満のアルミニウム塩；少なくともポリオウイルス、Corynebacterium diphtheriaeおよびClostridium tetaniを起源とする免疫原性抗原；Corynebacterium diphtheriaeの免疫原性抗原として使用される１ｍｌあたり４〜１６Ｌｆの量のジフテリアトキシンを含有するワクチンに関する。また本発明は、その１次免疫および／または追加免疫としての使用ならびに２種の注射用量の該ワクチンを含む医薬キットにも関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、少なくともジフテリア、灰白髄炎および破傷風に対する新規多価ワ
クチンであって、すでに１次免疫されている、あるいはすでに感受性を有してい
る個体において、１次免疫の際および免疫ブースターとして使用されるワクチン
に関する。

【０００２】従来技術ジフテリアはコリネバクテリウム・ジフテリアエ（Corynebacterium diphther
iae）によるものである。本質的には、伝染は呼吸経路を介する直接的なもので
ある。呼吸形態の臨床的徴候は２つの機構の結果である。侵入開始時の細菌の増
殖は局所的な徴候を生じさせ、通常には咽頭部（偽膜性アンギナ）、時として喉
頭部（クループ）におけるものである。特定株の外毒素の拡散は悪性アンギナお
よび／または内蔵合併症（多発性神経炎、心筋炎、悪性Marfan症候群）の原因で
ある。最近、大部分の先進国において多くの血清学的研究がなされており、年齢
、性別および局地的な伝染病または免疫の履歴によって、今日では住民の２０な
いし８０％がもはや正確に免疫されないこと；ならびに５０歳以上の女性個体が
特に病気にかかりやすいことが示されている（Rappuoli et al., Vaccine 11, 5
76-577, 1993, Simonsen et al., Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand, 9
5, 225-231, 1987, Wirz et al., Vaccine, 13, 771-773, 1995）。このような
病気にかかりやすさは、先進国で時々起こるジフテリアの劇的な復活により、最
近２０年間にわたり明らかになってきた（Galazka et al., Eur. J. Epidemiol,
11, 107-117, 1995）。

【０００３】破傷風はクロストリジウム・テタニ（Clostridium tetani）によるものである
。本質的に土壌性の胞子型のものは、生物体の破壊（創傷、咬み傷／刺し傷、火
傷または小規模な傷害）により侵入し、増殖型を生じる。この形態は内毒素テタ
ノスパスミンを分泌する。細菌の溶解によりその拡散が起こる。神経向性である
該毒素が徴候を生じさせる。すなわち、最初の開口障害および筋委縮を生じさせ
る。治療しなければ、徴候の進行は仮死または失神により致命的となる。トキソ
イドでの免疫は単なる反撃にすぎない。１次免疫で獲得された免疫は時間ととも
に低下し、追加免疫が必要である。年齢とともに免疫が消失または損失すること
は、いくつかの血清学的調査（Hilton et al., Ann. Intern. Med., 115, 32-33
, 1991）により数十年にわたりアメリカ人集団において記録されている。ヨーロ
ッパにおいても、血清学的調査により同等の結果が得られている（Kjeldsen et
al., Scand. J. Infect. Dis., 20, 177-185, 1988）。それゆえ、多くの成人、
特に５０歳以上の女性が破傷風になりやすく、あるいは破傷風に常になりやすい
状態であり、トキソイドでの免疫が必要であることは明らかである。

【０００４】灰白髄炎は、エンテロウイルスのグループに属するポリオウイルスによるもの
である。３種のセロタイプが存在し、１型、２型および３型と呼ばれる。本質的
に、伝染は直接または間接的な糞便−経口によるものであり、時々、経口−経口
による。該ウイルスは腸、筋肉、髄膜および神経向性を有する。一般的には、感
染は、目立たないか、あるいは穏やかである。この「灰白髄炎感染」は免疫性の
ものであるが、型の間で交差免疫がなく、数週間にわたり伝染性である。それは
例外的に髄膜性または麻痺性（急性弛緩性麻痺）の形態を生じる（年齢および型
にもよるが、感染の０．１ないし１％）。この「灰白髄炎疾患」は、疫学的治療
処置方法がないので、常に重症である。仮死による致命的疾患でない場合（年齢
および型にもよるが、２ないし１０％）であっても、換気または筋肉の無能化が
後作用として残る。灰白髄炎のある国とない国との間の人々の往来が激しくなり
、灰白髄炎のない国への野生型株の侵入および再導入の危険性が高まっている。
最近２〜３年において、高レベルの免疫適用範囲および非常に低い疾病の世界的
発生率にもかかわらず、侵入したケースおよび伝染がヨーロッパ、北米および中
東においてみられるようになった（WHO, Releve Epidemiologique Hebdomadaire
[Weekly Epidemiological Record], 29, 220-221, 1996）。疾病が除去される
のを待つ一方で、灰白髄炎のある国とない国との間の人々の往来が激しくなり、
それゆえ、世界のいずれの地域においても危険性が高まり、野生型株の侵入によ
り危険性は激増する。このタイプの疾病の激化の中で疾病の広がりを最小限にす
るためには、急性灰白髄炎の単一ケースの報告がもはや存在しない国を含め、す
べての国が民衆全体をカバーする高レベルの免疫適用範囲を維持することが重要
である。

【０００５】ジフテリアおよび破傷風ワクチンは１９３０年代にRaminにより開発されたも
のであり、トキソイドに基づくものである。Corynebacterium diphtheriaeまた
はClostridium tetani培養物の濃縮物をホルムアルデヒドの作用で解毒し、次い
で、精製することにより、それらを得ることができる。それらの個々の免疫活性
はインビトロおよびインビボで評価される。凝集アッセイによりトキソイド量が
測定され、１回あたりの凝集単位（Ｌｆ）で表される（Lyng et al., J. Biol.
Stand., 15, 27-37, 1987; J. Lyng, Biologicals, 18, 11-17, 1990）。

【０００６】破傷風トキソイドは時々単独で投与される。しかしながら、伝統的にこのトキ
ソイドは常に少なくともジフテリアトキソイドと混合されてきた。一般的には、
１次破傷風およびジフテリア免疫は生後１年目に３回に分けて行われる（WHO, W
HO/EP/GEN, 95.3, 1995）。国によっては生後２年目および４ないし１０年目に
追加免疫を投与する。時々、生後１１ないし１８年目にも追加免疫が行われる。
さらに、１９８７年以来、ＷＨＯは発展途上国の出産年齢の女性を破傷風トキソ
イドで１次免疫を３回行い、１年ないし５年後に追加免疫を１回行うことを推奨
している。

【０００７】１回の免疫あたりの破傷風トキソイド（Ｔ）は国により異なり、１次免疫また
は追加免疫には１回分０．５ｍｌあたり５ないし２０Ｌｆである。欧州薬局方は
少なくとも２０ＩＵの活性を推奨している。

【０００８】最も広く古くから投与されてきた１回あたりのジフテリアトキソイド（Ｄ）量
は、小児の１次免疫複合体中の量であり、１回分０．５ｍｌあたり１２ないし５
０Ｌｆの範囲である（Galazka et al., Vaccine, 14, 845-857, 1996）。

【０００９】追加免疫には、ジフテリアトキソイド（ｄ）量を少なくすることが現在一般的
である。一般的には、その量は小児量の約１／１０である。よって、米国および
カナダでは１回分０．５ｍｌにつき２Ｌｆのセットが７歳からの追加免疫に推奨
されている（Edsall et al., Am. J. Hyg, 53, 283-295, 1951）。ヨーロッパに
おいて、トキソイド量および最低投与年齢は国によって異なる。量は一定でない
。なぜなら、欧州薬局方により賦課された条件は量のみに関係するのではなく、
活性にも関係しているからである。１回分０．５ｍｌにつき少なくとも２ＩＵで
なければならない。

【００１０】成人集団用の追加免疫については、一般的には、やはりジフテリアトキソイド
が破傷風トキソイドと混合される。この混合は、破傷風トキソイド単独の場合よ
りも耐性をわずかに低下させることが知られている（Palmer et al., Br. Med.
J., 286, 624-626, 1983）。米国において、７歳以上の個体に投与されたＴおよ
びＴｄワクチンに関連した望ましくない出来事が最近分析された（Haber et al.
, ICAAC, 1996）。個体に曝されたＴｄワクチンは、Ｔワクチンよりも局所的反
応、呼吸困難、意識消失または痙攣を引き起こした。

【００１１】灰白髄炎に関しては、１９５０年代に２種のワクチンが開発された。それらは
Salk（Plotkin et al., E. A. Vaccines, ed. Raven Press, 1994）により開発
されたホルムアルデヒドで不活性化された注射可能ワクチン（ＩＰＶ）、ならび
にSabin（Plotkin et al.,上記文献）により開発された生菌ワクチンである経口
ワクチン（ＯＰＶ）である。ＩＰＶはすべての国から野生型灰白髄炎および免疫
後の灰白髄炎の両方を除去した（Murdin et al., Vaccine, 14, 735-746, 1996
）。ＩＰＶの製造方法および組成は国により異なる。かくして３タイプのポリオ
ウイルスがＶＥＲＯ連続細胞系において培養されており、それらは後に精製され
、ホルムアルデヒドで不活性化される。それらの個々の免疫活性はインビトロお
よびインビボで評価されている。ＥＬＩＳＡによりウイルス抗原含量が測定され
、国際単位で表される：ＷＨＯは１回分０．５ｍｌあたり、１型、２型、３型の
Ｄ抗原に関してそれぞれ４０ＩＵ、８ＩＵおよび３２ＩＵ（シグモイド法に
より測定）を推奨している。

【００１２】ＩＰＶは２つの薬理学的利点を提供する：それは安定であり、特別な兵站を必
要としない。それは時々他の抗原と混合することができる。

【００１３】乳幼児期における灰白髄炎、破傷風およびジフテリアでの同時免疫は世界中で
数年間にわたり共通の慣習となっており、大部分の先進国においては実に数十年
にもわたり慣習となっている。この慣習は、これら３つの病気による死亡者数お
よび症例をかなり減少させることにおいて大きく貢献した。しかしながら、それ
らは消え去ってはいない。先進国において、それらが発生した場合、特に人生の
後半においてそれらが発生した場合、それらはより重症である。免疫投与により
獲得した免疫性は時間とともに低下する。人生の後半においてこの免疫性の本来
的な維持からの恩恵は受けられないので、これらの国々の１０代および成人は再
度病気にかかりやすくなる。今から一生の間当該３つの疾病に対する免疫適用範
囲を維持することは疫学的義務である。

【００１４】それゆえ、少なくともジフテリア、灰白髄炎および破傷風に対する新規ワクチ
ンに対する必要性が存在し、該新規ワクチンは１次免疫の際および追加免疫とし
て使用できるものであり、該新規ワクチンは破傷風、灰白髄炎およびジフテリア
に対する防御を付与すること、ならびに／あるいは１次免疫または感作において
最初に付与された防御を延長させることを目的とするものであり、さらに該新規
ワクチンは、現存するワクチンにより誘発される集団に対する望ましくない影響
を最小限にするものである。

【００１５】ＴＤポリオ型（Ｔ：破傷風トキソイド；Ｄ：慣用量のジフテリアトキソイド；
ポリオ：不活性化１、２および３型ポリオウイルス）の注射可能小児用ワクチン
、例えば、D.T.Plio^Rワクチン（PMsv S. A., France）はこの必要性を満足する
ことができない。詳細には、これらのタイプのワクチンは主に小児の１次免疫に
使用されるものである。それらはアルミニウム塩を欠いており、それらは多すぎ
る量、例えば１００Ｌｆ／ｍｌのジフテリアトキソイドを含有しており、それら
は成人において望ましくない反応を引き起こす（Bjorkholm et al., Eur. J. Cl
in. Microb., 6, 637-640, 1987）。

【００１６】また、１次免疫を受ける集団に対する望ましくない影響を最小化するために、
現存するＴＤポリオワクチンを簡単に変更することを考えることは可能でない。
詳細には、選択される目的は、例えば、含有されるジフテリアトキソイド量を減
少させることであろう。この場合、Ｔｄワクチン（現存のもの）中に慣用的に使
用される、例えば、少なくとも１ｍｌあたり４Ｌｆのオーダーのトキソイドの量
を選択することは考えられないであろうが、例えば、おそらく２０Ｌｆ／ｍｌよ
りも多く添加することは考えられるであろう。実際には、慣用的なＴｄワクチン
において、ジフテリアトキソイドは、その免疫原性を増強するアルミニウム塩を
常にアジュバントとしている。ＴＤポリオワクチンにおいてアジュバントがない
という事実は、Ｔｄワクチンに使用されるトキソイド量に関してトキソイド量を
増加させることを意味する。

【００１７】同じ理由で、現存する注射可能なＴｄ型ワクチン、例えばvaccinol^RまたはTd-
Pur^Rワクチン（Chiron-Behring GmbH, Germany）またはDiftavax^Rワクチン（PMs
v S. A., France）を慣用的な灰白髄炎ワクチン（PMsv, France）と単に混合す
ることでは、満足な解決を得ることはできなかった。詳細には、かかるワクチン
中の各構成成分の選択ならびにその用量は、最適免疫応答の生起および望ましく
ない効果の最小化における決定因子である。

【００１８】よって、例えば、新規抗原（ポリオ）をＴｄワクチンに添加する場合、アルミ
ニウム塩の量は最適なアジュバントの役割を果たすには不十分である可能性があ
る。一方、よって、かかるワクチンの免疫原性が低下する危険性がある。他方、
アルミニウム塩量を増加させることによりこの問題を解決しようとすれば、平行
して、これらの塩に関連した望ましくない反応がさらに悪化するであろう（Ｔｄ
ワクチン１ｍｌあたり１．２ないし３ｍｇ；Gupta et al., Vaccine, 13, 1263-
1276, 1995）。

【００１９】同様に、新規抗原（ポリオ）をＴｄワクチンに添加する場合、Ｔまたはｄ抗原
それぞれの相対的負荷量も減少する。よって、かかるワクチンの免疫原性が低下
する危険性がある。他方、各抗原の量、詳細にはジフテリアトキソイド量を増加
させることによりこの問題を解決しようとすれば、平行して、このトキソイドに
関連した望ましくない反応がさらに悪化するであろう（Bjorkholm et al., Eur.
J. Clin. Microb., 6, 637-640, 1987）。

【００２０】そえゆえ、Ｔｄポリオ型ワクチンの各成分の選択ならびにそれらの用量の決定は困難であり、現存ワクチンから容易に推量することができない。さらに、成人または１０代の人における追加免疫として適するジフテリア、破
傷風、灰白髄炎および百日咳に対する免疫の組み合わせはなく、また、Ａ型肝炎
および／またはＢ型肝炎に対する免疫混合物もない。

【００２１】よって、本発明は、少なくとも基本的なＴｄポリオの組み合わせを有している
が、以前のＴＤポリオ、Ｔｄおよびポリオワクチンとは異なるものであり、これ
らのワクチンと同等の免疫原性を有し、さらに、それらの望ましくない効果を最
小化するワクチンを提供することが本発明の目的である。本発明のワクチンは、
１次免疫および追加免疫に使用できるという利点を有する。

【００２２】発明の概要この目的を達成するために、本発明は、下記のものを含むワクチンに関する： −Ａｌ^３＋原子に関して表した場合１ｍｌあたり１．２ｍｇ未満のアルミニウ
ム塩、 −少なくともポリオウイルス、Corynebacterium diphtheriaeおよびClostridi
um tetaniを起源とする免疫原性抗原、ならびに −Corynebacterium diphtheriaeの免疫原性抗原として使用される１ｍｌあた
り４〜１６Ｌｆの量のジフテリアトキソイド。

【００２３】本発明のワクチンは、１次免疫免疫を受けた集団、あるいは感作された集団に
おいて、１次免疫において、ならびに追加免疫として使用できる。出願人は、上
記ワクチンが追加免疫として特に有用であることを示した。

【００２４】驚くべきことに、出願人は、上記ワクチンが成分抗原により誘発される反応原
性および／またはアレルギー性の効果を最小化することを示した。

【００２５】もう１つの主題によれば、本発明は、上記ワクチンを投与することを特徴とす
る、少なくともポリオウイルス、Corynebacterium diphtheriaeおよびClostridi
um tetaniに対する免疫方法に関する。

【００２６】最後に、本発明は、少なくとも２種の用量の本発明のワクチンを含む医薬キッ
トにも関する。

【００２７】発明の詳細な説明本発明の文脈において、「すでに１次免疫を受けた、あるいはすでに感作され
た集団」なる表現は、すでに少なくともポリオウイルス、Corynebacterium diph
theriaeおよび／またはClostridium tetaniに対して免疫された成人、１０代の
人または若い個体、あるいはすでに少なくともポリオウイルス、Corynebacteriu
m diphtheriaeおよび／またはClostridium tetani微生物の１つと接触した個体
を意味する。好ましい集団は１０代の人および成人からなり、より詳細には、年
をとった個体からなるものである。

【００２８】好ましくは、Corynebacterium diphtheriaeおよびClostridium tetani抗原の
起源はそれらのトキシンであり、ホルムアルデヒドにて解毒され、次いで、精製
されたものである。これらのトキシンの解毒および精製にための技法は数十年に
わたりよく知られたものであり、出典明示により本明細書に記載されているもの
とされ、例えば、Leong et al., Science, 220, 515-517, 1983; Ramin G., Ann
. Inst. Pasteur, 38, 1-105, 1924;またはRaynaud et al., Ann. Inst. Pasteu
r, 96, 60-71, 1959;またはBizzini et al., Eur. J. Biochem., 17, 100-105,
1970に記載されたような技法がある。遺伝子操作により得ることのできる解毒さ
れたアナログも本発明に包含される。

【００２９】同様に、ポリオウイルス抗原は１またはそれ以上のタイプの不活性化ポリオウ
イルス（後の説明を参照のこと）および／または例えばDelpeyroux et al., 70,
1065-73, 1988; EP323861（Pasteur Institut）; EP86707（Pasteur Institut
）；またはEP65924（Pasteur Institut）に記載されたようなポリオウイルスの
精製免疫原性抗原のみを含むものであってもよい。

【００３０】不活性化ポリオウイルスを得るためには、ＶＥＲＯ細胞系にてそれらを培養し
、それらを精製し、次いで、例えば、ホルムアルデヒドにてそれらを解毒するこ
とが可能である。ポリオウイルスの培養および解毒のための技法は数十年にわた
りよく知られたものであり、出典明示により本発明の記載中に一体化され、例え
ば、WO9800167（Connaught）；Dulbecco, Nature, 376, p.216, 1995;およびCoh
en, Acta Leiden, 56, 65-83, 1987,およびSalk, Dev. Biol. Stand., 47, 247-
55, 1981に記載されたような技法がある。

【００３１】好ましくは、不活性化１型（MAHONEY株）、２型（MEF 1株）および３型(Sauke
tt株）ポリオウイルスを用いる。 Corynebacterium diphtheriaeの免疫原性抗原として１回の免疫に用いるジフ
テリアトキソイドの量は１ｍｌあたり４ないし１６Ｌｆ、好ましくは、６〜１４
Ｌｆ、詳細には例えば１ｍｌあたり約１０Ｌｆとすべきである。この量は最適免
疫原性を確かなものとすることを可能とするが、同時に、例えば抗原に対する反
応原性（reactogenic）またはアレルギー性反応のごとき望ましくない効果を最
小化する。

【００３２】同様に、Clostridium tetaniの免疫原性抗原として１回の免疫に用いる破傷風
トキソイドの量は１ｍｌあたり６ないし３０Ｌｆ、好ましくは８〜２０Ｌｆ、詳
細には例えば１回あたり約１０Ｌｆである。この量は最適免疫原性を確かなもの
とすることを可能とするが、同時に、望ましくない効果を最小化させる。

【００３３】ジフテリアまたは破傷風トキソイドの量（Ｌｆ）を測定するためには、Lyng（
J. Biol. Stand., 15, 27-37, 1987；またはBiologicals, 18, 11-17, 1990）、
またはＷＨＯ（Manual for the production and the control of vaccines, BLG
/UNDP/77.1およびBLG/UNDP/77.2）により記載された凝集アッセイを用いるが、
使用トキソイドの純度が、ジフテリアについては窒素１ｍｇあたり１５００〜１
８００Ｌｆ、あるいは破傷風については窒素１ｍｇあたり１０００〜１３００Ｌ
ｆであることを考慮する。

【００３４】例えば、大部分の製品において精製ジフテリアトキソイドの純度は、一般的に
は窒素１ｍｇあたり約１７００〜１８００Ｌｆ（内部ソース）である。同様に、
破傷風トキソイドの純度は約１２００〜１４００Ｌｆ（内部ソース）である。

【００３５】免疫原性抗原として使用される不活性化ポリオウイルスに関しては、本発明に
よる免疫量は、例えば、１型ポリオウイルスのＤ抗原６０〜１２０ＩＵ／ｍｌ
、２型ポリオウイルスのＤ抗原８〜３０ＩＵ／ｍｌおよび／または３型ポリオ
ウイルスのＤ抗原１６〜８０ＩＵ／ｍｌを含むことができる。国際単位はシグ
モイド法により決定される。

【００３６】本発明の特別な具体例において、本発明のワクチンは、基本的なＴｄポリオの
組み合わせのほかに、例えば、０．１ないし６０μｇ／ｍｌの精製ビー・ペルツ
ッシス（B. pertussis）抗原、好ましくはB. pretussisトキソイド（ＰＴ）およ
びＦ−ＨＡ；０．１ないし４０μｇ／ｍｌのＢ型肝炎HBs抗原；および／または
０．１ないし４０μｇ／ｍｌの不活性化Ａ型肝炎ウイルスまたはその抗原を含む
ことができる。

【００３７】一般的処理により得られる解毒されたアナログを包含するボルデテラ・ペルツ
ッシス（Bordetella pertussis）トキシンを、異なった方法で製造することがで
きる。例えば、B. pertussis株を慣用的方法（Sekura et al., L. Biol. Chem.,
258, 14647-14651, 1993）により培養し、培地をAffi-gel Blue^R（BioRad Lab,
US）カラムに通し、次いで、塩豊富溶液（例えば、０．７５Ｍ塩化マグネシウ
ム）でそれを溶離させ、次いで、塩を除去した後、この溶離物をフェツイン−セ
ファロースアフィニティーカラム（臭化シアンに結合したフェツインから構成さ
れる）に再吸着させ、次いで、４Ｍのマグネシウム塩の溶液で溶離することによ
りトキソイドを単離することができる。次いで、特許出願ＰＣＴ／ＥＰ９７／０
５３７８（PMsv）に記載されたように、Munozらの変法（Infect. Immun., 33, 8
20-826, 1981）に従って、グルタルアルデヒドを用いてB. pertussisトキシンを
解毒することができる。他の多くの方法が当業者に利用可能であり、例えば、Ir
onsらの方法（Biochem. Biophys. Acta. 580, 175-185, 1979）、または特許Ｕ
Ｓ４７０５６８６およびＥＰ３３６７３６に記載された方法があり、出典明示に
よりそれらを本明細書に一体化させる。

【００３８】本質的にはCowellら（Infect. And Immun., 41, 1, 313-320, 1983）により記
載された方法により培養上清からＦ−ＨＡを精製することができる。メチル化β
−シクロデキストリンのごとき増殖プロモーターを用いて上清中のＦ−ＨＡ収量
を増加させることができる。培養上清をヒドロキシアパタイトカラムに負荷する
。Ｆ−ＨＡはカラムに吸着するが、ＰＴは吸着しない。カラムをTriton X-100で
非常に徹底的に洗浄して、エンドトキシを除去する。次いで、０．１Ｍリン酸ナ
トリウム中０．５ＭＮａＣｌを用いてＦ−ＨＡを溶離させ、必要ならば、フェ
ツイン−セファロースカラムに通して残存ＰＴを除去する。さらなる精製は、セ
ファロースＣＬ−６Ｂカラムに通すことを含む。別法は、当該抗原に対して指向
されたモノクローナル抗体であってＣＮＢｒ−活性化アフィニティーカラムに結
合したものを用いることによりＦ−ＨＡを精製することを含む。特許ＥＰ３３６
７３６に記載されたように、パーライトでのクロマトグラフィーを用いてＦ−Ｈ
Ａを精製することもできる。

【００３９】Ｆ−ＨＡの精製に適した方法は特許ＥＰ０２４２３０２の実施例３にも記載さ
れている。本発明の文脈において、Ｆ−ＨＡはこの方法により調製される。

【００４０】特許ＥＰ２７３８１１（Pasteur Vaccines）に記載された方法によりＢ型肝炎
抗原の上清を得ることができ、該方法において、ＨＢｓＡｇ遺伝子を担持するプ
ラスミドでトランスフェクションされ、抗原性表面粒子を培地中に放出するよう
になったＣＨＯ細胞の培養を用いて抗原性Ｂ型肝炎表面粒子が得られる。他の方
法は当業者によく知られており、例えば、ＥＰ８６４６４９、ＵＥ５６７１１ま
たはＩＥ４８６６５に記載された方法があり、出典明示により本明細書に一体化
させる。

【００４１】同様に、Flemingらの方法（Viral Hepatitis and Liver Disease, 87-90, 198
8; J. Med. Virol., 22, 7-16, 1987）により不活性化Ａ型肝炎ウイルスを得る
ことができる。他の方法は当業者によく知られており、例えば、Wang et al., V
accine, 13, 835-840, 1995; Shevtsova et al., Zh. Mikrobiol Epidemiol Imm
unobiol., 2, 55-90, 1995;およびRichtmann et al., J. Med. Virol., 48, 147
-50, 1996;またはＥＰ１９９４８０；ＩＥ４８３３９；またはＩＥ５０１９１に
記載された方法があり、出典明示により本明細書に一体化させる。

【００４２】本発明のワクチンは、アジュバントとして認識されているもの、特に、リン酸
アルミニウムおよび水酸化物のごときすべてのアルミニウム塩；Ｎ−アセチルム
ラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミル−Ｌ−アラニン−２−［１，２−ジ
パルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−（ヒドロキシホスホリルオキシ）］（Sanc
hez-Pescador et al., J. Immu., 141, 1720-1727, 1988参照）；Quillaja sapo
naria由来の分子、例えばStimulon^R（Aquila, US）；Iscoms^R（CSL Ltd., US）
；コレステロールおよびアナログに基づくすべての分子、例えばDC Chol^R（Targ
eted Genetics）；糖脂質Bay R1005^R（Bayer, Germany）；Leishmania brasilli
ensis抗原、例えばCorixa Corp.(US)から入手可能なLeIF（技術用語）、ならび
にポリホスファゼンファミリーのポリマー、例えば"Virus Research Institute"
(US)から入手可能なAdjumer（技術用語）からから選択される１種またはそれ以
上のアジュバントを含む。本発明のワクチンは、Ａｌ^３＋原子に関して表した場
合１．２ｍｇ／ｍｌ未満、好ましくは０．７０ｍｇ／ｍｌのアルミニウム塩を含
む。

【００４３】 D.T.Polio^R（PMsv, France）のごとき慣用的なＴＤポリオワクチンに関しては
、本発明が初めてアジュバントの添加、詳細には例えば水酸化アルミニウムのご
ときアルミニウム塩の添加を提案するものである、ということに注意すべきであ
る。

【００４４】すべての期待に反して、本発明のワクチンは、Td-Pur^RまたはDiftavax^Rのごと
きすべての慣用的なＴｄワクチン中の含有されるよりも低いアルミニウム塩量を
含むことができるが、不活性化ポリオウイルスの添加の結果その添加量を増加さ
せる必要があるかもしれない。本発明のワクチンは１．２ｍｇ／ｍｌ未満、好ま
しくは０．８ｍｇ／ｍｌ未満のアルミニウム塩を含む。アルミニウム塩の量は、
ワクチン分野で用いられる方法に対応して、常にアルミニウム原子（Ａｌ^３＋）
に関して表示される。それゆえ、本明細書において言及されるすべてのアルミニ
ウムの量はこのようにして表示される。

【００４５】本発明のワクチンは、例えば、２−フェノキシエタノールおよび／またはホル
ムアルデヒド等のごとき他の成分を含むことができる。

【００４６】選択される種々の処方は上記のものの１つであってもよく、例えば、詳細には
、Bordetella pertussis、Ａ型肝炎またはＢ型肝炎由来の他の抗原を含むもので
あってもよい。

【００４７】本発明のワクチンは、不溶性アルミニウム塩の存在によりわずかに白濁した注
射可能懸濁液の形態であってもよい。好ましくは、免疫用量は約０．５ｍｌであ
り、ガラスシリンジ中に前以て充填されたものである。深い皮下経路または筋肉
内経路により、好ましくは筋肉内経路により、例えば三角筋において投与を行う
。

【００４８】本発明の特別な具体例において、最適な免疫反応を促進し、これらの抗原の反
応原性および／またはアレルギー性の効果を最小化するために、１０日ないし３
カ月の間隔をおいて数回に分けてワクチン注射が同じ個体になされる。１次免疫
には、好ましくは、本発明のワクチンを３回投与し、最初の２回は１ないし２カ
月間隔で投与し、３回目の投与は２回目の投与から６ないし１２カ月たってから
行う。例えば、１次免疫を受けた集団あるいは感作された集団に使用できる追加
免疫には、本発明のワクチンを１回、あるいは少なくとも１カ月おいて２回投与
する。

【００４９】有利には、灰白髄炎に対する経口ワクチンを用いて１次免疫が行われた場合の
追加免疫において本発明のワクチンを用いることができる。

【００５０】好ましくは、４ないし１６Ｌｆ、好ましくは１０Ｌｆ／ｍｌのジフテリアトキ
ソイド；６ないし３０Ｌｆ／ｍｌ、好ましくは２０Ｌｆ／ｍｌの破傷風トキソイ
ドならびにそれぞれ４０ＩＵ、８ＩＵおよび３２ＩＵ（シグモイド法）の１
、２および３型ポリオウイルスのＤ抗原を含む０．５ｍｌの用量を、１次免疫お
よび追加免疫の両方に使用する。存在するアルミニウム塩の量は、好ましくは、
Ａｌ^３＋原子に関して表した場合０．７０ｍｇ／ｍｌである。

【００５１】本発明のワクチンは、注射された場合、現存するＴＤポリオおよびＴｄワクチ
ンにより誘発される望ましくない効果を減少させることを可能にする。よって、
例えば、四肢の無感覚、腫れ、発熱、赤斑に関連した痛み、結節、硬化および／
または斑状出血のごとき局所的反応の減少、ならびに呼吸困難、意識消失または
痙攣の減少を観察することが可能である。これらの反応は、抗原および／または
アルミニウム塩のごときワクチンの他のある種の化合物に対するアレルギー性、
または反応原性の反応に分類することができる。かくして、出願人は、本発明の
ワクチンが特に成人における追加免疫に適することを示した。

【００５２】以下の実施例において本発明をさらに詳細に説明する。特記しないかぎり、パ
ーセントは重量パーセントである。しかしながら、これらの実施例は本発明の主
題の説明のためのものであり、本発明を限定するものではないことはいうまでも
ない。

【００５３】実施例１種々の量のジフテリアトキソイドを含むＴｄポリオの免疫原性ＩＭＤ培地中、３６℃で１５ないし１８時間、ＩＭ１５１４Ｎ３Ｓ株を培養
し、培地を清澄化し、限外濾過により濃縮し、６／１０００のホルマリン存在下
、３７℃で４週間解毒し、次いで、トキシンを精製して窒素１ｍｇあたり約１７
００Ｌｆの純度とすることによりジフテリアトキソイド（ｄ）を調製する。

【００５４】平行して、ＮａＣｌおよびクエン酸ナトリウムを添加したMassachusetts培地
中、３５℃で４日間Harvard株を培養し、培地を遠心分離し、限外濾過により濃
縮し、５．５／１０００のホルマリンおよび５ｇ／ｌの重炭酸ナトリウムの存在
下、３５℃で２週間解毒し、次いで、トキシンを精製して窒素１ｍｇあたり約１
２００Ｌｆの純度とすることにより破傷風トキソイド（Ｔ）を調製する。

【００５５】同様に、不活性化１型（MAHONEY株）、２型（MEF 1株）および３型（Saukett
株）ポリオウイルスをSalk法により調製する。

【００５６】次いで、上記の５種の免疫原性抗原を水酸化アルミニウム、２−フェノキシエ
タノール、ホルムアルデヒド、フェノールレッド不含Hanks培地１９９、および
水と混合する。これを行うために、水の存在下でアルニミウムゲルを滅菌し、ｐ
Ｈを５．６ないし６に合わせ、ＰＤＴ（２または８Ｌｆ／１回分）およびＰＴＴ
（１０Ｌｆ／１回分）およびHanks培地１９９を順次添加し、ｐＨを６〜６．９
に合わせ、３タイプのポリオウイルスを添加し、次いで、２−フェノキシエタノ
ールおよびホルムアルデヒドを添加し、所望によりｐＨを６．８ないし７に合わ
せる。

【００５７】最終生成物０．５ｍｌをＴｄポリオワクチンとして使用し、それは最少でも２
ＩＵのジフテリアトキソイド、最少でも２０ＩＵの精製破傷風トキソイド、それ
ぞれ不活性型の１、２および３型ポリオウイルスについて４０ＩＵ、８ＩＵお
よび３２ＩＵのＤ抗原（値はシグモイド法により測定）、Ａｌ^３＋原子に関し
て表した場合０．３５ｍｇの水酸化アルミニウム、２．５μｌの２−フェノキシ
エタノールならびに１２．５μｇのホルムアルデヒドを含有し、残りはフェノー
ルレッド不含Hanks培地１９９および水からなる。

【００５８】フェーズＩの研究の主な目的は、吸着されたＴｄポリオワクチンの最初の投与
の臨床的および生物学的耐性を確認することであった。この目的のために、３１
人の健康成人志願者を動員した。各０．５ｍｌの３つのバッチのワクチンを用い
た。それらは上記精製ジフテリアトキソイド量においてのみ異なっていた：１回
につき２Ｌｆ、５Ｌｆおよび８Ｌｆ。３つのバッチを、１のバッチにつき１０個
体に投与した。各個体は１のバッチから１回免疫され、三角筋に注射された。

【００５９】２、５および８Ｌｆの免疫群において全身的反応は報告されなかった。２Ｌｆ
のＰＤＴのバッチで免疫された群の８個体、５ＬｆのＰＤＴのバッチで免疫され
た群の６個体および８ＬｆのＰＤＴで免疫された群の８個体において最初の１週
間において少なくとも１の局所的反応が報告された。その反応はいくつかの赤斑
、結節、硬化および／または斑状出血に関連する痛みを常に伴っていた。すべて
の反応は処置しなくても消失し、個体の日常生活に支障をきたすものではなかっ
た。最初の１週間を経過した後は反応が起こらなかった。研究者は望ましくない
重大な出来事を確認することはなかった。

【００６０】この研究の第２の目的は、吸着されたワクチンの最初の３つのバッチの免疫原
性を評価することであった。結果は、３つのバッチに関して５種の抗原に対する免疫応答が優れていたことを示す。個体が若いことおよび免疫してから時間がた
っていないことによる高い初期力価にもかかわらず、各抗原に関して追加免疫の
効果が得られた。

【００６１】実施例２若い成人における免疫原性５０８人の若い成人における臨床試験でＴｄポリオワクチンの免疫原性および
その無害性を調べた。各個体に０．５ｍｌのＴｄ（Diftavax^R）またはＴｄポリオワクチンを左の三
角筋に注射し、灰白髄炎に対する０．５ｍｌのワクチン（VPI^R,PMsv）またはプ
ラシボを右の三角筋に注射した。吸着されたＴｄワクチンの１回分は破傷風トキ
ソイド（活性≧２０ＩＵ）、ジフテリアトキソイド（活性≧２ＩＵ）および水
酸化アルミニウム（≦１．２５ｍｇ）を含有する。ＩＰＶワクチンは１型（４０
ＩＵ）、２型（８ＩＵ）および３型（３２ＩＵ）ポリオウイルスのＤ抗原を
含有する。プラシボはＤ抗原を含有しないこと以外はＩＰＶと同じ成分を有する
。Ｔｄポリオワクチンは実施例１に記載したのと同じ成分を有する（１回分につ
き５ＬｆのＰＤＴ）。

【００６２】ＥＬＩＳＡアッセイを用いて、個体血清の抗−ジフテリア、破傷風および灰白
髄炎抗体を調べた。結果は、免疫前には実質的にすべての個体がＰＤＴに関してセロポジティブで
あったことを示す（９９．２％が０．０１ＩＵ／ｍｌまたはそれ以上の力価を
有し：可能な防御；９２．６％が０．１ＩＵまたはそれ以上の力価を有してい
た：確実な防御）。Ｔｄポリオで免疫してから１カ月後、９９．６％の個体が０
．１ＩＵ／ｍｌまたはそれ以上の抗体力価を有し、８２．４％が１ＩＵまたは
それ以上の力価を有していた（長期防御）。全体として、１７．４％の個体がセ
ロコンバージョンを示した。

【００６３】同様に、大部分の個体は破傷風トキソイドに関してセロポジティブであった（
９９．６％が０．０１ＩＵ／ｍｌまたはそれ以上の力価を有し：可能な防御；
９８．４％が０．１ＩＵ／ｍｌまたはそれ以上の力価を有していた：確実な防
御）。Ｔｄポリオで免疫してから１カ月後、１００％の個体が０．１ＩＵ／ｍ
ｌまたはそれ以上の抗体力価を有し、９９．２％が１ＩＵ／ｍｌまたはそれ以
上の力価を有していた（長期防御）。全体として、２５．２％の個体がセロコン
バージョンを示した。

【００６４】灰白髄炎に対する防御に関しては、大部分の個体が３タイプのポリオウイルス
に関してセロポジティブであった。全体として、１型に関して９９．２％の個体
が５またはそれ以上の抗体力価を有し、２型に関して１００％が５またはそれ以
上の抗体力価を有し、３型に関して９７．６％が５またはそれ以上の抗体力価を
有していた。Ｔｄポリオで免疫してから１カ月後、１００％の個体がすべてのポ
リオウイルスタイプに関して５またはそれ以上の力価を有しており、最小力価は
１型については１２０、２型については１６０、３型については８０であった。
全体として、すでに高い抗体力価を有している個体の６３．１％がセロコンバー
ジョンを示した。

【００６５】Ｔｄポリオで得られた結果、ならびにＴｄおよびＶＰＩ^Ｒ対照ワクチンを組み合わせて得られた結果を比較した場合、同等の抗体応答が得られる。

【００６６】実施例３若い成人における無害性および耐性１７４２人の若い成人においてＴｄポリオワクチンの無害性および耐性を調べ
た。これらの各個体に、実施例１に示すワクチン０．５ｍｌを左の三角筋に注射
して投与した（ＰＤＴ：１回につき５Ｌｆ）。免疫してから１５分後に効果を評
価した。免疫から１カ月の間、局所的、領域的および全身的な効果を評価した。

【００６７】共通の即時的効果は注射部位の赤斑の出現（０．３４％の個体）および痛み（
０．１１％）である。免疫後１カ月間における共通の局所的効果は下記のものであり、６６％の個体
にみられた：注射部位の痛み（６４．４１％）、赤斑（９．１３％）ならびに皮
下結節（３．３３％）。これらの望ましくない効果は免疫後最初の３日で生じ、
２〜３日続く。０．８６％の個体において浮腫、炎症、偏頭痛、腕の無感覚、自
発的でない筋肉の萎縮およびパラエステシア（paraesthesia）も報告された。

【００６８】免疫後１カ月間における共通の全身的効果は下記のものであり、１８％の個体
においてみられた：頭痛（１０．５％）、悪心または嘔吐（２．７５％）および
不快感（２．４１％）。全身的なじんましんまたはかゆみの発生は報告されなか
った。これらの出来事は免疫後最初の３日で生じ、２〜３日続く。わずか０．２
３％の個体が免疫後最初の３日間に４０℃を超える発熱を示した。

【００６９】実施例４若い個体においてＴｄ＋ポリオと比較した場合のＴｄポリオの無害性
および耐性実施例２に記載したＴｄポリオワクチンは、５０８人の若い成人に関する試験
において優れた耐性を示す（実施例２）。そのうえ、当該結果は実施例３に記載
した試験で得られた結果と同等である。

【００７０】ポリオワクチン注射部位において観察された少なくとも１の局所的または領域
的な徴候を有していた個体（３６．５％）から、プラシボ注射部位において観察
された少なくとも１の局所的または領域的な徴候を有していた個体（１４．８％
）を差し引いて、次いで、このパーセンテージをＴｄワクチンの注射部位におい
て観察された少なくとも１の局所的または領域的な徴候を有していた個体のパー
センテージ（６６．７％）に加えると、望ましくない出来事の出現において約８
％の相違（８８．４％対８０．５％）がみられる。それゆえ、Ｔｄポリオワクチンは現存ワクチンの同時投与よりも良く耐えられるものである。

【００７１】実施例５４０歳以上の個体における免疫原性４０歳以上（４０ないし７８歳）の１１３個体について臨床試験を行ってＴｄ
Ｐｐｌｉｏワクチンの免疫原性および無害性を調べた。ジフテリア、破傷風およ
び灰白髄炎に対してすべての個体を１次免疫したが（１年に３回）、それぞれ最
後の免疫から３２年（最短１５年）、２８年（最短１０年）および２８年（最短
１０年）たっていた。

【００７２】実施例１に記載したＴｄポリオ（ＰＤＴ１回に５Ｌｆ）０．５ｍｌを右の三
角筋に注射した個体に、２８日後に２回目の注射を左の三角筋に行った。ＥＬＩ
ＳＡアッセイを用いて抗−ジフテリア、破傷風および灰白髄炎抗体を個体の血清
から評価した。

【００７３】結果は、個体のわずか５０％が破傷風に対して最初に防御されたことを示し、
かくして、免疫における傾向が示された。８３％の個体は、最初は１、２および
３型ポリオウイルスに対してセロポジティブであった。１回目の免疫から２８日
目には、ジフテリア、破傷風ならびに１、２および３型ポリオウイルスに対して
防御された個体の割合はそれぞれ８０．５％、９７．３％および１００％に増加
した。２回目の免疫から５６日目には、ジフテリア、破傷風ならびに１、２およ
び３型ポリオウイルスに対して防御された個体の割合はそれぞれ９３．７％、１
００％および１００％に増加した。

【００７４】実施例６４０歳以上の個体においてＴｄ＋ポリオと比較した場合のＴｄポリオ
の無害性および耐性実施例５に記載したＴｄポリオワクチンの無害性および耐性を評価した。結果
は、耐性のプロファイルがＴｄ＋ポリオの組み合わせにより得られた耐性のプロ
ファイルと類似したものであることを示す。しかしながら、Ｔｄポリオワクチンは望ましくない重大な出来事をほとんど誘発しない（１０００回の注射につき１
．８例未満）。

【００７５】実施例７成人用ｄ．Ｔ．ポリオ．ＰＴ．Ｆ−ＨＡ追加ワクチン５Ｌｆのジフテリアトキソイド（窒素１ｍｇあたり１７００Ｌｆの純度を有す
る）、５Ｌｆの破傷風トキソイド（窒素１ｍｇあたり１２００Ｌｆの純度を有す
る）、それぞれ不活性化１、２および３型ポリオウイルスのＤ抗原４０ＩＵ、
８ＩＵおよび３２ＩＵ（シグモイド法により測定）、６μｇ／ｍｌの精製Bord
etella pertussisトキソイド（ＰＴ）および６μｇ／ｍｌのBordetella pertuss
is Ｆ−ＨＡ、ならびに０．３５ｍｇの水酸化アルミニウムからなり、残りはフ
ェノールレッド不含のHanks培地１９９および水からなる保存料含有または不含
の免疫懸濁液０．５ｍｌを調製する。２．５μｌの２−フェノキシエタノールおよび１２．５μｇのホルムアルデヒ
ドを保存料として添加することもできる。ジフテリアおよび破傷風トキソイド、ならびに不活性化ポリオウイルスを実施
例１に記載したように調製した。

【００７６】 Sekuraらの方法（J. Biol. Chem., 258, 14647-14651, 1993）に従ってB. per
tussisトキソイドを調製し、Munozらの変法（Infect. Immun., 33, 820-826, 19
81）に従って解毒し、次いで、アルミニウムゲルに前吸着させる。ＥＰ０２４２
３０２の実施例３に記載された方法を用いてB. pertussis F-HAを調製し、次い
で、アルミニウム塩に前吸着させる。

【００７７】次いで、上記免疫原性抗原を水酸化アルミニウムおよび水と混合し、適当な場
合には、保存料とも混合する。これを行うために、アルミニウムゲルを水の存在
下で滅菌し、ｐＨを５．６ないし６に合わせ、PDT、PTTおよびB. pertussis PT
およびF-HAを順次添加し、ｐＨを６．８〜７に合わせ、Hanks培地１９９および
３タイプのポリオウイルスを添加し、次いで、適当な場合には、２−フェノキシ
エタノールおよびホルムアルデヒドを添加する。

【００７８】実施例８成人用ｄ．Ｔ．ポリオ．ＰＴ．Ｆ−ＨＡ．ＨＢｓ追加ワクチン５Ｌｆのジフテリアトキソイド（窒素１ｍｇあたり１７００Ｌｆの純度を有す
る）、５Ｌｆの破傷風トキソイド（窒素１ｍｇあたり１２００Ｌｆの純度を有す
る）、それぞれ不活性化１、２および３型ポリオウイルスのＤ抗原４０ＩＵ、
８ＩＵおよび３２ＩＵ（シグモイド法により測定）、６μｇ／ｍｌの精製Bord
etella pertussisトキソイド（ＰＴ）および６μｇ／ｍｌのBordetella pertuss
is Ｆ−ＨＡ、５μｇ／ｍｌのＢ型肝炎ＨＢｓ抗原、ならびに０．３５ｍｇの水
酸化アルミニウムからなり、残りはフェノールレッド不含のHanks培地１９９お
よび水からなる保存料不含の免疫懸濁液０．５ｍｌを調製する。ジフテリアおよび破傷風トキソイド、ならびに不活性化ポリオウイルスを実施
例１に記載したように調製した。B. pertussis PTおよびF-HAを実施例７に記載
したように調製した。特許ＥＰ２７３８１１（Pasteur Vaccines）に記載された方法に従ってＨＢｓ
抗原を調製した。アルミニウムゲルに前吸着させることにより安定化させた。

【００７９】次いで、上記免疫原性抗原を水酸化アルミニウムおよび水と混合する。これを
行うために、アルミニウムゲルを水の存在下で滅菌し、ｐＨを５．６ないし６に
合わせ、PDT、PTTおよびB. pertussis PTおよびF-HAを順次添加し、ｐＨを６．
８〜７に合わせ、Hanks培地１９９および３タイプのポリオウイルスを添加し、
必要ならばｐＨを６．８に合わせ、ＨＢｓを添加する。

【００８０】実施例９成人用ｄ．Ｔ．ポリオ．ＰＴ．Ｆ−ＨＡ．ＨＢｓ．ＨＡ追加ワクチン
５Ｌｆのジフテリアトキソイド（窒素１ｍｇあたり１７００Ｌｆの純度を有す
る）、５Ｌｆの破傷風トキソイド（窒素１ｍｇあたり１２００Ｌｆの純度を有す
る）、それぞれ不活性化１、２および３型ポリオウイルスのＤ抗原４０ＩＵ、
８ＩＵおよび３２ＩＵ（シグモイド法により測定）、６μｇ／ｍｌの精製Bord
etella pertussisトキソイド（ＰＴ）および６μｇ／ｍｌのBordetella pertuss
is Ｆ−ＨＡ、５μｇ／ｍｌのＢ型肝炎ＨＢｓ抗原、５μｇ／ｍｌの不活性化Ａ
型肝炎ウイルス、ならびに０．３５ｍｇの水酸化アルミニウムからなり、残りは
フェノールレッド不含のHanks培地１９９および水からなる保存料不含の免疫懸
濁液０．５ｍｌを調製する。ジフテリアおよび破傷風トキソイド、ならびに不活性化ポリオウイルスを実施
例１に記載したように調製した。B. pertussis PTおよびF-HAを実施例７に記載
したように調製した。実施例８の記載のごとくＨＢｓ抗原を調製した。 Flemingらの方法（上記）に従って不活性化Ａ型肝炎ウイルスを調製する。

【００８１】次いで、上記免疫原性抗原を水酸化アルミニウム、保存料および水と混合する
。これを行うために、アルミニウムゲルを水の存在下で滅菌し、ｐＨを５．６な
いし６に合わせ、PDT、PTTおよびB. pertussis PTおよびF-HAを順次添加し、ｐ
Ｈを６．８〜７に合わせ、Hanks培地１９９および３タイプのポリオウイルスを
添加し、必要ならばｐＨを６．８に合わせ、次いで、ＨＢｓおよび不活性化Ａ型
肝炎ウイルスを順次添加する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 39/295 Ａ６１Ｋ 39/295 Ａ６１Ｐ 25/00 Ａ６１Ｐ 25/00 31/04 31/04 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 4C085 AA04 AA05 BA10 BA12 BA17 BA53 BA88 BA89 CC07 CC08 DD01 DD03 DD31 DD41 EE03 EE06 FF02 GG03 GG04

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】 −Ａｌ^３＋原子に関して表した場合、１ｍｌあたり１．２ｍ
ｇ未満のアルミニウム塩、 −少なくともポリオウイルス、Corynebacterium diphtheriaeおよびClostridi
um tetaniを起源とする免疫原性抗原、および −Corynebacterium diphteriaeの免疫原性抗原として使用される１ｍｌあたり
４〜１６Ｌｆの量のジフテリアトキソイドを含むワクチン。
【請求項２】ジフテリアトキソイドの量が１ｍｌあたり約１０Ｌｆである
ことを特徴とする請求項１記載のワクチン。
【請求項３】破傷風トキソイドの量が１ｍｌあたり約２０Ｌｆである請求
項１または２に記載のワクチン。
【請求項４】 Bordetella pertussis、Ａ型肝炎抗原およびＢ型肝炎抗原か
ら選択される少なくとも１種の抗原をさらに含む請求項１ないし３のいずれか１
項に記載のワクチン。
【請求項５】１次免疫および／または追加免疫に使用される請求項１ない
し４のいずれか１項に記載のワクチン。
【請求項６】該抗原および／またはアルミニウム塩により誘発される反応
原性および／またはアレルギー性の効果を最小化するように意図された請求項５
記載のワクチン。
【請求項７】少なくともポリオウイルス、Corynebacterium diphtheriae
およびClostridium tetaniに対して個体を防御するための医薬品を製造するため
の請求項１ないし６のいずれか１項に記載のワクチンの使用。
【請求項８】１０日ないし３カ月の間隔をおいて同じ成人個体に分けて注
射することを意図されており、該抗原により誘発される反応原性および／または
アレルギー性の効果を最小化することを意図されている請求項７記載の使用。
【請求項９】少なくとも２種の注射可能用量の請求項１ないし４のいずれ
か１項に記載のワクチンを含む医薬キット。
【請求項１０】請求項１ないし４のいずれか１項に記載のワクチンを投与
することを特徴とする、少なくともポリオウイルス、Corynebacterium diphther
iaeおよびClostridium tetaniに対して免疫する方法。
【請求項１１】ワクチンが深い皮下経路または筋肉内経路により、好まし
くは三角筋領域における筋肉内経路により、３回に分けて、好ましくは０．５ｍ
ｌずつ投与され、最初の２回は１ないし２カ月間隔で、３回目の投与は２回目の
投与から６ないし１２カ月たってから行われるものである、請求項１０記載の１
次免疫方法。
【請求項１２】ワクチンが深い皮下経路または筋肉内経路により、好まし
くは三角筋領域における筋肉内経路により、１回または２回、好ましくは０．５
ｍｌずつ、少なくとも１カ月おいて投与されるものである、請求項１０記載の追
加免疫方法。