JP2003519654A - 脈管形成を抑制するためのエピガロカテキンガラートの使用 - Google Patents

脈管形成を抑制するためのエピガロカテキンガラートの使用

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Abstract

(57)【要約】 本発明はほ乳動物の組織における脈管形成を抑制する方法に関し、有効量のエピガロカテキンガラート、エピカテキンガラートもしくはそれらの組合わせを組織に供給することを含む。この方法は、種々の皮膚ガン、乾癬、クモ状静脈腫もしくは目のまわりの隈の治療のような脈管形成に関連する皮膚異常の治療に特に有用であり、そこではカテキンは局所的に使用される。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 発明の分野 本発明は化粧用および薬学的治療法に関する。もっと具体的には、本発明は脈
管形成（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）関連疾患、特に皮膚疾患の治療に関する。 発明の背景 すでに存在する血管から新しい毛細管を生じる過程である脈管形成は、創傷治
ゆおよび女性の生殖周期のようなある非常に特別の存在を除けば、通常は健康な
成人では起らないようなしっかりと調節されたできごとである。それは数多くの
段階を含む複雑な過程であり、基底膜（ｂａｓｅｍｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ）
分解、細胞増殖、移行、および内皮細胞の分化、管腔の形成、ならびに新たな基
底膜の堆積を含む。その過程の調節も複雑であり、多数の様々な因子、たとえば
コラゲナーゼおよびプロテインキナーゼＣのような酵素、成長因子およびＶＥＧ
ＦおよびｃＡＭＰのような信号分子、ならびに細胞マトリックス接着分子を含む
。脈管形成は、腫瘍形成のようなある異常、および慢性関節リウマチのような慢
性炎症性疾患の脈管形成の不可欠の部分である。脈管形成は慢性炎症性皮膚疾患
と関連しており、表皮ケラチノサイトにおけるＶＥＧＦの過剰発現による毛細管
および次の細静脈の新生により特徴づけられる。新しい血管成長は単球およびリ
ンパ球の浸潤を促進することにより慢性炎症を悪化させる。脈管成長因子ＶＥＧ
ＦおよびＦＧＦに加えて、サイトカインＴＮＦａおよびＩＬ−１ならびに脂質炎
症性メディエータＰＧＥ1 ，ＰＧＥ2 およびＰＡＦも炎症性脈管形成において関
係する。しかし、経路に多くの段階があるので、このことは経路において進行が
停止されうる多くの箇所を付与する。脈管形成抑制剤の数多くの異なる天然源は
、従来より報告されている；本発明は、脈管形成の進行を制御する新規な天然源
をここに提供する。 発明の要約 本発明はほ乳動物の組織における脈管形成を抑制する方法に関し、有効量のエ
ピガロカテキンガラート（ＥＧＣＧ）、エピカテキンガラート（ＥＣＧ）、もし
くはそれらの組合わせを組織に供給することを含む。その方法は慢性炎症性異常
およびガン性腫瘍のような多くの異常を治療するのに使用されうる。特に好適な
態様において、ＥＧＣＧおよび／またはＥＣＧは種々の皮膚異常に関連する脈管
形成を抑制もしくは減少させるために局所的に付着される。 発明の詳細な説明 ＥＧＣＧおよびＥＣＧは、天然源の中でとりわけ緑茶に天然に存在するいくつ
かのポリフェノール類の２つである。これらの２つの化合物、および緑茶は、通
常、多くの化粧用および薬剤用の用途があり、フリーラジカルの捕促剤、皮膚白
色化、抗炎症、および毛髪着色を含む。そして、ここにこれらの化合物が脈管形
成を抑制することができることが意外にも見出された。特に、これらの各化合物
はコラゲナーゼおよびプロテインキナーゼＣの両方、ならびに内皮細胞のＶＥＧ
Ｆ誘起による移行および脈管形成経路に含まれる多くの成分のいくつか、を抑制
し得ることが最初に試験管内で観察された。脈管形成へのこれらの抑制効果はつ
いでひよこの胚の漿尿膜分析（ｃｈｉｃｋ ｅｍｂｒｙｏ ｃｈｏｒｉｏａｌｌ
ａｎｔｏｉｃ ｍｅｍｂｒａｎｅ ａｓｓａｙ）において生体内で確認された。
【０００２】 いくつかのフラボノイド化合物は脈管形成を抑制する活性があることが従来示
されていたが（Ｆｏｔｓｉｓら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ５：２９１
６〜２９２１頁、１９９７年）、この点についてカテキンは不活性であることが
明白に示されていた。したがって、これらの特定の緑茶カテキンが脈管形成に効
果があることが観察されるのは特に驚くべきことである。本発明に用いられるカ
テキンは緑茶のＥＧＣＧもしくはＥＣＧに富む画分であり得、または実質的に純
粋なＥＧＣＧ，ＥＣＧ、もしくはそれらの組合わせであり得、「実質的に純粋な
」とは、少くとも７５％、好ましくは少くとも９０％が非ＥＧＣＧもしくは非Ｅ
ＣＧ化合物を含まないことを意味する。
【０００３】 ＥＧＣＧおよびＥＣＧの脈管形成効果は使用量に依存する。内皮細胞の移行抑
制を測定する漿尿膜分析で評価するとき、０．０１mg／ml程度の低濃度がこの移
行を抑制するのに実質的な効果を有し、この効果はその濃度が増加するにつれて
増加し、約１mg／mlの濃度レベルでもっとも著しい。したがって、脈管形成に関
連する疾患の治療のための実際的な使用のために、使用される活性化合物の有効
量は、全組成物の質量基準で約０．０１〜約１０％、好ましくは約０．０５〜約
５％、最も好ましくは約０．０５〜約３％に及ぶ。各化合物は単独で、もしくは
もう１つと組合わせて使用されうる。
【０００４】 本発明方法に有用な組成物のカテキン成分は、治療されるべき異常に当然に依
存する、意図される投与形態に適切ないかな種類の賦形剤（ｖｅｈｉｃｌｅ）と
も配合され得る。カテキンは、全身の（ｓｙｓｔｅｍｉｃ）、たとえば経口もし
くは非経口のデリバリーのために処方され得、または局所的なデリバリーのため
に処方され得る。これらの活性成分の処方は、たとえば「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’
ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」，１８版（１９９０年
）に記載される日常的な方法により達成され、その内容は引用によりここに組入
れられる。
【０００５】 脈管形成抑制におけるこれらの緑茶カテキンの使用は、その病理が血管の増殖
、もしくは血液細胞の移行と関係する幅広い種々の異常の治療にカテキンを非常
に有用にする。このような異常は、血管化固形ガン性腫瘍を含み、それは増殖組
織として、その成長を支持するために血管を非常に頼みとする。このように、Ｅ
ＧＣＧ／ＥＣＧ組成物は腫瘍性の成長を局所的に、もしくは全身的に治療する方
法に用いられうる。さらに、ＥＧＣＧおよび／またはＥＣＧはリウマチ様関節炎
および乾癬のような慢性炎症性異常に起因する脈管形成を抑制するのに使用され
うる。ＥＧＣＧ／ＥＣＧ組成物は、さらに糖尿病性網膜症の治療に使用されうる
。
【０００６】 好適な態様において、カテキンは脈管形成に関連する皮膚異常を治療するのに
局所的に使用されうる。このような異常の例は、乾癬、アトピー性皮膚炎、接触
性皮膚炎のような炎症性皮膚疾患、メラノーマまたは基底もしくは扁平上皮細胞
癌のような皮膚ガン、クモ状静脈腫、および目のまわりの隈、を含む。局所的な
使用において、活性カテキン成分は前述の量で、選択された賦形剤に添加され、
そして約０．１mg／cm2 〜２mg／cm2 皮膚の量で皮膚に付着される。異常に依存
して、組成物は、異常が軽減されるときまで一時的な計画にもとづいて使用され
得、または慢性の異常には、組成物は慢性的に使用され得、たとえば混合物を含
有する組成物の安全で有効な量が、脈管形成に関連する異常の症状の進行を抑制
するために、またはくり返えす異常を軽減するために使用される。すべての場合
において、組成物の局所的使用は１回／週〜約４〜５回／日、好ましくは約３回
／週〜約３回／日、最も好ましくは約１〜２回／日、実施されうる。「慢性」の
使用は、ここでは、局所的使用の期間が使用者の生涯にわたることがあり得、好
ましくは少くとも約１ヶ月、もっと好ましくは約３ヶ月〜約２０年、もっと好ま
しくは約６ヶ月〜約１０年、なおもっと好ましくは約１年〜約５年であり、治療
は目のまわりのかげおよび隈、皮膚炎症、またはクモ状静脈腫のような異常の進
行を抑制しうる。
【０００７】 他の活性物を本組成物のＥＧＣＧ／ＥＣＧ成分と組合わせることも望ましい。
ＥＧＣＧもしくはＥＣＧと組合わせて特に有利な効果を付与しうる他の活性物の
例は、サメ軟骨、フィトスフィゴシン、もしくはスフィンゴシンであり、それら
のそれぞれも脈管形成に効果を有する；皮膚白色化剤、特にチロシナーゼ阻害剤
であり、関連するメラニン化を治療し、防止するための黒ずんだ隈の治療におい
てＥＧＣＧ／ＥＣＧの活性を補う；そして抗刺激原（ａｎｔｉｉｒｒｉｔａｎｔ
ｓ）であり、治療すべき異常に関連しうる浮腫を防止する。
【０００８】 本発明は、次の制限的でない実施例によりさらに例証される。 実施例 実施例１ コラーゲンマトリックス上の内皮細胞の移行を抑制する緑茶カテキンの能力が
「Ｂｏｙｄｅｎ室」化学走性分析にならって設計された系で評価された。２つの
室を分離する膜はコラーゲンＴＶ型で被覆される。上部室はヒトの皮膚の微細血
管内皮細胞（ＨＭＶＥＣ−ｄ，２５００００セル／ml）およびウシ血清アルブミ
ンを充填される。下部室は血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ，１００ng／ml）および
５％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）を含有する。０．００１〜１mg／mlの濃度で
ＥＧＣＧ／ＥＣＧの組合わせ（７７および２３％）を含有する組成物が上部およ
び下部室に添加され、３７℃で６時間インキュベートされる；適切な賦形剤対照
も同時に行なわれる。移行細胞の量がトリプシン化により膜表面に残る細胞を除
去し、膜中に埋込まれた細胞を可溶化し、そして光学密度６００nmで１％クリス
タルバイオレットで分光光度計で定量化することにより測定される。その結果は
表１に示されるように、ＥＧＣＧ／ＥＣＧが約０．０１〜１mg／mlの濃度で、使
用量に依存して血管成長を抑制することを示す。 実施例２ 受精鶏卵の漿尿膜（ＣＡＭ）は、抗脈管形成活性の分析に適した血管ネットワ
ークを付与することが示されている。緑茶カテキンの生体内活性を試験するため
に、受精した白色レグホンの卵が３７℃で１０日間インキュベートされ、４８時
間試験試料で処理され、そして対照に比較して脈管構造（ｖａｓｃｕｌａｔｕｒ
ｅ）の減少について評価される。４の日に、卵の先端に穴をあけ、そして再び密
封された穴より卵白が除去される。この時に、四角形の窓が胚にわたって直接に
殻に開けられ、テープで再密封される。１０の日に、卵はインキュベーターから
取除かれ、漿尿膜は血管特性を評価される；異常な、もしくは発育不十分な膜を
有する卵は捨てられる。０．０１〜１mg／mlにわたる使用量の試験試料が１３mm
の丸いＴｈｅｒｍａｎｏｘカバーガラス上にピペット（４０μｌ）で分注され、
４８時間インキュベーターにもどされる。４８時間のインキュベート期間につづ
いて、卵のＣＡＭは未処理の対照と比較して３つの基準について評価される：卵
の生育可能性（ｖｉａｂｉｌｉｔｙ）、血管成長の防止を示す卵の数、および脈
管構造の減少を示す領域の程度（たとえば、２５〜５０％、５０〜７５％、もし
くは＞７５％）。フィトスフィンゴシンが正の対照として使用される（２．５mg
／mlで１００％抑制を示す）。表示はＥＧＣＧ／ＥＣＧで観察された結果を示し
、比較的高い濃度でＥＧＣＧが生体内で脈管形成を抑制することを示す。
【０００９】 表１ 試料 使用量 脈管構造の減少を有する卵％ ＥＧＣＧ／ＥＣＧ １．０mg／ml ３０％ （脈管構造の２５〜５０％減少） ＥＧＣＧ／ＥＣＧ ０．５mg／ml ２５％ （脈管構造の２５〜５０％減少） ＥＧＣＧ／ＥＣＧ ０．０１mg／ml ０％ フィトスフィンゴシン ２．５mg／ml １００％ （脈管構造の５０〜１００％減少）
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 17/02 Ａ６１Ｐ 17/02 17/06 17/06 35/00 35/00 // Ｃ０７Ｄ 311/62 Ｃ０７Ｄ 311/62 Ｆターム(参考） 4C062 FF11 4C084 AA19 NA14 ZA361 ZA362 ZA891 ZA892 ZB112 ZB261 ZB262 4C086 AA01 AA02 BA08 MA01 MA02 MA04 MA07 NA14 ZA36 ZA89 ZB26 4C087 AA01 AA02 BB46 MA02 NA14 ZA36 ZA89 ZB26 4C206 AA01 AA02 FA03 MA01 MA02 MA04 MA13 NA14 ZA36 ZA89 ZB26

Claims (23)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 有効量のエピガロカテキンガラート、エピカテキンガラート
    もしくはそれらの組合わせを含有する組成物を組織に供給することからなる、ほ
    乳動物における脈管形成（ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ）を抑制する方法。
  2. 【請求項２】 カテキンがエピガロカテキンガラートである請求項１記載の
    方法。
  3. 【請求項３】 カテキンがエピガロカテキンガラートおよびエピカテキンガ
    ラートの組合わせである請求項１記載の方法。
  4. 【請求項４】 カテキンの量が約０．０１〜約１０％である請求項１記載の
    方法。
  5. 【請求項５】 組織が固形腫瘍である請求項１記載の方法。
  6. 【請求項６】 組織が皮膚である請求項１記載の方法。
  7. 【請求項７】 有効量のエピガロカテキンガラート、エピカテキンガラート
    もしくはそれらの組合わせを含有する組成物を皮膚に付着させることからなる、
    脈管形成に関連する異常（ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ）を治療もしくは抑制する方法
    。
  8. 【請求項８】 組成物がエピガロカテキンガラートを含有する請求項７記載
    の方法。
  9. 【請求項９】 組成物がエピガロカテキンガラートおよびエピカテキンガラ
    ートの組合わせを含有する請求項７記載の方法。
  10. 【請求項１０】 カテキンの量が約０．０１〜約１０％である請求項７記載
    の方法。
  11. 【請求項１１】 カテキンの量が約０．０５〜約５％である請求項７記載の
    方法。
  12. 【請求項１２】 カテキンの量が約０．０５〜約３％である請求項７記載の
    方法。
  13. 【請求項１３】 異常が腫瘍性の異常である請求項７記載の方法。
  14. 【請求項１４】 異常が扁平上皮細胞癌；基底細胞癌、もしくはメラノーマ
    である請求項１３記載の方法。
  15. 【請求項１５】 異常が炎症性の異常である請求項７記載の方法。
  16. 【請求項１６】 異常が乾癬である請求項１５記載の方法。
  17. 【請求項１７】 異常がクモ状静脈腫（ｓｐｉｄｅｒ ｖｅｉｎｓ）、もし
    くは目のまわりの隈（ｕｎｄｅｒｅｙｅ ｃｉｒｃｌｅｓ）である請求項７記載
    の方法。
  18. 【請求項１８】 組成物が、付加的な脈管形成抑制剤、皮膚白色化剤、抗炎
    症剤およびそれらの組合わせからなる群より選ばれる活性成分をさらに含有する
    請求項７記載の方法。
  19. 【請求項１９】 付加的な脈管形成抑制剤、皮膚白色化剤、抗炎症剤および
    それらの組合わせからなる群より選ばれる少くとも１つの付加的活性成分ととも
    に、有効量のエピガロカテキンガラート、エピカテキンガラートもしくはそれら
    の組合わせを含有する、皮膚への局所的付着のための化粧用もしくは医薬用組成
    物。
  20. 【請求項２０】 カテキンが、サメ軟骨、フィトスフィンゴシンもしくはス
    フィンゴシンからなる群より選ばれる脈管形成抑制剤と一緒にとれる請求項１９
    記載の組成物。
  21. 【請求項２１】 カテキンが皮膚白色化剤と一緒にされる請求項１９記載の
    組成物。
  22. 【請求項２２】 カテキンが抗炎症剤と一緒にされる請求項１９記載の組成
    物。
  23. 【請求項２３】 カテキンの量が全組成物の約０．０１〜約１０％である請
    求項１９記載の組成物。
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