JP2003518480A

JP2003518480A - 脂肪吸収キトサン

Info

Publication number: JP2003518480A
Application number: JP2001547974A
Authority: JP
Inventors: エバレットジェイ．ニコルズ，
Original assignee: バンソン，インコーポレイテッド
Priority date: 1999-12-29
Filing date: 2000-12-15
Publication date: 2003-06-10
Also published as: EP1242123A2; AU2281301A

Abstract

(57)【要約】１つの局面において、本発明は、哺乳動物の体の胃腸管による脂質の吸収を減少させるためのキットを提供する。このキットは、キトサン、パッケージ、およびキトサンが食物と同時に摂取され得ることを示す説明書を包含する。本発明のキットへ組み込むために有用であるキトサンは、胃液中に十分に迅速に溶解する。これは、胃の中で溶解し、その後、摂取者の胃腸管内で効率よく脂質を捕捉するするためには、必ずしも食事の前に摂取される必要はない。本発明のキットの特定の実施態様においては、キトサンは、１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸中への溶解の特性を有しており、その結果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度に、酸がキトサンと接触した後５分以内に到達する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（発明の分野）本発明は、キトサン、キトサンを含有しているキット、および哺乳動物の体に
よる脂質の吸収を減少させるための食事療法のサプリメントとしてのキトサンの
使用に関する。

【０００２】（発明の背景）キチンは、無脊椎動物の外骨格（詳細には、海洋性の甲殻類の甲羅）中に天然
に存在している、β−（１−４）−結合した２−アセトアミド−２−デオキシ−
Ｄ−グルコースユニットから構成される直鎖状の多糖類である。キチンの化学的
な脱アセチル化によって、２−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−グルコースおよび２
−アセトアミド−２−デオキシ−Ｄ−グルコースユニットのコポリマーである、
キトサンを生じる。キトサンは、以下を含有している多数の用途を有する：水の
精製において有用な吸着剤；紙の湿度のウェブ強度のエンハンサー；血液コレス
テロールを低下させる化合物；粘度を調節することにおいて有用である化合物；
化粧品の添加物；薬学的なアジュバント、および食事療法のサプリメント。

【０００３】食事療法のサプリメントとしてのキトサンの使用に関して、キトサンの摂取は
、コレステロールを含む脂質の血液血清レベルを低下させ得、そして胃腸管中で
の食事脂肪の吸収を妨げることによって体重の減少を促進し得る。キトサンは、
約ｐＨ６．４未満のｐＨで可溶性であり、そして従って、胃酸中に可溶である。
溶解したキトサンが胃から離れそして十二指腸に入ると、胃酸は、十二指腸の中
の重炭酸イオンによって中和され、そしてキトサンは溶液から沈殿する。沈殿の
間および沈殿後にキトサンは脂質を捕捉し、それによってリパーゼによるそれら
の消化、および腸を通じる吸収を妨げると考えられる。従って、キトサンは、十
二指腸および続く胃腸管の部分の中で効率よく脂質を捕捉するためには、胃酸中
に溶解しなければならない。

【０００４】キトサンの調製物は、キトサンが胃酸中に完全に溶解するような十分な時間を
提供するように、食事の少なくとも１時間前に摂取されるべきであることが、一
般的に理解される。従って、胃腸管による脂質の吸収を減少させるための食事療
法のレジメの一部としてキトサンを利用するヒトは、キトサンが溶解するための
十分な時間を提供するように、各食事の十分に前にキトサンを摂取することを覚
えておかなければならない。

【０００５】高い密度のキトサンの調製物が所望される。なぜなら、例えば、同じ用量のキ
トサンを送達するためには、低い密度のキトサンと比較して、少ない容量の高密
度のキトサンが摂取される必要があるからである。従って、例えば、ヒトは、低
い密度のキトサンの標準的な調製物と比較して、高い密度のキトサンのより少量
の錠剤またはカプセルを摂取することを必要とする。

【０００６】本発明者らは、同時係属中の米国特許出願番号第０９／１１４，０２３号に開
示されているキトサンが、さらに本明細書中に記載されそして特徴付けられてい
るように、胃酸を模倣する酸性の条件下で容易に可溶性であることを、新たに発
見した。従って、同時係属中の米国特許出願番号第０９／１１４，０２３号に開
示されているキトサンは、摂取者の胃腸管の中の脂質を効率よく捕捉するために
、食物を摂取する前に摂取される必要はない。好ましくは、同時係属中の米国特
許出願番号第０９／１１４，０２３号に開示されているキトサンは、食物と同時
に摂取され、それによって、摂取者が食物の摂取の前にキトサンを忘れずに摂取
する困難を回避する。

【０００７】（発明の要旨）１つの局面においては、本発明は、哺乳動物の体（例えば、ヒトの体）による
脂質の吸収を減少させるためのキットを提供する。このキットは、キトサン、パ
ッケージング、およびキトサンが食物とともに摂取され得ることを示す説明書を
包含する。本発明のキットへの包含のために有用なキトサンは、胃液中に十分に
迅速に溶解する。これは、胃の中で溶解し、その後、摂取者の胃腸管内で効率よ
く脂質を捕捉するするためには、必ずしも食事の前に摂取される必要はない。本
発明のキットの特定の実施態様においては、キトサンは、１６℃から２５℃の範
囲内の温度で、１００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸（ＨＣｌ）中への溶
解の特性を有しており、その結果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度に、酸
がキトサンと接触した後５分以内に到達する。キトサン溶液の粘度は、本明細書
中の実施例８に示されているように、ＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄＶｉｓｃｏｍｅｔ
ｅｒを使用して測定され得る。

【０００８】本発明のキットにおいて、高いタップ密度および／またはバルク密度を有して
いるキトサンを利用することが所望される。本発明のキットは、好ましくは、少
なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密度、より好ましくは、少なくとも約０．５
ｇ／ｍｌのタップ密度を有し、そして少なくとも約０．３ｇ／ｍｌのバルク密度
、より好ましくは、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのバルク密度を、最も好ましく
は、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのバルク密度を有しているキトサンを含む。本
発明のキット中への包含のために有用である本発明において好ましいキトサンは
、本出願の実施例９に示される油結合アッセイによって決定されるように、１ｇ
のキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合する。ここでは、キ
トサンは、５、１０、または１５分間、０．１６Ｎの塩酸と接触され（そして少
なくとも部分的にその中に溶解され）、次いでトウモロコシ油の存在下で沈殿す
る。高いタップ密度および高いバルク密度を有している（そして所望される可溶
性および脂肪結合特性を有している）キトサンの例は、本明細書中に記載されて
いる酸処理方法に従って処理され、そして本明細書中で参考として援用されてい
る同時係属中の米国特許出願番号第０９／１１４，０２３号中のキトサンである
。

【０００９】限定的ではない例によって、パッケージングは、ボトル、プラスチックバッグ
、またはブリスターパックであり得る。説明書は、例えば、ボトルに添付された
ラベルとして、パッケージングに添付され得る。本発明のキットの１つの代表的
な実施態様においては、キトサンはボトル中にパッケージ化され、そして説明書
がボトルに添付されるラベル上に印刷される。本発明のキットの別の代表的な実
施態様においては、キトサンは、箱の中にパッケージ化されるボトル中にパッケ
ージ化され、そして説明書が、箱の中に含まれる説明書の別の用紙上に印刷され
る。

【００１０】別の局面においては、本発明は、哺乳動物の体による脂質の吸収を減少させる
ための方法を提供する。この方法は、キトサン、パッケージング、およびキトサ
ンが食物とともに摂取され得ることを示す説明書を包含しているキットを摂取者
に提供する工程を包含する。本発明のキットは、本発明の方法の実施において有
用である。

【００１１】本発明の脂質の吸収の減少のためのキットおよび／または方法を利用すること
によって、摂取者は、食物の摂取の前に脂質を吸収するキトサンを忘れずに摂取
する必要はない。

【００１２】（好ましい実施態様の詳細な説明）本明細書中で使用される場合には、用語「メッシュ」は、定義された直径の穴
を有しているスクリーンを通過するその能力によって決定される、粒子の大きさ
をいう。本明細書中で使用されるメッシュの大きさは、ＣｈｅｍｉｃａｌＥｎ
ｇｉｎｅｅｒｓ’ Ｈａｎｄｂｏｏｋ、第１５版、Ｒ．Ｈ．ＰｅｒｒｙおよびＣ
．Ｈ．Ｃｈｉｌｔｏｎ編の表２１〜１２に示されているような、Ｔｙｌｅｒ当量
である。メッシュ数の前のプラスの記号は、粒子がそのメッシュの大きさよりも
大きく、そして示されたメッシュの大きさを有しているスクリーンを通過しない
ことを示す。メッシュ数の前のマイナスの記号は、粒子がメッシュの大きさより
も小さく、そして示されたネガティブなメッシュの大きさを有しているスクリー
ンを通過することを示す。

【００１３】用語「キチン」は、Ｎ−アセチルグルコサミン残基およびグルコサミン残基の
直鎖状のコポリマーをいい、ここでは、キチンを構成する残基の９８％より多く
がＮ−アセチルグルコサミン残基である。

【００１４】用語「キトサン」は、少なくとも２％程度の脱アセチル化を有している（すな
わち、キトサンを構成している残基の少なくとも２％がグルコサミンである）、
グルコサミン残基およびＮ−アセチルグルコサミン残基のコポリマーをいう。

【００１５】用語「バルク密度」は、そのパッケージ化されていない容量によって除算され
る、キトサンサンプルの質量をいう。バルク密度の単位は、立方センチメートル
（ｃｃ）あたりのグラム（ｇ）（ｇ／ｃｃと省略される）であるか、あるいは、
ミリリットル（ｍｌ）あたりのグラム（ｇ）（略号ｇ／ｍｌと省略される）であ
る。本発明の実施においては、キトサンのバルク密度は、代表的には、１０ｍｌ
のメスシリンダー中に挽いて粉にしたキトサンを注ぎ、そしてその容量でシリン
ダー中のキトサンの質量を除算することによって、測定される。

【００１６】用語「タップ密度」は、そのパッケージ化された容量で除算された、キトサン
サンプルの質量をいう。タップ密度は、１０ｍｌのメスシリンダー中にキトサン
のサンプルをいれること、およびキトサンの質量を記録することによって決定さ
れる。メスシリンダーの開いた末端は（例えば，プラスチックフィルムで）シー
ルされる。次いで、メスシリンダーが、一定の容量に達する（すなわち、シリン
ダー中のキトサンの容量が持続的にタッピングされることによってさらに減少し
なくなる）まで、固体の表面上で３００回、強制的に上下にタッピングされる。
キトサンの質量は、その最終的な、一定の容量で除算されて、タップ密度が得ら
れる。タップ密度の単位は、立方センチメートル（ｃｃ）あたりのグラム（ｇ）
（略号ｇ／ｃｃと省略される）であるか、あるいは、ミリリットル（ｍｌ）あた
りのグラム（ｇ）（略号ｇ／ｍｌと省略される）である。

【００１７】１つの局面においては、本発明は、哺乳動物の体（例えば、ヒトの体）による
脂質の吸収を減少させるためのキットを提供する。キットは、キトサン、パッケ
ージング、およびキトサンが食物とともに摂取され得ることを示す説明書を包含
する。句「キトサンが食物とともに摂取され得る」は、キトサンが食物の摂取前
の３０分以内から食物の摂取の１時間後までのいずれかの時点で摂取され得るこ
とを意味する。好ましくは、キトサンは、食物の摂取の１５分以内に、より好ま
しくは、食物の摂取の５分以内に摂取される。最も好ましくは、キトサンは、食
物の摂取と同時に摂取される。

【００１８】本発明のキットへの包含のために有用であるキトサンは胃液中に十分に迅速に
溶解するので、これは、胃の中で溶解しその後摂取者の胃腸管内で効率よく脂質
を捕捉するするために、必ずしも食事の前に摂取される必要はない。本発明のキ
ットの特定の実施態様においては、キトサンは、１６℃から２５℃の範囲内の温
度で、１００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸（ＨＣＬ）中への溶解の特性
を有しており、その結果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度に、酸がキトサ
ンと接触した後５分以内に到達する。本発明のキットの別の実施態様においては
、キトサンは、１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１００倍（ｗ／ｗ）過剰の
０．１６Ｎの塩酸（ＨＣＬ）中への溶解の特性を有しており、その結果、溶解し
たキトサンの溶液の最大の粘度に、酸がキトサンと接触した後２分以内に到達す
る。キトサン溶液の粘度は、本明細書中の実施例８に示されているように、Ｂｒ
ｏｏｋｆｉｅｌｄＶｉｓｃｏｍｅｔｅｒを使用して測定され得る。

【００１９】本発明のキットにおいては、高いタップ密度および／または高いバルク密度を
有しているキトサンを利用することが所望される。本発明のキットは、好ましく
は、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密度、より好ましくは、少なくとも約
０．５ｇ／ｍｌのタップ密度を有し、そして少なくとも約０．３ｇ／ｍｌのバル
ク密度、より好ましくは、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのバルク密度を、そして
最も好ましくは、約０．５ｇ／ｍｌのバルク密度を有しているキトサンを含む。
従って、例えば、本発明のキットの１つの実施態様においては、少なくとも約０
．３ｇ／ｍｌのバルク密度および少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密度を有
しているキトサンが挙げられる。別の代表的な実施態様においては、本発明のキ
ットは、それぞれ少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密度およびバルク密度を
有するキトサンを含む。本発明のキット中への包含のために有用である本発明に
おいて好ましいキトサンは、本明細書中の実施例９に示される油結合アッセイに
従って、５、１０、または１５分間、０．１６Ｎの塩酸と接触され（そして少な
くとも部分的にその中に溶解され）、そしてトウモロコシ油の存在下で沈殿させ
た後で、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合する。
高いタップ密度および高いバルク密度を有している（そして所望される可溶性お
よび脂肪結合特性を有している）キトサンの例は、本明細書中に記載されている
酸処理方法に従って処理され、そして本明細書中で参考として援用されている同
時係属中の米国特許出願番号第０９／１１４，０２３号に開示されているキトサ
ンである。

【００２０】限定的ではない例によって、パッケージングは、ボトル、プラスチックバッグ
、またはブリスターパックであり得る。キトサンはまた、箱の中にパッケージ化
される多数のペーパーバッグ中にもパッケージ化され得る。説明書は、例えば、
ボトルに添付されたラベルとして、パッケージングに添付され得る。本発明のキ
ットの１つの代表的な実施態様においては、キトサンはボトル中にパッケージ化
され、そして説明書がボトルに添付されるラベル上に印刷される。本発明のキッ
トの別の代表的な実施態様においては、キトサンは、箱（例えば、ボール箱）の
中にパッケージ化されるボトル中にパッケージ化され、そして説明書が、箱の中
に含まれる説明書の別の用紙上に印刷される。

【００２１】従って、上記および代表的な例に従うと、本発明の１つの実施態様は、キトサ
ン、パッケージング、およびキトサンが食物とともに摂取されることを示す説明
書を含有しているキットを提供する。ここでは、キトサンは、１６℃から２５℃
の範囲内の温度で、１００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸中に溶解する特
性を有しており、その結果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度に、酸がキト
サンと接触した後５分以内（より好ましくは、２分以内）に到達する。なお別の
実施態様および代表的な例においては、本発明は、キトサン、パッケージング、
およびキトサンが食物とともに摂取されることを示す説明書を含有しているキッ
トを提供する。ここでは、キトサンは、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌ（より好ま
しくは、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌ）のタップ密度を有し、そして本出願の実
施例９に示される油結合アッセイによって決定されるように、１ｇのキトサンあ
たり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合する。ここでは、キトサンは、１
５分間（より好ましくは、１０分間、最も好ましくは、５分間）、０．１６Ｎの
塩酸と接触され（そして少なくとも部分的にその中に溶解され）、そしてトウモ
ロコシ油の存在下で沈殿する。さらなる実施態様および代表的な例においては、
本発明は、キトサン、パッケージング、およびキトサンが食物とともに摂取され
ることを示す説明書を含有しているキットを提供する。ここでは、キトサンは、
（ａ）１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６
Ｎの塩酸中に溶解する特性を有しており、その結果、溶解したキトサンの溶液の
最大の粘度に、酸がキトサンと接触した後５分以内（より好ましくは、２分以内
）に到達し、そして（ｂ）実施例９に示される油結合アッセイによって決定され
るように、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合する
。ここでは、キトサンは、１５分間（より好ましくは、１０分間、最も好ましく
は、５分間）、０．１６Ｎの塩酸と接触され、次いでトウモロコシ油の存在下で
沈殿する。

【００２２】別の局面においては、本発明は、哺乳動物の体による脂質の吸収を減少させる
ための方法を提供する。この方法は、キトサン、パッケージング、およびキトサ
ンが食物とともに摂取されることを示す説明書を含有しているキットを摂取者に
提供する工程を包含する。本発明のキットは、本発明の方法の実施において有用
である。

【００２３】従って、上記および代表的な例に従うと、本発明の方法の１つの実施態様は、
キトサン、パッケージング、およびキトサンが食物とともに摂取されることを示
す説明書を含有しているキットを摂取者に提供する工程を包含する工程を包含す
る。ここでは、キトサンは、１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１００倍（ｗ
／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸中に溶解する特性を有しており、その結果、溶解
したキトサンの溶液の最大の粘度に、酸がキトサンと接触した後５分以内（より
好ましくは、２分以内）に到達する。本発明の方法の別の実施態様は、キトサン
、パッケージング、およびキトサンが食物とともに摂取されることを示す説明書
を含有しているキットを摂取者に提供する工程を包含する。ここでは、キトサン
は、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌ（より好ましくは、少なくとも約０．５ｇ／ｍ
ｌ）のタップ密度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決
定されるように、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結
合する。ここでは、キトサンは、１５分間（より好ましくは、１０分間、最も好
ましくは、５分間）、０．１６Ｎの塩酸と接触され、次いでトウモロコシ油の存
在下で沈殿する。本発明の方法のなお別の実施態様は、キトサン、パッケージン
グ、およびキトサンが食物とともに摂取されることを示す説明書を含有している
キットを摂取者に提供する工程を包含する。ここでは、キトサンは、（ａ）１６
℃から２５℃の範囲内の温度で、１００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸中
に溶解する特性を有しており、その結果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度
に、酸がキトサンと接触した後５分以内（より好ましくは、２分以内）に到達し
、そして（ｂ）実施例９に示される油結合アッセイによって決定されるように、
１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合する。ここでは
、キトサンは、１５分間（より好ましくは、１０分間、最も好ましくは、５分間
）、０．１６Ｎの塩酸と接触され、次いでトウモロコシ油の存在下で沈殿する。

【００２４】本発明のキットおよび方法において有用であるキトサンは、酸処理方法によっ
て調製され得る。この方法は、キトサンを有効量の水および有効量の酸と混合す
る工程、ならびにキトサン、水、および酸の混合物を本明細書中で以後にさらに
十分に記載されているように乾燥させる工程を包含する。上記の酸処理方法にお
いて出発材料として有用であるキトサン（本明細書中以後、「出発キトサン」と
呼ばれる）は容易に入手可能であり、そして無脊椎動物（特に、海洋性の甲殻類
）の外骨格から得られるキチンに由来する。例えば、出発キトサンは、以下の様
式で獲得され得る。キチンは、最初に、約５時間の間、２０℃から３０℃で２Ｍ
の塩酸中に殻を浸すことによって、甲殻類の殻から抽出される。脱石灰化された
殻は水で洗浄され、次いで約６時間の間、４０℃から５０℃で１〜３％の水酸化
ナトリウム中に浸されることによって脱タンパク質化され、続いて水中で洗浄さ
れる。次いで、得られたキチンは、１８時間の間、約４０℃から５０℃で５０％
の水酸化ナトリウム溶液で処理され、次いでｐＨが約７．０になるまで水で洗浄
されることによって、脱アセチル化される。得られた出発キトサンは、所望され
るメッシュの大きさになるように挽いて粉にされる。

【００２５】出発キトサンの分子量は、好ましくは、約１０００ダルトンから約２，０００
，０００ダルトンまでの範囲であり、最も好ましくは、約１０，０００ダルトン
から約１，０００，０００ダルトンの範囲であるはずである。

【００２６】出発キトサンの粒子の大きさが、それらに由来する処理されたキトサンのタッ
プ密度に影響を与えることが見出されている。一般的には、出発キトサンの粒子
の大きさが小さいければ小さいほど、それらから誘導される処理されたキトサン
のタップ密度は高い。好ましくは、出発キトサンの粒子の大きさは、約２０メッ
シュよりも小さく、最も好ましくは、約４０メッシュよりも小さい。キトサンの
粉末は、任意の当該分野で認識されている手段（例えば、高速タービン型Ｊａｃ
ｏｂｓｏｎグラインダーの使用）によって、所望される粒子の大きさにまで挽い
て粉にされ得る。

【００２７】出発キトサンの粘度もまた、それらに由来する処理されたキトサンの密度に影
響を与えることが見出されている。一般的には、出発キトサンの粘度が低ければ
低いほど、それらに由来する処理されたキトサンのタップ密度は高い。好ましく
は、出発キトサンは、少なくとも約１ｃｐｓの密度を有するはずであり、ここれ
略号「ｃｐｓ」は、粘度のセンチポアズ単位をいう。代表的には、出発キトサン
の粘度は、以下の様式において１％（ｗ／ｗ）のキトサン溶液を使用して決定さ
れる。キトサンは、蒸留水中に稀釈された１％（ｗ／ｗ）の氷酢酸中に溶解され
る。キトサンの溶液は、９８ｇの蒸留水に対して１ｇの乾燥キトサンを添加する
こと、続いて、１ｇの氷酢酸を添加しそして２５℃で２時間の間攪拌することに
よって粘度の測定のために調製した。粘度は、ＢｒｌｌｋｆｉｅｌｄＶｉｓｃ
ｏｍｅｔｅｒを使用して２５℃で２時間の攪拌時間の終わりに測定される。

【００２８】さらに、出発キトサンの脱アセチル化の程度が、それらに由来する処理された
キトサンのタップ密度に影響を与えることが、見出されている。出発キトサンは
、代表的には、約６５％から約９５％までの割合の脱アセチル化、好ましくは、
約７５％から約９０％までの割合の脱アセチル化を有する。キチンは、４０℃以
上の温度で５０％の水酸化ナトリウムの溶液でキチンを処理することのような、
任意の当該分野で認識されている手段によって、出発キトサンを生じるように、
脱アセチル化され得る。脱アセチル化のプロセスは、高い温度でより迅速に、そ
して効率よく生じる。

【００２９】出発キトサンは、少なくとも１つの酸を含有している水と混合させる。出発キ
トサンに対して添加される水の量は、それらに由来する処理されたキトサンのタ
ップ密度に影響を与える。出発キトサンに対して添加される水の量は、出発トサ
ン中にすでに水が存在することを可能にするように調節されるはずである。出発
キトサンは、好ましくは、０％の水から約２０％の水までの水分含量にまで乾燥
されるはずである。出発キトサンに対して添加される水の質量は、出発キトサン
の質量の約１０倍を超えないはずである。好ましくは、出発キトサンに対して添
加される水の質量は、出発キトサンの質量の約５倍である。出発キトサンが出発
キトサンよりも少ない質量である酸の量、および出発キトサンの質量の１０倍等
量またはそれ以上である水の量と混合される場合には、高いタップ密度は得られ
ない。逆に、出発キトサンが、出発キトサンよりも多い量の酸の量、および出発
キトサンの質量の１０倍以上である水の量と混合される場合には、キトサンは溶
解し、そして粘性の溶液を形成し、そして粒子性のままではない。

【００３０】同様に、出発キトサンに対して添加される酸の量は、それらに由来する処理さ
れたキトサンのタップ密度に影響を与える。出発キトサンに対して添加される酸
の質量は、出発キトサンの質量の少なくとも約０．１％であるはずであり、出発
キトサンは、０％から約２０％までの水分含量にまで乾燥されている。出発キト
サンに対して添加される酸の量は、出発キトサン中に残存している水の量に比例
して調節され得る。出発キトサンの質量に近い、同等の、またはそれよりも多い
酸の量が使用される場合には、出発キトサンに対して添加される水の量は、キト
サンが完全に溶解することを防ぐように、減少されるはずである。

【００３１】以下を含む多数の酸が、出発キトサンを処理するために有用であるが、これら
に限定されない：コハク酸、アジピン酸、塩酸、グルタミン酸、乳酸、アスパラ
ギン酸、酢酸、ピルビン酸、ニコチン酸、およびリンゴ酸。最も有効な酸は、少
なくとも１つのカルボキシル基を含有している有機酸である。本発明において好
ましい酸は、コハク酸、ピルビン酸、リンゴ酸、Ｌ−グルタミン酸、およびアス
コルビン酸である。

【００３２】出発キトサンは、少なくとも１分間の間、またはキトサン、水、および酸が均
質なペーストを形成するまで、水および少なくとも１つの酸と混合される。水は
、室温であり得るか、または加熱され得る。処理されたキトサンは、０％から約
２０％までの水分含量にまで乾燥される。乾燥は、任意の当該分野で認識されて
いる手段（例えば、風乾、減圧乾燥、加熱乾燥、または凍結乾燥）によって行わ
れ得るが、最も高いキトサンの密度は、熱での乾燥によって達成される。

【００３３】さらに、さらなる工程は、それが乾燥される前に、水および塩基（例えば、水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム、または水酸化アンモニウム）を含有している
中和浴に対してペーストを添加することによって、キトサン／水／酸のペースト
中で酸を中和することである。存在する塩基の量は、好ましくは、ペースト中に
存在する酸の量の約１０倍のモル過剰である。中和溶液の全量は、キトサンのペ
ーストが、液体が塩基と十分に混合することを可能にするために十分に液性であ
るままにすることを確実にするために十分であるはずである。好ましくは、中和
溶液の容量は、キトサンペーストの約１０倍の容量である。キトサン、水、酸、
および塩基の混合物が攪拌され、攪拌の持続時間が、主に、混合物の温度によっ
て決定される。一般的には、温度が高ければ高いほど、攪拌の持続時間は短い。
従って、例えば、約２０℃から約３０℃までの室温では、攪拌は少なくとも１８
時間継続されるはずである。

【００３４】次いで、中和されたペーストが、好ましくは、酸の塩（例えば、利用される酸
がコハク酸であり、そして中和塩基が水酸化ナトリウムである場合には、コハク
酸ナトリウム）を除去しそして洗い流すために、水で十分にリンスされる。ある
いは、中和工程が、ペーストが乾燥された後に行われ得る。乾燥されたペースト
は、上記に記載されているような中和浴に添加され、そして室温で少なくとも１
８時間、またはより高い温度でより短い時間の間、攪拌される。塩基の中和工程
がプロセスに含まれる場合には、より高い酸の濃度が、キトサンを処理するため
に使用され得る。

【００３５】処理されたキトサンの粒子の大きさは、所望される粒子の大きさが達成される
まで、好ましくは、挽いて粉にすることによって、大きさを減少され得る。従っ
て、例えば、２０メッシュよりも小さい粒子の大きさ（好ましくは、４０メッシ
ュよりも小さい）が、キトサンが本発明のキット中に含まれるキトサンのような
食餌療法のサプリメントとして使用されるキトサンについて、本発明において好
ましい。

【００３６】次いで、処理された挽いて粉にされたキトサンは、好ましくは、最上段のふる
いから最下段のふるいまでで減少するメッシュの大きさを有している（すなわち
、メッシュの口の大きさが、積み重ねの最上段から積み重ねの最下段まで減少す
る）積み重ねられたふるいを通じてそれを通過させることによって、ふるいにか
けられる。積み重ねられたふるいは、それぞれの粒子が、粒子が通過することを
可能にするには小さすぎるメッシュの大きさを有するふるいに達するまで、キト
サン粒子がふるいを通じて通過するように、一定の振動を与えられる。あるいは
、特定のメッシュの大きさよりも小さい粒子の大きさを有するキトサンのみを得
ることが所望される場合には、特定のメッシュの大きさを有している単一のスク
リーンを通じて通過する全てのキトサンが回収される。

【００３７】本発明のキットおよび方法において利用されるキトサンは、単独で、あるいは
、ビタミンＣ、Ｅ，Ｂ６、β−カロテン、葉酸、ニコチン酸、抗酸化剤、レシチ
ン、食物繊維、ならびに種々の結合剤および／または潤滑剤を含む、他の成分と
組合せてのいずれかで、カプセル化され得るかまたは錠剤にされ得る。錠剤また
はカプセル剤を飲み込むことが困難であるそのような個体のためには、キトサン
は、クラッカー、クッキー、およびケーキのような焼いたもの、ならびに飲料に
添加され得る。

【００３８】代表的な例として、ヒトは、食事の前に、約１ｇから約４ｇまでのキトサンを
摂取し得る。キトサンの錠剤は、代表的には、約１．５ｇであり、そして約１．
０ｇのキトサン、結合剤、潤滑剤、および／または質量の平衡を行う増量剤を含
む。

【００３９】以下の実施例は、単に、本発明を実施するために現在意図される最良の形態を
説明するが、本発明を限定するように解釈されるべきではない。

【００４０】（実施例１）（本発明の実施において有用である、高いタップ密度のキトサンの調製）出発キトサンの４個のサンプルを、この実施例に示すように処理し、そして処
理したキトサンのサンプルの得られたタップ密度を決定した。

【００４１】４個のキトサンのサンプルを同一の条件下で処理した。出発キトサンの４個の
サンプルのそれぞれの粘度を、１％（ｗ／ｗ）の酢酸中の１％の出発キトサン（
ｗ／ｗ）の溶液を使用することによって決定した。それぞれのサンプルを、９８
．００ｇの蒸留水に対して１．００ｇの出発キトサンを、続いて１．００ｇの氷
酢酸を添加し、そして最少で２時間の間、攪拌プレート上で磁気攪拌棒で攪拌す
ることによって調製した。粘度を、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ粘度計を使用して測定
した。

【００４２】出発キトサンのサンプルは、全て−１２０メッシュ材料であった。１０．００
ｇの乾燥−１２０メッシュ出発キトサンを、ビーカーに入れた。０．５７ｇの溶
解させたコハク酸を含有している５０．００ｇの蒸留水（２０℃から３０℃の室
温）を出発キトサンに対して添加し、そしてこの混合物を攪拌し、そして約１〜
５分間の間、スパチュラで混合した。得られた糊状／スポンジ状の材料を、対流
式オーブン中で１８時間の間、６０℃で乾燥させるために、ステンレス鋼のトレ
イ上に広げた。

【００４３】乾燥後、材料を、研究室用の粉砕ミル（Ｔｈｏｍａｓ−Ｗｉｌｅｙ）中で挽い
て粉にし、そして粒子を、剪断作用によって大きさを減少させた。挽いて粉にし
た材料を、研究室用のＴｈｏｍａｓＳｉｅｖｅＳｈａｋｅｒを使用して８０
メッシュのふるいを通じてふるいにかけた。８０メッシュのふるい（Ｔｙｌｅｒｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ）を通過する材料を回収し、そしてタップ密度を、１０
ｍｌのメスシリンダー中にキトサンのサンプルを入れること、およびキトサンの
質量を記録することによって決定した。次いで、メスシリンダーを、３００回、
固体表面上で、一定の容量に達する（すなわち、シリンダー中のキトサンの容量
が持続的にタッピングされることによってさらに減少しなくなる）まで、強制的
に上下にタッピングした。キトサンの質量を、その最終的な一定の容量で割り算
して、タップ密度を得た。未処理の出発キトサンのサンプルのアリコートを挽い
て粉にし、そして同じ８０メッシュのふるい通じてふるいにかけ、そしてタップ
密度を、−８０メッシュ材料について上記に示すように決定した。表１に示すデ
ータは、４個の出発キトサンのサンプルを上記の方法に従って処理することの、
タップ密度に対する影響を示す。

【００４４】表１．処理後のタップ密度の増大

【００４５】

【表１】表１に示す結果は、４個の出発キトサンのサンプルのタップ密度が、この実施
例に示すような出発キトサンの処理によって５０パーセントより多く増大された
ことを実証する。

【００４６】（実施例２）（出発キトサンの粘度の影響）本明細書中で開示される酸処理方法に従って処理した、処理されたキトサンの
タップ密度に対する出発キトサンの粘度の影響を、以下の様式で評価した。出発
キトサンのサンプルは、全て−１２０メッシュであった。出発キトサンの粘度を
、Ｂｒｏｏｋｆｏｅｌｄ粘度計を使用して決定した。処理条件は、実施例１に記
載するとおりであった。簡潔には、１０グラムの−１２０メッシュの出発キトサ
ンを、糊状／スポンジ状の粘稠度にまで、０．５７グラムの溶解させたコハク酸
を含有している５０グラムの水とともに混合した。混合物を６０℃で乾燥させ、
次いで挽いて粉にし、そして−８０メッシュの粒子を得るようにふるいにかけた
。タップ密度を、実施例１に記載するように−８０メッシュ材料について決定し
た。結果を図１に示す。

【００４７】図１に示す結果は、一般的には、出発キトサンの粘度が低ければ低いほど、本
明細書中で開示される酸処理方法に従って処理したキトサンのタップ密度が高い
ことを実証する。

【００４８】（実施例３）（出発キトサンに対する水の割合の影響）本明細書中で開示されている酸処理方法に従って処理されたキトサンのタップ
密度についての、出発キトサンに対する水の比の影響を、以下の様式で決定した
。１０グラムの−１２０メッシュの出発キトサンのアリコート（全て、同じロッ
トから採取した）を、出発キトサンの質量の５．７％に対して等量のコハク酸で
処理した。コハク酸を、使用した乾燥した出発キトサンの重量で、等量から３倍
、４倍、５倍、６倍、８倍、または１０倍の量の水の中に溶解させた。例えば、
１０グラムの出発キトサンを、３０グラム、または４０グラム、または５０グラ
ム、または６０グラム、または８０グラム、または１００グラムの水の中に溶解
させた０．５７グラムのコハク酸に対して添加した。混合物を、糊状／スポンジ
状の粘稠度にまで混合し、６０℃で乾燥させ、挽いて粉にし、−８０メッシュの
ふるいを通じてふるいにかけ、そしてタップ密度を、−８０メッシュ材料につい
て決定した。これらの実験の結果を、図２に示す。

【００４９】（実施例４）（キトサンのタップ密度に対する種々の酸の影響）本明細書中で開示される酸処理方法において利用する場合に、キトサンのタッ
プ密度を増大させる種々の酸の能力を、以下の様式で研究した。この実験におい
て使用した種々の酸は分子量において異なるので、利用したそれぞれの酸の量は
、コハク酸の量（すなわち、出発キトサンの質量の５．７％）のモル等量であっ
た。使用した酸の上記のモル等量が室温（２０℃から３０℃）では完全には可溶
性ではない場合には、溶液を、酸を溶解させるために、少なくとも４５℃に加熱
した。次いで、溶解させた酸を含有している加熱した溶液を、出発キトサンに対
して添加し、そして混合物を攪拌した。出発キトサンを、実施例１に記載するよ
うに処理した。

【００５０】コハク酸（出発キトサンの５．７％の質量で使用した）のモル濃度と等しいモ
ル濃度で他の酸を使用する場合には、これらの酸は、０．４０ｇ／ｃｃよりも大
きい漸増するタップ密度で有効である。結果を、以下の表２に示す。

【００５１】表２．出発キトサンの質量の５．７％であるコハク酸の量に等しいモル濃度で
種々の酸を使用する、キトサンのタップ密度の比較

【００５２】

【表２】 ^＊酸を溶解させるために溶液を加熱した。

【００５３】表２に示すデータは、本発明の実施において有用であるキトサンを生成するた
めに有効である酸として、以下が挙げられるがこれらに限定されないことを明ら
かにする：コハク酸、フマル酸、塩酸、グルクロン酸、クエン酸、乳酸、マロン
酸、アスコルビン酸、アルパラギン酸、酢酸、リンゴ酸、ピルビン酸、およびマ
レイン酸。

【００５４】酸をまた、出発キトサンの質量の２８％に等しいコハク酸の量に対する等モル
濃度で、試験した。酸の室温での最大の可溶性が、コハク酸（出発キトサンの質
量の２８％で使用した）についてのモル当量を提供するために必要とされる酸の
量よりも少ない場合には、濃度を、室温（２０℃から３０℃）での酸の飽和溶液
と定義した。熱は、酸を溶解させるためには適用しなかった。出発キトサンを、
処理したキトサンのメッシュの大きさが表３に示されるものであったことを除い
て、実施例１に記載するように処理した。結果を表３に示す。

【００５５】表３．出発キトサンの質量の２８％であるコハク酸の量に等しいモル濃度で種
々の酸を使用する、キトサンのタップ密度の比較

【００５６】

【表３Ａ】

【００５７】

【表３Ｂ】飽和濃度、または２８％のコハク酸に対するモル当量で使用した場合には、試
験した酸の大部分が、０．４０ｇ／ｍｌよりも大きい漸増するタップ密度で有効
であった。有効ではない酸は、グルタミン酸、アスパラギン酸、およびフマル酸
であった。

【００５８】（実施例５）（タップ密度に対する、増大させた酸および中和工程の付加の影響）出発キトサンを処理するために高濃度の酸を使用する（例えば、表３に示す高
いタップ密度のキトサンのサンプルの調製において）場合には、得られる高いタ
ップ密度のキトサンは、好ましくは、酸を中和するための塩基の溶液で処理され
るべきである。次いで、得られる酸の塩が、高いタップ密度を維持したまま、水
で洗い流されてリンスされ得る。増大した量の酸での出発キトサンの処理、およ
びまた、中和工程の包含の、タップ密度に対する影響を以下の様式で研究した。

【００５９】タップ密度を、８０メッシュよりも小さく挽いて粉にした乾燥キトサンについ
て決定した。中和を、水中の１％の水酸化ナトリウム中の乾燥または湿ったペー
ストを室温（２０℃から３０℃）で１８時間攪拌すること、続いて、ｐＨ７まで
水中で十分にリンスすることによって、行った。コントロールの処理は、酸を含
まない同じ量の水との出発キトサンの混合、乾燥、および８０メッシュよりも小
さくなるように挽いて粉にすることからなる。使用した水の量は、使用した出発
キトサンの質量の５倍であった。その他の点では、サンプルを、実施例１に示す
ように処理した。結果を、表４に示す。

【００６０】表４．タップ密度に対する増大した酸および中和の影響

【００６１】

【表４】表４に示すデータは、比較的高い酸の濃度の使用、および中和工程を含むこと
が、高いタップ密度のキトサンを生じることを実証する。

【００６２】（実施例６）（処理した出発キトサンおよび未処理の出発キトサンについてのタップ密度の
値と比較した、バルク密度の値）バルク密度およびタップ密度を、未処理の出発キトサン、および本明細書中に
示した酸処理方法に従って処理したキトサンのメッシュの大きさの一定範囲を使
用して決定した。処理したキトサンを、実施例１に示すように処理した。キトサ
ンのサンプルを処理するために使用した酸は、乾燥した出発キトサンの質量の５
．７％に等しい量のコハク酸であった。タップ密度およびバルク密度を、本明細
書中で提供したそれらの用語の定義において示す方法に従って測定した。結果を
、以下の表５に示す。キトサンのロットＫ８０７７１０１２、Ｋ５０Ａ８０２１
０、およびＫ５０Ｊ８０２０６は、未処理の出発キトサンの３個の別々のロット
である。キトサンのロットＳＲＷ−２３９８は、コハク酸で処理したキトサンで
ある。

【００６３】表５．密度およびＣｏｍｐｒｅｓｓｉｂｉｌｉｔｙＩｎｄｅｘ値の表

【００６４】

【表５】表５に示すＣ．Ｉ．値は、ＣｏｍｐｒｅｓｓｉｂｉｌｉｔｙＩｎｄｅｘ値（
ＣａｒｒｓＩｎｄｅｘ値としてもまた公知である）であり、これは、流動性の
測定値である。Ｃ．Ｉ．値を、タップ密度で割ったバルク密度で割り算して関数
を得、これを１から引き算し、そして得られる値に１００を掛け算する。一般的
には、１５よりも小さいＣａｒｒｓ値を有しているキトサン粒子は、非常に良好
な流れの特性を有し；１５と２５との間のＣａｒｒｓ値を有しているキトサン粒
子は、良好な流れの特性を有し、一方、２５よりも大きいＣａｒｒｓ値を有して
いるキトサン粒子は、乏しい流れ特性を有する。表５に示すデータは、この実施
例に示すように処理したキトサンが、非常に良好な流れ特性を有することを実証
する。

【００６５】（実施例７）（実施例１に示す方法に従って処理したキトサンの粒子構造）出発キトサンを、実施例１に示すように処理し、そして処理したキトサン粒子
、およびコントロールの未処理の出発キトサン粒子の構造を、走査電子顕微鏡を
利用して５０×の倍率で試験した。図３は、未処理の出発キトサン粒子の粒子構
造を示す。粒子は、不規則な輪郭、および繊維状のストランドを投影する表面を
有する。未処理のキトサン粒子はまた、図３に示すように互いに凝集する傾向に
ある。対照的に、そして図４に示すように、本明細書中で実施例１に示す方法に
従って処理したキトサンの粒子は、比較的なめらかな表面を有し、そして未処理
の出発キトサン粒子と比較して粒子の形状においてはバリエーションが少ない。
未処理の出発キトサン粒子から広がる繊維状の投影は、粒子を両眼の光学顕微鏡
下で観察した場合に、より容易に明らかである。

【００６６】（実施例８）（種々のキトサンのサンプルの塩酸中での可溶性）種々のキトサンのサンプル（本出願中に示す酸処理方法に従ってコハク酸で処
理したキトサンを含む）の可溶性を決定し、以下のように比較した。全ての溶液
は、室温（１６℃〜２５℃）であった。

【００６７】０．１６ＮのＨＣＬを、以下の様式で調製した。清潔な乾燥させた５００ｍｌ
のメスシリンダーを、蒸留水で４分の３まで満たし、それに対して３０．８ｍｌ
の濃ＨＣＬ（１１．７Ｎ）を添加した。メスシリンダー中の稀釈した酸の容量を
、蒸留水で５００ｍｌまで注意深く上げ、次いで清潔な乾燥させた２．５リット
ル（Ｌ）の容器中に注いだ。３個の５００ｍｌの蒸留水のアリコート、および１
つの２５０ｍｌの蒸留水のアリコートを、２．５リットルの容器中の５００ｍｌ
の塩酸の溶液に対して添加した。塩酸溶液の最終的な容量は、２．２５Ｌであっ
た。最終的な塩酸の濃度は、０．１６Ｎであった。

【００６８】２００ミリリットル（ｍｌ）の１％（ｗ／ｗ）のキトサンの溶液を、以下の様
式で調製した。キトサンの水分含量を最初に、キトサンのサンプルを秤量するこ
と、次いでサンプルを乾燥させ、そして乾燥させたサンプルを秤量することによ
って決定した。乾燥後のキトサンのサンプルの重さを、乾燥前のサンプルの重さ
で割り算した。得られた関数を、１から引き算し、そして水分のパーセントを得
るために１００を掛け算した。水分のパーセントを、１００で割り算することに
よって、少数（Ｄ）に転換した。以下の方程式を、１％（ｗ／ｗ）のキトサンの
溶液の２００ｍｌを作成するために必要であるキトサンの質量を計算するために
使用した：キトサンの必要とされる質量＝（２．００ｇ）／（Ｄ）折り目をつけたワックスの秤量紙を、上皿天秤上で風袋を計った。必要とされ
るキトサンの量を、＋／−０．０１ｇの精度まで秤量し、そして記録した。４０
０ｍｌのビーカーを、上皿天秤の上で風袋を計った。２００ｍｌの１％（ｗ／ｗ
）のキトサンの溶液を調製するためにビーカー中にどれだけのＨＣｌ溶液を注ぐ
かを決定するために、以下の方程式を利用した：必要とされる０．１６ＮのＨＣ
Ｌの量＝［（２００．００ｇ）−（必要とされるキトサンの質量）］。

【００６９】必要とされる０．１６ＮのＨＣＬ溶液の量（＋／−０．０１ｇの精度で）を、
風袋を計った４００ｍｌのビーカーに添加した。１”×１／４”攪拌棒を、酸を
含有しているビーカーに入れ、これを攪拌プレートの上に置き、そして攪拌を、
ボルテックルを生じるように中程度の速度で開始した。攪拌棒の回転速度を、ボ
ルテックスの底のチップがビーカーの１２５ｍｌの印に重なるように調節した。
ボルテックスは、好ましくは、約１”に達する高さを有するべきであり、そして
ボルテックスの真中のセクションは、約３／４”を測定するべきである。

【００７０】一旦、ボルテックスが安定すると、キトサンを穏やかに攪拌溶液中にタッピン
グした。キトサンは、均一に酸の表面上に分散させられた（ビーカーの壁の近く
まで）。キトサンのそれぞれのサンプルを、同じ様式で酸の溶液に対して絶えず
添加した。全てのキトサンを酸の溶液に対して添加した後、予め設定したタイマ
ー（適切な混合時間を設定した）を開始した。手で持てるサイズのキッチンスト
レーナー（約４０メッシュ）、ボウル、およびＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ粘度計の
セル（＃２の紡錘型）（それぞれ清潔でありそして乾燥させた）を、手の届くと
ころに用意した。混合が完了すると、ビーカーを攪拌プレートから迅速に移動さ
せた。内容物を、ストレーナーを通じて濾過し、そして溶解させたキトサンの溶
液をボウルの中に回収した。溶解させたキトサンの溶液を、ボウルから粘度計の
セル中に注いだ。粘度計の速度を、６０ｒｐｍに設定し、紡錘型＃２をセルの中
に配置し、粘度計を４分間実行させた。次いで、得られた値を記録した。粘度計
の読み取り値を、５の係数を得られた値に掛け算することによって得た。それぞ
れのサンプルを、二連で実行し、そして平均値を決定した。平均の粘度の値を、
表６に示す。ここでは、ＨＤ−ＥＯＢは、本明細書中および同時係属中の特許出
願番号第０９／１１４，０２３号に示されている酸処理方法に従ってコハク酸で
処理したキトサンであり；ＨＤは、本出願に記載されている酸処理方法では処理
されていない、市販の高密度のキトサン（約０．８ｇ／ｍｌのタップ密度を有し
ている）である。通常のキトサンは、約０．３ｇ／ｍｌのタップ密度を有し、そ
して本出願において記載されている酸処理方法で処理されていない、市販のキト
サンである。

【００７１】表６．種々のキトサンの粘度の比較の時間経過

【００７２】

【表６】キトサンＨＤ−ＥＯＢの最大の粘度は、酸に対する添加の５分以内（代表的に
は、２分以内）に達成され、一方、他のキトサンは、最大の粘度に達するまでに
少なくとも６０分を必要とする。一旦、完全な可溶性（最大の粘度）に到達する
と、粘度が減少することが、キトサンの特徴である。粘度の減少は、ポリマー鎖
の酸加水分解に起因すると考えられている。

【００７３】（実施例９）（制限された時間の間酸に対して暴露させられたキトサンの脂肪に結合する能
力）種々のキトサンのサンプル（本出願で示される酸処理方法に従ってコハク酸で
処理されたキトサンを含む）の、脂質に対して結合する能力を、以下のように研
究した。全ての溶液は、室温（１６℃〜２５℃）であった。

【００７４】１リットルの０．１６ＮのＨＣＬの溶液を、清潔なそして乾燥させた１Ｌのメ
スフラスコに１３．７ｍｌの濃ＨＣＬ（Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｒｅａｇｅｎｔｇｒａｄ
ｅ、１１．７Ｎ）を添加することによって調製した。蒸留水を、メニスカスがち
ょうどメスフラスコの首のエッチングされた線に達するまで、ＨＬＣに対してゆ
っくり添加した。充填を、フラスコを数回かき回すことによって内容物を混合す
るために、定期的に停止した。

【００７５】０．２Ｍの炭酸／重炭酸緩衝溶液（ｐＨ１０．５）を、以下の様式で調製した
。８．４８ｇの固体の無水炭酸ナトリウムを、溶液Ａを作成するために、４００
．０ｇの蒸留水中に溶解させた。６．７２ｇの固体の重炭酸ナトリウムを、溶液
Ｂを作成するために４００．０ｇの蒸留水中に溶解させた。０．２Ｍの炭酸／重
炭酸緩衝液（ｐＨ１０．５）を、容量で９：１の比で、溶液Ａを溶液Ｂと混合す
ることによって調製した。

【００７６】２つの円錐型の遠心分離チューブを、試験するそれぞれのキトサンのサンプル
について用意した。それぞれのチューブに対して、１０ｍｌの０．１６ＮのＨＣ
Ｌを添加し、その後、チューブにキャップをした。ＯｒｂｉｔａｌＳｈａｋｅ
ｒ（ＬａｂＬｉｎｅＭｏｄｅｌ３５２０）をセットした。振盪装置は、３
／４インチの軌道を有し、それによって水平な循環する動きを生じ、そして１６
０ｒｐｍの持続的な回転速度を生じ得る。１６０ｒｐｍの持続的な回転速度を、
操作者が３０秒のローター中での８０回の回転を可能にすることを確実にするこ
とによって、それぞれのサンプルを試験する前にチェックした。

【００７７】トウモロコシ油（１００％のトウモロコシ油、Ｍａｚｏｌａｂｒａｎｄ）お
よび０．２Ｍの炭酸／重炭酸緩衝液を、すぐに注ぐように用意した天秤の横に配
置した。それぞれのサンプルについて、約０．１ｇのキトサンを提供するために
必要とされるキトサンサンプルの質量を、最初に、キトサンサンプル（試験前）
の乾燥の際に生じた質量の損失の割合を計算することによって決定した。乾燥の
際に生じた質量の損失のパーセントを、１００から引き算し、そしてこの新しい
割合を、少数値（Ｄ）を得るようにそれを転換するために１００で割り算した。
必要とされるキトサンのサンプルの正確な量を計算するために、以下の方程式を
使用した：必要とされるサンプルの質量＝（０．１０００ｇ）／Ｄ。必要とされ
るキトサンのサンプルの質量を、＋／−０．０００１ｇの精度まで秤量した。

【００７８】酸を含有している遠心分離チューブの１つはキャップをせずに、そして軌道振
盪装置（ｏｒｂｉｔａｌｓｈａｋｅｒ）のプラットフォームに対して確保され
た遠心分離チューブ中に入れた。キトサンのサンプルを、円錐型の遠心分離チュ
ーブ中の酸の溶液の表面上に直接注いだ。チューブの側面をキトサンのサンプル
が流れ落ちることを避けるように、注意した。ここでは、棒が差し入れされ、従
って、酸との接触は生じない。キトサンの添加の直後に、軌道振盪装置を１６０
ｒｐｍで実行した。

【００７９】軌道振盪装置を２分間、５分間、または１５分間、実行した。遠心分離チュー
ブを可能な限り迅速に、乱れを最少にしながらホルダーから取り出し、そしてそ
れぞれのチューブを上皿天秤上で計った。約１０．００ｇのトウモロコシ油をそ
れぞれのチューブに注ぎ、そして導入ピペットを使用して正確に１０．００＋／
−０．０１ｇを生じた（挿入ピペットを用いて粘性の油をより容易にピペッティ
ングするようにするために、細いチューブチップを、やすりで刻み目を入れ、そ
して壊した（ｂｒｅａｋｏｆｆ））。キトサンおよび油を含有しているそれぞ
れのチューブの質量を、Ｗ_ｓとして記録した。

【００８０】１０ｍｌのピペットを使用して、８．５ｍｌの０．２Ｍの炭酸／重炭酸緩衝液
（ｐＨ１０．５）をそれぞれのチューブに対してすぐに添加し、そしてチューブ
に迅速に再びキャップをし、そして激しく上下に３０秒間振盪させて、酸を中和
させ、そしてキトサンを沈殿させた。次いで、それぞれのチューブを、円錐型の
試験チューブのラックに直立させて置いた。それぞれのサンプルを、同じ方法で
処理し、そして３０分間乱さないように静置させ、その後、正確に２分間、１，
２００〜１，７５０×ｇで遠心分離した。遠心したチューブを遠心分離装置から
取り出し、そしてそれぞれのチューブの上部の遊離の油の表面の層をピペットで
採取し、そして＋／−０．０１ｇの精度まで秤量した。遊離の油の質量を、Ｗ_ｆとして記録した。

【００８１】キトサンＨＤ−ＥＯＢの１グラムあたりに結合したかまたは捕捉されたた油の
量を、以下の方程式に従って計算した。ここでは、５％が、ＨＤ−ＥＯＢ中の５
％（ｗ／ｗ）の有機酸の含有量についての補正である。１グラムのキトサンあた
りに捕捉されたグラム数＝Ｗ_ｓ−Ｗ_ｆ／（０．１）［１−（％Ａｓｈ＋５％）／
１００］。キトサン中の焼き尽くされたもの（ａｓｈ）のパーセントを、キトサ
ンの水分を補正したサンプル（これは、２．０ｇのキトサンおよびサンプル中に
存在している水分を含む）を得ること、および約７００℃の温度で３時間のマッ
フル炉中で風袋を計った坩堝中でサンプルを焼き尽くして乾燥させることによっ
て決定した。坩堝の中に残っている焼き尽くされたものを秤量し、そして焼き尽
くす前のキトサン（サンプル中の水を除く）の質量（２．０ｇ）で割り算し、そ
して焼き尽くしたものの割合を生じるように１００を掛け算した。

【００８２】通常のまたはＨｉｇｈＤｅｎｓｉｔｙ（ＨＤ）のキトサンの１グラムあたり
に結合したかまたは捕捉された油の量を、以下の方程式に従って計算した：１グ
ラムのキトサンあたりに捕捉された油のグラム数＝Ｗ_ｓ−Ｗ_ｆ／（０．１）［１
−（％Ａｓｈ）／１００］。５％の補正計数はここでで使用されないことに注目
する。しかし、補正は、ここでは、キトサン中に存在する任意の他の添加物につ
いては行われるべきである。存在する場合には、他の添加物のパーセントが、％
Ａｓｈに対して加えられる。

【００８３】表７は、この実施例に記載するようにアッセイした、種々のキトサンサンプル
の脂肪に結合する能力の比較を示す。ＨＤ−ＥＯＢは、本出願において示される
酸処理方法、および本明細書中で参考として援用されている同時係属中の特許出
願番号第０９／１１４，０２３号に従って記載するようにコハク酸で処理したキ
トサンである；ＨＤは、本出願に記載されている酸処理方法では処理されていな
い、市販の高密度のキトサン（約０．８ｇ／ｍｌのタップ密度を有している）で
ある。通常のキトサンは、約０．３ｇ／ｍｌのタップ密度を有し、そして本出願
において記載されている酸処理方法で処理されていない、市販のキトサンである
。

【００８４】表７．種々のキトサンの脂肪結合能力

【００８５】

【表７】２、５、および１５分で結合した油の質量を足し算し、そしてその和を３で割
り算することによって、それぞれのキトサンのサンプルによって結合された油の
平均質量を計算した。平均値を表８に示す。

【００８６】表８．３つの時点にわたる油の結合の比較

【００８７】

【表８】本発明の好ましい実施形態が説明されそして記載されているが、種々の変更が
本発明の精神および範囲を逸脱することなくその中で行われ得ることが理解され
る。

【図面の簡単な説明】

本発明の上記の局面および付随する利点の多くは、同じものが、添付の図面と
組合せられた場合に、以下の詳細な説明を参照してより良好に理解されるように
、より容易に明らかとなる。

【図１】図１は、本明細書中で開示される酸処理方法に従って処理されたキトサンのタ
ップ密度に対する、出発キトサンの密度の影響を示す。

【図２】図２は、本明細書中で開示される酸処理方法に従って処理されたキトサンのタ
ップ密度に対する、出発キトサンに対する水の比の影響を示す。

【図３】図３は、未処理の出発キトサンの粒子の、５０×倍率の、走査電子顕微鏡の画
像を示す。

【図４】図４は、本明細書中で開示される酸処理方法に従って処理されたキトサンの粒
子の、５０×倍率の、走査電子顕微鏡の画像を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】哺乳動物の体の消化系による脂肪の吸収を減少させるための
、キットであって、該キットは、以下：（ａ）キトサン；（ｂ）パッケージ；および（ｃ）該キトサンが食物とともに摂取され得ることを示す説明書、を備える、キット。
【請求項２】前記キトサンが、１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１０
０倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸中への溶解の特性を有しており、その結
果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度に、該酸が該キトサンと接触した後５
分以内に到達する、請求項１に記載のキット。
【請求項３】前記キトサンが、１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１０
０倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸中への溶解の特性を有しており、その結
果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度に、該酸が該キトサンと接触した後２
分以内に到達する、請求項１に記載のキット。
【請求項４】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密度
を有する、請求項１に記載のキット。
【請求項５】前記キトサンが、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのタップ密度
を有する、請求項１に記載のキット。
【請求項６】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのバルク密度
を有する、請求項１に記載のキット。
【請求項７】前記キトサンが、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのバルク密度
を有する、請求項１に記載のキット。
【請求項８】前記キトサンが、少なくとも約０．３ｇ／ｍｌのバルク密度
、および少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密度を有する、請求項１に記載の
キット。
【請求項９】前記キトサンが、それぞれ少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタ
ップ密度およびバルク密度を有する、請求項１に記載のキット。
【請求項１０】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項２に記載のキット。
【請求項１１】前記キトサンが、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項２に記載のキット。
【請求項１２】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項３に記載のキット。
【請求項１３】前記キトサンが、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項３に記載のキット。
【請求項１４】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが１５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項１に記載のキ
ット。
【請求項１５】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが１０分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項１に記載のキ
ット。
【請求項１６】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項１に記載のキッ
ト。
【請求項１７】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが１５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項２に記載のキ
ット。
【請求項１８】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが１５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項３に記載のキ
ット。
【請求項１９】前記パッケージがボトルを含む、請求項１に記載のキット
。
【請求項２０】前記パッケージがボトルからなる、請求項１に記載のキッ
ト。
【請求項２１】前記説明書が前記パッケージに添付されている、請求項１
に記載のキット。
【請求項２２】前記説明書が前記ボトルに添付されている、請求項１９に
記載のキット。
【請求項２３】前記説明書が、前記キトサンが食物の摂取前の３０分以内
の任意の時点で摂取され得ることを示す、請求項１に記載のキット。
【請求項２４】前記説明書が、前記キトサンが食物の摂取前の１５分以内
の任意の時点で摂取され得ることを示す、請求項１に記載のキット。
【請求項２５】前記説明書が、前記キトサンが食物の摂取前の５分以内の
任意の時点で摂取され得ることを示す、請求項１に記載のキット。
【請求項２６】前記説明書が、前記キトサンが食物の摂取と同時に摂取さ
れ得ることを示す、請求項１に記載のキット。
【請求項２７】前記説明書が、前記キトサンが食物の摂取後１時間以内に
摂取され得ることを示す、請求項１に記載のキット。
【請求項２８】キットを摂取者に提供する工程を包含する、哺乳動物の体
による脂質の吸収を減少させるための方法であって、該キットが、以下：（ａ）キトサン；（ｂ）パッケージ；および（ｃ）該キトサンが食物とともに摂取され得ることを示す説明書、を備える、方法。
【請求項２９】前記キトサンが、１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１
００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸中への溶解の特性を有しており、その
結果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度に、該酸が該キトサンと接触した後
５分以内に到達する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】前記キトサンが、１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１
００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．１６Ｎの塩酸中への溶解の特性を有しており、その
結果、溶解したキトサンの溶液の最大の粘度に、該酸が該キトサンと接触した後
２分以内に到達する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３２】前記キトサンが、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのバルク密
度を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３４】前記キトサンが、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのバルク密
度を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３５】前記キトサンが、少なくとも約０．３ｇ／ｍｌのバルク密
度、および約０．４ｇ／ｍｌのタップ密度を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３６】前記キトサンが、それぞれ少なくとも約０．４ｇ／ｍｌの
タップ密度およびバルク密度を有する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３７】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３８】前記キトサンが、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３９】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項３０に記載の方法。
【請求項４０】前記キトサンが、少なくとも約０．５ｇ／ｍｌのタップ密
度を有する、請求項３０に記載の方法。
【請求項４１】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが１５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項２８に記載の
方法。
【請求項４２】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが１０分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項２８に記載の
方法。
【請求項４３】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項２８に記載の方
法。
【請求項４４】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが１５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項２９に記載の
方法。
【請求項４５】前記キトサンが、少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密
度を有し、そして実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に
、１ｇのキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、
該キトサンが１５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される、請求項３０に記載の
方法。
【請求項４６】前記パッケージがボトルを含む、請求項２８に記載の方法
。
【請求項４７】前記パッケージがボトルからなる、請求項２８に記載の方
法。
【請求項４８】前記説明書が前記パッケージに添付されている、請求項２
８に記載の方法。
【請求項４９】前記説明書が前記ボトルに添付されている、請求項４６に
記載の方法。
【請求項５０】哺乳動物の体の消化系による脂質の吸収を減少させるため
の、キットであって、該キットは、以下：（ａ）キトサンであって、該キトサンが、（１）少なくとも約０．４ｇ／ｍｌのタップ密度を有しており；（２）１６℃から２５℃の範囲内の温度で、１００倍（ｗ／ｗ）過剰の０．
１６Ｎの塩酸中への溶解の特性を有しており、その結果、溶解したキトサンの溶
液の最大の粘度に、該酸が該キトサンと接触した後５分以内に到達し；そして（３）実施例９に示される油結合アッセイによって決定される場合に、１ｇ
のキトサンあたり少なくとも５０ｇのトウモロコシ油に結合し、ここで、該キト
サンが１５分間の間０．１６Ｎの塩酸と接触される；（ｂ）パッケージ；ならびに（ｃ）該キトサンが食物と同時に摂取され得ることを示す、説明書、を備える、キット。