JP2003502423A

JP2003502423A - チオフェン−エチル−チオウレア化合物およびｈｉｖの治療におけるその使用

Info

Publication number: JP2003502423A
Application number: JP2001504921A
Authority: JP
Inventors: ウックン、ファティ、エム．; ヴェンカタチャラム、タラカード
Original assignee: パーカーヒューズインスティテュート
Priority date: 1999-06-23
Filing date: 2000-06-23
Publication date: 2003-01-21
Also published as: CN1196697C; AU6539900A; IL144874A0; CA2375261A1; DE60001581T2; ES2195905T3; DE60001581D1; WO2000078755A1; BR0009102A; ATE233758T1; EP1194427B1; EP1194427A1; MXPA01009283A; US6124324A; AU5635800A; KR20020012287A; CN1356997A; WO2000078756A1

Abstract

(57)【要約】突然変異、薬剤感受性、薬剤耐性およびマルチ薬剤耐性株のＨＩＶを含むＨＩＶ感染症の治療のための薬剤および逆転写酵素のインヒビターとしての、新規チオフェン−エチル−チオウレア（ＴＥＴ）化合物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（発明の分野）本発明は、ＨＩＶの突然変異株およびマルチ薬剤耐性ＨＩＶ感染症の治療方法
において効果的な逆転写酵素阻害剤に関する。

【０００２】（発明の背景）最近、ＨＩＶ感染症の治療に使用される薬剤により、逆転写酵素の阻止または
ＨＩＶプロテアーゼの阻止によるＨＩＶウイルスの複製の阻止が試みられている
。医療におけるアンチレトロウイルス薬剤の三つのカテゴリーは、ヌクレオシド
アナログ（例えばＡＺＴ）、プロテアーゼインヒビター（例えば、ネルファイナ
ビア（nelfinavir））、および最近導入されたネビラパイン（nevirapine.）の
ような非核酸系の逆転写酵素阻害剤（ＮＮＩ）である。

【０００３】最近のアンチレトロウイルスの療法の強力な組み合わせは、ＨＩＶおよびＡＩ
ＤＳ感染者の予後を有意義に改良している。組み合わせ療法は、ＡＩＤＳからの
死（死亡率は絶対的数字と同等）における劇的な減少における重要な要因かもし
れない。最も一般的に使用される組み合わせは、プロテアーゼインヒビターと共
に、若しくは伴わずに、二つのヌクレオシドアナログを含む。

【０００４】ネビラパイン（nevirapine.）は、最近の唯一のＮＮＩ化合物であり、ＨＩＶ
の治療のために、ＡＺＴおよび／またはプロテアーゼインヒビターと共に、組み
合わせて使用されている。効果的なドラッグカクテルの新しいシリーズは、一医
薬治療戦略において直面している薬剤抵抗性の問題の増加に対し戦うための三作
用治療法（トリプルアクショントリートメント）としてのヌクレオシドおよびプ
ロテアーゼインヒビターとの組み合わせのその他のＮＮＩに、最も影響を与える
らしい。

【０００５】特に、薬剤治療の形態において高い選択圧が導き出される時に、不運にも、ウ
イルスの高い複製率は、遺伝子的変種（突然変異）を導出する。これらの突然変
異種は、予め患者に投与されたアンチウイルス剤に対し抵抗性がある。切り替え
薬剤（スイッチングエージェント）又は組み合わせ治療の使用は、抵抗性を減少
若しくは遅らせるかもしれない。しかし、ウイルスの複製は、一医薬治療により
若しくはこれに二つの医薬を組み合わせても、完全に抑圧されないから、薬剤抵
抗性ウイルス株は、結局、出現する。一つ（若しくは二つ）のヌクレオシド類似
体および二つ（若しくは一つ）のＲＴを標的とするＮＮＩを使用する三医薬組み
合わせは、薬剤耐性問題に打ち勝つための大変有望な治療を提供する。そのよう
な三作用医薬組み合わせに対し抵抗性のＲＴ突然変異株は、機能できないだろう
。

【０００６】 L1001、K103N、 V106A、E138K、Yl8lCおよびY188Hを含む多数の突然変異株は
、ＮＮＩ化合物に対し耐性として特徴づけられている。特に、Y18lCおよびK103N
の突然変異は、治療が最も困難かも知れない。なぜなら、それらは、試験済みの
ＮＮＩ化合物のほとんどに対し、耐性だからである。

【０００７】最近、ＮＮＩのノックアウト濃度の使用の提案された戦略が、大変有望な結果
であることが証明された。この戦略において鍵となるアイディアは、薬剤耐性株
の出現を防止するために、検知不能レベルまでウイルスを低減させために治療の
極めて初期段階でＮＮＩを高濃度で投薬することである。この戦略および三作用
組み合わせにおいての最善の使用のための理想的なＮＮＩ化合物は、三つの基準
に合わなければなない。１）大量に投与されるため、細胞毒性が極めて低いこと２）ウイルスが薬剤耐性を発現する前にウイルスの複製機構を完全に停止させ
ることができるための、効力が極めて高いこと３）最近の医療で見られる薬剤耐性突然変異株に対する強力な対ウイルス活性

【０００８】最も一般的に見られる突然変異種に対する改良された丈夫さと共にサブナノモ
ル（ｓｕｂｎａｎｏｍｏｌａｒ）までＲＴ阻害を減少させることができ、かつ好
ましくは厄介な突然変異種のほとんどを阻害できる新たなＮＮＩのデザインは、
緊急に必要とされている。新たな対ウイルス剤は、以下の望まれる特徴を持つ：
（１）効果的なＲＴの阻害；（２）最低限の細胞毒性；および（３）ＨＩＶの既
知薬剤耐性株の阻害の改良された能力。現在、これらの要求される特性の総てを
持つ対ＨＩＶ剤は、ほとんど無い。

【０００９】米国においてライセンスおよび販売するために米国食品医薬品局（ＦＤＡ）か
ら承認された２つのＨＩＶＲＴの非核酸系インヒビター（ＮＮＩ）は、ネビラ
パイン（nevirapine (dipyridodiazepinone derivative)）およびデラビラジン
（delavirdine (bis(heteroaryl)piperazine (BHAP) derivative, BHAP U-90152
)）である。ＨＩＶＲＴを阻害するために開発された他の有望な新しい非核酸系
インヒビター（ＮＮＩ）は、ジヒドロアルコキシベンジルオキソピリミジン誘導
体（dihydroalkoxybenzyloxopyrimidine (DABO) derivatives）、１−［（２−
ヒドロキシエトキシ）メチル］−６−（フェニルチオ）チミン誘導体（1-[(2-hy
droxyethoxy)methyl]-6-(phenylthio)thymine (HEPT) derivatives）、テトラヒ
ドロベンゾンジアゼピン（tetrahydrobenzondiazepine (TIBO)）、２’５−ビス
−O−（ｔ−ブチルジメチルシリル）−３'−スピロ−５’’−（４’’−アミノ
−１’’，２’’−オキサチオレ−２’’，２’−ジオキシド）ピリミジン（2'
,5'-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-3'-spiro-5"-(4"-amino-l",2"- oxathio
le-2",2'-dioxide)pyrimidine (TSAO)）、オキサチンカルボオキサニリド誘導
体（oxathiin carboxanilide derivatives）、キノキサリン誘導体（quinoxali
ne derivatives）、チアジアゾル誘導体（thiadiazole derivatives）およびフ
ェネチルチアゾリルチオウレア誘導体（phenethylthiazolylthiourea (PETT) de
rivatives）を含む。

【００１０】ＮＮＩが、ポリメラーゼサイトに近いＨＩＶの特別なアロステリックサイトに
結合すること、およびＲＴのコンフォメーションおよび運動性のいずれかを変化
させることにより、逆転写を妨害することが知られており、それによって、酵素
の非競合的阻害を引き起こす（kohlstaedt,L.A.et.al.，Science,1992，256,178
3-1790）。

【００１１】幾らかのＮＮＩと複合化しているＲＴ結晶構造が、報告されており（α−ＡＰ
Ａ、ＴＩＢＯ、ネビラバイン（Nevirapine）、およびＨＥＰＴ誘導体を含む）、
そのような構造に関する情報は、ＲＴ対する結合親和性を最大化する狙いのＮＮ
Ｉのさらなる誘導体化の基礎を提供する。しかし、利用可能なＲＴＮＮＩ複合
体結晶構造の数は、限られている。

【００１２】構造情報の不足により、ＰＥＴＴおよびＤＡＢＯ誘導体のような活性的インヒ
ビターの調製のために、交互のデザイン手続に頼らなければならない。ＰＥＴＴ
の系統だった合成について最初に報告された戦略の一つは、ＲＴの構造特性と独
立した、構造−活性の相関関係の分析であり、そして、重要なアンチＨＩＶ活性
と共にいくつかのＰＥＴＴの開発を導いた(Bell, F. W. et al., J. Med. Chem.
, 1995, 38, 4929-4936; Cantrell, A. S. et al., J. Med. Chem., 1996, 39,
4261-4274).

【００１３】ＨＩＶ逆転写酵素（ＲＴ）のＮＮＩ結合サイトをターゲットにする選択された
phenethylthiazolylthiourea (PETT)誘導体は、合成され、対ヒト免疫不全ウイ
ルス（ＨＩＶ）活性についてテストされた。デザインのベースとなった構造およ
びこれらのＰＥＴＴ誘導体の合成は、生物学的アッセイおよびそれらのアンチＨ
ＩＶ活性により助けられた。新規誘導体のいくつかは、ＡＺＴ若しくはTrovirid
ineよりも活性が良く、細胞毒性無しに、ナノモルレベルの濃度でＨＩＶ複製を
停止させた。これらの化合物は、ＨＩＶ感染症の治療において有用であり、突然
変異株に対し特に効力を有し、それはマルチ薬剤耐性ＨＩＶの治療において、そ
れらを有用にする。

【００１４】発明の概要本発明は、新規なＨＩＶ逆転写酵素の非核酸系インヒビター（ＮＮＩ）として
のチオフェン−エチル−チオウレア（ＴＥＴ）を提供する。本発明のＴＥＴ化合
物、組成物および方法は、ＨＩＶ感染症の治療に有用であり、特に、マルチ薬剤
耐性突然変異株を含む、複数のＨＩＶ株に対し、有用である。

【００１５】本発明のＴＥＴ化合物、組成物および方法は、逆転写酵素活性の阻害に有用で
あり、かつセラピー−ナイーブ、薬剤耐性株およびマルチ薬剤耐性突然変異株を
含む複数のＨＩＶ株の複製阻害に有用である。例えば、薬学的組成物の形態で、
本発明のＴＥＴ化合物を投与することにより、ＨＩＶ−１感染症のようなレトロ
ウイルス感染症の治療において、本発明のＴＥＴ化合物は、特に有用である。

【００１６】式（Ｉ）で示すように、本発明のＴＥＴ化合物は、チオフェン構造を持つ。前
記チオフェンは、（Ｒｎ）で置換されていても、置換されていなくてもよい。Ｒ
１は、環状部分であり、置換されていても、置換されていなくてもよい。特に好
ましい本発明のＴＥＴ化合物は、式（ＩＩ）で示す構造を有するＷＨ−４４３で
ある。

【化５】

【００１７】本発明の有用なＴＥＴ化合物および組成物は、極めて低い細胞毒性およびＨＩ
Ｖに対いするきわめて高い効能を持つ。

【００１８】以下、本発明の化合物および方法について、以下の詳細説明および実施例にお
いて、さらに詳しく述べる。

【００１９】発明の詳細な説明定義ここで、以下の極は、次の意味を持つ。

【００２０】 “ＮＮＩ”は、非核酸系インヒビターを意味する。本発明において、ＨＩＶ逆
転写酵素（ＲＴ）の非核酸系インヒビターが定義された。

【００２１】突然変異（ＨＩＶ）とは、野生株に比べ、一つ以上のアミノ酸変異を有するＨ
ＩＶ株を意味する。

【００２２】 “マルチ薬剤耐性ＨＩＶ”とは、一つ以上の化学療法剤を用いた治療に対し耐
性である一つ以上のＨＩＶを意味する。

【００２３】 “治療において効果的な量”とは、投薬において幾らかの治療効果を提供する
服用量を意味し、本発明においては、患者のウイルス活性若しくはウイルス量を
低減できることであり、ウイルスＲＴ活性および／またはウイルスの複製の抑

【００２４】本発明の化合物本発明の化合物は、チオフェン−エチル−チオウレア（ＴＥＴ）化合物を含み
、これは式（Ｉ）の構造を有し、ＲＴの新規な非核酸系インヒビターとして有用
である。

【化６】

【００２５】チオフェンは、置換されていても、置換されていなくても良く，例えば、Ｒは
、Ｈ、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ１２）アルキル基若しくはアルコキシ基、アミノ基
、シアノ基、ニトロ基、水酸基等である。ｎの値は、０から４である。Ｒ１は、
環状部分であり、それは、置換されても、されなくても良く、例えば、フェニル
、ピリジル、ピペリジニル、ピペロニル、モルホリル、フリル（phenyl, pyridy
l, piperidinyl, piperonyl, morphorlyl, furyl）等であり、また、シクロ（Ｃ
３−Ｃ１２）アルキル基、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２）アルケニル基、イソチアゾリ
ル基、テトラゾリル基、トリアゾリル基、ピリジル基、イミダゾリル基、フェニ
ル基、ナフチル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンジイミダゾリル基、チアゾリル
基、オキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、チ
アジアゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、ピロリル基、インドリル基、ベンゾチ
エニル基、チエニル基、ベンゾフリル基、キノリル基、イソキノリル基、および
ピラゾリル基（cyclo(C3-C12) alkyl, cyclo(C3-C12) alkenyl, isothiazolyl,
tetrazolyl, triazolyl, pyridyl, imidazolyl, phenyl, napthyl, benzoxazoly
l, benzimidazolyl, thiazolyl, oxazolyl, benzothiazolyl, pyrazinyl, pyrid
azinyl, thiadiazolyl, benzotriazolyl, pyrolyl, indolyl, benzothienyl, th
ienyl, benzofuryl, quinolyl, isoquinolyl, pyrazolyl）等であってもよい。
Ｒ１の任意の置換基は、例えば、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル基、（Ｃ１−Ｃ３）ア
ルコキシ基、ハロゲン基、水酸基を含む。

【００２６】好ましい一例では、Ｒ１は、ピリジルであり、任意に一つ以上の置換基で置換
され、置換基は、例えば、アルキル基、アルコキシ基、ハロゲン基、または水酸
基である。より好ましくは、Ｒ１は臭素若しくは塩素のようなハロゲンで置換さ
れたピリジル基である。本発明の模範的な化合物は、 N-[2-(2-thiophene)ethyl]-N'-[2-(5-bromopyridyl)]-thiourea (HI-443)であり
、ここで、Ｒ１はヒ゜リシ゛ル基であり、ハロゲンの臭素で置換されている。

【００２７】本発明の化合物は、チオフェン−エチル−チオウレア（ＴＥＴ）化合物を含み
、これは式（ＩＩ）の構造を有し、ＲＴの新規な非核酸系インヒビターとして有
用である。

【化７】チオフェンは、置換されていても、置換されていなくても良く，例えば、Ｒは
、Ｈ、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ１２）アルキル基若しくはアルコキシ基、アミノ基
、シアノ基、ニトロ基、水酸基等である。ｎの値は、０から４であってよい。Ｘ
は、Ｓ若しくはＯであってよい。Ｚは、−ＮＨ−若しくはＯであってもよい。Ｒ
２は、環状部分であり、それは、置換されても、されなくても良く、例えば、フ
ェニル、ピリジル、ピペリジニル、ピペロニル、モルホリル、フリル、チアゾリ
ル、２‘３−ジデヒドロ−２’３‘−ジデオキシチミミジニル（ｄ４Ｔ）（phen
yl, pyridyl, piperidinyl, piperonyl, morphorlyl, furyl，thiazolyl，2',3'
-didehydro-2',3'-dideoxythymidinyl）等であり、また、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２
）アルキル基、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２）アルケニル基、イソチアゾリル基、テト
ラゾリル基、トリアゾリル基、ピリジル基、イミダゾリル基、フェニル基、ナフ
チル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンジイミダゾリル基、チアゾリル基、オキサ
ゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、チアジアゾリ
ル基、ベンゾトリアゾリル基、ピロリル基、インドリル基、ベンゾチエニル基、
チエニル基、ベンゾフリル基、キノリル基、イソキノリル基、およびピラゾリル
基（cyclo(C3-C12) alkyl, cyclo(C3-C12) alkenyl, isothiazolyl, tetrazolyl
, triazolyl, pyridyl, imidazolyl, phenyl, napthyl, benzoxazolyl, benzimi
dazolyl, thiazolyl, oxazolyl, benzothiazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, th
iadiazolyl, benzotriazolyl, pyrolyl, indolyl, benzothienyl, thienyl, ben
zofuryl, quinolyl, isoquinolyl, pyrazolyl）等であってもよい。Ｒ２の任意
の置換基は、例えば、Ｈ，（Ｃ１−Ｃ３）アルキル基、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキ
シ基、ハロゲン基、−ＣＯ−アルキル基、水酸基を含む。

【００２８】好ましいその他の例では、Ｒ２は、チアゾリル基であり、任意に一つ以上の置
換基で置換され、置換基は、例えば、アルキル基、アルコキシ基、ハロゲン基、
または水酸基である。より好ましくは、Ｒ２はチアゾリル基である。本発明の模
範的な化合物は、 N-[2-(2-thiophenylethyl)]-N'-[2-(thiazolyl)]thiourea (DDE530)であり、こ
こで、Ｒ２はチアゾリル基である。

【００２９】式（ＩＩ）の好ましい化合物を、下記テーブルＡに示す。

【００３０】

【表１】

【００３１】本発明の化合物は、ポリメラーゼサイト近くのＨＩＶ−ＲＴの特異的アロステ
リックサイトに結合することが好ましく、例えば、ＲＴのコンフォメーション若
しくは運動性を変化させることにより、逆転写酵素を妨害することが好ましい。

【００３２】酸塩本発明の化合物は、また、薬学的に受容可能な塩の形態であってもよい。薬学
的に受容可能な塩は、有機酸および無機酸により形成される。

【００３３】塩形成に適した酸の例は、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、クエン酸、しゅう酸、
マロン酸、サリチル酸、リンゴ酸、グルコン酸、フマル酸、サクシニル酸、アス
コルビン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸等である。一般的な手法で、遊離塩
基と、単塩若しくは二塩等の目的とする酸の十分量とを接触させることにより、
塩が調製される。塩基を用いた塩の処理により塩基を再生させてもよい。例えば
、水性塩基の希釈溶液を利用してもよい。希釈水性水酸化ナトリウム、炭酸カリ
ウム、アンモニアおよび重炭酸ソーダ溶液が、この目的に適している。極性溶媒
の溶解性のようなある物理的特性において、遊離塩基は、それらの塩と異なる。
しかし、その塩は、本発明の目的において、それらの個々の遊離塩基に等しい。
Ｒが水素原子の場合の塩基の過剰な使用は、対応する基本的な塩を与える。

【００３４】本発明の化合物の使用方法本発明の化合物は、レトロウイルスの逆転写酵素活性を阻害する方法において
有用である。本発明の化合物の阻害に効果的な量のＲＴへの接触により、インビ
トロ若しくはインビボで、レトロウイルス逆転写酵素が阻害される。本発明の化
合物は、また、ＨＩＶ−１のようなＨＩＶを含むレトロウイルスの複製も阻害す
る。例えば、本発明の化合物の阻害に効果的な量の接触により、ウイルスの複製
が阻害される。

【００３５】式（Ｉ）の化合物若しくは薬学的に受容可能な塩の阻害に効果的な投与により
、ＨＩＶ−１感染症を含むＨＩＶ感染症において、本発明の方法は、逆転写酵素お
よび／または突然変異株を含むＨＩＶの複数株の複製を阻害するのに有用である
。式（Ｉ）の化合物もしくはインヒビターは、薬学的に受容可能なキャリアと組
み合わせて投与されることが好ましく、標的抗体および／またはサイトカインの
ような特別なデリバリー剤と組み合わされてもよい。本発明の化合物もしくはイ
ンヒビターは、他の抗ウイルス剤、イムノモジュレーター、抗生物質若しくはワ
クチン等と組み合わせて投与してもよい。

【００３６】式（Ｉ）の化合物は、一般的な非毒性の薬学的に許容可能なキャリア、アジュ
バント、またはビヒクルを含む投薬ユニット剤型において、吸入スプレーにより
、局所的に、粘膜または直腸を通しての吸収により、経口的に、非経口的に（皮
下注射、静脈注射、筋肉注射、組織内注射、点滴を含む）、投与できる。本発明
の薬学的組成物は、経口投与に適したサスペンジョン若しくは錠剤、鼻噴霧剤、
クリーム、殺菌注射水溶液若しく油性サスペンジョンのような殺菌注射剤、坐剤
の形態をとることが可能である。一つの例において、本発明のＴＥＴは、例えば
、ジェルの形態で、異性間のＨＩＶの伝染を防ぐために、鞘膜的（intravaginal
ly）および／または局所的に、適用可能である。

【００３７】サスペンジョンのような経口投与剤のために、前記組成物は、薬剤調製の分野
の既知の技術で調製可能である。前記組成物は、賦型剤としての微小結晶セルロ
ース、懸濁剤としてのアルギン酸若しくはアルギン酸ナトリウム、増粘剤として
のメチルセルロース、および甘味剤若しくはフレーバーを含むことができる。早
期放出タブレットとして、前記組成物は、微結晶セルロース、澱粉、ステアリン
酸マグネシウム塩および乳糖、または、この分野で知られているその他の賦型剤
、バインダー、希釈剤、分解剤、滑剤を含むことができる。

【００３８】吸入剤若しくはエアゾールによる投与のために、前記組成物は、薬剤の分野に
おけるよく知られた技術により調製できる。ベンジルアルコール、若しくは他の
適切な防腐剤、生物学的有効性の向上のための吸着促進剤、フッ素炭化物若しく
はこの分野の既知の可溶化剤若しくは分散剤の使用により、前記組成物は、塩溶
液として調製できる。

【００３９】注射溶液若しくは注射分散液としての投与のために、オレイン酸を含む、合成
のモノ若しくはジグリセライドを含む滅菌オイルのような、好ましい分散剤、湿
潤剤および懸濁剤の使用により、当分野のよく知られた技術に従い、前記組成物
は、形成できる。

【００４０】坐薬としての直腸内適用のために、薬剤放出のために直腸内で液化若しくは溶
解し、外気温度では固体である、ココアバター、合成グリセライドエステル、ポ
リエチレングリコールのような、好ましい非刺激性助剤と共に混合することによ
り、前記組成物を調製することができる。

【００４１】ＨＩＶ感染症、ＡＩＤＳ若しくはＡＩＤＳ関連合併症（AIDS-related complex
、ＡＲＣ）のようなレトロウイルス感染症の治療若しくは予防において、本発明
の化合物を、一回当たり、約０．０２から約１０．０グラムの量で、かつ一日に
２回から５回以上で経口投与することが、有用である。例えば、１日に１回から
４回で、体重１ｋｇ当たり約０．１から１００ｍｇの量の前記化合物を投与する
ことにより、ＨＩＶ感染症を治療できる。一つの例では、６時間おきに、約１０
０ｍｇから約４００ｍｇの量を経口投与する。特別な患者に対する投与レベルは
、調整され、かつ種々要因に依存すし、これらの要因には、前記特別の化合物の
活性、代謝安定性、その化合物の活性の長さ、年齢、体重、一般的な健康状態、
性別、患者の食事内容、投与形態、排泄頻度、薬剤の組み合わせ、および特別な
条件の過酷さ、が含まれる。

【００４２】ＨＩＶ感染症、ＡＩＤＳまたはＡＲＣの治療において、式Ｉの前記化合物は、
他の有用な薬剤と組み合わせて投与することができる。例えば、抗ウイルス剤、
免疫調整剤、抗感染症剤、若しくはワクチンの有効量と組み合わせて、本発明の
前記化合物を投与できる。本発明の前記化合物は、ＨＩＶのようなレトロウイル
スに対し晒される期間の間若しくは後より前に、投与することができる。

【００４３】ターゲットモエティ（targeting Moiety）への結合本発明の化合物は、ターゲットモエティへの結合により、処置されるべき細胞
への特異的配送のための標的になり得る。本発明の化合物への結合のための有用
なターゲットモエティは、抗原、サイトカイン、および処置すべき前記細胞上に
発現した受容体リガンドを含む。「結合」という語句は、２以上の化合物で形成
される複合体を意味する。

【００４４】「ターゲットモエティ」という語句は、所望の活性のための特別なサイトへの
本発明の化合物の配送を助ける化合物を意味する。ターゲットモエティは、例え
ば、細胞表面に存在する分子に特異的に結合する分子を含む。本発明において、
そのような有用なターゲットモエティは、抗細胞表面抗原抗体を含む。インター
ロイキン等のサイトカイン、上皮細胞成長因子等の因子等は、それらのレセプタ
ーをハイレベルで発現している細胞に結合するターゲットモエティである。

【００４５】特に、治療的な活性のための本発明の化合物を細胞の標的のための有用なター
ゲットモエティは、処置するべきウイルス感染細胞に存在する抗原若しくは受容
体に結合するそれらのリガンドを含む。例えば、ＣＤ４８のようなＴ細胞に存在
する抗原は、抗体の標的になり得る。単鎖断片等の抗体断片も、使用できる。そ
の他のリガンド−レセプターの結合対は、標的細胞への抗ウイルス標的のための
科学文献において、知られている。本発明の化合物とターゲットモエティとの結
合の生成方法は、知られている。

【００４６】本発明の化合物の製造方法本発明の化合物は、スキーム１および２に示すようにして調製できる。一般に
、チオカルボニル剤若しくはカルボニル剤を形成するために、適当なアミン（Ｒ
１−ＮＨ₂）を、アセトニトリル溶媒存在下、外気温、で約１２時間、１，１−
チオカルボニル−ジイミダゾル若しくは１，１´−カルボニル−ジイミダゾル（
1,1'-thiocarbonyl-diimidazole or 1,1'-carbonyl-diimidazole）と反応させる
。直ちに、2',3'-didehydro-2',3'-dideoxythymidine (d4T)は、Ｒ１−ＮＨ₂で
置換される。そして、反応生成物を、ジメチルフォルムアミド（ＤＭＦ）のよう
な非プロトン溶媒中、１００℃のような高温、かつ約１５時間の長時間で、置換
若しくは非置換のチオエチルアミンと共に濃縮する。目的の化合物を、カラムク
ロマトグラフィーで精製する。

【００４７】スキーム１

【化８】

【００４８】スキーム２

【化９】

【００４９】本発明のＴＥＴ化合物は、上述のようにして、若しくは他の合成方法により、
合成することができる。

【００５０】実施例本発明について、以下の実施例によりさらに詳細に述べる。前記実施例は、実
施態様を例示するものであり、いかなる場合も本発明を制限するものでない。

【００５１】実施例１置換チオウレア化合物の対比最近、我々は、トロビリジン（trovirdine）の平面なピリジル環を、大きな体
積を占めるひだがよったピペリジニル環若しくはピペラジニル環で置き換えたこ
とを報告した(Mao et. al., 1998, Bioor.Medicinal Chem. Lett. 8:2213-2218)
。それは、バタフライ形状のＮＮＩ結合ポケットの広いウイング２領域に良く充
填した。そのようなヘテロ環は、芳香環より、構造的に、より柔軟であり、結合
におけるエントロピーの大きな損失にもかかわらず、これは硬い結合ポケットに
、より効果的にフィットできるという利点である。

【００５２】最初に合成したヘテロ環化合物は、N-[2-(1-piperidinylethyl)]-N'[2-(5-bro
mopyridyl)]-thiourea (HI-172) とN-[2-(1-piperazinylethyl)]-N'[2-(5-bromo
pyridyl)]-thiourea (Mao et. al, surpra)である。抗ウイルス活性を調べた結
果、前記両化合物は、trovirdineに比べ効果的であり、ナノモル濃度でヒト抹消
血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるＮＮＩ感受性ＨＩＶ−１株ＨＴＬＶＩＩＩＢの
複製を阻害した。しかし、非類似trovirdineである両化合物とも、ＮＮＩ耐性Ｈ
ＩＶ−１株の複製は阻害できなかった(Mao et.al, 1999, Bioorg. Med. Chem. L
ett. 9:1593-1598)。これらの初期の知見は、trovirdineのピリジル環をかさ高
いリングに置き換えることで、有用な化合物を作れるが、この新規化合物は、Ｒ
Ｔ変異のＨＩＶ−１株を阻害する能力は保有していないことを示した。ＲＴ−Ｎ
ＮＩの構造と機能のさらなる理解および新規かつ効果的なＮＮＩの発見により、
８個の異なるヘテロ環置換基で trovirdineのピリジン環を置換した。前記置換基は、以下の基を含む。ａ．ヘテロ環状アミンピロリドン、１−メチル−ピロリドン、モルホリン、イミ
ダゾル、インドール；ｂ．ヘテロ環状芳香基フランおよびチオフェン；およびｃ．芳香アルデヒドピペロニル

【００５３】化合物の合成チオウレアおよび尿素化合物は、スキーム３および４に記載のようにして
合成した。すなわち、前記物質であるチオカルボニル誘導体を得るために、2-am
ino-5-bromopyridineを1, 1 -thiocarbonyl diimidazoleを用いて濃縮した。さ
らに、置換フェニルエチルアミンと反応させて標的化合物を高収率で得た。

【００５４】室温で、５０ｍｌの無水アセトニトリルに、thiocarbonyldiimidazole (8.90g
, 50 mmol)および2-amino-5-bromo pyridine (8.92g, 50 mmol)を加えた。反応
生成物を１２時間攪拌し、沈殿物をろ過し、冷アセトニトリル（２×２５ｍｌ）
で洗浄し、真空条件で乾燥して、化合物Ａ（１１．４０ｇ，８０％）を得た。ジ
メチルホルムアミド（１５ｍｌ）の化合物Ａ（０．５５当量）のけんだく液に、
適当なアミン（０．５０当量）を加えた。反応混合物を１００℃まで加熱し、１
５時間濃縮した。反応混合物を氷冷水に注ぎ、懸濁液を３０分間攪拌した。生成
物をろ過し、水で洗浄し、乾燥し、カラムクロマトグラフィーで精製することに
より、標的化合物を高収率で得た。比較対照であるtrovidineは，Bell等の方法
により調製した（J. Med. Chem 1995,38:4926-9; Ahgren et.al., 1995, Antim
icrob.Agents Chemotherapy 39:1329-1335.）。

【００５５】スキーム３

【化１０】

【００５６】スキーム４

【化１１】ａ＝1,1'-thiocarbonyl diimidazole, acetonitrile,室温,１２時間ｂ＝DMF,１００℃、１５時間Ｒ１はテーブル１に示す。

【００５７】

【００５８】合成化合物の特性分析プロトンとカーボンの核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを、バリアンスペクト
ロメーター（Varian spectrometer）により、オートマティックブロードプロー
ブを用いて測定した。特に注記しない限り、全てのＮＭＲスペクトルは、室温の
ＣＤＣｌ₃中で測定した。ケミカルシフトは、標準としてのテトラメチルシラン
に対する千分率（ミリオン）で示した。複数の略記であるｓ，ｄ，ｄｄ，ｔ，ｑ
，ｍは、それぞれ、シングル（singlet）,ダブル（doublet）,ダブルのダブル（
doublet of doublet）,トリプレット（triplet）,カルテット（quartet）および
マルチ（multiplet）を示す。ＵＶスペクトルは、１センチのセル長を持つベッ
クマンモデルＵＶスペクトルメーター（Beckmann Model # DU 7400 UV/Vis）で
測定した。フーリエ変化赤外線スペクトルは、ＦＴ−ニコレットモデル装置（FT
-Nicolet model Protege #460）を用いて測定した。液体試料の赤外線スペクト
ルは、ＫＢｒディスクを用いた適切な液体として行った。マススペクトル分析は
、フィニガンの装置（Finnigan MAT 95 instrument）若しくはヒュ−レートパッ
カードの装置（Hewlett-Packard Matrix Assisted Laser Desorption (MALDI)
spectrometer model # G2025A）のいずれかを用いて行った。後者のケースでの
マトリックスは、シアノヒドロキシシンナミックアシッドを用いた。融点は、メ
ルトジョンズの装置（Melt John's apparatus）を用いて測定し、補正しなかっ
た。元素分析は、アトランティックマイクロラボズ（Atlantic Microlabs (Norc
ross, GA)）により行った。カラムクロマトグラフィーは、ベーカー社（Baker C
ompany）から入手したシリカゲルを用いて行った。溶出に用いた溶媒は、化合物
により変化させ、かつエチルアセテート、メタノール、クロロホルム、ヘキサン
、メチレンクロライドおよびエーテルの一つを含む。以下に、合成化合物の特性
データを示す。

【００５９】 N-[2-(2-fluorophenethyl)]-N'-[2-(5-bromopyridyl)]thiourea (HI-240): 収率: 71%, mp 156-157oC; UV (MeOH) λmax: 209, 256, 274, 305 nm; IR(KBr
) ν 3446, 3234, 3163, 3055, 2935, 1672, 1595, 1560, 1531, 1466, 1390, 1
362, 1311, 1265, 1227, 1169, 1136, 1089, 1003, 864, 825, 756 cm -1; 1HNM
R (CDCl3) δ 11.36 (bs, 1H),9.47 (bs, 1H), 8.05-8.04 (dd, 2H), 7.29-7.2
4 (m, 1H),7.13-7.03 (m, 3H), 6.87-6.84 (d, 1H), 4.06-3.99 (q, 2H), 3.10
-3.05 (t, 2H), 13C(CDCl3) δ 179.1, 151.7, 146.2, 141.1, 131.2, 131.1,
128.5, 128.4, 124.1, 115.5, 115.2, 113.6, 112.2 , 45.8 and 28.2; 19F(CD
Cl3) δ -42.58 ＆-42.55 (d); Maldi Tof mass : 355 (M+1), Calculated mas
s : 354; Anal. (C14H13BrFN3S) C, H, N,S;

【００６０】 N-[2-(1-pyrolidylethyl)]-N'-[2-(5-bromopyridyl)]thiourea (HI-230): 収率: 72%; mp. 136-138oC ; UV (MeOH) λmax: 203, 206, 252, 277, 306 nm
, IR(KBr) 3454, 3220, 3159, 3059, 2941, 2787, 1595, 1531, 1475, 1311
, 1229, 1182, 1061, 1003, 864, 821, 706 cm -1; 1HNMR (CDCl3) δ 11.53 (
bs, 1H), 9.17 (bs, 1H), 8.19-8.11 (d, 1H), 7.73-7.69 (d, 1H), 6.82-6.79
(dd, 1H), 3.85-3.83 (q, 2H), 2.79(t, 2H), 2.60 (bm, 4H), 1.81 (bm); 13C(
CDCl3) δ 178.7 , 151.7 , 146.5 , 141.1, 113.4, 112.7 , 53.8 , 53.6, 44.
9 and 23.7 ; Maldi Tof mass : 329 (M+1), Calculated mass : 328; Anal. (C
12H17Br N4 S), Found: C: 42.64, H: 4.80, N:16.71, S: 7.72, Br: 28.04;

【００６１】 N-[2-(1-piperonyl)]-N'-[2-(5-bromopyridyl)]thiourea (HI-257): 収率: 70%; mp 159-162oC; UV (MeOH) λmax: 209, 276nm, IR(KBr) 3450, 32
15, 3151, 3082, 3009, 2931, 1591, 1562, 1529, 1500, 1475, 1305, 1238, 11
68, 1086, 1041, 933, 858, 825, 794, 688 cm -1; 1HNMR (DMSO-d6) δ 11.64
(bs, 1H),10.68 (bs, 1H), 8.17-8.16(s, 1H), 7.75-7.72(d, 1H), 7.19-7.16
(d,1H), 6.91-6.90 (s, 1H), 6.84-6.83 (d, 1H), 6.79-6.77(d,1H) , 6.01 (s,
2H), 4.86-4.84 (d, 2H); 13C(CDCl3) δ 178.7 , 151.3, 146.4, 144.7 , 139
.7, 130.3 , 119.5, 113.5 ,110.9 , 106.9, 99.7 and 47.3 , Maldi Tof mass
: 366 (M+Na), Calculated mass : 345; Anal. (C14H12Br N3 O2 S) C, H, N,
S, Br;

【００６２】 N-[2-(1-piperidinoethyl)]-N'-[2-(5-bromopyridyl)]thiourea (HI-172): 収率 : 74%; m.p. 150-152 oC; Rf = 0.74 in CHCl3:MeOH (9:1); UV (MeOH)
λmax: 306, 275 and 205 nm, IR(KBr)n 3155, 3077, 2935, 2850, 2360, 1591
, 1525, 1465, 1319, 1226, 1095, 827 and 756 cm -1; 1HNMR (CDCl3) δ 11.5
3 (s, 1H), 9.72 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.72-7.68 (d, 1H), 6.95-6.92 (d,
1H), 3.84-3.78 (q, 2H), 2.61-2.57 (t, 2H), 2.45 (bs, 4H), 1.64-1.48 (m,
6H); 13C(CDCl3) δ 178.1, 151.8, 146.3, 140.8, 113.5, 112.6, 56.1, 54.0
, 43.0, 26.3 and 24.3; Mass observed on MALDI-TOF : 343.5; Exact Mass =
343. Anal. (C13H19BrN4S) C, H, N, S, Br;

【００６３】 N-[2-(1-methyl-2-pyrrolidinylethyl)]-N'-[2-(5 bromopyridyl)]thiourea (HI-206): 収率 : 56%; Rf = 0.34 in CHCl3:MeOH (9:1); UV (MeOH) λmax 307 , 276, 2
56 and 207 nm, IR(KBr) 3207, 2944, 2782, 2360, 1591, 1467, 1307, 1226,
1093 and 825 cm -1; 1HNMR (CDCl3) δ 11.18 (s, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.22 (
s, 1H), 7.74-7.70 (d, 1H), 6.75-6.72 (d, 1H), 3.82-3.72 (q, 2H), 3.61-3.
54 (m, 1H), 3.14-3.04 (t, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.19-1.60 (m, 6H); 13C(CDC
l3) δ 178.9, 146.9, 140.8, 113.3, 112.2, 64.2, 57.2, 43.4, 40.7, 32.4,
30.5 and 22.2; Mass observed on MALDI-TOF : 343.6; Exact Mass 343; Anal.
(C13H19BrN4S) Found: C: 45.49, H: 5.58, N:16.32 S: 9.34, Br: 23.28;

【００６４】 N-[2-(5-Bromopyridinyl)]-N'-[2-(2-Imidazolylethyl)] thiourea (HI-436): 収率 44%; mp: 104-107oC; UV(MeOH) max: 208, 275, 305 nm; IR(KBr) 34
90, 3228, 3097, 2944, 2618, 1592, 1529, 1502, 1463, 1301, 1267, 1228, 11
99, 1095, 937, 862, 827, 784, 750, 661, 595 cm-1; 1H NMR (DMSO) 11.12
(bs, 1H), 10.13 (bs, 1H), 7.82-7.81 (d, 1H), 7.41-7.38 (dd, 1H), 7.33 (s
, 1H), 6.80-6.77 (d, 1H), 6.61 (s, 1H), 4.89 (bs, 1H), 3.76-3.69 (q, 2H)
, 2.73-2.68 (t, 2H); 13C NMR (DMSO) 178.3, 151.4, 144.8, 139.8, 134.0,
133.9, 116.2, 113.4, 111.1, 44.2, 25.4; MALDI-TOF found: 327.6;

【００６５】 N-[2-(5-Bromopyridinyl)]-N'-[2-(2-Thiophenylethyl)] thiourea (HI-443): 収率 40%; mp: 160-161oC; UV(MeOH) max: 260, 276, 306 nm; IR(KBr) n32
18, 3151, 3087, 2935, 2873, 1594, 1552, 1531, 1332, 1297, 1265, 1224, 11
88, 1134, 1089, 1076, 1006, 833, 811, 784, 742, 688, 582, 503 cm-1; 1H
NMR (CDCl3) 11.45 (bs, 1H), 10.40 (bs, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.68-7.64 (dd
, 1H), 7.20-7.19 (d, 1H), 7.08-7.04 (dd, 1H), 6.99-6.95(m, 1H), 6.91 (s,
1H), 4.04-3.97 (q, 2H), 3.24-3.20 (t, 2H); 13C NMR (CDCl3) 179.1, 151
.7, 145.1, 140.6, 140.1, 126.2, 124.8, 123.3, 113.8, 111.5, 46.1, 28.4;

【００６６】 N-[2-(5-Bromopyridinyl)]-N'-[2-(3-Indolylethyl)] thiourea (HI-442): 収率 44%; mp: 208-209oC; UV(MeOH) max: 222, 274, 305 nm; IR(KBr) 33
51, 3207, 3147, 3079, 3035, 2915, 2869, 2840, 1591, 1556, 1531, 1465, 14
21, 1328, 1299, 1230, 1189, 1105, 1004, 950, 906, 860, 831, 752, 644, 58
8, 509 cm-1; 1H NMR (CDCl3) 11.30 (bs, 1H), 10.32 (bs, 1H), 10.20 (bs,
1H), 7.81 (d, 1H), 7.65-7.58 (m, 2H), 7.41-7.39 (d, 1H), 7.16-7.11 (t,
2H), 7.05-7.00 (t, 2H), 4.06-4.00 (q, 2H), 3.15-3.11 (t, 2H); 13C NMR
(CDCl3) 178.4, 151.6, 144.9, 139.8, 135.7, 126.4, 122.0, 120.6, 117.9,
117.7, 113.5, 111.1, 111.0, 110.7, 45.4, 23.7;

【００６７】 N-[2-(5-Chloropyridinyl)]-N'-[2-(2-Imidazolylethyl)] thiourea (HI-446): 収率 56%; mp: 175oC; UV(MeOH) max: 209, 274, 307 nm; IR(KBr) 3494,
3226, 3089, 2944, 2620, 1598, 1556, 1531, 1465, 1390, 1311, 1267, 1230,
1197, 1110, 1008, 937, 864, 827, 784, 752, 663, 621, 597, 507, 474 cm-1;
1H NMR (CDCl3) 11.38 (bs, 1H), 10.40 (bs, 1H), 7.99-7.98 (t, 1H), 7.7
2-7.68 (dd, 1H), 7.7.56-7.52 (dd, 2H),7.13-7.10 (d, 1H), 6.86 (s, 1H), 4
.02-3.96 (q, 2H), 2.98-2.94 (t, 2H); 13C NMR (CDCl3) 178.4, 151.2, 142
.5, 137.2, 133.9, 123.2, 112.9, 44.2, 25.5;

【００６８】 N-[2-(5-Bromopyridinyl)]-N'-[2-(2-Furylmethyl)] thiourea (HI-503): 収率 44%; mp: 187-188oC; UV(MeOH) max: 209, 276, 307 nm; IR(KBr) n32
16, 3155, 3083, 3037, 2921, 1594, 1550, 1529, 1463, 1307, 1228, 1176, 11
35, 1093, 1006, 968, 864, 817, 719, 568 cm-1; 1H NMR (DMSO) 11.50 (t,
1H), 10.86 (bs, 1H), 8.32-8.31 (d, 1H), 7.99-7.95 (dd, 1H), 7.60 (t, 1H)
, 7.17-7.14 (d, 1H), 6.42-6.35(m, 2H), 4.87-4.85 (d, 2H); 13C NMR (DMSO
) 179.8, 152.5, 151.0, 146.3, 142.7, 141.7, 114.8, 112.3, 110.8, 107.8,
41.6;

【００６９】 N-[2-(5-Bromopyridinyl)]-N'-[2-(4-Morpholinoethyl)] thiourea (HI-276): 収率 43%; mp: 159-160oC; UV(MeOH) max: 207, 275, 306 nm; IR(KBr) 32
09, 3153, 3079, 3025, 2942, 2852, 2807, 1592, 1562, 1533, 1465, 1334, 12
99, 1228, 1199, 1143, 1112, 1018, 943, 912, 862, 831, 727, 700, 507 cm-1
; 1H NMR (CDCl3) 11.52 (bs, 1H), 9.24 (bs, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.76-7.7
2 (dd, 1H), 6.89-6.82 (t, 1H), 3.87-3.75 (m, 6H), 2.69-2.55 (m, 6H);; 1
3C NMR (CDCl3) 178.6, 151.7, 146.5, 141.1, 113.5, 112.8, 67.2, 55.9, 53
.1, 42.5;

【００７０】 N-[2-(5-Bromopyridinyl)]-N'-[2-(Pyridinyl)] thiourea (HI-142): 収率 54%; mp: 152-154oC; UV(MeOH) max: 208, 273, 306, 485 nm; IR(KBr)
3224, 3156, 3085, 3039, 2931, 1583, 1558, 1531, 1465, 1432, 1361, 1319,
1263, 1228, 1166, 1135, 1095, 1012, 885, 825, 756, 700, 661, 567, 511 c
m-1; 1H NMR (CDCl3) 11.55 (bs, 1H), 9.56 (bs, 1H), 8.61-8.60 (d, 1H),
8.08-8.07 (d, 1H), 7.71-7.62 (m, 2H), 7.29-7.18 (m, 2H), 6.89-7.86 (d, 1
H), 4.24-4.17 (q, 2H), 3.25-3.21 (t, 2H); 13C NMR (CDCl3) 178.7, 158.6
, 151.6, 148.9, 146.2, 140.9, 136.6, 123.6, 121.6, 113.5, 112.6, 44.9, 3
6.6;

【００７１】 N-[2-(2-pyridylethyl)]-N'-[2-(pyridyl)]thiourea (HI-207): 収率: 49%, Rf =0.68 in CHCl3:MeOH (9:1); UV (MeOH) λmax 293, 265, 247
and 209 nm, IR(KBr) 3415, 3222, 3050, 2360, 1600, 1533, 1479, 1436, 1
315, 1240, 1151 and 775 cm -1; 1HNMR (CDCl3) δ 11.90 (s, 1H), 8.8 (s, 1
H), 8.60-8.58 (d, 1H), 8.03-8.01 (d, 1H), 7.65-7.56 (m, 2H), 7.27-7.14 (
m, 2H), 6.93-6.89 (d, 1H), 6.80-6.77 (d, 1H) 4.23-4.15 (q, 2H) and 3.41-
3.20 (t, 2H); 13C(CDCl3) δ 179.2, 158.9, 153.0, 149.2, 145.5, 138.5, 1
36.4, 123.5, 121.4, 117.7, 111.8, 44.9 and 36.9; Mass observed on MALDI-
TOF : 257.1; Exact Mass = 258. Anal. (C13H14N4S) C, H, N, S;

【００７２】 N-[2-(1-piperizinylethyl)]-N'-[2-(5-bromopyridyl)]thiourea (HI-258): 収率: 75% ; mp. 178-180o C; UV (MeOH) λmax 209, 275, 305, IR(KBr) 3448,
3223, 3159, 3034, 2812, 1666, 1595, 1466, 1435, 1308, 1229, 1130, 1092,
1000, 833 cm -1 ; 1HNMR (CDCl3) δ1HNMR (CDCl3) δ 11.50 (s, 1H), 9.77
(s, 1H), 8.19-8.11 (d, 2H), 7.75-7.71 (d, 1H), 6.97-6.95 (d, 1H), 3.87-3
.86 (q, 2H), 3.63-3.60 (t, 2H), 3.45-3.42(t, 2H), 2.74-2.69 (t, 2H), 2.
59-2.52(m, 4H) ; 13C(CDCl3) δ 178.7 , 160.8, 151.8, 146.1, 141.0 , 113.
7, 112.7 , 55.2 , 52., 51.9 , 45.8 , 42.5 and 40.1 ; Mass observed on M
ALDI-TOF : 343.5; Exact Mass = 343; Anal. (C12H18BrN5S) Found: C: 41.98,
H: 4.88, N:18.74 S: 8.52, Br: 21.58.

【００７３】 N-(2-Thiopheneethyl)-N'-[2-(5-chloropyridyl)]thiourea (DDE 524) 収率: 40%; mp: 163-164^oC, UV (MeOH) _max206, 253, 274, 303 nm, IR: 3
219, 3160, 3039, 2935, 2854, 1596, 1556, 1531, 1473, 1334, 1256, 1228, 1
186, 1134, 1110, 815, 686 cm^-1; ¹H NMR (DMSO-d₆) 11.32 (t, 1H), 10.76
(s, 1 H), 8.10 (dd, 1 H, J=3.3), 7.87-7.83 (dd, 1 H, J=11.4), 7.37-7.35
( ddd, 1 H, J=6.9), 7.18-7.15 (dd, 1 H, J=9.6), 6.99-6.95 (m, 2 H), 3.84
(q, 2 H, J=5.4), 3.15 (t, 2 H, J=6.9); ¹³C NMR (DMSO-d₆) 179.2, 152.1
, 143.6, 141.2, 138.9, 127.1, 125.8, 124.5, 123.8, 114.1, 46.5, 28.6; MA
LDI-TOF 299.5 (M+2).

【００７４】 N-[2-(2-Thiophenylethyl)]-N'-[2-(thiazolyl)]thiourea (DDE 530). 収率 36%, mp: 193-194^oC; UV (MeOH) _max: 207, 212, 215, 232, 236, 255,
289 nm; IR :3219, 3151, 3087, 3003, 2935, 1595, 1552, 1531, 1471, 1298,
1263, 1211, 1188, 1134, 1076, 846, 812, 686 cm^-1; ¹H NMR (DMSO-d₆) 11.
66 (br s, 1 H), 9.69 (br s, 1 H), 7.34 (d, 2 H, J=3.3), 7.08 (d, 1 H, J=
3.6), 6.97-6.93 (m, 2 H), 3.78 (q, 2 H), 3.12 (t, 2 H); ¹³C NMR (DMSO-d₆ ) 178.3, 161.9, 141.1, 136.5, 127.1, 125.6, 124.4, 112.1, 45.9, 28.6; M
ALDI-TOF 270.7 (C₁₀H₁₁N₃S₃ + 1).

【００７５】置換チオウレア化合物の抗ウイルス活性アンチＨＩＶ活性の精製ＲＴアッセイ合成化合物を、精製組換えＨＩＶＲＴに対し、ＲＴ阻害活性（ＩＣ５０［ｒ
ＲＴ］）をテストした。これには、セルフリーＱｕａｎ−Ｔ−ＲＴシステム（Am
ersham, Arlington Heights, IL）を用い、これは、シンチレーショプロキシメ
トリーアッセイ原理（Bosworth, et al., 1989, Nature 341:167-168.）を利用
する。アッセイにおいて、ＤＮＡ／ＲＮＡテンフ゜レートは、ビオチン・アジビンによるＳＰＡビーズに結合している。プライマーＤＮＡは、１６−ｍｅｒオリゴ（Ｔ
）であり、これは、ポリ（Ａ）テンフ゜レートに対しアニールされている。プライマー／テンプレートは、ストレプアビジン被覆のＳＰＡビーズに結合している。

【００７６】 ³Ｈ−ＴＴＰは、最終濃度が０．５μＣｉ／サンプルになるように、ＲＴアッ
セイバッファー(49.5 mM Tris-Cl, pH 8.0, 80 mM KCI, 10 MM MgCl2 10 mM DTT
, 2.5 mM EGTA, 0.05% Nonidet-P-40)で希釈され、アニールされたＤＮＡ／ＲＮ
Ａ結合ＳＰＡビーズに加えられる。試験化合物は、０．００１μＭから１００μ
Ｍ濃度までで、反応物に加えられる。組換えＨＩＶＲＴの１０ｍUの添加および
３７℃で1時間のインキュベートにより、３Ｆ−ＴＦＰのインコーポレーション
によりプライマーが伸長する。この反応を、0.2 mlの120 mM EDTAを加えて停止
する。サンプルは、開放系で、Beckman LS 7600装置を用いて計測され、ＩＣ₅₀
値は、未処理サンプルとの比較で計算される。以下のテーブル１にデータを示す
。

【００７７】テーブル１

【表２】

【００７８】テーブル１に示すように、ピリジル環の置換は、trovirdineのＲＴ阻害機能に
大きなインパクトを与えた。Trovirdineを除き、N'-[2-(2-thiophene)ethyl]-N'
-[2-(5-bromopyridyl)]- thiourea (HI-443) だけが、インビトロで、９０％以
上の組換えＲＴ阻害活性を示した。ＨＩ−443は、ＩＣ５０値が０．８μＭおよ
びＩＣ９０値が１２μＭで、組換えＲＴを阻害した。

【００７９】ＨＩ−４４３のチオフェン基は、Trovirdineと同じＲＴのＮＮＩ結合ポケット
のウイング２領域を占めたが、それは小さな分子体積であった。また、ＲＴ結合
サイトにおけるＨＩ−４４３の予測されるドッキング位置は、最適水素結合ドナ
ーサイズを阻害する。したがって、したがって、ＨＩ−４４３は、組換えＲＴの
阻害活性が、trovirdine（ＩＣ５０＝０．８μＭ）若しくは我々が先に公表した
リード化合物ＨＩ−１７２（ＩＣ５０＝０．６μＭ、かさばるヘテロ環置換基ピ
ペリジニル基を持つ）より、わずかに低いことは、驚くべきことではない(Mao e
t.al., 1998, Bioorg. Med. Chem. Lett.8:2213)（テーブル１参照）。

【００８０】実施例３ＴＥＴ化合物とその他のＮＮＩとの比較ＴＥＴ化合物であるＨＩ−４４３の抗ＨＩＶ活性について、前記実施例２に記載
した精製組換えＲＴおよびＱｕａｎ−Ｔ−ＲＴアッセイシステムを用い、trovir
dineおよびヘテロ環ＮＮＩであるＨＩ−１７２(Mao et.al., 1998, Bioorg. Med
. Chem. Lett.8:2213)と比較した。

【００８１】付け加えて、化合物の抗HIV活性を測定した。この測定は、Uckun等の方法（in
Uckun et.al., 1998, Antimicrobial Agents and Chemotherapy 42:383）によ
り、健康なボランティアドナーから提供された抹消血単球細胞（ＰＢＭＣ）にお
けるＨＩＶ−１のＨＴＬＶＩＩＩＢ株の複製を阻害する能力を測定することによ
り、行った。

【００８２】ＨＩＶ陰性ドナーからの正常ヒト抹消血単球細胞（ＰＢＭＮＣ）を７２時間イ
ンキュベートした。これは、熱処理不活性仔牛結成（ＦＢＳ）２０％（V/V）、
３％インターロイキン−２．２ｍＭＬ−グルタミン酸塩、２５ｍＭＨＥＰＥ
Ｓ、２μｌ、ＮＡＨＣＯ，５０ｍｇ／ｍＬゲンタマイシンおよび４μｇ／ｍＬph
ytohemagglutininを添加したＲＰＭＩ１６４０でのインキュベートである。イ
ンキュベート後に、前記細胞を、５％湿度、ＣＯ²雰囲気、３７℃、一時間の吸
着時間、０．１の複数感染（MOI）で、ＨＩＶ−１若しくはHIV株に晒した。つづ
いて、種々のインヒビター濃度の９６ウエルマイクロプレート（１００μｌ／ウ
エル、２ｘ１０⁶セル／ｍＬ、３つのうち一つのウエル）で細胞を培養した。培
養液上澄みをウエルから感染後7日目にサンプリングし、ｐ２４抗原ｐ２４酵素
免疫法（ＥＩＡ）にかけた（Erice et al., 1993, Antimicrob. Ag. Chemothera
py 37:385-838）。適用したｐ２４ＥＩＡは、カルチャーコーポレーション（Cou
lter Corporation/Immunotech, Inc. (Westbrook, ME).）から入手可能である無
改変力学的アッセイである。ウイルスの複製の阻害率（％）は、無処理感染細胞
（例えば、ウイルスコントロール）からのｐ２４値と、処理感染細胞であるテス
ト対象物からのｐ２４値との比較により計算した。

【００８３】 2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)-carbonyl]-2H
-tetrazolium hydroxide (XTT)を用いたマイクロカルチャーテトラゾリンアッセ
イ（ＭＴＡ）は、前記化合物の細胞毒性の評価により行った。これは、例えば、
Ｕｃｋｕｎ等の方法（Uckun et.al., 1998, Antimicrobial Agents and Chemoth
erapy 42:383; and Mao et.al., 1998, Bioorg. Med. Chem. Lett.8:2213.）に
より行った。

【００８４】薬剤耐性ＨＩＶ株に対する活性 Uckun等の方法（in Uckun et.al., 1998, Antimicrobial Agents and Chemoth
erapy 42:383）により、ＴＥＴ化合物ＨＩ−４３３の活性についてテストした（
テーブル２参照）。前記テストは、薬剤感受性株（ＨＴＬＶＶＩＩＩＢ）、Ｎ
ＮＩ耐性株（Ａ１７およびＡ１７変異種）および多種薬剤耐性ＨＩＶ−１株（Ｒ
Ｔ−ＭＤＲ）に対する活性についてのテストである。また、前記方法により、TE
T化合物であるＤＤＥ−５２６、ＤＤＥ−５２４、ＨＩ−４４３およびＤＤＥ５
３０の活性についてテストした（テーブル３参照）。前記テストは、薬剤感受性
株（ＨＴＬＶＶＩＩＩＢ）、多種薬剤耐性ＨＩＶ−１株（ＲＴ−ＭＤＲ）およ
びＡＩＤＳ患者から分離した病原のＨＩＶに対する活性についてのテストである
。ＲＴ−ＭＤＲは、AIDS Research and Reference Reagent Programを通じ、ベ
ンダー博士（Dr.Bender Larder）から入手した。ＲＴ−ＭＤＲは、ネーチャー誌
（Larder et al., 1993, Nature, 365, 451-453）に記載されている。

【００８５】データを、テーブル２およびテーブル３に示す。このデータは、ＰＢＭＣ（化
合物がｐ２４生成物を５０％まで阻害する濃度）におけるＨＩＶｐ２４抗原生成
物の阻害のＩＣ５０の値としてのデータである。驚くべきことに、ＴＥＴ化合物
のＨＩ−４４３は、多種薬剤耐性ＨＩＶ−１株ＲＴ−ＭＤＲ（Ｖ１０６Ａ変異お
よびＲＴ残基７４Ｖ、４１Ｌ、２１５Ｙ変異を持つ）に対し、ＨＴＬＶＩＩＩＢ
に対するよりも、１０倍以上の効能を示した。

【００８６】テーブル２

【表３】

【００８７】テーブル２に示すように、ＴＥＴ化合物のＨＩ−４４３は、ヒト抹消血単核細
胞（ＰＢＭＣ）における３回の独立した実験の３回において、ＨＩＶ−１株ＨＴ
ＬＶＩＩＩＢの複製を効果的に阻害し、その時のＩＣ５０値は０．０３μＭで
あった。組換えＲＴに対する高いＩＣ５０値によれば、ＨＴＬＶＩＩＩＢの複製
阻害のＨＩ−４４３のＩＣ５０値は、trovirdineのＩＣ５０値より５倍高く、Ｈ
Ｉ−１７２のＩＣ５０値より３０倍高かった。驚くべきことに、ＨＩ−４４３は
、多種薬剤耐性ＨＩＶ−１株ＲＴ−ＭＤＲ（Ｖ１０６Ａ変異およびＲＴ残基７４
Ｖ、４１Ｌ、２１５Ｙ変異を持つ）に対し、ＨＴＬＶＩＩＩＢに対するよりも、
１０倍以上の効能を示した。

【００８８】テーブル３

【表４】

【００８９】ＨＩ−４４３は、ＮＮＩ耐性ＨＩＶ−１株Ａ１７（Ｙ１８１Ｃ変異を持つ）に
対し、ＨＴＬＶIIIＢに対するのと同様の効果を示し（ＩＣ５０：０．０４８μ
Ｍｖ０．０３０μＭ）、ＨＴＬＶIIIＢに対するより効果が１００倍低かっ
たが、trovirdine耐性Ａ１７変種（ＲＴのＹ１８１ＣおよびＫ１０３Ｎに変異を
持つ）も阻害することが可能であった（テーブル２）。ＨＩ−４４３は、多種薬
剤耐性ＨＩＶ−１株ＲＴ−ＭＤＲに対し、trovirdineより５倍効能が高く、nevi
rapineより１２５０倍効能が高く、delavirdineより１００倍効能が高く、ＭＫ
Ｃ−４４２より７５倍効能が高く、ＨＩ−１７２より２５０００倍効能が高く、
ＨＩ−２４０より１．２５倍効能が高く（最近、抗ＨＩＶ活性を示すフッ素置換
ＰＥＴＴが報告された。Vig et.al., 1998, Bioor.Med.Chem.6:1789）、ＡＺＴ
より５０倍効能が高かった。同様に、ＨＩ−４４３は、ＮＮＩ耐性ＨＩＶ−１株
Ａ１７に対し、trovirdineより１０倍効能が高く、nevirapineより２０８３倍効
能が高く、delavirdineより１０４２倍効能が高く、ＨＩ−１７２より２０８３
倍効能が高く、ＨＩ−２４０より４．２倍効能が高かった。最後に、ＨＩ−４４
３は、ＩＣ５０値３．２６３μＭで、ＮＮＩ耐性ＨＩＶ−１株Ａ１７変種の複製
を阻害した。ここで、trovirdine、nevirapine、delavirdineおよびＨＩ−１７
２の前記ＩＣ５０値は、全て１００μＭ以上であり、ＨＩ−２４０の前記ＩＣ５
０値は４１μＭであった（テーブル２）。これらの知見から、ＴＥＴ化合物のＨ
Ｉ−４４３は、ＨＩＶ−１のＮＮＩ耐性株および多種薬剤耐性株に対する抗ウイ
ルス活性を示す新規なＮＮＩといえる。

【００９０】この明細書で記載した全ての刊行物、特許および特許書類は、本明細書の内容
をなす。ここで述べた本発明は、実施例の組み合わせを含む改変をされてもよい
。全ての明白な組み合わせは、クレームされた本発明の精神と範囲内にある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＢＺ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 4C063 AA01 CC92 DD12 DD62 EE01 4C086 AA01 AA02 AA03 BC17 BC82 GA04 MA01 NA14 ZB33

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記の式（化１）の化合物または薬学的に許容されるその塩。【化１】前記式において、ｎは、０から３であり、Ｒは、Ｈ、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ１２）アルキル基、（Ｃ１−Ｃ１２）アルコキ
シ基、アミノ基、シアノ基、ニトロ基、水酸基であり、および、Ｒ１は、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２）アルキル基、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２）アルケニ
ル基、イソチアゾリル基、テトラゾリル基、トリアゾリル基、ピリジル基、イミ
ダゾリル基、ナフチル基、ベンゾオキシアゾリル基、ベンジイミダゾリル基、オ
キサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、チアジア
ゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、ピロリル基、インドリル基、ベンゾチエニル
基、チエニル基、ベンゾフリル基、キノニル基、イソキノニル基、若しくはピラ
ゾリル基であり、これらは、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル基、（Ｃ１−Ｃ３）アルコ
キシ基、ハロゲン基および水酸基からなる群から選択された少なくとも一つの置
換基で任意に置換されていても良い。
【請求項２】下記の式（化２）の化合物または薬学的に許容されるその塩。【化２】前記式において、ｎは、０から３Ｘは、Ｓ若しくはＯＺは、−ＮＨ−若しくはＯＲは、Ｈ、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ１２）アルキル基、（Ｃ１−Ｃ１２）アルコキ
シ基、アミノ基、シアノ基、ニトロ基、水酸基であり、および、Ｒ１は、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２）アルキル基、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２）アルケニ
ル基、イソチアゾリル基、テトラゾリル基、トリアゾリル基、ピリジル基、イミ
ダゾリル基、ナフチル基、ベンゾオキシアゾリル基、ベンジイミダゾリル基、チ
アゾリル基、オキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ピラジニル基、ピリダジニ
ル基、チアジアゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、ピロリル基、インドリル基、
ベンゾチエニル基、チエニル基、ベンゾフリル基、キノニル基、イソキノニル基
、若しくはピラゾリル基であり、これらは、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル基、（Ｃ１
−Ｃ３）アルコキシ基、ハロゲン基および水酸基からなる群から選択された少な
くとも一つの置換基で任意に置換されていても良い。
【請求項３】下記の式（化３）の化合物。【化３】前記式において、Ｒ１はピリジル基であり、置換されていてもよい。
【請求項４】ピリジル基がハロゲンによって置換されている請求項３記載の
化合物。
【請求項５】ピリジル基が、臭素若しくは塩素で置換されている請求項３記
載の化合物。
【請求項６】［2-(2-チオフェン)エチル-N-[2-(5-フ゛ロモヒ゜リシ゛ル)]-チオウレア（ＨＩ−４４３）若しくは薬学的に許容可能なその塩である請求項３記載の化合物。
【請求項７】［2-(2-チオフェン)エチル-N-[2-(5-フ゛ロモヒ゜リシ゛ル)]-チオウレア（ＨＩ−４４３）若しくは薬学的に許容可能なその塩である請求項４記載の化合物。
【請求項８】ＨＩＶ感染症の治療のための医薬の製造においての、請求項２
、３、４、６、若しくは７の化合物の使用。
【請求項９】セラピー-ネイヴ（therapy-naive）若しくは薬剤耐性のＨＩＶ
感染症の治療のための医薬の製造においての、請求項２、３、４、６、若しくは
７の化合物の使用。
【請求項１０】治療に効果的な量の請求項４記載の化合物と、薬学的に許容
可能なキャリア若しくは希釈剤とを含む薬学的組成物。
【請求項１１】ＨＩＶ逆転写酵素の阻害のための医薬品の製造における請求
項４記載の化合物の使用。
【請求項１２】セラピー-ネイヴ（therapy-naive）若しくは薬剤耐性のＨＩ
Ｖ感染症の治療のための医薬の製造においての下記の式（化４）の化合物若しく
は薬学的に許容可能なその塩の使用。【化４】前記式において、ｎは、０から３であり、Ｒは、Ｈ、ハロゲン、（Ｃ１−Ｃ１２）アルキル基、（Ｃ１−Ｃ１２）アルコキ
シ基、アミノ基、シアノ基、ニトロ基、水酸基であり、および、Ｒ１は、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２）アルキル基、シクロ（Ｃ３−Ｃ１２）アルケニ
ル基、イソチアゾリル基、テトラゾリル基、トリアゾリル基、ピリジル基、イミ
ダゾリル基、ナフチル基、ベンゾオキシアゾリル基、ベンジイミダゾリル基、オ
キサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、チアジア
ゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、ピロリル基、インドリル基、ベンゾチエニル
基、チエニル基、ベンゾフリル基、キノニル基、イソキノニル基、若しくはピラ
ゾリル基であり、これらは、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル基、（Ｃ１−Ｃ３）アルコ
キシ基、ハロゲン基および水酸基からなる群から選択された少なくとも一つの置
換基で任意に置換されていても良い。
【請求項１３】請求項１、２、３、４、５、６または７に記載の少なくとも
一つの化合物を、効果的な量で、治療対象者に投与する、ＨＩＶの治療方法。
【請求項１４】請求項１、２、３、４、５、６または７に記載の少なくとも
一つの化合物を、効果的な量で、治療対象者に投与することを含む、セラピー-
ネイヴ（therapy-naive）若しくは薬剤耐性のＨＩＶの治療方法。
【請求項１５】請求項１、２，３、４、５、６または７に記載の化合物を、
効果的な量で、ウイルスに接触させるＨＩＶの阻害方法。