JP2003313592A - 粉末洗浄剤組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 （ａ）配列番号１で示されるアミノ酸配
列と９０％以上の相同性を有するセルラーゼについて、
配列番号１の２４２位又はこれに相当する位置のグルタ
ミン残基を他のアミノ酸残基に置換した変異アルカリセ
ルラーゼを含有する粉末洗浄剤組成物；該酵素造粒物；
該酵素を含有する洗浄剤粒子。 【効果】 本発明の粉末洗浄剤組成物は、高濃度な浸漬
洗浄や、温水による洗濯にも適し、襟・袖口等の皮脂由
来の汚れ、染み汚れに対しても優れた洗浄力を発揮す
る。また、本発明組成物におけるセルラーゼは高活性で
あり、従来の洗浄剤に比べて酵素の使用量が少なくて済
むため、当該組成物における酵素特有の匂いも低減でき
る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、変異アルカリセル
ラーゼを含有する粉末洗浄剤組成物、該酵素造粒物及び
該酵素を含有する洗浄剤粒子に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】襟袖等
の皮脂汚れ及び下着の黄ばみ等の親油的な汚れ、食べこ
ぼし汚れのひどい場合は、通常の洗濯では充分に汚れが
取れなかったり、染みのまま残ったりする。このため、
従来から洗剤組成物の通常使用濃度よりも高濃度な水溶
液に衣料を浸漬することや、温水による洗濯が行われて
いる。

【０００３】特に、顕著な汚れに対して行われる、通常
使用濃度より高濃度な温水への浸漬洗浄においては、被
洗浄物から離脱した汚れの一部が再び被洗浄物に沈着し
て洗浄効率を下げるという問題がある。この再沈着を防
止するために、カルボキシメチルセルロース等のセルロ
ース系の再汚染防止剤や、ポリエチレングリコール等の
ノニオン性高分子再汚染防止剤の配合検討が行われてい
るが、十分な効果が得られていない。

【０００４】また、特開平７−２１６０８４号公報には
アミノ酸ポリマー、特開平６−３３００８４号公報には
α−スルホ脂肪酸誘導体、特表平１０−５０５８７４号
公報にはエチレン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリ
アミンペンタメチレンリン酸のようなアミノ酢酸の誘導
体やアクリル酸又はメタクリル酸のホモポリマー等が再
汚染防止剤として開示されているが、十分な効果が得ら
れていない。

【０００５】一方、プロテアーゼ、リパーゼ、セルラー
ゼ、アミラーゼ等の酵素を洗浄補助剤として洗浄剤に配
合することは古くから実施されており、中でもセルラー
ゼは、木綿単繊維の非晶質領域に作用し、単繊維内の皮
脂汚れを効果的に除去し、洗浄力を向上させることが見
いだされている。しかしながら、アルカリ性の衣料用洗
剤液中で作用できるアルカリセルラーゼであっても、従
来知られているもののほとんどは耐熱性が低く、且つ衣
料用洗剤に酵素を高配合しようとする場合には、酵素培
養の特異臭が問題となっていた。

【０００６】従って、襟・袖口等の皮脂由来の汚れ、染
み汚れに対して優れた洗浄力を持つ洗浄剤組成物、より
具体的には高濃度な浸漬洗浄や、温水による洗濯に適し
た洗浄剤組成物が望まれていた。

【０００７】本発明は、再汚染防止効果に優れ、洗浄効
率の高い洗浄剤組成物、特に顕著な汚れに対して行われ
る、通常使用濃度より高濃度な洗浄、温水洗浄、浸漬洗
浄、或いはこれらの組み合わせ洗浄に適する粉末洗浄剤
組成物を提供することを目的とする。

【０００８】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、斯かる実
情に鑑み、酵素を配合した洗浄剤組成物について検討し
た結果、特定の変異セルラーゼが高温で安定であると共
に高活性であり、これを配合した組成物が、高濃度な洗
浄や温水洗浄、浸漬洗浄等に適し、且つ特異臭が殆どな
い粉末洗浄剤組成物となり得ることを見出した。

【０００９】すなわち本発明は、（ａ）配列番号１で示
されるアミノ酸配列と９０％以上の相同性を有するセル
ラーゼについて、配列番号１の２４２位又はこれに相当
する位置のグルタミン残基を他のアミノ酸残基に置換し
た変異アルカリセルラーゼを含有する粉末洗浄剤組成物
を提供するものである。

【００１０】また本発明は、上記（ａ）の変異アルカリ
セルラーゼの造粒物であって、２０℃、１分後のセルラ
ーゼ放出率が５０％以上である酵素造粒物を提供するも
のである。

【００１１】また本発明は、上記（ａ）の変異アルカリ
セルラーゼ、（ｂ）界面活性剤、及び（ｃ）ビルダーを
含有する洗浄剤粒子を提供するものである。

【００１２】

【発明の実施の形態】（ａ）成分の変異アルカリセルラ
ーゼは、配列番号１で示されるアミノ酸配列と９０％以
上の相同性を有するセルラーゼを変異の対象となるセル
ラーゼ（以下、「親アルカリセルラーゼ」ともいう）と
し、当該配列番号１の２４２位又はこれに相当する位置
のグルタミン残基を他のアミノ酸残基に置換してなるも
のであり、これらは野生型の変異体或いは人為的に変異
を施した変異体であってもよい。

【００１３】親アルカリセルラーゼである「配列番号１
で示されるアミノ酸配列を有するアルカリセルラーゼ」
としてはＥｇｌ−２３７［バチルス エスピーＫＳＭ−
Ｓ２３７（ＦＥＲＭ ＢＰ−７８７５）由来、Hakamada
ら，Biosci. Biotechnol. Biochem., 64, 2281-2289, 2
000］が挙げられる。また、「配列番号１に示すアミノ
酸配列と９０％以上の相同性を示すアルカリセルラー
ゼ」としては、配列番号１に示すアミノ酸配列と好まし
くは９５％以上、より好ましくは９８％以上の相同性を
示すアルカリセルラーゼが挙げられ、例えば、バチルス
エスピー １１３９株由来のアルカリセルラーゼ（Ｅ
ｇｌ−１１３９）（Fukumori ら，J. Gen,Microbiol, 1
32, 2329-2335）（相同性９１．４％）、バチルス エ
スピー ＫＳＭ−６４株由来のアルカリセルラーゼ（Ｅ
ｇｌ−６４）（Sumitomo ら，Biosci. Biotechnol. Bio
chem., 56, 872-877, 1992）（相同性９１．９％）、バ
チルス エスピー ＫＳＭ−Ｎ１３１株由来のセルラー
ゼ（Ｅｇｌ−Ｎ１３１ｂ）（特願２０００−４７２３７
号）（相同性９５．０％）が挙げられる。尚、アミノ酸
配列の相同性はＧＥＮＥＴＹＸ−ＷＩＮのマキシマムマ
ッチングやサーチホモロジー等のプログラム（ソフトウ
ェア開発）を用いて計算することができる。

【００１４】そして、本発明の変異アルカリセルラーゼ
は、配列番号１で示されるアミノ酸配列を有するセルラ
ーゼを親アルカリセルラーゼとする場合には、２４２位
のグルタミン残基を他のアミノ酸に置換したものであ
り、配列番号１で示されるアミノ酸配列と９０％以上の
相同性を有するセルラーゼ（配列番号１で示されるアル
カリセルラーゼを除く）を親アルカリセルラーゼとする
場合には、配列番号１の２４２位に相当する位置のグル
タミン残基を他のアミノ酸に置換したものである。斯か
る他のアミノ酸残基としては、セリン残基が好ましい。

【００１５】また、「相当する位置のアミノ酸残基」を
特定する方法としては、例えばリップマン−パーソン法
等の公知のアルゴリズムを用いてアミノ酸配列を比較
し、各アルカリセルラーゼのアミノ酸配列中に存在する
保存アミノ酸残基に最大の相同性を与えることにより行
うことができる。セルラーゼのアミノ酸配列をこのよう
な方法で整列させることにより、アミノ酸配列中にある
挿入、欠失にかかわらず、相同アミノ酸残基の各セルラ
ーゼにおける配列中の位置を決めることが可能である
（図１）。相同位置は、三次元構造中で同位置に存在す
ると考えられ、対象のセルラーゼの特異的機能に関して
類似した効果を有することが推定できる。

【００１６】配列番号１に示すアルカリセルラーゼ（Ｅ
ｇｌ−２３７）の２４２位に相当する位置を、前述した
Ｅｇｌ−１１３９、Ｅｇｌ−６４、Ｅｇｌ−Ｎ１３１ｂ
について示せば、Ｅｇｌ−１１３９では２４２位、Ｅｇ
ｌ−６４では２４２位、Ｅｇｌ−Ｎ１３１ｂでは２２８
位である。

【００１７】また、本発明の変異アルカリセルラーゼ
は、その酵素活性及び酵素特性が変化しない限り、配列
番号１の２４２位又はこれに相当する位置のグルタミン
残基以外に、例えば配列番号１の１０位のロイシン、１
６位のイソロイシン、２２位のセリン、３３位のアスパ
ラギン、３９位のフェニルアラニン、７６位のイソロイ
シン、１０９位のメチオニン、２６３位のフェニルアラ
ニン、３０８位のスレオニン、４６２位のアスパラギ
ン、４６６位のリジン、４６８位のバリン、５５２位の
イソロイシン、５６４位のイソロイシン、６０８位のセ
リン等が他のアミノ酸残基に同時に置換していてもよ
い。

【００１８】配列番号１に示すアルカリセルラーゼにお
いて、２個所以上の変異が同時になされた場合の好まし
い具体例を以下に示す。尚、以下の表記ではアミノ酸を
３文字表記とし、「＋」は一ヶ所の置換に対し付加され
た置換を表し、「／」については表記したいずれのアミ
ノ酸を使用しても良いことを示している。例えば、２重
置換体の例としては、Ｌｅｕ１０（Ｇｌｎ／Ａｌａ／Ｐ
ｒｏ／Ｍｅｔ）＋Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ、Ｇｌｎ２４２Ｓ
ｅｒ＋Ｐｈｅ２６３（Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｐｒｏ／Ｖａ
ｌ）、Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ＋Ｓｅｒ６０８（Ｉｌｅ／Ａ
ｒｇ）等が好ましく、Ｓｅｒ２２Ｐｒｏ＋Ｇｌｎ２４２
Ｓｅｒが特に好ましい。

【００１９】３重置換体の例としては、Ｌｅｕ１０（Ｇ
ｌｎ／Ａｌａ／Ｐｒｏ／Ｍｅｔ）＋Ｓｅｒ２２Ｐｒｏ＋
Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ、Ｉｌｅ１６（Ａｓｎ／Ａｒｇ）＋
Ｓｅｒ２２Ｐｒｏ＋Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ、Ｉｌｅ７６
（Ｈｉｓ／Ｍｅｔ／Ｖａｌ／Ｔｈｒ／Ａｌａ）＋Ｇｌｎ
２４２Ｓｅｒ＋Ｌｙｓ４６６（Ｌｅｕ／Ａｌａ／Ｓｅ
ｒ）等が好ましく、Ｌｅｕ１０Ｇｌｎ＋Ｓｅｒ２２Ｐｒ
ｏ＋Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ、Ｉｌｅ１６Ａｓｎ＋Ｓｅｒ２
２Ｐｒｏ＋Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒが特に好ましい。

【００２０】４重置換体の例としては、Ｉｌｅ１６（Ａ
ｓｎ／Ａｒｇ）＋Ｍｅｔ１０９（Ｉｌｅ／Ｌｅｕ／Ｓｅ
ｒ／Ｖａｌ）＋Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ＋Ｉｌｅ５６４（Ｖ
ａｌ／Ｔｈｒ／Ｌｅｕ）等が好ましく、Ｌｅｕ１０Ｇｌ
ｎ＋Ｉｌｅ１６Ａｓｎ＋Ｉｌｅ７６Ｈｉｓ＋Ｇｌｎ２４
２Ｓｅｒが特に好ましい。

【００２１】５重置換体の例としては、Ｉｌｅ１６（Ａ
ｓｎ／Ａｒｇ）＋Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ＋Ｔｈｒ３０８
（Ａｌａ／Ｓｅｒ／Ｇｌｙ／Ｖａｌ）＋Ｉｌｅ５５２Ｍ
ｅｔ＋Ｓｅｒ６０８（Ｉｌｅ／Ａｒｇ）等が好ましく、
Ｌｅｕ１０Ｇｌｎ＋Ｉｌｅ１６Ａｓｎ＋Ｉｌｅ７６Ｈｉ
ｓ＋Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ＋Ｌｙｓ４６６Ｌｅｕが特に好
ましい。また、更にそれ以上の多重置換、例えば６〜１
７置換体でもよい。

【００２２】本発明の変異アルカリセルラーゼは、例え
ば以下の方法により得ることができる。すなわち、クロ
ーニングされた親アルカリセルラーゼ（例えば配列番号
１で示されるアミノ酸配列を有するアルカリセルラー
ゼ）をコードする遺伝子に対して置換（以下、「変異」
ともいう）を施し、得られた変異遺伝子を用いて適当な
宿主を形質転換し、当該組換え宿主を培養し、培養物か
ら採取することにより得られる。

【００２３】親アルカリセルラーゼをコードする遺伝子
のクローニングは、一般的な遺伝子組換え技術を用いれ
ばよく、例えばバチルス エスピーＫＳＭ−Ｓ２３７の
染色体より、ショットガン法やＰＣＲ法により取得でき
る。

【００２４】親アルカリセルラーゼをコードする遺伝子
の変異手段としては、一般的に行われているランダム変
異や部異特異的変異の方法がいずれも採用できる。より
具体的には、例えばのSite-Directed Mutagenesis Syst
em Mutan-Super Express Kmキット(Takara製)等を用い
て行うことができる。また、リコンビナントＰＣＲ（po
lymerase chain reaction）法（PCR protocols, Academ
ic press, New York,1990）を用いることによって、遺
伝子の任意の配列を他の遺伝子の該任意の配列に相当す
る配列と置換することが可能である。

【００２５】得られた変異遺伝子を用いた本発明変異ア
ルカリセルラーゼの生産は、宿主菌体内で複製維持が可
能であり、該酵素を安定に発現させることができ、該遺
伝子を安定に保持できるベクターに当該遺伝子を組込
み、得られた組換えベクターを用いて宿主菌を形質転換
することにより行えばよい。

【００２６】斯かるベクターとしては大腸菌を宿主とす
る場合、ｐＵＣ１８、ｐＢＲ３２２、ｐＨＹ３００ＰＬ
Ｋ（ヤクルト本社）等が挙げられ、枯草菌を宿主にする
場合、ｐＵＢ１１０、ｐＨＳＰ６４（Sumitomoら、Biosc
i. Biotechnol,Biocem., 59,2172-2175, 1995）あるい
はｐＨＹ３００ＰＬＫ等が挙げられる。

【００２７】宿主菌を形質転換するにはプロトプラスト
法、コンピテントセル法、エレクトロポレーション法等
を用いて行うことができる。宿主菌としては特に制限さ
れないがバチルス属（枯草菌）等のグラム陽性菌、大腸
菌等のグラム陰性菌、ストレプトマイセス属等の放線
菌、サッカロマイセス属等の酵母あるいはアスペルギル
ス属等のカビが挙げられる。

【００２８】得られた形質転換体は、資化しうる炭素
源、窒素源、金属塩、ビタミン等を含む培地を用いて適
当な条件下で培養すればよい。かくして得られた培養液
から、一般的な方法によって酵素の分取や精製を行い、
限外ろ過濃縮、凍結乾燥、噴霧乾燥、結晶化等により必
要な酵素形態を得ることができる。

【００２９】斯くして得られた本発明の変異アルカリセ
ルラーゼは、優れた耐熱性を有するとともに、洗浄力に
も優れ、更に高い比活性を有する。

【００３０】（ａ）成分の含有量は、粉末洗浄剤組成物
中では、０．０００１〜５質量％であるのが好ましく、
０．０００５〜２．５質量％がより好ましく、０．００
１〜２質量％が更に好ましい。また、酵素造粒物として
用いる場合の造粒物中での（ａ）成分の含有量は、０．
０１〜５０質量％であるのが好ましく、０．０５〜２５
質量％がより好ましく、０．１〜２０質量％が更に好ま
しい。

【００３１】また、２０℃の０．９質量％ＮａＣｌ水溶
液１００ｍＬのスターラー１００ｍｉｎ^-1の撹拌下、酵
素造粒物１００ｍｇを添加し、１分後に放出されたセル
ラーゼ量を完全溶解時のセルラーゼ量で除した放出率
は、洗浄性能の点で５０％以上であるのが好ましく、更
に６０％以上、更に７０％以上、特に８０％以上である
のが好ましい。

【００３２】本発明の粉末洗浄剤組成物は、上記（ａ）
成分の他に、（ｂ）界面活性剤及び（ｃ）ビルダーを含
有するのが好ましい。（ｂ）成分の界面活性剤として
は、陰イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、両
性界面活性剤及び陽イオン性界面活性剤の１種又は組み
合わせを挙げることができるが、好ましくは陰イオン性
界面活性剤、非イオン性界面活性剤である。

【００３３】陰イオン性界面活性剤としては、炭素数１
０〜１８のアルコールの硫酸エステル塩、炭素数８〜２
０のアルコールのアルコキシル化物の硫酸エステル塩、
アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル硫酸エステル
塩、パラフィンスルホン酸塩、α−オレフィンスルホン
酸塩、α−スルホ脂肪酸塩、α−スルホ脂肪酸アルキル
エステル塩又は脂肪酸塩が好ましい。本発明では特に、
アルキル鎖の炭素数が１０〜１４、より好ましくは１２
〜１４の直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩が好まし
い。これらの塩の対イオンとしては、アルカリ金属塩や
アミン類が好ましく、特にナトリウム及び／又はカリウ
ム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミンが好ま
しい。

【００３４】非イオン性界面活性剤としては、ポリオキ
シアルキレンアルキル（炭素数８〜２０）エーテル、ア
ルキルポリグリコシド、ポリオキシアルキレンアルキル
（炭素数８〜２０）フェニルエーテル、ポリオキシアル
キレンソルビタン脂肪酸（炭素数８〜２２）エステル、
ポリオキシアルキレングリコール脂肪酸（炭素数８〜２
２）エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレ
ンブロックポリマーが好ましい。特に、非イオン性界面
活性剤としては、炭素数１０〜１８のアルコールにエチ
レンオキシドやプロピレンオキシド等のアルキレンオキ
シドを４〜２０モル付加した〔ＨＬＢ値（グリフィン法
で算出）が１０．５〜１５．０、好ましくは１１．０〜
１４．５であるような〕ポリオキシアルキレンアルキル
エーテルが好ましい。

【００３５】（ｂ）成分の界面活性剤の合計量は、洗浄
力及び溶解性の点から、粉末洗浄剤組成物中１０〜６０
質量％であるのが好ましく、１５〜５０質量％がより好
ましく、２０〜４５質量％が更に好ましい。陰イオン性
界面活性剤は、粉末洗浄剤組成物中１〜６０質量％であ
るのが好ましく、１〜５０質量％がより好ましく、３〜
４０質量％が特に好ましい。非イオン性界面活性剤は、
粉末洗浄剤組成物中０．５〜４５質量％であるのが好ま
しく、１〜３５質量％がより好ましく、３〜２５質量％
が特に好ましい。陰イオン性界面活性剤と非イオン性界
面活性剤は、単独で用いることもできるが、好ましくは
混合して用いるのが良い。また、両性界面活性剤や陽イ
オン性界面活性剤を目的に合わせ併用することもでき
る。

【００３６】（ｃ）成分のビルダーとしては、そのもの
自身では洗浄力がないか、又はあってもそれ程著しくな
いが、粉末洗浄剤組成物に配合されると著しく洗剤性能
を向上させ、特に洗浄剤の主要成分である界面活性剤の
洗浄能力を向上させるものが挙げられ、作用として、多
価金属陽イオンの捕捉作用、汚れ分散作用及びアルカリ
緩衝作用の少なくとも１つの作用を有するものである。
斯かるビルダーとしては、例えば水溶性無機化合物、水
不溶性無機化合物、有機化合物等が挙げられる。

【００３７】水溶性無機化合物としては、リン酸塩（ト
リポリリン酸塩、ピロリン酸塩、メタリン酸塩、リン酸
三ナトリウム等）、ケイ酸塩、炭酸塩、硫酸塩等が挙げ
られる。中でも３つの作用を全て有する点でリン酸塩が
好ましい。

【００３８】水不溶性無機化合物としては、アルミノケ
イ酸塩（Ａ型ゼオライト、Ｐ型ゼオライト、Ｘ型ゼオラ
イト、非晶質アルミノケイ酸塩等）、結晶性ケイ酸塩等
が挙げられる。中でも粒子径３μｍ以下（より好ましく
は１μｍ以下）のＡ型ゼオライトが好ましい。

【００３９】有機化合物としては、カルボン酸塩（アミ
ノカルボン酸塩、ヒドロキシアミノカルボン酸塩、ヒド
ロキシカルボン酸塩、シクロカルボン酸塩、マレイン酸
誘導体、シュウ酸塩等）、有機カルボン酸（塩）ポリマ
ー（アクリル酸重合体及び共重合体、多価カルボン酸重
合体及び共重合体、グリオキシル酸重合体、多糖類及び
これらの塩等）等が挙げられる。中でも有機カルボン酸
（塩）ポリマーが好ましい。

【００４０】前記ビルダーの塩において、対イオンとし
ては、アルカリ金属塩、アミン類が好ましく、特にナト
リウム及び／又はカリウム、モノエタノールアミン、ジ
エタノールアミンが好ましい。

【００４１】これらのビルダーは、単独で又は２種以上
を併用することができるが、水溶性無機化合物を含有す
るのが好ましく、水溶性無機化合物及び有機化合物を併
用するのがより好ましく、水溶性無機化合物、有機化合
物及び水不溶性無機化合物を併用するのが更に好まし
い。

【００４２】（ｃ）成分のビルダーの合計量は、洗浄性
能の点から、粉末洗浄剤組成物中２０〜８０質量％であ
るのが好ましく、３０〜７０質量％がより好ましく、３
５〜６０質量％が更に好ましい。また、水溶性無機化合
物ビルダーは、粉末洗浄剤組成物中１０〜５０質量％で
あるのが好ましく、１５〜４５質量％がより好ましく、
２０〜４０質量％が更に好ましい。水不溶性無機化合物
ビルダーは、粉末洗浄剤組成物中５〜５０質量％である
のが好ましく、１０〜４５質量％がより好ましく、１５
〜４０質量％が更に好ましい。有機化合物ビルダーは、
粉末洗浄剤組成物中０．１〜２０質量％であるが好まし
く、０．３〜１５質量％がより好ましく、０．５〜１０
質量％が更に好ましい。

【００４３】本発明の粉末洗浄剤組成物には、上記
（ａ）〜（ｃ）成分の他に、漂白剤（過炭酸塩、過ホウ
酸塩、漂白活性化剤等）、再汚染防止剤（カルボキシメ
チルセルロース等）、柔軟化剤（ジアルキル型第四級ア
ンモニウム塩、粘土鉱物等）、還元剤（亜硫酸塩等）、
蛍光増白剤（ビフェニル型、アミノスチルベン型等）、
泡コントロール剤（シリコーン等）、香料、その他の酵
素（プロテアーゼ、ペクチナーゼ、アミラーゼ、リパー
ゼ等）等の添加剤を含有させることができる。これら
は、別の粒子として粉末洗浄剤組成物に配合しても良
い。

【００４４】上記成分を含有する本発明の粉末洗浄剤組
成物は、（ａ）成分からなる酵素造粒物（以下、「粒子
（Ｉ）」ともいう）と洗剤ベースとなる（ｂ）及び
（ｃ）成分を含有する粒子（以下、「粒子（ＩＩ）」と
もいう）を含有する組成物、又は一つの粒子中に（ａ）
〜（ｃ）成分を含有する洗浄剤粒子であるのが好まし
い。

【００４５】（ａ）成分からなる酵素造粒物は、洗浄効
率の点から、２０℃、１分後のセルラーゼの放出率が５
０％以上、好ましくは６０％以上、更に好ましくは７０
％以上、特に好ましくは８０％以上の粒子（粒子
（Ｉ））であるのが好ましい。ここで、セルラーゼ放出
率とは、１００ｍＬ溶ビーカー（内径５０ｍｍ）に２０
℃の０．９質量％ＮａＣｌ水溶液１００ｍＬを入れ、攪
拌子（長さ３５ｍｍ、直径８ｍｍ）の回転数１００ｍｉ
ｎ^-1にて攪拌下、粒子１００ｍｇを添加し、１分後に放
出されたセルラーゼ活性量を完全溶解時のセルラーゼ活
性量で除し、得られた値に１００をかけたものをいう。
尚、セルラーゼ活性量は公知の方法（特開平１０−３１
３８５９号公報）により測定すればよい。

【００４６】当該酵素造粒物は、非分級性の点から、Ｊ
ＩＳ Ｋ ３３６２：１９９８により規定された方法で
測定する見掛け密度が、５００〜１６００ｇ／Ｌである
のが好ましく、より好ましくは６００〜１５００ｇ／
Ｌ、特に好ましくは７００〜１４００ｇ／Ｌである。ま
た、高速溶解性、低発塵性、非分級性の点から、ＪＩＳ
Ｚ ８８０１の標準篩を用いて５分間振動させた後、
篩目のサイズによる重量分率から求める平均粒径が、１
５０〜１２００μｍであるのが好ましく、より好ましく
は１５０〜１０００μｍ、特に好ましくは２００〜９０
０μｍである。加えて、発塵性、溶解性の点から、１２
５〜７１０μｍの粒子が酵素造粒物全体の８０質量％以
上であるのが好ましく、９０質量％以上がより好まし
い。

【００４７】酵素造粒物中のセルラーゼの含有量は、造
粒性や溶解性及び洗浄性能の点から、０．０２〜２０質
量％であるのが好ましく、０．０５〜１５質量％がより
好ましく、０．１〜１０質量％が更に好ましい。

【００４８】本発明の酵素造粒物は、以下に示す（Ｉ−
１）及び／又は（Ｉ−２）の造粒物であるのが好まし
く、高速溶解性及び低発塵性の点で（Ｉ−２）の造粒物
であるのがより好ましい。

【００４９】（Ｉ−１）の造粒物は、セルラーゼを平均
粒径２００〜１２００μｍの水溶性粒子からなる核物質
及び融点３５〜７０℃の水溶性有機バインダーと共に造
粒し、得られた造粒物の平均粒径が核物質の平均粒径の
１〜２倍である造粒物である。

【００５０】核物質としては、塩化ナトリウム、塩化カ
リウム、芒硝、炭酸ナトリウム、砂糖等の水溶性粒子が
挙げられ、中でも塩化ナトリウムが好ましい。核物質の
平均粒径は、溶解性、及び目的とする最終の酵素粒子を
洗剤粒子と混合した時の外観の美麗さ、非分級性の観点
から、２００〜１２００μｍが好ましく、２５０〜１０
００μｍがより好ましい。なお、平均粒径は、ＪＩＳ
Ｚ ８８０１の標準篩を用いて５分間振動させた後、篩
目のサイズによる重量分率から求めることができる。核
物質の含有量は、造粒性や溶解性の観点から、（Ｉ−
１）の造粒物中３０〜８０質量％であるのが好ましく、
４０〜７０質量％がより好ましい。

【００５１】水溶性有機バインダーとしては、ポリエチ
レングリコール、非イオン界面活性剤（ポリオキシエチ
レン−ポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエ
チレン・アルキルエーテル等）等が挙げられ、中でもポ
リエチレングリコールが好ましい。生産性の点で、水溶
性有機バインダーの量は、核物質１００重量部に対して
５〜６０重量部であるのが好ましい。

【００５２】水溶性有機バインダーの融点は、３５〜７
０℃であることが好ましく、４０〜７０℃がより好まし
く、４５〜６８℃が更に好ましい。該融点は、ＪＩＳ
Ｋ００６４：１９９２に規定された目視による方法によ
り測定することができる。セルラーゼを核物質及び水溶
性有機バインダーと共に造粒して（Ｉ−１）の造粒物を
製造する方法は、公知の方法を用いればよく、例えば特
開昭６２−２５７９９０号公報に記載の造粒法が好まし
い。

【００５３】以上のようにして得られた造粒物（Ｉ−
１）の平均粒径は、溶解性及び非分級性の観点から、核
物質の平均粒径の１〜２倍が好ましく、１．０５〜１．
５倍がより好ましい。

【００５４】（Ｉ−２）の造粒物は、セルラーゼ、水不
溶性物質４５質量％以上、及び水溶性バインダー５〜４
０質量％を含有し、かつ内部よりも表面近傍に水溶性バ
インダーが多く存在する構造を有する造粒物である。

【００５５】水不溶性物質としては、セルロースパウダ
ー等の有機物質、ゼオライト、タルク、クレー、アルミ
ナ、カオリン、チタニア、炭酸カルシウム、硫酸バリウ
ム等の無機物質が挙げられ、熱に対する安定性の点で、
無機物質が好ましく、中でも分散性の点でゼオライトや
カオリンが特に好ましい。水不溶性物質は、均一性の点
で、一次粒子の平均粒径が２０μｍ以下であるのが好ま
しく、１０μｍ以下がより好ましく、０．１〜５μｍが
特に好ましい。（Ｉ−２）の造粒物中の水不溶性物質の
含有量は、酵素の速やかな溶出を促す点で、４５質量％
以上であるのが好ましく、５０質量％以上がより好まし
い。一方、溶け残り防止の点からは、９０質量％以下で
あるのが好ましく、８０質量％以下がより好ましく、７
０質量％以下が特に好ましい。

【００５６】水溶性バインダーとしては、ポリエチレン
グリコール及びその誘導体、ポリビニルアルコール及び
その誘導体、水溶性セルロース誘導体、カルボン酸系ポ
リマー、澱粉、糖類等が挙げられる。誘導体としては、
エーテル化合物等が挙げられる。中でも、生産性、高速
溶解性の点で、カルボン酸系ポリマー及び糖類が好まし
く、アクリル酸−マレイン酸コポリマーの塩、ポリアク
リル酸塩がより好ましい。塩としては、ナトリウム塩、
カリウム塩、アンモニウム塩が好ましい。該水溶性バイ
ンダーを配合することは、粒子強度の向上及び粒子の速
やかな崩壊の点で好ましい。（Ｉ−２）の造粒物中の水
溶性バインダーの含有量は、低発塵性の点で５質量％以
上であるのが好ましく、１０質量％以上がより好まし
く、１５質量％以上が更に好ましい。また、高速溶解性
の点からは、４０質量％以下であるのが好ましく、３５
質量％以下がより好ましく、３０質量％以下が更に好ま
しい。

【００５７】（Ｉ−２）の造粒物は、粒子内部よりも表
面近傍に水溶性バインダーが多く存在する構造を有する
ものであり、例えば、前記セルラーゼ、水不溶性物質、
及び水溶性バインダーを混合して、好ましくは水分量３
０〜６０質量％のスラリーにした後、該スラリーを噴霧
乾燥することで得られる。噴霧乾燥時の熱風の温度は、
酵素の安定性及び生産性の点で１４０〜２１０℃が好ま
しい。その他の噴霧乾燥の条件については、特に限定は
ない。

【００５８】なお、セルラーゼ造粒物における水溶性バ
インダーの偏在性の確認は、例えば、フーリエ変換赤外
分光法（ＦＴ−ＩＲ）や光音響分光法（ＰＡＳ）を併用
する方法（ＦＴ−ＩＲ／ＰＡＳ）を用いて行うことがで
きる。これらは、Applied Spectroscopy vol.47、1311-1
316(1993)に記載のとおり、粒子の表面から深さ方向に
おける物質の分布状態を解析する方法であり、それによ
り水溶性成分の偏在性を確認することができる。

【００５９】酵素造粒物は、洗浄性能及び経済性の点で
洗浄剤組成物中０．０１〜１０質量％であるのが好まし
く、０．０５〜８質量％がより好ましく、０．１〜５質
量％が更に好ましい。

【００６０】（ｂ）及び（ｃ）成分から構成される粒子
（ＩＩ）は、洗浄効率の点から、（ｂ）成分及び（ｃ）
成分を含有し、２０℃、１分後の（ｂ）成分の放出率が
６０％以上、好ましくは７０％以上、より好ましくは８
０％以上の粒子であるのが好ましい。ここで、界面活性
剤放出率は、ＪＩＳ Ｋ ３３６２：１９９８記載の界
面活性剤定量法に基づいて測定することができる。

【００６１】粒子（ＩＩ）は、流動性及び非ケーキング
性の点で、表面被覆剤により表面改質を行うことが好ま
しく、当該表面被覆剤は粒子（ＩＩ）中、１〜３０質量
％であるのが好ましく、２〜１５質量％がより好まし
く、５〜１０質量％が更に好ましい。表面被覆剤として
は、例えば、アルミノケイ酸塩、ケイ酸カルシウム、二
酸化ケイ素、ベントナイト、タルク、クレイ、非晶質シ
リカ誘導体、結晶性シリケート化合物等のシリケート化
合物、金属石鹸、粉末の界面活性剤等の微粉体、カルボ
キシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリ
アクリル酸ソーダ、アクリル酸とマレイン酸のコポリマ
ー又はその塩等のポリカルボン酸塩等の水溶性ポリマ
ー；脂肪酸が挙げられる。中でも水不溶性無機物が好ま
しく、特に結晶性アルミノケイ酸塩、非晶質アルミノケ
イ酸塩、結晶性シリケート化合物が好ましい。

【００６２】粒子（ＩＩ）は、（ｂ）成分、（ｃ）成分
の少なくとも一部を混合した後乾燥する工程を経て得る
粒子（ＩＩ−１）の製法、（ｂ）成分として陰イオン界
面活性剤を含有し、該陰イオン界面活性剤の液体酸前駆
体と、該陰イオン界面活性剤を中和するのに必要な量以
上の粒子状固体水溶性アルカリ無機物質を混合して中和
する工程を経て得る粒子（ＩＩ−２）の製法等によって
得ることができる。中でも粒子（ＩＩ−１）の製法が洗
浄性能、溶解性の点で好ましい。

【００６３】すなわち粒子（ＩＩ−１）は、（ｂ）成
分、（ｃ）成分の少なくとも一部をスラリーとして混合
し、噴霧乾燥によって粒子を得ることができる。場合に
よっては、（ｂ）成分、（ｃ）成分の残部を後添加して
も良いし、より高い見掛け密度を求めるのであれば、
（ｂ）成分、（ｃ）成分の残部を後添加して造粒するこ
とができる。溶解性の点で、噴霧乾燥粒子構造を潰さず
に粒子内部に気孔を維持することが好ましい。この点で
（ｂ）成分を含有する液状物を、噴霧乾燥粒子内部に気
孔を維持したまま吸収担持させる方法がより好ましい。

【００６４】粒子（ＩＩ−２）は、（ｂ）成分として陰
イオン界面活性剤を含有し、該陰イオン界面活性剤を中
和するのに必要な量以上の粒子状固体水溶性アルカリ無
機物質に、該陰イオン界面活性剤の液体酸前駆体を添加
することにより、該液体酸前駆体を中和し、これを造粒
して粒子を得ることができる。

【００６５】粒子（ＩＩ）の見掛け密度は、好ましくは
５００〜１２００ｇ／Ｌ、より好ましくは６００〜１０
００ｇ／Ｌ、特に好ましくは６５０〜８５０ｇ／Ｌであ
る。また、経済効率の観点から、見掛け密度は５００ｇ
／Ｌ以上が好ましく、溶解性の観点から１２００ｇ／Ｌ
以下が好ましい。

【００６６】粒子（ＩＩ）の平均粒径は、好ましくは１
５０〜８００μｍ、より好ましくは２５０〜７５０μ
ｍ、特に好ましくは３００〜７００μｍである。また、
ペースト化防止の観点からは１５０μｍ以上が好まし
く、溶解性の観点からは８００μｍ以下が好ましい。

【００６７】粒子（ＩＩ）の水分値としては、品質の観
点から１０質量％以下であるのが好ましく、５質量％以
下がより好ましい。

【００６８】（ａ）〜（ｃ）成分を含有する洗浄剤粒子
は、以下のように製造することができる。すなわち、製
法Ａ：（ａ）成分及び、（ｂ）成分、（ｃ）成分の少な
くとも一部を混合した後乾燥する工程を経て得る方法、
製法Ｂ：（ｂ）成分、（ｃ）成分の少なくとも一部を混
合した後に乾燥し、これに（ａ）成分を含有する液体を
添加し（ａ）成分を担持させる工程を経て得る方法、製
法Ｃ：（ｂ）成分として陰イオン界面活性剤を含有し、
該陰イオン界面活性剤の液体酸前駆体と、該陰イオン界
面活性剤を中和するのに必要な量以上の粒子状固体水溶
性アルカリ無機物質を混合して中和する工程、及びこれ
に（ａ）成分を含有する液体を添加し（ａ）成分を担持
させる工程を経て得る方法、等によって得ることができ
る。中でも製法Ｂが洗浄性能、溶解性及び酵素の安定性
の点で好ましい。

【００６９】製法Ａによれば、（ａ）成分及び、（ｂ）
成分、（ｃ）成分の少なくとも一部をスラリーとして混
合し、噴霧乾燥によって洗浄剤粒子を得ることができ
る。場合によっては、（ｂ）成分、（ｃ）成分の残部を
後添加してもよいし、より高い見掛け密度を求めるので
あれば、（ｂ）成分、（ｃ）成分の残部を後添加して造
粒することができる。溶解性の点で、噴霧乾燥粒子構造
を潰さずに粒子内部に気孔を維持することが好ましい。
この点で（ｂ）成分を含有する液状物を、噴霧乾燥粒子
内部に気孔を維持したまま吸収担持させる方法がより好
ましい。

【００７０】製法Ｂによれば、（ｂ）成分、（ｃ）成分
の少なくとも一部をスラリーとして混合した後に噴霧乾
燥し、これに（ａ）成分を含有する液体を添加し（ａ）
成分を担持させて洗浄剤粒子を得ることができる。場合
によっては、（ｂ）成分、（ｃ）成分の残部を後添加し
ても良いし、より高い見掛け密度を求めるのであれば、
（ｂ）成分、（ｃ）成分の残部を後添加して造粒するこ
とができる。溶解性の点で、噴霧乾燥粒子構造を潰さず
に粒子内部に気孔を維持することが好ましい。この点で
（ｂ）成分を含有する液状物を、噴霧乾燥粒子内部に気
孔を維持したまま吸収担持させる方法がより好ましい。

【００７１】製法Ｃによれば、（ｂ）成分として陰イオ
ン界面活性剤を含有し、該陰イオン界面活性剤を中和す
るのに必要な量以上の粒子状固体水溶性アルカリ無機物
質に、該陰イオン界面活性剤の液体酸前駆体を添加する
ことにより、該液体酸前駆体を中和し、これを造粒する
過程で（ａ）成分を含有する液体を添加し（ａ）成分を
担持させる方法がより好ましい。

【００７２】また、当該洗浄剤粒子は、流動性及び非ケ
ーキング性の点で、表面被覆剤により表面改質を行うこ
とが好ましい。表面被覆剤は洗浄剤粒子中１〜３０質量
％であるのが好ましく、２〜１５質量％がより好まし
く、５〜１０質量％が更に好ましい。表面被覆剤として
は、上記粒子（ＩＩ）について挙げたものと同様のもの
が使用できる。

【００７３】斯くして得られる本発明の粉末洗浄剤組成
物は、溶解性の点から、ＪＩＳ Ｚ８８０１の標準篩を
用いて５分間振動させた後、篩目のサイズによる質量分
率から求める洗浄剤組成物の平均粒径は１５０〜１００
０μｍであるのが好ましく、より好ましくは１５０〜８
００μｍ、更に好ましくは１８０〜６００μｍである。

【００７４】また、ＪＩＳ Ｋ ３３６２：１９９８に
より規定された方法で測定する見掛け密度は、溶解性の
点から、１６００ｇ／Ｌ以下であるのが好ましく、１３
００ｇ／Ｌ以下がより好ましく、１０００ｇ／Ｌ以下が
更に好ましい。また、利便性や廃棄物（例えば箱等）低
減の点からは、見掛け密度は３００ｇ／Ｌ以上であるの
が好ましく、６００ｇ／Ｌ以上がより好ましく、７００
ｇ／Ｌ以上が更に好ましい。

【００７５】本発明の洗浄剤組成物は、利便性の点か
ら、圧縮して錠剤形態にしてもよいし、１回の使用量を
水溶性或いは水不溶性の容器に収納してもよい。

【００７６】

【実施例】製造例１ （１）アルカリセルラーゼ遺伝子の変異体作製 鋳型ＤＮＡとして大腸菌−枯草菌のシャトルベクターｐ
ＨＹ３００ＰＬＫ中に組換えられたＢａｃｉｌｌｕｓ
ｓｐ．ＫＳＭ−Ｓ２３７株由来のアルカリセルラーゼ遺
伝子を用いた。

【００７７】部位特異的変位Ｌｅｕ１０Ｇｌｎ、Ｉｌｅ
１６Ａｓｎ、Ｓｅｒ２２Ｐｒｏ、Ｉｌｅ７６Ｈｉｓ、Ｇ
ｌｎ２４２Ｓｅｒ、Ｌｙｓ４６６Ｌｅｕを導入するため
の変異導入用プライマーＬｅｕ１０Ｇｌｎ（配列番号
２）、Ｉｌｅ１６Ａｓｎ（配列番号３）、Ｓｅｒ２２Ｐ
ｒｏ（配列番号４）、Ｉｌｅ７６Ｈｉｓ（配列番号
５）、Ｇｌｎ２４２Ｓｅｒ（配列番号６）、Ｌｙｓ４６
６Ｌｅｕ（配列番号７）を用い、アルカリセルラーゼ遺
伝子内に存在する適当な対向プライマーを構築して鋳型
ＤＮＡと共に変異導入を行った。

【００７８】即ち、鋳型ＤＮＡプラスミド０．５μＬ
(１０ｎｇ)、変異導入用プライマー２０μＬ（１μ
Ｍ）、対向プライマー２０μＬ（１μＭ）、１０倍濃度
のＰＣＲ用緩衝液１０μＬ、１０ｍＭデオキシヌクレオ
チド３リン酸(ｄＮＴＰ)混液８μＬ、Ｐｙｒｏｂｅｓｔ
ＤＮＡポリメラーゼ０．５μＬ(２．５ｕｎｉｔｓ、タ
カラ製)及び脱イオン水３９．５μＬを混合した後、ｇ
ｅｎｅ ａｍｐ ＰＣＲ ｓｙｓｔｅｍ９７００（アマシ
ャムファルマシア製）でＰＣＲを行った。反応条件は、
９４℃２分間の熱変性後、９４℃１分間、５６℃１分
間、７２℃３０秒間（３０サイクル）及び７２℃１分間
で行った。得られたＰＣＲ産物をＧＦＸ ＰＣＲＤＮＡ
ａｎｄ ｇｅｌ ｂａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏ
ｎ ｋｉｔ（アマシャムファルマシア製）で精製後（４
３．５μＬ）、５．５μＬの１０倍濃度のリン酸化用緩
衝液及びポリヌクレオチドキナーゼ１μＬ(１０ｕｎｉ
ｔｓ)を加え、３７℃で１時間リン酸化反応を行ない精
製（５０μＬ）した。リン酸化されたＰＣＲ産物２５μ
Ｌに、鋳型プラスミドを２μＬ(２０ｎｇ)、１０倍濃度
のＰＣＲ用緩衝液１０μＬ、１０ ｍＭ ｄＮＴＰ混液８
μＬ、ＰｙｒｏｂｅｓｔＤＮＡポリメラー１μＬ (５ｕ
ｎｉｔｓ)及び脱イオン水５４μＬを混合した後、ＰＣ
Ｒを行った。反応条件は、９４℃、２分間の熱変性後、
９４℃１分間、６０℃１分間、７２℃６分間（３０サイ
クル）及び７２℃１２分間で行った。得られたＰＣＲ産
物を精製後（４３．５μＬ）、５．５μＬの１０倍濃度
のリン酸化用緩衝液及びポリヌクレオチドキナーゼ１μ
Ｌ (１０ｕｎｉｔｓ)を加え、３７℃で１時間リン酸化
反応を行った後、エタノール沈澱（１０μＬ）した。回
収された１０μＬのＤＮＡ溶液をｌｉｇａｔｉｏｎ ｋ
ｉｔ ｖｅｒ．２（タカラ製）を用いて１６℃、１８時
間ライゲーション反応を行い、自己閉環した後、再度エ
タノール沈殿して、ＤＮＡ混液を回収した。

【００７９】（２）形質転換法 （１）で得られたＤＮＡ混液５μＬを用いてChangらの
方法（Chang and Cohen,Mol.Gen.Gent.,168,111-115,19
79）によりＢａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓＩＳＷ
１２１４株に導入して形質転換体を取得した。即ち、宿
主菌Ｂ． ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＩＳＷ１２１４株を５０
ｍＬのＬＢ培地中で３７℃で、約２時間振とう培養後
(６００ｎｍにおける吸光度が０．４)、室温で遠心分離
(７０００ｍｉｎ^-1、１５分間)により菌体を集め、５
ｍＬのＳＭＭＰ[０．５Ｍ シュークロース、２０ｍＭ
マレイン酸二ナトリウム、２０ｍＭ 塩化マグネシウム
６水塩、３５％（ｗ／ｖ）ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｍｅ
ｄｉｕｍ３（ディフコ製）］に懸濁後、ＳＭＭＰ溶液に
溶解した５００μＬのリゾチーム溶液 (３０ｍｇ／ｍ
Ｌ)を加え、３７℃で１時間保温した。保温終了後、室
温で遠心分離 (２８００ｍｉｎ^-1、１５分間)によりプ
ロトプラストを集め、５ｍＬのＳＭＭＰに懸濁しプロト
プラスト溶液を調製した。０．５ｍＬのプロトプラスト
溶液に１０μＬのプラスミド溶液と１．５ｍＬの４０％
（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ８０００、
シグマ製）を加え、緩やかに攪拌後、室温で２分間放置
した後、直ちに５ｍＬのＳＭＭＰ溶液を混和し、室温で
遠心分離 (２８００ｍｉｎ^-1、１５分間)によりプロト
プラストを集め、１ｍＬのＳＭＭＰ溶液に再懸濁した。
プロトプラスト懸濁液を３７℃で９０分間振盪 (１２０
ｍｉｎ^-1)した後、テトラサイクリン（１５μｇ／ｍ
Ｌ、シグマ製）を含むＤＭ３再生寒天培地[０．８％
（ｗ／ｖ） 寒天（和光純薬製）、０．５％コハク酸２
ナトリウム６水塩、０．５％カザミノ酸テクニカル（デ
ィフコ製）、０．５％酵母エキス、０．３５％リン酸１
カリウム、０．１５５％リン酸２カリウム、０．５％グ
ルコース、０．４％塩化マグネシウム６水塩、０．０１
％牛血清アルブミン（シグマ製）、０．５％カルボキメ
チルセルロース、０．００５％トリパンブルー（メルク
製）及びアミノ酸混液(ロイシン、メチオニン１０μg／
ｍＬ)]上に塗布し、３０℃で７２時間培養して形質転換
体を得た。ＤＭ３再生寒天平板培地上で、ハローを形成
した形質転換体をテトラサイクリン（１５μｇ／ｍＬ）
を含んだポリペプトン培地で、３０℃で１５時間振とう
培養を行い、集菌後、ｍｉｃｒｏ ｐｒｅｐ ｐｌａｓ
ｍｉｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｋｉｔ（アマシャ
ムファルマシア製）によりプラスミドを回収、精製し
た。

【００８０】（３）塩基配列の決定 （２）で取得したプラスミド中に挿入されたセルラーゼ
遺伝子の塩基配列の確認は、３７７ＤＮＡシークエンサ
ー（アプライド バイオシステム製）を用いて行なっ
た。

【００８１】製造例２ 酵素造粒物の製造 （１）酵素造粒物−１の製造 配列番号１に示すアルカリセルラーゼの２４２位のグル
タミンをセリンに置換した変異アルカリセルラーゼ（４
００００Ｕ／ｇ）２質量％、核物質（平均粒径２５０μ
ｍの塩化ナトリウム）４５質量％、バインダー（ポリエ
チレングリコール６０００）１５質量％、酸化チタン５
質量％、塩化カルシウム１質量％、芒硝３２質量％を造
粒し、平均粒径３５０μｍの造粒物を得た。１２５〜７
１０μｍの粒子は９０質量％以上であり、見掛け密度は
８３０ｇ／Ｌであった。

【００８２】（２）酵素造粒物−２の製造 配列番号１に示すアルカリセルラーゼの２４２位のグル
タミンをセリンに置換した変異アルカリセルラーゼ（４
００００Ｕ／ｇ）２質量部、水不溶性物質（ゼオライ
ト）６５質量部、水溶性バインダー（ポリアクリル酸／
マルチット＝１／１）２５質量部、芒硝４質量部である
水分量５５質量％のスラリーを調整した。次にこれを噴
霧乾燥により水分量４質量％の平均粒径２５０μｍの造
粒物を得た。１２５〜７１０μｍの粒子は９０質量％以
上であり、見掛け密度は８１０ｇ／Ｌであった。また、
表面近傍に水溶性バインダーが多く存在していた。

【００８３】（３）酵素造粒物−３の製造 酵素造粒物−１に用いたセルラーゼを、配列番号１に示
すアルカリセルラーゼの２２位のセリンをプロリンに、
２４２位のグルタミンをセリンに置換した変異アルカリ
セルラーゼに置き換えた以外は同様にして造粒物を得
た。１２５〜７１０μｍの粒子は９０質量％以上であ
り、見掛け密度は８３０ｇ／Ｌであった。

【００８４】（４）酵素造粒物−４の製造 酵素造粒物−２に用いたセルラーゼを、配列番号１に示
すアルカリセルラーゼの２２位のセリンをプロリンに、
２４２位のグルタミンをセリンに置換した変異アルカリ
セルラーゼに置き換えた以外は同様にして造粒物を得
た。１２５〜７１０μｍの粒子は９０質量％以上であ
り、見掛け密度は８１０ｇ／Ｌであった。また、表面近
傍に水溶性バインダーが多く存在していた。

【００８５】（５）酵素造粒物−５の製造 酵素造粒物−１に用いたセルラーゼを、配列番号１に示
すアルカリセルラーゼの１０位のロイシンをグルタミン
に、２２位のセリンをプロリンに、２４２位のグルタミ
ンをセリンに置換した変異アルカリセルラーゼに置き換
えた以外は同様にして酵素造粒物を得た。１２５〜７１
０μｍの粒子は９０質量％以上であり、見掛け密度は８
２０ｇ／Ｌであった。

【００８６】（６）酵素造粒物−６の製造 酵素造粒物−２に用いたセルラーゼを、配列番号１に示
すアルカリセルラーゼの１０位のロイシンをグルタミン
に、２２位のセリンをプロリンに、２４２位のグルタミ
ンをセリンに置換した変異アルカリセルラーゼに置き換
えた以外は同様にして酵素造粒物を得た。１２５〜７１
０μｍの粒子は９０質量％以上であり、見掛け密度は８
００ｇ／Ｌであった。また、表面近傍に水溶性バインダ
ーが多く存在していた。

【００８７】（７）酵素造粒物−７の製造 酵素造粒物−１に用いたセルラーゼを、配列番号１に示
すアルカリセルラーゼの１０位のロイシンをグルタミン
に、１６位のイソロイシンをアスパラギンに、７６位の
イソロイシンをヒスチジンに、２４２位のグルタミンを
セリンに、４６６位のリシンをロイシンに置換した変異
アルカリセルラーゼに置き換えた以外は同様にして酵素
造粒物を得た。１２５〜７１０μｍの粒子は９０質量％
以上であり、見掛け密度は８２０ｇ／Ｌであった。

【００８８】（８）酵素造粒物−８の製造 酵素造粒物−２に用いたセルラーゼを、配列番号１に示
すアルカリセルラーゼの１０位のロイシンをグルタミン
に、１６位のイソロイシンをアスパラギンに、７６位の
イソロイシンをヒスチジンに、２４２位のグルタミンを
セリンに、４６６位のリシンをロイシンに置換した変異
アルカリセルラーゼに置き換えた以外は同様にして酵素
造粒物を得た。１２５〜７１０μｍの粒子は９０質量％
以上であり、見掛け密度は８２０ｇ／Ｌであった。ま
た、表面近傍に水溶性バインダーが多く存在してした。

【００８９】製造例３ 洗剤ベースの製造 （１）洗剤ベース−１の製造 全洗剤ベース中の質量基準で、直鎖アルキル（炭素数１
０〜１３）ベンゼンスルホン酸ナトリウム２０質量％、
トリポリリン酸ナトリウム１７質量％、炭酸ナトリウム
１０質量％、硫酸ナトリウム２２質量％、１号ケイ酸ナ
トリウム１４質量％、ポリエチレングリコール（ＭＷ＝
１３０００）０．３質量％、アクリル酸−マレイン酸コ
ポリマー（ナトリウム塩（７０モル％中和）、モノマー
比はアクリル酸／マレイン酸＝３／７（モル比）、平均
分子量７００００）０．３質量％、カルボキシメチルセ
ルロース０．２質量％、チノパールＣＢＳ−Ｘ（チバス
ペシャリティケミカルス社製）０．０５質量％、チノパ
ールＡＭＳ−ＧＸ（チバスペシャリティケミカルス社
製）０．０５質量％、及び亜硫酸ナトリウム０．５質量
％から、固形分５０質量％のスラリーを調製し、噴霧乾
燥することによって噴霧乾燥粒子を得た。ついで、これ
を全洗剤ベース中の質量基準で、４Ａ型ゼオライト（東
ソー（株）製）１０質量％、及び香料０．３質量％を混
合し表面被覆を行い洗剤ベースを得た。洗剤ベースの平
均粒径は３００μｍ、見掛け密度は４５０ｇ／Ｌであっ
た。

【００９０】（２）洗剤ベース−２の製造 固形分４８質量％のスラリーを、熱風温度２５０℃で噴
霧乾燥し、ポリアクリル酸ナトリウム（平均分子量１０
０００）８質量％、炭酸ナトリウム３０質量％、硫酸ナ
トリウム２０質量％、塩化ナトリウム５質量％、蛍光染
料０．５質量％、ゼオライト３５質量％の噴霧乾燥粒子
を得た。次に、レディゲミキサー（松阪技研（株）製、
容量２０Ｌ、ジャケット付き）に噴霧乾燥粒子１００質
量部投入し、主軸（１５０ｍｉｎ^-1）の攪拌下、非イオ
ン界面活性剤１８質量部、直鎖アルキル（炭素数１０〜
１３）ベンゼンスルホン酸ナトリウム２０質量部、脂肪
酸（炭素数１４〜１８）ナトリウム５質量部、ポリエチ
レングリコール（平均分子量８５００）３質量部、水４
質量部の混合液を、３分間で投入し、その後５分間攪拌
を行った。更に、このミキサーに結晶性シリケート１５
質量部、ゼオライト１５質量部、香料０．３質量部を投
入し、表面被覆を行い洗剤ベースを得た。得られた洗剤
ベースの見掛け密度８２０ｇ／Ｌ、平均粒径３２０μｍ
であった。

【００９１】（３）洗剤ベース−３の製造 最終洗剤ベース基準で、直鎖アルキルベンゼンスルホン
酸カリウム（Ｃ１０〜１４）１４質量％、α−オレフィ
ンスルホン酸カリウム（炭素数１４〜１８）１２質量
％、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（Ｃ１２〜１
４、ＥＯ１２）８質量％、ポリエチレングリコール（平
均分子量＝８５００）１質量％、ゼオライト１８質量
％、アクリル酸−マレイン酸コポリマー（平均分子量＝
７００００）０．５質量％、脂肪酸カリウム（パーム核
油由来）４質量％、１号ケイ酸塩４質量％、炭酸カリウ
ム８質量％、硫酸ナトリウム２質量％、亜硫酸ナトリウ
ム１質量％、及び蛍光染料０．３質量％からなるスラリ
ー（固形分５０質量％）を調製し、噴霧乾燥して噴霧乾
燥組成物を得た。これに最終洗剤ベース基準の重量基準
で、炭酸ナトリウム１３質量％をリボンミキサーに投入
して混合を行った。得られた混合物を前押し出し式２軸
型押し出し造粒機（ペレッターダブル：不二パウダル
（株）製）で直径が１０ｍｍの円柱状に押し出し成形し
て圧密化した。得られたペレット状物を、ゼオライト５
質量％とともにフラッシュミル（不二パウダル（株）
製）で粉砕造粒して表面被覆を行った。この造粒物から
粗大物を取り除いた後、Ｖブレンダーに移し、ゼオライ
ト５質量％を混合し、水分４．２質量％の洗剤ベースを
得た。得られた洗剤ベースは、見掛け密度８２０ｇ／
Ｌ、平均粒径３９０μｍであった。

【００９２】実施例１〜１３ 表１の組み合わせで、上記の酵素造粒物及び洗剤ベース
を混合し粉末洗浄剤組成物を得た。

【００９３】比較例１〜６ 酵素造粒物−１〜４を市販の「セルザイム０．７Ｔ」も
しくは、「ケアザイム４５００Ｔ」（ノボザイムズ社
製）に置き換えて同活性量になるようにして粉末洗浄剤
組成物を得た（表２）。各洗浄剤組成物について、溶解
性、洗浄力、匂い、再汚染防止性の評価を行った。結果
を表１及び表２に併せて示す。また、セルラーゼの放出
率は、実施例１〜１３は何れも６０％以上であったが、
比較例は５０％未満であった。

【００９４】

【表１】

【００９５】

【表２】

【００９６】＜溶解性評価＞１Ｌ容ビーカー（内径１０
５ｍｍ）に５℃の硬水（７１．２ｍｇＣａＣＯ₃／Ｌ、
Ｃａ／Ｍｇのモル比７／３）１Ｌを入れ、攪拌子（長さ
３５ｍｍ、直径８ｍｍ）の回転数８００ｍｉｎ^-1にて撹
拌下、酵素造粒物又は洗浄剤組成物１ｇを投入し、６０
秒間攪拌してＪＩＳ Ｚ ８８０１規定の標準篩（目開
き７４μｍ）を通過させた。この時の篩い上の状態を以
下の基準で目視判定した。

【００９７】評価基準： ○：残留物が全く無い ×：残留物が確認できる

【００９８】＜洗浄力評価＞まず、表３に示した成分か
らなる油脂／カーボン汚れを木綿金布に染着させ、人工
汚染布を調製した（６×６cm）。

【００９９】

【表３】

【０１００】次いで、４０℃の使用水（ＣａＣｌ₂：５
５．４２ｍｇ／Ｌ、ＭｇＣｌ₂・６Ｈ ₂Ｏ：４３．５１ｍ
ｇ／Ｌ）１６７ｍＬを１Ｌ容ビーカー（内径１０５ｍ
ｍ）に入れ、洗浄剤組成物０．６７ｇを溶解させ、この
中に前記人工汚染布５枚を入れ、４０℃で１時間漬け置
きした。次いで４０℃の使用水（同上）８３３ｍＬを加
え、全量をかき混ぜ式洗浄力試験機（ターゴトメータ
ー）の試料カップに移し、回転速度１００ｍｉｎ^-1にて
１０分間攪拌した。人工汚染布を流水下で濯いだ後、ア
イロンプレスし、反射率測定に供した。汚染前の原布及
び洗浄前後の汚染布の５５０ｎｍにおける反射率を自記
色彩計（島津製作所製（株）製）にて測定し、次式によ
って洗浄率（％）を求め、５枚の測定平均値を以下の基
準により評価した。

【０１０１】

【数１】

【０１０２】評価基準： ○：洗浄率が７５％以上 ×：洗浄率が７５％未満

【０１０３】＜匂い評価＞坪量５５０ｇ／ｃｍ²の紙表
面をポリエチレンでラミネートし、容器を作成した。接
着剤としては、一般に用いられているアクリル系エマル
ジョンタイプの接着剤を使用した。容器寸法は横１４．
８ｃｍ×奥行き８．７ｃｍ×高さ１６ｃｍである。これ
に、洗剤組成物１５００ｇを充填した。その後、開口部
を封緘し、３０℃、８０％ＲＨの恒温恒湿器中に９０日
間放置した。試験後、以下の基準により評価した。

【０１０４】評価基準： ○：酵素の特異臭が殆ど感じられない ×：酵素の特異臭が感じられる

【０１０５】＜洗浄剤組成物の再汚染防止性＞得られた
洗浄剤０．６７ｇを、４０℃の使用水（ＣａＣｌ₂：５
５．４２ｍｇ／Ｌ、ＭｇＣｌ₂・６Ｈ₂Ｏ：４３．５１ｍ
ｇ／Ｌ）１０００ｍＬに溶解させる。次にこれに社団法
人日本油化学会選定のカーボンブラック（旭カーボン
（株）製、旭洗浄用カーボンブラックが好適）０．２５
ｇを添加し、２６±１．５ＫＨｚの超音波を５分間照射
してカーボンブラックを均一に分散させる。次にこれを
４０℃にてかき混ぜ式洗浄力試験機（ターゴトメータ：
Ｔｅｒｇ−Ｏ−Ｔｏｍｅｔｅｒ）の試料カップに移し、
６ｃｍ×６ｃｍの木綿の白布（社団法人日本油化学会選
定の標準品、洗濯科学協会が販売する＃２０２３布）５
枚を入れて回転速度１００±５ｍｉｎ^-1で１０分間撹拌
する。次に木綿の白布を取り出し、含水率が２００質量
％以下になるように軽く手で絞ってから、４０℃の使用
水（ＣａＣｌ ₂：５５．４２ｍｇ／Ｌ、ＭｇＣｌ₂・６Ｈ
₂Ｏ：４３．５１ｍｇ／Ｌ）１０００ｍＬに入れ、かき
混ぜ式洗浄力試験機（回転速度１００±５ｍｉｎ^-1）を
用いて３分間濯ぎ、この濯ぎ操作を計２回行なう。次に
風乾後、アイロン仕上げを行って、５５０ｎｍにおける
反射率を判定した。

【０１０６】

【数２】

【０１０７】評価基準： ○：再汚染防止率が６５％以上 ×：再汚染防止率が６５％未満

【０１０８】製造例４ 洗浄剤粒子の製造 （１）洗浄剤粒子−１の製造 全洗浄剤粒子中の質量基準で、配列番号１に示すアルカ
リセルラーゼの２４２位のグルタミンをセリンに置換し
た変異アルカリセルラーゼ０．０１質量％、直鎖アルキ
ル（炭素数１０〜１３）ベンゼンスルホン酸ナトリウム
２０質量％、トリポリリン酸ナトリウム１７質量％、炭
酸ナトリウム１０質量％、硫酸ナトリウム２２質量％、
１号ケイ酸ナトリウム１４質量％、ポリエチレングリコ
ール（ＭＷ＝１３０００）０．３質量％、アクリル酸−
マレイン酸コポリマー（ナトリウム塩（７０モル％中
和）、モノマー比はアクリル酸／マレイン酸＝３／７
（モル比）、平均分子量７００００）０．３質量％、カ
ルボキシメチルセルロース０．２質量％、チノパールＣ
ＢＳ−Ｘ（チバスペシャリティケミカルス社製）０．０
５質量％、チノパールＡＭＳ−ＧＸ（チバスペシャリテ
ィケミカルス社製）０．０５質量％、及び亜硫酸ナトリ
ウム０．５質量％から、固形分５０質量％のスラリーを
調製し、噴霧乾燥することによって噴霧乾燥粒子を得
た。ついで、これを全洗浄剤粒子中の質量基準で、４Ａ
型ゼオライト（東ソー（株）製）１０質量％、及び香料
０．３質量％を混合し表面被覆を行い洗浄剤粒子を得
た。洗浄剤粒子の平均粒径は３００μｍ、見掛け密度は
４５０ｇ／Ｌであった。洗浄剤粒子１００質量部に対し
て消泡剤０．４質量部を混合し、洗浄剤組成物を得た。

【０１０９】（２）洗浄剤粒子−２の製造 固形分４８質量％のスラリーを、熱風温度２００℃で噴
霧乾燥し、配列番号１に示すアルカリセルラーゼの２２
位のセリンをプロリンに、２４２位のグルタミンをセリ
ンに置換した変異アルカリセルラーゼ０．０２質量％、
ポリアクリル酸ナトリウム（平均分子量１００００）８
質量％、炭酸ナトリウム３０質量％、硫酸ナトリウム２
０質量％、塩化ナトリウム５質量％、蛍光染料０．５質
量％、ゼオライト３５質量％の噴霧乾燥粒子を得た。次
に、レディゲミキサー（松阪技研（株）製、容量２０
Ｌ、ジャケット付き）に噴霧乾燥粒子１００質量部投入
し、主軸（１５０ｍｉｎ^-1）の攪拌下、非イオン界面活
性剤１８質量部、直鎖アルキル（炭素数１０〜１３）ベ
ンゼンスルホン酸ナトリウム２０質量部、脂肪酸（炭素
数１４〜１８）ナトリウム５質量部、ポリエチレングリ
コール（平均分子量８５００）３質量部、水４質量部の
混合液を、３分間で投入し、その後５分間攪拌を行っ
た。更に、このミキサーに結晶性シリケート１５質量部
とゼオライト１５質量部を投入し、表面被覆を行い洗浄
剤粒子を得た。得られた洗浄剤粒子の見掛け密度８３０
ｇ／Ｌ、平均粒径３１０μｍであった。

【０１１０】（３）洗浄剤粒子−３の製造 固形分４８質量％のスラリーを、熱風温度２００℃で噴
霧乾燥し、ポリアクリル酸ナトリウム（平均分子量１０
０００）８質量％、炭酸ナトリウム３０質量％、硫酸ナ
トリウム２０質量％、塩化ナトリウム５質量％、蛍光染
料０．５質量％、ゼオライト３５質量％の噴霧乾燥粒子
を得た。次に、レディゲミキサー（松阪技研（株）製、
容量２０Ｌ、ジャケット付き）に噴霧乾燥粒子１００質
量部投入し、主軸（１５０ｍｉｎ^-1）の攪拌下、非イオ
ン界面活性剤１８質量部、直鎖アルキル（炭素数１０〜
１３）ベンゼンスルホン酸ナトリウム２０質量部、脂肪
酸（炭素数１４〜１８）ナトリウム５質量部、ポリエチ
レングリコール（平均分子量８５００）３質量部、配列
番号１に示すアルカリセルラーゼの２２位のセリンをプ
ロリンに、２４２位のグルタミンをセリンに置換した変
異アルカリセルラーゼ０．０２質量部、水４質量部の混
合液を、３分間で投入し、その後５分間攪拌を行った。
更に、このミキサーに結晶性シリケート１５質量部とゼ
オライト１５質量部を投入し、表面被覆を行い洗浄剤粒
子を得た。得られた洗浄剤粒子の見掛け密度８２０ｇ／
Ｌ、平均粒径３２０μｍであった。

【０１１１】（４）洗浄剤粒子−４の製造 炭酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、蛍光染料を、レデ
ィゲミキサーＦＫＭ−１３０Ｄ（（株）マツボー製）を
用いて攪拌羽根を周速３．４ｍ／ｓ、剪断機周速２７ｍ
／ｓで１分間混合した。混合物の平均粒径は９８μｍで
あった。次に、同条件でミキサーを作動させながら、直
鎖アルキル（炭素数１２〜１４）ベンゼンスルホン酸
（含水率０．５％）と硫酸の混合物を４分間で加え、更
に５分間作動させて中和反応を行った。次いで、同条件
でミキサーを作動させながら、非イオン界面活性剤、ゼ
オライトを洗浄剤粒子中の１５質量％分を加え、２分間
作動させて造粒を行った。次に、同条件でミキサーを作
動させながら、ゼオライトを洗浄剤粒子中の７質量％分
を加え、配列番号１に示すアルカリセルラーゼの２２位
のセリンをプロリンに、２４２位のグルタミンをセリン
に置換した変異アルカリセルラーゼを４質量％含有する
酵素溶液を洗浄剤粒子中の０．５質量％分、ポリエチレ
ングリコール（ＰＥＧ１３０００）、アクリル酸マレイ
ン酸コポリマー（ＡＡ／ＭＡコポリマー）４０質量％水
溶液を１分間で加え、更に２分間作動させて造粒を行っ
た。続いて残りのゼオライトを加え、更に２分間作動さ
せて表面改質処理を行い、表４に示す洗浄剤粒子を得
た。得られた洗浄剤粒子は、見掛け密度７８０ｇ／Ｌ、
平均粒径３６０μｍであった。

【０１１２】

【表４】

【０１１３】（５）比較例 変異アルカリセルラーゼを配合せずに、それ以外は製造
例８、９、１１と同様にして洗浄剤粒子を得た。これに
同活性量のセルザイム０．７Ｔ、もしくはケアザイム４
５００Ｔ（ノボザイムズ社製）粒子を添加して洗浄剤組
成物とした。

【０１１４】実施例１４ 実施例１〜１３と同様に、各洗浄剤粒子について、溶解
性、洗浄力、匂い、再汚染防止性の評価を行った。溶解
性については、洗浄剤粒子−１〜４は、篩い上のセルラ
ーゼ残留量が何れも比較例の残留量よりも大幅に下回っ
ていた。また、セルラーゼの放出率は、洗浄剤粒子−１
〜４は何れも６０％以上であったが、比較例は５０％未
満であった。再汚染防止性、匂いの評価については、洗
浄剤粒子−１〜４は何れもセルザイムを用いた比較例よ
りも明らかに勝っていた。また、洗浄力、再汚染防止性
の評価については、洗浄剤粒子−１〜４は何れもケアザ
イムを用いた比較例よりも明らかに勝っていた。

【０１１５】

【発明の効果】本発明の粉末洗浄剤組成物は、高濃度な
浸漬洗浄や、温水による洗濯にも適し、襟・袖口等の皮
脂由来の汚れ、染み汚れに対しても優れた洗浄力を発揮
する。また、本発明組成物におけるセルラーゼは高活性
であり、従来の洗浄剤に比べて酵素の使用量が少なくて
済むため、当該組成物における酵素特有の匂いも低減で
きる。

【０１１６】

【配列表】 SEQUENCE LISTING <110> KAO CORPORATION <120> Powdery Detergent Composition <130> P01931404 <160> 7 <170> PatentIn Ver. 2.1 <210> 1 <211> 824 <212> PRT <213> Bacillus sp.KSM-S237 <400> 1 Met Met Leu Arg Lys Lys Thr Lys Gln Leu Ile Ser Ser Ile Leu Ile 1 5 10 15 Leu Val Leu Leu Leu Ser Leu Phe Pro Ala Ala Leu Ala Ala Glu Gly 20 25 30 Asn Thr Arg Glu Asp Asn Phe Lys His Leu Leu Gly Asn Asp Asn Val 35 40 45 Lys Arg Pro Ser Glu Ala Gly Ala Leu Gln Leu Gln Glu Val Asp Gly 50 55 60 Gln Met Thr Leu Val Asp Gln His Gly Glu Lys Ile Gln Leu Arg Gly 65 70 75 80 Met Ser Thr His Gly Leu Gln Trp Phe Pro Glu Ile Leu Asn Asp Asn 85 90 95 Ala Tyr Lys Ala Leu Ser Asn Asp Trp Asp Ser Asn Met Ile Arg Leu 100 105 110 Ala Met Tyr Val Gly Glu Asn Gly Tyr Ala Thr Asn Pro Glu Leu Ile 115 120 125 Lys Gln Arg Val Ile Asp Gly Ile Glu Leu Ala Ile Glu Asn Asp Met 130 135 140 Tyr Val Ile Val Asp Trp His Val His Ala Pro Gly Asp Pro Arg Asp 145 150 155 160 Pro Val Tyr Ala Gly Ala Lys Asp Phe Phe Arg Glu Ile Ala Ala Leu 165 170 175 Tyr Pro Asn Asn Pro His Ile Ile Tyr Glu Leu Ala Asn Glu Pro Ser 180 185 190 Ser Asn Asn Asn Gly Gly Ala Gly Ile Pro Asn Asn Glu Glu Gly Trp 195 200 205 Lys Ala Val Lys Glu Tyr Ala Asp Pro Ile Val Glu Met Leu Arg Lys 210 215 220 Ser Gly Asn Ala Asp Asp Asn Ile Ile Ile Val Gly Ser Pro Asn Trp 225 230 235 240 Ser Gln Arg Pro Asp Leu Ala Ala Asp Asn Pro Ile Asp Asp His His 245 250 255 Thr Met Tyr Thr Val His Phe Tyr Thr Gly Ser His Ala Ala Ser Thr 260 265 270 Glu Ser Tyr Pro Ser Glu Thr Pro Asn Ser Glu Arg Gly Asn Val Met 275 280 285 Ser Asn Thr Arg Tyr Ala Leu Glu Asn Gly Val Ala Val Phe Ala Thr 290 295 300 Glu Trp Gly Thr Ser Gln Ala Ser Gly Asp Gly Gly Pro Tyr Phe Asp 305 310 315 320 Glu Ala Asp Val Trp Ile Glu Phe Leu Asn Glu Asn Asn Ile Ser Trp 325 330 335 Ala Asn Trp Ser Leu Thr Asn Lys Asn Glu Val Ser Gly Ala Phe Thr 340 345 350 Pro Phe Glu Leu Gly Lys Ser Asn Ala Thr Asn Leu Asp Pro Gly Pro 355 360 365 Asp His Val Trp Ala Pro Glu Glu Leu Ser Leu Ser Gly Glu Tyr Val 370 375 380 Arg Ala Arg Ile Lys Gly Val Asn Tyr Glu Pro Ile Asp Arg Thr Lys 385 390 395 400 Tyr Thr Lys Val Leu Trp Asp Phe Asn Asp Gly Thr Lys Gln Gly Phe 405 410 415 Gly Val Asn Ser Asp Ser Pro Asn Lys Glu Leu Ile Ala Val Asp Asn 420 425 430 Glu Asn Asn Thr Leu Lys Val Ser Gly Leu Asp Val Ser Asn Asp Val 435 440 445 Ser Asp Gly Asn Phe Trp Ala Asn Ala Arg Leu Ser Ala Asn Gly Trp 450 455 460 Gly Lys Ser Val Asp Ile Leu Gly Ala Glu Lys Leu Thr Met Asp Val 465 470 475 480 Ile Val Asp Glu Pro Thr Thr Val Ala Ile Ala Ala Ile Pro Gln Ser 485 490 495 Ser Lys Ser Gly Trp Ala Asn Pro Glu Arg Ala Val Arg Val Asn Ala 500 505 510 Glu Asp Phe Val Gln Gln Thr Asp Gly Lys Tyr Lys Ala Gly Leu Thr 515 520 525 Ile Thr Gly Glu Asp Ala Pro Asn Leu Lys Asn Ile Ala Phe His Glu 530 535 540 Glu Asp Asn Asn Met Asn Asn Ile Ile Leu Phe Val Gly Thr Asp Ala 545 550 555 560 Ala Asp Val Ile Tyr Leu Asp Asn Ile Lys Val Ile Gly Thr Glu Val 565 570 575 Glu Ile Pro Val Val His Asp Pro Lys Gly Glu Ala Val Leu Pro Ser 580 585 590 Val Phe Glu Asp Gly Thr Arg Gln Gly Trp Asp Trp Ala Gly Glu Ser 595 600 605 Gly Val Lys Thr Ala Leu Thr Ile Glu Glu Ala Asn Gly Ser Asn Ala 610 615 620 Leu Ser Trp Glu Phe Gly Tyr Pro Glu Val Lys Pro Ser Asp Asn Trp 625 630 635 640 Ala Thr Ala Pro Arg Leu Asp Phe Trp Lys Ser Asp Leu Val Arg Gly 645 650 655 Glu Asn Asp Tyr Val Ala Phe Asp Phe Tyr Leu Asp Pro Val Arg Ala 660 665 670 Thr Glu Gly Ala Met Asn Ile Asn Leu Val Phe Gln Pro Pro Thr Asn 675 680 685 Gly Tyr Trp Val Gln Ala Pro Lys Thr Tyr Thr Ile Asn Phe Asp Glu 690 695 700 Leu Glu Glu Ala Asn Gln Val Asn Gly Leu Tyr His Tyr Glu Val Lys 705 710 715 720 Ile Asn Val Arg Asp Ile Thr Asn Ile Gln Asp Asp Thr Leu Leu Arg 725 730 735 Asn Met Met Ile Ile Phe Ala Asp Val Glu Ser Asp Phe Ala Gly Arg 740 745 750 Val Phe Val Asp Asn Val Arg Phe Glu Gly Ala Ala Thr Thr Glu Pro 755 760 765 Val Glu Pro Glu Pro Val Asp Pro Gly Glu Glu Thr Pro Pro Val Asp 770 775 780 Glu Lys Glu Ala Lys Lys Glu Gln Lys Glu Ala Glu Lys Glu Glu Lys 785 790 795 800 Glu Ala Val Lys Glu Glu Lys Lys Glu Ala Lys Glu Glu Lys Lys Ala 805 810 815 Val Lys Asn Glu Ala Lys Lys Lys 820 <210> 2 <211> 29 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 2 gaaaacaaag cagcagattt cttccattc 29 <210> 3 <211> 31 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 3 gatagaagta aaactaaatt aagaatggaa g 31 <210> 4 <211> 28 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 4 gttttacttc tacctttatt tccggcag 28 <210> 5 <211> 38 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 5 atcaacatgg agaaaaacat caattacgtg gaatgagt 38 <210> 6 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 6 agtccggacg cgaactccag tttggac 27 <210> 7 <211> 38 <212> DNA <213> Artificial Sequence <400> 7 ctgccaacgg ttggggactt agtgttgata ttttaggt 38

【図面の簡単な説明】

【図１】配列番号１で示されるアミノ酸配列と９０％以
上の相同性を有するセルラーゼのアミノ酸配列を整列さ
せた図である。

フロントページの続き (72)発明者 西村 弘 和歌山県和歌山市湊1334 花王株式会社研 究所内 Ｆターム(参考） 4B050 CC04 DD02 EE01 JJ03 KK01 KK02 KK05 LL04 4H003 AA01 AB01 AB03 AB15 AB19 AB44 AC08 BA09 CA16 CA20 DA01 EA12 EA15 EA16 EA19 EA25 EA28 EB32 EB36 EC03 FA06 FA09 FA27 FA32

Claims (15)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 （ａ）配列番号１で示されるアミノ酸配
   列と９０％以上の相同性を有するセルラーゼについて、
   配列番号１の２４２位又はこれに相当する位置のグルタ
   ミン残基を他のアミノ酸残基に置換した変異アルカリセ
   ルラーゼを含有する粉末洗浄剤組成物。
2. 【請求項２】 他のアミノ酸残基がセリン残基である請
   求項１記載の粉末洗浄剤組成物。
3. 【請求項３】 更に、（ｂ）界面活性剤及び（ｃ）ビル
   ダーを含有する請求項１又は２記載の粉末洗浄剤組成
   物。
4. 【請求項４】 （ａ）成分が、２０℃、１分後のセルラ
   ーゼ放出率が５０％以上の酵素造粒物である請求項１〜
   ３のいずれか１項記載の粉末洗浄剤組成物。
5. 【請求項５】 （ｂ）成分及び（ｃ）成分が、（ｂ）成
   分及び（ｃ）成分を含有し、２０℃、１分後の（ｂ）成
   分放出率が６０％以上の粒子である請求項３又は４記載
   の粉末洗浄剤組成物。
6. 【請求項６】 酵素造粒物が、（ａ）成分を平均粒径２
   ００〜１２００μｍの水溶性粒子からなる核物質及び融
   点３５〜７０℃の水溶性有機バインダーと共に造粒して
   得られるものであり、その平均粒径が核物質の平均粒径
   の１〜２倍である請求項４又は５記載の粉末洗浄剤組成
   物。
7. 【請求項７】 酵素造粒物が、（ａ）成分、水不溶性物
   質４５質量％以上、及び水溶性バインダー５〜４０質量
   ％を含有し、かつ内部よりも表面近傍に水溶性バインダ
   ーが多く存在する構造を有するものである請求項４又は
   ５記載の粉末洗浄剤組成物。
8. 【請求項８】 （ｂ）成分及び（ｃ）成分を含有する粒
   子が、（ｂ）成分及び（ｃ）成分の少なくとも一部を混
   合した後に乾燥して得られ、粒子内に気孔を有するもの
   である請求項５〜７のいずれか１項記載の粉末洗浄剤組
   成物。
9. 【請求項９】 （ａ）成分、（ｂ）成分及び（ｃ）成分
   が洗浄剤粒子を形成する請求項３記載の粉末洗浄剤組成
   物。
10. 【請求項１０】 洗浄剤粒子が、（ａ）成分、（ｂ）成
    分及び（ｃ）成分の少なくとも一部を混合した後、乾燥
    工程を経て得られるものである請求項９記載の粉末洗浄
    剤組成物。
11. 【請求項１１】 洗浄剤粒子が、（ｂ）成分及び（ｃ）
    成分の少なくとも一部を混合した後に乾燥し、これに
    （ａ）成分を含有する液体を添加して（ａ）成分を担持
    させる工程を経て得られるものである請求項９記載の粉
    末洗浄剤組成物。
12. 【請求項１２】 洗浄剤粒子が、（ｂ）成分として陰イ
    オン界面活性剤を含有し、該陰イオン界面活性剤の液体
    酸前駆体と、該陰イオン界面活性剤を中和するのに必要
    な量以上の粒子状固体水溶性アルカリ無機物質を混合し
    て中和する工程、及びこれに（ａ）成分を含有する液体
    を添加し（ａ）成分を担持させる工程を経て得られるも
    のである請求項９記載の粉末洗浄剤組成物。
13. 【請求項１３】 平均粒子径が１５０〜１０００μｍで
    ある請求項３〜１１のいずれか１項記載の粉末洗浄剤組
    成物。
14. 【請求項１４】 （ａ）配列番号１で示されるアミノ酸
    配列と９０％以上の相同性を有するセルラーゼについ
    て、配列番号１の２４２位又はこれに相当する位置のグ
    ルタミン残基を他のアミノ酸残基に置換した変異アルカ
    リセルラーゼの造粒物であって、２０℃、１分後のセル
    ラーゼ放出率が５０％以上である酵素造粒物。
15. 【請求項１５】 （ａ）配列番号１で示されるアミノ酸
    配列と９０％以上の相同性を有するセルラーゼについ
    て、配列番号１の２４２位又はこれに相当する位置のグ
    ルタミン残基を他のアミノ酸残基に置換した変異アルカ
    リセルラーゼ、（ｂ）界面活性剤、及び（ｃ）ビルダー
    を含有する洗浄剤粒子。