JP2003137840A - プラバスタチンの単離・精製方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】本発明は、プラバスタチン又はその薬理上許容
される塩を単離・精製する工程において、不純物を無機
酸を用いて、分解する工程を行うことを特徴とする、プ
ラバスタチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製
方法に関する。 【解決手段】プラバスタチン又はその薬理上許容される
塩を単離・精製する工程において、不純物を無機酸を用
いて、分解する工程を行うことを特徴とする、プラバス
タチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、菌により生成され
たプラバスタチン類を含む培養濃縮液から、有機溶媒を
用いて、プラバスタチン類を抽出する工程において、有
機溶媒として、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素
数３以上のアルキル基を示す。）を有する溶媒を使用
し、プラバスタチン又はその薬理上許容される塩を単離
・精製する工程に関する。

【０００２】また、本発明は、不純物を無機酸を用いて
分解する工程を行うことを特徴とする、プラバスタチン
又はその薬理上許容される塩の単離・精製方法に関す
る。

【０００３】更に、本発明は、不純物を無機塩基を用い
て分解する工程を行うことを特徴とする、プラバスタチ
ン又はその薬理上許容される塩の単離・精製方法に関す
る。

【０００４】また、本発明は、上記３工程から選択され
る２以上の工程を含有することを特徴とする、プラバス
タチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製方法に
関する。

【０００５】更に、本発明は、式（Ｉ）

【０００６】

【化１】

【０００７】を有する化合物を、工業的に生産されたプ
ラバスタチンナトリウムに対して、０．１重量％以下の
量まで除去することに関連する発明に関する。

【０００８】

【従来の技術】プラバスタチンは、特開昭５７−２２４
０号公報（ＵＳＰ４３４６２２７）にＨＭＧ−ＣｏＡリ
ダクターゼ阻害剤として開示されている化合物であり、
下記式（ＩＩ）

【０００９】

【化２】

【００１０】を有し、現在、プラバスタチンナトリウム
が高脂血症治療剤として発売されている。

【００１１】

【発明が解決しようとする課題】ＨＭＧ−ＣｏＡリダク
ターゼ阻害剤として、プラバスタチンの他に多くの化合
物が知られているが、例えば、アトロバスタチン、フル
バスタチン、イタバスタチン等は、全て合成により製造
される化合物である。

【００１２】一方、ロバスタチン及びシンバスタチン
は、プラバスタチンと同様に発酵により製造されるもの
の、一段階の発酵により生成され、この点、プラバスタ
チンの二段階発酵と相違する。すなわち、プラバスタチ
ンナトリウムは、下記式に示すとおり、二段階にわたっ
て菌により変換培養することにより生成されるものであ
る。

【００１３】

【化３】

【００１４】そもそも、菌を発酵させた場合、化学反応
で合成を行うよりも、予想し得ない多くの不純物が生成
してしまうものである。各工程毎に精製を行ったとして
も不純物を除去しきれるものではなく、特に工業的生産
を目的とした大量培養における、各工程の生成物につい
てはなおさらである。

【００１５】一方、「安全で有効な医薬を製造するため
の重要な因子の一つが、高純度の生成物を得ることであ
る。化学物質は、原料物質から化学合成、生物により生
産された当該物質を単離・精製する又は遺伝子組換え細
胞等を利用した生産で生成された当該物質を単離・精製
する等の製法により取得される。一般的に、遺伝子組換
法を含めいかなる製法を採用しようが、原料の純度、反
応の不完全性、単離・精製過程での分解等により、製造
される化学物質は１００％の純度のものを得ることは困
難なことが多い。また、医薬の分野において、診断薬、
治療薬は、不純物を含むと診断や治療に好ましくない影
響を及ぼす可能性を否定することができないのは、本願
発明の属する技術分野における技術常識に属することは
明らかであり、できる限り高純度の生成物を得る事が重
要とされている。」（東京高裁平成９年（行ケ）第３０
２号事件（１２年２月１７日判決））のである。

【００１６】そして、ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ阻害
剤は、血中コレステロールを有効に低下させるために、
投与期間が長期にわたるような薬剤であるため、特に高
純度であることが必要とされる。

【００１７】従って、上記のとおり、二段階発酵により
生成されるプラバスタチン類は、一段階発酵により生成
されるシンバスタチン及びロバスタチンに比べて、不純
物もより多く含有するため、精製工程が特に重要であ
り、不純物を除去し高純度のプラバスタチンを単離・精
製する方法を見出すための研究が続けられていた。

【００１８】本発明者等は、特に、プラバスタチンを二
段階発酵して生成する際に、下記一般式（Ｉ）

【００１９】

【化４】

【００２０】を有する化合物が必ず生成され、しかも上
記化合物（Ｉ）の生産量が、プラバスタチンに変換培養
する際に生成される不純物の中で最も多いことを見出し
た。しかしながら、このように、高純度のプラバスタチ
ンを得るためには、医薬を製造するにあたり不純物とさ
れる化合物の中でも、上記化合物（Ｉ）を確実に除去す
ることが重要な課題であることがわかったものの、上記
化合物（Ｉ）は、プラバスタチンの一つの不斉炭素上の
水酸基にかかる光学異性体であるため、他の不純物に比
べて除去することが非常に困難であった。

【００２１】従って、クロマトグラフィーのような煩雑
なものではなく、工程生産性を損なわず、しかもクロマ
トグラフィーで精製される程度の高純度で、プラバスタ
チン又はその薬理上許容される塩を単離・精製する方
法、更に上記化合物（Ｉ）を除去し高純度のプラバスタ
チンを得ることができるような、簡便な単離・精製方法
が望まれていた。

【００２２】一方、ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ阻害剤
の精製方法としては、以下のものが知られている。 （１）ＷＯ９２／１６２７６号公報（特表平６−５０６
２１０号公報） 本公報は、「高性能液体クロマトグラフィーを使用する
ことを特徴とするＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ阻害剤の
精製方法、及び、該精製方法により得られたＨＭＧ−Ｃ
ｏＡリダクターゼ阻害剤」に関する。

【００２３】本公報の精製方法は、ＨＭＧ−ＣｏＡリダ
クターゼ阻害剤の精製工程において、高性能液体クロマ
トグラフィーを用いることを特徴とする。一方、本発明
の単離・精製方法は、酢酸n-プロピル、酢酸n-ブチルの
ような式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素数３以上
のアルキル基を示す。）を有する溶媒を使用することに
より、プラバスタチンの不純物を除去するか、及び／又
は、無機酸及び／又は無機塩基を用いて分解することに
より不純物を除去し、高性能液体クロマトグラフィーを
用いずに、高純度のプラバスタチンを得られることを特
徴としている点で、本公報の精製方法とは相違する。

【００２４】また、本発明の「上記化合物（Ｉ）をプラ
バスタチンナトリウムに対して、０．１重量％以下まで
除去することを特徴とする」単離・精製方法については
記載も示唆もされていない。

【００２５】ところで、高性能液体クロマトグラフィー
は、大量の溶媒を要し、それらに少量の不揮発性不純物
が含まれ得るが故に、大規模生産の場合にはより深刻に
なる。溶媒の除去に際し、これらの不純物は試料に混入
する。加えて、このように多量の溶媒を用いることによ
り、深刻な環境汚染や多額の蒸溜費用を招くことにな
る。

【００２６】従って、高性能液体クロマトグラフィー
は、煩雑であり、工業的なプラバスタチンの単離・精製
に用いられる操作であるとは考えられない。

【００２７】そして、プラバスタチンの工業生産にあた
って、高性能液体クロマトグラフィーを用いたとして
も、プラバスタチンの光学異性体である上記化合物
（Ｉ）を除去し所望の純度のプラバスタチンを得ること
は困難である。 （２）ＷＯ９９／４２６０１号公報 本公報は、「ＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ阻害剤の濃縮
培養液を、酸でｐＨ４．５乃至７．５に調節した後、酢
酸エチルでＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ阻害剤を抽出
し、所望によりラクトン化させた後結晶化することによ
り、９９．６％以上の純度を有するＨＭＧ−ＣｏＡリダ
クターゼ阻害剤を得る単離・精製方法」に関する。

【００２８】本公報の精製方法は、菌により生成された
プラバスタチン類を含む培養濃縮液から、有機溶媒を用
いて、プラバスタチン類を抽出する工程において、酢酸
エチルを使用していることに対して、本発明の精製方法
は、酢酸ｎ-プルピル、酢酸n-ブチルのような式 ＣＨ₃
ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素数３以上のアルキル基を
示す。）を有する溶媒を使用している点で、本発明の単
離・精製方法とは相違する。

【００２９】更に、本発明の単離・精製方法は、プラバ
スタチンの不純物を、無機酸及び／又は無機塩基を用い
て分解する工程を行うことにより高純度のプラバスタチ
ンを得ることも特徴としているが、本公報では、無機酸
及び／又は無機塩基を用いてＨＭＧ−ＣｏＡリダクター
ゼ阻害剤の不純物を分解する工程については、記載も示
唆もされていない。

【００３０】また、本発明の「上記化合物（Ｉ）をプラ
バスタチンナトリウムに対して、０．１重量％以下まで
除去することを特徴とする」単離・精製方法について
は、記載も示唆もされていない。

【００３１】確かに、本公報の実施例３では、プラバス
タチンの単離・精製方法が記載されているが、本実施例
では、酢酸エチルで抽出されたプラバスタチンの純度が
７０．３％足らずに留まっており、その後本発明の単離
・精製方法とは相違するクロマトグラフィーを用いて精
製する記載はあるものの、最終的に得られたプラバスタ
チンの純度については全く記載されていない。従って、
最終的に高純度のプラバスタチンが得られているのか否
かはそもそも不明であるし、加えて上記化合物（Ｉ）が
プラバスタチンに対して、０．１重量％以下まで精製さ
れているかどうかについても記載も示唆もされていな
い。

【００３２】また、本公報の実施例において、９９．６
％以上の高純度で得られるとされているロバスタチンで
さえ、最終生成物のＨＰＬＣのチャート（Fig.4）を見
る限り、純度が９９．６％以上のロバスタチンが得られ
ているとは考えにくく、信憑性がない。 （３）ＷＯ００／１７１８２号公報 本公報は、「置換クロマトグラフィーを使用することを
特徴とするＨＭＧ−ＣｏＡリダクターゼ阻害剤の精製方
法、及び、該精製方法により得られたＨＭＧ−ＣｏＡリ
ダクターゼ阻害剤」に関する。

【００３３】本公報の精製方法は、ＨＭＧ−ＣｏＡリダ
クターゼ阻害剤の精製工程において、置換クロマトグラ
フィーを用いることを特徴とする。一方、本発明の単離
・精製方法は、酢酸n-プロピル、酢酸n-ブチルのような
式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素数３以上のアル
キル基を示す。）を有する溶媒を使用して、プラバスタ
チンの不純物を除去するか、及び／又は、無機酸及び／
又は無機塩基を用いて分解することにより不純物を除去
し、置換クロマトグラフィーを含む一切のクロマトグラ
フィーを用いずに、高純度のプラバスタチンが得られる
ことを特徴としている点で、本公報の精製方法とは相違
する。

【００３４】また、本発明の「上記化合物（Ｉ）をプラ
バスタチンナトリウムに対して、０．１重量％以下まで
除去することを特徴とする」単離・精製方法について
は、記載も示唆もされていない。

【００３５】そして、プラバスタチンの工業的生産にあ
たって、置換クロマトグラフィーを用いたとしても、煩
雑であり、また、プラバスタチンの光学異性体である上
記化合物（Ｉ）を除去することは困難である。

【００３６】なお、上記精製方法の他に、通常、当業者
が採用する単離・精製方法としては、例えば、分析用高
圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を挙げることが
できるが、分析用ＨＰＬＣは、プラバスタチンの単離・
精製方法としては実用的手段ではない。分析用ＨＰＬＣ
は、非常に細い直経の充填カラム（直径4.6ｍｍ×長さ2
5ｃｍ）を用い、一回の分析毎に高圧にあるカラムに約1
0μg(1×10^-2mg)の試料を添加するものであり、一回の
分析は、約３０分を要する。試料はいずれはカラムから
流出するものの、極端に稀釈された溶液状であり、分析
系では成分検出は可能であるが、収集は実用的でない。
更に、分析用ＨＰＬＣには収集系は付属しておらず、そ
れを設置するにしても、固体試料を得たい場合には溶媒
除去を要する。プラバスタチンの単離・精製に分析用Ｈ
ＰＬＣを使うとすると、僅か1個の5mg錠を作るに必要な
プラバスタチンを単離・精製するのに、500回の分析と2
50時間を要することとなり、分析用ＨＰＬＣはプラバス
タチンの単離・精製の目的には非現実的な操作であるか
が明らかである。

【００３７】また、分取用ＨＰＬＣも、前述の理由によ
り、商業規模のプラバスタチンの単離・精製に適した手
法とはいえない。

【００３８】シリカゲルクロマトグラフィーは、シリカ
ゲル粒子の大きさに基づき、カラムクロマトグラフィー
とフラッシュクロマトグラフィーに大別できるが、商業
規模の単離・精製に使うに適した手法であるとは期待さ
れなかった。

【００３９】実際に、各種クロマトグラフィーを用い
て、上記化合物（Ｉ）及びその他の不純物の分離を試み
たが、上記化合物（Ｉ）はプラバスタチンの立体異性体
であるため、該化合物をプラバスタチンから分離できな
かった。

【００４０】再結晶は、医薬品分野で広く用いられてい
る単離・精製操作である。しかしながら、再結晶を使用
しても、構造的にプラバスタチンと類似する上記化合物
（Ｉ）をプラバスタチンから選択的に分離し、組成物中
のプラバスタチンの純度を所望の水準まで改善するには
効果的でなかった。

【００４１】ガスクロマトグラフィーや蒸溜といった、
他の単離・精製法も考慮したが、いずれも試料分子の大
きさの差異に準拠した分離に基づいており、両者とも試
料の加熱を要する。しかしながら、プラバスタチンはそ
の融点では分解する傾向があるため、これらを単離・精
製法とすることができない。

【００４２】また、上記化合物（Ｉ）を除去するため前
記単離・精製方法のいずれかを繰り返し行ったとしても
逆にプラバスタチンの収率をも減少させてしまう。

【００４３】更に、上述されているような、従来知られ
ているいかなる単離・精製方法を組み合わせても、上記
化合物（Ｉ）を０．１％以下の量まで除去し、プラバス
タチンの工業的生産に適用することはできなかった。

【００４４】従って、工程生産性を損なうこともなく、
高純度のプラバスタチン、特に、プラバスタチンの類縁
物質である上記一般式（Ｉ）を有する化合物を除去する
ことにより高純度であるプラバスタチンを得る事ができ
る単離・精製方法は、今まで全く知られていない。

【００４５】本発明者らは、プラバスタチンを含有する
医薬組成物について鋭意研究を行った結果、高純度のプ
ラバスタチンを得る単離・精製方法、更にプラバスタチ
ンの類縁物質である上記化合物（Ｉ）を含めた不純物を
該医薬組成物から除去する単離・精製方法、特に上記化
合物（Ｉ）をプラバスタチンを含有する医薬組成物全量
に対して０．１％以下の量まで除去する単離・精製方法
を見出し、本発明を完成した。

【００４６】

【課題を解決するための手段】本発明は、（１） 菌に
より生成されたプラバスタチン類を含む培養濃縮液か
ら、有機溶媒を用いて、プラバスタチン類を抽出する工
程において、有機溶媒として、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記
式中、Ｒは炭素数３以上のアルキル基を示す。）を有す
る溶媒を使用することを特徴とする、プラバスタチン又
はその薬理上許容される塩の単離・精製方法、（２）
プラバスタチン又はその薬理上許容される塩を単離・精
製する工程において、不純物を無機酸を用いて、分解す
る工程を行うことを特徴とする、プラバスタチン又はそ
の薬理上許容される塩の単離・精製方法、（３） プラ
バスタチン又はその薬理上許容される塩を単離・精製す
る工程において、不純物を無機塩基を用いて、分解する
工程を行うことを特徴とする、プラバスタチン又はその
薬理上許容される塩の単離・精製方法に関する。

【００４７】好適には、（４） Ｒがn-プロピル基又は
n-ブチル基である、（１）記載のプラバスタチン又はそ
の薬理上許容される塩の単離・精製方法、（５） 無機
酸が、リン酸である、（２）記載のプラバスタチン又は
その薬理上許容される塩の単離・精製方法、（６） 無
機酸を用いて分解する工程のｐＨが、２乃至５である、
（２）又は（５）に記載のプラバスタチン又はその薬理
上許容される塩の単離・精製方法を挙げることができ
る。

【００４８】更に本発明は、（７） 菌により生成され
たプラバスタチン類を含む培養濃縮液から、有機溶媒を
用いて、プラバスタチン類を抽出する工程において、有
機溶媒として、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素
数３以上のアルキル基を示す。）を有する溶媒を使用
し、かつ、不純物を無機酸を用いて分解する工程を行う
ことを特徴とする、プラバスタチン又はその薬理上許容
される塩の単離・精製方法、（８） プラバスタチン又
はその薬理上許容される塩を単離・精製する工程におい
て、不純物を無機酸を用いて分解する工程、及び、不純
物を無機塩基を用いて分解する工程を行うことを特徴と
する、プラバスタチン又はその薬理上許容される塩の単
離・精製方法、（９） 菌により生成されたプラバスタ
チン類を含む培養濃縮液から、有機溶媒を用いて、プラ
バスタチン類を抽出する工程において、有機溶媒とし
て、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素数３以上の
アルキル基を示す。）を有する溶媒を使用し、並びに、
不純物を無機酸を用いて分解する工程、及び、不純物を
無機塩基を用いて分解する工程を行うことを特徴とす
る、プラバスタチン又はその薬理上許容される塩の単離
・精製方法に関し、好適には、（１０） Ｒがn-プロピ
ル基又はn-ブチル基である、（７）又は（９）記載のプ
ラバスタチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製
方法、（１１） 無機酸が、リン酸である、（７）乃至
（１０）から選択されるいずれか一項に記載にのプラバ
スタチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製方
法、（１２） 無機酸を用いて分解する工程のｐＨが、
２乃至５である、（７）乃至（１１）から選択されるい
ずれか一項に記載のプラバスタチン又はその薬理上許容
される塩の単離・精製方法を挙げることができる。ま
た、本発明は、（１３） 菌により生成されたプラバス
タチン類を含む培養濃縮液から、有機溶媒を用いて、プ
ラバスタチン類を抽出する工程において、有機溶媒とし
て、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素数３以上の
アルキル基を示す。）を有する溶媒を使用し、かつ、不
純物を無機塩基を用いて分解する工程を行うことを特徴
とする、プラバスタチン又はその薬理上許容される塩の
単離・精製方法に関し、好適には、（１４） Ｒがn-プ
ロピル基又はn-ブチル基である、（１３）記載のプラバ
スタチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製方法
を挙げることができる。

【００４９】また、本発明は、（１５） 菌により生成
されたプラバスタチン類を含む培養濃縮液から、有機溶
媒を用いて、プラバスタチン類を抽出する工程におい
て、有機溶媒として、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒ
は炭素数３以上のアルキル基を示す。）を有する溶媒を
使用し、かつ、不純物を無機酸を用いて分解する工程を
行うことにより、一般式（Ｉ）

【００５０】

【化５】

【００５１】を有する化合物を、プラバスタチンナトリ
ウムに対して、０．１重量％以下の量まで除去すること
を特徴とする、プラバスタチンナトリウムの単離・精製
方法、（１６） プラバスタチンナトリウムを単離・精
製する工程においてに、不純物を無機酸を用いて分解す
る工程、及び、不純物を無機塩基を用いて分解する工程
を行うことにより、一般式（Ｉ）

【００５２】

【化６】

【００５３】を有する化合物を、プラバスタチンナトリ
ウムに対して、０．１重量％以下の量まで除去すること
を特徴とする、プラバスタチンナトリウムの単離・精製
方法、（１７） 菌により生成されたプラバスタチン類
を含む培養濃縮液から、有機溶媒を用いて、プラバスタ
チン類を抽出する工程において、有機溶媒として、式
ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素数３以上のアルキル
基を示す。）を有する溶媒を使用し、並びに、不純物を
無機酸を用いて分解する工程、及び、不純物を無機塩基
を用いて分解する工程を行うことにより、一般式（Ｉ）

【００５４】

【化７】

【００５５】を有する化合物を、プラバスタチンナトリ
ウムに対して、０．１重量％以下の量まで除去すること
を特徴とする、プラバスタチンナトリウムの単離・精製
方法に関し、好適には、（１８） Ｒがn-プロピル基又
はn-ブチル基である、（１５）又は（１７）記載のプラ
バスタチンナトリウムの単離・精製方法、（１９） 無
機酸が、リン酸である、（１５）乃至（１８）から選択
されるいずれか一項に記載のプラバスタチンナトリウム
の単離・精製方法、（２０） 無機酸を用いて分解する
工程のｐＨが、２乃至５である、（１５）乃至（１９）
から選択されるいずれか一項に記載のプラバスタチンナ
トリウムの単離・精製方法を挙げることができる。

【００５６】更に本発明は、（２１） 菌により生成さ
れたプラバスタチン類を含む培養濃縮液から、有機溶媒
を用いて、プラバスタチン類を抽出する工程において、
有機溶媒として、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭
素数３以上のアルキル基を示す。）を有する溶媒を使用
し、かつ、不純物を無機塩基を用いて分解する工程を行
うことにより、一般式（Ｉ）

【００５７】

【化８】

【００５８】を有する化合物を、プラバスタチンナトリ
ウムに対して、０．１重量％以下の量まで除去すること
を特徴とする、プラバスタチンナトリウムの単離・精製
方法に関し、好適には、（２２）一般式（Ｉ）

【００５９】

【化９】

【００６０】を有する化合物を、プラバスタチンナトリ
ウムに対して、０．１重量％以下の量で含有することを
特徴とする、工業的に生産されたプラバスタチンナトリ
ウムを含有する組成物、（２３） Ｒがn-プロピル基又
はn-ブチル基である、（２１）記載のプラバスタチンナ
トリウムの単離・精製方法を挙げることができる。

【００６１】また、本発明は、（２４） （１）乃至
（２３）のいずれか一項に記載の単離・精製方法により
得られ、一般式（Ｉ）

【００６２】

【化１０】

【００６３】を有する化合物を、プラバスタチンナトリ
ウムに対して、０．１重量％以下の量で含有することを
特徴とする、プラバスタチンナトリウムを含有する組成
物に関する。

【００６４】本発明において、「プラバスタチン類」と
は、下記式（ＩＩ）

【００６５】

【化１１】

【００６６】を有するプラバスタチン又はその薬理上許
容される塩、及び、上記式（ＩＩ）と類似の構造を有す
る化合物、即ちプラバスタチンの類縁物質（例えば、上
記化合物（Ｉ）を挙げることができる。）をいう。

【００６７】プラバスタチン又はその薬理上許容される
塩の単離・精製は、通常、以下に記載する単離・精製方
法によって達成される。

【００６８】まず、変換培養を終えたプラバスタチンを
含む培養液を、常法に従って、ろ過及び／又は遠心法に
より、菌体を分離し、その後濃縮して培養濃縮液を得
る。

【００６９】得られた培養濃縮液は、所望により、酸を
用いてpHを調節した後、酢酸エチルのような水と混和し
にくい有機溶媒を用いてプラバスタチン類を抽出する。
例えば、ＷＯ９９／４２６０１号公報では、ＨＭＧ−Ｃ
ｏＡリダクターゼ阻害剤を含む培養濃縮液を、酸を用い
てpHを４．５〜７．５（好適には５．５〜７．５）に調
節した後、酢酸エチルを用いて抽出している。

【００７０】そのようにして得られたプラバスタチン類
は常法に従って、上記抽出液から採取される。例えば、
上記抽出液を、水、飽和食塩水等で洗浄後、水酸化ナト
リウムを加え、抽出分液し、逆抽出水層としてプラバス
タチン塩の水溶液を得る事ができる。得られたプラバス
タチン塩は、所望により結晶化することもできる。

【００７１】所望により行なわれる結晶化は、一般に有
機合成化学の技術において周知の方法、例えば、Ullman
n's, Encyclopedia of Industrial Chemistry" Vol. A2
4, 5th edition (1993) , pp. 437-505に記載の方法に
より以下のように行うことができる。

【００７２】結晶化の方法としては、例えば、得られた
プラバスタチン又はその薬理上許容される塩の組成物
に、有機溶媒及び水を加え、加温溶解し、接種すること
により、結晶体としてプラバスタチンを得る事ができ
る。

【００７３】結晶化に使用される有機溶媒としては、例
えば、ヘキサン、ヘプタンのような脂肪族炭化水素類；
トルエン、キシレンのような芳香族炭化水素類；酢酸メ
チル、酢酸エチル、酢酸n-プロピル、酢酸n-ブチルのよ
うなエステル類；酢酸のような有機酸類；メタノ−ル、
エタノ−ル、ｎ−プロパノ−ル、イソプロパノ−ル、ｎ
−ブタノ−ル、イソブタノ−ル、ｔ−ブタノ−ル、イソ
アミルアルコ−ル、ジエチレングリコール、グリセリ
ン、オクタノールのようなアルコ−ル類；アセトン、メ
チルエチルケトンのようなケトン類；ジエチルエーテ
ル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジ
オキサン、ジメトキシエタン、ジエチレングリコールジ
メチルエーテルのようなエ−テル類；ホルムアミド、ジ
メチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ヘキサメ
チルリン酸トリアミドのようなアミド類；ジメチルスル
ホキシドのようなスルホキシド類；水と１種類以上の上
記有機溶媒との混合溶媒；であり、好適には、水と１種
類以上の上記有機溶媒との混合溶媒であり、更に好適に
は、水と、アルコ−ル類、エステル類及びケトン類から
選択される１種類以上の有機溶媒との混合溶媒であり、
最も好適には、水、アルコール類及びエステル類の混合
溶媒である。

【００７４】本発明の単離・精製方法は、上述のように
常法に従って、培養濃縮液を得た後、酢酸エチルではな
く、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式中、Ｒは炭素数３以上の
アルキル基を示す。）を有する有機溶媒を用いて抽出す
ることを特徴とする。

【００７５】上記式中、Ｒの定義における「炭素数３以
上のアルキル基」は、例えば、n-プロピル、イソプロピ
ル、n-ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、
ペンチル、イソペンチル、２−メチルブチル、ネオペン
チル、１−エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、
４−メチルペンチル、３−メチルペンチル、２−メチル
ペンチル、１−メチルペンチル、３，３−ジメチルブチ
ル、２，２−ジメチルブチル、１，１−ジメチルブチ
ル、１，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチ
ル、２，３−ジメチルブチル、１−エチルブチル、２−
エチルブチル基のような基であり、好適には、炭素数３
乃至６個の直鎖又は分枝鎖アルキル基であり、好適には
Ｃ₃−Ｃ₄アルキル基であり、最も好適には、n-プロピル
又はn-ブチル基である。

【００７６】また、本発明の単離・精製方法は、上述の
ようなプラバスタチンの単離・精製方法において、プラ
バスタチンの不純物を無機酸を用いて分解する工程、及
び／又は、不純物を無機塩基を用いて分解する工程を行
うことを特徴とする。

【００７７】プラバスタチンの不純物を無機酸を用いて
分解する工程及び不純物を無機塩基を用いて分解する工
程を行う場合は、順不同で希望する工程を、単離・精製
方法において適宜実施することができる。そのような単
離・精製方法の具体例としては、例えば、（ａ） 菌に
より生成されたプラバスタチン類を含む培養濃縮液か
ら、有機溶媒を用いて、プラバスタチン類を抽出する工
程において、有機溶媒として、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記
式中、Ｒは炭素数３以上のアルキル基を示す。）を有す
る溶媒を使用し、かつ、不純物を無機酸を用いて分解す
る工程を行うことを特徴とする、プラバスタチン又はそ
の薬理上許容される塩の単離・精製方法、（ｂ） 菌に
より生成されたプラバスタチン類を含む培養濃縮液か
ら、有機溶媒を用いて、プラバスタチン類を抽出する工
程において、有機溶媒として、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記
式中、Ｒは炭素数３以上のアルキル基を示す。）を有す
る溶媒を使用し、かつ、不純物を無機塩基を用いて分解
する工程を行うことを特徴とする、プラバスタチン又は
その薬理上許容される塩の単離・精製方法、（ｃ） プ
ラバスタチン又はその薬理上許容される塩を単離・精製
する工程において、不純物を無機酸を用いて分解する工
程、及び、不純物を無機塩基を用いて分解する工程を順
不同で行うことを特徴とする、プラバスタチン又はその
薬理上許容される塩の単離・精製方法、（ｄ） 菌によ
り生成されたプラバスタチン類を含む培養濃縮液から、
有機溶媒を用いて、プラバスタチン類を抽出する工程に
おいて、有機溶媒として、式 ＣＨ₃ＣＯ₂Ｒ（上記式
中、Ｒは炭素数３以上のアルキル基を示す。）を有する
溶媒を使用し、並びに、不純物を無機酸を用いて分解す
る工程、及び、不純物を無機塩基を用いて分解する工程
を行うことを特徴とする、プラバスタチン又はその薬理
上許容される塩の単離・精製方法を挙げることができ
る。

【００７８】プラバスタチン又はその薬理上許容される
塩の不純物を無機酸により分解する工程は、不活性溶媒
の存在下又は非存在下（好適には、存在下）、プラバス
タチン又はその薬理上許容される塩を、ｐＨ２乃至５を
付与する条件（好適にはｐＨ３乃至４）で行われる。

【００７９】不純物の無機酸分解で使用される「無機
酸」とは、通常、酸として用いられる無機物質であれば
特に限定はないが、例えば、臭化水素酸、塩酸、硫酸、
過塩素酸、リン酸、硝酸のような無機酸を挙げることが
でき、好適には、リン酸又は硫酸である。

【００８０】反応温度及び反応時間は、ｐＨ値にも依存
するが、基本的には、反応温度が低ければ反応時間は長
くする必要があり、反応温度が高ければ反応時間は短く
する必要があるが、例えば、２０℃〜８０℃（好適に
は、４０℃〜６０℃）にて、１分間乃至６時間（好適に
は、５分間乃至２０分間）、処理することにより行なわ
れる。

【００８１】不純物の無機酸分解で使用される「不活性
溶媒」は、通常、溶媒として使用されるものであれば特
に限定はないが、例えば、メタノ−ル、エタノ−ル、ｎ
−プロパノ−ル、イソプロパノ−ル、ｎ−ブタノ−ル、
イソブタノ−ル、ｔ−ブタノ−ル、イソアミルアルコ−
ル、ジエチレングリコール、グリセリン、オクタノー
ル、シクロヘキサノール、メチルセロソルブのようなア
ルコ−ル類；水；水と上記有機溶媒との混合溶媒；であ
り、好適には、水又は水と上記有機溶媒との混合溶媒で
あり、最も好適には、水又は水とエタノ−ルとの混合溶
媒である。

【００８２】反応終了後、目的化合物であるプラバスタ
チンは常法に従って、反応液から採取される。例えば、
酢酸エチルのような水と混和しない有機溶媒を加え、目
的化合物を含む有機層を分離し、水等で洗浄して、溶剤
を留去することによって得られる。更に必要ならば、活
性炭を加えて脱色し、ろ過して活性炭を除去した後、水
酸化ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエ
トキシドのような塩を形成する試薬を加え、ロータリエ
バポレーター等により減圧下濃縮して、プラバスタチン
の塩を得ることができる。

【００８３】プラバスタチン又はその薬理上許容される
塩の不純物を無機塩基で分解する工程は、不活性溶媒の
存在下又は非存在下（好適には、存在下）に、プラバス
タチン又はその薬理上許容される塩を、ｐＨ１０〜１４
を付与する条件（好適には、ｐＨ１１〜１３）で行われ
る。

【００８４】不純物の無機塩基分解で使用される「無機
塩基」とは、通常の反応において塩基として使用される
無機物質であれば特に限定はないが、例えば、炭酸リチ
ウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムのようなアルカリ
金属炭酸塩類；炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウ
ム、炭酸水素カリウムのようなアルカリ金属重炭酸塩
類；水素化リチウム、水素化ナトリウム、水素化カリウ
ムのようなアルカリ金属水素化物類；水酸化リチウム、
水酸化ナトリウム、水酸化カリウムのようなアルカリ金
属水酸化物類；リチウムメトキシド、ナトリウムメトキ
シド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔ−ブトキシド
のようなアルカリ金属アルコキシド類を挙げることがで
き、好適には、アルカリ金属水酸化物類であり、最も好
適には、水酸化ナトリウムである。

【００８５】反応温度及び反応時間は、ｐＨ値にも依存
するが、基本的には、反応温度が低ければ反応時間は長
くする必要があり、反応温度が高ければ反応時間は短く
する必要があるが、例えば、−１０℃〜１１０℃（好適
には、０℃〜１００℃）にて、１５分乃至６０時間（好
適には、３０分間乃至７２時間）、処理することにより
行なわれ、より好適には、０℃付近で、３０時間前後で
ある。

【００８６】不純物の無機塩基分解で使用される「不活
性溶媒」は、本反応に不活性なものであれば特に限定は
ないが、不純物の無機酸分解で使用される不活性溶媒と
同様のものを挙げることができる。

【００８７】反応終了後、目的化合物であるプラバスタ
チンは常法に従って、上記反応液から採取される。例え
ば、硫酸水溶液のような酸を加え、酢酸エチルのような
水と混和しない有機溶媒を加え、目的化合物を含む有機
層を分離し、水等で洗浄して、溶剤を留去することによ
って得られる。更に必要ならば、活性炭を加えて脱色
し、ろ過して活性炭を除去した後、ナトリウムメトキシ
ド、ナトリウムエトキシド、水酸化ナトリウムのような
塩を形成する試薬を加え、ロータリエバポレーター等に
より減圧下濃縮して、プラバスタチンの塩を得ることが
できる。

【００８８】更に、本発明の単離・精製方法は、得られ
たプラバスタチン塩を結晶化する工程を含んでいてもよ
く、結晶化する方法は、上述のように常法に従って行う
ことができる。

【００８９】なお、本発明の精製度の分析は、、高性能
液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を介して行うこと
ができる。ＨＰＬＣの測定条件は、 Ａ：移動相：20%アセトニトリル、30%メタノール、50%T
EAP緩衝液（0.3%Triethylamine-H₃PO₄（ｐH3.2））； 検出波長：UV２３８nm； カラム：Waters社製逆相カラムSymmetry C18 3.5μm,φ
4.6mm×15cm； 流量：1ml/min Ｂ：移動相：メタノール：水：酢酸(100)：トリエチル
アミン混液(600:400:1:1); 検出波長：UV２３８nm； カラム：エルマ光学製カラムERC‐ODS‐1262 φ6mm×1
0cm； カラム温度：30℃； 流量：1ml/min Ｃ：移動相：メタノール：水：酢酸(100)：トリエチル
アミン混液(450:550:1:1)； 検出波長：UV２３８nm； カラム：ＢＥＣＫＭＡＮ社製カラムＵＬＴＲＡＳＰＨＥ
ＲＥ ODS φ4．6mm×15cm 5μm； カラム温度：25℃； 流量：1.3ml/min である。

【００９０】以下に、実施例を示し、本発明を更に詳細
に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるもの
ではない。

【００９１】

【実施例】実施例１ 培養濃縮液より酢酸n-ブチルを用
いた抽出 （１ａ）培養液の濃縮 変換培養を終えたプラバスタチン培養液10 Lを水酸化ナ
トリウムでpH12としたのち、50℃に加温し30分間撹拌し
た。培養液を室温に冷却後、ろ過助剤として500 gのセ
ライト545（商標）（セライト コーポレーション社
製）を加えてろ過した。分離した菌体に水を3 L加え、
再度懸濁させた後ろ過した。得られた２つの濃縮液を合
併し10 Lの培養濃縮液を得た。 （１ｂ）酢酸n-ブチルを用いた抽出 得られた培養濃縮液を25%硫酸でpH5.7とした後、5 Lの
酢酸n-ブチルを加え撹拌してプラバスタチンを抽出し
た。分離した水層を75%硫酸でpH5.7とした後、5Lの酢酸
n-ブチルを加えて撹拌し抽出した。得られた２つの酢酸
n-ブチル層を合併し、これに2 Lの飽和食塩水を加えて
撹拌して洗浄した。上層を分離して得た8Lの抽出液に1
Lの水を加え、撹拌しながら25%水酸化ナトリウムを加え
てpH9.5とした後、水層を分離してプラバスタチンのナ
トリウム塩水溶液1 Lを得た。ＨＰＬＣ（条件Ａ）によ
るプラバスタチンナトリウムの純度は、90％以上であっ
た。本実施例の結果より、酢酸n-ブチルを用いることに
より、高純度のプラバスタチンナトリウムが得られてい
ることが明らかである。

【００９２】実施例２ 培養濃縮液より酢酸n-プロピル
を用いた抽出 酢酸n-ブチルのかわりに酢酸n-プロピルを用いて、実施
例１と同様に処理をし、プラバスタチンのナトリウム塩
水溶液を得た。ＨＰＬＣ（条件Ａ）によるプラバスタチ
ンナトリウムの純度は、85％以上であった。本実施例の
結果より、酢酸n-プロピルを用いることにより、高純度
のプラバスタチンナトリウムが得られていることが明ら
かである。

【００９３】実施例３ リン酸による不純物の分解 実施例１で得られた水溶液［ＨＰＬＣ（条件Ａ）による
化合物（Ｉ）／プラバスタチンナトリウムは9.3％］に3
50 mlのエタノールを加え、リン酸でpH3.0に調整した後
50℃で10分間撹拌した。ＨＰＬＣ（条件Ａ）による化合
物（Ｉ）／プラバスタチンナトリウムは0.9％であっ
た。本実施例の結果より、リン酸を用いることにより、
化合物（Ｉ）が顕著に除去されていることが明らかであ
る。

【００９４】実施例４ 硫酸による不純物の分解 リン酸のかわりに硫酸を用いて、実施例３と同様に処理
をした。ＨＰＬＣ（条件Ａ）による化合物（Ｉ）／プラ
バスタチンナトリウムは3％であった。本実施例の結果
より、硫酸を用いることにより、化合物（Ｉ）が顕著に
除去されていることが明らかである。

【００９５】実施例５ 水酸化ナトリウムによる不純物
の分解、抽出及び結晶化 （５ａ）水酸化ナトリウムによる不純物の分解 プラバスタチンの培養濃縮液500ml［ＨＰＬＣ（条件
Ｂ）による化合物（Ｉ）／プラバスタチンナトリウムは
12.1％］を100℃まで加熱した後、2当量分の水酸化ナト
リウムを水溶液として添加した（ｐH11.3）。100℃で3
時間攪拌後冷却し、室温にて20％硫酸水溶液でpH8.5に
調整し、水酸化ナトリウムによるアルカリ処理液を得た
(プラバスタチンナトリウムの含有量：56.6g)。ＨＰＬ
Ｃ（条件Ｂ）による化合物（Ｉ）／プラバスタチンナト
リウムは0.41％であった。本実施例の結果より、水酸化
ナトリウムを用いることにより、化合物（Ｉ）が顕著に
除去されていることが明らかである。 （５ｂ）水酸化ナトリウムによる不純物の分解後の抽出
及び結晶化 （５ａ）で得られた水酸化ナトリウムによるアルカリ処
理液260g(プラバスタチンナトリウムの含有量：19g)に
酢酸n-ブチルを用いて、実施例（１ｂ）と同様にして水
層を分離してプラバスタチンのナトリウム塩水溶液を得
た。

【００９６】得られたプラバスタチンのナトリウム塩水
溶液を約1/2量まで減圧濃縮した後、水77mlを加え再び
減圧濃縮した。濃縮液をプラバスタチンのフリー体に対
して6倍量となるように水で液量を調整して0〜5℃まで
冷却し、20％硫酸水溶液を滴下しpH4.6でプラバスタチ
ンのフリー体結晶を析出し、1晩攪拌した後にろ過し
た。結晶を冷希硫酸(pH4)で洗浄し、プラバスタチンの
フリー体湿品結晶を得た。

【００９７】プラバスタチンのフリー体湿品に酢酸エチ
ル63mlを加え室温で溶解した後、室温で攪拌しながら20
％硫酸水溶液でpH4.5に調整し、攪拌抽出分液後酢酸エ
チル層に水21mlを加え抽出洗浄後分液した。抽出洗浄し
た酢酸エチル層にエタノール25mlを加えた後、室温で攪
拌しながら6％水酸化ナトリウム・エタノール溶液でpH8.
7に調整しナトリウム塩化液を得た。この後、常法に従
って結晶化し、プラバスタチンナトリウム塩の結晶8.95
gを得た。この方法で得られたプラバスタチンナトリウ
ム塩のHPLC（条件Ｃ）による純度は99.67%であり、化合
物（Ｉ）／プラバスタチンナトリウム=0.1％であった。

【００９８】本実施例の結果より、水酸化ナトリムによ
る不純物の分解工程及び酢酸n-ブチルを用いた抽出工程
によって、化合物（Ｉ）が顕著に除去されていることが
明らかである。

【００９９】実施例６ 酢酸ｎ-ブチルによる抽出、リ
ン酸による不純物の分解、及び結晶化 実施例３で得られた酸処理液に、25%水酸化ナトリウム
を加えてpH12としさらに50℃で30分撹拌を続けた。溶液
を減圧下ロータリーエバポレーターで1 Lまで濃縮し、
プラバスタチンナトリウム塩を含有する濃縮液を得た。
得られた濃縮液を硫酸でpH4.0に調整した後、プラバス
タチンを0.5 Lの酢酸エチルで抽出し、抽出液を水0.2 L
で洗浄した。抽出液に5 gの活性炭を加え10分間放置し
た後、ろ紙でろ過し、ろ液を25%水酸化ナトリウムでpH
8.7に調整したのち、減圧下ロータリーエバポレーター
で乾固して50 gのプラバスタチンナトリウム塩を得た。
常法に従って結晶化し、34 gのプラバスタチンナトリウ
ム塩の粗結晶を得た。粗結晶を同じ組成の溶媒を用いて
再結晶してプラバスタチンナトリウム塩の純粋な結晶 3
2 gを得た。

【０１００】この方法で得られたプラバスタチンナトリ
ウム塩のHPLC（条件Ａ）による純度は99.7%以上であ
り、化合物（Ｉ）／プラバスタチンナトリウム=0.1％で
あった。

【０１０１】本実施例より、酢酸ｎ-ブチルによる抽出
及びリン酸による不純物の分解工程によって、化合物
（Ｉ）が0.1％以下まで除去され、高純度のプラバスタ
チンナトリウムが得られたことが明らかである。

【０１０２】更に、酢酸ｎ-ブチルによる抽出及びリン
酸による不純物の分解工程に、水酸化ナトリウムによる
不純物の分解工程を加えることにより、化合物（Ｉ）が
更に除去され、高純度のプラバスタチンナトリウムが得
られたことが明らかである。

【０１０３】実施例７ 水酸化ナトリウムによる不純物
の分解、硫酸による分解及び結晶化 実施例（５ａ）で得られた水酸化ナトリウムによるアル
カリ処理液から、酢酸エチルを用いて、実施例（５ｂ）
と同様にして抽出し、プラバスタチンのナトリウム塩水
溶液を得た。得られた水溶液に350 mlのエタノールを加
え、硫酸でpH1.5に調整した後20℃で1時間撹拌した。常
法に従って結晶化し、プラバスタチンナトリウム塩の純
粋な結晶を得た。ＨＰＬＣ（条件Ｃ）による化合物
（Ｉ）／プラバスタチンナトリウム=0.1％以下であっ
た。

【０１０４】本実施例より、硫酸による不純物の分解及
び水酸化ナトリウムによる不純物の分解工程によって、
化合物（Ｉ）が0.1％以下まで除去され、高純度のプラ
バスタチンナトリウムが得られた。

【０１０５】比較例１酢酸エチルによるプラバスタチンの抽出 酢酸n-ブチルのかわりに酢酸エチルを用いて、実施例
（１ａ）と同様に処理をし、プラバスタチンのナトリウ
ム塩水溶液を得た。ＨＰＬＣ（条件Ａ）によるプラバス
タチンナトリウムの純度は、約70％であった。

【０１０６】培養濃縮液から、プラバスタチン類を抽出
する有機溶媒が、酢酸エチル、酢酸n-プロピル、及び酢
酸n-ブチルである場合の、化合物（Ｉ）／プラバスタチ
ンナトリウム（％）は、以下のとおりである。下記結果
より、酢酸エチルで抽出するよりも、酢酸n-プロピル及
び酢酸n-ブチルにより抽出することによって、高純度の
プラバスタチンが得られていることが明らかである。

【０１０７】

【表１】 実施例（１ａ） 実施例２ 比較例１ 抽出溶媒 酢酸n-ブチル 酢酸n-プロピル 酢酸エチル フ゜ラハ゛スタチン の純度（％） ＞９０ ＞８５ 約７０

【０１０８】

【発明の効果】本発明の精製方法は、カラムクロマトグ
ラフィーのような煩雑かつ生産性の低く、工業的生産に
向かない方法を使用することなく、従って、工程生産性
及びプラバスタチンの純度を損なうことなく、高純度の
プラバスタチン又はその薬理上許容される塩を得ること
ができた。

【０１０９】また、本発明の単離・精製方法により上記
化合物（Ｉ）をプラバスタチンに対して０．１％以下の
量まで除去された。

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成１５年２月６日（２００３．２．６）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

【化１】 を有する不純物を無機酸を用いて、４０〜６０℃の反応
温度で分解する工程を行うことを特徴とする、プラバス
タチンナトリウム又はその薬理上許容される塩の単離・
精製方法。

フロントページの続き (72)発明者 鈴木 睦夫 神奈川県平塚市四之宮１丁目12番１号 三 共株式会社内 (72)発明者 浜野 潔 東京都品川区広町１丁目２番58号 三共株 式会社内 (72)発明者 高松 安行 福島県いわき市泉町下川字大剱389−４ 三共株式会社内 (72)発明者 萩澤 稔 神奈川県平塚市四之宮１丁目12番１号 三 共株式会社内 Ｆターム(参考） 4H006 AA02 AD13 AD15 AD30 BC51 BE03 BE04 BE10 BJ30 BN20 BS10

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】プラバスタチン又はその薬理上許容される
   塩を単離・精製する工程において、不純物を無機酸を用
   いて、分解する工程を行うことを特徴とする、プラバス
   タチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製方法。
2. 【請求項２】無機酸が、リン酸又は硫酸である、請求項
   １に記載のプラバスタチン又はその薬理上許容される塩
   の単離・精製方法。
3. 【請求項３】無機酸を用いて分解する工程のｐＨが、
   １．５又は２乃至５である、請求項１又は請求項２に記
   載のプラバスタチン又はその薬理上許容される塩の単離
   ・精製方法。
4. 【請求項４】無機酸を用いて分解する工程における反応
   温度が、２０℃〜８０℃である、請求項１乃至３より選
   択されるいずれか一項に記載のプラバスタチン又はその
   薬理上許容される塩の単離・精製方法。
5. 【請求項５】無機酸を用いて分解する工程のｐＨが１．
   ５であるときの反応温度は、２０℃であり、無機酸を用
   いて分解する工程のｐＨが２乃至５であるときの反応温
   度は、４０℃〜６０℃である、請求項１乃至３より選択
   されるいずれか一項に記載のプラバスタチン又はその薬
   理上許容される塩の単離・精製方法。
6. 【請求項６】プラバスタチン又はその薬理上許容される
   塩を単離・精製する工程において、さらに不純物を無機
   塩基を用いて分解する工程を行うことを特徴とする、請
   求項１乃至５より選択されるいずれか一項に記載のプラ
   バスタチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製方
   法。
7. 【請求項７】無機塩基が、アルカリ金属水酸化物類であ
   る、請求項６に記載のプラバスタチン又はその薬理上許
   容される塩の単離・精製方法。
8. 【請求項８】無機塩基を用いて分解する工程における反
   応温度が、５０℃〜１００℃である、請求項６又は請求
   項７に記載のプラバスタチン又はその薬理上許容される
   塩の単離・精製方法。
9. 【請求項９】無機塩基を用いて分解する工程における反
   応温度が、５０℃である、請求項６又は請求項７に記載
   のプラバスタチン又はその薬理上許容される塩の単離・
   精製方法。
10. 【請求項1０】無機塩基を用いて分解する工程における
    反応温度が、１００℃である、請求項６又は請求項７に
    記載のプラバスタチン又はその薬理上許容される塩の単
    離・精製方法。