JP2003066033A - マイクロプレート及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 ウエルの微小化が容易でウエル表面を親水性
化して生体成分の吸着を低く抑えたマイクロプレート、
逆に疎水性化して、抗原等の標的タンパク質を吸着また
は共有結合させることができる表面としたマイクロプレ
ート、更に、親水性のウエル底部と疎水性のウエル壁部
を持つ水溶液が外部に溢れにくいマイクロプレート等の
種々の物性を有するマイクロプレート及びその簡便な製
造方法を提供する。 【解決手段】 試料収納用凹部であるウエルが基材上に
多数配列して設けられ、前記ウエルの壁部と底部の少な
くとも一つが活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）
の硬化物から成ることを特徴とするマイクロプレート。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、抗原抗体反応、酵
素反応、ＤＮＡの反応や分析、その他の化学、生化学微
量反応、並びに反応生成物の定性的または定量的な測定
に使用されるマイクロプレート及びその製造方法に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】医学特に診断分野、製薬及びバイオ分野
では、９６穴マイクロプレートの様なマイクロプレート
を使用した反応と分析が多く行われている。近年、より
高価な試薬（例えばＤＮＡ）等による診断の出現や、検
出器機の精度向上、反応と分析の時間短縮のために、使
用される機器並びに試薬量が微小化されてきた。それに
伴い、反応と分析用の容器としてのマイクロプレートの
微小化及びマイクロプレートへの生体成分の吸着防止が
必要になってきた。

【０００３】しかしながら、現在使用されているマイク
ロプレートは、射出成形で製造された９６穴型、３８４
穴型及び１５３６穴型の３種類のものである。使用され
るポリマーは主にポリスチレンやポリカーボネートのよ
うな熱可塑性樹脂であり、これらの樹脂は疎水性で、タ
ンパクなどの生体成分に対する吸着性が強いという欠点
を有している。

【０００４】一方、ウエル底部の直径を０．５ｍｍ以下
にするマイクロプレートの微小化に関しては、従来の射
出成形法による製造では限界であり、また、ウエル内表
面への官能基付与などによる生体成分の低吸着型のマイ
クロプレートや、ウエルの底部が親水性で壁部が疎水性
のような底部と壁部の表面物性が異なるマイクロプレー
トを製造することは、熱可塑性樹脂を用いた従来の射出
成型法では製造が困難であった。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明が解決
しようとする課題は、試料収納凹部であるウエルの微小
化が容易で、ウエル表面を親水性化して生体成分の吸着
を低く抑えたマイクロプレート、逆に疎水性化して、抗
原等の標的タンパク質を吸着または共有結合させること
ができる表面としたマイクロプレート、更に、親水性の
ウエル底部と疎水性のウエル壁部を持つ水溶液が外部に
溢れにくいマイクロプレート等の種々の物性を有するマ
イクロプレート及びその簡便な製造方法を提供すること
にある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、基材上に試料収納
用凹部であるウエルが多数配列して設けられたマイクロ
プレートを、ウエルの壁部と底部の少なくとも一つを活
性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）の硬化物で構成
し、更に用いる活性エネルギー線硬化性樹脂組成物の種
類を選択することにより、上記課題を解決できることを
見出し、本発明を完成するに至った。

【０００７】即ち、本発明は、試料収納用凹部であるウ
エルが基材上に多数配列して設けられ、前記ウエルの壁
部と底部の少なくとも一つが活性エネルギー線硬化性樹
脂組成物（Ａ）の硬化物から成ることを特徴とするマイ
クロプレートを提供する。

【０００８】本発明は、下記の工程を含む、試料収納用
凹部であるウエルが基材上に多数配列して設けられたマ
イクロプレートの製造方法を提供する。 （１）活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）を基材
上に塗布または印刷して基材上に活性エネルギー線硬化
性樹脂組成物（Ａ）から成る樹脂層（Ｂ１）を形成する
第１工程と、（２）前記樹脂層（Ｂ１）上にパターン化
したマスクをのせて活性エネルギー線を照射し、ウエル
となる部分以外の樹脂層を硬化させ、次いで未硬化の樹
脂層を除去してウエルを形成させる第２工程。

【０００９】更に本発明は、下記の工程を含む、試料収
納用凹部であるウエルが基材上に多数配列して設けられ
たマイクロプレートの製造方法をも提供する。 （１）活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）を基材
上に塗布または印刷して、基材上に活性エネルギー線硬
化性樹脂組成物（Ａ）から成る樹脂層（Ｂ１）を形成す
る第１工程、（２）前記樹脂層（Ｂ１）にエネルギー線
を照射して、前記樹脂層（Ｂ１）を半硬化させる第２工
程、

【００１０】（３）半硬化させた前記樹脂層（Ｂ１）上
に前記樹脂層（Ｂ１）の活性エネルギー線硬化性樹脂組
成物（Ａ）と同一もしくは異なる組成の活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物を塗布または印刷し、半硬化させた
前記樹脂層（Ｂ１）上に更に活性エネルギー線硬化性樹
脂組成物から成る樹脂層（Ｂ２）を形成する第３工程、
及び、（４）前記樹脂層（Ｂ２）上にパターン化したマ
スクをのせて活性エネルギー線を照射してウエルとなる
部分以外の樹脂層を硬化させ、次いで未硬化の樹脂層を
除去してウエルを形成させる第４工程。

【００１１】

【発明の実施の形態】本発明に用いる活性エネルギー線
硬化性樹脂組成物（Ａ）は、紫外線、可視光、赤外線の
如き活性エネルギー線の照射により重合し、硬化物とな
る活性エネルギー線重合性化合物を含むものであれば良
く、これら活性エネルギー線重合性化合物はラジカル重
合性化合物、アニオン重合性化合物、カチオン重合性化
合物などのいずれであっても良い。

【００１２】これらの活性エネルギー線重合性化合物と
しては、例えば、分子内に、ビニル基、ビニリデン基、
アクリロイル基、メタクリロイル基［以下併せて（メ
タ）アクリロイル基と称する。（メタ）アクリル、（メ
タ）アクリレート等についても同様である］、マレイミ
ド基などを有する化合物が挙げられるが、これらの中で
も活性エネルギー線の照射による重合速度が早いことか
ら、（メタ）アクリレートが好ましい。

【００１３】上記の活性エネルギー線重合性化合物は親
水性の重合性化合物と疎水性の重合性化合物、及び両親
媒性の重合性化合物の３種類に分けることができる。こ
こで言う親水性とは上記の重合性化合物の硬化物が水と
の接触角が約５５°以下の重合性化合物であることをい
い、また、疎水性とは、その硬化物が水との接触角が約
５５°を越える重合性化合物のことを言う。

【００１４】１分子中に１個の（メタ）アクリロイル基
を有する疎水性の重合性化合物（以下、単官能化合物と
いう）としては、例えば、ブチル（メタ）アクリレー
ト、ラウリル（メタ）アクリレート、トリフルオロエチ
ル（メタ）アクリレート、オクタフルオロペンチル（メ
タ）アクリレート、ヘプタデカフルオロデシル（メタ）
アクリレート、３−（メタ）アクリロイルプロピルトリ
ス（トリメチルシロキシ）シラン等が挙げられる。

【００１５】１分子中に２個の（メタ）アクリロイル基
を有する疎水性の重合性化合物（以下、２官能化合物と
いう）として、例えば、１，６−ヘキサンジオールジ
（メタ）アクリレート、ポリプロピレングリコールジ
（メタ）アクリレート、ヒドロキシピバリン酸ネオペン
チルグリコールジ（メタ）アクリレート、３−アクリロ
イルオキシグリセリンモノメタクリレート、

【００１６】２，２’−ビス（４−（メタ）アクリロイ
ルオキシポリエチレンオキシフェニル）プロパン２，
２’−ビス（４−（メタ）アクリロイルオキシポリプロ
ピレンオキシフェニル）プロパン、ジシクロペンタニル
ジ（メタ）アクリレート、ビス［（メタ）アクリロイル
オキシエチル］ヒドロキシエチルイソシアネート、フェ
ニルグリシジルエーテルアクリレートトリレンジイソシ
アネート、アジピン酸ジビニル等が挙げられる。

【００１７】１分子中に３個の（メタ）アクリロイル基
を有する疎水性の重合性化合物（以下、３官能化合物と
いう）としては、例えば、トリメチロールプロパントリ
（メタ）アクリレート、トリメチロールエタントリ（メ
タ）アクリレート、トリス［（メタ）アクリロイルオキ
シエチル］イソシアネート、ペンタエリスリトールトリ
（メタ）アクリレート等が挙げられる。

【００１８】１分子中に４個の（メタ）アクリロイル基
を有する疎水性の重合性化合物（以下、４官能化合物と
いう）として、例えば、ペンタエリスリトールテトラ
（メタ）アクリレート、グリセリンジ（メタ）アクリレ
ートヘキサメチレンジイソシアネート等が挙げられる。
また、１分子中に５個の（メタ）アクリロイル基を有す
る疎水性の重合性化合物（以下、５官能化合物という）
として、例えば、ジペンタエリスリトールモノヒドロキ
シペンタ（メタ）アクリレート等が挙げられる。

【００１９】１分子中に６個の（メタ）アクリロイル基
を有する疎水性の重合性化合物（以下、６官能化合物と
いう）として、例えば、ジペンタエリスリトールヘキサ
（メタ）アクリレート、などが挙げられる。また、疎水
性の重合性化合物として、ビスフェノールＡ−ジエポキ
シ−（メタ）アクリル酸付加物の如きエポキシ樹脂の
（メタ）アクリル酸エステル、ポリエーテル樹脂の（メ
タ）アクリル酸エステル、ポリブタジエン樹脂の（メ
タ）アクリル酸エステル、分子末端に（メタ）アクリル
基を有するポリウレタン樹脂なども挙げられる。これら
疎水性の活性エネルギー線重合性化合物は、単独で用い
ることも、２種以上の化合物を混合して用いることもで
きる。

【００２０】一方、親水性の活性エネルギー線重合性化
合物としては、例えば、メトキシポリエチレングリコー
ル（メタ）アクリレートの如きポリエチレングリコール
親水鎖を有する重合性化合物や、（メタ）アクリルアミ
ド、Ｎ，Ｎ−ジメチル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−イ
ソプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチル
アミノプロピル（メタ）アクリルアミド、Ｎ−メチレン
ビス（メタ）アクリルアミドの如きアミド基を有する
（メタ）アクリレートや、

【００２１】（メタ）アクリロイルオキシエチルスルホ
ン酸ナトリウム、スルホン酸ナトリウム−２−メチルプ
ロパン−２−アクリルアミドの如き陰イオンを有する
（メタ）アクリレートや、トリ−ブチル｛２−（メタ）
アクリロイルオキシエチル｝ホスホニウムクロライド、
ジメチルアミノエチル（メタ）アクリレート四級化物の
如き陽イオンを有する（メタ）アクリレートや、

【００２２】２−（メタ）アクリロイルオキシプロピル
ハイドロゲンフタレート、２−アクリロイルオキシエチ
ル琥珀酸、（メタ）アクリル酸、２−（メタ）アクリロ
イルオキシプロピルヘキサヒドロハイドロゲンフタレー
トの如きカルボキシル基を有する（メタ）アクリレート
や、ヒドロキシエチル（メタ）アクリレート、ヒドロキ
シプロピル（メタ）アクリレートの如き水酸基を有する
（メタ）アクリレートや、

【００２３】モノ｛２−（メタ）アクリロイルオキシエ
チル｝アシッドホスフェート［ＣＨ_２＝Ｃ（Ｒ）ＣＯＯ
ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＰＯ（ＯＨ）_２、ここで、Ｒ＝Ｈ、−Ｃ
Ｈ_３］、１０−（メタ）アクリロイルオキシデシルジヒ
ドロジエンホスフェート［ＣＨ _２＝Ｃ（Ｒ）ＣＯＯ（Ｃ
Ｈ_２）_１０ＯＰＯ（ＯＨ）_２、ここで、Ｒ＝Ｈ、−ＣＨ
_３］、β−（メタ）アクリロイルオキシエチルフェニル
リン酸［ＣＨ_２＝Ｃ（Ｒ）ＣＯＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＰＯ
（ＯＨ）ＯＣ_６Ｈ_５、ここで、Ｒ＝Ｈ、ＣＨ_３］の如き
リン酸（メタ）アクリレートや、糖（メタ）アクリレー
ト及びアミノ酸（メタ）アクリレート等が挙げられる。
これらの親水性重合性化合物は、単独で用いることも、
２種以上の化合物を混合して用いることもできる。

【００２４】更に、本発明に用いる活性エネルギー線硬
化性樹脂組成物（Ａ）に両親媒性の活性エネルギー線重
合性化合物を含有させることにより、マイクロプレート
のウエル表面に親水性を付与することが出来る。ここで
言う両親媒性の活性エネルギー線重合性化合物とは、分
子内に親水基と疎水基の両方を含有し、活性エネルギー
線の照射により、活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ）に含有される活性エネルギー線重合性化合物と共
重合することが可能な重合性官能基を有するものであ
る。

【００２５】両親媒性の活性エネルギー線重合性化合物
が有する親水基としては、例えば、アミノ基、四級アン
モニウム基、フォスフォニウム基の如きカチオン基；ス
ルホン基、燐酸基、カルボキシル基の如きアニオン基；
水酸基、ポリエチレングリコール鎖、アミド基の如きノ
ニオン基または重合鎖；アミノ酸の如き両性イオン基等
が挙げられる。中でも、本発明に用いる両親媒性の活性
エネルギー線重合性化合物が有する親水基としては、窒
素雰囲気中での重合による親水性付与の点から、ポリエ
ーテル鎖、特に繰り返し数６〜２０のポリエチレングリ
コール鎖を有する化合物が好ましい。

【００２６】一方、両親媒性の活性エネルギー線重合性
化合物の疎水基としては、例えば、アルキル基、アルキ
レン基、アルキルフェニル基、長鎖アルコキシ基、フッ
素置換アルキル基、シロキサン基などが挙げられる。中
でも、本発明に用いる両親媒性の活性エネルギー線重合
性化合物は、疎水基としては、炭素数６〜２０のアルキ
ル基またはアルキレン基を有する化合物であることが好
ましい。炭素数６〜２０のアルキル基またはアルキレン
基は、例えば、アルキルフェニル基、アルキルフェノキ
シ基、アルコキシ基、フェニルアルキル基などの形で含
有されていてもよい。

【００２７】本発明に使用する両親媒性の活性エネルギ
ー線重合性化合物は、中でも、親水基として繰り返し数
６〜２０のポリエチレングリコール鎖を有し、且つ、疎
水基として炭素原子数６〜２０のアルキル基またはアル
キレン基を有する化合物であることが好ましい。これら
両親媒性の活性エネルギー線重合性化合物の中でも、ノ
ニルフェノキシポリエチレングリコール（ｎ＝８〜１
７）（メタ）アクリレート、ノニルフェノキシポリプロ
ピレングリコール（ｎ＝８〜１７）（メタ）アクリレー
トが特に好ましい。

【００２８】これらの両親媒性の活性エネルギー線重合
性化合物を活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）に
含有させることにより、該樹脂組成物を窒素雰囲気中で
重合させても、良好な親水性かつ低タンパク吸着性の樹
脂硬化物表面が得られるので好ましい。

【００２９】活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）
に含有させる両親媒性の活性エネルギー線重合性化合物
と（メタ）アクリレート等の他の活性エネルギー線重合
性化合物との好ましい割合は、両親媒性の活性エネルギ
ー線重合性化合物及び他の活性エネルギー線重合性化合
物の種類によって異なるが、（メタ）アクリレートを含
む他の活性エネルギー線重合性化合物１重量部に対し
て、両親媒性の活性エネルギー線重合性化合物を０．１
重量部以上含むことが好ましく、０．２重量部以上であ
ることが更に好ましい。０．１重量部未満であると、高
い親水性の表面を形成することが困難となる。

【００３０】また、両親媒性の活性エネルギー線重合性
化合物が（メタ）アクリレートを含む他の活性エネルギ
ー線重合性化合物１重量部に対して、５重量部以下であ
ることが好ましく、３重量部以下であることが更に好ま
しい。５重量部よりも多い場合は、水に対して膨潤性に
なりがちである。

【００３１】本発明のマイクロプレートは、活性エネル
ギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）の架橋重合体からなるこ
とにより、耐溶剤性、耐熱性などの特性が向上し、好ま
しい。ここで言う架橋重合体とは、２官能以上の活性エ
ネルギー線重合性化合物を使用することにより、架橋重
合による硬化物（重合体）の生成と同時にマイクロプレ
ートの構造が形成され、新たな成形加工が不要なもので
ある。

【００３２】また、マイクロプレートに機能性（特に抗
原などのタンパク質との高吸着性または高結合性等）を
付与できる活性エネルギー線重合性化合物として、例え
ば、アクロレインの如きアルデヒド基を有する（メタ）
アクリレートや、（メタ）アクリロイルクロライドの如
き（メタ）アクリレートの酸ハロゲン化物、（メタ）ア
クリロイルオキシエチルイソシアネートの如きイソシア
ナト基（−NCO）を有する（メタ）アクリレートや、グ
リシジル（メタ）アクリレートの如きエポキシ基を有す
る（メタ）アクリレート等が挙げられる。

【００３３】これらの活性エネルギー線重合性化合物
は、単独、あるいは２種以上の活性エネルギー線重合性
化合物または上記の疎水性の活性エネルギー線重合性化
合物、または親水性の活性エネルギー線重合性化合物と
混合して、活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）に
用いることができる。

【００３４】本発明が提供できるマイクロプレートのウ
エル横断面の形状は特に限定されないが、例えば、円
形、楕円形、三角形、正方形、長方形、六角形などの形
状が挙げられる。中でも洗浄のしやすさや底面積の大き
さより、円形や正方形以上の多角形の方が好ましい。ま
た、本発明が提供できるマイクロプレートのウエル底部
面積も特に限定されないが、反応・分析に使用される場
合の操作性の観点から、７×１０^−５ｍｍ^２〜３８ｍｍ
^２であることが好ましく、試薬量の微量化の観点から、
ウエル底部面積が７×１０^−５ｍｍ^２〜０．１ｍｍ^２で
あることが更に好ましい。

【００３５】ウエル内の試料の洗浄性やウエル内の乾燥
性、及びウエル底部への透過光を利用する測定の観点か
ら、本発明のマイクロプレートのウエルの底部／側壁部
の面積比は０．００５〜１０であることが好ましく、
０．０５〜１であることが更に好ましい。

【００３６】本発明の活性エネルギー線硬化性樹脂組成
物（Ａ）の硬化物からなるマイクロプレートは一般に透
明であるが、特にウエル底部が透明であるものは、透過
光を利用する測定に利用できるためにより好ましい。具
体的には、活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）の
硬化物からなるマイクロプレートのウエル底部の全光透
過率が７０％以上であることが好ましく、９０％以上で
あることが更に好ましい。

【００３７】更に、ウエルとウエルの間の距離も特には
限定されないが、操作性の点から、ウエルの直径（ウエ
ル形状が円以外の場合は同一底面積の円の直径とする）
／ウエルの中心間距離（ピッチ）の比が０．０１〜０．
５であることが好ましく、０．１〜０．３であることが
更に好ましい。

【００３８】本発明の製造方法に使用される基材の素材
は、活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）と同じ素
材であっても良いし、異なる素材であっても良い。マイ
クロプレートと異なる素材としては、活性エネルギー線
硬化性樹脂組成物（Ａ）の硬化物との接着性が良ければ
特に限定されず、金属、ガラス、不織布、熱可塑性樹
脂、熱硬化性樹脂及び活性エネルギー線硬化性樹脂から
なる群から選ばれる素材から成るシートであれば良い。

【００３９】例えば、ポリエチレンテレフタレート、ポ
リスチレン、ＡＢＳ樹脂、ポリカーボネート、塩化ビニ
ル、酢酸ビニル、ポリプロビレン、ポリスルホンなどの
熱可塑性樹脂、ウレタン系樹脂、（メタ）アクリル系樹
脂、ポリエステル系樹脂、アミノ樹脂、フェノール樹
脂、ガラス（特に無蛍光ガラス）、不織布、金属等が挙
げられる。

【００４０】また、本発明のマイクロプレートは、ウエ
ルの壁部と底部の素材を組み合わせることにより、下記
のような種々のマイクロプレートを製造することが出来
る。 （１）ウエル壁部が活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ）の硬化物からなり、ウエル底部も活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ）の硬化物からなるもの。 （２）ウエル壁部が活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ）の硬化物からなり、ウエル底部は活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ）と異なる組成の活性エネルギ
ー線硬化性樹脂組成物の硬化物からなるもの。

【００４１】（３）ウエル壁部が活性エネルギー線硬化
性樹脂組成物（Ａ）の硬化物からなり、ウエル底部は他
の基材（例えばガラス）からなるもの。 （４）ウエル壁部も底部も、その硬化物が疎水性である
活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）の硬化物か
らなるもの。 （５）ウエル壁部も底部も、その硬化物が親水性である
活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）の硬化物か
らなるもの。

【００４２】（６）ウエル壁部は、その硬化物が疎水性
である活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）の硬
化物からなり、ウエル底部は、その硬化物が親水性であ
る活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）の硬化物
からなるもの等が挙げられる。

【００４３】その硬化物が疎水性である活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ１）は、（Ａ１）の硬化物の水
との接触角が５５°を越える活性エネルギー線硬化性樹
脂組成物であり、その成分として、上記の疎水性の活性
エネルギー線重合性化合物を含むもので、更に該疎水性
の活性エネルギー線重合性化合物の種類によって、その
他の活性エネルギー線重合性化合物、例えば親水性の活
性エネルギー線重合性化合物や両親媒性の活性エネルギ
ー線重合性化合物を含有させてもよいが、得られた組成
物の硬化物の水接触角が５５°を越えるものであればよ
い。

【００４４】一方、その硬化物が親水性である活性エネ
ルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）とは、その硬化物の
水との接触角が５５°以下である活性エネルギー線硬化
性樹脂組成物である。その成分として、上記した親水性
の活性エネルギー線重合性化合物を含むもので、更に該
親水性の重合性化合物の種類により、その他の重合性化
合物、例えば疎水性の活性エネルギー線重合性化合物、
両親媒性の活性エネルギー線重合性化合物を含有させて
もよいが、得られた硬化物の水との接触角が５５°以下
になるものであればよい。

【００４５】換言すれば、用途に応じて、その硬化物が
疎水性の活性エネルギー線重合性化合物、親水性の活性
エネルギー線重合性化合物及び両親媒性の活性エネルギ
ー線重合性化合物を種類と含有割合とを調整することに
より、得られるマイクロプレートの表面の親水性と疎水
性とを任意に調整することが出来る。

【００４６】例えば、マイクロプレートのウエルの容積
が小さくなるにつれ、ウエル内の液が溢れ易くなり、隣
接するウエル間での汚染が発生しやすくなるが、ウエル
底部を親水性表面にし、その他の部分を疎水性にするこ
とにより、ウエル内から液が溢れにくくなり、隣接のウ
エルを汚染しにくくなる。上述した（１）〜（４）及び
（６）のマイクロプレートがこの用途に特に適してい
る。

【００４７】また、上記（５）のマイクロプレートはウ
エル壁部も底部も親水性である活性エネルギー線硬化性
樹脂組成物（Ａ２）の硬化物からなるマイクロプレート
であるが、このようなマイクロプレートを用いると、タ
ンパク質、酵素等の生体成分に対する吸着性が低くな
り、測定の感度、再現性が向上して好ましい。

【００４８】本発明のマイクロプレートの製造方法は大
きく分けて二つある。第一の製造方法は、（１）活性エ
ネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）を基材上に塗布また
は印刷して基材上に活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ）から成る樹脂層（Ｂ１）を形成する第１工程と、
（２）前記樹脂層（Ｂ１）上にパターン化したマスクを
のせて活性エネルギー線を照射し、ウエルとなる部分以
外の樹脂層（Ｂ１）を硬化させ、次いで未硬化の樹脂層
（Ｂ１）を除去してウエルを形成させる第２工程とから
なるマイクロプレートの製造方法である。

【００４９】本発明の製造方法に使用される活性エネル
ギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）、両親媒性の活性エネル
ギー線重合性化合物については、上記マイクロプレート
の説明に述べられたものと同じものであるので、ここで
は説明を省略する。

【００５０】活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）
の塗布方法（樹脂層（Ｂ１）の形成方法）は、活性エネ
ルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）が塗膜状に形成できれ
ば良く、特に限定されない。例えばコーターによる塗布
方法や、基材を活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ）に浸漬する塗布方法、活性エネルギー線硬化性樹
脂組成物（Ａ）の基材へのスプレーによる塗布方法、及
びスピンコーターによる塗布方法などが挙げられる。操
作の簡便さから、コーターによる塗布方法が好ましい。

【００５１】また、印刷はウエルの浅いマイクロプレー
トの製造に特に有効である。印刷方法としては特に限定
されないが、例えばスクリーン印刷、グラビア印刷、ス
タンプ印刷等の印刷方法が挙げられる。

【００５２】本発明の活性エネルギー線硬化性樹脂組成
物（Ａ）を硬化させるために活性エネルギー線を照射す
る方法は任意であり、例えば、照射不要部分をマスキン
グして照射する、或いはレーザーなどの活性エネルギー
線のビームを走査する、照射部分のみに焦点を結ばせる
等のフォトリソグラフの手法が利用できる。

【００５３】その他に、いわゆる光造形法によっても製
造できる。即ち、活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ）からなる樹脂層（Ｂ１）にエネルギー線をパター
ニング照射し、未照射部分の未硬化の樹脂層（Ｂ１）を
除去すること無く、その上に活性エネルギー線硬化性樹
脂組成物（Ａ）の第２層を置き（或いは活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ）の液面下に、第２層の厚みと
なる深さだけ第１層を沈め）第２層にエネルギー線をパ
ターニング照射し、この工程を繰り返す方法を採ること
も出来る。

【００５４】この際、パターニング照射した活性エネル
ギー線が表面層のみを硬化させ、下の層の非照射部を硬
化させないようにするためには、活性エネルギー線硬化
性樹脂組成物（Ａ）の活性エネルギー線吸収率を高くし
て下層に届かないようにする方法、吸収されやすいエネ
ルギー線、例えば電子線を用いる方法、口径比の大きい
光学系を使用して表面層にのみ焦点を合わせる方法、２
光子過程で硬化する活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ）を使用する、などにより実施できる。この場合
も、活性エネルギー線照射は、パターニング照射法であ
っても、活性エネルギー線走査法によっても良い。

【００５５】未硬化の樹脂層（Ｂ１）の除去が必要な場
合は、その除去方法として例えば、物理的な除去や、水
や水溶液または溶剤洗浄による除去、または物理的な除
去の後、溶剤洗浄による除去などが挙げられる。洗浄
後、必要に応じ、更に活性エネルギー線照射などによる
再硬化を行っても良い。

【００５６】本発明の製造方法に使用される基材として
は、マイクロプレートと同じ素材である活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ）であっても良いし、異なる素
材であっても良い。また、基材として、活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ）と同じ組成のもの、または違
う組成の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物を上記の基
材に塗布して、活性エネルギー線の照射により、硬化ま
たは半硬化物を形成させて用いても良い。

【００５７】基材に活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ）と同じ組成のもの、または違う組成の樹脂組成物
を塗布し、活性エネルギー線照射などによる硬化または
半硬化は、窒素雰囲気中で行っても良いし、親水性重合
性化合物の水溶液中で行っても良い。

【００５８】その硬化物が疎水性である活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ１）を、親水性の活性エネルギ
ー線重合性化合物（例えば、親水基を有する（メタ）ア
クリレート）の水溶液中で半硬化（本発明の第二の製造
方法）または硬化を行うと、活性エネルギー線硬化性樹
脂組成物（Ａ１）の硬化物の表面に親水性の活性エネル
ギー線重合性化合物がグラフト重合し、硬化物もしくは
半硬化物の表面が親水性のものが得られる。

【００５９】従って、親水性の活性エネルギー線重合性
化合物により親水性化した活性エネルギー線硬化性樹脂
組成物（Ａ１）の硬化物の上に更に活性エネルギー線硬
化性樹脂組成物（Ａ）を塗布し、ウエル部以外の部分を
活性エネルギー線照射によって硬化させた後、未重合の
活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）を除去する
と、ウエル底部が親水性化されたマイクロプレートを得
ることが出来る。

【００６０】親水性の活性エネルギー線重合性化合物の
水溶液中での硬化または半硬化は、疎水性の活性エネル
ギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）の硬化物の表面のみに
親水性の活性エネルギー線重合性化合物をグラフト重合
できる特徴を有する。硬化物が疎水性の活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ１）の硬化物の表面にグラフト
重合させる親水性の活性エネルギー線重合性化合物の量
は、水溶液中の親水性の活性エネルギー線重合性化合物
の濃度や疎水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ１）中の重合開始剤の含有量、及び硬化温度を変え
ることにより調整することが出来る。

【００６１】親水性の活性エネルギー線重合性化合物の
水溶液中の濃度は１〜２０重量％が好ましく、５〜１５
重量％が更に好ましい。また、硬化物が疎水性の活性エ
ネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）中の重合開始剤の
含有量は０．１重量％〜５重量％が好ましく、１〜５重
量％が更に好ましい。更に、親水性の活性エネルギー線
重合性化合物の水溶液中に界面活性剤を添加すると、親
水性の活性エネルギー線重合性化合物が疎水性の活性エ
ネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）とより馴染みやす
く、より親水性の高い表面が得られるので好ましい。

【００６２】そのような界面活性剤は、親水性の活性エ
ネルギー線重合性化合物の水溶液に溶解するものであれ
ば良く、例えば、ｎ−ドデシルベンゼンスルホン酸ナト
リウムの如きアニオン性界面活性剤、ｎ−ドデシルトリ
メチルアンモニウムクロライドの如きカチオン性界面活
性剤、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、
ポリエチレングリコールモノーパラーノニルフェニルエ
ーテルの如き非イオン性界面活性剤などが挙げられる。
親水性の重合性化合物の水溶液中の界面活性剤濃度は
０．１重量％〜１５重量％が好ましく、０．５重量％〜
５重量％が更に好ましい。

【００６３】上記の硬化物が疎水性の活性エネルギー線
硬化性樹脂組成物（Ａ１）を親水性の活性エネルギー線
重合性化合物の水溶液中で硬化または半硬化させる方法
は、疎水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ
１）に親水性の活性エネルギー線重合性化合物を含有さ
せて基材に塗布し、空気中または窒素雰囲気中で硬化ま
たは半硬化させる方法に比べて、硬化物内部に親水性の
重合性化合物が存在しない為に、膨潤や強度低下が起こ
らない利点を有する。

【００６４】本発明の第二の製造方法は、（１）活性エ
ネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）を基材上に塗布また
は印刷して、基材上に活性エネルギー線硬化性樹脂組成
物（Ａ）から成る樹脂層（Ｂ１）を形成する第１工程
と、（２）前記樹脂層（Ｂ１）にエネルギー線を照射し
て、前記樹脂層（Ｂ１）を半硬化させる第２工程と、

【００６５】（３）半硬化させた前記樹脂層（Ｂ１）上
に前記樹脂層（Ｂ１）の活性エネルギー線硬化性樹脂組
成物（Ａ）と同一もしくは異なる組成の活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物を塗布または印刷し、半硬化させた
前記樹脂層（Ｂ１）上に更に活性エネルギー線硬化性樹
脂組成物から成る樹脂層（Ｂ２）を形成する第３工程
と、及び、（４）前記樹脂層（Ｂ２）上にパターン化し
たマスクをのせて活性エネルギー線を照射して、ウエル
となる部分以外の樹脂層を硬化させ、次いで未硬化の樹
脂層を除去してウエルを形成させる第４工程とからなる
マイクロプレートの製造方法である。

【００６６】本発明の第二の製造方法で使用される活性
エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）、両親媒性の活性
エネルギー線重合性化合物、基材、及び活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ）の塗布方法及び印刷方法につ
いては、上記マイクロプレートの説明に述べられたもの
と同じものであるので、ここでは説明を省略する。

【００６７】本発明の第２の製造方法は、活性エネルギ
ー線硬化性樹脂組成物（Ａ）の粘度が低い場合、または
ウエルの壁部とウエルの底部が同じ素材、または異なる
素材、特にウエルの壁部が疎水性で、ウエルの底部が親
水性のマイクロプレートの製造に特に有効である。

【００６８】例えば、ウエルの壁部が疎水性で、ウエル
の底部が親水性のマイクロプレートを製造するには、上
記第２の製造方法において、樹脂層（Ｂ１）を構成する
活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）として、硬化
物が親水性である活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ２）を、また樹脂層（Ｂ２）を構成する活性エネル
ギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）として、硬化物が疎水性
である活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）を用
いれば良い。更に必要に応じて各組成物に両親媒性の重
合性化合物を添加しても良い。

【００６９】本発明の第２の製造方法において、活性エ
ネルギー線などによる樹脂層（Ｂ１）の半硬化（第２工
程）は、基材に塗布された活性エネルギー線硬化性樹脂
組成物（Ａ）の流動性がなくなる程度で良い。活性エネ
ルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）の粘度が低い場合は、
（Ａ）からなる樹脂層（Ｂ１）の上に更に活性エネルギ
ー線硬化性樹脂組成物（Ａ）を塗布して樹脂層（Ｂ２）
を形成させた時に、樹脂層（Ｂ１）の形状を維持しにく
い場合がある。このような場合、樹脂層（Ｂ１）を予め
活性エネルギー線で半硬化させてから、該半硬化した樹
脂層（Ｂ１）の表面に活性エネルギー線硬化性樹脂組成
物（Ａ）を塗布または印刷した方が樹脂層（Ｂ１）及び
（Ｂ２）の平滑性が向上するので好ましい。

【００７０】樹脂層（Ｂ１）と樹脂層（Ｂ２）の硬化物
間の接着性を十分に保つ為、樹脂層（Ｂ１）表面に重合
性不飽和二重結合が残留している程度に半硬化を止める
必要があるが、この最適条件は簡単な実験により求める
ことが出来る。半硬化は窒素雰囲気中において短時間で
行うことも出来るが、重合阻害を受けやすい空気中で短
時間不完全硬化させる方法が好ましい。

【００７１】本発明の第二の製造方法において、活性エ
ネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）に親水性の活性エネ
ルギー線重合性化合物を併用することにより、マイクロ
プレートに親水性を付与することが出来る。そのような
親水性の活性エネルギー線重合性化合物は、先に述べた
親水性の活性エネルギー線重合性化合物と同じものであ
るので、ここでは説明を省略する。

【００７２】また、樹脂層（Ｂ１）の半硬化は親水性の
活性エネルギー線重合性化合物の水溶液中で行っても良
い。硬化物が疎水性である活性エネルギー線硬化性樹脂
組成物（Ａ１）から形成した樹脂層（Ｂ１）を親水性の
活性エネルギー線重合性化合物（例えば、親水基を有す
る（メタ）アクリレート）の水溶液中で半硬化を行う
と、樹脂層（Ｂ１）の半硬化物の表面に親水性重合性化
合物がグラフト重合され、表面が親水性化されたものが
得られる。

【００７３】樹脂層（Ｂ１）の半硬化物表面にグラフト
重合させる親水性の活性エネルギー線重合性化合物の量
は、水溶液中の親水性の活性エネルギー線重合性化合物
の濃度、疎水性の活性エネルギー線樹脂組成物（Ａ１）
中の重合開始剤の含有量および硬化温度などにより調整
することが出来る。ここで用いる親水性の活性エネルギ
ー線重合性化合物の種類、添加しても良い界面活性剤の
種類は先に述べたものと同様であり、ここでの記載は省
略する。

【００７４】用いる親水性の活性エネルギー線重合性化
合物の水溶液中の親水性の活性エネルギー線重合性化合
物濃度は１〜２０重量％が好ましく、５〜１５重量％が
更に好ましい。また、硬化物が疎水性である活性エネル
ギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）中の重合開始剤の含有
量は０．１重量％〜５重量％が好ましく、１〜５重量％
が更に好ましい。また親水性の重合性化合物の水溶液中
の界面活性剤濃度は０．１重量％〜１５重量％が好まし
く、０．５重量％〜５重量％が更に好ましい。

【００７５】本発明に用いられる重合方法は生産効率な
どの面から、活性エネルギー線（例えば電子線、γ線、
Ｘ線、紫外線、可視光線等）を用いることが好ましい。
これらの中でも、装置及び取扱いの簡便さから紫外線を
用いることが更に望ましい。照射する紫外線の強度は、
１０〜５００ｍＷ／ｃｍ^２ (１００〜５０００Ｗ／ｍ ^２
)の範囲が好ましく、照射時間は、０．１〜１８０秒の
範囲が好ましい。

【００７６】エネルギー線として紫外線や可視光線を用
いる場合、重合速度を速める目的で、活性エネルギー線
硬化性樹脂組成物（Ａ）に光重合開始剤を含有させるこ
ともできる。また、紫外線の照射を不活性ガス雰囲気下
で行うことによって、更に重合速度を速めることができ
る。電子線もまた本発明に用いることのできる好ましい
エネルギー線である。電子線を用いると、添加剤（例え
ば増粘剤、増白剤、抗菌剤）などの紫外線吸収の影響を
受けないため、これらの選択の幅が広がると共に、製造
速度も向上する。

【００７７】本発明で使用する活性エネルギー線硬化性
樹脂組成物（Ａ）には、例えば、重合開始剤、重合遅延
剤、重合禁止剤、溶剤、増粘剤、消泡剤、紫外線吸収
剤、浸透剤、ｐＨ調整剤、塩、顔料、染料等の着色剤、
界面活性剤、耐水化剤、ポリマー、無機物（シリカ、ア
ルミナ等）、酸、アルカリ、防黴剤、抗菌剤等のその他
成分を溶解または分散した状態で含有させることもでき
る。

【００７８】本発明で使用する活性エネルギー線硬化性
樹脂組成物（Ａ）に混合することができる紫外線重合開
始剤としては、例えば、ｐ−ｔｅｒｔ−ブチルトリクロ
ロアセトフェノン、２，２’−ジエトキシアセトフェノ
ン、２−ヒドロキシ−２−メチル−１−フェニルプロパ
ン −１−オンの如きアセトフェノン類；ベンゾフェノ
ン、４，４’−ビスジメチルアミノベンゾフェノン、２
−クロロチオキサントン、２−メチルチオキサントン、
２−エチルチオキサントン、２−イソプロピルチオキサ
ントンの如きケトン類；

【００７９】ベンゾイン、ベンゾインメチルエーテル、
ベンゾインイソプロピルエーテル、ベンゾインイソブチ
ルエーテルの如きベンゾインエーテル類；ベンジルジメ
チルケタール、ヒドロキシシクロヘキシルフェニルケト
ンの如きベンジルケタール類、などが挙げられる。ま
た、開始剤の代わりに、マレイミド化合物の如きマイク
ロプレート成分に組み込まれ、かつ、開始剤としての機
能を有する化合物を用いても良い。

【００８０】活性エネルギー線として可視光や紫外線等
を使用する場合には、パターニング精度を向上させるた
めに、重合遅延剤及び／または重合禁止剤と光重合開始
剤を併用することが好ましい。重合遅延剤や重合禁止剤
としては、α−メチルスチレン、２，４−ジフェニル−
４−メチル−１−ペンテンなどのエネルギー線重合性化
合物としては重合速度の低いビニル系モノマー；ｔｅｒ
ｔ−ブチルフェノールなどのヒンダントフェノール類な
どが挙げられる。

【００８１】

【実施例】以下、実施例及び比較例を用いて本発明をさ
らに詳細に説明するが、本発明は、これらの実施例の範
囲に限定されるものではない。なお、以下の実施例及び
比較例において、「部」は特に断りのない限り「重量
部」を表わす。

【００８２】［実施例１］ （疎水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）
１の調製）疎水性アクリレートとして、「ユニディック
Ｖ−４２６３」（大日本インキ化学工業株式会社製の１
分子内に平均して３個のアクリル基を有するウレタンア
クリレート）５９．５部、「ニューフロンティアＨＤＤ
Ａ」（第一工業製薬株式会社製のヘキサンジオールジア
クリレート）４０部、重合遅延剤として２，４−ジフェ
ニル−４−メチル−１−ペンテン（和光純薬工業株式会
社製）０．５部、紫外線重合開始剤として「イルガキュ
アー１８４」（日本チバガイギー社製）５部を均一に混
合して、疎水性樹脂組成物（Ａ１）１を得た。

【００８３】（マイクロプレート１の作製）厚さ２ｍｍ
のガラス板の周りにシリコーンゴムで厚さ１ｍｍ、５０
ｍｍ角の四角い囲いを作って、その中に活性エネルギー
線硬化性樹脂組成物（Ａ１）１を流し込んで樹脂層（Ｂ
１）を形成し、該樹脂層（Ｂ１）の上に厚さ５０μｍの
ポリプロピレン製フィルムを載せて、更にその上に直径
３ｍｍの円形状が３個×３個、６ｍｍのピッチ（円の中
心間距離）で配列されているポリエチレンテレフタレー
ト製マスクを載せて、メタルハライドランプにより波長
３６０ｎｍの強度が８０ｍＷ／ｃｍ^２(８００Ｗ／ｍ^２)
の紫外線（垂直光）を１５秒間照射した。

【００８４】照射後、マスク及びポリプロピレンフィル
ムを取り除いて、エタノールで未硬化部分の樹脂層（Ｂ
１）を除去して、自然乾燥させて、透明なマイクロプレ
ート１を得た。マイクロプレート１を顕微鏡で観察した
結果、ウエルが直径約３ｍｍの円筒状になっており、ピ
ッチ（円の中心間距離）が約６ｍｍ、ウエルの深さが約
０．９ｍｍであった。このマイクロプレート１はウエル
底部がガラスで出来ており、ウエルの寸法から体積は約
６．４μｌであった。

【００８５】ウエル底部の親水性を測定する為、上記の
厚さ２ｍｍのガラス板を水接触角測定に用いた。測定は
協和科学株式会社製の液滴法ＣＡ−Ｄ型接触角計を用い
た。測定の結果、該ガラス表面の水との接触角が約２７
°であった。またウエルの壁部の疎水性を測定する為、
厚さ１ｍｍのアクリル板にコーターを用いて活性エネル
ギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）１を厚さ１００μｍに
なるように塗布し、窒素雰囲気中でメタルハライドラン
プにより波長３６０ｎｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ ^２(６０
０Ｗ／ｍ^２)の紫外線を６０秒照射して硬化させて、水
接触角の測定に用いた。測定の結果、塗膜表面の水との
接触角は約７１°であった。

【００８６】［実施例２］ （親水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）
２の調製）疎水性アクリレートとして、「ユニディック
Ｖ−４２６３」（大日本インキ化学工業株式会社製の１
分子内に平均して３個のアクリル基を有するウレタンア
クリレート）７４．５部、「ニューフロンティアＨＤＤ
Ａ」（第一工業製薬株式会社製のヘキサンジオールジア
クリレート）５部、両親媒性の活性エネルギー線重合性
化合物として「ニューフロンティアＮ−１７７Ｅ」（第
一工業製薬株式会社製のノニルフェノキシポリエチレン
グリコールアクリレート）２０部、重合遅延剤として
２，４−ジフェニル−４−メチル−１−ペンテン（和光
純薬工業株式会社製）０．５部、紫外線重合開始剤とし
て「イルガキュアー１８４」（日本チバガイギー社製）
５部を均一に混合して、親水性樹脂組成物（Ａ２）２を
得た。

【００８７】（マイクロプレート２の作製）ウエル底部
の作製として、厚さ１ｍｍのアクリル板にコーターを用
いて活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）２を厚
さ１００μｍになるように塗布し樹脂層（Ｂ１）を形成
し、空気中でメタルハライドランプにより波長３６０ｎ
ｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫外線を
５秒照射し、半硬化させた。

【００８８】次いでウエルの壁部の作製として、この半
硬化させた樹脂層（Ｂ１）の上にコーターを用いて活性
エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）２を厚み２５０
μｍになるように塗布して樹脂層（Ｂ２）を形成し、該
樹脂層（Ｂ２）の上に厚さ５０μｍのポリプロピレン製
フィルムを載せ、更にその上に５００μｍ角の正方形が
４０個×６０個、７００μｍのピッチ（正方形の中心間
距離）で格子状に配列されているポリエチレンテレフタ
レート製のマスクを載せて、メタルハライドランプによ
り波長３６０ｎｍ、強度が８０ｍＷ／ｃｍ^２(８００Ｗ
／ｍ^２)の紫外線（垂直光）を１５秒間照射した。

【００８９】照射後、マスク及びポリプロピレンフィル
ムを取り除き、エタノールで未硬化部分の樹脂層（Ｂ
２）を除去し、自然乾燥させて、ウエルの底部と壁部が
親水性のマイクロプレート２を得た。マイクロプレート
２を電子顕微鏡で観察した結果、ウエルが約５００μｍ
角の正方形筒状になっており、ピッチ（正方形の中心間
距離）が約７００μｍ、ウエルの深さが約２００μｍで
あった。上記のウエルの寸法から、ウエルの体積は約
０．０５μｌであった。

【００９０】ウエルの底部及び壁部の親水性度合いを測
定する為、厚さ１ｍｍのアクリル板にコーターを用いて
親水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）２
を厚さ１００μｍになるように塗布し、窒素雰囲気中で
メタルハライドランプにより波長３６０ｎｍ、強度６０
ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫外線を６０秒照射し
て硬化させて、水接触角の測定に用いた。測定は協和科
学株式会社製の液滴法ＣＡ−Ｄ型接触角計を用いた。測
定の結果、該塗膜表面の水との接触角は約１０°であっ
た。

【００９１】［実施例３］ （疎水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）
３の調製）疎水性アクリレートとして、「ユニディック
Ｖ−４２６３」（大日本インキ化学工業株式会社製の１
分子内に平均して３個のアクリル基を有するウレタンア
クリレート）８０部、「ニューフロンティアＨＤＤＡ」
（第一工業製薬株式会社製のヘキサンジオールジアクリ
レート）１９部、「ビスコート１７Ｆ」（大阪有機化学
工業株式会社製のヘプタデカフルオロデシルアクリレー
ト）０．５部、重合遅延剤として２，４−ジフェニル−
４−メチル−１−ペンテン（和光純薬工業株式会社製）
０．５部、紫外線重合開始剤として「イルガキュアー１
８４」（日本チバガイギー社製）５部を均一に混合し
て、疎水性の樹脂組成物（Ａ１）３を得た。

【００９２】（親水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組
成物（Ａ２）３の調製）疎水性アクリレートとして、
「ユニディックＶ−４２６３」（大日本インキ化学工業
株式会社製の１分子内に平均して３個のアクリル基を有
するウレタンアクリレート）７５部、「ニューフロンテ
ィアＨＤＤＡ」（第一工業製薬株式会社製のヘキサンジ
オールジアクリレート）５部、親水性アクリレートとし
て「ライトエステルＰ−２Ｍ」（共栄社化学株式会社製
の２−メタクリロイルオキシエチルアシッドホスフェー
ト）５部、両親媒性の活性エネルギー線硬化性化合物と
して「ニューフロンティアＮ−１７７Ｅ」（第一工業製
薬株式会社製のノニルフェノキシポリエチレングリコー
ルアクリレート）１５部、紫外線重合開始剤として「イ
ルガキュアー１８４」（日本チバガイギー社製）５部を
均一に混合して、親水性の活性エネルギー線硬化性樹脂
組成物（Ａ２）３を得た。

【００９３】（マイクロプレート３の作製）ウエル底部
の作製として、厚さ２ｍｍのガラス板にコーターを用い
て親水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）
３を厚さ１００μｍになるように塗布して樹脂層(Ｂ１)
を形成し、空気中でメタルハライドランプにより波長３
６０ｎｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫
外線を２秒照射して半硬化させた。

【００９４】次いで、ウエルの壁部の作製として、この
半硬化した樹脂層（Ｂ１）の上にコーターを用いて疎水
性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）３を厚
み２５０μｍになるように塗布して樹脂層（Ｂ２）を形
成し、該樹脂層（Ｂ２）の上に厚さ５０μｍのポリプロ
ピレン製フィルムを載せて、更にその上に直径５００μ
ｍの円形状が４０個×６０個、１０００μｍのピッチ
（円の中心間距離）で配列されているポリエチレンテレ
フタレート製マスクを載せて、メタルハライドランプに
より波長３６０ｎｍ、強度８０ｍＷ／ｃｍ^２(８００Ｗ
／ｍ^２)の紫外線（垂直光）を１５秒間照射した。

【００９５】照射後、マスク及びポリプロピレンフィル
ムを取り除いて、エタノールで未硬化部分の樹脂層（Ｂ
２）を除去し、自然乾燥させて、ウエル底部が親水性で
壁部が疎水性であるマイクロプレート３を得た。マイク
ロプレート３を電子顕微鏡で観察した結果、ウエル直径
が約５００μｍ、ピッチ（円の中心間距離）が約１００
０μｍ、深さが約２００μｍであった。ウエルの直径及
び深さから、ウエルの体積は約０．０４μｌであった。

【００９６】ウエル底部の親水性を測定する為、厚さ２
ｍｍのガラス板にコーターを用いて親水性樹脂組成物
（Ａ２）３を厚さ１００μｍになるように塗布し、窒素
雰囲気中でメタルハライドランプにより波長３６０ｎ
ｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫外線を
６０秒照射して硬化させ、水接触角の測定に用いた。測
定は協和科学株式会社製の液滴法ＣＡ−Ｄ型接触角計を
用いた。測定の結果、該塗膜表面の水との接触角は約１
２°であった。

【００９７】一方、ウエル壁部の疎水性を測定する為
に、厚さ２ｍｍのガラス板にコーターを用いて疎水性樹
脂組成物（Ａ１）３を厚さ１００μｍになるように塗布
し、窒素雰囲気中でメタルハライドランプにより波長３
６０ｎｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫
外線を６０秒照射して硬化させて、水接触角の測定に用
いた。測定の結果、該塗膜表面の水との接触角は約７６
°であった。

【００９８】［実施例４］ （疎水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）
４の調製）疎水性アクリレートとして、「ユニディック
Ｖ−４２６３」（大日本インキ化学工業株式会社製の１
分子内に平均して３個のアクリル基を有するウレタンア
クリレート）８０部、「ニューフロンティアＨＤＤＡ」
（第一工業製薬株式会社製のヘキサンジオールジアクリ
レート）１９．５部、重合遅延剤として２，４−ジフェ
ニル−４−メチル−１−ペンテン（和光純薬工業株式会
社製）０．５部、紫外線重合開始剤として「イルガキュ
アー１８４」（日本チバガイギー社製）５部を均一に混
合して、疎水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
（Ａ１）４を得た。

【００９９】（ウエル底部の樹脂組成物（Ａ１）４の親
水性化とマイクロプレート４の作製）ウエルの底部作製
として、厚さ１ｍｍのアクリル板にコーターを用いて疎
水性の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）４を
厚さ１００μｍになるように塗布して樹脂層（Ｂ１）を
形成し、このアクリル板をアクリルアミド（和光純薬工
業株式会社製）１０重量％の水溶液中に浸漬したまま、
メタルハライドランプにより波長３６０ｎｍ、強度６０
ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫外線を５秒照射して
半硬化させ、活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ
１）４を親水性化した。

【０１００】次いで、ウエルの壁部の作製として、この
半硬化した樹脂層（Ｂ１）の上にコーターを用いて疎水
性樹脂組成物（Ａ１）４を３００μｍになるように塗布
し樹脂層（Ｂ２）を形成し、その上に直径１ｍｍの円形
状が３個×３個、４ｍｍのピッチ（円の中心間距離）で
配列されているポリエチレンテレフタレート製マスクを
載せて、メタルハライドランプにより波長３６０ｎｍ、
強度８０ｍＷ／ｃｍ^２(８００Ｗ／ｍ^２)の紫外線（垂直
光）を１５秒間照射した後、マスク及びポリプロピレン
フィルムを取り除いて、エタノールで未硬化部分の樹脂
層（Ｂ２）を除去して自然乾燥させ、更に窒素雰囲気中
で上記の紫外線を照射して、ウエル底部が親水性で壁部
が疎水性であるマイクロプレート４を得た。

【０１０１】マイクロプレート４を顕微鏡で観察した結
果、ウエルが直径約１ｍｍの円筒状になっており、ピッ
チ（円の中心間距離）が約４ｍｍ、ウエルの深さが約２
５０μｍであった。上記のウエルの寸法から、ウエル体
積は約０．２μｌであった。

【０１０２】ウエル底部の親水性を測定する為に、厚さ
１ｍｍのアクリル板にコーターを用いて疎水性の活性エ
ネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）４を厚さ２５０μ
ｍになるように塗布し、このアクリル板をアクリルアミ
ド（和光純薬工業株式会社製）１０重量％の水溶液中に
浸漬したまま、メタルハライドランプにより波長３６０
ｎｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫外線
を４０秒照射して硬化させて、水接触角の測定に用い
た。測定は協和科学株式会社製の液滴法ＣＡ−Ｄ型接触
角計を用いた。測定の結果、該塗膜表面の水との接触角
は約２０°であった。

【０１０３】一方、ウエル側壁部の疎水性を測定する為
に、厚さ１ｍｍのアクリル板にコーターを用いて疎水性
の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）４を厚さ
２５０μｍになるように塗布し、窒素雰囲気中でメタル
ハライドランプにより波長３６０ｎｍ、強度６０ｍＷ／
ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫外線を４０秒照射して硬化
させたものを水接触角測定に用いた。測定は協和科学株
式会社製の液滴法ＣＡ−Ｄ型接触角計を用いた。測定の
結果、該塗膜表面の水との接触角は約６７°であった。

【０１０４】［実施例５］ （マイクロプレート５の作製）ウエル底部の作製とし
て、厚さ１ｍｍのアクリル板にコーターを用いて疎水性
の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）１を厚さ
１００μｍになるように塗布して樹脂層（Ｂ１）を形成
し、空気中でメタルハライドランプにより波長３６０ｎ
ｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の紫外線を
３秒照射して半硬化させた。

【０１０５】次いで、ウエル壁部の作製として、この半
硬化した樹脂層（Ｂ１）の上にコーターを用いて疎水性
の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）３を厚み
３００μｍになるように塗布して樹脂層（Ｂ２）を形成
し、その上に直径１ｍｍの円形状が３個×３個、４ｍｍ
のピッチ（円の中心間距離）で配列されているポリエチ
レンテレフタレート製マスクを載せて、メタルハライド
ランプにより波長３６０ｎｍ、強度８０ｍＷ／ｃｍ
^２(８００Ｗ／ｍ^２)の紫外線（垂直光）を１５秒間照射
した。

【０１０６】照射後、マスク及びポリプロピレンフィル
ムを取り除き、エタノールで未硬化部分の樹脂層（Ｂ
２）を除去し自然乾燥させ、更に窒素雰囲気中で上記の
紫外線を照射して、ウエルの底部と壁部が異なる樹脂組
成物の硬化物からなるマイクロプレート５を得た。マイ
クロプレート５を顕微鏡で観察した結果、ウエルが直径
約１ｍｍの円筒状になっており、ピッチ（円の中心間距
離）が約４ｍｍ、ウエルの深さが約２５０μｍであっ
た。ウエルの寸法から、ウエルの体積は約０．２μｌで
あった。

【０１０７】ウエル底部の疎水性を測定する為に、厚さ
１ｍｍのアクリル板にコーターを用いて、活性エネルギ
ー線硬化性樹脂組成物（Ａ）１を厚さ１００μｍになる
ように塗布し、窒素雰囲気中でメタルハライドランプに
より波長３６０ｎｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ
／ｍ^２)の紫外線を６０秒照射して硬化させて水接触角
の測定に用いた。測定の結果、該塗膜表面の水との接触
角は約７１°であった。

【０１０８】一方、ウエル壁部の疎水性を測定する為
に、厚さ１ｍｍのアクリル板にコーターを用いて疎水性
樹脂組成物（Ａ１）３を厚さ１００μｍになるように塗
布し、窒素雰囲気中でメタルハライドランプにより波長
３６０ｎｍ、強度６０ｍＷ／ｃｍ^２(６００Ｗ／ｍ^２)の
紫外線を６０秒照射して硬化させて、水接触角の測定に
用いた。測定の結果、塗膜表面の水との接触角は約７６
°であった。

【０１０９】

【発明の効果】本発明は、試料収納凹部であるウエルの
微小化が容易で、ウエル部の形状や寸法（底部面積やウ
エル深さ）の調整幅が広いマイクロプレートの製造方
法、及びウエル表面を親水性化して生体成分の吸着を低
く抑えたマイクロプレート、逆に疎水性化して、抗原等
の標的タンパク質を吸着、または共有結合させることが
できる表面としたマイクロプレート、更に、親水性のウ
エル底部と疎水性のウエル壁部を持つ水溶液が外部に溢
れにくいマイクロプレート等の種々の物性を有するマイ
クロプレートとその簡便な製造方法を提供することがで
きる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き Ｆターム(参考） 2G045 DA13 DA36 HA17 HA20 2G052 AA28 AD46 DA06 JA08 JA16 4F006 AA12 AA15 AA17 AA20 AA22 AA33 AA35 AA36 AA37 AA40 AA58 AB42 AB43 BA10 BA11 CA09 DA04 EA03

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 試料収納用凹部であるウエルが基材上に
   多数配列して設けられ、前記ウエルの壁部と底部の少な
   くとも一つが活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）
   の硬化物から成ることを特徴とするマイクロプレート。
2. 【請求項２】 基材がガラス、熱可塑性樹脂、熱硬化性
   樹脂及び活性エネルギー線硬化性樹脂から成る群から選
   ばれる素材から成るシートである請求項１に記載のマイ
   クロプレート。
3. 【請求項３】 基材上に活性エネルギー線硬化性樹脂組
   成物（Ａ）の硬化物から成る層を有し、ウエルの壁部が
   前記活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）の硬化物
   から成る請求項１または２に記載のマイクロプレート。
4. 【請求項４】 基材上に活性エネルギー線硬化性樹脂組
   成物（Ａ）の硬化物から成る層を有し、ウエルの壁部が
   活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）の硬化物から
   成り、ウエルの底部が（Ａ）と同一もしくは異なる組成
   の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物の硬化物から成る
   請求項１または２に記載のマイクロプレート。
5. 【請求項５】 ガラスから成る基材上に活性エネルギー
   線硬化性樹脂組成物（Ａ）の硬化物から成る層を有し、
   ウエルの底部が前記基材のガラスで形成され、ウエルの
   壁部が活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）の硬化
   物から成る請求項１または２に記載のマイクロプレー
   ト。
6. 【請求項６】 活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
   （Ａ）が、その硬化物が疎水性である活性エネルギー線
   硬化性樹脂組成物（Ａ１）から成る請求項１〜５のいず
   れか一項に記載のマイクロプレート。
7. 【請求項７】 活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
   （Ａ）が、その硬化物が親水性である活性エネルギー線
   硬化性樹脂組成物（Ａ２）から成る請求項１〜５のいず
   れか一項に記載のマイクロプレート。
8. 【請求項８】 ウエルの壁部が活性エネルギー線硬化性
   樹脂組成物（Ａ１）の疎水性の硬化物から成り、ウエル
   の底部が活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）の
   親水性の硬化物から成る請求項４に記載のマイクロプレ
   ート。
9. 【請求項９】 活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
   （Ａ）が両親媒性の活性エネルギー線重合性化合物を含
   む請求項１，２，３，４，５，７及び８のいずれか１項
   に記載のマイクロプレート。
10. 【請求項１０】 下記の工程を含む、試料収納用凹部で
    あるウエルが基材上に多数配列して設けられたマイクロ
    プレートの製造方法。 （１）活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）を基材
    上に塗布または印刷して基材上に活性エネルギー線硬化
    性樹脂組成物（Ａ）から成る樹脂層（Ｂ１）を形成する
    第１工程と、（２）前記樹脂層（Ｂ１）上にパターン化
    したマスクをのせて活性エネルギー線を照射し、ウエル
    となる部分以外の樹脂層を硬化させ、次いで未硬化の樹
    脂層を除去してウエルを形成させる第２工程。
11. 【請求項１１】 基材がガラス、熱可塑性樹脂、熱硬化
    性樹脂及び活性エネルギー線硬化性樹脂から成る群から
    選ばれる素材から成るシートである請求項１０に記載の
    マイクロプレートの製造方法。
12. 【請求項１２】 下記の工程を含む、試料収納用凹部で
    あるウエルが基材上に多数配列して設けられたマイクロ
    プレートの製造方法。 （１）活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）を基材
    上に塗布または印刷して、基材上に活性エネルギー線硬
    化性樹脂組成物（Ａ）から成る樹脂層（Ｂ１）を形成す
    る第１工程、（２）前記樹脂層（Ｂ１）にエネルギー線
    を照射して、前記樹脂層（Ｂ１）を半硬化させる第２工
    程、（３）半硬化させた前記樹脂層（Ｂ１）上に前記樹
    脂層（Ｂ１）の活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
    （Ａ）と同一もしくは異なる組成の活性エネルギー線硬
    化性樹脂組成物を塗布または印刷し、半硬化させた前記
    樹脂層（Ｂ１）上に更に活性エネルギー線硬化性樹脂組
    成物から成る樹脂層（Ｂ２）を形成する第３工程、及
    び、（４）前記樹脂層（Ｂ２）上にパターン化したマス
    クをのせて活性エネルギー線を照射してウエルとなる部
    分以外の樹脂層を硬化させ、次いで未硬化の樹脂層を除
    去してウエルを形成させる第４工程。
13. 【請求項１３】 基材がガラス、熱可塑性樹脂、熱硬化
    性樹脂及び活性エネルギー線硬化性樹脂から成る群から
    選ばれる素材から成るシートである請求項１２に記載の
    マイクロプレートの製造方法。
14. 【請求項１４】 樹脂層（Ｂ１）を構成する活性エネル
    ギー線硬化性樹脂組成物（Ａ）が、その硬化物が親水性
    である活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ２）であ
    り、樹脂層（Ｂ２）を構成する活性エネルギー線硬化性
    樹脂組成物（Ａ）がその硬化物が疎水性である活性エネ
    ルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）から成る請求項１２
    または１３に記載のマイクロプレートの製造方法。
15. 【請求項１５】 活性エネルギー線硬化性樹脂組成物
    （Ａ）が両親媒性の活性エネルギー線重合性化合物を含
    む請求項１０〜１４のいずれか１項に記載のマイクロプ
    レートの製造方法。
16. 【請求項１６】 樹脂層（Ｂ１）が、その硬化物が疎水
    性である活性エネルギー線硬化性樹脂組成物（Ａ１）か
    ら成り、前記樹脂層（Ｂ１）を半硬化させる際に、前記
    半硬化を親水性の活性エネルギー線重合性化合物の水溶
    液中で活性エネルギー線照射により行うことにより、前
    記樹脂層（Ｂ１）の前記水溶液との接触側の表面を親水
    性化する請求項１２または１３に記載のマイクロプレー
    トの製造方法。