JP2002542256A - ピロリジンカルボニルアミノ環状ジスルフィド類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 抗炎症薬として活性を有する、式（Ｉ）の化合物が記述される。内皮細胞への細胞の結合を阻害する、環状ジスルフィド化合物が提供される。このような化合物は、症候及び／又は損傷が、インテグリン発現細胞への細胞接着分子の結合に関連している、喘息のような炎症性疾患を処置するのに有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 本発明は、一般に、炎症性疾患の処置のための有用な処置薬である、ピロリジ
ニル環状ジスルフィド化合物に関する。

【０００２】 免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパージーンファミリーのメンバーである、血管細
胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）は、活性化内皮細胞において発現される。イン
テグリンＶＬＡ−４（ａ₄β₁）は、ＶＣＡＭ−１の主な受容体である。ＶＬＡ−
４は、血中リンパ球、好酸球、好塩基球、及び単球を含む、多くの細胞型におい
て発現される。ＶＣＡＭ−１はまた、Ｂ及びＴ細胞において発現される第２のイ
ンテグリンＬＰＡＭ−１（パイエル板接着分子）にも結合する。インテグリンＬ
ＰＡＭ−１もまた、粘膜アドレッシング細胞（mucosal addressing cell）接着
分子（ＭａｄＣＡＭ）と呼ばれる別の細胞接着分子と結合できる。細胞接着分子
ＶＣＡＭ−１又はＭａｄＣＡＭへのインテグリンＶＬＡ−４及びＬＰＡＭ−１の
結合は、普通は血液から組織への高分子及び血中細胞の通過を許す。しかし細胞
接着分子へのインテグリンの結合は、上記細胞型が組織を浸潤して組織損傷を引
き起こす、有害な炎症に至ることもある。

【０００３】 したがって、細胞接着分子／インテグリンアンタゴニスト（細胞接着分子への
インテグリンの結合を阻害する）は、有害な炎症を予防することができる。例え
ば、このようなアンタゴニストは、炎症性腸疾患、関節炎におけるＴ細胞遊出、
喘息における好酸球蓄積及び気管支収縮、並びに組織同種移植片の生存時間の延
長により引き起こされる組織損傷を予防するために必要とされる。

【０００４】 したがって本発明の目的は、下記一般式（Ｉ）：

【０００５】

【化９】

【０００６】 〔式中、Ｒ₂及びＲ₃は、それぞれ独立に低級アルキルであるか、又はこれらの結
合している炭素原子と一緒に、４〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭素環を形成し
；Ｒ₅は、水素、低級アルキル、Ｒ−ＳＯ₂−、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_m−ＣＯ−又はＲ₈ −Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−であり；Ｒは、低級アルキルであり；Ｒ₆及びＲ₈は、
水素又は低級アルキルであり；Ｘは、−Ｏ−又は−ＮＨ−であり；ｍは、１〜７
の整数であり、ｙは、０〜７の整数であり、そしてｎは、１〜３の整数である（
ここで、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、不斉炭素原子を示す）〕で示される化合物、及
び加水分解可能なそのエステル又はエーテルを提供することである。

【０００７】 Ｒ₂及びＲ₃は、これらの結合している炭素と一緒に、シクロペンタン、シクロ
ペンテン、シクロブタン、シクロブテン、シクロヘキサン又はシクロヘキセンの
ような、４〜７個の炭素原子を含むシクロアルカン又はシクロアルケン基を形成
しうる。

【０００８】 下記のものも、本発明の好ましい実施態様である： （ｉ）Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、４〜６個の炭素原
子を含む脂肪族シクロアルカン環を形成する、式（Ｉ）の化合物、又は薬学的に
許容しうるその塩。

【０００９】 （ii）Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シクロペンタン環
を形成する、（ｉ）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。

【００１０】 （iii）下記式：

【００１１】

【化１０】

【００１２】 で示される、（ii）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。

【００１３】 （iv）（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ
−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８
−カルボン酸である、（iii）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。

【００１４】 （ｖ）Ｒ₅が、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_mＣＯ−である、（iii）記載の化合物、又は薬
学的に許容しうるその塩。

【００１５】 （vi）（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）−（４−ヒ
ドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，
１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘ
プタデカン−８−カルボン酸である、（ｖ）記載の化合物、又は薬学的に許容し
うるその塩。

【００１６】 （vii）（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−（２，２−ジメチル−１−オキ
ソプロピル）−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリ
ジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７
，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸である、（ｖ
）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。

【００１７】 （viii）Ｒ₅が、Ｒ₈−Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−である、（iii）記載の化合物
、又は薬学的に許容しうるその塩。

【００１８】 （ix）Ｘが、酸素である、（viii）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるそ
の塩。

【００１９】 （ｘ）Ｒ₅が、水素である、（iii）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるそ
の塩。

【００２０】 （xi）（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニ
ル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ
−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８
−カルボン酸である、（ｘ）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。

【００２１】 （xii）Ｒ₅が、Ｒ−ＳＯ₂−である、（iii）記載の化合物、又は薬学的に許容
しうるその塩。

【００２２】 （xiii）Ｒ₅が、低級アルキルである、（iii）記載の化合物、又は薬学的に許
容しうるその塩。

【００２３】 （xiv）（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−メチルスルホニル−３（Ｒ）−
（４−ヒドロキシフェニル）−２（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕
−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１
２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸である、（xii）記載の化合物、又は薬学的
に許容しうるその塩。

【００２４】 （xv）Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シクロヘキサン環
を形成する、（ｉ）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。

【００２５】 （xvi）下記式：

【００２６】

【化１１】

【００２７】 で示される、（xv）記載の化合物。

【００２８】 （xvii）（９Ｒ，１４Ｒ）−１４−〔〔〔３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェ
ニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−７，１５−ジオキ
ソ−１１，１２−ジチア−８，１６−ジアザスピロ〔５．１２〕オクタデカン−
９−カルボン酸である、（xvi）記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩
。

【００２９】 （xviii）Ｒ₅が、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_m−ＣＯ−である、（xvi）記載の化合物、又
は薬学的に許容しうるその塩。

【００３０】 （xix）（９Ｒ，１４Ｒ）−１４−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）−（４−
ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−７
，１５−ジオキソ−１１，１２−ジチア−８，１６−ジアザスピロ〔５．１２〕
オクタデカン−９−カルボン酸である、（xviii）記載の化合物、又は薬学的に
許容しうるその塩。

【００３１】 （xx）一般式（Ａ）：

【００３２】

【化１２】

【００３３】 〔式中、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基を
形成し；Ｒ₂及びＲ₃は、それぞれ独立に低級アルキルであるか、又はこれらの結
合している炭素原子と一緒に、４〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭素環を形成し
；Ｒ₉は、アミノ保護基であり；Ｒ₁₀及びＲ₁₀′は、チオ保護基であり；そして
ｎは、１〜３の整数である〕で示される化合物。

【００３４】 （xxi）Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シクロペンタン
環を形成する、（xx）記載の化合物。

【００３５】 （xxii）２（Ｒ）−〔〔〔１−〔〔２（Ｒ）−〔〔（１，１−ジメチルエトキ
シ）カルボニル〕アミノ〕−１−オキソ−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕
プロピル〕アミノ〕エチル〕シクロペンチル〕カルボニル〕アミノ−３−〔（ト
リフェニルメチル）チオ〕プロパン酸１，１−ジメチルエチルエステルである、
（xxi）記載の化合物。

【００３６】 （xxiii）一般式（Ｂ）：

【００３７】

【化１３】

【００３８】 〔式中、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基を
形成し；Ｒ₂及びＲ₃は、それぞれ独立に低級アルキルであるか、又はこれらの結
合している炭素原子と一緒に、４〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭素環を形成し
；Ｒ₉は、アミノ保護基であり；そしてｎは、１〜３の整数である〕で示される
、化合物。

【００３９】 （xxiv）Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シクロペンタン
環を形成する、（xxiii）記載の化合物。

【００４０】 （xxv）（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボ
ニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザ
スピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエス
テルである、（xxiv）記載の化合物。

【００４１】 （xxvi）一般式（Ｃ）：

【００４２】

【化１４】

【００４３】 〔式中、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基を
形成し；Ｒ₂及びＲ₃は、それぞれ独立に低級アルキルであるか、又はこれらの結
合している炭素原子と一緒に、４〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭素環を形成し
；そしてｎは、１〜３の整数である〕で示される化合物、並びに加水分解可能な
そのエステル及びエーテル。

【００４４】 （xxvii）Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シクロペンタ
ン環を形成する、（xxvi）記載の化合物。

【００４５】 （xxviii）（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−アミノ−６，１４−ジオキソ−１０，１
１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン
酸１，１−ジメチルエチルエステルである、（xxvii）記載の化合物。

【００４６】 本発明の化合物は、有効な抗炎症薬である。本発明により、この環状ジスルフ
ィド化合物は、内皮細胞へのα４インテグリン発現細胞の接着を阻害することに
より、炎症に対抗する。環状ジスルフィド化合物の一般的なメカニズム作用は、
内皮細胞の細胞接着分子へのα４インテグリン発現細胞の結合の阻害である。こ
の化合物はまた、肺内のような、炎症部位でのこのような細胞の局所的活性化を
も阻害しうる。本発明の化合物は、肺の炎症、喘息、慢性関節リウマチ、多発性
硬化症（ＭＳ）、及び炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を含む、慢性炎症性疾患に伴う炎
症のような炎症の処置に特に有用である。

【００４７】 本出願を通して使用されるとき、「低級アルキル」という用語は、メチル、エ
チル及びプロピル、好ましくはメチルのような、１〜７個の炭素原子を有する直
鎖及び分岐鎖両方のアルキル基を含む。本明細書において使用されるとき、「低
級アルコキシ」という用語は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロ
ポキシ、ｎ−ブトキシ、tert−ブトキシなどのような、１〜７個の炭素原子を有
する直鎖又は分岐鎖アルコキシ基を包含する。また本明細書において使用される
とき、「低級アルカン酸」という用語は、プロピオン酸及び酢酸のような、２〜
７個の炭素原子のアルカン酸を包含する。更に本明細書において使用されるとき
、「ハロゲン」又は「ハロ」という用語は、他に記載がなければ、フッ素、塩素
、臭素及びヨウ素を包含する。

【００４８】 「置換低級アルキル」という用語は、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、低級ア
ルコキシ、低級アルカノイル、低級アルキルチオ、低級アルキルスルフィニル、
低級アルキルスルホニル、及び置換アミノから独立に選択される、１つ以上の基
により置換されている低級アルキル基を意味する。置換低級アルキル基の例は、
２−ヒドロキシエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、シアノメチル、及び
２−ニトロプロピルを含む。

【００４９】 「低級アルカノイル」又は「アシル」という用語は、２〜７個の炭素原子の脂
肪族カルボン酸から誘導される基、例えば、アセチル、プロピオニルなどを意味
する。「アシル」という用語は、「低級アルカノイル」を意味する他に、ベンゾ
イルのようなアロイルも含む。

【００５０】 また本明細書において使用されるとき、「アリール」という用語は、フェニル
、トリルなどのような、単環式芳香族炭化水素基（非置換であっても、又は１つ
以上の位置において低級アルキレンジオキシ、ハロゲン、ニトロ、低級アルキル
若しくは低級アルコキシ置換基で置換されていてもよい）、及びナフチル、アン
トリル、フェナントリル、アズリルなどのような、多環式アリール基（１つ以上
の上述の基で置換されていてもよい）を意味する。好ましいアリール基は、置換
及び非置換の単環式アリール基、特にフェニルである。「アラルキル」という用
語は、アルキルが低級アルキルであるとき、水素原子の１つが、アリール基によ
り置換されている、アルキル基を意味し、アラルキル基の例は、ベンジル、２−
フェニルエチル、３−フェニルプロピル、４−クロロ−ベンジル、４−メトキシ
ベンジルなどである。

【００５１】 本明細書において使用されるとき、「加水分解可能なエステル又はエーテル基
」という用語は、加水分解することにより、ヒドロキシル基及び／又はカルボキ
シル基を得ることができる、任意のエステル又はエーテルを意味する。この目的
に有用なエステル基の例は、アシル残基が、低級アルカン酸、アリール低級アル
カン酸、又は低級アルカンジカルボン酸から誘導されるものである。このような
エステル基を形成するために利用できる活性化酸には、アリール又は低級アルカ
ン酸から誘導される、酸無水物及び酸ハロゲン化物、好ましくは酸塩化物又は酸
臭化物がある。無水物の例は、無水酢酸、カプロン酸無水物、安息香酸無水物、
低級アルカンジカルボン酸無水物、例えば、無水コハク酸を含む。更に、加水分
解可能なエステルは、クロロギ酸エステル、例えば、クロロギ酸トリクロロエチ
ルから形成することができる。

【００５２】 適切なエーテル保護基は、例えば、テトラヒドロピラニルエーテル又は４−メ
トキシ−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラニルエーテルである。他には、ベンジル
、ベンズヒドリル、若しくはトリチルエーテルのようなアリールメチルエーテル
、又はα−低級アルコキシ低級アルキルエーテル、例えば、メトキシメチル若し
くはアリルエーテル、又はトリメチルシリルエーテルのようなアルキルシリルエ
ーテルがある。

【００５３】 あるいは、「加水分解可能なエステル基」という用語は、加水分解することに
よりカルボキシル基が得られるエステルを意味する。典型的には、アルコキシル
基は、低級アルカノール又は置換低級アルカノールから誘導される。このような
エステル基を形成するために利用できるアルカノールには、エタノール、メタノ
ール、イソ−プロパノール、tert−ブタノール及び２−（ジメチルアミノ）エタ
ノールのような、置換又は非置換の第１級、第２級及び第３級アルカノールがあ
る。

【００５４】 「チオ保護基」という用語は、開裂することにより遊離チオ基が得られる、任
意の基を意味する。好ましいチオ保護基には、トリアリールメタン、トリ−アル
キルメタン、ベンジルのようなアラルキル基がある。好ましいアシル基は、低級
アルカノイル及びアロイル、特にベンゾイルである。一般に、酸開裂性チオ保護
基を利用することが好ましく、例えば、トリチル基のようなトリ−アリールメチ
ル基が特に好ましい。

【００５５】 「アミノ保護基」という用語は、開裂することにより遊離アミノ基が得られる
、任意の基を意味する。アミノ保護基は、ペプチド合成において利用される任意
の従来のアミノ保護基であってよい。一般に、好ましいアミノ保護基は、約pH２
．０〜３．０の穏やかな酸性条件下で開裂可能なものである。特に、好ましいア
ミノ保護基は、第３級低級アルキル、低級アルキル及びトリ−低級アルキルメチ
ル基である。

【００５６】 「薬学的に許容しうる塩」という用語は、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リ
ン酸、クエン酸、ギ酸、マレイン酸、酢酸、コハク酸、酒石酸、メタンスルホン
酸、パラトルエンスルホン酸などのような、無機及び有機両方の薬学的に許容し
うる酸との塩を含むように使用される。このような塩は、標準法を用いて当業者
にはかなり容易に生成させることができる。

【００５７】 本出願を通して与えられる化合物の図表示において、濃い先細の線は、不斉炭
素が属する環の平面より上にある置換基を示し、点線は、不斉炭素が属する環の
平面より下にある置換基を示し、そして波線は、その分子の平面より上又は下の
いずれかにあってよい置換基を示す。本明細書を通して与えられる化合物の図表
示は、便宜のために記載されることを理解すべきであり、立体異性体、エナンチ
オマー及びラセミ体を含む他の形も含むと解釈すべきであり、そして示される特
定の形に限定されると解釈してはならない。

【００５８】 式（１）の化合物及び薬学的に許容しうるその塩、更には式（１）の化合物の
中間体は、立体異性を示す。本発明の化合物は、式（１）の化合物の任意の異性
体又はこれらの異性体の混合物であってよい。１つ以上の不斉炭素原子を有する
本発明の化合物及び中間体は、本発明の方法における適切な工程で、所望の立体
配置を有する所定の立体異性体又は純粋なエナンチオマーを得るための当該分野
において周知の方法により分割可能な、立体異性体のラセミ混合物として得られ
よう。あるいは、所望の異性体は、当該分野において既知の方法により、直接合
成されよう。

【００５９】 本発明の化合物中の不斉炭素原子は、ａ、ｂ、ｃ及びｄと表示される。ａ、ｂ
、ｃ及びｄと表示される不斉炭素原子のそれぞれの立体配置は、それが表す特定
の立体異性体により指定することができる。本発明の化合物は、「ａ」と表示さ
れる炭素原子が、Ｓ、Ｒ、又はＲ，Ｓ−立体配置であり；「ｂ」と表示される炭
素原子が、Ｓ、Ｒ、又はＲ，Ｓ−立体配置であり；「ｃ」と表示される炭素原子
が、Ｓ、Ｒ、又はＲ，Ｓ−立体配置であり；そして「ｄ」と表示される炭素原子
が、Ｓ、Ｒ、又はＲ，Ｓ−立体配置である、化合物を含む。

【００６０】 本発明の化合物の好ましい立体配置は、式（１）の化合物の純粋な立体異性体
である。この好ましい立体配置を有する化合物は、式（１ａ）：

【００６１】

【化１５】

【００６２】 〔式中、上記化合物中のＲ₂及びＲ₃は、結合している炭素原子と一緒に、シクロ
ペンタン環を形成する〕で示される化合物であり、好ましい立体配置は、式（Ib
）：

【００６３】

【化１６】

【００６４】 で示される化合物である。

【００６５】 式（１）の化合物、そして特に式（１）の化合物のピロリジンの純粋な（＋）
−trans異性体から誘導される類似体は、抗炎症薬として大きな効力を示す。こ
れらの抗炎症薬の効力を決定する手段は、細胞接着分子ＶＣＡＭ−１へのインテ
グリンＶＬＡ−４の結合を阻害するこれらの能力を評価することによる。例えば
、本明細書における化合物の効力は、ＶＬＡ−４／ＶＣＡＭ−１結合測定法によ
り測定するとき、ＶＣＡＭ／ＶＬＡ４結合の５０％阻害時の化合物の濃度（ＩＣ ₅₀ ）に関して測定することができる。本発明の化合物、特に実質的に純粋な（＋
）−trans異性体、即ち、約５％未満の対応する立体異性体を含む（＋）−trans
異性体は、以前から知られているＶＣＡＭ／ＶＬＡ４アンタゴニストよりも高い
効力を示す。

【００６６】 本発明では、任意の当該分野において既知の従来法を用いて、ＶＣＡＭ−１／
ＶＬＡ−４結合の阻害を測定することができる。例えば、固相二重抗体ＥＬＩＳ
Ａ又はラモス（Ramos）細胞によるスクリーニング測定法を利用して、ＶＣＡＭ
−１／ＶＬＡ−４結合の阻害を測定することができる。

【００６７】 特に好ましい式（１）の化合物は、 （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキ
シフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−
ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデ
カン−８−カルボン酸； （９Ｒ，１４Ｒ）−１４−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキ
シフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−７，１５−
ジオキソ−１１，１２−ジチア−８，１６−ジアザスピロ〔５．１２〕オクタデ
カン−９−カルボン酸； （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−メチルスルホニル−３−（Ｒ）−（４−
ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６
，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕
ヘプタデカン−８−カルボン酸； （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−（２，２−ジメチル−１−オキソプロピ
ル）−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕
カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−
ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸；及び （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−
２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０
，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カル
ボン酸である。

【００６８】 本発明の化合物は、経口的に、直腸内に、又は非経口的（例えば、静脈内、筋
肉内、皮下、くも膜下又は経皮）に；又は舌下に、又は眼用調剤として、又は肺
内の炎症の処置用のエーロゾルとして投与することができる。カプセル剤、錠剤
、経口投与用の懸濁剤又は液剤、坐剤、注射液、点眼薬、軟膏剤又はスプレー液
が、投与剤型の例である。

【００６９】 静脈内、筋肉内、経口又は吸入投与は、投与の好ましい形である。本発明の化
合物が有効量で投与される用量は、特定の活性成分の性質、患者の年齢及び必要
性並びに投与の様式に依存する。用量は、任意の従来法により、例えば、用量限
定臨床試験により決定されよう。即ち、本発明は更に、ＶＬＡ−４発現細胞への
ＶＣＡＭ−１又はフィブロネクチンの結合が、疾患の症状又は損傷における原因
因子である疾患に罹患している宿主を処置する方法であって、該症状又は該損傷
が軽減するように、ＶＬＡ−４発現細胞へのＶＣＡＭ−１又はフィブロネクチン
の結合を阻害するのに十分な量の本発明の化合物を投与することによる方法を特
徴とする。一般に、１日に約０．１〜１００mg/kg体重の用量が好ましく、１日
に１〜２５mg/kgの用量がとりわけ好ましく、そして１日に１〜１０mg/kg体重の
用量が特に好ましい。

【００７０】 本発明は更に、薬学的に有効量の本発明の化合物及び薬学的に許容しうる担体
を含む医薬組成物を特徴とする。このような組成物は、任意の従来法により処方
されよう。錠剤又は顆粒剤は、一連の結合剤、充填剤、担体又は希釈剤を含んで
よい。液体組成物は、例えば、滅菌水混和性液の形であってよい。カプセル剤は
、活性成分の他に充填剤又は増粘剤を含んでよい。更に、香味改善用添加剤、同
様に保存、安定化、水分保持及び乳化剤として通常使用される物質、また浸透圧
を変化させる塩、緩衝化剤及び他の添加剤も存在してよい。

【００７１】 炎症性疾患、特に細胞接着分子へのインテグリンの有害な結合が介在する、例
えば喘息のような疾患の処置のための、本発明の化合物を活性物質として含む医
薬の製造のための本発明の化合物の使用もまた、本発明の目的の１つである。

【００７２】 前述の担体物質及び希釈剤は、任意の従来の薬学的に許容しうる有機又は無機
物質、例えば、水、ゼラチン、乳糖、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、タ
ルク、アラビアゴム、ポリアルキレングリコールなどを含むことができる。

【００７３】 本発明の方法により調製される化合物であれば、これも本発明の目的の１つで
ある。

【００７４】 本発明により、式（１）の化合物は、式（１３）：

【００７５】

【化１７】

【００７６】 〔式中、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基を
形成し；そしてＲ₂及びＲ₃は、上記と同義である〕で示される環状ペプチドコア
化合物を、式（１９）：

【００７７】

【化１８】

【００７８】 〔式中、Ｒ₁₅は、低級アルキル、Ｒ−ＳＯ₂−、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_m−ＣＯ−又はＲ ₈ −Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−であり、そしてＲ、Ｒ₆及びＲ₈は、上記と同義であ
る〕で示される化合物と反応させることにより調製される。

【００７９】 本発明の化合物の調製に適した環状ペプチドコア（１３）は、式（２）及び（
３）の化合物を、下記の反応スキームＩにより反応させることによって調製する
ことができる。

【００８０】

【化１９】

【００８１】 〔ここで、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基
を形成し；Ｒ₂及びＲ₃は、上記と同義であり；Ｒ₇は、これの結合している酸素
と共に、加水分解可能なエステル基を形成し；Ｒ₉は、アミノ保護基であり；Ｒ_{1 0} 及びＲ₁₀′は、チオ保護基であり；そしてｎは、上記と同義である〕。

【００８２】 式（２）の化合物中のＲ₇は、対応する酸から、エステル化によりこの酸の遊
離カルボキシ基を保護することにより生成される。Ｒ₇は、好ましくはメチル基
のような低級アルキルである。式（２）の化合物の調製において、式（２）の化
合物中の対応する遊離酸をハロゲン化アルキルと反応させることにより、保護エ
ステルを生成させる。式（２）の対応する遊離酸基を標準的な加水分解可能なエ
ステル保護基に変換する任意の従来法を利用することができる。

【００８３】 反応スキームＩにおいて、式（２）のエステルは、式（２）の化合物を式（３
）のジブロモアルカンと反応させることにより、アルキル化される。このアルキ
ル化は、式（２）のエステルを強塩基、例えばリチウムジイソプロピルアミドに
より、低温、典型的には−４０〜−７８℃に維持した不活性溶媒、例えばＴＨＦ
中で処理し、次にこの反応混合物を式（３）のジブロモアルカンとこの温度で反
応させて、式（４）の臭化物を得ることにより便利には行われる。式（４）の臭
化物を、アルカリ金属アジドと反応させて、式（５）のアジドを生成させる。反
応のこの工程では、ハロゲン化物をアジド基に変換する任意の従来法を利用する
ことができる。例えば、室温〜８０℃の温度での、ＤＭＦのような適切な不活性
溶媒中のアジ化ナトリウムにより、式（５）のアジドが得られる。

【００８４】 式（５）のアジドは、Ｒ₇により生成されるエステル保護基の加水分解により
、式（６）の化合物に変換される。式（５）のアジドの対応する遊離酸である、
式（６）の化合物を生成させるこの加水分解は、エステル加水分解の任意の従来
法により行うことができる。例えば、式（５）のエステル基の加水分解は、室温
から溶媒の還流温度の温度での、水性メタノール中の過剰な水酸化リチウムでの
処理により達成して、式（６）の酸を得ることができる。

【００８５】 反応の次の工程において、式（６）の遊離酸は、式（７）のアミンと反応させ
て、式（６）の遊離酸基と、式（７）の遊離アミノ基の間にアミド結合を生成さ
せ、これにより式（８）のアジド化合物が得られる。式（８）の化合物の生成に
おいて、この反応を実施する際、アミド生成の任意の従来法を利用することがで
きる。式（６）及び（７）の化合物の縮合反応は、好ましくはペプチド化学にお
いて使用される従来のカップリング試薬、例えば、ＨＢＴＵを、室温で適切な溶
媒、例えばＤＭＦ中でジイソプロピルエチルアミンのような第３級塩基の存在下
で使用して行われる。

【００８６】 式（７）の化合物において、カルボキシル基は、Ｒ₁により保護される。環上
の他の保護基に影響を及ぼすことなく、このスキームの次の反応において容易に
脱離させることができるため、tert−ブチル基の使用が好ましい。また式（７）
の化合物において、Ｒ₁₀は、チオ保護基である。本明細書において上述のように
、任意の適切なチオ保護基が利用されよう。

【００８７】 「ｄ」と表示される不斉炭素原子を有する化合物（７）は、特定の立体配置を
有することができる。他方では化合物（７）は、立体異性体の混合物であっても
よい。化合物（７）の立体配置は、反応スキーム全体を通して伝えられる。した
がって、最終生成物の化合物（１）の立体配置は、化合物（７）の立体配置に依
存する。即ち、「ｄ」と表示される不斉炭素原子において、化合物（１）は、化
合物（７）と同じ特定の立体配置を有するか、あるいは化合物（７）が立体異性
体の混合物であるならば、化合物（１）は、立体異性体の混合物として製造され
よう。

【００８８】 式（８）の化合物は、対応する第１級アミンへのアジド基の還元により、式（
９）の化合物に変換される。対応する第１級アミンにアジドを還元する任意の従
来法を利用することができる。一般に、式（９）のアミンを生成させるアジド（
８）の還元は、従来の還元剤、好ましくはトリメチル−又はトリフェニルホスフ
ィンのようなホスフィンを、室温でジクロロメタンのような適切な不活性溶媒中
で使用して行われる。

【００８９】 反応の次の工程において、式（９）の第１級アミンは、式（１０）のシステイ
ン誘導体の遊離カルボン酸とカップリングさせることにより、式（１１）の化合
物を形成するペプチド結合を生み出すアミド基が生成する。式（９）のアミノ基
は、上述のような任意の従来のペプチドカップリング法により、システイン誘導
体（１０）の遊離酸とカップリングさせる。式（１１）の化合物の生成において
、化合物（１０）のＲ₉は、ペプチド合成において利用される任意の従来のアミ
ノ保護基であってよい。一般に、好ましいアミノ保護基は、約pH２．０〜３．０
の穏やかな酸性条件下で開裂されるものである。詳細には、好ましいアミノ保護
基は、第３級低級アルコキシカルボニル基、例えば、Ｂｏｃ基である。また、式
（１０）の化合物において、Ｒ₁₀′は、チオ保護基である。本明細書に上述のよ
うに、任意の適切なチオ保護基が利用されよう。

【００９０】 化合物（１０）は、「ｃ」と表示されるその不斉炭素原子において、特定の立
体配置を有することができる。他方では化合物（１０）は、立体異性体の混合物
であってもよい。化合物（１０）の立体配置は、反応スキーム全体を通して伝え
られる。したがって、最終生成物の化合物（１）の立体配置は、化合物（１０）
の立体配置に依存する。即ち、「ｃ」と表示される不斉炭素原子において、化合
物（１）は、化合物（１０）と同じ特定の立体配置を有するか、あるいは化合物
（１０）が立体異性体の混合物であるならば、化合物（１）は、立体異性体の混
合物であろう。

【００９１】 式（９）及び（１０）の化合物のアミドカップリング（ここで、化合物（９）
及び（１０）の両方又はいずれかが、特定の立体配置又はその混合物を有する）
を実施することができる。好ましくは、両化合物は、Ｌ−システインから誘導さ
れる。立体異性体の混合物が使用されるとき、化合物（１１）は、反応スキーム
を通して維持される立体異性体の混合物として製造される。あるいは、化合物（
１１）が、１つの立体異性体として生成されるとき、この立体異性体の特定の立
体配置は、反応スキームを通して維持される。

【００９２】 式（１１）の化合物は、環化されて、式（１２）の化合物が生成する。一般に
、化合物（１１）の環化は、式（１２）の環状ジスルフィドを与える、室温付近
でのヨウ素のジクロロメタン溶液による、０．５〜２g/lの希溶液中での処理に
より行うことができる。これらの条件下で、チオ保護基Ｒ₁₀及びＲ₁₀′は式（１
１）の化合物から脱離されて、２つのチオ基のカップリングが起こり、式（１１
）の化合物が環化されて、環状ジスルフィド（１２）が生成する。

【００９３】 反応の次の工程において、式（１３）の化合物は、環状ジスルフィド（１２）
の化合物からのＲ₉アミノ保護基の選択的脱離により生成する。環状ジスルフィ
ド（１２）は、アミノ保護基Ｒ₉及びエステル保護基Ｒ₁を含む。したがって、式
（１２）の化合物は、低温、好ましくは０〜２０℃で、酢酸エチル中の１N Ｈ
Ｃｌ中で酸性条件下で処理して、Ｒ₁エステル保護基に影響を及ぼさないままに
Ｒ₉アミノ保護基を脱離することにより、次のカップリング工程に適した遊離ア
ミン誘導体（１３）を与える。好ましいケースにおいて、生成物（１３）は、反
応混合物から沈殿するが、他のケースでは、エーテル若しくはヘキサンのような
溶媒の添加による沈殿、又は注意深い濃縮により、単離を行うことができる。

【００９４】 化合物（１１）中の不斉炭素原子「ｃ」及び「ｄ」の特定の立体配置は、化合
物（１３）まで伝えられる。したがって、化合物（１３）の立体配置は、化合物
（１１）を製造するために使用される化合物（７）及び（１０）の立体配置に依
存する。

【００９５】 化合物（１９）は、下記の反応スキーム２に示される手順により調製すること
ができる。

【００９６】

【化２０】

【００９７】

【化２１】

【００９８】 〔ここで、Ｒ₁₁は、エーテル保護基であり；Ｚは、脱離基であり；Ｒ₂₅は、低級
アルキルであり；Ｒ₃₅は、Ｒ−ＳＯ₂−であり；Ｒ₅₅は、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_m−ＣＯ
−又はＲ₈−Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−であり；Ｒ₈−Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−；Ｒ
、Ｒ₆、Ｒ₈、Ｘ、ｙ及びｍは、上記と同義である〕。

【００９９】 式（１９）の化合物は、最初に式（１４）の化合物と式（１５）の化合物とを
反応させて、式（１６）の化合物を生成させることにより製造される。この反応
では、化合物（１５）は、式（１４）の化合物の二重結合に１，４エノラート付
加により付加される。この反応を行う際に、二重結合へのエノラート付加の任意
の従来法を利用することができる。例えば、この１，４エノラート付加を行うと
き、式（１４）の化合物と化合物（１５）のＲ−ビスラクチムジメチルエーテル
及びｎ−ＢｕＬｉとの反応のような従来法により、化合物（１４）をそのリチウ
ムエノラートに変換する。−６０〜−７８℃での化合物（１４）及び（１５）の
反応の実施により、所望の生成物（１６）が得られる。

【０１００】 「ａ」と表示される不斉炭素原子において、化合物（１４）は、２つの可能な
幾何異性体の１つ又はこれら２つの幾何異性体の混合物として存在しうる。同様
に、「ｅ」と表示される不斉炭素原子のために、化合物（１５）は、１つの特定
の立体異性体又は立体異性体の混合物として存在しうる。したがって、化合物（
１４）及び（１５）の特定の立体配置に応じて、化合物（１６）の４つの可能な
立体異性体の１つ又はこれらの混合物を製造することができる。これらの種々の
立体配置は、化合物（１８）に伝えられる。

【０１０１】 化合物（１６）の好ましい立体配置は、下記式（１６′）：

【０１０２】

【化２２】

【０１０３】 〔式中、Ｒ₁₁は、上記と同義である〕で示される。

【０１０４】 式（１６）の化合物において、Ｒ₁₁基は、好ましくはメチルである。式（１６
）の化合物は、対応するＣＨ₂ＯＨ基への化合物（１６）のカルボキシメチル基
の還元、及び次にＣＨ₂ＯＨ基上のＯＨを脱離基Ｚに変換することにより、式（
１７）の化合物に変換される。一般に、この還元反応は、ＬｉＢＨ₄又はＬＡＨ
のような、リチウムアルミニウム又は水素化ホウ素リチウム還元試薬を、適切な
不活性溶媒、例えばＴＨＦ中で−２０℃と室温との間の温度で使用して行うこと
により、化合物が得られ、これは普通単離されないが、メシルオキシ又はトシル
オキシのような任意の従来の脱離基であってよい脱離基Ｚが得られる、適切な物
質との反応により、直接化合物（１７）に変換される。脱離基Ｚを得るための化
合物（１７）を反応させる任意の従来法は、例えば、第３級アミン塩基、例えば
ジイソプロピルエチルアミンの存在下でジクロロメタン中のメタンスルホニルク
ロリドでの処理を利用することができる。

【０１０５】 化合物（１７）は、６０〜１３０℃の温度でＤＭＦ中のヨウ化ナトリウムの存
在下での環化により、ラクタム（１８）に変換される。一般に、反応は便利には
、反応が完了するまで、反応温度の上昇に伴い、低沸点ジクロロメタン溶媒を留
去することにより行われる。ラクタム（１８）は、シリカゲルクロマトグラフィ
ーのような従来法により単離することができる。ラクタム（１８）の生成におい
て、化合物（１７）の窒素含有複素環における炭素に結合している２つのメトキ
シル基は、カルボニル基に変換される。

【０１０６】 ラクタム（１８）は、加水分解により式（１９ａ）の化合物に変換される。式
（１８）の化合物においてラクタム基とＲ₁₁により生成した保護基の両方を加水
分解する任意の既知法を用いることができる。例えば、１００〜１３０℃の温度
で数時間の酢酸中の４８％ ＨＢｒによるラクタム（１８）の処理によって、Ｒ ₁₁ 基の脱離が行われ、そしてラクタム環が開環することにより、（１９ａ）が得
られる。加水分解により、化合物（１８）における不斉炭素原子「ａ」及び「ｂ
」の特定の立体配置は、化合物（１９ａ）に伝えられる。したがって、化合物（
１９ａ）の立体配置は、化合物（１６）を生成させるのに使用される化合物（１
４）及び（１５）の立体配置に由来する。

【０１０７】 化合物（１９）の好ましい立体異性体は、下記式（１９Ｉ）：

【０１０８】

【化２３】

【０１０９】 で示される。

【０１１０】 本発明により、式（１９ａ）の化合物は、式（１９ａ）の化合物と塩化アセチ
ルとを重炭酸ナトリウムのような有機弱塩基の存在下で反応させることにより、
式（１９ｂ）の化合物に変換される。このようにして、式（１９ｂ）の化合物中
の遊離アミノ基が保護される。

【０１１１】 式（１９ｂ）の化合物は、４０℃〜８０℃の温度でメタノール中の無水塩酸に
よる式（１９ｃ）の化合物の処理によって、式（１９ｃ）の化合物に変換するこ
とができる。このようにして、式（１９ｂ）の化合物は、今や遊離アミノ基を有
する（１９ｃ）の保護酸に変換される。この遊離アミノ基は、別々に置換基Ｒ₂₅ 、Ｒ₅₅及びＲ₃₅へと変換することができる。

【０１１２】 Ｒ₂₅がアルキル基である式（２２）の化合物への式（１９ｃ）の化合物の変換
において、式（１９ｃ）の化合物は、低級アルキルアルデヒドで処理して、中間
体アミンが生成し、これを次にシアノ水素化ホウ素ナトリウムのような適切な還
元剤で、典型的には有機弱酸（例えば、酢酸）の存在下で処理することにより、
式（２２）の化合物が得られる。式（２２）の化合物は、アルカリ塩基（例えば
、水酸化ナトリウム）での処理のような、塩基性条件下の加水分解により式（１
９ｇ）の化合物に変換される。

【０１１３】 他方で、式（１９ｃ）の化合物は、低級アルキルスルホニルクロリドとの反応
により、式（１９ｅ）の化合物に変換することができる。このようにして、式（
１９ｃ）は、式（２０）の化合物に変換される。式（２０）の化合物への式（１
９ｃ）の化合物の変換において、第２級アミンを低級アルキルスルホニルクロリ
ドと縮合させる、任意の従来法を利用することができる。式（２０）の化合物は
、水性条件下のアルカリ塩基（例えば、水酸化ナトリウム）によるような、塩基
性条件下の加水分解により、式（１９ｅ）の化合物に変換される。このようにし
て、Ｒ₃₅が低級アルキルスルホニル基である式（１９ｅ）の化合物を製造するこ
とができる。

【０１１４】 式（１９ｃ）の化合物は、式（１９）の化合物とアシル化剤、特に下記式：

【０１１５】

【化２４】

【０１１６】 で示される反応性誘導体とを反応させることにより、式（２１）の化合物に変換
される。

【０１１７】 反応性誘導体は、酸ハロゲン化物又は酸無水物を含む。この手順において、第
２級アミンをこれら酸無水物又は酸ハロゲン化物でアシル化するための任意の従
来法を用いることができる。このようにして、式（１９ｆ）の化合物を製造する
。

【０１１８】 式（１９）の化合物は、式（１９ｆ）、（１９ｇ）及び（１９ｅ）の化合物か
らなる。この化合物は、下記の反応スキーム３により、式（Ig）の化合物に変換
することができる。

【０１１９】

【化２５】

【０１２０】 〔ここで、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄、Ｒ₅、Ｒ₆及びＲ₁₅は、上記と同義である〕。

【０１２１】 上述のように、式（１３）及び（１９）の化合物は、標準的アミド合成法、例
えば、式（１ａ）の化合物が得られる、室温と＋４５℃の間の温度でのＤＭＦの
ような非プロトン性極性溶媒中での小過剰のＨＢＴＵ及びジイソプロピルエチル
アミンでの（１３）及び（１９）の処理によって、式（１ａ）の化合物に変換さ
れる。Ｒ₁は、これの結合している酸素原子と共に、上述の加水分解可能なエス
テル基を形成する。加水分解可能なエステルの開裂に適した酸性条件下、例えば
、室温でジオキサン／ジクロロメタン中の４N塩酸での（１ａ）の更なる処理、
及び反応の終了後、エーテルでの生成物の沈殿によって、本発明の化合物（Ｉ）
が生成する。

【０１２２】 Ｒ₁₅が、tert−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ基）である、即ち、Ｒ₁₅が、Ｒ ₈ −Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−であり；かつＲ₈が、tert−ブチルであり、Ｘが、０
であり、そしてｙが、ゼロである、式（１）の化合物への式（１ａ）の化合物の
変換において、この基は、酸加水分解により式（Ｉａ）の化合物から脱離されて
、Ｒ₅が水素である、式（１）の化合物が生成する。他方で、Ｒ₅が水素である式
（１）の化合物は、Ｒ₅が水素である式（１）の化合物とＢｏｃ無水物とを、式
（１９ｃ）の化合物から式（２１）の化合物を形成するのに利用されたのと同じ
条件下で反応させることにより、変換してＢｏｃ基に戻すことができる。反応ス
キーム３において出発物質として、式（１９ａ）の化合物の代わりに式（１９ｇ
）の化合物が利用されるならば、アミノ基がＲ₂₅で置換された式（１）の化合物
が生成されよう。他方で、反応スキーム３の式（１９ａ）の化合物の代わりに式
（１９ｆ）の化合物が利用されるならば、置換基Ｒ₅₅を伴う式（１）の化合物が
生成されよう。他方で、反応スキーム３において式（１９ａ）の化合物を式（１
９ｅ）の化合物で置き換えるならば、置換基Ｒ₃₅を伴う式（１）の化合物が生成
されよう。

【０１２３】 本発明は更に以下の実施例により説明される。実施例において使用される用語
は、以下のとおり定義される： ＴＨＦは、テトラヒドロフランであり、 ＤＭＦは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドであり、 ＨＯＢＴは、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールであり、 ＢＯＰは、ヘキサフルオロリン酸〔（ベンゾトリアゾール−１−イル）オキシ
〕トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムであり、 ＨＡＴＵは、ヘキサフルオロリン酸Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−
イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムであり、 ＨＢＴＵは、ヘキサフルオロリン酸Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ′，
Ｎ′−テトラメチルウロニウムであり、 ＤＩＰＥＡは、ジイソプロピルエチルアミンであり、 ＤＭＡＰは、４−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ピリジンであり、 ＤＰＰＡは、ジフェニルホスホリルアジドであり、 ＤＢＵは、１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデカ−７−エンであり
、 ＮａＨは、水素化ナトリウムであり、 ブラインは、塩化ナトリウム飽和水溶液であり、 ＴＬＣは、薄層クロマトグラフィーであり、 ＬｉＯＨは、水酸化リチウムであり、 ＬＤＡは、リチウムジイソプロピルアミドであり、 ＢＯＰ−Ｃｌは、ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸塩
化物であり、 ＮＭＰは、Ｎ−メチルピロリジノンであり、 Ｆｍｏｃは、（９−フルオレニルメトキシ）カルボニルであり、 ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸であり、 ＨＯＡｃは、酢酸であり、 ＨＲＭＳは、高分解能質量分析であり、 トリチルは、トリフェニルメチルであり、 ＬＡＨは、水素化アルミニウムリチウムであり、 ＤＣＭは、ジクロロメタンであり、 Ｂｏｃは、〔〔（１，１−ジメチル）エトキシ〕カルボニル〕−であり、 Ｂｏｃ無水物は、ジ−tert−ブチル−ジカルボナートであり、 Ｂｏｃ₂Ｏは、ジ−tert−ブチル−ジカルボナートであり、 ＨＲＰは、西洋ワサビペルオキシダーゼであり、 ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドであり、 ＢＳＡは、ウシ血清アルブミンであり、 ＣＨＯは、チャイニーズハムスター卵巣であり、 ＥＤＴＡは、エチレンジアミン四酢酸であり、 ＰＭＳＦは、ｐ−トルエンスルホニルフルオリドであり、 ＰＢＳは、リン酸緩衝液である。

【０１２４】 実施例 実施例１ １−（２−アジドエチル）シクロペンタンカルボン酸の調製

【０１２５】

【化２６】

【０１２６】 ａ．ＴＨＦ ８５（mL）中のジイソプロピルアミン（５６mL、０．３９６mol）
の氷冷溶液に、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウム（２４０mL、１．６M、０．３
９３mol）を２０分かけて加えた。混合物を０℃で３０分間撹拌し、−６５℃の
浴温まで冷却して、ＴＨＦ（５０mL）中のシクロペンタンカルボン酸エチル（３
７．４ｇ、０．２６３mol）を２０分かけて加えた。１時間後、ＴＨＦ（５０mL
）中の１，２−ジブロモエタン（４７mL、０．５４５mol）の溶液を加え、混合
物を−６５℃で３時間保持して、一晩室温まで温まるのを待った。反応は、塩化
アンモニウム飽和溶液（２００mL）の添加によりクエンチし、層を分離して、水
層を酢酸エチル（１００mL）で抽出した。合わせた抽出物を１：１のブライン：
水（２５０mL）で洗浄して、乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）した。この溶液を濾過して濃縮
し、トルエン（１００mL）で希釈して濃縮した。希釈と濃縮を２回繰り返して、
１−（２−ブロモエチル）シクロペンタンカルボン酸エチルである臭化物を得た
（５２．５ｇ）。

【０１２７】

【化２７】

【０１２８】 ｂ．ＤＭＦ（２００mL）中の上記臭化物（５２．５ｇ、０．２１１mol）及びア
ジ化ナトリウム（５４ｇ、０．８３１mol）の溶液を５０℃で５時間窒素雰囲気
下で撹拌して濾過した。濾液をほぼ乾燥状態まで濃縮し、酢酸エチル（５００mL
）で希釈し、濾過して濃縮することにより、粗１−（２−アジドエチル）シクロ
ペンタンカルボン酸エチル（４０．９ｇ）を褐色の油状物として得た。この物質
を以前の実施分からの生成物と合わせて（合計６３．５ｇ）、ヘキサン中の５％
酢酸エチルで溶出するシリカゲル２５０ｇのクロマトグラフィーにより精製して
、１−（２−ブロモエチル）シクロペンタンカルボン酸エチル５０．３ｇを明褐
色の油状物として得た。

【０１２９】

【化２８】

【０１３０】 ｃ．上からの１−（２−ブロモエチル）シクロペンタンカルボン酸エチル（５０
．３ｇ、０．２３８mol）をＴＨＦ（７５０mL）及びメタノール（３７５mL）に
溶解して、水（３００mL）中の水酸化リチウム水和物（１５ｇ、０．３５７mol
）の溶液を加えた。生じた溶液を４０℃で一晩撹拌して濃縮した。残渣を、１N
水酸化ナトリウム４０mLを含む水２Lに溶解して、ヘキサン（１L）で洗浄した。
水層を、１N ＨＣｌ（３７５mL）で酸性にして、エーテル（２×１L）で抽出し
た。合わせた抽出物を乾燥（Ｎａ₂ＳＯ₄）して濃縮することにより、１−（２−
アジドエチル）シクロペンタンカルボン酸（３７．５ｇ）を琥珀色の液体として
得た。

【０１３１】 実施例２ Ｎ−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｓ−トリチル−Ｌ−システイン−ｔ−ブ
チルエステルの調製

【０１３２】

【化２９】

【０１３３】 無水トルエン（１０mL）中のＦｍｏｃ−Ｓ−トリチル−Ｌ−システイン（２．
９ｇ、５mmol）の懸濁液を８０℃に加熱した。この懸濁液に２０分かけて、ジ−
tert−ブチル−ジメチルホルムアミドアセタール（４．８mL、２０mmol）を加え
た。溶液を冷却し、水、飽和重炭酸ナトリウム（２×１０mL）で洗浄して、溶媒
を留去した。残渣を、酢酸エチル／ヘキサン（１５／８５）で溶出するフラッシ
ュクロマトグラフィーにより精製して、Ｎ−フルオレニルメトキシカルボニル−
Ｓ−トリチル−Ｌ−システイン−ｔ−ブチルエステル２．２ｇを得た。

【０１３４】 実施例３ Ｎ−〔〔１−（２−アジドエチル）シクロペンチル〕カルボニル〕−Ｓ−トリフ
ェニルメチル−Ｌ−システイン１，１−ジメチルエチルエステルの調製

【０１３５】

【化３０】

【０１３６】 ＤＭＦ ５mL中のＮ−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｓ−トリチル−Ｌ−
システイン１，１−ジメチルエチルエステル（６４０mg、１mmol）の溶液に、ピ
ペリジン２mLを加えた。この溶液を２０分間撹拌して、溶媒を留去した。残った
ピペリジンは、固体をＤＭＦ（３×２０mL）と共沸し、高真空下で１時間乾燥す
ることにより除去して、Ｓ−トリチル−Ｌ−システイン１，１−ジメチルエチル
エステルを固体として得た。この固体に、ＤＭＦ ５mL、次に１−（２−アジド
エチル）シクロペンタンカルボン酸（６ａ）（１８３mg、１mmol）、ＨＢＴＵ（
３７９mg、１mmol）、及びＤＩＰＥＡ（０．１８mL、１mmol）を加えた。生じた
溶液を５時間撹拌し、高真空下で溶媒を除去した。残渣を、酢酸エチル／ヘキサ
ン（１５／８５）を溶離液として使用するシリカゲルカラムクロマトグラフィー
により精製して、Ｎ−〔〔１−（２−アジドエチル）シクロペンチル〕カルボニ
ル〕−Ｓ−トリフェニルメチル−Ｌ−システイン１，１−ジメチルエチルエステ
ル５００mg（８６％）を得た。

【０１３７】 実施例４ ２（Ｒ）−〔〔〔１−〔〔２（Ｒ）−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボ
ニル〕アミノ〕−１−オキソ−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロピル〕
アミノ〕エチル〕シクロペンチル〕カルボニル〕アミノ−３−〔（トリフェニル
メチル）チオ〕プロパン酸１，１−ジメチルエチルエステル（１１ａ）の調製

【０１３８】

【化３１】

【０１３９】 ＴＨＦ ５mL中のＮ−〔〔１−（２−アジドエチル）シクロペンチル〕カルボ
ニル〕−Ｓ−トリフェニルメチル−Ｌ−システイン１，１−ジメチルエチルエス
テル（５００mg、０．８６mmol）の溶液に、アルゴン下、ＴＨＦ中のトリメチル
ホスフィンの溶液（１M溶液１．４１mL、１．５当量）を加えた。この溶液を３
時間撹拌し、次に水６滴を加えた。生じた溶液を１５分間撹拌し、溶媒を真空下
で留去して、残渣を高真空下で１４時間乾燥した。生じた油状物に、ＤＭＦ ５
mL中のＮ−〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕−Ｓ−トリチル−Ｌ−
システイン（１０）（４６３mg、１mmol）、ＨＢＴＵ（３７９mg、１mmol）、及
びＤＩＰＥＡ（０．１８mL、１mmol）の溶液を加えた。この溶液を６時間撹拌し
て、溶媒を高真空下で留去した。残渣を、ヘキサン中の３５％酢酸エチルで溶出
するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、２（Ｒ）−〔〔〔１−〔〔
２（Ｒ）−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−１−オキ
ソ−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロピル〕アミノ〕エチル〕シクロペ
ンチル〕カルボニル〕アミノ−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロパン酸
１，１−ジメチルエチルエステル（１１ａ）５１０mg（５９％）を得た。

【０１４０】 実施例５ （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミ
ノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４
．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステルの調製

【０１４１】

【化３２】

【０１４２】 ９／１のジクロロメタン−メタノール５００mL中の２（Ｒ）−〔〔〔１−〔〔
２（Ｒ）−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−１−オキ
ソ−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロピル〕アミノ〕エチル〕シクロペ
ンチル〕カルボニル〕アミノ−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロパン酸
１，１−ジメチルエチルエステル（１１ａ）（５１０mg、０．５１mmol）の溶液
に５分かけて、９／１のジクロロメタン−メタノール５００mL中のヨウ素（５２
０mg、４当量）の溶液を加えた。生じた反応混合物を１０分間撹拌し、０．１M Ｎａ₂Ｓ₂Ｏ₃ ３００mLでクエンチした。層を分離して、水層をジクロロメタ
ン２００mLで抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥
して、溶媒を留去することにより、油状物を得た。１／１の酢酸エチル／ヘキサ
ンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、（８Ｒ，１３Ｒ）
−１３−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−６，１４−
ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデ
カン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル１６０mg（６１％）を得
た。

【０１４３】 実施例６ （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−アミノ−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−
７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジ
メチルエチルエステルの調製

【０１４４】

【化３３】

【０１４５】 酢酸エチル５mL中のメタノール（０．１５mL、３．８mmol）の混合物に０℃で
アルゴン雰囲気下、塩化アセチル（０．２７mL、３．８mmol）を加えた。この溶
液を０℃で１０分間、及び室温で３０分間撹拌した。この溶液に、（８Ｒ，１３
Ｒ）−１３−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−６，１
４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプ
タデカン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル（１３０mg、０．２
５mmol）を加えた。混合物を７時間撹拌した。沈殿物をガラスフリットに集めて
、エチルエーテルで洗浄した。高真空下で乾燥後、（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−ア
ミノ−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４
．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル９２mg
を得た（濾液及び洗浄液の留去後の回収出発物質に基づく収率９６％）。

【０１４６】 実施例７ ３（Ｒ）−〔（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジヒドロ−３，６−ジメトキシ−５−（
１−メチルエチル）−２−ピラジニル〕−３−（４−メトキシフェニル）プロパ
ン酸メチルエステルの調製

【０１４７】

【化３４】

【０１４８】 無水ＴＨＦ ２５０mL中の（Ｒ）−２，５−ジメトキシ−３−イソプロピル−
３，６−ジヒドロピラジン（１８．４ｇ、１００mmol）の溶液に−７０℃（内部
温度）で、ｎ−ＢｕＬｉの溶液（ヘキサン中１．６M、６３mL、１００mmol）を
、内部温度が−７０℃未満を維持するように、３時間かけて滴下により加えた。
添加後、溶液を−７０℃で４０分間撹拌した。次にこの溶液に、trans−４−メ
トキシケイ皮酸メチル（２１．２ｇ、１１０mmol）のＴＨＦ溶液９０mLを１時間
かけて加えた。生じた溶液を−７０℃で更に４時間撹拌した。反応は、−７０℃
での酢酸（６．１mL、１００mmol）の添加によりクエンチして、生じた懸濁液を
室温まで加温することにより、黄色の溶液を得た。この溶液をエーテルで１００
０mLまで希釈し、有機層を水（３×８０mL）及びブライン（３×８０mL）で洗浄
して、ＭｇＳＯ₄で乾燥した。溶媒の除去後、残渣（４４．３ｇ）を、酢酸エチ
ル／ヘキサン（１：５．５）で溶出するシリカゲルのＨＰＬＣにより精製して、
３（Ｒ）−〔（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジヒドロ−３，６−ジメトキシ−５−（
１−メチルエチル）−２−ピラジニル〕−３−（４−メトキシフェニル）プロパ
ン酸メチルエステル（３０．６ｇ、８１．３mmol、８１．３％）を得た。ＴＬＣ
：Ｒｆ＝０．３、酢酸エチル／ヘキサン（１／５）。ＨＲＭＳ、実測値 ３７７
．２０７１、計算値 ３７７．２０７６。元素分析：Ｃ₂₀Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₅の計算値：
Ｃ、６４．１６；Ｈ、７．００；Ｎ、７．４８。実測値：Ｃ、６４．０５；Ｈ、
７．２８；Ｎ、７．３７。

【０１４９】 実施例８ ３（Ｒ）−〔（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジヒドロ−３，６−ジメトキシ−５−（
１−メチルエチル）−２−ピラジニル〕−３−（４−メトキシフェニル）プロパ
ノールの調製

【０１５０】

【化３５】

【０１５１】 滴下ロート及び温度計を取り付けた乾燥した二つ口フラスコに、３（Ｒ）−〔
（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジヒドロ−３，６−ジメトキシ−５−（１−メチルエ
チル）−２−ピラジニル〕−３−（４−メトキシフェニル）プロパン酸メチルエ
ステル（１７．５ｇ、４６．４８mmol）及び無水ＴＨＦ ５５９mLを加えた。次
にこの溶液を、アセトン−氷浴中でアルゴン下、−１０℃に冷却した。この溶液
に、ＴＨＦ中の水素化アルミニウムリチウムの溶液（０．８M、６０mL、４８mmo
l）を、内部温度を０℃未満に維持するような速度で滴下により加えた。添加後
、氷浴を取りはずし、反応混合物を室温で２時間撹拌した。反応は、酢酸エチル
１０mL、次に硫酸ナトリウム飽和溶液２５mLの添加によりクエンチした。生じた
白色の沈殿物を濾過して、酢酸エチル（４×１００mL）で洗浄した。次に合わせ
た濾液を濃縮することにより、３（Ｒ）−〔（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジヒドロ
−３，６−ジメトキシ−５−（１−メチルエチル）−２−ピラジニル〕−３−（
４−メトキシフェニル）プロパノールを無色の油状物（１７．７ｇ）として得た
。ＴＬＣ（Ｒｆ：０．５、酢酸エチル／ヘキサン＝１：１）単一スポット。

【０１５２】 実施例９ メタンスルホン酸３（Ｒ）−〔（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジヒドロ−３，６−ジ
メトキシ−５−（１−メチルエチル）−２−ピラジニル〕−３−（４−メトキシ
フェニル）プロピルエステル（２９）の調製

【０１５３】

【化３６】

【０１５４】 上記の油状の３（Ｒ）−〔（２Ｓ，５Ｒ）−２，５−ジヒドロ−３，６−ジメ
トキシ−５−（１−メチルエチル）−２−ピラジニル〕−３−（４−メトキシフ
ェニル）プロパノール（２８）（１７．７ｇ）をジクロロメタン３００mLに溶解
した。この溶液に−５℃で、メタンスルホニルクロリド（８．０２ｇ、５．４２
mL、７０mmol）を加え、次にジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、１２mL
、７０mmol）を１０分かけて滴下により加えた。反応液を０℃で２時間撹拌した
。この明黄色の溶液をエーテル２Lで希釈して水（３×２００mL）及び食塩水（
２×２００mL）で洗浄した。硫酸ナトリウムで乾燥後、この溶液を２０℃で真空
下１６０mLの容量まで濃縮した。ＥＡ／Ｈ（＝１：１）中のＴＬＣ：Ｒｆ＝０．
７４、主要なスポットとして；Ｒｆ＝０．２１、小スポットとして。

【０１５５】 実施例１０ （３Ｒ，８Ｒ，８ａＳ）−ヘキサヒドロ−８−（４−メトキシフェニル）−３−
（１−メチルエチル）ピロロ〔１，２−ａ〕ピラジン−１，４−ジオキシド（３
０）の調製

【０１５６】

【化３７】

【０１５７】 圧力平衡化滴下ロート、温度計及びショートパス分留頭を取り付けた２Lの三
つ口フラスコに、ＤＭＦ １，０００mL及びヨウ化ナトリウム（３３ｇ、２００
mmol）を充填した。実施例９において上で得られた粗メタンスルホナート（２９
）の溶液を、アルゴン下６０〜１２０℃の浴温で滴下ロートにより１．２時間か
けてＤＭＦ溶液に加えた。添加後、低沸点成分は、１００mm圧の分留頭を介する
蒸留により除去した。残渣を１２０℃（内部温度）で更に２．５時間撹拌した。
反応混合物を室温まで冷却した後、溶媒を真空下で留去して、残渣を酢酸エチル
（７００mL）で希釈した。生じた白色の固体を濾過により集め、酢酸エチル（３
×１００mL）で洗浄して捨てた。合わせた濾液を水（３×１００mL）で洗浄した
。水層をＮａＣｌで飽和させて、酢酸エチル（３×２００mL）で抽出した。合わ
せた酢酸エチル層を硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮することにより、粗生成物（
３０）１６．５ｇを得た。酢酸エチルで溶出するシリカゲル３００ｇによる濾過
後、（３０）を得た（ＤＭＦ １当量を含む１１．５ｇ）。酢酸エチル：ヘキサ
ン（８：１）で溶出するシリカゲルカラムのＨＰＬＣ精製によって、（３０）９
．３ｇを白色の泡状固体として得た。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：実測値 ３０２．１
６２７，計算値 ３０２．１６３０。

【０１５８】 実施例１１ （＋）−（２Ｓ，３Ｒ）−１−アセチル−３−（４−ヒドロキシ）フェニルプロ
リン（２９）の調製

【０１５９】

【化３８】

【０１６０】 実施例１０において上で得られた化合物（３０）（８．０ｇ、２６．４５mmol
）を４８％臭化水素酸水溶液６０mL及び酢酸１８mLに溶解した。この溶液を１３
０〜１３５℃の浴温で３．５時間撹拌した。反応は、逆相ＨＰＬＣによりモニタ
ーした。次に溶媒合計６５mLを真空下で蒸留して、残渣を室温に冷却した。生じ
た白色の結晶性固体（バリン臭化水素酸塩、２．１５ｇ）を濾過により除去して
、濾液を水（７０mL）で希釈した。水層を固体ＮａＨＣＯ₃（２５．６ｇ）で処
理することにより、（３１）の褐色の懸濁液を得た。次いで上記懸濁液に、ＴＨ
Ｆ ６０mL中の塩化アセチル（１２．２mL、１７１mmol）を２０℃で２時間かけ
て加えた。添加中、７を超える反応pHを維持するために、ＮａＨＣＯ₃更に１．
２ｇを数回に分けて加えた。添加後、懸濁液を室温で一晩撹拌した。ＴＦＡによ
りpH＜３まで酸性化後、懸濁液を濃縮乾固して、褐色の残渣をアセトン（２×２
５０mL）で抽出した。アセトン溶液を硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮することに
より、褐色のゴム状物を得た。この褐色の残渣を熱酢酸エチル（２×２５０mL）
で抽出することによりＮ−アセチルバリンを除去した。残った褐色のゴム状物（
１１．２ｇ）を水６０mLに溶解して、ＲＰ−ＨＰＬＣ（５×３０cmウォーターズ
Ｃ−１８デルタプレップ（Waters C-18 Delta Prep）カラム、水中の５％〜９５
％アセトニトリルの線形勾配で溶出、１５０mL/分）により精製して、（＋）−
（２Ｓ，３Ｒ）−１−メチルカルボニル−３−（４−ヒドロキシ）フェニルプロ
リン（３２）を白色の固体（３．４５ｇ、１４．２４mmol）（５３．８％）とし
て得た。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）、実測値 ２５０．１０７８、計算値 ２５０．１
０７９。

【０１６１】 実施例１２ （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシ
フェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジ
オキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカ
ン−８−カルボン酸の調製

【０１６２】

【化３９】

【０１６３】 ＤＭＦ ２０mL中の実施例１１で調製された（２Ｓ，３Ｒ）−１−メチルカル
ボニル−３−（４−ヒドロキシ）フェニルプロリン（２９）（１．３７ｇ、５．
５mmol）及び実施例６で調製された（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−アミノ−６，１４
−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタ
デカン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル（２．２７ｇ、５．０
mmol）の溶液に、ＨＢＴＵ（２．０８ｇ、５．５mmol）及びＤＩＰＥＡ（２．７
mL、１５mmol）を室温で加えた。この溶液をアルゴン下で１．５時間撹拌した。
次いで反応は、ブライン３０mLでクエンチして、生じた混合物を酢酸エチル（３
×１００mL）で抽出した。合わせた有機層を０．１N塩化水素、飽和ＮａＨＣＯ₃ 、及びブライン（それぞれ２×３０mL）で洗浄して、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶
媒の除去後、生じた黄色の泡状物をジクロロメタン−ヘキサンから再結晶するこ
とにより、（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）−（４−
ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６
，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕
ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステルを明黄色の粉末
（３．０１ｇ）として得た。

【０１６４】 無水ジクロロメタン１５mL中のこのエステル（３．０１ｇ）の溶液に、ジオキ
サン中の４N ＨＣｌ（５０mL）を室温で１度に加えた。生じた溶液を室温で４
．５時間撹拌することにより、懸濁液を得た。この懸濁液を混合溶媒（３：７の
ジクロロメタン：エーテル）５０mLで希釈して濾過した。明黄色のフィルターケ
ーキを上記混合溶媒（２×２０mL）、次いでエーテル（２×２０mL）で洗浄した
。ケーキを真空下で乾燥することにより、明黄色の粉末（２．５１ｇ、ＨＰＬＣ
純度：＞８５％）を得た。最後の精製は、ＲＰ−ＨＰＬＣで行って、（８Ｒ，１
３Ｒ）−１３−アミノ−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−
ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸を白色の固体（１．５
５ｇ、２．６１mmol）として収率５２％で得た。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：実測値
５９３．２０９、計算値 ５９３．２１０３。

【０１６５】 実施例１３ １−（２−アジドエチル）シクロヘキサンカルボン酸の調製

【０１６６】

【化４０】

【０１６７】 実施例１に記載される方法を用い、かつシクロヘキサンカルボン酸エチルエス
テルから出発して、１−（２−アジドエチル）シクロヘキサンカルボン酸を油状
物として得た。低分解能質量分析（ＥＳ−）ｍ／ｚ １９６．１〔（Ｍ−Ｈ）、
Ｃ₉Ｈ₁₄Ｎ₃Ｏ₂の計算値：１９６．１〕。

【０１６８】 実施例１４ Ｎ−〔〔（１−（２−アジドエチル）シクロヘキサン〕カルボニル〕−Ｓ−トリ
フェニルメチル−Ｌ−システインメチルエステル（２２）の調製

【０１６９】

【化４１】

【０１７０】 ＤＭＦ（１２mL）中の１−（２−アジドエチル）シクロヘキサンカルボン酸（
２０）（０．６０ｇ、３．０mmol）、Ｓ−トリフェニルメチル−Ｌ−システイン
メチルエステルのＴＦＡ塩（１．４ｇ、３．０mmol）及びジイソプロピルエチル
アミン（０．７８ｇ、６．０mmol）の溶液に、ＨＢＴＵ（１．１ｇ、３．０mmol
）を加えた。生じた混合物を室温で４時間撹拌した。この反応混合物を、酢酸エ
チル（１００mL）及び水（３５mL）を含む分液ロートに注ぎ入れた。水層を分離
して、酢酸エチル（２×５０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を飽和ブライン
で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過して真空下で濃縮した。ヘキサン：酢酸エ
チル（８：１）で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して
、アジド（２２）（１．２５ｇ、７４％）を白色の固体として得た。高分解能質
量分析：ｍ／ｚ ５７９．２３９６〔（Ｍ＋Ｎａ）⁺；Ｃ₃₂Ｈ₃₆Ｎ₄Ｏ₃ＳＮａの
計算値：５７９．２４０６〕。

【０１７１】 実施例１５ メチルエステル（２３） Ｎ−〔〔１−〔２−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ
）カルボニル〕アミノ〕エチル〕シクロヘキサン〕カルボニル〕−Ｓ−トリフェ
ニルメチル−Ｌ−システインメチルエステルの調製

【０１７２】

【化４２】

【０１７３】 ＴＨＦ（１０ml）中の実施例１４において上で得られたアジド（２２）（１．
２４ｇ、２．２mmol）の溶液に、トリメチルホスフィン（２．５ml、ＴＨＦ中１
M、２．５mmol）を滴下により加えた。生じた混合物を室温で３０分間撹拌して
、水（０．０８０ｇ、４．５mmol）を反応混合物に加えた。２時間撹拌後、反応
混合物をＣＨ₂Ｃｌ₂（７０mL）で希釈し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濾過して真空で
濃縮した。この油状物を高真空下で５時間乾燥させた。

【０１７４】 この粗アミンを酢酸エチル（１０mL）に溶解して、Ｂｏｃ₂Ｏ（１．０ｇ、４
．６mmol）をこの混合物に加えた。生じた混合物を一晩撹拌した。反応混合物を
、酢酸エチル（７５mL）及び水（２５mL）を含む分液ロートに注ぎ入れた。水層
を分離して、酢酸エチル（１×５０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を飽和ブ
ラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過して真空で濃縮した。ヘキサン−酢
酸エチル（６：１、次いで４：１）で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフ
ィーにより精製して、Ｎ−〔〔１−〔２−〔〔（１，１−ジメチルエトキシ）カ
ルボニル〕アミノ〕エチル〕シクロヘキサン〕カルボニル〕−Ｓ−トリフェニル
メチル−Ｌ−システインメチルエステル（２３）（０．８８ｇ、６２％）を得た
。高分解能質量スペクトル ｍ／ｚ ６５３．３００７〔（Ｍ＋Ｎａ）⁺；Ｃ₃₇
Ｈ₄₆Ｎ₂Ｏ₅ＳＮａの計算値：６５３．３０２５〕。

【０１７５】 実施例１６ ２（Ｒ）−〔〔〔１−〔２−〔〔３−〔〔（アセチルアミノ）メチル〕チオ〕−
２（Ｒ）−〔〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕アミノ〕
−１−オキソプロピル〕アミノ〕エチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕アミノ
〕−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロパン酸メチルエステル（２４）の
調製

【０１７６】

【化４３】

【０１７７】 ジクロロメタン（１０ml）中の実施例１５で生成したエステル（２３）（０．
８８ｇ、１．４mmol）の溶液にＴＦＡ（５ml）を加えた。この混合物を４５分間
撹拌して、真空で濃縮した。このＴＦＡ塩を高真空下で２時間乾燥した。

【０１７８】 ＤＭＦ（１０ml）中の粗ＴＦＡ塩、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ａｃｍ）−ＯＨ（５７
５mg、１．４mmol）及びジイソプロピルエチルアミン（１ml、過剰）の溶液に、
ＨＢＴＵ（５９５mg、１．６mmol）を加えた。生じた混合物を一晩撹拌した。反
応混合物を、酢酸エチル（１５０ml）を含む分液ロートに注ぎ入れて、０．３M ＨＣｌ（２×３０ml）で洗浄した。水層を合わせて、酢酸エチル（１×５０ml
）で逆抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ₃（１×３０ml）で洗浄し、
ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過して真空で濃縮した。ヘキサン−酢酸エチル（１：１
、次いで２：３）で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製し
て、２（Ｒ）−〔〔〔１−〔２−〔〔３−〔〔（アセチルアミノ）メチル〕チオ
〕−２（Ｒ）−〔〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル〕アミ
ノ〕−１−オキソプロピル〕アミノ〕エチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕ア
ミノ〕−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロパン酸メチルエステル（２４
）（１．０５ｇ、８０％）を得た。ＨＲＭＳ：（Ｃ₅₃Ｈ₅₈Ｎ₄Ｏ₇Ｓ₂）：実測値
、ｍ／ｚ９４９．３６３６（Ｍ＋Ｎａ）⁺。計算値 ９４９．３６４５。

【０１７９】 実施例１７ ２（Ｒ）−〔〔〔１−〔２−〔〔３−〔〔（アセチルアミノ）メチル〕チオ〕−
２（Ｒ）−〔〔２（Ｓ）３（Ｒ）−１−アセチル−３−（４−ヒドロキシフェニ
ル）ピロリジン−２−イル〕カルボニル〕アミノ〕−１−オキソプロピル〕アミ
ノ〕エチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕アミノ〕−３−〔（トリフェニルメ
チル）チオ〕プロパン酸メチルエステルの調製

【０１８０】

【化４４】

【０１８１】 ＤＭＦ（３ml）中の化合物２（Ｒ）−〔〔〔１−〔２−〔〔３−〔〔（アセチ
ルアミノ）メチル〕チオ〕−２（Ｒ）−〔〔（９Ｈ−フルオレン−９−イルメト
キシ）カルボニル〕アミノ〕−１−オキソプロピル〕アミノ〕エチル〕シクロヘ
キシル〕カルボニル〕アミノ〕−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロパン
酸メチルエステル（２４）（５００mg、０．５４mmol）の溶液に、ピペリジン（
２ml）を加えた。混合物を１時間撹拌して真空下で濃縮した。残渣を高真空で一
晩乾燥した。粗残渣をヘキサン（３×２５ml）で洗浄して、高真空下で４５分間
乾燥することにより、（２４）からのＦｍｏｃ基の脱離に由来する粗アミン（３
６４mg）を得た。この粗アミンをアルゴン下で−１０℃で貯蔵した。

【０１８２】 ＤＭＦ（１ml）中の上記アミン（５０mg、０．０７mmol）、（２Ｓ，３Ｒ）−
１−アセチル−３−（４−ヒドロキシ）フェニルプロリン（３２）（１８mg、０
．０７mmol）及びジイソプロピルエチルアミン（０．０５ml、過剰）の溶液に、
ＨＢＴＵ（３０mg、０．０８mmol）を加えた。生じた混合物を室温で３．５時間
撹拌した。反応混合物を、酢酸エチル（５０ml）を含む分液ロートに注ぎ入れて
、０．５M ＨＣｌ（２×１５ml）で洗浄した。水層を合わせて酢酸エチル（１
×２０ml）で逆抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＨＣＯ₃（１×１５ml）で
洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過して真空で濃縮することにより、粗生成物（
２５）５０mgを得た。この物質は、精製するのが難しいため、完全な性状解析は
、メチルエステルの加水分解後に行った。

【０１８３】 実施例１８ ２（Ｒ）−〔〔〔１−〔２−〔〔３−〔〔（アセチルアミノ）メチル〕チオ〕−
２（Ｒ）−〔〔２（Ｓ）３（Ｒ）−１−アセチル−３−（４−ヒドロキシフェニ
ル）ピロリジン−２−イル〕カルボニル〕アミノ〕−１−オキソプロピル〕アミ
ノ〕エチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕アミノ〕−３−〔（トリフェニルメ
チル）チオ〕プロパン酸（２６）の調製

【０１８４】

【化４５】

【０１８５】 ＭｅＯＨ（０．５ml）中の２（Ｒ）−〔〔〔１−〔２−〔〔３−〔〔（アセチ
ルアミノ）メチル〕チオ〕−２（Ｒ）−〔〔２（Ｓ）３（Ｒ）−１−アセチル−
３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−イル〕カルボニル〕アミノ〕
−１−オキソプロピル〕アミノ〕エチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕アミノ
〕−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロパン酸メチルエステル（２５）（
５０mg粗生成物）の溶液に、水（０．２５ml）中の水酸化リチウム（２．５mg、
０．０６０mmol）の溶液を加えた。混合物を２時間撹拌して、０．５M ＨＣｌ
（数滴）により反応混合物を酸性（pH≒１〜２）にした。反応混合物を、酢酸エ
チル（２０ml）及び水（５ml）を含む分液ロートに注ぎ入れた。水層を分離して
、酢酸エチル（２×１０mL）で逆抽出した。合わせた有機層を飽和ブラインで洗
浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過して真空下で濃縮した。２５分間かけて１５〜
９５％アセトニトリル−水勾配を使用する逆相ＨＰＬＣによる精製によって、２
（Ｒ）−〔〔〔１−〔２−〔〔３−〔〔（アセチルアミノ）メチル〕チオ〕−２
（Ｒ）−〔〔２（Ｓ）３（Ｒ）−１−アセチル−３−（４−ヒドロキシフェニル
）ピロリジン−２−イル〕カルボニル〕アミノ〕−１−オキソプロピル〕アミノ
〕エチル〕シクロヘキシル〕カルボニル〕アミノ〕−３−〔（トリフェニルメチ
ル）チオ〕プロパン酸（２６）（４２mg）を得た。高分解能質量スペクトル ｍ
／ｚ ９４４．３７０１（Ｍ＋Ｎａ）⁺；Ｃ₅₀Ｈ₅₉Ｎ₅Ｏ₈Ｓ₂Ｎａの計算値：９４
４．３７０３。

【０１８６】 実施例１９ （９Ｒ，１４Ｒ）−１４−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシ
フェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−７，１５−ジ
オキソ−１１，１２−ジチア−８，１６−ジアザスピロ〔５．１２〕オクタデカ
ン−９−カルボン酸の合成

【０１８７】

【化４６】

【０１８８】 ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ（１００ml、９：１）中の２（Ｒ）−〔〔〔１−〔２−
〔〔３−〔〔（アセチルアミノ）メチル〕チオ〕−２（Ｒ）−〔〔２（Ｓ）３（
Ｒ）−１−アセチル−３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−イル〕
カルボニル〕アミノ〕−１−オキソプロピル〕アミノ〕エチル〕シクロヘキシル
〕カルボニル〕アミノ〕−３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロパン酸（２
６）（４０mg、０．０４５mmol）の溶液に、室温で、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ（１
００ml、９：１）中のＩ₂（４１mg、０．１６mmol）の溶液を２５分かけて滴下
により加えた。添加終了後、反応混合物を５分間撹拌して、Ｎａ₂Ｓ₂Ｏ₅の飽和
溶液（１ml）を滴下により加えた。反応混合物を濾過して、真空下で濃縮した。
２５分間かけて１５〜９５％アセトニトリル−水勾配を使用する逆相ＨＰＬＣに
よる精製によって、（９Ｒ，１４Ｒ）−１４−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）
−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミ
ノ〕−７，１５−ジオキソ−１１，１２−ジチア−８，１６−ジアザスピロ〔５
．１２〕オクタデカン−９−カルボン酸（６mg、２３％）を得た。高分解能質量
スペクトル ｍ／ｚ ６０７．２２５５〔（Ｍ＋Ｈ）⁺；Ｃ₂₈Ｈ₃₉Ｎ₄Ｏ₇Ｓ₂の計
算値：６０７．２２６０〕。

【０１８９】 実施例２０ （２Ｓ，３Ｒ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸
メチルエステル塩酸塩の合成

【０１９０】

【化４７】

【０１９１】 メタノール５０mL中の（２Ｓ，３Ｒ）−１−アセチル−３−（４−ヒドロキシ
フェニル）ピロリジン−２−カルボン酸（１．０ｇ）の溶液をＨＣｌガスで飽和
させた。この溶液を２４時間還流して、溶媒を留去することにより、褐色の固体
を得た。次にこの固体を無水の飽和ＨＣｌメタノール溶液２０mLに溶解して、生
じた溶液を一晩室温で撹拌した。溶媒の除去後、（２Ｓ，３Ｒ）−３−（４−ヒ
ドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル塩酸塩を明褐色
の固体（０．８３ｇ）として得た。

【０１９２】 実施例２１ （２Ｓ，３Ｒ）−１−メタンスルホニル−３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロ
リジン−２−カルボン酸の合成

【０１９３】

【化４８】

【０１９４】 ジクロロメタン（２mL）中の実施例２０で調製された（２Ｓ，３Ｒ）−３−（
４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル塩酸塩（
１００mg、０．３８mmol）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（１２９mg、１．１５mmol）
及びメタンスルホニルクロリド（８０．２mg、０．７０mmol）を０℃で加えた。
この溶液を室温で６時間撹拌して、酢酸エチル（２０mL）で希釈した。次に溶液
を飽和重炭酸ナトリウム（２×５mL）及びブライン（２×５mL）で洗浄して濃縮
した。残渣をシリカゲルのパッドで濾過することにより、無色の油状物（８９．
９mg）を得た。この油状物をＭｅＯＨ／ＴＨＦ（１mL／１mL）に溶解して、生じ
た溶液を１N水酸化ナトリウム（０．５mL、０．５mmol）で処理した。この溶液
を室温で４時間撹拌して、酢酸で酸性にした。粗生成物を逆相ＨＰＬＣ（水中の
０．７５％ ＴＦＡを含む５〜９５％アセトニトリル、４０分の線形勾配）によ
り精製して、（２Ｓ，３Ｒ）−１−メタンスルホニル−３−（４−ヒドロキシフ
ェニル）ピロリジン−２−カルボン酸を白色の固体（２２mg、０．０８mmol）と
して得た。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：実測値 ２８６．０７５７、計算値 ２８６．
０７５０。

【０１９５】 実施例２２ （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−メチルスルホニル−３−（Ｒ）−（４−ヒ
ドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，
１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘ
プタデカン−８−カルボン酸の合成

【０１９６】

【化４９】

【０１９７】 ＤＭＦ ０．２mL中の（２Ｓ，３Ｒ）−１−メタンスルホニル−３−（４−ヒ
ドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸（１５mg、０．０５mmol）及び
実施例６で調製された（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−アミノ−６，１４−ジオキソ−
１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−
カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル塩酸塩（２２．７mg、０．０５mmol
）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（１９．４mg、０．１５mmol）及びＨＢＴＵ（１９mg
、０．０５mmol）を加えた。この溶液を室温で３時間撹拌して、水で３mLまで希
釈した。生じた白色の沈殿物を集めて、一晩減圧下で乾燥することにより、白色
の固体４０mgを得た。この乾燥固体をジクロロメタン１mLに溶解して、この溶液
をジオキサン中の４N ＨＣｌ（２mL）で処理した。溶液を一晩撹拌して濃縮し
た。残渣を逆相ＨＰＬＣ（水中の０．７５％ ＴＦＡを含む５〜９５％アセトニ
トリル、４０分の線形勾配）により精製して、（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔
１−メチルスルホニル−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）
−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジ
チア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸を白
色の固体（１７．３mg）として得た。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：実測値 ６２９．１
７６７、計算値 ６２９．１７７３。

【０１９８】 実施例２３ （２Ｓ，３Ｒ）−１−（２，２−ジメチル−１−オキソプロピル）−３−（４−
ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸の合成

【０１９９】

【化５０】

【０２００】 ＴＨＦ／Ｈ₂Ｏ（２mL／１mL）中の実施例２０で調製された（２Ｓ，３Ｒ）−
３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル塩
酸塩（２００mg、０．７６mmol）の溶液に、飽和ＮａＨＣＯ₃（５mL）を加えた
。上記混合物に、塩化トリメチルアセチル（４２０mg、３．５mmol）を２０分か
けて加えた。次に生じた溶液を室温で４時間撹拌して、酢酸エチルで３０mLまで
希釈した。次に有機層をブライン（２×５mL）で洗浄して、濃縮することにより
、（２Ｓ，３Ｒ）−１−（１−オキソ−２，２，２−トリメチルエチル）−３−
（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステルを白色
の固体（３２０mg）として得た。この固体をＥｔＯＨ ３mLに溶解して、１N水
酸化ナトリウム（３mL、３mmol）と共に室温で８時間撹拌した。６N ＨＣｌで
の酸性化後、溶媒を除去して、残渣をジクロロメタンで抽出した。濃縮後、残渣
をエーテルで洗浄することにより、（２Ｓ，３Ｒ）−１−（２，２−ジメチル−
１−オキソプロピル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カル
ボン酸を白色の固体（１１７mg）として得た。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：実測値 ２
９２．１５５６、計算値 ２９２．１５４９。

【０２０１】 実施例２４ （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−（２，２−ジメチル−１−オキソプロピル
）−３（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボ
ニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザ
スピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸の合成

【０２０２】

【化５１】

【０２０３】 ＤＭＦ ０．５mL中の（２Ｓ，３Ｒ）−１−（２，２−ジメチル−１−オキソ
プロピル）−３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸（４
５mg、０．１５mmol）及び実施例６で調製された（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−アミ
ノ−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．
１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル塩酸塩（
７０mg、０．１５mmol）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（５８mg、０．４５mmol）及び
ＨＢＴＵ（５９mg、０．１５mmol）を加えた。この溶液を室温で３時間撹拌して
、水で３mLまで希釈した。生じた白色の沈殿物を集めて、減圧下で一晩乾燥する
ことにより、（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−（２，２−ジメチル−１−オ
キソプロピル）−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロ
リジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−
７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジ
メチルエチルエステル９８mgを白色の固体として得た。この乾燥固体をジクロロ
メタン１mLに溶解して、溶液をジオキサン中の４N ＨＣｌ（２mL）で処理した
。溶液を一晩撹拌して濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣ（水中の０．７５％ ＴＦ
Ａを含む５〜９５％アセトニトリル、４０分の線形勾配）により精製して、（８
Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−（２，２−ジメチル−１−オキソプロピル）−
３（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル
〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピ
ロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸を白色の固体（９mg）として得た
。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：実測値 ６３５．２５４３、計算値 ６３５．２５７３
。

【０２０４】 実施例２５ （２Ｓ，３Ｒ）−１−〔（１，１−ジメチルエトキシル）カルボニル〕−３−（
４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸の合成

【０２０５】

【化５２】

【０２０６】 ＴＨＦ（２mL）中の実施例２０で調製された（２Ｓ，３Ｒ）−３−（４−ヒド
ロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸メチルエステル塩酸塩（１００mg
、０．３８mmol）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（６５mg、０．５mmol）及びＢｏｃ₂
Ｏ（２１８mg、１mmol）を２０℃で加えた。次に溶液を室温で１６時間撹拌して
、酢酸エチル（２０mL）で希釈した。次に溶液を飽和重炭酸ナトリウム（２×５
mL）及びブライン（２×５mL）で洗浄して濃縮した。残渣をシリカゲルで濾過す
ることにより、（２Ｓ，３Ｒ）−１−〔（１，１−ジメチルエトキシル）カルボ
ニル〕−３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸メチルエ
ステルを無色の油状物（１１３mg）として得た。次にこの油状物をＭｅＯＨ／Ｔ
ＨＦ（２mL／１mL）に溶解して、生じた溶液を１N水酸化ナトリウム（０．７mL
、０．７mmol）で処理した。この溶液を室温で４時間撹拌して、酢酸で酸性にし
た。粗生成物を逆相ＨＰＬＣ（水中の０．７５％ ＴＦＡを含む５〜９５％アセ
トニトリル、４０分の線形勾配）により精製して、（２Ｓ，３Ｒ）−１−〔（１
，１−ジメチルエトキシル）カルボニル〕−３−（４−ヒドロキシフェニル）ピ
ロリジン−２−カルボン酸を白色の固体（７０mg、０．２２mmol）として得た。
ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：実測値 ３０８．１５１１、計算値 ３０８．１４９８。

【０２０７】 実施例２６ （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔３（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２（
Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１
−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸
の合成

【０２０８】

【化５３】

【０２０９】 ＤＭＦ ０．５mL中の（２Ｓ，３Ｒ）−１−〔（１，１−ジメチルエトキシ）
カルボニル〕−３−（４−ヒドロキシフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸（
４６mg、０．１５mmol）及び実施例６で調製された（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−ア
ミノ−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４
．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル塩酸塩
（７０mg、０．１５mmol）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（５８mg、０．４５mmol）及
びＨＢＴＵ（５９mg、０．１５mmol）を加えた。この溶液を室温で３時間撹拌し
て、水で３mLまで希釈した。生じた白色の沈殿物を集めて、減圧下で一晩乾燥す
ることにより、（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔３（Ｒ）−（４−ヒドロキシフ
ェニル）−２（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキ
ソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−
８−カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル１０５mgを白色の固体として得
た。この乾燥固体（８５mg）をジクロロメタン２mLに溶解して、溶液をジオキサ
ン中の４N ＨＣｌ（２mL）で処理した。この溶液を一晩撹拌して、次に溶媒を
除去した。残渣を逆相ＨＰＬＣ（水中の０．７５％ ＴＦＡを含む５〜９５％ア
セトニトリル、４０分の線形勾配）により精製して、（８Ｒ，１３Ｒ）−１３−
〔〔〔３（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２（Ｓ）−ピロリジニル〕カル
ボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジア
ザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸を白色の固体（５８mg）と
して得た。ＨＲＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：実測値 ５５１．２０１７、計算値 ５５１．
１９９８。

【０２１０】 実施例２７ ＶＬＡ−４／ＶＣＡＭ−１スクリーニング測定法 固定化ＶＣＡＭ−１への結合に競合する能力として定義されるＶＬＡ−４アン
タゴニスト活性は、固相二重抗体ＥＬＩＳＡを用いて定量した。ＶＣＡＭ−１に
結合したＶＬＡ−４（α４β１インテグリン）は、抗インテグリンβ１抗体：Ｈ
ＲＰ結合抗マウスＩｇＧ：色素産生物質（Ｋ−ブルー（K-Blue））の複合体によ
り検出する。最初に、これは、組換えヒトＶＣＡＭ−１（１００μl ＰＢＳ中
０．４μg）で９６ウェルプレート（ヌンク・マキシソープ（Nunc Maxisorp））
をコーティングすること、各プレートを封止すること及び次にプレートを４℃で
１８時間静置させることを包含した。ＶＣＡＭコーティングしたプレートは、次
に１％ ＢＳＡ／０．０２％ ＮａＮ₃２５０μlでブロックすることにより非特
異的結合を減少させた。測定の当日、全プレートは、ＶＣＡＭ測定用緩衝液（VC
AM Assay Buffer）（２００μl/ウェル：５０mMトリス−ＨＣｌ、１００mM Ｎ
ａＣｌ、１mM ＭｎＣｌ₂、０．０５％トゥイーン２０；pH７．４）で２回洗浄
した。試験化合物は、１００％ ＤＭＳＯに溶解し、次に１mg/mL ＢＳＡを補
足したＶＣＡＭ測定緩衝液に１：２０希釈した（即ち、最終ＤＭＳＯ＝５％）。
連続の１：４希釈を行って、各試験化合物に関して０．００５nM〜１．５６３μ
Mの濃度範囲を達成した。１ウェルあたり各希釈液１００μlをＶＣＡＭコーティ
ングしたプレートに加え、次にラモス細胞由来ＶＬＡ−４ １０μlを加えた。
これらのプレートは、順に、プラットホームシェーカーで１分間混合し、３７℃
で２時間インキュベートし、次にＶＣＡＭ測定緩衝液２００μl/ウェルで４回洗
浄した。マウス抗ヒトインテグリンｂ１抗体１００μlを各ウェルに加え（ＶＣ
ＡＭ測定緩衝液中０．６μg/ml＋１mg/mL ＢＳＡ）、３７℃で１時間インキュ
ベートした。このインキュベーション時間の最後に、全プレートはＶＣＡＭ測定
緩衝液（２００μl/ウェル）で４回洗浄した。次に対応する第２抗体のＨＲＰ結
合ヤギ抗マウスＩｇＧ（１ウェルあたり１００μl、ＶＣＡＭ測定緩衝液中に１
：８００希釈＋１mg/mL ＢＳＡ）を各ウェルに加え、続いて室温で１時間イン
キュベートし、最後にＶＣＡＭ測定緩衝液で３回洗浄（２００μl/ウェル）した
。発色は、１ウェルあたりＫ−ブルー１００μlの添加（１５分インキュベーシ
ョン、室温）により開始し、１ウェルあたりレッドストップ緩衝液（Red Stop B
uffer）１００μlの添加により終わらせた。次に全プレートは、ＵＶ／Ｖｉｓ分
光光度計で６５０nMで読んだ。結果は、全結合（即ち、試験化合物の非存在下で
のＶＬＡ−４＋ＶＣＡＭ−１）の阻害％として計算した。

【０２１１】 実施例２８ ラモス（ＶＬＡ−４）／ＶＣＡＭ−１の細胞によるスクリーニング測定法プロト
コール 材料： 可溶性組換えヒトＶＣＡＭ−１（５−及び７−Ｉｇドメインの混合物）は、Ｃ
ＨＯ細胞培地から免疫親和性クロマトグラフィーにより精製して、０．１Mトリ
ス−グリシン（pH７．５）、０．１M ＮａＣｌ、５mM ＥＤＴＡ、１mM ＰＭ
ＳＦ、０．０２％ ＮａＮ₃及び１０μg/mLロイペプチンを含む溶液で維持した
。カルセイン−ＡＭ（Calcein-AM）は、モレキュラープローブ社（Molecular Pr
obes Inc.）から購入した。

【０２１２】 方法： 固定化ＶＣＡＭ−１への結合に関して細胞表面ＶＬＡ−４と競合する能力とし
て定義されるＶＬＡ−４（ａ４ｂ１インテグリン）アンタゴニスト活性は、ラモ
ス−ＶＣＡＭ−１細胞接着測定法を用いて定量した。細胞表面ＶＬＡ−４を持つ
ラモス細胞を蛍光染料（カルセイン−ＡＭ）で標識して、試験化合物の存在下及
び非存在下でＶＣＡＭ−１に結合させた。接着細胞に関係した蛍光強度の減少（
阻害％）は、試験化合物によるＶＬＡ−４介在性細胞接着の競合阻害を反映した
。

【０２１３】 最初に、これは、組換えヒトＶＣＡＭ−１（１００μl ＰＢＳ中１００ng）
で９６ウェルプレート（ヌンク・マキシソープ）をコーティングすること、各プ
レートを封止すること及びプレートを４℃で１８時間静置させることを包含した
。次いでＶＣＡＭコーティングしたプレートは、ＰＢＳ中の０．０５％トゥイー
ン−２０で２回洗浄し、次にブロッキング緩衝液（Blocking Buffer）（１％
ＢＳＡ／０．０２％チメロサール）２００μlで１時間（室温）ブロックするこ
とにより非特異的結合を減少させた。ブロッキング緩衝液とのインキュベーショ
ン後、プレートを反転させ、ブロットして、残りの緩衝液を吸引した。次に各プ
レートをＰＢＳ ３００μlで洗浄し、反転させ、残りのＰＢＳを吸引した。

【０２１４】 試験化合物を１００％ ＤＭＳＯに溶解し、次にＶＣＡＭ細胞接着測定緩衝液
（VCAM Cell Adhesion Assay Buffer）（５０mMトリス−ＨＣｌ中に４mM Ｃａ
Ｃｌ₂、４mM ＭｇＣｌ₂、pH７．５）に１：２５希釈した（最終ＤＭＳＯ＝４％
）。各化合物について連続８回の１：４希釈を行った（１nM〜１２，５００nMの
一般的濃度範囲）。各希釈液１００μl/ウェルをＶＣＡＭコーティングしたプレ
ートに加え、続いてラモス細胞（１％ ＢＳＡ／ＰＢＳ中２００，０００細胞/
ウェル）１００μlを加えた。試験化合物及びラモス細胞を含むプレートを４５
分間室温でインキュベートさせ、次にＰＢＳ １６５μl/ウェルを加えた。プレ
ートを反転させて非接着細胞を除去し、ブロットしてＰＢＳ ３００μl/ウェル
を加えた。プレートを再度反転させ、ブロットして残りの緩衝液を穏やかに吸引
した。細胞溶解緩衝液（Lysis Buffer）（５０mMトリス−ＨＣｌ中０．１％ Ｓ
ＤＳ、pH８．５）１００μlを各ウェルに加え、ロータリー振盪プラットホーム
で２分間撹拌した。次にプレートは、サイトフルオロ２３００（Cytofluor 2300
）（ミリポア（Millipore））蛍光測定システム（励起＝４８５nm、発光＝５３
０nm）で蛍光強度を読んだ。

【０２１５】

【表１】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ， ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ， ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，Ｃ Ｕ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ， ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，Ｌ Ｋ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ， ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，Ｔ Ｊ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 フトゥヒ，ネーダー アメリカ合衆国、ニュージャージー 07924、チャタム、ダニエル・ストリート １ (72)発明者 ジャクソン，デービッド・ヤング アメリカ合衆国、カリフォルニア 94066、 サン・ブルーノ、クレアモント・ドライブ 1360 (72)発明者 ティリー，ジェファソン・ライト アメリカ合衆国、ニュージャージー 07006、ノース・コールドウェル、エバー グリーン・ドライブ 19 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 AA06 BA01 BA15 BA23 BA26 BA28 CA59 DA40 MA13 MA17 MA23 MA28 MA31 MA35 MA37 MA52 MA58 MA60 MA66 NA14 ZA592 ZB112 4H045 AA10 AA30 BA12 EA28 FA30 GA05 GA40

Claims (35)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（Ｉ）： 【化１】 〔式中、Ｒ₂及びＲ₃は、それぞれ独立に低級アルキルであるか、又はこれらの結
   合している炭素原子と一緒に、４〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭素環を形成し
   ；Ｒ₅は、水素、低級アルキル、Ｒ−ＳＯ₂−、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_m−ＣＯ−又はＲ₈ −Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−であり；Ｒは、低級アルキルであり；Ｒ₆及びＲ₈は、
   水素又は低級アルキルであり；Ｘは、−Ｏ−又は−ＮＨ−であり；ｍは、１〜７
   の整数であり、ｙは、０〜７の整数であり、そしてｎは、１〜３の整数である（
   ここで、ａ、ｂ、ｃ、及びｄは、不斉炭素原子を示す）〕で示される化合物、及
   び加水分解可能なそのエステル若しくはエーテル又は薬学的に許容しうるその塩
   。
2. 【請求項２】 Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、４〜６
   個の炭素原子を含む脂肪族シクロアルカン環を形成する、請求項１記載の化合物
   、又は薬学的に許容しうるその塩。
3. 【請求項３】 Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シクロ
   ペンタン環を形成する、請求項２記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩
   。
4. 【請求項４】 下記式： 【化２】 で示される、請求項３記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。
5. 【請求項５】 （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔３−（Ｒ）−（４−ヒドロ
   キシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４
   −ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタ
   デカン−８−カルボン酸である、請求項４記載の化合物、又は薬学的に許容しう
   るその塩。
6. 【請求項６】 Ｒ₅が、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_m−ＣＯ−である、請求項４記載の化
   合物、又は薬学的に許容しうるその塩。
7. 【請求項７】 （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ）
   −（４−ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミ
   ノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４
   ．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸である、請求項６記載の化合物、又は薬
   学的に許容しうるその塩。
8. 【請求項８】 （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−（２，２−ジメチル−
   １−オキソプロピル）−３−（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）
   −ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジ
   チア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸であ
   る、請求項６記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。
9. 【請求項９】 Ｒ₅が、Ｒ₈−Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−である、請求項４記載
   の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。
10. 【請求項１０】 Ｘが、酸素である、請求項９記載の化合物、又は薬学的に
    許容しうるその塩。
11. 【請求項１１】 Ｒ₅が、水素である、請求項４記載の化合物、又は薬学的
    に許容しうるその塩。
12. 【請求項１２】 （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔３−（Ｒ）−（４−ヒド
    ロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−６，１
    ４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプ
    タデカン−８−カルボン酸である、請求項１１記載の化合物、又は薬学的に許容
    しうるその塩。
13. 【請求項１３】 Ｒ₅が、Ｒ−ＳＯ₂−である、請求項４記載の化合物、又は
    薬学的に許容しうるその塩。
14. 【請求項１４】 Ｒ₅が、低級アルキルである、請求項４記載の化合物、又
    は薬学的に許容しうるその塩。
15. 【請求項１５】 （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔〔１−メチルスルホニル−
    ３（Ｒ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル
    〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピ
    ロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸である、請求項１３記載の化合物
    、又は薬学的に許容しうるその塩。
16. 【請求項１６】 Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シク
    ロヘキサン環を形成する、請求項２記載の化合物、又は薬学的に許容しうるその
    塩。
17. 【請求項１７】 下記式： 【化３】 で示される、請求項１６記載の化合物。
18. 【請求項１８】 （９Ｒ，１４Ｒ）−１４−〔〔〔３−（Ｒ）−（４−ヒド
    ロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕アミノ〕−７，１
    ５−ジオキソ−１１，１２−ジチア−８，１６−ジアザスピロ〔５．１２〕オク
    タデカン−９−カルボン酸である、請求項１７記載の化合物、又は薬学的に許容
    しうるその塩。
19. 【請求項１９】 Ｒ₅が、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_m−ＣＯ−である、請求項１７記載
    の化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。
20. 【請求項２０】 （９Ｒ，１４Ｒ）−１４−〔〔〔１−アセチル−３−（Ｒ
    ）−（４−ヒドロキシフェニル）−２−（Ｓ）−ピロリジニル〕カルボニル〕ア
    ミノ〕−７，１５−ジオキソ−１１，１２−ジチア−８，１６−ジアザスピロ〔
    ５．１２〕オクタデカン−９−カルボン酸である、請求項１９記載の化合物、又
    は薬学的に許容しうるその塩。
21. 【請求項２１】 一般式： 【化４】 〔式中、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基を
    形成し；Ｒ₂及びＲ₃は、それぞれ独立に低級アルキルであるか、又はこれらの結
    合している炭素原子と一緒に、４〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭素環を形成し
    ；Ｒ₉は、アミノ保護基であり；Ｒ₁₀及びＲ₁₀′は、チオ保護基であり；そして
    ｎは、１〜３の整数である〕で示される化合物。
22. 【請求項２２】 Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シク
    ロペンタン環を形成する、請求項２１記載の化合物。
23. 【請求項２３】 ２（Ｒ）−〔〔〔１−〔〔２（Ｒ）−〔〔（１，１−ジメ
    チルエトキシ）カルボニル〕アミノ〕−１−オキソ−３−〔（トリフェニルメチ
    ル）チオ〕プロピル〕アミノ〕エチル〕シクロペンチル〕カルボニル〕アミノ−
    ３−〔（トリフェニルメチル）チオ〕プロパン酸１，１−ジメチルエチルエステ
    ルである、請求項２２記載の化合物。
24. 【請求項２４】 一般式： 【化５】 〔式中、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基を
    形成し；Ｒ₂及びＲ₃は、それぞれ独立に低級アルキルであるか、又はこれらの結
    合している炭素原子と一緒に、４〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭素環を形成し
    ；Ｒ₉は、アミノ保護基であり；そしてｎは、１〜３の整数である〕で示される
    、化合物。
25. 【請求項２５】 Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シク
    ロペンタン環を形成する、請求項２４記載の化合物。
26. 【請求項２６】 （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−〔〔（１，１−ジメチルエトキ
    シ）カルボニル〕アミノ〕−６，１４−ジオキソ−１０，１１−ジチア−７，１
    ５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−カルボン酸１，１−ジメチル
    エチルエステルである、請求項２５記載の化合物。
27. 【請求項２７】 一般式： 【化６】 〔式中、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基を
    形成し；Ｒ₂及びＲ₃は、それぞれ独立に低級アルキルであるか、又はこれらの結
    合している炭素原子と一緒に、４〜６個の炭素原子を含む脂肪族炭素環を形成し
    ；そしてｎは、１〜３の整数である〕で示される化合物、並びに加水分解可能な
    そのエステル及びエーテル。
28. 【請求項２８】 Ｒ₂及びＲ₃が、これらの結合している炭素と一緒に、シク
    ロペンタン環を形成する、請求項２７記載の化合物。
29. 【請求項２９】 （８Ｒ，１３Ｒ）−１３−アミノ−６，１４−ジオキソ−
    １０，１１−ジチア−７，１５−ジアザスピロ〔４．１２〕ヘプタデカン−８−
    カルボン酸１，１−ジメチルエチルエステルである、請求項２８記載の化合物。
30. 【請求項３０】 薬学的に有効量の請求項１〜２０のいずれか１項記載の化
    合物又は薬学的に許容しうるその塩、及び所望であれば言及される薬学的に不活
    性な担体を含む、医薬組成物。
31. 【請求項３１】 請求項１記載の化合物の製造方法であって、式（１３）： 【化７】 〔式中、Ｒ₁は、これの結合している酸素と共に、加水分解可能なエステル基を
    形成し；そしてＲ₂及びＲ₃は、請求項１と同義である〕で示される環状コア化合
    物を、式（１９）： 【化８】 〔式中、Ｒ₁₅は、低級アルキル、Ｒ−ＳＯ₂−、Ｒ₆−（ＣＨ₂）_m−ＣＯ−又はＲ ₈ −Ｘ−（ＣＨ₂）_y−ＣＯ−であり；そしてＲ、Ｒ₆及びＲ₈は、請求項１と同義
    である〕で示される化合物と反応させることを特徴とする方法。
32. 【請求項３２】 請求項３１記載の方法により製造される、請求項１〜２０
    のいずれか１項記載の化合物。
33. 【請求項３３】 治療薬としての、請求項１〜２０のいずれか１項記載の化
    合物。
34. 【請求項３４】 炎症性疾患、特に、例えば喘息のような、細胞接着分子へ
    のインテグリンの有害な結合が介在するこのような疾患の処置用の活性物質とし
    て、請求項１〜２０のいずれか１項記載の化合物を含む医薬の製造のための、請
    求項１〜２０のいずれか１項記載の化合物の使用。
35. 【請求項３５】 本明細書に記載の発明。