JP2002515444A - 骨粗鬆症の治療方法 - Google Patents

骨粗鬆症の治療方法

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スティーブン・ショーネシー
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ハミルトン・シヴィック・ホスピタル・リサーチ・ディヴェロップメント・コーポレーション
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Abstract

(57)【要約】 骨密度が減少する病的状態にある哺乳類患者において、ＩＬ−１１、その細胞表面膜レセプターおよび細胞表面糖タンパク質ｇｐ１３０の三次複合体の生体内形成を抑制することからなる、そのような症状の治療および軽減方法が開示されている。このような物質の例には、天然のＩＬ−１１レセプターと比べると、それらのｇｐ１３０結合部位で修飾された組換え体の可溶性ＩＬ−１１レセプター変異体、およびＩＬ−１１と相互作用することができるペプチドがある。本発明の方法は骨吸収およびそれ故に骨量減少を抑制するばかりでなく、骨形成の過程を増大して骨密度を増加させる。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、薬物治療およびこれに有用な薬剤に関する。詳細には、本発明は、
原因となる病理が骨の損失をもたらす骨吸収の増加、例えば閉経後の骨粗鬆症で
ある病理状態の予防および治療に関する。本発明はまた、そのような状態の治療
および予防に有用な治療薬に関する。
【０００２】
【発明の背景】
骨の再構築は、骨形成と骨吸収との間の平衡に依存する。骨芽細胞は主に非石
化Ｉ型コラーゲンが沈着した新たな類骨の形成を担っている。骨吸収は、破骨細
胞と称される大きな多核細胞により媒介される。骨吸収のためには、まず破骨細
胞が石化基質と密接に接触する領域を築く。これは、破骨細胞と骨基質界面との
間の保護された区画を形成し、ここに酸性の微少環境が形成される。これらの領
域内では、骨は脱石化され、分泌されたリソソームの加水分解酵素の作用により
コラーゲン繊維が再吸収される。インビトロおよびインビボの両方で骨吸収の有
力な刺激物質として多くの因子が見出されている。これらには副甲状腺ホルモン
、１,２５−ジヒドロキシビタミンＤ3、プロスタグランジン−Ｅ2または−Ｉ2、
ＩＬ−１、ＴＮＦ−βおよび骨由来増殖因子が包含される。これらの因子のうち
、破骨機能に直接作用するものは無く、全て骨芽細胞の存在が必要である。
【０００３】 増加した骨吸収は、広範囲の診療状態の顕著な特徴である。故に、閉経後の女
性のみに起こるのでなく、転移性の骨の癌、骨髄腫および骨のパジェット病のし
ばしばある合併症でもある。現在の治療は、骨吸収を遮断する薬剤（ビスホスホ
ネートおよびカルシトニンなど）の使用を包含するか、または閉経後の骨粗鬆症
の場合にはエストロゲンを用いるホルモン補充療法である。
【０００４】 インターロイキン−１１（ＩＬ−１１）は、骨形成／骨吸収において単独でま
たは他のサイトカインと共同で役割を有している。 ＩＬ−１１は、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、白血病阻害因子（ＬＩＦ
）およびオンコスタチンＭ（ＯＳＭ）を包含するサイトカインのファミリーに属
する。これらのサイトカインは同様な三次構造を有し、共通のシグナルトランス
デューサ（ｇｐ１３０）を共有し、そして重複する生物活性を有する。これらの
サイトカインについて生物応答を誘起するためには、サイトカイン、その特異的
レセプター（α鎖）およびｇｐ１３０からなる三次複合体が形成されなければな
らない。
【０００５】
【先行技術の簡単な引用】
Van Leuvenら, Genomics (1996) Jan 1; 31(1): 65-70 はヒトのインターロイ
キン−１１レセプター（ＩＬ−１１Ｒ）の遺伝子のクローニング、遺伝子の構造
の分析および予想されるタンパク質の配列の決定を報告している。タンパク質の
構造および機能は報告されていない。 Karowら, Biochem J. (1996) 318: 489-495 は、ＩＬ−１１αレセプターの遺
伝子のクローニングおよびそのアミノ酸配列の説明を報告し、マウスインターロ
イキン−１１レセプター（ＩＬ−１１Ｒ）の可溶性形態の産生を報告し、これが
高い親和性をもってＩＬ−１１リガンドと相互作用することを示している。ｐｇ
１３０に対するＩＬ−１１単独での親和性は検出レベルより低いと報告されてい
るが、ＩＬ−１１および可溶性ＩＬ−１１Ｒは高い親和性でｇｐ１３０と相互作
用する。このレセプターは、ハイモポイエチンレセプターファミリーの他のもの
と配列相同性を示す膜貫通タンパク質である。しかし、ＩＬ−１１ＲにおけるＩ
Ｌ−１１およびｇｐ１３０結合部位の位置は開示されていない。
【０００６】 Teramuraら, Blood 1992, 79: 327 および Musashiら, Proc. Natl. Acad, Sc
i. U.S.A. 1991, 88:765 は、骨におけるＩＬ−１１単独または他のサイトカイ
ンとの共同での機能が顆粒球／マクロファージコロニー形成の支持および血小板
桂精細胞である巨核球の数と倍数性の増加であることを報告している。 Girasoleら, J, Clin. Invest. 1994, 93: 1516 および Tamuraら, Proc. Nat
l. Acad. Sci. 1993, 90: 11924 は、ＩＬ−１１がこのファミリーの他のサイト
カインと同様に破骨細胞形成の過程において役割を果たしていることを示す実験
結果を報告している。 １９９３年１月になされたU.S.特許第5,215,895, Bennettらは、ＩＬ−１１を
コードするＤＮＡ配列で形質転換した細胞を培養することによりＩＬ−１１を製
造する方法を開示している。 カナダ国特許出願第2,177,837号, Cilibertoらは、そのｇｐ１３０結合領域に
おいて突然変異させたＩＬ−６アンタゴニストを開示している。
【０００７】
【発明の要旨】
本発明は、骨吸収の増加または骨形成の減少が潜在的な病状である、骨粗鬆症
などの診療状態の症状を治療および緩和する新規手段を提供することを目的とす
る。 さらに本発明は、そのような診療状態の治療および／またはその症状の緩和に
有用な新規治療薬を提供することを目的とする。
【０００８】 本発明は、骨吸収過程および骨形成過程の両方におけるインターロイキン−１
１（ＩＬ−１１）の役割の解明に基づくものであり、利益な結果がその作用を阻
害することにより得られることは予期せぬことである。このサイトカインは、破
骨細胞の形成と活性、故に骨吸収に重要であることは見出されていた。さらに、
このサイトカインは、骨形成の阻害剤として作用することが見出されていた。骨
欠損状態でのその役割におけるＩＬ−１１の作用機序は、ＩＬ−１１、その細胞
表面の膜レセプター（ＩＬ−１１Ｒ）および糖タンパク質ｇｐ１３０（ｇｐ１３
０）の複合体形成を包含する。この三次複合体が形成されないかまたはより少な
い程度でしか形成されない場合には、骨吸収が阻害されるばかりか、多くの場合
において新たな骨形成が促進されて、新たな骨が効果的に形成され、骨密度が増
加する。
【０００９】 従って、本発明は１つの広い態様から、骨密度が減少している病態の症状を治
療または緩和する方法を提供し、該方法はそのような状態を被っている哺乳類患
者においてＩＬ−１１、ＩＬ−１１Ｒおよびｇｐ１３０の三次複合体のインビボ
での形成を阻害することからなる。そのような状態は、骨吸収の増加および骨形
成の顕著な不足を包含するものである。骨粗鬆症に加えて、これらの状態には、
転移性骨癌、骨髄腫、パジェット病および、特に高齢のヒト患者における骨折の
治癒が包含される。
【００１０】 本発明の別の態様によれば、骨密度が減少している病態の症状を緩和するため
に哺乳類患者に投与される治療薬が提供され、該治療薬にはＩＬ−１１、その細
胞表面の膜レセプターＩＬ−１１Ｒおよび細胞表面糖タンパク質ｇｐ１３０の三
次複合体のインビボでの形成を妨げることができる、生物学的に許容しうるペプ
チド化合物、タンパク質配列、低分子および抗体が包含される。
【００１１】 本発明の別の態様によれば、ＴＲＡＰの新規な使用およびＩＬ−１１アンタゴ
ニストを検出するための骨小結節形成アッセイが提供される。 本発明の別の態様によれば、溶液からＩＬ−１１を選択的に除去する方法おお
び溶液からＩＬ−１１を精製または濃縮する方法が提供される。 本発明の別の態様によれば、ＩＬ−１１、その細胞表面の膜レセプターＩＬ−
１１Ｒおよび細胞表面糖タンパク質ｇｐ１３０の三次複合体のインビボでの形成
を妨げることができる、生物学的に許容しうるＩＬ−１１アンタゴニストからな
る、哺乳類患者に投与して骨密度が減少している病態の症状を緩和するための治
療薬が提供される。
【００１２】 本発明の別の態様によれば、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合
体の形成に必要な成分の翻訳を阻害しうるアンチセンス核酸を包含する転写可能
な遺伝物質からなる、哺乳類患者に投与して骨密度が減少している病態の症状を
緩和するための治療薬が提供される。 本発明の別の態様によれば、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合
体の形成を阻害しうるアミノ酸配列をコードする転写可能な遺伝物質を包含する
発現可能な遺伝物質からなる、哺乳類患者に投与して骨密度が減少している病態
の症状を緩和するための治療薬が提供される。
【００１３】 図１Ａは天然のＩＬ−１１レセプターを表す略図であり、その種々の領域およ
びＩＬ−１１とｇｐ１３０と相互作用する結合領域を示す。 図１ＢはSEQ ID NO.3に記載され、下記の実施例３で用いたｃＤＮＡ配列を表
わす。 図２は天然のＩＬ−１１Ｒのｇｐ１３０結合領域の詳細な配列であり、特に好
ましい突然変異部位および本発明の変異体の産生を示す。広範囲にわたり変異し
た部位はSEQ ID NO.4に開示される。 図３はＩＬ−１１レセプターのペプチド配列の部分を表し、ＩＬ−１１と相互
作用する領域を太字で示す。 図４は、下記に実施例５にて用いたペプチド１（SEQ ID NO.1）およびペプチ
ド２（SEQ ID NO.2）の配列を表し、実験において観察された活性を示す。 図５は、下記の実施例１にて得られた結果のグラフである。 図６Ａ、ＢおよびＣは下記の実施例２にて得られた結果のグラフである。 図７ＡおよびＢは下記の実施例４にて得られた結果のグラフである。 図８は下記の実施例５にて得られた結果のグラフである。 図９は下記の実施例６にて得られた結果のグラフである。 図１０は下記の実施例７にて得られた結果のグラフである。
【００１４】
【好ましい態様の説明】
本発明の好ましい方法は、ＩＬ−１１、その細胞表面の膜レセプターＩＬ−１
１Ｒおよび細胞表面糖タンパク質ｇｐ１３０の三次複合体のインビボでの形成を
阻害する物質の有効量を患者に投与することにより、患っている哺乳類患者にお
いて骨密度が減少するという病態の症状を治療または緩和することからなる。そ
のような物質の例には、ＩＬ−１１に対する抗体、ＩＬ−１１Ｒに対する抗体、
ｇｐ１３０に対する抗体、ＩＬ−１１レセプターの変異型、ＩＬ−１１の低分子
量アンタゴニスト、通常ＩＬ−１１Ｒにより結合される領域においてＩＬ−１１
と選択的に相互作用し、その結果ＩＬ−１１とＩＬ−１１Ｒとの間の正常な相互
作用を妨げる配列を包含する物質である。
【００１５】 本発明の好ましい化合物の第１グループは、天然のＩＬ−１１Ｒと比較してＩ
Ｌ−１１／ＩＬ−１１Ｒ相互作用に関与するが、ｇｐ１３０とは相互作用しない
ような修飾された組換え可溶性ＩＬ−１１Ｒ変異体である。その結果、ＩＬ−１
１、ＩＬ−１１Ｒおよびｇｐ１３０の三次複合体が形成されないか、またはごく
僅かな程度でしか形成されず、このため生物応答が無いかまたはより少ない。好
ましい態様において、ｇｐ１３０結合領域におけるアミノ酸の置換は、これらの
好ましい化合物においてＩＬ−１１の結合においてほとんどまたは全く作用を持
たせず、ｇｐ１３０とＩＬ−１１Ｒとの相互作用を実質的にまたは完全に無くす
る。しかし、ＩＬ−１１Ｒタンパク質の他の領域での突然変異は、ＩＬ−１１Ｒ
におけるｇｐ１３０結合部位の特性を変化させ、生産的なＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１
３０の相互作用を抑制または阻害することができる。ＩＬ−１１／ｇｐ１３０／
ＩＬ−１１Ｒ三次複合体の形成を妨げるほとんど全ての可溶性ＩＬ−１１レセプ
ター変異体は、本発明の範囲内である。特定の例はヒト由来のＩＬ−１１Ｒ配列
に関するが、他の哺乳類由来の対応する配列もまた作用するであろう。
【００１６】 本発明の可溶性ＩＬ−１１Ｒは、SEQ ID NO.4に記載される、その全てが天然
のＩＬ−１１Ｒのｇｐ１３０結合部位内にある２８２位、２８３位、２８６位、
２８９位および２９１位の１カ所または２カ所以上で変異させるのが好ましい。
特に好ましい突然変異は独立してＤ２８２→Ｇ、Ａ２８３→Ｄ、Ｇ２８６→Ｄ、
Ｈ２８９→ＹおよびＶ２９１→Ｌ、またはそのような変異の２つ以上の組合せで
ある。アミノ酸は、本明細書ではその標準的三文字表示および一文字コードを参
照して記載される。特にＤ、Ｇ、Ａ、Ｈ、Ｙ、ＶおよびＬとの記号は、別個のア
ミノ酸に関して通常の意味を有し、即ちＤはアスパラギン酸を表し、Ｇはグリシ
ン、Ａはアラニンを表し、Ｈはヒスチジンを表し、Ｙはチロシンを表し、Ｖはバ
リンを表し、そしてＬはロイシンを表す。
【００１７】 天然のＩＬ−１１Ｒは、約４６ｋｄの分子量を有する公知のタンパク質である
。そのアミノ酸配列は決定されている。これは添付した図面の図１Ａに概略的に
示しているように、幾つかの別個の機能領域を有する。これは通常は細胞表面の
膜に結合している。これはＩＬ−１１と結合するための領域を有している。別の
領域である約２７０−３００位は、ｇｐ１３０結合部位である。これらの領域は
、図１Ａにおいて示されており、ここで１は４つの位置的に保存されたシステイ
ン残基を含む亜もの末端領域を表し、２はＩＬ−１１結合領域を表し、３はｇｐ
１３０結合領域表し、４は膜貫通ドメインを表す。
【００１８】 ｇｐ１３０結合部位のアミノ酸配列は図２に示している。本発明は、好ましい
態様の１つにおいて、この領域の天然のアミノ酸の１つ以上を別のアミノ酸に置
換することにより、図２に示すｇｐ１３０結合部位において突然変異したＩＬ−
１１Ｒを提供する。本発明の特に好ましい生成物は、上述したように２８２位、
２８３位、２８６位、２８９位および２９０位の１ヶ所以上において突然変異し
たものである。これらの変異体は、ｇｐ１３０との結合を効果的に減少させるか
または全く削除するが、ＩＬ−１１との結合には実質的に影響を与えない。
【００１９】 本発明の変異型可溶性ＩＬ−１１Ｒ（ｓＩＬ−１１Ｒ）は、公知の技術を用い
て調製することができる。好ましい方法において、ＩＬ−１１Ｒをコードするｃ
ＤＮＡは、ＩＬ−１１Ｒ特異的なプライマーおよびヒト骨肉腫細胞から単離した
全ＲＮＡを用いるＲＴ−ＰＣＲによりクローン化される。プライマーは、次にプ
ラスミドベクター中にクローニングするための末端制限エンドヌクレアーゼ部位
を含有する。好ましいｃＤＮＡ配列を挿入するための配列は図１Ｂにおいて示し
ている。適切なベクター中に連結した後、ＩＬ−１１Ｒ ＤＮＡは哺乳類細胞中
で発現させることができる。幼ハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞は、この目的のた
めの適する宿主哺乳類細胞の例となる。抽出および精製後、ｓＩＬ−１１Ｒ Ｄ
ＮＡは特定部位の突然変異誘発に供して、ｇｐ１３０との結合を媒介するが、Ｉ
Ｌ−１１との結合にはほとんど影響しないＩＬ−１１レセプター中のアミノ酸配
列、例えば上記したアミノ酸を修飾することができる。
【００２０】 本発明による好ましい化合物の第２グループは、ＩＬ−１１と選択的に相互作
用し、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０の三次複合体の形成に必要なＩＬ
−１１とＩＬ−１１Ｒとの間の相互作用を抑制するペプチド配列である、ＩＬ−
１１結合性ペプチドである。驚くべきことに、小さなアミノ酸配列がＩＬ−１１
に結合し、且つＩＬ−１１とＩＬ−１１Ｒとの間の正常な相互作用を抑制しうる
ことが見出された。特に、アミノ酸配列Arg Arg Leu Arg Ala Ser Trp Thr Tyr
Pro Ala Ser Trp Pro Cys Gin Pro His Phe Leu（SEQ ID NO:1）を有するペプチ
ドが、ＩＬ−１１に結合し、ＩＬ−１１Ｒとの生産的なその相互作用を抑制する
ものとして特定された。さらに驚くべきことに、SEQ ID NO:1のアミノ末端に包
含されるペプチド配列Arg Arg Leu Arg Ala Ser Trp（SEQ ID NO:5）が、ＩＬ−
１１とＩＬ−１１Ｒとの間の生産的な相互作用を抑制するこのペプチドの能力に
重要であることが見出された。この短いペプチド（SEQ ID NO:5）はまた、ＩＬ
−１１とＩＬ−１１Ｒとの間の生産的な相互作用を阻害しうる。また、ヒトＩＬ
−１１ＲにおけるSEQ ID NO:1またはSEQ ID NO:5に対応する配列の近くに位置す
るがこれらと重複しない３番目のペプチド（SEQ ID NO:6）が、ＩＬ−１１とＩ
Ｌ−１１Ｒとの間の生産的な相互作用を阻害することが見出された。
【００２１】 驚くべきことに、マウスとヒトのＩＬ−１１Ｒのアミノ酸配列は、SEQ ID NO:
5およびSEQ ID NO:6（ヒトの配列を記載している）に対応する配列において少し
異なるのみである。特に、SEQ ID NO:5に記載されるヒトのアミノ酸配列はＲＲ
ＬＲＡＳＷであるのに対し、マウスの配列はＲＲＬＨＡＳＷ（SEQ ID NO:10）で
ある。故に、ペプチド１（SEQ ID NO:5）における４位に対応する位置において
塩基性アミノ酸残基が存在することはヒトおよびマウスの配列間で保存されてい
るが、その位置における実際のアミノ酸は異なっている。故に、SEQ ID NO:5お
よびSEQ ID NO:6に対応するペプチドは、ＩＬ−１１結合性ペプチドであり、ア
ミノ酸配列ＲＲＬＸＡＳＷ（ここでＸは塩基性アミノ酸である）（SEQ ID NO:7
）を有するペプチドは潜在的にＩＬ−１１結合性ペプチドである。
【００２２】 また、SEQ ID NO:6は、ヒトＩＬ−１１Ｒ内にて特定されているＩＬ−１１結
合領域のアミノ酸配列、即ち：Ser He Leu Arg Pro Asp Pro Pro Gln Gly Leu A
rg Val Glu Ser Val Pro Gly Tyr Proを記載している。対応するマウスの配列は
SEQ ID NO:8に記載されており、これは：Set Ile leu Arg Pro Asp Pro Pro Gln
Gly Leu Arg Val Glu Ser Val Pro Ser Tyr Proである。これらの配列は、１８
番目のアミノ酸において異なり、これによりヒトのペプチドはGlyを有し、マウ
スの配列はSerを有する。GlyおよびSerは共に、それぞれ６０.１Å3および８０.
３Å3の体積を有し、且つそれぞれ７５Å2および１１５Å2の確定表面積を有す
る、比較的に小さいアミノ酸である。これは、このペプチド中の比較的小さい大
きさのアミノ酸１８はＩＬ−１１との相互作用を促進することを示唆する。しか
し、GlyとSerはその親水性において異なり、これは幾つかの要因が相互作用して
、これらのペプチド中の１８位の特定のアミノ酸置換の適合性を決定することを
示唆している。故に、アミノ酸配列：Ser Ile Leu Arg Pro Asp Pro Pro Gln Gl
y Leu Arg Val Glu Ser Val Pro xxx Tyr Pro（ここでxxxは適するアミノ酸であ
る）を有するＩＬ−１１結合性ペプチドが存在するが、この配列を有する潜在的
なＩＬ−１１結合性ペプチドをＴＲＡＰアッセイおよび／または骨小結節形成ア
ッセイを用いて検査し、これらがＩＬ−１１結合性ペプチドであるかを決定する
ことが必要である。
【００２３】 上述のアミノ酸置換に加えて、哺乳類の材料から特定されるＩＬ−１１結合性
ペプチドに対応する他の哺乳類由来のアミノ酸配列もまた潜在的なＩＬ−１１結
合性ペプチドでありうる。故に、哺乳類の１つの種においてＩＬ−１１結合性ペ
プチドが特定され、哺乳類の配列間で変異がある場合、他の哺乳類における対応
するアミノ酸配列および観察される保存残基のパターンを参照して、他のＩＬ−
１１結合性ペプチドを特定することが可能である。
【００２４】 本明細書の開示を考慮すると、ＩＬ−１１と相互作用し、且つＩＬ−１１およ
びＩＬ−１１Ｒとの間の生産的な相互作用を阻害して、これによりＩＬ−１１／
ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０複合体の形成を阻害または抑制しうるペプチドを特定
してこれを製造することは、当業者の能力の範囲内である。当業者によれば、ペ
プチドとＩＬ−１１との結合に必須な特徴を保存するアミノ酸の置換または修飾
を含有するペプチド配列は可能であり、本発明の範囲内であることは自明である
。そのようなペプチドは、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO
:7、SEQ ID NO:8または SEQ ID NO:10のアミノ酸配列の全てまたは一部を含むこ
とができる。また、これらのペプチドは、これらの配列とは実質的に異なるアミ
ノ酸配列を有していてもよいが、これらのペプチドとＩＬ−１１との特異的な相
互作用を許容する機能的特徴を有していてもよい。ＩＬ−１１結合性ペプチドで
あるペプチドは、本明細書に述べられているＴＲＡＰアッセイおよび骨小結節形
成アッセイの１方または両方を用いて容易に特定することができる。
【００２５】 ＩＬ−１１と選択的に相互作用するタンパク質およびペプチド配列は、インビ
トロでもインビボと同様に有益なものである。本発明は、ＩＬ−１１に選択的に
結合するペプチド配列を教示する。従って、このペプチドに適当な連結成分によ
り適する基質を結合させることは当業者の能力の範囲内である。いったん結合さ
れれば、固定化ペプチド配列は、溶液からＩＬ−１１を除去するために用いるこ
とができる。特に、固定化ペプチドは、ＩＬ−１１の溶液を減少させるために用
いることができる。また、固定化ペプチドは１つの溶液においてＩＬ−１１を結
合させるために用いて、次いで第２溶液の存在下においてＩＬ−１１を放出させ
、これによりＩＬ−１１に富むかまたはＩＬ−１１以外の成分の数もしくは量が
減少した溶液を製造することができる。
【００２６】 故に、本発明の他の好ましい態様は、ＩＬ−１１に対して親和性を有する本発
明の固定化ペプチドを使用して溶液からＩＬ−１１を選択的に除去する方法であ
る。
【００２７】 本発明において、用語「低分子」は３０ｋｄ以下の分子量を有する化合物であ
り、用語「ＩＬ−１１アンタゴニスト」は、ＩＬ−１１とＩＬ−１１Ｒとの間の
生産的な相互作用を阻害または抑制し、そしてＩＬ−１１とｇｐ１３０の生産的
な相互作用の促進についてＩＬ−１１よりもより有効でない化合物である。
【００２８】 ＩＬ−１１に関連する骨密度疾患の治療において有用な特別のＩＬ−１１アン
タゴニストは、本明細書に述べられるＴＲＡＰアッセイおよび骨小結節形成アッ
セイを用いて特定することができる。ＴＲＡＰアッセイは当業界において知られ
ており、マウス頭蓋冠（骨芽細胞）と骨髄細胞をインビトロで共培養し、次いで
酒石酸−耐性酸ホスファターゼ陽性（ＴＲＡＰ+）多核細胞を計測することによ
り破骨細胞の形成を評価することを包含する。本明細書の開示、特にＩＬ−１１
結合性ペプチドに関し、その配列を包含する情報および保存される残基のパター
ンを考慮すれば、ペプチドではないが、類似する結合特異性を有する潜在的なＩ
Ｌ−１１アンタゴニストを設計することは当業者の能力のうちである。ＴＲＡＰ
アッセイおよび骨小結節形成アッセイにおいて活性を試験することによりＩＬ−
１１アンタゴニストとされる場合に、これらの潜在的なＩＬ−１１アンタゴニス
トをスクリーニングして決定することができる。
【００２９】 本発明の他の好ましい態様は、ＩＬ−１１アンタゴニストの存在について試料
をスクリーニングしてＩＬ−１１アンタゴニストを特定するための、個別のまた
は組合せにおけるＴＲＡＰアッセイおよび骨小結節形成アッセイの使用である。
【００３０】 第３グループの好ましい化合物は、ＩＬ−１１Ｒに結合して、ＩＬ−１１との
生産的な相互作用を抑制するペプチドである。ＩＬ−１１Ｒに結合するペプチド
は、本発明の開示を考慮してＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ結合部位を模倣する分子
により設計することができる。また、そのようなペプチドは、潜在的なペプチド
をスクリーニングすることより特定することができる。ＩＬ−１１Ｒ結合性ペプ
チドは、ＴＲＡＰアッセイにおいてＴＲＡＰ+ＭＮＣの形成を減少させるＩＬ−
１１Ｒ結合性ペプチドの能力および／または骨小結節形成アッセイを用いてのイ
ンビトロでの骨粒形成におけるＩＬ−１１の阻害効果を減少させるＩＬ−１１結
合性ペプチドの能力によって潜在的なペプチドから特定することができる。
【００３１】 ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体の形成を阻害または抑制す
る、本発明において使用される第４グループの好ましい化合物は、その複合体の
１つの成分に選択的に結合して、三次複合体を形成する成分間の相互作用を妨げ
る抗体を包含する。幾つかの抗ＩＬ−１１抗体は市販されている。また、抗体は
、目的のペプチドを含む化合物を適する動物に注射する標準的技術を用いて調製
してもよい。有用な抗体には、抗ＩＬ−１１抗体、抗ｇｐ１３０抗体、抗ＩＬ−
１１Ｒ抗体、および三次複合体の成分の１つの目的の部位に対して特異的である
ヒト型化モノクローナル抗体が包含される。
【００３２】 本発明は、ヒトＩＬ−１１Ｒタンパク質の配列、幾つかのＩＬ−１１結合性ペ
プチドの配列、ヒトおよびマウスのＩＬ−１１ＲにおけるＩＬ−１１結合領域の
配列、並びにＩＬ−１１Ｒにおけるｇｐ１３０結合領域の配列、同様に可溶性Ｉ
Ｌ−１１Ｒを製造する手段を開示する。従って、ＩＬ−１１ＲにおけるＩＬ−１
１結合領域またはｇｐ１３０結合領域の何れかに特異的に結合する抗体を製造し
、これをスクリーニングすることは当業者の能力の範囲内である。これらの特的
抗体を使用して、この領域を通じてＩＬ−１１がＩＬ−１１Ｒに結合するのを特
異的に阻害し、これにより溶液中のＩＬ−１１レベルに実質的に影響を与えるこ
となく、インビボでの上述の複合体の形成を阻害することができる。これは、Ｉ
Ｌ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０複合体の形成を阻害することが所望される
が、幾つかの他の生体作用のために遊離のＩＬ−１１および機能的ｇｐ１３０が
保持されることを所望する状態に特に有用である。
【００３３】 ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体の形成を阻害または抑制す
るために本発明において使用される好ましい化合物の第５グループは、ＩＬ−１
１／ＩＬ−１１Ｒ結合領域においてＩＬ−１１またはＩＬ−１１Ｒの何れかに特
異的に結合することにより、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ相互作用を妨げうる低分
子を包含する。ＩＬ−１１およびＩＬ−１１Ｒの低分子アンタゴニストは、ＴＲ
ＡＰアッセイおよび骨小結節形成アッセイを使用して特定することができる。Ｉ
Ｌ−１１アンタゴニストおよびＩＬ−１１Ｒアンタゴニストの両方を、本発明の
化合物の結合領域の特徴を考慮して特定および／または合成することができる。
分子の結合親和性を制御する大きさ、形、親水性および電荷などの特徴はよく理
解され、本発明のペプチドおよびタンパク質を考慮して分子模倣を用いて、ＩＬ
−１１またはＩＬ−１１Ｒに結合する潜在性を有する低分子を特定することは当
業者の能力の範囲内である。先行技術において知られ、そして下記するＴＲＡＰ
アッセイおよび骨小結節形成アッセイを用いてＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ
１３０複合体の形成を阻害または抑制する能力について、有力な低分子をスクリ
ーニングすることもまた当業者の能力の範囲内である。
【００３４】 本発明の教示を考慮すれば、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合
体の形成を阻害しうる転写可能な遺伝物質を作成することもまた当業者の能力の
範囲内である。
【００３５】 使用しうる転写可能な遺伝物質の１つは、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１
３０三次複合体（ＩＬ−１１、ＩＬ−１１Ｒ、ｇｐ１３０、またはその部分を包
含する）の形成に必要な成分をコードするｍＲＮＡに相補的なアンチセンスＲＮ
Ａをコードし、そしてこのｍＲＮＡの翻訳を阻害または抑制しうるＤＮＡである
。ＩＬ−１１のｍＲＮＡ配列は既に報告されており、配列表はＧＥＮＢＡＮＫデ
ータベース（Accession No. M57766，M37007 (M. Fascicularis)，Accession No
. M81890，M57765，M37006（ヒト））において見ることができる。ｇｐ１３０の
ｍＲＮＡ配列は報告されており、配列表はＧＥＮＢＡＮＫデータベース（Access
ion No. M83336，MX62646）において見ることができる。ＩＬ−１１Ｒα鎖のｍ
ＲＮＡ配列は報告されており、配列表はＧＥＮＢＡＮＫデータベース（Accessio
n No. U32324）において見ることができる。この配列情報および本発明における
開示を考慮すれば、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体の形成を
阻害しうる転写可能な遺伝物質を作成することは当業者の能力の範囲内である。
ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０複合体の１つの成分の翻訳を阻害する特
定のアンチセンスｍＲＮＡの能力は、標準法を用いて検査することができる。
【００３６】 アンチセンス配列を用いて、目的のもの（ＩＬ−１１、ＩＬ−１１Ｒおよびｇ
ｐ１３０を含む）の対応するタンパク質の翻訳を阻害し、これにより標的細胞に
おいてそのタンパク質のレベルを減少させることができる。タンパク質レベルの
減少は、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体において結合可能な
タンパク質を減少させ、これにより散じ複合体の形成を減少させる。核酸配列を
コードする転写可能な遺伝物質を、遺伝子治療を含む標準技術によって被検者に
導入することができる。
【００３７】 ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体の形成を阻害するために使
用しうる転写可能な遺伝物質の第２のタイプは、三次複合体の形成を阻害し、そ
して転写の際に適当な位置に対してこれらの配列を標的とするアミノ酸配列を含
有しうるアミノ酸配列をコードする転写可能な遺伝物質である。そのようなアミ
ノ酸配列の例は、これらの配列を分泌させることを目的として添加された適当な
アミノ酸配列を有する本発明の可溶性ＩＬ−１１Ｒ変異体、ＩＬ−１１結合性ペ
プチドおよびＩＬ−１１Ｒ結合性ペプチドである。タンパク質の標的化および選
択的開裂配列は当業界で知られており、分泌を意図し且つこれを目的とするアミ
ノ酸配列をコードする転写可能な遺伝物質を作成することは当業者の能力の範囲
である。
【００３８】 前述のアミノ酸配列に加えて、ＴＲＡＰ+アッセイおよび／または骨小結節形
成アッセイを使用してＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体の形成
を阻害または抑制する他のアミノ酸配列を特定することも当業者の能力の範囲で
ある。三次複合体の形成を阻害しうるペプチドまたはタンパク質を特定すれば、
そのペプチドまたはタンパク質のアミノ酸配列は標準的方法を使用して決定する
ことができる。従って、目的のペプチドまたはタンパク質のアミノ酸配列をコー
ドし、転写後修飾および標的化情報を有する発現可能な遺伝分子を考案すること
も当業者の能力の範囲である。
【００３９】 転写制御因子を選択して、本発明の転写可能な遺伝物質を構成的に転写指せる
ことができる。また、転写のレベルは、これを包含する化合物のレベルに対して
感受性のある転写制御因子により調節することができる。包含される適当な化合
物には、患者の身体中の組織により天然に産生される物質が包含されるが、その
レベルは病態や他の要因により変化しうる。また、包含される化合物は、通常は
転写可能な遺伝物質を転写させるには十分なレベルで存在しないであってもよい
。そのような場合、包含される化合物は、所望される転写レベルを刺激するに必
要な時間および投与量で被検者に導入される。
【００４０】 閉経後の骨粗鬆症は、一般的に骨芽細胞に媒介される骨形成と破骨細胞による
骨吸収の間の不均衡に起因する骨重量の減少により特徴付けられる。骨芽細胞は
新たな骨または類骨の形成の原因となるが、ＩＬ−６またはＩＬ−１１などのサ
イトカインを放出することにより破骨細胞の活性化および／またはその数を制御
していると考えられる。この過程は、マウス頭蓋冠（骨芽細胞）と骨髄細胞をイ
ンビトロで共培養し、次いで酒石酸−耐性酸ホスファターゼ陽性（ＴＲＡＰ+）
多核細胞の数を計測することにより破骨細胞の形成を定量することを包含する“
ＴＲＡＰアッセイ”を用いて試験することができる。卵巣切除（ＯＶＸ）ラット
またはマウスは、骨粗鬆症の研究において閉経後の女性のための満足のゆく動物
モデルを提供する。
【００４１】 偽手術されたＯＶＸマウスおよびＩＬ−１１中和抗体で処理されたＯＶＸマウ
スから単離された骨髄細胞のインビトロにおける破骨細胞の形成のための能力を
比較する最初の実験は、ＩＬ−１１Ａｂ処理が偽手術した動物から得られるもの
よりも破骨細胞のレベルが減少していたということを示した。従って、骨密度が
骨形成と骨吸収との平衡により決定されるため、ＩＬ−１１Ｒのｇｐ１３０への
結合の阻害剤は閉経後の患者において骨の欠乏を逆転させる。
【００４２】 マウス頭蓋冠と骨髄細胞の共培養を用いると、ＩＬ−１１がインビトロにおけ
る破骨細胞形成の潜在的なシミュレーターであることが示された。さらに、マウ
ス頭蓋冠（主に骨芽細胞）を２５０μＭ アスコルビン酸および１０ｍＭ β−
グリセロールホスフェートの存在下で培養する（骨小結節形成アッセイ）場合に
は、ＩＬ−１１が骨形成を阻害することが示された。故に、ＩＬ−１１を標的と
することにより、破骨細胞形成の過程、故に病理学的な骨の欠乏を阻害すること
ができないが、骨形成の過程を刺激することにより既に失われた骨を修復するこ
とができる。
【００４３】 インビトロＴＲＡＰアッセイはまた、インビボで使用する前に可溶性ＩＬ−１
１Ｒ変異体、ＩＬ−１１結合性ペプチド、ＩＬ−１１結合性ペプチドおよび低分
子をスクリーニングする好都合な手段を提供する。特に、低分子、ＩＬ−１１結
合性ペプチドまたはＩＬ−１１Ｒ変異体を製造する場合、機能的三次複合体の形
成の阻害におけるその有効性はインビトロにおいてＴＲＡＰアッセイにより検査
することができる。分析条件下において外因性ＩＬ−１１の存在下でＴＲＡＰ+
ＭＮＣの顕著な減少を引き起こすこれらの化合物は、三次複合体の形成の阻害に
有効であると考えられる。目的の潜在的な化合物が化合物の混合物に包含される
場合、ＴＲＡＰアッセイを用いて試験する前に標準的手段によりこれらの化合物
を分離することが所望される。そのような分離は、潜在的に所望される化合物の
除去、同様に観察される結果を産生する可能性のある化合物の数を減らすことを
可能にする。
【００４４】 三次複合体の形成の阻害に有用な化合物の特定しうることに加えて、ＴＲＡＰ
アッセイは本発明の種々の化合物の相対的有効性を調査することを可能にする。
本明細書にて用いる場合、用語「低分子」、「ＩＬ−１１結合性ペプチド」、「
ＩＬ−１１Ｒ結合性ペプチド」および「ＩＬ−１１Ｒ変異体」は、ＴＲＡＰ+ア
ッセイを用いて試験する場合にはインビトロにおいてＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ
／ｇｐ１３０三次複合体の形成の阻害について効果的である低分子、ペプチドま
たはタンパク質を意味する。本明細書にて用いる場合、用語「抗ＩＬ−１１抗体
」および「抗ＩＬ−１１Ｒ抗体」は、ＴＲＡＰ+アッセイを用いて試験する場合
にはインビトロにおいてＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体の形
成の阻害について効果的である抗体、その部分またはその機能的同等物を意味す
る。
【００４５】 骨小結節形成アッセイは、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体
の形成の阻害について可溶性ＩＬ−１１Ｒ、ＩＬ−１１結合性ペプチド、ＩＬ−
１１Ｒ結合性ペプチドおよび低分子の有効性をスクリーニングするための２つ目
の好都合な方法を提供する。調査すべき化合物を骨小結節形成アッセイ系に添加
して、骨粒形成におけるその化合物の作用を調査することができる。ＴＲＡＰア
ッセイを用いるの同様に、ある状況では骨小結節形成アッセイ分析を用いて試験
する前に試料内に含まれる種々の化合物を分離することが所望される。分析条件
下においてＩＬ−１１による骨粒形成の阻害について顕著な減少を引き起こすこ
れらの化合物は、三次複合体の形成の阻害について効果的であると考えられる。
三次複合体の形成の阻害に有用な化合物を特定しうることに加えて、この分析は
本発明の種々の化合物の相対的有効性の調査を可能にする。
【００４６】 本発明の化合物は、種々の投与様式により、そして種々の形態で全身的にまた
は局所的に投与することができる。本発明のタンパク質、ペプチドおよび低分子
を投与しうる１つの剤形は、適当な生体許容性担体中の溶液または懸濁液などの
液体形態である。液体化合物などをデリバリーする好ましい手段は注射である。
また、本発明のタンパク質、ペプチドおよび低分子は経口投与のために封入して
もよい。封入材を選択して、消化過程における至適な段階で封入した化合物の放
出を可能にして最大生体効果を可能にすることができる。
【００４７】 局所的な治療を所望する場合、本発明の化合物は、所望される治療部位の近く
に移植するため適する基質中に包含させてもよい。そのような基質は、患者の診
療上の必要性に依存して持続的または生体分解性とすることができる。局所投与
の１つの特に効果的な手段は、骨折の固定に使用される移植ピン中への本発明の
化合物の封入である。局所投与の他の好ましい形態は、治療の際における疾患に
冒されている部位に最も近い哺乳類患者の領域中への注射である。
【００４８】 本発明の転写可能な遺伝物質は、種々の投与様式により、そして種々の形態で
全身的にまたは局所的に投与することができる。アンチセンスＲＮＡ配列を用い
て細胞内タンパク質の翻訳を阻害することを所望する場合、アンチセンスＲＮＡ
をコードするＤＮＡを標準的方法により標的細胞の核に導入することができる。
ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０三次複合体の形成を阻害しうるタンパク
質またはペプチド産物をコードするＤＮＡ配列を導入することを所望する場合、
該ＤＮＡを標準的方法により患者身体中に既に存在する細胞の核に導入すること
ができる。また、インビトロでＤＮＡをＭＨＣ−適合性細胞の核に導入し、導入
されたＤＮＡを発現する細胞を、重要な部位の近くに静脈注射または局所注射な
どの標準的方法により全身にまたは局所的に患者に投与することができる。
【００４９】 活性化合物の所望される投与量は、投与様式、治療すべき病態、被検者の全体
的状態および投与すべき化合物の如何により変わる。これらの要因を考慮して特
定の患者に対する適当な投与量を決定することは当業者の能力の範囲内である。
本発明の可溶化したＩＬ−１１Ｒ変異体を注射により全身投与することを所望す
る場合、適当な投与量は体重kg当たり１mg〜２０mgの可溶性ＩＬ−１１Ｒ変異体
であると予想される。被検者および治療すべき病態に依存して投与量は、その存
在する骨密度が顕著に低くない場合には被検者の体重ｋｇ当たり１〜１０mgとし
、骨密度が顕著に低い場合には被検者の体重ｋｇ当たり１０〜２０mgとするのが
より好ましい。多くの病態において可溶化ＩＬ−１１Ｒ変異体の適当な全身性投
与量は、同等の患者の治療に対する副甲状腺ホルモンの適当な投与量と同様であ
ると考えられる。
【００５０】 本発明の化合物の局所的投与を所望する場合、適当な局所投与量は、治療領域
における所望される化合物のレベルを考慮して決定することができる。局所治療
に必要な全体的投与量は、全身治療に必要なレベルよりも低いと予想され、多く
の場合において適当は局所投与量は、全身治療に必要な化合粒の量の１０〜１０
０倍低い。
【００５１】 可溶化ＩＬ−１１Ｒ変異体の代わりにまたはこれに加えて、低分子、ＩＬ−１
１結合性ペプチド、ＩＬ−１１Ｒ結合性ペプチドまたは特異的抗体を用いること
が所望される場合、適当な投与量はＩＬ−１１Ｒの適当な投与量に基づいて容易
に決定することができる。低分子、ペプチドまたは抗体の投与量は可溶化ＩＬ−
１１Ｒ変異体の投与量の関数であり、可溶化ＩＬ−１１Ｒ変異体に関する標的、
インビトロにおける三次複合体の形成阻止およびその相対的有効性およびインビ
ボにおけるその相対的半減期に対して、低分子、ペプチドまたは抗体の標的数度
、相対的分子量および結合親和性に基づいて有効標的結合の同等のレベルを与え
るよう調節される。特定の低分子、抗体またはペプチドの標的数度、分子量、結
合親和性およびインビボ半減期は、標準的方法により決定することができる。イ
ンビトロにおける三次複合体の形成阻止についての化合物の有用性は、上述のよ
うにＴＲＡＰアッセイおよび／または骨小結節形成アッセイを用いて検査するこ
とができる。本発明のＩＬ−１１結合性ペプチドの適当な投与量は、局所注射に
より投与する場合にはしばしば体重kg当たり０.１〜１０mgの範囲である。特定
の患者に対して必要とされる特定のＩＬ−１１結合性ペプチドの投与量は、上述
の要因、患者の全般的な状態および治療すべき疾患を考慮して容易に決定するこ
とができる。
【００５２】 ある例において、本発明のペプチドを化学修飾して、活性を高めるかまたはイ
ンビボでの分解を阻害することにより、これらのペプチドの活性および／または
インビボでの半減期を増強することが所望される。例えば、化学成分を特定のア
ミノ酸に共有結合させて、分解酵素の作用を妨げてもよい。また、ペプチド配列
におけるアミノ酸を科学的に修飾して、ペプチドとＩＬ−１１との間の特異的結
合を大きく減少させることなく全般的なペプチドの半減期を増加させてもよい。
さらに、ある例においては、これらのペプチドの形成において１つ以上のＤ−ア
ミノ酸異性体残基を用いることが所望される。ある例においては、ペプチドを環
状化することが所望される。例えば環状化は、特定のペプチドのコンホメーショ
ンを安定化させ、結合の所望のレベルを得るために使用することができる。アミ
ノ酸に化学成分を添加することによりペプチド配列を修飾する方法、特定のアミ
ノ酸の化学修飾する方法およびアミノ酸のＤ−異性体を導入する方法は当業界で
知られており、本明細書の開示を考慮してどの修飾が適切であるかおよびこれら
の修飾をどのように行うかを決定することは当業者の能力の範囲内である。
【００５３】 投与すべき化合物が、患者の細胞内で発現させるアンチセンス遺伝物質からな
る場合、適当な投与量は細胞中におけるアンチセンス物質の転写レベル、その安
定性および相補的なＩＬ−１１Ｒ ＲＮＡに対する結合親和性に依存する。 また、目的のタンパク質またはペプチド配列の分泌型をコードする発現可能な
遺伝物質は、標準的方法を用いて適するＭＨＣ−適合性細胞中に生体外で導入す
ることができ、そしてこれらの細胞は標準的方法により患者の体内に導入するこ
とができる。
【００５４】 これらの細胞は、骨沈着の増加または骨吸収の減少が必要とされる領域に局所
的に投与してもよいが、通常のように投与してもよい。発現可能な遺伝分子は本
質的に活性であるか、またはそれを誘導することができる。発現可能な分子の適
当な投与量は、投与様式、治療すべき病態、患者の状態、コードするＲＮＡおよ
びそのタンパク質産物の安定性、タンパク質発現のレベル、並びにＩＬ−１１結
合性ペプチド、ＩＬ−１１Ｒ結合性ペプチド、低分子および特異的抗体に関して
上述したような、有効な標的結合のレベルに影響を与える他の要因により依存す
る。一般的に、発現可能な遺伝分子の適当な投与量は、このペプチドの適当なレ
ベルが患者に直接投与された場合における標的細胞の近傍に存在する分泌タンパ
ク質またはペプチドのレベルと同様な、標的細胞の近傍に存在する分泌タンパク
質またはペプチドのレベルを与える投与量であることが予測される。
【００５５】 投与すべき化合物が、ＩＬ−１１、ＩＬ−１１Ｒまたはｇｐ１３０に特異的に
結合し、その三次複合体の形成を抑制または阻害する抗体からなる場合、この化
合物の全身投与または局所投与のいずれかが可能である。局所投与は、目的の抗
体を含有する溶液の治療すべき組織のおおよその領域への注射を包含する、種々
の方法により行うことができる。また、全身性または局所的方法のいずれかにお
いて目的の抗体を分泌するＭＨＣ−適合性細胞を被検者の体内に導入してもよい
。 さらに本発明を説明するために次の特別な実施例を記載する。
【００５６】 実施例１：ＩＬ−１１の骨小結節形成の抑制 骨小結節形成アッセイを用いて骨形成に及ぼすＩＬ−１１の効果を調べた。マ
ウス頭蓋冠細胞（一次骨芽細胞）を２５０μＭのアスコルビン酸および１０ｍＭ
のβ−グリセロールホスフェートの存在下、および種々の量のインターロイキン
−１１の存在下で培養した。培養後その培地をプレートに採り、次いで１枚のプ
レート当たりの骨小結節の数を数えた。結果は添付の図５に示されており、そこ
では１枚のプレート当たりの骨小結節の数が縦軸に、一定の比例での記載ではな
いが横軸に表示されたインターロイキンの種々の濃度に関してプロットされてい
る。それぞれのバーは図５に表されているように、種々の濃度のインターロイキ
ン−１１を含有する各実験での結果を示している。 明かに分かることは、インターロイキン−１１の不在下で実施した実験は１枚
のプレート当たり最高数の骨小結節を産生し、そしてインターロイキン−１１の
濃度が増加するにつれて１枚のプレート当たりの骨小結節の数は減少したことで
ある。このことは、ＩＬ−１１が骨形成を抑制することを証明している。
【００５７】 実施例２：卵巣切除した動物の骨量減少を停止させ、逆転させることができる抗
−ＩＬ−１１−中和抗体の能力の証明 ２４匹の実験用マウスを６匹ずつの４つの等グループに分けた。これらのグル
ープの３つは卵巣切除し（ＯＶＸ）、一方第４グループは対照として作用させる
ために虚偽手術した（ＳＨＡＭ）。卵巣切除後１週間目に、卵巣切除した動物の
１グループ（ＯＶＸ＋抗ＩＬ−１１Ａｂ）を１匹のマウス当たり一日の投与量１
６０μｇの抗−ＩＬ−１１−Ａｂ（アフィニティー精製したヒツジ抗−マウスＩ
Ｌ−１１ポリクロナール中和抗体）で処置し始めた。同時に、卵巣切除した動物
の別グループ（ＯＶＸ＋ＮＳＩｇＧ）を一日当たり同一投与量の正常ヒツジ免疫
グロブリン（ＮＳＩｇＧ）で処置し始めた。各処置は腹腔内注射により一日に一
回行った。血漿分析により、ＩｇＧがＮＳＩｇＧグループの動物の循環系中に入
ったことが証明された。残り２つのグループの動物は全く処置を受けなかった。
【００５８】 処置の開始日に、虚偽手術した動物（ＳＨＡＭ−基準線）および同数の卵巣切
除した未処置動物（ＯＶＸ−基準線）を犠牲にして、組織形態計測学的分析用に
それらの右大腿骨を得、基準線の値を確立することができた。
【００５９】 処置開始後２１日目に残りの動物を同様に殺害し、骨組織形態計測用にそれら
の右大腿骨を取り除いた。このために、各マウスの右大腿骨のカルシウム除去さ
れていない末端の三分の一をグリコールメタクリレート（ＪＢ−４埋め込み培地
；Analychem社製、Tronto, Ontario, Canada）中に埋めた。６〜８μｍの組織構
造部分をリッヘルトユングミクロトーム（モデルＫ４；Riechert Jung Canada,
Toronto, Ontario）を用いて獲得し、プレートに載せ、次いで１％トルイジンブ
ルーまたはヘマトキシリンとエオシン（Ｈ＆Ｅ）で染色し、形態計測学的分析を
行った。それぞれの場合、全ての骨幹端を包含した骨端成長プレート下の８００
μｍ領域をメルツグリッド（Merz grid; Carl Zeiss Canada, Don Mills, Ontar
io）を使用する光学顕微鏡に載せた。このように調査した各部分は５〜８mm2の
全組織面積を包含した。以下のパラメーター、（１）海面骨質体積、（２）骨芽
細胞表面、（３）類骨表面および（４）破骨細胞表面を測定した。各部分に関し
て、海面骨質体積を、メルツグリッドを使用してランダムに選択された ＞1,600
ポイント測定値の全体（４５視野；400×倍率）から計算した。骨芽細胞表面、
類骨表面または破骨細胞表面の百分率を、油浸漬（1,000×）下でメルツ基部の
半球状グリッドが海面骨質を横断するそれぞれが存在するかまたは存在しないか
を記録することにより計算した。骨芽細胞は海面骨質表面に並ぶ明瞭な立方形の
細胞として形態学的に同定され、一方破骨細胞は海面骨質表面に極めて接近した
大きな多核細胞として形態学的に同定され、酒石酸耐性酸ホスファターゼ（Sigm
a Chemical社製、 St.Louis, MO; Procedure No.386）について染色された。
【００６０】 海面骨質体積の測定結果は、図６Ａにグラフで示されている。明らかに、ＩＬ
−１１抗体で処置したＯＶＸ＋抗ＩＬ−１１Ａｂグループは、未処置ＯＶＸグル
ープおよび負の制御ＯＶＸＮＳＩｇＧのＩｇＧ処置グループよりも遥かに大きな
海面骨質体積を有した。処置開始の日に犠牲となったＳＨＡＭおよびＯＶＸの各
動物からの大腿骨での測定値は、骨体積増加に関して基準線の値になる。ＯＶＸ
＋抗ＩＬ−１１Ａｂグループの供試動物が、ＯＶＸ基準線に比べて海面骨質体積
に有意な獲得を示したことが注目されよう。これは海面骨質損失が防止されるの
みならず、ＩＬ−１１の生物活性の抑制により逆転されたことをも指摘している
。
【００６１】 図６Ｂは類骨表面測定値の結果を示しており、ＯＶＸ＋抗ＩＬ−１１Ａｂ動物
が比較グループよりも高い骨形成比率を表している。これはＩＬ−１１の生物活
性を抑制することによりＯＶＸマウスにおいて新しい骨の形成を促進し、骨量減
少を逆転させそして骨密度を増加させることができることを証明している。 図６Ｃは同様に破骨細胞表面測定値の結果を示しており、ＩＬ−１１抗体で処
置したＯＶＸ＋抗ＩＬ−１１Ａｂ動物の場合における顕著な減少を示す。これは
また、ＯＶＸ＋抗ＩＬ−１１Ａｂ動物が比較グループよりも骨吸収が遥かに少な
いことを指摘しており、さらにＩＬ−１１の生物活性の抑制がＯＶＸマウスの骨
吸収を防止し、逆転さえさせることを証明している。
【００６２】 実施例３：ＩＬ−１１誘導の破骨細胞形成を抑制する可溶性インターロイキン−
１１レセプターの調製 ＩＬ−１１レセプターをコードするｃＤＮＡ（トランスメンブランおよび細胞
質のドメインを除く）をＩＬ−１１レセプター特異的プライマーを用いてＲＴ−
ＰＣＲによりクローン化し、全てのＲＮＡをヒト骨肉腫細胞系ＳＡＯＳ−２から
単離した。プライマー配列はヒトＩＬ−１１レセプターα−鎖のＤＮＡ配列をベ
ースとした。前進プライマーはスタートのＡＴＧコドンに先立つＫｏｚａｋ共通
配列を含有し、一方復帰プライマーは終止コドンに加えて、ヒスチジンタグをコ
ードする塩基を含有する。両プライマーはプラスミドベクターへのその後のクロ
ーニング用の末端制限エンドヌクレアーゼ部位を含有する。可溶性ＩＬ−１１レ
セプターをコードするｃＤＮＡインサートの真正物（SEQ ID NO：3 に記載のｃ
ＤＮＡ）は制限エンドヌクレアーゼ分析により、および修飾されたＴ７ＤＮＡポ
リメラーゼ系（Sequenase, Amersham社製）を用いた二重鎖ＤＮＡシークエンス
法により確認される。
【００６３】 哺乳類細胞中での安定発現のために、ＩＬ−１１ＲｃＤＮＡをゲル精製し、次
いでネオマイシン遺伝子をコードしそして高濃度のＧ４１８の下での選択を可能
にするｐｃＤＮＡ３．１ベクター（Invitrogen, Carlsbad, CA）に連結させる。
このｃＤＮＡを、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）前初期プロモーター／エ
ンハンサー（これは種々の哺乳類細胞系で高レベル発現を可能にする）の上流に
、そしてウシ成長ホルモン（ＢＧＨ）ポリアデニル化シグナル（これは有効な転
写産物安定化および終止を可能にする）の下流に挿入する。挿入すべきｃＤＮＡ
配列は、バンロイベン氏等（Van Leuven et al.）により同定されたＩＬ−１１
ＲｃＤＮＡ上のヌクレオチド６２〜１１５６に対応するｃＤＮＡ配列から得、さ
らにこの配列の３′末端に追加の３９ヌクレオチドを加えてトロンビン分裂部位
、ヒスチジンタグおよび停止コドンを得た。挿入されたｃＤＮＡ配列（SEQ ID N
O：3）は図１Ｂに記載されている。
【００６４】 挿入されたＩＬ−１１ＲｃＤＮＡの正確な配向は制限エンドヌクレアーゼ分析
およびＤＮＡ配列分析により確認される。ネオマイシン含有培地中で選択してか
ら約１０〜１２日後に薬物耐性コロニーを単離し、最大分泌クローンをローラー
ボトル中に植え付け、その培地を２〜３日毎に集める。集めた培地から可溶性Ｉ
Ｌ−１１ＲをＮｉ2+−ＩＤＡカラムを用いて精製し、次いでＥＤＴＡで溶出した
。ヒスチジンタグとＩＬ−１１レセプターの両方に対する抗体を用いてＥＬＩＳ
Ａにより抗原レベルを測定する。
【００６５】 ｓＩＬ−１１Ｒがｇｐ１３０と会合しないことを確かめるために、位置指定変
異誘発を用いて、ｇｐ１３０結合を仲介するがＩＬ−１１結合に影響を及ぼさな
い、ＩＬ−１１レセプター中のアミノ酸を修飾する。具体的には、その方法は独
立してまたは組み合わせでＤ２８２をＧに、Ａ２８３をＤに、Ｇ２８６をＤに、
Ｈ２８９をＹに、そしてＶ２９１をＬに変異させる。ＩＬ−１１Ｒの関連部分お
よび好ましい変異は図２に示されている。位置指定変異誘発は、以前に記述（Au
stin, Richard C. et al., “FEBS Letters", Vol.280, No.2, 254:258（1991年
3月）, Federation of European Biochemical Societies）されたようにして、
ＭｃＭａｓｔｅｒ大学の分子生物学および生物工学研究中央施設で合成された変
異体オリゴデオキシヌクレオチドプライマーを用いて実施する。ＢＨＫ細胞中で
の発現の前に、生成するｓＩＬ−１１Ｒ変異体ｃＤＮＡをｐｃＤＮＡ３.１に挿
入し、次いで全てのｓＩＬ−１１Ｒ変異体ｃＤＮＡの配列を前述のシークエンス
法により確認する。
【００６６】 実施例４：試験管内でのＩＬ−１１誘導の破骨細胞形成に及ぼすｓＩＬ−１１Ｒ
アンタゴニストの効果の測定 マウス骨髄と頭蓋冠細胞との共培養中の破骨細胞発生に及ぼすＩＬ−１１の効
果を標準技法を用いて調べた。簡単には、マウスから大腿骨を取り除き、軟組織
を切開し次いでその大腿骨の遠位端および近辺端を取り除くことによって骨髄培
養を作製した。次いでその骨髄を２５ゲージ針を用いて５mlのαＭＥＭおよび１
.０％のペニシリン−ストレプトマイシンでフラッシュした。次にその骨髄細胞
を、プラスチックに付着する細胞を除去するために（木炭処理した）１５％胎児
ウシ血清を含有するαＭＥＭ中に懸濁して、１ml当たり５００００００個の細胞
の濃度を得た。次いで非付着細胞をさらに９日間マウス頭蓋冠細胞とともに共培
養し、次いで固定し、ＴＲＡＰアーゼ活性のために染色した（染料はSigma Chem
ical社、 St.Louis, MOから得た）。ＴＲＡＰ+ＭＮＣは平滑な皮質骨切片中に吸
収小窩を形成する能力を有し、そしてそれ故に破骨細胞源であると考えられてい
る。
【００６７】 (ｉ) ＴＲＡＰ+細胞形成のＩＬ−１１投与量依存性 マウス骨髄と頭蓋冠細胞の共培養での破骨細胞発生に及ぼすＩＬ−１１の効果
を、これらの培養を種々の特定濃度のＩＬ−１１の存在下で９日間維持すること
により調べた。培養の９日後に細胞をＴＲＡＰアーゼ活性のために染色し、多核
性ＴＲＡＰ+細胞の数を測定した。この実験の結果は表１に示されている。デー
タは平均＋／−ＳＥＭとして表されている。
【００６８】 (ii) ＩＬ−１１誘導の破骨細胞形成における変異体ＩＬ−１１レセプターの影
響 ＩＬ−１１誘導の破骨細胞形成におけるｇｐ１３０結合領域変異体ＩＬ−１１
Ｒの効果を評価するために、前記（i）に記載の方法を２０ng／mlのＩＬ−１１
および１０ng／ml、１００ng／mlまたは１０００ng／mlの（Ａ）実施例３に記載
のＨ２８９→Ｙ２８９変異体の溶解したＩＬ−１１レセプターまたは（Ｂ）対応
する溶解した天然のＩＬ−１１レセプターのいずれかを用いて繰り返した。図７
Ａおよび７Ｂに示されたこの実験の結果は、変異体ＩＬ−１１レセプターはＩＬ
−１１誘導の破骨細胞形成を抑制することができるが、一方天然のＩＬ−１１レ
セプターはできないことを証明している。
【００６９】 実施例５：試験管内でのＩＬ−１１誘導の破骨細胞形成に及ぼすペプチドＩＬ−
１１Ｒアンタゴニストの効果の測定 外因性抗体または他の大きなタンパク質を加えずに、ＩＬ−１１とＩＬ−１１
Ｒとの相互作用を選択的に抑制する手段を有することは望ましい。意外なことに
、ＩＬ−１１とＩＬ−１１Ｒとの相互作用を抑制することができる短いペプチド
配列を作製できることが確定した。アミノ酸配列 ArgArgLeuArgAlaSerTrpThrTyr
ProAlaSerTrpProCysGlnProHisPheLeu を有するペプチド（“ペプチド１”，SEQ
ID NO：1）を合成したが、それはＩＬ−１１を結合するようであるＩＬ−１１レ
セプター中のある領域に相同である。
【００７０】 ペプチド１がＩＬ−１１誘導のＭＮＣ形成を抑制できるかどうかを測定するた
めに、ｇｐ１３０結合領域変異体ＩＬ−１１レセプタータンパク質の代わりにペ
プチド１を用い、そして溶解した天然のＩＬ−１１レセプターの代わりに重複ペ
プチド（“ペプチド２”，SEQ ID NO：2）を用いて実験４の方法を繰り返した。
ペプチド２はアミノ酸配列 ThrTyrProAlaSerTrpProCysGlnProHisPheLeuLeuLysPh
eArgLeuGlnTyr（SEQ ID NO：2）を有し、天然のＩＬ−１１レセプター中に生ず
るアミノ酸配列の一部分を表し、そしてペプチド１の配列と部分的に重複してい
る。ペプチド２は、ペプチド１に含有されるＮ−末端 ArgArgLeuArgAlaSerTrp
配列（SEQ ID NO：5）を欠如している。これらのペプチドの配列は図４に示され
ている。
【００７１】 ペプチド１はＩＬ−１１誘導の破骨細胞形成を抑制し、一方ペプチド２は抑制
しない。ペプチド１に関するこの実験の結果は図８に示されている。これは Arg
ArgLeuArgAlaSerTrp からなるペプチド配列がＩＬ−１１と相互作用し、破骨細
胞形成の活性化を仲介するＩＬ−１１に対するアンタゴニストとして作用するこ
とができることを指摘している。破骨細胞形成を抑制することができるぺプチド
１および特にペプチド配列 ArgArgLeuArgAlaSerTrp の能力は、このペプチドが
ＩＬ−１１と相互作用していることを指摘している。すなわち、ペプチド１はＩ
Ｌ−１１結合ペプチドの一例である。
【００７２】 実施例６：試験管内での骨小結節形成を抑制できるＩＬ−１１の能力に及ぼすＩ
Ｌ−１１アンタゴニストの効果の測定 本発明のＩＬ−１１アンタゴニストが骨小結節形成を抑制することができるか
どうか、そして特に、これらのアンタゴニストが骨小結節形成に対するＩＬ−１
１の抑制効果を減少させることができるかどうかを確定することが望まれた。 骨小結節形成を標準技法を用いて測定した。簡単には、頭蓋冠細胞を以下のよ
うにして作製した。頭蓋冠細胞を２日令胎児マウス頭蓋冠からコラゲナーゼ消化
により獲得した。次いでこれらの細胞を０.５ｍＭのアスコルビン酸および１０
ｍＭのβ−グリセロホスフェートの存在下で２１日間培養した。下記の実験記述
で指摘されている場合には、実験４のＩＬ−１１および変異体ＩＬ−１１レセプ
ターを初日およびその後３〜４日毎に培養に加え、その後分析のために培地を除
去した。骨小結節形成は、アリザリンレッド染色の小結節を光学顕微鏡下で数え
ることによりその量を測定した。
【００７３】 マウス頭蓋冠細胞培養に単独で加えられた外因性ＩＬ−１１は図５に示されて
いるように骨小結節形成を抑制することができる。実験４に記載されそして実験
３の方法により調製された型のｇｐ１３０結合領域変異体溶解のＩＬ−１１レセ
プターの、２０ng／mlの外因性ＩＬ−１１の存在下での骨小結節形成に関する効
果を評価した。それらの結果は図９に示されている。これらの結果は極めて低レ
ベルの変異体を溶解したＩＬ−１１レセプターは、外因性ＩＬ−１１の効果を後
退させることができるということを指摘している。さらに、この実験で使用した
変異体レセプター１０ng／mlの添加は、外因性ＩＬ−１１の存在しない場合に観
察されたレベルに比べて骨小結節形成を促進することができた。すなわち、変異
体ＩＬ−１１ＲのようなＩＬ−１１アンタゴニストは骨小結節形成を促進するこ
とができる。
【００７４】 実施例７：試験管内での骨小結節形成を抑制できるＩＬ−１１の能力に及ぼすＩ
Ｌ−１１アンタゴニストペプチドの効果の測定 実施例５で用いたようなＩＬ−１１アンタゴニストペプチドを使用して、実施
例６に報告されたのと同様の方法で骨小結節形成を調節することができるかどう
かを確定することが望まれた。これを成就するために、溶解した変異体ＩＬ−１
１レセプターの代わりにペプチド１を置き換えて、実施例６の方法を繰り返した
。この実験の結果は図１０に示されている。ペプチド１は極めて低い濃度で２０
ng／mlの外因性ＩＬ−１１の抑制効果を減少させることができた。５０ng／mlの
濃度においてペプチド１は、対照試料に見られる以上に骨小結節形成を可能にし
た。ペプチド２はＩＬ−１１による小結節形成の抑制を減少させることはできな
かった。すなわち、ペプチド１（SEQ ID NO：1）および特にそのペプチド配列 A
rgArgLeuArgAlaSerTrp（SEQ ID NO：5）は骨小結節形成を促進することができる
。
【配列表】
【図面の簡単な説明】
【図１Ａ】 天然のＩＬ−１１レセプターを表す略図であり、その種々の領域およびＩＬ−
１１とｇｐ１３０と相互作用する結合領域を示す。
【図１Ｂ】 SEQ ID NO. 3に記載され、実施例３で用いたｃＤＮＡ配列を表わす。
【図２】 天然のＩＬ−１１Ｒのｇｐ１３０結合領域の詳細な配列であり、特に好ましい
突然変異部位および本発明の変異体の産生を示す。広範囲にわたり変異した部位
はSEQ ID NO. 4に開示される。
【図３】 ＩＬ−１１レセプターのペプチド配列の部分を表し、ＩＬ−１１と相互作用す
る領域を太字で示す。
【図４】 実施例５にて用いたペプチド１（SEQ ID NO. 1）およびペプチド２（SEQ ID N
O. 2）の配列を表し、実験において観察された活性を示す。
【図５】 実施例１にて得られた結果のグラフである。
【図６Ａ】 実施例２にて得られた結果のグラフである。
【図６Ｂ】 実施例２にて得られた結果のグラフである。
【図６Ｃ】 実施例２にて得られた結果のグラフである。
【図７Ａ】 実施例４にて得られた結果のグラフである。
【図７Ｂ】 実施例４にて得られた結果のグラフである。
【図８】 実施例５にて得られた結果のグラフである。
【図９】 実施例６にて得られた結果のグラフである。
【図１０】 実施例７にて得られた結果のグラフである。
【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書
【提出日】平成１２年６月１９日（２０００．６．１９）
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正内容】
【特許請求の範囲】
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正内容】
【００４２】 マウス頭蓋冠と骨髄細胞の共培養を用いると、ＩＬ−１１がインビトロにおけ
る破骨細胞形成の潜在的な刺激薬であることが示された。さらに、マウス頭蓋冠
（主に骨芽細胞）を２５０μＭ アスコルビン酸および１０ｍＭ β−グリセロ
ールホスフェートの存在下で培養する（骨小結節形成アッセイ）場合には、ＩＬ
−１１が骨形成を阻害することが示された。故に、ＩＬ−１１を標的とすること
により、破骨細胞形成の過程、故に病理学的な骨の欠乏を阻害することができな
いが、骨形成の過程を刺激することにより既に失われた骨を修復することができ
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 19/10 Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ 43/00 １１１ Ｃ０７Ｋ 1/22 Ｃ０７Ｋ 1/22 14/54 ＺＮＡ 14/54 ＺＮＡ Ｇ０１Ｎ 33/15 Ｚ Ｇ０１Ｎ 33/15 33/50 Ｚ 33/50 33/68 33/68 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ， ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，Ｇ Ｅ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，Ｍ Ｎ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ， ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，Ｚ Ｗ (72)発明者 リチャード・カール・オースティン カナダ国オンタリオ・エル９ジー・２ケイ ５．アンカスター．ローズマリーレーン68 Ｆターム(参考） 2G045 AA34 AA35 BA14 BB20 BB24 BB51 CB01 CB13 DA13 DA36 FA16 GC22 4C084 AA02 AA17 BA03 CA53 DA12 NA14 ZA962 ZA972 ZC022 4C085 AA13 AA14 BB17 CC03 CC05 DD23 EE01 4C086 AA01 AA02 EA16 MA01 MA04 NA14 ZA96 ZA97 ZC02 4H045 AA10 AA20 AA30 BA13 BA14 BA17 CA40 DA02 DA51 EA20 FA72 FA74

Claims (47)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 骨密度が減少する病的状態にある哺乳類患者においてＩＬ−
    １１、ＩＬ−１１Ｒおよびｇｐ１３０の三次複合体の形成を抑制することからな
    る、その症状の治療または軽減方法。
  2. 【請求項２】 ＩＬ−１１、ＩＬ−１１Ｒおよびｇｐ１３０の三次複合体の
    形成を生体内において抑制する物質の有効量を患者に投与することからなる、請
    求項１記載の方法。
  3. 【請求項３】 病的状態が閉経後の骨量減少である請求項２記載の方法。
  4. 【請求項４】 物質が変異体ＩＬ−１１Ｒである請求項２記載の方法。
  5. 【請求項５】 物質がｇｐ１３０結合領域内に少なくとも１個の変異を有す
    る変異体ＩＬ−１１Ｒである請求項４記載の方法。
  6. 【請求項６】 物質が少なくとも１個の以下の変異：Ｄ２８２→Ｇ２８２、
    Ａ２８３→Ｄ２８３、Ｇ２８６→Ｄ２８６、Ｈ２８９→Ｙ２８９およびＶ２９１
    →Ｌ２９１を有する変異体ＩＬ−１１Ｒである請求項５記載の方法。
  7. 【請求項７】 物質が変異、Ｈ２８９→Ｙ２８９を有する変異体ＩＬ−１１
    Ｒである請求項６記載の方法。
  8. 【請求項８】 物質が可溶性変異体ＩＬ−１１Ｒである請求項４〜７のいず
    れか一項に記載の方法。
  9. 【請求項９】 変異体ＩＬ−１１ＲがヒトＩＬ−１１Ｒである請求項８記載
    の方法。
  10. 【請求項１０】 物質が抗ＩＬ−１１抗体である請求項２記載の方法。
  11. 【請求項１１】 物質がＩＬ−１１結合ペプチドである請求項２記載の方法
    。
  12. 【請求項１２】 物質がＩＬ−１１Ｒによって正常に結合される領域内で１
    Ｌ−１１を特異的に結合するアミノ酸配列を有する１Ｌ−１１結合ペプチドであ
    る請求項１１記載の方法。
  13. 【請求項１３】 物質が、配列ＡｒｇＡｒｇＬｅｕＡｒｇＡｌａＳｅｒＴｒ
    ｐからなるペプチドである請求項１２記載の方法。
  14. 【請求項１４】 物質が小分子である請求項２記載の方法。
  15. 【請求項１５】 物質がＩＬ−１１アンタゴニストである請求項２記載の方
    法。
  16. 【請求項１６】 物質がＩＬ−１１Ｒ結合ペプチドである請求項２記載の方
    法。
  17. 【請求項１７】 物質がＩＬ−１１とＩＬ−１１Ｒとの相互作用を抑制する
    抗ＩＬ−１１Ｒ抗体である請求項２記載の方法。
  18. 【請求項１８】 物質がＩＬ−１１Ｒとｇｐ１３０との相互作用を抑制する
    抗ＩＬ−１１Ｒ抗体である請求項２記載の方法。
  19. 【請求項１９】 ＩＬ−１１、ＩＬ−１１Ｒおよびｇｐ１３０の三次複合体
    の形成を抑制する転写可能な遺伝物質の有効量を患者に投与することからなる請
    求項１記載の方法。
  20. 【請求項２０】 転写可能な遺伝物質がＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１
    ３０の三次複合体の形成に必要な成分の翻訳を抑制することができるＲＮＡ配列
    をコードする請求項１９記載の方法。
  21. 【請求項２１】 転写可能な遺伝物質がＩＬ−１１ｍＲＮＡに相補的なＲＮ
    Ａ配列をコードするＤＮＡからなる請求項２０記載の方法。
  22. 【請求項２２】 転写可能な遺伝物質がＩＬ−１１ＲｍＲＮＡに相補的なＲ
    ＮＡ配列をコードするＤＮＡからなる請求項２０記載の方法。
  23. 【請求項２３】 転写可能な遺伝物質がｇｐ１３０ｍＲＮＡに相補的なＲＮ
    Ａ配列をコードするＤＮＡからなる請求項２０記載の方法。
  24. 【請求項２４】 転写可能な遺伝物質がＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１
    ３０の三次複合体の形成を抑制することができるアミノ酸配列をコードするＤＮ
    Ａからなる請求項１９記載の方法。
  25. 【請求項２５】 転写可能な遺伝物質がｇｐ１３０への結合を抑制するよう
    に変異されたＩＬ−１１Ｒをコードする請求項２４記載の方法。
  26. 【請求項２６】 転写可能な遺伝物質がＩＬ−１１結合ペプチドをコードす
    る請求項２４記載の方法。
  27. 【請求項２７】 転写可能な遺伝物質の転写レベルが誘導化合物の濃度に依
    存する請求項１９〜２６のいずれか一項に記載の方法。
  28. 【請求項２８】 患者がヒトである請求項１〜２７のいずれか一項に記載の
    方法。
  29. 【請求項２９】 変異体ＩＬ−１１Ｒからなる組成物。
  30. 【請求項３０】 変異体ＩＬ−１１Ｒが少なくとも１個の以下の変異：Ｄ２
    ８２→Ｇ２８２、Ａ２８３→Ｄ２８３、Ｇ２８６→Ｄ２８６、Ｈ２８９→Ｙ２８
    ９およびＶ２９１→Ｌ２９１を有する請求項２９記載の組成物。
  31. 【請求項３１】 変異体ＩＬ−１１ＲがＨ２８９→Ｙ２８９の変異を有する
    請求項３０記載の組成物。
  32. 【請求項３２】 変異体ＩＬ−１１Ｒが可溶性である請求項２９、３０また
    は３１に記載の組成物。
  33. 【請求項３３】 変異体ＩＬ−１１ＲがヒトＩＬ−１１Ｒである請求項２９
    〜３２のいずれか一項に記載の組成物。
  34. 【請求項３４】 ＩＬ−１１結合ペプチドからなる組成物。
  35. 【請求項３５】 ＩＬ−１１結合ペプチドが、配列ＡｒｇＡｒｇＬｅｕＡｒ
    ｇＡｌａＳｅｒＴｒｐからなる請求項３４記載の組成物。
  36. 【請求項３６】 ＩＬ−１１結合ペプチドが、配列ＡｒｇＡｒｇＬｅｕＨｉ
    ｓＡｌａＳｅｒＴｒｐからなる請求項３４記載の組成物。
  37. 【請求項３７】 ＩＬ−１１結合ペプチドが、配列ＡｒｇＡｒｇＬｅｕＸＡ
    ｌａＳｅｒＴｒｐからなり、そしてＸが塩基性アミノ酸である請求項３４記載の
    組成物。
  38. 【請求項３８】 ＩＬ−１１結合ペプチドが、配列ＳｅｒＩｌｅＬｅｕＡｒ
    ｇＰｒｏＡｓｐＰｒｏＰｒｏＧｌｎＧｌｙＬｅｕＡｒｇＶａｌＧｌｕＳｅｒＶａ
    ｌＰｒｏＧｌｙＴｙｒＰｒｏからなる請求項３４記載の組成物。
  39. 【請求項３９】 ＩＬ−１１結合ペプチドが、配列ＳｅｒＩｌｅＬｅｕＡｒ
    ｇＰｒｏＡｓｐＰｒｏＰｒｏＧｌｎＧｌｙＬｅｕＡｒｇＶａｌＧｌｕＳｅｒＶａ
    ｌＰｒｏＳｅｒＴｙｒＰｒｏからなる請求項３４記載の組成物。
  40. 【請求項４０】 ＩＬ−１１の精製における請求項３４〜３９のいずれか一
    項に記載のペプチドの使用。
  41. 【請求項４１】 溶液からＩＬ−１１が涸渇した請求項３４〜３９のいずれ
    か一項に記載のペプチドの使用。
  42. 【請求項４２】 適切な基質に適当に固定された請求項３４〜３９のいずれ
    か一項に記載のペプチドからなるＩＬ−１１の選択的結合のための組成物。
  43. 【請求項４３】 ＩＬ−１１Ｒ結合ペプチドからなる組成物。
  44. 【請求項４４】 ＩＬ−１１Ｒを特異的に結合しそしてＩＬ−１１とＩＬ−
    １１Ｒとの間の相互作用を遮断する抗体からなる、ＩＬ−１１／ＩＬ−１１Ｒの
    相互作用を抑制するのに有用な組成物。
  45. 【請求項４５】 ＩＬ−１１Ｒを特異的に結合しそしてｇｐ１３０とＩＬ−
    １１Ｒとの間の相互作用を遮断する抗体からなる、ＩＬ−１１Ｒ上のｇｐ１３０
    結合部位を介してのＩＬ−１１Ｒ／ｇｐ１３０の相互作用を抑制するのに有用な
    組成物。
  46. 【請求項４６】 ＩＬ−１１アンタゴニストの同定におけるＴＲＡＰアッセ
    イの使用。
  47. 【請求項４７】 ＩＬ−１１アンタゴニストの同定における骨髄形成アッセ
    イの使用。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2016515094A (ja) * 2013-02-07 2016-05-26 シーエスエル、リミテッド Ｉｌ−１１ｒ結合タンパク質及びその使用
JP2019103502A (ja) * 2013-02-07 2019-06-27 シーエスエル、リミテッド Ｉｌ−１１ｒ結合タンパク質及びその使用
JP2020511414A (ja) * 2016-12-16 2020-04-16 シンガポール・ヘルス・サービシーズ・ピーティーイー・リミテッド Ｉｌ−１１抗体

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2237915A1 (en) 1998-05-19 1999-11-19 Stephen Shaughnessy Osteoporosis treatment
WO2003099322A2 (en) * 2002-05-24 2003-12-04 Isis Innovation Limited Il-11 derivatives and therapeutic uses thereof
WO2005065418A2 (en) * 2003-12-31 2005-07-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Compositions and methods of use of targeting peptides for diagnosis and therapy
US8518888B2 (en) * 2008-10-14 2013-08-27 Csl Limited Method of treatment of gastrointestinal-type cancer with antagonistic antibodies to IL-11R
WO2011154413A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Fritz-Lipmann-Insitut E. V. Leibniz-Institut Für Altersforschung Agent against glucocorticoid-induced osteoporosis
GB201522186D0 (en) 2015-12-16 2016-01-27 Singapore Health Services Pte Ltd And Nat University Of Singapore The Treatment of fibrosis
GB201621439D0 (en) 2016-12-16 2017-02-01 Singapore Health Services Pte Ltd And Nat Univ Of Singapore IL-11Ra Antibodies
CA3126322A1 (en) 2019-01-21 2020-07-30 Singapore Health Services Pte. Ltd. Treatment of hepatotoxicity
GB201902419D0 (en) 2019-02-22 2019-04-10 Singapore Health Serv Pte Ltd Treatment of kidney injury
CA3146344A1 (en) 2019-05-03 2020-11-12 Singapore Health Services Pte. Ltd. Treatment and prevention of metabolic diseases
GB201906291D0 (en) 2019-05-03 2019-06-19 Singapore Health Serv Pte Ltd Treatment and prevention of metabolic diseases
GB202009292D0 (en) 2020-06-18 2020-08-05 Singapore Health Serv Pte Ltd Treatment and prevention of disease caused by type IV collagen dysfunction
GB202017244D0 (en) 2020-10-30 2020-12-16 Nat Univ Singapore Methods to extend health-span and treat age-related diseases
KR20230150287A (ko) 2021-02-26 2023-10-30 바이엘 악티엔게젤샤프트 비정상적 자궁 출혈의 치료에 사용하기 위한 il-11 또는 il-11ra의 억제제
WO2023006765A1 (en) 2021-07-26 2023-02-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Treatment and prevention of alcoholic liver disease
WO2023111196A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Singapore Health Services Pte. Ltd. Treatment and prevention of glomerular disease

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US5530101A (en) * 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5215895A (en) * 1989-11-22 1993-06-01 Genetics Institute, Inc. Dna encoding a mammalian cytokine, interleukin-11
US5270181A (en) 1991-02-06 1993-12-14 Genetics Institute, Inc. Peptide and protein fusions to thioredoxin and thioredoxin-like molecules
US5292646A (en) 1991-02-06 1994-03-08 Genetics Institute, Inc. Peptide and protein fusions to thioredoxin and thioredoxin-like molecules
US5888510A (en) * 1993-07-21 1999-03-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Chronic rheumatoid arthritis therapy containing IL-6 antagonist as effective component
IT1274350B (it) 1994-12-06 1997-07-17 Angeletti P Ist Richerche Bio Antagonisti di interleuchina-6(il-6) che consistono di forme solubili del ricettore alfa di il-6, mutate nell'interfaccia che si lega a gp 130
IT1274782B (it) * 1994-12-14 1997-07-24 Angeletti P Ist Richerche Bio Metodo per selezionare superagonisti, antagonisti e superantagonisti di ormoni del cui complesso recettoriale fa parte gp 130
CA2208457A1 (en) * 1994-12-22 1996-06-27 Genetics Institute, Inc. Human interleukin-11 receptor
GB9621095D0 (en) * 1996-10-09 1996-11-27 Imperial College Novel system
CA2237915A1 (en) 1998-05-19 1999-11-19 Stephen Shaughnessy Osteoporosis treatment
DE60125543T2 (de) * 2000-04-05 2007-10-04 Zymogenetics, Inc., Seattle Löslicher zytokinrezeptor zalpha11

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2016515094A (ja) * 2013-02-07 2016-05-26 シーエスエル、リミテッド Ｉｌ−１１ｒ結合タンパク質及びその使用
JP2019103502A (ja) * 2013-02-07 2019-06-27 シーエスエル、リミテッド Ｉｌ−１１ｒ結合タンパク質及びその使用
JP2022028651A (ja) * 2013-02-07 2022-02-16 シーエスエル、リミテッド Ｉｌ－１１ｒ結合タンパク質及びその使用
JP2020511414A (ja) * 2016-12-16 2020-04-16 シンガポール・ヘルス・サービシーズ・ピーティーイー・リミテッド Ｉｌ−１１抗体
JP7181870B2 (ja) 2016-12-16 2022-12-01 シンガポール・ヘルス・サービシーズ・ピーティーイー・リミテッド Ｉｌ－１１抗体

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