JP2002514889A

JP2002514889A - 植物成長刺激組成物

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Publication number: JP2002514889A
Application number: JP52226896A
Authority: JP
Inventors: ジョーンズ，クレイグ; ビッツ，ディー・マイケル
Original assignee: イー・ケイ・エム・エイ・インコーポレーテッド
Priority date: 1995-01-20
Filing date: 1995-12-28
Publication date: 2002-05-21
Also published as: BR9510296A; US5843427A; MX9705494A; EP0804543A4; EP0804543A1; IL116836A0; CA2210798A1

Abstract

(57)【要約】本発明は、植物の成長を刺激することが可能な組成物及び該組成物の製造方法に関する。胃腸微生物の出発培養物から得られる培養物を磁場に暴露することにより培養物を調製する。培養物の磁場暴露は、その栄養源から分離した培養物の流路に特にＮ極である同一極を向けた２個の磁石の間で実施される。本発明の方法中には栄養源を使用して栄養含有培地から得られた微生物の試料を培養し、植物成長刺激組成物で使用するための微生物培養物を単離する。植物成長刺激組成物は更に、Ｎａ、Ｃｌ、Ｐ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｓ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｋ、Ｍｎ、Ｍｏ、Ｓｉ、Ｂ、Ｎｉ及びＲｂの栄養調合物を含む。

Description

【発明の詳細な説明】植物成長刺激組成物技術分野本発明は植物の成長を刺激することが可能な組成物及び該組成物の製造方法に関する。発明の背景植物成長刺激組成物は農商業地及び宅地整備をはじめとする多数の分野で利用されている。天然又は合成源に由来する種々の成長刺激組成物が市販されている。本発明の組成物は両者の由来の成分を含み、優れた成長刺激性の利点をもつ。本発明の組成物は、特定土壌条件下で成長する特定植物種に最適に適応できるという利点もある。発明の目的及び要約本発明の１つの目的は、植物の成長を刺激することが可能な組成物を提供することである。本発明の別の目的は、植物成長刺激組成物の成分として使用できるように微生物培養物を処理する方法を提供することである。本発明の別の目的は、植物成長刺激組成物の成分として使用するのに適した栄養調合物を提供することである。１態様において、本発明は植物成長刺激組成物の成分として使用するための微生物培養物の製造方法に関する。該方法は、ｉ）哺乳動物の胃腸管から微生物の出発培養物試料を得る段階と、 ii）ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、無機リン及び塩素又はその塩を含む培地で試料を培養する段階と、 iii）穀類又はイネ科牧草を含む栄養源（food source）の存在下で段階（ii）からの試料を培養する段階と、 iv）段階（iii）からの微生物培養物を栄養源から分離する段階と、ｖ）段階（iv）からの培養物を磁場に暴露する段階を含む。別の態様において、本発明は上記方法により製造された微生物培養物と、Ｎａ、Ｃｌ、Ｐ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｓ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｉ、Ｓｅ、Ｆｅ、Ｋ、Ｍｎ、Ｍｏ、Ｓｉ、Ｂ、Ｎｉ及びＲｂを含む栄養調合物を含む植物成長刺激組成物に関する。更に別の態様では、本発明はこのような栄養調合物に関する。更に別の態様では、本発明は植物の成長を刺激する方法に関する。該方法は、刺激を与えるような条件下で植物に上記組成物を投与することを特徴とする。更に別の態様では、本発明は植物成長刺激組成物の成分として使用するための微生物培養物の製造方法に関し、該方法は、光学顕微鏡で測定した場合に微生物の細胞壁の肥厚を生じるような条件下で培養物を磁場に暴露することを特徴とする。本発明の他の目的及び利点は以下の説明に明示される。図面の簡単な説明図１．微生物培養物の製造用発酵槽の模式図。図２．再循環管に対する磁石の向きの模式図。発明の詳細な説明本発明は植物成長刺激組成物の成分として使用するための微生物培養物の製造方法に関する。本発明は成長刺激組成物で前記微生物培養物と併用する栄養調合物にも関する。本発明の培養物及び調合物はサトウキビ、野菜、果物、イネ科牧草及び熱帯植物等の種々の植物種の成長を刺激するために使用することができる。本発明の培養物及び調合物は鑑賞植物にも利用することができる。本発明の微生物培養物を製造するのに利用可能な出発培養物は、特定微生物株の単離物を混合するか又は動物からの混合培養物、例えば動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくは草食動物、最も好ましくはウシ（例えば乳牛）の胃腸管から混合培養物を採取することにより得られる。出発培養物は例えば動物の胃（例えば草食動物の前胃）から吸引した試料又は動物の腸管から採取した糞便試料から得られる。出発培養物は天然源から得るか又は単離物から調製するかに拘わらず、天然源（例えば草食動物（例えばウシ）の唾液）又は化学物質から調製可能な培地の存在下で初期期間（例えば２１〜３１時間、好ましくは２４時間）培養する。唾液から調製する場合には、次の手順を使用することができる。動物（例えばウシ）の口から食塊（bolus：例えば約１リットル）を採取し、フィルター（例えば約８０μｍフィルター）にかける。食塊を温水（食塊１リットル当たり水約１０リットル）で洗浄して濾液（好ましくはｐＨ約６．３〜６．８）を得、初期培地として使用する。合成培地を使用する場合には、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、無機リン、塩素を含有するように調合するのが好ましい。１例として、重炭酸ナトリウム０．０２２５ｇ／ｌ、重炭酸カリウム０．００１２５ｇ／ｌ、炭酸カルシウム０．００００２５ｇ／ｌ、炭酸マグネシウム（無水）０．００００３７５ｇ／ｌ、リン酸０．００３３７５ｇ／ｌ、クロロ酢酸０．００２１２５ｇ／ｌを含有する培地を使用することができる。培地成分の濃度は出発培養物と標的植物により異なるが、典型的には、例えば上記濃度の±４５％、好ましくは±２０％の範囲である。出発培養物試料を好ましくはｐＨ６．９〜７．３の培地でインキュベートする。ｐＨ調節はこの時点及び全工程を通して種々の酸及び塩基を用いて実施することができ、好適酸は硫酸、塩酸及びクエン酸であり、クエン酸がより好適であり、好適塩基は水酸化カリウム、水酸化カルシウム及び重炭酸ナトリウムであり、重炭酸ナトリウムが最も好ましい。この初期インキュベーション中及び全工程を通して（例えば圧縮空気注入により）空気を導入し、酸素濃度を３〜５ｐｐｍに維持する（酸素、窒素及びアルゴンが圧縮空気の主成分である）。この初期期間中に窒素、糖及び酸素の取り込みが生じる。細胞数、栄養分濃度及び細胞壁濃度が増加する。次に（例えば２３〜２８時間後、好ましくは２４時間後に）培地／出発培養物試料混合物に栄養源（基質）を加える。栄養源は食用穀類及びイネ科牧草の混合物を含み得る。トウモロコシ粉、オートムギ、マイロ（milo）、アルファルファ、ヒマワリ種子、落花生（丸の豆）、コムギ、大豆、オオムギ、コメ、アマのうちの少なくとも３種をほぼ等重量部で加えるのが好ましい。サトウキビや野菜の場合には、トウモロコシ粉、オートムギ、アルファルファ及び丸の落花生の混合物が好ましい。この混合物は熱帯植物にも有利である。イネ科牧草が標的植物である場合（例えばゴルフ場整備の場合）には、トウモロコシ粉、オートムギ、アルファルファ及びアマの混合物が好ましい。栄養源は典型的には、別容量の液体（即ち（例えば約１：５〜１：４の比の）培地と水）と共に液体約７〜８リットルに対して乾燥物質約１ｋｇの割合で培地／出発培養物試料に加える。初期培地／出発培養細胞に栄養源と液体を複数回に分けて加えてもよく、約２４時間間隔で２回加えるのが好ましい。このインキュベーション期間の間中、ほぼ中性のｐＨ、好ましくは約６．９〜約７．３のｐＨを維持することが好ましい。温度は３４〜４１℃に維持するのが好ましく、３７〜４０℃が好ましい。栄養基質の最終添加後、得られたブロスを例えば再循環槽で再循環させることにより十分に混合する。再循環は典型的には約２４時間行い、その後、粒状物質を析出させるに十分な時間、ブロスを放置する。次にブロス上清のアリコートを取り出して第２の容器（槽）に入れる。上清アリコートを粒状物質から分離することにより、アリコート中に存在する微生物をその栄養源から分離する（こうして「二次代謝」を行わせる）。第２の容器に移したアリコートのｐＨを約４．５〜約６．３、好ましくは５．１／５．８〜６．３、より好ましくは５．１〜６．１（ｐＨは実際に３．４〜９．０であり得る）まで（例えば数時間かけて）ゆっくりと低下させる。温度は３４〜４１℃に維持し、３７〜４１℃が好ましい。最少量（例えばアリコートの約１〜３％ｖ／ｖ）好ましくは３％）の第２の栄養源を加える。第２の栄養源は例えば糖蜜（例えばサトウキビ又は柑橘類糖蜜）、アロエベラ、パパイヤジュース、ステアリン酸塩又はグリコーゲンである。サトウキビ又はイネ科牧草が標的植物である場合にはサトウキビ糖蜜が好ましく、柑橘類、野菜及び熱帯植物の場合には柑橘類糖蜜が好ましい（熱帯植物の場合にはパパイヤジュースも有利であり得る）。工程のこの時点で１ｍｌ当たりの細胞数は７００，０００〜１，５００，０００が有利であり、約８５０，０００個／ｍｌ〜９００，０００個／ｍｌが好ましく、約８９０，０００個／ｍｌが最も好ましい。細胞数はアリコートを第１の槽から第２の槽に移すのを遅らせることにより増加できる。ｐＨが低下し、第２の栄養源を加えた後、培養物のアリコートを磁場に再循環させる。磁場は電磁石又は永久磁石、例えば希土類磁石を用いて発生させる。永久磁石の場合には、例えば２個の反対極の磁石により適当な磁場を発生させることができる。本発明で使用するのに適した磁石は１２００〜４５００ガウスの強度をもち、約３５００ガウスの磁石が好ましい。図２はこのような磁石の好適向きを示す。同図では再循環管の両側に同一極（即ちＮ極）が向くように示しているが、必ずしもこのように配置する必要はない（例えば反対極が管に向くようにしてもよい）。上記のような磁石の使用に加え、粒子移動により磁場を発生させてもよい。微生物を磁場に暴露すると、微生物細胞壁の厚さの増加と細胞移動度の増加が光学顕微鏡で観察される。本発明はこれらの目的を達成することが可能な磁場の使用を意図する。磁場再循環工程中に、Ｎａ、Ｃｌ、Ｐ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｓ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｋ、Ｍｎ、Ｍｏ、Ｓｉ、Ｂ、Ｎｉ及びＲｂを含み、好ましくは更にＣｏ、Ｉ又はＳｅも含む栄養調合物を加える。一般に、本発明の方法で（圧縮空気成分と共に）発酵を刺激するにはモリブデン、ホウ素及びマグネシウムが重要である。好ましくは、調合物は下記組成をもち、下記濃度範囲（ｇ／ｌ）で培養物の調合物を加えると、培養物中の成分の濃度が増加する。微生物に許容可能である限り、他の形態で上記元素を使用してもよい。熱帯植物、野菜及びイネ科牧草（例えばゴルフ場芝）に有利な調合物を以下に示す（ｇ／ｌ培養物として表す。各元素は上記形態で加える。）（サトウキビの値については実施例参照）。これらの有利な値（及びサトウキビに関する値）は変動し得る。熱帯植物の値は例えば±５９％、好ましくは±２８％、野菜の値は±４３０％、好ましくは±２２％、芝の値は±４５０％、好ましくは±２０％、サトウキビの値は±４５％、好ましくは±２０％変動し得る。磁場暴露及び栄養調合物添加の完了後、得られた組成物をすぐに使用してもよいし、例えば２年間といった長期間貯蔵してもよい。貯蔵中にはｐＨは約５（例えば４．９〜５．２）に維持するのが好ましいが、５．５〜６．５のｐＨ範囲を使用してもよい。温度は５〜４５℃、好ましくは３４〜４１℃に維持する。紫外線に当たらないように貯蔵するのが好ましい。組成物を施用するために使用する計画は、任意の特定植物に最適化できる。例えばサトウキビには組成物１．５ガロン／エーカー／年を約４回に等分して施用し、柑橘類果樹園には約２ガロン／エーカー／年を約２回に等分して施用し、ゴルフ場芝には約３ガロン／エーカー／年を約２回に等分して施用し、野菜には約２〜２．５ガロン／エーカー／年を約２回に等分して施用する。熱帯植物の場合には約１ガロン／エーカー／月を施用する。組成物を水で約２０：１に希釈し、希釈した組成物を噴霧により施用すると有利であるが、他の施用方法（例えば潅漑）も使用できる。熱帯植物の場合には葉茎噴霧が好ましい。組成物を施用する結果、植物成長の有意刺激が生じる。組成物は単独施用してもよいし、殺虫剤や除草剤等の他の物質と併用してもよい。理論に拘束する意図はないが、本発明の利点は本発明の組成物の成分が硝化に作用して硫黄代謝を増進することに少なくとも部分的に起因すると考えられる。本発明の発酵プロセスではアルコール、アルデヒド、有機酸、エステル、ケトン、フェノール及び硫黄化合物が生産されると考えられる。当然のことながら、硫黄化合物は特に重要である。上述のように、ホウ素とマグネシウムは酸素、窒素及びアルゴン（圧縮大気の主成分）と共に発酵プロセスを刺激すると予想される。これらの成分を加えると、培養物中に存在する酵母の窒素循環を助長すると考えられる。酵母が栄養基質及び第２の栄養源中で糖を変換するにつれてアルコール、エステル及びガムが形成される（ガムはアルギン酸塩、微生物ガム、植物滲出液及び豆類ガムを含む）。特に有用な炭水化物群としては、例えば栄養基質として誘導されるような前記ガム及びセルロース化合物が挙げられる。酵母の窒素取り込み能は他の窒素固定剤と共に所定の好気性細菌類、アゾトバクター及びシアノバクターにより増加する。ガムは硫黄代謝に重要であるが、これらの細菌はガムの生産に重要であると考えられる元素であるモリブデン、ホウ素及びマグネシウムにより刺激されると考えられる。モリブデン、ホウ素及びマグネシウムの重要性はその後の酵素プロセスでこれらの元素が果たす役割に起因すると考えられる。窒素固定プロセスには（電子に高還元能を提供する）レダクターゼと（これらの電子を使用してＮ₂をＮＨ₄ ⁺に還元する）ニトロゲナーゼとから構成されるニトロゲナーゼ錯体が必要である。各成分は、鉄がシステイン残基の硫黄原子と無機スルフィドに結合した鉄−硫黄タンパク質である。錯体のニトロゲナーゼ成分は１又は２個のモリブデン原子も含む。ニトロゲナーゼがＮ₂をＮＨ₄ ⁺に変換するにはＡＴＰと強力な還元剤が必要である。殆どの窒素固定微生物において、この６電子還元の高電位電子源は還元フェレドキシンである。ＡＴＰはレダクターゼと結合し、そのコンホメーションを変化させることにより酵素のレドックス電位を−０．２９Ｖから−０．４０Ｖに変化させる。ＡＴＰは加水分解され、レダクターゼはニトロゲナーゼ成分から解離する。最後に、錯体のニトロゲナーゼ成分に結合したＮ₂はＮＨ₄ ⁺に還元される。ホスホリル移動に関しては、ＡＴＰからアクセプターへのホスホリル基の移動はキナーゼが触媒する。ＡＴＰから種々の６炭糖へのホスホリル基の移動はヘキソキナーゼが触媒する。ヘキソキナーゼの活性にはＭｇ²⁺（又はＭｎ²⁺等の別の２価金属イオン）が必要である。２価金属イオンはＡＴＰと錯体を形成する。硼酸はアシル−酵素中間体を形成する酵素の別種の遷移状態類似体である。アセチルコリンエステラーゼはアセチルコリン中のエステル結合の加水分解を触媒する酵素である。酢酸塩とコリンはガム及びろうの形成に重要な２種の物質である。硫酸化は反応生成物（硫酸塩）が特徴的−ＯＳＯ₃−分子構造を示す有機化合物にＳＯ₄基を導入する任意のプロセスとして定義される。硫酸化はアルケン、アルコール又はフェノールに及ぼす硫酸化剤の作用により−ＣＯＳ−結合を形成する反応を含む。優れた加水分解安定性を示すスルホン酸塩と異なり、アルコール硫酸塩は酸性媒体中で加水分解を受け易い。本発明の方法では脂肪アルコールとポリアルコキシレダクターゼの硫酸化が生じ、硫酸化物は乳化剤として洗剤機能を果たす。本発明の方法により生産されるガムは微生物硫黄代謝産物を貯蔵及び安定化することができる。ガムは一般に発酵成分を安定化させ、こうして本発明の方法の生成物の貯蔵を助長する役割ももつ。硫黄代謝成分が安定化されると、会合したアルコールとの洗剤反応のために炭化水素鎖から硫黄結合を除去することにより、環境内で炭化水素鎖との直接反応が可能になる。アルコール、アルデヒド等の塩基性発酵プロセスは植物セルロースの成分及び短鎖炭素構造を分解する。上述のように、発酵中に５．１〜６．１のｐＨを維持すると有利である。発酵プロセスが酸性サイクルに移るにつれてガムが形成される。ガムが形成され始めると、ｐＨは例えば６．１〜６．８となる（この範囲はもっと広く、例えば５．２〜６．８でもよい）。ガムはアニオン性であるため、酸性発酵産物及び硫黄代謝産物を貯蔵するのに有利である。本発明の生成物は、ガム及びろう生産現象を利用することにより、嫌気性微生物生産における硫黄錯体へのＡＴＰ変換を介して窒素循環のより迅速な変換を可能にすると考えられる。本発明の方法の化学は、亜硫酸塩及びメルカプタンの生産を減らすように硫黄代謝経路を迂回させると考えられる。従って、エネルギー源がデヒドロゲナーゼ系を介して水素と関連していると思われる嫌気性条件下で形成される亜硫酸水素及びメタン等の終産物の生産が低減すると考えられる。マグネシウムは終産物生産を変えることができる。磁場及び磁束を調節して永久化及び／又は振動させると共に生物触媒（例えばタンパク質、ビタミン、微量元素）を変更し、酸素、窒素及びアルゴンの適正なガス混合物を使用することにより、α結合プリン、ビオチン、スルフィン酸化炭化水素等を含む所望の硫黄含有化合物を富化し、望ましくないガスの濃度を低下させることができる。磁場を本発明の調合物と組み合わせると、窒素及び硫黄循環を介して硫黄代謝の最終錯体へのより迅速な変換が実現されると思われる。以下、非限定的な実施例により本発明の所定の態様を詳細に説明する。実施例サトウキビの成長を刺激するための組成物の製造前胃吸引機（ＪｏｈｎｓｏｎａｎｄＪｏｈｎｓｏｎ）を使用して７．５歳の乳牛ホルスタインの前胃から約１リットルの試料を吸引する。試料は給餌から約１２〜１４時間後に採取する。試料はＣｌｏｓｔｒｉｄｉａ、Ｂａｃｃｉｌｕｓ、Ａｚｏｔａｂａｃｔｅｒ及び原生動物（試料１ｍｌ当たり少なくとも細菌１００個）を含む。下記成分を含む培地（１６９リットル）に試料１リットルを加える。培地：重炭酸ナトリウム 3.80g 重炭酸カリウム 0.21125g 炭酸カルシウム 0.004225g 炭酸マグネシウム(無水) 0.0063375g リン酸 0.570375g クロロ酢酸 0.359125g。試料と培地（混合物Ａ）を最初の２４時間は温度３７℃及びｐＨ６．９〜７．３で槽１（図１参照）に維持する。この段階及び全工程を通して適宜クエン酸及び重炭酸ナトリウムを使用してｐＨ調節を行う。この最初の２４時間の間に圧縮空気を注入して混合物（Ａ）を撹拌し、混合物（Ａ）に約３〜５ｐｐｍの酸素が存在するようにする。最初の２４時間が終了したら槽１内の混合物（Ａ）に混合物（Ｂ）を加える。混合物（Ｂ）はｐＨ７．０〜７．１の水１４０リットルと、３〜５ｐｐｍの酸素濃度に達するように空気を注入した上記培地３０リットルを含む。混合物（Ｂ）は更にほぼ等重量部の下記成分を含む基質約２０ｋｇも含む。基質：トウモロコシ粉オートムギアルファルファ丸の落花生。混合物（Ｂ）のｐＨは約７．１〜７．２、温度は約３４〜４０℃、酸素濃度は（圧縮空気の注入により）約３〜５ｐｐｍに維持する。混合物（Ｂ）を混合物（Ａ）に加えた後もこれらの同一条件を維持して混合物（Ｃ）を形成する。混合物（Ｃ）は圧縮空気注入により撹拌しながら槽１に約３７℃で第２の２４時間維持する。この第２の２４時間が終了したら槽１内の混合物（Ｃ）に混合物（Ｄ）を加えて混合物（Ｅ）を形成する。混合物（Ｄ）は混合物（Ｂ）と同様にｐＨ７．１〜７．２の水１４０リットルと培地３０リットルを含む。混合物（Ｄ）は更に上記基質２０ｋｇも含む。混合物（Ｅ）を圧縮空気注入により撹拌しながら槽１に第３の２４時間維持する（温度４０℃、ｐＨ７．１、酸素濃度３〜５ｐｐｍ）。第３の２４時間が完了したら、混合物（Ｅ）を１０分間再循環させる。槽１とそれに付属する再循環システムは、１０分間で混合物（Ｅ）の完全な再循環を実施できるように設計する。この再循環は２時間おいて第４の２４時間実施する。その後、粒状物質を析出させるに十分な時間、混合物（Ｅ）を放置する。第４の２４時間が終了したら、混合物（Ｅ）上清１７０リットルを槽２（図１参照）に移す。槽２に圧縮空気を注入し、槽内に存在する混合物（Ｅ）のアリコート（混合物（Ｅ−Ｔ２））を撹拌し、３〜５ｐｐｍの酸素濃度を維持する。混合物（Ｅ−Ｔ２）を３７〜４１℃の温度に維持し、ｐＨを５．８〜６．３までゆっくりと（即ち約３時間かけて）下げ、３％（ｖ／ｖ）サトウキビ糖蜜を加える。混合物（Ｅ−Ｔ２）中に存在する微生物の数は約８９０，０００個（cell）／ｍｌである。混合物（Ｅ−Ｔ２）（１７５リットル）を別の再循環槽である槽３（図１参照）に移し、「微量栄養」パッケージを添加する。パッケージの成分の濃度は、１７５リットルに添加したときに混合物（Ｅ−Ｔ２）１リットル当たりのｇとして下記の濃度に相当するように調合する。重炭酸ナトリウム .018 クロロ酢酸 .003 リン酸(液体) .002 炭酸マグネシウム(無水) .002 炭酸カルシウム .004 硫黄(組成物中の硫酸塩由来) .006 ステアリン酸亜鉛 .00003 硫酸銅 .00002 酢酸コバルト・4水和物 .00000004 ヨウ素(液体) .0000008 Se(プラズマグレード標準(液体)) .000001 硫酸鉄 .00006 重炭酸カリウム .006 硫酸マグネシウム・1水和物 .00001 モリブデン酸85%(粉末) .000001 ケイ素(参照標準溶液(1000ppm)) .00001 硼酸 .000005 炭酸ニッケル .00000005 塩化ルビジウム .000007。槽３の内容物（混合物（Ｅ−Ｔ３））を再循環させ、再循環中に磁場に通す（再循環工程では８0ｇａｌ／分ポンプを使用する）。磁場は直径1¹/₂”ＰＶＰ８０ゲージ再循環管に対して図２に示すような向きに配置した６個の３５００ガウス希土類磁石により生成し、磁石と管の間に１／３２”フェノールバンドを配置する。再循環中にｐＨは５．５〜６．５、温度は約３７℃に維持する。再循環中に圧縮空気を注入して３〜５ｐｐｍの酸素濃度を維持する。１０分間再循環後に得られた組成物を３５〜３８℃の温度で約２４時間貯蔵する。上記方法から得られた組成物を１．５ガロン／エーカーの合計年間施用量で１年に４回噴霧することによりサトウキビに施用する。上記に引用した全文献は参考資料としてその全体を本明細書の一部とする。当業者は、本発明の真の範囲から逸脱せずに形態及び詳細を種々に変更できることを上記開示から理解しよう。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者ビッツ，ディー・マイケルアメリカ合衆国フロリダ州33143，マイアミ，サウス・ウエスト，エイティセカンド・ストリート 6880

Claims

【特許請求の範囲】１．ｉ）哺乳動物の胃腸管から微生物の出発培養物試料を得る段階と、 ii）ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、無機リン及び塩素又はその塩を含む培地で前記試料を培養する段階と、 iii）穀類又はイネ科牧草を含む栄養源の存在下で段階（ii）からの試料を培養する段階と、 iv）段階（iii）からの微生物培養物を前記栄養源から分離する段階と、ｖ）段階（iv）からの前記培養物を磁場に暴露する段階を含む微生物培養物の製造方法。２．前記出発培養物試料が草食動物から得られる請求項１に記載の方法。３．前記出発培養物試料がウシの前胃から得られる請求項２に記載の方法。４．前記栄養源がトウモロコシ、オートムギ、マイロ、アルファルファ、ヒマワリ種子、落花生、コムギ、大豆、オオムギ、コメ又はアマの少なくとも１種を含む請求項１に記載の方法。５．段階（i）〜（iii）で６．９〜７．３のｐＨを維持する請求項１に記載の方法。６．段階（iv）でｐＨを５．８〜６．３に調節する請求項５に記載の方法。７．前記磁場が各々１２００〜４５００ガウスの少なくとも２個の希土類磁石により発生される磁場である請求項１に記載の方法。８．前記磁場への前記暴露が、段階（iv）からの培養物の流路に同一極を向けた２個の磁石の間に段階（iv）からの前記培養物を通すことにより実施される請求項１に記載の方法。９．前記同一極がＮ極である請求項８に記載の方法。１０．請求項１に記載の方法により製造された微生物培養物。１１．請求項１０に記載の培養物と、Ｎａ、Ｃｌ、Ｐ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｓ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｃｏ、Ｉ、Ｓｅ、Ｆｅ、Ｋ、Ｍｎ、Ｍｏ、Ｓｉ、Ｂ、Ｎｉ及びＲｂを含む栄養調合物を含む植物成長刺激組成物。１２．Ｎａ、Ｃｌ、Ｐ、Ｍｇ、Ｃａ、Ｓ、Ｚｎ、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｋ、Ｍｎ、Ｍｏ、Ｓｉ、Ｂ、Ｎｉ及びＲｂを含む栄養調合物。１３．更にＣｏ、Ｉ又はＳｅを含む請求項１２に記載の栄養調合物。１４．刺激を与えるような条件下で請求項１１に記載の調合物を植物に投与することを特徴とする植物の成長を刺激する方法。１５．前記植物がサトウキビ、野菜、果樹、熱帯植物又はイネ科牧草である請求項１４に記載の方法。１６．光学顕微鏡で測定した場合に微生物の細胞壁の肥厚を生じるような条件下で培養物を磁場に暴露することを特徴とする、植物成長刺激組成物の成分として使用するための微生物培養物の製造方法。１７．ｉ）哺乳動物の胃腸管の試料に対応する微生物の出発培養物試料を得る段階と、 ii）ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、無機リン及び塩素又はその塩を含む培地で前記試料を培養する段階と、 iii）栄養源の存在下で段階（ii）からの試料を培養する段階と、 iv）段階（iii）からの微生物培養物を前記栄養源から分離する段階を含む微生物培養物の製造方法。１８．請求項１７に記載の方法により製造された微生物培養物。１９．請求項１８に記載の培養物と、Ｍｇ、Ｍｏ及びＢを含む栄養調合物を含む植物成長刺激組成物。２０．刺激を与えるような条件下で請求項１９に記載の組成物を植物に投与することを特徴とする植物の成長を刺激する方法。２１．段階（iv）からの前記微生物培養物がガム又はろうを含む請求項１８に記載の培養物。２２．段階（iv）からの前記微生物培養物中に存在する硫黄代謝物がガム又はろうで貯蔵又は安定化される請求項１７に記載の方法。２３．段階（iv）からの前記培養物中に生じる窒素又は硫黄循環の速度を増加するような条件下で段階（iv）からの前記培養物を磁場に暴露する段階を更に含む請求項１７に記載の方法。２４．植物に有害な物質の排気を増加するような条件下で段階（iv）からの前記培養物を磁場に暴露する段階を更に含む請求項１７に記載の方法。２５．段階（ii）、（iii）又は（iv）中にアルゴン、酸素及び窒素を導入する段階を更に含む請求項１７に記載の方法。