JP2002510666A - 抗炎症抗菌性ベンジルフェノール剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 口腔用製品中に使用するための、式（Ｉ）： 【化１】 ［式中、Ｒ₁及びＲ₂は、直鎖または枝分れアルキル置換基であるか、または、１つ以上のアルキル置換基を有するシクロアルキルである。］の抗菌抗炎症性化合物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 発明の分野 本発明は、新規な抗菌抗炎症性ベンジルフェノール化合物に関し、抗歯垢、抗
歯肉炎及び抗歯周疾患の強化という利益を提供するために口腔用組成物中に本化
合物を使用した際に、有用な用途を見い出すことができる。

【０００２】 発明の背景 歯垢細菌は、歯肉炎及び歯周疾患を含む口腔疾患を引き起こす毒素を作り出す
。歯肉炎は、そのような疾患の初期の段階であり、歯肉は赤くなって腫れ；また
歯肉は、歯の刷掃等によってわずかな摩耗にさらされると出血し；口臭が続く。
連続的な歯垢の侵襲は歯周疾患を生じ、このことは、歯を取り囲んで包囲し支持
する組織である歯周組織（すなわち歯周靭帯、歯肉、及び歯槽骨）に影響を及ぼ
す。歯肉炎及び歯周炎は、それぞれ歯肉及び歯周靭帯の炎症性疾患である。歯肉
症及び歯周症は、組織の変性疾患を伴うより重い状態である。

【０００３】 微生物は、歯周疾患の開始及び進行の両方の一因となる。こうした微生物の例
えばストレプトコッカス・ミュータンス（streptococcus mutans）は、各々の歯
を取り囲むペリクル膜に定着し、軟質の塊を形成する。歯肉縁における及び歯肉
縁の下の歯垢と、そのような歯垢に起因する硬質の歯石とは、歯肉炎を引き起こ
し、それに続いて、病的に深化した歯肉溝である歯周ポケットを生じる。そのよ
うなポケット内部の身体の免疫応答には、プロスタグランジン類（ＰＧ）の合成
が含まれ、ＰＧは、炎症性応答に関連する重要な免疫調節物質であり、また、２
つの酵素アイソフォームであるシクロオキシゲナーゼ−１（ＣＯＸ−１）及びシ
クロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）の生成物である。ＣＯＸ−２は、炎症細
胞中のサイトカイン類、マイトジェン類及び内毒素によって誘導されるもので、
ＰＧの生成の上昇及び炎症の原因である。Offenbacher et al., J. Periodont R es. , 21, 101-112 (1986)及びGoodson et al., Prostaglandins, 19, 81-85 (19
74)は、炎症を起こした歯周囲組織内部にはきわめて高いレベルのＣＯＸ−２が 存在するが、寛解中のそのような組織内部のＣＯＸ−２は少ないことを示した。
進行中の歯周ポケット内部のＣＯＸ−２レベルは１μMに近く（Offenbacher et
al., J. Periodon. Res., 19, 1-13 (1984)）、これは、血管拡張、骨吸収及び 他の前炎症反応を誘発すると考えられているレベルである。従って、歯垢の細菌
形成と関連した歯肉炎とに取り組むために；また、ＣＯＸ−２活性を阻害して、
ＰＧ関連炎症と歯周疾患に関連した骨吸収とを低減するために；抗菌特性及びＰ
Ｇ阻害特性の両方を有する物質が必要である。

【０００４】 Listerがフェノールを外科用防腐剤として使用した１８６０年代以来、管希釈
（tube dilution）、ディスク寒天（disc agar）、拡散または同様の測定法にお
いて試験した際に、フェノールのほぼ全ての誘導体が、ある程度の殺菌作用を有
することは周知である。Dewhirstは、Prostaglandins, 20, No. 2, 209-222 (19
80)において、非ステロイド系抗炎症剤としてプロスタグランジンシクロオキシ ゲナーゼを阻害する能力に関して、６３のフェノール系化合物を調べた。Dewhir
stは、最も強力な阻害剤は、短い橋によって連結した２つの芳香環構造を持ち、
一方の環は無極性であり、他方の環は、橋に対してオルトであるフェノール性ヒ
ドロキシルを含み、また、橋は、この化合物が二座金属キレートを形成できるよ
うなルイス塩基を含む、と報告している。

【０００５】 ３つのフェノール系物質は、不都合な体重減少無しにハムスターのう蝕を抑制
することが示されている。Stralfors, Archs. Oral, 12, 1375-1385 (1967)。こ
の３つのフェノール系物質は、クエルセチン（ペンタヒドロキシフラボン）、カ
フェー酸（３，４−ジヒドロキシケイ皮酸）及びプロトカテク酸（３，４−ジヒ
ドロキシ安息香酸）だった。他のフェノール系物質は周知であり、また広く使用
されている抗菌物質であり、例えば市販のマウスリンス調合物中に見い出される
チモール（２−イソプロピル−５−メチルフェノール）である。米国特許第5,72
3,500号は、抗菌性でありかつ抗歯垢効果を提供する口腔用組成物中に使用する ための、非陽イオン抗菌性アルキル化フェノール化合物を開示している。米国特
許第3,928,624号は、ハロゲンとアルキル置換基とを含むアミノエチルフェノー ル類を抗炎症剤として開示した。米国特許第4,244,956号及び同第4,563,526号は
、プロスタグランジン類の合成を阻害し、血小板凝集を抑制し、局所性及び全身
性抗炎症剤として有用な置換済み２−（アリールメトキシ）フェノール化合物を
医薬品（medicinal agent）として開示した。米国特許第5,512,561号及び同第5,
677,296号は、置換済みビベンゾキサゼピン（bibenzoxazepine）化合物のカルバ
ミド酸誘導体類を、疼痛の治療のための鎮痛剤として、及び、プロスタグランジ
ン−Ｅ₂介在疾患の治療のためのプロスタグランジン−Ｅ₂（ＣＯＸ−２）アンタ
ゴニストとして開示している。欧州特許出願0 528 468 A1は、歯周炎を抑制する
及び／または低減するためのトリクロサン（２’，４，４’−トリクロロ−２−
ヒドロキシ−ジフェニル−エーテル）の使用を開示しており、ここでトリクロサ
ンは、シクロオキシゲナーゼ活性を阻害し、また、微生物の攻撃（microbial ch
allenge）を低減する。

【０００６】 シクロオキシゲナーゼ及びＰＧ活性を阻害するための口腔用組成物中の陰イオ
ン成分と共存できるより有効な抗菌剤が、歯垢、歯肉炎、及び歯周疾患に取り組
むために従来技術において引き続き必要とされている。

【０００７】 発明の要約 本発明は、式Ｉの以下の構造：

【０００８】

【化３】

【０００９】 ［式中、Ｒ₁及びＲ₂は、直鎖または枝分れアルキル置換基であるか、または、
１つ以上のアルキル置換基を有するシクロアルキルである。］ を有する抗菌抗炎症性ベンジルフェノール（ＡＡＢ）化合物を提供する。

【００１０】 本明細書において使用する「アルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子
を有する飽和炭化水素基であって、その範囲内で１〜６個の炭素原子を含み、さ
らにその範囲内で１、２、または３個の炭素原子を含み、直鎖または枝分れ鎖で
あり得る飽和炭化水素基を意味する。そのような基の代表的なものは、メチル、
エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅ
ｒｔ−ブチル、ペンチル及びその他同様なものである。

【００１１】 本ＡＡＢ化合物は口腔用組成物において特に用途を有し、こうした組成物は、
口腔に許容されるビヒクルと組み合わせて治療上有効な量の式ＩのＡＡＢ化合物
を含み、そのような組成物を口腔表面に適用した際に、抗菌性と抗炎症性との強
化という利益が得られる。

【００１２】 本ＡＡＢ化合物はまた、殺菌と皮膚刺激の低減とが望まれる場合に、皮膚用ク
リーム及びローション並びに家庭用表面ケア製品等の抗菌性パーソナルケア製品
中に使用するのに有用である。

【００１３】 発明の詳細な説明 １態様においては本発明は、上記に説明しかつ定義した通り、式Ｉの構造を含
むＡＡＢ化合物を提供する。本発明の好適な実施例は、２−ｔ−ブチル−４−（
４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールであり、その構造を下記に式ＩＩとして
示す：

【００１４】

【化４】

【００１５】 ２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールのような本発
明の化合物は、抗菌剤としての及びプロスタグランジンアンタゴニストとしての
活性を示しており、そのため、細菌感染とＰＧ介在疾患とを治療する際に有用で
あると思われる。

【００１６】 好ましい２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノール化合
物の製造は、本発明の化合物の多くの製造の代表的なものであり、一般に従来技
術において周知である。好ましい２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジ
ル）−フェノール化合物は、Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI, 53233
から入手可能な４−ベンジルフェノール（４−ヒドロキシジフェニルメタン）の
フリーデル−クラフツアルキル化によって製造する。フリーデル−クラフツアル
キル化は典型的な求電子芳香族置換であり、塩化アルミニウム（ＡｌＣｌ₃）等 のルイス酸触媒の存在下で、ハロゲン化アルキルを使用して、ベンゼンをアルキ
ル化してアルキルベンゼンにする。

【００１７】 本発明のＡＡＢ化合物を他の諸成分と共に取り入れて口腔用組成物を形成して
よく、そのような組成物は、洗口剤等の諸成分の溶液；または、０〜７５％の研
磨剤を含んでよい練り歯磨きまたはゲル等の半固体；またはチューインガム；ま
たは固体ロゼンジ；またはその他同様なものとしてよい。口腔用組成物がゲルま
たはペースト歯磨き剤であるような用途においては、水、湿潤剤、界面活性剤及
び研磨剤または研磨材を含みかつ口腔内での使用に適したビヒクルの内部に、治
療上有効な量の式Ｉの本ＡＡＢ化合物を含む。

【００１８】 本発明のゲルまたはペースト歯磨き剤組成物の製造において使用する湿潤剤は
一般に湿潤剤の混合物であり、湿潤剤は例えばグリセロール、ソルビトール及び
分子量２００〜１，０００の範囲内のポリエチレングリコールであるが、湿潤剤
の他の混合物及び単一の湿潤剤もまた用いてよい。歯磨き剤内部の湿潤剤の含有
量は、約１０〜約３０重量％、好ましくは約１０〜約２０重量％の範囲内である
。含水率は、約３０〜約６０重量％、好ましくは約４０〜約５５重量％である。

【００１９】 本発明の口腔用組成物中に取り入れる際に、本ＡＡＢ化合物が、有効で、殺菌
性があり、プロスタグランジンを阻害し、無毒である量は、一般的に約０．００
３〜約５重量％、好ましくは約０．００５〜約３重量％、より好ましくは約０．
０２〜約１重量％の範囲内である。

【００２０】 本ＡＡＢ化合物の抗菌活性を強化するために、本口腔用組成物中に抗菌強化剤
を含んでよい。非水溶性非陽イオン抗菌性化合物と組み合わせたそのような抗菌
強化剤の使用は、米国特許第5,188,821号及び同第5,192,531号等の従来技術にと
っては周知である。

【００２１】 本発明の実施において使用するために好ましい抗菌強化剤としては、分子量約
１，０００〜約５，０００，０００、好ましくは約３０，０００〜約５００，０
００を有する天然または合成陰イオン性高分子ポリカルボキシレートが挙げられ
る。合成陰イオン性高分子ポリカルボキシレート類は一般に、遊離酸類、または
、好ましくは部分的にまたはより好ましくは完全に中和済みの水溶性アルカリ金
属（例えばカリウムであり好ましくはナトリウム）塩類またはアンモニウム塩類
の形態で用いる。好ましいのは、無水マレイン酸またはマレイン酸と別の重合可
能なエチレン性不飽和モノマーとの１：４〜４：１コポリマー類であり、好まし
くはメチルビニルエーテル（methyl vinyl either）／無水マレイン酸で分子量 （Ｍ．Ｗ．）約３０，０００〜約１，０００，０００、最も好ましくは約３０，
０００〜約５００，０００を有するものである。こうしたコポリマー類は例えば
、Ｇａｎｔｒｅｚ（登録商標）、ＡＮ １３９（Ｍ．Ｗ．５００，０００）、Ａ
Ｎ １１９（Ｍ．Ｗ．２５０，０００）；好ましくはＳ−９７医薬品等級（Ｍ．
Ｗ．７００，０００）としてISP Technologies, Inc., Bound Brook, N.J. 0880
5から入手可能である。

【００２２】 本発明の実施において有用な他の高分子ポリカルボキシレート類としては、無
水マレイン酸とアクリル酸エチル、メタクリル酸ヒドロキシエチル、Ｎ−ビニル
−２−ピロリドン（N-vinyl-2-pyrollidone）、またはエチレン（最後のものは 例えばＭｏｎｓａｎｔｏ ＥＭＡ（登録商標）Ｎｏ：１１０３、Ｍ．Ｗ．１０，
０００及び等級６１として入手可能である）との１：１コポリマー類、及び、ア
クリル酸とメタクリル酸メチル、メタクリル酸ヒドロキシエチル、アクリル酸メ
チル、アクリル酸エチル、メタクリル酸イソブチル、イソブチルビニルエーテル
またはＮ−ビニル−２−ピロリドンとの１：１コポリマー類が挙げられる。

【００２３】 追加の有効で有用なポリカルボキシレート化合物としては、無水マレイン酸と
スチレン、イソブチレンまたはエチルビニルエーテル（ethyl vinyl either）と
のコポリマー類、ポリアクリル酸、ポリイタコン酸、ポリマレイン酸、及びＵｎ
ｉｒｏｙａｌ（登録商標）ＮＤ−２として入手可能でありＭ．Ｗ．が１，０００
という低さのスルホンアクリルオリゴマー類が挙げられる。

【００２４】 また本発明の実施において有用なのは、例えばＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）
９３４、９４０及び９４１という商標でB.F. Goodrich, Cleveland, OH 44131か
ら市販されているいわゆるカルボキシビニルポリマー類であり、こうしたポリマ
ー類は、約０．７５％〜約２．０％のポリアリルスクロースまたはポリアリルペ
ンタエリトリトールを架橋剤として架橋したポリアクリル酸のコロイド状水溶性
ポリマーからなり、しばしばＭ．Ｗ．は４〜５百万までかまたはそれを超える。

【００２５】 抗菌強化剤を用いる際には、本発明の組成物中に、重量で約０．０５〜約５％
、好ましくは約０．１〜約３％取り入れる。 線状分子であり脱水済みのポリリン酸塩類を、本明細書において抗歯石剤とし
て任意に用いることができる。こうしたものは周知であり、一般に、完全にまた
は部分的に中和済みの水溶性アルカリ金属（例えばカリウムであり、または好ま
しくはナトリウム）塩類またはアンモニウム塩類、及びこれらの任意の混合物の
形態で用いる。代表的な例としては、トリポリリン酸ナトリウム、ピロリン酸三
酸一ナトリウム、ピロリン酸二酸二ナトリウム、ピロリン酸一酸三ナトリウム、
及びピロリン酸四ナトリウム、対応するカリウム塩類及びその他同様なものが挙
げられる。本発明においてはこれらを、本口腔用組成物中に、近似的な重量で約
０．１〜約３％、典型的には約１〜約２．５％、より典型的には約１．５〜約２
％、特に約２％用いることができる。特に望ましい抗歯石剤は、ピロリン酸四ア
ルカリ金属塩の例えばピロリン酸四ナトリウム、ピロリン酸四カリウム、及びこ
れらの混合物である。

【００２６】 フッ化物イオンもまた望ましくは本発明の口腔用組成物中に含めて、抗う蝕性
効果を提供してよい。こうした材料の中には、無機フッ化物塩類の例えば可溶の
アルカリ金属フッ化物塩類の例えばフッ化ナトリウム、フッ化カリウム、フッ化
アンモニウム、モノフルオロリン酸ナトリウム、及びヘキサフルオロケイ酸ナト
リウムがある。アルカリ金属フッ化物及びフッ化スズの例えばフッ化ナトリウム
、フッ化第一スズ、モノフルオロリン酸ナトリウム及びこれらの混合物が好まし
い。

【００２７】 フッ素提供塩の量は一般に、本口腔用組成物中に、約０．０００５〜約３．０
重量％の濃度で存在する。任意の適切な最小量の上述の塩を使用してよいが、約
３００〜２，０００ppm、より好ましくは約８００〜約１，５００ppmのフッ化物
イオンを放出するのに十分なフッ化物塩を用いることが好ましい。

【００２８】 本口腔用組成物の性質が練り歯磨きまたはゲル等の実質的に半固体またはペー
スト状である場合、歯磨き剤用ビヒクルは、歯科的に許容可能な研磨材の例えば
重炭酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、メタリン酸カリウム、リン酸三カル
シウム、二水和リン酸二カルシウム、無水リン酸二カルシウム、ピロリン酸カル
シウム、炭酸カルシウム、ケイ酸アルミニウム、アルミナ水和物、か焼したアル
ミナ、シリカ、及び／またはベントナイトを含んでよい。

【００２９】 研磨材は一般に、ペーストまたはゲル組成物中に、重量濃度で約０〜約７５重
量％存在し、好ましくはゲル中に約０〜約３０重量％、ペースト中に約２５〜約
６０重量％存在する。

【００３０】 練り歯磨き並びにゲルは一般的に、天然のまたは合成の増粘剤を、約０．１〜
約１０重量％、好ましくは約０．５〜約５重量％の比率で含む。適切な増粘剤と
しては、アイリッシュモス、イオタ−カラギーナン、カッパ−カラギーナン、ト
ラガカントゴム、デンプン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシエチルプロピル
セルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセ
ルロース、ヒドロキシエチルセルロース及びナトリウムカルボキシメチルセルロ
ースが挙げられる。

【００３１】 本口腔用組成物の性質が洗口剤またはリンス等の実質的に液体であるような本
発明の態様においては、ビヒクルは一般的に水−アルコール混合物である。一般
に、水対アルコールの重量比は、約３：１〜１０：１、好ましくは約４：１〜約
６：１の範囲内である。アルコールは、無毒のアルコールの例えばエタノールま
たはイソプロパノールである。湿潤剤の例えばグリセリン、ソルビトール、また
はアルキレングリコールの例えばポリエチレングリコール若くは好ましくはプロ
ピレングリコールは、約１０〜３０重量％の量で存在してよい。マウスリンスは
一般的に、約５０〜８５％の水、約０〜２０重量％の無毒のアルコール及び約１
０〜４０重量％の湿潤剤を含む。

【００３２】 界面活性剤を本発明の組成物中に使用することで、予防措置の向上を実現し、
また、口腔全体にわたる本ＡＡＢ化合物の十分で完全な分散を実現する助けとす
る。界面活性剤は好ましくは陰イオン系であり、適切な例としては、高級脂肪酸
モノグリセリドモノサルフェート類の水溶性塩類の例えば水素化ヤシ油脂肪酸類
のモノスルホン化モノグリセリドのナトリウム塩、高級アルキルサルフェート類
の例えばラウリル硫酸ナトリウム、アルキルアリールスルホネート類の例えばド
デシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、高級アルキルスルホアセテート類、１，
２−ジヒドロキシプロパンスルホネートの高級脂肪酸エステル類、及び低級脂肪
族アミノカルボン酸化合物の実質的に飽和した高級脂肪族アシルアミド類の例え
ば脂肪酸、アルキルまたはアシル基中に１２〜１６個の炭素を有するもの、及び
アルコイルタウリン類、及びその他同様なものが挙げられる。最後に言及したア
ミド類及びタウレート類の例は、Ｎ−ラウロイルサルコシン；Ｎ−ラウロイル、
Ｎ−ミリストイル、またはＮ−パルミトイルサルコシンのナトリウム、カリウム
及びエタノールアミン塩類（実質的にせっけんまたは同様の高級脂肪酸材料を含
むべきではない）；並びにＮ−メチル−Ｎ−ココイル（またはオレオイルまたは
パルミトイル）タウリン類である。

【００３３】 任意の適切な着香または甘味材料もまた用いてよい。適切な着香成分の例は、
着香油の例えばスペアミント、ペパーミント、ウインターグリーン、サッサフラ
ス、丁字、セージ、ユーカリ、シナモン、レモン、及びオレンジの各油、及びサ
リチル酸メチルである。適切な甘味剤としては、スクロース、乳糖、麦芽糖、キ
シリトール、シクラミン酸ナトリウム、ペリラルチン、アスパルチルフェニルア
ラニンメチルエステル、サッカリン及びその他同様なものが挙げられる。適切に
は、着香剤及び甘味剤は、各々または合わせて本製剤の約０．１％〜５％以上を
占めてよい。

【００３４】 硝酸カリウム及びクエン酸カリウム等の歯の感受性を軽減させるために使用す
る物質もまた、本発明の口腔用組成物中に、約０．１〜約１０重量％の濃度で含
ませることができる。

【００３５】 様々な他の材料を本発明の口腔用組成物中に取り入れてよく、これには、白化
剤の例えば過酸化尿素、過酸化水素、防腐剤の例えば安息香酸ナトリウム、ビタ
ミン類及びクロロフィル化合物が含まれる。こうした補助剤を存在させる場合に
は、所望の特性及び特徴に実質的に悪影響を及ぼさない量で本組成物中に取り入
れる。

【００３６】 本発明の口腔用組成物は、諸成分を適切に混合することで製造してよい。例え
ばマウスリンスの製造においては、アルコール、湿潤剤、界面活性剤、及びフッ
化ナトリウムのような塩類等の諸成分の混合物中に本ＡＡＢ化合物を分散させ、
着香剤を次に加え、混合する。次いで、真空下で約１５〜３０分間、諸成分を混
合する。生成したリンス製品を次に容器に入れる。歯磨き剤を同様に製造し、追
加の増粘剤及び研磨剤を、最後の工程または最後から２番目の工程において含ま
せる。

【００３７】 本発明のＡＡＢ化合物を、温かいガムベースの中へ撹拌するか、またはガムベ
ースの外側表面にコーティングすることで、ロゼンジ中に、またはチューインガ
ム中にまたは他の製品中に取り入れることができ、ガムベースの例示として、望
ましくは従来の可塑剤または軟化剤、糖または他の甘味剤または炭水化物類の例
えばブドウ糖、ソルビトール及びその他同様なものと共に用いたジェルトン（je
lutone）、ゴムラテックス及びビニライト樹脂類を挙げることができる。

【００３８】 錠剤またはロゼンジ中のビヒクルまたはキャリアは、非う蝕原性で固体の水溶
性多価アルコール（ポリオール）の例えばマンニトール、キシリトール、ソルビ
トール、マリトール（malitol）、水素化デンプン加水分解物、水素化ブドウ糖 、水素化二糖類または水素化多糖類であり、総組成物の約９０〜９８重量％の量
である。塩類の例えば重炭酸ナトリウム、塩化ナトリウム、重炭酸カリウムまた
は塩化カリウムを、ポリオールキャリアと完全にまたは部分的に置き換えてよい
。約０．１〜５重量％という少量の錠剤成形用滑沢剤を、錠剤またはロゼンジ調
合物の中に取り入れて、錠剤及びロゼンジの両方の製造を容易にしてよい。適切
な滑沢剤としては、ヤシ油等の植物油、ステアリン酸マグネシウム、及びステア
リン酸アルミニウムが挙げられる。

【００３９】 平滑な仕上げを有する錠剤とは対照的に、ロゼンジ調合物は約２％のガムをバ
リア剤として含んで光沢のある表面を得る。適切な非う蝕原性のガムとしては、
カッパカラギーナン、カルボキシメチルセルロース、及びヒドロキシエチルセル
ロースが挙げられる。

【００４０】 以下の実施例は、本発明の化合物とそのような化合物の使用とを例示するもの
であるが、本発明はそれに限定されるものでないことは理解されよう。本明細書
において及び添付の請求の範囲において言及する全ての量と比率とは、特に断わ
らない限り重量である。

【００４１】 実施例Ｉ 本発明の２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールの合
成のために、５．０gの４−ベンジルフェノールを秤量し、マグネティックスタ ーラーと２つのガス入口アダプターとを備えた１００mlの２口丸底フラスコ中に
入れた。シリンジを使用して、２５．０mLのハロゲン化アルキルである２−クロ
ロ−２−メチルプロパンを丸底フラスコに加えた。混合物を、室温で５分間、全
てのベンジルフェノールが溶解するまで撹拌した。フラスコを雰囲気（２２℃）
温度の冷却浴中に置き、１．０gの触媒であるＡｌＣｌ₃を少量ずつ５分間で加え
た。気体の発生が止んだ後、混合物を室温で１５分間撹拌した。３％の酢酸エチ
ル及び９７％のヘキサンの溶離液を用いたシリカゲルカラムクロマトグラフを使
用して生成物を精製した。収率８３％で、６．７gの精製済み２−ｔ−ブチル− ４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノール生成物を黄色の油として単離した
。

【００４２】 実施例ＩＩ サイトカインＩＬ−１βによって刺激したヒトの細胞の培養におけるプロスタ
グランジンＥ₂（ＰＧＥ₂）の生成を含み、様々なレベルの本発明のＡＡＢ化合物
である２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールを用いた
測定法を使用して、プロスタグランジン（炎症）阻害剤としての本発明のＡＡＢ
化合物の効力を証明した。具体的には、１０％の熱失活ウシ胎仔血清（ＦＢＳ、
Gibco/BRL）を含む高グリコースＤｅｌｂｅｃｏ修正イーグル培地（ＤＭＥＭ、G
ibco/BRL-Life Technologies, Grand Island, New York）中で、ヒトの胚の口蓋
間葉細胞（ＨＥＰＭ、ＡＴＣＣ＃１４８６）を増殖させた。３７℃、湿度１００
％、１０％ＣＯ₂で細胞を増殖させた。分析の前に、細胞を２４穴のプレート中 に継代培養して、１２組の重複培養物を形成し、７０〜９０％集密的にした。実
験の日に、無血清培地（０．５％ウシ血清アルブミン、ＢＳＡを含む）を用いて
細胞を３回洗浄し、続いて以下のものと取り替えた；第１の培養の組における、
ＢＳＡ含有培地単独（負の対照）；第２の培養の組における、培地及び１．０ng
/mLのＩＬ−１β（正の対照、阻害剤無し）；第３〜第１２の培養の組における 、培地、１．０ng/mLのＩＬ−１β、及び．０１μM〜５０μMの範囲の２−ｔ− ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノール。暴露は２４時間であり
、この時点で培地を各穴から除去し、ＨＣｌを用いて培地のｐＨを３．５に調節
し、生成したＰＧＥ₂に関して、PerSeptive Biosystems, Framingham, Mass. 01
701から入手可能なＰｅｒＳｅｐｔｉｖｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｔｉｔｅ ｒＦｌｕｏｒ ＰＧＥ₂ ＥＩＡキットを使用して培地を分析した。

【００４３】 本発明の２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノール化合
物のＰＧＥ₂阻害効果を決定する前に、各培養穴中の生存可能な細胞数に関して 結果を正規化しなければならない；細胞の多いか少ないかに対応して、生成する
ＰＧＥ₂は多くなるか少なくなる。修正ＭＴＴ法を使用して、各培養穴中の細胞 数を決定した。ＰＧＥ₂決定のための最初の培地を除去した後に、血清を含む培 地（増殖培地）を用いて各培養穴内部の細胞を２回洗浄し、０．５mgのＭＴＴ試
薬（Sigma Research, St. Lois, Mo. 63178）を含む１．０mlの増殖培地で各培 養穴を再び満たした。３７℃で３時間経た後に、培地を傾瀉除去し、イソプロパ
ノール中の０．０４NのＨＣｌの１．０mlを使用して、形成された紫色のホルマ ザン結晶を溶解した。溶解の後に、各培養穴から得た１００μlのイソプロパノ ール溶液の分光吸光度を５７０nmで決定した。正規化因子である細胞濃度比を各
培養穴につき計算するために、個々の培養穴のイソプロパノール溶液の吸光度を
、未刺激の負の対照の組のイソプロパノール溶液の平均吸光度で割った。各培養
穴につき最初に決定したＰＧＥ₂を次に正規化するために、個々の培養穴に関し て計算した細胞濃度比をかけた。各培養の組の正規化したＰＧＥ₂の結果を、２ −ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノール阻害剤を含ませず
に刺激した正の対照の組のＰＧＥ₂濃度と比較して、各培養の組の内部の刺激し たＰＧＥ₂生成の阻害の程度を決定した。様々な濃度の２−ｔ−ブチル−４−（ ４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールの正規化済みプロスタグランジン阻害パ
ーセントを知ることによって、正の対照の５０％を阻害するのに必要な２−ｔ−
ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールの濃度であるＩＣ₅₀を計
算した。２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールの計算
されたＰＧＥ₂のＩＣ₅₀を下記の表Ｉに記録する。

【００４４】 比較のために、周知のＰＧＥ₂阻害剤であるトリクロサンを使用して、実施例 ＩＩのＰＧＥ₂のＩＣ₅₀測定方法を繰り返した。この比較測定の結果もまた表Ｉ に記録する。

【００４５】 表Ｉ ＰＧＥ₂阻害の測定 ＩＣ₅₀ 化合物 ＰＧＥ₂の５０％を阻害する濃度 （μモル） トリクロサン ７．０ ２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチル ３．７ベンジル）フェノール 表Ｉを参照すると、本発明の化合物である２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブ
チルベンジル）−フェノールは、ＰＧＥ₂阻害剤としてトリクロサンよりも大幅 に、ほぼ２倍有効であることが示される。

【００４６】 実施例ＩＩＩ Dewhirst, Prostaglandins, 22, 209-222 (1980)に説明する酸素利用測定法を
使用して、ＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２酵素の阻害剤としての本発明のＡＡＢ化合
物の効力を示した。様々な濃度の本発明の化合物である２−ｔ−ブチル−４−（
４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールを選択し、これは、阻害剤無しの正の対
照と比較して酵素活性を２０％〜約８０％阻害するものである。こうした様々な
濃度の２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールを、閉じ
た系内でＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２酵素に独立に加え、系内で酵素は、分子状酸
素を必要とする反応において反応した。ＣＯＸの酵素活性の阻害の程度は、閉じ
た系内部で時間の関数として観察した酸素消費の低減によって測定した。ＣＯＸ
酵素のＩＣ₅₀、ＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２酵素の活性を５０％阻害することが見
い出された２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノールの濃
度、を表ＩＩに記録する。

【００４７】 比較のために、ＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２の前駆体の生成を阻害することでＰ
Ｇを阻害することが周知の物質であるトリクロサンを使用して、実施例ＩＩＩの
ＣＯＸ酵素のＩＣ₅₀測定方法を繰り返した。この比較測定の結果もまた表ＩＩに
記録する。

【００４８】 表ＩＩ ＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２阻害の測定 ＩＣ₅₀ ＩＣ₅₀ 化合物 ＣＯＸ−１活性の ＣＯＸ−２活性の ５０％を阻害する濃度 ５０％を阻害する濃度 （μモル） （μモル） トリクロサン ４３．０ ２２９．５ ２−ｔ−ブチル−４− １７．４ １００．０ （４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノール 表ＩＩに記録した結果は、本発明の化合物である２−ｔ−ブチル−４−（４−
ｔ−ブチルベンジル）−フェノールは、トリクロサンよりも大幅に、２倍を超え
て有効なＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２阻害剤であることを証明する。

【００４９】 実施例ＩＶ 本発明のＡＡＢ化合物である２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル
）−フェノールの抗菌効力をＭＩＣ（最小発育阻止濃度）試験によって評価した
。ＭＩＣ試験は、２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノー
ルが細菌の増殖を完全に阻止する最小濃度をppm単位で測定する。ＭＩＣが低い 程、試験対象の化合物の抗菌活性は大きい。

【００５０】 ９６穴のマイクロタイタープレートを使用して、BBL, Cockeysville, MD 2103
0から入手可能な１００μlのトリプティケースソイブロス（ＴＳＢ）培地を、プ
レート内部の１２の列の各々の中に入れた。オクタペットピペッタ（octapette
pipettor）を使用して、２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フ
ェノール化合物を１２の列の各々内で連続的に希釈し、各列の第１の穴の１２５
ppmから第１２の０．０６１ppmまでにした（各列は、前の列の１／２の濃度の２
−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノール化合物を含む）。
一般的な口内細菌であるＡ．ビスコサス（A. viscosus）細菌を６１０nmの光学 密度が０．１となる濃度で含む追加の１００μlのＴＢＳを、１２の列の各々に 加えた。プレートを次に密封し、２４時間、３７℃で温置した。各列の光学密度
をBio-Tech Industries, Inc., Model El_x 808 Microtiter Plate Readerを使用
して読み取り、存在する細菌の量を決定した；細菌の増殖を阻止することが観察
された最低濃度の２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノー
ル化合物を含む列をＭＩＣと指定し、下記の表ＩＩＩに記録する。

【００５１】 実施例ＩＶの手順を、水を負の対照とし、周知の有効な抗菌剤であるトリクロ
サンを比較及び正の対照として使用して同時に行った。トリクロサンに関して決
定したＭＩＣもまた、比較のために表ＩＩＩに記録する。

【００５２】 表ＩＩＩ 細菌最小発育阻止濃度 化合物 ＭＩＣ （ppm） トリクロサン ３．６１ ２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチル ０．２４ベンジル）−フェノール 表ＩＩＩを参照すると示されるように、本発明のＡＡＢである２−ｔ−ブチル
−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノール化合物のＭＩＣは、トリクロサ
ンのもののわずか約７％だった。

【００５３】 実施例Ｖ 本発明のＡＡＢ化合物と一般的な歯磨き剤成分との共存性を証明するために、
以下の配合の液体歯磨き剤を製造した： 表ＩＶ 成分 組成 （グラム） 第Ｉ段 蒸留水 ５６．４６ フッ化ナトリウム ０．２４ソルビトール ２０．０ 第ＩＩ段 プロピレングリコール ０．５０グリセロール ２０．０ 第ＩＩＩ段 着香剤 １．０ ２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチル ０．３０ベンジル）−フェノール 第ＩＶ段ラウリル硫酸ナトリウム １．５ 液体歯磨き剤の製造においては、第Ｉ段の諸成分を秤量し、マグネティックス
ターラーを備えた４オンスジャー中に入れ、室温で中程度に撹拌しながら５分間
撹拌した。第ＩＩ段の諸成分を、マグネティックスターラーを備えた５０mLビー
カー中で合わせ、５分間撹拌した。撹拌しながら第ＩＩ段を第Ｉ段に加え、混合
物を５分間撹拌した。第ＩＩＩ段の諸成分を小さなねじ蓋バイアル中で合わせ、
蓋をして、均一になるまで手で激しく振とうした。第ＩＩＩ段を、第Ｉ及び第Ｉ
Ｉ段を合わせた混合物に加え、合わせたものを１０分間撹拌した。第ＩＶ段を１
枚の秤量用紙上に置いて秤量し、第Ｉ、第ＩＩ及び第ＩＩＩ段を合わせたものに
撹拌しながら少量ずつ５分間で加えた。第Ｉ、第ＩＩ、第ＩＩＩ及び第ＩＶ段を
最終的に合わせたものを室温で１時間撹拌し、安定で消費者に許容される液体歯
磨き剤を得た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ， ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，Ｇ Ｅ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ， ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，Ｍ Ｎ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ， ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，Ｚ Ｗ (72)発明者 ハールズ，スーザン アメリカ合衆国ニュージャージー州08822， フレミントン，オールド・クリントン・ロ ード 139 (72)発明者 シャピロ，スチュアート スイス国ツェーハー−8802 キルヒベル ク，ベフラーシュトラーセ 45 (72)発明者 ガッファー，アブダル アメリカ合衆国ニュージャージー州08902， プリンストン，カーター・ロード 89 Ｆターム(参考） 4C083 AB051 AB472 AC122 AC132 AC471 AC472 AC782 BB55 BB60 CC41 EE33 4C206 AA01 AA02 CA17 MA01 MA02 MA04 NA14 ZB35 ZC02 4H006 AA01 AA03 AB22 AB26 AB29 FC22 FC52 FE13

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 抗炎症プロスタグランジン阻害特性を有し、かつ、構造式： 【化１】 ［式中、Ｒ₁及びＲ₂は、直鎖または枝分れアルキル置換基であるか、または、
   １つ以上のアルキル置換基を有するシクロアルキルである。］ を有する抗菌性化合物。
2. 【請求項２】 ２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベンジル）−フェノ
   ールである、請求項１に記載の化合物。
3. 【請求項３】 口腔に許容されるビヒクルと有効な抗菌抗炎症量の式： 【化２】 ［式中、Ｒ₁及びＲ₂は、直鎖または枝分れアルキル置換基であるか、または、
   １つ以上のアルキル置換基を有するシクロアルキルである。］ の化合物とを含む抗歯垢性口腔用組成物。
4. 【請求項４】 前記化合物は、２−ｔ−ブチル−４−（４−ｔ−ブチルベン
   ジル）−フェノールである、請求項３に記載の組成物。
5. 【請求項５】 前記化合物は、前記口腔用組成物中に、約０．００３〜約５
   重量％の範囲にわたる量で存在する、請求項３に記載の組成物。
6. 【請求項６】 陰イオン性ポリカルボキシレート抗菌強化剤は前記組成物中
   に取り入れられる、請求項３に記載の組成物。
7. 【請求項７】 前記組成物はマウスリンスの形態である、請求項３に記載の
   組成物。
8. 【請求項８】 前記組成物は、研磨剤と水であるビヒクルと湿潤剤とを含む
   歯磨き剤の形態である、請求項３に記載の組成物。