JP2002506051A - Ｈｉｖ−１感染を治療するための放射免疫剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明はＨＩＶ−１の感染を治療するための放射性薬剤に関する。ＨＩＶ標準療法の欠点は、一つには、現在使用されている薬剤を生涯にわたって毎日大量に（１日およそ３０錠）厳しいタイムスケジュールで摂取しなければならず、多くの副作用が生じることである。また他方では、従来の薬剤は単にウィルス複製を低減させるにすぎず、ＨＩＶ感染した宿主細胞は除去されないので、ＨＩＶ感染は治癒しないという点である。本特許出願は、抗レトロウィルス療法によってウィルス汚染を低減した後、ならびに場合によっては幹細胞移植で保護したり甲状腺機能を薬剤で保護しながら、ＨＩＶ−１に感染した患者のＨＩＶを複製している細胞を体内で除去するための、モノクローナル抗体と放射性核種からなる放射免疫剤を記載している。この放射免疫剤は１回または複数のサイクルで、ＨＩＶ−１感染した患者に対して静脈内に投与するためのものであり、ＨＩＶを複製する宿主細胞を的確に持続的に損傷させて、ほとんどすべての宿主細胞が除去されるようにする。その目的はＨＩＶ感染の治癒、もしくは少なくとも病状進行の遅延である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 ［従来技術］ ＷＨＯの発表によれば、１９９７年末の時点ですでに世界中に３千万以上の人
がＨＩＶ−１に感染している。ＨＩＶ感染は、ＨＩＶ感染したＣＤ４＋ヘルパー
Ｔ細胞が失われることによって進行性の免疫不全につながる。この細胞の数が３
５０／μｌの閾値を下回ると、または血液中のウィルス汚染が３０．０００ＲＮ
Ａコピー／μｌの数を上回ると、今日では２種類のリバーストランスクリプター
ゼ（ＲＴＩ）阻害剤と１種類のプロテアーゼ阻害剤とからなる薬物の三成分の組
合せの投与を好ましくは伴う、抗レトロウィルス治療が開始される。それによっ
てＨＩＶウィルスの複製が抑制され、遅延される。しかしながらＨＩＶを複製す
る宿主細胞は、こうした手段によっては除去することができない。ＨＩＶ感染は
生命を脅かす感染症に属する。ＨＩＶ感染の治癒は未だ可能ではない。

【０００２】 免疫治療による取組みは、これまで満足のいく治療上のオプションとはなって
いない。確かにＨＩＶやＨＩＶ感染細胞は抗体でマーキングすることができるも
のの、この抗体はもともとＨＩＶ感染によって傷つけられているので、感染細胞
の除去につながるような所望の免疫応答を解発しない。したがってＨＩＶ感染に
よって阻害される身体自身の細胞毒性的な免疫応答を、目的をもって人工的に惹
起される、できることならば全てのＨＩＶ感染細胞の的確な死によって置き換え
なければならない。

【０００３】 放射性核種による治療は、良性および悪性の甲状腺疾患の放射性ヨウ素治療と
して、ドイツでは５０年以上にわたって放射線医学治療の最も重要な方法として
知られており、副作用が少ないことも判明している。予後の併発症、特に悪性腫
瘍の誘導は今日まで証明されていない（Ｍｏｓｅｒ１９９６）。

【０００４】 ラジオアイソトープを用いた新たな治療可能性は、近年、転移したクロム親和
性細胞種や神経芽細胞種を治療する際の¹³¹Ｉ標識されたメタ・ヨード・ベンジ ル・グアニジン（ＭＩＢＧ）によって得られており、関節リウマチの場合にはＲ
ａｄｉｏｓｙｎｏｖｉｏｒｔｈｅｓｅ、胸膜や腹膜の癌腫の場合には⁹⁰Ｙ珪酸塩
の腔内点滴、⁸⁹Ｓｒなどの骨親性物質での骨格転移の待期的な疼痛療法、あるい
は真性赤血球増加症の放射性リン治療によって得られている（Ｍｏｓｅｒ１９９
６）。臨床試験では現在のところいわゆる「放射免疫療法」があり、これは特に
結腸直腸の癌腫の場合には¹³¹Ｉ標識した抗ＣＥＡ ＩｇＧや（Ｂｌｕｍｅｎｔ ｈａｌ他、１９９２、Ｂｌｕｍｅｎｔｈａｌ １９９４）、Ｂ細胞リンパ腫の場
合には¹³¹Ｉ標識した抗ＣＤ２０抗体および抗ＣＤ２２抗体（Ｋａｍｉｎｓｋｉ 他、１９９３、Ｐｒｅｓｓ他、１９９３、Ｐｒｅｓｓ他、１９９５、Ｐｒｅｓｓ
他、１９９５）を使用する。

【０００５】 ＨＩＶ感染の治療については、放射性核種の利用に関する経験がない。わずか
な線量のガンマ線はＨＩＶの発現率を高める場合があるように思われるが（Ｘｕ
他、１９９６）、それに対してマカクザルのＳＩＶ感染を用いた動物実験で明ら
かになったところでは、的確なリンパ節照射をすれば末梢血液中のウィルス汚染
を低減し、病気の進行を停止させることができる（Ｆｕｌｔｚ他、１９９５）。
ただしＨＩＶ感染患者に対する全身照射はまったく非特異的に作用するので高い
放射線量が必要となる。したがってその効果は原則として不確実であり、望まし
くない放射線障害による代償が大きい。

【０００６】 ＨＩＶ感染に対して放射免疫療法を用いた経験は世界のどこにも存在しない。
特許登録簿を調査してみると、ＨＩＶ−ｅｎｖタンパク質ｇｐ１６０の保存され
ている免疫優性でないエピトープを認識する能力のある抗体が記載された明細書
がある（ＡＺ ＷＯ９１／１０７４２Ａ１）。この出願人は、このモノクローナ
ル抗体が「トキシン」と結合できると記している。出願人はこれを（言葉の上で
は不正確であるが）レクチン、リシン、アブリン、モデシン、ジフテリア毒素、
シュードモナス外毒素のことであるとも、また細胞増殖抑制剤や「ラジオアイソ
トープ」のことであるとも解している。この出願人は「放射免疫抱合体」を製造
する方法を記載していない。この出願人の目的は、抗体とトキシンとの抱合体を
ＨＩＶ感染細胞から細胞質に取り込み、この抱合体が吸収された後に細胞を殺す
ことである（３頁、２０行から３２行）。周知のとおり抗体は稀に少量しか細胞
によって吸収されないが、それについては議論されていない。当然ながらトキシ
ンが（抗体に結合された状態で、または結合されていない状態で）非特異的に健
康な細胞、つまりＨＩＶ感染していない細胞にも取り込まれるという問題につい
ても検討されていない。トキシンに対して「ラジオアイソトープ」を利用するこ
とからくる利点は記載されておらず、作用メカニズムも説明されておらず、適切
なアイソトープも指定されておらず、技術的行為の教示としての製造方法も開示
されていない。特に、抗体と、抗体とトキシンとの抱合体とが血液中で遊離した
ＨＩＶ粒子によって捕捉されてしまい、ＨＩＶ感染細胞の除去のために利用でき
なくなるという問題も顧慮されていない。こうした未解決の問題やリスクが前述
の抗体とトキシンとの抱合体を効果の薄いものにするばかりか、リスクが大きい
ために産業上では適用不可能であるように思われる。

【０００７】 別の明細書（ＡＺ ＷＯ９４／０４１９１Ａ１）には、ＣＤ４レセプタを担っ
ているすべての細胞、つまり健康な細胞とＨＩＶ感染細胞とを完全に除去するた
めの治療方法が記載されている。そのために２通りの方法が記載されており、一
つの方法では遺伝子工学で製造されたｇｐ１２０（＝ＨＩＶ−１の表面糖蛋白）
を使用し、別の方法では細胞のＣＤ４レセプタに対するモノクローナル抗体を利
用する。さまざまなトキシン、細胞増殖抑制剤、抗レトロウィルス物質、放射性
核種などとの抱合体も同じく提案されている。この製剤の根本的な欠点は、ＨＩ
Ｖ感染者の身体におけるＣＤ４レセプタを担うすべての細胞の破壊を意図してい
る点である（アブストラクト参照）。このことは、それでなくとも程度の差こそ
あれ深刻な打撃を受けているＨＩＶ患者の免疫系に対してラディカルな攻撃をす
ることになり（３４頁、７−８行参照）、倫理的に許容できるとはまず思われな
い。

【０００８】 ［解決法］ 悪性腫瘍の場合の放射免疫療法と同じく、適切な放射性核種をＨＩＶに特異的
な抗体に結合させる。抗体が細胞の腫瘍マーカに結合する腫瘍の放射免疫療法と
は異なり、この場合の抗体は、ＨＩＶ感染細胞の細胞表面で抗原提示されてこれ
に結合しているレトロウィルスの構造タンパク質の保存されているエピトープを
認識する。この放射免疫剤は抗レトロウィルスの標準療法によってウィルス汚染
を低減した後に行うためのものであり、場合により幹細胞の移植や甲状腺への薬
剤投与によって生じる場合のある骨髄障害や甲状腺障害といった問題を防止する
ものである。これによって、上に掲げた明細書に記載されている薬剤および治療
法の欠点を克服し、従来、制約されることなくに広がっている世界的な健康問題
を解決しようとするものである。

【０００９】 放射免疫抱合体として、有利には、人間のｇｐ４１特異的なモノクローナル抗
体とアイソトープ¹³¹Ｉとの抱合体が考慮の対象となる。レトロウィルスの膜内 外グリコプロテインｇｐ４１はウィルスと細胞の脂質膜の中にしっかり統合され
、したがって表面プロテインｇｐ１２０とは違い、脱落によってウィルスないし
ＨＩＶ感染細胞から分離することがない。

【００１０】 放射免疫抱合体の適切な成分であり、広範に特徴づけられるのは、たとえば人
間のモノクローナル抗体２Ｆ５であり、この抗体は、強力に保存された種々のＨ
ＩＶ−１単離体に広く存在しているエピトープと結合する（Ｍｕｓｔｅｒ他、１
９９３）。

【００１１】 ［放射免疫抱合体の製造］ マウスの抗体、ヒト化した抗体、およびヒトのモノクローナル抗体の製造は従
来技術である（概要についてはＬｉｄｅｌｌとＷｅｅｋｓ １９９５，Ｐｅｔｅ
ｒｓ他１９９６参照）。ＳＩＶおよびＨＩＶ特異的なモノクローナル抗体の単離
も同じく慣用手段であり、ＨＩＶ研究の重要な基礎となっている（Ｂｅｒｇｔｅ
ｒ １９９０）。

【００１２】 放射性核種を得ることは同じく従来技術であり、遊離した放射性核種をタンパ
ク質に結合させるにはすでに一連の方法が利用可能である（ＥｃｋｅｒｔとＫａ
ｒｔｅｎｂｅｃｋ １９９６）。

【００１３】 ¹³¹Ｉ，³²Ｐ，⁹⁰Ｙ，および⁸⁹Ｓｒといった放射性核種は半減期が短いので、 放射免疫結合をセンターに近いところで調製し、ないしは迅速に輸送することが
必要である。

【００１４】 したがって、寿命の短い放射性核種でＨＩＶ患者の治療を行うための前提条件
は、特殊化された学際的なセンターを設立し、そこでＨＩＶ感染者の専門的な治
療（特に抗レトロウィルス標準治療）に加えて、放射線防護法上の観点から放射
免疫抱合体の早期の適用を保証することである。

【００１５】 ［放射免疫抱合体の利用法］ 治療を成功させる前提条件は、一般に用いられている最新の標準三種療法で患
者を予備治療することにより、ウィルス汚染を低減させることである。それによ
って、より多い線量の放射免疫製剤をＨＩＶ感染細胞に近づけてこれを除去する
ことができる。そうしないと薬剤が遊離しているウィルス粒子によって捕捉され
、細胞毒性作用が低くなってしまう。

【００１６】 ¹³¹Ｉを主成分とする薬剤を投与する前に、さらに甲状腺診断と甲状腺遮断を 公知のモデルに基づいて行わなくてはならない。

【００１７】 放射免疫抱合体は静脈内に投与すべきである。そのためには、一般に、放射線
が鎮静化するまで患者を周囲から遮断するために数日間にわたる入院が必要であ
る。

【００１８】 薬剤は、末梢静脈または中心静脈へボーラス、簡易注入、または維持療法とし
て数日間にわたり５０−３００ｍＣｉの線量を予定して投与する。投与は一回行
うか、または数週間の間隔でサイクルの形で行う。

【００１９】 ［放射免疫抱合体によって達成される利点］ 放射免疫抱合体はモノクローナル抗体の助けによって、ＨＩＶ−１を複製する
細胞の細胞壁に統合されたレトロウィルスの膜内外グリコプロテインまたは表面
グリコプロテインのエピトープ（ｇｐ４１またはｇｐ１２０）に特異的に結合す
る。こうして前記細胞に固定された放射性核種はβ放射を付近の周囲に発する。
このとき、特に多数の放射免疫抱合体で占められたＨＩＶ−１感染細胞が損傷を
うける。

【００２０】 放射線照射が細胞やＤＮＡに及ぼす作用についてはこれまで十分に報告されて
いる（概要についてはＫａｕｆｍａｎｎ他、１９９６、Ｓａｕｅｒ、１９９８参
照）。放射線生物学上の作用の基礎となるのはＤＮＡの変化である。変化した遺
伝子からは、機能を失っている誤ったタンパク質がコード化される。ＨＩＶ複製
に欠かせない酵素もそれによって機能を失う。そのうえ細胞質の物質交替にも変
化が起こる。その結果、細胞増殖死またはアポプトーシスによってＨＩＶ感染細
胞が除去される。

【００２１】 ¹³¹Ｉなどのα放射またはβ放射の放射エネルギーは、最大で細胞直径の４０ 倍の到達距離しかない。しかし放射障害の結果としての健康な細胞の悪性転換は
きわめて稀であり、統計的にはほとんど把握できないほどである。健康な細胞が
傷つけられると、その細胞は同じく大半のケースでは分裂能力を失い、細胞増殖
死またはプログラミングされた細胞死（アポトーシス）が始まる。しかも周辺に
ある健康な細胞への照射は、ＨＩＶ感染したＴリンパ球の放射免疫療法の場合に
は副次的な役割しか果たさない。なぜならＴリンパ球は大半が循環しており、し
たがって健康な細胞は短時間しか放射汚染を受けないからである。

【００２２】 ただし放射免疫製剤を投与した後は一時的に血液学上の副作用や、日和見感染
のリスクが高まっていることを特に考慮する必要がある。というのも、一般的な
骨髄中毒症に加えてヘルパーＴ４細胞の数が著しく減少することが予想されるか
らである。しかしこれは正常な機能という点で障害のあるＨＩＶ感染したヘルパ
ーＴ４細胞の損失であるから、このことは明確な治療目標である。場合によって
は前記の理由から、本特許出願に記載されている放射免疫療法を幹細胞移植と結
びつけるとよい。ただしＴ４前駆細胞はＣＤ４レセプタがないのでＨＩＶに感染
していないため、ヘルパーＴ４細胞集団の再生を予測することができる。この想
定は、前述した動物実験による研究によって裏づけられる（Ｆｕｌｔｚ他、１９
９５）。

【００２３】 明細書ＷＯ９４／０４１９１Ａ１および明細書ＷＯ９１／１０７４２Ａ１の製
剤と比べたときの大きな利点は、本明細書の放射免疫抱合体は使用の形態（抗レ
トロウィルス標準療法によるウィルス汚染の低減）により、遊離しているウィル
ス粒子や、脱落によって分離したウィルス蛋白によって捕捉されないという点で
ある。

【００２４】 ２番目の利点は、明細書ＷＯ９４／０４１９１Ａ１の両方の製剤と違って主に
ＨＩＶ感染している細胞が損傷をうけて殺され、それに対して健康な細胞はほと
んど傷つけられないことである。

【００２５】 ３番目の大きな利点は、明細書ＷＯ９１／１０７４２Ａ１の抗体とトキシンと
の抱合体と違って本明細書の放射免疫抱合体は内部移行が必要なく、放射性核種
がトキシンのように非特異的に健康な細胞に結合しないという点である。

【００２６】 本特許出願に記載の放射免疫抱合体によってＨＩＶ感染の放射免疫療法を行う
目的は、ＨＩＶ−１複製をしている細胞の的確かつ完全な除去、およびこれに伴
うＨＩＶ感染者の治癒または少なくとも病状経過の有意な遅延、生活品質の改善
、および保健機関での費用の削減である。

【００２７】 このとき、上に掲げた各明細書に記載されている薬剤と治療方法の欠点が克服
されるので、これまで不治と考えられていた感染患者に従来よりも優れた治療を
施し、症例のうち少なくとも一部を治癒させるという可能性が開かれる。

【００２８】 ［参考文献］

【表１】

【００２９】

【表２】

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年５月２４日（２０００．５．２４）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，Ｅ Ａ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，Ｇ Ｈ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ， ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ， ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ Ｆターム(参考） 4C084 AA17 MA66 ZB332 ZC552 4C085 AA14 AA21 EE06

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ＨＩＶ感染患者でウィルスを複製している細胞を生体内除去
   するための放射免疫抱合体の使用において、 放射免疫抱合体が、免疫学的に有効な成分として、ＨＩＶ−１の表面グリコプ
   ロテインｇｐ１２０または膜内外グリコプロテインｇｐ４１にあるエピトープに
   対するヒトのモノクローナル抗体またはマウスの抗体の場合には選択的にヒト化
   したモノクローナル抗体であって、これに送薬用担体および／またはアジュバン
   トを加えたものと、 放射性の成分としてたとえば¹³¹Ｉ，³²Ｐ，⁹⁰Ｙ，⁸⁹Ｓｒとを包含しており、 該放射免疫抱合体は抗レトロウィルスの標準三種療法によってウィルス汚染を
   低減しながら、または低減した後で使用することを特徴とする放射免疫抱合体の
   使用。
2. 【請求項２】 上記放射免疫抱合体が、１回または周期的な静脈投与の形態
   で、５０から３００ｍＣｉの間の総線量のためのものであることを特徴とする請
   求項１記載の放射免疫抱合体の使用。
3. 【請求項３】 任意選択的に幹細胞移植と関連して使用されることを特徴と
   する請求項１または２記載の放射免疫抱合体の使用。
4. 【請求項４】 ¹³¹Ｉを放射性の成分とする場合において、公知のモデルに 基づく甲状腺遮断と関連して使用されることを特徴とする請求項１から３のいず
   れか１に記載の放射免疫抱合体の使用。